title: Οδηγία 2000/33/ΕΚ της Επιτροπής, της 25ης Απριλίου 2000, σχετικά με την προσαρμογή, για εικοστή έβδομη φορά, στην τεχνική πρόοδο της οδηγίας 67/548/ΕΟΚ του Συμβουλίου περί προσεγγίσεως των νομοθετικών, κανονιστικών και διοικητικών διατάξεων που αφορούν την ταξινόμηση, συσκευασία και επισήμανση των επίκινδυνων ουσιών (Κείμενο που παρουσιάζει ενδιαφέρον για τον ΕΟΧ.)

eurovoc_concepts:
analytical chemistry
approximation of laws
chemical product
cytology
toxicology

text: L 136/90 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm 8. 6. 2000 ODGCIA 2000/33/EJ SGR EPISQOPGR sgy 25gy Apqik(cid:223)ot 2000 rvesij(cid:220) le sgm pqoraqloc(cid:222), cia eijors(cid:222) (cid:221)bdolg uoq(cid:220), rsgm sevmij(cid:222) pq(cid:252)odo sgy odgc(cid:223)ay 67/548/EOJ sot Rtlbotk(cid:223)ot peq(cid:223) pqorecc(cid:223)rexy sxm molohesij(cid:254)m, jamomirsij(cid:254)m jai dioijgsij(cid:254)m dias(cid:220)nexm pot auoqo(cid:253)m sgm sanim(cid:252)lgrg, rtrjetar(cid:223)a jai epir(cid:222)lamrg sxm epij(cid:223)mdtmxm otri(cid:254)m (*) (Je(cid:223)lemo pot paqotri(cid:220)fei emdiau(cid:221)qom cia som EOV) G EPISQOPG SXM ETQXPA(cid:218)JXM JOIMOSGSXM, ENEDXRE SGM PAQOTRA ODGCIA: ‚vomsay tp(cid:252)wg: ¢qhqo 1 sg rtmh(cid:222)jg cia sgm (cid:223)dqtrg sgy Etqxpaœj(cid:222)y Joim(cid:252)sgsay, sgm odgc(cid:223)a 67/548/EOJ sot Rtlbotk(cid:223)ot, sgy 27gy Iotm(cid:223)ot 1967, peq(cid:223) pqorecc(cid:223)rexy sxm molohesij(cid:254)m, jamomirsij(cid:254)m jai dioijgsij(cid:254)m sanim(cid:252)lgrg, rtrjetar(cid:223)a jai dias(cid:220)nexm epijimd(cid:253)mxm otri(cid:254)m (1), (cid:252)pxy sqopopoi(cid:222)hgje epir(cid:222)lamrg sxm seketsa(cid:223)a ap(cid:252) sgm odgc(cid:223)a 1999/33/EJ sot Etqxpaœjo(cid:253) Joimobot- k(cid:223)ot jai sot Rtlbotk(cid:223)ot (2), jai id(cid:223)xy so (cid:220)qhqo 28, pot auoqo(cid:253)m rsgm Ejsil(cid:254)msay sa aj(cid:252)kotha: (1) (2) ma pqoraqlorse(cid:223) rsgm Epib(cid:220)kkesai sevmij(cid:222) pq(cid:252)odo so paq(cid:220)qsgla V sgy odgc(cid:223)ay 67/548/EOJ cia som jahoqirl(cid:252) sxm leh(cid:252)dxm pqordioqirlo(cid:253) sxm utrijo-vglij(cid:254)m idios(cid:222)sxm, sgy sonij(cid:252)sgsay jai sgy oijosonij(cid:252)sgsay sxm otri(cid:254)m jai sxm rjetarl(cid:220)sxm. So (cid:220)qhqo 7 paq(cid:220)cqauoy 2 sgy odgc(cid:223)ay 86/609/EOJ sot Rtlbotk(cid:223)ot, sgy 24gy Moelbq(cid:223)ot 1986, cia sgm pqor(cid:221)ccirg sxm molohesij(cid:254)m, jamomirsij(cid:254)m jai dioijgsij(cid:254)m dias(cid:220)nexm sxm jqas(cid:254)m lek(cid:254)m rvesij(cid:220) le sgm pqorsar(cid:223)a sxm f(cid:254)xm pot vqgri- lopoio(cid:253)msai cia peiqalasijo(cid:253)y jai (cid:220)kkoty epirsglomijo(cid:253)y rjopo(cid:253)y (3), pqobk(cid:221)pei (cid:252)si dem ejseko(cid:253)msai peiq(cid:220)lasa le pei- qalas(cid:252)fxa eu(cid:252)rom so epidixj(cid:252)lemo apos(cid:221)kerla d(cid:253)masai ma episetvhe(cid:223) le (cid:220)kkg epirsglomij(cid:220) apodejs(cid:222) l(cid:221)hodo pot e(cid:223)mai e(cid:253)koca jai pqajsij(cid:220) diah(cid:221)rilg. (3) ‚votm amapstvhe(cid:223) emakkajsij(cid:221)y peiqalasij(cid:221)y l(cid:221)hodoi pot dem peqikalb(cid:220)motm sg vq(cid:222)rg f(cid:254)xm cia som (cid:221)kecvo sxm vglij(cid:254)m. Ats(cid:221)y oi l(cid:221)hodoi ha pq(cid:221)pei ma eiravho(cid:253)m rso paq(cid:220)qsgla V sgy odgc(cid:223)ay 67/548/EOJ. (4) Sa l(cid:221)sqa pot pqobk(cid:221)pei g paqo(cid:253)ra odgc(cid:223)a e(cid:223)mai r(cid:253)luxma le sg cm(cid:254)lg sgy episqop(cid:222)y cia sgm pqoraqloc(cid:222) rsgm sevmij(cid:222) pqo(cid:252)odo sxm odgci(cid:254)m pot rves(cid:223)fomsai le sgm en(cid:220)keiwg sxm sevmij(cid:254)m uqacl(cid:254)m rso elp(cid:252)qio epijimd(cid:253)mxm otri(cid:254)m jai paqa- rjetarl(cid:220)sxm, Sa je(cid:223)lema rsa paqaqs(cid:222)lasa I jai II sgy paqo(cid:253)ray odgc(cid:223)ay pqo- rs(cid:223)hemsai rso l(cid:221)qoy B sot paqaqs(cid:222)lasoy V sgy odgc(cid:223)ay 67/548/EOJ. ¢qhqo 2 1. Sa jq(cid:220)sg l(cid:221)kg h(cid:221)sotm re irv(cid:253) siy molohesij(cid:221)y, jamomirsij(cid:221)y jai dioijgsij(cid:221)y dias(cid:220)neiy pot e(cid:223)mai apaqa(cid:223)sgsey pqojeil(cid:221)mot ma rtlloquxho(cid:253)m pqoy sgm paqo(cid:253)ra odgc(cid:223)a (cid:221)xy sgm 1g Ojsxbq(cid:223)ot 2001 so aqc(cid:252)seqo. Emgleq(cid:254)motm sgm Episqop(cid:222) rvesij(cid:220). Sa jq(cid:220)sg l(cid:221)kg leqilmo(cid:253)m (cid:254)rse oi dias(cid:220)neiy pot herp(cid:223)fotm rvesij(cid:220) ma peqi(cid:221)votm (cid:222) ma rtmode(cid:253)omsai ap(cid:252) paqapolp(cid:222) rsgm paqo(cid:253)ra odgc(cid:223)a jas(cid:220) sgm ep(cid:223)rglg dglor(cid:223)etr(cid:222) soty. Sa jq(cid:220)sg l(cid:221)kg jahoq(cid:223)- fotm sgm loqu(cid:222) sgy xy (cid:220)mx amauoq(cid:220)y. Sa jq(cid:220)sg l(cid:221)kg joimopoio(cid:253)m rsgm Episqop(cid:222) siy j(cid:253)qiey 2. dias(cid:220)neiy sgy ehmij(cid:222)y moloher(cid:223)ay pot herp(cid:223)fotm rsom sol(cid:221)a sgy paqo(cid:253)ray odgc(cid:223)ay paq(cid:221)vomsay paq(cid:220)kkgka p(cid:223)maja rtrvesirlo(cid:253) lesan(cid:253) sxm dias(cid:220)nexm sgy odgc(cid:223)ay jai sxm amsirso(cid:223)vxy herpif(cid:252)le- mxm ehmij(cid:254)m dias(cid:220)nexm. ¢qhqo 3 G paqo(cid:253)ra odgc(cid:223)a aqv(cid:223)fei ma irv(cid:253)ei sgm sq(cid:223)sg gl(cid:221)qa ap(cid:252) sg dglo- r(cid:223)etr(cid:222) sgy rsgm Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joi- mos(cid:222)sxm. ¢qhqo 4 G paqo(cid:253)ra odgc(cid:223)a apeth(cid:253)mesai rsa jq(cid:220)sg l(cid:221)kg. Bqtn(cid:221)kkey, 25 Apqik(cid:223)ot 2000. Cia sgm Episqop(cid:222) Margot WALLSTR(cid:214)M L(cid:221)koy sgy Episqop(cid:222)y (*) Ejd(cid:252)hgje pqim sgm eijors(cid:222) (cid:221)jsg pqoraqloc(cid:222). (1) EE 196 sgy 16. 8. 1967, r. 1. (2) EE L 199 sgy 30. 7. 1999, r. 57. (3) EE L 358 sgy 18. 12. 1986, r. 1. 8. 6. 2000 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm L 136/91 PAQAQSGLA I «B. 40. DIABQXRG SOT DEQLASOR 1. 1. 1. LEHODOR Eiracxc(cid:222) So Etqxpaœj(cid:252) J(cid:221)msqo Epij(cid:253)qxrgy Emakkajsij(cid:254)m Leh(cid:252)dxm (EJEEL, Joim(cid:252) J(cid:221)msqo Eqetm(cid:254)m, Etqxpaœj(cid:222) Episqop(cid:222)) (cid:221)vei ecjq(cid:223)mei xy epirsglomij(cid:220) (cid:221)cjtqey d(cid:253)o im xisqo dojil(cid:221)y deqlasij(cid:222)y diabqxsij(cid:252)sgsay, sg dojilar(cid:223)a diadeqlij(cid:222)y gkejsqij(cid:222)y ams(cid:223)rsargy (TER (cid:151) transcutaneous electrical resistance) d(cid:221)qlasoy ep(cid:223)ltoy jai dojil(cid:222) pot vqgrilopoie(cid:223) olo(cid:223)xla amhqxp(cid:223)mot d(cid:221)qlasoy (1) (2) (3). G lek(cid:221)sg epij(cid:253)qxrgy sot EJEEL jas(cid:221)deine (cid:252)si jai oi d(cid:253)o dojil(cid:221)y e(cid:223)mai re h(cid:221)rg ma diajq(cid:223)motm le ani(cid:252)pirso sq(cid:252)po cmxrs(cid:221)y diabqxsij(cid:221)y ap(cid:252) lg diabqxsij(cid:221)y otr(cid:223)ey sot d(cid:221)qlasoy. P(cid:221)qam so(cid:253)sot, so pqxs(cid:252)jokko sgy dojil(cid:222)y le olo(cid:223)xla amhq(cid:254)pimot d(cid:221)qlasoy, ep(cid:221)sqewe oqh(cid:222) di(cid:220)jqirg lesan(cid:253) sxm diau(cid:252)qxm bahl(cid:254)m diabqxsij(cid:254)m epidq(cid:220)rexm (cmxrs(cid:220) irvtq(cid:220) diabqxsij(cid:220) sot d(cid:221)qlasoy, R35, jai (cid:220)kka diabqxsij(cid:220) sot d(cid:221)qlasoy R34) (2). G peqicqau(cid:222) sxm d(cid:253)o leh(cid:252)dxm jai g diadijar(cid:223)a sgy dojil(cid:222)y paq(cid:221)vomsai jasxs(cid:221)qx. G epikoc(cid:222) sgy leh(cid:252)dot c(cid:223)mesai le b(cid:220)rg siy eidij(cid:221)y apais(cid:222)reiy jai siy pqosil(cid:222)reiy sot vq(cid:222)rsg. Bk(cid:221)pe ep(cid:223)rgy cemij(cid:222) eiracxc(cid:222) l(cid:221)qoy B. 1. 2. Oqirlo(cid:223) Di(cid:220)bqxrg sot d(cid:221)qlasoy: e(cid:223)mai g pq(cid:252)jkgrg lg amsirsqeps(cid:222)y bk(cid:220)bgy rso deqlasij(cid:252) irs(cid:252) les(cid:220) sgm euaqloc(cid:222) ekecv(cid:252)- lemgy otr(cid:223)ay. 1. 3. Otr(cid:223)ey amauoq(cid:220)y Otdel(cid:223)a, akk(cid:220) bk(cid:221)pe rgle(cid:223)a 1. 5. 3. 4 jai 1. 7. 2. 3. 1. 4. Aqv(cid:222) sgy leh(cid:252)dot (cid:151) Dojilar(cid:223)a diadeqlij(cid:222)y gkejsqij(cid:222)y ams(cid:223)rsargy (TER) d(cid:221)qlasoy ep(cid:223)ltoy So ekecv(cid:252)lemo tkij(cid:252) euaql(cid:252)fesai ep(cid:223) 24 (cid:254)qey jas’ am(cid:254)saso (cid:252)qio rsiy epideqlij(cid:221)y epiu(cid:220)meiey d(cid:223)rjxm d(cid:221)qlasoy pot (cid:221)votm kguhe(cid:223) ap(cid:252) siy doq(cid:221)y meaq(cid:254)m epilt(cid:254)m oi opo(cid:223)oi (cid:221)votm hamasxhe(cid:223) le lg b(cid:220)matro sq(cid:252)po. Sa diabqxsij(cid:220) tkij(cid:220) pqordioq(cid:223)fomsai b(cid:220)rei sgy ijam(cid:252)sgs(cid:220)y soty ma pqojako(cid:253)m ap(cid:254)keia sgy ajeqai(cid:252)sgsay sgy jeqas(cid:223)mgy rsib(cid:220)day jai sgy uqajsij(cid:222)y keisotqc(cid:223)ay, g opo(cid:223)a lesq(cid:220)sai xy le(cid:223)xrg sgy eccemo(cid:253)y diadeqlij(cid:222)y gkejsqij(cid:222)y ams(cid:223)rsargy (TER) re ep(cid:223)peda valgk(cid:252)seqa em(cid:252)y jas(cid:254)sasot oq(cid:223)ot (5 kh) (4) (5). Eqehirsij(cid:220) jai lg eqehirsij(cid:220) tkij(cid:220) dem pqojako(cid:253)m le(cid:223)xrg sgy TER re ep(cid:223)peda valgk(cid:252)seqa sot jasxs(cid:220)sot oq(cid:223)ot. Rsg diadijar(cid:223)a sgy dojil(cid:222)y lpoqe(cid:223) ma emrxlasxhe(cid:223) (cid:221)ma rs(cid:220)dio d(cid:221)rletrgy vqxrsij(cid:222)y cia siy sariemeqc(cid:221)y otr(cid:223)ey jai siy otd(cid:221)seqey oqcamij(cid:221)y em(cid:254)reiy (cia soty oqirlo(cid:253)y bk(cid:221)pe tporgle(cid:223)xrg 6) (cid:254)rse ma leixhe(cid:223) o aqihl(cid:252)y sxm wetdohesij(cid:254)m aposekerl(cid:220)sxm pot kalb(cid:220)momsai le vglij(cid:221)y otr(cid:223)ey atso(cid:253) sot s(cid:253)pot rtcjejqil(cid:221)ma (2) (7). 1. 5. Peqicqau(cid:222) sgy leh(cid:252)dot dojil(cid:222)y (cid:151) dojilar(cid:223)a TER d(cid:221)qlasoy ep(cid:223)ltoy 1. 5. 1. Peiqalas(cid:252)fxa Cia sgm pqoesoilar(cid:223)a sxm d(cid:223)rjxm d(cid:221)qlasoy apaiso(cid:253)msai meaqo(cid:223) (20-23 gleq(cid:254)m) ep(cid:223)ltey (rs(cid:221)kevoy Wistar (cid:222) paq(cid:252)loio). Auaiqe(cid:223)sai epilek(cid:254)y so sq(cid:223)vxla ap(cid:252) sgm peqiov(cid:222) sgy q(cid:220)vgy jai sxm pketq(cid:254)m le lijq(cid:222) ntqirsij(cid:222) lgvam(cid:222) cia f(cid:254)a. Sa peiqalas(cid:252)fxa ejpk(cid:253)momsai jai ruotcc(cid:223)fomsai epilek(cid:254)y em(cid:254) g peqiov(cid:222) elbaps(cid:223)fesai re amsibiosij(cid:252) di(cid:220)ktla (pot peqi(cid:221)vei, ep(cid:223) paqade(cid:223)clasi, rsqepsoltj(cid:223)mg, pemijik(cid:223)mg, vkxqaluaimij(cid:252)kg (cid:222) aluoseqij(cid:223)mg, re jas(cid:220)kkgkey rtcjemsq(cid:254)reiy cia sgm amarsok(cid:222) sgy bajsgqiaj(cid:222)y am(cid:220)pstngy). Sa peiqalas(cid:252)fxa ejpk(cid:253)momsai ej m(cid:221)ot le amsibiosij(cid:220) sgm sq(cid:223)sg (cid:222) s(cid:221)saqsg gl(cid:221)qa le sgm pq(cid:254)sg (cid:221)jpktrg jai vqgrilopoio(cid:253)msai ems(cid:252)y sqi(cid:254)m gleq(cid:254)m (g gkij(cid:223)a sxm peiqalas(cid:252)fxxm dem pq(cid:221)pei ma tpeqba(cid:223)mei siy 31 gl(cid:221)qey cia sgm pqoesoilar(cid:223)a sgy doq(cid:220)y). 1. 5. 2. Pqoesoilar(cid:223)a sxm d(cid:223)rjxm d(cid:221)qlasoy Sa peiqalas(cid:252)fxa hamas(cid:254)momsai le lg b(cid:220)matro sq(cid:252)po. Auaiqe(cid:223)sai so d(cid:221)qla ap(cid:252) sg q(cid:220)vg j(cid:220)he f(cid:254)ot jai apakk(cid:220)rre- sai ap(cid:252) sgm peq(cid:223)rreia k(cid:223)poty le pqorejsij(cid:222) apol(cid:220)jqtmr(cid:222) sot ap(cid:252) so d(cid:221)qla. G doq(cid:220) sopohese(cid:223)sai ep(cid:220)mx ap(cid:252) so (cid:220)jqo rxk(cid:222)ma poktsesqauhxqoaihtkem(cid:223)ot (PTFE) le sq(cid:252)po (cid:254)rse g epiu(cid:220)meia sgy epideql(cid:223)day ma bq(cid:223)rjesai re epau(cid:222) le so rxk(cid:222)ma. So d(cid:221)qla rtcjqase(cid:223)sai rsg h(cid:221)rg sot le sg bo(cid:222)heia ekarsijo(cid:253) dajstk(cid:223)ot O o opo(cid:223)oy rseqe(cid:254)mesai le p(cid:223)erg rso (cid:220)jqo sot rxk(cid:222)ma, em(cid:254) g peq(cid:223)rreia irs(cid:254)m apoj(cid:252)psesai. Oi diars(cid:220)reiy sot rxk(cid:222)ma jai sot dajstk(cid:223)ot paq(cid:221)vomsai rso rv(cid:222)la 1. Rsg rtm(cid:221)veia, g (cid:221)mxrg sot ekarsijo(cid:253) dajstk(cid:223)ot O le so (cid:220)jqo sot rxk(cid:222)ma PTFE rsecamopoie(cid:223)sai le sg bo(cid:222)heia bafek(cid:223)mgy O rxk(cid:222)may rsgq(cid:223)fesai le ekasgqixs(cid:252) ruicjs(cid:222)qa em(cid:252)y tpodov(cid:221)a pot peqi(cid:221)vei di(cid:220)ktla heiijo(cid:253) lacmgr(cid:223)ot (154 mM) (rv(cid:222)la 2). 1. 5. 3. Diadijar(cid:223)a dojil(cid:222)y 1. 5. 3. 