title: 79/796/EEZ: Prva direktiva Komisije od 26. srpnja 1979. o utvrđivanju metoda analize koje se koriste u Zajednici za ispitivanje određenih šećera namijenjenih prehrani ljudi

text:
               13/Sv. 012

               HR

               Službeni list Europske unije

               3

         31979L0796

               L 239/24

               SLUŽBENI LIST EUROPSKE UNIJE

               26.07.1979.

      PRVA DIREKTIVA KOMISIJE

   od 26. srpnja 1979.
   o utvrđivanju metoda analize koje se koriste u Zajednici za ispitivanje određenih šećera namijenjenih prehrani ljudi
   (79/796/EEZ)
   KOMISIJA EUROPSKIH ZAJEDNICA,
   uzimajući u obzir Ugovor o osnivanju Europske ekonomske zajednice,
   uzimajući u obzir Direktivu Vijeća 73/437/EEZ od 11. prosinca 1973. o usklađivanju zakonodavstava država članica u odnosu na određene šećere namijenjene prehrani ljudi (1), a posebno njezin članak 11.,
   budući da se člankom 11. te Direktive utvrđuje da se sastav određenih šećera mora provjeriti metodama analize koje se primjenjuju unutar Zajednice;
   budući da je poželjno da se donese početni niz metoda za koje su provedene studije;
   budući da su u Prilogu Direktivi 73/437/EEZ utvrđene metode za određivanje tipa boje za šećer ili bijeli šećer i za ekstra bijeli šećer, metoda mjerenja vodljivosti pepela u ekstra bijelom šećeru, u otopini šećera, u otopini invertnog šećera i u sirupu invertnog šećera te metoda određivanja boje u otopini ekstra bijelog šećera i otopini šećera;
   budući da bi, s druge strane bilo uputno, dok se ne formuliraju daljnje metode Zajednice za određivanje reducirajućih šećera, dopustiti državama članicama mogućnost da nastave odobravati upotrebu Laneove i Eynonove metode (u Prilogu II. točki III. 3. i točki III. 4., metode 7. i 8.) umjesto Luff-Schoorlove metode (u Prilogu II. točki III. 3. i točki III. 4., metoda 6.);
   budući da su metode analize predviđene ovom Direktivom u skladu s mišljenjem Stalnog odbora za hranu,
   DONIJELA JE OVU DIREKTIVU:
   Članak 1.
   1.   Države članice zahtijevaju da se analize potrebne za provjeru kriterija navedenih u Prilogu I., izvode u skladu s metodama opisanim u Prilogu II. ovoj Direktivi.
   2.   Ne dovodeći u pitanje drugi podstavak, za određivanje reducirajućih šećera u sljedećim šećerima upotrebljavat će se Luff-Schoorlova metoda (u Prilogu II., metoda 6.):

               —

               otopini šećera,

               —

               otopini bijelog šećera,

               —

               otopini invertnog šećera,

               —

               otopini bijelog invertnog šećera,

               —

               sirupu invertnog šećera,

               —

               glukoznom sirupu,

               —

               osušenom glukoznom sirupu,

               —

               dekstroza monohidratu,

               —

               bezvodnoj dekstrozi.

         Države članice, međutim, mogu na svom državnom području za određivanje reducirajućih šećera u jednom ili više gore navedenih šećera zahtijevati upotrebu Laneove i Eynonove metode (Prilog II., metode 7. i/ili 8. prema potrebi).
   3.   Ako država članica koristi mogućnost iz stavka 2. drugog podstavka, ona o tome odmah obavješćuje Komisiju i druge države članice.
   Članak 2.
   Države članice donose zakone i druge propise potrebne za usklađivanje s ovom Direktivom najkasnije 18 mjeseci nakon njezine objave. One o tome odmah obavješćuju Komisiju.
   Članak 3.
   Ova je Direktiva upućena državama članicama.

      Sastavljeno u Bruxellesu 26. srpnja 1979.

            Za Komisiju

         Étienne DAVIGNON

            Član Komisije

      (1)  SL L 356, 27.12.1973., str. 71.
   PRILOG I.
   PODRUČJE PRIMJENE METODA ANALIZE KOJE SE KORISTE U ZAJEDNICI ZA ODREĐENE ŠEĆERE NAMIJENJENE PREHRANI LJUDI

                  I.   Određivanje gubitka mase sušenjem u:

                           —

                           polubijelom šećeru

               (upotrebom metode 1., iz Priloga II.)

                           —

                           šećeru ili bijelom šećeru

                           —

                           ekstra bijelom šećeru

                  II.   Određivanje suhe tvari u:

               II.1.

                           —

                           glukoznom sirupu

               (upotrebom metode 2., iz Priloga II.)

                           —

                           osušenom glukoznom sirupu

                           —

                           dekstroza monohidratu

                           —

                           bezvodnoj dekstrozi

               II.2.

                           —

                           otopini šećera ili otopini bijelog šećera

               (upotrebom metode 3., iz Priloga II.)

                           —

                           otopini invertnog šećernoj ili otopini bijelog invertnog šećera

                           —

                           sirupu invertnog šećera ili sirupu bijelog invertnog šećera

                  III.   Mjerenje reducirajućih šećera u:

               III.1.

                           —

                           polubijelom šećeru

               (upotrebom metode 4., iz Priloga II.)

               III.2.

                           —

                           šećeru ili bijelom šećeru

               (upotrebom metode 5., iz Priloga II.)

                           —

                           ekstra bijelom šećeru

               III.3.

                           —

                           otopini šećera

               (upotrebom metode 6. ili 7., iz Priloga II.)

                           —

                           otopini bijelog šećera

                           —

                           otopini invertnog šećera

                           —

                           otopini bijelog invertnog šećera

                           —

                           sirupu invertnog šećera

                           —

                           sirupu bijelog invertnog šećera

               III.4.

                           —

                           glukoznom sirupu

               (upotrebom metode 6. ili 8., iz Priloga II.)

                           —

                           osušenom glukoznom sirupu

                           —

                           dekstroza monohidratu

                           —

                           bezvodnoj dekstrozi

                  IV.   Određivanje sulfatnog pepela u:

                           —

                           glukoznom sirupu

               (upotrebom metode 9., iz Priloga II.)

                           —

                           osušenom glukoznom sirupu

                           —

                           dekstroza monohidratu

                           —

                           bezvodnoj dekstrozi

                  V.   Određivanje polarizacije u:

                           —

                           polubijelom šećeru

               (upotrebom metode 10., iz Priloga II.)

                           —

                           šećeru ili bijelom šećeru

                           —

                           ekstra bijelom šećeru

         PRILOG II.
   METODE ANALIZE ZA PROVJERU SASTAVA ODREĐENIH ŠEĆERA NAMIJENJENIH PREHRANI LJUDI
   UVOD
   1.   Priprema uzorka za analizu

   Uzorak dostavljen u laboratorij treba dobro promiješati.
   Odvojiti dio uzorka od najmanje 200 g i prenijeti ga odmah u čistu, suhu, hermetički zatvorenu posudu.
   2.   Reagensi i oprema

   Popis opreme sadrži samo posebne instrumente i opremu ili onu koja zahtijeva posebne standarde.
   Pojam voda, podrazumijeva destiliranu vodu ili demineraliziranu vodu najmanje jednake čistoće.
   Ako nije drukčije navedeno, sve kemijske tvari koje se koriste moraju biti priznate analitičke čistoće.
   Pojam otopina reagensa, ukoliko nije drukčije navedeno, podrazumijeva vodenu otopinu.
   3.   Izražavanje rezultata

   Rezultat naveden u službenom izvješću o analizi predstavlja srednju vrijednost dobivenu iz najmanje između dva određivanja koja zadovoljavaju kriterij ponovljivosti.
   Ukoliko nije drukčije određeno, rezultati se izražavaju kao maseni udio u uzorku zaprimljenom u laboratoriju.
   Broj decimalnih mjesta u tako izraženom rezultatu određen je preciznošću metode.
   METODA 1.

      ODREĐIVANJE GUBITKA MASE SUŠENJEM

   1.   Opseg i područje primjene

   Ovom se metodom određuje gubitak mase sušenjem u:

               —

               polubijelom šećeru,

               —

               šećeru ili bijelom šećeru,

               —

               ekstra bijelom šećeru.

         2.   Definicija

   „Gubitak mase sušenjem”: iznos gubitka mase pri sušenju, određen opisanom metodom.
   3.   Princip

   Gubitak mase sušenjem određuje se sušenjem pri temperaturi 103 ± 2 °C.
   4.   Oprema

   4.1.   Analitička vaga točnosti 0,1 mg.
   4.2.   Sušionik s odgovarajućom ventilacijom i regulatorom temperature s mogućnošću održavanja temperature na 103 ± 2 °C.
   4.3.   Metalna posudica za vaganje s ravnim dnom, otporna na djelovanje uzorka i uvjete analize, promjera najmanje 100 mm i dubine najmanje 30 mm.
   4.4.   Eksikator sa svježe aktiviranim silika-gelom ili odgovarajućim sušilom s indikatorom prisutnosti vode.
   5.   Postupak

                  Napomena:

               postupci opisani u točkama od 5.3. do 5.7. moraju se provesti odmah nakon otvaranja posude s uzorkom.

         5.1.   Osušiti posudicu (4.3.) do konstantne mase u sušioniku (4.2.) pri 103 ± 2 °C.
   5.2.   Ostaviti posudicu da se hladi u eksikatoru (4.4.) najmanje 30 do 35 minuta i zatim je izvagati s točnošću 0,1 mg.
   5.3.   U posudicu izvagati približno 20 do 30 g uzorka s točnošću 0,1 mg.
   5.4.   Staviti posudicu u sušionik (4.2.) na tri sata pri 103 ± 2 °C.
   5.5.   Ostaviti posudicu da se ohladi u eksikatoru (4.4.) i zatim izvagati s točnošću 0,1 mg.
   5.6.   Ponovo postaviti posudice u sušionik na 30 minuta pri 103 ± 2 °C.
   Ostaviti da se ohladi u eksikatoru (4.4.) i zatim izvagati s točnošću 0,1 mg. Ponoviti ovaj postupak ako je razlika između dva vaganja veća od 1 mg. Ako se masa poveća, za izračun upotrijebiti najnižu izmjerenu vrijednost.
   5.7.   Ukupno vrijeme sušenja ne smije biti duže od četiri sata.
   6.   Izražavanje rezultata

   6.1.   Formula i metoda izračunavanja:

   Gubitak mase sušenjem izražava se kao postotak u odnosu na masu originalnog uzorka i izračunava se na sljedeći način:

   gdje je:

               m0

               početna masa uzorka u gramima,

               m1

               masa uzorka nakon sušenja u gramima.

         6.2.   Ponovljivost

   Razlika između rezultata dva određivanja koje provodi isti analitičar istodobno ili neposredno jedno za drugim na istom uzorku, u istim uvjetima, ne smije prelaziti 0,02 g na 100 g uzorka.
   METODA 2.

      ODREĐIVANJE SUHE TVARI

   Metoda s vakuum sušionikom
   1.   Opseg i područje primjene:

   Ovom se metodom određuje udio suhe tvari u:

               —

               glukoznom sirupu,

               —

               sušenom glukoznom sirupu,

               —

               dekstroza monohidratu,

               —

               bezvodnoj dekstrozi.

         2.   Definicija

   „Udio suhe tvari”: udio suhe tvari određen opisanom metodom.
   3.   Princip

   Udio suhe tvari određuje se pri temperaturi od 70 ± 1 °C upotrebom vakuum sušionika, pri tlaku od najviše 3,3 kPa (34 mbar). Kod glukoznog sirupa ili sušenoga glukoznog sirupa, uzorci se prije sušenja pripremaju miješanjem s vodom i kremenim pijeskom.
   4.   Reagensi

   4.1.   Kremeni pijesak: pročistiti u Buchnerovom lijevku višekratnim ispiranjem razrijeđenom klorovodičnom kiselinom (1 ml koncentrirane kiseline, gustoće 1,19 g/ml pri 20 °C, na litru vode). Postupak je završen kada je otopina nakon ispiranja kisela. Ispiranje nastaviti vodom sve dok pH filtrata ne bude veći od 4. Osušiti u sušoniku pri 103 ± 2 °C i pohraniti u hermetički zatvorenu posudu.
   5.   Oprema

   5.1.   Vakuum sušionik, nepropustan, sa termostatom, termometrom i opremljen termometrom i vakuum manometrom. Sušionik mora biti konstruiran tako da omogućuje brzi prijenos topline na posudice za vaganje postavljene na njezinim policama.
   5.2.   Uređaj za sušenje zraka koji se sastoji od staklene kolone napunjene svježe aktiviranim suhim silika - gelom ili odgovarajućim sredstvom za sakupljanje vlage i koji sadrži indikator prisutnosti vode. Ova staklena kolona se povezana je s uređajem za ispiranje plinova koji sadrži koncentriranu sumpornu kiselinu i povezan je sa dovodom zraka u sušionik.
   5.3.   Vakuum pumpa kojom se u sušioniku može održavati tlak od 3,3 kPa (34 mbar) ili manji.
   5.4.   Metalna posudica za vaganje s ravnim dnom, otporna na djelovanje uzoraka i uvjete analize, promjera najmanje 100 mm i dubine najmanje 300 mm.
   5.5.   Stakleni štapić, dovoljno dug da ne može u potpunosti upasti u posudu.
   5.6.   Eksikator koji sadrži svježe aktivirani suhi silika - gel ili odgovarajući adsorbent za sakupljanje vlage s indikatorom sadržine vode.
   5.7.   Analitička vaga točnosti 0,1 mg.
   6.   Postupak

   6.1.   U posudicu za vaganje (5.4.) opremljenu staklenim štapićem (5.5.) potrebno je usipati približno 30 g kremenog pijeska (4.1.). To se sve zajedno postavi u sušionik (5.1.) pri 70 ± 1 °C i tlak se smanji na 3,3 kPa (34 mbar) ili manje.
   Sušiti najmanje 5 sati, dovodeći spori dotok zraka u sušionik kroz uređaj za sušenje zraka. Povremeno treba provjeriti tlak i ako je potrebno korigirati ga.
   6.2.   U sušioniku ponovo uspostaviti atmosferski tlak, povećavajući pažljivo dotok suhog zraka. Posudu zajedno sa staklenim štapićem treba odmah staviti u eksikator (5.6.). Ostaviti da se ohladi i tada izvagati.
   6.3.   U čašu od 100 ml izvagati 10 g uzorka s točnošću od približno 1 mg.
   6.4.   Uzorak razrijediti s 10 ml tople vode i otopinu kvantitativno prenijeti u posudu za vaganje koristeći stakleni štapić (5.5.).
   6.5.   Posudicu s uzorkom i staklenim štapićem staviti u sušionik i smanjiti tlak na 3,3 kPa (34 mbar) ili manje. Sušiti pri 70 ± 1 °C, propuštajući spori protok suhog zraka kroz sušionik.
   Postupak sušenja traje 20 sati; krajem prvog dana smanjenje mase je najveće. Nužno je da vakuum pumpa radi na prethodno prilagođenom tlaku i omogući spor dotok suhog zraka u sušionik kako bi se tijekom noći održavao tlak od približno 3,3 kPa (34 mbar) ili manje.
   6.6.   Ponovo uspostaviti atmosferski tlak u sušioniku, povećavajući pažljivo dotok suhog zraka. Posudicu za vaganje zajedno sa sadržajem staklenim štapićem treba odmah staviti u eksikator. Ostaviti da se ohladi i tada izvagati uz točnost od 1 mg.
   6.7.   Nastaviti s postupkom (6.5.) još 4 sata. Ponovo uspostaviti atmosferski tlak u sušioniku i odmah staviti posudicu u eksikator. Ostaviti da se ohladi i tada izvagati. Provjeriti je li postignuta konstantna masa. Smatra se da je konstantna masa postignuta na zadovoljavajući način ako razlika između dvaju vaganja iste posudice nije veća od 2 mg. Ako je razlika veća, ponoviti postupak 6.7.
   6.8.   Za određivanje suhe tvari u uzorcima bezvodne dekstroze ili monohidrata dekstroze nije potrebna upotrijebiti kremeni pijesak i vodu.
   7.   Izražavanje rezultata

   7.1.   Formula i metoda izračunavanja

   Udio suhe tvari, izražen kao postotak u odnosu na masu uzorka, izražen je jednadžbom:

   pri čemu je:
   m0= početna masa uzorka u gramima;
   m1= masa posudice za vaganje i kremenog pijeska, staklenog štapića i ostatka uzorka nakon sušenja, u gramima;
   m2= masa posude za vaganje, kremenog pijeska i staklenog štapića u gramima.
   7.2.   Ponovljivost

   Razlika između rezultata dva određivanja koje provodi isti analitičar istovremeno ili neposredno jedno za drugim na istom uzorku, pod istim uvjetima, ne smije biti veća od 0,12 g na 100 g uzorka.
   METODA 3.

