Quale di questi non è un metodo per introdurre geni in una cellula?
Trasfezione
Elettroporazione
PESCARE
Ri combinazione
I metodi per introdurre i geni in una cellula includono tecniche di trasfezione (a base chimica), elettroporazione (fisica), infezione (mediata da virus) e ricombinazione. L'ibridazione in situ fluorescente (FISH) è una tecnica citogenetica che utilizza sonde marcate con fluorescenza per rilevare sequenze specifiche di DNA in campioni di tessuto. Non viene utilizzato per introdurre geni nelle cellule. Metodi di manipolazione genetica: la trasfezione è il metodo più comunemente utilizzato per introdurre transgeni nelle cellule staminali embrionali umane (hES). Questo sistema si basa sull'utilizzo di molecole carrier che si legano agli acidi nucleici estranei e li introducono nelle cellule attraverso la membrana plasmatica. L'elettroporazione è un metodo che impiega la somministrazione di impulsi elettrici che creano pori transitori nella membrana cellulare, consentendo al DNA estraneo di entrare nelle cellule. L'infezione è la manipolazione genetica mediante infezione virale che può produrre una percentuale molto elevata di cellule modificate. I vantaggi rispetto ad altri sistemi sono l'elevata efficienza del trasferimento del DNA (efficienza quasi del 100%) e le integrazioni a copia singola. La ricombinazione avviene mediante scambio fisico di DNA. Un gene endogeno può essere sostituito da un gene trasfettato mediante ricombinazione omologa. La ricombinazione è il risultato dell'incrocio che avviene nei chiasmi e coinvolge due dei quattro cromatidi. Rif: Protocolli sulle cellule staminali embrionali umane di Kursad Turksen, 2006, pagina 225