DNA Dalgaboyu: 260nm | tabletkitabesi
İstanbul Teknik Üniversitesi, Moleküler Biyoloji ve Genetik Bölümü Doktora Öğrencisi
DNA veya RNA izolasyonu sonrasında, konsantrasyon ve saflıkların ölçülmesi için (Nanodrop™ ve benzeri) spektrofotometreler kullanılır. Bu cihazlar, izolasyon sonrası elde edilen DNA’ın miktar ve saflıklarını ifade eden değerler verir. Örnek konsantrasyonuna ek olarak, okunan değerler arasında A260/230 ve A260/280 gibi parametreler de bulunur. Peki bu değerler ne anlama gelir? Yüksek veya düşük olması neyi ifade eder?
Spektrofotometreler, temel olarak sıvı örneğe belli bir dalgaboyunda ışık gönderdikten sonra bunun ne kadarının sıvı içerisinde absorbe edilmeden geçip gittiğini ölçer. Sıvının içindeki madde ne kadar fazla ise soğurulan ışığın miktarı o kadar fazla olur. Gönderilen ve geçen ışık miktarının oranından, absorbans adı verilen optik yoğunluk değeri (OD) ölçülür.
Beer Lambert kanunu, absorbans ile konsantrasyon arasında doğrudan bir korelasyon olduğunu gösterir. Nükleik asitler bir çok dalgaboyunda absorbans gösterse de, maksimum soğurma yaptığı ışık 260 nm dalgaboyundadır. Bu dalgaboyunda DNA’nın…
← Empatinin İzafiyeti Üzerine	Genler kaderimiz mi? Yoksa bizi biz yapan genler üstü bir durumda da mı var? →