title: Komission kertomus - Vaihtoehtoisten eläinkoemenetelmien kehittäminen, validointi ja oikeudellinen hyväksyminen kosmetiikka-alalla (1995)

eurovoc_concepts:
animal experimentation
bioprocess
cosmetic product
protection of animals
research method

text: EUROOPAN YHTEISÖJEN KOMISSIO Bryssel, 24. 07. 1996 KOM(96) 365 lopull. KOMISSION KERTOMUS VAIHTOEHTOISTEN ELÄINKOEMENETELMIEN KEHITTÄMINEN, VALIDOINTI JA OIKEUDELLINEN HYVÄKSYMINEN KOSMETIIKKA- ALALLA 1995 VAIHTOEHTOISTEN ELÄINKOEMENETELMIEN KEHITTÄMINEN, VALIDOINTI JA OIKEUDELLINEN HYVÄKSYMINEN KOSMETIIKKA- ALALLA 1995 TIIVISTELMÄ I - JOHDANTO Komission velvoitteet Direktiivin 76/768/ETY, sellaisena kuin se on muutettuna direktiivillä 93/35/ETY, 4 täsmennetään, että jäsenvaltioiden on kiellettävä sellaisten artiklan kosmeettisten valmisteiden kaupan pitäminen, jotka sisältävät ainesosia tai niiden yhdistelmiä, jotka on testattu eläinkokeilla 1 päivän tammikuuta 1998 jälkeen. i kohdassa Käsitteen 'niiden yhdistelmiä' monitulkintaisuus on komission mielestä ratkaistu, ja se on sitä mieltä, että kielto kohdistuu myös lopullisiin kosmeettisiin valmisteisiin. Tämän kiellon täytäntöönpaneminen liittyy eläinkokeita tyydyttävällä tavalla korvaavien menetelmien kehittämiseen niin, että niiden avulla voidaan tieteellisesti osoittaa saavutettavan vastaava kuluttajansuojan taso. Jotta tilanteen kehittymisestä saataisiin säännöllistä tietoa, direktiivissä säädetään seuraavasti: "Komissio antaa vuosittain kertomuksen Euroopan parlamentille ja neuvostolle eläinkokeita korvaavien koemenetelmien kehittämisen, validoinninja oikeudel lisen hyväksymisen edistymisestä. Kertomuksessa on valmisteisiin liittyvien eläinkokeiden määristä ja tyypeistä". tarkat tiedot kosmeettisiin Vuoden 1994 kertomus Ensimmäinen kertomus esitettiin vuonna 1994. Siinä kuvattiin kiinnostavia, mutta rajallisia tuloksia, joiden perusteella ei voida korvata eläinkokeita, mutta voidaan edistää käytettyjen eläinten määrän vähentämistä. Tulevaisuudennäkymät olivat kuitenkin optimistisia imeytymistä, fototoksisuutta/fotoirritaatiota ja mutageenisuuden peruskokeita koskevien vaihtoehtoisten menetelmien validoinnin osalta. Kertomuksessa korostettiin myös, että tämän hetkisen tiedon perusteella ei ole kovin todennäköistä, että eläinkokeet korvattaisiin kokonaan systeemisen riskin arviointia koskevissa toksisuustutkimuksissa eli tutkittaessa vaikutusta verenkierron välityksellä koko elimistöön ihon läpi tapahtuvan imeytymisen jälkeen. silmänärsytyskokeita, läpäisevää ihon H - VUODEN 1995 KERTOMUS Kertomuksen tavoitteet ja kysymykset mahdollisesta riskistä ihmisten terveydelle ovat samat kuin vuoden 1994 kertomuksessa. Täytäntöönpanosta huolehtivat: teollisuus, Euroopan komissio: PO XI, PO-CCR, PO XXIV, PO XII Euroopan kosmetiikka-alan jota edustaa COLIPA kosmetiikka-, toalettitarvike- ja hajuvesiteollisuuden yhdyskomitea) Yhdysvaltain hallitus ja CFTA (Amerikan kosmetiikka-, toalettitarvike- ja hajuvesiteollisuuden liitto) Japanin hallitus ja JOA (Japanin kosmetiikkateollisuuden liitto) OECD (Taloudellisen yhteistyön ja kehityksen järjestö). (Euroopan 1 - Validoinnin vaiheiden selventäminen Validointi on prosessi, jossa menettelyn luotettavuus ja asianmukaisuus vahvistetaan tietyn tavoitteen osalta. Tämä prosessi on osoittautunut monimutkaisemmaksi ja enemmän aikaa vieväksi kuin oli ennalta arvioitu. On ollut tarpeen määrittää tarkemmin uusien kokeiden arvioinnin vaiheet (kokeen kehittäminen ja tutkimuspöytäkirjan tuottaminen, esivalidointi, itse validointi, tutkimuksen puolueeton ja riippumaton arviointi, eteneminen kohti oikeudellista hyväksymistä). 2 - Aloitteet Eri toimijat ovat tehneet monia aloitteita edellä kuvattujen tavoitteiden saavuttamiseksi. PO XI PO XI käsittelee kokeisiin ja muihin tieteellisiin tarkoituksiin käytettävien eläinten suojelusta annettua direktiiviä 86/609/ETY ja on vastuussa käytettyjä eläimiä koskevista tilastoista, sekä vaarallisten aineiden luokituksesta, pakkaamisesta ja merkinnöistä annettua direktiiviä 67/548/ETY, jonka liitteissä määritellään Euroopan unionin hyväksymät koemenetelmät. PO - CCR • CE VM A (Euroopan vaihtoehtoisten menetelmien keskus) on järjestänyt jo 14 seminaaria vaihtoehtoisten menetelmien kehittämisestä ja validoinnista. Seitsemässä niistä käsiteltiin kosmeettisten valmisteiden turvallisuutta ja niistä on julkaistu kertomukset. Saatavilla on myös kaksi kertomusta esivalidointia ja validointia koskevista menettelyistä. ECB (Euroopan kemikaali virasto) antaa tarvittavaa teknistä ja tieteellistä tukea PO Xllle. • Il PO XXIV/CSC (Kosmetiikka-alan tiedekomitea) • PO XXIV toimii täytäntöönpanijana, koska se käsittelee kosmeettisia valmisteita koskevaa direktiiviä, ja sen tehtävänä on valmistaa komissiota varten lykätä luonnos eläinkoekieltoa tarvittaessa. tarkoituksena on toimenpiteistä, joiden • CSC ja sen erityisesti vaihtoehtoisista koemenetelmistä vastaava alaryhmä ovat arvioineet COLIPA. n esittämiä eri asiakirjoja. Ne ovat myös hyväksyneet koemenetelmien validointitutkimusten tieteellistä arviointia varten tarvittavista tiedoista niiden käyttämiseksi kosmeettisten tuotteiden turvallisuutta koskevissa arvioinneissa". "Vaihtoehtoisten asiakirjan poxn PO XII on tukenut taloudellisesti vaihtoehtoisten koemenetelmien kehittämistä ja validointia koskevia eri tutkimusohjelmia. COLIPA/SCAAT (Eläinkokeille vaihtoehtoisten koemenetelmien valmisteleva komitea) Useiden asiakirjojen laatimisen ja lukuisiin tutkimuksiin osallistumisen lisäksi COLIPA on järjestänyt kansainvälisen tieteellisen symposiumin vaihtoehtoisista koemenetelmistä 29. - 30. marraskuuta 1995 Brysselissä. Yhdysvallat • • Yhdysvaltain hallitus tutkii aktiivisesti mahdollisuutta kansainväliseen yhteistyöhön, jonka avulla voitaisiin saada aikaan suosituksia. FDA (Food and Drug Administration), joka on kosmeettisten valmisteiden ilmaissut huolestuneisuutensa turvallisuudesta vastaava eläinkokeiden kieltämisestä direktiivin 93/35/ETY täytäntöönpanon yhteydessä. elin, on OECD OECD julkaisee toksisuuskokeisiin liittyviä ohjeita, jotka jäsenvaltiot ovat hyväksyneet. Parhaillaan se käsittelee ihon läpäisevää imeytymistä koskevan in vitro kokeen ohjeita. 3 - Tilastoja eläinkokeista Kosmeettisia valmisteita ja ainesosia koskevien tietojen kerääminen on osoittautunut vaikeaksi, koska tietoja direktiivin 86/609/ETY mukaisesti kokeisiin ja muihin tieteellisiin tarkoituksiin käytettävien eläinten lukumäärästä ei kerätä vuosittain. 8 jäsenvaltiota on ilmoittanut, että niiden alueella ei ole tehty eläinkokeita lopullisilla kosmeettisilla tuotteilla (Italia, Kreikka, Belgia, Irlanti, Ruotsi, Suomi, Luxemburg, Saksa). m 6 jäsenvaltiota on ilmoittanut, että niiden alueella ei ole tehty eläinkokeita kosmeettisilla ainesosilla Irlanti, Ruotsi, Suomi, (Kreikka, Alankomaat, Luxemburg). Ainoastaan kolme jäsenvaltiota (Itävalta, Ranska, Yhdistynyt kuningaskunta) on ilmoittanut kaikki luvut, joissa on täsmennetty toisinaan, että ne ovat epätarkkoja eivätkä tulkittavissa. Lisäksi on huomattava, että tietyt jäsenvaltiot, jotka eivät tuota kosmeettisia aineksia, voivat tietenkin käyttää muissa jäsenvaltioissa tai kolmansissa maissa testattuja aineksia, ja että tiettyjä aineksia on voitu testata muiden tarkoitusten vuoksi. 