lo sr decade in y emettendo particelle beta , con un tempo di dimezzamento pari a 28.5 anni ed una energia massima di emissione pari a 546 kev .
tale decadimento  caratterizzato da un tempo di dimezzamento pari a 64.1 ore e da una energia massima di emissione pari a 2284 kev ( stamoulis et al . , 2007 ) .
caratteristica molto importante dal punto di vista analitico  la capacit di sr e y di raggiungere il cosiddetto equilibrio secolare ovvero lo stato in cui le concentrazioni di attivit dei due isotopi sono equivalenti .
essendo lenergia massima di emissione delly circa 5 volte maggiore rispetto a quella dello sr , risulta favorevole la sua determinazione , in luogo di quella del radioisotopo progenitore , con evidente guadagno in sensibilit analitica ( delloro et al . , 2013 ) .
losr  considerato un pericoloso contaminante delle filiere agroalimentari in quanto , possedendo una spiccata affinit chimica con il calcio , pu essere rapidamente assorbito e si deposita nelle ossa nelle quali viene trattenuto ( torres et al . , 2002 ) .
le problematiche di carattere sanitario connesse allaccumulo di sr nel tessuto osseo umano ed animale consistono nella possibile comparsa di osteosarcoma ed altre neoplasie .
inoltre , questo radionuclide pu influenzare negativamente alcuni processi enzimatici e di trasporto nei quali  coinvolto il calcio ( bronner et al . , 1963 ) .
relativamente alla possibilit di accumulo di sr nelle materie prime per mangimi e quindi nei prodotti finiti , tale rischio risulta particolarmente rilevante in relazione alla capacit di trasferimento del radionuclide fino ai prodotti alimentari di origine animale .
nelle zone particolarmente contaminate , il passaggio di radionuclidi ( cs e sr ) dallambiente ai foraggi e da questi ai prodotti di origine animale ( latte e carni bovine e suine )  stato pi volte messo in evidenza da diversi studi effettuati dal disastro di chernobyl ad oggi ( annenkov e averin , 2011 ) .
nelle stesse condizioni di contaminazione radioattiva laccumulo di sr risulta molto maggiore rispetto a quello relativo al cs . in uno studio , pubblicato nel 1998 ( fesenko et al . , 1998 ) , sono stati definiti inoltre dei coefficienti di passaggio piante - foraggio , sia per il cs che per lo sr , espressi come bq / kg di piante / kbq / m . per lo sr tali coefficienti variano
da 4.52 per il frumento invernale a 8.50 per il mais , fino a 11.63 per le erbe graminacee - leguminose annue da foraggio .
in condizioni di contaminazione media corrispondente a circa 1 kbq / m questi coefficienti di accumulo portano ad una concentrazione di attivit di sr , per singola unit foraggera , variabile da 1.3 bq per lorzo ed il grano , a 8.45 bq per linsilato di mais , fino a 33.7 bq per le erbe graminacee leguminose pluriennali .
dal punto di vista della contaminazione della filiera agroalimentare , la materia prima che risente maggiormente della contaminazione da sr  senza dubbio il latte .
questo  dovuto , come gi accennato in precedenza , alla spiccata similarit chimica di questo radioisotopo con il calcio , elemento molto abbondante nel latte .
diversi studi hanno dimostrato che il passaggio di sr nel latte  indipendente dal tipo di mangime utilizzato ( fieno , leguminose , cereali )
e che il contenuto finale pu variare dallo 0.2 al 6.2% ( annenkov , 1964 ) .
per questo motivo , il regolamento ( euratom ) no 2218/89 della commissione europea prevede controlli ufficiali sulla radiocontaminazione del latte , in caso di incidenti nucleari , e stabilisce i massimi limiti consentiti per la contaminazione da sr .
tali limiti corrispondono a 125 bq l ( o bg kg ) per il latte ed i prodotti lattiero caseari ed a 75 bq l per gli alimenti per linfanzia ( compreso il latte ) ( commissione europea , 1989 ) .
