Visualization and Live Imaging of Oligodendrocyte Organelles in Organotypic Brain Slices Using Adeno-associated Virus and Confocal Microscopy | Protocol (Translated to Hindi)\nदृश्य और Organotypic मस्तिष्क Adeno-जुड़े वायरस और फोकल माइक्रोस्कोपी का उपयोग स्लाइस में Oligodendrocyte Organelles के लाइव इमेजिंग\nOrganotypic स्लाइस संस्कृति Oligodendrocyteययन…\nElectroporation द्वारा कृंतक Sciatic तंत्रिका में रण में…\nMyelinating oligodendrocytes तेजी से कार्रवाई संभावित प्रसार और ंयूरॉन अस्तित्व को बढ़ावा देने के । यहां वर्णित oligodendrocyte के लिए एक प्रोटोकॉल है organotypic मस्तिष्क स्लाइस में फ्लोरोसेंट प्रोटीन के बाद के समय के साथ विशिष्ट अभिव्यक्ति इमेजिंग । इसके अलावा, दाग myelin visualizing के लिए एक सरल प्रक्रिया प्रस्तुत की है ।\nन्यूरॉन्स बिजली के इंसुलेशन और myelinating oligodendrocytes के पौष्टिकता समर्थन पर भरोसा करते हैं । oligodendrocytes के महत्व के बावजूद, उंनत उपकरण वर्तमान में न्यूरॉन्स अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया, केवल आंशिक रूप से oligodendrocyte शोधकर्ताओं द्वारा पर लिया गया है । सेल प्रकार-वायरल transduction द्वारा दाग विशिष्ट लाइव organelle गतिशीलता का अध्ययन करने के लिए एक उपयोगी तरीका है । यह पत्र adeno के साथ transduction द्वारा organotypic मस्तिष्क स्लाइस में oligodendrocyte mitochondria visualizing के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन-जुड़े वायरस (AAV) mitochondrial नियंत्रण के तहत transcriptional लक्षित फ्लोरोसेंट प्रोटीन के लिए जीन ले myelin बुनियादी प्रोटीन प्रमोटर । यह organotypic कोरोनरी माउस मस्तिष्क स्लाइसें बनाने के लिए प्रोटोकॉल शामिल हैं । mitochondria की समय-चूक इमेजिंग के लिए एक प्रक्रिया तो इस प्रकार है । इन पद्धतियों को अन्य organelles को हस्तांतरित किया जा सकता है और myelin म्यान में अध्ययनरत organelles के लिए विशेष रूप से उपयोगी हो सकता है. अंत में, हम फोकल चिंतनशील माइक्रोस्कोपी (कोर) द्वारा स्लाइसें में रहने वाले दाग myelin के दृश्य के लिए एक आसानी से उपलब्ध तकनीक का वर्णन । कोर कोई अतिरिक्त उपकरणों की आवश्यकता है और लाइव इमेजिंग के दौरान myelin म्यान की पहचान करने के लिए उपयोगी हो सकता है ।\nमस्तिष्क की सफेद बात तंत्रिका कोशिका axons से बना है myelin, एक विशेष विस्तारित प्लाज्मा oligodendrocytes द्वारा गठित झिल्ली में लिपटे । Myelin तेज और विश्वसनीय कार्रवाई संभावित प्रसार और myelinated axons के दीर्घकालिक अस्तित्व के लिए आवश्यक है, और Myelin का नुकसान स्नायविक रोग पैदा कर सकता है । उनके महत्व के बावजूद, oligodendrocytes के गुणों न्यूरॉन्स और astrocytes के साथ तुलना में कम जाना जाता है. नतीजतन oligodendrocytes के अध्ययन के लिए कम औजार विकसित किए गए हैं ।\nसेल organelles की लाइव इमेजिंग जैसे mitochondria, endoplasmatic जालिका (ER) या अलग vesicular संरचनाओं समय के साथ organelles में गतिशील परिवर्तन का अध्ययन करने के लिए उपयोगी हो सकता है । परंपरागत रूप से, रहने वाले oligodendrocytes की इमेजिंग monocultures1,2में प्रदर्शन किया गया है । हालांकि, monoculture में oligodendrocytes कॉम्पैक्ट myelin प्रदर्शित नहीं करते हैं, और organotypic या तीव्र मस्तिष्क स्लाइस कर सकते हैं, इसलिए, एक बेहतर विकल्प हो सकता है जब स्थानीयकरण और organelles के आंदोलन का अध्ययन. myelin म्यान में छोटे organelles और प्रोटीन का स्थानीयकरण myelinated axon और आसपास के myelin म्यान के बीच कम दूरी के कारण चुनौतीपूर्ण हो सकता है । इस प्रकार, प्रकाश सूक्ष्म immunostaining प्रक्रियाओं अकेले myelin म्यान में organelles और myelinated axon में उन लोगों के बीच भेदभाव करने के लिए स्थानिक संकल्प नहीं है । यह organelle के लिए जीन के साथ वायरल transduction द्वारा हल किया जा सकता है लक्षित फ्लोरोसेंट सेल प्रकार विशेष प्रमोटरों द्वारा संचालित प्रोटीन । लाभ एक कोशिका-विशिष्ट और विरल अभिव्यक्ति है, जो organelle स्थानीयकरण और गतिशीलता का सटीक आकलन सक्षम करता है । ट्रांसजेनिक पशुओं को भी ऐसे organelle-लक्षित कक्ष-विशिष्ट व्यंजक3को प्राप्त करने के लिए उपयोग किया जा सकता है । हालांकि, ट्रांसजेनिक पशुओं के उत्पादन और रखरखाव महंगा है और आम तौर पर विरल अभिव्यक्ति है कि वायरल तरीकों से प्राप्त किया जा सकता है प्रदान नहीं करता है ।\nयहां वर्णित विधि mitochondrial-लक्षित फ्लोरोसेंट प्रोटीन (dsred या ग्रीन फ्लोरोसेंट प्रोटीन, GFP) myelin बुनियादी प्रोटीन प्रमोटर (MBP-मिळो-dsred या MBP-मिळो-GFP) द्वारा संचालित के साथ oligodendrocytes के वायरल transduction का उपयोग करता है कल्पना organotypic ब्रेन स्लाइसेस में oligodendrocyte mitochondria । इसके अलावा, कोशिका में एक और फ्लोरोसेंट प्रोटीन की अभिव्यक्ति (या तो GFP के साथ एक साथ इस्तेमाल किया-dsred या tdtomato-GFP के साथ प्रयोग किया जाता है) कक्ष आकृति विज्ञान, cytoplasmic म्यान के myelin डिब्बों सहित दृश्य सक्षम करने के लिए प्रयोग किया जाता है । प्रोटोकॉल organotypic मस्तिष्क स्लाइसें (डी सिमौनी और यू, २००६4,5) द्वारा वर्णित प्रोटोकॉल का एक संशोधित संस्करण बनाने के लिए प्रक्रिया भी शामिल है । हम तो mitochondrial आंदोलन का अध्ययन करने के लिए समय चूक इमेजिंग प्रक्रिया का वर्णन । यह प्रक्रिया इमेजिंग के दौरान एक सतत विनिमय के साथ एक ईमानदार फोकल माइक्रोस्कोप का उपयोग करता है, एक सेटअप है कि इमेजिंग के दौरान दवाओं या अंय मध्यम परिवर्तन के आसान आवेदन सक्षम बनाता है । समय चूक इमेजिंग प्रक्रिया किसी भी फोकल माइक्रोस्कोप पर किया जा सकता है, नीचे वर्णित के रूप में रहने वाले स्लाइस बनाए रखने के लिए कुछ अतिरिक्त उपकरणों के साथ । प्रोटोकॉल भी इमेजिंग का अनुकूलन और phototoxicity कम करने के लिए कई सुझाव शामिल हैं ।\nअंत में, एक त्वरित और सरल करने के लिए फोकल रिफ्लेक्टर माइक्रोस्कोप (कोर) द्वारा दाग myelin कल्पना तरीका वर्णित है । यह लाइव इमेजिंग के दौरान myelin म्यान की पहचान करने के लिए उपयोगी हो सकता है । हाल के वर्षों में, कई तकनीकों किसी भी आवश्यक दाग के बिना छवि myelin को विकसित किया गया है, लेकिन इनमें से ज्यादातर विशिष्ट उपकरणों और विशेषज्ञता की आवश्यकता होती है6,7,8। प्रक्रिया यहां वर्णित myelin म्यान के चिंतनशील गुणों का उपयोग करता है और एक सरल एकल उत्तेजना वर्णक्रमीय फोकल चिंतनशील माइक्रोस्कोपी की तरंग दैर्ध्य संस्करण (स्कोर, जिसमें कई लेजर तरंग दैर्ध्य myelin कल्पना करने के लिए संयुक्त कर रहे हैं) 9. कोर किसी भी फोकल माइक्रोस्कोप है कि एक ४८८ एनएम लेजर और एक ४७०-५०० एनएम bandpass उत्सर्जन फ़िल्टर या एक स्वरित्र उत्सर्जन फिल्टर है पर किया जा सकता है ।\n< p class = "jove_content" > यहां बताई गई प्रक्रियाओं को नार्वे के पशु अनुसंधान प्राधिकरण ने अनुमोदित कर दिया है । माल और अन्य आवश्यक उपकरणों के लिए आपूर्तिकर्ताओं और कैटलॉग संख्या दस्तावेज़ के अंत में सामग्री सूची में उपलब्ध हैं ।\n< p class = "jove_title" > 1. Organotypic स्लाइसर्स की तैयारी\n< p class = "jove_content" > नोट: यह नुस्खा प्रसव दिन 7-9 (p7-9) में दो माउस पिल्ले का उपयोग करता है, जो 24 Organotypic स्लाइसें २ ६ पर विभाजित उपज-अच्छी तरह से संस्कृति व्यंजन । जब तक अंयथा कहा, सभी प्रक्रियाओं एक बाँझ डाकू और nitril या लेटेक्स दस्ताने में किया जाना चाहिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए । केवल सेल कल्चर ग्रेड अवयवों का इस्तेमाल किया जाना चाहिए ।\nआटोक्लेव बोतलें, विच्छेदन उपकरण (1 बड़ी कैंची, 1 छोटी कैंची, 1 बड़े फ्लैट रंग, 1 छोटे गोल और तेज रंग और 1 संदंश, विवरण के लिए सामग्री की सूची देखें), ग्लास पिपेट, पिपेट टिप्स और टुकड़ा तैयार करने के लिए इस्तेमाल किया ऊतक पोंछे.\nके रूप में गिलास पिपेट के आधे बड़े खोलने के साथ प्रयोग किया जाना चाहिए, संकीर्ण अंत टूट ।\nएक हीरे scriber कलम के साथ\nस्कोर (यदि उपलब्ध है) बस बिंदु के नीचे पिपेट के आसपास जहां कांच संकीर्ण शुरू होता है । तो एक नाइट्राइल दस्ताने या इसी तरह में पिपेट के नुकीले छोर जगह है । ध्यान से पिपेट झुकने जबकि यह एक काम बेंच के खिलाफ धक्का से टिप तोड़ ।\nतो रेत कागज के एक टुकड़े पर रगड़ या एक Bunsen बर्नर पर थोड़ा पिघल द्वारा टूट अंत कुंद । टूटी हुई पिपेट टूट अंत रबर बल्ब में बदल गया और समाधान छू/\nके बड़े खुले अंत के साथ कट मस्तिष्क स्लाइस हस्तांतरण करने के लिए उपयोग किया जाता है नोट: यह एक बाँझ डाकू में नहीं किया है और अग्रिम में कई दिनों किया जा सकता है ।\nसंस्कृति व्यंजन तैयार.\nनोट: यह टुकड़ा करने की क्रिया या टुकड़ा करने से पहले2घंटे से पहले दिन किया जा सकता है ।\nबाँझो Polytetrafluoroethylene (PTFE) झिल्ली (& #34; कंफ़ेद्दी & #34;). दो बाँझ संदंश का प्रयोग आसपास के नीले प्लास्टिक के टुकड़ों से एकल कंफ़ेद्दी को दूर करने और ९६% इथेनॉल (ेतोः) युक्त एक पेट्री डिश में दो बार सूई से निष्फल । फिर शुष्क करने के लिए एक बाँझ बड़े पेट्री पकवान में कंफ़ेद्दी फ्लैट रखना.\nनोट: कंफ़ेद्दी संस्कृति आवेषण में झिल्ली के समान हाइड्रोफिलिक PTFE झिल्ली हैं । कंफ़ेद्दी एड्स लाइव इमेजिंग का उपयोग करें, क्योंकि एक स्लाइस आसानी से डालने से माइक्रोस्कोप सेटअप करने के लिए संदंश के साथ कंफ़ेद्दी उठाने से स्थानांतरित कर सकते हैं (देखें ४.८. for विवरण). वैकल्पिक रूप से, मस्तिष्क स्लाइसें कंफ़ेद्दी (जिसमें स्लाइसें संस्कृति डालने की झिल्ली को सीधे संलग्न करेंगे) के बिना किया जा सकता है । इस मामले में, झिल्ली डालने के लिए एक स्केलपेल के साथ कट किया जाना चाहिए माइक्रोस्कोप स्नान करने के लिए टुकड़ा हस्तांतरण.\nएक अच्छी तरह से संस्कृति व्यंजन के प्रत्येक कुआं करने के लिए संस्कृति मध्यम (रिएजेंट में नुस्खा & #39; तालिका) की 1 मिलीलीटर जोड़ें ।\nजगह एक संस्कृति एक अच्छी तरह से बाँझ संदंश उपयोग में डालने । संमिलित करें और संस्कृति माध्यम के बीच हवा के बुलबुले से बचें ।\nनोट: धन और पर्यावरण को बचाने के लिए, यह संस्कृति आवेषण का पुनः प्रयोग संभव है । यह आसुत एच में पूरी तरह से धोने के द्वारा किया जा सकता है2हे (डीएच2o) ७०% ेतोः में मशीन द्वारा बाद में पुनः प्रयोग तक 24 घंटे की एक ंयूनतम के लिए । जब नई संस्कृति के लिए तैयारी, 15-30 min.\nके लिए पराबैंगनी (यूवी) प्रकाश के तहत एक सेल संस्कृति प्लेट में आवेषण सूखी\nदो (निष्फल और शुष्क) कंफ़ेद्दी पर प्रत्येक संस्कृति आवेषण । न्यूनतम ओवरलैप प्राप्त करने के लिए आवेषण के किनारों की ओर कंफ़ेद्दी प्लेस.\nसेल कल्चरल मशीन में प्लेटें ३७ & #176; C के साथ 5% कं2.\nबबल कोल्ड विच्छेदन मध्यम (recipe in reagents & #39; सारणी) विथ bioxide गैस (९५% O2/5%CO2). समाधान बाँझ रखने के लिए, एक बाँझ सिरिंज फिल्टर करने के लिए गैस सिलेंडर से ट्यूब कनेक्ट (०.२२ & #181; मी पोरे आकार).\nएक बाँझ एक बाँझ कांच पिपेट से जुड़े ट्यूब को सिरिंज फिल्टर के दूसरे छोर जोड़े. घोल में ग् पिपेट लगाएं, parafilm से ढक दें और गैस चालू करें । विच्छेदन मध्यम बर्फ पर रखें.\nविच्छेदन/टुकड़ा करने की क्रिया क्षेत्र तैयार करें ।\nनोट: आदर्श रूप में, इस प्रक्रिया को बाँझ डाकू में किया जाना चाहिए । यदि यह संभव न हो तो vibratome को किसी कार्य पीठ पर छोड़ा जा सकता है । इस मामले में, यह एक बाल शुद्ध और चेहरे मास्क का उपयोग करने के लिए सिफारिश की है ।\nएक एकल धार रेजर ब्लेड का उपयोग कर, एक आयताकार टुकड़ा काट (लगभग2सेमी x ०.५ सेमी) agarose जेल (एजेंट में नुस्खा & #39; तालिका) और गोंद इस vibratome मंच पर इस तरह कि लंबे पक्ष vibratome ब्लेड चेहरे ।\nसभी सतहों और ७०% ेतोः के साथ vibratome भागों को साफ और autoclaved ऊतक पोंछे के साथ पोंछे ।\nनोट: यह महत्वपूर्ण है कि सभी टुकड़ों है कि मस्तिष्क के ऊतकों के साथ संपर्क में हो जाएगा पूरी तरह से शुष्क के बाद से ेतोः कोशिकाओं को नुकसान पहुंचा सकता है ।\nvibratome करने के लिए एक बाँझ उस्तरा ब्लेड देते हैं और vibratome इस समारोह है अगर कंपन की जाँच करें.\nप्लेस autoclaved डाकू में विच्छेदन उपकरण autoclaved ऊतक पोंछे के साथ एक साथ, चार छोटे पेट्री व्यंजन, एक गोल बढ़त स्केलपेल, रबर बल्ब के साथ2ग्लास पिपेट, दो खुले अंत ग्लास पिपेट (pt. १.१ देखें) और सुपर गोंद (ेतोः के साथ छिड़काव) ।\nvibratome नाव में और चार छोटे पेट्री व्यंजन में bubbled विच्छेदन मध्यम डालो ।\nनोट: यह कदम केवल इस बिंदु पर से माध्यम से विच्छेदन से पहले तुरंत किया जाना चाहिए पर bubbled या बर्फ पर रखा नहीं है ।\nटुकड़े और माउंट दिमाग.\nनोट: स्वस्थ स्लाइस प्राप्त करने के लिए, इस कदम को जल्दी और ठीक किया जाना चाहिए । कुछ अभ्यास की जरूरत है ।\nEuthanize पशु #1 स्थानीय दिशानिर्देशों के अनुसार गर्दन के विस्थापन से और फिर बड़ी कैंची के साथ decapitate.