title: BERETNING FRA KOMMISSIONEN - UDVIKLING, VALIDERING OG JURIDISK GODKENDELSE AF ALTERNATIVE FORSØGSMETODER TIL ERSTATNING AF FORSØG MED LEVENDE DYR I KOSMETIKSEKTOREN - 1995

eurovoc_concepts:
animal experimentation
bioprocess
cosmetic product
protection of animals
research method

text: KOMMISSIONEN FOR DE EUROPÆISKE FÆLLESSKABER Bruxelles, den 24. 07. 1996 KOM(96) 365 endelig udg. BERETNING FRA KOMMISSIONEN UDVIKLING, VALIDERING OG JURIDISK GODKENDELSE AF ALTERNATIVE FORSØGSMETODER TIL ERSTATNING AF FORSØG MED LEVENDE DYR I KOSMETIKSEKTOREN 1995 UDVIKLING, VALIDERING OG JURIDISK GODKENDELSE AF ALTERNATIVE FORSØGSMETODER TIL ERSTATNING AF FORSØG MED LEVENDE DYR I KOSMETIKSEKTOREN 1995 RESUME I - INDLEDNING Kommissionens forpligtelser I direktiv 76/768/EØF, artikel 4, stk. 1, litra i), som ændret ved direktiv 93/35/EØF, hedder det, at medlemsstaterne forbyder markedsføring af kosmetiske produkter, som indeholder. bestanddele eller forbindelser heraf, der er blevet afprøvet på dyr efter den 1. januar 1998. Formuleringen "forbindelser heraf' er ikke længere tvetydig for Kommissionen at se, for den mener, at forbudet også omfatter færdige kosmetiske produkter. Forbudets indførelse skal ses i forbindelse med udviklingen af "tilfredsstillende metoder, der kan anvendes i stedet for dyreforsøg. og at. det. er blevet videnskabeligt valideret, at de. yder samme beskyttelse for forbrugeren". Med henblik på at fremskaffe regelmæssige oplysninger om udviklingen i situationen specificeres det: Kommissionen skal årligt fremlægge en rapport for Europa-Parlamentet og Rådet vedrørende de fremskridt, der er nået indenfor udvikling, validering og juridisk godkendelse af metoder, der kan anvendes i stedet for dyreforsøg. Rapporten skal indeholde præcise data om, hvor mange og hvilken slags forsøg, der er blevet gennemført på dyr for så vidt angår kosmetiske midler. Rapport for 1994 Den første rapport blev fremlagt i 1994. I den opregnede man interessante, men begrænsede resultater, som ikke gjorde det muligt at erstatte dyreforsøg, men som dog kunne bidrage til at reducere antallet af anvendte dyr. Udsigterne var dog rimelig optimistiske for validering af alternative metoder til testning af øjenirritation, perkutan absorption, fototoksicitet/fotoirritation og basistestning af mutagenicitet. Det blev end videre fremhævet, at det med det daværende kendskab ikke var særlig sandsynligt, at man ville kunne erstatte dyreforsøg helt ved undersøgelse af toksicitet i forbindelse med evaluering af den systematiske risiko, dvs. forbundet med en påvirkning gennem blodet på hele organismen efter perkutan absorption. II - RAPPORT FOR 1995 Formålet med rapporten, begrebet potentiel risiko for menneskers sundhed, er det samme som i forbindelse med rapporten for 1994. De berørte aktører er fortsat: Europa-Kommissionen: GD XI, GD-FFC, GD XXIV, GD XII den europæiske industri repræsenteret af COLIPA, Forbindelsesudvalget for Europæiske Sammenslutninger af Industrier på Parfumeri-, Kosmetik- og Hudplej eområdet Den amerikanske administration og CFTA (Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association) Den japanske administration og JO A (Japanese Cosmetics Industry Association) OECD 1- Præcisering af vaiideringsfaserne Validering er den proces, hvorved man evaluerer og kontrollerer relevans og pålidelighed i forbindelse med en test, som er udviklet til et givet formål. Denne proces har vist sig at være mere kompleks end forventet og tager længere tid end beregnet. Det har været nødvendigt at definere faserne i evalueringen af nye tests bedre (udvikling af en test og udarbejdelse af en protokol; forhåndsvalidering; egentlig validering; uvildig bedømmelse af undersøgelsen; vejen til juridisk godkendelse). 2 - Initiativerne De forskellige aktører har taget mange initiativer med henblik på at nå de foreskrevne mål. GDXI GD XI er ansvarlig dels for direktiv 86/609/EØF om beskyttelse af dyr, der anvendes til forsøg og andre videnskabelige formål, og skal derfor indsamle statistiske oplysninger om de anvendte dyr, dels direktiv 67/548/EØF om klassificering, emballering og mærkning af farlige stoffer, hvis bilag indeholder en definition af de forsøgsmetoder, der er anerkendt af EU. GD-FFC • • ECVAM (Det Europæiske Center for Validering af Alternative Metoder) har allerede organiseret 14 seminarer om udvikling og validering af alternative metoder. Syv af dem vedrørte kosmetiske produkters sikkerhed, og rapporterne er offentliggjort. Der foreligger yderligere to rapporter om forhåndsvalidering og validering. ECB (Det Europæiske Kontor for Kemiske Stoffer) giver GD XI den nødvendige tekniske og videnskabelige støtte. GD XXIV/VUK (Det Videnskabelige Udvalg for Kosmetologi) • GD XXIV spiller en rolle som primus motor i forbindelse med de iværksatte aktioner, eftersom det er ansvarlig for kosmetikdirektivet og på Kommissionens vegne skal forberede et forslag til foranstaltninger med henblik på at udskyde fristen for forbud mod dyreforsøg, hvis det viser sig at blive nødvendigt. VUK og VUK's underudvalg, som særlig beskæftiger sig med alternative metoder, har vurderet forskellige dokumenter og dossierer fremlagt af COLIPA. De har endvidere vedtaget et dokument med titlen "Påkrævede oplysninger i forbindelse med den videnskabelige evaluering af valide- ringsundersøgelserne, for så vidt angår alternative tests, der skal kunne bruges i evalueringen af kosmetiske midlers sikkerhed". • GDXII GD XII har finansieret forskellige forskningsprogrammer om udvikling og validering af alternative metoder. COLIPA/SCAAT (Styringsudvalg for alternativer til dyreforsøg) Ud over at udarbejde dossierer og deltage i mange undersøgelser organiserede COLIPA et internationalt videnskabeligt symposium om alternativer til dyreforsøg i Bruxelles den 29. og 30. november 1995. USA • • Den amerikanske regering søger aktivt at samarbejde, som kan muliggøre henstillinger. FDA (Food and Drug Administration), det statslige organ, der er ansvarligt for kosmetiksikkerhed, giver udtryk for bekymring med hensyn til udelukkelsen af dyreforsøg, når direktiv 93/35/EØF træder i kraft. internationalt fremme OECD OECD offentliggør retningslinjer for testning af toksicitet, som er godkendt af medlemsstaterne. I øjeblikket drøfter man en retningslinje vedrørende testning af perkutan absorption in vitro. 3 - Statistikker over dyreforsøg Det har været vanskeligt at indsamle specifikke data om kosmetikbestanddele og -produkter, fordi indsamlingen af data over, hvor mange dyr der anvendes til forsøg og andre videnskabelige formål, i henhold til direktiv 86/609/EØF, ikke er fastsat til at skulle foregå årligt. 8 medlemsstater har tilkendegivet, at der ikke var anvendt dyr til at teste færdige kosmetikprodukter på deres territorium (Italien, Grækenland, Belgien, Irland, Sverige, Finland, Luxembourg, Tyskland). UV 6 medlemsstater har tilkendegivet, at der ikke var anvendt dyr til at teste kosmetikbestanddele på deres territorium (Grækenland, Nederlandene, Irland, Sverige, Finland, Luxembourg). 3 medlemsstater (Østrig, Frankrig, Det Forenede Kongerige) har sat tal på oplysningerne, idet det dog i nogle tilfælde anføres, at tallene ikke kan fortolkes, og at der hersker usikkerhed om overensstemmelsen med virkeligheden. Det skal endvidere bemærkes, at visse medlemsstater, som ikke selv producerer bestanddele, kan anvende bestanddele, der er blevet testet i andre medlemsstater eller i lande uden for EU, og at visse bestanddele kan være blevet testet til andre formål. 4 - Konklusioner og perspektiver vedrørende udvikling af alternative metoder til testning af toksicitet i forbindelse med evaluering af sikkerheden af kosmetiske produkter og bestanddele heraf. 