FLP-FRT recombination
জেনেটিক্সে, এফএলপি-এফআরটি পুনঃসংযোগ একটি সাইট-নির্দেশিত পুনঃসংযোগ প্রযুক্তি, যা ভিভোতে নিয়ন্ত্রিত পরিস্থিতিতে কোনও জীবের ডিএনএ পরিচালনা করতে ক্রমবর্ধমানভাবে ব্যবহৃত হয়। এটি ক্রি-লক্স রিকম্বিনেশনের অনুরূপ, তবে এতে বেকারের ইস্ট স্যাকারোমাইসেস সেরেভিসিয়ার 2 মাইক্রো প্লাসমিড থেকে প্রাপ্ত রিকম্বিনেজ ফ্লিপেজ (এফএলপি) দ্বারা শর্ট ফ্লিপেজ রিকগনিশন টার্গেট (এফআরটি) সাইটগুলির মধ্যে সিকোয়েন্সের পুনঃসংযোগ জড়িত। 34 বিপি ন্যূনতম এফআরটি সাইট সিকোয়েন্সের ক্রম 5 '3' রয়েছে যার জন্য ফ্লিপেজ (এফএলপি) 13-বিপি 5 '-জিএএজিটিটিসিটিএটিটিসি-3' উভয় বাহুতে 8 বিপি স্পেসারের পাশে আবদ্ধ হয়, অর্থাৎ। বিপরীত দিকে সাইট-নির্দিষ্ট পুনর্মিলন (ক্রসওভারের অঞ্চল)। এফ. আর. টি-মধ্যস্থ ফাটলটি উপরের স্ট্র্যান্ডের অসমমিত 8 বিপি কোর অঞ্চল (5 '3') থেকে ঠিক সামনে এবং নীচের স্ট্র্যান্ডের এই ক্রমের পিছনে ঘটে। বেশ কয়েকটি বৈকল্পিক এফ. আর. টি সাইট বিদ্যমান, তবে পুনর্মিলন সাধারণত দুটি অভিন্ন এফ. আর. টি-র মধ্যে ঘটতে পারে তবে সাধারণত অ-অভিন্ন ("ভিন্ন-নির্দিষ্ট") এফ. আর. টি-র মধ্যে নয়। জৈব কার্যকারিতা খামিরের মধ্যে, এই উৎসেচকটি বিরল ভুল বিভাজনের ঘটনাগুলির কারণে 2 মাইক্রো প্লাসমিড অনুলিপি সংখ্যায় হ্রাস পায়। এটি ডিএনএ প্রতিলিপির সময় 2 মাইক্রো প্লাজমিডের উপর দুটি বিপরীত পুনরাবৃত্তির মধ্যে পুনর্মিলন ঘটিয়ে তা করে। এটি একটি প্রতিলিপি কাঁটার দিক পরিবর্তন করে, যার ফলে একক সূচনায় একাধিক রাউন্ড অনুলিপি করা হয়। এফ. আর. টি সাইট সিকোয়েন্স সেনেকফ এট আল-এর রূপান্তর। (1987) এফ. আর. টি-র মধ্যে নিউক্লিওটাইড প্রতিস্থাপন কীভাবে এফ. এল. পি-মধ্যস্থ পুনর্মিলনের কার্যকারিতাকে প্রভাবিত করে তা তদন্ত করে। লেখকরা এক বা উভয় এফ. আর. টি সাইটে বেস প্রতিস্থাপন প্ররোচিত করেছেন এবং সাইট-নির্দিষ্ট পুনর্মিলন পর্যবেক্ষণের জন্য প্রয়োজনীয় এফ. এল. পি-র ঘনত্ব পরীক্ষা করেছেন। প্রতিটি ক্ষার প্রতিস্থাপন এফ. আর. টি সাইটের মধ্যে তেরোটি নিউক্লিওটাইডের প্রত্যেকটিতে করা হয়েছিল (উদাহরণস্বরূপ জি থেকে এ, টি এবং সি)। প্রথমত, লেখকরা দেখিয়েছেন যে এফ. আর. টি ক্রমের মধ্যে বেশিরভাগ মিউটেশন ন্যূনতম প্রভাব সৃষ্টি করে যদি দুটি সাইটের মধ্যে কেবল একটির মধ্যে উপস্থিত থাকে। যদি উভয় স্থানের মধ্যে মিউটেশন