\nछोटी, तीखी कैंची का प्रयोग\n, जल्दी से नाक को गर्दन से एक sagittal चीरा लगाकर त्वचा को हटा दें और खोपड़ी को प्रकट करने के लिए अलग से खींचो ।\nsagittal टांका के साथ कटौती, ललाट हड्डियों और lamboid टांका (मस्तिष्क और सेरिबैलम के बीच सीमा) के अंदरूनी भाग पर पार्श्व चीरा द्वारा पीछा किया ।\nका उपयोग संदंश को मोड़ने के लिए हर तरफ खोपड़ी खोलो. कपाल नसों मस्तिष्क के ventral पक्ष के तहत एक गोल, तेज रंग डालने से मस्तिष्क से काट रहे है और धीरे से रंग बाद में ले जा ।\nएक एकल किनारे उस्तरा ब्लेड का उपयोग करने के लिए एक कोरोनरी कट rostral सेरिबैलम ।\nनोट: यह कटौती उस कोण को निर्धारित करेगी, जिस पर स्लाइसें काटी गई हैं. यह चाहिए, इसलिए, एक सीधे कोण पर बनाया जाना चाहिए ।\nमस्तिष्क को खोपड़ी से बाहर पलटें और विच्छेदन मध्यम से युक्त एक छोटी पेट्री डिश में ।\nदोहराएँ चरण 1.6.1.-1.6.4. for पशु #2 और एक दूसरे पेट्री पकवान में इस मस्तिष्क जगह है ।\nनोट: जानवरों बाँझ नहीं हैं । डाकू के एक तरफ विच्छेदन प्रदर्शन और फिर दूसरे के लिए कदम, साफ पक्ष एक बार दिमाग खोपड़ी से हटा दिया गया है ।\nvibratome स्टेज के लिए मस्तिष्क लगायेंगे: घुड़सवार agarose जेल के सामने सिर्फ मंच के लिए सुपर गोंद की एक पतली परत जोड़ें । मस्तिष्क #1 के साथ एक बड़े फ्लैट रंग के साथ पकड़ हौसले से कट (caudal) ओर रंग और ventral पक्ष का सामना करना पड़ (और के रूप में संभव के रूप में बंद के रूप में जा रहा है) agarose जेल ।\nफिर धीरे से गोंद पर यह धक्का से मस्तिष्क जगह संदंश का एक सेट के साथ रंग । मस्तिष्क #2 के लिए पर्याप्त जगह छोड़ने के लिए सुनिश्चित करें.\nनोट: यह दिमाग अच्छी तरह से मंच से जुड़े हुए हैं कि महत्वपूर्ण है, लेकिन अत्यधिक गोंद के बिना, इस काटने बाधा कर सकते हैं.\nमस्तिष्क #1 के बढ़ते तुरंत बाद, मस्तिष्क के शीर्ष पर विच्छेदन मध्यम की कुछ बूँदें जोड़ने के लिए बड़े रंग का उपयोग करें । इससे दिमाग नम रहेगा, गोंद सख्त होगा और उसे दिमाग के किनारों से चिपकने से रोका जा सकेगा.\nदोहराएँ चरण 1.6.7 और 1.6.8. for मेंदू #2.\nvibratome नाव पर मंच लगायेंगे.\nकट २३० & #181; एम मोटी राज्याभिषेक स्लाइसें के एक आयाम के साथ 1-१.५ mm, ८५ हर्ट्ज की एक आवृत्ति और ०.२ mm के एक वेग/s. लगभग १.४ mm rostral और २.१ mm caudal के बीच स्लाइस लीजिए Bregma.\nप्रत्येक स्लाइस ओपन-एंड ग्लास पिपेट (pt. १.१) का उपयोग करके काट दिया गया है के बाद स्लाइसें इकट्ठा । विच्छेदन मध्यम से युक्त एक पेट्री डिश के लिए स्लाइस हस्तांतरण । स्लाइस को दो टुकड़ों में काटकर, दो गोलार्द्धों को विभाजित करने के लिए एक गोल स्केलपेल का प्रयोग करें ।\nजब सभी स्लाइस काट रहे हैं, जगह स्लाइस संस्कृति व्यंजन में ।\nसंस्कृति पकवान ले (समय में एक) मशीन से बाहर ।\nखुले अंत गिलास पिपेट का उपयोग कर, ध्यान से कंफ़ेद्दी में से प्रत्येक के लिए एक टुकड़ा हस्तांतरण ।\nनोट: स्लाइस को कंफ़ेद्दी के बीच में सपाट रखना चाहिए । यह कुछ कौशल की आवश्यकता है । हालांकि, अगर कुछ स्लाइसें सही नहीं हैं, यह उंहें छोड़ने के लिए समय बिताने की तुलना में उंहें स्थानांतरित करने की कोशिश कर के रूप में यह महत्वपूर्ण है के रूप में तेजी से संभव के रूप में मशीन में सभी स्लाइसें प्राप्त करने के लिए बेहतर है ।\nएक गिलास पिपेट (नुकीले छोर) का उपयोग करने के लिए धीरे टुकड़ा छूने के बिना अधिक माध्यम से हटाने के लिए ।\nनोट: स्लाइस को मशीन के दौरान लिक्विड में नहीं डुबोया जाना चाहिए । इस प्रकार, अतिरिक्त माध्यम aspirated ऐसी है कि स्लाइस हवा को उजागर कर रहे है होना चाहिए (मध्यम की एक पतली फिल्म अभी भी स्लाइस को कवर किया जाएगा) । स्लाइस कि तरल में डूबे रहने आमतौर पर अस्वस्थ हो जाएगा या मरो (4 और हमारी टिप्पणियों).\nमशीन में वापस पकवान चाल एक बार सभी कंफ़ेद्दी एक टुकड़ा है ।\nदोहराएँ चरण 1.7.8.-1.8.4. for डिश #2.\nसंस्कृति माध्यम बदल.\nनोट: यह टुकड़ा करने की क्रिया के बाद दिन किया जाना चाहिए (इन विट्रो, DIV1 में 1 दिन) और फिर हर 2-3 दिन ।\nएक पानी स्नान या मशीन में कचौरी संस्कृति माध्यम.\nएक बाँझ डाकू में\n, वैक्यूम चूषण का उपयोग करें या एक नियमित पिपेट एक बाँझ टिप के साथ महाप्राण संस्कृति माध्यम के लिए एक अच्छी तरह से. यह धीरे पकवान tipping द्वारा किया जाता है (के बारे में 30 डिग्री) और संस्कृति डालने के किनारे पर पिपेट टिप रखकर ।\nनिकालें लगभग ८०० & #181; L को एक अच्छी तरह से (बस काफी माध्यम को सम्मिलित करने के लिए मध्यम में कवर के नीचे रखने के लिए छोड़). फिर, एक साफ पिपेट का उपयोग करते हुए, जोड़ें ८०० & #181; एल के पूर्व गरम मध्यम से प्रत्येक अच्छी तरह से । फिर बर्तन वापस सेल संस्कृति मशीन में जगह ।\n< p class = "jove_title" > 2. Viral Transduction\nखरीद या मेक AAVs प् याज का प्लाज्मिड, जैसा कि पहले बताया गया है < सुप class = "xref" > 10 , < सुप class = "xref" > 11 .\nनोट: यह प्रोटोकॉल dsred बुनियादी प्रोटीन प्रमोटर के GFP नियंत्रण के तहत एक रिपोर्टर जीन के रूप में mitochondrial लक्षित transcriptional या myelin ले जाने AAV सीरोटाइप 2/8 (AAV 2/8) के उपयोग का वर्णन करता है < सुप वर्ग = "xref" > १२ (AAV2/८ MBP_mito_dsred या AAV2/ ८ MBP_mito_GFP) ते कल्पना oligodendrocyte mitochondria. जनरल सीएजी प्रवर्तक (AAV 2/8 CAG_GFP या AAV 2/8 CAG_tdtomato) द्वारा संचालित रिपोर्टर जीन के रूप में GFP या tdtomato को ले AAV 2/8 को oligodendrocyte कोशिका की कल्पना करने के लिए प्रयोग किया जाता है । इस प्रकार, AAV 2/8 CAG_GFP के साथ AAV2/8 MBP_mito_dsred का संयोजन mitochondria में लाल कोशिका और हरी oligodendrocytes देता है, जबकि AAV2 के संयोजन/8 MBP_mito_GFP और AAV 2/8 CAG_tdtomato हरे mitochondria और लाल कोशिका देता है । कहीं और अधिक विस्तार से वर्णन किया जाता है < सुप वर्ग = "xref" > १३ .\nपर दिन7इन विट्रो (DIV7), transduce oligodendrocytes with AAVs.\nचेतावनी: AAVs के साथ काम करने के लिए सुरक्षा नियमों का पालन करें । सुनिश्चित करें कि उचित प्रशिक्षण और सुरक्षा स्तर की स्वीकृति आवश्यक है । सभी निंनलिखित बिंदुओं को एक वर्ग द्वितीय सुरक्षा दस्ताने और लैब कोट का उपयोग कर कैबिनेट में किया जाना चाहिए । यहां, AAV के प्रांतस्था क्षेत्र के लिए आवेदन के स्लाइस का वर्णन किया गया है, के रूप में यह क्षेत्र है कि सबसे अच्छा वसूली से पता चलता है ।\nपूर्व में AAV को पतला करना (३७ & #176; ग) कल्चरल मीडियम. चारों ओर कमजोरियां2& #215; 109जीनोम प्रतियां/एमएल (GC/एमएल) oligodendrocytes के एक विरल transduction जो स्लाइस के भीतर एकल कोशिकाओं की इमेजिंग सक्षम बनाता है पाने के लिए सिफारिश कर रहे हैं । हालांकि, एक पायलट अलग titers का उपयोग करने transduced oligodendrocytes कि विशिष्ट प्रयोगों के लिए उपयुक्त है की एक घनत्व सुनिश्चित किया जाना चाहिए । यदि दो अलग AAVs का उपयोग किया जाता है, वे एक ही समाधान में मिलाया जाना चाहिए और एक साथ टुकड़ा करने के लिए जोड़ा ।\nके आसपास जोड़ें १.३ & #181; L पतला प्रत्येक स्लाइस करने के लिए AAV: सुनिश्चित करें कि पिपेट टिप के बाहर सूखी है । पिपेट १.३ & #181; L पतला AAV और प्रांतस्था के ऊपर पिपेट पकड़, पिपेट टिप (लगभग 1 मिमी दूर) के साथ स्लाइस को छूने के बिना संभव के रूप में बंद.\nफिर धीरे पिपेट से बाहर समाधान धक्का । जब समाधान स्लाइस को छूता है, तो पूरे प्रांतस्था क्षेत्र पर समाधान फैलाने के लिए पिपेट टिप को प्रांतस्था पर ले जाएं ।\nनोट: इस प्रक्रिया के रूप में उपवास के रूप में संभव के रूप में आवश्यक से अधिक समय के लिए हुड से बाहर स्लाइस रखने से बचने के लिए किया जाना चाहिए । समय पर एक डिश पर यह मत करो और पहली डिश #2 डिश पर शुरू करने से पहले वापस मशीन में डाल दिया । ऊतक को नुकसान पहुँचाए बिना AAV का एक संतोषजनक वितरण पाने के लिए कुछ अभ्यास और एक स्थिर हाथ की आवश्यकता है ।\nयदि एक ईमानदार प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप सेल लैब में उपलब्ध है, तो प्रोटीन एक्सप्रेशन को माइक्रोस्कोप के तहत डिश में रखकर कल्चर में समय के दौरान चेक किया जा सकता है ।\nनोट: पकवान से अधिक 2-5 मिनट के लिए मशीन के बाहर नहीं रखा जाना चाहिए ।\n< p class = "jove_title" > 3. समय-चूक इमेजिंग\n< p class = "jove_content" > नोट: इमेजिंग किया जा सकता है जब भी फ्लोरोसेंट मार्कर की अभिव्यक्ति का स्तर पर्याप्त है और स्लाइसें स्वस्थ देखो (आमतौर पर DIV11-14) ।\nसुनिश्चित करें कि माइक्रोस्कोप, छिड़काव और हीटिंग को सही ढंग से सेट किया गया है ताकि बुलबुला इमेजिंग समाधान गर्म हो और प्रवेश कर सके और नहाने से बाहर निकल सके ।\nनोट: विभिन्न समाधान स्नान कक्षों के लिए मौजूद हैं । एक सरल संस्करण यहां प्रस्तुत किया है ।\nमें और कुंद सिरिंज सुइयों द्वारा स्नान के आउटलेट बनाने के लिए (तुला पर ~ ४५ & #176;) कि blu द्वारा स्नान के पक्षों से जुड़े रहे है-कील/\nयह सुनिश्चित करना है कि टयूबिंग लगातार bubbled इमेजिंग समाधान की एक बोतल से चला जाता है, सिकुड़नेवाला पंप के माध्यम से, हीटर इकाई के हीटिंग ट्यूब के माध्यम से, और फिर स्नान में प्रवेश सिरिंज सुई के लिए ।\nसिरिंज सुई आउटलेट के लिए एक और ट्यूब कनेक्ट । यह ट्यूब तो सिकुड़नेवाला पंप के माध्यम से चला जाता है और इमेजिंग समाधान की बोतल को वापस (या एक बेकार बोतल के लिए) ।\nबबल इमेजिंग सॉल्यूशन (recipe in reagents & #39; टेबल) विथ bioxide गैस.\nनोट: यह मी होना चाहिएइमेजिंग से पहले कम से rted 15 मिनट और प्रयोग के दौरान जारी रखें ।\nसिकुड़नेवाला पंप और हीटर पर बारी और स्नान के माध्यम से समाधान चलाने के लिए इष्टतम स्नान तापमान प्राप्त करने के लिए (३७ & #177; ०.५ & #176; ग). सुनिश्चित करें कि तापमान इकाई से जुड़ा थर्मामीटर संवेदक स्नान समाधान में जलमग्न हो गया है ।\nमाइक्रोस्कोप, प्रतिदीप्ति लैंप और उपयुक्त पराबैंगनीकिरण पर बारी ।\nनमूना के लिए एक उपयुक्त प्रकाश पथ की स्थापना की ।\nनोट: यह माइक्रोस्कोप सेटअप और जांच के आधार पर भिंन होगा । कैसे फोकल माइक्रोस्कोप का उपयोग करने के लिए की सामान्य ज्ञान की आवश्यकता है और यहाँ से निपटा नहीं किया जाएगा ।\nउचित आवर्धन और संख्यात्मक एपर्चर (एनए) के साथ एक जल विसर्जन उद्देश्य का उपयोग करें । हम एक 40x जल विसर्जन योजना-apochromat उद्देश्य (एनए १.०) का उपयोग करें ।\nओपन pinhole लगभग 2-२.५ के ऑप्टिकल सेक्शन हासिल करने के लिए & #181; मी समय चूक वीडियो के लिए । यह समय चूक के दौरान ध्यान से बाहर जा mitochondria की घटना कम कर देता है ।\nट्रान्सफर organotypic स्लाईस टू बाथ:\nएक छोटे प्लास्टिक पेट्री डिश के लिए इमेजिंग समाधान या संस्कृति माध्यम की एक बूंद जोड़ें ।\n, बाँझ संदंश का उपयोग करने के लिए ड्रॉप करने के लिए झिल्ली डालने से एक organotypic टुकड़ा हस्तांतरण. संदंश को केवल कंफ़ेद्दी को छूना चाहिए और न कि स्लाइस.\nको पेट्री डिश पर ढक्कन लगा दें.\nतुरंत संस्कृति मशीन में वापस स्लाइस के बाकी युक्त पकवान डाल दिया ।\nमाइक्रोस्कोप के लिए स्लाइस युक्त पेट्री डिश लाने के लिए.\nसिकुड़नेवाला पंप बंद है, जबकि माइक्रोस्कोप स्नान के लिए टुकड़ा स्थानांतरित । सबसे पहले, स्नान के शीर्ष करने के लिए पेट्री डिश से स्लाइस के साथ कंफ़ेद्दी लिफ्ट करने के लिए संदंश का उपयोग करें (कंफ़ेद्दी नाव होगा) । इसके बाद कंफ़ेद्दी के हर तरफ संदंश के दो नुस्खे रखें ताकि वे स्लाइस को छूने के बिना कंफ़ेद्दी को स्पर्श करें, और नहाने के नीचे के हल के माध्यम से कंफ़ेद्दी को धकेलें । मध्य में कंफ़ेद्दी को स्नान कराएं ।\nका उपयोग संदंश को कंफ़ेद्दी के शीर्ष पर रखने के लिए, स्लाइस को छुए बिना, होल्ड-डाउन एंकर (वीणा) पर लगाएं ।\nनोट: एक वीणा एक घोड़े की नाल के आकार का प्लैटिनम लंगर कि तैर या स्नान में बहती से टुकड़ा को रोकने के लिए प्रयोग किया जाता है । तीव्र स्लाइस के लिए, पतली तार वीणा के एक तरफ से दूसरे के लिए चला (एक संगीत वीणा जैसी) । organotypic स्लाइस के लिए, वीणा और इस तरह से कंफ़ेद्दी के आकार फिट है कि यह टुकड़ा छूने के बिना कंफ़ेद्दी के शीर्ष पर रखना कर सकते हैं ।\nटर्न सिकुड़नेवाला पंप बॅक ऑन.\nनमूना नीचे उद्देश्य कम ।\nछवि के लिए कक्ष और क्षेत्र का चयन करें ।\nनोट: लेजर प्रकाश को कोशिकाओं के अत्यधिक जोखिम से बचने के रूप में यह सेल विषाक्तता का कारण बन सकता है (नीचे अंक में सुझाव देखें) ।\nसही अभिव्यक्ति के साथ एक स्वस्थ दिखने oligodendrocyte खोजने के लिए eyepieces और फ्लोरोसेंट लैंप का उपयोग करें । आमतौर पर, oligodendrocytes कि फ्लोरोसेंट प्रोटीन की एक मजबूत एक्सप्रेस अस्वस्थ दिखाई देते हैं । अस्वस्थ oligodendrocytes एक blobby उपस्थिति के साथ प्रक्रियाओं होगा, और mitochondria खंडित दिखाई देगा । स्वस्थ oligodendrocytes में, सोमा और प्रक्रियाओं चिकनी दिखाई देते हैं और mitochondria विभिन्न लंबाई है (हालांकि आम तौर पर बहुत कम न्यूरॉन्स और astrocytes < सुप वर्ग = "xref" > १३ , < सुप वर्ग = "xref" > १४ , < सुप वर्ग = "xref" > १५ ).