Policejní bulvár. Lehne si Nagyová taky na koleje? | Český deník 89\n← Billy The Heretic a Hipster Hitler\nKyselé hrozny: ‘K volbám nikdo nepřišel, proto ať je vezme čert.’ →\nČeský zpravodajský bulvár jako by se sám sebe snažil vyvinit, když zatrvzele používá ženino původní příjmení, alibisticky se tím snad od osoby Jany Nagyové-Nečasové snaží jaksi oddálit. Přitom o ní referuje takřka zevnitř jejího těla.\n«Díky» MF DNES si každý zvědavec může přečíst osobní SMS korespondenci, odposlechy hovorů, a jako by to nestačilo, tak dokonce perverzní hodnocení odposlechů policisty! Je to, jako bychom sledovali porno, před kterým už někdo jiný masturbuje. Skutečný voyerismus na druhou, vrtat se v osobní komunikaci Jany N.-N. a pak se ještě rochnit ve větách odposlouchávajících estébáků: Nagyová nadává, nagyová křičí…\nPrávě takový článek, zužitkovávající estébácké odposlechy, vyprodukoval Tomáš Syrovátka s Adélou Paclíkovou na MF DNES.\nSkoro se nám chce tento výtrysk policejně-bulvárního bahna zprvu hodnotit chladně, pod heslem «Qui bono» – komu tím prospějí? Snad ty nechutné články mají nahnat pár soucitných bodů pro ODS (s níž je spojen Petr Nečas, manžel Jany Nagyové-Nečasové) před nadcházejícími eurovolbami? Nebo mají preference ODS naopak zcela potopit, aby se zisk ANO a TOP09 vyšvihl do výšin?\nAle pak nám dojde, že to je naprosto nevhodné uvažování. Měli bychom se spíše ptát, kdo neustále dopouští, že estébácké policejní odposlechy a další přepisy hovorů si můžeme přečíst v celostátním zpravodajství. Neviditelná ruka trhu? Lid si to žádá, my mu vyhovíme? «Technologii máme a známé na policii taky, tak kde je problém?» ptají se možná redaktoři.\nNo, nikde, samozřejmě. Jenom bychom je rádi upozornili, že ta naše nekonkrétní česká neviditelná pracka trhu na sebe leckdy přivolá už docela konkrétní a viditelnou ruku hněvu, takže ať se pak nikdo nediví, když konkrétní redaktoři, stejně jako policisté, budou po několik týdnů nacházet u svých vozů propíchané pneumatiky, nebo jim bude jinak vyhrožováno.\nJistě, to je poněkud patologická reakce, která by zřejmě neměla mít ve společnosti místo, ale když už tato společnost je tak degenerovaná, že produkuje mediální štvanici proti konkrétním osobám (o jejichž případných pletkách se zákonem by mělo být referováno jen sporadicky, věcně a hlavně bez bulvarizujících odposlechů), pišme klidně o jevech, které se v takové společnosti mohou vyskytnout, jako reakce na podobně neutěšené jevy předchozí.\nNěkdo skutečně může být tak aktivní, že se nesmíří s kvalitou celostátního tisku, který se stal čpícím bulvárem, a vezme spravedlnost do svých rukou.\nJiný člověk zase může této mediální «kvalitě» zcela podlehnout, a třeba zavalí Janu Nečasovou sprostými anonymy. To už pak bude možná poslední kapka, kdy Jana N. dále nesnese přítomnost svého jména ve voyeurských fantaziích publikovaných MF DNES, a lehne si pod vlak.\nČlánek byl publikován v rubrice Méně krav, zato více volů se štítky mfd, štvanice. Kliknutím na příslušnou rubriku nebo štítek zobrazíte články na podobné téma.


