ApoA-1 Milano
-{ApoA-1}- Milano, -{ETC-216, MDCO-216}- je prirodna mutirana varijanta apolipoproteina A1 proteina koji se nalazi u ljudskoj HDL čestici, koja vrši prenos holesterola iz tkiva u jetru. Njegov značaj je u neposrednoj povezanosti sa zaštitom srca od kardiovaskularnih bolesti, a na osnovu najnovijih, zasada nepotpunih istraživanja (iz 2013 godine) i u regresiji tumora i metastaza.

Apolipoprotein -{apoA-1}- Milano prvi put je identifikovan od strane dr Cesarea Sirtorija u Milanu, koji je dokazao da je njegovo prisustvo u organizmu čoveka značajno za smanjenje rizika od kardiovaskularne bolesti, iako je u svojim istraživanjima izazvao smanjenje nivoa -{HDL}- i povećanje nivoa triglicerida.

Ova mutacija apolipoproteina A1, omogućava -{Ap-1}- Milano da brzo mobiliše holesterol, oduzimajući ga od perifernih tkiva i prenoseći ga do tkiva odgovornih za njegovu razgradnju, čime se smanjuju naslage arteriosklerotične naslage i njegov sadržaj u makrofagima. To verovatno objašnjava zašto je Apo-1 Milano sposoban da se suprotstavi patološkim promenama u srčanim (koronarnim) arterijama.

Istorija 
-{ApoA-1}- Milano, kao varijantu apolipoproteina A1 prvi je opisao dr Cesare Sirtorija, koji je kod pojedinaca u ruralnim oblastima Italije identifikovao veoma nizak nivo HDL. On je sa saradnicima utvrdio značajnu hipertrigliceridmiju s vrlo značajnim padom lipoproteina visoke gustoće (HDL)-holesterola (7-14 mg/dl) u tri člana (otac, sin i kći) jedne italijanske porodice. Te tri osobe nisu pokazivale nikakve znake ateroskleroze, niti je aterosklerotska bolest bila značajno prisutna u porodici. Aktivnosti lipoprotein lipaze i lecitin:holesterol aciltransferaze su bile normalne ili blago smanjene. Morfološka, strukturna studije HDL u ovih ispitanika pokazala je značajno proširenje lipoproteinskim čestica (oko 120 vs oko 94 za kontrolu HDL) i istovremeno povećanje sadržaja triglicerida. 

Posmatrajući inače klinički zdrave ispitanike u hipertrigliceridemiji sa smanjenim HDL-holesterolom i izmenjenim apoproteinom, bez značajne incidencije aterosklerotske bolesti u ispitanoj porodici, Sirtorija je zaključio da je ovo novootkrivena bolest u patologiji lipoproteina, koja je vrlo verovatno posledica izmenjenog odnosa amino kiselina u sastavu -{apoA-1}- proteina.

Infuzijom rekombinirajućih -{ApoA-1}- Milano-fosolipidnog kompleksa u kasnijim i izolovanim studijama, uglavnom na eksperimetalnim životinjskim modelima, proizvedena je brza regresija ateropskleroze. Tako je dokazano da rekombinantni -{apoA-1}- Milano/fosfolipidi kompleks (-{ETC-216}-) dat intravenski u pet doza u nedeljnim intervalima, proizvodi značajnu regresiju koronarne ateroskleroze mereno intravaskularnim ultrazvukom.

Iako istorijski gledano ova saznanja obećavaju, potrebni su dokazi u velikim kliničkim studijama s morbiditetom i mortalitetom kao krajnjim ciljem.

Matabolizam i značaj 
Najzastupljeniji proteina u HDL je -{apoA-1}- Milano koji služi „kao kamen temeljac“ za lipoprotein visoke gustoće (-{HDL}- ili "„dobri holesterol“") čestica. Povećana proizvodnja apoA-1 Milano proteina će rezultovati u sintezi novih -{HDL}- čestica. Ove novosintetisane HDL čestice su „funkcionalne“ zbog dovoljno velikog kapaciteta da uklone holesterol iz aterosklerotskih plakova. „Isticanje“ holesterola iz plaka na HDL holesterolu naziva se povratni transport holesterola (-{RCT}-).

