Gli isoenzimi possono essere differenziati l'uno dall'altro da
Elettroforesi su gel di agar
Stabilità al calore
Specificità del substrato
Tutti questi
Identificazione degli isoenzimi: nell'elettroforesi su gel di agar o su gel di poliacrilammide, gli isoenzimi hanno mobilità diversa. Gli isoenzimi LDH, CK e ALP possono essere separati mediante elettroforesi. Stabilità al calore: uno degli isoenzimi può essere facilmente denaturato dal calore, ad es. isoenzima osseo dell'ALP (BALP). Inibitori: uno degli isoenzimi può essere sensibile a un inibitore, ad es. tarate labili ACP. Il valore Km o la specificità del substrato possono essere diversi per gli isoenzimi, ad es. la glucochinasi ha un Km elevato e l'esochinasi ha un Km basso per il glucosio. la glucochinasi agisce specificamente sul glucosio come substrato mentre l'esochinasi può fosforilare qualsiasi zucchero esoso. I requisiti dei cofattori possono essere diversi per gli isoenzimi. L'isocitrato deidrogenasi mitocondriale è NAD+ dipendente e l'isoenzima citoplasmatico è NADP+ dipendente. La localizzazione tissutale può essere diversa per gli isoenzimi. La forma H4 di LDH è presente nell'hea, mentre la varietà M4 è presente nel muscolo scheletrico. Anticorpi specifici possono identificare diversi tipi di isoenzimi. Ad esempio, gli isoenzimi CK sono separati da anticorpi.
Enzyme basics and serine proteases