1. E u a q l o c (cid:222) s o t e k e c v (cid:252) l e m o t t k i j o (cid:253) Oi tcq(cid:221)y ekecv(cid:252)lemey otr(cid:223)ey (150 (cid:181)l) euaql(cid:252)fomsai rsgm epideqlij(cid:222) epiu(cid:220)meia pot bq(cid:223)rjesai rso erxseqij(cid:252) sot rxk(cid:222)ma (rv(cid:222)la 2). …sam enes(cid:220)fomsai rseqe(cid:220) tkij(cid:220), euaql(cid:252)fesai epaqj(cid:222)y por(cid:252)sgsa rseqeo(cid:253) tkijo(cid:253) rso d(cid:223)rjo (cid:254)rse ma jak(cid:253)psesai so r(cid:253)moko sgy epiu(cid:220)meiay sgy epideql(cid:223)day. Rsg rtm(cid:221)veia, 150 (cid:181)l apiomirl(cid:221)mot meqo(cid:253) pqors(cid:223)hemsai rso rseqe(cid:252) tkij(cid:252) jai oi rxk(cid:222)mey amade(cid:253)omsai (cid:222)pia. Oi ekecv(cid:252)lemey otr(cid:223)ey pq(cid:221)pei ma e(cid:223)mai re l(cid:221)cirsg dtmas(cid:222) epau(cid:222) le so d(cid:221)qla. Cia oqirl(cid:221)ma rseqe(cid:220) ats(cid:252) lpoqe(cid:223) ma episetvhe(cid:223) le h(cid:221)qlamrg rsoty 30 (cid:176)C jas’ am(cid:254)saso (cid:252)qio jai s(cid:222)ng sgy ekecv(cid:252)lemgy otr(cid:223)ay (cid:222) le (cid:220)kerla (cid:254)rse ma kguhe(cid:223) jojjopoigl(cid:221)mo tkij(cid:252) (cid:222) rj(cid:252)mg. L 136/92 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm 8. 6. 2000 Cia j(cid:220)he ekecv(cid:252)lemg otr(cid:223)a vqgrilopoio(cid:253)msai sqeiy d(cid:223)rjoi d(cid:221)qlasoy. Oi ekecv(cid:252)lemey otr(cid:223)ey diasgqo(cid:253)msai re epau(cid:222) le so d(cid:221)qla ep(cid:223) 24 (cid:254)qey (bk(cid:221)pe ep(cid:223)rgy 1. 5. 3. 4). Rsg rtm(cid:221)veia ejpk(cid:253)momsai le ejs(cid:252)netrg sqevo(cid:253)lemot meqo(cid:253) heqlo- jqar(cid:223)ay (cid:221)xy 30 (cid:176)C (cid:221)xy (cid:252)sot apolajqtmho(cid:253)m pk(cid:222)qxy. G apol(cid:220)jqtmrg ekecv(cid:252)lemxm otri(cid:254)m pot (cid:221)votm rseqeopoighe(cid:223) rso erxseqij(cid:252) sot rxk(cid:222)ma e(cid:223)mai dtmas(cid:252)m ma dietjoktmhe(cid:223) le ejs(cid:252)netrg heqlo(cid:253) meqo(cid:253) heqlojqar(cid:223)ay 30 (cid:176)C peq(cid:223)pot. 1. 5. 3. 2. L e s q (cid:222) r e i y T E R G TER lesq(cid:220)sai le sg bo(cid:222)heia c(cid:221)utqay dedol(cid:221)mxm (databridge) pot keisotqce(cid:223) le emakkarr(cid:252)lemo qe(cid:253)la jai valgk(cid:222) s(cid:220)rg (p. v. AIM 401 (cid:222) 6401 (cid:222) ams(cid:223)rsoivg). Pqim ap(cid:252) sg l(cid:221)sqgrg sgy gkejsqij(cid:222)y ams(cid:223)rsargy, ekass(cid:254)mesai g epiuameiaj(cid:222) s(cid:220)rg sot d(cid:221)qlasoy le sgm pqorh(cid:222)jg aiham(cid:252)kgy 70 % rsgm por(cid:252)sgsa pot apaise(cid:223)sai cia ma jaktuhe(cid:223) g epideql(cid:223)da. K(cid:223)ca keps(cid:220) aqc(cid:252)seqa, o rxk(cid:222)may amsirsq(cid:221)uesai cia ma apolajqtmhe(cid:223) g aiham(cid:252)kg jai o irs(cid:252)y emtdas(cid:254)mesai le sgm pqorh(cid:222)jg 3 lk diak(cid:253)lasoy heiijo(cid:253) lacmgr(cid:223)ot (154 mM). Sa gkejsq(cid:252)dia sgy c(cid:221)utqay dedol(cid:221)mxm sopoheso(cid:253)msai re lia ap(cid:252) siy d(cid:253)o pketq(cid:221)y sot d(cid:223)rjot d(cid:221)qlasoy cia sg l(cid:221)sqgrg sgy ams(cid:223)rsargy re kh/d(cid:223)rjo d(cid:221)qlasoy (rv(cid:222)la 2). Oi diars(cid:220)reiy sxm gkejsqod(cid:223)xm jai so l(cid:222)joy sot gkejsqod(cid:223)ot pot bq(cid:223)rjesai j(cid:220)sx ap(cid:252) soty ruicjs(cid:222)qey s(cid:253)pot jqodode(cid:223)kot paq(cid:221)vomsai rso rv(cid:222)la 1. O ruicjs(cid:222)qay sot erxseqijo(cid:253) (vomdqo(cid:253)) gkejsqod(cid:223)ot sopohese(cid:223)sai rsgm joqtu(cid:222) sot rxk(cid:222)ma PTFE jas(cid:220) sg l(cid:221)sqgrg sgy ams(cid:223)rsargy (cid:254)rse ma enaruak(cid:223)fesai g elb(cid:220)psirg rsaheqo(cid:253) sl(cid:222)lasoy sot gkejsqod(cid:223)ot rso di(cid:220)ktla heiijo(cid:253) lacmgr(cid:223)ot. So enxseqij(cid:252) (keps(cid:252)) gkejsq(cid:252)dio sopohese(cid:223)sai ems(cid:252)y sot tpodov(cid:221)a le sq(cid:252)po (cid:254)rse ma ajotlp(cid:220)ei rsom pthl(cid:221)ma sot. G ap(cid:252)rsarg lesan(cid:253) b(cid:220)rgy sot ekgsgqixso(cid:253) ruicjs(cid:222)qa jai sgy b(cid:220)rgy sot rxk(cid:222)ma PTFE diasgqe(cid:223)sai rsaheq(cid:222) (rv(cid:222)la 1) dedol(cid:221)mot (cid:252)si epgqe(cid:220)fei sg kalbam(cid:252)lemg sil(cid:222) sgy ams(cid:223)rsargy. Rglei(cid:254)mesai (cid:252)si am g lesqo(cid:253)lemg sil(cid:222) sgy ams(cid:223)rsargy tpeqba(cid:223)mei sa 20 kh, ats(cid:252) lpoqe(cid:223) ma oue(cid:223)kesai rsgm ekecv(cid:252)lemg otr(cid:223)a pot epijak(cid:253)psei sgm epideqlij(cid:222) epiu(cid:220)meia sot d(cid:223)rjot d(cid:221)qlasoy. Lpoqe(cid:223) ma epiveiqghe(cid:223) apol(cid:220)jqtmrg sgy otr(cid:223)ay ats(cid:222)y le am(cid:220)detrg sot rxk(cid:222)ma PTFE ep(cid:223) 10 detseq(cid:252)kepsa peq(cid:223)pot auo(cid:253) jaktuhe(cid:223) so rs(cid:252)li(cid:252) sot le som pqorsaset(cid:252)lemo le c(cid:220)msi ams(cid:223)veiqa. So di(cid:220)ktla heiijo(cid:253) lacmgr(cid:223)ot apov(cid:253)mesai jai epamakalb(cid:220)mesai g l(cid:221)sqgrg sgy ams(cid:223)rsargy le m(cid:221)o di(cid:220)ktla heiijo(cid:253) lacmgr(cid:223)ot. Oi l(cid:221)rey lesqo(cid:253)lemey sil(cid:221)y TER c(cid:223)momsai apodejs(cid:221)y eu(cid:252)rom oi r(cid:253)cvqom(cid:221)y soty hesij(cid:221)y jai aqmgsij(cid:221)y sil(cid:221)y pot (cid:221)votm pqoj(cid:253)wei cia sgm otr(cid:223)a l(cid:220)qstqa peqijke(cid:223)omsai rsiy apodejs(cid:221)y cia sg l(cid:221)hodo peqiov(cid:221)y gl(cid:254)m. Oi tpodeijmt(cid:252)lemey otr(cid:223)ey l(cid:220)qstqey jai oi ams(cid:223)rsoivey apodejs(cid:221)y peqiov(cid:221)y gl(cid:254)m gkejsqij(cid:222)y ams(cid:223)rsargy cia sgm peqicqau(cid:252)lemg lehodokoc(cid:223)a jai rtrjet(cid:222) (cid:221)votm xy en(cid:222)y: L(cid:220)qstqay Otr(cid:223)a Hesij(cid:252)y Aqmgsij(cid:252)y Tdqovkxqij(cid:252) on(cid:253) (36 %) 10 M Aporsacl(cid:221)mo meq(cid:252) Ped(cid:223)o sil(cid:254)m gkejsqij(cid:222)y ams(cid:223)rsargy (kh) 0,5-1,0 10-25 1. 5. 3. 3. S q o p o p o i g l (cid:221) m g d i a d i j a r (cid:223) a c i a s a r i e m e q c (cid:221) y o t r (cid:223) e y o t d (cid:221) s e q e y o q c a m i j (cid:221) y e m (cid:254) r e i y E(cid:220)m oi sil(cid:221)y TER ekecv(cid:252)lemxm otri(cid:254)m pot elp(cid:223)psotm rsgm jasgcoq(cid:223)a sxm sariemeqc(cid:254)m otri(cid:254)m (cid:222) sxm otd(cid:221)seqxm oqcamij(cid:254)m em(cid:254)rexm e(cid:223)mai lijq(cid:252)seqey ap(cid:252) (cid:222) (cid:223)rey le 5 kh, lpoqe(cid:223) ma pqaclasopoighe(cid:223) ejs(cid:223)lgrg sgy die(cid:223)rdtrgy vqxrsij(cid:222)y rsoty irso(cid:253)y. Le sg diadijar(cid:223)a ats(cid:222) ha pqordioqirse(cid:223) jas(cid:220) p(cid:252)ro sa aposek(cid:221)rlasa e(cid:223)mai wetdohesij(cid:220) (2). 1. 5. 3. 3. 1. Euaqloc(cid:222) jai apol(cid:220)jqtmrg sgy vqxlasij(cid:222)y otr(cid:223)ay rotkuoqodaq(cid:223)mgy B Les(cid:220) sgm aqvij(cid:222) jaseqcar(cid:223)a le sgm ekecv(cid:252)lemg otr(cid:223)a euaql(cid:252)fomsai rsgm epideqlij(cid:222) epiu(cid:220)meia j(cid:220)he d(cid:223)rjot d(cid:221)qlasoy cia d(cid:253)o (cid:254)qey, 150 (cid:181)l diak(cid:253)lasoy rotkuoqodal(cid:223)mgy B re apersacl(cid:221)mo meq(cid:252) 10 % (w/v). Rsg rtm(cid:221)veia, oi d(cid:223)rjoi d(cid:221)qlasoy ejpk(cid:253)momsai le ejs(cid:252)netrg sqevo(cid:253)lemot meqo(cid:253) heqlojqar(cid:223)ay dxlas(cid:223)ot ep(cid:223) 10 detseq(cid:252)kepsa peq(cid:223)pot (cid:254)rse ma apolajqtmhe(cid:223) stv(cid:252)m peq(cid:223)rreia (cid:222) ad(cid:221)rletsg vqxrsij(cid:222). ‚jarsoy sxm d(cid:223)rjxm d(cid:221)qlasoy auaiqe(cid:223)sai ap(cid:252) som rxk(cid:222)ma PTFE jai sopohese(cid:223)sai le uiak(cid:223)dio (p. v. ct(cid:220)kimo uiak(cid:223)dio rpimhgqirlo(cid:253) sxm 20 ml) pot peqi(cid:221)vei apiomirl(cid:221)mo meq(cid:252) (8 ml). Sa uiak(cid:223)dia amade(cid:253)omsai (cid:222)pia ep(cid:223) 5 keps(cid:220) (cid:254)rse ma apolajqtmhe(cid:223) stv(cid:252)m epipk(cid:221)om peq(cid:223)rreia (cid:222) ad(cid:221)rletsg vqxrsij(cid:222). Epamakalb(cid:220)mesai g (cid:221)jpktrg le sqevo(cid:253)lemo meq(cid:252) jai, rsg rtm(cid:221)veia, oi d(cid:223)rjoi d(cid:221)qlasoy auaiqo(cid:253)msai jai sopoheso(cid:253)msa re uiak(cid:223)dia pot peqi(cid:221)votm 5 ml diak(cid:253)lasoy dxdejtkorotkuomijo(cid:253) masq(cid:223)ot (SDS) re aporsacl(cid:221)mo meq(cid:252) 30 % (w/v). Sa uiak(cid:223)dia au(cid:222)momsai pqoy ep(cid:254)arg rsoty 60 (cid:176)C ep(cid:223) lia m(cid:253)vsa. Les(cid:220) sgm ep(cid:254)arg, oi d(cid:223)rjoi d(cid:221)qlsoy auaiqo(cid:253)msai ap(cid:252) sa uiak(cid:223)dia jai apoqq(cid:223)psomsai em(cid:254) so emapol(cid:221)mom di(cid:220)ktla utcojemsqe(cid:223)sai ep(cid:223) 8 keps(cid:220) rsoty 21 (cid:176)C (rvesij(cid:222) utc(cid:252)jemsqoy d(cid:253)malg p 175). Ap(cid:252) sgm tpeqje(cid:223)lemg rsib(cid:220)da kalb(cid:220)mesai 1 ml jai aqai(cid:254)mesai re amakoc(cid:223)a 1 pqoy 5 (x/x) [dgk. 1 ml + 4 ml] le di(cid:220)ktla 30 % (w/v) SDS re apersacl(cid:221)mo meq(cid:252). G opsij(cid:222) ptjm(cid:252)sgsa sot diak(cid:253)lasoy lesq(cid:220)sai rsa 565 nm peq(cid:223)pot. 1. 5. 3. 3. 2. Tpokocirl(cid:252)y sgy peqiejsij(cid:252)sgsay re vqxrsij(cid:222) G peqiejsij(cid:252)sgsa j(cid:220)he d(cid:223)rjot re rotkuoqodal(cid:223)mg B tpokoc(cid:223)fesai le b(cid:220)rg siy sil(cid:221)y opsij(cid:222)y ptjm(cid:252)sgsay (rtmse- kers(cid:222)y loqiaj(cid:222)y ap(cid:252)rbergy sgy rotkuoqodal(cid:223)mgy B rsa 565 nm = 8,7 (cid:215)104 loqiaj(cid:252) b(cid:220)qoy = 580). Pqordioq(cid:223)fesai g peqiejsij(cid:252)sgsa ej(cid:220)rsot d(cid:223)rjot d(cid:221)qlasoy re rotkuoqodal(cid:223)mg B jai jas(cid:252)pim tpokoc(cid:223)fesai g l(cid:221)rg peqiejsij(cid:252)sgsa re vqxrsij(cid:222) cia siy epamak(cid:222)weiy. Oi l(cid:221)rey sil(cid:221)y d(cid:221)rletrgy vqxrsij(cid:222)y c(cid:223)momsai apodejs(cid:221)y eu(cid:252)rom oi r(cid:253)cvqomey sil(cid:221)y pot (cid:221)votm pqoj(cid:253)wei cia sgm otr(cid:223)a l(cid:220)qstqa peqijke(cid:223)omsai rsiy apodejs(cid:221)y cia sg l(cid:221)hodo peqiov(cid:221)y sil(cid:254)m. Oi tpodeijmt(cid:252)lemey apodejs(cid:221)y peqiov(cid:221)y sil(cid:254)m peqiejsijos(cid:222)sxm re vqxrsij(cid:222) cia siy otr(cid:223)ey l(cid:220)qstqey, cia sg lehodokoc(cid:223)a jai cia sg rtrjetar(cid:223)a pot peqicq(cid:220)uomsai (cid:221)votm xy en(cid:222)y: 8. 6. 2000 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm L 136/93 L(cid:220)qstqay Otr(cid:223)a Hesij(cid:252)y Aqmgsij(cid:252)y Tdqovkxqij(cid:252) on(cid:253) (36 %) 10 M Aporsacl(cid:221)mo meq(cid:252) 1. 5. 3. 4. P q (cid:252) r h e s e y p k g q o u o q (cid:223) e y Peqiov(cid:222) sil(cid:254)m peqiejsijos(cid:222)sxm re vqxrsij(cid:222)/ ((cid:181)g/d(cid:223)rjo) 40-100 15-35 Oi ekecv(cid:252)lemey otr(cid:223)ey lpoqo(cid:253)m ma euaql(cid:252)fomsai rsoty d(cid:223)rjoty d(cid:221)qlasoy cia bqav(cid:253)seqa vqomij(cid:220) diars(cid:222)lasa (p. v. 2 (cid:254)qey) pqojeil(cid:221)mot ma emsop(cid:223)fomsai tkij(cid:220) pot pqojako(cid:253)m irvtq(cid:222) di(cid:220)bqxrg. G lek(cid:221)sg epij(cid:253)qxrgy, xrs(cid:252)ro, jas(cid:221)deine (cid:252)si g dojilar(cid:223)a TER od(cid:222)cgre re tpeqejs(cid:223)lgrg sot diabqxsijo(cid:253) dtmalijo(cid:253) diau(cid:252)qxm ekecv(cid:252)lemxm vglij(cid:254)m otri(cid:254)m les(cid:220) sg dias(cid:222)qgr(cid:222) soty re epau(cid:222) le soty d(cid:223)rjoty d(cid:221)qlasoy ep(cid:223) d(cid:253)o (cid:254)qey (2), em(cid:254) le sgm eijorisesq(cid:220)xqg diadijar(cid:223)a ep(cid:221)sqewe som oqh(cid:252) pqordioqirl(cid:252) sxm diabqxsij(cid:254)m jai lg diabqxsij(cid:254)m otri(cid:254)m. Sa vaqajsgqirsij(cid:220) jai oi diars(cid:220)reiy sgy vqgrilopoio(cid:253)lemgy rtrjet(cid:222)y jah(cid:254)y jai g ajokotho(cid:253)lemg peiqalasij(cid:222) diadijar(cid:223)a lpoqo(cid:253)m ma epgqe(cid:220)rotm siy kalbam(cid:252)lemey sil(cid:221)y TER. So jas(cid:254)saso (cid:252)qio di(cid:220)bqxrgy sxm 5 kh tpokoc(cid:223)rsgje le b(cid:220)rg sa dedol(cid:221)ma pot ek(cid:222)uhgram le sg rtcjejqil(cid:221)mg rtrjet(cid:222) jai diadijar(cid:223)a pot peqicq(cid:220)uomsai rsgm paqo(cid:253)ra l(cid:221)hodo. Re peq(cid:223)psxrg rglamsij(cid:222)y lesabok(cid:222)y sxm rtmhgj(cid:254)m sgy dojil(cid:222)y e(cid:223)mai dtmas(cid:252)m ma irv(cid:253)otm diauoqesij(cid:220) (cid:252)qia jai sil(cid:221)y cia soty l(cid:220)qstqey. Xy ej so(cid:253)sot, rtmirs(cid:220)sai diajq(cid:223)bxrg sgy lehodokoc(cid:223)ay jai sot jasxs(cid:220)sot oq(cid:223)ot ams(cid:223)rsargy l(cid:221)rx sgy dienacxc(cid:222)y dojil(cid:254)m le reiq(cid:220) pqos(cid:253)pxm diaktl(cid:220)sxm amauoq(cid:220)y sa opo(cid:223)a ha epikeco(cid:253)m lesan(cid:253) sxm vglij(cid:254)m otri(cid:254)m pot vqgrilopoi(cid:222)hgjam rsg lek(cid:221)sg epij(cid:253)qxrgy (3). 1. 6. Aqv(cid:222) sgy leh(cid:252)dot dojil(cid:222)y (cid:151) Dojilar(cid:223)a le olo(cid:223)xla amhq(cid:254)pimot d(cid:221)qlasoy So ekecv(cid:252)lemo tkij(cid:252) euaql(cid:252)fesai sopij(cid:220) ep(cid:223) 4 (cid:254)qey jas’ am(cid:254)saso (cid:252)qio, rso sqirdi(cid:220)rsaso olo(cid:223)xla amhq(cid:254)pimot d(cid:221)qlasoy so opo(cid:223)o peqikalb(cid:220)mei amapkarhe(cid:223)ra epideql(cid:223)da le keisotqcij(cid:222) jeqas(cid:223)mg rsib(cid:220)da. Sa diabqxsij(cid:220) tkij(cid:220) satsopoio(cid:253)msai le b(cid:220)rg sgm ijam(cid:252)sgs(cid:220) soty ma pqojako(cid:253)m le(cid:223)xrg sgy jtssaqij(cid:222)y bixril(cid:252)sgsay ((cid:252)pxy pqordioq(cid:223)fe- sai p. v. le sg dojilar(cid:223)a amacxc(cid:222)y sot MTT) re ep(cid:223)peda valgk(cid:252)seqa sxm jahoqirh(cid:221)msxm jasxs(cid:220)sxm oq(cid:223)xm re rtcjejqil(cid:221)mey peqi(cid:252)doty (cid:221)jhergy. G aqv(cid:222) sgy dojilar(cid:223)ay rsgq(cid:223)fesai rso rjepsij(cid:252) (cid:252)si diabqxsij(cid:221)y vglij(cid:221)y otr(cid:223)ey e(cid:223)mai eje(cid:223)mey pot lpoqo(cid:253)m ma dieird(cid:253)rotm rsgm jeqas(cid:223)mg rsoib(cid:220)da (le di(cid:220)vtrg (cid:222) di(cid:220)bqxrg) jai e(cid:223)mai aqjo(cid:253)msxy jtssaqosonij(cid:221)y (cid:254)rse ma pqojako(cid:253)m so h(cid:220)maso sxm jtss(cid:220)qxm rsiy tpoje(cid:223)lemey jtssaqij(cid:221)y rsoib(cid:220)dey. 1. 