Biosynthesis of doxorubicin
ಡಾಕ್ಸೊರುಬಿಸಿನ್ (ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್) ಎಂಬುದು ಡೌನೊರುಬಿಸಿನ್ನ 14-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಲೇಟೆಡ್ ಆವೃತ್ತಿಯಾಗಿದ್ದು, ಇದು ಅದರ ಜೈವಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಮಾರ್ಗದಲ್ಲಿ ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ನ ತಕ್ಷಣದ ಪೂರ್ವಸೂಚಕವಾಗಿದೆ. ಡೌನೊರುಬಿಸಿನ್ ನೈಸರ್ಗಿಕ ಉತ್ಪನ್ನವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚು ಹೇರಳವಾಗಿ ಕಂಡುಬರುತ್ತದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಸ್ಟ್ರೆಪ್ಟೊಮೈಸಿಸ್ನ ವಿವಿಧ ಕಾಡು ಪ್ರಭೇದಗಳಿಂದ ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುತ್ತದೆ. ಇದಕ್ಕೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, ತಿಳಿದಿರುವ ಒಂದೇ ಒಂದು ಕಾಡು-ಅಲ್ಲದ ಪ್ರಭೇದವಾದ ಸ್ಟ್ರೆಪ್ಟೊಮೈಸಿಸ್ ಪ್ಯೂಸೆಟಿಯಸ್ ಉಪಜಾತಿ ಸೀಸಿಯಸ್ ಎಟಿಸಿಸಿ 27952, ಆರಂಭದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಡಾಕ್ಸೊರುಬಿಸಿನ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ಕಂಡುಬಂದಿದೆ. ಈ ಪ್ರಭೇದವನ್ನು ಆರ್ಕಾಮೋನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು ರಚಿಸಿದ್ದಾರೆ. 1969 ರಲ್ಲಿ ಡೌನೊರುಬಿಸಿನ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ತಳಿಯನ್ನು ಪರಿವರ್ತಿಸುವ ಮೂಲಕ, ಆದರೆ ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಅಲ್ಲ, ಕನಿಷ್ಠ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದಾದ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ. ತರುವಾಯ, ಹಚಿನ್ಸನ್ ಅವರ ಗುಂಪು ವಿಶೇಷ ಪರಿಸರ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ, ಅಥವಾ ಆನುವಂಶಿಕ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸುವ ಮೂಲಕ, ಸ್ಟ್ರೆಪ್ಟೊಮೈಸಿಸ್ನ ಇತರ ತಳಿಗಳು ಡಾಕ್ಸೊರುಬಿಸಿನ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಬಹುದು ಎಂದು ತೋರಿಸಿತು. ಅವನ ಗುಂಪು ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಉತ್ಪಾದನೆಗೆ ಅಗತ್ಯವಾದ ಅನೇಕ ವಂಶವಾಹಿಗಳನ್ನು ಅಬೀಜ ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿ ಮಾಡಿದೆ, ಆದಾಗ್ಯೂ ಅವೆಲ್ಲವನ್ನೂ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ನಿರೂಪಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ. 1996 ರಲ್ಲಿ, ಸ್ಟ್ರೋಹ್ಲ್ ಅವರ ಗುಂಪು ಡೌನೊರುಬಿಸಿನ್ ಅನ್ನು ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಆಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸುವ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಎನ್ಕೋಡಿಂಗ್ ಮಾಡುವ ಜೀನ್ ಡಾಕ್ಸ್ ಎ ಅನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿದಿದೆ, ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಿದೆ ಮತ್ತು ನಿರೂಪಿಸಿದೆ. 1999 ರ ಹೊತ್ತಿಗೆ, ಅವರು ರಿಕಾಂಬಿನೆಂಟ್ ಡಾಕ್ಸ್ ಎ, ಸೈಟೋಕ್ರೋಮ್ ಪಿ 450 ಆಕ್ಸಿಡೇಸ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಿದರು ಮತ್ತು ಇದು ಡೌನೊರುಬಿಸಿನ್ಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಹಂತಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಂತೆ ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಜೈವಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಅನೇಕ ಹಂತಗಳನ್ನು ವೇಗವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಕಂಡುಕೊಂಡರು. ಇದು ಮಹತ್ವದ್ದಾಗಿತ್ತು ಏಕೆಂದರೆ ಎಲ್ಲಾ ಡೌನೊರುಬಿಸಿನ್ ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ತಳಿಗಳು ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಅಗತ್ಯವಾದ ವಂಶವಾಹಿಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ ಎಂಬುದು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಯಿತು, ಇವೆರಡರಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚು ಚಿಕಿತ್ಸಕವಾಗಿ ಮುಖ್ಯವಾಗಿದೆ. ಹಚಿನ್ಸನ್ ಅವರ ಗುಂಪು ಡಾಕ್ಸ್ ಎ ಎನ್ಕೋಡಿಂಗ್ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ಗಳನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸುವ ಮೂಲಕ ಮಾತ್ರವಲ್ಲದೆ, ಕಡಿಮೆ ಉಪಯುಕ್ತ ಉತ್ಪನ್ನಗಳಿಗೆ ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಪೂರ್ವಗಾಮಿಗಳನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಕಿಣ್ವಗಳನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲು ರೂಪಾಂತರಗಳನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸುವ ಮೂಲಕ, ಅದರ ವಾಣಿಜ್ಯ ಉತ್ಪಾದನೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸುವ ಹುದುಗುವಿಕೆಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಿಂದ ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ನ ಇಳುವರಿಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸುವ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿತು, ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಬೌಮೈಸಿನ್ ತರಹದ ಗ್ಲೈಕೋಸೈಡ್ಗಳು. ಕೆಲವು ತ್ರಿವಳಿ ರೂಪಾಂತರಗಳು, ಡಾಕ್ಸ್ ಎ ಅನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಿದವು, ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ನ ಇಳುವರಿಯನ್ನು ದ್ವಿಗುಣಗೊಳಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಯಿತು. ಇದು ಶೈಕ್ಷಣಿಕ ಆಸಕ್ತಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಆ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಡಿ. ಎಕ್ಸ್. ಆರ್. ಗೆ ಪ್ರತಿ ಕೆಜಿಗೆ ಸುಮಾರು 13.7 ಲಕ್ಷ ಡಾಲರ್ ವೆಚ್ಚವಾಗುತ್ತಿತ್ತು ಮತ್ತು 1999ರಲ್ಲಿ ಪ್ರಸ್ತುತ ಉತ್ಪಾದನೆಯು ವರ್ಷಕ್ಕೆ 225 ಕೆಜಿ ಆಗಿತ್ತು. ಹೆಚ್ಚು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಉತ್ಪಾದನಾ ತಂತ್ರಗಳು ಲಿಪೊಸೋಮಲ್ ಅಲ್ಲದ ಸೂತ್ರೀಕರಣದ ಬೆಲೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿ ಕೆಜಿಗೆ $11 ಲಕ್ಷಕ್ಕೆ ಇಳಿಸಿವೆ. ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಅನ್ನು ಡೌನೊರುಬಿಸಿನ್ನಿಂದ ಅರೆ-ಸಂಶ್ಲೇಷಿತವಾಗಿ ಉತ್ಪಾದಿಸಬಹುದಾದರೂ, ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫಿಲಿಕ್ ಬ್ರೋಮಿನೇಷನ್ ಮತ್ತು ಅನೇಕ ಹಂತಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇಳುವರಿ ಕಳಪೆಯಾಗಿದೆ. ಡೌನೊರುಬಿಸಿನ್ ಅನ್ನು ಹುದುಗುವಿಕೆಯಿಂದ ಉತ್ಪಾದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆಯಾದ್ದರಿಂದ, ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳು ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಿದರೆ ಅದು ಸೂಕ್ತವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಅವಲೋಕನ ಡಾಕ್ಸೊರುಬಿಸಿನ್ನ ಆಂಥ್ರಾಸೈಕ್ಲಿನ್ ಅಸ್ಥಿಪಂಜರವು (ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್) ಸ್ಟ್ರೆಪ್ಟೊಮೈಸಿಸ್ ಪ್ಯೂಸೆಟಿಯಸ್ನಲ್ಲಿ ಟೈಪ್ II ಪಾಲಿಕೇಟೈಡ್ ಸಿಂಥೇಸ್ನಿಂದ (ಪಿಕೆಎಸ್) ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುತ್ತದೆ. ಮೊದಲನೆಯದಾಗಿ, 21-ಕಾರ್ಬನ್ ಡೆಕಕೆಟೈಡ್ ಸರಪಳಿ (ಚಿತ್ರ 1). (1)) ಅನ್ನು ಪ್ರೊಪಿಯೊನಿಲ್-ಕೋಎಯಿಂದ ಒಂದೇ 3-ಕಾರ್ಬನ್ ಪ್ರೊಪಿಯೊನಿಲ್ ಗುಂಪಿನಿಂದ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮಾಲೊನಿಲ್-ಕೋಎಯ 9 ಅನುಕ್ರಮ (ಪುನರಾವರ್ತಿತ) ಡಿಕಾರ್ಬೊಕ್ಸಿಲೇಟಿವ್ ಘನೀಕರಣಗಳಿಂದ ಪಡೆದ 9 2-ಕಾರ್ಬನ್ ಘಟಕಗಳಿಂದ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿ ಮಾಲೋನಿಲ್-ಸಿಒಎ ಘಟಕವು ಬೆಳೆಯುತ್ತಿರುವ ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ ಸರಪಳಿಗೆ 2-ಕಾರ್ಬನ್ ಕೆಟೈಡ್ ಘಟಕವನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿ ಸೇರ್ಪಡೆಯು ಅಸೈಲ್ ಕ್ಯಾರಿಯರ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ (ಎಸಿಪಿ), ಕೆಟೋಸಿಂಥೇಸ್ (ಕೆಎಸ್)/ಚೈನ್ ಲೆಂಗ್ತ್ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ (ಸಿಎಲ್ಎಫ್) ಹೆಟೆರೊಡೈಮರ್ ಮತ್ತು ಮಾಲೋನಿಲ್-ಕೋವಾಃ ಎಸಿಪಿ ಅಸೈಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರೇಸ್ (ಎಂಎಟಿ) ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ "ಕನಿಷ್ಠ ಪಿಕೆಎಸ್" ನಿಂದ ವೇಗವರ್ಧಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ. (ಚಿತ್ರ 10ರ ಮೇಲ್ಭಾಗವನ್ನು ನೋಡಿ. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಕೊಬ್ಬಿನಾಮ್ಲ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆ, ಕೊಬ್ಬಿನಾಮ್ಲ ಸಿಂಥೇಸ್ಗಳು ಮತ್ತು ಟೈಪ್ I ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಹೋಲುತ್ತದೆ. ಆದರೆ, ಕೊಬ್ಬಿನಾಮ್ಲ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, ಬೆಳೆಯುತ್ತಿರುವ ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ ಸರಪಳಿಯ ಕೀಟೋ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಸರಪಳಿಯ ಉದ್ದದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮಾರ್ಪಡಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಅವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಕಡಿಮೆಯಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಟೈಪ್ I ಪಿಕೆಎಸ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳಿಗೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಕಿಣ್ವಗಳು (ಕೆಎಸ್, ಸಿಎಲ್ಎಫ್, ಎಸಿಪಿ ಮತ್ತು ಎಟಿ) ಪರಸ್ಪರ ಕೋವೆಲೆಂಟ್ ಆಗಿ ಜೋಡಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿಲ್ಲ, ಮತ್ತು ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ ಸರಪಳಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಪ್ರತಿ ಹಂತದಲ್ಲೂ ಸಹ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ. ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ನ 21-ಕಾರ್ಬನ್ ಡೆಕಕೆಟೈಡ್ ಸರಪಳಿಯು ಪೂರ್ಣಗೊಂಡ ನಂತರ, ಅಂತಿಮವಾಗಿ ಟೆಟ್ರಾಸೈಕ್ಲಿಕ್ ಆಂಥ್ರಾಸೈಕ್ಲಿನ್ ಅಗ್ಲೈಕೋನ್ ಅನ್ನು (ಗ್ಲೈಕೋಸೈಡ್ ಲಗತ್ತಿಸದೆ) ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಸತತ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳನ್ನು ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಥಿಯಾಮಿನ್ ಡೈಫಾಸ್ಫೇಟ್ (ಟಿ. ಡಿ. ಪಿ.) ಅನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳ್ಳುವ ಡೌನೊಸಮೈನ್ ಅಮೈನೋ ಸಕ್ಕರೆಯನ್ನು ಮತ್ತೊಂದು ಸರಣಿಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ ರಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದನ್ನು ಆಂಥ್ರಾಸೈಕ್ಲಿನ್ ಅಗ್ಲೈಕೋನ್ಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮೊದಲು ಡೌನೊರುಬಿಸಿನ್ ಮತ್ತು ನಂತರ ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳನ್ನು ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಜೈವಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಕನಿಷ್ಠ 3 ಜೀನ್ ಸಮೂಹಗಳು ಮುಖ್ಯವಾಗಿವೆಃ ರೇಖೀಯ ಪಾಲಿಕೇಟೈಡ್ ಸರಪಳಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆ ಮತ್ತು ಅದರ ಮೊದಲ ಸೈಕ್ಲೈಸೇಶನ್ಗಳಿಗೆ ಅಗತ್ಯವಾದ ಕಿಣ್ವಗಳನ್ನು ನಿರ್ದಿಷ್ಟಪಡಿಸುವ ಡಿಪಿಎಸ್ ವಂಶವಾಹಿಗಳು, ಡಿಎನ್ಆರ್ ಸಮೂಹವು ಆಂಥ್ರಾಸೈಕ್ಲಿನ್ ರಚನೆಯ ಉಳಿದ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳಿಗೆ ಮತ್ತು ಅಮೈನೋ ಸಕ್ಕರೆ, ಡೌನೊಸಾಮೈನ್, ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಡಿಎನ್ಎಂ ವಂಶವಾಹಿಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಿದೆ. ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಜೀವಿಗಳ ಮೇಲೆ ಆಂಥ್ರಾಸೈಕ್ಲಿನ್ನ ವಿಷಕಾರಿ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು "ಸ್ವಯಂ ನಿರೋಧಕ" ವಂಶವಾಹಿಗಳ ಒಂದು ಗುಂಪಿದೆ. ಜೀವಕೋಶದಿಂದ (ಡಿ. ಆರ್. ಆರ್. ಲೋಕೈ) ಡಿ. ಎಕ್ಸ್. ಆರ್. ನ ಹೊರಹರಿವನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುವ ಮೆಂಬರೇನ್ ಪಂಪ್ ಒಂದು ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವಾಗಿದೆ. ಈ ಸಂಕೀರ್ಣ ಅಣುಗಳು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಮಾತ್ರ ಪ್ರಯೋಜನಕಾರಿಯಾಗಿರುವುದರಿಂದ ಮತ್ತು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಸಾಕಷ್ಟು ಶಕ್ತಿಯ ಅಗತ್ಯವಿರುವುದರಿಂದ, ಅವುಗಳ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಬಿಗಿಯಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ ಚೈನ್ ಸಿಂಥೆಸಿಸ್ ಡಾಕ್ಸೊರುಬಿಸಿನ್ ಅನ್ನು ವಿಶೇಷ ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ ಸಿಂಥೇಸ್ನಿಂದ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಆರಂಭಿಕ ಘಟನೆಯೆಂದರೆ ಪ್ರೊಪಿಯೋನಿಲ್-ಸಿಒಎ ಸ್ಟಾರ್ಟರ್ ಘಟಕದ ಆಯ್ಕೆ ಮತ್ತು ಐದು ಕಾರ್ಬನ್ ಬಿ-ಕೆಟೋವೆಲರಿಲ್ ಎಸಿಪಿಯನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಮಾಲೋನಿಲ್-ಸಿಒಎಯಿಂದ ಪಡೆದ ಎರಡು ಕಾರ್ಬನ್ ಕೆಟೈಡ್ ಘಟಕಕ್ಕೆ ಅದರ ಡಿಕಾರ್ಬೊಕ್ಸಿಲೇಟಿವ್ ಸೇರ್ಪಡೆಯಾಗಿದೆ. ಐದು ಇಂಗಾಲದ ಡೈಕೆಟೈಡ್ ಅನ್ನು ಎ. ಸಿ. ಪಿ. ಯು ಕೆ. ಎಸ್. ಸಕ್ರಿಯ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಸಿಸ್ಟೀನ್ ಸಲ್ಫೈಡ್ರಿಲ್ ಗುಂಪಿಗೆ ಥಿಯೋಸ್ಟರ್ ವಿನಿಮಯದ ಮೂಲಕ ತಲುಪಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಎ. ಸಿ. ಪಿ. ಯನ್ನು ಸರಪಳಿಯಿಂದ ಬಿಡುಗಡೆ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಉಚಿತ ಎ. ಸಿ. ಪಿ. ಯು ಸಿ. ಓ. ಎ. ಬಿಡುಗಡೆಯೊಂದಿಗೆ ಮಾಲೋನಿಲ್-ಸಿ. ಓ. ಎ. ಯಿಂದ ಮತ್ತೊಂದು ಮಾಲೋನೇಟ್ ಗುಂಪನ್ನು ಎತ್ತಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಎ. ಸಿ. ಪಿ. ಯು ಹೊಸ ಮ್ಯಾಲೋನೇಟ್ ಅನ್ನು ಕೆ. ಎಸ್. ನ ಸಕ್ರಿಯ ಸ್ಥಳಕ್ಕೆ ತರುತ್ತದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಅದು ಡೀಕಾರ್ಬಾಕ್ಸಿಲೇಟೆಡ್ ಆಗಿದೆ, ಬಹುಶಃ ಸಿಎಲ್ಎಫ್ ಉಪಘಟಕದ ಸಹಾಯದಿಂದ, ಮತ್ತು 7 ಕಾರ್ಬನ್ ಟ್ರೈಕೆಟೈಡ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಸೇರುತ್ತದೆ, ಈಗ ಎ. ಸಿ. ಪಿ. ಗೆ ಲಂಗರು ಹಾಕಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 1 ರ ಮೇಲ್ಭಾಗವನ್ನು ನೋಡಿ). ಮತ್ತೆ ಎ. ಸಿ. ಪಿ. ಯು ಸರಪಳಿಯನ್ನು ಕೆ. ಎಸ್. ಉಪಘಟಕಕ್ಕೆ ಹಸ್ತಾಂತರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಡೆಕಕೆಟೈಡ್ ಪೂರ್ಣಗೊಳ್ಳುವವರೆಗೆ ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಟೈಪ್ II ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳಲ್ಲಿ ಆರಂಭಿಕ ಘಟನೆಯು ಅಸಿಟೈಲ್-CoA ಯಿಂದ ಪಡೆದ ಅಸಿಟೇಟ್ ಘಟಕದ ACP ಯಿಂದ KS/CLF ಹೆಟೆರೊಡೈಮರ್ನ ಕೀಟೋಸಿಂಥೇಸ್ (KS) ಉಪಘಟಕದ ಸಕ್ರಿಯ ಸ್ಥಳಕ್ಕೆ ತಲುಪಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ. ಟೈಪ್ II ಪಿಕೆಎಸ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳಿಗೆ ಪೂರ್ವನಿಯೋಜಿತ ವಿಧಾನವೆಂದರೆ ಪ್ರೈಮರ್ ಘಟಕವಾಗಿ ಅಸಿಟೇಟ್ನ ಸಂಯೋಜನೆ, ಮತ್ತು ಇದು ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ "ಕನಿಷ್ಠ ಪಿಕೆಎಸ್" ಗೆ ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ. ಬೇರೆ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಈ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಿಂದ ಕೆಎಸ್/ಸಿಎಲ್ಎಫ್/ಎಸಿಪಿ (ಡಿಪಿಎಸ್ ಎ, ಬಿ ಮತ್ತು ಜಿ) ಕ್ರಿಯೆಯು 21-ಕಾರ್ಬನ್ ಡೆಕಕೆಟೈಡ್ಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವುದಿಲ್ಲ, ಬದಲಿಗೆ 20-ಕಾರ್ಬನ್ ಡೆಕಕೆಟೈಡ್ಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಅಸಿಟೇಟ್ "ಆದ್ಯತೆಯ" ಸ್ಟಾರ್ಟರ್ ಆಗಿದೆ. ಪ್ರೊಪಿಯೊನೇಟ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ದಿಷ್ಟಪಡಿಸುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಲಾಗಿಲ್ಲ, ಆದರೆ ಇದು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಪ್ರೋಟೀನ್, ಡಿಪಿಎಸ್ ಸಿ ಅನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ ಎಂಬುದು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿದೆ, ಇದು ಪ್ರೊಪಿಯೊನೈಲ್-ಸಿಒಎಗೆ ಕೀಟೋಸಿಂಥೇಸ್ ಅಥವಾ ಅಸೈಲ್ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರೇಸ್ ಸೆಲೆಕ್ಟಿವ್ ಆಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತಿರಬಹುದು ಮತ್ತು ಬಹುಶಃ ಡಿಪಿಎಸ್ ಡಿ ಕೊಡುಗೆ ನೀಡುತ್ತದೆ. ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ ಉತ್ಪಾದನೆಗೆ ಮೀಸಲಾದ ಎಂ. ಎ. ಟಿ. ಅನ್ನು ವಿತರಿಸಬಹುದು ಎಂದು ಕಂಡುಬಂದಿದೆ. ಪಿಕೆಎಸ್ ತನ್ನದೇ ಆದ ಕೊಬ್ಬಿನಾಮ್ಲ ಸಿಂಥೇಸ್ನಿಂದ ಎಂಎಟಿಯನ್ನು "ಎರವಲು ಪಡೆಯಬಹುದು" ಮತ್ತು ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಜೈವಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಎಸಿಪಿ ತನ್ನ ಮ್ಯಾಲೋನೇಟ್ ಗುಂಪನ್ನು ಪಡೆಯುವ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಮಾರ್ಗ ಇದಾಗಿರಬಹುದು. ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, "ಸ್ವಯಂ-ಮ್ಯಾಲೊನೈಲೇಷನ್" ಎಂಬುದು ಟೈಪ್ II ಎಸಿಪಿಗಳ ಅಂತರ್ಗತ ಲಕ್ಷಣವಾಗಿದೆ ಎಂಬುದಕ್ಕೆ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಪುರಾವೆಗಳಿವೆ. ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ನೀಡಲಾದ ಟೈಪ್ II ಪಿಕೆಎಸ್ ತನ್ನದೇ ಆದ ಎಂಎಟಿ (ಗಳನ್ನು) ಒದಗಿಸಬಹುದು, ಅದು ಎಫ್ಎಎಸ್ನಿಂದ ಒಂದನ್ನು ಎರವಲು ಪಡೆಯಬಹುದು, ಅಥವಾ ಅದರ ಎಸಿಪಿ "ಸ್ವಯಂ-ಮ್ಯಾಲೊನೈಲೇಟ್" ಆಗಿರಬಹುದು. ಅದೇ ಕೆ. ಎಸ್./ಸಿ. ಎಲ್. ಎಫ್./ಎ. ಸಿ. ಪಿ. ತ್ರಿಕೋನ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಇಡೀ ವೇಗವರ್ಧಕ ಚಕ್ರದ ಮೂಲಕ ಪೂರ್ಣ-ಉದ್ದದ ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ ಸರಪಳಿಯ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆಯೇ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿ ಘನೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ನಂತರ ಎ. ಸಿ. ಪಿ. ಪ್ರತ್ಯೇಕಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆಯೇ ಎಂಬುದು ತಿಳಿದಿಲ್ಲ. ಡಿಪಿಎಸ್ ಕೆಎಸ್/ಸಿಎಲ್ಎಫ್ನಂತೆಯೇ ಇರುವ ಆಕ್ಟಿನೋರೋಡಿನ್ ಕೆಎಸ್/ಸಿಎಲ್ಎಫ್ನ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ರಚನೆಯು, ಕೆಎಸ್ ಮತ್ತು ಸಿಎಲ್ಎಫ್ ಉಪಘಟಕಗಳ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ನಲ್ಲಿ ರೂಪುಗೊಂಡ ಆಂಫಿಪ್ಯಾಥಿಕ್ ಸುರಂಗದೊಳಗೆ ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ಗಳು ಉದ್ದವಾಗಿರುವುದನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಸುರಂಗವು ಸುಮಾರು 17-Å ಉದ್ದವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಒಂದು ಬದಿಯಲ್ಲಿ ಅನೇಕ ಚಾರ್ಜ್ ಮಾಡಲಾದ ಅಮೈನೋ ಆಮ್ಲದ ಅವಶೇಷಗಳಿವೆ, ಇದು ಸರಪಳಿಯ ಕಾರ್ಬೊನಿಲ್ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಸ್ಥಿರಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಇನ್ನೊಂದು ಬದಿಯು ಹೈಡ್ರೋಫೋಬಿಕ್ ಆಗಿದೆ. ಈ ರಚನೆಯು ಸರಪಳಿಯ ಉದ್ದಕ್ಕೆ ಎರಡೂ ಉಪಘಟಕಗಳು ಏಕೆ ಅಗತ್ಯವಾಗಿವೆ ಮತ್ತು ಕ್ರಮಬದ್ಧವಾದ ಆವರ್ತನೆಗಾಗಿ ಸರಿಯಾಗಿ ಇರಿಸುವವರೆಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಬೆಳೆಯುವ ಸರಪಳಿಯನ್ನು ಯಾದೃಚ್ಛಿಕ ಸ್ವಾಭಾವಿಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಂದ ಹೇಗೆ ರಕ್ಷಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ರಚನೆಯು ಸರಪಳಿಯ ಉದ್ದದ ನಿಯಂತ್ರಣಕ್ಕೆ ಒಂದು ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಸಹ ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಅಮೈನೋ ಆಮ್ಲದ ಅಡ್ಡ ಗುಂಪುಗಳು ಸುರಂಗದೊಳಗೆ ವಿಸ್ತರಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು "ದ್ವಾರಗಳಾಗಿ" ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತವೆ. ಒಂದೆರಡು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಬೃಹತ್ ಅವಶೇಷಗಳು ಸರಪಳಿಯಿಂದ ಅಗಮ್ಯವಾಗಬಹುದು, ಇದು ಮುಕ್ತಾಯಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ರಚನೆಯ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಸುರಂಗ ಅವಶೇಷಗಳಿಗೆ ಮಾಡಿದ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳು ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನದ ಸರಪಳಿಯ ಉದ್ದವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಯಿತು. ಅಂತಿಮ ಘನೀಕರಣವು ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ ಸರಪಳಿಯನ್ನು "ಬಕಲ್" ಮಾಡಲು ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಸಿ-12 ಮೀಥಿಲೀನ್ ಕಾರ್ಬನಿಯನ್ನಿಂದ ಇಂಟ್ರಾಮಾಲಿಕ್ಯುಲರ್ ದಾಳಿಯನ್ನು ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಕಿಣ್ವ ವೇಗವರ್ಧಕ ಪ್ರೋಟಾನ್ ತೆಗೆಯುವಿಕೆಯಿಂದ ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಿ-7 ಕಾರ್ಬೊನಿಲ್ನಲ್ಲಿ ಸುರಂಗದಲ್ಲಿ ಸ್ಥಾಯೀವಿದ್ಯುತ್ತಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳಿಂದ ಸ್ಥಿರಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ 1 ರಲ್ಲಿ 3 ಅನ್ನು ನೋಡಿ). ಈ ಸುರಂಗದ ನೆರವಿನ ಇಂಟ್ರಾಮಾಲಿಕ್ಯುಲರ್ ಆಲ್ಡೋಲ್ ಘನೀಕರಣವು ಸರಪಳಿಯು ಇನ್ನೂ ಸುರಂಗದಲ್ಲಿರುವಾಗ ಮೊದಲ ಸೈಕ್ಲೈಸೇಶನ್ ಅನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ಅದೇ ರೀತಿಯ ಸಿ-7/ಸಿ-12 ದಾಳಿಯು ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ನ ಜೈವಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಇದೇ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. 21-ಇಂಗಾಲದ ಡೆಕಕೆಟೈಡ್ ಅನ್ನು 12-ಡಿಯೋಕ್ಸಿಯಾಲ್ಕಲೋನಿಕ್ ಆಮ್ಲವಾಗಿ (5) ಪರಿವರ್ತಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು 3 ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಜೈವಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಮೊದಲ ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾದ ಮಧ್ಯಂತರವಾಗಿದೆ. ಈ ಹಂತಗಳನ್ನು ಡಿಪಿಎಸ್ ಜೀನ್ ಕ್ಲಸ್ಟರ್ನಲ್ಲಿನ ಅಂತಿಮ 3 ಕಿಣ್ವಗಳಿಂದ ವೇಗವರ್ಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ ಸಿಂಥೇಸ್ನ ಭಾಗವೆಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಡೆಕಕೆಟೈಡ್ ಇನ್ನೂ ಕೆಎಸ್/ಸಿಎಲ್ಎಫ್ ಹೆಟೆರೊಡೈಮರ್ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದ್ದರೂ, 9-ಕಾರ್ಬೊನಿಲ್ ಗುಂಪನ್ನು ಡಿಪಿಎಸ್ ಇ, 9-ಕೆಟೊರೆಡಕ್ಟೇಸ್ನಿಂದ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ಎನ್ಎಡಿಪಿಹೆಚ್ ಅನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವ ಏಜೆಂಟ್/ಹೈಡ್ರೈಡ್ ದಾನಿಯಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಡಿಪಿಎಸ್ ಎಫ್, "1 ನೇ ರಿಂಗ್ ಸೈಕ್ಲೇಸ್"/ಅರೋಮಾಟೇಸ್, ಬಹಳ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಇದು ಸಿ-7/ಸಿ-12 ಸೈಕ್ಲೇಸ್ಗಳ ಕುಟುಂಬದಲ್ಲಿದೆ, ಇದಕ್ಕೆ ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಸಿ-9 ಕೀಟೋ-ಕಡಿತದ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ ಸರಪಳಿಯು ಇನ್ನೂ ಭಾಗಶಃ ಕೆಎಸ್/ಸಿಎಲ್ಎಫ್ ಸುರಂಗದಲ್ಲಿದ್ದಾಗ ಈ ಎರಡು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು ಸಂಭವಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ಭಾವಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಅಂತಿಮವಾಗಿ ಅದರ ಕೋವೆಲೆಂಟ್ ಲಿಂಕ್ನಿಂದ ಕೆಎಸ್ ಅಥವಾ ಎಸಿಪಿಗೆ ಸರಪಳಿಯನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬುದು ತಿಳಿದಿಲ್ಲ. ರೂಪಾಂತರಗಳು