Ovarian culture
ডিম্বাশয় কালচার একটি ইন-ভিট্রো প্রক্রিয়া যা ডিম্বাশয়ের বিকাশ, বিষাক্ততা এবং প্যাথলজি তদন্তের অনুমতি দেয়। এই কৌশলটি উর্বরতার চিকিৎসার সম্ভাব্য প্রয়োগগুলি অধ্যয়ন করতেও ব্যবহার করা যেতে পারে যেমন প্রাথমিক ডিম্বাশয়ের ফলিকল থেকে oocytes পৃথক করা যা নিষিক্তকরণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। মাউস ডিম্বাশয়ের টিস্যু ব্যবহার করে কালচার পদ্ধতি বেশ কয়েকটি কালচার পদ্ধতি রয়েছে যা ডিম্বাশয় এবং ফলিকুলার বৃদ্ধি এবং বিকাশ তদন্তের জন্য নিযুক্ত করা যেতে পারে। পুরো ডিম্বাশয় সংস্কৃতি অক্ষত ডিম্বাশয়ের সংস্কৃতি আদিম ফলিকল গঠন এবং বিকাশকে সমর্থন করে। ডিম্বাশয়গুলি নবজাতক ইঁদুরের কুকুরছানা থেকে বিচ্ছিন্ন করা হয় এবং α-মিনিমাল এসেনশিয়াল মিডিয়াতে (αMEM) দ্রবীভূত বোভাইন সিরাম অ্যালবুমেন (বিএসএ) ধারণকারী ডিম্বাশয় কালচার মাধ্যমে স্থাপন করা হয়। কালচারগুলি 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস, 5 শতাংশ সিও2 ইনকিউবেটরে রক্ষণাবেক্ষণ করা হয় এবং তারপরে আরও গবেষণার সুবিধার্থে ডিম্বাশয়গুলি হিমায়িত বা স্থির করা হয়। ফলিকল কালচার ইন্ডিভিজুয়াল কালচারিংয়ের এই পদ্ধতিটি প্রাক-অন্ত্রের শেষ থেকে প্রাক-ডিম্বস্ফোটন পর্যায় পর্যন্ত পৃথক ফলিকলের বৃদ্ধিকে সমর্থন করে। এই ব্যবস্থাটি ফলিকলের বৃদ্ধি এবং হরমোন উৎপাদন অধ্যয়ন করার অনুমতি দেয়। অল্পবয়সী ইঁদুরের ডিম্বাশয়গুলি (19-23 দিন) অপসারণ করা হয় এবং অর্ধেক করা হয়, এবং ফলিকলগুলি একটি মাইক্রোস্কোপের অধীনে চিহ্নিত করা হয়। দেরী প্রাক-অ্যান্ট্রাল ফলিকলগুলি 180-200 মাইক্রোমিটার ব্যাসযুক্ত এবং গ্রানুলোসা কোষের 2-3 স্তরযুক্ত হিসাবে চিহ্নিত করা হয়। ফলিকলগুলি ম্যানুয়ালি বিচ্ছিন্ন করা হয় এবং তারপরে কালচারের উপযুক্ততার জন্য পরীক্ষা করা হয়। ফলিকলগুলি শুধুমাত্র সংস্কৃতির জন্য বেছে নেওয়া হয় যদি সেগুলি স্বাস্থ্যকর হয় (ব্যাস 190 ± 10 মাইক্রোমিটার; স্বচ্ছ; অন্ধকার অ্যাট্রেটিক অঞ্চল ছাড়া; অক্ষত বেসাল ল্যামিনা)। ফলিকল কালচার মিডিয়াম (α-মিনিমাল এসেনশিয়াল মিডিয়া, রিকম্বিনেন্ট হিউম্যান ফলিকল স্টিমুলেটিং হরমোন, অ্যাসকরবিক অ্যাসিড এবং প্রাপ্তবয়স্ক মহিলা মাউসের সিরাম) যুক্ত কূপগুলি জীবাণুমুক্ত সিলিকন তেল দিয়ে আচ্ছাদিত করা হয়, যা মাঝারি বাষ্পীভবন প্রতিরোধ করে। প্রতিটি কূপের নীচে একটি ফলিকল স্থাপন করা হয় এবং একটি 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস, 5 শতাংশ সিও2 ইনকিউবেটরে রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়, যা 6 দিন পর্যন্ত তাজা মাধ্যমযুক্ত একটি কূপের মধ্যে স্থানান্তরিত করা হয়। যদি বৃদ্ধির পরিমাপ দৃশ্যমানভাবে নেওয়া হয় তবে তেলের স্তরের কারণে বিকৃতি অবশ্যই হিসাব করতে হবে। ফলিকলগুলি হিমায়িত বা স্থির করা হয় যাতে আরও বিশ্লেষণ করা যায়। কাছাকাছি 2 টি ফলিকল কালচার করে, ফলিকল-ফলিকল মিথস্ক্রিয়া পরীক্ষা করা যেতে পারে। ফলিকলগুলি একসঙ্গে বেড়ে একটি দুই-ফলিকল ইউনিট গঠন করতে পারে। ফলিকলগুলি উপরের মতো ডিম্বাশয় থেকে বিচ্ছিন্ন করা হয়, তারপর জোড়ায় জোড়ায় ফলিকল কালচার মিডিয়াম এবং জীবাণুমুক্ত সিলিকন তেল সহ একটি কুয়ায় একে অপরের সংস্পর্শে রাখা হয়। বিভিন্ন জিনগত উৎস থেকে ফলিকলগুলি সহ-কালচার করা যেতে পারে যাতে সহ-কালচারের মধ্যে টিস্যু উত্সকে আলাদা করা যায়। মাধ্যমটি প্রতি 2 দিন অন্তর প্রতিস্থাপন করা হয় এবং 6 দিন পরে কালচারটি আরও প্রক্রিয়াকরণের জন্য স্থির বা হিমায়িত করা হয়। ফলিকল-ডিম্বাশয় সহ-সংস্কৃতি এই পদ্ধতিটি ফলিকল-ডিম্বাশয় মিথস্ক্রিয়া অধ্যয়ন করার অনুমতি দেয়। ডিম্বাশয় এবং ফলিকলগুলি উপরের মতো বিচ্ছিন্ন করা হয় এবং তারপরে একটি ফলিকল একটি প্লেটে নবজাতকের ডিম্বাশয়ের একটি মেরুর সংস্পর্শে রাখা হয়। ফলিকল-ডিম্বাশয় প্লেটটি ফলিকল কালচার মাধ্যমে 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে, 5 শতাংশ সিও2-এ 5 দিন পর্যন্ত কালচার করা হয়। এই মুহুর্তে পরবর্তী প্রক্রিয়াকরণের আগে সহ-চাষ হিমায়িত বা স্থির করা হয়। টিস্যু উৎসের মধ্যে পার্থক্য সহজতর করার জন্য ডিম্বাশয় এবং ফলিকল বিভিন্ন জিনগত উৎস থেকে হওয়া উচিত। ডিম্বাশয় কালচার কৌশলের ব্যবহার টক্সিকোলজিক্যাল স্টাডিজ বর্তমানে প্রজননগত টক্সিকোলজির ক্ষেত্রে গবেষণা মূলত ভিভোতে করা হয়, তবে ডিম্বাশয়ের ফলিকলগুলিকে ভিট্রোতে উত্থাপনের অনুমতি দেওয়ার লক্ষ্যে নতুন কালচার পদ্ধতি তৈরি করা হয়েছে। এই নতুন পদ্ধতিগুলি আমাদের পৃথক ডিম্বাশয়ের ফলিকল, ভ্রূণ, ডিম্বাশয় (পুরো অঙ্গ বা টিস্যুর শুধুমাত্র অংশ) এবং ভ্রূণের স্টেম কোষগুলিকে কালচার করার অনুমতি দেয়। ডিম্বাশয়ের সংস্কৃতি গবেষণার জন্য দরকারী কারণ এগুলি আমাদের ডিম্বাশয় এবং এর ফলিকল এবং oocytes-এর বিশেষ কাঠামোর ক্ষতি সনাক্ত করার জন্য ইন ভিট্রো ডিম্বাশয়ের সংস্কৃতির মড্যুলেটেড কালচার conditions.The ক্ষমতা সহ একটি পরিবেশে নিয়মতান্ত্রিক ফলিকল বিকাশ, পর্যায়ক্রমিক ডিম্বস্ফোটন এবং ফলিকল অ্যাট্রেসিয়ার প্রতিলিপি তৈরি করতে দেয়, যা সম্ভাব্য বিকাশমূলক এবং/অথবা প্রজনন বিষাক্ত পদার্থগুলির দ্রুত স্ক্রিনিংয়ের অনুমতি দেয়। অতএব, ডিম্বাশয় সংস্কৃতি ব্যবস্থা প্রজনন জীববিজ্ঞান এবং বিষাক্তবিজ্ঞানে ক্রমবর্ধমানভাবে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হচ্ছে। পুরো ডিম্বাশয় বা ডিম্বাশয়ের টুকরোগুলির কালচার একটি নিয়ন্ত্রিত