Vì nồng độ cortisol thay đổi trong ngày, nên thời điểm xét nghiệm cortisol là rất quan trọng. Xét nghiệm máu cortisol thường được thực hiện hai lần một ngày vào buổi sáng khi nồng độ cortisol ở mức cao nhất và một lần nữa vào khoảng 4 giờ chiều, khi mức thấp hơn nhiều. Cortisol cũng có thể được đo bằng xét nghiệm nước tiểu hoặc nước bọt. Đối với xét nghiệm nước tiểu cortisol, nhà cung cấp dịch vụ chăm sóc sức khỏe của bạn có thể yêu cầu bạn thu thập tất cả nước tiểu trong khoảng thời gian 24 giờ. Đây được gọi là xét nghiệm mẫu nước tiểu trong 24 giờ. Nó được sử dụng vì nồng độ cortisol thay đổi trong ngày.