4 - LoDDUPäätelmät ia tulevaisuudennäkymät jotka liittyvät kosmeettisten valmisteiden ja ainesten turvallisuuden arviointiin käytettyjen eri toksisuustestien korvaamiseksi tarkoitettujen vaihtoehtoisten menetelmien kehittämiseen 4 -1 Ainekset Fototoksisuus/fotoirritaatio (ihoreaktio, kun iholle on laitettu kemiallista ainetta ja siihen kohdistetaan UV-säteilyä). Tämä koskee erityisesti UV-suotimia. Tulokset EU/COLlPA:n in vitro kokeen kansainvälisen validointitutkimuksen toisesta vaiheesta ovat osoittautuneet erittäin merkittäviksi ja kolmatta vaihetta suunnitellaan. Myös UV-suotimia koskeva lisätutkimus on tarpeen. Validointi tapahtunee lähitulevaisuudessa. fotoirritaatiota koskevan Ihon läpäisevä imeytyminen (perkutaaninen absorptio) Jäsenvaltiot ja OECD voivat hyväksyä ihon läpäisevää imeytymistä koskevien vitro kokeiden uudet ohjeet lähitulevaisuudessa. in Ihofärsvtvs On ehdotettu, että kosmeettisten ainesten ihoärsytystä arvioitaisiin vapaaehtoisilla ihmisillä. Tätä koskevista harkita, mikäli esitutkimuksista saadaan riittävät takuut. toksisuusriskejä voitaisiin Ihonherkistys Ihonherkistyksen arviointi in vitro vaatii tarkempia tutkimuksia herkistyksen mekanistisista perusteista ennen kuin validointitutkimusta voidaan harkita. silmäirritaatiokokeelle Silmänärsvtvs Draizen koskevan kansainvälisen EU/HO. n validointitutkimuksen tulokset tuottivat pettymyksen, sillä yksikään kokeista ei saavuttanut tutkimukselle asetettuja tavoitteita. Olisi rohkaistava joustavampaa lähestymistapaa testaukseen esimerkiksi hyväksymällä tieteellisesti validoitujen menetelmien yhdistäminen ja arvioimalla ainesten toksisuutta suhteessa asianmukaisiin standardikontrolliaineisiin ("benchmark"). koemenetelmiä vaihtoehtoisia \\J Fotomutageenisuus (kaikki geneettisen informaation muutokset, jotka johtuvat UV- säteilystä) On annettu suosituksia perusteista, jotka olisi hyväksyttävä in vitro kokeiden koepöytäkirjojen määrittelyä varten. Ihokorroosio Syövyttäviä aineita ei käytetä kosmeettisissa valmisteissa. CEVMA. n in vitro ihokorroosiokokeita koskevaa validointitutkimusta voitaisiin kuitenkin käyttää seulontavaiheessa, jotta saataisiin olennaisen tärkeitä tietoja ennen kuin kokeita vapaaeh to silla ihmisillä voidaan suunnitella. Mutageenisuus vitro In mutageenisuuspotentiaalia, käytetään koko ajan. In vivo kokeita tehdään vain, jos in vitro kokeiden tulokset ovat epäilyttäviä. kosmeettisten arvioidaan aineiden kokeita, joilla Näyttää melko mahdottomalta, että lähitulevaisuudessa voitaisiin korvata kokonaan in vivo kokeet, joilla arvioidaan systeemistä riskiä eli akuuttia toksisuutta, sub kroonista toksisuutta, karsinogeenisuutta, lisääntymis-ja kehittymistoksisuutta. Käytettyjen menetelmien parantamisella on kuitenkin saatu merkittävästi vähennettyä käytettyjen eläinten määrää. 4 -2 Lopulliset kosmeettiset valmisteet Lopullisten kosmeettisten tuotteiden silmä- ja ihotoleranssia voidaan yleensä arvioida in vitro, mikäli ainesten toksisuuteeen ja niiden fyysis-kemiallisiin ominaisuuksiin liittyvät tiedot ovat tunnettuja ja niistä saadaan tarvittavat takuut. Lopullisten kosmeettisten tuotteiden ihokompatibiliteettia (ihoärsytyksen puutetta) voidaan arvioida ihmisillä, mikäli se voidaan tehdä tarkkaan valvottujen kliinisten tutkimusten yhteydessä. On tärkeää korostaa, että vapaaehtoisten ihmisten käyttämistä eläinkokeita korvaavana menetelmänä on harkittava erittäin huolellisesti. Tällaisten tutkimusten eettiset ongelmat ovat ilmeiset, eikä niitä pitäisi sallia ennen kuin in vitro ja in vivo tutkimukset ovat osoittaneet, että vakavien seurausten vaaraa ei ole. Lopuksi: ja Perkutaanisen absorption fotoirritaation arvioimista koskevien vaihtoehtoisten menetelmien validointi a ainesten osalta, ja silmä- ja ihotoleranssin arvioimista koskevien vaihtoehtoisten menetelmien validointi a harkita lähitulevaisuudessa. valmisteiden lopullisten voidaan osalta V Vaihtoehtoisten menetelmien kehittäminen silmä- ja ihoirritaation ja ihonherkistyksen arvioimiseksi aineksista vaatii ensin lisätutkimusten suorittamista. In vitro menetelmien kehittäminen systeemistä riskiä koskevilla alueilla ei tapahdu lähitulevaisuudessa, vaikka eläinten lukumäärää vähennettäisiinkin. Vi SANASTO CAPT: CAAT: CFTA: COLIPA: DEREK: ECB: ECVAM: ERGATT: ES AC: EU: EU/HO international validation study: Committee of Adaptation to Technical Progress Centre for Alternatives to Animal Testing (John Hopkins University. USA) Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association (USA) European Cosmetic, Toiletry and Perfumery Association Deductive Estimation of Risk from Existing Knowledge European Chemicals Bureau European Centre for the Validation of Alternative Methods European Research Group for Alternatives in Toxicity Testing ECVAM Scientific Advisory Committee European Union FDA: FDCA: FLT: FRAME: GLP: ICC V AM: IF AW: IRAG: IVTIP: JO A: JRC: MM AS: MHW: NIEHS: NRU: NTP: PM: OECD: QSAR: RBC: SCAAT: SCC: SIAT: TEA: UV: ZEBET: European Union/Home Office international validation study Food and Drug Administration (USA) Food, Drug and Cosmetics Act (USA) Fluorescein Leakage Test Fund for the Replacement of Animals in Medical Experiments Good Laboratory Practice US Inter-Agency Coordinating Committee for the Validation of Alternative Methods International Fund for Animal Welfare Interagency Regulatory Alternatives Group In Vitro Testing Industrial Platform Japanese Cosmetics Industry Association Joint Research Centre Modified Maximum Average Score Ministry for Health and Welfare (Japan) National Institute of Environmental Health Sciences (USA) Neutral Red Uptake Assay National Toxicology Program (USA) Prediction Model Organisation for Economic Cooperation and Development Quantitative Structure-Activity Relationships Red Blood Cell Haemolysis Test Steering Committee on Alternatives to Animal Testing Scientific Committee on Cosmetology Scweizerisches Institut fur Alternativen zu Tierversuchen Tissue Equivalent Assay Ultraviolet Zentrastelle Ergänzungsmethoden Bundesgesundheitsamt T i e r v e r s u ch und Bewertung zur Erfassung von Ersatz und z um im VU SISÄLLYSLUETTOLO JOHDANTO VALIDOINNIN VAIHEIDEN SELVENTÄMINEN - Eri tarkoituksiin käytettyjen vaihtoehtoisten koemenetelmien validointi - Vaiheet uusien kokeiden kehittämisessä VUONNA 1995 TEHDYT ALOITTEET TOIMIJAT ALOITTEET 1. EUROOPAN UNIONI PO XI PO CCR PO XXIV/CSC PO XII COUPAI SCAAT 2. 3. 4. YHDYSVALLAT JAPANI OECD TÄMÄNHETKINEN TILANNE ELÄINKOKEISIIN LIITTYVIÄ TILASTOJA LOPPUPÄÄTELMÄT A. B. C. D. E. F. G. TULEVAISUUDENNÄKYMÄT SIVU 2 2-5 3 3 5-14 5 7 7 7 9 11 12 13 14 14 14-18 19 19-20 21 A. JOHDANTO Tämä on toinen niistä kertomuksista, joka komission on annettava vuosittain Euroopan toteutuneesta edistyksestä eläinkokeita korvaavien parlamentille koemenetelmien kehittämisessä, validoinnissa ja oikeudellisessa hyväksymisessä kosmetiikka-alalla. ja neuvostolle "Komissio antaa vuosittain kertomuksen Euroopan parlamentille ja neuvostolle eläinkokeita korvaa vien koemenetelmien kehittämisen, validoinnin ja oikeudellisen hyväksymisen edistymisestä. Kertomuksessa on tarkat tiedot kosmeettisiin valmisteisiin liittyvien eläinkokeiden määristä ja tyypeistä. Jäsenvaltioiden on kerättävä nämä tiedot niiden tilastotietojen lisäksi, joista säädetään kokeisiin ja muihin tieteellisiin tarkoituksiin käytettävien eläinten suojelua koskevien jäsenval tioiden lakien, asetusten ja hallinnollisten määräysten lähentämisestä annetussa direktiivissä 86/609/ETY. Komissio huolehtii erityisesti niiden koemenetelmien kehittämisestä, validoinnista ja oikeudellisesta hyväksymisestä, joissa ei käytetä eläviä eläimiä. " (direktiivi 93/35/ETY, 4 artiklan i alakohta). Lukuun ottamatta samoina pysyviä tavoitteita, toimijoita ja mahdollista vaaraa ihmisten terveydelle, ensimmäisessä vuosikertomuksessa (KOM(94)606) esitettyjä kohtia arvioidaan uudelleen. Validoinnin vaiheiden selventäminen (B) Vuonna 1995 tehdyt aloitteet (C) Tämänhetkinen tilanne (D) Eläinkokeisiin liittyviä tilastoja (E) Loppupäätelmät (F) Tulevaisuudennäkymät (G) B. VALIDOINNIN VAIHEIDEN SELVENTÄMINEN Komission pääasiallisena tavoitteena edelleen on rohkaista sellaisten vaihtoehtoisten koemenetelmien kehittämistä, validointia ja oikeudellista hyväksyntää, joilla voitaisiin saavuttaa kuluttajansuojassa vähintään vastaava taso kuin eläinkokeilla. Validointi on prosessi, jossa menettelyn luotettavuus ja asianmukaisuus vahvistetaan tietyn tavoitteen osalta. Tämän tuloksen saavuttamiseksi tarvittavat vaiheet ovat osoittautuneet moninaisemmiksi ja prosessi monimutkaisemmaksi kuin oli ennalta arvioitu. Ensimmäisessä Amdenin workshop-seminaarissa, joka pidettiin