Các phản ứng không phụ thuộc vào ánh sáng diễn ra trong lục lạp thực vật. Trong quá trình này, đường được tạo ra từ carbon dioxide. Quá trình này, được gọi là chu trình Calvin, sử dụng các sản phẩm của các phản ứng phụ thuộc vào ánh sáng (ATP và NADPH) và các enzym khác nhau.