Vectors in gene therapy
জিন থেরাপি কোষে ডি. এন. এ সরবরাহ ব্যবহার করে, যা নীচে সংক্ষিপ্তভাবে বিভিন্ন পদ্ধতিতে সম্পন্ন করা যেতে পারে। দুটি প্রধান শ্রেণীর পদ্ধতি হল যেগুলি রিকম্বিনেন্ট ভাইরাস (কখনও কখনও জৈবিক ন্যানো পার্টিকেল বা ভাইরাল ভেক্টর বলা হয়) এবং যেগুলি নগ্ন ডিএনএ বা ডিএনএ কমপ্লেক্স (অ-ভাইরাল পদ্ধতি) ব্যবহার করে। ভাইরাস সমস্ত ভাইরাস তাদের পোষকের সাথে আবদ্ধ হয় এবং তাদের প্রতিলিপি চক্রের অংশ হিসাবে পোষক কোষে তাদের জিনগত উপাদান প্রবর্তন করে। এই জেনেটিক উপাদানটিতে এই ভাইরাসগুলির আরও অনুলিপি তৈরি করার মৌলিক 'নির্দেশাবলী' রয়েছে, যা ভাইরাসের চাহিদা মেটাতে শরীরের স্বাভাবিক উৎপাদন যন্ত্রপাতি হ্যাক করে। পোষক কোষ এই নির্দেশাবলী পালন করবে এবং ভাইরাসের অতিরিক্ত অনুলিপি তৈরি করবে, যার ফলে আরও বেশি সংখ্যক কোষ সংক্রামিত হবে। কিছু ধরনের ভাইরাস হোস্টের সাইটোপ্লাজমে তাদের জিনোম ঢোকায়, কিন্তু প্রকৃতপক্ষে কোষে প্রবেশ করে না। অন্যরা প্রোটিন অণু হিসাবে ছদ্মবেশে কোষের ঝিল্লিতে প্রবেশ করে এবং কোষে প্রবেশ করে। দুটি প্রধান ধরনের ভাইরাস সংক্রমণ রয়েছেঃ লাইটিক এবং লাইসোজেনিক। তার ডিএনএ ঢোকানোর অল্প সময়ের মধ্যেই, লাইটিক চক্রের ভাইরাসগুলি দ্রুত আরও ভাইরাস তৈরি করে, কোষ থেকে ফেটে যায় এবং আরও কোষকে সংক্রামিত করে। লাইসোজেনিক ভাইরাসগুলি তাদের ডি. এন. এ-কে পোষক কোষের ডি. এন. এ-তে সংহত করে এবং একটি ট্রিগারের প্রতিক্রিয়া জানানোর আগে অনেক বছর ধরে শরীরে বেঁচে থাকতে পারে। ভাইরাসটি কোষের মতো পুনরুত্পাদন করে এবং এটি ট্রিগার না হওয়া পর্যন্ত শারীরিক ক্ষতি করে না। ট্রিগারটি পোষক থেকে ডিএনএ মুক্ত করে এবং নতুন ভাইরাস তৈরি করতে এটি ব্যবহার করে। রেট্রোভাইরাস রেট্রোভাইরাসের জিনগত উপাদান আরএনএ অণু আকারে থাকে, অন্যদিকে তাদের পোষকের জিনগত উপাদান ডিএনএ আকারে থাকে। যখন একটি রেট্রোভাইরাস একটি পোষক কোষকে সংক্রামিত করে, তখন এটি তার আর. এন. এ-কে কিছু এনজাইম, যেমন রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেস এবং ইন্টিগ্রেজের সাথে কোষে প্রবর্তন করবে। রেট্রোভাইরাস থেকে এই আর. এন. এ অণুটি হোস্ট কোষের জেনেটিক উপাদানের সাথে একীভূত হওয়ার আগে অবশ্যই তার আর. এন. এ অণু থেকে একটি ডি. এন. এ অনুলিপি তৈরি করতে হবে। আর. এন. এ অণু থেকে ডি. এন. এ অনুলিপি তৈরি করার প্রক্রিয়াকে বিপরীত প্রতিলিপি বলা হয়। এটি ভাইরাসে বাহিত একটি এনজাইম দ্বারা সঞ্চালিত হয়, যাকে রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেস বলা হয়। এই ডিএনএ অনুলিপি তৈরি হওয়ার পরে এবং পোষক কোষের নিউক্লিয়াসে মুক্ত হওয়ার পরে, এটি অবশ্যই পোষক কোষের জিনোমে অন্তর্ভুক্ত করা উচিত। অর্থাৎ, এটি অবশ্যই কোষের বড় ডিএনএ অণুতে (ক্রোমোজোম) ঢোকানো উচিত। এই প্রক্রিয়াটি ইন্টিগ্রেজ নামে ভাইরাসের মধ্যে বাহিত আরেকটি উৎসেচক দ্বারা সম্পন্ন হয়। এখন যেহেতু ভাইরাসের জিনগত উপাদান সন্নিবেশ করা হয়েছে, তাই বলা যেতে পারে যে পোষক কোষটি নতুন জিন ধারণ করার জন্য পরিবর্তিত হয়েছে। যদি এই পোষক কোষটি পরে বিভক্ত হয়, তবে এর বংশধররা সকলেই নতুন জিন ধারণ করবে। কখনও কখনও রেট্রোভাইরাসের জিনগুলি অবিলম্বে তাদের তথ্য প্রকাশ করে না। রেট্রোভাইরাস ব্যবহার করে জিন থেরাপির একটি সমস্যা হল যে ইন্টিগ্রেজ এনজাইম হোস্টের জিনোমের যে কোনও নির্বিচারে অবস্থানে ভাইরাসের জেনেটিক উপাদান সন্নিবেশ করতে পারে; এটি এলোমেলোভাবে একটি ক্রোমোজোমের মধ্যে জেনেটিক উপাদান সন্নিবেশ করে। যদি হোস্ট কোষের মূল জিনের মাঝখানে জেনেটিক উপাদান ঢোকানো হয়, তবে এই জিনটি ব্যাহত হবে (সন্নিবেশমূলক মিউটেজেনেসিস)। যদি জিনটি কোষ বিভাজন নিয়ন্ত্রণকারী একটি হয়, তবে অনিয়ন্ত্রিত কোষ বিভাজন (অর্থাৎ ক্যান্সার) ঘটতে