Léto jako zátěž pro oteklé nohy\nNejen z pohledu do kalendáře, ale i na teploměr je jasné, že letošní léto se hlásí ke slovu. Většina z nás se na toto roční období těší, ale horké letní dny nepřinášejí jen pozitiva. V létě totiž mnozí trpí na otoky nohou, což není nic příjemného. Oteklé končetiny mohou zkomplikovat i vysněnou dovolenou, především pokud se jedná o dlouhé cesty.\nS příchodem teplého počasí pravidelně dochází k větší zátěži lidského organismu a v kombinaci s dlouhým sezením v dopravních prostředcích, často ve stěsnaném prostoru, nebo s dlouhými přesuny pěšky jsou samozřejmě nejvíce zatěžovány dolní končetiny. Teplo nejen zpomaluje průtok krve žilami, ale také zvyšuje riziko dehydratace, následné hromadění krve v nohou má za následek pocit „těžkých nohou“, bolest a otoky. Za častější otoky nohou v letních měsících však nemůže jen teplé počasí. Otoky mívají mnohdy řadu dalších příčin, nejčastější je chronická žilní choroba, dále jsou to problémy s lymfatickým systémem, které bývají doprovázeny lymfatickými otoky, a další příčinou může být také nesprávná funkce vnitřních orgánů. Proto je vždy při těchto problémech důležité neodkládat návštěvu u lékaře.\nČeho byste se měli v letních měsících vyvarovat, pokud trpíte na otékání dolních končetin:\ndlouhodobého pobytu na slunci a prudkého slunění, teplo způsobuje rozšíření žil;\ndlouhého sezení na jednom místě bez pravidelného protahování nohou, popř. dlouhého stání na místě, při dlouhých cestách nezapomínejte na osvědčené krátké procházky, které prospívají krevnímu oběhu a podporují žilní návrat;\ntěsnému oblečení, především botám a také ponožkám, příliš těsný oděv stlačuje žíly a brání žilnímu návratu;\nvysokých nebo naopak velmi nízkých podpatků, doporučovaná obuv má mít podpatky vysoké 3 až 4 centimetry.\nNezapomínejte na starý, ale osvědčený recept osprchování nohou studenou vodou na závěr koupele. To podporuje správnou funkci žil a zmírňuje pocit těžkosti a bolest nohou. V době dovolených spojených s častým grilováním je více než kdy jindy třeba myslet na dostatečný příjem tekutin (alespoň 1,5 litru denně) a také na omezený příjem nasycených mastných kyselin (tučné maso, máslo), ty ruku v ruce působí proti dvěma faktorům, které jsou zodpovědné za zvýšený žilní tlak, a to proti zácpě a nadváze. Velmi příznivě proti otokům pomáhají také masáže dolních končetin. Masírujte si proto nohy, jak jen to bude možné, a to ve směru od chodidel nahoru na stehna ve směru žilního oběhu.\nPreventivní použití venofarmak\nVětšina lidí, kteří se připravují na dovolenou, dnes již ví, že před dlouhými lety je doporučováno používat venofarmaka (léčivého přípravku podporujícího žilní návrat z dolních končetin směrem k srdci), která pomáhají posilovat napětí žilní stěny. Ne každý si ale uvědomuje, že toto doporučení se týká dlouhého cestování obecně, tedy i autem nebo autobusem. Ve všech dopravních prostředcích sedí cestovatelé pasivně několik hodin ve strnulé pozici a dolní končetiny tedy nejsou dostatečně prokrveny. Následkem bývají oteklé nohy a může docházet i k emboliím. Pokud trpíte otoky, pocitem napětí nebo bolestí nohou při dlouhém cestování, nezapomeňte navštívit svého ošetřujícího lékaře a nechat si předepsat účinné venofarmakum. Pro maximální efekt by se mělo užívat alespoň měsíc před plánovanou cestou a po celou dobu dovolené.\nJednoduché cviky, které pomáhají\nV době dovolených na sebe většinou máte více času, naučte se proto 10 jednoduchých cviků, které jsou výborným pomocníkem v boji proti otékajícím nohám. Většinu cviků můžete provádět v podstatě kdekoliv a pravidelná „rozcvička“ vašim nohám určitě prospěje.