Un fumatore cronico di 56 anni, massa nei bronchi resecati. Il marcatore immunoistochimico più utile per fare una diagnosi corretta sarebbe aEUR'
Citocheratina
Vimentina
Caderina della membrana epiteliale
Antigene comune dei leucociti
Immunoistochimica della citocheratina L'immunoistochimica è uno strumento importante per la determinazione del tipo di tessuto in base alla presenza (o assenza) di marcatori di lignaggio specifici del tessuto. Il principio di base dell'immunoistochimica è quello di marcare un anticorpo con una sonda (marcatore colorato) specifica per un antigene di un particolare tessuto. - Questo anticorpo viene eseguito sul tessuto di origine sconosciuta. Se il tessuto ha quel particolare sito antigene (epitopo), l'anticorpo si attaccherà al tessuto. Poiché questo anticorpo è marcato, può essere visto al microscopio e può essere diagnosticata l'origine del tessuto. Cominciamo la discussione con i filamenti intermedi: i filamenti intermedi sono componenti del citoscheletro sia del tessuto normale che di quello neoplastico. Ci sono i principali antigeni utilizzati in immunoistochimica. Esistono cinque ampie classi di filamenti intermedi. La maggior parte delle neoplasie presentano un'espressione predominante di uno di questi: a) Carcinomi cheratinici, mesoteliomi e non? GCT seminomo b) Vimentina Sarcoma, melanomi, seminomi, linfomi c) Neurofilamento Tumori neurali e neuroendocrini d) Proteina acida fibrillare gliale (GFAP) Tumori di origine astrogliale e) Desmina Tumori di origine muscolare (leiomiomi e rabdomiomi) Le cellule neoplastiche possono co-esprimere più di uno di questi filamenti intermedi, cioè possono essere +ve per 2 marcatori di diversa origine. Questi risultati possono essere utili anche per diagnosticare un tumore. Dopo questa breve descrizione esaminiamo i vari marcatori presenti in ciascuna neoplasia. Carcinomi Le citocheratine sono i marcatori più sensibili del carcinoma. - Questi sono. ulteriormente suddiviso in 20 sottotipi in base al peso molecolare e al pH isoelettrico. - Queste singole cheratine forniscono informazioni importanti sul sito di origine di un determinato carcinoma. CK7+/CK20+ Cellula di transizione uroteliale ca ; Ca pancreas, carcinoma macinoso ovarico CK7+/CK20- Seno, polmone, endometrio, tiroide, ovaio (sieroso), timoma CK7-/CK20+ Colorettale, stomaco, cellule di Merkel CK7-/CK20- Fegato, rene (cellule chiare), prostata Marcatori epiteliali per la determinazione del sito di origine del carcinoma Mammella * Recettore per estrogeni e progesterone (se positivo, indica una buona prognosi) * Marcatore mammario specifico GCDP (proteina cistica lorda) * (HE2/neu-prognosi sfavorevole) * La caderina è -ye nel carcinoma lobulare ma +ve nel carcinoma duttale Fegato CAM, AFP Tiroide Tiroglobulo nella calcitonina (papillare e follicolare) (midollare) Prostata PAP, antigene prostatico specifico Colorettale CEA, CK20, pancreas CA19-9, ovaio CA-125 Altri marcatori epiteliali Antigene della membrana epiteliale (EMA) -4 Seno, polmone e reni, adenocarcinoma sono tipicamente +ve. Carcinoma Antigene embrionale +ve nei carcinomi del tratto gastrointestinale, del pancreas, del polmone, della mammella, dell'utero e dell'ovaio Tumori cheratina positivi oltre ai carcinomi Mesoteliomi - Di solito la cheratina HMW +ve, CK5/6 dovrebbe essere distinta dagli adenocarcinomi che sono protettivi per la citocheratina a basso peso molecolare e il carcinoma origine embrionale. GCT non seminomatosi - Si distinguono dai carcinomi in quanto positivi per - HCG (coriocarcinoma) - AFP (tumore del seno endoteliale), - Fosfatasi alcalina placentare (PCAP), - Ca embrionale (coriocarcinoma e tumore del seno endodenale). Sarcomi Vimentina: -Caratteristicamente espressa nelle cellule mesenchimali normali - Tali tumori includerebbero tumori derivati ​​da - vasi sanguigni, - muscoli, - grasso, - cailage, - elementi emopoietici, - tubo neurale e cresta neurale, e - cellule Seoli e granulosa del testicolo e ovaio. Altri marcatori utilizzati nei tumori a cellule mesenchimali. Tumore di origine miogena, ovvero leio e rabdomiosarcoma - Actina e desmina muscolo-specifici - Mioglobina, miogenina e mio-D1 Tumore di origine vascolare, ovvero emangioma e angiosarcoma - Fattore VIII - CD31 Tumori fibroistiocitici, ad es. istiocitoma fibroso maligno - CD68 - HAM56 Osteosarcoma: - Osteopontina - Osteocalcina - Osteonectina - Proteina GIA dell'osso Sarcoma di Ewing e PNET (Ewing nei tessuti molli): - CD99 (anticorpi contro il gene MIC-2) - oltre a Ewings questo è positivo anche in pochi altri tumori compreso il tumore a cellule della granulosa ovarica. GIST (tumori stromali gastrointestinali): - CD117 identifica il gene C-KIT per la tirosina chinasi. - Sono normalmente presenti sulle cellule interstiziali di Cajal. - Questi tumori rispondono al farmaco Glevac/Imatinib, che viene somministrato anche ai pazienti affetti da LMC con traslocazione (9:22). Altri tumori importanti in cui l'immunoistochimica ha un ruolo: Melanomi -S-100 (marcatore sensibile ma non specifico) - HMB-45 (melanosoma, altamente sensibile e specifico) Linfomi -CD-45 - utilizzato nello screening dei linfomi. - La tipizzazione Fuher viene eseguita da: - Marcatori di cellule B CD19, CD20, CD23 - Marcatori di cellule T CD-2, CD-3, CD-7 - Cellule di Reedsternberg - CD15 e CD30 .per linfoma di Hodgkin Seminoma -Vimentina e PLAP +ve - AFP e HCG (-ye) Tumore neuroendocrino, ad es. tumori carcinoidi -NSE (enolasi neurone specifica) - Cromogranina - Sinaptofisina - Leu-7 Tumori neurali di origine gliale, ad es. Astrocvtomi -GFAP (proteina dell'acido fibrillare gliale)