      ODREĐIVANJE UKUPNE SUHE TVARI

   (Refraktometrijska metoda)
   1.   Opseg i područje primjene:

   Ovom se metodom određuje udio suhe tvari u:

               —

               otopini šećera,

               —

               otopini bijelog šećera,

               —

               otopini invertnog šećera,

               —

               otopini bijelog invertnog šećera,

               —

               sirupu invertnog šećera,

               —

               sirupu bijelog invertnog šećera.

         2.   Definicija

   „Udio suhe tvari”: udio suhe tvari određen opisanom metodom.
   3.   Princip

   Indeks refrakcije uzorka određuje se pri 20 °C te se udio suhe tvari očita pomoću referentne tablice u kojoj je navedena koncentracija kao funkcija indeksa refrakcije.
   4.   Oprema

   4.1.   Refraktometar, točnosti 4 decimalna mjesta, s termometrom i pumpom za vodu povezanom s termostatski kontroliranom vodenom kupelji temperature 20 ± 0,5 °C.
   4.2.   Izvor svjetlosti koji se sastoji od natrijeve svjetiljke.
   5.   Postupak

   5.1.   Ako su u uzorku prisutni kristali, treba ih ponovo otopiti razrjeđivanjem uzorka u omjeru 1 : 1 (m/m).
   5.2.   U refraktometru (4.1.) izmjeriti indeks refrakcije uzorka pri 20 °C.
   6.   Izražavanje i izračunavanje rezultata

   6.1.   Izračunati udio suhe tvari iz indeksa refrakcije za otopinu saharoze pri 20 °C navedenog u tablici i korigirati rezultat dobiven iz tablice za prisutnost invertnih šećera, dodavajući 0,022 za svaki 1 % invertnog šećera prisutnog u analiziranom uzorku.
   6.2.   Ako je uzorak bio razrijeđen vodom u omjeru 1:1 (m/m), izračunani udio suhe tvari množi se s dva.
   6.3.   Ponovljivost

   Razlika između rezultata dva određivanja koje provodi isti analitičar istovremeno ili neposredno jedno za drugim na istom uzorku, u istim uvjetima, ne smije prelaziti 0,2 g suhe tvari na 100 g uzorka.

      REFERENTNE TABLICE

      Refrakcijski indeksi (n) otopine saharoze pri 20 °C
       (1)

                  n

               (20 °C)

               Saharoza
               (%)