Sveitsissä vuonna 1990, laadittiin validointiprosessille olennaisen tärkeä teoreettinen perusta, johon sisältyi tietopankkien sisäinen arviointi, laboratorion kehittäminen ja tulosten arviointi. laboratorioiden välinen arviointi, Vuodesta 1990 lähtien tehdyistä validointitutkimuksista saatujen kokemusten perusteella on voitu todeta, että on tarpeen määritellä tarkemmin validointitutkimuksen eri tavoitteen ja sisällyttää uudet vaiheet uusien kokeiden arviointiprosessiin. ympäristön Euroopan vaihtoehtoisten menetelmien keskus (CEVMA), joka on tutkimuslaitoksen yksikkö yhteisessä tutkimuskeskuksessa (Isprassa), on keskustelujen keskipisteessä, ja seuraavilla aloilla on saavutettu merkittävää edistystä: * * * validointia koskevat käytännölliset näkökohdat esivalidointijärjestelmä ICCVAM:in (Yhdysvallat - Inter-Agency Coordinating Committee for the Validation of Alternative Methods) ja OECD:n (Taloudellisen yhteistyön ja kehityksen järjestön) kanssa käytävät kansainväliset keskustelut validointi- ja hyväksy misperusteiden yhdenmukaistamisesta. Tutkimuspöytäkirjojen validointia koskevia käytännöllisiä ja logistisia suosituksia tehtiin CEVMA: n ja ERG ATT: in (European Research Group for Alternatives in Toxicity Testing) järjestämässä toisessa Amdenin workshop-seminaarissa 24. - 28. tammikuuta 1994), ja niitä käsitellään CEVMA:n kertomuksessa n:o 5. Eri tarkoituksiin käytettyjen vaihtoehtoisten koemenetelmien validointi Vaihtoehtoisten koemenetelmien validointitutkimuksia tehdään pääasiassa neljän tyyppisten tavoitteiden saavuttamiseksi. Tutkimuksista erotetaan: 1. 2. 3. 4. Vaihtoehtoisten menetelmien validointi muita kuin lakisääteisiä tutkimuksia varten. Vaihtoehtoisten menetelmien validointi niiden ottamiseksi osaksi lakisääteisiä ohjeita. Vaihtoehtoisten menetelmien validointi nykyisten ohjeiden korvaamiseksi. Vaihtoehtoisten menetelmien validointi, joiden tarkoituksena on saada osa lakisääteisissä ohjeissa vaadituista tiedoista. Vaiheet uusien kokeiden kehittämisessä 1. Kokeen kehittäminen ja tutkimuspöytäkirjan laatiminen. Kokeen kehittämisessä huomioon otettavat perusteet koostuvat pääasiassa menetelmän perusteiden tavoitteiden määrittelystä, biologisen päämäärän erittelystä, tulosten julkaisusta ja tulkinnasta ennustemallia (PM) käyttäen. kuvauksesta, tieteellisten kokeen Ennustemallin on mahdollistettava kaikkien vaihtoehtoisella menetelmällä saatujen tulosten muuntaminen oikeaksi ennusteeksi in vivo toksisuudesta. on ensiarvoisen Ennustemalli validointiohjelman tärkeä saavuttamiseksi. Sen avulla on mahdollista testata selkeästi määritelty hypoteesi, toimii oppaana arvioida objektiivisesti kokeen validointitutkimusta suunniteltaessa. suorituskykyä, onnistuneen se ja Esivalidointi Kokemus on osoittanut, että laajojen ja kalliiden validointitutkimusten tulokset voivat vaarantua, mikäli niiden johdossa olevat henkilöt eivät vaadi, että optimoidut koepöytäkirjat ja todisteet niiden suorituskyvystä esitetään ennen muodollisen validointitutkimuksen aloittamista. Esivalidoinnin tavoitteita ja esivalidointiprosessia kuvataan CEVMA: n esivalidointia koskevan työryhmän ensimmäisessä kertomuksessa. Esivalidoinnin tavoitteena on: tutkimuspöytäkirjan optimointi ja standardisointi menetelmän siirrettävyyden arviointi. Esivalidointiin kuluu kolme vaihetta: tutkimuspöytäkirjan parantaminen, mikä edellyttää menetelmän kehittäneen laboratorion ja menetelmän optimointia varten nimetyn laboratorion välistä yhteistyötä tutkimuspöytäkirjan siirtäminen, mikä edellyttää kahden ensimmäisen laboratorion sekä siirtoa varten nimetyn laboratorion välistä yhteistyötä sokkotutkimus, kolmen laboratorion tutkimuspöytäkirjan suorituskykyä tutkimaan tarkoitetun osallistumista. edellyttää vähintään näiden joka 3. Validointi Validointiin kuuluu muodollinen laboratorioiden välinen tutkimus. Pääasialliset vaiheet ovat: tutkimuksen suunnittelu kokeiden valinta laboratorioiden valinta koeaineiston valinta ja jakelu tulosten kerääminen ja analysointi tutkimuksen arviointi 4. Riippumaton arviointi tutkimuksen toteuttamisesta ja tuloksista. Tähän olisi sisällyttävä objektiivinen arvio tieteellisesti validoitujen kokeiden arvosta verrattuna muihin kokeisiin ja ottaen huomioon validoinnin tavoitteet. Edistyminen oikeudellista hyväksymistä kohti. On olennaisen tärkeää, että kaikki uudet menetelmät, joita pidetään riittävästi validoituina niin, että niillä voidaan korvata jokin nykyinen menetelmä, tunnustetaan kansainvälisesti niin laajalti kuin mahdollista. Esimerkiksi OECD:n (Taloudellisen yhteistyön ja kehityksen järjestön) koeohjeet ovat erityisen merkittäviä tässä suhteessa, koska niitä käytetään sen jäsenvaltioissa Euroopassa, Pohjois-Amerikassa, Japanissa, Australiassa ja Uudessa-Seelannissa tehtävissä kokeissa. Lisäksi OECD:n tietojen yhtäpitävyyttä koskevan keskinäisen hyväksymisen (Mutual Acceptance of Data Agreement) mukaan jäsenvaltioiden on hyväksyttävä OECD:n ohjeiden mukaisesti suoritetuista kokeista saadut tiedot, sillä edellytyksellä, että hyvän laboratoriokäytännön periaatteita on noudatettu. OECD on laatinut menetelmän koeohjeiden päivittämistä ja uusien koemenetelmien käyttöönottamista varten. C. VUONNA 1995 TEHDYT ALOITTEET TOIMIJAT Muistin virkistämiseksi: toimijat, jotka ovat mukana rohkaisemassa vaihtoehtoisten menetelmien tutkimusta, kehittämistä ja validointia ovat seuraavat: 1. EUROOPAN UNIONI Euroopan komissio Useat komission osastot ovat mukana eläinkokeisiin koemenetelmien kehittämiseen ja arviointiin liittyvillä aloilla. ja vaihtoehtoisten PO XI: Ympäristö, ydinturvallisuus ja pelastuspalvelu käsittelee kokeisiin ja muihin tieteellisiin tarkoituksiin käytettävien eläinten suojelusta annettua direktiiviä 86/609/ETY ja vaarallisten aineiden luokituksesta, pakkaamisesta ja merkinnöistä annettua direktiiviä 67/548/ETY, ja on niistä vastuussa. Yhteinen tutkimuskeskus (CCR) CEVMA, Euroopan vaihtoehtoisten menetelmien keskus ESAC, CEVMA:n neuvoa-antava tieteellinen komitea ECB, Euroopan kemikaalitoimisto PO XXIV: Kuluttajapolitiikka yksikkö 4, Laatupolitiikka ja tuotemarkkinat, käsittelee kosmetiikka-alan direktiiviä 76/768/ETY CSC. Kosmetiikka-alan tiedekomitea, komission neuvoa-antava komitea PO XII: Tiede, tutkimus ja kehitystyö rahoittaa tutkimusohjelmia. Eurooppalainen kosmetiikkateollisuus COLIPA - Comité de Liaison Européen des Industries Cosmétiques, des Produits de Toilette et de la Parfumerie (Euroopan kosmetiikka-, toalettitarvike- ja hajuvesiteollisuuden yhdyskomitea) on perustanut SCAAT:in. SCAAT - Steering Committee on Alternatives to Animal Testing (eläinkokeille vaihtoehtoisten koemenetelmien valmistelevakomitea) valvoo COLIPA: n validointitutkimuksia ja koordinoi kosmetiikkateollisuuden validointipyrkimyksiä maailmanlaajuisesti. 