Xét nghiệm thường không cần thiết nhưng có thể được thực hiện bằng Nuôi cấy vi rút Phát hiện RNA vi rút bằng RT-PCR Ít phổ biến hơn, có hiện tượng đảo ngược huyết thanh Enterovirus có thể được phát hiện bằng cách sử dụng xét nghiệm RT-PCR trên một mẫu từ vị trí tổn thương (ví dụ: họng hoặc mũi họng, máu, dịch não tuỷ) hoặc từ phân, trong đó sinh vật thường có mặt ngay cả khi vị trí lâm sàng liên quan ở nơi khác; xác định cơ quan gây bệnh là quan trọng chủ yếu trong các trường hợp viêm màng não vô khuẩn.