Glucose phosphate broth
ಗ್ಲುಕೋಸ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ರಸವನ್ನು ಮೀಥೈಲ್ ರೆಡ್ (ಎಮ್ಆರ್) ಪರೀಕ್ಷೆ ಮತ್ತು ವೋಗೆಸ್-ಪ್ರಾಸ್ಕೌರ್ ಪರೀಕ್ಷೆ (ವಿಪಿ) ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪದಾರ್ಥಗಳು ಗ್ಲುಕೋಸ್-5 ಗ್ರಾಂ/ಎಲ್ ಡಿಪೋಟ್ಯಾಸಿಯಮ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್-5 ಗ್ರಾಂ/ಎಲ್ ಪ್ರೋಟಿಯೋಸ್ ಪೆಪ್ಟೋನ್-5 ಗ್ರಾಂ/ಎಲ್ ಡಿಸ್ಟಿಲ್ಡ್ ವಾಟರ್-1000 ಎಂಎಲ್ ಪಿಹೆಚ್-6.9 ಮೀಥೈಲ್ ರೆಡ್ ಟೆಸ್ಟ್ ಪ್ರಿನ್ಸಿಪಲ್ ಇದನ್ನು ಗ್ಲುಕೋಸ್ನ ಹುದುಗುವಿಕೆಯ ಮೂಲಕ ಮಿಶ್ರ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಜೀವಿಗಳ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಮತ್ತು ಮಾಧ್ಯಮದ ಬಫರಿಂಗ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಜಯಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪರೀಕ್ಷಾ ಜೀವಿಯ ಶುದ್ಧ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯೊಂದಿಗೆ ಮ್ಯಾಕ್ಕಿಂಕಿಯ (ಗ್ಲುಕೋಸ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಸಾರು) ಲಸಿಕೆ ಹಾಕುವ ವಿಧಾನ. <ಐ. ಡಿ. 1> ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ 35 ಡಿಗ್ರಿ ಸೆಲ್ಸಿಯಸ್ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಈ ಕಷಾಯವನ್ನು ಸೇವಿಸಿ. ಹೊಮ್ಮುವಿಕೆಯ ನಂತರ 5 ಹನಿ ಮೀಥೈಲ್ ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣವನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ರಸಕ್ಕೆ, ಕೊಳವೆಯ ಬದಿಗಳ ಮೂಲಕ ಸೇರಿಸಿ. ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ ಮಾಧ್ಯಮದ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಸ್ಥಿರವಾದ ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣದ ಬೆಳವಣಿಗೆಯು pH ಅನ್ನು 4.4 ಕ್ಕೆ ಇಳಿಸಲು ಸಾಕಷ್ಟು ಆಮ್ಲ ಉತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಧನಾತ್ಮಕ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಇತರ ಜೀವಿಗಳು ಪರೀಕ್ಷಾ ತಲಾಧಾರದಿಂದ ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಆಮ್ಲವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಬಹುದಾದ್ದರಿಂದ, ಹಳದಿ ಮತ್ತು ಕೆಂಪು ನಡುವಿನ ಮಧ್ಯಂತರ ಕಿತ್ತಳೆ ಬಣ್ಣವು ಬೆಳೆಯಬಹುದು. ಇದು ಧನಾತ್ಮಕ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಪ್ರತಿ ಲಾಟ್ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಿದ ನಂತರ ಧನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಋಣಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳನ್ನು ಚಲಾಯಿಸಬೇಕು. ಧನಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣಃ ಎಸ್ಚೆರಿಚಿಯಾ ಕೋಲಿ ಋಣಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣಃ ಕ್ಲೆಬ್ಸಿಯೆಲ್ಲಾ ವೋಗೆಸ್ ಪ್ರೋಸ್ಕೌರ್ ಪರೀಕ್ಷಾ ತತ್ವ ಇದನ್ನು ಗ್ಲುಕೋಸ್ ಹುದುಗುವಿಕೆಯಿಂದ ಅಸಿಟೈಲ್ ಮೀಥೈಲ್ ಕಾರ್ಬಿನಾಲ್ (ಅಸಿಟೋಯಿನ್) ಎಂಬ ತಟಸ್ಥ ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಕೆಲವು ಜೀವಿಗಳ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕ್ಲೆಬ್ಸಿಯೆಲ್ಲಾ, ಎಂಟರೊಬ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಮುಂತಾದ ಸದಸ್ಯರು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ತಟಸ್ಥ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಿಸುವ ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನವಾದ ಅಸಿಟೋಯಿನ್ನ ಉತ್ಪಾದನೆಯು ಗ್ಲುಕೋಸ್ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯ ಮುಖ್ಯ ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಮಿಶ್ರ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ವಾತಾವರಣದ ಆಮ್ಲಜನಕ ಮತ್ತು 40 ಪ್ರತಿಶತ KOH ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ, ಅಸಿಟೋಯಿನ್ ಅನ್ನು ಡಯಾಸೆಟೈಲ್ ಆಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು α-ನಾಫ್ಥೋಲ್ ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣದ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಹೊರತರಲು ವೇಗವರ್ಧಕವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಮಾಧ್ಯಮ ಗ್ಲುಕೋಸ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಸಾರು ಕಾರಕಗಳು ಎಃ α-ನಾಫ್ಥೋಲ್-5 ಗ್ರಾಂ ಸಂಪೂರ್ಣ ಈಥೈಲ್ ಆಲ್ಕೋಹಾಲ್-100 ಎಂಎಲ್-0.6 ಎಂಎಲ್-3 ಭಾಗಗಳು ಬಿಃ KOH-40 ಗ್ರಾಂ ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ನೀರು-100 ಎಂಎಲ್-0.2 ಎಂಎಲ್-1 ಭಾಗ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನ ಪರೀಕ್ಷಾ ಜೀವಿಯ ಶುದ್ಧ ಇನಾಕ್ಯುಲಮ್ನೊಂದಿಗೆ ಗ್ಲುಕೋಸ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಮಾಂಸದ ಕೊಳವೆಯೊಂದಕ್ಕೆ ಲಸಿಕೆ ಹಾಕಿ ಮತ್ತು 24 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ 35 ಡಿಗ್ರಿ ಸೆಲ್ಸಿಯಸ್ನಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡುತ್ತವೆ. ಈ ಮಾಂಸದ 1 ಎಂ. ಎಲ್. ಗೆ 0.6 ಎಂ. ಎಲ್. ನಷ್ಟು 5 ಪ್ರತಿಶತ α-ನಾಫ್ಥೋಲ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ನಂತರ 0.2 ಎಂ. ಎಲ್. ನಷ್ಟು 40 ಪ್ರತಿಶತ KOH ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ. ವಾತಾವರಣದ ಆಮ್ಲಜನಕಕ್ಕೆ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಒಡ್ಡಲು ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ನಿಧಾನವಾಗಿ ಅಲುಗಾಡಿಸಿ ಮತ್ತು ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು 10-15 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಅಡೆತಡೆಯಿಲ್ಲದೆ ಉಳಿಯಲು ಅವಕಾಶ ಮಾಡಿಕೊಡಿ. ಒಂದು ಧನಾತ್ಮಕ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಿದ 15 ನಿಮಿಷ ಅಥವಾ ಅದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಸಮಯದ ನಂತರ ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣದ ಬೆಳವಣಿಗೆಯಿಂದ ಪ್ರತಿನಿಧಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ, ಇದು ಅಸಿಟೋಯಿನ್ನ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣ ಉತ್ಪನ್ನವಾದ ಡಯಾಸೆಟೈಲ್ನ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. 1 ಗಂಟೆ ನಿಂತ ನಂತರ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣದ್ದಾಗಿರಬೇಕು, ಏಕೆಂದರೆ ಋಣಾತ್ಮಕ ವಿ. ಪಿ. ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳು ತಾಮ್ರದಂತಹ ಬಣ್ಣವನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡಬಹುದು, ಇದು ತಪ್ಪು ಧನಾತ್ಮಕ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು, ಏಕೆಂದರೆ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡುವಾಗ ಕಾರಕಗಳ ಕ್ರಿಯೆಯಿಂದಾಗಿ. ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಪ್ರತಿ ಲಾಟ್ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಿದ ನಂತರ ಧನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಋಣಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳನ್ನು ಚಲಾಯಿಸಬೇಕು. ಧನಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣಃ ಕ್ಲೆಬ್ಸಿಯೆಲ್ಲಾ ಋಣಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣಃ ಎಸ್ಚೆರಿಚಿಯಾ ಕೋಲಿ ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಪಿ. ಎಚ್ ಸೂಚಕಗಳು ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರದ ತಂತ್ರಗಳು