2. YHDYSVALLAT CTFA- Cosmetic, toiletry and fragrance association (Kosmetiikka-, toalettitarvike- ja hajuvesiteollisuuden liitto) 3. JAPANI JCIA - Japanese Cosmetic Industry Association (Japanin kosmetiikkateollisuuden liitto) 4. TALOUDELLISEN YHTEISTYÖN JA KEHITYKSEN JÄRJESTÖ (OECD) OECD julkaisee koeohjeita, jotka sen jäsenvaltiot ovat hyväksyneet yksimielisesti. Nämä ohjeet ovat lähes samat kuin liitteessä V esitetyt EU:n koemenetelmät ja yhdessä tiedon keskinäistä hyväksymistä koskevan periaatteen kanssa antavat mahdollisuuden kansainväliseen yhdenmukaistamiseen ja 3 R -lähestymistavan (reduce, refine and replace - vähennetään, parannetaan ja korvataan) järkevään soveltamiseen. ALOITTEET 1. EUROOPAN UNIONI PO XI PO XI: Ympäristö, ydinturvallisuus ja pelastuspalvelu on tehnyt sopimuksen jäsenvaltioiden kanssa parhaasta lähestymistavasta tilastotietojen keräämiseksi kahdesti vuodessa kokeisiin ja muihin tieteellisiin tarkoituksiin käytettävien eläinten suojelusta annetun direktiivin 86/609/ETY 13 ja 26 artiklan mukaisesti. Taulukkoon, joka jäsenvaltioiden on täytettävä, sisältyy kosmeettisiin kokeisiin käytettyjen eläinten kokonaismäärä. PO XI käsittelee myös direktiiviä 67/548/ETY ja EU:n koemenetelmiä, jotka on esitetty yksityiskohtaisesti komission direktiivissä 87/302/ETY ja komission direktiivin 92/69/ETY liitteessä (osa B - toksisuuden määrittämistä koskevat menetelmät). PO XI tuki EU/HO kansainvälistä validointitutkimusta vaihtoehtoisista menetelmistä Draizen sUrnäirritaatiokokeelle sekä EU/COLIPA kansainvälistä validointitutkimusta in vitro fototoksisuudesta. PO CCR CEVMA vaihtoehtoisiin menetelmiin liittyvien asioiden kanssa tekemisissä olevia osastoja. (Euroopan vaihtoehtoisten menetelmien keskus) avustaa kaikkia Euroopan komissio perusti CEVMA: n neuvostolle ja Euroopan parlamentille lokakuussa 1991 annetun komission tiedonannon mukaisesti ja vastauksena direktiivin 86/609/ETY 23 artiklaan, jossa todetaan, että: "Komission ja jäsenvaltioiden tulisi edistää tutkimusta sellaisten vaihtoehtoisten menetelmien kehittämiseksi ja hyväksymiseksi, joilla voitaisiin saada tasoltaan yhtä hyvää tietoa kuin se tieto, joka saadaan eläinkokeilla, mutta siten, että käytetään vähemmän eläimiä tai kivuttomampia menettelyjä, ja ryhtyä muihin sellaisiin toimiin, joita ne pitävät asianmukaisina tämän alan tutkimuksen edistämiseksi. " CEVMA:n tehtävänä on: 1. 2. 3. 4. yhteensovittaa vaihtoehtoisten menetelmien validointi Euroopan unionin tasolla toimia vaihtoehtoisten koemenetelmien kehittämistä koskevan tiedon välittäjänä perustaa vaihtoehtoisia menetelmiä koskeva tietopankki ja ylläpitää ja johtaa sitä edistää lainsäätäjien, teollisuuden, biolääketieteen tutkijoiden, kuluttajajärjestöjen ja eläinsuojeluryhmien välistä vuoropuhelua vaihtoehtoisten koemenetelmien kehittämistä, validointia ja kansainvälistä tunnustamista varten. Isprassa 18. lokakuuta 1994 järjestetyssä CEVMA:n avaussymposiumissa keskusteltiin pääasiassa korvaavien vaihtoehtoisten koemenetelmien validoinnista. Tässä symposiumissa harkittiin CEVMA:n osuutta vaihtoehtoisten koemenetelmien ja koestrategioiden kehittämisessä, validoinnissa ja hyväksymisessä, ja se voidaan esittää tiivistetyssä muodossa seuraavasti. Sen tehtävänä on: lähestymistapaa osallistua ohjeiden laatimiseen itse validointiprosessin kautta, koska tämä on yhteydessä aiheellisten ja luotettavien kokeiden kehittämiseen ja hyväksymiseen tiettyjen tavoitteiden osalta yksilöidä ensisijaiset kohteet ottaen huomioon tiedon taso tietyillä aloilla varmistaa, että vaihtoehtoiset koemenetelmät liittyvät yksinkertaisiin, selvästi erotettaviin ja hyvin määriteltyihin biologisiin tuloksiin, joiden mekaaninen perusta ymmärretään riittävän hyvin koestrategioiden edistää monitieteellistä rakenneaktiviteettisuhteita kehittämiseksi sisällyttämällä niihin kvantitatiivisia (QSAR - quantitative structure activity relations), biokinetiikkaa ja solu- ja kudosviljely menetelmiä ottaa huomioon vaikeudet, jotka johtuvat koeaineiston ja siihen liittyvien laadukkaiden in vivo tietojen puutteesta rohkaista nykyisten ohjeiden ja lakisääteisten menettelyjen uudelleenarviointia saavuttaa yksimielisyys asiaan liittyvien valtiollisten, teollisuuden, tieteellisten ja muiden järjestöjen kanssa laatia perusteet validointia, validointitutkimusten riippumatonta arviointia ja vaihtoehtoisten koemenetelmien ja koestrategioiden validointia ja oikeudellista hyväksymistä varten aktiivisessa yhteistyössä esimerkiksi OECD: n ja ICC V AM: in kanssa. integroitujen Tähän mennessä CEVMA on järjestänyt useita vaihtoehtoisten menetelmien kehittämiseen ja validointiin liittyviä workshop-seminaareja ja on julkaissut kertomuksen 14:sta seminaarista. CEVMA on asettanut etusijalle vaihtoehtoiset menetelmät kosmeettisten aineiden kokeissa. Seuraavassa on lueteltu kertomukset, jotka liittyvät suoraan kosmeettisten aineiden turvallisuuden arviointiin: - kertomus 2 - kertomus 5 - kertomus 6 - kertomus 7 - - - - - kertomus 8 - In vitro phototoxicity testing (1994) Practical aspects of the validation of toxicity tests procedures (1995) A pre validation study on in vitro skin corrosivity testing (1995) Development and validation of non-animal tests and testing strategies: the identification of a coordinated response to the challenge and the opportunity presented by the sixth amendment to the Cosmetic directive (1995) The integrated use of alternative approaches for predicting toxic hazard (1995) The three Rs: The Way Forward (1995) - kertomus 11 - - kertomus 13 - Methods for assessing percutaneous absorption (1995) Vuonna 1995 julkaistiin vielä kaksi kertomusta, jotka koskivat: vaihtoehtoisten koemenetelmien validointia (CEVMA:n ja ECB:n yhteinen lausunto) CEVMA:n esivalidointia käsittelevän työryhmän kertomusta. Vuosina 1995 -1998 CEVMA:n ensisijaisten kohteisiin kosmeettisten aineiden kokeiden alalla kuuluvat: kehittyvä toksisuus metabolismi syövyttävyys fototoksisuus ihon läpäisevyys silmä- ja ihoirritaatio herkistyminen. ECB (Euroopan kernikaalitoimisto) antaa teknistä ja tieteellistä tukea PO XI:He vaarallisten aineiden luokitteluun ja merkintöihin, uusista aineista ilmoittamiseen, nykyisiin kemikaaleihin, vaarallisten aineiden vienti-/tuontivalvontaan ja koemenetelmiin liittyvissä asioissa (direktiivin 67/548/ETY liitteen V mukaisesti). ECB:n ja CEVMA:n tehokasta yhteyttä korvaavien vaihtoehtoisten koemenetelmien välille kehitetään käsittelemiseksi ja sellaisten muutosten tekemiseksi, joilla vähennetään vaadittavien eläinten määrää tai vähennetään välttämättä tarvittavien eläinten kärsimyksiä säännösten ja ohjeiden mukaisesti. po xxrv/csc PO XXIV - Kuluttajapolitiikka, joka käsittelee kosmetiikkatuotteita koskevaa direktiiviä 76/768/ETY, toimii edelleen asioiden vauhdittajana ja on laajentanut toimintaansa niin, että direktiivin 93/35/ETY säännöksiä noudatettaisiin paremmin säädetyssä määräajassa. Mikäli vaihtoehtoisia koemenetelmiä ei ole tieteellisesti validoitu eikä oikeudellisesti hyväksytty, PO XXIV:n tehtävänä on valmistella komissiota varten ehdotus toimenpiteistä, joiden tarkoituksena on pidentää määräaikaa, jonka jälkeen eläinkokeet kielletään tekniseen kehitykseen mukauttamista käsittelevän komitean (CAPT) menettelyn mukaisesti (direktiivin 76/768/ETY 10 artikla). Tämä komitea muodostuu jäsenvaltioiden edustajista ja sen puheenjohtajana toimii komission edustaja, joka esittää komitealle luonnoksen toteutettavista toimenpiteistä. Lausunnon antamiseen tarvitaan määräenemmistö. Uuden yhteispäätösmenettelyn mukaisesti Euroopan parlamentille on ilmoitettava samaan aikaan ja samoilla edellytyksillä kaikista CAPT:ille jätetyistä toimenpiteitä koskevista luonnoksista. nJos eläinkokeita tyydyttävällä tavalla korvaavien menetelmien kehittämisessä ei olla edistytty riittävästi ja erityisesti jos pyrkimyksistä huolimatta vaihtoehtoisilla koemenetelmillä ei olla voitu tieteellisesti osoittaa saavutettavan vastaavaa kuluttajansuojan tasoa, ottaen huomioon Taloudellisen yhteistyön ja kehityksen järjestön (OECD) ohjeet toksisuuskokeista komissio antaa 10 artiklassa säädettyä menettelyä noudattaen 1 päivään tammikuuta 1997 ehdotuksen toimenpiteistä tämän säännöksen täytäntöönpanon lykkäämiseksi riittäväksi määräajaksi, kuitenkin vähintään kahdeksi vuodeksi. Ennen toimenpiteitä koskevan ehdotuksen antamista komissio kuulee kosmetiikan alan 76/768/ETY, sellaisena kuin se on muutettuna direktiivillä 93/35/ETY, 4 artiklan i alakohta). tiedekomiteaa" (direktiivin PO XXIV on useita kertoja kehottanut jäsenvaltioita noudattamaan velvoitteitaan kerätä täsmällisiä tietoja eläinkokeista, jotka koskevat valmiita kosmeettisia tuotteita ja niiden aineksia. Tilastolliset tiedot, jotka on kerättävä direktiivin 93/35/ETY mukaisesti kosmeettisten tuotteiden osalta ovat laajempia kuin tiedot, jotka niiden on toimitettava direktiivissä 86/609/ETY säädettyjen velvoitteiden noudattamiseksi. Jäsenvaltioita on pyydetty toimittamaan yksityiskohtaisemmat tulokset vuosittain. PO XXIV on säännöllisessä kanssakäymisessä PO XI:n ja CEVMA:n kanssa ja on helpottanut kaikkien toimijoiden välistä yhteydenpitoa. CSC: Kosmetiikan