Le proteine ​​vengono purificate utilizzando solfato di ammonio mediante:
Salare
Cromatografia a scambio ionico
Cromatografia di massa
Esclusione della dimensione molecolare
Ans è "a", ovvero Salatura La precipitazione con solfato di ammonio è un metodo di purificazione delle proteine ​​alterando la solubilità delle proteine. La tecnica è nota come salatura. Salatura: le proteine ​​vengono purificate utilizzando differenze di solubilità proteica in diverse concentrazioni di sale. La solubilità delle proteine ​​varia in base alla forza ionica della soluzione e quindi in base alla concentrazione di sale. Si osservano due effetti distinti: a basse concentrazioni di sale, la solubilità della proteina aumenta con l'aumento della concentrazione di sale (cioè con l'aumento della forza ionica), un effetto chiamato salting in. Quando la concentrazione di sale (forza ionica) aumenta ulteriormente, la solubilità della proteina le proteine ​​iniziano a diminuire. Con una forza ionica sufficientemente elevata, la proteina sarà quasi completamente precipitata dalla soluzione (salatura). Poiché le proteine ​​differiscono notevolmente nella loro solubilità a forza ionica elevata, la salatura è una procedura molto utile per assistere nella purificazione di una determinata proteina. . Il sale comunemente usato è il solfato di ammonio, poiché è molto solubile in acqua. La concentrazione di solfato di ammonio viene aumentata gradualmente e la proteina precipitata viene recuperata in ogni fase. La proteina precipitata viene quindi rimossa mediante centrifugazione e quindi la concentrazione di solfato di ammonio viene aumentata a un valore che farà precipitare la maggior parte delle proteine ​​di interesse lasciando la massima quantità di contaminanti proteici ancora in soluzione. Questa tecnica è utile per rimuovere rapidamente grandi quantità di proteine ​​contaminanti, come primo passo in molti schemi di purificazione. Viene spesso utilizzato anche durante le fasi successive della purificazione per concentrare le proteine ​​dalla soluzione diluita seguendo procedure come la filtrazione su gel
Amino Acid Metabolism