Persiapan awal insulin dimurnikan dengan cukup kasar dari jaringan pankreas yang diekstraksi dari hewan baik babi atau sapi. Saat ini, insulin sebagian besar dibuat secara biosintetik dengan teknologi DNA rekombinan atau 'rekayasa genetika'. Sampai tahun 1980-an, semua insulin diekstraksi dari pankreas sapi dan babi. Urutan asam amino (bahan penyusun protein) sedikit berbeda dalam insulin dari spesies yang berbeda. Dibandingkan dengan insulin manusia, insulin babi (babi) memiliki satu asam amino yang berbeda dan insulin sapi (sapi) tiga asam amino yang berbeda.