\nको देखने के क्षेत्र के बीच में ब्याज की कोशिका पर रखें.\nउपयोग & #34; live & #34; सॉफ़्टवेयर में फ़ंक्शन (Leica और जीस माइक्रोस्कोप्स के लिए) स्क्रीन पर कक्ष की पहचान करना और रुचि का क्षेत्र चुनना, उदा., कक्ष का एक भाग जिसमें कई प्राथमिक प्रक्रियाएँ या myelin आवरण शामिल हों, या एक एकल प्रक्रिया या myelin म्यान \nनोट: संभव के रूप में प्रक्रियाओं/आवरण के रूप में ज्यादा के रूप में छवि में सक्षम हो, प्रक्रियाओं है कि एक्स-y दिशा में अपेक्षाकृत फ्लैट रखना युक्त क्षेत्रों का चयन करें ।\nब्याज के क्षेत्र में ज़ूम (आमतौर पर ०.१४ के पिक्सेल आकार के साथ एक छवि का निर्माण-०.३० & #181; m).\nका उपयोग कर & #34; क्षेत्रको & #34; उपकरण, क्षेत्र के चारों ओर एक आयत आरेखित करें और केवल चयनित क्षेत्र को स्कैन करने का विकल्प चुनें । स्कैनिंग समय, और इस प्रकार लेजर जोखिम, केवल चयनित क्षेत्र स्कैनिंग से कम है.\nनोट: क्षैतिज आयताकार क्षेत्रों की जरूरत है स्कैन लाइनों की कम संख्या के कारण ऊर्ध्वाधर क्षेत्रों की तुलना में तेजी से स्कैन किया जाएगा । यदि किसी अनुलंब आयत क्षेत्र को स्कैन किया जाता है, तो स्कैन समय को ९० अंश (घुमाव उपकरण का उपयोग करके) को रोटेट करके घटाया जा सकता है ।\nलेजर शक्ति को समायोजित करने और लाभ mitochondria पर एक अच्छा दृश्य प्राप्त करने के लिए ।\nनोट: न्यूनतम लेजर शक्ति की जरूरत का उपयोग करें । यदि संभव हो, लेजर शक्ति बढ़ाने के बजाय लाभ की बारी है । कोशिका विषाक्तता के कारण के अलावा, बहुत उच्च लेजर पावर ब्लीच समय के साथ imaged वस्तुओं होगा, इस प्रकार स्कैनिंग के दौरान लेजर शक्ति या लाभ की एक और वृद्धि की आवश्यकता होती है । आवश्यक लेजर शक्ति और लाभ अभिव्यक्ति के स्तर और माइक्रोस्कोप पर निर्भर करेगा । एक LSM700 फोकल माइक्रोस्कोप के साथ, हम 20-40 & #181 की शक्ति पर एक ५५५ एनएम लेजर का उपयोग करें, छवि dsred या tdtomato के लिए डब्ल्यू और एक ४८८ एनएम लेजर 20-30 & #181 पर प्रयोग किया जाता है; w to छवि GFP (लेजर शक्ति उद्देश्य के पीछे एपर्चर पर मापा) । लाभ लाइव इमेजिंग के लिए उच्च सेट है, आमतौर पर ७००-८०० के लिए GFP और 850-980 dsred और tdtomato के लिए की सीमा में । उच्च लाभ कुछ अधिक पृष्ठभूमि शोर, डिजिटल ऑफ़सेट (ऑफ़सेट मान सामांयतया0और 15 के बीच रखना) को बढ़ाने से निकाल दिया गया है कारण हो सकता है । हमारे अनुभव में, MBP_mito_GFP का उपयोग कर एक बेहतर संकेत MBP_mito_dsred से शोर देता है ।\nस्कैन गति का चयन करें.\nनोट: एक तेजी से स्कैनिंग की गति का उपयोग करके और एक छोटे से स्कैनिंग क्षेत्र ड्राइंग द्वारा स्कैनिंग समय को कम (नीचे बिंदु 4.10.5 देखें). यह भी एक द्वि-दिशा स्कैन करने से स्कैनिंग समय को बचाने के लिए संभव है । हालांकि, यह गरीब छवि गुणवत्ता के कारण अनुशंसित नहीं है ।\nसेट आवृत्ति और समय चूक रिकॉर्डिंग की अवधि, उदाहरण पर कब्जा छवियों oligodendrocytes में mitochondrial इमेजिंग के लिए 20 मिनट की कुल के लिए हर2सेकंड.\nनोट: आवृत्ति और अवधि ब्याज की वस्तुओं की गतिशीलता के अनुसार सेट किया जाना चाहिए । एक उच्च आवृत्ति अधिक लेजर प्रकाश करने के लिए नमूना बेनकाब होगा, लेकिन तेजी से चलती वस्तुओं भी समय की एक छोटी कुल अवधि की आवश्यकता-चूक वीडियो ( उदाहरण के लिए न्यूरॉन्स में mitochondria, जो अधिक बार कदम और mitochondria से एक बहुत उच्च गति में oligodendrocytes, आम तौर पर2मिनट की कुल के लिए हर सेकंड छवि है < सुप क्लास = "xref" > 16 ).\nसमय-चूक रिकॉर्डिंग प्रारंभ करें ।\nनोट: mitochondria से बाहर ले जा सकते है फ़ोकस और/या छवि क्षेत्र से बाहर रिकॉर्डिंग के दौरान बहाव । कंपन और आंदोलन को कम करने के लिए, में और स्नान के आउटलेट को समायोजित करने और अगर जरूरत पंप गति को कम । फोकस में छोटे परिवर्तन आमतौर पर अभी भी हो । इस प्रकार, इमेजिंग के दौरान स्क्रीन की सतत निगरानी की आवश्यकता है, रिकॉर्डिंग के दौरान ध्यान के छोटे समायोजन के साथ.\nसेल और छवि की प्रक्रिया की भविष्य की पहचान के लिए पूरे सेल के एक z-पोट पर कब्जा ।\nनोट: बेहतर रिज़ॉल्यूशन के लिए, pinhole को z-स्टैक के लिए 1 हवादार इकाई पर रीसेट किया जाना चाहिए.\nवै: टयूब दाग myelin.\nनोट: oligodendrocytes transduced के साथ (cytoplasmic) GFP में, myelin म्यानों को आमतौर पर कोशिका (cytoplasmic लकीरें) एक प्राथमिक प्रक्रिया से जुड़ा (देखें < मजबूत वर्ग = "xfig" > चित्रा2ए और बी) की सीधी रेखाओं के रूप में पहचाना जा सकता है । हालांकि, अगर GFP अभिव्यक्ति बहुत कमज़ोर है या एक cytoplasmic मार्कर का उपयोग नहीं किया जाता है, तो यहां समझाए गए अनुसार फोकल चिंतनशील माइक्रोस्कोपी (कोर) द्वारा myelin म्यान की कल्पना करना संभव है ।\n४८८ एनएम पर लेजर उत्तेजना के साथ सॉफ्टवेयर में एक नया प्रकाश पथ सेट और एक ही तरंग दैर्ध्य, जैसे 470-500 एनएम के आसपास उत्सर्जित प्रकाश पर कब्जा ।\nलेजर शक्ति और लाभ समायोजित जब तक myelin दिखाई है (< मजबूत वर्ग में उदाहरण देखें = "xfig "> चित्रा3). एक LSM ५१० मेटा माइक्रोस्कोप का प्रयोग, हम आम तौर पर7की एक लेजर शक्ति का उपयोग करें-& #160; 12 & #181; W (उद्देश्य के पीछे एपर्चर पर मापा) ।\nवै: immunostaining. के लिए स्लाइस की तैयारी\nयदि imaged कक्ष immunostaining के बाद पहचाना जाना चाहिए, तो कक्ष की एक कम आवर्धन छवि (10x) कैप्चर करें और छवि में एक तीर या समान आरेखित करके उसके स्थान को इंगित करें । सेल का पता लगाने के लिए, यह भी पूरे टुकड़ा का एक मैनुअल नक्शा आकर्षित करने के लिए सिफारिश की है, सेल के स्थान का संकेत है ।\nकमरे के तापमान में 1 घंटे के लिए शेखर पर 4% paraformaldehyde (पीएफए) में स्लाइस फिक्स ।\nसावधानी: पीएफए हानिकारक है । सुरक्षात्मक पहनते है और केवल एक हवादार डाकू में उपयोग का उपयोग करें ।\nपतला निर्धारण 1:10 और4& #176 पर छोड़ दें; ग जब तक शुरू immunohistochemistry के रूप में कहीं और वर्णित < सुप class = "xref" > 17 .\nनोट: हालांकि स्लाइस कई हफ्तों के लिए पतला निर्धारण में छोड़ा जा सकता है, प्रतिदीप्ति फीका हो सकता है । निर्धारण के 10 दिनों के भीतर immunohistochemistry प्रदर्शन की सिफारिश की है.\nOrganotypic मस्तिष्क स्लाइसें कि संस्कृति और transduced थे ऊपर वर्णित के रूप में cortical oligodendrocytes व्यक्त mito_dsred और GFP के एक विरल वितरण दिखाया । Olig2 और MBP के खिलाफ एंटीबॉडी के साथ Immunostaining की पुष्टि की है कि अभिव्यक्ति oligodendrocytes के लिए विशिष्ट था (चित्रा 1).\nलाइव इमेजिंग के लिए, transduced oligodendrocytes समानांतर में चल रहे कई myelin आवरण की उनकी विशेषता आकृति विज्ञान द्वारा पहचाना गया (चित्र 1 और चित्र 2a) । transduced oligodendrocytes पर समय-चूक इमेजिंग प्रदर्शन करके, यह प्राथमिक प्रक्रियाओं और myelin म्यानों में mitochondria के आंदोलन की निगरानी करने के लिए संभव है (चित्र बी-डी).\nकम GFP अभिव्यक्ति के साथ कोशिकाओं में, myelin म्यान लाइव इमेजिंग के दौरान ४८८ एनएम पर नमूना रोशन और उत्सर्जित प्रकाश ४७०-५०० एनएम (चित्रा 3) द्वारा पहचाना जा सकता है । इस फोकल चिंतनशील माइक्रोस्कोपी (कोर) तकनीक भी पीएफए निश्चित और immunostained ऊतक पर काम किया, हालांकि myelin आवरण dimmer (चित्र बी-सी) दिखाई दिया । myelin बुनियादी प्रोटीन (MBP) के खिलाफ एंटीबॉडी के साथ immunostaining करके, हमने पाया है कि इमेजिंग विमान के लिए क्षैतिज बिछाने myelin म्यानों के १००% के करीब (ऐरोहेड द्वारा संकेत दिया, चित्र बी-सी) कोर के साथ दिखाई दे रहे हैं, जबकि myelin म्यान यह देखने के क्षेत्र के लिए सीधा करना (तारों से संकेत मिलता है, चित्र बी-सी) कम या बिल्कुल नहीं दिखाई दे रहे हैं । हालांकि लगभग सभी नोड visualized हैं, कई नोड है प्रकट नहीं किया जा रहा म्यान के छोटे भागों के साथ, सतत, दिखाई (चित्र3/ myelin में इन छोटे "अंतराल" तीन पूरक तरंग दैर्ध्य, तथाकथित स्कोर9के साथ इमेजिंग द्वारा में भरा जा सकता है ।\nचित्र 1 : Immunohistochemistry पुष्टि करता है कि MBP-मिळो-dsred चुनिंदा oligodendrocytes कि Olig2 और MBP के लिए प्रतिरक्षा सकारात्मक है में व्यक्त की है । छवियां (AAV2/8) MBP-मिळो-dsred (लाल, mitochondrial मार्कर) और सीएजी-GFP (ग्रीन, cytosol) के साथ transduceded माउस मस्तिष्क स्लाइस के neocortex से कर रहे हैं । स्लाइस myelin मार्कर myelin बुनियादी प्रोटीन के लिए immunolabeled थे (MBP, नीला) और Olig2 (oligodendrocyte वंश कोशिका परमाणु मार्कर, रानी). (संख्या संदर्भ से संशोधित आंकड़ा13) कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।\nचित्र2: oligodendrocytes में mitochondrial आंदोलन को ट्रैक करने के लिए समय-चूक इमेजिंग । (क) oligodendrocyte transduced के MBP_mito_dsred (red mitochondria) और CAG_GFP (green प्रतिदीप्ति) के साथ जेड-टैक (ऑप्टिकल सेक्शन १०.३५ µm) का प्रोजेक्शन. (B) एक ही कक्ष की एकल फोकल छवि (ऑप्टिकल अनुभाग १.०४ µm) । वर्ग समय-चूक इमेजिंग (C) के लिए चयनित किया गया था जो क्षेत्र इंगित करता है और (D) में kymographs (वतनी) बनाने के लिए आरेखित रेखाएँ इंगित किए गए हैं । (ग) एक और बी में सेल की समय चूक रिकॉर्डिंग से छवियां अलग समय अंक पर लिया । मूविंग mitochondria (लाल तीर) दर्शाया गया है । (D) (B) में इंगित की गई पथ से Kymographs । स्टेशनरी mitochondria को सीधी अनुलंब रेखाओं के रूप में देखा जाता है और चलती mitochondria तिरछी रेखाओं के रूप में देखी जाती हैं. के रूप में kymographs में देखा जा सकता है, और समय में पाठ्यक्रम छवियों में (ग), केवल प्राथमिक Kymograph 1 (वतनी 1) के रूप में चिह्नित प्रक्रिया में mitochondria जा रहे हैं । अंय तीन kymographs में mitochondria समय चूक रिकॉर्डिंग के दौरान स्थिर रहे हैं । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।\nचित्र3: myelin से सना हुआ के दृश्य को फोकल चिंतनशील माइक्रोस्कोपी (कोर) । (क) z-पोट (ऑप्टिकल सेक्शन १०.३५ µm) का प्रोजेक्शन एक जीवित organotypic मस्तिष्क स्लाइस के neocortex से. यहां दर्शाए गए oligodendrocyte में GFP व्यंजक (ग्रीन सेल बॉडी) प्राथमिक प्रक्रियाओं और myelin म्यानों की पहचान के लिए बहुत मंद है । इसके बजाय, myelin म्यान ४८८ एनएम पर उत्तेजना द्वारा visualized और ४७०-५०० एनएम पर उत्सर्जित प्रकाश कैप्चरिंग थे (रानी में दिखाया गया है) । GFP + oligodendrocyte के कुछ कोशिका-रिच paranodes को myelin नोड (तीरों) के सुझावों पर देखा जा सकता है । संमिलित करें: myelin म्यान के बढ़ाया भाग से पता चलता है कि myelin कोर के साथ visualized प्रकट होता है "patched" या सतत (विवरण के लिए मुख्य पाठ देखें) । (B-C) striatum (ख) और हिप्पोकैंपस CA1 की परत radiatum (सी) के एक तीव्र माउस मस्तिष्क टुकड़ा है कि 4% पीएफए में तय किया गया है और immunostained बुनियादी प्रोटीन (myelin) के लिए MBP से फोकल छवियां । Horisontal myelin म्यान (ऐरोहेड) कोर के साथ दिखाई दे रहे हैं, जबकि आवरण है कि देखने के क्षेत्र के लिए सीधा कर रहे है (तारक) सबसे अक्सर दिखाई नहीं हैं । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।\nरिएजेंटों की तालिका: इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए कृपया यहां क्लिक करें.\norganotypic संस्कृतियों बनाने के लिए प्रोटोकॉल यहां वर्णित एक संशोधित संस्करण डी सिमौनी और यू द्वारा वर्णित प्रोटोकॉल के18 है (२००६)5। सबसे महत्वपूर्ण परिवर्तन नीचे उल्लिखित किया गया है । Tris बफर संस्कृति माध्यम है, जो जब वायरल transduction और सेल माध्यम के बदलने के दौरान मशीन के बाहर स्लाइस के अस्तित्व में सुधार करने के लिए जोड़ा गया है । कंफ़ेद्दी के लिए नसबंदी प्रक्रिया भी बदली है । जबकि अंय प्रोटोकॉल autoclaving द्वारा कंफ़ेद्दी निष्फल, हम यह सिफारिश नहीं है क्योंकि यह कंफ़ेद्दी के कई कारण को कर्ल होगा । इन पर हो स्लाइस के रूप में कर्ल्ड कंफ़ेद्दी का उपयोग करने से बचें कम स्वस्थ हो जाते हैं । हमारे प्रोटोकॉल चूहों का उपयोग करता है, नहीं चूहों, और संस्कृति प्रांतस्था के बजाय हिप्पोकैंपस, जो हम पतले स्लाइस (२३० µm बनाम ३०० µm) के साथ अच्छी तरह से काम करता है खोजने के लिए संशोधित किया गया है । चूहों और चूहों में प्रसव दिवस 10-20 के आसपास myelination चोटियों के रूपमें19, p7 पर चूहों से बनी संस्कृतियों-9 (और फिर 11-14 दिनों के लिए प्रसंस्कृत) myelinating oligodendrocytes का अध्ययन करने के लिए इष्टतम हैं. इन विट्रो में 11-14 दिनों में, संस्कृतियों कॉंपैक्ट myelin आवरण के साथ कई परिपक्वoligodendrocytes13 होते हैं । युवा चूहों से बनी संस्कृतियों संस्कृति अवधि के अंत में कम परिपक्व oligodendrocytes होते हैं, जबकि बड़े चूहों से बनी संस्कृतियों को और अधिक चुनौतीपूर्ण स्वस्थ20रखने के लिए दिखाया गया है.