La seguente tecnica di separazione dipende dalla dimensione molecolare della proteina
Cromatografia su colonna di carbossimetilcellulosa
Messa a fuoco isoelettrica
Cromatografia per filtrazione su gel
Cromatografia su colonna di dietilamminoetil (DEAE).
La risposta è l'esclusione della dimensione C (o filtrazione su gel): la cromatografia separa le proteine ​​in base al loro raggio di Stokes, il raggio della sfera che occupano mentre cadono in una soluzione. Il raggio di Stokes è una funzione della massa e della forma molecolare. Quando cade rapidamente, una proteina allungata occupa un volume effettivo maggiore di una proteina sferica della stessa massa. La cromatografia ad esclusione dimensionale utilizza sfere porose. Rif: Harper's Illustrated Biochemistry, 30E (2015) Pg No 27. nella cromatografia a scambio ionico, le fasi solide a scambio cationico contengono gruppi funzionali legati covalentemente e caricati negativamente. Gli esempi includono gruppi fortemente acidi, come gli ioni solfonato, o gruppi debolmente acidi, come carbossile o carbossimetile. Gli enzimi immobilizzati sono stati legati chimicamente ad adsorbenti, come (1) cellulosa microcristallina, (2) dietilamminoetil (DEAE) cellulosa, (3) carbossimetilcellulosa e (4) agarosio. Rif: Libro di testo Tietz di chimica clinica e diagnostica molecolare, 5E Pg n. 308 e 375 Iso La focalizzazione elettrica si basa sul campo elettrico e sul pH. Tamponi ionici chiamati anfoliti e un campo elettrico applicato vengono utilizzati per generare un gradiente di pH all'interno di una matrice di poliacrilammide. Le proteine ​​applicate migrano fino a raggiungere la regione della matrice dove il pH corrisponde al loro punto isoelettrico (pI). Rif: Harper's Illustrated Biochemistry, 30E (2015) Pagina n. 29.
Structure and function of protein