alan tiedekomitean, joka on komission neuvoa-antava komitea, vaihtoehtoisten tehtävänä on antaa tieteellinen lausunto PO XXIV:lie niiden koemenetelmien sovellettavuudesta, tuotteiden turvallisuutta ihmisille koskevassa arviointiprosessissa. jotka on validoitu kosmeettisten Vaihtoehtoisia koemenetelmiä käsittelevä CSC:n alakomitea järjesti kaksi työkokousta (2. helmikuuta ja 11. toukokuuta) ja kaksi SCAAT:in/COLIPA:n kanssa yhteistä kokousta (19. syyskuuta ja 1. joulukuuta), joissa kehitettiin seuraavia toimia: 1. COLIPAm jättämien asiakirjojen ja tapausten arviointi Valoärsytys (fotoirritaatio) in vitro (EU/COLIPA) ilmoittamien COLIPA: n julkaistujen esivalidointivaiheen osittaisten tulosten ja validointitutkimuksen vaihetta 2 koskevien osittaisten tietojen analysoinnin perusteella CSC ei voinut antaa tieteellistä lausunto koko ehdotuksesta. kirjallisuudessa tietojen eli CSC korostaa kuitenkin, että eläimistä saadut mallit ovat riittämättömiä fototoksisten vaikutusten ennustamiseksi ihmisissä, ja on sitä mieltä, että fototoksisia ominaisuuksia koskeva in vitro tutkimus on merkittävä askel ultraviolettisuotimia sisältävien kosmeettisten tuotteiden turvallisuuden arviointiprosessissa. Ihon läpi tapahtuva imeytyminen (perkutaaninen absorptio) in vitro (COLIPA) COLIPA:n laatimien asiakirjojen eli perkutaanista absorptiota koskevien in vitro kokeiden ohjeiden, standardointipöytäkirjojen ja in vitro/in vivo kokeiden yleistä korrelaatiota koskevan yleisen katsauksen analysoinnin jälkeen CSC suosittelee 10 perkutaanisen absorptiomenetelmän in vitro esittämistä samoin, ja täydentämään sitä laboratorioiden sisäisillä ja välisillä tuloksilla, jotka on saatu soveltuvasti valituilla koeaineilla ja välittäjäaineilla. Fotomutageenisuus (COLIPA) CSC:lle annettavaan loppukertomukseen sisältyvissä COLIPA:n suosituksissa ilmoitetaan tutkimuspöytäkirjojen määrittelyssä käytettävät perusteet. CSC pahoittelee, että se ei ole vielä voinut tehdä arviotaan UV-suotimien validoitujen menetelmien fotomutageenisuuspotentiaalista perusteita että perusteella fotomutageenisuuskokeiden toteuttamista varten vuonna 1990 (SPC/803/90). asianmukaisesti huolimatta, yleisiä kehitti siitä se 2. Vaihtoehtoisten koemenetelmien validointitutkimusten tieteellistä arviointia varten tarvittavat tiedot niiden käyttämiseksi kosmeettisten tuotteiden turvallisuutta koskevissa arvioinneissa Ottaen huomioon vaihtoehtoisten koemenetelmien validointiin liittyvät ongelmat CSC on tullut siihen tulokseen, että on aiheellista laatia asiakirja, josta on välitöntä hyötyä tulevissa validointitutkimuksissa. Tässä kertomuksessa on otettu huomioon validointiin liittyvät kvalitatiiviset ja kvantitatiiviset ongelmat. Valitut perusteet: koskevat kokeiden tieteellistä validointia mahdollistavat toksisuusasteen mittaamisen ovat sovellettavissa kosmeettisiin aineisiin sisältävät tilastollisten analyysimenetelmien määritelmän. Kertomuksessa korostetaan tarvetta toimittaa todisteita tutkimuspöytäkirjojen optimoinnista ja tarvetta esittää in vitro ja in vivo tietojen välinen suhde matemaattisessa muodossa. poxn PO XII - Hede, tutkimus ja kehitystyö rahoittaa tutkimusohjelmia, joihin kuuluu erityisesti vaihtoehtoisten koemenetelmien kehittäminen Euroopan yhteisön neljännestä puiteohjelmasta tutkimusta, teknologista kehittämistä ja esittelyä koskevien toimien osalta (1994 - 1998) 26 päivänä huhtikuuta 1994 tehdyn Euroopan parlamentin ja neuvoston päätöksen N:o 1110/94/EY mukaisesti, jossa selkeästi annetaan ohjeeksi, että "eläimillä 11 tehdyt kokeilut ja kokeet on aiheellista korvata mahdollisuuksien rajoissa koeputki testeillä tai muilla menetelmillä". PO XII on tukenut tai tukee parhaillaan useita in vitro kokeiden kehittämis- ja validointiohjelmia. Joistakin näistä hankkeista voi olla hyötyä kosmetiikka-alalle: BRIDGE - Loppukertomus (EUR 15777, julkaistu vuonna 1995) Ennustavien in vitro kokeiden kehittäminen herkistävien ainesosien löytämiseksi. BIOTECH (1992 -1994) Joitakin in vitro kehittyvää toksikologiaa koskevia hankkeita. BIOTECH (1994 - 1998) Työohjelmassa on suunniteltu esinormatiivinen vaihtoehdoista eläinkokeille farmakotoksikologiassa. tutkimus in vitro IVTIP (In Vitro Testing Industrial Platform): foorumi, joka on järjestetty teknologian tuottajien ja käyttäjien välisten yhteyksien parantamiseksi. Vuonna 1995 järjestettiin kaksi tapaamista, joissa käsiteltiin neljännen puiteohjelman yhteydessä ja validoinnissa tapahtunutta edistystä. COLIPA/SCAAT SCAAT on perustanut kullekin tutkimusalueelle eri alojen asiantuntijoista koostuvia erityisiä työryhmiä validoinnin toteuttamista varten. COLIPA:n järjestämä eläinkokeille vaihtoehtoisia koemenetelmiä koskeva kansainvälinen tieteellinen symposium kokoontui Brysselissä 29. - 30. marraskuuta 1995, ja siihen osallistui teollisuuden, tieteellisen yhteisön, komission ja Euroopan parlamentin sekä eläinsuojelujärjestöjen edustajia. Ensimmäisessä, VALIDOINTIA käsitelleessä istunnossa tuotiin esiin ennustemallien merkittävä asema ja esiteltiin käynnissä olevia valoärsytystä (fotoirritaatio) ja silmänärsytystä (silmäirritaatio) koskevia validointitutkimuksia. Istunto päättyi pyöreän pöydän keskusteluihin lainsäädännöllistä lähestymistapaa koskevista näkökulmista. Toisessa istunnossa käsiteltiin KEHITTÄMISTÄ ja siihen sisältyi esityksiä perkutaanisesta ihon herkistämisestä absorptiosta, (ihosensibilisaatio). (ihokompatibiliteetti) iholle sopivuudesta ja ja CSC:n Kolmannessa istunnossa käsiteltiin TURVALLISUUDEN ARVIOINTIA tekemiä aloitteita lainsäädäntöviranomaisten ja lähestymistapaa. Istunnossa korostettiin kosmetiikkateollisuuden sisäisiä tutkimuksia ja sekä brittiläisten saksalaisten 12 strategioita tukevien tieteellisten tietojen saatavuuden merkitystä lopullisten tuotteiden turvallisuuden arvioinnissa. Esityksiä täydensivät posteriesittelyt. Näiden yhteydessä osallistujille jaettiin International Fund for Animal Welfare -rahaston (1FAW) lähestymistapaa esittelevää esitettä. Koska vaikuttaa selvältä, että eläinkokeita ei ole mahdollista korvata yksinkertaisella in vitro kokeella, IFAW esitti pääasiallisesti korvaaviin vaihtoehtoihin perustuvan vaiheittaisen strategian, jonka mukaan käytetään ensisijaisesti ihmisistä peräisin olevia soluja ja kudoksia, suljetaan pois kaikki in vivo eläinkokeet ja suositellaan in vivo kokeita vapaaehtoisilla ihmisillä. Symposiumissa korostui COLIPA:n johtava asema vaihtoehtoisia menetelmiä koskevien tutkimus-, kehittämis- ja validointitöiden järjestämisessä. Suurten eurooppalaisen kosmetiikkayritysten aikaansaannokset ovat merkittäviä suhteessa kosmeettisia aineita koskevissa kokeissa käytettyjen eläinten määrään, ja saaduista tiedoista on suurta hyötyä muille teollisuudenaloille. Lisäksi symposiumissa jaettiin tietoa tieteellisellä ja tarkalla tavalla eri osapuolille, ja se tarjosi mahdollisuuden kiinnostavaan mielipiteidenvaihtoon. Teollisuuden ja komission nopeasti yhteistä ihokompatibiliteettia, fotoirritaatiota ja perkutaanista absorptiota koskevan tutkimuksen alalla. lähestymistapaa korvaamiseksi eläinkokeiden vaadittiin 2. Yhdysvallat Yhdysvaltojen hallitus toivoo kansainvälistäyhteistyötä lähestymistavan suosi ttelemiseksi lainsäädännön antamisperusteiden ja uusia vaihtoehtoisia menetelmiä koskevan määrittämiseksi niin, että selvästi määriteltäisiin näiden menetelmien käyttöedellytykset (biologiset tulokset, asianmukaisuus aineluokkien osalta jne. ). ICCVAM järjesti joulukuussa 1995 Arlingtonissa, Virginiassa, workshop-seminaarin vaihtoehtoisten toksikologisten koemenetelmien validoinnista ja oikeudellisesta hyväksymisestä, jota tukivat National Institute of Environmental Health Sciences (NIEHS) ja National Toxicology Program (NTP). Seminaarin tarkoituksena oli keskustella ICCVAM:in kertomusluonnoksesta, johon sisältyi suosituksia uusien ja tarkistettujen toksikologisten koemenetelmien validointia ja oikeudellista hyväksymistä koskevista perusteista ja prosesseista. FDA (Food and Drug Administration) on Yhdysvalloissa kosmeettisten aineiden turvallisuudesta vastaava elin. Se on vuorovaikutussuhteessa sellaisten julkisten ja yksityisten laitosten kanssa, jotka käsittelevät vaihtoehtoisten koemenetelmien kehittämistä ja validointia, sekä keskittyy menetelmiin, joilla tuotetaan tieteellisesti pitäviä tuloksia. FDA ilmaisee huolestumisensa direktiivin 93/35 täytäntöönpanoon liittyvästä eläinkokeiden kiellosta. Tietyt kosmeettisten aineiden valmistajat EU:ssa eivät tällöin voi täyttää Yhdysvaltain ruoka-, lääke- ja kosmeettisia aineita koskevassa laissa (FDCA - Food, Drug and Cosmetic Act) määrättyjä terveyttä koskevia edellytyksiä. 