ಅಥವಾ ಜೀನ್ ಅಳಿಸುವಿಕೆಯಿಂದ ಡಿಪಿಎಸ್ ಎಫ್ ಸೈಕ್ಲೇಸ್ ಅನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಿದರೆ, ಸರಪಳಿಯು ಯಾದೃಚ್ಛಿಕ ಶೈಲಿಯಲ್ಲಿ ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತವಾಗಿ ಸೈಕ್ಲೈಸ್ ಆಗುತ್ತದೆ. ಹೀಗಾಗಿ, ಡಿಪಿಎಸ್ ಎಫ್ ಅನ್ನು "ಚಾಪೆರೋನ್" ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಅಥವಾ ಯಾದೃಚ್ಛಿಕವಲ್ಲದ ಸೈಕ್ಲೈಸೇಶನ್ ಅನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಪಾಲಿಕೆಟೈಡ್ ಅನ್ನು ಮಡಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಇದು ಶಕ್ತಿಯುತವಾಗಿ ಅನುಕೂಲಕರವಾದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ನಂತರದ ನಿರ್ಜಲೀಕರಣ ಮತ್ತು ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಸುಗಂಧಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಮುಂದೆ, ಡಿಪಿಎಸ್ ವೈ ಮುಂದಿನ ಎರಡು ಇಂಗಾಲ-ಇಂಗಾಲದ ಬಂಧಗಳ ರಚನೆಯನ್ನು ಕ್ರಮಬದ್ಧವಾಗಿ ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ನಿರ್ಜಲೀಕರಣವನ್ನು ವೇಗವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಒಂದು ಉಂಗುರದ ಸುಗಂಧಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ (5). ε-ರೋಡೋಮೈಸಿನೋನ್ಗೆ ಪರಿವರ್ತನೆ ಮುಂದಿನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು ಡಿ. ಎನ್. ಆರ್ ಜೀನ್ ಕ್ಲಸ್ಟರ್ನಿಂದ ಹುಟ್ಟುವ ಕಿಣ್ವಗಳಿಂದ ವೇಗವರ್ಧಿಸಲ್ಪಡುತ್ತವೆ. ಡಿಎನ್ಆರ್ ಜಿ, ಒಂದು ಸಿ-12 ಆಕ್ಸಿಜನೇಸ್ (ಸಂಖ್ಯೆಗಾಗಿ (5 ನೋಡಿ)) ಆಣ್ವಿಕ ಆಮ್ಲಜನಕವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಕೀಟೋ ಗುಂಪನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸುತ್ತದೆ. ಇದು ಕ್ವಿನೋನ್-ರೂಪಿಸುವ ಮೊನೊಆಕ್ಸಿಜನೇಸ್ ಎಂದೂ ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ "ಆಂಥ್ರೋನ್ ಪ್ರಕಾರದ ಆಕ್ಸಿಜನೇಸ್" ಆಗಿದೆ, ಇವುಗಳಲ್ಲಿ ಅನೇಕವು ಹಲವಾರು ರೀತಿಯ ಆರೊಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಪಾಲಿಕೇಟೈಡ್ ಪ್ರತಿಜೀವಕಗಳ ಜೈವಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ 'ಟೈಲರಿಂಗ್ ಕಿಣ್ವಗಳು' ಆಗಿವೆ. ಅವುಗಳಿಗೆ ಯಾವುದೇ ಸಹಘಟಕಗಳಿಲ್ಲಃ ಯಾವುದೇ ಫ್ಲೇವಿನ್ಗಳು, ಲೋಹಗಳು ಅಥವಾ ಶಕ್ತಿಯ ಮೂಲಗಳಿಲ್ಲ. ಅವುಗಳ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಲಾಗಿಲ್ಲ ಆದರೆ "ಪ್ರೋಟೀನ್ ರಾಡಿಕಲ್" ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರಬಹುದು. ಕ್ವಿನೋನ್ ಆಗಿರುವ ಆಲ್ಕಲೋನಿಕ್ ಆಮ್ಲವು (6) ಉತ್ಪನ್ನವಾಗಿದೆ. ಡಿಎನ್ಆರ್ ಸಿ, ಆಲ್ಕಲೋನಿಕ್ ಆಮ್ಲ-ಒ-ಮೀಥೈಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರೇಸ್, ಎಸ್-ಅಡೆನೊಸಿಲ್ ಮೆಥಿಯೋನಿನ್ (ಎಸ್ಎಎಂ) ಅನ್ನು ಕೋಫ್ಯಾಕ್ಟರ್/ಮೀಥೈಲ್ ಗುಂಪಿನ ದಾನಿಯಾಗಿ ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಎಸ್ಟರ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುವ ಅಣುವಿನ ಕಾರ್ಬಾಕ್ಸಿಲಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ತುದಿಯನ್ನು ಮೀಥೈಲೇಟ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಉತ್ಪನ್ನವು ಆಲ್ಕಲೋನಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ (7) ಆಗಿದೆ. ಮೀಥೈಲ್ ಗುಂಪನ್ನು ನಂತರ ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಇದು ಪಕ್ಕದ ಮೀಥೈಲಿನ್ ಸೇತುವೆಯನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಇದು ಟರ್ಮಿನಲ್ ಕಾರ್ಬೊನಿಲ್ ಗುಂಪಿನ ಮೇಲೆ ಅದರ ದಾಳಿಯನ್ನು ಸುಗಮಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಡಿಎನ್ಆರ್ಡಿ ಯಿಂದ ವೇಗವರ್ಧಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಆರ್ ಡಿ, ನಾಲ್ಕನೇ ರಿಂಗ್ ಸೈಕ್ಲೇಸ್ (ಎಎಎಂಇ ಸೈಕ್ಲೇಸ್), ಇಂಟ್ರಾಮಾಲಿಕ್ಯುಲರ್ ಆಲ್ಡೋಲ್ ಅಡಿಷನ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ವೇಗವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ. ಯಾವುದೇ ಕೋಫಾಕ್ಟರ್ಗಳ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಆರೊಮ್ಯಾಟೈಸೇಶನ್ ಅಥವಾ ನಿರ್ಜಲೀಕರಣವು ಸಂಭವಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಸರಳವಾದ ಮೂಲ ವೇಗವರ್ಧಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಪ್ರಸ್ತಾಪಿಸಲಾಗಿದೆ. ಉತ್ಪನ್ನವು ಅಕ್ಲಾವಿಕೆಟೋನ್ (8) ಆಗಿದೆ. ಡಿಎನ್ಆರ್ ಎಚ್, ಅಕ್ಲಾವಿಕೆಟೋನ್ ರಿಡಕ್ಟೇಸ್, ಅಕ್ಲಾವಿನೋನ್ (9) ಅನ್ನು ನೀಡಲು ಹೊಸ ನಾಲ್ಕನೇ ಉಂಗುರದ 17-ಕೀಟೋ ಗುಂಪನ್ನು 17-ಒಹೆಚ್ ಗುಂಪಿಗೆ ಸ್ಟೀರಿಯೋಸ್ಪೆಸಿಫಿಕ್ ಆಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಇದು ಹೊಸ ಕೈರಲ್ ಕೇಂದ್ರವನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಎನ್. ಎ. ಡಿ. ಪಿ. ಎಚ್ ಒಂದು ಕೋಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಆಗಿದೆ. ಡಿಎನ್ಆರ್ ಎಫ್, ಅಕ್ಲಾವಿನೋನ್-11-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಲೇಸ್, ಎಫ್ಎಡಿ ಮೊನೊಆಕ್ಸಿಜನೇಸ್ ಆಗಿದ್ದು, ಇದು ನಂತರದ ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಲೇಷನ್ಗಾಗಿ ಆಣ್ವಿಕ ಆಮ್ಲಜನಕವನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲು ಎನ್ಎಡಿಪಿಹೆಚ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ε-ರೋಡೋಮೈಸಿನೋನ್ (10) ಉತ್ಪನ್ನವಾಗಿದೆ. ಡಾಕ್ಸೊರುಬಿಸಿನ್ ಡಿಎನ್ಆರ್ ಎಸ್, ಡೌನೊಸಮೈನ್ ಗ್ಲೈಕೋಸಿಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರೇಸ್ಗೆ ಪರಿವರ್ತಿಸುವುದರಿಂದ ಟಿ. ಡಿ. ಪಿ. ಸಕ್ರಿಯ ಗ್ಲೈಕೋಸೈಡ್, ಎಲ್-ಡೌನೊಸಮೈನ್-ಟಿಡಿಪಿಯನ್ನು ε-ರೋಡೋಮೈಸಿನೋನ್ಗೆ ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ರೋಡೋಮೈಸಿನ್ ಡಿ ಅನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ 2). ಟಿಡಿಪಿಯ ಬಿಡುಗಡೆಯು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಮುಂದಕ್ಕೆ ಕೊಂಡೊಯ್ಯುತ್ತದೆ. ಕಿಣ್ವವು ಟೈಪ್ II ಪಿಕೆಎಸ್ ಆರೊಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಉತ್ಪನ್ನಗಳಿಗೆ ಸೇರಿಸಲಾದ ಇತರ "ಅಸಾಮಾನ್ಯ ಸಕ್ಕರೆಗಳ" ಗ್ಲೈಕೋಸೈಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರೇಸ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಅನುಕ್ರಮ ಹೋಲಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಡಿಎನ್ಆರ್ ಪಿ, ರೋಡೋಮೈಸಿನ್ ಡಿ ಮೆಥೈಲೆಸ್ಟರೇಸ್, ಡಿಎನ್ಆರ್ಸಿಯಿಂದ ಈ ಹಿಂದೆ ಸೇರಿಸಲಾದ ಮೀಥೈಲ್ ಗುಂಪನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುತ್ತದೆ. ಇದು ಆರಂಭದಲ್ಲಿ ಪಕ್ಕದ ಮೀಥಿಲೀನ್ ಸೇತುವೆಯನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲು ನೆರವಾಯಿತು, ಮತ್ತು ಅದರ ನಂತರ ಅದರ ಕಾರ್ಬಾಕ್ಸಿಲ್ ಗುಂಪು ಸಿ-10 ಇಂಗಾಲವನ್ನು ಬಿಡುವುದನ್ನು ತಡೆಯಿತು (ಚಿತ್ರ 2 ನೋಡಿ). ಕಾರ್ಬಾಕ್ಸಿಲ್ ಗುಂಪನ್ನು ನಾಲ್ಕನೇ ರಿಂಗ್ ಸೈಕ್ಲೈಸೇಶನ್ಗೆ ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಎಸ್ಟೆರಿಫೈ ಮಾಡಿರದಿದ್ದರೆ, ಅದರ ನಿರ್ಗಮನವು ಬೈಸೈಕ್ಲಿಕ್ ಆರೊಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ನ ರಚನೆಯಿಂದ ಒಲವು ಹೊಂದುತ್ತಿತ್ತು. ಸಿ-7 ಕಡಿತ ಮತ್ತು ಗ್ಲೈಕೋಸೈಲೇಷನ್ ನಂತರ, ಸಿ-8 ಮೀಥಿಲೀನ್ ಸೇತುವೆಯನ್ನು ಡಿಪ್ರೋಟೋನೇಶನ್ಗಾಗಿ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಆರೊಮ್ಯಾಟೈಸೇಶನ್ ಸಾಧ್ಯತೆ ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ. ಸಂಖ್ಯೆಯೊಂದಿಗೆ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾಗದ ಮಧ್ಯಂತರವು ಚಿತ್ರ 2ರಲ್ಲಿರುವ 3ನೇ ಅಣುವಾಗಿದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಗಮನಿಸಿ. ಸಂಖ್ಯಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಬಹಳ ವಿಚಿತ್ರವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಆರಂಭಿಕ ನಾಮಕರಣದ ಕುರುಹಾಗಿದೆ. ಮಧ್ಯಂತರದ ಡಿಕಾರ್ಬೊಕ್ಸಿಲೇಷನ್ ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತವಾಗಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ, ಅಥವಾ ಡಿಎನ್ಆರ್ ಪಿ ಪ್ರಭಾವದಿಂದ, 13-ಡಿಯೋಕ್ಸಿಕಾರ್ಮಿನೋಮೈಸಿನ್ ಅನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. ಸ್ಟ್ರೆಪ್ಟೊಮೈಸಿಸ್ ಪರ್ಪುರಾಸೆನ್ಸ್ನಿಂದ ಡಿ. ಎನ್. ಆರ್. ಪಿ. ಗೆ 53 ಪ್ರತಿಶತ ಅನುಕ್ರಮ ಹೋಮೋಲಜಿ ಹೊಂದಿರುವ [ಕಿಣ್ವ] ಅಕ್ಲಾಸಿನೋಮೈಸಿನ್ ಮೆಥೈಲೆಸ್ಟರೇಸ್ನ ಬಂಧಿಸಲಾದ ಉತ್ಪನ್ನಗಳೊಂದಿಗೆ ಸ್ಫಟಿಕ ರಚನೆಯನ್ನು ಪರಿಹರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಇದು ಅದೇ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ವೇಗವರ್ಧಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಫೈಲ್ ಮತ್ತು ಗ್ಲೈ-ಮೆಟ್ನಂತೆ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುವ ಸೆರಿನ್ನೊಂದಿಗೆ ಕ್ಲಾಸಿಕ್ ಸೆರ್-ಹಿಸ್-ಆಸ್ಪ್ ವೇಗವರ್ಧಕ ತ್ರಿಕೋನವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ, ಇದು "ಆಕ್ಸಿಯಾನಿಯನ್ ಹೋಲ್" ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುವ ಮೂಲಕ ಪರಿವರ್ತನೆಯ ಸ್ಥಿತಿಯ ಸ್ಥಿರೀಕರಣವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ಸಕ್ರಿಯ ಸೈಟ್ ಅಮೈನೋ ಆಮ್ಲಗಳು ಬಹುತೇಕ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಡಿಎನ್ಆರ್ ಪಿ ಯಂತೆಯೇ ಇರುತ್ತವೆ, ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವು ಬಹುತೇಕವಾಗಿ ಒಂದೇ ಆಗಿರುತ್ತದೆ. ಬಯೋಸಿಂಥೆಟಿಕ್ ಯೋಜನೆಯಲ್ಲಿ (ಚಿತ್ರ 2) ಡಾಕ್ಸ್ ಎ ಅನ್ನು ಮುಂದಿನದಾಗಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದ್ದರೂ, ಡಿಎನ್ಆರ್ ಕೆ, ಕಾರ್ಮಿನೋಮೈಸಿನ್ 4-ಒ-ಮೀಥೈಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರೇಸ್ ಚಿತ್ರ 2 ರಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಗ್ಲೈಕೋಸೈಡ್ಗಳ 4-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಲ್ ಗುಂಪನ್ನು ಒ-ಮೀಥೈಲೇಟ್ ಮಾಡಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಬಂಧಿಸಲಾದ ಉತ್ಪನ್ನಗಳೊಂದಿಗೆ ಕಿಣ್ವದ 2.35 Å ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಸ್ಫಟಿಕ ರಚನೆಯನ್ನು ಇತ್ತೀಚೆಗೆ ಪರಿಹರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ದೃಷ್ಟಿಕೋನವು ಮೀಥೈಲ್ ವರ್ಗಾವಣೆಯ ಎಸ್. ಎನ್. 