পারে। এই সমস্যাটি সম্প্রতি জিঙ্ক ফিঙ্গার নিউক্লিয়াস ব্যবহার করে বা বিটা-গ্লোবিন লোকাস নিয়ন্ত্রণ অঞ্চলের মতো নির্দিষ্ট ক্রমগুলি অন্তর্ভুক্ত করে নির্দিষ্ট ক্রোমোজোমাল সাইটগুলিতে একীকরণের স্থান নির্দেশ করার মাধ্যমে সমাধান করা শুরু হয়েছে। এক্স-লিঙ্কযুক্ত গুরুতর সম্মিলিত ইমিউনোডেফিসিয়েন্সি (এক্স-এসসিআইডি)-র চিকিৎসার জন্য রেট্রোভাইরাল ভেক্টর ব্যবহার করে জিন থেরাপি ট্রায়ালগুলি আজ অবধি জিন থেরাপির সবচেয়ে সফল প্রয়োগের প্রতিনিধিত্ব করে। ফ্রান্স এবং ব্রিটেনে কুড়ি জনেরও বেশি রোগীর চিকিৎসা করা হয়েছে, যার মধ্যে রোগ প্রতিরোধ ব্যবস্থা পুনর্গঠনের উচ্চ হার লক্ষ্য করা গেছে। ফরাসি এক্স-এস. সি. আই. ডি জিন থেরাপি ট্রায়ালে চিকিত্সা করা রোগীদের মধ্যে লিউকেমিয়ার খবর পাওয়া গেলে মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে অনুরূপ পরীক্ষাগুলি সীমাবদ্ধ বা স্থগিত করা হয়েছিল। আজ অবধি, ফরাসি ট্রায়ালে চারজন এবং ব্রিটিশ ট্রায়ালে একজন শিশু রেট্রোভাইরাল ভেক্টর দ্বারা সন্নিবেশিত মিউটেজেনেসিসের ফলে লিউকেমিয়ায় আক্রান্ত হয়েছে। এই শিশুদের মধ্যে একজন ছাড়া বাকি সবাই প্রচলিত অ্যান্টি-লিউকেমিয়া চিকিৎসায় ভালো সাড়া দিয়েছে। অ্যাডেনোসিন ডিমিনেজ (এ. ডি. এ) এনজাইমের (এস. সি. আই. ডি-এর একটি রূপ) ঘাটতির কারণে এস. সি. আই. ডি-র চিকিৎসার জন্য জিন থেরাপি পরীক্ষা মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র, ব্রিটেন, আয়ারল্যান্ড, ইতালি এবং জাপানে আপেক্ষিক সাফল্যের সাথে অব্যাহত রয়েছে। অ্যাডেনোভাইরাস হল এমন ভাইরাস যা ডাবল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ আকারে তাদের জিনগত উপাদান বহন করে। এগুলি মানুষের শ্বাসযন্ত্র, অন্ত্র এবং চোখের সংক্রমণ ঘটায় (বিশেষ করে সাধারণ সর্দি)। যখন এই ভাইরাসগুলি একটি পোষক কোষকে সংক্রামিত করে, তখন তারা তাদের ডিএনএ অণুকে পোষকের মধ্যে প্রবর্তন করে। অ্যাডেনোভাইরাসের জিনগত উপাদান পোষক কোষের জিনগত উপাদানের মধ্যে অন্তর্ভুক্ত (ক্ষণস্থায়ী) হয় না। ডিএনএ অণুটি পোষক কোষের নিউক্লিয়াসে মুক্ত থাকে এবং এই অতিরিক্ত ডিএনএ অণুর নির্দেশাবলী অন্য যে কোনও জিনের মতোই প্রতিলিপি করা হয়। একমাত্র পার্থক্য হল যে এই অতিরিক্ত জিনগুলি প্রতিলিপি করা হয় না যখন কোষটি কোষ বিভাজনের মধ্য দিয়ে যেতে চলেছে তাই সেই কোষের বংশধরদের অতিরিক্ত জিন থাকবে না। ফলস্বরূপ, অ্যাডেনোভাইরাসের সাথে চিকিত্সার জন্য ক্রমবর্ধমান কোষের জনসংখ্যায় পুনরায় প্রশাসনের প্রয়োজন হবে যদিও হোস্ট কোষের জিনোমে একীকরণের অনুপস্থিতিতে এস. সি. আই. ডি পরীক্ষায় দেখা ক্যান্সারের ধরন প্রতিরোধ করা উচিত। এই ভেক্টর সিস্টেমটি ক্যান্সারের চিকিৎসার জন্য প্রচার করা হয়েছে এবং প্রকৃতপক্ষে ক্যান্সারের চিকিৎসার জন্য লাইসেন্সপ্রাপ্ত প্রথম জিন থেরাপি পণ্য, জেন্ডিসিন, একটি অ্যাডেনোভাইরাস। জেন্ডিসিন, একটি অ্যাডেনোভাইরাল পি53-ভিত্তিক জিন থেরাপি 2003 সালে চীনা খাদ্য ও ওষুধ নিয়ন্ত্রকদের দ্বারা মাথা এবং ঘাড়ের ক্যান্সারের চিকিৎসার জন্য অনুমোদিত হয়েছিল। অ্যাডভেক্সিন, ইন্ট্রোজেনের অনুরূপ জিন থেরাপি পদ্ধতি, 2008 সালে মার্কিন খাদ্য ও ওষুধ প্রশাসন (এফডিএ) দ্বারা প্রত্যাখ্যান করা হয়েছিল। 