La PCR in tempo reale viene utilizzata per:
Solo rilevamento del DNA
Solo rilevamento dell'RNA
Solo rilevamento delle proteine
Per monitorare l'amplificazione del DNA target
La PCR in tempo reale viene utilizzata per monitorare l'amplificazione del DNA target. In questa PCR utilizziamo il colorante verde SYBR, che ha la proprietà di dare fluorescenza quando legato al dsDNA. Quando si verifica la sintesi del DNA, la quantità di DNA aumenta gradualmente, quindi aumenta anche la fluorescenza. Questa fluorescenza può essere misurata e da essa è possibile calcolare la quantità di DNA. Pertanto è noto come PCR quantitativa (q PCR). Coloranti utilizzati in qPCR: Rilevamento basato su SYBR: utilizza il colorante verde SYBR (colorante legante il ds-DNA) - NON specifico della sequenza. Rilevazione basata su TaqMan: utilizza una sonda fluorogenica specifica per il gene bersaglio per rilevare il bersaglio, poiché si accumula durante la PCR.
Techniques in molecular biology