ঘটে, তবে এফএলপি-র দক্ষতা নাটকীয়ভাবে হ্রাস পায়। দ্বিতীয়ত, লেখকরা তথ্য সরবরাহ করেছেন যার জন্য নিউক্লিওটাইডগুলি এফএলপি-র বন্ধন এবং স্থান-নির্দিষ্ট পুনর্মিলনের কার্যকারিতার জন্য সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ। যদি উভয় এফ. আর. টি সাইটে প্রথম নিউক্লিওটাইড একটি সাইটোসিনে (জি থেকে সি) প্রতিস্থাপিত হয়, তৃতীয় নিউক্লিওটাইড একটি থাইমিন (এ থেকে টি) প্রতিস্থাপিত হয়, অথবা সপ্তম নিউক্লিওটাইড একটি অ্যাডেনোসিনের (জি থেকে এ) প্রতিস্থাপিত হয়, তাহলে এফএলপি-মধ্যস্থ সাইট-নির্দিষ্ট পুনর্মিলনের কার্যকারিতা 100 গুণেরও বেশি হ্রাস পায়। যদিও এফ. আর. টি সাইটগুলির মধ্যে শুধুমাত্র একটিতে পূর্বোক্ত যে কোনও নিউক্লিওটাইডের বেস প্রতিস্থাপনের ফলে কার্যকারিতা যথাক্রমে দশগুণ, দশগুণ এবং পাঁচগুণ হ্রাস পেয়েছে। ক্যাপিটালাইজড নিউক্লিওটাইডগুলিতে বেস প্রতিস্থাপনের ফলে এফএলপি-মধ্যস্থ সাইট-নির্দিষ্ট পুনর্মিলনের সর্বাধিক হ্রাস ঘটে (ওয়াইল্ডটাইপ এক্স মিউট্যান্ট এবং মিউট্যান্ট এক্স মিউট্যান্ট): 5 '3' অনেক উপলব্ধ নির্মাণের মধ্যে একটি অতিরিক্ত বাহু সিকোয়েন্স (5 '-3') অন্তর্ভুক্ত রয়েছে একটি বেস জোড়া আপস্ট্রিম উপাদান থেকে দূরে এবং একই অভিযোজনেঃ 5 '3' এই বিভাগটি এক্সসিশনের জন্য বিতরণযোগ্য তবে একীকরণের জন্য প্রয়োজনীয়, রিকম্বিনেজ-মধ্যস্থ ক্যাসেট এক্সচেঞ্জ সহ। যেহেতু পুনঃসংযোগ ক্রিয়াকলাপ একটি নির্বাচিত অঙ্গকে লক্ষ্যবস্তু করা যেতে পারে, বা নিম্ন স্তরের পুনঃসংযোগ ক্রিয়াকলাপ কেবলমাত্র কোষের একটি উপসেটের ডিএনএকে ধারাবাহিকভাবে পরিবর্তন করতে ব্যবহার করা যেতে পারে, তাই বহু-কোষীয় জীবের মধ্যে জেনেটিক মোজাইক তৈরি করতে এফএলপি-এফআরটি ব্যবহার করা যেতে পারে। এই প্রযুক্তি ব্যবহার করে, একটি জিনের ক্ষতি বা পরিবর্তন একটি নির্দিষ্ট আগ্রহের লক্ষ্যে অধ্যয়ন করা যেতে পারে, এমনকি এমন ক্ষেত্রেও যেখানে পরীক্ষামূলক প্রাণীরা অন্যান্য অঙ্গগুলিতে এই জিনের ক্ষতি থেকে বাঁচতে পারে না (স্থানিক নিয়ন্ত্রণ)। একটি জিন পরিবর্তনের প্রভাব সময়ের সাথে সাথে অধ্যয়ন করা যেতে পারে, বিকাশের দেরিতে পুনঃসংযোগ কার্যকলাপকে ট্রিগার করার জন্য একটি ইন্ডুসিবল প্রবর্তক ব্যবহার করে (সাময়িক নিয়ন্ত্রণ)-এটি পরিবর্তনকে বাধা দেয়। এফএলপি-র জৈব রাসায়নিক কাঠামো এবং ক্রিয়ার প্রক্রিয়া জৈব রাসায়নিকভাবে