Il DNA dell'HBV è?
Singolo filamento
A doppio filamento
Parzialmente a filamento singolo
Parzialmente a doppio filamento
Ris- D Rif 1 - Sebbene l'HBV sia tra i virus più piccoli in termini di dimensioni del virione e del genoma, ha numerose caratteristiche uniche che lo rendono completamente distinto dagli altri virus a DNA. Ha un DNA parzialmente a doppio filamento con un'organizzazione del genoma, un ciclo di vita e una storia naturale altamente complessi. Notevolmente distinto dagli altri virus a DNA, utilizza un intermedio dell'RNA chiamato RNA pregenomico (pgRNA) e la trascrittasi inversa per la replicazione del genoma. La replicazione del genoma è ottenuta mediante un complesso meccanismo di spostamento dei primer facilitato da sequenze ripetute dirette codificate nel genoma. Rif 2 - jvi.asm.org/content/81/12/6164.full Il virus dell'epatite B (HBV) contiene un piccolo genoma di DNA circolare rilassato (RC) parzialmente a doppio filamento. Il DNA RC deve essere convertito in DNA circolare covalentemente chiuso (CCC), che funge da modello per tutta la trascrizione dell'RNA virale. Come primo passo verso la comprensione di come si forma il DNA del CCC, abbiamo analizzato i fattori virali e dell'ospite che potrebbero essere coinvolti nella formazione del DNA del CCC, utilizzando trasfezioni transitorie e stabili del DNA dell'HBV e del correlato epadnavirus aviario, il virus dell'epatite B delle anatre (DHBV). Rif 3 - Introduzione al genoma Il virus dell'epatite B (HBV) è un grave problema sanitario in tutto il mondo con oltre 350 milioni di persone che sono portatori cronici. L'HBV provoca l'epatite B, una malattia infettiva grave e comune del fegato. L’infezione cronica è associata ad un aumentato rischio di sviluppare gravi malattie epatiche, tra cui la cirrosi epatica e il carcinoma epatocellulare (HCC), una delle forme più comuni di cancro umano. Il rischio stimato di HCC nei portatori cronici di HBV è circa 100 volte maggiore rispetto ai soggetti non infetti. I farmaci anti-HBV attualmente disponibili presentano limitazioni. La somministrazione di interferone alfa è associata a reazioni avverse; gli analoghi nucleosidici sono virostatici e richiedono una somministrazione a lungo termine. Organizzazione del genoma L'HBV è un virus a DNA avvolto che appartiene alla famiglia Hepadnaviridae (tassonomia NCBI, ICTV, ViralZone). Contiene un piccolo genoma di DNA circolare rilassato (rcDNA) parzialmente a doppio filamento (DS) che si replica mediante trascrizione inversa di un intermedio di RNA, l'RNA pregenomico (pgRNA). La sua lunghezza è compresa tra 3182 e 3248 bp a seconda dei genotipi. Il genoma codifica quattro open reading frames (ORF) sovrapposti che vengono tradotti in proteina del nucleo virale, proteine ​​di superficie, polimerasi/trascrittasi inversa (RT) e HBx. Ciclo di replicazione Il ciclo vitale dell'HBV inizia quando il virus si attacca alla cellula ospite e viene internalizzato. Studi recenti hanno dimostrato che il polipeptide cotrasportatore sodio-taurocolato (NTCP) è un recettore funzionale nell'infezione da HBV. L'rcDNA del virione viene consegnato al nucleo, dove viene riparato per formare un DNA circolare chiuso covalentemente (cccDNA). Il cccDNA episomiale funge da modello per la trascrizione del pgRNA e degli altri mRNA virali da parte della RNA polimerasi II dell'ospite. Le trascrizioni vengono poi esportate nel citoplasma, dove avviene la traduzione delle proteine ​​virali. RT si lega al pgRNA e innesca l'assemblaggio delle proteine ​​principali in nucleocapsidi immaturi contenenti RNA. I nucleocapsidi immaturi subiscono quindi un processo di maturazione in cui il pgRNA viene trascritto in modo inverso dalla RT per produrre l'rcDNA maturo. Una caratteristica unica della trascrizione inversa dell'epadnavirus è l'avvio, innescato da RT, della sintesi del DNA del filamento negativo, che porta al legame covalente di RT all'estremità 5' del DNA del filamento negativo. I nucleocapsidi maturi contenenti rcDNA vengono quindi avvolti dalle proteine ​​della superficie virale e secreti come virioni (percorso di secrezione) o, in alternativa, vengono riciclati nel nucleo per amplificare ulteriormente il pool di cccDNA (percorso di riciclo). La persistenza del cccDNA negli epatociti gioca un ruolo chiave nella persistenza virale, nella riattivazione della replicazione virale dopo la cessazione della terapia antivirale e nella resistenza alla terapia.