4-1 Bestanddele Fototoksicitet/fotoirritation (kutan reaktion efter epikutan anvendelse af et kemisk stof i forbindelse med UV-stråling). Det vedrører særlig UV-filtre. Resultaterne af fase II af EU/COLIPA's internationale valideringsundersøgelse af in vitro-tests vedrørende fototoksicitet har allerede åbnet mulighed for væsentlige fremskridt. Fase III er planlagt. Det bliver nødvendigt med en supplerende undersøgelse af UV-filtre. Validering kan forventes i den nærmeste fremtid. Perkutan absorption Det forventes, at en ny retningslinje for in vitro-testning af perkutan absorption vil blive godkendt i den nærmeste fremtid af medlemsstaterne og OECD. Kutan irritation Det foreslås at evaluere kosmetiske bestanddeles kutane irritation på frivillige forsøgspersoner. Det forudsætter dog, at forudgående undersøgelser af den toksiske risiko giver tilstrækkelig garanti. Kutan sensibilisering Evaluering in vitro af kutan sensibilisering forudsætter nærmere undersøgelser af sensibiliseringens mekanistiske grundlag, inden man kan overveje at foretage en valideringsundersøgelse. Øjenirritation Resultaterne af valideringsundersøgelsen om alternativer til Draiza-testen af øjenirritation var skuffende (EU/Home Office-undersøgelsen og COLIPA- undersøgelsen), for så vidt som ingen af testene opfyldte undersøgelsernes målsætninger. Det er muligt at gå mere fleksibelt til værks, hvis man accepterer en kombination af videnskabeligt validerede metoder og en evaluering af nye produkters og deres bestanddeles toksicitet på grundlag af en sammenligning med passende standardkontrolstoffer (benchmark). t \V Fotomutagenicitet (samtlige ændringer af det genetiske materiales informative indhold i forbindelse med UV-stråling). Der er foreslået henstillinger om de kriterier, der skal vedtages med henblik på at definere protokoller for tests in vitro. Hudkorrosion Der anvendes ikke korrosive bestanddele i kosmetiske produkter. Men ECVAM's valideringsundersøgelse af tests af hudkorrosion kan anvendes i screeningsfasen og give oplysninger, som er absolut nødvendige, før tests på frivillige forsøgspersoner kan overvejes. Mutagenicitet Der anvendes løbende tests in vitro til evaluering af kosmetiske bestanddeles mutagene potentiel. Tests in vivo anvendes kun, når tests in vitro giver tvivlsomme resultater. Inden for en overskuelig fremtid bliver det sandsynligvis ikke muligt at erstatte tests in vivo til evaluering af den systematiske risiko, som f. eks. testning af akut toksicitet, toksicitet, carcinogenicitet, og mutagenicitet. Med videreudviklingen af de anvendte metoder er det dog allerede blevet muligt at reducere antallet af anvendte dyr betydeligt. subkronisk 4-2 Færdige kosmetikprodukter Færdige kosmetikprodukters øjentolerance og kutane tolerance kan normalt evalueres forudsat at man på forhånd kender bestanddelenes toksicitetsdata og fysisk-kemiske egenskaber, og at de giver tilstrækkelig garanti. in vitro, Færdige kosmetikprodukters kutane kompatibilitet (ingen kutan irritation) kan evalueres på mennesker, forudsat at det sker inden for rammerne af strengt overvågede kliniske undersøgelser. Det er vigtigt at understrege, at anvendelse af frivillige forsøgspersoner som et erstatningsalternativ til dyreforsøg, må overvejes med største forsigtighed. Sådanne undersøgelser, som har en klar etisk dimension, bør kun tillades, når undersøgelser in vivo og/eller in vitro har vist, at der ikke er risiko for alvorlige følgevirkninger. Sammenlagt - Validering af alternative metoder til evaluering af perkutan absorption og fotoirritation i forbindelse med bestanddele, til evaluering af øjentolerance og kutan tolerance for færdige produkter, kan forventes i den nærmeste fremtid. Udfærdigelse af alternative metoder til evaluering af øjenirritation, kutan irritation og kutan sensibilisering i forudgående forbindelse med bestanddele forudsætter Der bliver ikke udfærdiget in vitro-metoder på områder med en systematisk risiko inden for en overskuelig fremtid, selvom det er muligt at reducere antallet af dyr. V. GLOSSARY CAPT: C A AT: CFTA: COLIPA: DEREK: ECB: ECVAM: ERGATT: ES AC: EU: EU/HO international validation study: Committee of Adaptation to Technical Progress Centre for Alternatives to Animal Testing (John Hopkins University. USA) Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association (USA) European Cosmetic, Toiletry and Perfumery Association Deductive Estimation of Risk from Existing Knowledge European Chemicals Bureau European Centre for the Validation of Alternative Methods European Research Group for Alternatives in Toxicity Testing ECVAM Scientific Advisory Committee European Union FDA: FDCA. FLT: FRAME: GLP: ICCVAM: IFAW: IRAG: IVTIP: JO A: JRC: MMAS: MHW: NIEHS: NRU: NTP: PM: OECD: QSAR: RBC: SCAAT. SCC: SIAT: TEA: UV: ZEBET: European Union/Home Office international validation study Food and Drug Administration (USA) Food, Drug and Cosmetics Act (USA) Fluorescein Leakage Test Fund for the Replacement of Animals in Medical Experiments Good Laboratory Practice US Inter-Agency Coordinating Committee for the Validation of Alternative Methods International Fund for Animal Welfare Interagency Regulatory Alternatives Group In Vitro Testing Industrial Platform Japanese Cosmetics Industry Association Joint Research Centre Modified Maximum Average Score Ministry for Health and Welfare (Japan) National Institute of Environmental Health Sciences (USA) Neutral Red Uptake Assay National Toxicology Program (USA) Prediction Model Organisation for Economic Cooperation and Development Quantitative Structure-Activity Relationships Red Blood Cell Haemolysis Test Steering Committee on Alternatives to Animal Testing Scientific Committee on Cosmetology Scweizerisches Institut fur Alternativen zu Tierversuchen Tissue Equivalent Assay Ultra Violet Zentrastelle zur Erfassung und Bewertung von Ersatz und Ergånzungs- methoden zum Tierversuch im Bundesgesundheitsamt VI INDHOLDSFORTEGNELSE A. INDLEDNING B. PRÆCISERING AF VALIDERINGSFASERNE - Validering af alternative metoder anvendt til - Faser i evalueringen af nye tests forskellige formål C. INITIATIVERNE 11995 Aktørerne Initiativer 1. Den Europæiske Union GDXI GD-FFC GD AX7WCSC GDXII COLIPA/SCAAT 2. 3. 4. USA JAPAN OECD SIDE 2 2-5 3 3 5-14 5 6 6 7 9 12 12 14 14 14 D. STATUS OVER, HVOR LANGT MAN ER NÅET MED ARBEJDET 15-19 E. STATISTIKKER OVER DYREFORSØG F. KONKLUSIONER G. PERSPEKTIVER 20-21 21-22 23-24 A. INDLEDNING Nærværende rapport er den anden rapport, som Kommissionen er blevet pålagt at fremlægge årligt for Europa-Parlamentet og for Rådet, og den vedrører de fremskridt, der er nået inden for udvikling, validering og juridisk godkendelse af metoder, der kan anvendes i stedet for dyreforsøg til afprøvning af kosmetiske midler. der for de fremskridt, juridisk og i stedet for data om, blevet inden forsøg, skal slags for udvikling, der kan anvendes indeholde præcise fremlægge en rapport og Rådet vedrørende validering "Koumissionen skal årligt Europa-Parlamentet er nået af metoder, godkendelse dyreforsøg. Rapporten hvor mange og hvilken gennemført på dyr for så vidt angår kosmetiske indhente er forpligtede Medlemsstaterne oplysninger statistikker, direktiv til beskyttelse videnskabelige i Kommissionen på sinde at få fremmet valideringen forsøgsmetoder, (Direktiv 32)). og den juridiske hvori der 93/35/EØF, art. af dyr, der anvendes formål. Det ligger som de pålægges at foretage til den indsamling ikke anvendes 4 (i) (L 358 af 18. 12. 86, som supplement 86/609/EØF godkendelse der er s. l) til at forsøg og andre særdeleshed udviklingen, af levende dyr. " s. (L 151 af 23. 6. 