L'amplificazione del DNA in vitro viene eseguita da
Tecnica del blotting
Tecnica ricombinante
Elettroforesi
Reazione a catena della polimerasi
(D) Reazione a catena della polimerasi # L'amplificazione del DNA viene eseguita mediante PCR> Tecnica blotting Dopo l'elettroforesi su gel, vengono spesso utilizzate sonde per rilevare molecole specifiche dalla miscela. Tuttavia, le sonde non possono essere applicate direttamente sul gel. Il problema può essere risolto mediante tre tipi di metodiche di blotting: Southern blotting, Northern blotting e Western blotting. Il Southern blotting è una tecnica per rilevare specifici frammenti di DNA in una miscela complessa. Il Northern blotting viene utilizzato per rilevare frammenti di RNA, invece di frammenti di DNA. Il Western blotting viene utilizzato per rilevare una particolare proteina in una miscela. La sonda utilizzata quindi non è DNA o RNA, ma anticorpi. La tecnica è anche chiamata PCR "immunoblotting": tecniche in vitro come la reazione a catena della polimerasi consentono l'amplificazione di specifiche sequenze di DNA in modo che piccole quantità di acidi nucleici estranei possano essere riconosciute nei campioni ospiti. Il DNA ricombinante si riferisce a un insieme di tecniche per creare (e analizzare) molecole di DNA che contengono DNA di due organismi non correlati. Una delle molecole di DNA è tipicamente un DNA batterico o virale in grado di accettare un'altra molecola di DNA; questo è chiamato DNA vettoriale. L’altra molecola di DNA proviene da un organismo di interesse, che potrebbe essere qualsiasi cosa, da un batterio a una balena o a un essere umano. La combinazione di queste due molecole di DNA consente la replicazione di molte copie di uno specifico DNA. Queste copie del DNA possono essere studiate in dettaglio, utilizzate per produrre proteine ​​preziose o utilizzate per la terapia genica o altre applicazioni. L'elettroforesi, chiamata anche cataforesi, è il movimento di particelle disperse rispetto a un fluido sotto l'influenza di un campo elettrico spazialmente uniforme. Questo fenomeno elettrocinetico fu osservato per la prima volta nel 1807 da Reuss, il quale notò che l'applicazione di un campo elettrico costante provocava la migrazione delle particelle di argilla disperse nell'acqua. In definitiva è causato dalla presenza di un'interfaccia carica tra la superficie delle particelle e il fluido circostante.
C.N.S.