\norganotypic स्लाइस बनाने की प्रक्रिया में कई महत्वपूर्ण कदम शामिल हैं । विच्छेदन और दिमाग के बढ़ते, साथ ही कंफ़ेद्दी पर स्लाइस रखने, तेजी से किया जाना चाहिए और कुछ कौशल की आवश्यकता है । आमतौर पर, organotypic स्लाइस संस्कृतियों बनाने में पहला प्रयास कम सफल रहे हैं, लेकिन अभ्यास के 2-3 दौर स्वस्थ संस्कृतियों बनाने के लिए आवश्यक कौशल प्राप्त करने के लिए पर्याप्त होना चाहिए । यह प्रक्रिया में एक बाँझ वातावरण रखने के लिए संस्कृतियों के संक्रमण से बचने के लिए महत्वपूर्ण है । इसके अलावा, जब जीवित कोशिकाओं के साथ काम कर रहे, यह हमेशा के लिए सही पीएच और समाधान के परासरणीयता सुनिश्चित करने के लिए सेल स्वास्थ्य बनाए रखने के लिए अनिवार्य है । यह है, इसलिए, परासरणीयता जांच करने के लिए एक अच्छी सलाह है (270-310 mOsm/किग्रा) और सभी समाधानों का pH जो स्लाइस पर उपयोग किया जाता है, विशेष रूप से पहली बार प्रयोग करने पर । संस्कृति और organotypic संस्कृतियों के लिए विच्छेदन समाधान एक पीएच संकेतक (phenol लाल) होते हैं, लेकिन संस्कृति माध्यम में पीले सीरम वास्तविक पीएच से कम की एक छाप दे सकते हैं । संस्कृति माध्यम में संक्रमण की संभावना को कम करने के लिए पेनिसिलिन, Streptomycin, और Nystatin शामिल हैं । इसलिए यह इन एंटीबायोटिक दवाओं और antimycotics जब लैब में organotypic टुकड़ा संस्कृति तकनीक की स्थापना का उपयोग करने की सिफारिश की है, लेकिन वे बाद में जब विशेषज्ञ रोकनेवाला तकनीक लागू किया जाता है बचा जा सकता है । वर्तमान प्रोटोकॉल कक्ष की व्यवहार्यता का आकलन करने के लिए कक्ष आकृति विज्ञान का उपयोग करता है । एक और अधिक मात्रात्मक परीक्षा के लिए, स्लाइसें propidium आयोडाइड या समान रंगों के साथ लोड किया जा सकता है जैसा कि21कहीं वर्णित है । हालांकि, यह पता होना जरूरी है कि propidium आयोडाइड के उत्सर्जन स्पेक्ट्रम dsred, tdtomato और अंय लाल संकेतकों के साथ ओवरलैप । propidium आयोडाइड और इसी तरह के रिएजेंट की एक और सीमा है कि वे आसानी से टुकड़ा की गहरी परतों में प्रवेश नहीं करते हैं, इस प्रकार कोशिकाओं की शीर्ष परत के लिए सेल व्यवहार्यता के आकलन को सीमित5।\nजीन डिलिवरी के लिए कई तरह के तरीके मौजूद हैं । organelles कल्पना करने के लिए organotypic स्लाइस संस्कृतियों के AAV transduction का उपयोग करने का मुख्य लाभ इस प्रकार हैं: AAV transduction गैर के साथ तुलना में postmitotic oligodendrocytes के लिए एक बेहतर सफलता दर-वायरल अभिकर्मक तरीकों22है । इसके अलावा, organotypic संस्कृतियों में सभी मस्तिष्क कोशिका प्रकार मौजूद हैं, और oligodendrocytes एक के समान आकृति विज्ञान है कि vivo मेंदेखा, कॉम्पैक्ट myelin13सहित. यह monoculture में oligodendrocytes से अलग है, जो axons के साथ संचार की कमी है, और इस तरह कॉंपैक्ट myelin नहीं बनाते हैं । विट्रो में इमेजिंग आसान है vivo में के साथ तुलना में और एक बेहतर स्थानिक संकल्प है, जो विशेष रुचि का है प्रदान करता है जब इमेजिंग छोटे organelles जैसे mitochondria. फ्यूचर रिसर्च वीवो मेंइमेज का लक्ष्य होगा, लेकिन लिपिड से भरपूर myelin म्यान के कारण होने वाले ऑप्टिकल वाकया से एक बड़ी चुनौती का सामना करना पड़ेगा । इसके अलावा, AAV सीरोटाइप tropism और प्रमोटर विशिष्टता vivo में और इन विट्रो शर्तों13,23के बीच अलग हो सकता है । यहां प्रस्तुत प्रोटोकॉल में AAV2/8 MBP_mito_dsred और AAV2/8 MBP_mito_GFP को oligodendrocyte mitochondria की कल्पना करने के लिए प्रयोग किया जाता है । AAV सीरोटाइप 2/1 भी MBP_mito_dsred के साथ परीक्षण किया गया था लेकिन organotypic स्लाइस में oligodendrocytes की एक कम संख्या संक्रमित (नहीं दिखाया गया है) । AAV2/8 CAG_GFP और AAV2/8 CAG_tdtomato को oligodendrocyte कोशिका की कल्पना करते थे । इस के लिए जनरल सीएजी प्रमोटर का उपयोग करने के बावजूद, AAV 2/8 CAG_GFP और CAG_tdtomato चुनिंदा संक्रमित oligodendrocytes, केवल astrocytes और न्यूरॉन्स की एक छोटी संख्या के साथ संक्रमित किया जा रहा (इन आसानी से उनकी विशेषता आकृति विज्ञान द्वारा पहचाना जा सकता है). oligodendrocytes के लिए यह selectivity संभवतः AAV 2/8 सीरोटाइप24के tropism के कारण हुआ है । हालांकि, organelle-लक्षित अभिव्यक्ति के लिए, उच्च कोशिका-MBP-या अन्य oligodendrocyte-विशिष्ट प्रवर्तकों के साथ प्राप्त विशिष्टता की सिफारिश की है । अंय serotypes हमारे द्वारा CAG_GFP के साथ परीक्षण किया गया AAV 2/1, 2/2, 2/5, 2/7, 2/9, जिनमें से ज्यादातर संक्रमित मुख्य रूप से ंयूरॉंस और astrocytes (नहीं दिखाया गया है) ।\nनिर्माण और प्रायोगिक शर्तों के आधार पर सेल transduction के संशोधन की जरूरत होगी । transduced कक्ष बहुत मंद दिखाई देते हैं, तो अभिव्यक्ति को बढ़ाने के लिए transduction के बाद इन विट्रो में एक लंबा समय का प्रयास करें । यदि कोशिकाएं चमकदार लेकिन अस्वस्थ दिखाई देती हैं तो transduction के बाद समय को कम करें । यदि बहुत कम कोशिकाएं transduced हैं तो AAV की एकाग्रता बढ़ाई जा सकती है । हालांकि, यह भी संभव है कि transduction के बाद इन विट्रो में समय बहुत लंबा है और transduced कोशिकाओं की मृत्यु हो गई है । यहां इस्तेमाल किया निर्माण के लिए, अभिव्यक्ति का स्तर इष्टतम 4-6 दिनों के बाद transduction थे । transduction के बाद 7-8 दिनों में, कोशिकाओं blobby प्रक्रियाओं के साथ कम स्वस्थ दिखाई दिया, और transduction के बाद 10 दिनों, केवल कुछ transduced कोशिकाओं दिखाई (नहीं दिखाया गया) थे.\nइस प्रोटोकॉल organotypic स्लाइस की लाइव इमेजिंग के लिए एक ईमानदार खुर्दबीन का उपयोग करता है । यह सबसे मोनो से अलग है और सह संस्कृतियों है कि आम तौर पर एक औंधा माइक्रोस्कोप का उपयोग करें । यह यहां एक औंधा माइक्रोस्कोप का उपयोग करने के लिए इष्टतम है, क्योंकि स्लाइस तो ऊपर की ओर का सामना करना पड़ कंफ़ेद्दी के साथ दिया जाना चाहिए, जो संभवतः स्लाइसें कम स्वस्थ होने का कारण बनता है. ईमानदार खुर्दबीन का एक लाभ के लिए सेटअप करने के लिए इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी जोड़ने की संभावना है । इसके अलावा, एक पंप के उपयोग के लिए माध्यम बदलने का मतलब है कि दवा समाधान आसानी से जोड़ा जा सकता है और समय चूक इमेजिंग के दौरान हटा दिया । पंप के साथ एक नुकसान की समस्याओं के स्नान में कंपन और धाराओं के कारण ध्यान बनाए रखने है । माइक्रोस्कोप के तहत, धीरे-धीरे कम हो जाएगा कोशिकाओंस्वस्थ. इसलिए हम 1 घंटे की एक अधिकतम के लिए माइक्रोस्कोप के नीचे स्लाइस रखने के लिए । imaged स्लाइसें दूर फेंक रहे है (विशेष अपशिष्ट) । सुनिश्चित करने के लिए इमेजिंग की स्थिति इष्टतम हैं, नियंत्रण कोशिकाओं की इमेजिंग, जिसमें mitochondrial आंदोलन पहले से ही अच्छी तरह से विशेषता है, समानांतर में चलाया जाना चाहिए । उदाहरण के लिए, axons या dendrites में mitochondrial आंदोलन AAV 2/1 Syn_mito_dsred के साथ transducing स्लाइस द्वारा imaged किया जा सकता है (जिसमें dsred अभिव्यक्ति ंयूरॉन द्वारा संचालित है विशिष्ट synapsin प्रमोटर) या AAV 2/1 CAG_mito_dsred (के बाद immunostaining सेल पहचान की पुष्टि) । mitochondrial आंदोलन का विश्लेषण ImageJ में एकाधिक kymograph उपकरण का उपयोग किया जा सकता है के रूप में25कहीं और वर्णित है ।\nयहाँ हम लाइव इमेजिंग के दौरान दाग myelin के दृश्य के लिए कोर का वर्णन. स्कोर9, जो तीन उत्तेजना तरंग दैर्ध्य का उपयोग करता है के साथ तुलना में, कोर केवल एक (४८८ एनएम) का उपयोग करता है और इस तरह लागू करने के लिए सरल है । स्कोर में, तीन तरंग दैर्ध्य प्रत्येक myelin म्यान के अलग "टुकड़े" प्रकट और एक साथ म्यान की एक पूरी छवि दे । इसके अलावा, स्कोर cytoplasmic जेब जैसे myelin म्यान संरचनाओं का पता लगाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । कोर में इस्तेमाल एक तरंग दैर्ध्य के साथ, एक कम विस्तृत दृश्य दिया जाता है और खोल दानेदार या लगातार प्रकट हो सकता है (छवि 3). फिर भी, कोर myelin आवरण के १००% है कि देखने के क्षेत्र में क्षैतिज है के पास visualizes । इस प्रकार, कोर myelin आवरण का पता लगाने के लिए उपयोगी है, लेकिन myelin संरचनाओं या अखंडता के विश्लेषण के लिए नहीं है ।\nहम लिंडा Hildegard Bergersen और सेल लैब और उपकरण, Janelia आणविक जीवविज्ञान प्लाज्मिड और वायरस के उत्पादन और कोएन वर्वेके लेजर शक्ति माप के साथ सहायता के लिए के लिए संसाधन कर्मचारी साझा करने के लिए उपयोग के लिए Bjørås मागणार धंयवाद । यह काम नार्वे स्वास्थ्य संघ, नार्वे अनुसंधान परिषद और सूक्ष्म उपकरण द्वारा वित्त पोषित किया गया Norbrain द्वारा वित्त पोषित किया गया ।


JNU Violence Live Updates JNU Students Union and ABVP members clash in campus JNU Students Union Chief Aishe Ghosh Injured - JNU Violence Live Updates: जेएनयू में हिंसा के बाद छात्रों का दिल्ली पुलिस मुख्यालय के बाहर विरोध प्रदर्शन, हिंसा में 28 छात्र घायल\n14 दिसंबर, 2020|6:43|IST\nहिंदी न्यूज़ › देश › JNU Violence Live Updates: जेएनयू में हिंसा के बाद छात्रों का दिल्ली पुलिस मुख्यालय के बाहर विरोध प्रदर्शन, हिंसा में 28 छात्र घायल\nJNU Violence Live Updates: जेएनयू में हिंसा के बाद छात्रों का दिल्ली पुलिस मुख्यालय के बाहर विरोध प्रदर्शन, हिंसा में 28 छात्र घायल\nLast updated: Mon, 06 Jan 2020 04:29 AM\n1 / 3tudents protest outside Delhi Police headquarters against attack on students at Jawaharlal Nehru University\n2 / 3Congress leader Priyanka Gandhi Vadra arrives at AIIMS Trauma Centre where 18 people from Jawaharlal Nehru University have been admitted\n3 / 3JNU Violence Live Updates: JNU Students Union and ABVP members clash in campus JNU Students Union Chief Aishe Ghosh Injured\nजवाहरलाल नेहरू विश्वविद्यालय परिसर में रविवार (5 जनवरी) रात को उस वक्त हिंसा भड़क गयी जब लाठियों से लैस कुछ नकाबपोश लोगों ने छात्रों तथा शिक्षकों पर हमला किया, परिसर में संपत्ति को नुकसान पहुंचाया जिसके बाद प्रशासन को पुलिस को बुलाना पड़ा। हमले में जेएनयू छात्र संघ की अध्यक्ष आईशी घोष सहित कम से कम 28 लोग घायल हो गये जिन्हें एम्स में भर्ती कराया गया है।\nसूत्रों ने बताया कि हिंसा शाम करीब पांच बजे शुरू हुई। जेएनयू प्रशासन ने कहा कि लाठियों से लैस नकाबपोश उपद्रवी परिसर के आसपास घूम रहे थे। वे संपत्ति को नुकसान पहुंचा रहे थे और लोगों पर हमले कर रहे थे। कानून व्यवस्था बनाए रखने के लिए पुलिस को बुलाया गया।\nदिल्ली पुलिस ने देरी से कार्रवाई के आरोपों के बीच कहा कि उसने फ्लैग मार्च किया और जेएनयू प्रशासन से लिखित अनुरोध मिलने के बाद स्थिति को नियंत्रित कर लिया गया। हालांकि पुलिस ने यह नहीं बताया कि किसी को गिरफ्तार किया गया है अथवा नहीं। घटना के बाद परिसर के भीतर और आस पास बड़ी संख्या में पुलिस बल तैनात किया गया है और प्रवेश द्वार को बंद कर दिया गया है।\nछात्रों ने आरोप लगाया कि हमलावरों ने हॉस्टल में घुसकर छात्रों और शिक्षकों के साथ मारपीट की। कुछ टीवी चैनलों द्वारा प्रसारित वीडियो फुटेज में पुरुषों के एक समूह को दिखाया गया जो हॉकी लिए इमारत में घूम रहे थे। वाम-नियंत्रित जेएनयूएसयू और एबीवीपी ने हिंसा के लिए एक-दूसरे को दोषी ठहराया। छात्र संघ ने आरोप लगाया कि एबीवीपी के सदस्यों द्वारा किए गए पथराव में घोष सहित उसके कई सदस्य घायल हो गए। लेकिन आरएसएस समर्थित छात्रों के संगठन ने आरोप लगाया कि उसके सदस्यों पर वाम-संबद्ध छात्र संगठनों ने क्रूरता से हमला किया जिसमें उनके 25 लोग घायल हो गए, जबकि 11 लापता हो गए हैं।\nJNU Violence Live Updates:\n- जवाहरलाल नेहरू विश्वविद्यालय में हुई हिंसा के खिलाफ कैंडल जलाकर प्रदर्शन करते अलीगढ़ मुस्लिम विश्वविद्यालय के छात्र।\n- जेएनयू कैम्पस में दिल्ली पुलिस के फ्लैग मार्च करने के दौरान 'दिल्ली पुलिस, गो बैक' के नारे लगे।\n- जवाहरलाल नेहरू विश्वविद्यालय में हिंसा के बाद जेएनयू कैम्पस में दिल्ली पुलिस ने फ्लैग मार्च किया।\nDelhi Police conducts flag march inside JNU campus after the violence in Jawaharlal Nehru University yesterday. pic.twitter.com/arJhkPMd8T\n- जवाहरलाल नेहरू विश्वविद्यालय में हुई हिंसा के खिलाफ पुणे में प्रदर्शन करते फिल्म एवं टेलीविजन इंस्टीच्यूट के छात्र।\n- जवाहरलाल नेहरू विश्वविद्यालय में हुई हिंसा के खिलाफ जेएनयू कैम्पस के बाहर लगातार प्रदर्शन करते छात्र।\n- जवाहरलाल नेहरू विश्वविद्यालय में हुई हिंसा के खिलाफ मुंबई के गेटवे ऑफ इंडिया के पास अलग-अलग कॉलेजों से छात्रों की भीड़।\n- जवाहरलाल नेहरू विश्वविद्यालय में हुई हिंसा के खिलाफ दिल्ली पुलिस मुख्यालय के बाहर जमा प्रदर्शनकारियों की भीड़।\n- जवाहरलाल नेहरू विश्वविद्यालय में हुई हिंसा के खिलाफ जेएनयू कैम्पस के बाहर प्रदर्शन करते छात्र।\n- एम्स ट्रॉमा सेंटर के बाहर 'जय भीम' के नारे लगाते युवा। यहीं जेएनयू के घायल छात्र भर्ती हैं।