Justin Chambers sinh ra và lớn lên ở Springfield, Ohio. Được phát hiện trên một chuyến tàu điện ngầm ở Paris, anh ấy bắt đầu sự nghiệp của mình với tư cách là một người mẫu chuyên nghiệp làm việc khắp Châu Âu, Nhật Bản và Hoa Kỳ với các hợp đồng tại Calvin Klein và Armani, cùng những người khác. Đặt mục tiêu vào diễn xuất, Chambers chuyển đến New York và học bốn năm tại H.B. Studios và Ron Stetson Studios.