Urutan di mana nukleotida dihubungkan, disebut sekuens, ditentukan oleh proses yang dikenal sebagai sekuensing DNA. Dalam sel eukariotik, sintesis DNA terjadi sesaat sebelum pembelahan sel melalui proses yang disebut replikasi. Ketika replikasi dimulai, dua untai DNA dipisahkan oleh berbagai enzim.