Nella PCR, Acquaticus thermophilus è preferito rispetto a E.coli perché: (IGP dicembre 2007)
Termostabile alla temperatura alla quale il DNA si liquefa
Correzione bozze effettuata
Fatto in modo più preciso
Non necessita di primer
Risposta: A (Termostabile alla temperatura alla quale il DNA si liquefa) Utilizzando una DNA polimerasi9 termostabile (ad esempio Taq polimerasi) proveniente da un batterio ("thermus aquations") che normalmente vive ad alta temperatura, la polimerasi non viene denaturata e quindi, non è necessario aggiungerlo ad ogni ciclo successivo"- Lippintcott. Biochimica 4th/482Polymerase Chain ReactionPCR fornisce un mezzo sensibile, selettivo ed estremamente rapido per amplificare una sequenza desiderata di DNA. Venti cicli forniscono un'amplificazioneQ di 106 e 30 cicli di 109 - Harper 27th/410-11SpecificityQ si basa sull'uso di due primer oligonucleotidici che si ibridano in sequenze complementari su filamenti opposti di DNA e fiancheggiano la sequenza target Il DNA a doppio filamento può essere interrotto dal calore o da un pH elevato, dando origine al DNA a filamento singolo Il DNAQ funge da modello per la sintesi di un filamento complementare replicando gli enzimi, la DNA polimerasi. La prima reazione PCR utilizzava una DNA polimerasi di E.coli che veniva distrutta da ogni ciclo di denaturazione termica. La sostituzione di una DNA polimerasi termostabile (Taq polimerasi) da Thermus acquatico, ovvia a questo problema e ha reso possibile l'automazione della reazione, poiché le reazioni della polimerasi possono essere eseguite a 70 gradi. Il CPCR è un processo ciclico e il ciclo contiene tre fasi che coinvolgono (Chatterjea & Shinde)DenaturazioneQ del duplex del DNA (94-98°C)RicotturaQ dei primer (37-60°C)EstensioneQ dei primer con una polimerasi in presenza di dNTP (circa 720°C)La DNA polimerasi amplifica il DNA nella PCR, la PCR iniziale utilizzava un E coli, La DNA polimerasi è stata distrutta da ciascun ciclo di generazione di calore, ovvero la polimerasi è stata denaturata. Questa difficoltà viene risolta utilizzando la DNA polimerasi della tabella termica di "thermusaquaticuS" che può resistere a temperature comprese tra 70°C e 80°C. Pertanto non è necessario aggiungere la polimerasi in ogni ciclo.
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