               1,3330

               0,009

               1,3331

               0,078

               1,3332

               0,149

               1,3333

               0,218

               1,3334

               0,288

               1,3335

               0,358

               1,3336

               0,428

               1,3337

               0,498

               1,3338

               0,567

               1,3339

               0,637

               1,3340

               0,707

               1,3341

               0,776

               1,3342

               0,846

               1,3343

               0,915

               1,3344

               0,985

               1,3345

               1,054

               1,3346

               1,124

               1,3347

               1,193

               1,3348

               1,263

               1,3349

               1,332

               1,3350

               1,401

               1,3351

               1,470

               1,3352

               1,540

               1,3353

               1,609

               1,3354

               1,678

               1,3355

               1,747

               1,3356

               1,816

               1,3357

               1,885

               1,3358

               1,954

               1,3359

               2,023

               1,3360

               2,092

               1,3361

               2,161

               1,3362

               2,230

               1,3363

               2,299

               1,3364

               2,367

               1,3365

               2,436

               1,3366

               2,505

               1,3367

               2,574

               1,3368

               2,642

               1,3369

               2,711

               1,3370

               2,779

               1,3371

               2,848

               1,3372

               2,917

               1,3373

               2,985

               1,3374

               3,053

               1,3375

               3,122

               1,3376

               3,190

               1,3377

               3,259

               1,3378

               3,327

               1,3379

               3,395

               1,3380

               3,463

               1,3381

               3,532

               1,3382

               3,600

               1,3383

               3,668

               1,3384

               3,736

               1,3385

               3,804

               1,3386

               3,872

               1,3387

               3,940

               1,3388

               4,008

               1,3389

               4,076

               1,3390

               4,144

               1,3391

               4,212

               1,3392

               4,279

               1,3393

               4,347

               1,3394

               4,415

               1,3395

               4,483

               1,3396

               4,550

               1,3397

               4,618

               1,3398

               4,686

               1,3399

               4,753

               1,3400

               4,821

               1,3401

               4,888

               1,3402

               4,956

               1,3403

               5,023

               1,3404

               5,091

               1,3405

               5,158

               1,3406

               5,225

               1,3407

               5,293

               1,3408

               5,360

               1,3409

               5,427

               1,3410

               5,494

               1,3411

               5,562

               1,3412

               5,629

               1,3413

               5,696

               1,3414

               5,763

               1,3415

               5,830

               1,3416

               5,897

               1,3417

               5,964

               1,3418

               6,031

               1,3419

               6,098

               1,3420

               6,165

               1,3421

               6,231

               1,3422

               6,298

               1,3423

               6,365

               1,3424

               6,432

               1,3425

               6,498

               1,3426

               6,565

               1,3427

               6,632

               1,3428

               6,698

               1,3429

               6,765

               1,3430

               6,831

               1,3431

               6,898

               1,3432

               6,964

               1,3433

               7,031

               1,3434

               7,097

               1,3435

               7,1642

               1,3436

               7,230

               1,3437

               7,296

               1,3438

               7,362

               1,3439

               7,429

               1,3440

               7,495

               1,3441

               7,561

               1,3442

               7,627

               1,3443

               7,693

               1,3444

               7,759

               1,3445

               7,825

               1,3446

               7,891

               1,3447

               7,957

               1,3448

               8,023

               1,3449

               8,089

               1,3450

               8,155

               1,3451

               8,221

               1,3452

               8,287

               1,3453

               8,352

               1,3454

               8,418

               1,3455

               8,484

               1,3456

               8,550

               1,3457

               8,615

               1,3458

               8,681

               1,3459

               8,746

               1,3460

               8,812

               1,3461

               8,878

               1,3462

               8,943

               1,3463

               9,008

               1,3464

               9,074

               1,3465

               9,139

               1,3466

               9,205

               1,3467

               9,270

               1,3468

               9,335

               1,3469

               9,400

               1,3470

               9,466

               1,3471

               9,531

               1,3472

               9,596

               1,3473

               9,661

               1,3474

               9,726

               1,3475

               9,791

               1,3476

               9,856

               1,3477

               9,921

               1,3478

               9,986

               1,3479

               10,051

               1,3480

               10,116

               1,3481

               10,181

               1,3482

               10,246

               1,3483

               10,311

               1,3484

               10,375

               1,3485

               10,440

               1,3486

               10,505

               1,3487

               10,570

               1,3488

               10,634

               1,3489

               10,699

               1,3490

               10,763

               1,3491

               10,828

               1,3492

               10,892

               1,3493

               10,957

               1,3494

               11,021

               1,3495

               11,086

               1,3496

               11,150

               1,3497

               11,215

               1,3498

               11,279

               1,3499

               11,343

               1,3500

               11,407

               1,3501

               11,472

               1,3502

               11,536

               1,3503

               11,600

               1,3504

               11,664

               1,3505

               11,728

               1,3506

               11,792

               1,3507

               11,856

               1,3508

               11,920

               1,3509

               11,984

               1,3510

               12,048

               1,3511

               12,112

               1,3512

               12,176

               1,3513

               12,240

               1,3514

               12,304

               1,3515

               12,368

               1,3516

               12,431

               1,3517

               12,495

               1,3518

               12,559

               1,3519

               12,623

               1,3520

               12,686

               1,3521

               12,750

               1,3522

               12,813

               1,3523

               12,877

               1,3524

               12,940

               1,3525

               13,004

               1,3526

               13,067

               1,3527

               13,131

               1,3528

               13,194

               1,3529

               13,258

               1,3530

               13,321

               1,3531

               13,384

               1,3532

               13,448

               1,3533

               13,511

               1,3534

               13,574

               1,3535

               13,637

               1,3536

               13,700

               1,3537

               13,763

               1,3538

               13,826

               1,3539

               13,890

               1,3540

               13,953

               1,3541

               14,016

               1,3542

               14,079

               1,3543

               14,141

               1,3544

               14,204

               1,3545

               14,267

               1,3546

               14,330

               1,3547

               14,393

               1,3548

               14,456

               1,3549

               14,518

               1,3550

               14,581

               1,3551

               14,644

               1,3552

               14,707

               1,3553

               14,769

               1,3554

               14,832

               1,3555

               14,894

               1,3556

               14,957

               1,3557

               15,019

               1,3558

               15,082

               1,3559

               15,144

               1,3560

               15,207

               1,3561

               15,269

               1,3562

               15,332

               1,3563

               15,394

               1,3564

               15,456

               1,3565

               15,518

               1,3566

               15,581

               1,3567

               15,643

               1,3568

               15,705

               1,3569

               15,767

               1,3570

               15,829

               1,3571

               15,891

               1,3572

               15,953

               1,3573

               16,016

               1,3574

               16,078

               1,3575

               16,140

               1,3576

               16,201

               1,3577

               16,263

               1,3578

               16,325

               1,3579

               16,387

               1,3580

               16,449

               1,3581

               16,511

               1,3582

               16,573

               1,3583

               16,634

               1,3584

               16,696

               1,3585

               16,758

               1,3586

               16,819

               1,3587

               16,881

               1,3588

               16,943

               1,3389

               17,004

               1,3590

               17,066

               1,3591

               17,127

               1,3592

               17,189

               1,3593

               17,250

               1,3594

               17,311

               1,3595

               17,373

               1,3596

               17,434

               1,3597

               17,496

               1,3598

               17,557

               1,3599

               17,618

               1,3600

               17,679

               1,3601

               17,741

               1,3602

               17,802

               1,3603

               17,863

               1,3604

               17,924

               1,3605

               17,985

               1,3606

               18,046

               1,3607

               18,107

               1,3608

               18,168

               1,3609

               18,229

               1,3610

               18,290

               1,3610

               18,351

               1,3611

               18,412

               1,3613

               18,473

               1,3614

               18,534

               1,3615

               18,595

               1,3616

               18,655

               1,3617

               18,716

               1,3618

               18,777

               1,3619

               18,837

               1,3620

               18,898

               1,3621

               18,959

               1,3622

               19,019

               1,3623

               19,080

               1,3624

               19,141

               1,3625

               19,201

               1,3626

               19,262

               1,3627

               19,322

               1,3628

               19,382

               1,3629

               19,443

               1,3630

               19,503

               1,3631

               19,564

               1,3632

               19,624

               1,3633

               19,684

               1,3634

               19,745

               1,3635

               19,805

               1,3636

               19,865

               1,3637

               19,925

               1,3638

               19,985

               1,3639

               20,045

               1,3640

               20,106

               1,3641

               20,166

               1,3642

               20,226

               1,3643

               20,286

               1,3644

               20,346

               1,3645

               20,406

               1,3646

               20,466

               1,3647

               20,525

               1,3648

               20,585

               1,3649

               20,645

               1,3650

               20,705

               1,3651

               20,765

               1,3652

               20,825

               1,3653

               20,884

               1,3654

               20,944

               1,3655

               21,004

               1,3656

               21,063

               1,3657

               21,123

               1,3658

               21,183

               1,3659

               21,242

               1,3660

               21,302

               1,3661

               21,361

               1,3662

               21,421

               1,3563

               21,480

               1,3664

               21,540

               1,3665

               21,599

               1,3666

               21,658

               1,3667

               21,718

               1,3668

               21,777

               1,3669

               21,836

               1,3670

               21,896

               1,3671

               21,955

               1,3672

               22,014

               1,1673

               22,073

               1,3674

               22,132

               1,3675

               22,192

               1,3676

               22,251

               1,1677

               22,310

               1,3678

               22,369

               1,3679

               22,428

               1,3680

               22,487

               1,3681

               22,546

               1,3682

               22,605

               1,3683

               22,664

               1,3684

               22,723

               1,3685

               22,781

               1,3686

               22,840

               1,3687

               22,899

               1,3688

               22,958

               1,3689

               23,017

               1,3690

               23,075

               1,3691

               23,134

               1,3692

               23,193

               1,3693

               23,251

               1,3694

               23,310

               1,3695

               23,369

               1,3696

               23,427

               1,3697

               23,486

               1,3698

               23,544

               1,3699

               23,603

               1,3700

               23,661

               1,3701

               23,720

               1,3702

               23,778

               1,3703

               23,836

               1,3704

               23,895

               1,3705

               23,953

               1,3706

               24,011

               1,3707

               24,070

               1,3708

               24,128

               1,3709

               24,186

               1,3710

               24,244

               1,3711

               24,302

               1,3712

               24,361

               1,3713

               24,419

               1,3714

               24,477

               1,3715

               24,535

               1,3716

               24,593

               1,3717

               24,651

               1,3718

               24,709

               1,3719

               24,767

               1,3720

               24,825

               1,3721

               24,883

               1,3722

               24,941

               1,3723

               24,998

               1,3724

               25,056

               1,3725

               25,114

               1,3726

               25,172

               1,3727

               25,230

               1,3728

               25,287

               1,3729

               25,345

               1,3730

               25,403

               1,3731

               25,460

               1,3732

               25,518

               1,3733

               25,576

               1,3734

               25,633

               1,3735

               25,691

               1,3736

               25,748

               1,3737

               25,806

               1,3738

               25,863

               1,3739

               25,921

               1,3740

               25,978

               1,3741

               26,035

               1,3742

               26,093

               1,3743

               26,150

               1,3744

               26,207

               1,3745

               26,265

               1,3746

               26,322

               1,3747

               26,379

               1,3748

               26,436

               1,3749

               26,493

               1,3750

               26,551

               1,3751

               26,608

               1,3752

               26,665

               1,3753

               26,722

               1,3754

               26,779

               1,3755

               26,836

               1,3756

               26,893

               1,3757

               26,950

               1,3758

               27,007

               1,3759

               27,064

               1,3760

               27,121

               1,3761

               27,178

               1,3762

               27,234

               1,3763

               27,291

               1,3764

               27,348

               1,3765

               27,405

               1,3765

               27,462

               1,3767

               27,518

               1,3768

               27,575

               1,3769

               27,632

               1,3770

               27,688

               1,3771

               27,745

               1,3772

               27,802

               1,3773

               27,858

               1,3774

               27,915

               1,3775

               27,971

               1,3776

               28,028

               1,3777

               28,084

               1,3778

               28,141

               1,3779

               28,197

               1,3780

               28,253

               1,3781

               28,310

               1,3782

               28,366

               1,3783

               28,422

               1,3784

               28,479

               1,3785

               28,535

               1,3786

               28,591

               1,3787

               28,648

               1,3788

               28,704

               1,3789

               28,760

               1,3790

               28,816

               1,3791

               28,872

               1,3792

               28,928

               1,3793

               28,984

               1,3794

               29,040

               1,3795

               29,096

               1,3796

               29,152

               1,3797

               29,208

               1,3798

               29,264

               1,3799

               29,320

               1,3800

               29,376

               1,3801

               29,432

               1,3802

               29,488

               1,3803

               29,544

               1,3804

               29,600

               1,3805

               29,655

               1,3806

               29,711

               1,3807

               29,767

               1,3808

               29,823

               1,3809

               29,878

               1,3810

               29,934

               1,3811

               29,989

               1,3812

               30,045

               1,3813

               30,101

               1,3814

               30,156

               1,3815

               30,212

               1,3816

               30,267

               1,3817

               30,323

               1,3818

               30,378

               1,3819

               30,434

               1,3820

               30,489

               1,3821

               30,544

               1,3822

               30,600

               1,3823

               30,655

               1,3824

               30,711

               1,3825

               30,766

               1,3826

               30,821

               1,3827

               30,876

               1,3828

               30,932

               1,3829

               30,987

               1,3830

               31,042

               1,3831

               31,097

               1,3832

               31,152

               1,3833

               31,207

               1,3834

               31,262

               1,3835

               31,317

               1,3836

               31,372

               1,3837

               31,428

               1,3838

               31,482

               1,3839

               31,537

               1,3840

               31,592

               1,3841

               31,647

               1,3842

               31,702

               1,3843

               31,757

               1,3844

               31,812

               1,3845

               31,867

               1,3846

               31,922

               1,3847

               31,976

               1,3848

               32,031

               1,3849

               32,086

               1,3850

               32,140

               1,3851

               32,195

               1,3852

               32,250

               1,3853

               32,304

               1,3854

               32,359

               1,3855

               32,414

               1,3856

               32,468

               1,3857

               32,523

               1,3858

               32,577

               1,3859

               32,632

               1,3860

               32,686

               1,3861

               32,741

               1,3862

               32,795

               1,3863

               32,849

               1,3864

               32,904

               1,3865

               32,958

               1,3866

               33,013

               1,3867

               33,067

               1,3868

               33,121

               1,3889

               33,175

               1,3870

               33,230

               1,3871

               33,284

               1,3872

               33,338

               1,3873

               33,392

               1,3874

               33,446

               1,3875

               33,500

               1,3876

               33,555

               1,3877

               33,609

               1,3878

               33,663

               1,3879

               33,717

               1,3880

               33,771

               1,3881

               33,825

               1,3882

               33,879

               1,3883

               33,933

               1,3884

               33,987

               1,3885

               34,040

               1,3886

               34,094

               1,3887

               34,148

               1,3888

               34,202

               1,3889

               34,256

               1,3890

               34,310

               1,3891

               34,363

               1,3892

               34,417

               1,3893

               34,471

               1,3894

               34,524

               1,3895

               34,578

               1,3896

               34,632

               1,3897

               34,685

               1,3898

               34,739

               1,3899

               34,793

               1,3900

               34,846

               1,3901

               34,900

               1,3902

               34,953

               1,3903

               35,007

               1,3904

               35,060

               1,3905

               35,114

               1,3906

               35,167

               1,3907

               35,220

               1,3908

               35,274

               1,3909

               35,327

               1,3910

               35,380

               1,3911

               35,434

               1,3912

               35,487

               1,3913

               35,540

               1,3914

               35,593

               1,3915

               35,647

               1,3916

               35,700

               1,3917

               35,753

               1,3918

               35,806

               1,3919

               35,859

               1,3920

               35,912

               1,3921

               35,966

               1,3922

               36,019

               1,3923

               36,072

               1,3924

               36,125

               1,3925

               36,178

               1,3926

               36,231

               1,3927

               36,284

               1,3928

               36,337

               1,3929

               36,389

               1,3930

               36,442

               1,3931

               36,495

               1,3932

               36,548

               1,3933

               36,601

               1,3934

               36,654

               1,3935

               36,706

               1,3936

               36,759

               1,3937

               36,812

               1,3938

               36,865

               1,3939

               36,917

               1,3940

               36,970

               1,3941

               37,023

               1,3942

               37,075

               1,3943

               37,128

               1,3944

               37,180

               1,3945

               37,233

               1,3946

               37,286

               1,3947

               37,338

               1,3948

               37,391

               1,3949

               37,443

               1,3950

               37,495

               1,3951

               37,548

               1,3952

               37,600

               1,3953

               37,653

               1,3954

               37,705

               1,3955

               37,757

               1,3956

               37,810

               1,3957

               37,862

               1,3958

               37,914