13 3. Japani Japanin terveysministeriö on vastuussa kokeista ja koeohjeista Japanissa. Japanilaiset tutkimusryhmät toimivat erityisesti sellaisten vaihtoehtoisten menetelmien validoinnin parissa, joilla voitaisiin korvata Draizen koe. Menetelmien hyväksyminen riippuu niiden erityisestä käytöstä silmäirritaation arvioinnissa (seulonta tai korvaaminen, yksittäinen koe tai koesarja). JCIA on sitä mieltä, että on vaikea suositella kosmeettisten aineiden turvallisuuden arviointiin säännöllisesti käytettävää koetta tai koesarjaa, jonka ennustavuus on vähäisempi kuin in vivo menetelmien ennustavuus. 4. OECD että OECD puuttuisi Lokakuussa 1994 järjestetyssä OECD:n koeohjeita koskevan ohjelman kansallisten koordinoijien viidennessä kokouksessa sovittiin, että olisi pyrittävä yhdenmukaistamaan kansainvälisesti vaihtoehtoisten koemenetelmien validointia koskevia lukuisia julkaisuja ja esitettyjä käsitteitä. Asiaa koskevan kansainvälisen keskustelun osalta pideidin aiheellisena, kaikille osapuolille keskustelufoorumin, jonka kautta voitaisiin päästä kansainväliseen yksimielisyyteen että validointi- kansainvälisesti hyväksyttävän lähestymistavan perustana olisi mieluummin käytettävä jo olemassaolevia ehdotuksia kuin kehitettävä jälleen uusia käsitteitä. Tältä osin sellaisten keskusten kuin CAAT (John Hopkins University Center for Alternatives to Animal Testing) Yhdysvalloissa, ECVAM Yhdistyneessä kuningaskunnassa, ERGATT ja lukuisten kansallisten keskusten (esim. FRAME Yhdistyneessä ja komiteoiden kuningaskunnassa, IRAG ja ICCVAM Yhdysvalloissa, NCA Alankomaissa, SIAT Sveitsissä ja ZEBET Saksassa) toiminnalle annettiin ansaittua arvoa. ja hyväksymisperusteista. Kansalliset koordinoijat korostivat, tarjoaisi asiaan ja Kansalliset koordinoijat olivat yhtä mieltä siitä, että OECD:n workshop-seminaari olisi paras lähestymistapa, koska sellainen kokoontuminen tarjoaisi runsaasti mahdollisuuksia kaikille asiasta kiinnostuneille osapuolille keskustella aiheesta ja hakea yksimielisyyttä. Lisäksi pidettiin ratkaisevan tärkeänä sitä, että jäsenvaltiot sisällyttäisivät osallistujien joukkoon oikeudellisesta hyväksynnästä vastuussa olevia henkilöitä. Ruotsi tarjoutui isännöimään kokoontumista. Tammikuussa 1995 perustettiin ohjauskomitea opastamaan OECD:n sihteeristöä workshop-seminaarin aiheista ja rakenteesta sekä avustamaan seminaariohjelman kehittämisessä. Seminaari sovittiin pidettäväksi 22. - 24. tammikuuta 1996 Solnassa, Ruotsissa. ECVAM ja ZEBET olivat edustettuina ohjauskomiteassa. D. TÄMÄNHETKINEN TILANNE 14 KÄYNNISSÄ OLEVAT KEHITTÄMIS- JA VALIDOINTIMENETELMÄT Ihonherkistys Herkistäminen alueella tehdään merkittävästi tutkimuksia ja se on erittäin tärkeä kosmeettisten aineiden turvallisuuden kannalta. COLIPA:n järjestämässä symposiumissa (29. - 30. marraskuuta 1995) esitettiin mielenkiintoinen lähestymistapa in vitro ihonherkistyksen arviointiin. ECVAM järjesti workshop-seminaarin ihonherkistyksestä vuonna 1995 ja kertomus siitä julkaistaan vuonna 1996. Eri aineiden kemiallista rakennetta ja herkistäviä ominaisuuksia on tutkittu laajasti ja asiantuntijajärjestelmiä, kuten DEREK (Deductive Estimation of Risk from Existing rakenteellisten ihon herkistämispotentiaaliin Knowledge), kehitetään varoitussignaalien tunnistamiseksi. Mahdollinen ennustava lähestymistapa voisi perustua sellaisten molekylaaristen signaalien mittaamiseen, joita saavat aikaan herkistävät ainesosat soluviljelmissä liittyvien Erityisesti tällä alueella on korostettava, että herkistämispotentiaalin ennustaminen on erittäin vaikeaa ihmisistä saatavien tulosten yksilöllisen vaihtelevuuden vuoksi. Fotomutageenisuus - Validointi (COUPA) Vuodesta 1990 lähtien COLIPA on laatinut UV-suotimia koskevia asiakirjoja, jotka sisältävät erilaisilla kokeilla saatuja fotomutageenisuuteen liittyviä tietoja. COLIPA järjesti rengasreaktiokokeen sopivan tutkimuspöytäkirjan määrittämiseksi käyttämällä kahta ainesosaa, joiden fotomutageeninen potentiaali tiedetään ja jotka aktivoitiin UV-säteilyllä, sekä eri bakteerikantoja. Tämän kokeen tulokset mahdollistivat sellaisten suositusten kehittämisen, jotka koskivat bakteerikantojen tai soluviljelmien valintaa, valosimulaattoria, näytteiden säteilytystekniikkaa, UV-säteilyn annostusta, koeaineiden annostusta ja positiivisen kontrollin käyttöä. Validointitutkimusta on vaikea järjestää in vivo viitetietojen puuttuessa. Perkutaaninen absorptio CEVMA, COLIPA ja OECD ovat toimineet yhdessä perkutaanista absorptiota in vitro koskevien koeohjeiden kansainvälisen hyväksymisen helpottamiseksi. Fotoirritaatio/Fototoksisuus - Validointi: vaihe II (EU/COUPA) ja PO XI ovat edustettuina ZEBET: in koordinoiman CEVMA tutkimuksen hallintoryhmässä. Tutkimuksessa selvitetään mahdollisuutta lisävalidointitutkimukseen, jonka tarkoituksena on ennustaa UV-suotimien fotoirritaatiopotentiaalia. 15 Tutkimuksen ensimmäisessä vaiheessa (esivalidointi) solujen elinkelpoisuutta koskevasta tulosten analysoinnin perusteella oli mahdollista määrittää saatujen kokeesta jonka avulla voitiin erottaa fotoirritaatiota aiheuttavat aineet fotoirritaatiotekijä, fotoirritaatiota aiheuttamattomista aineista. Sokkotestinä järjestetyn toisen vaiheen (validointi) tavoitteena oli määrittää, voidaanko solutoksisuuskokeella ja soluvahinkoja mittaavalla kokeella (NRU-testi1 ja yhdistetty RBC-testi2 (fotohemolyysi + hemoglobiinin oksidaatio) 32:n systeemisesti tai paikallisesti ihmiselle annettavan kemiallisen ainesosan fotoirritaatiopotentiaalia ennustaa oikein. Vuonna 1995 päättyneen toisen vaiheen alustavat tulokset ovat rajoittuneet kaikissa laboratorioissa käytettyyn NRU-testiin. RBC-pöytäkirjaa käytettiin ainoastaan kolmessa laboratoriossa. Riippumaton biostatistikko tekee tilastollisia lisäarviointeja, jotka ovat käytössä vuoden 1996 alkupuoliskolla. Sihnäinitaath:LoppukertonmisEU/HO:aDrai2ensihn^ koemenetelmiä koskevasta tutkimuksesta vaihtoehtoisia Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli vahvistaa voidaanko yhdeksällä vaihtoehtoisella kokeella joko yksin tai yhdessä käytettynä korvata Draizen silmäirritaatiokoe voimakkaasti ärsytystä aiheuttavien koeaineiden osalta tai kemiallisten aineiden ärsytyspotentiaalin arvioimisen osalta, joko kemiallinen luokka huomioon ottaen tai sitä huomioon ottamatta, ja kaikista mitattavista potentiaaleista. Kaikkiaan 60 kemiallista ainetta analysoitiin itsenäisesti 37:ssä laboratoriossa. Tuloksia vertailtiin Draize-kokeesta saatuihin MMAS-tuloksiin (modified maximum average score) ja niitä arvioitiin tilastollisesti. Lukuun ottamatta pinta-aktiivisten aineiden ärsytyspotentiaalin ennustamista, mikään yhdeksästä kokeesta ei saavuttanut yhtään odotetuista tuloksista. Tämän tutkimuksen aikana saatiin monia arvokkaita kokemuksia, jotka otettiin huomioon suunniteltaessa COLIPA: n tutkimusta. Ne olivat myös validoinnin käytännöllisiä näkökohtia koskevan CEVMA: n workshop-seminaarin pohjana ja niiden perusteella kehitettiin CEVMA:n esivalidointisuunnitelma. In verotietojen vaihtelevuus oli suurin este in vivo kokeiden aiheellisuuden ja luotettavuuden vahvistamiselle. SUmäinitaath: Validointi (COUPA) NRU: Neutral red uptake essay - soluja käytetään kohteena ja solujen toksisuus on biologinen päämäärä RBC: Red blood cell haemolysis test - arvioidaan vahinkoja solukalvoille 16 Validointi tehtiin 23:11a kosmeettisella ainesosalla (pinta-aktiiviset aineet, alkoholit, säilytysaineet), joista 20 oli samaa kuin edellä mainitussa EU/HO:n tutkimuksessa, ja 32:11a kosmeettisella muodosteella (monissa fyysis-kemiallisissa muodoissa). Koeaineet testattiin in vivo OECD:n ohjeen 405 mukaisesti. tutkimuksen erityisenä tavoitteena oli määrittää, voidaanko nykyisin Tämän kosmetiikkateollisuudessa käytössä olevan kymmenen in vitro tutkimuspöytäkirjan (joista viisi oli arvioitu myös EU/HO:n tutkimuksessa) mukaisesti saatujen tietojen perusteella: saada aikaan hyväksyttävä korrelaatio MMAS-tulosten (modified maximum average score) kanssa saada aikaan hyväksyttävä korrelaatio yksittäisten tulosten kanssa, sellaisina kuin ne on kuvailtu OECD: n ohjeessa 405 ennustaa oikein silmänärsytyspotentiaali kaniinin silmästä vaihtoehtoiseen menetelmään kuuluvien algoritmien perusteella. ja toipumisaikojen Ensimmäistä kertaa vahdointitutkimuksessa ennustemallit (PM - predicition models) laadittiin ennen tutkimuksen aloittamista. Niissä määritettiin tarkoin kustakin menetelmästä in vitro saadut biologiset tulokset ja se, miten kukin biologinen tulos in vitro voidaan muuntaa silmäirritaatiopotentiaalia koskevaksi ennusteeksi. Tässä tutkimuksessa käytetyt ennustemallit perustuivat vanhoihin saatavissa kosmetiikkateollisuudelle tärkeistä aineksista ja muodosteista ja erityisesti niistä aineista, joiden irritaatiopotentiaali oli matalasta kohtuulliseen. jotka olivat tietoihin, Ohjelma ei mahdollistanut täydellistä validointia, koska vain harvat laboratoriot olivat osallistuneet erityisesti ohjelmaan kuuluvien kokeiden tekemiseen. Millään testatuista menetelmistä ei vielä voida validisti korvata Draizen silmäirritaatiokoetta. Ennustemallien luotettavuutta arvioitiin määrittämällä, olivatko laboratorioiden väliset tulokset toistettavissa ja jakautuivatko tiedot ennalta määrättyjen ennustemallien ennusteaikavälille. RBC-kokeessa oli hyvä laboratorioiden välinen toistettavuus ja lisäksi se tyydytti luotettavuusvaatimukset. Kolme testatusta pöytäkirjasta oli kohtuullisesti yhdenmukaisia ennustemallien kanssa (FLT3, RBC, TEA4), mutta lisätutkimukset ovat tarpeen useiden ennustemalleihin liittyvien teknisten ongelmien ratkaisemiseksi, ennen kuin lopullisia johtopäätöksiä niiden suorituskyvystä voidaan tehdä. Tämä validointitutkimus osoittaa hyvälaatuisten in rim tietojen saatavuuden merkityksen. Fluorescein* leakage test - mitataan soluseinälle aiheutuneita vaurioita. FLT: TEA: Tissue equivalent assay - mitataan aikaa, jona solujen elinvoimaisuus vähenee 50 %:lla uudellen muodostetulla iholla. 17 Käytettävissä olevat in vivo tiedot ovat riittäviä riskien arvioimiseksi. Kuitenkin in vivo ja in vitro tietojen arvioimiseksi näistä molemmista saaduissa tiedoissa olisi oltava teoreettisesti mahdollisimman vähän vaihtelua, jotta tarkka tilastollinen arvio olisi mahdollinen. Kokemus on osoittanut, että asia ei aina ole näin. Tulosten tutkiminen osoittaa, että tiettyjä ennustemalleja voidaan parantaa ja testata seuraavassa tutkimuksessa. Ihokortvosio: Esivatidointi (CEVMA) Neljää ihokorroosiokoetta ollaan arvioimassa ja optimoimassa (TER - rat skin transcutaneous electrical resistance assay, CORROSITEX™ ja Skin2™ ja EPISKUM™) vuonna 1996 tehtävän muodollisen validointitutkimuksen suunnittelua varten. IhokamnatibWteetti (COUPA) Ihokompatibiliteetti määritellään käyttöolosuhteissa ja kohtuullisen ennakoitavissa väärinkäyttöolosuhteissa. ihoärsytyksen puutteeksi tavanomaisissa Seitsemän COLIPA:n jäsenyhtiötä arvioivat lopullisten tuotteidensa ihokompatibiliteettia ihmisillä valvotuissa olosuhteissa, koska useimpien kosmeettisten tuotteiden ärsytyspotentiaali on erittäin alhainen. COLIPA on kehittänyt ohjeet ihokompatibiliteetin arviointia varten: ihmisiholle tehtävää kosmeettisten tuotteiden on otettava huomioon eettiset vaatimukset: ihmisille tehtävät kokeet on tehtävä Helsingin julistuksen (1964, 1989) mukaisesti on ehdottomasti noudatettava varovaista lähestymistapaa vaihe vaiheelta ennakkotietoja testattavien tuotteiden koostumuksesta ja stabiilisuudesta sekä ennakkoarviointia tuotteiden ainesosien toksisuustiedoista tarvitaan. Kosmeettisten ainesten kehittämässä. ihokompatibiliteettia koskevia ohjeita ollaan parhaillaan Vapaaehtoisina ihmisillä tehtävät tutkimukset (CEVMA) Vapaaehtoisilla ihmisillä tehtävät tutkimukset luetellaan usein osana eläinkokeille vaihtoehtoisia menetelmiä. CEVMa tutkii parhaillaan tällaisiin tutkimuksiin liittyviä eettisiä, oikeudellisia, turvallisuutta koskevia, logistisia ja tieteellisiä ongelmia yhdessä Pavian yliopiston, Nottinghamin yliopiston ja useiden kosmetiikka-alan yritysten kanssa. 18 E. ELÄINKOKEISIIN LIITTYVIÄ TILASTOJA Tietojen keruuta kokeisiin ja muihin tieteellisiin tarkoituksiin käytettävien eläinten lukumäärästä direktiivin 86/609/ETY 13 ja 26 artiklan mukaisesti ei tehdä vuosittain. Tämä selittää osittain vaikeudet, joita on kohdattu erityisesti kosmeettisia ainesosia ja tuotteita koskevien tietojen vuosittaisessa keräämisessä. Komissio on kuitenkin useaan otteeseen vedonnut jäsenvaltioihin vaadittujen tilastotietojen saamiseksi, ja tästä on myös muistutettu PO XXIV:n ja PO XI:n toiminnan yhteydessä. 1) 2) 3) 4) 8 jäsenvaltiota on ilmoittanut, että niiden alueella ei ole tehty eläinkokeita lopullisilla kosmeettisilla tuotteilla (Italia, Kreikka, Belgia, Irlanti, Ruotsi, Suomi, Luxemburg, Saksa). 6 jäsenvaltiota on ilmoittanut, että niiden alueella ei ole tehty eläinkokeita kosmeettisilla ainesosilla Irlanti, Ruotsi, Suomi, (Kreikka, Alankomaat, Luxemburg). Ainoastaan kolme jäsenvaltiota (Itävalta, Ranska, Yhdistynyt kuningaskunta) on ilmoittanut käytettyjen eläinten lukumäärään liittyvät luvut, joissa on täsmennetty toisinaan, että nämä luvut eivät ole tulkittavissa ja että ne eivät ole täysin luotettavia. Näillä edellytyksillä tässä kertomuksessa ei voida esittää annetut luvut sisältäviä vertailevia taulukoita, koska ne antaisivat virheellisen ja vääristyneen kuvan todellisesta tilanteesta. Kokeiden puuttumista koskevien ilmoitusten osalta on myös huomattava, että tietyt jäsenvaltiot, jotka eivät tuota kosmeettisia aineksia, voivat tietenkin käyttää muissa jäsenvaltioissa tiettyjä kosmeettisiin tuotteisiin käytetyistä aineksista on voitu testata muiden tarkoitusten vuoksi. tai kolmansissa maissa testattuja aineksia, ja että Komissio on erittäin pahoillaan, että sillä ei ole käytössään tarkempia tietoja tällä hetkellä, mutta se on riippuvainen jäsenvaltioista näiden tietojen keräämisessä. F. LOPPUPÄÄTELMÄT Vuoden 1995 aikana validoinnissa voidaan esittää seuraavasti: tapahtunut edistys vaihtoehtoisissa menetelmissä ja niiden 1. Kertomus EU/COLIPA:n fototoksisuutta (fotoirritaatiota) koskevan in vitro kokeen kansainvälisen validointitutkimuksen toisesta vaiheesta on saatavilla vuoden 1996 alussa, mutta on jo selvää, että NRU soluviljelmäkokeen validointi on ollut erittäin onnistunutta. Tutkimuksessa mukana olleet ovat vakuuttuneita siitä, että 19 hyväksyttävä OECD:n ohje voidaan laatia seuraavan kahden vuoden aikana, eli ja sen jälkeen kun tutkimuspöytäkirjoihin on tehty pieniä parannuksia. tutkimusta koskeva loppukertomus on julkaistu Euroopan kosmetiikkateollisuuden kokemukset ihon läpäisevää imeytymistä (perkutaaninen absorptio) koskevassa merkittävässä aiheessa ovat johtaneet konkreettiseen ehdotukseen OECD:n ohjeeksi in vitro kokeita varten. CEVMA ja COLIPA toimivat yhdessä OECD:n ja muiden kanssa helpottaakseen in vitro koeohjeiden hyväksymistä OECD: n jäsenvaltioissa. silmäirritaatiokokeelle Draizen koskevan kansainvälisen EU/HO:n validointitutkimuksen tulokset tuottivat pettymyksen, sillä yksikään kokeista ei saavuttanut tutkimukselle asetettuja tavoitteita. Tästä tutkimuksesta saatiin kuitenkin paljon arvokasta tietoa, jonka seurauksena tulevien validointitutkimusten laatu paranee huomattavasti. koemenetelmiä vaihtoehtoisia Draizen