1999 সালে জিন থেরাপি ট্রায়ালে অংশ নেওয়ার সময় জেসি জেলসিঞ্জারের মৃত্যুর পর অ্যাডেনোভাইরাস ভেক্টরের নিরাপত্তা নিয়ে উদ্বেগ উত্থাপিত হয়েছিল। তারপর থেকে, অ্যাডেনোভাইরাস ভেক্টর ব্যবহার করে কাজটি ভাইরাসের জিনগতভাবে সীমিত সংস্করণগুলিতে মনোনিবেশ করেছে। সাইটোমেগালোভাইরাস (সি. এম. ভি) হল β-হারপিসভাইরাস উপপরিবারের অংশ যার মধ্যে রোজোলোভাইরাস রয়েছে। সি. এম. ভি মানব সি. এম. ভি (এইচ. সি. এম. ভি), মুরাইন সি. এম. ভি (এম. সি. এম. ভি) এবং রিসাস সি. এম. ভি (আর. এইচ. সি. এম. ভি) সহ স্তন্যপায়ী পোষকের একটি ভাণ্ডারের সাথে সহাবস্থান করে। সিএমভিগুলি বড় ডিএনএ জিনোম দ্বারা চিহ্নিত করা হয় এবং সাধারণত সুস্থ পোষকের মধ্যে উপসর্গহীন সংক্রমণ হয়। জিন থেরাপি ভেক্টর হিসাবে সাইটোমেগালোভাইরাস (সিএমভি)-এর প্রথম তদন্ত 2000 সালে প্রকাশিত হয়েছিল। হেমাটোপোয়েটিক প্রজননক কোষের জন্য সি. এম. ভি-র ট্রপিজম এবং এর বড় জিনোম (230 কে. বি. পি) প্রাথমিকভাবে গবেষকদের আকৃষ্ট করেছিল। তারপর থেকে সি. এম. ভি-ভিত্তিক টিকা ভেক্টরগুলি টি কোষের প্রতিক্রিয়া প্ররোচিত করতে ব্যবহার করা হয়েছে। আরও সম্প্রতি, টেলোমেরেজ এবং ফলিস্ট্যাটিনযুক্ত সি. এম. ভি-কে স্বাস্থ্যকাল বাড়ানোর অভিপ্রায় নিয়ে মাউস স্টাডিতে শিরায় এবং ইন্ট্রানাসালভাবে বিতরণ করা হয়েছিল। ভাইরাল ভেক্টরের খাম প্রোটিন সিউডোটাইপিং উপরে বর্ণিত ভাইরাল ভেক্টরগুলির প্রাকৃতিক পোষক কোষের সংখ্যা রয়েছে যা তারা সবচেয়ে দক্ষতার সাথে সংক্রামিত করে। রেট্রোভাইরাসগুলির প্রাকৃতিক পোষক কোষের পরিসর সীমিত, এবং যদিও অ্যাডেনোভাইরাস এবং অ্যাডেনো-সম্পর্কিত ভাইরাস তুলনামূলকভাবে বিস্তৃত পরিসরের কোষগুলিকে দক্ষতার সাথে সংক্রামিত করতে সক্ষম, কিছু কোষের প্রকার এই ভাইরাসগুলির দ্বারাও সংক্রমণ প্রতিরোধী। একটি সংবেদনশীল কোষে সংযুক্তি এবং প্রবেশ একটি ভাইরাসের পৃষ্ঠের প্রোটিন খাম দ্বারা মধ্যস্থতা করা হয়। রেট্রোভাইরাস এবং অ্যাডেনো-সম্পর্কিত ভাইরাসগুলির ঝিল্লিতে একটি একক প্রোটিন আবরণ থাকে, অন্যদিকে অ্যাডেনোভাইরাসগুলি একটি খাম প্রোটিন এবং ফাইবার উভয়ের সাথে আবৃত থাকে যা ভাইরাসের পৃষ্ঠ থেকে দূরে প্রসারিত হয়। এই ভাইরাসগুলির প্রত্যেকটির খামের প্রোটিনগুলি হেপারিন সালফেটের মতো কোষ-পৃষ্ঠের অণুগুলির সাথে আবদ্ধ হয়, যা তাদের সম্ভাব্য পোষকের পৃষ্ঠে স্থানীয়করণ করে, সেইসাথে নির্দিষ্ট প্রোটিন রিসেপ্টর যা হয় ভাইরাল প্রোটিনে প্রবেশ-প্রচারকারী কাঠামোগত পরিবর্তনকে প্ররোচিত করে, অথবা এন্ডোসোমে ভাইরাসকে স্থানীয়করণ করে যেখানে লুমেনের অ্যাসিডিফিকেশন ভাইরাল কোটের এই পুনরায় ভাঁজকে প্ররোচিত করে। উভয় ক্ষেত্রেই, সম্ভাব্য পোষক কোষে প্রবেশের জন্য ভাইরাসের পৃষ্ঠে একটি প্রোটিন এবং কোষের পৃষ্ঠে একটি প্রোটিনের মধ্যে একটি অনুকূল মিথস্ক্রিয়া প্রয়োজন। জিন থেরাপির উদ্দেশ্যে, কেউ জিন থেরাপি ভেক্টর দ্বারা ট্রান্সডাকশনের জন্য সংবেদনশীল কোষের পরিসীমা সীমিত বা প্রসারিত করতে চাইতে পারে। এই লক্ষ্যে, অনেক ভেক্টর তৈরি করা হয়েছে যেখানে অন্তঃসত্ত্বা ভাইরাল এনভেলপ প্রোটিনগুলি অন্য ভাইরাস থেকে এনভেলপ প্রোটিন বা চিমেরিক প্রোটিন দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়েছে। এই ধরনের চিমেরাতে ভাইরাল প্রোটিনের সেই অংশগুলি থাকে যা ভিরিওনের মধ্যে অন্তর্ভুক্ত করার জন্য প্রয়োজনীয় এবং সেইসাথে নির্দিষ্ট পোষক কোষ প্রোটিনের সাথে মিথস্ক্রিয়া করার জন্য ক্রমগুলি থাকে। যে ভাইরাসগুলিতে খামের প্রোটিনগুলি বর্ণিত হিসাবে প্রতিস্থাপিত হয়েছে সেগুলিকে সিউডোটাইপ্ড ভাইরাস হিসাবে উল্লেখ করা হয়। উদাহরণস্বরূপ, জিন থেরাপি ট্রায়ালগুলিতে ব্যবহারের জন্য সবচেয়ে জনপ্রিয় রেট্রোভাইরাল ভেক্টর হল লেন্টিভাইরাস সিমিয়ান ইমিউনোডেফিসিয়েন্সি ভাইরাস যা ভেসিকুলার স্টোমাটাইটিস ভাইরাস থেকে এনভেলপ প্রোটিন, জি-প্রোটিনের সাথে লেপযুক্ত। এই ভেক্টরটিকে ভিএসভি জি-সিউডোটাইপড লেন্টিভাইরাস হিসাবে উল্লেখ করা হয় এবং এটি প্রায় সর্বজনীন কোষগুলিকে সংক্রামিত করে। এই ক্রান্তীয়তা ভিএসভি জি-প্রোটিনের বৈশিষ্ট্য যা দিয়ে এই ভেক্টরটি আবৃত থাকে। ভাইরাল ভেক্টরের ট্রপিজমকে এক বা কয়েকটি পোষক কোষের জনসংখ্যার মধ্যে সীমাবদ্ধ করার জন্য অনেক প্রচেষ্টা করা হয়েছে। এই অগ্রগতি