93, midler. disse af i henhold om til Bortset fra målsætningerne, aktørerne og de potentielle risici for menneskets helbred, som ikke er ændret i forhold til sidste år, vil nærværende rapport gennemgå de punkter, der er behandlet i den første årsrapport (KOM (94)606). præcisering af valideringsfaserne (B) initiativerne i 1995 (C) status over, hvor langt man er nået med arbejdet (D) statistikker over dyreforsøg (E) konklusioner (F) perspektiver (G) B. PRÆCISERING AF VALIDERINGSFASERNE Kommissionens hovedmålsætning er fortsat at fremme udvikling og validering samt vedtagelse af love om alternative metoder, der kan yde forbrugeren mindst samme beskyttelsesniveau som det, der kan opnås ved dyreforsøg. Validering er den proces, hvorved man evaluerer og kontrollerer relevans og pålidelighed i forbindelse med en test, som er udviklet til et givent formål. Det har vist sig, at man for at opnå dette resultat skal igennem flere faser, end man først havde regnet med, ligesom processen har vist sig at være mere kompleks end beregnet. På den første Amden-workshop (Schweiz, 1990) opstillede man det væsentligste teoretiske grundlag for valideringsprocessen, nemlig validering i det enkelte laboratorium, evalueringsudveksling laboratorierne imellem, udvikling af databaser samt evaluering af resultaterne. Den erfaring, man har gjort i forbindelse med de undersøgelser, der har været i gang siden 1990, har vist, at det er nødvendigt at give en mere præcis definition af de forskellige målsætninger i forbindelse med valideringsundersøgelserne samt at integrere flere faser i evalueringen af nye tests. ECVAM (Det Europæiske Center for Validering af Alternative Metoder), en enhed under Det Fælles Forskningscenters (ISPRA) Miljøinstitut er stærkt involveret i valideringsdebatten og er kommet med væsentlige bidrag på følgende områder: praktiske aspekter i forbindelse med validering forhåndsvalidering internationale diskussioner med ICCVAM (US - Inter-Agency Coordinating Committee for the Validation of Alternative Methods) og med OECD angående harmonisering af validerings- og godkendelseskriterierne. Ved den anden Amden-workshop (den 24. -28. januar 1994), som var organiseret af ECVAM og ERGATT (European Research Group for Alternatives in Toxicity Testing), blev der anbefalet nogle retningslinjer vedrørende de praktiske og logistiske aspekter i forbindelse med validering af alternative tests; disse anbefalinger figurerer i ECVAMs rapport nr. 5. Validering af alternative metoder anvendt formål til forskellige Validering af alternative tests kan foretages med fire hovedmåltyper for øje. Der skelnes mellem: 1. 2. 3. 4. Validering af alternative procedurer til brug i undersøgelser, som der ikke er opstillet regler for. Validering af alternative tests, der er beregnet til at skulle indgå i forskriftsmæssige retningslinjer. Validering af alternative tests, der skal erstatte eksisterende retningslinjer. Validering af alternative tests, der er beregnet til at tilvejebringe en del af de oplysninger, der er påkrævet i henhold til foreskrevne retningslinjer. Faser i evalueringen af nye tests 1. Udvikling af en test og udarbejdelse af en protokol De kriterier, der skal tages højde for i forbindelse med udviklingen af en test, omfatter primært en beskrivelse af metodegrundlaget, en definition af testens videnskabelige målsætning, en specificering af de biologiske reaktioner og af disses omfang, samt angivelse og fortolkning af resultaterne via en beregningsmodel. Beregningsmodellen skal gøre det muligt at konvertere et resultat, der er opnået ved hjælp af en alternativ metode, således at det kan anvendes til en korrekt beregning af in vivo-toksiciteten. Beregningsmodellen er af afgørende betydning for et vellykket resultat af et valideringsprogram. Den gør det muligt at teste én klart defineret hypotese, at evaluere testens anvendelighed objektivt, ligesom den kan bruges som vejledning i forbindelse med planlægningen af valideringsundersøgelsen. 2. Forhåndsvalidering Erfaringen har vist, at resultaterne af omfattende og dyre valideringsundersøgelser kan blive stærkt forringet, hvis de, der leder undersøgelserne, ikke insisterer på at få udleveret optimerede testprotokoller og beviser på disses anvendelighed, inden den formelle valideringsundersøgelse starter. Forhåndsvalideringens mål er beskrevet i rapport nr. l fra "ECVAM Prevalidation Task Force", hvor der også gives en skematisk oversigt over forhåndsvalideringsproceduren. Målsætningerne for en forhåndsvalidering er følgende: at optimere og standardisere protokollen at evaluere, i hvor høj grad metoden lader sig overføre. Udførelsen af forhåndsvalideringen omfatter følgende tre faser: en forbedring af protokollen, der indebærer et samarbejde mellem det laboratorium, som har udviklet metoden, og det laboratorium, der skal optimere metoden overførelse af protokollen, således at de to første laboratorier samarbejder med det laboratorium, som metoden skal overføres til en blindprøve, hvori der som et minimum skal være deltagelse fra de tre laboratorier, der har til opgave at undersøge protokollens anvendelighed. 3. Validering Valideringsfasen omfatter en formel undersøgelse med deltagelse af forskellige laboratorier. De vigtigste faser er som følger: udformning af undersøgelsen valg af tests valg af laboratorier valg og distribution af testmaterialer indsamling og analyse af resultaterne evaluering af undersøgelsen. 4. uvildig bedømmelse af undersøgelsens gennemførelse og resultater En objektiv evaluering af værdien af de videnskabeligt validerede tests via en sammenligning med andre tests, idet der tages højde for målsætningerne for valideringen. 5. Vejen til juridisk godkendelse Det er vigtigt, at en ny metode, der anses for at være fyldestgørende valideret til at kunne erstatte en eksisterende metode, opnår bredest mulig international anerkendelse. OECDs retningslinjer for tests er således vigtige i denne sammenhæng, eftersom de anvendes i forbindelse med gennemførelse af tests i medlemslandene i Europa og Nordamerika samt i Japan, Australien og New Zealand. I henhold til OECD-Aftalen om Gensidig Godkendelse af Data har medlemslandene indgået aftale om gensidig godkendelse af data hidrørende fra tests udført i overensstemmelse med OECDs retningslinjer for tests, forudsat at principperne for god laboratoriepraksis er opfyldt. OECD har fastlagt en procedure for opdatering af retningslinjer for tests og for indførelse af nye testmetoder. C. INITIATIVERNE I 1995 AKTØRERNE Det skal her endnu engang anføres, at aktørerne i forbindelse med fremme af forskning, udvikling og validering af alternative metoder er følgende: BEN EUROPÆISKE UNION Europa-Kommissionen Adskillige af Kommissionens tjenestegrene beskæftiger sig med anliggender vedrørende dyreforsøg og udviklingen og evalueringen af alternative metoder. Nuklear forvalter GD XI, Miljø, direktiv 86/609/EØF om beskyttelse af dyr, der anvendes til forsøg og andre videnskabelige formål, og direktiv 67/548/EØF om klassificering, emballering og mærkning af farlige stoffer. GD-FFC, Det Fælles og Civilbeskyttelse Forskningscenter Sikkerhed ECVAM, Det Europæiske Center for Validering af Alternative Metoder ESAC, ECVAMs Videnskabelige Rådgivende Udvalg ECB, Det Europæiske Kontor for Kemiske Stoffer GD XXIV: Forbrugerpolitik 4. kontor, Kvalitetspolitik og produktmarkedet, forvalter kosmetik-direktivet (76/768/EØF) CSC: Det Videnskabelige Udvalg for Kosmetologi (VUK), rådgivende udvalg for Kommissionen GD XII, Videnskab, Forskning og Udvikling giver tilskud til forskningsprogrammer. Den Europæiske Industri COLIPA - Forbindelsesudvalget for Europæiske Sammenslutninger af Industrier på Parfumeri-, Kosmetik- og Hudplejeområdet - har nedsat SCAAT-Udvalget (jf. nedenfor): SCAAT - Styringsudvalget for Alternativer til Dyreforsøg - overvåger COLIPAs valideringsundersøgelser og koordinerer kosmetikindustriens valideringsindsats på verdensplan. USA CTFA - Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association JAPAN JCIA - Japanese Cosmetics Industry Association ORGANISATIONEN FOR ØKONOMISK SAMARBEJDE OG UDVIKLING (OECD) OECD offentliggør retningslinjer for forsøg, som medlemslandene har godkendt samstemmende. De pågældende retningslinjer er næsten identiske med EU's forsøgsmetoder i Bilag V og giver - med princippet om gensidig anerkendelse af data - mulighed for harmonisering på internationalt plan og for en rationel fremgangsmåde ved anvendelse af de 3 R'er. INITIATIVER 1. DEN EUROPÆISKE UNION GD XI GD XI, Miljø, Nuklear Sikkerhed og Civilbeskyttelse er med medlemsstaterne nået til enighed om den bedste måde at gribe det an på, når der hvert andet år skal indsamles statistiske data i henhold til artikel 13 og artikel 26 i direktiv 86/609/EØF om beskyttelse af dyr, der anvendes til forsøg og andre videnskabelige formål. De skemaer, som medlemsstaterne i denne sammenhæng skal udfylde, indeholder en