এক্স-ও (XO) লিঙ্গ-নির্ধারণ পদ্ধতি
মাইট বাদে বেশিরভাগ আরাকনিডস শ্রেণির যেখানে অল্প সংখ্যক হ্যাপ্লোডিপ্লয়েড থাকে। প্রায় সমস্ত অ্যাপটেরিগোট এবং প্যালিওপটেরান পোকামাকড় (যেমন ফড়িং এবং সিলভারফিশ (lepisma saccharina))। বেশিরভাগ এক্সোপটারিগোট কীটপতঙ্গ, (যেমন ঘাস ফড়িং, ঝিঁঝিঁ এবং তেলাপোকা)। কিছু নেমোটোডস, ক্রাস্টেসিয়ানস, গ্যাস্ট্রোপড মল্লাস্ক এবং অস্থিযুক্ত মাছ, উল্লেখযোগ্যভাবে অ্যানিসিসট্রাসের গণ এর প্রজাতিসমূহ। এই পদ্ধতিতে কেবলমাত্র একটি সেক্স ক্রোমোজোম রয়েছে, যা X হিসাবে পরিচিত। পুরুষদের সবসময় একটি X ক্রোমোজোম থাকে (XO), যেখানে স্ত্রীদের থাকে দুটি (XX)। শূন্য (কখনও কখনও ইংরেজি O বর্ণ) আরেকটি সেক্স ক্রোমোজোমের অভাব প্রকাশ করে। প্রসবকালীন জননকোষ সবসময়ই একটি X ক্রোমোজোমকে ধারণ করে, তাই প্রাণির সন্তান কোন লিঙ্গের হবে তা পুংজননকোষে সেক্স ক্রোমোজোমের উপস্থিতির উপর নির্ভর করে। এর শুক্রাণুতে সাধারণত একটি X ক্রোমোজোম থাকে অথবা কোনও সেক্স ক্রোমোজোম থাকে না। এই পদ্ধতির ক্ষেত্রে, বেশিরভাগ প্রাণিরই দুটি সেক্স ক্রোমোজোম (XX) থাকে এবং এরা হারমাফ্রোডিটিক হয়। এরা ডিম এবং শুক্রাণু উভয়ই উৎপাদন করে যারা নিজেরাই নিষিক্ত করতে পারে, তবে বিরল ক্ষেত্রে পুরুষদের কেবল একটি সেক্স ক্রোমোজোম (XO) থাকে। জীববিজ্ঞানে গবেষণার ক্ষেত্রে প্রায়শই ব্যবহার করা হয় এমন একটি জীব হল - মডেল অর্গানিজম Caenorhabditis elegans - একটি নেমাটোড। কিছু ড্রসোফিলা প্রজাতির XO পুরুষ রয়েছে। এগুলি Y ক্রোমোসোমের অনুপস্থিতির কারণে উদ্ভূত বলে মনে করা হয়।