               1,3959

               37,967

               1,3960

               38,019

               1,3961

               38,071

               1,3962

               38,123

               1,3963

               38,175

               1,3964

               38,228

               1,3965

               38,280

               1,3966

               38,332

               1,3967

               38,384

               1,3968

               38,436

               1,3969

               38,488

               1,3970

               38,540

               1,3971

               38,592

               1,3972

               38,644

               1,3973

               38,696

               1,3974

               38,748

               1,3975

               38,800

               1,3976

               38,852

               1,3977

               38,904

               1,3978

               38,955

               1,3979

               39,007

               1,3980

               39,059

               1,3981

               39,111

               1,3982

               39,163

               1,3983

               39,214

               1,3984

               39,266

               1,3985

               39,318

               1,3986

               39,370

               1,3987

               39,421

               1,3988

               39,473

               1,3989

               39,525

               1,3990

               39,576

               1,3991

               39,628

               1,3992

               39,679

               1,3993

               39,731

               1,3994

               39,782

               1,3995

               39,834

               1,3996

               39,885

               1,3997

               39,937

               1,3998

               39,988

               1,3999

               40,040

               1,4000

               40,091

               1,4001

               40,142

               1,4002

               40,194

               1,4003

               40,245

               1,4004

               40,296

               1,4005

               40,348

               1,4006

               40,399

               1,4007

               40,450

               1,4008

               40,501

               1,4009

               40,553

               1,4010

               40,604

               1,4011

               40,655

               1,4012

               40,706

               1,4013

               40,757

               1,4014

               40,808

               1,4015

               40,860

               1,4016

               40,911

               1,4017

               40,962

               1,4018

               41,013

               1,4019

               41,064

               1,4020

               41,115

               1,4021

               41,166

               1,4022

               41,217

               1,4023

               41,268

               1,4024

               41,318

               1,4025

               41,369

               1,4026

               41,420

               1,4027

               41,471

               1,4028

               41,522

               1,4029

               41,573

               1,4030

               41,623

               1,4031

               41,674

               1,4032

               41,725

               1,4033

               41,776

               1,4034

               41,826

               1,4035

               41,877

               1,4036

               41,928

               1,4037

               41,978

               1,4038

               42,029

               1,4039

               42,080

               1,4040

               42,130

               1,4041

               42,181

               1,4042

               42,231

               1,4043

               42,282

               1,4044

               42,332

               1,4045

               42,383

               1,4046

               42,433

               1,4047

               42,484

               1,4048

               42,534

               1,4049

               42,585

               1,4050

               42,635

               1,4051

               42,685

               1,4052

               42,736

               1,4053

               42,786

               1,4054

               42,836

               1,4055

               42,887

               1,4056

               42,937

               1,4057

               42,987

               1,4058

               43,037

               1,4059

               43,088

               1,4060

               43,138

               1,4061

               43,188

               1,4062

               43,238

               1,4063

               43,288

               1,4064

               43,338

               1,4065

               43,388

               1,4066

               43,439

               1,4067

               43,489

               1,4068

               43,539

               1,4069

               43,589

               1,4070

               43,639

               1,4071

               43,689

               1,4072

               43,739

               1,4073

               43,789

               1,4074

               43,838

               1,4075

               43,888

               1,4076

               43,938

               1,4077

               43,988

               1,4078

               44,038

               1,4079

               44,088

               1,4080

               44,138

               1,4081

               44,187

               1,4082

               44,237

               1,4083

               44,287

               1,4084

               44,337

               1,4085

               44,386

               1,4086

               44,436

               1,4087

               44,486

               1,4088

               44,535

               1,4089

               44,585

               1,4090

               44,635

               1,4091

               44,684

               1,4092

               44,734

               1,4093

               44,783

               1,4094

               44,833

               1,4095

               44,882

               1,4096

               44,932

               1,4097

               44,981

               1,4098

               45,031

               1,4099

               45,080

               1,4100

               45,130

               1,4101

               43,179

               1,4102

               45,228

               1,4103

               45,278

               1,4104

               45,327

               1,4105

               45,376

               1,4106

               45,426

               1,4107

               45,475

               1,4108

               45,524

               1,4109

               45,574

               1,4110

               45,623

               1,4111

               45,672

               1,4112

               45,721

               1,4113

               45,770

               1,4114

               45,820

               1,4115

               45,869

               1,4116

               45,918

               1,4117

               46,967

               1,4118

               46,016

               1,4119

               46,065

               1,4120

               46,114

               1,4121

               46,163

               1,4122

               46,212

               1,4123

               46,261

               1,4124

               46,310

               1,4125

               46,359

               1,4126

               46,408

               1,4127

               46,457

               1,4128

               46,506

               1,4129

               46,555

               1,4130

               46,604

               1,4131

               46,652

               1,4132

               46,701

               1,4133

               46,750

               1,4134

               46,799

               1,4135

               46,848

               1,4136

               46,896

               1,4137

               46,945

               1,4138

               46,994

               1,4139

               47,043

               1,4140

               47,091

               1,4141

               47,140

               1,4141

               47,188

               1,4143

               47,237

               1,4144

               47,286

               1,4145

               47,334

               1,4146

               47,383

               1,4147

               47,431

               1,4148

               47,480

               1,4149

               47,528

               1,4150

               47,577

               1,4151

               47,625

               1,4152

               47,674

               1,4153

               47,722

               1,4154

               47,771

               1,4155

               47,819

               1,4156

               47,868

               1,4157

               47,916

               1,4158

               47,964

               1,4159

               48,013

               1,4160

               48,061

               1,4161

               48,109

               1,4162

               48,158

               1,4163

               48,206

               1,4164

               48,254

               1,4165

               48,302

               1,4166

               48,350

               1,4167

               48,399

               1,4168

               48,447

               1,4169

               48,495

               1,4170

               48,543

               1,4171

               48,591

               1,4172

               48,639

               1,4173

               48,687

               1,4174

               48,735

               1,4175

               48,784

               1,4176

               48,832

               1,4177

               48,880

               1,4178

               48,928

               1,4179

               48,976

               1,4180

               49,023

               1,4181

               49,071

               1,4182

               49,119

               1,4183

               49,167

               1,4184

               49,215

               1,4185

               49,263

               1,4186

               49,311

               1,4187

               49,359

               1,4188

               49,407

               1,4189

               49,454

               1,4190

               49,502

               1,4191

               49,550

               1,4192

               49,598

               1,4193

               49,645

               1,4194

               49,693

               1,4195

               49,741

               1,4196

               49,788

               1,4197

               49,836

               1,4198

               49,884

               1,4199

               49,931

               1,4200

               49,979

               1,4201

               50,027

               1,4202

               50,074

               1,4203

               50,122

               1,4204

               50,169

               1,4205

               50,217

               1,4206

               50,264

               1,4207

               50,312

               1,4208

               50,359

               1,4209

               50,407

               1,4210

               50,454

               1,4211

               50,502

               1,4212

               50,549

               1,4213

               50,596

               1,4214

               50,644

               1,4215

               50,691

               1,4216

               50,738

               1,4217

               50,786

               1,4218

               50,833

               1,4219

               50,880

               1,4220

               50,928

               1,4221

               50,975

               1,4222

               51,022

               1,4223

               51,069

               1,4224

               51,116

               1,4225

               51,164

               1,4226

               51,211

               1,4227

               51,258

               1,4228

               51,305

               1,4229

               51,352

               1,4230

               51,399

               1,4231

               51,446

               1,4232

               51,493

               1,4233

               51,540

               1,4234

               51,587

               1,4235

               51,634

               1,4236

               51,681

               1,4237

               51,728

               1,4238

               51,775

               1,4239

               51,822

               1,4240

               51,869

               1,4241

               51,916

               1,4242

               51,963

               1,4243

               52,010

               1,4244

               52,057

               1,4245

               52,104

               1,4246

               52,150

               1,4247

               52,197

               1,4248

               52,244

               1,4249

               52,291

               1,4250

               52,338

               1,4251

               52,384

               1,4252

               52,431

               1,4253

               52,478

               1,4254

               52,524

               1,4255

               52,571

               1,4256

               52,618

               1,4257

               52,664

               1,4258

               52,711

               1,4259

               52,758

               1,4260

               52,804

               1,4261

               52,851

               1,4261

               52,897

               1,4263

               52,944

               1,4264

               52,990

               1,4265

               53,037

               1,4266

               53,083

               1,4267

               53,130

               1,4268

               53,176

               1,4269

               53,223

               1,4270

               53,269

               1,4271

               53,316

               1,4272

               53,362

               1,4273

               53,408

               1,4274

               53,455

               1,4275

               53,501

               1,4276

               53,548

               1,4277

               53,594

               1,4278

               53,640

               1,4279

               53,686

               1,4280

               53,733

               1,4281

               53,779

               1,4282

               53,825

               1,4283

               53,871

               1,4284

               53,918

               1,4285

               53,964

               1,4286

               54,010

               1,4287

               54,056

               1,4288

               54,102

               1,4289

               54,148

               1,4290

               54,194

               1,4291

               54,241

               1,4292

               54,287

               1,4293

               54,333

               1,4294

               54,379

               1,4295

               54,425

               1,4296

               54,471

               1,4297

               54,517

               1,4298

               54,563

               1,4299

               54,609

               1,4300

               54,655

               1,4301

               54,701

               1,4302

               54,746

               1,4303

               54,792

               1,4304

               54,838

               1,4305

               54,884

               1,4306

               54,930

               1,4307

               54,976

               1,4308

               55,022

               1,4309

               55,067

               1,4310

               55,113

               1,4311

               55,159

               1,4312

               55,205

               1,4313

               55,250

               1,4314

               55,296

               1,4315

               55,342

               1,4316

               55,388

               1,4317

               55,433

               1,4318

               55,479

               1,4319

               55,524

               1,4320

               55,570

               1,4321

               55,616

               1,4322

               55,661

               1,4323

               55,707

               1,4324

               55,752

               1,4325

               55,798

               1,4326

               55,844

               1,4327

               55,889

               1,4328

               55,935

               1,4329

               55,980

               1,4330

               56,026

               1,4331

               56,071

               1,4332

               56,116

               1,4133

               56,162

               1,4334

               56,207

               1,4335

               56,253

               1,4336

               56,298

               1,4337

               56,343

               1,4338

               56,389

               1,4339

               56,434

               1,4340

               56,479

               1,4341

               56,525

               1,4342

               56,570

               1,4343

               56,615

               1,4344

               56,660

               1,4345

               56,706

               1,4346

               56,751

               1,4347

               56,796

               1,4348

               56,841

               1,4349

               56,887

               1,4350

               56,932

               1,4351

               56,977

               1,4352

               57,022

               1,4353

               57,067

               1,4354

               57,112

               1,4355

               57,157

               1,4356

               57,202

               1,4357

               57,247

               1,4358

               57,292

               1,4359

               57,337

               1,4360

               57,382

               1,4361

               57,427

               1,4362

               57,472

               1,4363

               57,517

               1,4364

               57,562

               1,4365

               57,607

               1,4366

               57,652

               1,4367

               57,697

               1,4368

               57,742

               1,4369

               57,787

               1,4370

               57,832

               1,4371

               57,877

               1,4372

               57,921

               1,4373

               57,966

               1,4374

               58,011

               1,4375

               58,056

               1,4376

               58,101

               1,4377

               58,145

               1,4378

               58,190

               1,4379

               58,235

               1,4380

               58,279

               1,4381

               58,324

               1,4382

               58,369

               1,4383

               58,413

               1,4384

               53,458

               1,4385

               58,503

               1,4386

               58,547

               1,4387

               58,592

               1,4388

               58,637

               1,4389

               58,681

               1,4390

               58,726

               1,4391

               58,770

               1,4392

               58,815

               1,4393

               58,859

               1,4394

               58,904

               1,4395

               58,948

               1,4396

               58,993

               1,4397

               59,037

               1,4398

               59,082

               1,4399

               59,126

               1,4400

               59,170

               1,4401

               59,215

               1,4402

               59,259

               1,4403

               59,304

               1,4404

               59,348

               1,4405

               59,392

               1,4406

               59,437

               1,4407

               59,481

               1,4408

               59,525

               1,4409

               59,569

               1,4410

               59,614

               1,4411

               59,658

               1,4412

               59,702

               1,4413

               59,746

               1,4414

               59,791

               1,4415

               59,835

               1,4416

               59,879

               1,4417

               59,923

               1,4418

               59,967

               1,4419

               60,011

               1,4420

               60,056

               1,4421

               60,100

               1,4422

               60,144

               1,4423

               60,188

               1,4424

               60,232

               1,4425

               60,276

               1,4426

               60,320

               1,4427

               60,364

               1,4428

               60,408

               1,4429

               60,452

               1,4430

               60,496

               1,4431

               60,540

               1,4432

               60,584

               1,4433

               60,628

               1,4434

               60,672

               1,4435

               60,716

               1,4436

               60,759

               1,4437

               60,803

               1,4438

               60,847

               1,4439

               60,891

               1,4440

               60,935

               1,4441

               60,979

               1,4442

               61,023

               1,4443

               61,066

               1,4444

               61,110

               1,4445

               61,154

               1,4446

               61,198

               1,4447

               61,241

               1,4448

               61,285

               1,4449

               61,329

               1,4450

               61,372

               1,4451

               61,416

               1,4452

               61,460

               1,4453

               61,503

               1,4454

               61,547

               1,4455

               61,591

               1,4456

               61,634

               1,4457

               61,678

               1,4458

               61,721

               1,4459

               61,765

               1,4460

               61,809

               1,4461

               61,852

               1,4462

               61,896

               1,4463

               61,939

               1,4464

               62,983

               1,4465

               62,026

               1,4466

               62,070

               1,4467

               62,113

               1,4468

               62,156

               1,4469

               62,200

               1,4470

               62,243

               1,4471

               62,287

               1,4472

               62,330

               1,4473

               62,373

               1,4474

               62,417

               1,4475

               62,460

               1,4476

               62,503

               1,4477

               62,547

               1,4478

               62,590

               1,4479

               62,633

               1,4480

               62,677

               1,4481

               62,720

               1,4482

               62,763

               1,4483

               62,806

               1,4184

               62,849

               1,4485

               62,893

               1,4486

               62,936

               1,4487

               62,979

               1,4488

               63,022

               1,4489

               63,065

               1,4490

               63,108

               1,4491

               63,152

               1,4492

               63,195

               1,4493

               63,238

               1,4494

               63,281

               1,4495

               63,324

               1,4496

               63,367

               1,4497

               63,410

               1,4498

               63,453

               1,4499

               63,496

               1,4500

               63,539

               1,4501

               63,582

               1,4502

               63,625

               1,4503

               63,668

               1,4304

               63,711

               1,4505

               63,754

               1,4506

               63,797

               1,4507

               63,840

               1,4508

               63,882

               1,4509

               63,925

               1,4510

               63,968

               1,4511

               64,011

               1,4512

               64,054

               1,4513

               64,097

               1,4514

               64,139

               1,4515

               64,182

               1,4516

               64,225

               1,4517

               64,268

               1,4518

               64,311

               1,4519

               64,353

               1,4520

               64,396

               1,4521

               64,439

               1,4522

               64,481

               1,4523

               64,524

               1,4524

               64,567

               1,4525

               64,609

               1,4526

               64,652

               1,4527

               64,695

               1,4528

               64,737

               1,4529

               64,780

               1,4530

               64,823

               1,4531

               64,865

               1,4532

               64,908

               1,4533

               64,950

               1,4534

               64,993

               1,4535

               65,035

               1,4536

               65,078

               1,4537

               65,120

               1,4538

               65,163

               1,4539

               65,205

               1,4540

               65,248

               1,4541

               65,290

               1,4542

               65,333

               1,4543

               65,375

               1,4544

               65,417

               1,4545

               65,460

               1,4546

               65,502

               1,4547

               65,544

               1,4548

               65,587

               1,4549

               65,629

               1,4550

               65,672

               1,4551

               65,714

               1,4552

               65,756

               1,4553

               65,798

               1,4554

               65,841

               1,4555

               65,883

               1,4556

               65,925

               1,4557

               65,967

               1,4558

               66,010

               1,4559

               66,052

               1,4560

               66,094

               1,4561

               66,136

               1,4562

               66,178

               1,4563

               66,221

               1,4564

               66,263

               1,4565

               66,305

               1,4566

               66,347

               1,4567

               66,389

               1,4568

               66,431

               1,4569

               66,473

               1,4570

               66,515

               1,4571

               66,557

               1,4572

               66,599

               1,4573

               66,641

               1,4574

               66,683

               1,4575

               66,725

               1,4576

               66,767

               1,4577

               66,809

               1,4578

               66,851

               1,4579

               66,893

               1,4580

               66,935

               1,4581

               66,977

               1,4582

               67,019

               1,4583

               67,061

               1,4584

               67,103

