La sterilizzazione dei terreni di coltura contenenti siero avviene mediante:
Autoclavaggio
Filtro a micropori
Radiazione gamma
Centrifugazione
Ris. è "b" cioè filtro a micropori Sterilizzazione dei terreni di coltura I componenti dei terreni di coltura devono essere sterilizzati con cura. Due metodi sono comunemente usati per sterilizzare i terreni di coltura: I) Autoclavaggio: i componenti come acqua, sali e integratori come peptone, tiptosio ecc., che sono stabili al calore, vengono sottoposti a trattamento in autoclave. - Generalmente l'autoclavaggio viene effettuato a 121°C e ad una pressione di 15 psi. - Il tempo necessario per la sterilizzazione dipende dal volume del terreno nel recipiente? a) Per piccoli volumi di liquidi (100 ml o meno), il tempo richiesto per il trattamento in autoclave è di 15-20 minuti. b) Per grandi quantità (2-4 litri) sono necessari 30-40 minuti. 2) Filtrazione su membrana: componenti come siero, trypsin, fattori di crescita, proteine, amminoacidi, vitamine, ormoni, carboidrati ed estratti vegetali sono termolabili e possono decomporsi durante il trattamento in autoclave. - Questi devono essere sterilizzati mediante filtrazione. - La porosità della membrana filtrante non deve essere superiore a 0,2 micron (U m). - La vetreria vuota destinata a contenere i mezzi deve essere sterilizzata in un'autoclave prima della sterilizzazione del filtro. . Questi due (autoclavaggio e filtrazione su membrana) sono i metodi più comunemente utilizzati per la sterilizzazione dei terreni di coltura. Ma quando questi non sono disponibili si possono utilizzare altri metodi; per esempio.? - Per i supporti contenenti zucchero o gelatina, è possibile utilizzare un'esposizione di 100°C per 20 minuti in tre giorni consecutivi. Questo è noto come tindalizzazione. - Alcuni supporti contenenti siero o liquido d'uovo possono essere sterilizzati riscaldando a 80-85 °C per 2-4 ore.