Obrnuti transport holesterola (-{RCT}-) 
Obrnuti transport holesterola (-{RCT}-) je prirodni proces u organizmu koji se opisuje kao uklanjač -{HDL}- holesterola iz aterosklerotskih plakova lokalizovanih u zidu arterije. Holesterol uklonjen iz plaka prenosi se na česticama HDL u jetru, gde se preko žuči izlučuje iz tela. Novosintetizovane HDL čestice su ravne i prazne i zato imaju važnu funkciju posredovanja u obrnutom transportu holesterola.

Lipoproteini velike gustine (HDL) imaju sposobnost da inhibiraju migraciju monocita u odgovoru na oksidovane LDL. Postoji više mehanizama putem kojih se mogu oksidovani lipoproteini male gustine (OxLDL) ukloniti iz subendotelnog prostora. Neki od tih mehanizama su:
 fagocitoza uz pomoć skavanger receptora na makrofagima;
 pojačani obrnuti transport holesterola posredstvom lipoproteina velike gustine (HDL-a).

Osim toga, pokazano je da i HDL i njegov glavni apolipoproteinski konstituens, apolipoprotein A-1 (apoA-I) sprečavaju oksidaciju LDL čestica. Osim pojačanog obrnutog transporta holesterola, HDL i apoA-I pokazuju svoje korisne efekte tako što odstranjuju reaktivne forme kiseonika iz LDL, sprečavajući tako oksidaciju LDL i posledičnu aktivaciju inflamatornih medijatora. Osim apoA-1, HDL sadrži nekoliko enzima koji mogu sprečiti formiranje oksidovanih fosfolipida u OxLDL koji izazivaju inflamatorni odgovor. Ovi enzimi su paraoksanaza, acetilhidrolaza faktora aktivacije trombocita (PAF-AH) i lecitin holestreol aciltransferaza (LCAT).

Tako je za određivanje rizika od ateroskleroze važan ne samo nivo HDL, nego i njegova funkcija. Na primer, u toku akutnog faznog odgovora -{HDL}- može biti konvertovan iz svog antiinflamatornog u proinflamatorno stanje. Van Lenten je izučavao ljudski HDL pre i posle elektivne hirurgije. Pre hirurgije HDL je bio sposoban da inhibira oksidaciju LDL i hemotaktičku aktivnost monocita koju LDL indukuju. Tri dana posle hirurgije, u piku akutnog faznog odgovora, HDL je stimulisao oksidaciju LDL i hemotaksičku aktivnost monocita. HDL se vratio u svoje antiinflamatorno stanje nakon jedne nedelje. Tako u akutnoj fazi HDL može biti proinflamatoran, a aktivnost njegovih antiinflamatornih komponenti, -{apoA-1}- i paraoksonaze povezane sa HDL, smanjena je u toku akutnog faznog odgovora.

Zato je cilj savremenog lečenja aterioskleroze zasnovan na stimulaciji obrnutog povratnog transporta holesterola, novosintetisanim -{HDL}- za uklanjanje holesterola iz plaka u arterijama. Naknadna regresija ateroskleroze terapijskom produkcijom -{ApoA-1}- Milano jedina je tehnologija koja je danas najuspešnija u uklanjanju i regresiji aterosklerotičnog plaka u rizičitih bolesnika sa kardiovaskularnim bolestima.

Istraživanja 
Najnovija istraživanja objavljena 2013. godine u SAD pokazala su da je apolipoprotein A1 (apoA1), glavna proteinska komponenta lipoproteina visoke gustoće (-{HDL}-), koja kroz urođene i adaptivne imunske procese potentno sprečava rast tumora i metastaza u više modela tumorskih procesa kod životinja, uključujući i agresivni B16F10L oblik složenog malignog melanoma.

Tako je u miševa sa ekspresijom humanog apoA1 gena (-{A1Tg}-) utvrđena povećana infiltracija -{CD11b+ F4/80+}- makrofaga M1, anti-tumorskog fenotipa, što je rezultovalo smanjenjem mase tumora i metastaza i time povećala mogućnost preživljavanja. Nasuprot tome, kod miševa kod kojih je apoA1 bio nedovoljan (-{A1KO}-) utvrđeno je značajno povećanje rasta tumora i smanjeno preživljenje miševa.