               1,4585

               67,145

               1,4586

               67,186

               1,4587

               67,228

               1,4588

               67,270

               1,4589

               67,312

               1,4590

               67,354

               1,4591

               67,396

               1,4592

               67,437

               1,4593

               67,479

               1,4594

               67,521

               1,4595

               67,563

               1,4596

               67,604

               1,4597

               67,646

               1,4598

               67,688

               1,4599

               67,729

               1,4600

               67,771

               1,4601

               67,813

               1,4602

               67,854

               1,4603

               67,896

               1,4604

               67,938

               1,4605

               67,979

               1,4606

               68,021

               1,4607

               68,063

               1,4608

               68,104

               1,4609

               68,146

               1,4610

               68,187

               1,4611

               68,229

               1,4611

               68,270

               1,4613

               68,312

               1,4614

               68,353

               1,4615

               68,395

               1,4616

               68,436

               1,4617

               68,478

               1,4618

               68,519

               1,4619

               68,561

               1,4620

               68,602

               1,4621

               68,643

               1,4622

               68,685

               1,4623

               68,726

               1,4624

               68,768

               1,4625

               68,809

               1,4626

               68,850

               1,4627

               68,892

               1,4628

               68,933

               1,4629

               68,974

               1,4630

               69,016

               1,4631

               69,057

               1,4632

               69,098

               1,4633

               69,139

               1,4634

               69,181

               1,4635

               69,222

               1,4636

               69,263

               1,4637

               69,304

               1,4638

               69,346

               1,4639

               69,387

               1,4640

               69,428

               1,4641

               69,469

               1,4642

               69,510

               1,4643

               69,551

               1,4644

               69,593

               1,4645

               69,634

               1,4646

               69,675

               1,4647

               69,716

               1,4648

               69,757

               1,4649

               69,798

               1,4650

               69,839

               1,4651

               69,880

               1,4652

               69,921

               1,4653

               69,962

               1,4654

               70,003

               1,4655

               70,044

               1,4656

               70,085

               1,4657

               70,126

               1,4658

               70,167

               1,4659

               70,208

               1,4660

               70,249

               1,4661

               70,290

               1,4662

               70,331

               1,4663

               70,372

               1,4664

               70,413

               1,4665

               70,453

               1,4666

               70,494

               1,4667

               70,535

               1,4668

               70,576

               1,4669

               70,617

               1,4670

               70,658

               1,4671

               70,698

               1,4672

               70,739

               1,4673

               70,780

               1,4674

               70,821

               1,4675

               70,861

               1,4676

               70,902

               1,4677

               70,943

               1,4678

               70,984

               1,4679

               71,024

               1,4680

               71,065

               1,4681

               71,106

               1,4681

               71,146

               1,4683

               71,187

               1,4684

               71,228

               1,4685

               71,268

               1,4686

               71,309

               1,4687

               71,349

               1,4688

               71,390

               1,4689

               71,431

               1,4690

               71,471

               1,4691

               71,512

               1,4692

               71,552

               1,4693

               71,593

               1,4694

               71,633

               1,4695

               71,674

               1,4696

               71,714

               1,4697

               71,755

               1,4698

               71,795

               1,4699

               71,836

               1,4700

               71,876

               1,4701

               71,917

               1,4702

               71,957

               1,4703

               71,998

               1,4704

               72,038

               1,4705

               72,078

               1,4706

               72,119

               1,4707

               72,159

               1,4708

               72,199

               1,4709

               72,240

               1,4710

               72,280

               1,4711

               72,320

               1,4712

               72,361

               1,4713

               72,401

               1,4714

               72,441

               1,4715

               72,482

               1,4716

               72,522

               1,4717

               72,562

               1,4718

               72,602

               1,4719

               72,643

               1,4720

               72,683

               1,4721

               72,723

               1,4722

               72,763

               1,4723

               72,803

               1,4724

               72,843

               1,4725

               72,884

               1,4726

               72,924

               1,4727

               72,964

               1,4728

               73,004

               1,4729

               73,044

               1,4730

               73,084

               1,4731

               73,124

               1,4732

               73,164

               1,4733

               73,204

               1,4734

               73,244

               1,4735

               73,285

               1,4736

               73,325

               1,4737

               73,365

               1,4738

               73,405

               1,4739

               73,445

               1,4740

               73,485

               1,4741

               73,524

               1,4742

               73,564

               1,4743

               73,604

               1,4744

               73,644

               1,4745

               73,684

               1,4746

               73,724

               1,4747

               73,764

               1,4748

               73,804

               1,4749

               73,844

               1,4750

               73,884

               1,4751

               73,924

               1,4752

               73,963

               1,4753

               74,003

               1,4754

               74,043

               1,4755

               74,083

               1,4756

               74,123

               1,4757

               74,162

               1,4758

               74,202

               1,4759

               74,242

               1,4760

               74,282

               1,4761

               74,321

               1,4762

               74,361

               1,4763

               74,401

               1,4764

               74,441

               1,4765

               74,480

               1,4766

               74,520

               1,4767

               74,560

               1,4768

               74,599

               1,4769

               74,639

               1,4770

               74,678

               1,4771

               74,718

               1,1772

               74,758

               1,4773

               74,797

               1,4774

               74,837

               1,4775

               74,876

               1,4776

               74,916

               1,4777

               74,956

               1,4778

               74,995

               1,4779

               75,035

               1,4780

               75,074

               1,1781

               75,114

               1,4782

               75,153

               1,4783

               75,193

               1,4784

               75,232

               1,4785

               75,272

               1,4786

               75,311

               1,4787

               75,350

               1,4788

               75,390

               1,4789

               75,429

               1,4790

               75,469

               1,4791

               75,508

               1,4792

               75,547

               1,4793

               75,587

               1,4794

               75,626

               1,4795

               75,666

               1,4796

               75,705

               1,4797

               75,744

               1,4798

               75,784

               1,4799

               75,823

               1,4800

               75,862

               1,4801

               75,901

               1,4802

               75,941

               1,4803

               75,980

               1,4804

               76,019

               1,4805

               76,058

               1,4806

               76,098

               1,4807

               76,137

               1,4808

               76,176

               1,4809

               76,215

               1,4810

               76,254

               1,4810

               76,294

               1,4812

               76,333

               1,4813

               76,372

               1,4814

               76,411

               1,4815

               76,450

               1,4816

               76,489

               1,4817

               76,528

               1,4818

               76,567

               1,4819

               76,607

               1,4820

               76,646

               1,4821

               76,685

               1,4822

               76,724

               1,4823

               76,763

               1,4824

               76,802

               1,4825

               76,841

               1,4826

               76,880

               1,4827

               76,919

               1,4828

               76,958

               1,4829

               76,997

               1,4830

               77,036

               1,4831

               77,075

               1,4832

               77,113

               1,4833

               77,152

               1,4834

               77,191

               1,4835

               77,230

               1,4336

               77,269

               1,4837

               77,308

               1,4838

               77,347

               1,4839

               77,386

               1,4840

               77,425

               1,4841

               77,463

               1,4842

               77,502

               1,4843

               77,541

               1,4844

               77,580

               1,4845

               77,619

               1,4846

               77,657

               1,4847

               77,696

               1,4848

               77,735

               1,4849

               77,774

               1,4850

               77,812

               1,4851

               77,851

               1,4852

               77,890

               1,4853

               77,928

               1,4854

               77,967

               1,4855

               78,006

               1,4856

               78,045

               1,4857

               78,083

               1,4858

               78,122

               1,4859

               78,160

               1,4860

               78,199

               1,4861

               78,238

               1,4862

               78,276

               1,4863

               78,315

               1,4864

               78,353

               1,4865

               78,392

               1,4866

               78,431

               1,4867

               78,469

               1,4868

               78,508

               1,4869

               78,546

               1,4870

               78,585

               1,4871

               78,623

               1,4872

               78,662

               1,4873

               78,700

               1,4874

               78,739

               1,4875

               78,777

               1,4876

               78,816

               1,4877

               78,854

               1,4878

               78,892

               1,4879

               78,931

               1,4880

               78,969

               1,4881

               79,008

               1,4882

               79,046

               1,4883

               79,084

               1,4884

               79,123

               1,4885

               79,161

               1,4886

               79,199

               1,4887

               79,238

               1,4888

               79,276

               1,4889

               79,314

               1,4890

               79,353

               1,4891

               79,391

               1,4892

               79,429

               1,4893

               79,468

               1,4894

               79,506

               1,4895

               79,544

               1,4896

               79,582

               1,4897

               79,620

               1,4898

               79,659

               1,4899

               79,697

               1,4900

               79,735

               1,4901

               79,773

               1,4902

               79,811

               1,4903

               79,850

               1,4904

               79,888

               1,4905

               79,926

               1,4906

               79,964

               1,4907

               80,002

               1,4908

               80,040

               1,4909

               80,078

               1,4910

               80,116

               1,4911

               80,154

               1,4912

               80,192

               1,4913

               80,231

               1,4914

               80,269

               1,4915

               80,307

               1,4916

               80,345

               1,4917

               80,383

               1,4918

               80,421

               1,4919

               80,459

               1,4920

               80,497

               1,4921

               80,534

               1,4922

               80,572

               1,4923

               80,610

               1,4924

               80,648

               1,4925

               80,686

               1,4926

               80,724

               1,4927

               80,762

               1,4928

               80,800

               1,4929

               80,838

               1,4930

               80,876

               1,4931

               80,913

               1,4932

               80,951

               1,4933

               80,989

               1,4934

               81,027

               1,4935

               81,065

               1,4936

               81,103

               1,4937

               81,140

               1,4938

               81,178

               1,4939

               81,216

               1,4940

               81,254

               1,4941

               81,291

               1,4942

               81,329

               1,4943

               81,367

               1,4944

               81,405

               1,4945

               81,442

               1,4946

               81,480

               1,4947

               81,518

               1,4948

               81,555

               1,4949

               81,593

               1,4950

               81,631

               1,4951

               81,668

               1,4952

               81,706

               1,4953

               81,744

               1,4954

               81,781

               1,4955

               81,819

               1,4956

               81,856

               1,4957

               81,894

               1,4958

               81,932

               1,4959

               81,969

               1,4960

               82,007

               1,4961

               82,044

               1,4962

               82,082

               1,4963

               82,119

               1,4964

               82,157

               1,4965

               82,194

               1,4966

               82,232

               1,4967

               82,269

               1,4968

               82,307

               1,4969

               82,344

               1,4970

               82,381

               1,4971

               82,419

               1,4972

               82,456

               1,4973

               82,494

               1,4974

               87,531

               1,4975

               82,569

               1,9976

               82,606

               1,4977

               82,643

               1,4978

               82,681

               1,4979

               82,718

               1,4980

               82,755

               1,4981

               82,793

               1,4982

               82,830

               1,4983

               82,867

               1,4984

               82,905

               1,4985

               82,942

               1,4986

               82,979

               1,4987

               83,016

               1,4988

               83,054

               1,4989

               83,091

               1,4990

               83,128

               1,4991

               83,165

               1,4992

               83,202

               1,4993

               83,240

               1,4994

               83,277

               1,4995

               83,314

               1,4996

               83,351

               1,4997

               83,388

               1,4998

               83,425

               1,4999

               83,463

               1,5000

               83,500

               1,5001

               83,537

               1,5002

               83,574

               1,5003

               83,611

               1,5004

               83,648

               1,5005

               83,685

               1,5006

               83,722

               1,5007

               83,759

               1,5008

               83,796

               1,5009

               83,833

               1,5010

               83,870

               1,5011

               83,907

               1,5012

               83,944

               1,5013

               83,981

               1,5014

               84,018

               1,5015

               84,055

               1,5016

               84,092

               1,5017

               84,129

               1,5018

               84,166

               1,5019

               84,203

               1,5020

               84,240

               1,5021

               84,277

               1,5022

               84,314

               1,5023

               84,351

               1,5024

               84,388

               1,5025

               84,424

               1,5026

               84,461

               1,5027

               84,498

               1,5028

               84,535

               1,5029

               84,572

               1,5030

               84,609

               1,5031

               84,645

               1,5032

               84,682

               1,5033

               84,719

               1,5034

               84,756

               1,5035

               84,792

               1,5036

               84,829

               1,5037

               84,866

               1,5038

               84,903

               1,5039

               84,939

               1,5040

               84,976

               1,5041

               85,013

               1,5042

               85,049

               1,5043

               85,086

               1,5044

               85,123

               1,5045

               85,159

               1,5046

               85,196

               1,5047

               85,233

               1,5048

               85,269

               1,5049

               85,306

               1,5050

               85,343

               1,5051

               85,379

               1,5052

               85,416

               1,5053

               85,452

               1,5054

               85,489

               1,5055

               85,525

               1,5056

               85,562

               1,5057

               85,598

               1,5058

               85,635

               1,5059

               85,672

               1,5060

               85,708

               1,5061

               85,744

               1,5062

               85,781

               1,5063

               85,817

               1,5064

               85,854

               1,5065

               85,890

               1,5066

               85,927

               1,5067

               85,963

               1,5068

               86,000

               1,5069

               86,036

               1,5070

               86,072

               1,5071

               86,109

               1,5072

               86,145

               1,5073

               86,182

               1,5074

               86,218

               1,5075

               86,254

               1,5076

               86,291

               1,5077

               86,327

               1,5078

               86,363

               1,5079

               86,399

         METODA 4.

      MJERENJE REDUCIRAJUĆIH ŠEĆERA IZRAŽENIH KAO INVERTNI ŠEĆERI

   (Metoda Berlinskog instituta)

      Opseg i područje primjene

               1.

               Ovom se metodom određuje količina reducirajućih šećera, izraženih kao invertni šećer, u polubijelom šećeru.

         2.   Definicija

   „Reducirajući šećeri izraženi kao invertni šećer”: količina reducirajućih šećera određena opisanom metodom.
   3.   Princip

   Otopina uzorka koji sadrži reducirajuće šećere koristi se za redukciju otopine bakrovog (II) kompleksa. Nastali bakrov (I) oksid tada se oksidira standardnom otopinom joda, čiji se suvišak određuje povratnom titracijom standardnom otopinom natrijevog tiosulfata.
   4.   Reagensi

   4.1.   Otopina bakra (II) (Müllerova otopina)
   4.1.1.   U 400 ml kipuće vode otopiti 35 g bakrovog (II) sulfata pentahidrata (CuSO4·5H2O). Ostaviti da se ohladi.
   4.1.2.   U 500 ml kipuće vode otopiti 173 g natrij-kalijevog tartarat tetrahidrata (Rochelle ili Seignette sol; KNaC4H4O6×4H2O) i 68 g bezvodnog natrijevog karbonata. Ostaviti da se ohladi.
   4.1.3.   Obje otopine (4.1.1. i 4.1.2.) preliti u odmjernu tikvicu od jedne litre i nadopuniti vodom do 1 litre. Dodati 2 g aktivnog ugljena, protresti, ostaviti da stoji nekoliko sati i profiltrirati preko debelog filter papira ili membranskog filtra.
   Ako se tijekom stajanja pojave male količine bakrovog (I) oksida, otopinu treba ponovo profiltrirati.
   4.2.   Otopina octene kiseline, 5 mol/litra
   4.3.   Otopina joda 0,01665 mol/litra (tj. 0,0333 N; 4,2258 g/litra)
   4.4.   Otopina natrijevog tiosulfata 0,0333 mol/litra
   4.5.   Otopina škroba: jednoj litri kipuće vode dodati suspenziju 5 g topljivog škroba u 30 ml vode. Ostaviti da vrije 3 minute, ostaviti da se ohladi i dodati, ako je potrebno, 10 mg živinog (II) jodida kao konzervans.
   5.   Oprema

   5.1.   Erlenmeyerova tikvica, 300 ml; birete i pipete
   5.2.   Kipuća vodena kupelj

   6.   Postupak

   6.1.   U Erlenmeyerovu tikvicu od 300 ml odvagati uzorak (10 g ili manje) koji sadrži do 30 mg invertnog šećera i otopiti u približno 100 ml vode.
   U Erlenmeyerovu tikvicu koja sadrži otopinu uzorka otpipetirati 10 ml otopine bakra (II) (4.1.). Sadržaj tikvice promiješati kružnim pokretima i tikvica se ostavi točno 10 minuta u kipućoj vodenoj kupelji (5.2.).
   Razina otopine u Erlenmeyerovoj tikvici mora biti barem 20 mm ispod razine vode u vodenoj kupelji. Tikvicu treba brzo ohladiti mlazom hladne vode. Tijekom ovog postupka otopina se ne smije miješati, jer bi u protivnom atmosferski kisik ponovo oksidirao istaloženi bakrov (I) oksid.
   Bez protresanja tikvice otpipetirati 5 ml octene kiseline 5 mol/litra (4.2.) i odmah iz birete dodati suvišak (između 20 i 40 ml) otopine joda 0,01665 mol/litra (4.3.).
   Promiješati kako bi se otopio talog bakra. Titrirati suvišak joda s otopinom natrijevog sulfata 0,0333 mol/litra (4.4.) koristeći otopinu škroba (4.5.) kao indikator. Indikator se dodaje pri kraju titracije.
   6.2.   Provesti slijepu probu s vodom. Ovo je potrebno provesti za svaku novu otopinu bakra (II) (4.4.). Titracija ne smije prijeći 0,1 ml.
   6.3.   Provesti hladnu kontrolnu probu s otopinom šećera. Ostaviti na sobnoj temperaturi 10 minuta kako bi reagirale sve eventualno prisutne reducirajuće tvari kao što je sumporni dioksid.
   7.   Izražavanje rezultata

   7.1.   Formula i metoda izračunavanja

   Volumen upotrijebljenog joda = ml 0,01665 mol/litra joda dodanog u suvišku minus ml 0,0333 mol/litra natrijevog tiosulfata utrošenog pri titraciji.
   Volumen (u ml) 0,01665 mol/litra utrošenog joda korigira se oduzimanjem:

               7.1.1.

               Broj ml utrošenih za slijepu probu provedenu s vodom (6.2.).

               7.1.2.

               Broj ml utrošenih za hladnu probu s otopinom šećera (6.3.).

               7.1.3.

               Vrijednosti od 2,0 ml za svakih 10 g saharoze u upotrijebljenom alikvotu, ili proporcionalne količine ako uzorak sadrži manje od 10 g saharoze (korekcija za saharozu).

         Nakon ovih korekcija, svaki ml otopine joda (4.3.) koji je reagirao, odgovara jednom miligramu invertnog šećera.
   Količina invertnog šećera, izražena kao postotak u uzorku, izračunava se na sljedeći način:

   pri čemu je:
   V1= broj ml otopine joda (4.3.) nakon korekcije,
   m0= masa upotrijebljenog uzorka, u gramima.
   7.2.   Ponovljivost

   Razlika između rezultata dva određivanja, koja na istom uzorku provodi isti analitičar istodobno ili neposredno jedno za drugim, u istim uvjetima, ne smije prelaziti 0,02 g na 100 g uzorka.
   METODA 5.

      MJERENJE REDUCIRAJUĆIH ŠEĆERA IZRAŽENIH KAO INVERTNI ŠEĆER

   (Metoda po Knightu i Allenu)
   1.   Opseg i područje primjene

   Ovom se metodom određuje količina reducirajućih šećera, izraženih kao invertni šećer u:

               —

               šećeru ili bijelom šećeru,

               —

               ekstra bijelom šećeru.

         2.   Definicija

   „Reducirajući šećeri izraženi kao invertni šećer”: količina reducirajućih šećera određena opisanom metodom.
   3.   Princip

   Otopini uzorka dodaje se u suvišku bakrovog (II) reagensa koji se reducira, a nereducirani dio se povratno titrira otopinom EDTA.
   4.   Reagensi

   4.1.   Otopina etilen diamin tetraoctene kiseline (di-natrijeva sol) (EDTA) 0,0025 mol/litra: otopiti 0,930 g EDTA u vodi i nadopuniti vodom do jedne litre.
   4.2.   Otopina mureksid indikatora: u 50 ml vode otopiti 0,25 g mureksida i pomiješati s 20 ml vodene otopine metilenskog modrila 0,2 g/100 ml.
   4.3.   Alkalni bakreni reagens: U približno 600 ml vode koja sadrži 40 ml 1,0 mol/litra natrijevog hidroksida, otopiti 25 grama bezvodnog natrijevog karbonata i 25 g kalij-natrijevog tartarat tetrahidrata. U približno 100 ml vode otopiti 6,0 grama bakrovog (II) sulfata pentahidrata (CuSO4·5H2O) i dodati otopini tartarata. Razrijediti vodom do 1 litre.

                  Napomena:

               otopina ima ograničen rok trajanja (jedan tjedan).

