L'enzima utilizzato per "lavare" le estremità appiccicose del DNA lo è
Frammento di Klenow
Polinucleotide chinasi
Fosfatasi alcalina
Primase
Lavare le estremità appiccicose significa rimuovere le estremità appiccicose (sporgenze di 3') per produrre DNA con estremità smussate (senza sporgenze). Le estremità appiccicose hanno sporgenze di 3' che possono essere digerite con il frammento di Klenow (ha attività di esonucleasi 3'-5') per produrre DNA dall'estremità smussata. Strumento Ruolo Enzimi di restrizione di tipo II Scindono il DNA in siti specifici DNA ligasi Formazione di legami fosfodiestere tra 2 frammenti Frammenti di Klenow (DNA polimerasi I senza attività di esonucleasi da 5' a 3') Utilizzati in precedenza per la polimerizzazione nelle reazioni PCR Polinucleotide chinasi Catalizzare il trasferimento di g fosfato da ATP Fosfatasi alcalina Rimuove il gruppo fosfato dall'estremità 5' per prevenire l'autoricottura delle estremità appiccicose del DNA Trascrittasi inversa DNA polimerasi RNA dipendente per la sintesi del cDNA RNAasi H Rimuove l'RNA dall'ibrido DNA-RNA Esonucleasi III Rimuove il nucleotide dall'estremità 3' Fago g esonucleasi Rimuove nucleotide dall'estremità 5' Nucleotidil transferasi terminale Nell'omopolimero che si estende per convogliare l'estremità cieca verso l'estremità appiccicosa
Techniques in molecular biology