Hampir semua jenis substrat dapat digunakan dalam pengujian ini (protein, peptida, lipid, dll.), selama metode yang sesuai untuk pemisahan ATP dan substrat radiolabel tersedia. Format throughput rendah standar untuk uji radioaktif in vitro kinase biasanya menggunakan elektroforesis gel, kromatografi atau teknik filtrasi untuk memisahkan ATP berlabel radio dari substrat berlabel radio.