তুলনামূলকভাবে অল্প পরিমাণে ভেক্টরের পদ্ধতিগত প্রশাসনের অনুমতি দেবে। অফ-টার্গেট কোষ পরিবর্তনের সম্ভাবনা সীমিত হবে এবং চিকিৎসা সম্প্রদায়ের অনেক উদ্বেগ দূর হবে। ক্রান্তিবাদকে সীমাবদ্ধ করার বেশিরভাগ প্রচেষ্টায় অ্যান্টিবডির টুকরো বহনকারী চিমেরিক খাম প্রোটিন ব্যবহার করা হয়েছে। এই ভেক্টরগুলি "ম্যাজিক বুলেট" জিন থেরাপির বিকাশের জন্য দুর্দান্ত প্রতিশ্রুতি দেখায়। প্রতিলিপি-সক্ষম ভেক্টর ONYX-015 নামক একটি প্রতিলিপি-সক্ষম ভেক্টর টিউমার কোষের প্রতিলিপিতে ব্যবহৃত হয়। দেখা গেছে যে ই1বি-55কেডি ভাইরাল প্রোটিনের অনুপস্থিতিতে অ্যাডেনোভাইরাস সংক্রামিত পি53 (+) কোষগুলির খুব দ্রুত অ্যাপোপটোসিস ঘটায় এবং এর ফলে ভাইরাসের বংশবৃদ্ধি নাটকীয়ভাবে হ্রাস পায় এবং পরবর্তী কোনও বিস্তার ঘটে না। অ্যাপোপটোসিস মূলত ই. আই. এ-র পি300 নিষ্ক্রিয় করার ক্ষমতার ফল ছিল। পি53 (-) কোষে, এপোপটোসিসের ক্ষেত্রে ই1বি 55কেডি মুছে ফেলার কোনও পরিণতি নেই, এবং ভাইরাল প্রতিলিপি বন্য-ধরনের ভাইরাসের অনুরূপ, যার ফলে কোষগুলির ব্যাপক হত্যা ঘটে। একটি প্রতিলিপি-ত্রুটিযুক্ত ভেক্টর কিছু প্রয়োজনীয় জিন মুছে দেয়। এই মুছে ফেলা জিনগুলি এখনও শরীরে প্রয়োজনীয় তাই এগুলি একটি সহায়ক ভাইরাস বা একটি ডিএনএ অণু দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়। সিস এবং ট্রান্স-অ্যাক্টিং উপাদানগুলি প্রতিলিপি-ত্রুটিযুক্ত ভেক্টরগুলিতে সর্বদা একটি "স্থানান্তর গঠন" থাকে। স্থানান্তর গঠন জিনটিকে ট্রান্সডিউস বা "ট্রান্সজিন" বহন করে। স্থানান্তর গঠনটি ভাইরাল জিনোমের সাধারণ কার্যকারিতার জন্য প্রয়োজনীয় ক্রমগুলিও বহন করেঃ প্যাকেজিং ক্রম, প্রতিলিপির জন্য পুনরাবৃত্তি করে এবং যখন প্রয়োজন হয়, বিপরীত প্রতিলিপির প্রাইমিং। এগুলি সিস-অ্যাক্টিং উপাদান হিসাবে চিহ্নিত, কারণ এগুলি ভাইরাল জিনোম এবং আগ্রহের জিনের মতো ডিএনএর একই অংশে থাকতে হবে। ট্রান্স-অ্যাক্টিং উপাদানগুলি হল ভাইরাল উপাদান, যা একটি ভিন্ন ডিএনএ অণুর উপর এনকোড করা যেতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, ভাইরাল কাঠামোগত প্রোটিনগুলি ভাইরাল জিনোমের চেয়ে আলাদা জিনগত উপাদান থেকে প্রকাশ করা যেতে পারে। হারপিস সিমপ্লেক্স ভাইরাস হারপিস সিমপ্লেক্স ভাইরাস একটি হিউম্যান নিউরোট্রপিক ভাইরাস। এটি বেশিরভাগ স্নায়ুতন্ত্রে জিন স্থানান্তরের জন্য পরীক্ষা করা হয়। বন্য ধরনের এইচএসভি-1 ভাইরাস নিউরোনগুলিকে সংক্রামিত করতে এবং পোষক ইমিউন প্রতিক্রিয়া এড়াতে সক্ষম, তবে এখনও পুনরায় সক্রিয় হতে পারে এবং ভাইরাল প্রতিলিপির একটি লাইটিক চক্র তৈরি করতে পারে। অতএব, এইচএসভি-1-এর মিউট্যান্ট স্ট্রেনগুলি ব্যবহার করা সাধারণ যা তাদের প্রতিলিপি করার ক্ষমতার অভাব রয়েছে। যদিও সুপ্ত ভাইরাসটি প্রতিলিপিগতভাবে স্পষ্ট নয়, তবে এর নিউরনের নির্দিষ্ট প্রবর্তক রয়েছে যা স্বাভাবিকভাবে কাজ চালিয়ে যেতে পারে। এইচএসভি-1-এর অ্যান্টিবডি মানুষের মধ্যে সাধারণ, তবে হারপিস সংক্রমণের কারণে জটিলতা কিছুটা বিরল। এনসেফালাইটিসের বিরল ক্ষেত্রে অবশ্যই সতর্কতা অবলম্বন করতে হবে এবং এটি এইচএসভি-2 কে ভাইরাল ভেক্টর হিসাবে ব্যবহার করার জন্য কিছু যৌক্তিকতা প্রদান করে কারণ এতে সাধারণত শরীরের ইউরোজেনিটাল অঞ্চলে স্নায়ুকোষের কোষগুলির জন্য ট্রপিজম থাকে এবং তারপরে মস্তিষ্কে গুরুতর প্যাথলজির হোস্টকে বাঁচাতে পারে। অ-ভাইরাল পদ্ধতিগুলি ভাইরাল পদ্ধতির তুলনায় কিছু সুবিধা উপস্থাপন করে, সাধারণ বড় আকারের উৎপাদন এবং কম পোষক ইমিউনোজেনেসিটি মাত্র দুটি। পূর্বে, নিম্ন মাত্রার সংক্রমণ এবং জিনের অভিব্যক্তি অ-ভাইরাল পদ্ধতিগুলিকে অসুবিধায় ফেলেছিল; তবে, ভেক্টর প্রযুক্তির সাম্প্রতিক অগ্রগতিতে ভাইরাসের মতো সংক্রমণ দক্ষতার অণু এবং কৌশল পাওয়া