Quale test utilizza l'oligomero con sostituzione di una singola coppia di basi:
PCR
RFLP
Analisi delle mutazioni con codice di errore
Nessuna delle precedenti
RFLP [Rif: J I polimorfismi sono differenze ereditarie riscontrate tra gli individui di una popolazione. Il polimorfismo della lunghezza dei frammenti di restrizione (RFLP) è una differenza nelle sequenze di DNA omologhe che può essere rilevata dalla presenza di frammenti di diversa lunghezza dopo la digestione dei campioni di DNA in questione con specifiche endonucleasi di restrizione. RFLP, come marcatore molecolare, è specifico per una singola combinazione clone/enzima di restrizione. Una sonda RFLP è una sequenza di DNA marcata che si ibrida con uno o più frammenti del campione di DNA digerito dopo che sono stati separati mediante elettroforesi su gel, rivelando così un modello di blotting unico caratteristico di un genotipo specifico in un locus specifico. Come sonde RFLP vengono generalmente utilizzati cloni Sho, DNA genomico a copia singola o bassa o cDNA. Gli RFLP vengono visualizzati digerendo il DNA di diversi individui con un enzima di restrizione, seguito da elettroforesi su gel per separare i frammenti in base alle dimensioni, quindi blotting e ibridazione su una sonda marcata che identifica il locus in esame. Un RFLP viene dimostrato ogni volta che il pattern Southern blot ottenuto con un individuo è diverso da quello ottenuto con un altro individuo. Harrison 17/e p390 scrive: "Il Southern blotting viene utilizzato per analizzare se i geni sono stati cancellati o riarrangiati. Viene anche utilizzato per rilevare polimorfismi della lunghezza dei frammenti di restrizione (RFLP). Il DNA genorico viene digerito con endonucleasi di restrizione e separato mediante elettroforesi su gel. Individuale I frammenti possono quindi essere trasferiti su una membrana e rilevati dopo l'ibridazione con specifiche sonde di DNA radioattivo. Poiché i disallineamenti di singole coppie di basi possono interrompere l'ibridazione delle sonde di DNA sho (oligonucleotidi), una variazione del Southern blot, chiamata ibridazione oligonucleotide-specifica (OSH). ), utilizza oligonucleotidi sho per distinguere i geni normali da quelli mutanti." RFLP è uno strumento importante nella mappatura del genoma, nella localizzazione dei geni per le malattie genetiche, nella determinazione del rischio di malattie e nei test di paternità