7. Peqicqau(cid:222) sgy leh(cid:252)dot dojil(cid:222)y (cid:151) Dojilar(cid:223)a le olo(cid:223)xla amhq(cid:254)pimot d(cid:221)qlasoy 1. 7. 1. Oloi(cid:254)lasa amhqxp(cid:223)mot d(cid:221)qlasoy Sa oloi(cid:254)lasa amhq(cid:254)pimot d(cid:221)qlasoy e(cid:223)mai dtmas(cid:252)m ma pqo(cid:221)qvomsai ap(cid:252) di(cid:220)uoqey pgc(cid:221)y, akk(cid:220) pq(cid:221)pei ma ijamopoio(cid:253)m oqirl(cid:221)ma jqis(cid:222)qia. So olo(cid:223)xla pq(cid:221)pei ma (cid:221)vei lia keisotqcij(cid:222) jeqas(cid:223)mg rsoib(cid:220)da le tp(cid:252)rsqxla f(cid:254)msxm jtss(cid:220)qxm. G uqajsij(cid:222) keisotqc(cid:223)a sgy jeqas(cid:223)mgy rsoib(cid:220)day pq(cid:221)pei ma e(cid:223)mai epaqj(cid:222)y. Ats(cid:252) lpoqe(cid:223) ma apodeivhe(cid:223) jasa- deijm(cid:253)omsay sgm amsov(cid:222) sot oloi(cid:254)lasoy rsgm jtssaqosonij(cid:252)sgsa les(cid:220) sgm euaqloc(cid:222) otri(cid:254)m oi opo(cid:223)ey e(cid:223)mai cmxrs(cid:221)y xy jtssaqosonij(cid:221)y akk(cid:220) dem diapeqmo(cid:253)m sgm jeqas(cid:223)mg rsoib(cid:220)da. Pq(cid:221)pei ep(cid:223)rgy ma jasadeijm(cid:253)esai (cid:252)si le so olo(cid:223)xla ats(cid:252) kalb(cid:220)momsai amapaqac(cid:254)cila aposek(cid:221)rlasa tp(cid:252) jahoqirl(cid:221)mey peiqalasij(cid:221)y rtmh(cid:222)jey. G bixril(cid:252)sgsa sxm f(cid:254)msxm jtss(cid:220)qxm sot oloi(cid:254)lasoy pq(cid:221)pei ma e(cid:223)mai aqjes(cid:220) twgk(cid:222) (cid:254)rse ma c(cid:223)mesai rau(cid:222)y di(cid:220)jqirg lesan(cid:253) sxm hesij(cid:254)m jai aqmgsij(cid:254)m laqs(cid:253)qxm. G jtssaqij(cid:222) bixril(cid:252)sgsa ((cid:252)pxy pqoj(cid:253)psei, ep(cid:223) paqade(cid:223)c- lasi, ap(cid:252) sg l(cid:221)sqgrg sxm epip(cid:221)dxm sot amavh(cid:221)msoy MTT, dgkad(cid:222) re sil(cid:222) opsij(cid:222)y ptjm(cid:252)sgsay) les(cid:220) sgm (cid:221)jherg re aqmgsij(cid:252) l(cid:220)qstqa pq(cid:221)pei ma elp(cid:223)psei rsa apodejs(cid:220) (cid:252)qia cia so rtcjejqil(cid:221)mo olo(cid:223)xla. Olo(cid:223)xy, oi sil(cid:221)y jtssaqij(cid:222)y bixril(cid:252)sgsay pot kalb(cid:220)momsai le hesij(cid:252) l(cid:220)qstqa ((cid:221)mamsi sxm ams(cid:223)rsoivxm pot kalb(cid:220)momsai le aqmgsij(cid:252) l(cid:220)qstqa) pq(cid:221)pei ma bq(cid:223)rjomsai ems(cid:252)y jahoqirl(cid:221)mxm oq(cid:223)xm. So vqgrilopoio(cid:253)lemo pqocmxrsij(cid:252) loms(cid:221)ko pq(cid:221)pei ma amsapojq(cid:223)mesai apaqais(cid:222)sxy rsa diehm(cid:222) pq(cid:252)stpa epij(cid:253)qxrgy (2). 1. 7. 2. Diadijar(cid:223)a dojil(cid:222)y 1. 7. 2. 1. E u a q l o c (cid:222) s o t e k e c v (cid:252) l e m o t t k i j o (cid:253) Pqojeil(cid:221)mot cia tcq(cid:220) tkij(cid:220), vqgrilopoie(cid:223)sai epaqj(cid:222)y por(cid:252)sgsa ekecv(cid:252)lemgy otr(cid:223)ay (cid:254)rse ma jak(cid:253)psei sgm epiu(cid:220)meia sot d(cid:221)qlasoy (sotk(cid:220)virsom 25 (cid:181)l/cm2. Pqojeil(cid:221)mot cia rseqe(cid:220) tkij(cid:220), vqgrilopoie(cid:223)sai epaqj(cid:222)y por(cid:252)sgsa ekecv(cid:252)lemgy otr(cid:223)ay (cid:254)rse ma jak(cid:253)psei so d(cid:221)qla jai rsg rtm(cid:221)veia g rseqe(cid:220) otr(cid:223)a tcqa(cid:223)mesai cia ma enaruakirse(cid:223) jak(cid:222) epau(cid:222) le so d(cid:221)qla. Eu(cid:252)rom apaise(cid:223)sai, sa rseqe(cid:220) jomiopoio(cid:253)msai pqim ap(cid:252) sgm vqgrilopo(cid:223)gr(cid:222) soty. G l(cid:221)hodoy euaqloc(cid:222)y pq(cid:221)pei ma e(cid:223)mai jas(cid:220)kkgkg cia (cid:221)ma etq(cid:253) u(cid:220)rla vglij(cid:254)m otri(cid:254)m (2). Rso s(cid:221)koy sgy peqi(cid:252)dot (cid:221)jhergy so ekecv(cid:252)lemo tkij(cid:252) ejpk(cid:253)mesai epilek(cid:254)y ap(cid:252) sgm epiu(cid:220)meia sot d(cid:221)qlasoy le akaso(cid:253)vo di(cid:220)ktla. 1. 7. 2. 2. L e s q (cid:222) r e i y s g y j t s s a q i j (cid:222) y b i x r i l (cid:252) s g s a y Cia sg l(cid:221)sqgrg sgy jtssaqij(cid:222)y bixril(cid:252)sgsay lpoqe(cid:223) ma vqgrilopoighe(cid:223) oiad(cid:222)pose epijtqxl(cid:221)mg porosij(cid:222) l(cid:221)hodoy. G pk(cid:221)om vqgrilopoio(cid:253)lemg dojilar(cid:223)a e(cid:223)mai g amacxc(cid:222) MTT g opo(cid:223)a paqe(cid:223)ve ajqib(cid:222) jai amapaqac(cid:254)cila aposek(cid:221)rlasa re di(cid:220)uoqa eqcars(cid:222)qia (2). O d(cid:223)rjoy d(cid:221)qlasoy elbaps(cid:223)fesai re di(cid:220)ktla MTT rtcjemsq(cid:254)rexy 0,3 mg/ml rsoty 20-28 (cid:176)C ep(cid:223) 3 (cid:254)qey. So pqoj(cid:253)psom jtamo(cid:253)m (cid:223)fgla uoqlatam ejvtk(cid:223)fesai (ejv(cid:253)kirg le diak(cid:253)sg) jai g rtcj(cid:221)msqxrg sgy uoqlatam tpokoc(cid:223)fesai le l(cid:221)sqgrg sgy opsij(cid:222)y ptjm(cid:252)sgsay re peqiov(cid:222) l(cid:222)joty j(cid:253)lasoy lesan(cid:253) 545 jai 595 nm. L 136/94 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm 8. 6. 2000 1. 7. 2. 3. P q (cid:252) r h e s e y p k g q o u o q (cid:223) e y So e(cid:223)doy sot vqgrilopoigh(cid:221)msoy oloi(cid:254)lasoy d(cid:221)qlasoy jai so ajqib(cid:221)y pqxs(cid:252)jokko sot vq(cid:252)mot (cid:221)jhergy jai sxm dia- dijari(cid:254)m (cid:221)jpktrgy j. kp. epgqe(cid:220)fotm re lec(cid:220)ko bahl(cid:252) sa rvesij(cid:220) le sgm jtssaqij(cid:222) bixril(cid:252)sgsa aposek(cid:221)rlasa. Rtm(cid:223)rs(cid:220)sai diajq(cid:223)bxrg sgy lehodokoc(cid:223)ay jai sot pqocmxrsijo(cid:253) loms(cid:221)kot l(cid:221)rx sgy dienacxc(cid:222)y dojil(cid:254)m le reiq(cid:220) pqos(cid:253)pxm diaktl(cid:220)sxm amauoq(cid:220)y sa opo(cid:223)a epik(cid:221)comsai lesan(cid:253) sxm vglij(cid:254)m otri(cid:254)m pot vqgrilopoi(cid:222)hgjam rsg lek(cid:221)sg epij(cid:253)qxrgy sot EJEEL (3). G vqgrilopoighe(cid:223)ra l(cid:221)hodoy e(cid:223)mai apaqa(cid:223)sgso ma (cid:221)vei apodeivhe(cid:223) amapa- qac(cid:254)cilg ems(cid:252)y jai lesan(cid:253) sxm diau(cid:252)qxm eqcarsgq(cid:223)xm cia (cid:221)ma etq(cid:253) u(cid:220)rla vglij(cid:254)m otri(cid:254)m, r(cid:253)luxma le sa diehm(cid:222) pq(cid:252)stpa. G l(cid:221)hodoy pq(cid:221)pei ma amsapojq(cid:223)mesai sotk(cid:220)virsom rsa jqis(cid:222)qia epirsglomij(cid:222)y epij(cid:253)qxrgy pot jahoq(cid:223)fo- msai pqogcotl(cid:221)mxy (2) jai sa aposek(cid:221)rlasa sgy lek(cid:221)sgy epij(cid:253)qxrgy ma dglorie(cid:253)omsai re (cid:221)cjtqo epirsglomij(cid:252) peqiodij(cid:252) sot opo(cid:223)ot sa (cid:220)qhqa ecjq(cid:223)momsai ap(cid:252) ol(cid:252)siloty aniokocgs(cid:221)y. 2. DEDOLEMA 2. 1. Epeneqcar(cid:223)a sxm aposekerl(cid:220)sxm 2. 1. 1. Dojilar(cid:223)a TER d(cid:221)qlasoy ep(cid:223)ltoy Oi sil(cid:221)y gkejsqij(cid:222)y ams(cid:223)rsargy re kh sot ekecv(cid:252)lemot tkijo(cid:253), sxm hesij(cid:254)m jai aqmgsij(cid:254)m laqs(cid:253)qxm jai stv(cid:252)m pqos(cid:253)pxm vglij(cid:254)m otri(cid:254)m amauoq(cid:220)y pq(cid:221)pei ma paqotri(cid:220)fomsai tp(cid:252) loqu(cid:222) p(cid:223)maja, (cid:252)pot ha peqikalb(cid:220)momsai ep(cid:223)rgy dedol(cid:221)ma cia sa epamakgpsij(cid:220) peiq(cid:220)lasa, l(cid:221)rey sil(cid:221)y jai g pqoj(cid:253)psotra sanim(cid:252)lgrg. 2. 1. 2. Dojilar(cid:223)a le oloi(cid:254)lasa amhq(cid:254)pimot d(cid:221)qlasoy Oi sil(cid:221)y opsij(cid:222)y ptjm(cid:252)sgsay jai sa tpokocirh(cid:221)msa dedol(cid:221)ma ejasorsia(cid:223)ay jtssaqij(cid:222)y bixril(cid:252)sgsay cia so ekecv(cid:252)- lemo tkij(cid:252), soty hesijo(cid:253)y jai aqmgsijo(cid:253)y l(cid:220)qstqey jai stv(cid:252)m pq(cid:252)stpey vglij(cid:221)y otr(cid:223)ey amauoq(cid:220)y pq(cid:221)pei ma paqotri(cid:220)fomsai tp(cid:252) loqu(cid:222) p(cid:223)maja, (cid:252)pot peqikalb(cid:220)momsai ep(cid:223)rgy dedol(cid:221)ma cia sa epamakgpsij(cid:220) peiq(cid:220)lasa, l(cid:221)rey sil(cid:221)y jai g pqoj(cid:253)psotra sanim(cid:252)lgrg. 2. 2. Aniok(cid:252)cgrg jai eqlgme(cid:223)a sxm aposekerl(cid:220)sxm 2. 2. 1. Dojilar(cid:223)a TER d(cid:221)qlasoy ep(cid:223)ltoy …sam g l(cid:221)rg sil(cid:222) TER pot kalb(cid:220)mesai cia sgm ekecv(cid:252)lemg otr(cid:223)a tpeqba(cid:223)mei sa 5 kh s(cid:252)se g rtcjejqil(cid:221)mg otr(cid:223)a dem hexqe(cid:223)sai diabqxsij(cid:222). E(cid:220)m g sil(cid:222) TER e(cid:223)mai lijq(cid:252)seqg (cid:222) (cid:223)rg sxm 5 kh, g ekecv(cid:252)lemg otr(cid:223)a hexqe(cid:223)sai diabqxsij(cid:222) eu(cid:252)rom dem pq(cid:252)jeisai cia sariemeqc(cid:252) otr(cid:223)a (cid:222) otd(cid:221)seqg oqcamij(cid:222) (cid:221)mxrg. Cia sariemeqc(cid:221)y otr(cid:223)ey (cid:222) otd(cid:221)seqey oqcamij(cid:221)y em(cid:254)reiy cia siy opo(cid:223)ey kalb(cid:220)momsai sil(cid:221)y TER lijq(cid:252)seqey (cid:222) (cid:223)rey sxm 5 kh, e(cid:223)mai dtmas(cid:252)m ma vqgrilopoighe(cid:223) g l(cid:221)hodoy sgy die(cid:223)rdtrgy vqxrsij(cid:222)y. E(cid:220)m g l(cid:221)rg peqiejsij(cid:252)sgsa sot d(cid:223)rjot re vqxrsij(cid:222) tpeqba(cid:223)mei (cid:222) iro(cid:253)sai le sgm ams(cid:223)rsoivg l(cid:221)rg peqiejsij(cid:252)sgsa re vqxrsij(cid:222) pot pqoj(cid:253)psei sats(cid:252)vqoma cia so hesij(cid:252) l(cid:220)qstqa 36 % tdqovk(cid:254)qio, s(cid:252)se so kalbam(cid:252)lemo apos(cid:221)kerla cia sgm ekecv(cid:252)lemg otr(cid:223)a e(cid:223)mai pqaclasij(cid:220) hesij(cid:252) jai g otr(cid:223)a exqe(cid:223)sai epol(cid:221)mxy diabqxsij(cid:222). E(cid:220)m g l(cid:221)rg peqiejsij(cid:252)sgsa sot d(cid:223)rjot re vqxrsij(cid:222) e(cid:223)mai lijq(cid:252)seqg ap(cid:252) sgm ams(cid:223)rsoivg l(cid:221)rg peqiejsij(cid:252)sgsa re vqxrsij(cid:222) pot pqoj(cid:253)psei sats(cid:252)vqoma cia so hesij(cid:252) l(cid:220)qstqa 36 % tdqovk(cid:254)qio, s(cid:252)se so kalbam(cid:252)lemo apos(cid:221)kerla cia sgm ekecv(cid:252)lemg otr(cid:223)a e(cid:223)mai wetdohesij(cid:252) jai g otr(cid:223)a dem e(cid:223)mai epol(cid:221)mxy diabqxsij(cid:222). 2. 2. 2. Dojilar(cid:223)a le olo(cid:223)xla amhq(cid:254)pimot d(cid:221)qlasoy G sil(cid:222) opsij(cid:222)y ptjm(cid:252)sgsay sot aqmgsijo(cid:253) l(cid:220)qstqa amsipqorxpe(cid:253)ei jtssaqij(cid:222) bixril(cid:252)sgsa 100 %. Xy ej so(cid:253)sot oi kalbam(cid:252)lemey cia so ekecv(cid:252)lemo de(cid:223)cla sil(cid:221)y opsij(cid:222)y ptjm(cid:252)sgsay lpoqo(cid:253)m ma vqgrilopoigho(cid:253)m cia som tpoko- cirl(cid:252) sgy ejasorsia(cid:223)ay bixril(cid:252)sgsay re rv(cid:221)rg le som aqmgsij(cid:252) l(cid:220)qstqa. G diavxqirsij(cid:222) sil(cid:222) ejasorsia(cid:223)ay jtssa- qij(cid:222)y bixril(cid:252)sgsay b(cid:220)rei sgy opo(cid:223)ay c(cid:223)mesai di(cid:220)jqirg lesan(cid:253) diabqxsij(cid:254)m jai lg diabqxsij(cid:254)m ekecv(cid:252)lemxm tkij(cid:254)m ((cid:222) lesan(cid:253) sxm diau(cid:252)qxm bahl(cid:254)m di(cid:220)bqxrgy) pq(cid:221)pei ma jahoq(cid:223)fesai rau(cid:254)y rso pqocmxrsij(cid:252) loms(cid:221)ko pqim ap(cid:252) sgm epij(cid:253)qxrg sgy leh(cid:252)dot, jai g pqaclasopoio(cid:253)lemg rsg rtm(cid:221)veia lek(cid:221)sg epij(cid:253)qxrgy pq(cid:221)pei ma jasadeijm(cid:253)ei sgm jasakkgk(cid:252)sgsa sgy diavxqirsij(cid:222)y ats(cid:222)y sil(cid:222)y (2). 3. EJHEREIR ‚jherg sgy dojil(cid:222)y G (cid:221)jherg sgy dojil(cid:222)y pq(cid:221)pei ma peqikalb(cid:220)mei sotk(cid:220)virsom siy aj(cid:252)kothey pkgqouoq(cid:223)ey: Ekecv(cid:252)lemg otr(cid:223)a: (cid:151) satsopo(cid:223)grg, utrij(cid:222) jas(cid:220)rsarg jai, jas(cid:220) peq(cid:223)psxrg, utrijovglij(cid:221)y idi(cid:252)sgsey. Am(cid:220)kocey pkgqouoq(cid:223)ey pq(cid:221)pei ma paq(cid:221)vomsai cia siy stv(cid:252)m vqgrilopoio(cid:253)lemey otr(cid:223)ey amauoq(cid:220)y. Rtmh(cid:222)jey dojil(cid:222)y: (cid:151) kepsoleq(cid:222)y peqicqau(cid:222) sgy diadijar(cid:223)ay dojil(cid:222)y pot ajokoth(cid:222)hgje, (cid:151) peqicqau(cid:222) jai aisiok(cid:252)cgrg stv(cid:252)m sqopopoi(cid:222)rexm. 8. 6. 