laccumulo di radiostronzio nei muscoli e negli organi risulta invece molto meno rilevante , dal momento che dopo la penetrazione nel sangue la maggior parte dei radionuclidi viene rimossa mediante gli organi escretivi o accumulata nello scheletro ( iammarino et al . ,
le concentrazioni residue nel muscolo risulteranno dunque esigue e variabili tra 0.011 bq kg per i bovini a 0.03 bq kg per i suini . per quanto riguarda
le percentuali di accumulo nelle uova , essendo queste un prodotto di organi di escrezione , tali valori risultano non trascurabili .
la percentuale di accumulo di sr nelle uova pu raggiungere l1.4% del contenuto totale della razione giornaliera . in questo caso il potenziale di accumulo dello sr risulta inferiore ( circa la met ) rispetto a quello del
attualmente , il regolamento com ( 2010)184 definitivo 2010/0098 della commissione europea non fissa dei limiti massimi consentiti per la contaminazione da sr nei mangimi , definendo solo quelli relativi al cs .
tali limiti sono stati invece definiti in altre regolamentazioni internazionali , come il regolamento rdu-99 che in bielorussia fissa alcuni limiti , come ad esempio 260 bq kg nel fieno , 185 bq kg nella paglia , 100 bq kg nellerba e nel grano da foraggio , 50 bq kg nellinsilato , 137 bq kg nei tuberi e 37 bq kg nellerba verde ( repubblica della bielorussia , 2001 ) .
risulta evidente , per quanto detto sinora , che il monitoraggio della contaminazione da sr dei mangimi deve essere considerato un importante compito per gli organi preposti ai controlli sulla salute animale e sulla sicurezza alimentare .
da un punto di vista metodologico , la determinazione di sr nelle matrici solide ha sempre presentato numerose problematiche analitiche , inerenti soprattutto la separazione radiochimica , dovute alla presenza di diversi cationi dalle caratteristiche chimicofisiche simili allo sr ( ca , pb , bi , etc . )
inoltre , non sono mai state definite e sviluppate le necessarie procedure di validazione del metodo ( maxwell iii e culligan , 2009 ; brun et al . , 2003 ; heilgeist , 2000 ; kabai et al . , 2011 ; kim et al . , 2009 ;
, 2007 ; wilken e joshi , 1991 ; vajda e kim , 2010 ) .
nel presente lavoro viene , pertanto , presentata lattivit di sviluppo e validazione di un metodo radiochimico per la determinazione di sr in varie tipologie di mangime per lapplicazione di questa tecnica nelle attivit routinarie di controllo .
la metodica analitica impiegata  stata la scintillazione liquida ad ultra basso fondo ( lsc ) , tecnica che consente di effettuare la determinazione di concentrazioni di attivit di sr al di sotto di 0.01 bq kg , dopo opportuno trattamento del campione ( estrazione / purificazione / separazione del radioisotopo ) e raggiungimento dellequilibrio secolare sr / y .
laffidabilit di questa procedura analitica  stata verificata mediante procedure di validazione implementate seguendo un protocollo sviluppato in - house , che consente di determinare le pi importanti performances analitiche in accordo con gli attuali riferimenti legislativi ( commissione europea , 2002 , 2004 ) .
del campione ne vengono inceneriti 250 g in muffola secondo la rampa di temperatura mostrata in figura 1 .
le ceneri vengono disciolte in una miscela hno3 8m / hf al 50% e viene aggiunto 1 ml di carrier ( sr stabile 10,000 mg l ) .
viene effettuata una lisciviazione della miscela a 300c , quindi una filtrazione e laggiunta di acido ossalico anidro e sodio acetato .
laggiunta di acido ossalico consente di precipitare lo stronzio presente nel campione come ossalato e di separarlo da altri metalli affini , una volta corretto il ph della soluzione a 4.5 mediante aggiunta di nh4oh al 30% .
il precipitato viene quindi disciolto con una miscela h2o2/hno3 8 m e la soluzione viene portata a secco .
il residuo viene disciolto in hcl 0.5 m e si aggiungono altri 4 volumi di h2o .
