Indagine per l'identificazione definitiva del cryptosporodium: marzo 2010
ELISA
Test di immunofluorescenza
Dimostrazione dell'ovocita nelle feci
Colorazione fluoroscente con auramina
Ris. B: Test di immunofluorescenza La diagnosi di cryptosporidium viene effettuata mediante la dimostrazione di oocisti nelle feci Metodi di rilevamento e conferma di cryptosporodium Montaggio a umido Nella microscopia in campo chiaro utilizzando il contrasto interferenziale differenziale (DIC), le oocisti appaiono come piccole strutture rotonde (da 4 a 6 im) simili ai lieviti. Non sono autofluorescenti. Le oocisti modificate a colorazione acidoresistente (da 4 a 6 im) hanno spesso pareti oocisti distinte e si colorano dal rosa chiaro al rosso brillante. In particolare, le infezioni che si stanno risolvendo possono avere "fantasmi" di oocisti incolori. Le oocisti mature possono avere sporozoiti distinguibili (fino a 4). Test anticorpale in fluorescenza indiretta: questa tecnica offre la più alta combinazione di sensibilità e specificità ed è considerata il gold standard. Tuttavia, non fornisce un vetrino colorato che possa essere archiviato. Richiede attrezzature speciali (microscopio a fluorescenza) e kit di test disponibili in commercio. I metodi per il rilevamento (ma non la conferma) delle oocisti di Cryptosporidium possono essere rilevati con i seguenti metodi, ma devono essere confermati dalle tecniche diagnostiche sopra elencate. Colorazione con safranina: le oocisti di Cryptosporidium spesso (ma non sempre) assumono un colore rosso-arancio brillante. Questo metodo, consigliato per Cyclospora, non è ampiamente utilizzato per Cryptosporidium perché le oocisti di Cryptosporidium potrebbero non sempre colorarsi correttamente. - Colorazione tricromica: le oocisti possono essere rilevate, ma non devono essere confermate, con questo metodo. Questo metodo di colorazione è inadeguato per la diagnosi definitiva perché tutte le oocisti appariranno non colorate. Le oocisti appaiono come piccole strutture rotonde che misurano da 4 a 6 mm. Altri metodi per rilevare il Cryptosporidium nelle feci. - Test immunoenzimatico (EIA): l'EIA non si basa sulle competenze microscopiche, è altamente sensibile e specifico ed è utile per lo screening di un gran numero di campioni. - Saggi rapidi immunocromatografici in cartuccia: i test rapidi in cartuccia possono essere utilizzati con campioni conservati e sono rapidi e facili da eseguire