Louis Pasteur sinh ngày 27 tháng 12 năm 1822, tại Dole, Jura, Pháp, là con thứ ba của Jean-Joseph Pasteur và Jeanne-Etiennette Roqui. Cha của ông là một thợ thuộc da, người đã từng là trung sĩ trong Chiến tranh Napoléon.