successivamente viene effettuata la rimozione di altri due importanti interferenti radiometrici , il pb ed il bi mediante precipitazione , sotto forma di solfuro , aggiungendo 1 ml dei rispettivi standard di carrier stabili ( 10,000 mg l ) e circa 50 mg di sodio solfuro .
ii precipitato formatosi viene rimosso mediante filtrazione con carta bibula , il ph del filtrato viene corretto ad 1.0 per rimuovere ly eventualmente presente , mediante complessazione con acido etil - esil ortofosforico ( hdehp ) , effettuando una doppia aggiunta di una soluzione di hdehp al 20% in toluene , agitazione vigorosa ed eliminazione della fase organica .
la fase acida viene portata a volume ( 200 ml ) con hcl 0.1 m e posta a temperatura ambiente fino al raggiungimento dellequilibrio secolare sr / y ( min . 15
viene aggiunto 1 ml di carrier yttrio stabile 10000 mg l , il ph della soluzione viene corretto a 1.0 e si procede con la separazione delly eventualmente presente mediante complessazione con hdehp , ovvero aggiungendo 200 ml di una soluzione di hdehp al 5% in toluene , agitando vigorosamente e recuperando la fase organica che viene quindi lavata due volte con hcl 0.1 m .
lestrazione finale delly dalla soluzione si ottiene mediante separazione liquidoliquido utilizzando due aliquote da 150 ml di hno3 3 m. ly , estratto nella fase acida , viene quindi precipitato come ossalato aggiungendo acido ossalico all8% , correggendo il ph a 2.5 mediante aggiunta di nh4oh al 15% e riscaldando la soluzione fino ad ottenere abbondante precipitato bianco . il precipitato viene filtrato , disciolto in una miscela hno3/h2o2 , portato a secco , quindi ridisciolto con hcl ed essiccato nuovamente .
il residuo finale viene ripreso con 8 ml di acido cloridrico 0.1 n , trasferito in apposita vial dove viene aggiunto il cocktail di scintillazione ( ultima gold ab ; perkin elmer , waltham , ma , usa ) .
la lettura lsc  stata effettuata mediante scintillatore liquido ad ultra basso fondo ( wallac 1220 quantuls ; perkin elmer ) impostato con un tempo di conteggio di 1000 minuti .
il metodo  stato sottoposto ad una procedura di validazione su matrici alimentari solide ( carni fresche e prodotti della pesca ) , implementata seguendo un approccio validativo in - house per verificare laffidabilit del metodo allo scopo preposto .
sono stati verificati i seguenti parametri : selettivit , linearit , precisione , recupero , efficienza di conteggio , robustezza ed incertezza di misura .
il decision threshold e il detection limit sono stati calcolati in accordo con la norma iso 11929:2010 ( iso , 2010 ) ; la selettivit  stata valutata mediante prove ripetute di fortificazione e verificando la forma dello spettro ed i conteggi totali ; la linearit  stata verificata mediante conteggio di tre sorgenti di attivit pari a 1.5 , 95.48 e 494,40 bq ; laccuratezza  stata verificata effettuando prove di fortificazione ripetute ( n=6 ) in condizioni di ripetibilit intermedia , a due livelli di concentrazione di attivit pari a 0,5 e 1.0 bq kg ; infine , lefficienza di conteggio e la minima concentrazione di attivit rivelabile sono state valutate trattando tre sorgenti di sr , di attivit pari a 1.0 bq , con la stessa procedura di separazione dellyttrio utilizzata per i campioni ( iammarino et al . , 2012 ) .
al fine di estendere il campo di applicazione ai mangimi , e considerando che tale tipologia di campione  caratterizzata da concentrazioni di attivit di sr non trascurabili , 6 tipologie diverse di mangime e materie prime per mangimi sono stati analizzate ; quindi , sugli stessi campioni , sono state effettuate prove di fortificazione a 1.0 bq kg .
il metodo cos ottimizzato e validato  stato impiegato per condurre un monitoraggio della contaminazione da sr su 32 campioni di foraggi e mangimi ( 18 insilati , 7 fieni e 7 mangimi ) .