2000 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm L 136/95 Aposek(cid:221)rlasa: (cid:151) paqotr(cid:223)arg re p(cid:223)maja sxm sil(cid:254)m gkejsqij(cid:222)y ams(cid:223)rsargy (dojilar(cid:223)a TER) (cid:222) sxm sil(cid:254)m ejasorsa(cid:223)ay jtssaqij(cid:222)y bixril(cid:252)sgsay (dojilar(cid:223)a le olo(cid:223)xla amhq(cid:254)pot d(cid:221)qlasoy) pot ek(cid:222)uhgram cia so ekecv(cid:252)lemo tkij(cid:252), soty hesijo(cid:253)y jai aqmgsijo(cid:253)y l(cid:220)qstqey jai stv(cid:252)m pq(cid:252)stpey vglij(cid:221)y otr(cid:223)ey amauoq(cid:220)y, rtlpeqikalbamol(cid:221)mxm sxm dedol(cid:221)mxm pot pqo(cid:221)jtwam ap(cid:252) sg epamakgpsij(cid:220) peiq(cid:220)lasa jai sxm l(cid:221)rxm sil(cid:254)m, (cid:151) peqicqau(cid:222) stv(cid:252)m (cid:220)kkxm epips(cid:254)rexm pot paqasgq(cid:222)hgjam. Rvokiarl(cid:252)y sxm aposekerl(cid:220)sxm Rtlpeq(cid:220)rlasa 4. BIBKIOCQAUIA (1) ECVAM (1998), ECVAM News & Views, ATLA 26, rr. 275-280. (2) Fentem, J. H. , Archer, G. E. B. , Balls, M. , Botham, P. A. , Curren, R. D. , Earl, L. K. , Esdaile, D. J. , Holzhutter, (1998), The ECVAM international validation study on in vitro tests for skin H-G. & Liebsch, M. corrosivity. 2. Results and evaluation by the Management Team, Toxicology in Vitro 12, rr. 483-524. (3) Barratt, M. D. , Brantom, P. G. , Fentem, J. H. , Gerner, I. , Walker, A. P. & Worth, A. P. (1998), The ECVAM international validation study on in vitro tests for skin corrosivity. 1. Selection and distribution of the test chemicals, Toxicology in Vitro 12, rr. 471-482. (4) Oliver, G. J. A. , Pemberton, M. A. & Rhodes, C. (1986), An in vitro skin corrosivity test (cid:151) modifications and validation, Food & Chemical Toxicology 24, rr. 507-512. (5) Botham, P. A. , Hall, T. J. , Dennett, R. , McCall, J. C. , Basketter, D. A. , Whittle, E. , Cheeseman, M. , Esdaile, D. J. & Gardner, J. (1992), The skin corrosivity test in vitro: results of an interlaboratory trial, Toxicology in Vitro 6, rr. 191-194. (6) Worth, A. P. , Fentem, J. H. , Balls, M. , Botham, P. A. , Curren, R. D. , Earl, L. K. , Esdaile, D. J. & Liebsch, M. (1998), An evaluation of the proposed OECD testing strategy for skin corrosion, ATLA 26, rr. 709-720. (7) Botham, P. A. , Chamberlain, M. , Barratt, M. D. , Curren, R. D. , Esdaile, D. J. , Gardner, J. R. , Gordon, V. C. , Hildebrand, B. , Lewis, R. W. , Liebsch, M. , Logemann, P. , Osborne, R. , Ponec, M. , Regnier, J. F. , Steiling, W. , Walker, A. P. & Balls, M. (1995), A prevalidation study on in vitro skin corrosivity testing. The report and recommendations of ECVAM workshop 6, ATLA 23, rr. 219-255. L 136/96 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm 8. 6. 2000 Rv(cid:222)la 1 8. 6. 2000 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm L 136/97 Rv(cid:222)la 2 L 136/98 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm 8. 6. 2000 PAQAQSGLA II «B. 41. UXSOSONIJOSGSA (cid:151) IN VITRO 3T3 NRU DOJILG UXSOSONIJOSGSAR 1 LEHODOR 1. 1 Eiracxc(cid:222) Xy uxsosonij(cid:252)sgsa oq(cid:223)fesai g sonij(cid:222) ap(cid:252)jqirg pot eluam(cid:223)fesai les(cid:220) sgm pq(cid:254)sg (cid:221)jherg sot d(cid:221)qlasoy re oqirl(cid:221)mey vglij(cid:221)y otr(cid:223)ey jai sgm em rtmeve(cid:223)a (cid:221)jherg rso uxy (cid:222) pot ep(cid:220)cesai olo(cid:223)xy ap(cid:252) ajsimob(cid:252)kgrg sot d(cid:221)qlasoy (cid:221)peisa ap(cid:252) rtrselij(cid:222) voq(cid:222)cgrg liay vglij(cid:222)y otr(cid:223)ay. Sa rsoive(cid:223)a pot kalb(cid:220)momsai ap(cid:252) sgm in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay vqgrile(cid:253)otm cia som pqordioqi- rl(cid:252) sgy uxsosonij(cid:222)y dtmas(cid:252)sgsay liay tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay, dgkad(cid:222) sgy (cid:253)paqngy (cid:222) apotr(cid:223)ay piham(cid:254)m jimd(cid:253)mxm pot lpoqe(cid:223) ma eluamirso(cid:253)m ap(cid:252) lia tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)a re rtmdtarl(cid:252) le (cid:221)jherg rso tpeqi(cid:254)dey jai so oqas(cid:252) uxy. Dedol(cid:221)mot (cid:252)si so sonijokocij(cid:252) sekij(cid:252) apos(cid:221)kerla sgy im xisqo dojil(cid:222)y e(cid:223)mai o pqordioqirl(cid:252)y sgy uxsojtseaqo- srnij(cid:252)sgsay, pot pqojake(cid:223)sai ap(cid:252) sg rtmdtarl(cid:221)mg dq(cid:220)rg vglij(cid:222)y otr(cid:223)ay jai uxs(cid:252)y, em(cid:254)reiy pot e(cid:223)mai uxsosonij(cid:221)y in vivo (cid:221)peisa ap(cid:252) rtrselij(cid:222) euaqloc(cid:222) jai jasamol(cid:222) rso d(cid:221)qla, jah(cid:254)y ep(cid:223)rgy jai em(cid:254)reiy pot dqotm xy uxsoeqe- hirsij(cid:220) (cid:221)peisa ap(cid:252) sopij(cid:222) euaqloc(cid:222) rso d(cid:221)qla, lpoqo(cid:253)m ma satsopoigho(cid:253)m le sg dojil(cid:222). G in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay amaps(cid:253)vhgje jai epijtq(cid:254)hgje re joim(cid:252) pq(cid:252)cqalla EE/COLIPA ap(cid:252) so 1992-1997 (123) pot ap(cid:221)bkepe rsgm jahi(cid:221)qxrg liay (cid:221)cjtqgy in vitro emakkajsij(cid:222)y k(cid:253)rgy ams(cid:223) sxm diau(cid:252)qxm in vivo vqgrilopoio(cid:253)lemxm dojil(cid:254)m. So 1996 re rtm(cid:220)msgrg eqcar(cid:223)ay sot OORA pqos(cid:220)hgje lia in vitro pqor(cid:221)ccirg diadovij(cid:254)m rsad(cid:223)xm ek(cid:221)cvot cia sgm ejs(cid:223)lgrg sgy uxsosonij(cid:252)sgsay (4). Sa aposek(cid:221)rlasa sgy in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222)y uxsosonij(cid:252)sgsay rtcjq(cid:223)hgjam le siy in vivo one(cid:223)ey uxsoso- nij(cid:221)y/uxsoeqehirsij(cid:221)y epidq(cid:220)reiy re f(cid:254)a jai amhq(cid:254)poty, jai g dojil(cid:222) apode(cid:223)vhgje (cid:252)si paqe(cid:223)ve enaiqesij(cid:221)y pqobk(cid:221)weiy xy pqoy siy epidq(cid:220)reiy ats(cid:221)y. G dojil(cid:222) dem (cid:221)vei rvediarse(cid:223) cia sgm pq(cid:252)bkewg (cid:220)kkxm dtrlem(cid:254)m epidq(cid:220)rexm pot lpoqe(cid:223) ma pqoj(cid:253)wotm ap(cid:252) sg rtmdtarl(cid:221)mg dq(cid:220)rg vglij(cid:222)y otr(cid:223)ay jai sot uxs(cid:252)y, p. v. uxsocomidio- sonij(cid:252)sgsay, uxsoakkeqc(cid:223)ay jai uxsojaqjimoc(cid:221)mergy, am jai pokk(cid:221)y otr(cid:223)ey pot paqotri(cid:220)fotm sa eidij(cid:220) ats(cid:220) vaqa- jsgqirsij(cid:220) amsidqo(cid:253)m hesij(cid:220) rsgm in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay. Epipk(cid:221)om, g dojil(cid:222) dem (cid:221)vei rvedia- rse(cid:223) jas(cid:220) sq(cid:252)po pot ma lpoqe(cid:223) ma c(cid:223)mesai ejs(cid:223)lgrg sgy uxsosonij(cid:222)y irv(cid:253)oy. Rso pqor(cid:220)qsgla d(cid:223)mesai lia pqor(cid:221)ccirg diadovij(cid:254)m rsad(cid:223)xm ek(cid:221)cvot sgy uxsosonij(cid:252)sgsay vglij(cid:254)m otri(cid:254)m. 1. 2 Oqirlo(cid:223) ‚msarg ajsimobok(cid:223)ay: g (cid:221)msarg sot pqorp(cid:223)psomsoy re lia epiu(cid:220)meia tpeqi(cid:254)doty (UV) (cid:222) oqaso(cid:253) uxs(cid:252)y, lesqo(cid:253)lemg re W/m2 (cid:222) mW/cm2. D(cid:252)rg uxs(cid:252)y: g por(cid:252)sgsa (= (cid:221)msarg (cid:215) vq(cid:252)moy) tpeqi(cid:254)doty (UV) (cid:222) oqas(cid:222)y ajsimobok(cid:223)ay pqorp(cid:223)psotray re epiu(cid:220)meia, ejuqaf(cid:252)lemg re Joules (= W (cid:215) s) am(cid:220) lom(cid:220)da epiuame(cid:223)ay, p. v. J/m2 (cid:222) J/cm2. F(cid:254)mey UV uxs(cid:252)y: oi vaqajsgqirlo(cid:223) pot pqose(cid:223)momsai ap(cid:252) sgm CIE (Commision Internationale de L’Eclairage) e(cid:223)mai: UVA (315-400 nm), UVB (280-315 nm) jai UVC (100-280 nm). Vqgrilopoio(cid:253)msai ep(cid:223)rgy jai oqirl(cid:221)moi (cid:220)kkoi vaqajsgqirlo(cid:223): so diavxqisij(cid:252) rgle(cid:223)o lesan(cid:253) UVB jai UVA sopohese(cid:223)sai rtvm(cid:220) rsa 320 nm, em(cid:254) g UVA lpoqe(cid:223) ma vxq(cid:223)fesai re UV-A1 jai UV-A2 le sgm tpodia(cid:223)qerg rsa 340 nm peq(cid:223)pot. Jtssaqij(cid:222) bixril(cid:252)sgsa: paq(cid:220)lesqoy pot lesq(cid:220)ei sg rtmokij(cid:222) dqarsij(cid:252)sgsa em(cid:252)y jtssaqijo(cid:253) pkghtrlo(cid:253) (p. v. pq(cid:252)rkgwg sgy fxsij(cid:222)y vqxrsij(cid:222)y Neutral Red re jtssaqij(cid:220) ktror(cid:254)lasa) g opo(cid:223)a, am(cid:220)koca le so lesqo(cid:253)lemo sekij(cid:252) apos(cid:221)kerla jai som vqgrilopoio(cid:253)lemo rvediarl(cid:252) sgy dojil(cid:222)y, rtrves(cid:223)fesai le so rtmokij(cid:252) aqihl(cid:252) (cid:222)/jai fxsij(cid:252)sgsa sxm jtss(cid:220)qxm. Rvesij(cid:222) jtssaqij(cid:222) bixril(cid:252)sgsa: g jtssaqij(cid:222) bixril(cid:252)sgsa ejuqaf(cid:252)lemg re rv(cid:221)rg le aqmgsijo(cid:253)y (diak(cid:253)sey) l(cid:220)qstqey pot (cid:221)votm peq(cid:220)rei ap(cid:252) (cid:252)kg sg diadijar(cid:223)ay dojil(cid:222)y (e(cid:223)se + UV e(cid:223)se ﬂ UV), akk(cid:220) dem (cid:221)votm tpobkghe(cid:223) re epeneqcar(cid:223)a le tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)a. Loms(cid:221)ko pq(cid:252)bkewgy: akc(cid:252)qihloy pot vqgrilopoie(cid:223)sai cia sg lesasqop(cid:222) sxm aposekerl(cid:220)sxm liay dojil(cid:222)y sonij(cid:252)- sgsay re pq(cid:252)bkewg sgy sonij(cid:222)y dtmas(cid:252)sgsay. Rsa pka(cid:223)ria sxm jasethtmsgq(cid:223)xm cqall(cid:254)m sgy paqo(cid:253)ray dojil(cid:222)y, cia sg lesasqop(cid:222) sxm aposekerl(cid:220)sxm sgy in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222)y uxsosonij(cid:252)sgsay re pq(cid:252)bkewg sxm uxsosonij(cid:254)m dtmasos(cid:222)sxm lpoqo(cid:253)m ma vqgrilopoigho(cid:253)m oi PIF jai MPE. PIF (photo irritation factor (cid:151) rtmsekers(cid:222)y uxsoeqehirlo(cid:253)): rtmsekers(cid:222)y pot kalb(cid:220)mesai rtcjq(cid:223)momsay d(cid:253)o en(cid:223)rot aposekerlasij(cid:221)y jtssaqosonij(cid:221)y rtcjemsq(cid:254)reiy (EC50) sgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay apotr(cid:223)a (ﬂ UV) jai paqotr(cid:223)a (+ UV) lg jtssaqosonij(cid:222)y ajsimob(cid:252)kgrgy le UVA/oqas(cid:252) uxy. MPE (mean photo efect (cid:151) l(cid:221)rg uxsoep(cid:223)dqarg): m(cid:221)o l(cid:221)sqo pot pqo(cid:221)qvesai ap(cid:252) lahglasij(cid:222) am(cid:220)ktrg sot pk(cid:222)qoty rv(cid:222)lasoy d(cid:253)o jalp(cid:253)kxm rtcj(cid:221)msqxrgy ap(cid:252)jqirgy apotr(cid:223)a (ﬂ UV) jai paqotr(cid:223)a (+ UV) lg jtssaqosonij(cid:222)y ajsimo- b(cid:252)kgrgy le UVA/oqas(cid:252) uxy. 8. 6. 2000 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm L 136/99 Uxsosonij(cid:252)sgsa: one(cid:223)a sonij(cid:222) ap(cid:252)jqirg pot eluam(cid:223)fesai les(cid:220) sgm pq(cid:254)sg (cid:221)jherg sot d(cid:221)qlasoy re oqirl(cid:221)mey vglij(cid:221)y otr(cid:223)ey jai sgm em rtmeve(cid:223)a (cid:221)jherg rso uxy, (cid:222) g opo(cid:223)a ep(cid:220)cesai olo(cid:223)xy ap(cid:252) ajsimob(cid:252)kgrg sot d(cid:221)qlasoy (cid:221)peisa ap(cid:252) rtrselij(cid:222) voq(cid:222)cgrg liay vglij(cid:222)y otr(cid:223)ay. Uxsoeqehirl(cid:252)y: tpodia(cid:223)qerg sot (cid:252)qot (cid:147)uxsosonij(cid:252)sgsa(cid:148), pot vqgrilopoie(cid:223)sai cia ma peqicq(cid:220)wei l(cid:252)mom siy uxsoso- nij(cid:221)y eje(cid:223)mey amsidq(cid:220)reiy pot pqojako(cid:253)msai rso d(cid:221)qla (cid:221)peisa ap(cid:252) (cid:221)jherg re vglij(cid:221)y otr(cid:223)ey (sopij(cid:220) (cid:222) ap(cid:252) so rs(cid:252)la). Oi uxsosonij(cid:221)y ats(cid:221)y amsidq(cid:220)reiy (cid:221)votm p(cid:220)msose xy apos(cid:221)kerla sg lg eneidijetl(cid:221)mg jasarsqou(cid:222) jtss(cid:220)qxm (amsidq(cid:220)reiy (cid:252)pxy sa gkiaj(cid:220) ecja(cid:253)lasa). Uxsoakkeqc(cid:223)a: ep(cid:223)jsgsg amorokocij(cid:222) ams(cid:223)dqarg, pot dem eluam(cid:223)fesai rsgm pq(cid:254)sg epau(cid:222) le vglij(cid:222) otr(cid:223)a jai uxy, jai vqei(cid:220)fesai epacxcij(cid:252) vqomij(cid:252) di(cid:220)rsgla liay (cid:222) d(cid:253)o ebdol(cid:220)dxm pqim ma eluamirse(cid:223) deqlasij(cid:222) ams(cid:223)dqarg. Uxsocomidiosonij(cid:252)sgsa: paqasgqo(cid:253)lemg comidiosonij(cid:222) ap(cid:252)jqirg le cemesij(cid:252) sekij(cid:252) apos(cid:221)kerla, pot eluam(cid:223)fesai les(cid:220) sgm (cid:221)jherg jtss(cid:220)qxm re lg comidiosonij(cid:222) d(cid:252)rg UV/oqaso(cid:253) uxs(cid:252)y jai lg comidiosonij(cid:222) vglij(cid:222) otr(cid:223)a. Uxsojaqjimoc(cid:221)merg: jaqjimoc(cid:221)merg pqojako(cid:253)lemg ap(cid:252) epameikgll(cid:221)mg vq(cid:222)rg uxs(cid:252)y jai vglij(cid:222)y otr(cid:223)ay. Eu(cid:252)rom stv(cid:252)m ap(cid:252) UV pqojako(cid:253)lemg ocjoc(cid:221)merg emirv(cid:253)esai ap(cid:252) vglij(cid:222) otr(cid:223)a, s(cid:252)se vqgrilopoie(cid:223)sai o (cid:252)qoy (cid:147)uxsortcjaqji- moc(cid:221)merg(cid:148). 1. 3 Otr(cid:223)ey amauoq(cid:220)y Ejs(cid:252)y ap(cid:252) som hesij(cid:252) vglij(cid:252) l(cid:220)qstqa vkxqopqolaf(cid:223)mg, pot ha pq(cid:221)pei ma dojil(cid:220)fesai sats(cid:252)vqoma re j(cid:220)he dojil(cid:222), re peqips(cid:254)reiy pq(cid:254)sgy euaqloc(cid:222)y sgy dojil(cid:222)y uxsosonij(cid:252)sgsay 3T3 NRU rtmirs(cid:220)sai ma vqgrilopoio(cid:253)msai xy otr(cid:223)ey amauoq(cid:220)y jai oqirl(cid:221)mey ap(cid:252) siy otr(cid:223)ey pot vqgrilopoi(cid:222)hgjam re dieqcarsgqiaj(cid:221)y dojil(cid:221)y le sgm paqo(cid:253)ra dojil(cid:222) (1) (3) (13). 1. 