\nPostavte se na špičky a přenášejte váhu ze špiček na paty a zpět.\nMalý míč (nebo vyšší měkkou podložkou) položte zem a opakovaně jej sešlapujte špičkou. Je důležité, aby pata zůstala po dobu cviku opřená o zem.\nNapněte končetiny před sebe a pomalu střídavě propínejte a krčte chodidla, střídejte jednu a druhou nohu.\nPosaďte se a s nataženýma nohama stlačujte míč umístěný mezi kotníky.\nLehněte si, natáhněte končetiny, propněte špičky a kružte nohama v kotníku, nejdříve jedním, pak opačným směrem.\nNapodobujte končetinami pohyb, jako když stříháte nůžkami.\nZvedněte obě nohy a střídavě krčte a natahujte prsty.\nImitujte jízdu na kole, nohy propínejte.\nPhDr. Jana Vylačilová\nobrázek č. 3 obrázek č.4


13.10.2014 – Členové České pirátské strany jsou v Praze za určitých podmínek ochotni tolerovat možnou koalici ANO, ČSSD a Trojkoalice složené ze Strany zelených, KDU-ČSL a STAN. Pro její zvolení ale ruku nezvednou, řekl nově zvolený zastupitel Mikuláš Ferjenčík. Piráti jsou jako nováčci v zastupitelstvu se svými čtyřmi mandáty žhavým želízkem v ohni. Bez jejich podpory by totiž vznikající koalice, která kopíruje vládní půdorys, měla nejtěsnější většinu.\n22.5.2018 – Novela zákona o státní službě, registr smluv, návrh na zrušení EET pro neplátce DPH, novela zákona o ochraně ovzduší, dění okolo Novičoku či pirátský návrh nominačního zákona – taková byla témata dnešní tiskové konference Pirátů, na které vystoupili předseda Pirátů Ivan Bartoš, poslanci Jan Lipavský, Mikuláš Ferjenčík, Dana Balcarová a Mikuláš Peksa.\n19.12.2017 – Parlament dnes ve třetím čtení rozhodne, zda schválí státní rozpočet České republiky na rok 2018. Mezi jedenapadesáti pozměňovacími návrhy jsou i dva pirátské, které předložil poslanec Mikuláš Ferjenčík, člen Rozpočtového výboru PS PČR. Úspory z Hradu a Ministerstva vnitra ČR chtějí Piráti přesunout do školství a prevence rizikového chování.\n18.11.2015 – Pražská TOP 09, ODS a Piráti se dnes domluvili na dalším společném vyjednávání při hledání nové koalice na magistrátu. Dohoda není nijak závazná a strany budou dále řešit své programové priority. ČTK to dnes řekli předsedové zastupitelského klubu ODS Alexandra Udženija a TOP 09 Václav Novotný a zastupitel za Piráty Mikuláš Ferjenčík. Strany si domluvily další schůzku na 24. listopadu. Ve čtvrtek 19. listopadu se sejde TOP 09 a ODS se zástupci Trojkoalice.\n7.9.2013 – Svobodný přístup k informacím, demokratická reforma zahrnující posílení odvolatelnosti politiků, větší zapojení veřejnosti do rozhodování či rozvoj znalostní ekonomiky jsou hlavní pilíře volebního programu České pirátské strany. Piráti mají ve všech regionech vybrané lídry pro předčasné volby, kandidátky se postupně doplňují. Kampaň, při které jim budou zejména v příhraničí pomáhat i piráti z Německa, odstartuje oficiálně příští týden, řekl dnes novinářům místopředseda strany Mikuláš Ferjenčík.\n24.8.2015 – Čtyřčlenný zastupitelský klub pirátů, který dosud odmítal křesla v radě, chce jednat o případné koaliční spolupráci na pražském magistrátu. Konečný souhlas s vyjednáváním musí dát vedení strany. V pondělí to sdělil zastupitel Mikuláš Ferjenčík. Piráti odmítají spolupráci s ČSSD, ODS a s komunisty. Nejbližší je jim Trojkoalice (SZ, STAN, KDU-ČSL). Pouze s ní by ale většinu v zastupitelstvu neměli. Oslovit by tak museli ještě vítězné ANO a TOP 09.