b"\n_START_ARTICLE_\nGen reporter\n_START_PARAGRAPH_\nGen reporter adalah gen yang digunakan sebagai indikator untuk membedakan organisme yang berhasil ditransformasi, dapat juga digunakan sebagai indikator keberhasilan kloning._NEWLINE_Gen reporter memiliki peran dalam berbagai penelitian biologi dan dapat memberikan evaluasi kualitatif maupun kuantitatif dari aktivitas suatu gen\n_START_SECTION_\nSejarah\n_START_PARAGRAPH_\nPenggunaan gen reporter untuk sel mamalia pertama kali digunakan pada tahun 1982. Pada penelitian tersebut digunakan vektor plasmid yang berisi gen pengkode enzim bakteri \xce\xb2-galaktosidase untuk mempelajari regulasi gen eukariot.\n_START_SECTION_\nSyarat\n_START_PARAGRAPH_\nSyarat suatu gen untuk dipilih menjadi gen reporter, yaitu harus menunjukkan fenotipe yang tidak ditunjukkan inang pada umumnya. Fenotipe yang ditunjukkan juga harus mudah dideteksi. Cara analisis gen ini dapat dilakukan dengan cara melihat ekspresi dan delesi dari gen tersebut. Gen ini juga tidak boleh menimbulkan sifat toksik bagi inangnya.\n_START_SECTION_\nBerdasarkan tujuan investigasi\n_START_PARAGRAPH_\nBiasanya akan dibentuk 2 tipe konstruksi gen, yaitu fusi gen dan fusi protein. Fusi gen adalah penyisipan gen reporter ke sekuens umum yang mengatur ekspresi gen reporter tersebut. Fusi protein berarti penyisipan gen penyandi pada suatu sekuens sehingga dapat dihasilkan protein ''chimeric'' yang berperan sebagai reporter. Kedua tipe konstruksi ini tetap berbasis penyandian gen reporter. Yang membedakan keduanya adalah tipe ekspresi gen yang diukur.\n_START_SECTION_\nContoh\n_START_PARAGRAPH_\nContoh gen reporter adalah gfp, lacZ, dan cat. Mekanisme kerja dari gen lacZ adalah menghasilkan enzim \xce\xb2-galaktosidase, yang akan memecah laktosa dan X-gal. Koloni yang memecah X-gal akan berwarna biru, sehingga gen ini dapat digunakan untuk seleksi biru putih. Gen cat mengkodekan enzim Chloramphenicol Acetyl Transferase (CAT). Deteksi dapat dilakukan dengan memberikan substrat berupa chloramphenicol yang terikat fluorophore. Bila koloni tersebut dapat memecah substrat, akan timbul pendaran dari fluorophore yang terlepas.\n_START_SECTION_\nAplikasi\n_START_PARAGRAPH_\nSalah satu contoh aplikasi gen reporter adalah dalam pembuatan plasmid vektor kloning pGEM-T. Vektor pGEM-T memiliki promotor RNA polymerase T7 dan SP6. Plasmid ini juga memiliki daerah multiple cloning site di antara gen penyandi peptida \xce\xb1 dari enzim \xce\xb2-galaktosidase, sehingga dapat dilaksanakan seleksi biru putih untuk indikator keberhasilan kloning. Pada bagian 3\xe2\x80\x99 ada deoksitimidin yang membantu ligasi dari produk PCR dengan ujung 3\xe2\x80\x99 deoksiadenosin yang akan ditambahkan saat amplifikasi dengan PCR oleh enzim Taq DNA polymerase. Vektor ini digunakan karena dapat memudahkan seleksi sel yang berhasil dikloning atau tidak dengan seleksi biru putih."