প্রাসঙ্গিক কাঠামো এবং সক্রিয় সাইট এফএলপি প্রোটিন, অনেকটা ক্রি-এর মতো, একটি টাইরোসিন পরিবার-নির্দিষ্ট সাইট-নির্দিষ্ট রিকম্বিনেজ। রিকম্বিনেজের এই পরিবারটি একটি প্রকার আইবি টোপোআইসোমরেজ পদ্ধতির মাধ্যমে তার কাজ সম্পাদন করে যার ফলে ডিএনএর দুটি পৃথক স্ট্র্যান্ডের পুনর্মিলন ঘটে। পুনঃসংযোগ একটি পুনরাবৃত্ত দুই ধাপের প্রক্রিয়া দ্বারা সঞ্চালিত হয়। প্রাথমিক পদক্ষেপটি হলিডে জংশন ইন্টারমিডিয়েট তৈরির কারণ হয়। দ্বিতীয় ধাপটি দুটি পরিপূরক স্ট্র্যান্ডের ফলস্বরূপ পুনঃসংযোগকে উৎসাহিত করে। তাদের পারিবারিক নাম থেকে বোঝা যায়, একটি অত্যন্ত সংরক্ষিত টাইরোসিন নিউক্লিওফাইল ডিএনএ স্ট্র্যান্ডগুলিকে বিভক্ত করে। টাইরোসিনের নিউক্লিওফিলিক বৈশিষ্ট্য আক্রমণ করে এবং ডিএনএ বিভাজন বিন্দুতে 3 '-ফসফেটের সাথে আবদ্ধ হয়। বিভক্ত ডি. এন. এ-র ফলস্বরূপ 5 '-হাইড্রক্সিল গ্রুপ নিউক্লিওফাইল হিসাবে কাজ করে এবং পরিপূরকভাবে বিভক্ত ডি. এন. এ স্ট্র্যান্ডে 3'-ফসফেটকে আক্রমণ করে, যার ফলে সফল পুনর্মিলন ঘটে। টাইরোসিনের অবশিষ্টাংশের বাইরে একটি সংরক্ষিত অনুঘটক পেন্টাড থাকে। এই পেন্টাড একটি লাইসিন (লাইসবটা), দুটি আর্জিনিন (আর্গ 1 এবং 2), একটি হিস্টিডাইন (হিস-2) এবং একটি হিস্টিডাইন/ট্রিপ্টোফান (হিস/টিআরপি-3) নিয়ে গঠিত যা এফএলপি এবং ক্রি-এর সক্রিয় স্থানের জন্য অবশিষ্টাংশের একটি বাধ্যতামূলক এবং অত্যন্ত সংরক্ষিত নক্ষত্রপুঞ্জ নিয়ে গঠিত (অন্যান্য আইবি টিপিওসোমেরেস সহ)। এই অন্যান্য অবশিষ্টাংশগুলি ডিএনএ স্ট্র্যান্ডের উপর এফএলপি বাঁধাই এবং অবস্থানের সঠিক অভিযোজনের জন্য গুরুত্বপূর্ণ। এফএলপি-মধ্যস্থ সাইট-নির্দিষ্ট পুনর্মিলনের প্রয়োগ প্রাথমিক সমস্যা থার্মোলেবিলিটি এফএলপি-এফআরটি পুনর্মিলনের প্রাথমিক প্রয়োগ স্তন্যপায়ী প্রাণীদের মধ্যে কাজ করেনি। এফএলপি প্রোটিন থার্মোলেবিল (উচ্চ তাপমাত্রায় বিকৃত) ছিল এবং তাই এই মডেল সিস্টেমগুলির উচ্চতর শরীরের তাপমাত্রার কারণে স্তন্যপায়ী মডেলে কার্যকর ছিল না। যাইহোক, পেটেন্ট এবং ক্রি-লক্স পুনঃসংযোগ ব্যবহারের উপর বিধিনিষেধের কারণে, আরও তাপস্থায়ী এফএলপি-এফআরটি ক্যাসেট তৈরির জন্য প্রচুর আগ্রহ নেওয়া হয়েছিল। প্রথম ফলাফলগুলির মধ্যে কিছু বুচোলজ এবং অন্যান্যরা তৈরি করেছিলেন। (1997) এসচেরিচিয়া কোলিতে সাইক্লিং মিউটেজেনেসিস ব্যবহার করে। তাদের গবেষণায়, লেখকরা দুটি প্লাজমিড