\n24.8.2015 – Čtyřčlenný zastupitelský klub Pirátů, který dosud odmítal křesla v radě, chce jednat o případné koaliční spolupráci na pražském magistrátu. Konečný souhlas s vyjednáváním musí dát vedení strany. V rozhovoru s ČTK to dnes řekl zastupitel Mikuláš Ferjenčík. Piráti odmítají spolupráci s ČSSD, ODS a s komunisty. Nejbližší je jim Trojkoalice (SZ, STAN, KDU-ČSL). Pouze s ní by ale většinu v zastupitelstvu neměli. Oslovit by tak museli ještě vítězné ANO a TOP 09.\n25.11.2016 – Česká pirátská strana bude za rok ve sněmovních volbách kandidovat samostatně. Rozhodl o tom republikový výbor strany na základě členské ankety i dosavadních volebních výsledků. ČTK to dnes oznámil mluvčí strany Mikuláš Ferjenčík. Piráti podle něj nechtějí přistupovat na kompromisy, což by vytvoření volební koalice s jinou stranou znamenalo.\nOsobnosti: Radovan Krejčíř (710 článků), Stanislav Polčák (251 článků)


Společnost Miele v Uničově postrádá technicky vzdělané pracovníky - CzechInvest\nHomepage > Novinky > Říjen 2015 > Společnost Miele v Uničově postrádá technicky vzdělané pracovníky\nSituaci chce do budoucna řešit i se zástupci místních škol.\nSetkání přímo v uničovském závodě se ve středu 7. října 2015 zúčastnili ředitelé uničovských základních škol, ředitelé partnerských středních odborných škol a učilišť z Olomouce, Lutína, Litovle, Mohelnice a Šumperka. Přítomni byli i zástupci Krajské hospodářské komory Olomouckého kraje, agentury CzechInvest a Svazu průmyslu a dopravy ČR.\nZástupci společnosti Miele poukázali na pracovní pozice, které z jejich pohledu na trhu práce chybí. Zároveň popsali, co pro jejich obsazení ve spolupráci se školami podnikají a co plánují do budoucna. „Žákům regionálních škol nabízíme celoročně exkurze do výroby, studentům středních škol pak vedle exkurzí poskytujeme brigády a odborné praxe. V současné době jednáme o zavedení stipendií pro studenty středních a vysokých škol,“ vyjmenovala Veronika Burianová, personální ředitelka společnosti Miele.\nZazněly také postřehy o nedostatečné manuální zručnosti studentů, kteří ve výrobním podniku Miele absolvují odbornou praxi, jako důsledku rušení praktických předmětů v mnohých školách. A jistý apel nepřímo směřoval také na rodiče žáků a studentů, aby své děti podpořili v technickém vzdělávání. Výrobní provozy totiž už nejsou „špinavým“ prostředím, jak v představách dodnes může převládat. Jedná se ve většině případů o moderní pracoviště se špičkovými technologiemi, která se navíc mnohdy dají ovládat z pohodlí kanceláře.


LCS mění formát, zavádí loser bracket v play-off | Tryhard.cz\nLCS mění formát, zavádí loser bracket v play-off\nNová sezona se neúprosně blíží a některé soutěže modifují svůj formát. Velkých změn se dočkáme v LCS a také v nizžší soutěži, kde působí akademie.\nLCS startuje 25.ledna, Akademie 24.ledna\nLCS zápasy budou k vidění v sobotu, neděli a nově i v pondělí\nv pondělí budeme moci sledovat Monday Night League, ve které proběhnou 2 LCS zápasy\nzápasy Akademie se odehrají v pátek, sobotu, neděli a pondělí\nnová show, Academy Rush, se bude vysílat v pátek v 17:00, kdy se budou hrát čtyři hry současně, pátá hra bude ukázaná v plném rozsahu\nbyl aktualizován formát jarního a letního playoff LCS, které bude trvat přes 4 týdny\nbyl aktualizován formát jarního playoff Akademie\n3 LCS týmy se kvalifikují na světový šampionát na základě výsledků v playoff letní části (zrušila se regionální kvalifikace pomocí championship pointů)\nV základní části budeme moci sledovat zápasy LCS nejen v sobotu a neděli večer, ale nově i v pondělí. O víkendu se dočkáme celkově osmi duelů nejvyšší americké soutěže. Následovat po čtyřech kláních LCS bude vždy jeden zápas akademií.