La separazione delle molecole in base alla dimensione e alla forma può essere adattata alla purificazione delle proteine ​​con questa tecnica:
Cromatografia di adsorbimento
Cromatografia per filtrazione su gel
Cromatografia su carta
Nessuna di queste
Ris. B. Cromatografia di filtrazione su gela. La cromatografia ad esclusione dimensionale, chiamata anche filtrazione su gel, separa le proteine ​​in base alle dimensioni. La matrice della colonna è un polimero reticolato con pori di dimensione selezionata. Le proteine ​​più grandi migrano più velocemente di quelle più piccole, perché sono troppo grandi per entrare nei pori delle sfere e quindi prendere un percorso più diretto attraverso la colonna.b. Le proteine ​​più piccole entrano nei pori e vengono rallentate dal loro percorso più labirintico attraverso la colonna. La cromatografia a scambio ionico sfrutta le differenze nel segno e nell'entità delle cariche elettriche nette delle proteine ​​a un dato pH.c. La matrice della colonna è un polimero sintetico contenente gruppi carichi legati; quelli con gruppi anionici legati sono chiamati scambiatori cationici, e quelli con gruppi cationici legati sono chiamati scambiatori anionici.d. La cromatografia di affinità separa le proteine ​​in base alla loro specificità di legame. Le proteine ​​trattenute sulla colonna sono quelle che si legano specificamente a un ligando reticolato alle sfere. (In biochimica, il termine "ligando" è usato per riferirsi a un gruppo o una molecola che si lega a una macromolecola come una proteina.)e. Dopo che le proteine ​​che non si legano al ligando vengono lavate attraverso la colonna, la proteina legata di particolare interesse viene eluita (lavata via dalla colonna) da una soluzione contenente il ligando libero.
Structure & Function of Protein