         4.4.   Standardna otopina invertnog šećera: u odmjernoj tikvici od 250 ml otopiti 23,750 g čiste saharoze (4.5.) u približno 120 ml vode, dodati 9 ml klorovodične kiseline (ζ = 1,16) i ostaviti da stoji osam dana pri sobnoj temperaturi. Otopinu dopuniti do 250 ml i provjeriti je li hidroliza potpuna mjerenjem polarimetrom ili saharimetrom u 200 mm cijevi. Vrijednost mora biti 11,80 ° ± 0,05 °S (vidi napomenu 8.). Otpipetirati 200 ml ove otopine u odmjernu tikvicu od 2 000 ml. Razrijediti vodom i uz protresanje (da ne bi došlo do prevelike lokalne alkalnosti) dodati 71,4 ml otopine natrijevog hidroksida (1 mol/litra) u kojoj je otopljeno 4 g benzojeve kiseline. Dopuniti do 2 000 ml da se dobije otopina invertnog šećera 1 g/100 ml. pH vrijednost ove otopine mora biti približno 3.
   Ovu stabilnu osnovnu otopinu smije se razrijediti samo neposredno prije upotrebe.
   4.5.   Čista saharoza: uzorak čiste saharoze koji sadrži invertnog šećera najviše 0,001 g/100 g.
   5.   Oprema

   5.1.   Epruvete: 150 mm × 20 mm.
   5.2.   Bijela porculanska zdjelica.
   5.3.   Analitička vaga točnosti 0,1 mg.
   6.   Postupak

   6.1.   U epruveti (5.1.) otopiti 5 g uzorka šećera u 5 ml hladne vode. Dodati 2,0 ml bakrovog reagensa (4.3.) i promiješati. Epruvetu pet minuta uroniti u kipuću vodenu kupelj, a zatim ohladiti u hladnoj vodi.
   6.2.   Otopinu iz epruvete se kvantitativno prenijeti u bijelu porculansku zdjelicu (5.2.) koristeći što manju količinu vode, dodati 3 kapi indikatora (4.2.) te titrirati otopinom EDTA (4.1.). V0 je utrošeni volumen otopine ml EDTA pri titraciji.
   Neposredno prije završne točke boja otopine mijenja se od zelene preko sive do ljubičaste, na završnoj točki. Ljubičasta boja zatim polako nestaje zbog oksidacije bakrovog (I) oksida u bakrov (II) oksid brzinom koja ovisi o koncentraciji prisutnog reduciranog bakra. Stoga završnoj točki titracije treba pristupiti prilično brzo.
   6.3.   Konstruirati baždarnu krivulju dodavajući poznate količine invertnog šećera (u obliku prikladno razrijeđene otopine 4.4.) k 5 g čiste saharoze (4.5.) i dodati dovoljnu količinu hladne vode tako da je ukupno dodano 5 ml otopine. Nacrtati dijagram volumena utrošenog pri titraciji (u ml) u ovisnosti o udjelu invertnog šećera dodanog k 5 g saharoze: dobiveni dijagram je linearan u području od 0,001 do 0,019 g/100 g invertnog šećera/100 g uzorka.
   7.   Izražavanje rezultata

   7.1.   Metoda izračunavanja

   Iz baždarne krivulje očitati udio invertnog šećera koji odgovara vrijednosti V0 ml EDTA upotrijebljene pri analizi uzorka.
   7.2.   Kod uzoraka za analizu s koncentracijom većom od 0,017g invertnog šećera/100 g uzorka, potrebno je količinu uzorka koji je uzet sukladno postupku (6.1.) odgovarajuće smanjiti, a uzorak za analizu dopuniti do 5 g s čistom saharozom (4.5.).
   7.3.   Ponovljivost

   Razlika između rezultata dvaju određivanja, koja provodi isti analitičar istovremeno ili neposredno jedno za drugim na istom uzorku te pod istim uvjetima, ne smije biti veća od 0,005 g na 100 g uzorka.
   8.   Napomena

   Za pretvorbu °S u polarimetrijske stupnjeve, podijeliti °S s 2,889 (cijevi od 200 mm; izvor svjetlosti koji se sastoji od natrijeve svjetiljke; instrument mora biti instaliran u prostoriji u kojoj je moguće održavati temperaturu na približno 20 °C).
   METODA 6.

      ODREĐIVANJE REDUCIRAJUĆIH ŠEĆERA IZRAŽENIH KAO INVERTNI ŠEĆER ILI DEKSTROZNI EKVIVALENT

   (Luff-Schoorlova metoda)
   1.   Opseg i područje primjene

   Ovom se metodom određuje:
   1.1.   Količina reducirajućih šećera izražena kao invertni šećer u:

               —

               otopini šećera,

               —

               otopini bijelog šećera,

               —

               otopini invertnog šećera,

               —

               otopini bijelog invertnog šećera,

               —

               sirupu invertnog šećerna,

               —

               sirupu bijelog invertnog šećernom.

         1.2.   Količina reducirajućih šećera izražena i izračunana (na bazi suhe tvari) kao dekstrozni ekvivalent u:

               —

               glukoznom sirupu,

               —

               sušenom glukoznom sirupu.

         1.3.   Količina reducirajućih šećera izražena kao D-glukoza u:

               —

               dekstroza monohidratu,

               —

               bezvodnoj dekstrozi.

         2.   Definicija

   „Reducirajući šećeri izraženi kao invertni šećeri, D-glukoza ili dekstrozni ekvivalent”: količina reducirajućih šećera izraženih kao invertni šećer, D-glukoza ili dekstrozni ekvivalent, određena opisanom metodom.
   3.   Princip

   Reducirajući šećeri u uzorku (ako je potrebno pročišćenom) zagrijavaju se do točke vrenja u standardiziranim uvjetima s otopinom bakrovih (II) iona, koji se djelomično reducira u bakar (I). Višak bakrovih (II) iona određuje se jodometrijski.
   4.   Reagensi

   4.1.   Carrez otopina (I): otopiti u vodi 21,95 g cinkovog acetata dihidrata (Zn(CH3COO)2 ·2H2O) (ili 24 g cinkovog acetat trihidrata (Zn(CH3COO)2·3H2O) i 3 ml ledene octene kiseline i nadopuniti do 100 ml vodom.
   4.2.   Carrez otopina (II): otopiti u vodi 10,6 g kalijevog heksacijanoferata (II) trihidrata K4[Fe(CN)6] ·3H2O i nadopuniti vodom do 100 ml.
   4.3.   Luff-Schoorlov reagens: pripremiti sljedeće otopine:
   4.3.1.   Otopina bakrovog (II) sulfata: u 100 ml vode otopiti 25 g bakrovog (II) sulfata pentahidrata (CuSO4·5H2O) koji ne sadrži željezo.
   4.3.2.   Otopina limunske kiseline: u 50 ml vode otopiti 50 g limunske kiseline monohidrata (C6H8O7·H2O).
   4.3.3.   Otopina natrijevog karbonata: otopiti 143,8 g bezvodnog natrijevog karbonata u oko 300 ml tople vode i ostaviti da se ohladi.
   4.3.4.   U odmjernoj tikvici od jedne litre dodati otopinu limunske kiseline (4.3.2.) otopini natrijevog karbonata (4.3.3.) miješajući laganim kružnim pokretima. Miješati kružnim pokretima dok burna reakcija ne prestane, a zatim dodati otopinu bakrovog (II) sulfata (4.3.1.) i nadopuniti do 1 000 ml vodom. Ostaviti otopinu da stoji preko noći i zatim, ako je potrebno, profiltrirati. Provjeriti molaritet dobivenog reagensa metodom opisanom u točki 6.1. (Cu 0,1 mol/litra; Na2CO3 1 mol/litra).
   4.4.   Otopina natrijevog tiosulfata, 0,1 mol/litra.
   4.5.   Otopina škroba: u jednu litru kipuće vode dodati mješavinu koja se sastoji od 5 g topljivog škroba i 30 ml vode. Ostaviti da vrije tri minute, a zatim ostaviti da se ohladi i dodati, ako je potrebno, 10 mg živinog (II) jodida, koji služi kao konzervans.
   4.6.   Sumporna kiselina, 3 mol/litra.
   4.7.   Otopina kalijevog jodida, 30 % (m/v).
   4.8.   Listići plovućca, prokuhani u klorovodičnoj kiselini, isprani vodom od kiseline i zatim osušeni.
   4.9.   Izopentanol

   4.10.   Natrijev hidroksid, 0,1 mol/litra.
   4.11.   Klorovodična kiselina, 0,1 mol/litra.
   4.12.   Otopina fenolftaleina, 1 % (m/v) u etanolu.
   5.   Oprema

   5.1.   Erlenmeyerova tikvica, 300 ml, s povratnim kondenzatorom.
   5.2.   Štoperica.
   6.   Postupak

   6.1.   Standardizacija Luff-Schoorlovog reagensa (4.3.).
   6.1.1.   U 25 ml Luff-Schoorlovog reagensa (4.3.) dodati 3 g kalijevog jodida i 25 ml 3 mol/litra sumporne kiseline (4.6.).
   Titrirati s 0,1 mol/litra natrijevim tiosulfatom (4.4.) koristeći otopinu škroba (4.5.) kao indikator dodan pred kraj titracije. Ukoliko volumen utrošenog 0,1 mol/litra natrijevog tiosulfata nije 25 ml, reagens treba ponovo pripremiti.
   6.1.2.   U odmjernu tikvicu od 100 ml otpipetirati 10 ml reagensa i razrijediti vodom do određenog volumena.
   Otpipetirati 10 ml razrijeđenog reagensa u 25 ml 0,1 mol/litra klorovodične kiseline (4.11.) u Erlenmeyerovoj tikvici i zagrijavati u kipućoj vodenoj kupelji 1 sat. Ohladiti, nadopuniti do originalnog volumena svježe prokuhalom vodom i titrirati s 0,1 mol/l natrijevim hidroksidom (4.10.) koristeći fenolftalein (4.12.) kao indikator.
   Volumen utrošenog 0,1 mol/litra natrijevog hidroksida (4.10.) mora biti između 5,5 i 6,5 ml.
   6.1.3.   Titrirati 10 ml razrijeđenog reagensa (6.1.2.) s 0,1 mol/litra klorovodičnom kiselinom (4.11.) koristeći fenolftalein (4.12.) kao indikator. U završnoj točki titracije nestaje ljubičasta boja.
   Volumen utrošene 0,1 mol/litra klorovodične kiseline (4.11.) mora biti između 6,0 i 7,5 ml.
   6.1.4.   pH vrijednost Luff-Schoorlovog reagensa pri 20 °C mora biti između 9,3 i 9,4 ml.
   6.2.   Priprema otopine

   6.2.1.   S točnošću 1 mg izvagati 5 g uzorka i kvantitativno prenijeti u odmjernu tikvicu od 250 ml s 200 ml vode. Izbistriti, ako je potrebno, dodavanjem 5 ml Carrezove otopine (I) (4.1.) i zatim 5 ml Carrezove otopine (II) (4.2.). Promiješati nakon svakog dodavanja. Nadopuniti vodom do 250 ml. Dobro promiješati. Profiltrirati ako je potrebno.
   6.2.2.   Razrijediti otopinu (6.2.1.) tako da 25 ml otopine sadrži najmanje 15 mg i najviše 60 mg reducirajućih šećera izraženih kao glukoza.
   6.3.   Titracija po Luff-Schoorlovoj metodi

   U Erlenmeyerovu tikvicu od 300 ml (5.1.). otpipetirati 25 ml Luff-Schoorlovog reagensa (4.3.) i 25 ml otopine šećera (6.2.2.) te dodati dva listića plovućca (4.8.). Na Erlenmeyerovu tikvicu (5.1.) spojiti povratno hladilo i aparaturu odmah postvaiti na azbestnu mrežicu iznad Bunsenovog plamenika. Srednji dio mrežice mora na azbestnom dijelu biti istog promjera kao dno tikvice. Zagrijavati tekućinu do vrenja 2 minute i pustiti da lagano vrije točno 10 minuta. Odmah ohladiti u hladnoj vodi i nakon 5 minuta titrirati na sljedeći način:
   Dodati 10 ml otopine kalijevog jodida (4.7.) i odmah zatim dodati oprezno (zbog burne reakcije) 25 ml 3 mol/litra sumporne kiseline (4.6.). Titrirati s 0,1 mol/litra otopinom natrijevog tiosulfata (4.4.) dok otopina ne postane gotovo bezbojna, zatim dodati nekoliko ml otopine škroba (4.5.) kao indikator i nastaviti titraciju dok plava boja ne nestane.
   Provesti kontrolnu probu koristeći 25 ml vode umjesto 25 ml otopine šećera (6.2.2.).
   7.   Izražavanje rezultata

   7.1.   Formula i način izračunavanja

   Iz donje tablice očitati (interpolirati ako je potrebno) masu glukoze ili invertnog šećera u mg koja odgovara razlici između dva očitanja titracija, koji su izraženi u ml 0,1 mol/litra natrijevog tiosulfata.
   Rezultat se izražava kao invertni šećer ili D-glukozu, kao postotak (m/m) suhe tvari.
   7.2.   Ponovljivost

   Razlika između rezultata dviju titracija koje provodi isti analitičar istovremeno ili neposredno jednu iza druge, na istom uzorku te pod istim uvjetima, ne smije biti veća od 0,2 ml.
   8.   Napomena

   Prije zakiseljavanja sumpornom kiselinom može se dodati mala količina izopentanola (4.9.) kako bi se smanjilo pjenjenje.

      Tablice vrijednosti prema Luff-Schoorlovom reagensu

               0,1 mol/litra
               Na2S2O3

               Glukoza, fruktoza, invertni šećeri
               C6H12O6

               ml

               mg

               razlika

               1

               2,4

               2

               4,8

               2,4

               3

               7,2

               2,4

               4

               9,7

               2,5

               5

               12,2

               2,5

               6

               14,7

               2,5

               7

               17,2

               2,5

               8

               19,8

               2,6

               9

               22,4

               2,6

               10

               25,0

               2,6

               11

               27,6

               2,6

               12

               30,3

               2,7

               13

               33,0

               2,7

               14

               35,7

               2,7

               15

               38,5

               2,8

               16

               41,3

               2,8

               17

               44,2

               2,9

               18

               47,1

               2,9

               19

               50,0

               2,9

               20

               53,0

               3,0

               21

               56,0

               3,0

               22

               59,1

               3,1

               23

               62,2

               3,1

         METODA 7.

      MJERENJE REDUCIRAJUĆIH ŠEĆERA IZRAŽENIH KAO INVERTNI ŠEĆER

   (Laneova i Eynonova modifikacija konstantnog volumena)
   1.   Opseg i područje primjene

   Ovom se metodom određuju reducirajući šećeri, izraženi kao invertni šećer u:

               —

               otopini šećerna,

               —

               otopini bijelog šećera,

               —

               otopini invertnog šećera,

               —

               otopini bijelog invertnog šećera,

               —

               sirupu invertnog šećera,

               —

               sirupu bijelog invertnog šećera.

         2.   Definicija

   „Reducirajući šećeri izraženi kao invertni šećer”: količina reducirajućih šećera određena opisanom metodom.
   3.   Princip

   Određeni volumen pripremljene Fehlingove otopine titrira se u točki vrenja s određenim volumenom uz korištenje metilenskog modrila kao unutarnjeg indikatora.
   4.   Reagensi

   4.1.   Fehlingova otopina:

               4.1.1.

               Otopina A:
               Otopiti 69,3 g bakrovog (II) sulfata pentahidrata (CuSO4·5H2O) u vodi i dopuniti do 1 000 ml.

               4.1.2.

               Otopina B:
               Otopiti 346,0 g natrij-kalijevog tartrata tetrahidrata (KNaC4H4O6·4H2O) i 100,0 g natrijevog hidroksida u vodi idopuniti do 1 000 ml. Prije upotrebe dekantirati bistru otopinu od taloga koji s vremenom može nastati.