rubrik for angivelse af det samlede antal dyr, der er anvendt til testning af kosmetiske midler. GD XI er endvidere ansvarlig for gennemførelsen af direktiv 67/548/EØF og for Den Europæiske Unions testmetoder som fastlagt i Kommissionens direktiv 87/302/EØF og i bilag til Kommissionens direktiv 92/69/EØF (Del B - metoder til bestemmelse af toksicitetsgrad). GD XI har støttet EU/HOs internationale valideringsundersøgelse om alternativer til Draize-testen af øjenirritation og ligeledes EU/COLIPAs internationale valideringsundersøgelse af fototoksicitet in vitro. GD FFC ECVAM (Det Europæiske Center for Validering af Alternative Metoder) står til rådighed for alle de GD'er, der er involveret i spørgsmålet om alternative metoder. ECVAM blev oprettet af Europa-Kommissionen i oktober 1991 i henhold til en meddelelse fra Kommissionen til Rådet og Europa- Parlamentet og i overensstemmelse med artikel 23 i direktiv 86/609/EØF, hvori det hedder: "Kommissionen og medlemsstaterne skal fremme forskning i udvikling og validering af alternative metoder, som kan give lige så omfattende oplysninger som dem, der opnås ved forsøg med dyr, men som indebærer anvendelse af færre dyr eller mindre smertefulde fremgangsmåder; de træffer alle øvrige foranstaltninger, som de anser for velegnede til fremme af forskningen på dette område. " ECVAM har først og fremmest til opgave at: 1. 2. 3. 4. Koordinere valideringen af de alternative testmetoder på EU-plan. Fungere som et sted for udveksling af erfaringer og information om udviklingen af alternative testmetoder. Oprette, udvikle og forvalte en database vedrørende alternat ive procedurer. Fremme dialogen mellem lovgivere, erhvervsfolk, biomedicinske videnskabsfolk og dyrevelfærdsgrupper med henblik på udvikling, validering og international anerkendelse af alternative testmetoder. ECVAMs åbningskonference, der blev organiseret i Ispra den 18. oktober 1994, var helliget debatten om validering af alternative erstatningsmetoder. På denne konference drøftedes ECVAMs rolle i forbindelse med udvikling, validering og godkendelse af alternative tests og teststrategier, en rolle, der kan resumeres således: at bidrage til udarbejdelsen af retningslinjer gennem selve valideringsprocessen, eftersom denne har så tæt tilknytning til udvikling og godkendelse af relevante og pålidelige tests beregnet til specifikke formål; at fastsætte prioriteter under hensyntagen til, hvor langt man videnskabeligt er nået inden for specifikke områder; at sikre, at de alternative tests omfatter simple biologiske reaktioner, der er tydelige og veldefinerede og baseret på en fyldestgørende indsigt i de grundlæggende mekani smer; at fremme fremgangsmåder, der indbefatter flere discipliner på én gang med henblik på udvikling af integrerede teststrategier, som omfatter QSAR-relationer (Quantitative structure acitivity relations), biokinetik samt celle- og vævskulturmetoder; at forsøge at løse de problemer, der er forbundet med manglen på testmateriale og dermed på in vivo-data af god kvalitet; at fremme fornyet evaluering af eksisterende retningslinjer og foreskrevne procedurer; at opnå konsensus ved at samarbejde med relevante organer inden for regeringerne, erhvervslivet, akademikerkredse o. lign. ; at opstille kriterier for validering og uvildig evaluering af resultaterne fra valideringsundersøgelserne samt for juridisk godkendelse af alternative tests og teststrategier; dette foregår via et aktivt samarbejde med bl. a. OECD og ICCVAM (Inter-Agency Coordinating Committee for the Validation of Alternative Methods, USA). ECVAM har indtil videre organiseret adskillige workshops med udvikling og validering af alternative tests som emne, og centret har offentliggjort rapporterne fra 14 af disse workshops. ECVAM har prioriteret testning af kosmetiske midler højt, og cte rapporter, der er af direkte interesse for evalueringen af kosmetiske midlers sikkerhed, er følgende: - rapport 2 - - rapport 5 - - rapport 6 - - rapport 7 - - rapport 8 - - rapport 11 - - rapport 13 - Test af fototoksicitet in vitro (1994) Praktiske aspekter af valideringen af procedurerne for toksicitetstests (1995) En forhånds-valideringsundersøgelse af in vitro-tests af hudkorrosion (1995) Udvikling og validering af forsøg uden dyr samt teststrategier; indkredsning af en koordineret strategi til at imødekomme de udfordringer og de muligheder, som den sjette ændring af kosmetikdirektivet (1995) indebærer En integreret anvendelse af alternative fremgangsmåder til at beregne toksiske risici (1995) De tre R'er: Vejen frem (1995) Metoder til at vurdere perkutan absorption (offentliggjort i 1996). Der offentliggjordes yderligere to rapporter i 1995 om: validering af alternative testmetoder den første rapport fra ECVAMs Task Force for Forhåndsvalidering. Blandt ECVAMs prioriterede emner på området testning af kosmetiske midler for perioden 1995-1998 kan nævnes: tiltagende toksicitet metabolisme korrosionsfølsomhed fototoksicitet hudpenetration øjen- og hudirritation sensibilisering Det Europæiske Kontor for Kemiske Stoffer yder teknisk og videnskabelig assistance til GD XI vedrørende klassificering og mærkning af farlige stoffer, anmeldelse af nye stoffer, eksisterende kemiske stoffer, kontrol med eksport/import af farlige stoffer og testmetoder (i overensstemmelse med bilag V i direktiv 67/548/EØF). Der er etableret tæt kontakt mellem Det Europæiske Kontor for Kemiske Stoffer og ECVAM, hvad angår alternative erstatnings-testmetoder og ændring af procedurer, hvori indgår dyreforsøg, med henblik på at mindske antallet af anvendte dyr og at gøre testene mindre smertefulde for de dyr, der anvendes til forsøg på områder, hvor det ifølge gældende lov er påkrævet, at der udføres tests på dyr. GD XXIV / VUK (CSC) GD XXIV - Forbrugerpolitik, som forvalter kosmetikdirektivet (direktiv 76/768/EØF) spiller fortsat en rolle som primus motor og har udvidet aktiviteterne med henblik på i så vid udstrækning som muligt at opfylde bestemmelserne i direktiv 93/35/EØF inden for de fastsatte frister. I tilfælde af at de alternative metoder ikke er blevet videnskabeligt valideret og juridisk godkendt, skal GD XXIV for Kommissionen forberede et forslag til foranstaltninger med henblik på at udskyde fristen for forbud mod dyreforsøg, i overensstemmelse med den procedure, der er foreskrevet af Udvalget for Tilpasning til Den Tekniske Udvikling (artikel 10 i direktiv 76/768/EØF). Dette udvalg (Udvalget for Tilpasning til Den Tekniske Udvikling) består af repræsentanter for medlemsstaterne og har en repræsentant for Kommissionen som formand. Formanden forelægger udvalget forslag til de foranstaltninger, der skal træffes. Der afgives udtalelse på grundlag af kvalificeret stemmeflertal. I overensstemmelse med den nye fælles beslutningsprocedure vil Europa-Parlamentet samtidig og på de samme betingelser blive underrettet om ethvert forslag til foranstaltninger, der bliver forelagt udvalget. u n« /eel vis fremskridt inden forsøgsmetoder på trods af "Hvis der ikke er sket tilstrækkelige for udviklingen af metoder, der på tilfredsstillende kan erstatte dyreforsøg, især for så vidt angår de tilfælde, hvor de alternative alle tænkelige bestræbelser ikke er blevet videnskabeligt valideret som værende i stand til at yde forbrugerne en og idet der tages højde tilsvarende grad af beskyttelse, for OECD-direktiverne om toksicitets-tests, Kommissionen senest den l. januar 199 7 fremlægge et forslag til denne bestemmelses ikrafttrædelse med en frist, to år, sådan som proceduren er foreskrevet Inden Kommissionen fremsætter dette forslag, skal den høre Det videnskabelige Udvalg for Kosmetologi" (direktiv 93/35/EØF, art. 4 (i)). foranstaltninger med henblik på at udskyde som under ingen omstændigheder må være mindre end i artikel 10. tilstrækkelig skal GD XXIV har gentagne gange anmodet medlemsstaterne om at opfylde deres forpligtelser til at indsamle præcise data om dyreforsøg, der udføres i forbindelse med bestanddele og færdige kosmetikprodukter. Den indsamling af statistiske data, som er foreskrevet i direktiv 93/35/EØF omfatter