2 ಕಾರ್ಯವಿಧಾನದೊಂದಿಗೆ ಸ್ಥಿರವಾಗಿದೆ. ಸಕ್ರಿಯ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿನ ಸಂಭಾವ್ಯ ಆಮ್ಲ/ಕ್ಷಾರ ಅವಶೇಷಗಳ ಸೈಟ್-ನಿರ್ದೇಶಿತ ಮ್ಯುಟಜೆನೆಸಿಸ್ ವೇಗವರ್ಧನೆಯ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರಲಿಲ್ಲ, ಇದು ಡಿಎನ್ಆರ್ ಕೆ ಆ ದರ ವರ್ಧನೆಯಲ್ಲಿ ಎಂಟ್ರೋಪಿಕ್ ಕಿಣ್ವವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬ ತೀರ್ಮಾನಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಓರಿಯೆಂಟೇಷನಲ್ ಮತ್ತು ಸಾಮೀಪ್ಯದ ಪರಿಣಾಮಗಳಿಂದಾಗಿದೆ. ಇದು ಇತರ ಓ-ಮೀಥೈಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರೇಸ್ಗಳಿಗೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಆಮ್ಲ/ಬೇಸ್ ವೇಗವರ್ಧನೆಯು ದರ ವರ್ಧನೆಗೆ ಅತ್ಯಗತ್ಯ ಕೊಡುಗೆಯಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಡಾಕ್ಸ್ ಎ ಸ್ಟ್ರೆಪ್ಟೊಮೈಸಿಸ್ ಪ್ಯೂಸೆಟಿಯಸ್ನಲ್ಲಿ ಮೂರು ಅನುಕ್ರಮ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣಗಳನ್ನು ವೇಗವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ. ಕೊರತೆಯ ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಉತ್ಪಾದನೆಯು ಪ್ರಾಥಮಿಕವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಟ್ಟದ ಡಾಕ್ಸ್ ಎ ಅಥವಾ ಅಸಮರ್ಪಕ ಕಾರ್ಯದಿಂದಾಗಿ ಅಲ್ಲ, ಆದರೆ ಚಿತ್ರ 2ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವ ಮಾರ್ಗದಿಂದ ಅನೇಕ ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು ಬೇರೆಡೆಗೆ ತಿರುಗಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಗ್ಲೈಕೋಸೈಡ್ಗಳು ಷಂಟ್ ಕಿಣ್ವಗಳ ಸಂಭಾವ್ಯ ಗುರಿಯಾಗಿದ್ದು, ತೋರಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ, ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಕೆಲವು ಡಿಎನ್ಆರ್ ಜೀನ್ ಕ್ಲಸ್ಟರ್ನ ಉತ್ಪನ್ನಗಳಾಗಿವೆ. ಈ ಕಿಣ್ವಗಳ ರೂಪಾಂತರಗಳು ಡಿಎಕ್ಸ್ಆರ್ ಉತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತವೆ. ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, ಸಿ-13 ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣಕ್ಕೆ (ಕೆಲವು ತಲಾಧಾರಗಳಿಗೆ 22,000/ಎಂ ವರೆಗೆ) ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಸಿ-14 ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣಕ್ಕೆ (130/ಎಂ) ಡಾಕ್ಸ್ ಎ ಬಹಳ ಕಡಿಮೆ ಕೆಕ್ಯಾಟ್/ಕೆಎಂ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಡಾಕ್ಸ್ ಎ ಅನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲು ಜೆನೆಟಿಕ್ ಕುಶಲತೆಯು ಇಳುವರಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿದೆ, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಷಂಟ್ ಕಿಣ್ವಗಳ ಜೀನ್ಗಳನ್ನು ಏಕಕಾಲದಲ್ಲಿ ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಿದರೆ. ಡಾಕ್ಸ್ ಎ ಎಂಬುದು ಸೈಟೋಕ್ರೋಮ್ ಪಿ-450 ಮೊನೊಆಕ್ಸಿಜನೇಸ್ ಆಗಿದ್ದು, ಇದು ವಿಶಾಲವಾದ ತಲಾಧಾರದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದು, ಸಿ-13 ಮತ್ತು ಸಿ-14ರಲ್ಲಿ ಆಂಥ್ರಾಸೈಕ್ಲಿನ್ ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ವೇಗವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ 2). ಕಿಣ್ವವು ಆಣ್ವಿಕ ಆಮ್ಲಜನಕ ಮತ್ತು ಎನ್. ಎ. ಡಿ. ಪಿ. ಎಚ್. ನ ಸಂಪೂರ್ಣ ಅಗತ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಆರಂಭದಲ್ಲಿ, ಸಿ-13 ನಲ್ಲಿ ಎರಡು ಅನುಕ್ರಮ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣಗಳನ್ನು ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ನಂತರ ಸಿ-14 ರ ಒಂದೇ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣವು ಡೌನೊರುಬಿಸಿನ್ ಅನ್ನು ಡಾಕ್ಸೊರುಬಿಸಿನ್ ಆಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ. ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಟೋಪೋಯಿಸೊಮೆರೇಸ್ ಇನ್ಹಿಬಿಟರ್ಗಳು ಜೈವಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