Bởi vì pyridostigmine kết hợp thuận nghịch với acetylcholinesterase, nó thực sự bảo vệ enzyme khỏi sự ức chế về cơ bản không thể đảo ngược bằng các chất dẫn truyền thần kinh sau đó; sau khi liên kết thuận nghịch bị phá vỡ, cholinesterase được giải phóng có thể giúp thuỷ phân dư thừa acetylcholine trong cơ quan đích.