Ultramicrotomy
আল্ট্রামাইক্রোটমি হল নমুনাগুলিকে অত্যন্ত পাতলা টুকরো করে কাটার একটি পদ্ধতি, যাকে অতি-পাতলা বিভাগ বলা হয়, যা ট্রান্সমিশন ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপে (টিইএম) বিভিন্ন বিবর্ধনগুলিতে অধ্যয়ন এবং নথিভুক্ত করা যেতে পারে। এটি বেশিরভাগ জৈবিক নমুনার জন্য ব্যবহৃত হয়, তবে প্লাস্টিক এবং নরম ধাতুর বিভাগগুলিও প্রস্তুত করা যেতে পারে। বিভাগগুলি অবশ্যই খুব পাতলা হতে হবে কারণ স্ট্যান্ডার্ড ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপের 50 থেকে 125 কেভি ইলেকট্রনগুলি 150 এনএম-এর চেয়ে অনেক বেশি পুরু জৈবিক উপাদানের মধ্য দিয়ে যেতে পারে না। সর্বোত্তম রেজোলিউশনের জন্য, বিভাগগুলি 30 থেকে 60 এনএম পর্যন্ত হওয়া উচিত। এটি মোটামুটিভাবে একটি 0.1 মিমি পুরু মানুষের চুলকে তার ব্যাস বরাবর 2,000 টুকরো টুকরো করে ভাগ করার সমতুল্য, অথবা একটি একক লাল রক্তকণিকা 100 টুকরো টুকরো করে কাটার সমতুল্য। আল্ট্রামাইক্রোটমি প্রক্রিয়া নমুনাগুলির অতি-পাতলা অংশগুলি "আল্ট্রামাইক্রোটম" নামে একটি বিশেষ যন্ত্র ব্যবহার করে কাটা হয়। আল্ট্রামাইক্রোটমে বেশিরভাগ জৈবিক অতি-পাতলা বিভাগের জন্য একটি হীরার ছুরি বা একটি কাচের ছুরি লাগানো থাকে, যা প্রায়শই প্রাথমিক কাটার জন্য ব্যবহৃত হয়। আল্ট্রামাইক্রোটমি প্রক্রিয়ার সাথে জড়িত আরও অনেক সরঞ্জাম রয়েছে। অতি-পাতলা বিভাগের জন্য নমুনা ব্লকের একটি এলাকা নির্বাচন করার আগে, প্রযুক্তিবিদ সেমিথিন বা "পুরু" বিভাগগুলি 0.5 থেকে 2 মাইক্রোমিটার পর্যন্ত পরীক্ষা করেন। এই পুরু অংশগুলি জরিপ বিভাগ হিসাবেও পরিচিত এবং একটি হালকা মাইক্রোস্কোপের অধীনে দেখা হয় যাতে নির্ধারণ করা যায় যে নমুনার সঠিক অঞ্চলটি পাতলা বিভাগের জন্য একটি অবস্থানে রয়েছে কিনা। 50 থেকে 100 এনএম পুরু "অতি-পাতলা" বিভাগগুলি টিইএম-এ দেখা যায়। আল্ট্রামাইক্রোটমি দ্বারা প্রাপ্ত টিস্যু বিভাগগুলি ছুরির কাটিয়া বল দ্বারা সংকুচিত হয়। উপরন্তু, ব্লকগুলির কাটা পৃষ্ঠের হস্তক্ষেপ মাইক্রোস্কোপি প্রকাশ করে যে বিভাগগুলি প্রায়শই সমতল হয় না। ইপন বা ভেস্তোপালের সাথে সংযুক্ত মাধ্যম হিসাবে শৈলশিরা এবং উপত্যকাগুলি সাধারণত উচ্চতায় 0.5 মাইক্রোমিটার অতিক্রম করে না, অর্থাৎ সাধারণ বিভাগের পুরুত্বের (1) গুণ বেশি। পরীক্ষা করার জন্য নমুনা থেকে একটি ছোট নমুনা নেওয়া হয়। নমুনাগুলি জৈবিক পদার্থ থেকে হতে পারে, যেমন প্রাণী বা উদ্ভিদ টিস্যু থেকে, অথবা অজৈব উপাদান যেমন শিলা, ধাতু, চৌম্বক টেপ, প্লাস্টিক, ফিল্ম ইত্যাদি থেকে হতে পারে। নমুনা ব্লকটি প্রথমে 1 মিমি বাই 1 মিমি আকারের একটি ব্লক ফেস তৈরি করার জন্য ছাঁটা হয়। "পুরু" অংশগুলি (1 মাইক্রোমিটার) অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপে দেখার জন্য নেওয়া হয়। টিইএম-এর জন্য বিভাগ করার জন্য একটি এলাকা বেছে নেওয়া হয় এবং ব্লকের মুখটি একটি পাশে 0.7 মিলিমিটারের চেয়ে বড় নয় এমন আকারে পুনরায় ছাঁটাই করা হয়। ব্লক মুখগুলির সাধারণত একটি বর্গাকার, ট্র্যাপিজয়েডাল, আয়তক্ষেত্রাকার বা ত্রিভুজাকার আকৃতি থাকে। অবশেষে, পাতলা অংশগুলি একটি আল্ট্রামাইক্রোটম ব্যবহার করে একটি কাচ বা হীরার ছুরি দিয়ে কাটা হয় এবং অংশগুলি একটি নৌকা বা গর্তে রাখা জলের উপর ভাসমান রেখে দেওয়া হয়। তারপর অংশগুলি জলের পৃষ্ঠ থেকে পুনরুদ্ধার করা হয় এবং একটি তামা, নিকেল, সোনা বা অন্যান্য ধাতব গ্রিডে স্থাপন করা হয়। 50 কেভি এবং 120 কেভি-র মধ্যে ত্বরান্বিত ভোল্টেজ সহ ট্রান্সমিশন ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপির জন্য আদর্শ বিভাগের পুরুত্ব প্রায় 30-100 এনএম। 1952 সালে হামবার্তো ফার্নান্দেজ মোরান ক্রায়ো আল্ট্রামাইক্রোটমি চালু করেন, যা একটি অনুরূপ কৌশল কিন্তু-20 এবং-150 ডিগ্রি সেলসিয়াসের মধ্যে হিমায়িত তাপমাত্রায় করা হয়। অতি-পাতলা হিমায়িত জৈবিক নমুনা কাটতে ক্রায়ো আল্ট্রামাইক্রোটমি ব্যবহার করা যেতে পারে। আরও "ঐতিহ্যবাহী" আল্ট্রামাইক্রোটমি প্রক্রিয়ার তুলনায় একটি সুবিধা হল গতি, কারণ 1 থেকে 2 ঘন্টার মধ্যে একটি নমুনা হিমায়িত করা এবং ভাগ করা সম্ভব হওয়া উচিত। তথ্যসূত্র মাইক্রোস্কোপি ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপি জৈবিক কৌশল এবং সরঞ্জাম