4 Aqvij(cid:221)y hexq(cid:222)reiy Tp(cid:220)qvotm di(cid:220)uoqoi s(cid:253)poi vglij(cid:254)m otri(cid:254)m pot (cid:221)votm amaueqhe(cid:223) xy uxsosonij(cid:221)y (5) (6) (7) (8). So l(cid:252)mo joim(cid:252) vaqa- jsgqirsij(cid:252) soty e(cid:223)mai g ijam(cid:252)sgs(cid:220) soty ma apoqqouo(cid:253)m uxseim(cid:222) em(cid:221)qceia rg peqiov(cid:222) sot gkiajo(cid:253) uxs(cid:252)y. R(cid:253)luxma le som pq(cid:254)so m(cid:252)lo sgy uxsovgle(cid:223)ay (Grotthaus-Draper’s Law) g uxsoams(cid:223)dqarg apaise(cid:223) epaqj(cid:222) apoqq(cid:252)ugrg jb(cid:220)msxm uxs(cid:252)y. ‚sri, pqim ap(cid:252) so biokocij(cid:252) (cid:221)kecvo r(cid:253)luxma le siy jasethtms(cid:222)qiey cqall(cid:221)y sgy paqo(cid:253)ray dojil(cid:222)y, ha pq(cid:221)pei ma pqordioq(cid:223)fesai so u(cid:220)rla apoqq(cid:252)ugrgy UV/oqaso(cid:253) sgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay (p. v. r(cid:253)luxma le sgm OECD Test Guideline 101). E(cid:220)m o rtmsekers(cid:222)y loqiaj(cid:222)y ap(cid:252)rbergy/apoqq(cid:252)ugrgy e(cid:223)mai lijq(cid:252)seqoy ap(cid:252) 10 k(cid:223)sqa (cid:215) molﬂ 1 (cid:215) cmﬂ 1 g vglij(cid:222) otr(cid:223)a dem (cid:221)vei uxsoamsidqarsij(cid:221)y dtmas(cid:252)sgsey jai dem vqei(cid:220)fesai ma ekecvhe(cid:223) le sgm in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay (cid:222) opoiad(cid:222)pose (cid:220)kkg biokocij(cid:222) dojil(cid:222) cia dtrleme(cid:223)y uxsovglij(cid:221)y epidq(cid:220)reiy (Pqor(cid:220)qsgla). 1. 5 Aqv(cid:222) sgy leh(cid:252)dot dojil(cid:222)y ‚votm emsopirse(cid:223) s(cid:221)rreqiy lgvamirlo(cid:223) le soty opo(cid:223)oty g apoqq(cid:252)ugrg uxs(cid:252)y ap(cid:252) lia vqxlou(cid:252)qo vglij(cid:222) (cid:221)mxrg lpoqe(cid:223) ma odgc(cid:222)rei re uxsosonij(cid:222) ap(cid:252)jqirg (7). …koi apok(cid:222)cotm re jasarsqou(cid:222) sxm jtss(cid:220)qxm. Rtmep(cid:254)y, g in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay bar(cid:223)fesai re r(cid:253)cjqirg sgy jtssaqosonij(cid:252)sgsay liay vglij(cid:222)y otr(cid:223)ay (cid:252)sam tpob(cid:220)kkesai re dojil(cid:222) le jai vxq(cid:223)y (cid:221)jherg re lg jtssaqosonij(cid:222) d(cid:252)rg UVA/oqaso(cid:253) uxs(cid:252)y. G jtssaqosonij(cid:252)sgsa re ats(cid:222) sg dojil(cid:222) ejuq(cid:220)fesai le sg loqu(cid:222) enaqs(cid:254)lemgy ap(cid:252) sg rtcj(cid:221)msqxrg le(cid:223)xrgy sgy pq(cid:252)rkgwgy sgy fxsij(cid:222)y vqxrsij(cid:222)y neutral red (NR) (9), 24 (cid:254)qey les(cid:220) sgm acxc(cid:222) le sgm tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)a jai ajsimob(cid:252)kgrg. J(cid:253)ssaqa Balb/c 3T3 diasgqo(cid:253)msai re jakki(cid:221)qceia cia 24 (cid:254)qey cia so rvglasirl(cid:252) lomorsib(cid:220)dxm. Rsg rtm(cid:221)veia, d(cid:253)o sqtbk(cid:223)a le 96 joik(cid:252)sgsey am(cid:220) dojilaf(cid:252)lemg otr(cid:223)a pqoepx(cid:220)fomsai le ojs(cid:254) diauoqesij(cid:221)y rtcjemsq(cid:254)reiy sgy otr(cid:223)ay cia 1 h. Rsg rtm(cid:221)veia, (cid:221)ma ap(cid:252) sa d(cid:253)o sqtbk(cid:223)a ejs(cid:223)hesai re lg jtssaqosonij(cid:222) d(cid:252)rg UVA/oqas(cid:252) uxs(cid:252)y 5 J/cm2 UVA (pe(cid:223)qala + UV), em(cid:254) so (cid:220)kko sqtbk(cid:223)o diasgqe(cid:223)sai rso rjos(cid:220)di (pe(cid:223)qala ﬂ UV). Jai rsa d(cid:253)o sqtbk(cid:223)a, so l(cid:221)rom acxc(cid:222)y amsijah(cid:223)rsasai jas(cid:252)pim ap(cid:252) l(cid:221)rom jakki(cid:221)qceiay jai (cid:221)peisa ap(cid:252) 24 aj(cid:252)lg (cid:254)qey ep(cid:254)argy, pqordioq(cid:223)fesai g jtssaqij(cid:222) bixril(cid:252)sgsa neutrald red uptake (NRU) cia 3 h. G rvesij(cid:222) jtssaqij(cid:222) bixril(cid:252)sgsa, ejuqaf(cid:252)lemg xy porors(cid:252) lg tpobkgh(cid:221)msxm re acxc(cid:222) aqmgsij(cid:254)m laqs(cid:253)qxm, tpokoc(cid:223)fesai cia j(cid:220)he l(cid:223)a ap(cid:252) siy ojs(cid:254) rtcjemsq(cid:254)reiy dojil(cid:222)y. Cia sgm pq(cid:252)bkewg sgy uxsosonij(cid:222)y dtmas(cid:252)sgsay, oi jas(cid:220) rtcj(cid:221)msqxrg apojq(cid:223)reiy pot kalb(cid:220)momsai le (+ UV) jai vxq(cid:223)y (ﬂ UV) ajsimob(cid:252)kgrg rtcjq(cid:223)momsai, rtm(cid:222)hxy rsa ep(cid:223)peda EC50, dgkad(cid:222) rsg rtcj(cid:221)msqxrg pot amars(cid:221)kei sgm jtssaqij(cid:222) bixril(cid:254)sgsa jas(cid:220) 50 % re r(cid:253)cjqirg le soty lg tpobkgh(cid:221)msey re acxc(cid:222) l(cid:220)qstqey. 1. 6 Poiosij(cid:220) jqis(cid:222)qia Jtsaqij(cid:222) etairhgr(cid:223)a re UVA, irsoqij(cid:220) rsoive(cid:223)a: Sa j(cid:253)ssaqa ha pq(cid:221)pei jamomij(cid:220) ma ek(cid:221)cvomsai xy pqoy sgm etai- rhgr(cid:223)a soty re UVA. J(cid:253)ssaqa diarpe(cid:223)qomsai tp(cid:252) ptjm(cid:252)sgsa pot vqgrilopoie(cid:223)sai jai rsgm in v(cid:237)tro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay, sgm ep(cid:252)lemg gl(cid:221)qa ajsimoboko(cid:253)msai le d(cid:252)reiy UVA ap(cid:252) 1-9 J/cm2, jai g jtssaqij(cid:222) bix- ril(cid:252)sgsa pqordioq(cid:223)fesai lia gl(cid:221)qa aqc(cid:252)seqa vqgrilopoi(cid:254)msay sg dojil(cid:222) NRU. Sa j(cid:253)ssaqa pkgqo(cid:253)m sa jqis(cid:222)qia poi(cid:252)sgsay, e(cid:220)m g bixril(cid:252)sgs(cid:220) soty les(cid:220) sgm ajsimob(cid:252)kgrg le 5 J/cm2 UVA dem e(cid:223)mai lijq(cid:252)seqg ap(cid:252) so 8 % sgy bixril(cid:252)sgsay sxm diasgqgh(cid:221)msxm rso rjos(cid:220)di laqs(cid:253)qxm. Rsg l(cid:221)cirsg d(cid:252)rg UVA sxm 9 J/cm2 g bixril(cid:252)sgsa dem ha pq(cid:221)pei ma e(cid:223)mai lijq(cid:252)seqg ap(cid:252) so 50 % eje(cid:223)mgy sxm diasgqgh(cid:221)msxm rso rj(cid:252)soy laqs(cid:253)qxm. O (cid:221)kecvoy ats(cid:252)y ha pq(cid:221)pei ma epamakalb(cid:220)mesai (cid:221)peisa ap(cid:252) j(cid:220)he 10 peq(cid:223)pot dieke(cid:253)reiy sxm jtss(cid:220)qxm. Etairhgr(cid:223)a rso UVA sxm aqmgsij(cid:254)m jtssaqij(cid:254)m laqs(cid:253)qxm sq(cid:221)votra dojil(cid:222): G dojil(cid:222) pkgqo(cid:223) sa poiosij(cid:220) jqis(cid:222)qia e(cid:220)m oi aqmgsijo(cid:223) l(cid:220)qstqey (j(cid:253)ssaqa re Earl’s balanced salt solution (EBSS) le (cid:222) vxq(cid:223)y 1 % dilehtkorotk- uone(cid:223)dio (DMSO) (cid:222) 1 % aiham(cid:252)kg (EtOH)) rso + UVA pe(cid:223)qala eluam(cid:223)fotm bixril(cid:252)sgsa (cid:252)vi lijq(cid:252)seqg ap(cid:252) so 8 % eje(cid:223)mgy lg ajsimobokgl(cid:221)mxm jtss(cid:220)qxm rsom (cid:223)dio diak(cid:253)sg sot rtlpaqolaqso(cid:253)msoy peiq(cid:220)lasoy rso rjos(cid:220)di (ﬂ UVA). L 136/100 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm 8. 6. 2000 Bixril(cid:252)sgsa aqmgsij(cid:254)m laqs(cid:253)qxm: G ap(cid:252)ktsg opsij(cid:222) ptjm(cid:252)sgsa (OD540 NRU) lesqo(cid:253)lemg rso ejv(cid:253)kirla MQ sxm aqmgsij(cid:254)m laqs(cid:253)qxm de(cid:223)vmei am sa 1 (cid:215)104 j(cid:253)ssaqa am(cid:220) joik(cid:252)sgsa amaps(cid:253)vhgjam le jamomij(cid:252) vq(cid:252)mo dipkariarlo(cid:253) jas(cid:220) sg di(cid:220)qjeia sxm d(cid:253)o gleq(cid:254)m sgy dojil(cid:222)y. Lia dojil(cid:222) pkgqo(cid:223) sa jqis(cid:222)qia apodov(cid:222)y e(cid:220)m g l(cid:221)rg OD540 MQH sxm lg tpobkgh(cid:221)msxm re acxc(cid:222) laqs(cid:253)qxm e(cid:223)mai ¯ 0,2. Hesij(cid:252)y l(cid:220)qstqay: Re j(cid:220)he in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay pq(cid:221)pei ma enes(cid:220)fesai rtcvq(cid:252)mxy jai lia cmxrs(cid:222) uxsosonij(cid:222) vglij(cid:222) otr(cid:223)a. Rsg lek(cid:221)sg epij(cid:253)qxrgy sxm EE/COLIPA xy hesij(cid:252)y l(cid:220)qstqay vqgrilopoi(cid:222)hgje vkxqopqolaf(cid:223)mg (CPZ) g opo(cid:223)a jai epol(cid:221)mxy pqose(cid:223)mesai. Rsgm peq(cid:223)psxrg CPZ pot enes(cid:220)fesai le so stpij(cid:252) pqxs(cid:252)- jokko rsgm in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay, oq(cid:223)rsgjam sa aj(cid:252)kotha jqis(cid:222)qia apodov(cid:222)y-dojil(cid:222)y: CPZ ajsimobokgl(cid:221)mg (+ UVA): EC50 = 0,1 (cid:221)xy 2,0 lg/ml, CPZ lg ajsimobokgl(cid:221)mg (ﬂ UVA): EC50 = 7,0 (cid:221)xy 90,0 lg/ ml. O rtmsekers(cid:222)y uxsoeqehirlo(cid:253) (PIF), dgkad(cid:222) g lesabok(cid:222) sgy EC50 ha pq(cid:221)pei ma e(cid:223)mai sotk(cid:220)virsom 6. Xy rtlpaqolaqso(cid:253)msey hesijo(cid:223) l(cid:220)qstqey, ams(cid:223) sgy (CPZ), lpoqo(cid:253)m ma vqgrilopoigho(cid:253)m jai (cid:220)kkey cmxrs(cid:221)y uxsoso- nij(cid:221)y vglij(cid:221)y otr(cid:223)ey, jas(cid:220)kkgkey cia sg vglij(cid:222) s(cid:220)ng (cid:222) sa vaqajsgqirsij(cid:220) diakts(cid:252)sgsay sgy aniokoco(cid:253)lemgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay. Rsgm peq(cid:223)prg ats(cid:222), le b(cid:220)rg irsoqij(cid:220) dedol(cid:221)ma, ha pq(cid:221)pei ma oqirso(cid:253)m jas(cid:220)kkgka oi peqiov(cid:221)y sxm sil(cid:254)m EC50 jai o PIF (cid:222) g MRE (mean photo elfeet) xy jqis(cid:222)qia apodov(cid:222)y cia sg dojil(cid:222). 1. 7 Peqicqau(cid:222) sgy leh(cid:252)dot dojil(cid:222)y 1. 7. 1 Paqarjet(cid:220)rlasa 1. 7. 1. 1 J (cid:253) s s a q a Rsg lek(cid:221)sg epij(cid:253)qxrgy vqgrilopoi(cid:222)hgje l(cid:252)milg jtssaqij(cid:222) reiq(cid:220) imobkars(cid:254)m pomsijo(cid:253) (cid:151)Balb/c 3T3, jk(cid:254)moy 31(cid:151) e(cid:223)se ap(cid:252) sgm ATCC e(cid:223)se ap(cid:252) sgm ECACC, g opo(cid:223)a epol(cid:221)mxy jai pqose(cid:223)mesai. Rso (cid:223)dio pqxs(cid:252)jokko dojil(cid:222)y lpoqo(cid:253)m ma vqgrilopoigho(cid:253)m en(cid:223)rot epistv(cid:254)y jai (cid:220)kka j(cid:253)ssaqa (cid:222) jtssaqij(cid:221)y reiq(cid:221)y, eu(cid:252)rom oi rtmh(cid:222)jey jakki(cid:221)qceiay e(cid:223)mai pqoraqlorl(cid:221)mey rsiy eidij(cid:221)y am(cid:220)cjey sxm jtss(cid:220)qxm, pq(cid:221)pei (cid:252)lxy ma jasadeijm(cid:253)esai g irodtmal(cid:223)a. Sa j(cid:253)ssaqa ha pq(cid:221)pei jamomij(cid:220) ma ek(cid:221)cvomsai l(cid:222)pxy e(cid:223)mai loktrl(cid:221)ma ap(cid:252) ltj(cid:252)pkarla jai ma vqgrilopoio(cid:253)msai l(cid:252)mom eu(cid:252)rom sa aposek(cid:221)rlasa sot ek(cid:221)cvot atso(cid:253) e(cid:223)mai ijamopoigsij(cid:220). Epeid(cid:222) g etairhgr(cid:223)a sxm jtss(cid:220)qxm re UVA lpoqe(cid:223) ma atn(cid:220)mesai le som aqihl(cid:252) sxm dieke(cid:253)rexm, ha pq(cid:221)pei ma vqgri- lopoio(cid:253)msai j(cid:253)ssaqa Balb/c 3T3 le som valgk(cid:252)seqo dtmas(cid:252)m aqihl(cid:252) dieke(cid:253)rexm, jas(cid:220) pqos(cid:223)lgrg j(cid:220)sx sxm 100. ‚vei idia(cid:223)seqg rglar(cid:223)a, g etairhgr(cid:223)a re UVA sxm jtss(cid:220)qxm Balb/c 3T3 ma ek(cid:221)cvesai sajsij(cid:220) r(cid:253)luxma le sg diadi- jar(cid:223)a poiosijo(cid:253) ek(cid:221)cvot pot peqicq(cid:220)uesai rsiy paqo(cid:253)rey jasethtms(cid:222)qiey cqall(cid:221)y. 1. 7. 1. 2 L (cid:221) r a j a i r t m h (cid:222) j e y j a k k i (cid:221) q c e i a y Cia sg rtm(cid:222)hg di(cid:221)ketrg jtss(cid:220)qxm jai jas(cid:220) sg di(cid:220)qjeia sgy diadijar(cid:223)ay dojil(cid:222)y ha pq(cid:221)pei ma vqgrilopoio(cid:253)msai jas(cid:220)kkgka l(cid:221)ra jakki(cid:221)qceiay jai rtmh(cid:222)jey epx(cid:220)rexy. Cia j(cid:253)ssaqa Balb/c 3T3 sa l(cid:221)ra ats(cid:220) e(cid:223)mai DMEM le pqorh(cid:222)jg 10 % oqo(cid:253) meoc(cid:221)mmgsot lorvaqio(cid:253), 4 mM ckotsal(cid:223)mg, pemijikk(cid:223)mg jai rsqepsoltj(cid:223)mg, jai ep(cid:254)arg le tcqar(cid:223)a rsoty 37 (cid:176)C/7,5 % CO2. E(cid:223)mai idia(cid:223)seqa rglamsij(cid:252), oi rtmh(cid:222)jey sgy jtssaqij(cid:222)y jakki(cid:221)qceiay ma diaruak(cid:223)- fotm vq(cid:252)mo jtssaqijo(cid:253) j(cid:253)jkot rsa jamomij(cid:220) irsoqij(cid:220) pka(cid:223)ria sxm vqgrilopoio(cid:253)lemxm jtss(cid:220)qxm (cid:222) jtssaqij(cid:254)m reiq(cid:254)m. 1. 7. 1. 3 E s o i l a r (cid:223) a s x m j a k k i e q c e i (cid:254) m J(cid:253)ssaqa ap(cid:252) jasewtcl(cid:221)mey aqvij(cid:221)y jakki(cid:221)qceiey elboki(cid:220)fomsai re l(cid:221)rom jakki(cid:221)qceiay rsgm jas(cid:220)kkgkg ptjm(cid:252)sgsa jai vxq(cid:223)fomsai re tpojakki(cid:221)qceiey sotk(cid:220)virsom lia uoq(cid:220) pqim ma vqgrilopoigho(cid:253)m rsgm in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay. Cia sg dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay, sa j(cid:253)ssaqa elboki(cid:220)fomsai re l(cid:221)rom jakki(cid:221)qceiay re ptjm(cid:252)sgsa s(cid:221)soia (cid:254)rse oi jakki(cid:221)qceiey ma lg uh(cid:220)motm re jas(cid:220)rsarg rtqqo(cid:222)y l(cid:221)vqi so s(cid:221)koy sgy dojil(cid:222)y, dgkad(cid:222) (cid:252)sam g jtssaqij(cid:222) bixril(cid:252)- sgsa pqordioq(cid:223)fesai 48 (cid:254)qey les(cid:220) sg diarpoq(cid:220) sxm jtss(cid:220)qxm. Rsgm peq(cid:223)psxrg jtss(cid:220)qxm Balb/c 3T3 jakkieqco(cid:253)le- mxm re sqtbk(cid:223)a 96 joikos(cid:222)sxm, g rtmirs(cid:254)lemg jtssaqij(cid:222) ptjm(cid:252)sgsa e(cid:223)mai 1 (cid:215)104 j(cid:253)ssaqa am(cid:220) joik(cid:252)sgsa. Cia j(cid:220)he dojilaf(cid:252)lemg vglij(cid:222) otr(cid:223)a, sa j(cid:253)ssaqa elboki(cid:220)fomsai le som (cid:223)dio sq(cid:252)po re d(cid:253)o vxqirs(cid:220) sqtbk(cid:223)a sxm 96 joikos(cid:222)sxm, sa opo(cid:223)a peqmo(cid:253)m rsg rtm(cid:221)veia sats(cid:252)vqoma ap(cid:252) (cid:252)kg sg diadijar(cid:223)a dojil(cid:222)y tp(cid:252) sats(cid:252)rgley rtmh(cid:222)jey jakki(cid:221)qceiay, ejs(cid:252)y ap(cid:252) sg vqomij(cid:222) peq(cid:223)odo (cid:252)pot (cid:221)ma ap(cid:252) sa sqtbk(cid:223)a ajsimoboke(cid:223)sai (+ UVA/oqas(cid:252)) jai so (cid:220)kko diasgqe(cid:223)sai rso rjos(cid:220)di (ﬂ UVA/oqas(cid:252)). 1. 7. 1. 