\n- महाराष्ट्र के पुणे में FTII के छात्रों ने जेएनयू में छात्रों पर हुए हमले के खिलाफ विरोध प्रदर्शन किया।\n- दिल्ली पुलिस ने देरी से कार्रवाई के आरोपों के बीच कहा कि उसने फ्लैग मार्च किया और जेएनयू प्रशासन से लिखित अनुरोध मिलने के बाद स्थिति को नियंत्रित कर लिया गया। हालांकि पुलिस ने यह नहीं बताया कि किसी को गिरफ्तार किया गया है अथवा नहीं।\n- जेएनयू में हुई घटना के विरोध में अलीगढ़ मुस्लिम विश्वविद्यालय में छात्रों ने कैंडल मार्च निकाला। छात्रों का आरोप है कि जेएनयू में पुलिस के साथ में एबीवीपी कार्यकर्ताओं में जेएनयू छात्रसंघ अध्यक्ष के साथ में मारपीट की।\n- जेएनयू विश्वविद्यालय ने कहा है कि कैंपस में हिंसा दुर्भाग्यपूर्ण है। प्रशासन परिसर में किसी भी प्रकार की हिंसा की कड़ी निंदा करता है। जेएनयू प्रशासन को उन छात्रों के प्रति दर्द और पीड़ा महसूस करता है जिनको हिंसा में चोटें आई हैं।\n- एम्स पहुंचीं प्रियंका गांधी ने छात्रों से की मुलाकात। छात्रों से मिलने के बाद प्रियंका गांधी ने कहा कि छात्रों ने उनको बताया कि गुंडों ने लाठी से उनको मारा है। उन्होंने आगे कहा कि एक छात्र ने बताया कि पुलिस ने कई बार उसके सिर मारा है।\n- मुखौटा लगाए हुए कुछ लोगों का समूह जेएनयू में घुस गया और उन्होंने वहां पथराव किया, छात्रों पर हमला किया और संपत्ति को नुकसान पहुंचाया : मानव ससांधन विकास मंत्रालय\n- हिंसा के कृत्यों और अराजकता को बर्दाश्त नहीं किया जाएगा, जेएनयू की घटना दुर्भाग्यपूर्ण और बेहद निंदनीय : मानव संसाधन विकास मंत्रालय\n- जेएनयू हिंसा की भारतीय जनता पार्टी ने कड़ी निंदा करते हुए कहा है कि ये अराजक तत्वों की कोशिश है। अराजकता के लिए छात्रों को मोहरा बनाया जा रहा है।\n- दिल्ली सरकार के स्वास्थ्य विभाग की ओर से कहा गया है कि एंबुलेंस को जेएनयू कैंपस के अंदर नहीं जाने दिया गया है। पुलिस ने एंबुलेंस को जाने से रोका। पार्टी ने कहा है कि हमें उम्मीद है कि दिल्ली पुलिस घायल छात्रों को चिकित्सा सहायता देने के लिए पहुंची एंबुलेंस को नहीं रोकेगी।\n- एचआरडी मंत्री डॉ रमेश पोखरियाल निशंक ने जेएनयू में हुई घटना की निंदा की है और छात्रों से परिसर में शांति बनाए रखने की अपील की है।\n- जवाहरलाल नेहरू विश्वविद्यालय में छात्रों पर हमले की घटना की जाँच ज्वाइंट सीपी, वेस्टर्न रेंड शालिनी सिंह करेंगी।\n- एम्स ट्रामा सेंटर में 18 और सफदरजंग में एक छात्र को भर्ती कराया गया है।\n- जेएनयू के घायल छात्रों को देखने के लिए एम्स के ट्रॉमा सेंटर पहुंची कांग्रेस महासचिव प्रियंका गांधी।\n- जनादेश द्वारा ठुकरा दिए गए और जनाधार वहींन राजनीतिक दलों और नेताओं की हताशा विश्वविद्यालयों में हिंसा के रूप में सामने आ रही है JNU में हुई हिंसा कि हम कड़ी निंदा करते हैं। इस बात की स्वतंत्र और निष्पक्ष जांच होनी चाहिए और दोषियों को कड़ी से कड़ी सजा मिलनी चाहिए: मनोज तिवारी\n- AIIMS ट्रॉमा सेंटर के अधिकारी: जवाहरलाल नेहरू विश्वविद्यालय (JNU) के 18 लोग सिर में रक्तस्राव, जबकि दूसरे घबराहट की शिकायत लेकर एम्स ट्रॉमा सेंटर आए हैं। जांच चल रही है।\n- स्वराज पार्टी के नेता योगेंद्र यादव कैंपस के बाहर पहुंचे हुए हैं। जहां उन्होंने कैंपस के बाहर ही उनके साथ हाथापाई का एक वीडियो भी सामने आया है।\n- जेएनयू कैंपस में हुई हिंसा के बाद भारी संख्या में छात्र दिल्ली पुलिस मुख्यालय के सामने प्रदर्शन कर रहे हैं।\n- राहुल गांधी ने ट्वीट कर कहा है कि नकाबपोशों द्वारा जेएनयू के छात्रों और शिक्षकों हमला किया गया है जिसमें कई गंभीर रूप से घायल हो गए हैं। देश की सत्ता पर काबिज फासीवादी लोग बहादुर छात्रों की आवाज़ से डरते हैं। जेएनयू में आज की हिंसा उसी डर को दिखाती है\n- दिल्ली के उप-राज्यपाल ने ट्वीट कर कहा है कि छात्रों और शिक्षकों के खिलाफ जेएनयू में हिंसा बेहत निंदनीय है। हमने कानून और व्यवस्था बनाए रखने और हिंसा के आरोपियों के खिलाफ कार्रवाई करने का निर्देश पुलिस को दिया है।\n- दिल्ली के मुख्यमंत्री अरविंद केजरीवाल ने ट्वीट कर कहा है कि हमने एलजी से बात की है और जेएनयू कैंपस में कानून व्यवस्था बहाल करने के लिए पुलिस को निर्देश देने का आग्रह किया है। उन्होंने आश्वासन दिया है कि वह स्थिति पर बारीकी से निगरानी रखे हैं और सभी आवश्यक कदम उठा रहे हैं।\n- यूपी के पूर्व सीएम अखिलेश यादव ने कहा है कि JNU में जिस तरह नक़ाबपोश अपराधियों ने छात्रों और अध्यापकों पर हिंसक हमला किया है वो बेहद निंदनीय है. इस विषय में तत्काल उच्च स्तरीय न्यायिक जाँच होनी चाहिए।\n- एबीवीपी ने कहा है कि हमले में करीब 25 छात्र गंभीर रूप से घायल हो गये और 11 छात्रों का अतापता नहीं है। छात्रावासों में कई एबीवीपी सदस्यों पर हमले हो रहे हैं तथा वामपंथी गुंडे छात्रावासों में तोड़फोड़ कर रहे हैं।\n- एबीवीपी ने आरोप लगाया कि वाम समर्थित छात्र संगठनों ने क्रूरतापूर्ण तरीके से हमला किया और उनके 25 कार्यकर्ता घायल हो गए हैं।\n- दिल्ली पुलिस ने कहा कि कानून-व्यवस्था कायम रखने के लिए जेएनयू प्रशासन की तरफ से किए गए अनुरोध पर उसने विश्वविद्यालय के परिसर में प्रवेश किया।\n- जेएनयू में हुए बवाल पर एबीवीपी की जेएनयू यूनिट के अध्यक्ष दुर्गेश ने बयान जारी करके इस पूरे घटना का आरोप लेफ्ट विंग के छात्रों पर लगाया।\n- जेएनयू कैंपस में बवाल के बाज जामिया कोआर्डिनेशन कमेटी ने अधिक से अधिक संख्या में छात्रों को आईटीओ पहुंचने की अपील की है।\n- घटना को लेकर एबीवीपी ने कहा है कि एसएफआई, आइसा, डीएसएफ से जुड़े लोगों ने हमला किया है । इस हमले में करीब 15 छात्रों को गंभीर चोटें आई हैं तथा अभी तक लगभग 11 छात्रों का कोई सुराग नहीं मिला।\n- जेएनयू छात्र संघ अध्यक्ष आईशी घोष ने कहा, 'मुझे मास्क पहने गुंडों ने बेरहमी से मारा है। मेरा खून बह रहा है। मुझे बेरहमी से पीटा गया है।\nयह हिंसा तब हुई जब जेएनयू शिक्षक संघ एक बैठक कर रहा था। इतिहास विभाग के एक प्रोफेसर आर महालक्ष्मी ने घटना का ब्योरा देते हुए कहा, ''हमने टी प्वॉइंट पर शाम पांच बजे एक शांति बैठक आयोजित की थी। जैसे ही यह खत्म हुई, बड़ी संख्या में लोग परिसर में दाखिल हुए और उन्होंने शिक्षकों और छात्रों पर मनमाने ढंग से हमला करना शुरू कर दिया।"\nएक अन्य प्रोफेसर प्रदीप शिंदे ने कहा, ''हमें इस बात पर आश्चर्य है कि इतनी बड़ी संख्या में लोग हाथों में छड़ें लिए कैंपस में कैसे घुसे । मुझे लगता है कि वे ऐसे राजनीतिक कार्यकर्ता थे जो हमेशा हमें देशद्रोही कहते हैं।" ऑनलाइन साझा किए गए एक वीडियो में, घोष के सिर से खून बहते देखा जा सकता है। वीडियो में वह कहती सुनाई दे रही हैं, ''मास्क पहने हुए लोगों ने मुझे बेरहमी से पीटा। जब मुझसे मारपीट की गई तब मैं अपने एक कार्यकर्ता के साथ थी। मैं बात तक करने की हालत में नहीं हूं।"\nजेएनयूएसयू ने दावा किया कि एबीवीपी के सदस्य मुखौटे पहने हुए लाठी, छड़ और हथौड़े के साथ परिसर में घूम रहे थे। जेएनयूएसयू ने दावा किया, "वे पत्थर फेंक रहे थे... छात्रावासों में घुस रहे हैं और छात्रों की पिटाई कर रहे हैं। कई शिक्षकों को भी पीटा गया है।" अखिल भारतीय विद्यार्थी परिषद ने आरोप लगाया कि हिंसा के पीछे वामपंथी छात्र संगठनों का हाथ है। एबीवीपी ने दावा किया कि हमले में लगभग 25 छात्र गंभीर रूप से घायल हो गए हैं और 11 छात्रों के बारे में कोई जानकारी नहीं है। एबीवीपी के कई सदस्यों पर छात्रावासों में हमला किया जा रहा है।\nWeb Title:JNU Violence Live Updates JNU Students Union and ABVP members clash in campus JNU Students Union Chief Aishe Ghosh Injured\nJNU हिंसा में पुलिस अब तक नहीं कर पाई कोई गिरफ्तारी\nJNU टाइमलाइन: कैसे सुलगी कैंपस में हिंसा की आग, जानें कब क्या-क्या हुआ\n3 दिनों से सुलग रहा था JNU कैंपस, जानें कैसे भड़की आग\nदेशभर में गूंजी JNU हिंसा की आवाज, जामिया से लेकर मुम्बई तक में विरोध\nJNU छात्रसंघ चुनाव के लिए ABVP ने इन छात्र नेताओं को बनाया उम्मीदवार\n10 साल पहले लापता हुआ बच्चा परिवार से मिला, काम आया यह उपकरण\nआ गई ड्राइवर-लेस इलेक्ट्रिक रोबोटैक्सी! सिंगल चार्ज में चलेगी 16 घंटे


ट्राइनैक्स एच टैबलेट: देखें उपयोग, दुष्प्रभाव, कीमत और विकल्प | 1mg\nहोम>ट्राइनैक्स एच>ट्राइनैक्स एच टैबलेट\nट्राइनैक्स एच टैबलेट\nट्रिफ्लूओपेराजाइन (NA) + ट्राइहेक्सीफेनिडील (NA)\nट्राइनैक्स एच टैबलेट कई दवाओं से मिलकर बना है जिसका इस्तेमाल स्किजोफ्रेनिया (मेंटल डिसऑर्डर जिसमें व्यक्ति असामान्य व्यवहार करता है) के इलाज में किया जाता है. यह विचारों को बदलता है और मूड को बेहतर बनाता है, व्यक्ति की सोचने, महसूस करने और व्यवहार करने की क्षमता में सुधार करता है.\nट्राइनैक्स एच टैबलेट मांसपेशियों के नियंत्रण में सुधार और मांसपेशियों की जकड़न दूर करने में भी मदद करता है. इसे खाने के साथ या उसके बिना लिया जा सकता है, अच्छा होगा कि रोज एक ही समय पर इसे लें.. इसे हर रोज एक ही समय पर लें क्योंकि यह शरीर में दवा का निरंतर स्तर बनाए रखने में मदद करता है. इस दवा को अपने डॉक्टर द्वारा निर्धारित खुराक और अवधि में ही लें और अगर आप कोई खुराक लेना भूल गए हैं तो उसे जल्द ही ले लें. बेहतर महसूस होने के बावजूद भी दवा की कोई खुराक ना छोड़ें और इलाज का कोर्स पूरा खत्म करें. यह आवश्यक है कि डॉक्टर से बात किए बिना इस दवा को अचानक बंद न किया जाए क्योंकि इससे आपके लक्षणों की अवस्था और भी खराब हो सकती है.\nट्राइनैक्स एच टैबलेट के मुख्य इस्तेमाल\nट्राइनैक्स एच टैबलेट के लाभ\nस्किजोफ्रेनिया एक मानसिक विकार है जिसमें व्यक्ति की सोचने की क्षमता, भावनाओं और व्यवहार में असामान्यता आ जाती है. ट्राइनैक्स एच टैबलेट मस्तिष्क में केमिकल्स के असंतुलन को ठीक करने में मदद करता है जो ऐसे बदलाव के लिए जिम्मेदार हैं. यह विचार, व्यवहार में सुधार करता है और जीवन की गुणवत्ता को बढ़ाता है.\nट्राइनैक्स एच टैबलेट के साइड इफेक्ट\nट्राइनैक्स एच के सामान्य साइड इफेक्ट\nट्राइनैक्स एच टैबलेट का इस्तेमाल कैसे करें\nइस दवा की खुराक और अनुपान की अवधि के लिए अपने डॉक्टर से सलाह लें. इसे साबुत निगल लें. इसे चबाएं, कुचलें या तोड़ें नहीं. ट्राइनैक्स एच टैबलेट को खाने के साथ या भूखे पेट भी ले सकते हैं, लेकिन बेहतर यह होगा कि इसे एक तय समय पर लिया जाए.\nट्राइनैक्स एच टैबलेट किस प्रकार काम करता है\nट्राइनैक्स एच टैबलेट दो दवाओं का मिश्रण हैःट्रिफ्लूओपेराजाइन और ट्राइहेक्सीफेनिडील. ट्राईफ्लुओपेरैज़ाइन एक विशेष प्रकार का एन्टीसाइकोटिक होता है. यह मस्तिष्क में एक केमिकल मैसेंजर (डोपामाइन) की क्रिया को अवरुद्ध करके काम करता है जिससे विचार और मूड प्रभावित होते हैं. हालांकि, इससे अनियंत्रित मूवमेंट (हाथों में थरथराहट, मांसपेशी में ऐंठन) जैसे साइड इफेक्ट हो सकते हैं.. इन दुष्प्रभावों की रोकथाम और इलाज के लिएट्राइहेक्सीफेनिडील जोड़ा गया है.\nशराब के साथ ट्राइनैक्स एच टैबलेट लेने से अत्यधिक नींद आ सकती है.\nगर्भावस्था के दौरान ट्राइनैक्स एच टैबलेट का इस्तेमाल करना असुरक्षित हो सकता है.. हालांकि, इंसानों से जुड़े शोध सीमित हैं लेकिन जानवरों पर किए शोधों से पता चलता है कि ये विकसित हो रहे शिशु पर हानिकारक प्रभाव डालता है. आपके डॉक्टर पहले इससे होने वाले लाभ और संभावित जोखिमों की तुलना करेंगें और उसके बाद ही इसे लेने की सलाह देंगें. कृपया अपने डॉक्टर से सलाह लें.\nट्राइनैक्स एच टैबलेट स्तनपान के दौरान इस्तेमाल के लिए संभवतः असुरक्षित है. मानवो पर किए गए अध्ययनों से पता चलता है कि यह दवा मां के दूध में मिश्रित हो सकती है और बच्चे को नुकसान पहुंचा सकती है.\nट्राइनैक्स एच टैबलेट के इस्तेमाल से ऐसे साइड इफेक्ट्स भी हो सकते हैं जिससे आपकी गाड़ी चलाने की क्षमता प्रभावित हो सकती है.\nट्राइनैक्स एच टैबलेट से नज़रों का धुंधलापन, चक्कर आना, हल्का जी मिचलाना, और कुछ मामलों में दिमागी उलझन हो सकते हैं. यह आपके ड्राइव करने की क्षमता को प्रभावित कर सकती है.\nऐसे मरीज जिन्हें किडनी से जुड़ी कोई बीमारी है, उनके ट्राइनैक्स एच टैबलेट के इस्तेमाल से जुड़ी जानकारी बहुत कम है. कृपया अपने डॉक्टर से सलाह लें.\nलीवर की बीमारी से पीड़ित मरीजों में ट्राइनैक्स एच टैबलेट के उपयोग से जुड़ी सीमित जानकारी उपलब्ध है. कृपया अपने डॉक्टर से सलाह लें.\nअगर आप ट्राइनैक्स एच टैबलेट लेना भूल जाएं तो?\nअगर आप ट्राइनैक्स एच टैबलेट निर्धारित समय पर लेना भूल गए हैं तो जितनी जल्दी हो सके इसे ले लें. हालांकि, अगर अगली खुराक का समय हो गया है तो छूटी हुई खुराक को छोड़ दें और नियमित समय पर अगली खुराक लें. खुराक को डबल न करें.\nकिविकैल्म फोर्ट टैबलेट\nटी.एफ प्लस टैबलेट\nटीसी प्लस टैबलेट\nट्राइनैक्स एच टैबलेट दवाओं का मिश्रण है जो सिज़ोफ्रेनिया के इलाज में मदद करता है.\nगाड़ी चलाते समय या एकाग्रता वाला कोई काम करते समय सावधानी बरतें क्योंकि ट्राइनैक्स एच टैबलेट के कारण चक्कर आने और नींद आने की समस्या हो सकती है.\nडॉक्टर से बिना बात किये ट्राइनैक्स एच टैबलेट लेना बंद न करें, इससे लक्षणों की अवस्था और बिगड़ सकती है.\nआप ट्राइनैक्स एच टैबलेट का उपयोग किस लिए कर रहे हैं?