      Napomena:

   Ove dvije otopine treba čuvati u smeđim bocama ili bocama boje jantara.
   4.2.   Otopina natrijevog hidroksida, 1 mol/litra.
   4.3.   Standardna otopina invertnog šećera: u odmjernoj tikvici od 250 ml otopiti 23,750 g čiste saharoze u približno 120 ml vode, dodati 9 ml klorovodične kiseline (ζ = 1,16) i ostaviti da stoji osam dana na sobnoj temperaturi. Otopinu dopuniti do 250 ml i mjerenjem polarimetrom ili saharimetrom u 200 mm cijevi provjeriti je li hidroliza potpuna. Vrijednost mora biti 11,80 ° ± 0,05 °S (vidi napomenu 8.). Otpipetirati 200 ml ove otopine u odmjernu tikvicu od 2 000 ml. Razrijediti vodom i uz protresanje (da ne bi došlo do prevelike lokalne alkalnosti) dodati 71,4 ml otopine natrijevog hidroksida (1 mol/litra) u kojoj je otopljeno 4 g benzojeve kiseline. Dopuniti do 2 000 ml da se dobije otopina invertnog šećera 1 g/100 ml. pH vrijednost ove otopine mora biti približno 3.
   Ovu stabilnu osnovnu otopinu smije se razrijediti neposredno prije upotrebe.
   Za pripremu otopine invertnog šećera 0,25 g/100 ml, pri 20 °C do oznake napuniti odmjernu tikvicu od 250 ml otopinom invertnog šećera 1 g/100 ml. Sadržaj tikvice prelije se u odmjernu tikvicu od 1 000 ml i nadopuni vodom do oznake, opet pri 20 °C.
   4.4.   Otopina metilenskog modrila, 1 g/100 ml.
   5.   Oprema

   5.1.   Laboratorijska tikvica od vatrostalnog stakla s uskim grlom, 500 ml.
   5.2.   Bireta, 50 ml, sa slavinom i vrhom za istjecanje, graduirana na 0,05 ml.
   5.3.   Graduirane pipete, 20 ml, 25 ml i 50 ml.
   5.4.   Odmjerne tikvice s jednom oznakom, 250 ml, 1 000 ml i 2 000 ml.
   5.5.   Plamenik koji omogućava vrenje u skladu s uvjetima opisanim u 6.1., i uočavanje promjene boje u završnoj točki bez potrebe uklanjanja tikvice (5.1.) od izvora topline.
   5.6.   Zaporni sat koji mjeri sekunde.
   6.   Postupak

   6.1.   Standardizacija Fehlingove otopine

   6.1.1.   U čistu, suhu čašu otpipetirati 50 ml otopine B (4.1.2.), a zatim 50 ml otopine A (4.1.1.) i dobro promiješati.
   6.1.2.   Isprati i napuniti biretu 0,25 % (0,25 g/100 ml) standardnom otopinom invertnog šećera (4.3.).
   6.1.3.   Otpipetirati alikvot od 20 ml mješavine otopina A i B (6.1.1.) u tikvicu od vatrostalnog stakla od 500 ml (5.1.). U tikvicu dodati 15 ml vode. Iz birete dodati 39 ml otopine invertnog šećera, dodati malu količinu granula protiv stvaranja plinskih mjehura i laganim kružnim pokretima promiješati sadržaj tikvice.
   6.1.4.   Tikvicu sa sadržajem zagrijavati do vrenja i pustiti da vrije točno dvije minute; tikvica se ne smije ukloniti s plamenika tijekom daljnjeg postupka niti vrenje smije prestati.
   Na kraju dvominutnog perioda vrenja, dodati tri ili četiri kapi otopine metilenskog modrila (4.4.): otopina mora biti intenzivno plave boje.
   6.1.5.   Nastaviti standardizaciju dodajući iz birete postupno standardnu otopinu invertnog šećera, najprije po 0,2 ml; zatim 0,1 ml i na kraju kap po kap do završne točke. U završnoj točki nestaje plava boja metilenskog modrila. Otopina poprima crvenkastu boju kao rezultat suspendiranog bakrovog (I) oksida.
   6.1.6.   Završna bi se točka trebala postići tri minute od početka vrenja otopine. Konačni titar, V0, treba biti između 39,0 i 41,0 ml. Ukoliko je V0 izvan tih granica, potrebno je prilagoditi koncentraciju bakra u Fehlingovoj otopini A (4.1.1.) i ponoviti postupak standardizacije.
   6.2.   Priprema otopina uzorka

   Koncentracija otopine uzorka treba biti takva da sadrži između 250 i 400 mg invertnog šećera u 100 ml.
   6.3.   Preliminarna proba

   6.3.1.   Preliminarnu probu je potrebno provesti kako bi se osiguralo da je količina vode koja se dodaje u 20 ml miješane otopine A i B dovoljna da se dobije konačni volumen od 75 ml nakon titracije.
   Provesti isti postupak kako je opisano u 6.1.4., ali umjesto standardne otopine invertnog šećera koristiti otopinu uzorka, tj. iz birete u tikvicu dodati 25 ml otopine uzorka. Dodati 15 ml vode i pustiti da vrije dvije minute, a zatim titrirati do završne točke kako je opisano u 6.1.5.
   6.3.2.   Ako nakon dodavanja otopine metilenskog modrila ostane crvenkasta boja, znači da je koncentracija otopine uzorka prevelika. U tom slučaju, probu treba odbaciti i ponoviti s otopinom uzorka manje koncentracije.
   Ukoliko je potrebno više od 50 ml otopine uzorka za dobivanje crvenkaste boje, mora se upotrijebiti otopina uzorka veće koncentracije.
   Količinu vode koju je potrebno dodati, izračunati tako da se volumen mješavine Fehlingovih otopina (20 ml) i volumen otopine uzorka oduzmu od 75 ml.
   6.4.   Završna analiza otopine uzorka

   6.4.1.   U tikvicu od vatrostalnog stakla otpipetirati 20 ml miješane Fehlingove otopine i količinu vode određenu kako je opisano u 6.3.
   6.4.2.   Iz birete dodati određeni titar otopine uzorka (kako je određeno u 6.3.) 1 ml manje. Dodati granule protiv stvaranja plinskih mjehura, kružnim pokretima promiješati sadržaj tikvice, zagrijati tikvicu i sadržaj do vrenja i titrirati kako je opisano u (6.3.). Završna točka bi se trebala postići jednu minutu nakon dodavanja otopine metilenskog modrila. Konačni titar = V1.
   7.   Izražavanje rezultata

   7.1.   Formula i metoda izračunavanja

   Količina reducirajućih šećera u uzorku, izraženih kao invertni šećer, izračunava se na sljedeći način:
   % reducirajućih šećera (kao invertni šećer) =
   gdje je:

               C

               =

               koncentracija otopine uzorka u g na 100 ml;

               V0

               =

               volumen standardne invertne otopine upotrijebljen pri standardizacijskoj titraciji, u ml;

               V1

               =

               volumen otopine uzorka upotrijebljene za preciznu analizu opisanu u točki 6.4.2., u ml;

               f

               =

               faktor korekcije kojim se uzima u obzir koncentracija saharoze u otopini uzorka. Vrijednosti su prikazane u sljedećoj tablici:

               Saharoza
               (g u kipućoj smjesi)

               Faktor korekcije f

               0

               1,000

               0,5

               0,982

               1,0

               0,971

               1,5

               0,962

               2,0

               0,954

               2,5

               0,946

               3,0

               0,939

               3,5

               0,932

               4,0

               0,926

               4,5

               0,920

               5,0

               0,915

               5,5

               0,910

               6,0

               0,904

               6,5

               0,898

               7,0

               0,893

               7,5

               0,888

               8,0

               0,883

               8,5

               0,878

               9,0

               0,874

               9,5

               0,869

               10,0

               0,864

         Korekcije za različite količine saharoze u otopini uzorka mogu se iz tablice izračunavati interpolacijom.

      Napomena:

   Približna koncentracija saharoze može se izračunati tako da se od ukupne koncentracije otopljenih čvrstih tvari izraženih kao saharoza, koji se određuju pomoću indeksa refrakcije otopine koristeći metodu 3. iz ovog dokumenta oduzme koncentracija otopljenih čvrstih tvari, koje potječu od invertnog šećera (za potrebe ovog izračuna f = 1,0).
   7.2.   Ponovljivost

   Razlika između rezultata dvaju određivanja, koja provodi isti analitičar, istovremeno ili neposredno jedno za drugim, na istom uzorku te pod istim uvjetima, ne smije prelaziti 1,0 % njihove aritmetičke sredine.
   8.   Napomena:

   Za pretvorbu °S u polarimetrijske stupnjeve, podijeliti °S s 2,889 (cijevi od 200 mm; izvor svjetlosti natrijeva svjetiljka; instrument mora biti instaliran u prostoriji u kojoj je moguće održavati temperaturu na približno 20 °C).
   METODA 8.

      ODREĐIVANJE DEKSTROZNOG EKVIVALENTA

   (Laneova i Eynonova konstanta)
   1.   Opseg i područje primjene

   Ovom se metodom određuje dekstrozni ekvivalent u:

               —

               glukoznom sirupu,

               —

               sušenom glukoznom sirupu,

               —

               dekstroza monohidratu,

               —

               bezvodnoj dekstrozi.

         2.   Definicija

   2.1.   „Reducirajuća snaga” je količina reducirajućih šećera, određena opisanom metodom, izražena kao bezvodna dekstroza (D-glukoza) i izračunana kao maseni udio u uzorku.
   2.2.   „Ekvivalent dekstroze” je reducirajuća snaga, izračunana kao maseni udio u suhoj tvari uzorka.
   3.   Princip

   Otopina uzorka u točki vrenja, u strogo specificiranim uvjetima, titrira se s određenim volumenom pripremljene Fehlingove otopine uz korištenje metilenskog modrila kao unutarnjeg indikatora.
   4.   Reagensi

   4.1.   Fehlingova otopina:

   4.1.1.   Otopina A.
   Otopiti 69,3 g bakar (II) sulfata pentahidrata (CuSO4 ·5H2O) u vodi i dopuniti do 1 000 ml u odmjernoj tikvici.
   4.1.2.   Otopina B.
   Otopiti 346,0 g natrij-kalijevog tartarat tetrahidrata (KNaC4H4O6·4H2O) i 100 g natrijevog hidroksida u vodi. Dopuni do 1 000 ml u odmjernoj tikvici. Prije upotrebe dekantirati bistru otopinu od taloga koji s vremenom može nastati.

      Napomena:

   Ove dvije otopine (4.1.1. i 4.1.2.) treba pohraniti u smeđe boce ili boce boje jantara.
   4.1.3.   Priprema miješane Fehlingove otopine
   U čistu i suhu čašu otpipetirati 50 ml otopine B (4.1.2.), a zatim 50 ml otopine A (4.1.1.) i dobro promiješati.

      Napomena:

   Miješana Fehlingova otopina ne smije se pohranjivati nego ju je uvijek potrebno pripremiti svježu i standardizirati (6.1.).
   4.2.   Bezvodna dekstroza (D-glukoza) (C6H12O6)
   Prije upotrebe materijal treba sušiti četiri sata u vakuum sušioniku na temperaturi 100 ± 1 °C ili manje i pri unutarnjem tlaku približno 10 kPa (103 mbar).
   4.3.   Standardna otopina dekstroze, 0,600 g/100 ml
   S točnošću od 0,1 mg izvagati 0,6 g bezvodne dekstroze (4.2.), otopiti je u vodi, otopinu kvantitativno prenijeti u odmjernu tikvicu od 100 ml (5.4), nadopuniti vodom do oznake i promiješati.
   Ova se otopina prije svake upotrebe mora svježe pripremiti.
   4.4.   Otopina metilenskog modrila, 0,1 g/100 ml
   Otopiti 0,1 g metilenskog modrila u 100 ml vode.
   5.   Oprema

   5.1.   Laboratorijska tikvica od vatrostalnog stakla s uskim grlom, 250 ml
   5.2.   Bireta, 50 ml, sa slavinom i vrhom za istjecanje, graduirana na 0,05 ml.
   5.3.   Pipete s jednom oznakom, 25 ml i 50 ml.
   5.4.   Odmjerne tikvice s jednom oznakom, 100 ml i 500 ml.
   5.5.   Plamenik koji omogućava vrenje u skladu s uvjetima opisanim u točki 6.1. i uočavanje promjene boje u završnoj točki bez potrebe uklanjanja tikvice (5.1.) od izvora topline (vidi točku 6.1., napomenu 3.).
   5.6.   Zaporni sat koji mjeri sekunde.
   6.   Postupak

   6.1.   Standardizacija Fehlingove otopine

   6.1.1.   U čistu, suhu vatrostalnu tikvicu (5.1.). otpipetirati 25 ml Fehlingove otopine (4.1.3.)
   6.1.2.   Napuniti biretu (5.2.) standardnom otopinom dekstroze (4.3.) i podesiti meniskus na oznaku nula.
   6.1.3.   U vatrostalnu tikvicu (5.1.) iz birete dodati 18 ml standardne otopine dekstroze (4.3.). Kružnim pokretima izmiješati sadržaj tikvice.
   6.1.4.   Vatrostalnu tikvicu postaviti na plamenik (5.5.) koji je prethodno podešen tako da vrenje počne nakon 120 ± 15 sekundi.
   Plamenik se tijekom titracije ne smije dodatno podešavati (vidi napomenu 1.).
   6.1.5.   Kad započne vrenje, uključiti zaporni sat.
   6.1.6.   Sadržaj tikvice pustiti da vrije 120 sekundi, mjereći vrijeme zapornim satom.
   Pri kraju vrenja dodati 1 ml otopine metilenskog modrila (4.4.).
   6.1.7.   Nakon 120 sekundi vrenja (mjerenih zapornim satom) početi iz birete (6.1.2.) u vatrostalnu tikvicu (5.1.) dodavati po 0,5 ml standardne otopine dekstroze dok u potpunosti ne nestane plava boja metilenskog modrila (vidi napomene 2. i 3.).
   Zabilježiti ukupni dodani volumen standardne otopine dekstroze uključujući predzadnje dodavanje 0,5 ml (X ml).
   6.1.8.   Ponoviti postupak pod točkama 6.1.1. i 6.1.2.
   6.1.9.   U vatrostalnu tikvicu (5.1.) iz birete dodati (X–0,3) ml standardne otopine dekstroze.
   6.1.10.   Ponoviti postupak pod točkama 6.1.4., 6.1.5 i 6.1.6.
   6.1.11.   Nakon 120 sekundi vrenja (mjereno zapornim satom) početi iz birete dodavati standardnu otopinu dekstroze u vatrostalnu tikvicu (5.1.), najprije po 0,2 ml, zatim kap po kap, dok ne nestane plava boja metilenskog modrila.
   Pri kraju postupka standardnu otopinu glukoze treba dodavati u intervalima od 10 do 15 sekundi.
   Ova dodavanja bi trebala biti završena u vremenu do 60 sekundi, a ukupno vrijeme vrenja ne smije biti duže od 180 sekundi.
   Kako bi se to postiglo, mogla bi biti potrebna i treća titracija, s malo većim, prikladno podešenim, početnim dodatkom standardne otopine dekstroze (6.1.9.).
   6.1.12.   Zabilježiti volumen standardne otopine dekstroze (V0 ml), utrošen do završne točke zadnje titracije (vidi napomenu 4.).
   6.1.13.   V0 mora biti između 19,0 i 21,0 ml standardne otopine dekstroze (4.3).
   Ako je V0 izvan tih granica, treba prilagoditi koncentraciju Fehlingove otopine A (4.1.1.) i ponoviti postupak standardizacije.
   6.1.14.   Budući da je V0 poznat, za svakodnevnu standardizaciju miješane Fehlingove otopine potrebna je samo jedna titracija, s početnim volumenom dodavanja standardne otopine dekstroze (V0 – 0,5) ml.