দিয়ে ই. কোলাই কোষকে সংক্রমিত করেছেনঃ একটি আরাবিনোজ প্রোমোটারের নিচের দিকে এলোমেলোভাবে পরিবর্তিত এফএলপি প্রোটিনের জন্য কোডিং এবং অন্যটিতে এফআরটি ক্যাসেটের মধ্যে একটি ল্যাকজেড জিন প্রোমোটার রয়েছে। ই. কোলাই 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস এবং 40 ডিগ্রি সেলসিয়াসে আরাবিনোজ প্লেটে জন্মায় এবং যদি পুনরায় সংমিশ্রণ ঘটে তবে ল্যাকজেড অভিব্যক্তিটি হ্রাস পাবে এবং উপনিবেশগুলি সাদা দেখাবে। প্রতিটি প্রজন্ম থেকে সাদা উপনিবেশগুলি নির্বাচন করা হয়েছিল এবং আট প্রজন্ম ধরে একই পূর্ববর্তী তাপমাত্রায় একটি নতুন আরাবিনোজ প্লেটে চাষ করা হয়েছিল। ওয়েস্টার্ন-ব্লটিং দ্বারা পুনঃসংযোগ নিশ্চিত হওয়ার পর এবং পরিবর্তিত এফএলপি জিনগুলি ক্রমবদ্ধ করার পর, এই অষ্টম প্রজন্মের এফএলপি প্রোটিন (এফএলপিই) স্তন্যপায়ী কোষ সংস্কৃতিতে রূপান্তরিত হয় এবং স্তন্যপায়ী কোষে পুনঃসংযোগ নিশ্চিত করা হয়। এফএলপি-র এই সংস্করণে শুধুমাত্র 4টি অ্যামিনো অ্যাসিড প্রতিস্থাপন রয়েছেঃ পি2এস, এল33এস, ওয়াই108এন এবং এস294পি। জেনেটিক মোজাইকের উৎপাদন একটি জীবের মধ্যে ঘটে যখন অনুরূপ কোষের প্রকারগুলি নির্দিষ্ট লোকিতে ভিন্ন জিনোটাইপের কারণে বিভিন্ন ফেনোটাইপ প্রকাশ করে। সহজ কথায় বলতে গেলে, এটি ঘটে যখন একটি জীবের মধ্যে বিভিন্ন জিনোটাইপ থাকে, যা সাধারণত প্রকৃতিতে বিরল। তবে, এফএলপি-এফআরটি পুনর্মিলন ব্যবহার করে এটি সহজেই (এবং সমস্যাযুক্তভাবে) তৈরি করা যেতে পারে। যদি একটি কোষের মধ্যে দুটি ভিন্ন এফ. আর. টি সাইট উপস্থিত থাকে এবং এফ. এল. পি যথাযথ ঘনত্বে উপস্থিত থাকে, তবে এফ. আর. টি ক্যাসেটটি দুটি এফ. আর. টি সাইটের মধ্যে নিষ্কাশিত এবং সন্নিবেশ করা অব্যাহত থাকবে। এই প্রক্রিয়াটি অব্যাহত থাকবে যতক্ষণ না এফএলপি প্রোটিনগুলি প্রয়োজনীয় ঘনত্বের নিচে নেমে আসে যার ফলে কোনও জীবের মধ্যে বিভিন্ন জিনোটাইপযুক্ত কোষ তৈরি হয়। এটি ফলের মাছি থেকে ইঁদুর পর্যন্ত দেখা গেছে এবং নির্দিষ্ট ক্রোমোজোম (সোমাটিক এবং লিঙ্গ) বা কোষের প্রকারের (সোমাটিক এবং জার্মলাইন) বিরুদ্ধে নির্বিচারে। ডাইমেকি এট আল প্রকাশের আগে কোষের বংশ নির্ধারণ। (1998), এন2 প্রবর্তক ব্যবহার করে ইঁদুরের স্নায়ুকোষীয় প্রজননের কোষ-ফলের ম্যাপিংয়ের জন্য ক্রি রিকম্বিনেজ ব্যবহার করা হয়েছিল। এইভাবে, ডাইমেকি এবং অন্যান্যদের লেখকরা। (1998) তত্ত্ব