La sterilizzazione dei terreni di coltura contenenti siero avviene mediante:
Autoclavaggio
Filtro a micropori
Radiazione gamma
Centrifugazione
Sterilizzazione dei terreni di coltura

I componenti dei terreni di coltura devono essere accuratamente sterilizzati.
Due metodi sono comunemente usati per sterilizzare i terreni di coltura:

1) Autoclavaggio
- I componenti come acqua, sali e integratori come peptone, triptosio ecc., che sono stabili al calore, vengono autoclavati.
- Generalmente l'autoclavaggio viene effettuato a 121°C e ad una pressione di 15 psi.

Il tempo richiesto per la sterilizzazione dipende dal volume del terreno nel recipiente.


Per piccoli volumi di liquidi (100 ml o meno), il tempo necessario per il trattamento in autoclave è di 15-20 minuti.
Per grandi quantità (2-4 litri) sono necessari 30-40 minuti.

2) Filtrazione su membrana
- Componenti come siero, trypsin, fattori di crescita, proteine, aminoacidi, vitamine, ormoni, carboidrati ed estratti vegetali sono termolabili e possono decomporsi durante il trattamento in autoclave.
- Questi devono essere sterilizzati mediante filtrazione.

La porosità della membrana filtrante non deve essere superiore a 0,2 micron (U m). - La vetreria vuota destinata a contenere i mezzi deve essere sterilizzata in un'autoclave prima della sterilizzazione del filtro.


Questi due (autoclavaggio e filtrazione su membrana) sono i metodi più comunemente utilizzati per la sterilizzazione dei terreni di coltura. Ma quando questi non sono disponibili si possono utilizzare altri metodi; per esempio.-

- Per i supporti contenenti zucchero o gelatina, è possibile utilizzare un'esposizione a 100°C per 20 minuti in tre giorni consecutivi. Questo è noto come tindalizzazione.
Alcuni terreni contenenti siero o liquido d'uovo possono essere sterilizzati riscaldandoli a 80-85°C per 2-4 ore.