\nप्र. ट्राइनैक्स एच टैबलेट को कितना समय लगता है?\nप्रत्येक व्यक्ति अलग-अलग उपचार से प्रतिक्रिया देता है. आमतौर पर, ट्राइनैक्स एच टैबलेट के पूरे लाभ महसूस करने में कई सप्ताह लग सकते हैं, हालांकि कुछ लोग जल्द से जल्द महसूस करना शुरू कर सकते हैं. इस दवा को काम करने का समय देना महत्वपूर्ण है.\nप्र. अगर मुझे अच्छा लगता है तो क्या मैं ट्राइनैक्स एच टैबलेट लेना बंद कर सकता/सकती हूं?\nनहीं, आपको ट्राइनैक्स एच टैबलेट लेना जारी रखना चाहिए भले ही आपको अच्छी तरह से महसूस होना चाहिए. अगर आप अचानक ट्राइनैक्स एच टैबलेट को रोकते हैं, तो गंभीर निकासी संबंधी समस्याएं हो सकती हैं. आपका डॉक्टर ट्राइनैक्स एच टैबलेट को रोकने से पहले धीरे-धीरे आपकी खुराक कम करेगा.\nप्र. क्या ट्राइनैक्स एच टैबलेट के इस्तेमाल से नींद आ सकती है?\nहां, ट्राइनैक्स एच टैबलेट से आपको नींद आ सकती है. ड्राइविंग, ऑपरेटिंग मशीनरी, ऊंचाई पर काम करने या संभावित खतरनाक गतिविधियों में भाग लेने से बचें जब तक आप यह जान लें कि यह दवा आपको कैसे प्रभावित करती है.\nप्र. क्या ट्राइनैक्स एच टैबलेट के इस्तेमाल से मुंह सूख सकता है?\nहां, ट्राइनैक्स एच टैबलेट का इस्तेमाल मुंह सूखने का कारण बन सकता है. अगर आपको सूखी मुंह का अनुभव होता है, तो बहुत सारे पानी पीते हैं. दिन के दौरान नियमित SIP लें और रात में अपने बिस्तर से पानी रखें. अगर आपके लिप्स में सूखी हो जाते हैं तो आप लिप बाम का उपयोग कर सकते हैं. ऐसिडिक (जैसे लेमन), मसाले और नमक होने वाले भोजन से बचने की कोशिश करें.\nप्र. ट्राइनैक्स एच टैबलेट के भंडारण और निपटान के लिए क्या निर्देश हैं?\nA लाइसेंस वेंडर पार्टनर आपकी सबसे नज़दीकी लोकेशन से ट्राइनैक्स एच टैबलेट डिलीवर करेगा. फार्मेसी द्वारा आपका ऑर्डर स्वीकार किए जाने के बाद, आपके साथ फार्मेसी की डिटेल शेयर की जाएंगी. आपके ऑर्डर की स्वीकृति आपके डॉक्टर की ℞ की वैधता और इस दवा की उपलब्धता पर आधारित है.\n₹7.5₹1025% की छूट पाएं


13 July 2021: Today’s Top Most 10 Environmental News।Weather news in India।Latest News Update - Paryavaranpost\nJuly 13, 2021 Anamika Pritam\taqi in delhi, Breaking News, cold in india, dls news, environmental concerns, environmental economics, Environmental News, environmental pollution, environmental problem, environmental threats, farmers protest news, fatafat news, fatafat news today, gavin newsom news, gujarat news online, gujarati news today, hindi news, imd, India Meteorological Department, INDIA NEWS, latest hindi news, latest india news, latest news, latest news live updates, latest news today, live news, news, nonstop news, pollution in delhi, rain, ranchi, ranchi news, temperature, today breaking news, today news, top news, top news stories, top trending news india, weather update, winter season\nराष्ट्रीय राजधानी दिल्ली के अनेक हिस्सों में बारिश, मॉनसून के दिल्ली आगमन की घोषणा\nमंगलवार को राष्ट्रीय राजधानी क्षेत्र (एनसीआर) के अनेक हिस्सों में झमाझम बारिश हुई, जिसके बाद मौसम विभाग ने मॉनसून के दिल्ली आगमन की घोषणा कर दी. दक्षिण-पश्चिम मॉनसून दिल्ली-एनसीआर की ओर बढ़ने के साथ ही आखिरकार पांच दिन की देरी के बाद, मंगलवार को पूरे देश में छा गया. मौसम विभाग के मुताबिक, 16 जुलाई तक बहुत ही हल्की बारिश की उम्मीद हैं. उसके बाद बारिश बढ़ने की संभावना है.\nदिल्ली में जल्द खत्म होगा जलसंकट, हरियाणा सरकार ने यमुना में छोड़ा 16,000 क्यूसेक पानी\nदिल्ली में जल्द ही जल संकट खत्म होने वाला है. हरियाणा की ओर से 16,000 क्यूसेक पानी यमुना में छोड़ा गया है. दिल्ली जल बोर्ड के उपाध्यक्ष राघव चड्ढा का कहना है कि हरियाणा की ओर से छोड़ा गया पानी तीन से चार दिनों में दिल्ली पहुंचेगा. बता दें कि दिल्ली में यमुना नदी में पानी के गिरते जलस्तर के चलते कई इलाकों में पानी की किल्लत आ खड़ी हुई है. इसे लेकर दिल्ली सरकार और हरियाणा सरकार के बीच जमकर आरोप प्रत्यारोप का सिलसिला भी जारी है. लेकिन इन सबके बीच दिल्ली वालों के लिए राहत की खबर सामने आई है.\nउत्तराखंड: टेंपररी पुल से उफनदी नदी पार करते लोग, उत्तराखंड की तस्वीरे डराने वाली\nउत्तराखंड के कई जिलों में हो रही लगातार बारिश से जनजीवन बुरी तरह प्रभावित हुआ है और कई इलाकों में बाढ़ का खतरा मंडरा रहा है. इस बीच उत्तराखंड के देहरादून का एक वीडियो सामने आया है, जिसमें लोग जान जोखिम में डालकर उफनती नदी पार कर रहे हैं. भारी बारिश के कारण टूट गए पुल के जरिए भी लोग नदी पार करते है. हालांकि सभी लोग सुरक्षित नदी के दूसरी तरफ पहुंच जाते हैं.लेकिन ये वीडियो डराने के लिए काफी है.\nकोरोना की तीसरी लहर पर PM ने चेताया, बोले- हिल स्टेशन पर उमड़ी भीड़ चिंता का विषय\nकोरोना वायरस की दूसरी लहर अभी पूरी तरह से खत्म नहीं हुई है और इस बीच कई राज्यों से नए मामले बढ़ने की खबरें सामने आने लगी हैं. इसी बीच आज एक बार फिर प्रधानमंत्री नरेंद्र मोदी ने पूर्वोत्तर के कई राज्यों के मुख्यमंत्रियों से कोविड-19 को लेकर अहम चर्चा की. हिल स्टेशन, पर्यटन स्थलों पर उमड़ रही भीड़ को लेकर पीएम मोदी ने चिंता व्यक्त की और लोगों से सावधानी बरतने को कहा.\nहिमाचल में नदी किनारे बने 10 घर बहे,3लोगों की मौत, 12 लापता\nहिमाचल प्रदेश में लगातार हो रही बारिश, बादल फटने की घटनाओं की वजह से हालात खराब हैं. बारिश के बाद हुई लैंडस्लाइड के कारण हिमाचल में 10 घर बह गए. हादसे में3लोगों की मौत हो गई, जबकि एक MBBS की छात्रा सहित 12 लोग लापता हो गए. हिमाचल के नगरोटा बगवां में 10 साल की लड़की बह गई, जिसकी लाश 300 मीटर दूर मिली. भागसूनाग में 12 कारें और एक दर्जन से ज्यादा मोटरसाइकिलें बह गईं. धर्मशाला के चैतरू गांव में मांझी नदी अपना रास्ता बदलकर सड़क पर बहने लगी है.\nदिल्ली के कालिंदी कुंज में स्थित यमुना नदी में फिर से दिखे जहरीले झाग\nदिल्ली के कालिंदी कुंज में स्थित यमुना नदी में फिर से जहरीले झाग दिखाई दे रहे है.आए दिन यमुना नदी में ये जहरीली झाग दिखाई देती हैं. ये जहरीली झाग यमुना नदी में बढ़ते प्रदूषण के कारण दिखाई देती हैं. जानकारों का कहना है कि ये झाग हरियाणा और दिल्ली की फैक्ट्रियों से निकलने वाले पानी की वजह से यमुना नदी में प्रदूषण स्तर बढ़ जाता है, जिसकी वजह से नदी में जहरीली झाग दिखाई देती है.\nजम्मू में टूटा 32 साल का रिकार्ड, नदियों के किनारे बसे इलाके जलमग्न, कई पशु तेज बहाव में बह गए\nजम्मू में बारिश ने पिछले 32 साल का रिकार्ड तोड़ दिया है। सोमवार को 150.6 मिलीमीटर बारिश रिकार्ड की गई। इससे पहले सात जुलाई 1989 को 150.4 मिलीमीटर बारिश हुई थी। जम्मू में सोमवार सुबह हुई मुसलधार बारिश से नदी-नालों में उफान और बरसाती नालों में बाढ़ से कई छोटे पुल और कच्चे मकान ढह गए। नदियों के किनारे बसे इलाके जलमग्न होने से कई पशु भी तेज बहाव में बह गए।\nदेश में लगातार घट रहे कोरोना के केस, लेकिन केरल-महाराष्ट्र बढ़ा रहे चिंताः स्वास्थ्य मंत्रालय\nमंगलवार को स्वास्थ्य मंत्रालय ने प्रेस कॉन्फ्रेंस कर बताया कि देश में संक्रमण के मामलों में लगातार कमी तो आ रही है, लेकिन केरल और महाराष्ट्र में देश के 50% से ज्यादा नए केस रजिस्टर्ड हो रहे हैं. स्वास्थ्य मंत्रालय की ओर से दी गई जानकारी में बताया गया है कि देश में इस वक्त 4.31 लाख एक्टिव केस हैं और रिकवरी रेट 97.3% है.\nमुख्यमंत्री शिवराज सिंह चौहान ने आज कचनार का पौधा रोपा\nहर दिन एक पेड़ लगाने के अपने संकल्प के तहत आज मुख्यमंत्री शिवराज सिंह चौहान ने कचनार का पौधा रोपा. उन्होंने ट्वीट करते हुए लिखा प्रतिदिन एक पौधा लगाने का क्रम जारी है। आज भोपाल स्थित स्मार्ट पार्क में कचनार का पौधा रोपा। कचनार सुंदर फूलों वाला वृक्ष है। इसके छोटे या मध्यम ऊँचाई के वृक्ष पूरे भारत में पाए जाते हैं। प्रकृति ने कचनार को अनेक औषधीय गुणों से भरपूर रखा है।\nवायु प्रदूषण के चलते और गंभीर हो रही है कोरोना मरीजों की हालत- स्टडी\nदुनिया भर में अभी भी कोरोना वायरस का कोई ना कोई नया वैरिएंट आकर तबाही मचा जा रहा है. इन सबके बीच एक नए शोध में सामने आया है, जिसमें कहा गया है कि प्रदूषण के चलते कोविड के मामले और ज्यादा गंभीर हो रहे हैं. अमेरिका के सबसे प्रदूषित शहरों में से एक में यह स्टडी हुई. स्टडी में दावा किया गया कि अमेरिका के मिशिगन स्थितत डेट्रॉइट में कोरोना के चलते अस्पताल में भर्ती 2,038 वयस्कों पर अध्ययन के बाद रिसर्चर्स में पाया गया कि जिन लोगों को सांस लेने में मदद करने के लिए ICU की जरूरत पड़ी थी, वे संभवतः वायु प्रदूषण से प्रभावित इलाकों में रहने वाले थे.\n← कुछ ही घंटों में धरती से टकराएगा महाविनाशक सौर तूफान, जानें कहां-कहां होगा इसका असर\nA new body clock-based approach likely for cancer treatment →\nDecember 16, 2021 Anamika Pritam Comments Off on 16 December 2021: Today’s Top Most 10 Environmental News।Weather news in India।Latest News Update


जियो-एयरटेल के सस्ते 4जी फोन का ऐसे मुकाबला करेंगे आईडिया-वोडाफोन! - Inext Live\n⁄ Idea Vodafone may launch soon cheap 4G Phone\nIdea Vodafone may launch soon cheap 4G Phone\nBy: Chandra Mohan Mishra | Publish Date: Fri 13-Oct-2017 10:14:38 PM (IST)\nजियो ने जब से 1500 रुपए कीमत का 4जी वोल्‍ट फोन बाजार में उतारा है, तब से देश की सभी बड़ी टेलीकॉम कंपनियां टेंशन में हैं। जियो के 4जी फोन का मुकाबला करने के लिए Airtel 1399 वाले स्मार्टफोन के साथ पहले ही मैदान में उतर चुकी है। अब खबर यह है कि आईडिया-वोडाफोन भी साथ मिलकर इस वॉर को और भी मजेदार बनाने वाले हैं।\nजियो के 1500 रुपए के 4जी फीचर फोन के बाजार में उतरते ही उसे टक्कर लेने के लिए एयरटेल ने अपना सस्ता 4जी स्मार्टफोन बाजार में उतार दिया है। जिसका इफेक्‍टिव प्राइस 1399 है। सस्ते 4जी फोन के बीच की यह लड़ाई यहीं थमतीनहीं दिख रही है। क्योंकि जानकारी मिली है कि Idea-वोडाफोन जल्दी ही 1500 से कम कीमत पर 4जी हैंडसेट लेकर जल्‍दी ही बाजार में आने वाले हैं।\nबिजनेस जगत की एक बड़ी वेबसाइट के मुताबिक आईडिया-वोडाफोन जो आपस में मर्ज हो रहे हैं, वो मार्केट लीडर बनने के लिए जल्दी ही सस्ते 4जी फोन बेचने की लड़ाई में कूदने वाले हैं। रिपोर्ट के मुताबिक लावा और कार्बन इन दो कंपनियों के साथ आईडिया की बातचीत चल रही है। हैंडसेट और कीमतें तय होते हैं ये सस्‍ते 4जी फोन जल्दी ही आपके नजदीकी आउटलेट्स पर नजर आ सकते हैं।\nजियो के फ्री 4जी फोन के मुकाबले Airtel लाया 1399 का स्मार्टफोन! जानिए5बड़े अंतर\nमोबाइल मैन्युफैक्चरर Lava के एक वरिष्ठ अधिकारी के मुताबिक सस्ता 4जी फोन लॉन्‍च करने को लेकर उनकी कई कंपनियों के साथ बातचीत चल रही है। खास बात यह है कि 1500 रुपए के आसपास की कीमत में बिकने के लिए आने वाले इन 4जी फोन के साथ कंपनियां कई तरह के लॉन्ग टर्म बंडल ऑफर भी लॉन्‍च करेंगे।\nकुल मिलाकर यह कहना चाहिए कि कुछ ही महीनों के भीतर अब हर हाथ में 4जी फोन ही नजर आ सकता है। जियो द्वारा मोबाइल उपभोक्ताओं को दिए जा रहे हैं सस्ते डेटा और कॉलिंग प्लान के साथ साथ सस्ते 4जी फीचर फोन के लॉन्च से भारत का टेलीकॉम मार्केट काफी दबाव में है। हर कंपनी जियो से मुकाबले के लिए हर हफ्ते कुछ ना कुछ नए ऑफर और प्लान लेकर आ रही है। Airtel ने तो हाल ही में जियो के फीचर फोन से मुकाबले के लिए लगभग उतनी ही कीमत में 4जी स्मार्टफोन उतार दिया है। Karbonn A40 Indian स्मार्टफोन फीचर्स के मामले में जियो फोन को टक्कर देता नजर आ रहा है। अब देखना यह है आईडिया-वोडाफोन अब क्या नया लेकर बाजार में उतरते हैं।\n# Cheap 4G Phone\n# Idea Vodafone Merger\nवो शहर जिसने दुनिया को अपने पहाड़ बेच डाले\nfootball-news17 hours ago