Ubrizgavanje ljudske apoA1 u A1KO miševa, vakcinisanih tumorskih ćelijama, izuzetno smanjuje rast tumora i ekspanziju metastaza, što uvećava njihovo preživljavanje i poboljšava u narednom životnom periodu regresiju tumora i metastaza kada se apoA1 primjenjuje nakon nastajanja tumora i metastaza. Studije s apolipoproteina A2 otkrile su protivtumorski terapijski učinak koji je bio specifičan za apoA1.

Dosadašnje studije pokazale su snažnu imunomodulatornu ulogu aloproteina -{apoA1}- u okolini tumora, menjajući sam tumor povezanim makrofagama (-{TAMs}-) iz pro-tumora M2 u protivtumorski M1 fenotip. Iz ovoga proizilazi zaključak da bi -{apoA1}-, preusmeren in vivo, izmamio tumorsku infiltraciju makrofaga i usmerio ih u pravcu uklanjanja tumora što može imati značaj za potencijalnu primenu -{apoA1}- u lečenju sve brojnijih vrsta tumora.

Izvori

Literatura 
 Hegele RA, Is regression of coronary atherosclerosis possible by infusing recombinant apolipoprotein A-I?. CMAJ. 2004 Mar 16; 170(6):954.
 Thot PP, Therapeutic reduction of coronary atheromatous plaque burden using bioengineered apoA-I Milano, Curr Atheroscler Rep. 2004 Sep; 6(5):333-4.
 Karthikeyan G, Rapid regression of atherosclerosis with infusion of high-density lipoprotein mimetics: is this the magic bullet? Natl Med J India. 2004 Jul-Aug; 17(4):203-4.
 Mazur W. Atherosclerosis. Bigger is better: high-density and low-density lipoprotein particle size, Rev Cardiovasc Med. 2005 Spring; 6(2):125-7.

Spoljašnje veze 
 Reverse cholesterol transport and cholesterol efflux in atherosclerosis