4 L e s a b o k i j (cid:222) e m e q c o p o (cid:223) g r g c Am jai g vq(cid:222)rg lesabokij(cid:254)m rtrsgl(cid:220)sxm aposeke(cid:223) cemij(cid:222) apa(cid:223)sgrg cia (cid:252)key siy in vitro dojil(cid:221)y cia sgm pq(cid:252)bkewg comidiosonij(cid:254)m jai jaqjimoc(cid:252)mxm dtmasos(cid:222)sxm, l(cid:221)vqi r(cid:222)leqa, rsgm peq(cid:223)psxrg sgy uxsosonijokoc(cid:223)ay, dem tp(cid:220)qvei jali(cid:220) cmxrs(cid:222) vglij(cid:222) otr(cid:223)a cia sgm opo(cid:223)a ma vqei(cid:220)fesai lesabokij(cid:252)y lesarvglasirl(cid:252)y pqojeil(cid:221)mot g otr(cid:223)a ma dq(cid:220)rei xy uxsoson(cid:223)mg in vivo (cid:222) in vitro. ‚sri, o(cid:253)se hexqe(cid:223)sai amacja(cid:223)o o(cid:253)se dijaiokoce(cid:223)sai epirsglomij(cid:220) g ejs(cid:221)kerg sgy paqo(cid:253)ray dojil(cid:222)y le j(cid:220)poio r(cid:253)rsgla lesabokij(cid:222)y emeqcopo(cid:223)grgy. 8. 6. 2000 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm L 136/101 1. 7. 1. 5 T p (cid:252) d o j i l (cid:222) o t r (cid:223) a / p a q a r j e t Oi tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ey pq(cid:221)pei ma e(cid:223)mai pq(cid:252)ruasa paqarjetarl(cid:221)mey k(cid:223)co pqim ap(cid:252) sg vq(cid:222)rg soty, ejs(cid:252)y ji am sa tuirs(cid:220)lema rsoive(cid:223)a rsaheq(cid:252)sgsay episq(cid:221)potm sgm apoh(cid:222)jetrg. Rsgm peq(cid:223)psxrg pot tp(cid:220)qvei piham(cid:252)sgsa save(cid:223)ay uxsoapoijod(cid:252)lgrgy, lpoqe(cid:223) ma apaise(cid:223)sai paqarjet(cid:222) le eqthq(cid:252) uxy. Oi tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ey ha pq(cid:221)pei ma diak(cid:253)omsai re qthlirsij(cid:220) akaso(cid:253)va diak(cid:253)lasa, p. v. Earl’s balanced salt solu- tion, (EBSS) (cid:222) phosphate buffered saline (PBS), sa opo(cid:223)a, cia k(cid:252)coty apoutc(cid:222)y paqelbasij(cid:254)m uaimol(cid:221)mxm jas(cid:220) sg di(cid:220)qjeia sgy ajsimob(cid:252)kgrgy, pq(cid:221)pei ma e(cid:223)mai apgkkacl(cid:221)ma pqxseœmij(cid:254)m rtrsasij(cid:254)m jai vqxrsij(cid:254)m deijs(cid:254)m qG pot apoqqouo(cid:253)m so uxy. Otr(cid:223)ey le peqioqirl(cid:221)mg tdasodiakts(cid:252)sgsa ha pq(cid:221)pei ma diak(cid:253)omsai re jas(cid:220)kkgkoty diak(cid:253)sey rso ejasomsapk(cid:220)rio sgy epihtlgs(cid:222)y sekij(cid:222)y rtcj(cid:221)msqxrgy jai jas(cid:252)pim ma aqai(cid:254)momsai 1:100 le so qthlirsij(cid:252) akaso(cid:253)vo di(cid:220)ktla. Eu(cid:252)- rom vqgrilopoie(cid:223)sai diak(cid:253)sgy, ats(cid:252)y pq(cid:221)pei ma tp(cid:220)qvei re rsaheq(cid:252) (cid:252)cjo 1 % (v/v) re (cid:252)key siy jakki(cid:221)qceiey, dgkad(cid:222) s(cid:252)ro rsoty aqmgsijo(cid:253)y l(cid:220)qstqey (cid:252)ro jai re (cid:252)key siy rtcjemsq(cid:254)reiy sgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay. Xy diak(cid:253)sey rtmirs(cid:254)msai so dilehtkorotkuone(cid:223)dio (DMSO) jai g aiham(cid:252)kg (EtOH). Jas(cid:220)kkgkoi lpoqe(cid:223) ma e(cid:223)mai jai (cid:220)kkoi diak(cid:253)sey le valgk(cid:222) jtssaqosonij(cid:252)sgsa (p. v. ajes(cid:252)mg), pq(cid:221)pei (cid:252)lxy ma ek(cid:221)cvomsai pqorejsij(cid:220) l(cid:222)pxy stv(cid:252)m eluam(cid:223)fotm j(cid:220)poiey eidij(cid:221)y idi(cid:252)sgsey, p. v. amsidqo(cid:253)m le sgm tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)a, pac(cid:254)motm sgm uxsosonij(cid:222) ep(cid:223)dqarg, em(cid:254)momsai le q(cid:223)fey, j. kp. Pqoy tpobo(cid:222)hgrg sgy tpobo(cid:222)hgrgy sgy diaktsopo(cid:223)grgy ma vqgrilopoighe(cid:223), eu(cid:252)rom apaise(cid:223)sai, am(cid:220)leing le vortex (cid:222)/jai ep(cid:223)dqarg tpeq(cid:222)vxm (cid:222)/jai h(cid:221)qlamrg rsoty 37 (cid:176)C. 1. 7. 1. 6 A m s i m o b o k (cid:223) a U V p q o e s o i l a r (cid:223) a Uxseim(cid:222) pgc(cid:222): o jqiril(cid:252)seqoy paq(cid:220)comsay rsg dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay e(cid:223)mai g epikoc(cid:222) jas(cid:220)kkgkgy uxseim(cid:222)y pgc(cid:222)y jai jas(cid:220)kkgkot u(cid:223)ksqot. G f(cid:254)mg UVA jai oi oqas(cid:221)y peqiov(cid:221)y rves(cid:223)fomsai rtm(cid:222)hxy le uaim(cid:252)lema uxsoetai- rhgsopo(cid:223)grgy (7) (10), em(cid:254) g UVB rves(cid:223)fesai kic(cid:252)seqo jai e(cid:223)mai apethe(cid:223)ay k(cid:223)am jtssaqosonij(cid:222), g de jtssaqosonij(cid:252)- sgs(cid:220) sgy atn(cid:220)mesai l(cid:221)vqi so vikiapk(cid:220)rio rsgm peqiov(cid:222) ap(cid:252) 313 (cid:221)xy 280 nm (11). Rsa jqis(cid:222)qia cia sgm epikoc(cid:222) jas(cid:220)kkgkgy uxseim(cid:222)y pgc(cid:222)y ha pq(cid:221)pei ma peqikalb(cid:220)mesai xy barij(cid:222) apa(cid:223)sgrg, sa j(cid:253)lasa pot ejp(cid:221)lpomsai ap(cid:252) sg uxseim(cid:222) pgc(cid:222) ma (cid:221)votm l(cid:222)joy j(cid:253)lasoy apoqqouo(cid:253)lemo ap(cid:252) sgm tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)a em(cid:254) g uxseim(cid:222) d(cid:252)rg (pot pq(cid:221)pei ma epistcv(cid:220)mesai l(cid:221)ra re kocij(cid:252) vqomij(cid:252) di(cid:220)rsgla) ha pq(cid:221)pei ma e(cid:223)mai epaqj(cid:222)y cia sgm am(cid:223)vmetrg cmxrs(cid:254)m uxso- etairhgsopoigsij(cid:254)m otri(cid:254)m. Peqais(cid:221)qx, sa vqgrilopoio(cid:253)lema l(cid:222)jg j(cid:253)lasoy jai oi d(cid:252)reiy dem ha pq(cid:221)pei ma (cid:221)votm amep(cid:223)sqepsey epidq(cid:220)reiy rso r(cid:253)rsgla dojil(cid:222)y, rtlpeqikalbamol(cid:221)mgy jai sgy ejpolp(cid:222)y heql(cid:252)sgsay (peqiov(cid:222) tpeq(cid:253)hqot). Xy (cid:220)qirsg uxseim(cid:222) pgc(cid:222) hexqe(cid:223)sai g pqorolo(cid:223)xrg sot gkiajo(cid:253) uxs(cid:252)y le gkiajo(cid:253)y pqoroloixs(cid:221)y. Rsoty gkiajo(cid:253)y pqoroloixs(cid:221)y vqgrilopoio(cid:253)msai s(cid:252)rom s(cid:252)na Xenon (cid:252)ro jai (epivqirl(cid:221)ma) s(cid:252)na tdqaqc(cid:253)qotlesakkoakocomid(cid:223)xm. Sa seketsa(cid:223)a (cid:221)votm so pkeom(cid:221)jsgla (cid:252)si ejp(cid:221)lpotm kic(cid:252)seqg heql(cid:252)sgsa jai e(cid:223)mai uhgm(cid:252)seqa, dem saiqi(cid:220)fotm (cid:252)lxy ap(cid:252)- ktsa le so gkiaj(cid:252) uxy. Epeid(cid:222) (cid:252)koi oi gkiajo(cid:223) pqoroloixs(cid:221)y ejp(cid:221)lpotm rglamsij(cid:221)y por(cid:252)sgsey UVB, ha pq(cid:221)pei ma uiksq(cid:220)qomsai jas(cid:220)kkgka (cid:254)rse ma enarheme(cid:223) g twgk(cid:222)y jtssaqosonij(cid:252)sgsay ajsimobok(cid:223)a UVB. Cia sgm in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay ha pq(cid:221)pei ma vqgrilopoie(cid:223)sai u(cid:220)rla ajsimobok(cid:223)ay apgkkacl(cid:221)mo pqajsij(cid:220) ap(cid:252) UVB (UVA:UVB p 1:20). ‚vei dglorietse(cid:223) paq(cid:220)deicla sgy jasamol(cid:222)y sgy uarlasij(cid:222)y ajsimobok(cid:223)ay sot uiksqaqirl(cid:221)mot gkiajo(cid:253) pqoroloixs(cid:222) pot vqgrilopoi(cid:222)hgje rsg lek(cid:221)sg ep(cid:223)rgy sgy in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222)y uxsosonij(cid:252)sgsay (3). Dorolesq(cid:223)a: G (cid:221)msarg sot uxs(cid:252)y ((cid:221)msarg ajsimobok(cid:223)ay) ha pq(cid:221)pei ma ek(cid:221)cvesai jamomij(cid:220) pqim ap(cid:252) j(cid:220)he dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay, vqgrilopoi(cid:254)msay jas(cid:220)kkgko etq(cid:253)fxmo tpeqixdi(cid:252)lesqo. So UV-l(cid:221)sqo pq(cid:221)pei ma diajqib(cid:254)mesai xy pqoy sgm pgc(cid:222). G keisotqc(cid:223)a sot UV-l(cid:221)sqot ha pq(cid:221)pei ma ek(cid:221)cvesai, jai cia so rjop(cid:252) ats(cid:252), rtmirs(cid:220)sai g vq(cid:222)rg em(cid:252)y de(cid:253)seqot UV-l(cid:221)sqot amauoq(cid:220)y sot (cid:223)diot s(cid:253)pot jai le sats(cid:252)rglg diajq(cid:223)bxrg. Hexqgsij(cid:220), jas(cid:220) lec(cid:220)ka diars(cid:222)lasa, ha pq(cid:221)pei ma vqgrilopoie(cid:223)sai uarlasoajsim(cid:252)lesqo cia ma lesqi(cid:221)sai g uarlasij(cid:222) ajsimobok(cid:223)a sgy uik- sqaqirl(cid:221)mgy uxseim(cid:222)y pgc(cid:222)y jai ma ek(cid:221)cvesai g bahlom(cid:252)lgrg sot etq(cid:253)fxmot UV-l(cid:221)sqot, sa (cid:252)qcama ats(cid:220) (cid:252)lxy apaiso(cid:253)m veiqirl(cid:252) l(cid:252)mom ap(cid:252) jas(cid:220)kkgka ejpaidetl(cid:221)ma (cid:220)sola. Rsg lek(cid:221)sg epij(cid:253)qxrgy pqordioq(cid:223)rsgje (cid:252)si d(cid:252)rg 5 J/cm2 (UVA) dem paqotri(cid:220)fei jtssaqosonij(cid:252)sgsa cia sa j(cid:253)ssaqa Balb/c 3T3, e(cid:223)mai (cid:252)lxy epaqj(cid:222)y cia sg di(cid:221)ceqrg (cid:221)rsx jai arhem(cid:254)m uxsosonij(cid:254)m vglij(cid:254)m otri(cid:254)m. Cia sgm ep(cid:223)setng 5 J/cm2 ems(cid:252)y vqomijo(cid:253) diars(cid:222)lasoy 50 min, g (cid:221)msarg sgy ajsimobok(cid:223)ay pq(cid:221)pei ma pqoraql(cid:252)fesai rsa 1,666 mW/cm2. Eu(cid:252)rom vqgrilopoighe(cid:223) (cid:220)kkg jtssaqij(cid:222) reiq(cid:220) (cid:222) diauoqesij(cid:222) uxseim(cid:222) pgc(cid:222), g d(cid:252)rg UVA lpoqe(cid:223) ma pq(cid:221)pei ma pqoraqlorse(cid:223) ekauq(cid:254)y, le b(cid:220)rg sa jqis(cid:222)qia sgy lg dtrlemo(cid:253)y ep(cid:223)dqargy rsa j(cid:253)ssaqa jai sgy ep(cid:220)qjeiay cia sgm am(cid:223)vmetrg rtm(cid:222)hxm uxsosonim(cid:254)m. O vq(cid:252)moy sgy uxseim(cid:222)y (cid:221)jhergy tpokoc(cid:223)fesai le som aj(cid:252)kotho sq(cid:252)po: 1. 7. 2 Rtmh(cid:222)jey dojil(cid:222)y G l(cid:221)cirsg rtcj(cid:221)msqxrg liay tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay dem ha pq(cid:221)pei ma tpeqba(cid:223)mei sa 100 (cid:181)g/ml, auo(cid:253) (cid:252)key oi uxsoso- nij(cid:221)y otr(cid:223)ey amivme(cid:253)hgjam re valgk(cid:252)seqey rtcjemsq(cid:254)reiy, em(cid:254) re twgk(cid:252)seqey rtcjemsq(cid:254)reiy atn(cid:220)mei g piham(cid:252)sgsa elu(cid:220)mirgy (13). So qG sgy twgk(cid:252)seqgy rtcj(cid:221)msqxrgy sgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay ha pq(cid:221)pei ma e(cid:223)mai ijamopoigpj(cid:252) (peqiov(cid:222) qG: 6,5-7,8). eruakl(cid:221)mxm hesij(cid:254)m aposekerl(cid:220)sxm (tpeqbokij(cid:254)m pqobk(cid:221)wexm) L 136/102 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm 8. 6. 2000 Oi peqiov(cid:221)y rtcjemsq(cid:254)rexm liay vglij(cid:222)y otr(cid:223)ay pot tpob(cid:220)kkesai re dojil(cid:222) paqotr(cid:223)a (+ UVA) jai apotr(cid:223)a (ﬂ UVA) uxs(cid:252)y ha pq(cid:221)pei ma pqordioq(cid:223)fomsai jas(cid:220)kkgka le pqogco(cid:253)lema peiq(cid:220)lasa cia e(cid:253)qerg sgy peqiov(cid:221)y. So e(cid:253)qoy jai (cid:221)sri (cid:254)rse oi jalp(cid:253)key rtcj(cid:221)msqxrgy-ap(cid:252)jqirgy ma tporsgq(cid:223)fomsai ap(cid:252) epaqj(cid:222) peiqalasij(cid:220) dedol(cid:221)ma. Ha pq(cid:221)pei ma vqgrilopoie(cid:223)sai cexle- sqij(cid:222) reiq(cid:220) rtcjemsq(cid:254)rexm (le rsaheq(cid:252) rtmsekers(cid:222) aqa(cid:223)xrgy). so di(cid:220)rsgla liay reiq(cid:220)y rtcjemsq(cid:254)rexm pq(cid:221)pei ma pqoraql(cid:252)fomsai 1. 7. 3 Diadijar(cid:223)a dojil(cid:222) (1) 1. 7. 3. 1 P q (cid:254) s g g l (cid:221) q a Paqarjet(cid:220)fesai emai(cid:254)qgla jtss(cid:220)qxm le 1 (cid:215)105 j(cid:253)ssaqa/lk re l(cid:221)rom jakki(cid:221)qceiay jai pqors(cid:223)hemsai 100 (cid:181)l l(cid:221)rot jakki(cid:221)qceiay rsiy peqiueqeiaj(cid:221)y l(cid:252)mom joik(cid:252)sgsey em(cid:252)y lijqosiskodosijo(cid:253) sqtbk(cid:223)ot le 96 joik(cid:252)sgsey (= ketj(cid:220)). Rsiy emapol(cid:221)motrey joik(cid:252)sgsey, pqors(cid:223)hemsai 100 (cid:181)l jtssaqijo(cid:253) emaixq(cid:222)lasoy le 1 (cid:215)105 j(cid:253)ssaqa/lk (= 1 (cid:215)104 j(cid:253)ssaqa/joik(cid:252)sgsa). Cia j(cid:220)he dojilaf(cid:252)lemg otr(cid:223)a, esoil(cid:220)fomsai d(cid:253)o sqtbk(cid:223)a: (cid:221)ma cia som pqordioqirl(cid:252) sgy jtssa- qosonij(cid:252)sgsay (ﬂ UVA), jai so (cid:220)kko cia som pqordioqirl(cid:252) sgy uxsojtssaqosonij(cid:252)sgsay (+ UVA). Sa j(cid:253)ssaqa epx(cid:220)fomsai cia 24 h (7,5 % CO2, 37 (cid:176)C) (cid:221)xy (cid:252)sot rvglas(cid:223)fotm lomorsib(cid:220)da re ep(cid:223)peda glirtqqo(cid:222)y. G peq(cid:223)odoy ats(cid:222) ep(cid:254)argy episq(cid:221)pei sgm epamauoq(cid:220) re jamomij(cid:222) jas(cid:220)rsarg jai pq(cid:252)rutrg sxm jtss(cid:220)qxm jai sgm ejhe- sij(cid:222) soty a(cid:253)ngrg. 1. 7. 3. 2 D e (cid:253) s e q g g l (cid:221) q a Les(cid:220) sgm ep(cid:254)arg, so l(cid:221)rom jakki(cid:221)qceiay apolajq(cid:253)mesai ap(cid:252) sa j(cid:253)ssaqa jai ajokothe(cid:223) dipk(cid:222) (cid:221)jpktrg le 150 (cid:181)l EBSS/PBS am(cid:220) joik(cid:252)sgsa. Pqors(cid:223)hemsai 100 (cid:181)l EBSS/PBS le sgm jas(cid:220)kkgkg rtcj(cid:221)msqxrg otr(cid:223)ay (cid:222) apk(cid:254)y diak(cid:253)sg (aqmgsij(cid:252)y l(cid:220)qstqay). Vqgrilopoio(cid:253)msai 8 diauoqesij(cid:221)y rtcjemsq(cid:254)reiy sgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay. Sa j(cid:253)ssaqa epx(cid:220)fomsai le sgm tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)a rso rjos(cid:220)di cia 60 keps(cid:220) (7,5 % CO2, 37 (cid:176)C). Cia sgm ejs(cid:221)kerg sot (+ UVA) sl(cid:222)lasoy sgy dojil(cid:222)y, sa j(cid:253)ssaqa ajsimoboko(cid:253)msai l(cid:221)ra ap(cid:252) so jap(cid:220)ji sot sqt- bk(cid:223)ot le 96 joik(cid:252)sgsey le 1,7 mW/cm2 UVA (= 5 J/cm2). Cia sgm apoutc(cid:222) rtlp(cid:253)jmxrgy tdqasl(cid:254)m j(cid:220)sx ap(cid:252) so jap(cid:220)ji vqgrilopoie(cid:223)sai (cid:221)may amelirs(cid:222)qay. Dipk(cid:220) sqtbk(cid:223)a (ﬂ UVA) diasgqo(cid:253)msai re heqlojqar(cid:223)a dxlas(cid:223)ot l(cid:221)ra re (cid:221)ma rjoseim(cid:252) jots(cid:223) cia 50 min (= vq(cid:252)moy (cid:221)jhergy UVA). So tp(cid:252) dojil(cid:222) di(cid:220)ktla lesacc(cid:223)fesai jai ajokothe(cid:223) (cid:221)jpktrg d(cid:253)o uoq(cid:221)y le 150 (cid:181)l EBSS/PBS. So EBSS/PBS amsija- h(cid:223)rsasai le l(cid:221)rom jakki(cid:221)qceiay jai ajokothe(cid:223) ep(cid:254)arg (7,5 % CO2, 37 (cid:176)C) (cid:252)kg sg m(cid:253)jsa (18-22 h). 