Primase mensintesis primer RNA yang digunakan untuk memulai fragmen Okazaki pada untai tertinggal. DNA polimerase III terus menambahkan nukleotida ke untai utama tepat di garpu replikasi. DNA polimerase I (tidak pada garpu replikasi) menggantikan primer RNA dengan nukleotida DNA. DNA ligase, juga tidak pada garpu replikasi menggabungkan nukleotida baru yang dihasilkan oleh polimerase I dengan untai yang berdekatan. Replikasi berlanjut sampai ada dua untai DNA yang benar-benar terpisah dan identik.