Биохемија
-{ ApoA-1 }- Milano , -{ ETC-216 , MDCO-216 }- je prirodna mutirana varijanta apolipoproteina A1 proteina koji se nalazi u ljudskoj HDL čestici , koja vrši prenos holesterola iz tkiva u jetru . Njegov značaj je u neposrednoj povezanosti sa zaštitom srca od kardiovaskularnih bolesti , a na osnovu najnovijih , zasada nepotpunih istraživanja ( izgodine ) i u regresiji tumora i metastaza . Apolipoprotein -{ apoA-1 }- Milano prvi put je identifikovan od strane dr Cesarea Sirtorija u Milanu , koji je dokazao da je njegovo prisustvo u organizmu čoveka značajno za smanjenje rizika od kardiovaskularne bolesti , iako je u svojim istraživanjima izazvao smanjenje nivoa -{ HDL }- i povećanje nivoa triglicerida . Ova mutacija apolipoproteina A1 , omogućava -{ Ap-1 }- Milano da brzo mobiliše holesterol , oduzimajući ga od perifernih tkiva i prenoseći ga do tkiva odgovornih za njegovu razgradnju , čime se smanjuju naslage arteriosklerotične naslage i njegov sadržaj u makrofagima . To verovatno objašnjava zašto je Apo-1 Milano sposoban da se suprotstavi patološkim promenama u srčanim ( koronarnim ) arterijama . Istorija -{ ApoA-1 }- Milano , kao varijantu apolipoproteina A1 prvi je opisao dr Cesare Sirtorija , koji je kod pojedinaca u ruralnim oblastima Italije identifikovao veoma nizak nivo HDL . On je sa saradnicima utvrdio značajnu hipertrigliceridmiju s vrlo značajnim padom lipoproteina visoke gustoće ( HDL ) -holesterolamg / dl ) u tri člana ( otac , sin i kći ) jedne italijanske porodice . Te tri osobe nisu pokazivale nikakve znake ateroskleroze , niti je aterosklerotska bolest bila značajno prisutna u porodici . Aktivnosti lipoprotein lipaze i lecitin:holesterol aciltransferaze su bile normalne ili blago smanjene . Morfološka , strukturna studije HDL u ovih ispitanika pokazala je značajno proširenje lipoproteinskim čestica ( okovs okoza kontrolu HDL ) i istovremeno povećanje sadržaja triglicerida . Posmatrajući inače klinički zdrave ispitanike u hipertrigliceridemiji sa smanjenim HDL-holesterolom i izmenjenim apoproteinom , bez značajne incidencije aterosklerotske bolesti u ispitanoj porodici , Sirtorija je zaključio da je ovo novootkrivena bolest u patologiji lipoproteina , koja je vrlo verovatno posledica izmenjenog odnosa amino kiselina u sastavu -{ apoA-1 }- proteina . Infuzijom rekombinirajućih -{ ApoA-1 }- Milano-fosolipidnog kompleksa u kasnijim i izolovanim studijama , uglavnom na eksperimetalnim životinjskim modelima , proizvedena je brza regresija ateropskleroze . Tako je dokazano da rekombinantni -{ apoA-1 }- Milano / fosfolipidi kompleks ( -{ ETC-216 }- ) dat intravenski u pet doza u nedeljnim intervalima , proizvodi značajnu regresiju koronarne ateroskleroze mereno intravaskularnim ultrazvukom . Iako istorijski gledano ova saznanja obećavaju , potrebni su dokazi u velikim kliničkim studijama s morbiditetom i mortalitetom kao krajnjim ciljem . Matabolizam i značaj Najzastupljeniji proteina u HDL je -{ apoA-1 }- Milano koji služi „ kao kamen temeljac “ za lipoprotein visoke gustoće ( -{ HDL }- ili " „ dobri holesterol “ " ) čestica . Povećana proizvodnja apoA-1 Milano proteina će rezultovati u sintezi novih -{ HDL }- čestica . Ove novosintetisane HDL čestice su „ funkcionalne “ zbog dovoljno velikog kapaciteta da uklone holesterol iz aterosklerotskih plakova . „ Isticanje “ holesterola iz plaka na HDL holesterolu naziva se povratni transport holesterola ( -{ RCT }- ) . Obrnuti transport holesterola ( -{ RCT }- ) Obrnuti transport holesterola ( -{ RCT }- ) je prirodni proces u organizmu koji se opisuje kao uklanjač -{ HDL }- holesterola iz aterosklerotskih plakova lokalizovanih u zidu arterije . Holesterol uklonjen iz plaka prenosi se na česticama HDL u jetru , gde se preko žuči izlučuje iz tela . Novosintetizovane HDL čestice su ravne i prazne i zato imaju važnu funkciju posredovanja u obrnutom transportu holesterola . Lipoproteini velike gustine ( HDL ) imaju sposobnost da inhibiraju migraciju monocita u odgovoru na oksidovane LDL . Postoji više mehanizama putem kojih se mogu oksidovani lipoproteini male gustine ( OxLDL ) ukloniti iz subendotelnog prostora . Neki od tih mehanizama su : fagocitoza uz pomoć skavanger receptora na makrofagima ; pojačani obrnuti transport holesterola posredstvom