PMO के दखल पर BHU के छात्रों ने धरना को दिया विराम, क्लास और परीक्षाओं का बहिष्कार जारी रहेगा\nHomeदेश-समाजPMO के दखल पर BHU के छात्रों ने धरना को दिया विराम, क्लास और...\nछात्रों का कहना है जब तक हमारी माँगों का समाधान नहीं होता और फिरोज खान को यहाँ से हटाया या स्थान्तरित नहीं किया जाता तब तक छात्र कक्षा और2दिसंबर से होने वाली परीक्षाओं का बहिष्कार जारी रखेंगे। छात्र कल पीएमओ को ज्ञापन और अपनी माँगों की कॉपी भी सौंपने जाएँगे।\nSVDV BHU में फिरोज खान की नियुक्ति का विरोध को छात्रों ने दिया विराम\nबनारस हिन्दू यूनिवर्सिटी (बीएचयू) के संस्कृत विद्या धर्म-विज्ञान संकाय में फिरोज खान की नियुक्ति को लेकर विरोध को आज 16वें दिन छात्रों ने पीएमओ के दखल पर विराम दे दिया है। लगातार प्रशासन छात्रों पर दबाव बना रहा है कि छात्र धरना ख़त्म कर दें लेकिन छात्र विराम देने के बाद भी अभी अपनी माँगों पर बने हुए हैं। छात्रों से पीएमओ और BHU प्रशासन ने इस मुद्दे के समाधान के लिए 10 दिन का समय माँगा है।\nछात्रों ने कल ही प्रशासन को अपना माँग पत्र सौंपते हुए कई सवालों का विश्वविद्यालय प्रशासन से जवाब माँगा था। जिसे लेकर देर रात SVDV के संकाय प्रमुख, अन्य विभागाध्यक्षों और VC के बीच मीटिंग चली थी लेकिन किसी भी नतीजे पर नहीं पहुँचा गया। छात्रों का कहना है जब तक हमारी माँगों का समाधान नहीं होता और फिरोज खान को यहाँ से हटाया या स्थान्तरित नहीं किया जाता तब तक छात्र कक्षा और2दिसंबर से होने वाली परीक्षाओं का बहिष्कार जारी रखेंगे। छात्र कल पीएमओ को ज्ञापन और अपनी माँगों की कॉपी भी सौंपने जाएँगे।\nआंदोलनरत SVDV के छात्रों का वाइसचांसलर से सवाल\nइस नियुक्ति प्रक्रिया में विश्वविद्यालय ने यूजीसी के किस शार्ट लिस्टिंग प्रक्रिया को अपनाया है?\nविश्वविद्यालय संविधान के अनुसार नियुक्ति प्रक्रिया सम्पन्न हुई है?\nक्या बीएचयू एक्ट के 1904, 1096, 1915, 1955, 1966 व 1969 एक्ट को केंद्र में रखकर यह नियुक्ति की गई है?\nसंस्कृत विद्या धर्म विज्ञान संकाय के साहित्य विभाग में क्या संकाय के अन्य सभी विभागों के अनुरूप ही शार्ट लिस्टिंग हुई है?\nक्या संकाय के सनातन धर्म के नियमों को ध्यान में रखकर शार्ट लिस्टिंग की गई है?\nSVDV BHU के छात्रों का माँग पत्र\nबता दें कि इस विरोध प्रदर्शन के विराम की कहानी पीएमओ के दखल के बाद लिखी गई। आज ही इस मामले की गूँज प्रधानमंत्री तक पहुँची थी। और प्रधानमंत्री कार्यालय ने इस सम्बन्ध में रिपोर्ट तलब की है। पीएमओ ने इस पूरे बवाल को लेकर BHU प्रशासन से रिपोर्ट भी माँगी। आनन-फानन में मंडलाधिकारी दीपक अग्रवाल ने विदेश दौरे पर होने के बावजूद पीएमओ को रिपोर्ट भेजी। अब प्रशासन एक विस्तृत रिपोर्ट तैयार कर रहा है, जिसे प्रधानमंत्री कार्यालय को भेजा जाएगा। छात्रों ने आरोप लगाया है कि कई विभागों में अयोग्य नियुक्तियों के जरिए विश्वविद्यालय को बदनाम करने की कोशिश की जा रही है।\nबता दें कि पहली बार बनारस हिंदू विश्वविद्यालय के संस्कृत विद्या धर्म विज्ञान संकाय (SVDV) के साहित्य विभाग में एक मुस्लिम सहायक प्रोफेसर डॉ फिरोज खान की नियुक्ति5नवम्बर को हुई। संकाय के विद्यार्थियों को जैसे ही इसकी जानकारी हुई, इस नियुक्ति के खिलाफ विश्वविद्यालय में विरोध प्रदर्शन शुरू हो गया था और तब से लगातार प्रदर्शन जारी था।


56873 विल्लुपुरम मयिलाडुतुरई पैसेंजर ट्रेन रनिंग स्टेटस, सीट उपलब्धता, ट्रेन सूची, टाइम टेबल और रूट मैप देखे - ixigo\nविल्लुपुरम मयिलाडुतुरई पैसेंजर - 56873\n56873 विल्लुपुरम मयिलाडुतुरई पैसेंजर\n56873 - विल्लुपुरम मयिलाडुतुरई पैसेंजर का किराया\nकडलूर पोर्ट जंक्शन\n56873 - विल्लुपुरम मयिलाडुतुरई पैसेंजर, सप्ताह के7दिन VM (विल्लुपुरम जंक्शन) से MV (मयिलाडुतुरई जंक्शन) तक चलती है। 56873 passenger ट्रेन, विल्लुपुरम जंक्शन से 05:55 बजे निकलती है और 09:10 बजे मयिलाडुतुरई जंक्शन पहुँचती है। 56873 ट्रेन, कुल 3hr 15min में यह सफ़र तय करती है एवं यात्रा के दौरान 22 स्टेशनों पर रुकती है। CHIDAMBARAM पर यह ट्रेन सबसे लंबे समय, अधिकतम 2min, तक रुकती है। इस मार्ग पर श्रेणी की सीटें उपलब्ध हैं और टिकट बुकिंग निम्नलिखित कोटा का उपयोग करके की जा सकती है: GN,TQ,SS,LD ixigo पर, विल्लुपुरम मयिलाडुतुरई पैसेंजर - 56873 का शेड्यूल, सीट की उपलब्धता, समय सारिणी और किराये के बारे में अधिक जानकारी प्राप्त करें। विल्लुपुरम मयिलाडुतुरई पैसेंजर के लिए IRCTC ट्रेन टिकट बुक करें, और आप ixigo trains ऐप द्वारा ऑनलाइन रनिंग स्टेटस (live running status) देखें!\nVM विल्लुपुरम जंक्शन शुरू 05:55 -06 1 1 समय पर\nSXR सेरणडणूर 06:04 06:05 1min 8 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nTUY तीरुठुरैयुर 06:11 06:12 1min 14 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nPRT पनरति 06:18 06:19 1min 20 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nMBU मेलपट्टमबाक्कम 06:26 06:27 1min 28 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nNPM नेल्लिकुप्पम 06:32 06:33 1min 33 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nVKP वरकलपत्टू 06:38 06:39 1min 38 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nTDPR तिरुपदरिपुल्यूर 06:49 06:50 1min 43 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nCUPJ कडलूर पोर्ट जंक्शन 06:57 06:58 1min 47 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nCQS कॅपर क्वॉरी 07:02 07:03 1min 51 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nALP अलापकम 07:14 07:15 1min 58 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nPUC पुदु छत्रीम 07:24 07:25 1min 67 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nPO परांगीपेत्ताई 07:31 07:32 1min 74 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nKII किल्ले 07:37 07:38 1min 80 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nCDM चिदंबरम 08:03 08:05 2min 85 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nVMP वल्लमपादुगई 08:11 08:12 1min 90 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nCLN कोलीडम 08:16 08:17 1min 93 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nSY सिरकाली 08:26 08:27 1min 102 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nVDL वैदीश्वरनकोविल 08:34 08:35 1min 108 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nANP आनंदटांडावपुरम 08:41 08:42 1min 116 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nNID नीडूर 08:45 08:46 1min 118 कि.मी. 1 1 1 समय पर\nMV मयिलाडुतुरई जंक्शन 09:10 समाप्त - 122 कि.मी.41 1 समय पर\nविल्लुपुरम मयिलाडुतुरई पैसेंजर 56873 रनिंग स्‍टेटस\nऊपर दी गई जानकारी के अलावा, हर स्टेशन पर विल्लुपुरम मयिलाडुतुरई पैसेंजर - का लाइव रनिंग स्टेटस देखें।\n56873 में कोच की स्थिति और सीट का नक्शा\nविल्लुपुरम मयिलाडुतुरई पैसेंजर - 56873 में 11 कोच हैं। आप अपने कोच की स्थिति के बारे में भी जानकारी प्राप्त कर सकते हैं।\nविल्लुपुरम मयिलाडुतुरई पैसेंजर - 56873, VM (विल्लुपुरम जंक्शन) से MV (मयिलाडुतुरई जंक्शन) तक सप्ताह में7दिन चलती है। यह विल्लुपुरम जंक्शन से मयिलाडुतुरई जंक्शन तक चलने वाली प्रमुख ट्रेन है और 122 किमी. की दूरी तय करती है। आप विल्लुपुरम मयिलाडुतुरई पैसेंजर - 56873 की सीट उपलब्धता, प्लेटफॉर्म पर अपने कोच की स्थिति, स्टेशनों पर रूकने का समय और 56873 रुट मानचित्र देख सकते हैं। आप Villupuram से Mayiladuthurai तक पहुँचने के लिए अन्य परिवहन के साधन भी देख सकते हैं।\n56873 की रेटिंग और समीक्षाएं\nclean to the toilet.please connect to the express train\ngood Super train best price super time\nvery nice.............app and it is very use ful\nBbs Rmm Sf - 20896Ms Kik Express - 16175Pdy Cape Exp - 16861Ncj Antyodaya - 16191हलदिया चेन्नई सुपरफ़ास्ट एक्स्प - 22614Chozhan Express - 16795Ltt Kik Exp - 11017तंजावुर - तिरुच्चिराप्पल्लि विशेष - 16865Ms Mq Express - 16179मंडुआडीह रामेश्वरम एक्सप्रेस - 15120\nVillupuram से Mayiladuthurai ट्रेन रनिंग स्‍टेटस\nBbs Rmm Sf - 20896 रनिंग स्‍टेटसMs Kik Express - 16175 रनिंग स्‍टेटसPdy Cape Exp - 16861 रनिंग स्‍टेटसNcj Antyodaya - 16191 रनिंग स्‍टेटसहलदिया चेन्नई सुपरफ़ास्ट एक्स्प - 22614 रनिंग स्‍टेटसChozhan Express - 16795 रनिंग स्‍टेटसLtt Kik Exp - 11017 रनिंग स्‍टेटसतंजावुर - तिरुच्चिराप्पल्लि विशेष - 16865 रनिंग स्‍टेटसMs Mq Express - 16179 रनिंग स्‍टेटसमंडुआडीह रामेश्वरम एक्सप्रेस - 15120 रनिंग स्‍टेटस\nVillupuram से Mayiladuthurai ट्रेन सीट उपलब्धता\nBbs Rmm Sf - 20896 सीट उपलब्धताMs Kik Express - 16175 सीट उपलब्धताPdy Cape Exp - 16861 सीट उपलब्धताNcj Antyodaya - 16191 सीट उपलब्धताहलदिया चेन्नई सुपरफ़ास्ट एक्स्प - 22614 सीट उपलब्धताChozhan Express - 16795 सीट उपलब्धताLtt Kik Exp - 11017 सीट उपलब्धतातंजावुर - तिरुच्चिराप्पल्लि विशेष - 16865 सीट उपलब्धताMs Mq Express - 16179 सीट उपलब्धतामंडुआडीह रामेश्वरम एक्सप्रेस - 15120 सीट उपलब्धता


मुझसे शादी करोगे मे शहजादा ने शहनाज को बोल दी ये बड़ी बात, शहनाज के फैन्स ने किया ट्रोल - Bollywood Like\nHome TV NEWS मुझसे शादी करोगे मे शहजादा ने शहनाज को बोल दी ये बड़ी बात, शहनाज के फैन्स ने किया ट्रोल\n10:49 AM MUJHSE SHAADI KAROGI, shehjada ne shehnaaj ko bola mannerless, SHEHNAAJ GILL, TV GOSSIP, TV NEWS\nमुझसे शादी करोगे में कई ट्विस्ट एंड टर्न्स देखने को मिल रहे हैं. लेकिन इस सब के बावजूद भी शो को देख दर्शक ज्यादा इंप्रेस नहीं हैं. वो पुरानी वाली शहनाज को भी मिस कर रहे हैं और सिद्धार्थ शुक्ला के साथ उनकी मस्ती भी. लेकिन जैसे बिग बॉस के घर में शहनाज को कई मौको पर टारगेट किया जाता था, वैसा ही कुछ मुझसे शादी करोगे में देखने को मिल रहा है.\nशहजादा की शहनाज के लिए विवादित टिप्पणी\nशो में वाइल्ड कार्ड एंट्री के रूप में आने वाले शहजादा ने शहनाज को लेकर विवादित बात बोल दी है. उन्होंने शहनाज को एक मैनरलेस लड़की बता दिया है. अब शहजादा ने ऐसा इसलिए बोला है क्योंकि शहनाज ने उन्हें कह दिया था कि वो किसी भी लड़के से जल्दी इंप्रेस नहीं होती हैं. सिर्फ यही नहीं शहनाज ने यहां तक कह दिया था कि वो इस समय शहजादा और दूसरे वाइल्ड कार्ड एंट्री को ज्यादा भाव नहीं देंगी. लगता है शहजादा को शहनाज का ये रूखापन ज्यादा रास नहीं आया. इसलिए उन्होंने अपनी एक सोशल मीडिया पोस्ट पर शहनाज को मैनरलेस लड़की बता दिया.\nट्रोल हो रहे शहजादा\nलेकिन शहजादा को शहनाज को ऐसा बोलना भारी पड़ता दिखाई दे रहा है. शहनाज गिल के फैंस शहजादा को सोशल मीडिया पर ट्रोल कर रहे हैं. कोई उन्हें नल्ला बता रहा है तो कोई उन पर सवालों की बौछार कर रहा है. एक यूजर तो शहजादा से काफी परेशान हो गया है. वो लिखता है- आपने शो में बस दो दिन बिताए हैं और आप चाहते हैं कि शहनाज आपके साथ कनेक्ट करने लगे. ये कैसे हो सकता है. आप जानते हैं कि शहनाज के दिल में पहले से कोई और है. आप मेकर्स की वजह से शहनाज को इंप्रेस नहीं कर पाए, तो उसका गुस्सा आप शहनाज पर निकाल रहे हो, ये ठीक बात नहीं है.\nबताते चलें कि इस समय सोशल मीडिया पर मुझसे शादी करोगे का एक प्रोमो काफी वायरल हो रहा है. प्रोमों में दिखाया गया है4लड़को को एविक्ट कर दिया जाएगा. हैरानी इस बात की है कि वीडियो में गौतम इसका जिम्मेदार खुद शहनाज को बता रहे हैं.\nवैसे खबरें तो ऐसी आ रही हैं कि मुझसे शादी करोगे बहुत जल्द बंद हो सकता है. शो दर्शकों को रिझाने में नाकामयाब साबित हुआ है जिसके चलते मेकर्स कोई बड़ा फैसला ले सकते हैं.\nTags: MUJHSE SHAADI KAROGI shehjada ne shehnaaj ko bola mannerless SHEHNAAJ GILL TV GOSSIP TV NEWS


CivilServices Exam 2018 Result: राजस्‍थान के अमृृत ने हासिल की चौथी रैंक | Civil Services Exam 2018 Result Amrit jain form Rajasthan achieved fourth rank in upsc exam | career - News in Hindi - हिंदी न्यूज़, समाचार, लेटेस्ट-ब्रेकिंग न्यूज़ इन हिंदी\nCivil Services Exam 2018 Result: राजस्‍थान के अमृृत ने हासिल की चौथी रैंक\nUpdated: November 7, 2019, 11:05 AM IST\nअमृत राजस्‍थान के भीलवाड़ा से ताल्‍लुक रखते हैं.\nCivil Services Exam 2018 Result: हाल ही में UPSC ने सिविल सेवा परीक्षा 2018 में आरक्षित रखी गई सीट का परिणाम घोषित किया हैं. इसमें राजस्‍थान के अमृत जैन ने टॉप किया है.\nLast Updated: November 7, 2019, 11:05 AM IST\nCivil Services Exam 2018 Result: हाल ही में UPSC ने सिविल सेवा परीक्षा 2018 में आरक्षित रखी गई सीट का परिणाम घोषित किया हैं. इस परिणाम राजस्‍थान के अमृत जैन ने टॉप किया है. अमृत ने चौथी रैंक हासिल की है. बता दें कि इस रिजल्ट में कुल 53 उम्मीदवारों ने क्‍वालिफाई किया है, जिन्हें शेष पदों को भरने के लिए चुना गया है.\nराजस्‍थान के भीलवाड़ा से ताल्‍लुक रखने वाले अमृत की पढ़ाई- लिखाई सेंट्रल एकेडमी स्कूल में हुई. इसके बाद उन्‍होंने बीटेक किया. पढ़ाई पूरी होने के बाद हैदराबाद की एक कंपनी में एक साल तक नौकरी की. इसी दौरान सिविल सेवा परीक्षा की तैयारी करते रहे.आखिरकार कड़ी मेहनत का नतीजा ये रहा कि अमृत का सिविल सेवा परीक्षा में सेलेक्‍शन हो गया. अमृत ने न केवल परीक्षा में सफलता पाई है, बल्‍कि टॉप करके ये भी बता दिया कि अगर कड़ी इच्‍छाशक्‍ति हो तो हर हाल में सफलता पाई जा सकती है.\nगौरतलब है कि इसके पहले यूपीएससी ने सिविल सेवा परीक्षा 2018 का परिणाम 05 अप्रैल को घोषित किया था. इनमें 812 वैकेंसी के लिए आइएएस, आइपीएस, आइएफएस, केंद्रीय सेवा में सभी ग्रुप में 759 उम्मीदवारों का चयन किया गया था. ये 53 उम्मीदवार एक समेकित आरक्षित सूची (consolidated reserve list) का हिस्सा थे. Department of Personnel & Training, the Commission द्वारा की गई मांग के मुताबिक आयोग ने 53 उम्मीदवार मांगे थे. जिसमें सिविल सेवा परीक्षा, 2018 के आधार पर इन पदों को भरने के लिए 38 सामान्य, 14 ओबीसी और 1 एससी कैटेगिरी के कैंडीडेट्स को लिया जाएगा.