গেছে। নগ্ন ডি. এন. এ-র ইনজেকশন এটি অ-ভাইরাল সংক্রমণের সবচেয়ে সহজ পদ্ধতি। একটি নগ্ন ডিএনএ প্লাজমিডের ইন্ট্রামাসকুলার ইনজেকশন থেকে পরিচালিত ক্লিনিকাল ট্রায়ালগুলি কিছুটা সাফল্যের সাথে ঘটেছে; তবে, সংক্রমণের অন্যান্য পদ্ধতির তুলনায় অভিব্যক্তিটি খুব কম হয়েছে। প্লাজমিডগুলির সাথে পরীক্ষার পাশাপাশি, নগ্ন পিসিআর পণ্যের সাথে পরীক্ষা করা হয়েছে, যা অনুরূপ বা বৃহত্তর সাফল্য পেয়েছে। নগ্ন ডি. এন. এ-র কোষীয় গ্রহণ সাধারণত অকার্যকর। নগ্ন ডিএনএ গ্রহণের দক্ষতা উন্নত করার উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করে গবেষণার প্রচেষ্টায় বেশ কয়েকটি অভিনব পদ্ধতি পাওয়া গেছে, যেমন ইলেক্ট্রোপোরেশন, সোনোপরেশন এবং একটি "জিন বন্দুক" ব্যবহার, যা উচ্চ চাপের গ্যাস ব্যবহার করে ডিএনএ লেপা সোনার কণাগুলিকে কোষে নিক্ষেপ করে। ডেলিভারি বাড়ানোর জন্য শারীরিক পদ্ধতি বৈদ্যুতিন সংযোজন এমন একটি পদ্ধতি যা কোষের ঝিল্লি জুড়ে ডিএনএ বহন করতে উচ্চ ভোল্টেজের ছোট ডাল ব্যবহার করে। এই শকটি কোষের ঝিল্লিতে ছিদ্রগুলির অস্থায়ী গঠনের কারণ বলে মনে করা হয়, যার ফলে ডিএনএ অণুগুলি অতিক্রম করতে পারে। বৈদ্যুতিন সংযোজন সাধারণত দক্ষ এবং বিভিন্ন ধরনের কোষের বিস্তৃত পরিসর জুড়ে কাজ করে। যাইহোক, ইলেক্ট্রোপোরেশনের পরে কোষের মৃত্যুর উচ্চ হার ক্লিনিকাল অ্যাপ্লিকেশন সহ এর ব্যবহার সীমিত করেছে। আরও সম্প্রতি ইলেক্ট্রন-অ্যাভালাঞ্চ ট্রান্সফেকশন নামে ইলেক্ট্রোপোরেশনের একটি নতুন পদ্ধতি জিন থেরাপি পরীক্ষায় ব্যবহার করা হয়েছে। একটি উচ্চ-ভোল্টেজ প্লাজমা স্রাব ব্যবহার করে, খুব ছোট (মাইক্রোসেকেন্ড) পালসের পরে ডিএনএ দক্ষতার সাথে বিতরণ করা হয়েছিল। বৈদ্যুতিন সংযোগের তুলনায়, কৌশলটির ফলে দক্ষতা ব্যাপকভাবে বৃদ্ধি পায় এবং কোষের ক্ষতি কম হয়। জিন বন্দুক কণা বোমাবর্ষণ বা জিন বন্দুকের ব্যবহার হল ডিএনএ সংক্রমণের আরেকটি শারীরিক পদ্ধতি। এই কৌশলে, ডি. এন. এ সোনার কণাগুলির উপর লেপ করা হয় এবং একটি যন্ত্রে লোড করা হয় যা কোষে ডি. এন. এ-র অনুপ্রবেশ অর্জনের জন্য একটি শক্তি তৈরি করে, স্বর্ণকে একটি "স্টপিং" ডিস্কে রেখে যায়। সোনোপরেশন কোষগুলিতে ডিএনএ সরবরাহ করতে অতিস্বনক ফ্রিকোয়েন্সি ব্যবহার করে। অ্যাকোস্টিক ক্যাভিটেশন প্রক্রিয়াটি কোষের ঝিল্লিকে ব্যাহত করে এবং ডিএনএকে কোষে যেতে দেয় বলে মনে করা হয়। চৌম্বকীয় সংক্রমণ নামক একটি পদ্ধতিতে, ডিএনএ চৌম্বকীয় কণায় জটিল হয় এবং ডিএনএ কমপ্লেক্সগুলিকে একটি কোষের মনোলেয়ারের সংস্পর্শে আনার জন্য টিস্যু কালচার ডিশের নীচে একটি চুম্বক স্থাপন করা হয়। হাইড্রোডায়নামিক ডেলিভারিতে ভাস্কুলেচারে (যেমন নিম্নতর ভেনা কাভা, পিত্তনালী বা লেজের শিরায়) একটি দ্রবণের উচ্চ পরিমাণের দ্রুত ইনজেকশন জড়িত থাকে। দ্রবণে অণু থাকে যা কোষে ঢোকানো হয়, যেমন ডিএনএ প্লাজমিড বা এসআইআরএনএ, এবং কোষে এই অণুগুলির স্থানান্তর ইনজেকশনের দ্রবণের উচ্চ পরিমাণের কারণে সৃষ্ট উচ্চতর হাইড্রোস্ট্যাটিক চাপ দ্বারা সহায়তা করা হয়। ডেলিভারি বাড়ানোর রাসায়নিক পদ্ধতি অলিগোনিউক্লিওটাইড জিন থেরাপিতে সিন্থেটিক অলিগোনিউক্লিওটাইডের ব্যবহার হল রোগ প্রক্রিয়ার সাথে জড়িত জিনগুলিকে নিষ্ক্রিয় করা। বেশ কয়েকটি পদ্ধতি রয়েছে যার মাধ্যমে এটি অর্জন করা যায়। একটি কৌশল ত্রুটিপূর্ণ জিনের প্রতিলিপি ব্যাহত করতে লক্ষ্য জিনের জন্য নির্দিষ্ট অ্যান্টিসেন্স ব্যবহার করে। আরেকটি ত্রুটিপূর্ণ জিনের এম. আর. এন. এ প্রতিলিপিতে নির্দিষ্ট অনন্য ক্রমগুলি বিভক্ত করার জন্য কোষকে সংকেত দেওয়ার জন্য সি. আর. এন. এ নামক আর. এন. এ-র ছোট অণু ব্যবহার করে, ত্রুটিপূর্ণ এম. আর. এন. এ-র অনুবাদকে ব্যাহত করে এবং তাই জিনের অভিব্যক্তি। আরও একটি কৌশল লক্ষ্য জিনের প্রতিলিপি সক্রিয় করার জন্য প্রয়োজনীয় ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরগুলির জন্য ডাবল স্ট্রেন্ডেড অলিগোডিওক্সিন্যুক্লিয়োটাইডগুলি ব্যবহার করে। ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরগুলি ত্রুটিযুক্ত জিনের প্রবর্তকের পরিবর্তে ডিকয়গুলির সাথে আবদ্ধ হয়, যা লক্ষ্য জিনের ট্রান্সক্রিপশনকে হ্রাস করে, অভিব্যক্তি হ্রাস করে। উপরন্তু, একক আটকে থাকা ডিএনএ অলিগোনিউক্লিওটাইডগুলি একটি মিউট্যান্ট জিনের মধ্যে একক ক্ষার পরিবর্তন নির্দেশ করতে ব্যবহৃত হয়েছে। অলিগোনিউক্লিওটাইড একটি কেন্দ্রীয় বেস, টার্গেট বেস ব্যতীত লক্ষ্য জিনের পরিপূরকতার সাথে অ্যানিল করার জন্য ডিজাইন করা হয়েছে, যা মেরামতের জন্য টেমপ্লেট বেস হিসাবে কাজ করে। এই কৌশলটিকে অলিগোনিউক্লিওটাইড মধ্যস্থ জিন মেরামত, লক্ষ্যযুক্ত জিন মেরামত বা লক্ষ্যযুক্ত নিউক্লিওটাইড পরিবর্তন হিসাবে উল্লেখ করা হয়। লাইপোপ্লেক্স কোষে নতুন ডিএনএ সরবরাহের উন্নতির জন্য, ডিএনএকে অবশ্যই ক্ষতি এবং ইতিবাচক চার্জ থেকে রক্ষা করতে হবে। প্রাথমিকভাবে, অ্যানায়োনিক এবং নিরপেক্ষ লিপিডগুলি সিন্থেটিক ভেক্টরের জন্য লাইপোপ্লেক্স নির্মাণের জন্য ব্যবহার করা হত। যাইহোক, তাদের সাথে সামান্য বিষাক্ততা যুক্ত হওয়া সত্ত্বেও, তারা শরীরের তরলগুলির সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ এবং টিস্যু নির্দিষ্ট হওয়ার জন্য তাদের মানিয়ে নেওয়ার সম্ভাবনা ছিল; তারা জটিল এবং উত্পাদন করতে সময়সাপেক্ষ তাই ক্যাশনিক সংস্করণগুলিতে মনোযোগ দেওয়া হয়েছিল। ক্যাটিয়ানিক লিপিডগুলি, তাদের ধনাত্মক চার্জের কারণে, প্রথমে নেতিবাচকভাবে চার্জ করা ডিএনএ অণুগুলিকে ঘনীভূত করতে ব্যবহার করা হত যাতে ডিএনএ লাইপোসোমে আবদ্ধ হতে পারে। পরে দেখা যায় যে ক্যাশিয়ানিক লিপিডের ব্যবহার লাইপোপ্লেক্সের স্থায়িত্বকে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করে। এছাড়াও তাদের চার্জের ফলস্বরূপ, ক্যাশিয়ানিক লাইপোসোমগুলি কোষের ঝিল্লির সাথে মিথস্ক্রিয়া করে, এন্ডোসাইটোসিসকে ব্যাপকভাবে প্রধান পথ হিসাবে বিশ্বাস করা হত যার মাধ্যমে কোষগুলি লাইপোপ্লেক্স গ্রহণ করে। এন্ডোসোমগুলি এন্ডোসাইটোসিসের ফলাফল হিসাবে গঠিত হয়, তবে, যদি জিনগুলি এন্ডোসোমের ঝিল্লি ভেঙে সাইটোপ্লাজমে মুক্তি না পায় তবে সেগুলি লাইসোসোমে পাঠানো হবে যেখানে সমস্ত ডিএনএ তাদের কার্যকারিতা অর্জনের আগেই ধ্বংস হয়ে যাবে। এটিও দেখা গেছে যে যদিও ক্যাশনিক লিপিডগুলি নিজেরাই ডিএনএকে লাইপোসোমে ঘনীভূত এবং আবদ্ধ করতে পারে, তবে "এন্ডোসোমাল এস্কেপিং"-এর ক্ষেত্রে ক্ষমতার অভাবের কারণে সংক্রমণ দক্ষতা খুব কম। যাইহোক, যখন সহায়ক লিপিডগুলি (সাধারণত বৈদ্যুতিন-নিরপেক্ষ লিপিড, যেমন ডিওপিই) লাইপোপ্লেক্স গঠনের জন্য যুক্ত করা হয়, তখন অনেক বেশি সংক্রমণ দক্ষতা লক্ষ্য করা যায়। পরে, এটি আবিষ্কৃত হয় যে নির্দিষ্ট লিপিডগুলির এন্ডোসোমাল ঝিল্লিকে অস্থিতিশীল করার ক্ষমতা রয়েছে যাতে এন্ডোসোম থেকে ডিএনএ বেরিয়ে আসতে সহায়তা করে, তাই সেই লিপিডগুলিকে ফিউজোজেনিক লিপিড বলা হয়। যদিও ক্যাশনিক লাইপোসোমগুলি জিন বিতরণ ভেক্টরের বিকল্প হিসাবে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়েছে, ক্যাশনিক লিপিডগুলির একটি ডোজ নির্ভর বিষাক্ততাও দেখা গেছে যা তাদের থেরাপিউটিক ব্যবহারকে সীমাবদ্ধ করতে পারে। লাইপোপ্লেক্সের সবচেয়ে সাধারণ ব্যবহার হল ক্যান্সার কোষে জিন স্থানান্তর, যেখানে সরবরাহকৃত জিনগুলি কোষে টিউমার দমনকারী নিয়ন্ত্রণ জিন সক্রিয় করে এবং অনকোজিনের ক্রিয়াকলাপ হ্রাস করে। সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে লাইপোপ্লেক্সগুলি শ্বাসযন্ত্রের এপিথেলিয়াল কোষগুলিকে সংক্রামিত করতে কার্যকর। পলিমারসোম হল লাইপোসোমের সিন্থেটিক সংস্করণ (লিপিড দ্বিস্তরীয় ভেসিকেল), যা অ্যাম্ফিফিলিক ব্লক কপোলিমার দিয়ে তৈরি। এগুলি হাইড্রোফিলিক বা হাইড্রোফোবিক উপাদানগুলিকে আবদ্ধ করতে পারে এবং কোষে ডিএনএ, প্রোটিন বা ওষুধের মতো পণ্য সরবরাহ করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। লাইপোসোমের তুলনায় পলিমারসোমের সুবিধাগুলির মধ্যে রয়েছে বৃহত্তর স্থিতিশীলতা, যান্ত্রিক শক্তি, রক্ত সঞ্চালনের সময় এবং সঞ্চয় ক্ষমতা। পলিপ্লেক্স-ডি. এন. এ সহ পলিমারের জটিলতাকে পলিপ্লেক্স বলা হয়। বেশিরভাগ পলিপ্লেক্স ক্যাটিয়ানিক পলিমার নিয়ে গঠিত এবং তাদের গঠন আয়নিক মিথস্ক্রিয়া দ্বারা স্ব-সমাবেশের উপর ভিত্তি করে। পলিপ্লেক্স এবং লাইপোপ্লেক্সের ক্রিয়া পদ্ধতির মধ্যে একটি গুরুত্বপূর্ণ পার্থক্য হল যে পলিপ্লেক্সগুলি সরাসরি তাদের ডিএনএ লোড সাইটোপ্লাজমে ছেড়ে দিতে পারে না। ফলস্বরূপ, নিষ্ক্রিয় অ্যাডেনোভাইরাসের মতো এন্ডোসোম-লাইটিক এজেন্টগুলির সাথে সহ-সংক্রমণ প্রয়োজন ছিল কণা গ্রহণের সময় তৈরি এন্ডোসাইটিক ভেসিকল থেকে ন্যানো পার্টিকল পালানোর সুবিধার্থে। যাইহোক, ডিএনএ যে প্রক্রিয়াগুলির মাধ্যমে এন্ডোলাইসোসোমাল পথ থেকে বেরিয়ে আসতে পারে সেগুলি সম্পর্কে আরও ভাল ধারণা, অর্থাৎ। প্রোটন স্পঞ্জ প্রভাব, পলিমার মেরুদণ্ডে প্রোটনযোগ্য অবশিষ্টাংশের অন্তর্ভুক্তির মতো নতুন পলিমার সংশ্লেষণ কৌশলকে ট্রিগার করেছে এবং পলিকেশন-ভিত্তিক সিস্টেমের উপর গবেষণাকে পুনরুজ্জীবিত করেছে। তাদের কম বিষাক্ততা, উচ্চ লোডিং ক্ষমতা এবং ফ্যাব্রিকেশন সহজতার কারণে, পলিশেনিক ন্যানোক্যারিয়ারগুলি তাদের প্রতিদ্বন্দ্বী যেমন ভাইরাল ভেক্টরগুলির তুলনায় দুর্দান্ত প্রতিশ্রুতি প্রদর্শন করে যা উচ্চ ইমিউনোজেনেসিটি এবং সম্ভাব্য কার্সিনোজেনেসিটি দেখায় এবং লিপিড-ভিত্তিক ভেক্টর যা ডোজ নির্ভরতা বিষাক্ততার কারণ হয়। পলিইথাইলিনিমাইন এবং চিটোসান পলিমারিক বাহকগুলির মধ্যে রয়েছে যা জিন ডেলিভারি থেরাপিউটিক্সের বিকাশের জন্য ব্যাপকভাবে অধ্যয়ন করা হয়েছে। সম্ভাব্য জিন বাহকদের গ্রন্থাগারে পলি (বিটা-অ্যামিনো এস্টার) এবং পলিফসফোরামিডেটের মতো অন্যান্য পলিকেশনিক বাহক যুক্ত করা হচ্ছে। পলিমার এবং কপোলিমারের বিভিন্নতা ছাড়াও, এই পলিমারিক ন্যানো-বাহকগুলির আকার, আকৃতি, পৃষ্ঠের রসায়ন নিয়ন্ত্রণের সহজতা তাদের লক্ষ্য করার ক্ষমতা এবং বর্ধিত ব্যাপ্তিযোগ্যতা এবং ধরে রাখার প্রভাবের সুবিধা নিতে সহায়তা করে। ডেনড্রিমার হল গোলাকার আকৃতির একটি অত্যন্ত শাখাযুক্ত ম্যাক্রোমলিকিউল। কণার পৃষ্ঠটি বিভিন্ন উপায়ে কার্যকরী হতে পারে এবং ফলস্বরূপ গঠনের অনেক বৈশিষ্ট্য তার পৃষ্ঠ দ্বারা নির্ধারিত হয়। বিশেষ করে একটি ক্যাশনিক ডেনড্রিমার নির্মাণ করা সম্ভব, অর্থাৎ। একটি ধনাত্মক পৃষ্ঠ আধান সহ। যখন ডি. এন. এ বা আর. এন. এ-র মতো জেনেটিক উপাদানের উপস্থিতিতে, চার্জ পরিপূরকতা ক্যাশনিক ডেনড্রিমারের সাথে নিউক্লিক অ্যাসিডের একটি অস্থায়ী সংযোগের দিকে পরিচালিত করে। তার গন্তব্যে পৌঁছানোর পরে ডেনড্রিমার-নিউক্লিক অ্যাসিড কমপ্লেক্সটি এন্ডোসাইটোসিসের মাধ্যমে কোষে নিয়ে যাওয়া হয়। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে ট্রান্সফেকশন এজেন্টগুলির জন্য মানদণ্ড হল ক্যাটিয়ানিক লিপিড। এই প্রতিযোগিতামূলক বিকারকগুলির সীমাবদ্ধতার মধ্যে রয়েছেঃ কিছু কোষের প্রকার সংক্রমণ করার ক্ষমতার অভাব, শক্তিশালী সক্রিয় লক্ষ্যকরণ ক্ষমতার অভাব, প্রাণী মডেলের সাথে অসঙ্গতি এবং বিষাক্ততা। ডেনড্রিমারগুলি শক্তিশালী সমযোজী গঠন এবং অণু কাঠামোর উপর চরম নিয়ন্ত্রণ প্রদান করে, এবং তাই আকার। এগুলি একসাথে বিদ্যমান পদ্ধতির তুলনায় আকর্ষণীয় সুবিধা দেয়। ডেনড্রিমার উৎপাদন ঐতিহাসিকভাবে একটি ধীর এবং ব্যয়বহুল প্রক্রিয়া যার মধ্যে