দিয়েছিলেন যে এফএলপি রিকম্বিনেজকে ইঁদুরের ক্রি রিকম্বিনেজের মতো একই কার্যকারিতার সাথে একইভাবে ব্যবহার করা যেতে পারে। লেখকরা দুটি ট্রান্সজেনিক মাউস লাইন তৈরি করেছেনঃ একটি নিউরোনাল ডব্লিউএনটি1:: এফএলপি ফিউশন লাইন এবং একটি লাইন যা টিএম1সিডব্লিউআর-এর 18তম এক্সনের পাশে এফআরটি ক্যাসেট ধারণ করে। লেখকরা এই এক্সনটিকে উত্তোলনের জন্য বেছে নিয়েছিলেন কারণ যদি এটি উত্তোলিত হয়, তবে এর ফলাফল একটি নাল ফেনোটাইপে পরিণত হয়। লেখকরা দুটি লাইনকে মেলান এবং বংশধরদের উৎসর্গ করার আগে বংশধরদের প্রাপ্তবয়স্ক হওয়ার অনুমতি দেন। স্নায়ুকোষ, পেশী, আন্ত্রিক এবং লেজের টিস্যুতে আর. এন. এ নিষ্কাশন করা হয়েছিল। রিভার্স-ট্রান্সক্রিপশন পিসিআর এবং নর্দান ব্লটিং মস্তিষ্কের টিস্যুতে প্রচুর পরিমাণে এবং পেশী টিস্যুতে মাঝারিভাবে (পেশীর মধ্যে স্কোয়ান কোষের কারণে) টিএম1সিডব্লিউআর-এর 18তম এক্সনের ছেদন নিশ্চিত করেছে। যেমনটা আশা করা হয়েছিল, অন্যান্য টিস্যুতে ছেদন দেখা যায়নি। লেখকরা দেখেছেন যে, কোষ-হার নির্ধারণে এফএলপি পুনঃসংযোগের দক্ষতা ক্রি পুনঃসংযোগের তুলনায় সমান, যদি ভালো না হয়। ড্রোসোফিলা মেলানোগাস্টারে (ফলের মাছি) আজ অবধি, ডি. মেলানোগাস্টারে বহুবার এফএলপি রিকম্বিনেজ ব্যবহার করা হয়েছে। ডি. মেলানোগাস্টারে এফএলপি রিকম্বিনেজের সাথে ক্রি রিকম্বিনেজের তুলনা ফ্রিকেনহাউস এট আল দ্বারা প্রকাশিত হয়েছিল। (2015)। ফ্রিকেনহাউস এট আল-এর লেখকরা। (2015)-এর দুটি উদ্দেশ্য ছিলঃ এফএলপি রিকম্বিনেজ "নক-আউট"-এর কার্যকারিতাকে ক্রি রিকম্বিনেজ "নক-আউট" এবং আরএনএআই নকডাউনের সাথে চিহ্নিত করা এবং তুলনা করা এবং ডি. মেলানোগাস্টারের নিউরন এবং পেশী টিস্যুতে এফইউএস-এর ফ্লাই অর্থোলগ ক্যাবেজা (ক্যাজ)-এর কার্যকারিতা প্রকাশ করা। মানুষের মধ্যে অ্যামায়োট্রফিক ল্যাটেরাল স্ক্লেরোসিস (এএলএস) এবং ফ্রন্টোটেম্পোরাল ডিমেনশিয়ায় এফইউএস দৃঢ়ভাবে জড়িত। লেখকরা একটি এলাভ-গ্যাল4/ইউএএস-এফএলপি বা ক্রি সিস্টেম ব্যবহার করেছেন বিশেষ করে নিউরনে রিকম্বিনেজ প্রকাশ করতে এবং একটি এমইএফ2-গ্যাল4/ইউএএস-এফএলপি বা ক্রি সিস্টেম ব্যবহার করেছেন বিশেষ করে পেশীতে এটি প্রকাশ করতে। লেখকরা এই উপসংহারে পৌঁছেছেন যে, এফএলপি রিকম্বিনেজ "নক-আউট" সরঞ্জামটি আরএনএআই এবং ক্রে রিকম্বিনেজ উভয়ের চেয়ে বেশি কার্যকর, যা ক্রি প্রোটিন এবং আরএনএআই