La sterilizzazione dei terreni di coltura contenenti siero avviene mediante:
Autoclavaggio
Filtro a micropori
Radiazione gamma
Centrifugazione
La maggior parte dei terreni di coltura vengono sterilizzati in autoclave a 121°C per 15 minuti a una pressione di 15 libbre/pollice2
Componenti come siero, trypsin, fattori di crescita, proteine, aminoacidi, vitamine, ormoni, carboidrati ed estratti vegetali sono termolabili e possono decomporsi durante il trattamento in autoclave. Pertanto, questi devono essere sterilizzati mediante filtrazione.