উপায়ে বিভিন্ন পরামিতিগুলির মূল্যায়নের অনুমতি দেয় এবং তাই, আরও সম্পূর্ণ প্রজনন বিষাক্ততার অধ্যয়নের সম্ভাবনা রয়েছে। ডিম্বাশয়ের সংস্কৃতির একটি বড় সুবিধা হল ডিম্বাশয়ের রিজার্ভ তৈরি করা আদিম ফলিকলের পুলের উপর ওষুধের প্রভাব মূল্যায়ন করার ক্ষমতা। যাইহোক, এই কৌশলটি কালচার সময়ের সময়কালের ক্ষেত্রে সীমাবদ্ধ, কারণ ফলিকুলার বিকাশ নিশ্চিত করার জন্য স্বল্প সময়কাল যথেষ্ট নাও হতে পারে। অন্যদিকে, দীর্ঘ সময়ের কালচারের ফলে কোষগুলি নেতিবাচকভাবে প্রভাবিত হতে পারে। বেশিরভাগ ইন ভিট্রো টক্সিকোলজি গবেষণায় মহিলা ইঁদুর এবং ইঁদুরের মডেল ব্যবহার করা হয়। সহজে পরিচালনা এবং ছোট আকারের কারণে প্রজনন ক্রিয়া এবং উর্বরতার উপর ওষুধের বিরূপ প্রভাব মূল্যায়নের জন্য এই প্রজাতিগুলি নির্বাচন করা হয়েছে। উপরন্তু, এই প্রজাতিগুলি শারীরবৃত্তীয়, শারীরবৃত্তীয় এবং জিনগতভাবে ভালভাবে চিহ্নিত করা হয়েছে। তাদের সংক্ষিপ্ত জীবনচক্র গর্ভাবস্থা, বুকের দুধ খাওয়ানো এবং বয়ঃসন্ধিকাল মূল্যায়ন করা সুবিধাজনক করে তোলে। বৈচিত্র্যময় মানব জনসংখ্যার মধ্যে বিষাক্ত ঝুঁকি মূল্যায়নের জন্য প্রাণী অধ্যয়নের প্রাসঙ্গিকতা অনির্ধারিত রয়ে গেছে কারণ প্রাপ্ত ফলাফলগুলি মানুষের কাছে এক্সট্রপোলেট করা যেতে পারে কিনা তা অজানা। উর্বরতার চিকিৎসা ডিম্বাশয় সংস্কৃতিতে ইন ভিভো পরিপক্কতার ব্যবহার পলিসিস্টিক ডিম্বাশয় সিন্ড্রোম (পিসিওএস) রোগীদের মধ্যে আইভিএফ চলাকালীন ডিম্বাশয় হাইপারস্টিমুলেশন সিন্ড্রোমের ঝুঁকি দূর করবে। যাদের পিসিওএস নেই তাদের জন্য, ইন ভিট্রো পরিপক্কতার এখনও সুবিধা রয়েছে কারণ প্রক্রিয়াটি কম তীব্র কারণ সুপারভ্যুলেশনের প্রয়োজন হয় না। ডিম্বাশয় সংস্কৃতির নীতিগুলি এমন মহিলাদের ক্ষেত্রে প্রয়োগ করা যেতে পারে যারা এফ. এস. এইচ বা ইস্ট্রোজেন সংবেদনশীল টিউমার প্রতিরোধী। আইভিএফ-এর তুলনায়, ইন ভিট্রো পরিপক্কতায় ব্যবহৃত কোষগুলি একটি ছোট আকারে কাটা হয়, অপরিণত এবং মিয়োসিসের মেটাফেজ 1ম পর্যায়ে আটক করা হয়। পরীক্ষাগারে একবার তারা মেটাফেজ 2-এ পরিপক্ক হয়। উর্বরতা সংরক্ষণ ডিম্বাশয়ের ক্ষতিকারক চিকিৎসার আগে ডিম্বাশয়ের টিস্যু সংগ্রহ করা যেতে পারে এবং ক্রায়োপ্রেজারভেশন ব্যবহার করে পরবর্তী পর্যায়ে পুনরায় রোপণ করা যেতে পারে। যাইহোক, এই পদ্ধতিটি ডিম্বাশয়ের ক্যান্সার এবং লিউকেমিয়ায় আক্রান্তদের মধ্যে ম্যালিগন্যান্সির পুনরাবৃত্তির সাথে যুক্ত। তত্ত্বগতভাবে, ডিম্বাশয়ের টিস্যু কালচার এই রোগীদের মধ্যে নিষিক্তকরণের জন্য পরিপক্ক oocytes উত্পাদন করার একটি নিরাপদ পদ্ধতি। তথ্যসূত্র বাহ্যিক লিঙ্ক ইন ভিট্রো ফার্টিলাইজেশন সেল কালচার প্রজনন উর্বরতা ওষুধ পরিবেশগত বিষাক্তবিদ্যা