mere end de generelle data, som er foreskrevet i direktiv 86/609/EØF. Medlemsstaterne er blevet anmodet om at fremlægge mere detaljerede resultater på årsbasis. GD XXIV har haft løbende kontakt med GD XI og ECVAM og har fremmet kommunikationen mellem alle aktørerne. VUKt Det Videnskabelige Udvalg for Kosmetologi er et rådgivende udvalg for Kommissionen, og dets opgave er at afgive en videnskabelig udtalelse til GD XXIV angående mulighederne for anvendelse af validerede alternative metoder til evaluering af, hvor sikre kosmetikprodukter er at bruge for mennesker. VUKs Underudvalg om Alternative Metoder og Retningslinjer organiserede to arbejdsmøder (den 2. februar og den 11. maj) og to fælles møder med SCAAT/COLIPA (den 19. september og den l. december); i løbet af disse møder gennemførtes følgende aktiviteter: 1. Evaluering af de af COLIPA fremlagte dokumenter og oplysninger In vitro-fotoirritation (EU/fCOLIPA) Analysen af de data, som COLIPA har tilvejebragt, dvs. af de delresultater fra forhåndsvalideringsfasen, som er udgivet i faglitteraturen, samt delvise oplysninger om valideringsundersøgelsernes fase 2, har ikke gjort det muligt 10 for VUK at afgive en videnskabelig udtalelse om forslaget i dets helhed. VUK understreger dog, at dyremodellerne ikke egner sig til at beregne fototoksiske virkninger hos mennesker og mener, at undersøgelsen af det fototoksiske potentiale "in vitro" er et vigtigt skridt i evalueringen af sikkerheden af de kosmetik-produkter, der indeholder UV-filtre. Perkutan absorption in vitro (COLIPA) Efter at have analyseret de dokumenter, som COLIPA har fremlagt, dvs. de retningslinjer for prøvninger af perkutan absorption in vitro, standardprotokollerne samt en generel oversigt over det indbyrdes forhold in vitro/in vivo, anbefaler VUK, at man præsenterer den perkutane nin vitro"- absorptionsmetode på ensartet vis, og at man supplerer den med resultater fra såvel de enkelte laboratorier som fra de koordinerede laboratorie-undersøgelser; der skal være anvendt test testmateriale og -hjælpestoffer ud fra et hensigtsmæssigt valg. Fotomutagenicitet (COLIPA) COLIPAs anbefalinger i den endelige rapport, der er blevet overdraget til VUK, angiver de krav, der skal tages højde for i forbindelse med definitionen af prøveprotokollerne. VUK beklager, at det endnu ikke er muligt at basere evalueringen af fotomutagenicitetspotentialet i UV-filtre på behørigt validerede metoder, på trods af at udvalget i 1990 opstillede de overordnede krav til gennemførelsen af fotomutagenicitetstests (SPC/803/90; SPC * Tjenesten for Forbrugerpolitik). 2. Påkrævede oplysninger i forbindelse med den videnskabelige evaluering af valideringsundersøgelserae for så vidt angår alternative tests, der skal kunne bruges i evalueringen af kosmetiske midlers sikkerhed. I betragtning af de problemer, der er forbundet med validering af alternative metoder, vurderede VUK, at det var relevant at udarbejde en dokument, som kunne udgøre et direkte bidrag til de fremtidige valideringsundersøgelser. I denne rapport tages der højde for de kvalitative og de kvantitative aspekter i forbindelse med validering. De valgte kriterier: vedrører den videnskabelige gør det muligt at måle toksicitetsgraden kan anvendes på kosmetiske bestanddele omfatter en definition af fremgangsmåderne ved udarbejdelsen af statistikker. validering af tests 11 Det gøres helt klart, hvor nødvendigt det er at tilvejebringe beviser for optimeringen af protokollerne, samt at formalisere forholdet mellem in vitro-data og in vivo-data i form af en matematisk relation. GD XII GD XII, Videnskab, Forskning og Udvikling giver tilskud til forskningsprogrammer, som bl. a. omfatter udvikling og validering af alternative metoder i henhold til Rådets og Europa-Parlamentets afgørelse nr. lllO/94/EF af 26. april 1994 om det fjerde rammeprogram for forskning og teknologisk udvikling, som indeholder følgende instruks: "Når som helst det er muligt, erstattes dyreforsøg med in vitro-forsøg eller andre metoder. " GD XII har støttet adskillige programmer om udvikling og validering af in vitro-tests, og andre er aktuelt under afvikling. Nogle af projekterne vil kunne være af interesse for kosmetiksektoren: BRIDGE - Endelig rapport (EUR 15777, offentliggjort i 1995) Udvikling af en in vitro-test til beregning af sensibiliserende forbindelser. BIOTECH (1992-1994) Nogle af projekterne omhandler in vitro-undersøgelser af tiltagende toksicitet. BIOTECH (1994-1998) Arbejdsprogrammet omfatter prænormativ forskning og udvikling af farmako-toksikologiske in vitro-tests som alternativ til dyreforsøg. IVTIP (In Vitro Testing Industrial Platform): forum oprettet med henblik på at forbedre kontakten mellem teknologiproducenter og brugere. Der afholdtes to møder i 1995, som omhandlede henholdsvis afviklingen af det fjerde rammeprogram og opnåede fremskridt hvad angår validering. For hvert enkelt forskningsområde har SCAAT oprettet specifikke arbejdsgrupper bestående af diverse eksperter med henblik på at gennemføre valideringsbestræbelserne. COLIPA organiserede et internationalt videnskabeligt symposium i Bruxelles den 29. og 30. november 1995 om alternativer til dyreforsøg, hvori deltog repræsentanter fra erhvervslivet, de 12 videnskabelige kredse, Kommissionen, Europa-Parlamentet og foreninger til dyrenes beskyttelse. Ved den første række møder, der omhandlede VALIDERING, understregedes beregningsmodellernes vigtige rolle, og der blev gjort status over de igangværende valideringsundersøgelser af fotoirritation og øjenirritation. Møderækken afsluttedes med en rundbordsdiskussion om perspektiverne for en lovgivningsmæssig tilnærmelse. den anden række møder omhandlede UDVIKLING og omfattede præsentationer af perkutan absorption, kutan kompatibilitet og kutan sensibilisering. Den tredje rækker møder drejede sig om EVALUERING AF SIKKERHEDEN, og her kom man ind på VUKs initiativer og på de britiske og tyske lovgivningsmyndigheders tiltag. Det blev understreget, hvor vigtigt det er at stille de videnskabelige data til rådighed, som kan støtte kosmetikindustriens interne undersøgelser og strategier med henblik på evaluering af de færdige produkters sikkerhed. Præsentationerne blev suppleret med en plakatudstilling, i forbindelse med denne udstilling blev der stillet en brochure til rådighed for deltagerne, hvor der var opstillet en skematisk oversigt over IFAWs strategi (International Fund for Animal Welfare = Den Internationale Fond for Dyrevelfærd). Da det fremgår helt tydeligt, at det ikke er muligt blot at erstatte dyreforsøg med in vitro-tests, fremlagde IFAW en fasestrategi, der hovedsagelig er baseret på erstatningsalternativer, der gør det muligt at anvende celler og væv fra mennesker; IFAW udelukker således enhver form for in vivo-dyreforsøg, idet de anbefaler, at man udfører in vivo- prøver på frivillige personer. Symposiet understregede den vigtige rolle, som COLIPA (Europæisk Kosmetikindustri) spiller for udviklingen og valideringen af alternative metoder. De bestræbelser, som de store europæiske kosmetikfirmaer har udfoldet, er meget betydelige i betragtning af det store antal dyr der anvendes i kosmetik-forsøg, og den viden, man har opnået, er af væsentlig betydning også for andre industrigrene. Desuden bidrog symposiet til, at de forskellige aktører fik præcise videnskabelige oplysninger, ligesom det gav anledning til interessante meningsudvekslinger. Der blev lagt op til, at erhvervslivet og Kommissionen anlægger en fælles strategi for hurtigst muligt at erstatte dyreforsøg inden for områderne kutan kompatibilitet, fotoirritation og perkutan absorption. 