1. 7. 3. 3 S q (cid:223) s g g l (cid:221) q a Lijqorjopij(cid:222) aniok(cid:252)cgrg Sa j(cid:253)ssaqa enes(cid:220)fomsai re lijqorj(cid:252)pio ams(cid:223)hergy u(cid:220)rexm. Jasacq(cid:220)uomsai oi loquokocij(cid:221)y akkac(cid:221)y sxm jtss(cid:220)qxm pot oue(cid:223)komsai rsgm jtssaqosonij(cid:222) ep(cid:223)dqarg sgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay. O (cid:221)kecvoy ats(cid:252)y rtm(cid:223)rsasai cia sgm apoutc(cid:222) peiqalasij(cid:254)m kah(cid:254)m, sa rsoive(cid:223)a (cid:252)lxy ats(cid:220) dem vqgrilopoio(cid:253)msai cia sgm ejs(cid:223)lgrg sgy jtssaqosonij(cid:252)sgsay (cid:222) sgy uxsosonij(cid:252)sgsay. Dojil(cid:222) neutral red uptake Sa j(cid:253)ssaqa ejpk(cid:253)momsai le 150 (cid:181)l pqoheqlarl(cid:221)mo EBSS/PBS. So di(cid:220)ktla ejpk(cid:253)rexy apolajq(cid:253)mesai le (cid:222)pia (cid:220)mskgrg. Pqors(cid:223)hemsai 100 (cid:181)l l(cid:221)rot NR jai ajokothe(cid:223) ep(cid:254)arg rsoty 37 (cid:176)C, re (cid:221)mtcqg asl(cid:252)ruaiqa le 7,5 % CO2 cia 3 h. Les(cid:220) sgm ep(cid:254)arg, so l(cid:221)rom NR apolajq(cid:253)mesai jai sa j(cid:253)ssaqa ejpk(cid:221)momsai le 150 (cid:181)l EBSS/PBS. Ajokothe(cid:223) oko- jkgqxsij(cid:222) les(cid:220)ccirg jai rs(cid:253)pxrg sot EBSS/PBS. (Pqoaiqesij(cid:254)y: am(cid:220)rsqoug utcoj(cid:221)msqgrg) Pqors(cid:223)hemsai ajqib(cid:254)y 150 (cid:181)l di(cid:220)ktla ejq(cid:252)ugrgy NR (pqoru(cid:220)sxy paqarjetarh(cid:221)m di(cid:220)ktla aiham(cid:252)kgy/onijo(cid:253) on(cid:221)oy) So lijqosiskodosij(cid:252) sqtbk(cid:223)o amajime(cid:223)sai le sav(cid:253)sgsa le sg bo(cid:222)heia amasaq(cid:220)jsg (r(cid:221)ijeq) lijqosiskodosij(cid:254)m sqt- bk(cid:223)xm ep(cid:223) 10 min, l(cid:221)vqiy (cid:252)sot ejvtkirse(cid:223) so NR ap(cid:252) sa j(cid:253)ssaqa jai rvglasirse(cid:223) oloiocem(cid:221)y di(cid:220)ktla. Lesqi(cid:221)sai g opsij(cid:222) ptjm(cid:252)sgsa sot ejvtk(cid:223)rlasoy NR rsa 540 nm le uarlasouxs(cid:252)lesqo, vqgrilopoi(cid:254)msay sa ketj(cid:220) xy rgle(cid:223)a amauoq(cid:220)y. Sa dedol(cid:221)ma r(cid:254)fomsai re jas(cid:220)kkgkg loqu(cid:222) (p. v. ASCII) cia lesacem(cid:221)rseqg am(cid:220)ktrg. (1) Pq(cid:252)rhesey kepsol(cid:221)qeiey lpoqo(cid:253)m ma bqeho(cid:253)m rsgm paqapolp(cid:222) 12. 8. 6. 2000 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm L 136/103 2 DEDOLEMA 2. 1 Poi(cid:252)sgsa jai por(cid:252)sgsa dedol(cid:221)mxm Sa dedol(cid:221)ma ha pq(cid:221)pei ma e(cid:223)mai s(cid:221)soia (cid:254)rse ma lpoqe(cid:223) ma c(cid:223)mei otriarsij(cid:222) am(cid:220)ktrg sgy rv(cid:221)rgy rtcj(cid:221)msqxrgy-ap(cid:252)- jqirgy paqotr(cid:223)a jai apotr(cid:223)a UVA/oqas(cid:222)y ajsimobok(cid:223)ay. Eu(cid:252)rom diapirsxhe(cid:223) jtssaqosonij(cid:252)sgsa, s(cid:252)ro so e(cid:253)qoy sxm rtcjemsq(cid:254)rexm (cid:252)ro jai so lesan(cid:253) sxm epil(cid:221)qoty rtcjemsq(cid:254)rexm di(cid:220)rsgla ha pq(cid:221)pei ma qthl(cid:223)fomsai (cid:221)sri (cid:254)rse ma lpoqe(cid:223) ma vaqavhe(cid:223) jalp(cid:253)kg r(cid:253)luxma le sa peiqalasij(cid:220) dedol(cid:221)ma. K(cid:252)cx sot (cid:252)si lia tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)a lpoqe(cid:223) ma lgm e(cid:223)mai jtssaqosonij(cid:222) l(cid:221)vqi sgm jahoqirl(cid:221)mg oqiaj(cid:222) rtcj(cid:221)msqxrg sxm 100 (cid:181)g/ml rso rjoseim(cid:252) pe(cid:223)qala (ﬂ UVA), akk(cid:220) k(cid:223)am sonij(cid:222) (cid:252)sam ajsimoboke(cid:223)sai (+ UVA), sa pqoy (cid:221)kecvo e(cid:253)qg sxm rtcjemsq(cid:254)rexm jai rsa d(cid:253)o l(cid:221)qg sot peiq(cid:220)lasoy lpoqe(cid:223) ma vqei(cid:220)fesai ma diau(cid:221)qotm jas(cid:220) s(cid:220)neiy lec(cid:221)hoty (cid:254)rse ma pkgqo(cid:253)sai g apa(cid:223)sgrg sgy jas(cid:220)kkgkgy poi(cid:252)sgsay sxm dedol(cid:221)mxm. Eu(cid:252)rom dem diapirsxhe(cid:223) jtssaqosonij(cid:252)sgsa jai rsa d(cid:253)o l(cid:221)qg sot peiq(cid:220)lasoy (ﬂ UVA jai + UVA)), aqje(cid:223) (cid:221)kecvoy le lec(cid:220)kg ap(cid:252)rsarg lesan(cid:253) lelomxl(cid:221)mxm d(cid:252)rexm l(cid:221)vqi sgm twgk(cid:252)seqg rtj(cid:221)msqxrg. Dem vqei(cid:220)fesai opoiad(cid:222)pose epak(cid:222)hetrg le epamakgpsij(cid:252) pe(cid:223)qala rsgm peq(cid:223)psxrg rauo(cid:253)y hesijo(cid:253) aposek(cid:221)rlasoy. Epipk(cid:221)om, dem vqei(cid:220)fesai ma epakghe(cid:253)omsai o(cid:253)se sa rau(cid:222) aqmgsij(cid:220) aposek(cid:221)rlasa, tp(cid:252) sgm pqoßp(cid:252)herg (cid:252)si g tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)a enes(cid:220)rsgje re epaqj(cid:254)y twgk(cid:221)y rtcjemsq(cid:254)reiy. Rsiy peqips(cid:254)reiy ats(cid:221)y, aqje(cid:223) (cid:221)ma j(cid:253)qio pe(cid:223)qala, epi- jotqo(cid:253)lemo ap(cid:252) (cid:221)ma (cid:222) peqirr(cid:252)seqa pqojasaqjsij(cid:220) peiq(cid:220)lasa ame(cid:253)qergy e(cid:253)qoty rtcjemsq(cid:254)rexm. Dojil(cid:221)y le oqiaj(cid:220) aposek(cid:221)rlasa joms(cid:220) rsg cqall(cid:222) sol(cid:222)y sot loms(cid:221)kot pq(cid:252)bkewgy ha pq(cid:221)pei ma epamakalb(cid:220)momsai cia epak(cid:222)hetrg. Eu(cid:252)rom hexqghe(cid:223) amacja(cid:223)a g epam(cid:220)kgwg sgy dojil(cid:222)y s(cid:252)se, cia sg k(cid:222)wg rauo(cid:253)y aposek(cid:221)rlasoy, lpoqe(cid:223) ma pa(cid:223)fei rglamsij(cid:252) q(cid:252)ko g diaj(cid:253)lamrg sxm peiqalasij(cid:254)m rtmhgj(cid:254)m. Lia barij(cid:222) lesabkgs(cid:222) rsg dojil(cid:222) ats(cid:222) e(cid:223)mai g paqa- rjet(cid:222) sxm diaktl(cid:220)sxm sgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay. Rtmep(cid:254)y, g diaj(cid:253)lamrg ats(cid:254)m sxm rtmhgj(cid:254)m (rtmdiak(cid:253)sgy, keiosq(cid:223)- bgrg, euaqloc(cid:222) tpeq(cid:222)vxm) lpoqe(cid:223) ma (cid:221)vei otriarsij(cid:222) rglar(cid:223)a rsgm epam(cid:220)kgwg sgy dojil(cid:222)y. Emakkajsij(cid:254)y, lpoqe(cid:223) ma enesarse(cid:223) jai g diaj(cid:253)lamrg sot pqo sgy ajsimobok(cid:222)rexy vq(cid:252)mot epx(cid:220)rexy. G bq(cid:220)vtmrg sot vq(cid:252)mot lpoqe(cid:223) ma (cid:221)vei idia(cid:223)seqg rglar(cid:223)a rsgm peq(cid:223)psxrg tdasoarsah(cid:254)m vglij(cid:254)m otri(cid:254)m. 2. 2 Epeneqcar(cid:223)a sxm aposekerl(cid:220)sxm …pot e(cid:223)mai dtmas(cid:252)m, pqordioq(cid:223)fesai g rtcj(cid:221)msqxrg liay tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay pot paqotri(cid:220)fei 50 % amarsok(cid:222) sgy jtssaqij(cid:222)y NRU (EC50). Ats(cid:252) lpoqe(cid:223) ma c(cid:223)mei euaql(cid:252)fomsay opoiad(cid:222)pose jas(cid:220)kkgkg diadijar(cid:223)a lg cqallij(cid:222)y ama- cxc(cid:222)y (jas(cid:220) pqos(cid:223)lgrg Hill (cid:222) kocirsij(cid:222) amacxc(cid:222)) rsa dedol(cid:221)ma rtcj(cid:221)msqxrgy-ap(cid:252)jqirgy, (cid:222) vqgrilopoi(cid:254)msay (cid:220)kkey diadijar(cid:223)ey pqoraqloc(cid:222)y (14). Pqim vqgrilopoighe(cid:223) j(cid:220)poia sil(cid:222) EC50 cia peqais(cid:221)qx tpokocirlo(cid:253)y, ha pq(cid:221)pei ma ek(cid:221)cvesai jas(cid:220)kkgka g poi(cid:252)sgsa sgy pqoraqloc(cid:222)y. Emakkajsij(cid:254)y, cia som tpokocirl(cid:252) sgy EC50 lpoqo(cid:253)m ma vqgri- lopoigho(cid:253)m cqauij(cid:221)y l(cid:221)hodoi pqoraqloc(cid:222)y. Rsgm peq(cid:223)psxrg ats(cid:222), rtmirs(cid:220)sai g vq(cid:222)rg v(cid:220)qsot pihamos(cid:222)sxm ((cid:215)(cid:150)jk(cid:223)- laja: log, y(cid:150)jk(cid:223)laja: probit), jah(cid:254)y re pokk(cid:221)y peqips(cid:254)reiy g rtm(cid:220)qsgrg rtcj(cid:221)msqxrgy-ap(cid:252)jqirgy jah(cid:223)rsasai rve- d(cid:252)m cqallij(cid:222) les(cid:220) so lesarvglasirl(cid:252) ats(cid:252). 2. 3 Aniok(cid:252)cgrg sxm aposekerl(cid:220)sxm (loms(cid:221)ka pq(cid:252)bkewgy) 2. 3. 1 Loms(cid:221)ko pq(cid:252)bkewgy (cid:221)jdorg 1: rtmsekers(cid:222)y uxsoeqehirlo(cid:253) (PIF) E(cid:220)m s(cid:252)ro paqotr(cid:223)a (+ UVA) (cid:252)ro jai apotr(cid:223)a (ﬂ UVA) uxs(cid:252)y, kalb(cid:220)momsai pk(cid:222)qeiy jalp(cid:253)key rtcj(cid:221)msqxrgy ap(cid:252)- jqirgy, o rtmsekers(cid:222)y uxsoeqehirlo(cid:253) (PIF) tpokoc(cid:223)fesai le som aj(cid:252)kotho s(cid:253)po: Sil(cid:222) PIF < 5, rgla(cid:223)mei lg uxsosonij(cid:222) dtmas(cid:252)sgsa, sil(cid:222) PIF ¯ 5 rgla(cid:223)mei uxsosonij(cid:222) dtmas(cid:252)sgsa. E(cid:220)m lia vglij(cid:222) otr(cid:223)a e(cid:223)mai jtssaqosonij(cid:222) l(cid:252)mo tp(cid:252) rtmh(cid:222)jey + UVA jai lg jtssaqosonij(cid:222) (cid:252)sam dojil(cid:220)fesai tp(cid:252) rtmh(cid:222)jey ﬂ UVA o PIF dem lpoqe(cid:223) ma tpokocirse(cid:223), am jai ats(cid:252) e(cid:223)mai (cid:221)ma apos(cid:221)kerla pot de(cid:223)vmei uxsososonij(cid:222) dtma- s(cid:252)sgsa. Rsiy peqips(cid:254)reiy ats(cid:221)y, lpoqe(cid:223) ma tpokocirse(cid:223) lia sil(cid:222) (cid:147)PIF(cid:148) e(cid:220)m g dojil(cid:222) jtssaqosonij(cid:252)sgsay (ﬂ) ejseke- rse(cid:223) l(cid:221)vqi sgm am(cid:254)sasg rtcj(cid:221)msqxrg dojil(cid:222)y (Cmax) op(cid:252)se ats(cid:222) g sil(cid:222) vqgrilopoie(cid:223)sai cia som tpokocirl(cid:252) sgy (cid:147)PIF(cid:148): E(cid:220)m lpoqe(cid:223) ma kguhe(cid:223) l(cid:252)mom sil(cid:222) (cid:147)<PIF(cid:148), s(cid:252)se j(cid:220)he sil(cid:222)> 1 pqok(cid:221)cei uxsosonij(cid:222) dtmas(cid:252)sgsa. E(cid:220)m dem lpoqo(cid:253)m ma tpokocirso(cid:253)m o(cid:253)se g EC50 (ﬂ UV) o(cid:253)se g EC50 (+ UV) k(cid:252)cx sot (cid:252)si g vglij(cid:222) otr(cid:223)a dem de(cid:223)vmei jall(cid:223)a jtssaqosonij(cid:252)sgsa l(cid:221)vqi sg l(cid:221)cirsg rtcj(cid:221)msqxrg dojil(cid:222)y, ats(cid:252) de(cid:223)vmei sgm lg (cid:253)paqng uxsosonij(cid:222)y dtmas(cid:252)- sgsay. Rsiy peqips(cid:254)reiy ats(cid:221)y, cia som vaqajsgqirl(cid:252) sot aposek(cid:221)rlasoy vqgrilopoie(cid:223)sai (cid:221)ma stpij(cid:252) (cid:147)PIF = * 1(cid:148): L 136/104 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm 8. 6. 2000 E(cid:220)m lpoqe(cid:223) ma kguhe(cid:223) l(cid:252)mo g sil(cid:222) (cid:147)PIF = * 1(cid:148) ats(cid:252) rgla(cid:223)mei sg lg (cid:253)paqng uxsosonij(cid:222)y dtmas(cid:252)sgsay. Rsiy peqips(cid:254)reiy (b) jai (c), ha pq(cid:221)pei ma kalb(cid:220)momsai robaq(cid:220) tp(cid:252)wg oi rtcjemsq(cid:254)reiy pot kalb(cid:220)momsai rsgm in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay pqojeil(cid:221)mot ma pqobkeuhe(cid:223) g uxsosonij(cid:222) dtmas(cid:252)sgsa 2. 3. 2 Loms(cid:221)ko pq(cid:252)bkeiwgy (cid:221)jdorg 2: l(cid:221)rg uxsoep(cid:223)dqarg (MPE) Emakkajsij(cid:220), lpoqe(cid:223) ma euaqlorse(cid:223) jai lia m(cid:221)a (cid:221)jdorg sot loms(cid:221)kot cia sgm pq(cid:252)bkewg sgy uxsosonij(cid:222)y dtmas(cid:252)- sgsay, pot (cid:221)vei amapstvhe(cid:223) vqgrilopoi(cid:254)msay dedol(cid:221)ma sgy lek(cid:221)sgy epij(cid:253)qxrgy sxm EE/COLIPA (15) jai dojilarse(cid:223) tp(cid:252) stuk(cid:221)y rtmh(cid:222)jey re lesacem(cid:221)rseqg lek(cid:221)sg cia sgm in vitro uxsosonij(cid:252)sgsa vglij(cid:254)m u(cid:223)ksqxm UV (13). So loms(cid:221)ko ats(cid:252) tpeqpgd(cid:220) som peqioqirl(cid:252) sot loms(cid:221)kot PIF rsiy peqips(cid:254)reiy pot dem lpoqe(cid:223) ma kguhe(cid:223) sil(cid:222) EC50. So loms(cid:221)ko vqgrilopoie(cid:223) sg (cid:147)l(cid:221)rg uxsoep(cid:223)dqarg(cid:148) (MPE), l(cid:221)sqo so opo(cid:223)o bar(cid:223)fesai re r(cid:253)cjqirg sxm pk(cid:222)qxm jalpt- k(cid:254)m rtcj(cid:221)msqxrgy ap(cid:252)jqirgy. Cia sgm euaqloc(cid:222) sot loms(cid:221)kot MPE, amaps(cid:253)vhgje rso Humboldt University (Berlin, D) (cid:221)ma eidij(cid:252) kocirlij(cid:252) pot lpoqe(cid:223) ma paqakguhe(cid:223) dxqe(cid:220)m. 2. 