Phosphofructokinase (PFK) adalah enzim glikolitik yang mengkatalisis transfer ireversibel fosfat dari ATP ke fruktosa-6-fosfat: fruktosa-6-fosfat + ATP fruktosa-1,6-bifosfat + ADP. Sebagian karena sifat ireversibel dari langkah ini dalam glikolisis, PFK adalah enzim pengatur utama untuk glikolisis. Ketika tingkat ATP tinggi di dalam sel, sel tidak lagi membutuhkan produksi energi metabolik untuk terjadi. Dalam hal ini, aktivitas PFK dihambat oleh regulasi alosterik oleh ATP itu sendiri, menutup katup pada aliran karbohidrat melalui glikolisis. Ingatlah bahwa regulator alosterik mengikat ke situs yang berbeda pada enzim dari situs aktif (katalitik). Jika tingkat ATP tinggi dalam sel, sel tidak lagi membutuhkan produksi energi metabolik terjadi. Dalam hal ini, aktivitas PFK dihambat oleh regulasi alosterik oleh ATP itu sendiri, menutup katup pada aliran karbohidrat melalui glikolisis.