Classical interference microscopy
ಕ್ವಾಂಟಿಟೇಟಿವ್ ಇಂಟರ್ಫೆರೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಎಂದೂ ಕರೆಯಲಾಗುವ ಕ್ಲಾಸಿಕಲ್ ಇಂಟರ್ಫೆರೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ, ಫೇಸ್ ಕಾಂಟ್ರಾಸ್ಟ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಅಥವಾ ಡಿಫರೆನ್ಷಿಯಲ್ ಇಂಟರ್ಫೆರೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ (ಡಿಐಸಿ) ಯಲ್ಲಿ ಬಳಸುವುದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪಾರ್ಶ್ವ ಬೇರ್ಪಡಿಸುವಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಎರಡು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಬೆಳಕಿನ ಕಿರಣಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ವಸ್ತು ಮತ್ತು ಉಲ್ಲೇಖ ಕಿರಣವು ಒಂದೇ ಉದ್ದೇಶದ ಮೂಲಕ ಹಾದುಹೋಗುವ ಇಂಟರ್ಫೆರೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್ನ ರೂಪಾಂತರಗಳಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿ ವಸ್ತುವಿನ ಎರಡು ಚಿತ್ರಗಳು ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುತ್ತವೆ (ಒಂದು "ಪ್ರೇತ ಚಿತ್ರ"). ಬಳಸಿದ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ತತ್ವಗಳಿಂದ ನಿರ್ಧರಿಸಲ್ಪಟ್ಟಂತೆ, ಎರಡು ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ದೃಶ್ಯ ಕ್ಷೇತ್ರದೊಳಗೆ ಅಥವಾ ವಿಭಿನ್ನ ಫೋಕಲ್ ಪ್ಲೇನ್ಗಳಲ್ಲಿ ಪಾರ್ಶ್ವವಾಗಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಎರಡು ಚಿತ್ರಗಳು ಒಂದಕ್ಕೊಂದು ಹೋಲಿಸಿದಾಗ ಉಪದ್ರವವಾಗಬಹುದು, ಏಕೆಂದರೆ ಅವು ಸಾಮೂಹಿಕ ದಪ್ಪ ಮಾಪನಗಳ ನಿಖರತೆಯ ಮೇಲೆ ತೀವ್ರ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತವೆ. ಹೀಗಾಗಿ, ಡಿ. ಐ. ಸಿ. ಯಂತೆ ತಯಾರಿಕೆಯ ಆವರ್ತನವು ಅಗತ್ಯವಾಗಬಹುದು. ಬಳಸಬಹುದಾದ ಮೊದಲ ಇಂಟರ್ಫೆರೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್ಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದನ್ನು ಡೈಸನ್ ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಿದರು ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಯಾರ್ಕ್ ಇಂಗ್ಲೆಂಡ್ನ ಕುಕ್, ಟ್ರೋಟನ್ & ಸಿಮ್ಸ್ (ನಂತರ ವಿಕರ್ಸ್ ಇನ್ಸ್ಟ್ರುಮೆಂಟ್ಸ್) ತಯಾರಿಸಿದರು. ಈ ಜಾಣ್ಮೆಯ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಕಿರಣದ ಮಾರ್ಗದಲ್ಲಿ ಧ್ರುವೀಕರಣ ಅಂಶಗಳ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲದೇ ಇಂಟರ್ಫೆರೆನ್ಸ್ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಸಾಧಿಸಿತು. ಧ್ರುವೀಕರಣದ ಅಂಶಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡ ನಂತರದ ಜನಪ್ರಿಯ ವಿನ್ಯಾಸವನ್ನು ಸ್ಮಿತ್ ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಿದರು ಮತ್ತು ಮೊದಲು ಲಂಡನ್ನ ಸಿ. ಬೇಕರ್ ಮತ್ತು ತರುವಾಯ ಯು. ಎಸ್ನ ಅಮೇರಿಕನ್ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಕಂಪನಿಯಿಂದ ಮಾರಾಟ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಮೇಲೆ ತಿಳಿಸಲಾದ ಎಲ್ಲಾ ವಿನ್ಯಾಸಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಎದುರಾಗುವ ಡಬಲ್-ಇಮೇಜ್ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಹಾರ್ನ್ ಅಳವಡಿಸಿದ ಮ್ಯಾಕ್-ಝೆಂಡರ್ ಇಂಟರ್ಫೆರೋಮೀಟರ್ ವಿನ್ಯಾಸದಲ್ಲಿ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ತಪ್ಪಿಸಲಾಯಿತು, ಇದು ಅತ್ಯಂತ ದುಬಾರಿ ಸಾಧನವಾಗಿದ್ದು, ಧ್ರುವೀಕೃತ ಬೆಳಕನ್ನು ಬಳಸುವುದಿಲ್ಲ, ಆದರೆ ನಿಖರವಾಗಿ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುವ ನಕಲಿ ಉದ್ದೇಶಗಳು ಮತ್ತು ಕಂಡೆನ್ಸರ್ಗಳ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಈ ವಿನ್ಯಾಸದೊಂದಿಗೆ (ಇ. ಲೀಟ್ಜ್ನಿಂದ ಮಾರಾಟವಾದ) ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದಲ್ಲಿ 60 ಎಂಎಂ ಕಿರಣದ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು ಸಾಧಿಸಲಾಯಿತು ಆದರೆ ಇಲ್ಲಿ ಎರಡು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ ಸ್ಲೈಡ್ ಸಿದ್ಧತೆಗಳ (ಮಾದರಿ ಮತ್ತು ಡಮ್ಮಿ) ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ದಪ್ಪವನ್ನು ಸಮತೋಲನಗೊಳಿಸುವುದು ಮತ್ತು ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ವೀಕ್ಷಣೆಗಳ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಈ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಸಮತೋಲನವನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳುವುದು (ಉದಾಹರಣೆಗೆ. 37 ಡಿಗ್ರಿ ಸೆಲ್ಸಿಯಸ್ನಲ್ಲಿ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾದ ಜೀವಂತ ಕೋಶಗಳ ಅಧ್ಯಯನಗಳು, ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ಹಿನ್ನೆಲೆ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪದ ಬಣ್ಣದಲ್ಲಿ ಕ್ರಮೇಣ ಬದಲಾವಣೆಯು ಕಾಲಾನಂತರದಲ್ಲಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ಇಂಟರ್ಫೆರೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಮಾಪನಗಳು ನೀಡುವ ಮುಖ್ಯ ಪ್ರಯೋಜನವೆಂದರೆ ಜೀವಂತ ಕೋಶಗಳ ಯೋಜಿತ ಒಣ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿಯನ್ನು ಅಳೆಯುವ ಸಾಧ್ಯತೆಯಾಗಿದೆ, ಇದನ್ನು ಮೊದಲ ಬಾರಿಗೆ ಆಂಡ್ರ್ಯೂ ಹಕ್ಸ್ಲೆ ಸ್ಟ್ರೈಟೆಡ್ ಸ್ನಾಯು ಕೋಶ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯದ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಬಳಸಿಕೊಂಡರು, ಇದು ಸ್ನಾಯು ಸಂಕೋಚನದ ಸ್ಲೈಡಿಂಗ್ ಫಿಲಾಮೆಂಟ್ ಮಾದರಿಗೆ ಕಾರಣವಾಯಿತು. ಇಂಟರ್ಫೆರೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿಯ ಜನಪ್ರಿಯತೆಯು ಸುಮಾರು 1940-1970 ಗಳಷ್ಟು ಉತ್ತುಂಗಕ್ಕೇರಿತು ಮತ್ತು ಅದರ ನಂತರ ಉಪಕರಣದ ಸಂಕೀರ್ಣತೆ ಮತ್ತು ಅದರ ಬಳಕೆ ಮತ್ತು ಚಿತ್ರ ದತ್ತಾಂಶದ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ ಎರಡರಲ್ಲೂ ತೊಂದರೆಗಳಿಂದಾಗಿ ಕುಸಿಯಿತು. ಇತ್ತೀಚಿನ ವರ್ಷಗಳಲ್ಲಿ, ಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪದ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವನ್ನು (ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಮ್ಯಾಕ್-ಜೆಹಂಡರ್ ಉಪಕರಣ) ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರಜ್ಞರು "ಮರುಶೋಧಿಸಿದ್ದಾರೆ" ಏಕೆಂದರೆ ಅದರ ಮುಖ್ಯ ಮೂಲ ಅನನುಕೂಲತೆಯನ್ನು (ಅನುವಾದಿತ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪದ ಬ್ಯಾಂಡ್ಗಳು ಅಥವಾ ಸಂಕೀರ್ಣ ಬಣ್ಣದ ಚಿತ್ರಗಳ ಕಠಿಣ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ) ಈಗ ಡಿಜಿಟಲ್ ಕ್ಯಾಮರಾ ಇಮೇಜ್ ರೆಕಾರ್ಡಿಂಗ್ ಮೂಲಕ ಸುಲಭವಾಗಿ ಮೀರಿಸಬಹುದು, ನಂತರ ಕಂಪ್ಯೂಟರ್ ಕ್ರಮಾವಳಿಗಳ ಅನ್ವಯವು ಸಂಸ್ಕರಿಸಿದ ಡೇಟಾವನ್ನು ಯೋಜಿತ ಒಣ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿಯ ಸುಳ್ಳು-ಬಣ್ಣದ ಚಿತ್ರಗಳಾಗಿ ವೇಗವಾಗಿ ತಲುಪಿಸುತ್ತದೆ. ಕೈಗಾರಿಕಾ ತಪಾಸಣೆ, ಅರೆವಾಹಕ ತಪಾಸಣೆ ಮತ್ತು ಮೇಲ್ಮೈ ರಚನೆಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಇಂಟರ್ಫರೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿದೆ. ಸಲಕರಣೆಗಳ ಇತಿಹಾಸ ಮತ್ತು ತಯಾರಕರ ಹೆಸರುಗಳು ಸ್ಮಿತ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ (ಸಿ. ಬೇಕರ್, ಲಂಡನ್, ಇಂಗ್ಲೆಂಡ್) ಡೈಸನ್ (ಕುಕ್ ಟ್ರೋಟನ್ & ಸಿಮ್ಸ್, ಯಾರ್ಕ್, ಇಂಗ್ಲೆಂಡ್) ಜಾಮಿನ್-ಲೆಬೆಡೆಫ್ (ಇ. ಲೀಟ್ಜ್, ವೆಟ್ಜ್ಲರ್, & ಝೈಸ್, ಜರ್ಮನಿ) ಮ್ಯಾಕ್-ಜೆಹಂಡರ್ (ಇ. ಲೀಟ್ಜ್, ವೆಟ್ಜ್ಲರ್, ಜರ್ಮನಿ) ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