Cosa accadrà al DNA se gli viene aggiunto del sale: (PGI dicembre 2008)
Aumenta il punto di fusione (Tm)
Diminuisci Tm
Non influenza Tm
La fusione porta alla denaturazione del DNA
Risposta: A (Aumenta il punto di fusione (Tm)) e D (La fusione porta alla denaturazione del DNA) "Un aumento di dieci volte del catione monovalente aumenta la Tm di 16,6!'C"- Harper 27th313Denaturazione e TM del DNADefinizione#"I filamenti di una data molecola di DNA separata in un intervallo di temperature. Il punto medio è chiamato punto di fusione (T J" È anche definito come "la temperatura alla quale il DNA è denaturato per metà# A questa temperatura, l'assorbanza del DNA a 260 nm aumenta di Il 18,5% ovvero la metà del 37% aumenta nell'assorbanza quando il DNA è completamente denaturato. Questo fenomeno è chiamato ipercromicità o effetto ipercromico. I fattori che influenzano TmTm dipendono sia dalla lunghezza della molecola che dalla composizione specifica della sequenza nucleotidica di quella molecola. Il DNA è ricco di coppie GC che hanno un legame 3-H che si scioglie a una temperatura più elevata rispetto a quello ricco di coppie A-T, che hanno un legame 2-H. Un aumento di dieci volte della concentrazione di cationi monovalenti aumenta la Tm di 16,6 gradi CFormamideQ comunemente usata nella tecnologia del DNA ricombinante e nell'urea, entrambi destabilizzano Legami H e quindi Tm più bassa. In che modo la concentrazione ionica influisce sulla Tm: La concentrazione ionica influenza anche la Tm perché il PO4 ha carica negativa. nei due filamenti sono schermati da ioni caricati positivamente. Quando la concentrazione ionica è bassa, questa schermatura diminuisce, aumentando così la forza repulsiva dei fili in bianco e nero e riducendo il Tm. Cos'è la ricottura: una volta che i fili sono separati, possono essere rinaturati. Se il campione fuso di DNA viene raffreddato lentamente, l'assorbanza della soluzione diminuisce. Questo è un indicatore del fatto che i filamenti complementari vengono nuovamente accoppiati. Questo processo è chiamato ricottura. La ricottura può avvenire solo a una temperatura inferiore alla Tm del DNA che è di circa 7GdegC. È più veloce a 20°C sotto (Tm) o 50°C. Applicazione di Tm al DNA# La quantità di G & C (guanina e citosina) in un genoma (chiamato "contenuto GC") può essere stimata misurando la temperatura alla quale il DNA genomico si scioglie. Un valore (Tm) più alto significa un contenuto di GC più elevato.# Utilizzato anche nelle tecniche di biologia molecolare, in particolare in PGR.# Utilizzato come proxy per equalizzare le forze di ibridazione di un insieme di molecole, ad es. la sonda oligonucleotidica del microarray di DNA. Utilizzata per rilevare differenze di sequenza in filamenti in bianco e nero e sequenze di DNA diverse. Conosciuto anche La denaturazione e la rinaturazione del DNA sono la base dell'ibridazione dell'acido nucleico - Biologia molecolare di Lodlsh 6th/117 La denaturazione del DNA è anche chiamata come "transizione da elica a bobina" - Il valore Chatterjea & Shinde 7th/228Tm viene calcolato mediante - Metodo del vicino più vicino fhttp:// en. wikipedia.org)
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