প্রতিলিপি উভয় ক্ষেত্রেই দেখা ফুটো অভিব্যক্তির অভাবের কারণে নির্দিষ্ট টিস্যু বা কোষের রেখায় নির্দিষ্ট জিনগুলিকে ছিটকে দেওয়ার উদ্দেশ্যে। এছাড়াও, লেখকরা ক্রে প্রোটিনের একটি বিষাক্ততা প্রত্যক্ষ করেছেন যা এফএলপি প্রোটিনের সাথে দেখা যায় না। ডানিও রেরিওতে (জেব্রাফিশ) এফএলপিই রিকম্বিনেজ সিস্টেমের কার্যকারিতা জেব্রাফিশে ওয়াং এট আল দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। (2009)। ভ্রূণগুলি, যা একটি পেশী-নির্দিষ্ট প্রবর্তকের নিচের দিকে এফ. আর. টি-পার্শ্বযুক্ত বর্ধিত সবুজ ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিন (ই. জি. এফ. পি)-এর জন্য অর্ধবৃত্তাকার ছিল, এফ. এল. পি. ই প্রোটিন দিয়ে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। এফএলপিই ছাড়া, এই ভ্রূণগুলি সমস্ত পেশী টিস্যুতে ই. জি. এফ. পি প্রকাশ করা উচিত, এবং যদি একটি বন্য ধরনের স্ট্র্যান্ডের সাথে অতিক্রম করা হয়, ফলস্বরূপ বংশধরের 50 শতাংশ পেশী টিস্যুতে ই. জি. এফ. পি প্রকাশ করা উচিত। এফএলপিই দিয়ে ইনজেকশন দেওয়া ভ্রূণগুলি পেশী টিস্যুতে ইজিএফপি-র অভিব্যক্তি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছিল এবং মোজাইকিজমও দেখা গিয়েছিল। যখন এই ভ্রূণগুলি প্রাপ্তবয়স্ক হয়, তখন তাদের একটি বন্য ধরনের স্ট্রেনের সাথে সঙ্গম করা হয় এবং ফলস্বরূপ আঁকড়ে ধরে থাকা বংশধরগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল যা পেশী টিস্যুতে ই. জি. এফ. পি প্রকাশ করে (<আই. ডি1>)। এই ফলাফলগুলি দেখায় যে, এফএলপিই কেবল দৈহিক কোষেই অত্যন্ত কার্যকর নয়, এটি জেব্রাফিশের জীবাণুতেও অত্যন্ত কার্যকর। উদ্ভিদগুলিতে আরাবিডোপসিস থালিয়ানা এবং টোব্যাকো ফাইটোসেন্সরগুলিতে "ফাইটোসেন্সর" বা "সেন্টিনেল" তৈরি করা হয় জিনগতভাবে পরিবর্তিত উদ্ভিদ যা জৈব বা অজৈব দূষকের উপস্থিতির কথা জানাতে পারে। এই ইঞ্জিনিয়ারড উদ্ভিদগুলির উৎপাদনে প্রচুর কৃষি এবং পরীক্ষাগার প্রতিশ্রুতি রয়েছে। যাইহোক, একটি উপযুক্ত রিপোর্টার ভেক্টর তৈরি করা সমস্যাযুক্ত বলে প্রমাণিত হয়েছে। সিস-নিয়ন্ত্রক উপাদানগুলি উদ্ভিদে জিনের প্রতিলিপি সক্রিয়করণে একটি প্রধান ভূমিকা পালন করে এবং অনেকগুলি ভালভাবে বোঝা যায় না। অনেক ফাইটোসেন্সর হয় তাদের রিপোর্টার জিন প্রকাশ করে না বা সিন্থেটিক প্রোমোটারদের কারণে মিথ্যা-পজিটিভ রিপোর্ট করে। রাও ও অন্যান্যদের লেখকরা। (2010) একটি অত্যন্ত দক্ষ ফাইটোসেন্সর উৎপাদনের জন্য এফএলপি রিকম্বিনেজ টুল ব্যবহার করেছে। লেখকরা এফএলপি উৎপাদন প্ররোচিত করার জন্য একটি হিট শক প্রবর্তক ব্যবহার করেছিলেন যখন একটি এফআরটি-পার্শ্বযুক্ত ভেক্টর বিটা-গ্লুকুরোনিডেস জিন (জিইউএস) থেকে সিএএমভি 35এস প্রবর্তককে পৃথক করেছিল। যখন গাছগুলি হিট-শকের সংস্পর্শে আসে, তখন এফএলপি-ইনডাকশন এফআরটি-পার্শ্বযুক্ত ভেক্টরের ছেদের দিকে পরিচালিত করে, কার্যকরভাবে জিএএস জিনটিকে সিএএমভি 35এস প্রবর্তকের সরাসরি নীচের দিকে সরিয়ে দেয়। জি. ইউ. এস সক্রিয় হওয়ার ফলে উদ্ভিদের পাতাগুলি সবুজ থেকে নীল রঙে পরিবর্তিত হয়; এইভাবে, ফাইটোসেন্সর কার্যকরভাবে মডেল সিস্টেমে চাপের কথা জানায়! গেট-ওয়ে-রেডি ইন্ডুসিবল এম. আই. আর. এন. এ (জিআর. আই. এম) এক্সপ্রেশন সিস্টেমের উৎপাদন আর. এন. এ ইন্টারফেরেন্স (আর. এন. এ. আই) ইউক্যারিওটসে জিন এবং সম্ভাব্য জিন নকআউটের অভিব্যক্তিতে একটি দৃষ্টান্তমূলক পরিবর্তন ঘটিয়েছে। জিআরআইএম এক্সপ্রেশন সিস্টেম তৈরির আগে, আরএনএআই ভেক্টর তৈরি করা ব্যয়বহুল এবং সময়সাপেক্ষ ছিল। ভেক্টরগুলি ঐতিহ্যবাহী অনুলিপি এবং আটকানো আণবিক ক্লোনিং পদ্ধতি দ্বারা উত্পাদিত হয়েছিল। গারউইক-কোপেন্স এবং অন্যান্য। (2011) আর. এন. এ. আই ভেক্টর উৎপাদনের জন্য অনেক বেশি কার্যকর পদ্ধতি তৈরি করেছে যেখানে আর. এন. এ. আই-এর অভিব্যক্তি ক্রি-রিকম্বিনেজ ব্যবহার করে নক-ইন এবং এফ. এল. পি-রিকম্বিনেজ ব্যবহার করে নক-আউট করা যেতে পারে। নতুন জিআরআইএম এক্সপ্রেশন সিস্টেম কৃত্রিম আরএনএআই গঠনযুক্ত এক্সপ্রেশন ভেক্টরের অনেক দ্রুত প্রজন্মের অনুমতি দেয়। লেখকরা দেখিয়েছেন যে তাদের অভিব্যক্তি ব্যবস্থা মানব ভ্রূণ কিডনি (এইচইকে) কোষে বেশ কার্যকরভাবে কাজ করে, যা আণবিক গবেষণায় একটি সাধারণ মানব অমর কোষ লাইন। আরও দেখুন সাইট-নির্দিষ্ট রিকম্বিনেজ প্রযুক্তি রিকম্বিনেজ-মধ্যস্থ ক্যাসেট এক্সচেঞ্জ ক্রি রিকম্বিনেজ ক্রি-লক্স রিকম্বিনেশন জেনেটিক রিকম্বিনেশন হোমোলোগাস রিকম্বিনেশন রেফারেন্স এক্সটার্নাল লিঙ্ক এফএলপি-এফআরটি রিকম্বিনেজঃ মেকানিজম অফ অ্যাকশন ভিডিও অফ দ্য ইউটিলাইজেশন এফএলপি-এফআরটি রিকম্বিনেজ ইন ডি. মেলানোস্টার ফটোরিসেপ্টর অ্যাপ্লিকেশন অফ এফএলপি ইন দ্য মিউট্যাজেনেসিস অফ ভিব্রিও কলেরা জেনেটিক্স টেকনিকস মলিকুলার জেনেটিক্স