অসংখ্য ধীর প্রতিক্রিয়া রয়েছে, একটি বাধা যা তাদের বাণিজ্যিক বিকাশকে মারাত্মকভাবে হ্রাস করেছে। মিশিগান-ভিত্তিক সংস্থা ডেনড্রাইটিক ন্যানোটেকনোলজিস গতিবিদ্যা চালিত রসায়ন ব্যবহার করে ডেনড্রিমার উৎপাদনের একটি পদ্ধতি আবিষ্কার করেছে, এমন একটি প্রক্রিয়া যা কেবল তিন মাত্রায় খরচ কমায়নি, প্রতিক্রিয়া সময়ও এক মাসের বেশি থেকে কয়েক দিনে কমিয়ে এনেছে। এই নতুন "প্রাইস্টার" ডেনড্রিমারগুলি বিশেষভাবে একটি ডিএনএ বা আরএনএ পেলোড বহন করার জন্য তৈরি করা যেতে পারে যা কম বা কোনও বিষাক্ততা ছাড়াই উচ্চ দক্ষতায় কোষগুলিকে সংক্রমণ করে। অজৈব ন্যানো কণা অজৈব ন্যানো কণা, যেমন সোনা, সিলিকা, আয়রন অক্সাইড (উদা. ম্যাগনেটোফেকশন) এবং ক্যালসিয়াম ফসফেটগুলি জিন সরবরাহ করতে সক্ষম বলে প্রমাণিত হয়েছে। অজৈব ভেক্টরের কিছু সুবিধা হল তাদের সঞ্চয় স্থায়িত্ব, কম উৎপাদন খরচ এবং প্রায়শই সময়, কম ইমিউনোজেনেসিটি এবং মাইক্রোবিয়াল আক্রমণের প্রতিরোধ। 100 এনএম-এর কম ন্যানোসাইজড পদার্থগুলি ডিএনএ বা আরএনএ-কে দক্ষতার সাথে আটকে রাখে এবং অবক্ষয় ছাড়াই এন্ডোসোম থেকে পালাতে দেয়। অজৈব পদার্থগুলি তাদের বর্ধিত ঘনত্ব এবং কালচার খাবারের গোড়ায় অগ্রাধিকারের অবস্থানের কারণে সংযুক্ত কোষের লাইনের জন্য উন্নত ইন ভিট্রো ট্রান্সফেকশন প্রদর্শন করতে দেখা গেছে। কোয়ান্টাম বিন্দুগুলিও সফলভাবে ব্যবহার করা হয়েছে এবং একটি স্থিতিশীল ফ্লুরোসেন্স মার্কারের সাথে জিন থেরাপির সংযোগের অনুমতি দেয়। ইঞ্জিনিয়ারড জৈব ন্যানো পার্টিকেলগুলিও বিকাশের অধীনে রয়েছে, যা জিন এবং থেরাপিউটিক এজেন্টগুলির সহ-বিতরণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। সেল-পেনেট্রেটিং পেপটাইড সেল-পেনেট্রেটিং পেপটাইড (সিপিপি), যা পেপটাইড ট্রান্সডাকশন ডোমেন (পিটিডি) নামেও পরিচিত, ছোট পেপটাইড (<40 অ্যামিনো অ্যাসিড) যা কোষের ঝিল্লির মধ্য দিয়ে দক্ষতার সাথে যায় এবং বিভিন্ন অণুর সাথে সমযোজী বা অ-সমযোজীভাবে আবদ্ধ থাকে, এইভাবে এই অণুগুলিকে কোষে প্রবেশ করতে সহায়তা করে। কোষের প্রবেশ প্রাথমিকভাবে এন্ডোসাইটোসিস দ্বারা ঘটে তবে অন্যান্য প্রবেশ প্রক্রিয়াও বিদ্যমান। সি. পি. পি-র কার্গো অণুগুলির উদাহরণগুলির মধ্যে রয়েছে নিউক্লিক অ্যাসিড, লাইপোসোম এবং কম আণবিক ওজনের ওষুধ। সিপিপি কার্গোকে সিপিপি সিকোয়েন্সের মধ্যে স্থানীয়করণ ক্রম অন্তর্ভুক্ত করে নির্দিষ্ট কোষের অর্গানেলে পরিচালিত করা যেতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, পারমাণবিক স্থানীয়করণ ক্রমগুলি সাধারণত সিপিপি পণ্যসম্ভারকে নিউক্লিয়াসে নিয়ে যাওয়ার জন্য ব্যবহৃত হয়। মাইটোকন্ড্রিয়ায় দিকনির্দেশনার জন্য, একটি মাইটোকন্ড্রিয়াল টার্গেটিং সিকোয়েন্স ব্যবহার করা যেতে পারে; এই পদ্ধতিটি প্রোটোফেকশনে ব্যবহৃত হয় (একটি কৌশল যা কোষের মাইটোকন্ড্রিয়ায় বিদেশী মাইটোকন্ড্রিয়াল ডিএনএ ঢোকানোর অনুমতি দেয়)। হাইব্রিড পদ্ধতি জিন স্থানান্তরের প্রতিটি পদ্ধতিতে ত্রুটি থাকার কারণে, কিছু হাইব্রিড পদ্ধতি তৈরি করা হয়েছে যা দুই বা ততোধিক কৌশলকে একত্রিত করে। ভাইরোসোমগুলি একটি উদাহরণ; তারা একটি নিষ্ক্রিয় এইচআইভি বা ইনফ্লুয়েঞ্জা ভাইরাসের সাথে লাইপোসোমগুলিকে একত্রিত করে। শুধুমাত্র ভাইরাল বা লাইপোসোমাল পদ্ধতির তুলনায় শ্বাসযন্ত্রের এপিথেলিয়াল কোষে এটি আরও কার্যকর জিন স্থানান্তর করতে দেখা গেছে। অন্যান্য পদ্ধতির মধ্যে রয়েছে ক্যাটিয়ানিক লিপিড বা হাইব্রিডাইজিং ভাইরাসের সঙ্গে অন্যান্য ভাইরাল ভেক্টরের মিশ্রণ। আরও দেখুন জিনগত প্রকৌশলের জিনোসোম (লাইপোপ্লেক্স) কৌশল রূপান্তর ট্রান্সফেকশন রেফারেন্স ফলিত জিনতত্ত্ব জৈবিক নীতিশাস্ত্র জৈবপ্রযুক্তি চিকিৎসা জিনতত্ত্ব আণবিক জীববিজ্ঞান জিন বিতরণ উদীয়মান প্রযুক্তি