      Napomena 1.:

   Ovim se osigurava da, kad započne vrenje, stvaranje pare bude neprekidno tijekom cijelog procesa titracije, čime se u najvećoj mogućoj mjeri sprečava ulazak zraka u tikvicu i reoksidacija njezinog sadržaja.

      Napomena 2.:

   Nestajanje modre boje metilenskog modrila najbolje se uočava tako da se promatraju gornji slojevi i meniskus otopine u tikvici, jer je u njemu relativno malo istaloženog crvenog bakar (I) oksida. Nestajanje modre boje najbolje se uočava ako se koristi indirektno svjetlo. Korisno je i postaviti bijeli zaslon iza tikvice.

      Napomena 3.:

   Tijekom određivanja bireta mora biti što je više moguće izolirana od izvora topline.

      Napomena 4.:

   Budući da je uvijek prisutan ljudski faktor, svaki analitičar treba provesti vlastitu standardizaciju i u izračunu koristiti vlastite vrijednosti za V0 (7.1.).
   6.2.   Preliminarno ispitivanje pripremljenog uzorka

   6.2.1.   Ukoliko približna vrijednost reducirajuće snage (2.1.) pripremljenog uzorka nije poznata, potrebno je provesti preliminarno ispitivanje kojim se određuje približna vrijednost potrebna za izračunavanje masenog udjela u uzorku (6.3.).
   Ovo se ispitivanje provodi na sljedeći način:
   6.2.2.   Pripremiti 2 % otopinu m/v uzorka s procijenjenom vrijednosti „Z”.
   6.2.3.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.2., koristeći otopinu uzorka (6.2.2.) umjesto standardne otopine dekstroze.
   6.2.4.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.1.
   6.2.5.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.3., koristeći 10,0 ml otopine uzorka umjesto 18,0 ml standardne otopine dekstroze.
   6.2.6.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.4.
   6.2.7.   Sadržaj tikvice zagrijati do vrenja. Dodati 1 ml otopine metilenskog modrila (4.4.).
   6.2.8.   Odmah po početku vrenja, treba uključiti zaporni sat (5.6.) i započeti s dodavanjem po 1,0 ml otopine uzorka iz birete u tikvicu u intervalima od približno 10 sekundi, dok ne nestane boja metilenskog modrila.
   Zabilježiti ukupni dodani volumen otopine uzorka uključujući predzadnje dodavanje (Y ml).
   6.2.9.   „Y” ne smije biti veći od 50 ml. Ukoliko jest, treba povećati koncentraciju otopine uzorka i ponoviti titraciju.
   6.2.10.   Približna reducirajuća snaga pripremljenog uzorka, izražena kao maseni udio, izračunava se na sljedeći način:

   6.3.   Uzorak za analizu

   S točnošću 0,1 mg izvagati pripremljeni uzorak (mg) koja sadrži između 2,85 i 3,15 g reducirajućih šećera izraženih kao bezvodna dekstroza (D-glukoza), koristeći pri izračunavanju ili poznatu približnu vrijednost reducirajuće snage (2.1.) ili približnu vrijednost dobivenu u točki 6.2.10.
   6.4.   Otopina uzorka

   Otopiti uzorak u vodi i nadopuniti do 500 ml u odmjernoj tikvici.
   6.5.   Određivanje

   6.5.1.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.1.
   6.5.2.   Napuniti biretu (5.2.) otopinom uzorka (6.4.) i podesiti meniskus na oznaku nula.
   6.5.3.   U vatrostalnu tikvicu birete dodati 18,5 ml otopine uzorka. Izmiješati sadržaj kružnim kretnjama.
   6.5.4.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.4.
   6.5.5.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.5.
   6.5.6.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.6.
   6.5.7.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.7., koristeći otopinu uzorka umjesto standardne otopine dekstroze.
   6.5.8.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.8.
   6.5.9.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.9., koristeći otopinu uzorka umjesto standardne otopine dekstroze.
   6.5.10.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.10.
   6.5.11.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.11., koristeći otopinu uzorka umjesto standardne otopine dekstroze.
   6.5.12.   Zabilježiti volumen otopine uzorka (V1) upotrijebljen do završne točke zadnje titracije.
   6.5.13.   V1 mora biti između 19,0 i 21,0 ml otopine uzorka.
   Ukoliko je V1 izvan tih granica, treba prilagoditi koncentraciju otopine uzorka i ponoviti postupak pod točkama 6.5.1. do 6.5.12.
   6.5.14.   Treba provesti dva određivanja na istoj otopini uzorka.
   6.6.   Količina suhe tvari

   Odrediti udio suhe tvari metodom 2. pripremljenog uzorka.
   7.   Izražavanje rezultata

   7.1.   Formula i metoda izračunavanja

   7.1.1.   Reducirajuća snaga
   Reducirajuća snaga, izražena kao maseni udio u pripremljenom uzorku, izračunava se na sljedeći način:

   pri čemu je:
   V0= volumen standardne otopine dekstroze (4.3.) upotrijebljen pri standardizacijskoj titraciji (6.1), izražen u ml;
   V1= volumen otopine uzorka (6.4.) upotrijebljen pri titraciji utvrđivanja (6.5.), izražen u ml;
   M= masa uzorka (6.3.) upotrijebljena za pripremu 500 ml otopine uzorka, izražena u gramima.
   7.1.2.   Dekstrozni ekvivalent
   Dekstrozni ekvivalent, izračunan kao postotak u odnosu na masu suhe tvari u pripremljenom uzorku, izražen je na sljedeći način:

   pri čemu je:

               RP

               =

               reducirajuća snaga, izračunana kao maseni udio pripremljenog uzorka (7.1.1.);

               D

               =

               količina suhe tvari u pripremljenom uzorku, izražena kao postotak mase.

         7.1.3.   Rezultat je aritmetička sredina dvaju određivanja, pod uvjetom da su zadovoljen kriterij ponovljivosti (7.2.).
   7.2.   Ponovljivost

   Razlika između rezultata dva određivanja, koja provodi isti analitičar, istovremeno ili neposredno jedno za drugim, na istom uzorku te pod istim uvjetima, ne smije prelaziti 1,0 % njihove aritmetičke sredine.
   METODA 9.

      ODREĐIVANJE SULFATNOG PEPELA

   1.   Opseg i područje primjene

   Ovom se metodom određuje količina sulfatnog pepela u:

               —

               glukoznom sirupu,

               —

               sušenom glukoznom sirupu,

               —

               dekstroza monohidratu,

               —

               bezvodnoj dekstrozi.

         2.   Definicija

   „Količina sulfatnog pepela”: količina sulfatnog pepela određena opisanom metodom.
   3.   Princip

   Određuje se ostatak mase uzorka nakon spaljivanja u oksidacijskoj atmosferi pri 525 °C u prisutnosti sumporne kiseline i izračunava se kao maseni udio u uzorku.
   4.   Reagensi

   4.1.   Sumporna kiselina, razrijeđena otopina: uz miješanje i hlađenje polako i pažljivo dodati 100 ml koncentrirane sumporne kiseline (gustoća pri 20 °C = 1,84 g/ml; 96 % m/m) u 300 ml vode
   5.   Oprema

   5.1.   Električna mufolna peć opremljena pirometrom, radne temperature 525 ± 25 °C.
   5.2.   Analitička vaga, točnosti 0,1 mg.
   5.3.   Lončići za žarenje, od platine ili kvarcnog stakla, odgovarajućeg kapaciteta.
   5.4.   Eksikator, sa svježe aktiviranim silikagelom ili odgovarajućim sušilom i s indikatorom prisutnosti vode.
   6.   Postupak

   Lončić za žarenje (5.3.) zagrijati na temperaturu spaljivanja, ohladiti u eksikatoru i izvagati. S točnošću 0,1 mg u lončić za žarenje izvagati 5 g glukoznog sirupa ili sušenoga glukoznog sirupa, ili približno 10 g dekstroza monohidrata ili bezvodne dekstroze.
   Dodati 5 ml otopine sumporne kiseline (4.1.) (vidi napomenu 8.1.) i uzorak pažljivo zagrijavati u lončiću za žarenje iznad plamena ili na žarnoj ploči dok potpuno ne pougljeni. Postupak karbonizacije, pri kojem iz uzorka izlaze pare (vidi napomenu 8.2.), treba izvoditi u digestoru.
   Lončić za žarenje (5.3.) staviti u mufolnu peć (5.1.) u kojoj je temperatura 525 ± 25 °C i spaljivati do nastanka bijelog pepela. To obično traje dva sata (vidi napomenu 8.3.).
   Uzorak hladiti približno 30 minuta u eksikatoru (5.4.) i zatim izvagati.
   7.   Izražavanje rezultata

   7.1.   Formula i metoda izračunavanja

   Količina sulfatnog pepela, izražena kao maseni udio u analiziranom uzorku, izračunava se na sljedeći način:

   pri čemu je:
   m1= masa pepela u gramima;
   m0= masa uzorka u gramima.
   7.2.   Ponovljivost

   Razlika između rezultata dvaju određivanja, koja provodi isti analitičar, istovremeno ili neposredno jedno za drugim, na istom uzorku pod istim uvjetima, ne smije prelaziti 2 % njihove aritmetičke sredine.
   8.   Napomene

   8.1.   Sumpornu kiselinu dodavati u malim količinama kako bi se spriječilo prekomjerno pjenjenje.
   8.2.   Pri prvoj karbonizaciji potreban je veliki oprez kako bi se spriječio gubitak uzorka ili pepela zbog prekomjernog nabreknuća uzorka.
   8.3.   Ukoliko uzorak ne sagori potpuno (tj. ostanu crne čestice), lončić za žarenje treba izvaditi iz peći, ohladiti, ostatak uzorka nakon hlađenja navlažiti s nekoliko kapi vode i vratiti u peć.
   METODA 10.

      ODREĐIVANJE POLARIZACIJE

   1.   Opseg i područje primjene

   Ovom se metodom određuje polarizacija u:

               —

               polubijelom šećeru,

               —

               šećeru ili bijelom šećeru,

               —

               ekstra bijelom šećeru.

         2.   Definicija

   Polarizacija je optička rotacija polarizirane svjetlosti otopine šećera 26 g šećera na 100 ml u cijevi duljine 200 mm.
   3.   Princip

   Polarizacija se određuje upotrebom saharimetra ili polarimetra pod uvjetima opisanim u sljedećoj metodi.
   4.   Reagensi

   4.1.   Sredstvo za bistrenje: alkalna otopina olovnog acetata.
   U približno 1 000 ml netom provrele vode dodati 560 g suhog alkalnog olovnog acetata. Pustiti mješavinu da vrije 30 minuta i zatim ostaviti da stoji preko noći.
   Pretočiti površinsku tekućinu i razrijediti je netom provrelom vodom kako bi se dobila otopina gustoće 1,25 g/ml, pri 20 °C.
   Zaštititi otopinu od kontakta sa zrakom.
   4.2.   Dietil eter

   5.   Oprema

   5.1.   Saharimetar, graduiran za normalnu masu od 26 g saharoze, ili polarimetar.
   Ovaj instrument mora biti instaliran u prostoriji u kojoj je moguće održavati temperaturu na približno 20 °C. Instrument kalibrirati standardnim kvarcnim pločicama.
   5.2.   Izvor svjetlosti sastoji se od natrijeve svjetiljke.
   5.3.   Precizne polarimetrijske cijevi duge 200 mm, greška ne smije biti veća od ± 0,02 mm.
   5.4.   Analitička vaga točnosti 0,1 mg.
   5.5.   Pojedinačno kalibrirane odmjerne tikvice od 100 ml s čepom. Tikvice stvarnog volumena 100,00 ± 0,01 ml mogu se koristiti bez korekcije. Tikvice volumena izvan ovih granica moraju se koristiti s prikladnom korekcijom kojom se volumen podešava na 100 ml.
   5.6.   Vodena kupelj, s termostatski kontroliranom temperaturom od 20 ± 0,1 °C.
   6.   Postupak

   6.1.   Priprema otopine.

   Što je brže moguće izvagati 26 ± 0,002 g uzorka i kvantitativno ga prenijeti u odmjernu tikvicu od 100 ml (5.5.) s približno 60 ml vode.
   Otopiti kružnim pokretima, bez zagrijavanja.
   Ako je potrebno bistrenje, dodati 0,5 ml olovo acetata (4.1.).
   Promiješati otopinu rotirajući tikvicu i ispirući pritom stjenke tikvice, sve dok volumen ne bude takav da je meniskus približno 10 mm ispod oznake.
   Tikvicu staviti u kontroliranu vodenu kupelj (5.6.) na 20 ± 0,1 °C dok temperatura otopine šećera ne bude konstantna.
   Dodavanjem kapi dietil etera (4.2.).ukloniti mjehuriće na površini tekućine
   Nadopuniti vodom do oznake.
   Začepiti i temeljito promiješati preokrećući tikvicu barem tri puta.
   Ostaviti da stoji pet minuta.
   6.2.   Polarizacija

   Održavati temperaturu na 20 ± 1 °C u svim daljnjim postupcima.
   6.2.1.   Uređaj namjestiti na nulu.
   6.2.2.   Uzorak profiltrirati kroz filtar papira. Prvih 10 ml filtrata odbaciti. Sakupiti sljedećih 50 ml filtrata.
   6.2.3.   Cijev polarimetra oprati ispirući je dvaput otopinom uzorka za analizu (6.2.2).
   6.2.4.   Cijev pažljivo napuniti otopinom uzorka za analizu pri 20 ± 0,1 °C.
   Ukloniti sve mjehuriće zraka pri stavljanju na mjesto krajnje ploče. Postaviti napunjenu cijev u ležište uređaja.
   6.2.5.   Zabilježiti rotaciju s točnošću 0,05 °S ili 0,02 kutnih stupnjeva. Ponoviti postupak još četiri puta. Izračunati srednju vrijednost pet očitanja.
   7.   Izražavanje rezultata

   7.1.   Formula i metoda izračunavanja

   Rezultati se izražavaju u stupnjevima S s točnošću 0,1 °S. Za pretvorbu kutnih stupnjeva u stupnjeve S, koristi se sljedeća formula:

   7.2.   Ponovljivost

   Razlika između rezultata dva određivanja, koja provodi isti analitičar, istovremeno ili neposredno jedno za drugim, na istom uzorku te pod istim uvjetima, tako da svaki predstavlja srednju vrijednost pet očitanja, ne smije prelaziti 0,1 °S.

      (1)  n vrijednosti u ovoj tablici izračunane su iz jednadžbe koju je razvio K. Rosenhauer za ICUMSA, a programirao ih je i izračunao Frank G. Carpenter iz UDSA te su objavljene u časopisu Sugar J. br. 33., str. 15.-22. (lipanj 1970.). Refrakcijski indeks se mjerio pri 20 °C s nultom crtom Na. Stupnjevi Brixa (% saharoze prema težini) dobiveni su vaganjem pri 20 °C u zraku pri tlaku od 760 Torra (mm Hg) i relativnoj vlazi 50 %. Ova tablica zamjenjuje prijašnju tablicu 47.012, 11. izdanje, uzetu iz časopisa Intern. Sugar J. 39., 22s (1937.).