lipoproteina velike gustine ( HDL-a ) . Osim toga , pokazano je da i HDL i njegov glavni apolipoproteinski konstituens , apolipoprotein A-1 ( apoA-I ) sprečavaju oksidaciju LDL čestica . Osim pojačanog obrnutog transporta holesterola , HDL i apoA-I pokazuju svoje korisne efekte tako što odstranjuju reaktivne forme kiseonika iz LDL , sprečavajući tako oksidaciju LDL i posledičnu aktivaciju inflamatornih medijatora . Osim apoA-1 , HDL sadrži nekoliko enzima koji mogu sprečiti formiranje oksidovanih fosfolipida u OxLDL koji izazivaju inflamatorni odgovor . Ovi enzimi su paraoksanaza , acetilhidrolaza faktora aktivacije trombocita ( PAF-AH ) i lecitin holestreol aciltransferaza ( LCAT ) . Tako je za određivanje rizika od ateroskleroze važan ne samo nivo HDL , nego i njegova funkcija . Na primer , u toku akutnog faznog odgovora -{ HDL }- može biti konvertovan iz svog antiinflamatornog u proinflamatorno stanje . Van Lenten je izučavao ljudski HDL pre i posle elektivne hirurgije . Pre hirurgije HDL je bio sposoban da inhibira oksidaciju LDL i hemotaktičku aktivnost monocita koju LDL indukuju . Tri dana posle hirurgije , u piku akutnog faznog odgovora , HDL je stimulisao oksidaciju LDL i hemotaksičku aktivnost monocita . HDL se vratio u svoje antiinflamatorno stanje nakon jedne nedelje . Tako u akutnoj fazi HDL može biti proinflamatoran , a aktivnost njegovih antiinflamatornih komponenti , -{ apoA-1 }- i paraoksonaze povezane sa HDL , smanjena je u toku akutnog faznog odgovora . Zato je cilj savremenog lečenja aterioskleroze zasnovan na stimulaciji obrnutog povratnog transporta holesterola , novosintetisanim -{ HDL }- za uklanjanje holesterola iz plaka u arterijama . Naknadna regresija ateroskleroze terapijskom produkcijom -{ ApoA-1 }- Milano jedina je tehnologija koja je danas najuspešnija u uklanjanju i regresiji aterosklerotičnog plaka u rizičitih bolesnika sa kardiovaskularnim bolestima . Istraživanja Najnovija istraživanja objavljena godine u SAD pokazala su da je apolipoprotein A1 ( apoA1 ) , glavna proteinska komponenta lipoproteina visoke gustoće ( -{ HDL }- ) , koja kroz urođene i adaptivne imunske procese potentno sprečava rast tumora i metastaza u više modela tumorskih procesa kod životinja , uključujući i agresivni B16F10L oblik složenog malignog melanoma . Tako je u miševa sa ekspresijom humanog apoA1 gena ( -{ A1Tg }- ) utvrđena povećana infiltracija -{ CD11b+ F4 / 80+ }- makrofaga M1 , anti-tumorskog fenotipa , što je rezultovalo smanjenjem mase tumora i metastaza i time povećala mogućnost preživljavanja . Nasuprot tome , kod miševa kod kojih je apoA1 bio nedovoljan ( -{ A1KO }- ) utvrđeno je značajno povećanje rasta tumora i smanjeno preživljenje miševa . Ubrizgavanje ljudske apoA1 u A1KO miševa , vakcinisanih tumorskih ćelijama , izuzetno smanjuje rast tumora i ekspanziju metastaza , što uvećava njihovo preživljavanje i poboljšava u narednom životnom periodu regresiju tumora i metastaza kada se apoA1 primjenjuje nakon nastajanja tumora i metastaza . Studije s apolipoproteina A2 otkrile su protivtumorski terapijski učinak koji je bio specifičan za apoA1 . Dosadašnje studije pokazale su snažnu imunomodulatornu ulogu aloproteina -{ apoA1 }- u okolini tumora , menjajući sam tumor povezanim makrofagama ( -{ TAMs }- ) iz pro-tumora M2 u protivtumorski M1 fenotip . Iz ovoga proizilazi zaključak da bi -{ apoA1 }- , preusmeren in vivo , izmamio tumorsku infiltraciju makrofaga i usmerio ih u pravcu uklanjanja tumora što može imati značaj za potencijalnu primenu -{ apoA1 }- u lečenju sve brojnijih vrsta tumora . Izvori Literatura Hegele RA , Is regression of coronary atherosclerosis possible by infusing recombinant apolipoprotein A-I ? . CMAJ.Mar 6 ) :954. Thot PP , Therapeutic reduction of coronary atheromatous plaque burden using bioengineered apoA-I Milano , Curr Atheroscler Rep.Sep ;5 ) :333-4 . Karthikeyan G , Rapid regression of atherosclerosis with infusion of high-density lipoprotein mimetics : is this the magic bullet ? Natl Med J India.Jul -Aug ;4 ) :203-4. Mazur W. Atherosclerosis . Bigger is better : high-density and low-density lipoprotein particle size , Rev Cardiovasc Med.Spring ;2 ) :125-7 . Spoljašnje veze Reverse cholesterol transport and cholesterol efflux in atherosclerosis Биохемија