silmäirritaatiokokeelle vaihtoehtoisia menetelmiä koskevassa COLIPA:n validointitutkimuksen ensimmäisestä vaiheesta, jossa oli rajoitetumpi määrä koeaineistoa kuin EU/HO:n tutkimuksessa, saatiin lupaavampia tuloksia ja se osoitti, että ennustemallit kannattaa sisällyttää koepöytäkirjoihin. COLIPA:n tutkimuksen tuloksena on laadittu suosituksia fotomutageenisuutta in vitro koskevien tutkimuspöytäkirjojen määrittelyssä noudatettavista perusteista. Toisen COLIPA:n aloitteen tuloksena on kehitetty ohjeita kosmeettisten tuotteiden ja niiden ainesten ihokompatibiliteetin arvioimiseksi ihmisillä. Vapaaehtoisten ihmisten käyttäminen eläinkokeita korvaavissa vaihtoehtoisissa kokeissa ansaitsee lisätarkastelua, mutta on vielä korostettava, että tällaisia tutkimuksia olisi tehtävä vasta sen jälkeen, kun aikaisemmista in vivo ja/tai in vitro kokeista saatujen tulosten perusteella on mahdollista välttää vakavien seuraamusten riski. Validointi on osoittautunut vieläkin vaikeammaksi, enemmän aikaa vieväksi ja kalliimmaksi kuin osattiin ennakoida. Keskusteluja käydään edelleen siitäkin, mitä validointi todella merkitsee ja miten vaihtoehtoisten koemenetelmien aiheellisuus ja luotettavuus voidaan vahvistaa. CEVMA on näiden keskusteluiden keskipisteessä ja sen osallisuus on ollut erittäin merkittävää monin eri tavoin. CEVMA:n esivalidointisuunnitelma, joka on parhaillaan kansainvälisessä arvioinnissa, parantaa todennäköisesti validointitutkimusten onmstumisastetta ja vähentää niiden tekemiseen tarvittavaa aikaa samoin kuin niiden kustannuksia. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. Kansainvälistä keskustelua on käyty Euroopassa, kuten myös Yhdysvalloissa ja Japanissa vaihtoehtoisten koemenetelmien validointia ja hyväksymistä koskevista yhdenmukaistamisperusteista. 20 G. TULEVAISUUDENNÄKYMÄT 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. VaHdointiprosessia koskevien realistisempien odotusten ja vaihtoehtoisten menetelmien validointia ja oikeudellista hyväksyntää koskevan onnistuneen kansainvälisen keskustelun voidaan olettaa johtavan merkittävään edistymiseen tulevaisuudessa. CSC:tä erityisesti kiinnostavia kemiallisia aineita koskevan pienen in vitro jatkotutkimuksen fototoksisuuskokeiden esitetään ohjeista hyväksyttäväksi lainsäädännöstä vastaaville viranomaisille. tulosten jälkeen voidaan odottaa, että joka laaditaan luonnos, On toivottavaa, että uudet ohjeet ihon läpi tapahtuvaa imeytymistä koskevista in vitro kokeista hyväksytään pian EU:n jäsenvaltioissa ja OECD:n jäsenvaltioissa. Odotettavissa on nopeampaa kellitystä kohti standardoituja ja asianmukaisia in vitro koemenetelmiä, joilla voidaan havaita herkistyspotentiaali. On olennaisen tärkeää harkita silmänärsytyskokeita (in vivo ja in vitro) koskevat odotukset uudelleen. Sillä välin olisi rohkaistava joustavampaa lähestymistapaa testaukseen esimerkiksi hyväksymällä uusien tuotteiden ja ainesten toksisuusarviointi vertaamalla tietoa, jota on saatu asianmukaisista standaitâkontroffiaineista ("benchmark"). Voitaisiin käyttää enemmän hyödyksi sitä, että lopullisten kosmeettisten tuotteiden silmä-ja ihotoleranssia voidaan arvioida in vitro, sillä ehdottomalla edellytyksellä, että ainesosien toksisuudesta ja niiden fyysis-kemiallisista ominaisuuksista on aikaisempia tietoja. Lopullisten kosmeettisten tuotteiden iholle sopivuutta voidaan lisäksi arvioida tarkoin valvotuissa kliinisissä tutkimuksissa. CEVMA:n ihokorroosiokokeiden validointitutkimuksesta on odotettavissa myönteisiä tuloksia, joita voitaisiin sen jälkeen käyttää esimerkiksi osana niitä tietoja, jotka vaaditaan vapaaehtoisilla ihmisillä tehtäviin tutkimuksiin. 8. Monien eri lähestymistapojen yhdistettyä käyttöä (esim. tietokonepohjaiset ennusteet, in vitro kokeet) ja hierarkkisten koestrategioiden käyttöä korostetaan enemmän kokeisiin käytettävien eläinten määrän vähentämiseksi sekä niiden käytön parantamiseksi ja korvaamiseksi. Direktiivin 76/768/ETY kuudes muutos tarjoaa ainutlaatuisen mahdollisuuden järkevään kehitykseen, joka tähtää kosmetiikka-alalla tehtävien eläinkokeiden korvaamiseen. Kehitystä on jo tapahtunut, mutta sen jatkuminen riippuu kaikkien osapuolien, eli komission ja sen neuvoa-antavien komiteoiden, jäsenvaltioiden, kosmetiikkateollisuuden ja lainsäädäntöviranomaisten välisten hyvien suhteiden ja tehokkaan yhteistyön säilymisestä. 21 ISSN 1024-4492 KOM(96) 365 lopullinen ASIAKIRJAT FI 10 15 05 03 Luettelonumero : CB-CO-96-366-FI-C ISBN 92-78-07198-6 Euroopan yhteisöjen virallinen julkaisujen toimisto L-2985 Luxemburg 21


title: 96/507/EY, Euratom: Komission päätös, tehty 24 päivänä heinäkuuta 1996, luvan antamisesta Luxemburgille olla ottamatta huomioon eräitä toimiluokkia tai käyttää eräitä likimääräisiä arvioita arvonlisäverosta kertyvien omien varojen perustan laskemiseksi tehdyn päätöksen 90/178/Euratom, ETY muuttamisesta (Ainoastaan ranskankielinen teksti on todistusvoimainen)

eurovoc_concepts:
Luxembourg
VAT
VAT resource
application of EU law
tax exemption
tax system

formats: html pdfa1b print


title: 388 R 4255 : Council Regulation (EEC) No 4255/88 of 19 December 1988 laying down provisions for implementing Regulation (EEC) No 2052/88 as regards the European Social Fund(OJ No L 374, 31.12.1988, p. 21).,388 R 4255 : Reglamento (CEE) N̊ 4255/88 del Consejo de 19 de diciembre de 1988 por el que se aprueban las disposiciones de aplicación del Reglamento (CEE) n̊ 2052/88, en lo relativo al Fondo Social Europeo(DO n̊ L 374 de 31.12.1988, p. 21).,388 R 4255 : Regolamento (CEE) n. 4255/88 del Consiglio del 19 dicembre 1988 recante disposizioni d'applicazione del regolamento (CEE) n. 2052/88 per quanto riguarda il Fondo sociale europeo(GU n. L 374 del 31.12.1988, pag. 21).,388 R 4255 : Regulamento (CEE) N̊ 4255/88 do Conselho de 19 de Dezembro de 1988 que estabelece disposições de aplicação do Regulamento (CEE) N̊2052/88 no que respeita ao Fundo Social Europeu(JO n̊ L 374 de 31.12.1988, p. 21).,388 R 4255 : Rådets forordning (EØF) nr. 4255/88 af 19. december 1988 om gennemførelsesbestemmelser til forordning (EØF) nr. 2052/88 for så vidt angår Den Europæiske Socialfond(EFT nr. L 374 af 31.12.1988, s. 21).,388 R 4255 : Règlement (CEE) n̊ 4255/88 du Conseil du 19 décembre 1988 portant dispositions d'application du règlement (CEE) n̊ 2052/88 en ce qui concerne le Fonds social européen(JO n̊ L 374 du 31.12.1988, p. 21).,388 R 4255 : Verordening (EEG) Nr. 4255/88 van de Raad van 19 december 1988 tot vaststelling van bepalingen voor de uitvoering van Verordening (EEG) nr. 2052/88 met betrekking tot het Europees Sociaal Fonds(PB nr. L 374 van 31.12.1988, blz. 21).,388 R 4255 : Verordnung (EWG) Nr. 4255/88 des Rates vom 19. Dezember 1988 zur Durchführung der Verordnung (EWG) Nr. 2052/88 hinsichtlich des Europäischen Sozialfonds(ABl. Nr. L 374 vom 31.12.1988, S. 21).,388 R 4255 : Κανονισμός (ΕΟΚ) αριθ. 4255/88 του Συμβουλίου της 19ης Δεκεμβρίου 1988 για διατάξεις εφαρμογής του κανονισμού (ΕΟΚ) αριθ. 2052/88 όσον αφορά το Ευρωπαϊκό Κοινωνικό Ταμείο(ΕΕ αριθ. L 374 της 31.12.1988, σ. 21).

eurovoc_concepts:
European Social Fund
consolidation of EU law


title: 96/501/CE, Euratom: Decisão da Comissão de 24 de Julho de 1996 que altera a Decisão 96/159/Euratom, CE, que autoriza Portugal a utilizar dados estatísticos anteriores ao penúltimo ano para o cálculo da matéria colectável dos recursos próprios provenientes do imposto sobre o valor acrescentado (Apenas faz fé o texto em língua portuguesa)

eurovoc_concepts:
Portugal
VAT
VAT resource
own resources
statistics


title: 96/507/EG, Euratom: Entscheidung der Kommission vom 24. Juli 1996 zur Änderung der Entscheidung 90/178/Euratom, EWG, mit der Luxemburg ermächtigt wird, bei der Berechnung der Grundlage für die MwSt.-Eigenmittel bestimmte Gruppen von Umsätzen nicht zu berücksichtigen und die Grundlage bei bestimmten anderen Gruppen von Umsätzen anhand näherer Schätzungen zu ermitteln (Nur der französische Text ist verbindlich)