13 2. USA USAs regering ønsker et internationalt samarbejde med henblik på anbefaling af en fremgangsmåde og fastlæggelse af kriterierne for vedtagelse af regler om nye alternative metoder, som tydeligt opstiller betingelserne for brug af disse metoder (biologiske reaktioner, relevans for de forskellige kategorier af stoffer, osv. ). ICCVAM har afholdt en workshop om validering og juridisk godkendelse af alternative toksikologiske testmetoder, sponsoreret af National Institute of Environmental Health Sciences (NIEHS) og Det Nationale Toksikologiprogram (NTP) i december 1995 i Arlington, Virginia. Formålet med denne workshop var at drøfte udkastet til I C C V A MS rapport om anbefalinger vedrørende kriterier og valideringsprocesser samt juridisk godkendelse af nye og reviderede toksikologiske afprøvningsmetoder. Food and Drug Administration (FDA) er det statslige organ, der er ansvarligt for kosmetiksikkerhed. FDA har et interaktivt forhold til de offentlige og private instanser, der har med udvikling og validering af alternative tests at gøre, og FDA fokuserer på metoder, der fører til pålidelige videnskabelige data. FDA giver udtryk for bekymring med hensyn til udelukkelsen af dyreforsøg, når direktiv 93/35 træder i kraft. Visse kosmetiske midler, der er produceret i EU, kan risikere ikke at opfylde de sikkerhedskrav (sundhedsmæssige krav), som er fastsat af US FDCA (Food, Drug and Cosmetics Act = lov om madvarer, medicin og kosmetik). 3. JAPAN Det henhører under det japanske ministerium for sundhed og velfærd at fastsætte retningslinjer for afprøvning og forsøg i Japan. Japanske forskergrupper beskæftiger sig især med validering af alternative tests, der kan træde i stedet for Draize-testen. Godkendelsen af disse tests afhænger af deres specifikke rolle i evalueringen af øjenirritation (screening eller erstatning: individuel test eller serietests). I henhold til JCLA vil det være svært til evalueringen af kosmetiske midlers sikkerhed at anbefale en test eller en testserie, hvis beregningsevne ikke svarer til in vivo-metodernes beregningsevne. 4. OECD I oktober 1994 afholdtes det 5. møde i Gruppen af Nationale Koordinatorer af OECDs Program for Testretningslinjer, og det besluttedes da, at der skulle gøres en indsats med henblik på international harmonisering af de forskellige publicerede og 14 anerkendte koncepter vedrørende validering af alternative testmetoder. Med henblik på en international debat om dette spørgsmål fandt man det hensigtsmæssigt, at OECD gik ind og påtog sig rollen som forum for alle de involverede parter, for således at åbne mulighed for at opnå international konsensus om validerings- og godkendelseskriterier. De nationale koordinatorer understregede, at man i stedet for at udvikle endnu et koncept skulle anvende de eksisterende forslag som grundlag for en internationalt godkendt fremgangsmåde. I den forbindelse udtryktes der anerkendelse af det arbejde, der udføres på centre som CAAT (John Hopkins University Center for Alternatives to Animal Testing)i USA, ECVAM i EU, ERGATT og forskellige nationale centre og udvalg (f. eks. FRAME i UK, IRAG og ICCVAM i USA, NCA i Nederlandene, SIAT i Schweiz og ZEBET i Tyskland). De nationale koordinatorer var enige om, at en OECD workshop ville være den mest hensigtsmæssige fremgangsmåde, da alle parter med interesse for emnet således ville få mulighed for at drøfte det og søge at opnå konsensus. Endvidere blev det understreget, at det var vigtigt, at medlemsstaterne blandt deres repræsentanter havde ansvarlige for lovgivningsområdet. Sverige tilbød at være værtsland for workshoppen. En styringsgruppe nedsattes i januar 1995 med den opgave at rådgive OECDs Sekretariat om workshoppens struktur og emneområder og at bistå med udarbejdelsen af mødeprogrammet for workshoppen, der fastsattes til den 22. -24. januar 1996 i Solna, Sverige. ECVAM og ZEBET var repræsenteret i styringsgruppen. D. STATUS OVBR, HVOR LANGT MAN BR NÅET MED ARBEJDET METODER UNDER UDVIKLING OG VALIDERING Kutan øenjsibiliøering Sensibilisering er et område, der er genstand for en betydelig forskningsindsats, og som er yderst relevant for kosmetiksikkerhed. På det symposium, der afholdtes af COLIPA (den 29. -30. november 1995), blev der fremlagt en interessant fremgangsmåde til at evaluere kutan sensibilisering in vitro. En ECVAM workshop om kutan sensibilisering afholdtes i 1995; rapporten herfra vil blive offentliggjort i 1996. Forskellige kemiske forbindelsers struktur og sensibiliseringspotentiale har været genstand for omfattende undersøgelser, og edb-ekspertsystemer såsom DEREK (Deductive Estimation of Risk from Existing Knowledge = deduktiv risikovurdering ud fra allerede eksisterende viden) er under udvikling med henblik på at identificere de former for 15 strukturer, der giver anledning til ekstra årvågenhed, og som er forbundet med det kutane sensibiliseringspotentiale. En mulig beregningsmetode vil kunne baseres på måling af de molekylære signaler, der forårsages af sensibiliserende stoffer på cellekulturer. Særligt på dette område er det vigtigt at understrege, at beregning af sensibiliseringspotentialet hos mennesker forbliver et meget vanskeligt forehavende på grund af, at mennesker reagerer individuelt og forskelligt på påvirkningerne. Fotowutaganioitat - Validering (COLIPA) Siden 1990 har COLIPA fremlagt rapporter vedrørende UV-filtre, som indeholder data om fotomutagenicitet; disse data er opnået ved forskellige former for tests. COLIPA arrangerede en ringtest for at definere en passende protokol ved sammen med forskellige bakteriestammer at bruge 2 stoffer, hvis fotomutagene potentiale er kendt, og som aktiveres af UVA-stråler. Resultaterne af denne ringtest har gjort det muligt at udfærdige anbefalinger for så vidt angår kriterierne for valg af bakteriestammer eller cellekulturer, solsimulator, teknikken til bestråling af prøverne, dosering af UV-stråler, dosering af de stoffer, der skal testes, og anvendelse af positive kontrolformer. Det er vanskeligt at planlægge en valideringsundersøgelse, når der ikke foreligger nogen in vivo-data, som man kan referere til. Perkutan absorption ECVAM, COLIPA og OECD har arbejdet tæt sammen med henblik på at fremme vedtagelsen af retningslinjer for testning af perkutan absorption in vitro. Fotoirritation/£ototokaiaitett validering - f u« II (BU/COLIPA) ECVAM og GD XI er repræsenteret i Direktionsudvalget for den undersøgelse, som ZEBET koordinerer, og som undersøger mulighederne for en supplerende valideringsundersøgelse, der skal kunne beregne den potentielle fotoirritation i UV-filtre, I den første fase (forhåndsvalidering) af undersøgelsen har analysen af resultater, der er opnået via tests af cellers levedygtighed, gjort det muligt at fastsætte en grænsefaktor, der adskiller fotoirritationsfremkaldende fra ikke- fotoirritationsfremkaldende stoffer. Målsætningen for den anden fase (validering), som var planlagt som en blindprøve, var at finde ud af, om en almindeligt anvendt celle-toksicitetstest og 16 en test, der måler cellebeskadigelser (NRU-testen1 og den kombinerede RBC-test2 (fotohæmolyse (blodcelledrab) + hæmoglobin oxydering) er i stand til korrekt at beregne fotoirritationspotentialet for menneskers vedkommende, for så vidt angår 32 kemiske stoffer, som anvendes systemisk eller topisk. De foreløbige resultater af fase II, som afsluttedes i 1995, begrænser sig til NRU-testen, der blev brugt i alle laboratorier. RBC-protokollen blev kun brugt i 3 laboratorier. Der bliver foretaget supplerende statistiske evalueringer af en uvildig biostatistiker, og de vil foreligge i løbet af de første seks måneder af 1996. Øjenirritation - den endelige rapport om BU/RO-undereegeleen a£ alternativer til Draise-testen af øjenirritation Formålet med denne undersøgelse var at finde ud af, om ni alternative tests, enkeltvis eller kombineret, kunne erstatte Draize-testen for så vidt angår testmateriale, der fremkalder kraftig irritation, og med henblik på at evaluere kemiske stoffers irritationspotentiale, med eller uden forbindelse til den relevante kemiske kategori og inden for hele skalaen af målelige potentialer. Der er blevet analyseret 60 kemiske stoffer uafhængigt af hinanden i 37 laboratorier. Resultaterne herfra er blevet sammenlignet med MMAS-resultaterne (Modified Maximum Average Score) fra Draize-testen, ligesom de har været genstand for statistisk evaluering. Bortset fra beregningen af irritationspotentialet i stoffer, der påvirker overfladespændingen, var der ingen af de ni tests, der opfyldte de opstillede mål. I løbet af undersøgelsen blev der gjort mange værdifulde erfaringer, som der er taget hensyn til i planlægningen af COLIPA-undersøgelsen. På grundlag af disse erfaringer blev der endvidere afholdt en ECVAM workshop om praktiske aspekter i forbindelse med validering, og ECVAMs forhåndsvalideringssystem blev ligeledes udviklet på grundlag heraf. In vivo-dataenes variabilitet konstateredes at være en betydelig hindring for at fastslå relevansen og pålideligheden af in vivo-tests. 