Un paziente soffriva di sindrome epatorenale. È stato prelevato un campione di urina dal paziente ed è stato esaminato al microscopio. Quale delle seguenti tecniche viene utilizzata per rendere visibile l'organismo?
Microscopia in campo oscuro
Microscopia di routine con sfondo colorato negativamente
Microscopia a contrasto di fase
Microscopia ottica composta
(a) Microscopia in campo scuroLEPTOSPIRALeptospira, comprende due specie:* L. interrogans (patogeno per l'uomo): provoca leptospirosi o malattia di Weil che coinvolge fegato e reni.* L.biflexa (saprofita)* Modalità di trasmissione: è zoonotica. Non avviene la trasmissione diretta da uomo a uomo. Si trasmette tramite:0 Contatto indiretto con acqua, terreno umido e superfici bagnate contaminate da urina animale oppure0 Contatto diretto con urina e prodotti del parto, placenta di animali infetti* Fonte: Sebbene >100 animali possano essere infetti; ma importanti fonti di infezione sono ratti, cani, bovini e maiali.* 3R: Importanti determinanti epidemiologici per la leptospirosi includono l'esposizione a roditori, piogge e risaie. Manifestazioni cliniche Il periodo di incubazione è di circa 5-14 giorni. In generale, le manifestazioni possono essere suddivise in due sindromi cliniche distinte.* Malattia febbrile anitterica lieve: si manifesta nel 90% dei pazienti. È bifasico; fase setticemica seguita dalla fase immunitaria* Malattia di Weil (sindrome epato-renale-emorragica): è una forma grave di malattia itterica, si manifesta nel 10% dei pazienti. Il tipico decorso bifasico potrebbe non essere presente. È più grave e fulminante Lieve malattia febbrile anicterica Malattia di WeilPrimo stadio 3-10 giorni (setticemia)Secondo stadio 10-30 giorni (immune)Primo stadio 3-10 giorni (setticemia)Secondo stadio 10-30 giorni (immune)Risultati cliniciFebbreMialgiaMal di testaCongiuntivasoffusioneDolore addominaleEritema faringeo senza essudatiVomitoMeningiteUveite, neutiride ottica, corioretiniteEruzione cutaneaFebbreNeuropatia perifericaFebbre altaIttero e aumento degli enzimi epaticiEmorragie:* Emorragia polmonare* Petecchie e porpora* Emorragia congiuntivale* Emorragia gastrointestinaleRene: aumento dell'urea sierica e della creatinina e insufficienza renaleIsolamentoDa sangue e liquido cerebrospinaleDa urinaSangue e CSFUrinaSiero lgMA bpresentePresenteAssentePresenteAntibioticiSuscettibile agli antibioticiRefrattario al trattamentoSuscettibile agli antibioticiRefrattario a trattamentoDiagnosi di laboratorio* Campioni: liquido cerebrospinale e sangue (nei primi 10 giorni dall'infezione) e urina (tra 10 e 30 giorni dall'infezione)Microscopia: le Leptospira sono estremamente sottili, quindi visibili al microscopio a fondo scuro.* Sono strettamente e regolarmente avvolte, con caratteristiche estremità uncinate come il manico di un ombrello.* Sono altamente mobili; mostrano movimenti di rotazione e traslazione.* Isolamento:0 Condizioni colturali: Leptospira è aerobia obbligata e cresce lentamente. Incubato a 30°C per 4-6 settimane.0 Terreni di coltura: poiché la Leptospira è altamente esigente, richiede terreni arricchiti come: terreno EMJH - terreno MC Terreno di Korthof* Sierologia per il rilevamento degli anticorpi: i test di rilevamento degli anticorpi possono essere ampiamente classificati in:0 Specifici per genere i test utilizzano antigeni genere-specifici ampiamente reattivi preparati da un ceppo non patogeno di L.biflexa Patoc 1. Non sono in grado di rilevare il sierotipo infettante. Vari test disponibili sono: Test di agglutinazione macroscopica su vetrino Test di agglutinazione con microcapsule (MCAT) Test di agglutinazione al lattice, ELISA e ICT Test specifico per sierotipi: Il test di agglutinazione microscopica (MAT) rileva gli anticorpi contro sierotipi specifici di L. interroagans. È il metodo gold standard e il test di riferimento per la diagnosi della leptospirosi.* Metodi molecolari:0 I geni bersaglio sono 16S o 23SrRNA o la sequenza di inserzione IS 1533.0 La PCR rileva precocemente prima che si verifichi la sieroconversione. Tuttavia, la PCR non è specifica per il sierotipo.0 PCR-RFLP o PFGE sono i metodi per determinare la genomospecie di Leptospira.* I criteri di Fame sono le linee guida approvate dall'OMS utilizzate per la diagnosi della leptospirosi. Si basa su risultati clinici, epidemiologici e di laboratorio. Trattamento* Leptospirosi lieve: doxiciclina orale (in alternativa amoxicillina)* Leptospirosi grave: la penicillina è il DOC (in alternativa ceftriaxone/cefotaxime)
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