La temperatura di fusione del DNA è: -
Proporzionale alle coppie AT
Proporzionale alle coppie GC
Nessuna relazione con la composizione della coppia di basi
Direttamente proporzionale alla lunghezza del DNA
La denaturazione o fusione di due filamenti di DNA significa la separazione dei due filamenti di DNA. In questo processo, i legami idrogeno tra le coppie di basi complementari vengono rotti, portando alla separazione. Temperatura di fusione (Tm) del DNA, ovvero la temperatura alla quale metà del duplex del DNA si dissocia per diventare a filamento singolo. La Tm del DNA è compresa tra 85 e 95 gradi C. *I primer con temperature di fusione comprese tra 52 e 58 gradi C generalmente producono i migliori risultati. *Tm è proporzionale alle coppie GC perché ci sono tre legami idrogeno tra G e C, rispetto ai due legami idrogeno tra A e T. Quindi un maggiore contenuto di GC conferisce termostabilità al DNA. *Per ogni aumento del 10% del contenuto di GC, la temperatura di fusione aumenta di 5°C.
JIPMER 2018