Il trimetoprim agisce:
Inibizione dell'enzima peptidil transferasi
Inibizione dell'enzima diidrofolato reduttasi
Inibizione dell'enzima diidropteroato sintasi
Si lega all'unità ribosomiale 50s e impedisce la sintesi proteica
Trimetoprim, Metotrexato e pirimetamina inibiscono l'enzima diidrofolato reduttasi e prevengono la formazione di acido tetraidrofolico e di acido diidrofolico.