il metodo radiochimico validato in questo studio ha mostrato diversi aspetti che lo rendono preferibile rispetto ad altri attualmente disponibili ( maxwell iii e culligan , 2009 ; brun et al . , 2003 ; heilgeist , 2000 ; kabai et al . , 2011 ; kim et al . , 2009 ; stamoulis et al . , 2007 ; wilken e joshi , 1991 ; vajda e kim , 2010 ) .
la specifica serie di precipitazioni e purificazioni garantisce la separazione radiochimica dello sr da altri isotopi ed interferenti ; inoltre , la tecnica lsc consente di registrare spettri sia di particelle alfa che beta con una efficace discriminazione delle sorgenti di emissione .
la tecnica lsc fornisce , inoltre , valori di efficienza di conteggio ( 0.87 ) , di decision threshold ( 0.003 bq kg ) e di detection limit ( 0.008 bq kg ) pi efficienti rispetto alle tecniche tradizionali . in figura 2  mostrato il caratteristico spettro di emissione beta dellyttrio-90 .
altri importanti parametri di validazione ( tabella 1 ) che caratterizzano il metodo sono la linearit ( r=0.9987 ) , il recupero medio ( 92 e 89% ) , il coefficiente di variazione percentuale ( 14 e 15% ) per livelli di additivazione pari rispettivamente a 0.5 bq kg e 1.0 bq kg , lincertezza di misura , pari al 16.0% e la robustezza , valutata in condizioni di major changes , ovvero variando la matrice da analizzare , caratterizzata da un campo di applicazione composto da carni fresche ( bovine , suine ed ovi - caprine ) , prodotti carnei ( insaccati e prosciutti ) , prodotti ittici ( molluschi bivalvi , cefalopodi e teleostei ) , prodotti lattiero caseari ( mozzarella , ricotta e formaggi a breve e lunga maturazione ) , grano e prodotti derivati del grano ( pane e pasta ) .
 importante ricordare che , al fine di verificare ulteriormente laccuratezza del metodo  stato analizzato un materiale di riferimento ( iaea 152 : coriandolo ) .
tale materiale di riferimento , caratterizzato da un valore certificato di concentrazione di attivit dello sr pari a 7,7 bq kg alla data del 31 agosto 1987 , ha fatto registrare un valore medio di concentrazione di attivit di sr pari a 7.161.67 bq kg ( p=95% , k=2 ) .
tenuto in considerazione lintervallo di accettabilit , dichiarato sullo stesso materiale di riferimento certificato ( 7.08.3 bq kg ad un livello di confidenza del 95% ) , si  potuta confermare lattendibilit dellintera procedura analitica .
la sessione supplementare di validazione , relativa allestensione del campo di applicazione ai mangimi , ha portato ai risultati riassunti nella tabella 2 .
le contaminazioni registrate nelle varie tipologie di mangime sono risultate molto variabili ( da 0.23 bq kg relativa al mangime per conigli , a 1.61 bq kg relativa al mangime complementare minerale ) , tuttavia non  possibile trarre conclusioni relativamente alla relazione tra entit della contaminazione e tipo di mangime a causa del basso numero di campioni analizzati non statisticamente significativo .
futuri studi , gi in fase di progettazione , andranno ad approfondire e definire leventuale specificit nella contaminazione da sr nelle varie tipologie di mangime . per quanto riguarda le prove di fortificazione , i risultati hanno confermato lestrema versatilit e robustezza del metodo validato .
la percentuale media di recupero  risultata infatti pari al 90% ( recupero medio di validazione al livello 1.0 bq kg=89% ) con un coefficiente di variazione percentuale pari a 14.3% ( cv% di validazione al livello 1.0 bq kg=15% ) . in figura
3 sono riportati i confronti tra gli spettri relativi alle varie tipologie di mangime testate , analizzate prima e dopo la fortificazione con sr .