1NRU: Neutral red uptake assay, bruger cellerne som mål og celletoksiciteten som biologisk resultat. 2RBC: Red blood cell haemolysis test, evaluerer skader pa celle membranerne. 17 Øjenirritation - validering (COLIPA) Der er blevet foretaget validering af 23 kosmetiske bestanddele (stoffer der påvirker overfladespændingen, alkohol, konserveringsmidler), hvoraf de 20 også indgik i ovennævnte EU/HO-undersøgelse, samt af 32 kosmetiske formler [med en omfattende række fysisk-kemiske former]. Testmaterialet er blevet testet in vivo i overensstemmelse med OECDs retningslinjer (OECD405). Denne undersøgelses specifikke mål var at afgøre, om data fra 10 in vitro-protokoller, der er almindeligt anvendt i kosmetik industrien (hvoraf de 5 også figurerer i EU/HO-undersøgelsen): stemmer tilfredsstillende overens med MMAS-resultaterne (modified maximum average score) stemmer tilfredsstillende overens med de individuelle betegnelser samt med den rekuperationstid, der er beskrevet i OECDs retningslinjer (OECD405) giver en korrekt beregning af øjenirritationspotentialet for kaninøjne på basis af alternative algoritmer. For første gang i en valideringsundersøgelse er der blevet opstillet beregningsmodeller inden undersøgelsens start. De definerer nøjagtigt de biologiske reaktioner, der er opnået i forbindelse med den enkelte in vitro-metode, samt hvordan den enkelte biologiske reaktion in vitro skal konverteres til en beregning af øjenirritationspotentiale. De beregningsmodeller, der er anvendt i denne undersøgelse, er baseret på historiske data, som man kan anvende med henblik på bestanddele og formler af interesse for kosmetikindustrien, og i særdeleshed med henblik på stoffer med et lavt til middelstort irritationspotentiale. Programmet har ikke gjort det muligt at nå frem til en fuldstændig validering, fordi det kun er et lille antal laboratorier, der har deltaget i programmets særlige prøvninger. Der er endnu ikke nogen af metoderne, der på forsvarlig vis kan erstatte Draize-øjenirritationstesten. Beregningsmodellernes pålidelighed evalueredes ved at finde frem til, om de fælles laboratorieundersøgelser var reproducerbare, og om de pågældende data befandt sig inden for de forud beregnede grænser, som var opstillet i de i forvejen definerede beregningsmodeller. RBC-testen viste en god reproducerbarhed i alle laboratorier; desuden opfylder den kravene til pålidelighed. 18 Der er tre af de testede protokoller, der i rimelig grad stemmer overens med de tilsvarende beregningsmodeller (FLT3, RBC, TEA4) , men supplerende undersøgelser er nødvendige for at få løst en række tekniske problemer, der er forbundet med beregningsmodellerne, inden man kan drage de endelige konklusioner om deres egenskaber. Dena« valideringsundersøgelse viser vigtigheden af "in vivo- data af god kvalitet". Når der foreligger in vivo-data, er de velegnede til at evaluere risici. For at sammenligne in vivo- og in vitro-data, burde de to grupper data teoretisk set variere så lidt som muligt i forhold til hinanden, hvis man vil sikre en nøjagtig statistisk evaluering. Erfaringen har vist, at dette ikke altid er tilfældet. Ud fra resultaterne kan man se, at visse beregningsmodeller vil kunne forbedres og testes i forbindelse med en fremtidig undersøgelse. Kutan korrosions følsomhed: forhåndsevaluering (ECVAM) De fire tests af kutan korrosionsfølsomhed, der indgår i undersøgelsen, er genstand for evaluering og optimeringsbestræbelser (TER = transcutaneous electrical resistance, CORROSITEX, Skin 2) og EPISKIN) med henblik på at forberede en formel valideringsundersøgelse for 1996. Kutan kompatibilitet (COLIPA) Kutan kompatibilitet defineres som fravær af kutan irritation ved normal brug og ved den form for forkert brug, der med rimelighed kan forudses. Der er syv firmaer inden for COLIPAs medlemskreds, der under kontrollerede forhold evaluerer den kutane kompatibilitet i deres færdige produkter til menneskebrug, fordi irritationspotentialet i de fleste kosmetikprodukter er meget lavt. COLIPA har udviklet nogle retningslinjer for kompatibilitetsevalueringen af færdige kosmetikprodukter, der er fremstillet til menneskehud: FLT: fluoresceine leikage teet: maler skader på cellebarrierer. 4TBA: Tieøue equivalent assay, maler den tid der kræves til at reducere en celles levedygtighed med 50% for så vidt angår menneskeceller i co-kultur. 19 der er taget hensyn til etiske krav: tests på mennesker skal udføres i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen (1964, 1989) en forsigtig skridt-for-skridt testprocedure er en nødvendighed det præciseres, at det er nødvendigt at have forudgående kendskab til de testede produkters sammensætning og stabilitet, ligesom det er nødvendigt med en forudgående evaluering af toksicitetsdata for så vidt angår de bestanddele, der indgår i produkternes sammensætning. Man er i øjeblikket ved at udarbejde retningslinjer for kosmetikbestanddeles kutane kompatibilitet. Tests gennemført på frivillige forsøgpersoner (ECVAM) Tests gennemført på frivillige forsøgspersoner opregnes ofte sammen med andre erstatningsalternativer til dyreforsøg. De etiske, juridiske, sikkerhedsmæssige, logistiske og videnskabelige problemer, der er forbundet med sådanne tests er i øjeblikket genstand for forskningsundersøgelser forestået af ECVAM i samarbejde med Pavia Universitet og Nottingham Universitet tillige med en række kosmetikvirksomheder. B. STATISTIKKER OVER DYREFORSØG Indsamlingen af data over, hvor mange dyr der anvendes til forsøg og andre videnskabelige formål, i henhold til artikel 13 og 26 i direktiv 86/609/EØF, er ikke fastsat til at skulle foregå årligt. Denne kendsgerning kan til dels forklare de vanskeligheder, der har været forbundet med årligt at indsamle specifikke data om kosmetikbestanddele og -produkter. Som det er anført i afsnittet om aktiviteterne i GD XXIV og GD XI, har Kommissionen gentagne gange opfordret medlemsstaterne til at indsamle de fornødne statistiske oplysninger. 1) 2) 8 medlemsstater har tilkendegivet, at der ikke var anvendt dyr til at teste færdige kosmetikprodukter på deres territorium (Italien, Grækenland, Belgien, Irland, Sverige, Finland, Luxembourg, Tyskland) 6 medlemsstater har tilkendegivet, at der ikke var anvendt dyr til at teste kosmetikbestanddele på deres territorium (Grækenland, Nederlandene, Irland, Sverige, Finiand, Luxembourg) 20 3) 4) Kun 3 medlemsstater (Østrig, Frankrig, Det Forenede Kongerige) har sat tal på oplysningerne om de anvendte forsøgsdyr, idet det dog i nogle tilfælde anføres, at tallene ikke er fortolkelige, og at der hersker usikkerhed om overensstemmelsen med virkeligheden. Under disse omstændigheder kan nærværende rapport ikke præsentere sammenlignende skemaer med talmæssige oplysninger, da sådanne skemaer ville give et fejlagtigt billede af de faktiske forhold. Hvad angår tilkendegivelserne om, at der ikke har været anvendt dyreforsøg, må man se med et vist forbehold på den informative værdi heraf, da nogle medlemsstater, der ikke selv producerer, utvivlsomt anvender bestanddele, der er blevet testet i andre medlemsstater eller andre lande uden for EU, og visse bestanddele, der indgår i kosmetikprodukter, kan være blevet testet til andre formål. Kommissionen beklager dybt, at den ikke råder over mere præcise data i øjeblikket, men understreger, at det er op til medlemsstaterne at indsamle de relevante data. F. KONKLUSIONER De fremskridt, man har kunnet konstatere i 1995 med hensyn til udvikling af alternative testmetoder og validering heraf kan sammenfattes således: 1. 