Il grafico seguente mostra una reazione a catena della polimerasi in
PCR del DNA
PCR
PCR nidificata
PCR in tempo reale
Una reazione a catena della polimerasi quantitativa (qPCR), chiamata anche reazione a catena della polimerasi in tempo reale, è una tecnica di laboratorio di biologia molecolare basata sulla reazione a catena della polimerasi (PCR), che viene utilizzata per amplificare e contemporaneamente quantificare una molecola di DNA mirata. Per una o più sequenze specifiche in un campione di DNA, la PCR quantitativa consente sia il rilevamento che la quantificazione. La quantità può essere un numero assoluto di copie o una quantità relativa quando normalizzata sull'input di DNA o su ulteriori geni normalizzanti. La procedura segue il principio generale della reazione a catena della polimerasi; la sua caratteristica fondamentale è che il DNA amplificato viene rilevato mentre la reazione procede in “tempo reale”. Si tratta di un approccio nuovo rispetto alla PCR standard, in cui il prodotto della reazione viene rilevato alla fine. Due metodi comuni per il rilevamento di prodotti nella PCR quantitativa sono: (1) coloranti fluorescenti non specifici che si intercalano con qualsiasi DNA a doppio filamento e (2) sonde di DNA sequenza-specifiche costituite da oligonucleotidi marcati con un repoer fluorescente che consente il rilevamento solo dopo l'ibridazione della sonda con la sua sequenza complementare per quantificare l'RNA messaggero (mRNA) e l'RNA non codificante nelle cellule o nei tessuti.
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