il monitoraggio su campioni di foraggi e mangimi ha confermato la necessit di un controllo radiochimico , soprattutto per quanto concerne le materie prime , in quanto su tutti i campioni  stata verificata una contaminazione da sr ben superiore al detection limit ( 0.008 bq kg ) del metodo ( tabella 3 ) . in particolare ,
i campioni di fieno hanno fatto registrare la concentrazione di attivit media di sr pi elevata ( 2.93 bq kg ) ; questo  in accordo con quanto definito dal regolamento bielorusso rdu-99 che fissa il limite massimo di contaminazione a 260 bq kg nel fieno ed a 50 bq kg nellinsilato .
tale netta differenziazione nella stima del limite massimo di contaminazione  , probabilmente , dovuta alla percentuale di sostanza secca che caratterizza queste due tipologie di matrice , ovvero 85% circa nel fieno e 40% circa nellinsilato .
la concentrazione di attivit media registrata nei mangimi  risultata la pi bassa ( 0.77 bq kg ) ed anche questo dato  sostanzialmente in accordo con quanto ad oggi disponibile in letteratura .
infatti , attualmente , non sono stati definiti limiti massimi ammissibili per la contaminazione da sr nei mangimi e ci  essenzialmente dovuto al fatto che , secondo i dati presenti in letteratura scientifica , questa matrice
infine , grazie allanalisi statistica dei dati ottenuti ( f - test a due campioni per varianze ) ,  stato possibile verificare una omogeneit dei dati tra i campioni di fieno e quelli di insilato , mentre i campioni di mangimi sono risultati contaminati a livelli statisticamente inferiori .
il metodo radiochimico descritto in questo studio , validato per la determinazione di radionuclidi beta emittenti ( sr ) nei mangimi presso il centro di referenza nazionale per la ricerca della radioattivit nel settore zootecnico - veterinario ( foggia ) , ha mostrato diversi aspetti ( selettivit , sensibilit e robustezza ) che lo rendono preferibile rispetto ad altri attualmente disponibili .
inoltre , le prove di validazione hanno permesso di verificare lidoneit allo scopo di tale metodica grazie alla valutazione delle pi importanti performance analitiche : selettivit , sensibilit , linearit , accuratezza e robustezza . per quanto
concerne il monitoraggio su campioni di foraggi e mangimi , tale lavoro ha permesso di confermare la necessit di controlli di tipo radiochimico , relativi alla contaminazione da sr , soprattutto per quanto concerne le materie prime .
infatti su tutti i campioni  stata verificata una contaminazione da sr ben superiore al detection limit ( 0.008 bq kg ) del metodo . in particolare ,
i campioni di fieno hanno fatto registrare la concentrazione di attivit media di sr pi elevata ( 2.93 bq kg ) , seguita da quella relativa ai campioni di insilato ( 2.07 bq kg ) e da quella relativa ai campioni di mangime ( 0.77 bq kg ) .
 90sr is considered as a dangerous contaminant of agri - food supply chains due to its chemical affinity with calcium , which makes its absorption in bones easy . 
 90sr accumulation in raw materials and then in final products is particularly significant in relationship to its ability to transfer into animal source products . the radionuclides transfer ( 137cs and 90sr ) from environment to forages and then to products of animal origin ( milk , cow and pork meats ) was studied and evaluated in different studies , which were carried out in contaminated areas , from chernobyl disaster until today . in the present work , the development and validation of a radiochemical method for the detection of 90sr in different types of animal feed , and the application of this technique for routinely control activities , 
 are presented . 
 liquid scintillation counting was the employed analytical technique , since it is able to determine very low activity concentrations of 90sr ( < 0.01 bq kg1 ) . 
 all samples analysed showed a 90sr contamination much higher than method detection limit ( 0.008 bq kg1 ) . 
 in particular , the highest mean activity concentration was registered in hay samples ( 2.93 bq kg1 ) , followed by silage samples ( 2.07 bq kg1 ) and animal feeds ( 0.77 bq kg1 ) . 
 in fact , all samples were characterized by 90sr activity concentrations much lower than reference limits . 
 this notwithstanding , the necessity to monitor these levels was confirmed , especially considering that 90sr is a possible carcinogen for human . 
Introduzione
Materiali e Metodi
Risultati e Discussione
Conclusioni