La cromatografia su gel di filtrazione separa le proteine ​​in base a
Polarità
Idrofobicità
Raggio di Stokes
pH
La cromatografia con filtrazione su gel separa le proteine ​​in base al loro raggio di Stokes, il raggio della sfera che occupano mentre cadono in soluzione. Il raggio di Stokes è una funzione della massa e della forma molecolare. Quando cade rapidamente, una proteina allungata occupa un volume effettivo maggiore di una proteina sferica della stessa massa. La cromatografia ad esclusione dimensionale utilizza sfere porose. I pori sono analoghi alle rientranze sulla riva di un fiume. Quando gli oggetti si muovono a valle, quelli che entrano in una rientranza vengono ritardati fino a quando non tornano nella corrente principale. Allo stesso modo, le proteine ​​con raggi di Stokes troppo grandi per entrare nei pori (proteine ​​escluse), rimangono nella fase mobile fluente ed emergono prima delle proteine ​​che possono entrare nei pori (proteine ​​incluse). Le proteine ​​emergono quindi da una colonna di filtrazione su gel in ordine decrescente rispetto ai loro raggi di Stokes.
Rif: Biochimica illustrata di Harper. 30a edizione pagina n: 27