2. Rapporten om fase II af EU/COLIPAs internationale valideringsundersøgelse af in vitro-tests vedrørende fototoksicitet (fotoirritation) vil foreligge i 1996, men det er allerede nu klart, at valideringen af NRU- cellekulturtesten har været en succes. Deltagerne i undersøgelsen forventer, at et forslag til acceptable OECD-retningslinjer kan udarbejdes inden for de næste to år, efter at den endelige rapport om undersøgelsen er blevet offentliggjort, og der er foretaget nogle mindre justeringer af protokollerne. De erfaringer, som den europæiske kosmetik-industri har høstet inden for det problematiske område kutan absorption in vitro, konkretiseres i form af et forslag til en OECD-retningslinje for in vitro-tests. ECVAM og COLIPA har et tæt samarbejde med OECD m. fl. med henblik på at fremme vedtagelsen af retningslinjer for in vitro- tests i OECD-medlemsstaterne. 3. Resultaterne af EU/HOs internationale valideringsundersøgelse om alternativer til Draize-testen 21 4. 5. 6. 7. 8. af øjenirritation var skuffende, for så vidt som ingen af testene opfyldte undersøgelsens målsætninger. Der blev imidlertid indhøstet mange værdifulde erfaringer, som vil bidrage til en markant forbedring af kvaliteten af fremtidige valideringsundersøgelser. Den første fase af COLIPA-undersøgelserne vedrørende validering af alternativer til Draize-testen af øjenirritation, der blev gennemført på grundlag af en mere begrænset skala af materialer end EU/HO- undersøgelsen, frembragte mere lovende resultater og viste værdien af at inddrage beregningsmodeller i testprotokoller. Som et resultat af COLIPA-undersøgelsen er der opstillet nogle anbefalinger for så vidt angår de kriterier, der bør tages hensyn til i forbindelse med definitionen af prøveprotokoller vedrørende fotomutagenicitet in vitro. Som et resultat af et andet COLIPA-initiativ er der udarbejdet retningslinjer vedrørende kompatibilitetstest af kosmetiske produkter og disses bestanddele anvendt på menneskehud. Anvendelse af frivillige forsøgspersoner som et erstatningsalternativ bør gøres til genstand for nærmere undersøgelse, men det skal understreges, at sådanne tests kun bør udføres på grundlag af resultater af forudgående in vivo og/eller in vitro-tests for ikke at risikere alvorlige følgevirkninger. Validering har vist sig at være vanskeligere, mere tidskrævende og mere kostbar end forventet. Man diskuterer fortsat, hvad validering egentlig vil sige, og hvorledes relevansen og pålideligheden af alternative metoder bedst kan kontrolleres. ECVAM, der spiller en central rolle i denne debat, har bidraget med en stor indsats på en lang række områder. 9. ECVAMs forhåndsvalideringssystem, som i øjeblikket er genstand for international evaluering, kan formodes at forbedre valideringstestenes effektivitet og at medføre besparelser, såvel hvad angår tid som penge. 10. Der har fundet drøftelser sted både internt i Europa og med USA og Japan om harmonisering af kriterierne vedrørende validering og godkendelse af alternative testmetoder til erstatning af dyreforsøg. c O. PERSPEKTIVER 22 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Fremkomsten af mere realistiske forventninger til valideringsprocessen og de positive resultater af internationale diskussioner om kriterier for validering og godkendelse af alternative erstatningsmetoder kan forventes at resultere i betydelige fremskridt. Efter gennemførelsen af endnu en undersøgelse af kemiske stoffar af sårlig interesse for VUK vil der højst sandsynligt blive udarbejdet et forslag til forskriftsmæssige retningslinjer for in vitro-testning af fototoksicitet, som vil blive forelagt de lovgivende myndigheder til godkendelse. Det forvantes, at nye retningslinjer for in vitro-tests af kutan absorption i nærmeste fremtid vil blive godkendt af EU-medlemsstaterne og OECD-landene. Hurtige fremskridt kan forventes, hvad angår udviklingen af standardiserede og adækvate in vitro-metoder til beregning af sensibiliseringspotentiale. Dat ex vigtigt at overveje narmere, hvad man forventer af øjenirritationstests (in vivo og in vitro)• Det er imidlertid muligt at gå mere fleksibelt til værks, hvis man f. eks. godkender an evaluering af nye produkters og deres bestanddeles toksicitet på grundlag af en sammanligning mad passende standardkontrolstoffer (benchmark). Der kan drages større nytte af det faktum, at færdige kosmetikprodukters ølentolerance og kutane tolerance kan evalueres in vitro pa den udtrykkelige betingelse, at man på forhånd kander bestanddelenes toksicitetsdata og fysisk-kemi ske egenskaber. Ydermere kan de færdige kosmetikprodukters kutane kompatibilitet evalueres inden for rammerne af strengt overvågede kliniske undersøgelBex• ECVAMs valideringsundersøgelse af tests af hudkorrosion kan forventes at give positive resultater, som i så fald f. eks. vil kunne anvendes som en del af de oplysninger, dar anses for absolut nødvendige, før tests på mennesker kan tillades. Der vil blive lagt større vægt på en integreret anvendelse af flere forskellige fremgangsmåder (f. eks. edb-baserede beregninger, in vitro-tests) og på hierarkisk opbyggede afprøvningsstrategier med henblik på at reducere, forbedre betingelserne for eller erstatte anvendelsen af lavende dyr til forsøg. Dan sjette ændring af direktiv 76/768/EØF frembyder en enestående lejlighed til at gøre mærkbare fremskridt med hensyn 23 til at erstatte dyreforsøg med alternative forsøgernetoder på kosmetikområdet. Sådanne fremskridt finder rent faktisk sted, men hvis denne positive udvikling skal fortsætte, er det nødvendigt at opretholde gode forbindelser og et effektivt samarbejde mellem alle involverede parter, dvs. Kommissionen og dens rådgivende udvalg, medlemsstaterne, kosmetikindustrien og de lovgivende myndigheder. 24 ISSN 0254-1459 KOM(96) 365 endelig udg. DOKUMENTER DA 10 15 05 03 Katalognummer : CB-CO-96-366-DA-C ISBN 92-78-07190-0 Kontoret for De Europæiske Fællesskabers Officielle Publikationer L-2985 Luxembourg 2^


title: COMMISSION REGULATION (EC) No 1450/96 of 24 July 1996 establishing the standard import values for determining the entry price of certain fruit and vegetables

eurovoc_concepts:
citrus fruit
fruit vegetable
grape
import price
stone fruit


title: REGULAMENTO (CE) Nº 1448/96 DA COMISSÃO de 24 de Julho de 1996 que determina em que medida podem ser aceites os pedidos de certificados de importação de determinados produtos do sector dos ovos e da carne de aves de capoeira apresentados em Julho de 1996 ao abrigo dos Regulamentos (CE) nº 1474/95 e (CE) nº 1251/96

eurovoc_concepts:
animal protein
egg
import licence
poultrymeat
tariff quota


title: Verordening (EG) nr. 1522/96 van de Raad van 24 juli 1996 inzake de opening en de wijze van beheer van bepaalde tariefcontingenten voor de invoer van rijst en breukrijst

eurovoc_concepts:
CCT duties
GATT
import licence
rice
tariff quota
third country

formats: html pdfa1b print


title: ΚΑΝΟΝΙΣΜΟΣ (ΕΚ) αριθ. 1446/96 ΤΗΣ ΕΠΙΤΡΟΠΗΣ της 24ης Ιουλίου 1996 για καθορισμό ορίων εντός των οποίων δύνανται να γίνουν αποδεκτές αιτήσεις που υποβλήθηκαν τον Ιούλιο του 1996 για άδειες εισαγωγής ορισμένων προϊόντων με βάση το κρέας πουλερικών βάσει του καθεστώτος που προβλέπεται από τον κανονισμό (ΕΚ) αριθ. 774/94 του Συμβουλίου για το άνοιγμα και τον τρόπο διαχείρισης ορισμένων κοινοτικών δασμολογικών ποσοστώσεων για το κρέας πουλερικών και για ορισμένα άλλα γεωργικά προϊόντα

eurovoc_concepts:
import licence
poultrymeat
tariff quota


title: Κανονισμός (ΕΚ) αριθ. 1445/96 της Επιτροπής της 24ης Ιουλίου 1996 για την προσέγγιση της έρευνας σχετικά με την καταστρατήγηση των μέτρων αντιντάμπινγκ που επιβλήθηκαν με τον κανονισμό (ΕΟΚ) αριθ. 2861/93 στις εισαγωγές ορισμένων μαγνητικών δίσκων (μικροδίσκων 3,5") καταγωγής Ιαπωνίας, Ταϊβάν και Λαϊκής Δημοκρατίας της Κίνας με τις εισαγωγές του ίδιου προϊόντος από τον Καναδά, το Χονγκ Κονγκ, την Ινδία, την Ινδονησία, το Μακάο, τη Μαλαισία, τις Φιλιππίνες, τη Σιγκαπούρη και την Ταϊλάνδη, και για την παύση της υποβολής του εν λόγω προϊόντος σε καταγραφή

eurovoc_concepts:
anti-dumping duty
anti-dumping legislation
customs regulations
import
magnetic medium
third country