4 Eqlgme(cid:223)a sxm aposekerl(cid:220)sxm Hesij(cid:252) apos(cid:221)kerla rsgm in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay (PIF ¯ 5 (cid:222) MPE ¯ 0,1) rgla(cid:223)mei (cid:252)si g tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)a (cid:221)vei uxsosonij(cid:222) dtmas(cid:252)sgsa. E(cid:220)m so apos(cid:221)kerla ats(cid:252) kalb(cid:220)mesai re rtcjemsq(cid:254)reiy j(cid:220)sx sxm 10 (cid:181)g/ ml, g tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)a e(cid:223)mai ep(cid:223)rgy piham(cid:252)m ma dqa jai xy uxsoson(cid:223)mg jai tp(cid:252) poij(cid:223)key rtmh(cid:222)jey (cid:221)jhergy in vivo. E(cid:220)m kguhe(cid:223) hesij(cid:252) apos(cid:221)kerla l(cid:252)mo rsg l(cid:221)cirsg rtcj(cid:221)msqxrg dojil(cid:222)y sxm 100 (cid:181)g/ml, cia sgm ejs(cid:223)lgrg sxm jimd(cid:253)mxm (cid:222) sgy uxsosonij(cid:222)y irv(cid:253)oy lpoqe(cid:223) ma apaise(cid:223)sai ma kguho(cid:253)m tp(cid:252)wg jai (cid:220)kka rsoive(cid:223)a. Re ats(cid:220) lpoqe(cid:223) ma peqikalb(cid:220)momsai rsoive(cid:223)a cia sg die(cid:223)rdtrg, sgm apoqq(cid:252)ugrg jai piham(cid:222) rtrr(cid:254)qetrg sgy otr(cid:223)ay rso d(cid:221)qla, (cid:222) (cid:221)kecvoy sgy otr(cid:223)ay re epibebaixsij(cid:222) emakkajsij(cid:222) dojil(cid:222), p. v. vqgrilopoi(cid:254)msay loms(cid:221)ko amhq(cid:254)pimot d(cid:221)qlasoy in vitro. Aqmgsij(cid:252) apos(cid:221)kerla ap(cid:252) sgm in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay (PIF < 5 (cid:222) MPE < 0,1) rgla(cid:223)mei (cid:252)si g tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)a dem e(cid:223)mai uxsosonij(cid:222) rsa jakkieqcgl(cid:221)ma j(cid:253)ssaqa hgkarsij(cid:254)m tp(cid:252) siy vqgrilopoio(cid:253)lemey rtmh(cid:222)jey. Rsiy peqips(cid:254)reiy (cid:252)pot g otr(cid:223)a lp(cid:252)qere ma dojilarse(cid:223) l(cid:221)vqi sg l(cid:221)cirsg rtcj(cid:221)msqxrg sxm 100 (cid:181)g/ml, stv(cid:252)m aqmgsij(cid:252) apos(cid:221)kerla rgla(cid:223)mei (cid:252)si g otr(cid:223)a dem (cid:221)vei uxsosonij(cid:222) dtmas(cid:252)sgsa, g de uxsosonij(cid:252)sgsa in vivo lpo- qe(cid:223) ma hexqghe(cid:223) xy ap(cid:223)hamg. Rsiy peqips(cid:254)reiy (cid:252)pot ek(cid:222)uhgram sats(cid:252)rgley apojq(cid:223)reiy rtcj(cid:221)msqxrgy-sonij(cid:252)sgsay (EC50 + UV jai EC50 ﬂ UV) re valgk(cid:252)seqey rtcjemsq(cid:254)reiy g eqlgme(cid:223)a sxm aposekerl(cid:220)sxm lpoqe(cid:223) ma e(cid:223)mai g (cid:223)dia. Amsih(cid:221)sxy, am dem jasade(cid:223)vhgje sonij(cid:252)sgsa (+ UV jai ﬂ UV) akk(cid:220) k(cid:252)cx leixl(cid:221)mgy tdasodiakts(cid:252)sgsay sgy otr(cid:223)ay oi rtcjemsq(cid:254)reiy peqioq(cid:223)rsgjam re sil(cid:221)y valgk(cid:252)seqey sxm 100 (cid:181)g/ml, s(cid:252)se lpoqe(cid:223) ma sehe(cid:223) em aluibok(cid:223)a g rtlbas(cid:252)- sgsa sgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay le sg dojil(cid:222) jai ha pq(cid:221)pei ma enesarse(cid:223) so emdev(cid:252)lemo dienacxc(cid:222)y epibebaixsij(cid:222)y doji- lar(cid:223)ay (p. v. , vqgrilopoi(cid:254)msay loms(cid:221)ko d(cid:221)qlasoy im xisqo, (cid:222) loms(cid:221)ko d(cid:221)qlasoy ex vivo or dojil(cid:222) in vivo). 3 AMAUOQA ‚jherg dojil(cid:222)y G (cid:221)jherg dojil(cid:222)y pq(cid:221)pei ma peqikalb(cid:220)mei sa aj(cid:252)kotha rsoive(cid:223)a: Tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)a: (cid:151) rsoive(cid:223)a satsopo(cid:223)grgy jai aqihl(cid:252)y CAS, e(cid:220)m e(cid:223)mai cmxrs(cid:220), (cid:151) utrij(cid:222) loqu(cid:222) jai jahaq(cid:252)sgsa, (cid:151) utrijovglij(cid:221)y idi(cid:252)sgsey rvesij(cid:221)y le sg dienacxc(cid:222) sgy lek(cid:221)sgy, (cid:151) rsaheq(cid:252)sgsa jai uxsorsaheq(cid:252)sgsa, e(cid:220)m e(cid:223)mai cmxrs(cid:221)y. Diak(cid:253)sgy: (cid:151) aisioj(cid:252)cgrg sgy epikoc(cid:222)y sot diak(cid:253)sg, (cid:151) diakts(cid:252)sgsa sgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay rsom diak(cid:253)sg, (cid:151) porors(cid:252) diak(cid:253)sg etqirj(cid:252)lemo rso l(cid:221)ro jaseqcar(cid:223)ay (EBSS (cid:222) PBS). J(cid:253)ssaqa: (cid:151) s(cid:253)poy jai pgc(cid:222) jtss(cid:220)qxm (cid:151) apotr(cid:223)a ltjopk(cid:220)rlasoy, (cid:151) aqihl(cid:252)y jtssaqij(cid:254)m dieke(cid:253)rexm, am e(cid:223)mai cmxrs(cid:221)y, (cid:151) etairhgr(cid:223)a sxm jtss(cid:220)qxm re UVA, pqordioqif(cid:252)lemg le som enopkirl(cid:252) ajsimob(cid:252)kgrgy pot vqgrilopoie(cid:223)sai rsgm in vitro 3T3 NRU dojil(cid:222) uxsosonij(cid:252)sgsay. Rtmh(cid:222)jey dojil(cid:222)y (a)/ep(cid:254)arg pqim jai les(cid:220) sgm jaseqcar(cid:223)a: (cid:151) s(cid:253)poy jai r(cid:253)rsarg sot l(cid:221)rot jakki(cid:221)qceiay, (cid:151) rtmh(cid:222)jey ep(cid:254)argy (rtcj(cid:221)msqxrg CO2, heqlojqar(cid:223)a, tcqar(cid:223)a), (cid:151) di(cid:220)qjeia sgy ep(cid:254)argy (pqojaseqcar(cid:223)a, lesajaseqcar(cid:223)a). 8. 6. 2000 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm L 136/105 Rtmh(cid:222)jey dojil(cid:222)y (b)/jaseqcar(cid:223)a le sgm vglij(cid:222) otr(cid:223)a: (cid:151) rjepsij(cid:252) sgy epikoc(cid:222)y sxm rtcjemsq(cid:254)rexm sgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay pot vqgrilopoio(cid:253)msai le jai vxq(cid:223)y ajsimob(cid:252)- kgrg UV/oqaso(cid:253), (cid:151) re peq(cid:223)psxrg peqioqirl(cid:221)mgy diakts(cid:252)sgsay sgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay jai apotr(cid:223)ay jtssaqosonij(cid:252)sgsay, rjepsij(cid:252) sgy vqgrilopoighe(cid:223)ray twgk(cid:252)seqgy rtcj(cid:221)msqxrgy, (cid:151) s(cid:253)poy jai r(cid:253)rsarg sot l(cid:221)rot jaseqcar(cid:223)ay (qthlirsij(cid:252) akaso(cid:253)vo di(cid:220)ktla), (cid:151) di(cid:220)qjeia sgy vglij(cid:222)y jaseqcar(cid:223)ay. Rtmh(cid:222)jey dojil(cid:222)y (c)/ajsimob(cid:252)kgrg: (cid:151) rjepsij(cid:252) epikoc(cid:222)y sgy vqgrilopoio(cid:253)lemgy uxseim(cid:222)y pgc(cid:222)y, (cid:151) vaqajsgqirsij(cid:220) uarlasij(cid:222)y amsimobok(cid:223)ay sgy uxseim(cid:222)y pgc(cid:222)y, (cid:151) vaqajsgqirsij(cid:220) diau(cid:220)meiay/apoqq(cid:252)ugrgy sot (cid:222) sxm vqgrilopoio(cid:253)lemxm u(cid:223)ksqxm, (cid:151) vaqajsgqirsij(cid:220) sot ajsimol(cid:221)sqot jai kepsol(cid:221)qeiey diajq(cid:223)bxr(cid:222)y sot, (cid:151) ap(cid:252)rsarg sgy uxseim(cid:222)y pgc(cid:222)y ap(cid:252) so r(cid:253)rsgla dojil(cid:222)y, (cid:151) (cid:221)msarg ajsimobok(cid:223)ay UVA rsgm ap(cid:252)rsarg ats(cid:222), ejuqaf(cid:252)lemg re mW/cm2, (cid:151) di(cid:220)qjeia (cid:221)jhergy re UV/oqas(cid:252) uxy, (cid:151) d(cid:252)rg UVA ((cid:221)msarg ajsimobok(cid:223)ay (cid:215) vq(cid:252)moy), ejuqaf(cid:252)lemg re J/cm2, (cid:151) heqlojqar(cid:223)a vqgrilopoio(cid:253)lemg rsiy jtssaqij(cid:221)y jakki(cid:221)qceiey jas(cid:220) sg di(cid:220)qjeia sgy ajsimob(cid:252)kgrgy jai rsiy sat- sovq(cid:252)mxy diasgqo(cid:253)lemey rso rjos(cid:220)di jtssaqij(cid:221)y jakki(cid:221)qceiey. Rtmh(cid:222)jey dojil(cid:222)y (d)/dojil(cid:222) NRU: (cid:151) r(cid:253)rsarg sot l(cid:221)rot NR, (cid:151) di(cid:220)qjeia ep(cid:254)argy NR, (cid:151) rtmh(cid:222)jey ep(cid:254)argy (rtcj(cid:221)msqxrg CO2, heqlojqar(cid:223)a, tcqar(cid:223)a), (cid:151) rtmh(cid:222)jey ejv(cid:253)kirgy NR (ejvtkirsij(cid:252), di(cid:220)qjeia), (cid:151) l(cid:222)joy j(cid:253)lasoy vqgrilopoio(cid:253)lemo cia sgm uarlasouxsolesqij(cid:222) am(cid:220)cmxrg sgy opsij(cid:222)y ptjm(cid:252)sgsay NR, (cid:151) de(cid:253)seqo l(cid:222)joy j(cid:253)lasoy (amauoq(cid:220)y), eu(cid:252)ro vqgrilopoie(cid:223)sai, (cid:151) peqiev(cid:252)lemo ketjo(cid:253) sot uarlasouxsol(cid:221)sqot, eu(cid:252)rom vqgrilopoie(cid:223)sai. Aposek(cid:221)rlasa: (cid:151) jtssaqij(cid:222) bixl(cid:252)sgsa kalbam(cid:252)lemg re j(cid:220)he rtcj(cid:221)msqxrg sgy tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay, ejuqaf(cid:252)lemg re pororsia(cid:223)a l(cid:221)rg bixril(cid:252)sgsa sxm laqs(cid:253)qxm, (cid:151) jalp(cid:253)key rtcj(cid:221)msqxrgy (cid:151) ap(cid:252)jqirgy (rtcj(cid:221)msqxrg tp(cid:252) dojil(cid:222) otr(cid:223)ay re rtm(cid:220)qsgrg le sg rvesij(cid:222) jtssaqij(cid:222) bixril(cid:252)sgsa), kalbam(cid:252)lemey re sats(cid:252)vqoma peiq(cid:220)lasa + UVA jai ﬂ UVA, (cid:151) am(cid:220)ktrg dedol(cid:221)mxm jalptk(cid:254)m rtj(cid:221)msqxrgy (cid:151) ap(cid:252)jqirgy: eu(cid:252)rom e(cid:223)mai dtmas(cid:252)m, ejs(cid:223)lgrg/tpokocirl(cid:252)y sxm EC50 (+ UVA) jai EC50 (ﬂ UVA), (cid:151) r(cid:253)cjqirg sxm d(cid:253)o jalptk(cid:254)m rtcj(cid:221)msqxrgy - ap(cid:252)jqirgy pot kalb(cid:220)momsai le jai vxq(cid:223)y ajsimob(cid:252)kgrg UVA/oqa- so(cid:253) e(cid:223)se le tpokocirl(cid:252) sot rtmsekers(cid:222) uxsoeqehirlo(cid:253) (PIF) e(cid:223)se le tpokocirl(cid:252) sgy l(cid:221)rgy uxsoep(cid:223)dqargy (MPE), (cid:151) sanim(cid:252)lgrg sgy uxsosonij(cid:222)y dtmas(cid:252)sgsay, (cid:151) jqis(cid:222)qia apodov(cid:222)y dojil(cid:222)y (a)/sats(cid:252)vqomoy aqmgsij(cid:252)y l(cid:220)qstqay: (cid:151) ap(cid:252)ktsg bixril(cid:252)sgsa (opsij(cid:222) ptjm(cid:252)sgsa ejvtk(cid:223)rlasoy NR) ajsimobokgl(cid:221)mxm jai lg jtss(cid:220)qxm, (cid:151) irsoqij(cid:220) rsoive(cid:223)a aqmgsijo(cid:253) l(cid:220)qstqa, l(cid:221)rg sil(cid:222) jai stpij(cid:222) ap(cid:252)jkirg, jqis(cid:222)qia apodov(cid:222)y dojil(cid:222)y (b)/sats(cid:252)vqomoy hesij(cid:252)y l(cid:220)qstqay: (cid:151) EC50 (+ UVA) jai EC50 (ﬂ UVA) jai PIF hesijo(cid:253) l(cid:220)qstqa, (cid:151) irsoqij(cid:220) rsoive(cid:223)a hesijo(cid:253) l(cid:220)qstqa: EC50 (+ UVA) jai EC50 (ﬂ UVA) jai PIF, lrg sil(cid:222) jai stpij(cid:222) ap(cid:252)- jkirg Rtf(cid:222)sgrg sxm aposekerl(cid:220)sxm Rtlpeq(cid:220)rlasa L 136/106 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm 8. 6. 2000 4 PAQAPOLPER (1) Spielmann, H. , Balls, M. , D(cid:246)ring, B. , Holzh(cid:252)tter, H. G. , Kalweit, S. , Klecak, G. , L’Eplattenier, H. , Liebsch, M. , Lovell, W. W. , Maurer, T. , Moldenhauer, F. , Moore, L. , Pape, W. , Pfannbecker, U. , Potthast, J. , De Silva, O. , Steiling, W. and Willshaw, A. ( 1994), EEC/COLIPA project on in vitro phototoxicity testing: First results obtained with a Balb/c 3T3 cell phototoxicity assay, Toxicology in Vitro 8, rr. 793-796. (2) Anon (1998), Statement on the scientific validity of the 3T3 NRU PT test (an in vitro test for phototoxi- city), European Commission, Joint Research Centre: ECVAM and DGXI/E/2, 3 November 1997, ATLA 26, rr. 7-8. (3) Spielmann, H. , Balls, M. , Dupuis, J. , Pape, W. J. W. , Pechovitch, G. , De Silva, O. , Holzh(cid:252)tter, H. G. , Clot- hier, R. , Desolle, P. , Gerberick, F. , Liebsch, M. , Lovell, W. W. , Maurer, T. , Pfannenbecker, U. , Potthast, J. M. , Csato, M. , Sladowski, D. , Steiling, W. and Brantom, P. (1998), EU/COLIPA (cid:130)In vitro phototoxicity(cid:145) validation study, results of phase II (blind trial), part 1: the 3T3 NRU phototoxicity test, Toxicology in Vitro 12, rr. 305-327. (4) OECD Test Guidelines Programme, ENV/MC/CHEM/TG(96)9: Final Report of the OECD Workshop on Harmonisation of Validation and Acceptance Criteria of Alternative Toxicological Test Methods, OECD Publications Office, Paris, 1996. (5) Lovell, W. W. (1993), A scheme for in vitro screening of substances for photoallergenic potential, Toxico- logy in Vitro 7, rr. 95-102. (6) Santamaria, L. and Prino, G. (1972), List of the photodynamic substances, Research progress in organic, biological and medicinal chemistry Vol. 3 Part 1, North Holland Publishing Co, Amsterdam, rr. VI-VVVX. (7) Spielmann, H. , Lovell, W. W. , H(cid:246)lzle, E. , Johnson, B. E. , Maurer, T. , Miranda, M. A. , Pape, W. J. W. , Sapora, O. and Sladowski, D. (1994), In vitro phototoxicity testing: The report and recommendations of ECVAM workshop 2, ATLA 22, rr. 314-348. (8) Spikes, J. D. (1989), Photosensitization, The science of photobiology, edited by KC Smith, Plenum Press, New York, 2nd edition, rr. 79-110. (9) Borenfreund, E. and Puerner, J. A. (1985), Toxicity determination in vitro by morphological alterations and neutral red absorption, Toxicology Letters 24, rr. 119-124. (10) Lambert L. A, Warner W. G. and Kornhauser A. (1996), Animal models for phototoxicity testing, Derma- totoxicology, edited by FN Marzulli and HI Maibach, published by Taylor & Francis, Washington DC, 5th Edition, rr. 515-530. (11) Tyrrell R. M. and Pidoux M (1987), Action spectra for human skin cells: estimates of the relative cytoto- xicity of the middle ultraviolet, near ultraviolet and violet regions of sunlight on epidermal keratinocy- tes, Cancer Research 47, rr. 1825-1829. (12) ZEBET/ECVAM/COLIPA, Standard Operating Procedure: Balb/c 3T3 NRU Phototoxicity Test, drafted 23 December 1997 by M. Liebsch and approved 6 March 1998 by the Management Team of the EU/ COLIPA project (cid:130)In Vitro Photoirritation(cid:145). (13) Spielmann, H. , Balls, M. , Dupuis, J. , Pape, W. J. W. , De Silva, O. , Holzh(cid:252)tter, H. G. , Gerberick, F. , Liebsch, M. , Lovell, W. W. and Pfannenbecker (1998), A Study on the Phototoxic Potential of UV Filter Chemicals from Annex VII of the EU Directive 76/768/EEC in the 3T3 NRU In Vitro Phototoxicity Test, ATLA 26, rr. 679-708. (14) Holzh(cid:252)tter, H. G. and Quedenau, J. (1995), Mathematical modelling of cellular responses to external signals, Journal of Biological Systems 3, rr. 127-138. (15) Holzh(cid:252)tter, H. G. (1997), A general measure of in vitro phototoxicity derived from pairs of dose-response curves and its use for predicting the in vivo phototoxicity of chemicals, ATLA 25, rr. 445-462. 8. 6. 2000 EL Ep(cid:223)rglg Eugleq(cid:223)da sxm Etqxpaœj(cid:254)m Joimos(cid:222)sxm L 136/107 Pqor(cid:220)qsgla