La sequenza di colorazione di Gram è
Carbol fucsina – Iodio – Acetone – Metilvioletto
Violetto di metile – Iodio – Acetone – Carbol fucsina
Violetto di metile – Acetone – Iodio – Carbol fucsina
Carbol fucsina – Acetone – Iodio – Metilvioletto
Colorazione primaria: cristalvioletto o metilvioletto 
Mordente – Iodio di Gram
Decolorante: acetone o etanolo
Colorazione secondaria: safranina o carbol fucsina