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Angel Number 23 Meaning in Hindi - Angel Number\nByAngelNumber September 6, 2021 September 5, 2021\nAngel Number 23 Meaning in hindi, Angel Number 23 Meaning, Angel Number 23, angel number 23 twin flame, angel number 23 23, angel number 23 love, angel number 23 doreen virtue, angel number 23 32, angel number 23 meaning love, angel number 23 spiritual meaning, angel number 23 meaning love, angel number 23 spiritual meaning, angel card number 23 meaning, angel number significance 23, angel number 23 dream meaning, 23 angel number meaning twin flame, 23 32 angel number meaning, angel card number 23 twin flame, angel card number 23 love, angel card number 23 meaning love, 23 angel number, 23 angel number meaning, 23 angel number twin flame, 23 angel number love, 23 angel number meaning love, 23 angel number meaning in hindi, 23 32 angel number, 23 angel number meaning in hindi, 23 angel number meaning twin flame, 23 angel number soulmate, 23 angel number spiritual meaning, 23 angel number 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जाते हैं जो कभी हमें बहुत खुश करती थीं। 23 नंबर की यह चेतावनी अलग-अलग रूपों में आ सकती है। आप इस संख्या को अपने आस-पास हर जगह देख सकते हैं, जिसका अर्थ है कि आपको अपने विश्वास को अपने हाथों में लेने की आवश्यकता है।\nशायद आप किसी ऐसे काम में फंस गए हैं जो आपको पूरा नहीं करता है और आपको ऐसा लगता है कि आप अपना जीवन उन चीजों पर बर्बाद कर रहे हैं जो मायने नहीं रखती हैं। आपके पास अपने दोस्तों और परिवार के लिए मुश्किल से समय है और आपने अपने शौक और रुचियों की पूरी तरह से उपेक्षा की है।\nइस तरह का जीवन आपको उदास और अकेला बना रहा है, भले ही कई लोग आपके साथ कुछ समय बिताने के लिए उत्सुक हों।\nयह परिवर्तन करना आसान नहीं होगा, खासकर यदि आपने लगभग पूरा जीवन एक ही काम करते हुए बिताया हो। इस आदत से बाहर निकलना कठिन होने वाला है लेकिन आप सफल होने में सक्षम होंगे। इस बदलाव को करने के लिए आपको बस थोड़े से साहस और इच्छाशक्ति की जरूरत है।\nआपको केवल एक चीज के बारे में सोचना है कि क्या आपको अपनी इस प्रतिभा को कभी भी आजमाने का पछतावा नहीं होगा। यदि आप जानते हैं कि आप दुखी और हृदयविदारक होने जा रहे हैं, तो इस साहसिक यात्रा पर आगे बढ़ें और कभी पीछे मुड़कर न देखें।\nइस तरह आपके पास बाद में जीवन में पछताने के लिए कुछ भी नहीं होगा, और आपको अपने आप पर गर्व होगा कि आपने इसे आजमाया। एक बार जब आप अपने जीवन को बदलने और अपने जुनून को आगे बढ़ाने का निर्णय लेते हैं, तो स्वर्गदूत आपकी देखभाल करने के लिए आपके कंधे के ठीक ऊपर होंगे। उनकी शक्ति कठिन समय में आपका मार्गदर्शन करेगी और आपके रास्ते में कुछ भी खड़ा नहीं होगा।\nAngel Number 23 विकास और विविधीकरण का प्रतीक है। यह संख्या उन लक्ष्यों का भी प्रतिनिधित्व करती है जिन्हें आपको अपने जीवन में पूरा करना है और आप उन लक्ष्यों को प्राप्त करने के लिए सब कुछ करने जा रहे हैं।\nयह संख्या जीवन और टीम वर्क में वास्तविक उद्देश्यों का भी प्रतीक है जो आपके लिए बहुत महत्वपूर्ण है।\n23 नंबर आपको अपने सपनों को प्राप्त करने में मदद करने के लिए स्वर्गदूतों और उच्च शक्ति से दिशा प्राप्त करने का प्रतिनिधित्व करता है। यह उच्च शक्ति आपके लिए आवश्यक है क्योंकि आप अपने सपने और जुनून को आगे बढ़ाने के लिए विश्वास और इच्छाशक्ति की कमी महसूस करते हैं।\n12 अंक का अर्थ बताता है कि आप रिश्ते में रहने की तुलना में अपने काम पर ज्यादा ध्यान देंगे। रिश्तों में आपकी रुचि कम होगी, लेकिन दूसरी तरफ आप सुख-सुविधाओं में अधिक लिप्त रहेंगे। ये सुख रिश्तों में नहीं बदलेंगे, और इसके बजाय, वे आपके और दूसरे पक्ष के बीच एक बार की बात हो जाएंगे।\nAngel Number 23 आपको यह भी बताता है कि यदि आप एक रिश्ते में हैं, तो आपके और आपके साथी के बीच सुख गतिविधियों में अधिकता के कारण रहने की स्थिति खट्टी हो जाएगी। सेक्स, शराब, और पार्टी करना जैसी चीजें रिश्ते के अलावा आपके अवकाश के समय के उपयोग की मुख्य तकनीक बन जाएंगी।\nयह Angel Number एक मजबूत संदेश देती है कि आपके पास जो प्रेम और दयालु गुण है, वह आपके प्रेम जीवन की तुलना में आपके सामाजिक जीवन में अधिक महत्व रखता है। देवदूत आपको यह बताने की कोशिश कर रहे हैं कि यह आपके बुरे लक्षणों को बदलने और उन लोगों पर ध्यान केंद्रित करने का समय है जो आपसे प्यार करते हैं। आपको अपने साथी से बहुत प्यार मिलता है, इसलिए यह उचित है कि आप उसी का बदला लें।\nसबसे पहले, 23 प्रतीकवाद एक संदेश देता है कि आपको अपने आंतरिक विचारों पर विश्वास करना चाहिए और भरोसा करना चाहिए क्योंकि वे आपको भविष्य में एक बेहतर स्थान पर पहुंचाएंगे। आपकी वृत्ति आपको आपकी सफलता की यात्रा के दौरान मीलों तक चलाएगी। आप प्राकृतिक प्रतिभाओं से धन्य हैं, जिसका सही उपयोग होने पर, आपके जीवन के साथ-साथ उन लोगों के जीवन में भी सुधार होगा जो आपको घेरे हुए हैं। आपके अभिभावक देवदूत संवाद कर रहे हैं कि आपको अपने दिल की इच्छा का दृढ़ता से पालन करना चाहिए और जो कुछ भी आपको खुश करता है।\nदूसरे, यह Angel Number आपको सचेत करती है कि आपको उन सपनों की दिशा में काम करने की आवश्यकता है जिन्हें आप प्राप्त करना चाहते हैं। सफलता की यात्रा में आपके रास्ते में आने वाली सभी चुनौतियों और बाधाओं से लड़ने के लिए आपको साहस और ताकत विकसित करनी चाहिए। आपका अभिभावक देवदूत आपको बता रहा है कि आपके सपने सच हो सकते हैं यदि आप उन्हें प्राप्त करने के लिए कड़ी मेहनत करते हैं। जब आप जो कर रहे हैं उससे प्यार करते हैं, तो आप इसे करने में लगने वाले समय की परवाह नहीं करेंगे, बशर्ते यह आपको बहुत सारी खुशियाँ लाए। आपका दिल जो चाहता है उसे करने में आपको जो खुशी मिलती है वह न केवल आपकी खुशी होगी बल्कि आपके आस-पास के लोगों में भी फैल जाएगी।\nअंत में, एक बार जब आप जो चाहते हैं उसे प्राप्त करने में डर लगता है, तो आपका जीवन नीरस हो जाएगा। इसलिए आपका अभिभावक देवदूत आपको यह संदेश देने की कोशिश कर रहा है कि आपको उस इच्छा को दृढ़ता से विकसित करना चाहिए। आपकी सफलता की यात्रा में डर कोई विकल्प नहीं है; इसके बजाय, यह एक ऐसा गुण है जो आपकी शब्दावली में भी नहीं होना चाहिए। Angel Number 23 आपसे एक अन्वेषण की भावना रखने का आग्रह कर रहा है जो आपको उन चीजों की खोज करने के लिए प्रेरित करेगा जिन्हें आपने कभी संभव नहीं समझा। यदि आप अपने जीवन में कुछ करने की कल्पना करते हैं, तो उस विचार का अनुसरण करें क्योंकि यह आपका जुनून है और आपको उसका पीछा करना चाहिए।\nसंख्या 23 संख्या2और3की ऊर्जाओं का मिश्रण है।\nनंबर2संतुलन और द्वैत, सहयोग, कूटनीति, आपकी आत्मा मिशन और जीवन में उद्देश्य का प्रतीक है।\nअंक3आशावाद और आनंद, रचनात्मकता, विकास, प्रोत्साहन, सहायता, अभिव्यक्ति की ऊर्जा को वहन करता है। नंबर3आरोही मास्टर्स की संख्या है।\nउस ने कहा, संख्या 23 एक संख्या है जो करिश्मा, समाज और संचार का प्रतीक है।\nAngel Number 23 आपसे अपने और दूसरों के जीवन को बेहतर बनाने का आग्रह करता है। आप अपने समाज को एक बेहतर जगह बनाना चाहते हैं, जो आनंद और संतोष से भरा हो और ऐसा करने के लिए आप अपनी सभी क्षमताओं का उपयोग करते हैं।\nयह संख्या आपको दूसरों की मदद करने के लिए हर संभव प्रयास करने के लिए प्रोत्साहित कर रही है।\nयदि आपके जीवन में संख्या 23 लगातार दिखाई देने लगे, तो यह दुनिया को एक बेहतर जगह बनाने के आपके प्रयासों के लिए आपको समर्थन भेजने वाले स्वर्गदूतों का संकेत है।\nवे कह रहे हैं कि आप अपनी ओर से मार्गदर्शन और मदद करके जो कुछ भी आप कल्पना करते हैं उसे पूरा कर सकते हैं।\nयदि यह संख्या आपके जीवन में बार-बार आती है, तो यह आपके लक्ष्यों और आत्मा मिशन को पूरा करने के आपके प्रयासों में ईश्वरीय और स्वर्गदूतों के बिना शर्त समर्थन का संकेत है।\nजब भी आप भय या असुरक्षा महसूस करते हैं, वे आपको ब्रह्मांड में विश्वास रखने और सहायता और मार्गदर्शन प्राप्त करने के लिए प्रोत्साहित कर रहे हैं।\nयदि आप सफल होना चाहते हैं, तो Angel Number 23 आपको मामलों के प्रति अपने दृष्टिकोण में आत्मविश्वास और हंसमुख रहने का संदेश देती है।\nयदि Angel Number 23 लगातार आपके द्वारा देखे जाने वाले स्थान पर दिखाई देती है, तो यह संकेत दे सकता है कि आपके स्वर्गदूतों के पास आपके लिए एक संदेश है।\nवे आपको यह संख्या तब तक दिखाते रहेंगे जब तक आपको एहसास नहीं हो जाता कि संयोग से ज्यादा कुछ है।\nयह संख्या संभवतः आपके स्वर्गदूतों का संदेश है कि आप अपनी और दूसरों को खुश करने के लिए अपनी प्रतिभा और क्षमताओं का अधिक उपयोग करना शुरू करें।\nयह संख्या आपको अपने जुनून और इच्छाओं का पीछा करना शुरू करने के लिए प्रोत्साहित करती है। यदि आप हमेशा कुछ करना चाहते थे, तो आपके जीवन में 23 Angel Number के संदेश का मतलब हो सकता है कि अब यह शुरू करने का सही समय है।\nआप छोटे कदम उठाकर शुरुआत कर सकते हैं, और चीजें वहीं से बढ़ेंगी।\nयदि आप अपने चारों ओर 23 नंबर देखते रहते हैं, तो इसे एक चेतावनी के रूप में लिया जा सकता है। आपको अपनी जड़ों में वापस जाने और उन चीजों का पीछा करने की जरूरत है जिन्हें आप भूल गए थे। यह जुनून ड्राइंग, संगीत निर्माण चीजें या जो कुछ भी आप पहले करना पसंद करते थे, हो सकता है।\nइन संकेतों को सुनना महत्वपूर्ण है क्योंकि जब आप बूढ़े हो जाएंगे तो आपको निश्चित रूप से इस जुनून का पीछा नहीं करने का पछतावा होगा। जब आप छोटे होते हैं तो अपने जीवन को आकार देना आसान होता है और यदि आप इस योजना को दूर धकेलते रहते हैं, तो आप इस लक्ष्य को कभी प्राप्त न करने के जोखिम में हैं।\n23 नंबर आपको अपने सभी सपनों को प्राप्त करने के लिए पर्याप्त परी शक्ति और सुरक्षा प्रदान करता है। आपको बस अपने लक्ष्यों और जुनून पर ध्यान केंद्रित करना है और कभी भी खुद पर विश्वास करना बंद नहीं करना है। प्रेरित रहना मुश्किल नहीं होगा क्योंकि यह जुनून कुछ ऐसा है जो आपके जीवन को कुछ समय के लायक बनाता है और आप अपने जीवन में इस “विशेष चीज़” के बिना अपने जीवन की कल्पना नहीं कर पाएंगे।\nयह नंबर आपको प्रेरित रहने में मदद करता है क्योंकि जब भी आप इस नंबर को देखेंगे तो आपको अपने लक्ष्य की याद दिला दी जाएगी। ऐसी चीजें जो आपको खुश करती हैं और जब आप उन पर काम कर रहे होते हैं तो आपको खुशी मिलती है, वे चीजें हैं जिन पर आपको ध्यान देने की आवश्यकता है।\nनहीं तो आपका जीवन एक जीवित दुःस्वप्न बनने जा रहा है और आपके दिन एक वाक्य की तरह ही होंगे। इसलिए, अगर आपको हर सुबह बिस्तर पर रहने का मन करता है और आप चाहते हैं कि आप कभी नहीं उठे, तो यह समय आपके जीवन में कुछ बदलाव करने का है।\nWhat to Do When you see Number 23\nअपने करियर से शुरुआत करें और इस संख्या की सकारात्मक ऊर्जा आपको इन सपनों को प्राप्त करने और अंत तक उनका पीछा करने में मदद करेगी। इस विशेष प्रतिभा को दुनिया को उपहार में दें और रास्ते में जितनी हो सके उतनी आत्माओं को छूएं।\nहमें उम्मीद है कि यह लेख आपके लिए दिलचस्प और उपयोगी रहा है, इसलिए अब आप उस संदेश को बेहतर ढंग से समझ सकते हैं जो आपके स्वर्गदूत आपको भेज रहे हैं। वे आपसे सीधे संवाद करने में सक्षम नहीं हैं, इसलिए वे आपको Angel Number 23 भेजते हैं।\nयह भी पढ़े: Angel Number 22 Meaning in Hindi\nयदि आप अपने चारों ओर 23 नंबर देखते रहते हैं, तो इसे एक चेतावनी के रूप में लिया जा सकता है। आपको अपनी जड़ों में वापस जाने और उन चीजों का पीछा करने की जरूरत है जिन्हें आप भूल गए थे।\nसबसे पहले, 23 प्रतीकवाद एक संदेश देता है कि आपको अपने आंतरिक विचारों पर विश्वास करना चाहिए और भरोसा करना चाहिए क्योंकि वे आपको भविष्य में एक बेहतर स्थान पर पहुंचाएंगे। आपकी वृत्ति आपको आपकी सफलता की यात्रा के दौरान मीलों तक चलाएगी।


फिर सामने आए गहलोत-पायलट के बीच मतभेद, राज्यसभा चुनाव को लेकर पायलट ने कही यह बात! - Rajasthan Times\nHome राजनीति फिर सामने आए गहलोत-पायलट के बीच मतभेद, राज्यसभा चुनाव को लेकर पायलट...\nफिर सामने आए गहलोत-पायलट के बीच मतभेद, राज्यसभा चुनाव को लेकर पायलट ने कही यह बात!\nजयपुर। प्रदेश के मुख्यमंत्री अशोक गहलोत और उपमुख्यमंत्री सचिन पायलट के बीच मतभेद एक बार फिर उजागर हो गए हैं। इस बार राज्यसभा चुनावों को लेकर पायलट ने बिना नाम लिए ऐसी बात कह दी जिससे उनके मतभेदों को लेकर नकारा नहीं जा सकता है। उप मुख्यमंत्री सचिन पायलट ने आज बिना नाम लिए सीएम गहलोत पर निशाना साधते हुए कहा कि राज्यसभा चुनाव के दौरान जिसने जो कहा और कहलवाया गया सब निराधार साबित हुआ। उसका कोई औचित्य नहीं था। पायलट ने कहा कि उनका दावा सही साबित हुआ कि कांग्रेस पार्टी के विधायकों के सौ फीसदी वोट राज्यसभा प्रत्याशियों को मिलेंगे और वही हुआ।\nदरअसल, राज्यसभा चुनाव से पहले मुख्यमंत्री अशोक गहलोत ने यह कहकर कांग्रेस विधायकों की बाड़ेबंदी की थी कि बीजेपी कांग्रेस विधायकों की तोडफोड़ की साजिश रच रही है। गहलोत ने विधायकों को 35 करोड़ तक के ऑफर देने का दावा किया था और इसकी जांच पहले एसीबी फिर एसओजी और अब एटीसएस को सौंप दी। लेकिन अभी तक शिकायत करने वाले सरकार के मुख्य सचेतक महेश जोशी ने एजेंसियों को अपना बयान तक दर्ज नहीं कराया है। न ही अभी तक ये सामने आया कि जांच में क्या जानकारी सामने आई और न ही किसी विधायक ने स्वीकार किया कि उसे ऑफर दिया गया।\nउल्लेखनीय है कि हाल ही में 19 जून को राजस्थान से राज्यसभा की3सीटों के लिए हुए चुनाव में कांग्रेस और बीजेपी ने अपने दो-दो प्रत्याशी चुनाव मैदान में उतारे थे। विधानसभा में पार्टीवार स्थिति को देखते हुए दो सीटों पर कांग्रेस और एक सीट पर बीजेपी की जीत तय मानी जा रही थी. परिणाम भी उसी के मुताबिक सामने आया।\nPrevious articleप्रदेश में शुरू होगी इंदिरा रसोई योजना\nNext articleचीनी निर्यात में नया रिकॉर्ड बनाएगा भारत\nगहलोत मंत्रिमण्डल विस्तार पर अभी लगा विराम!