\nV pondělí si zahrají čtyři týmy LCS. Tomuto vysílání říká Riot Monday Night League. Před touto show se můžeme naladit na kompetitivní vlnu, neboť proběhnou tři souboje v LCS Academy League.\nStejně jako minulý split nás i v základní části nadcházejícího čeká v pátek pět zápasů. Co se ale mění, je přenos. Nejdříve totiž budeme sledovat novou show s názvem Academy Rush, kde komentátoři a analytici budou přeskakovat od jednoho duelu k druhému a budou vyzdvihovat ty nejdůležitější momenty z daného souboje. To určitě ocení diváci, kteří nemají na sledování zápasů akademií moc času. Uvidí totiž to nejpodstatnější a nebudou muset obětovat hodiny času. Profitovat z toho budou samozřejmě i samotní hráči, kteří se dostanou více do podvědomí diváků. Získají cenné zkušenosti, které by mohli případně zužitkovat v LCS.\nO víkendu nás celkově čekají dva souboje akademií, které budou následovat vždy po zápasech LCS. V pondělí se můžeme těšit na tři duely z LCS Academy League.\nZměny v playoff a nominaci na Worlds\nZákladní část: LCS nadále pokračuje ve formátu dvou splitů, kdy nás v každém z nich čeká devět hracích týdnů. Zápasy budou probíhat systémem Bo1.\nPlayoff: Velké změny nás neminou ve vyřazovací části, která bude trvat přes čtyři týdny. Rozdíly budou patrné mezi jarním a letním playoff.\nPočet postupujících do vyřazovací části se nezměnil. Postupuje opět šest nejlepších celků základní části, kteří se utkají v Bo5 sériích.\nV prvním kole si nejlepší celek základní části vybere, zda chce čelit třetímu, nebo čtvrtému týmu (A1). Druhý tým se utká se soupeřem, kterého si první celek nevybral (A2). Vítězové postupuju do dalšího kola (B1).\nPoražení nemusí smutnit, neboť mají stále možnost probojovat se do finále a získat vysněný titul. Poražené celky z A1 a A2 se utkají s pátým (X2), nebo šestým celkem (X1).\nVítězové těchto duelů se utkají tváří v tvář (Y1). Vítěz postupuje do semifinále (Z1), kde narazí na slabšího z dvojice v B1.\nPoražený v souboji Z1 získá třetí místo, vítěz postupuje do finále (C1), kde na něho čeká soupeř, jenž vyhrál sérii v B1.\nVítěz letního splitu bude reprezentovat region na turnaji MSI.\nZde se dočkáme větší změny, neboť do playoff postupuje hned osm týmů, které budou bojovat v Bo5 sériích.\nV prvním kole se utká třetí celek se šestým (A1) a čtvrtý s pátým (A2). Vítěz A1 se utká s vítězem základní části (B1). Úspěšnější z dvojice v A2 změří síly s druhým celkem (B2).\nTýmy, které vypadly v prvním kole, se utkají s osmým a sedmým celkem (W1 a W2).\nVítězové duelů B1 a B2 se posouvají do dalšího kola (C1). Oba celky mají jistotu účasti na světovém šampionátu.\nVítězové z W1 a W2 narazí v dalším kole na neúspěšné týmy z B1 a B2 (X1 a X2). Vítězné celky postupují do Y1.\nVítěz C1 postupuje do finále (E1).\nÚspěšnější v souboji Y1 postupuje do semifinále, kde narazí na pokořeného z duelu C1 (Z1). Oba celky získají vstupenky na světový šampionát.\nVítěz Z1 postupuje do finále (E1), kde bojuje o titul a první seed na světovém šampionátu.\nTři nejlepší celky v letním playoff se probojují na světový šampionát. Regionální kvalifikace a s ní spojené championship pointy už neexistují.\nZápasy vyřazovací části jara se budou hrát v sobotu a neděli. V letním playoff se možná bude hrát i jiný den, kvůli velkému počtu zápasů. To se dozvíme později, až budeme blíže letnímu splitu.\nZákladní část: Akademie bude kopírovat LCS – dva splity po devíti hracích týdnech. Série Bo1.\nPlayoff: Šest nejlepších celků se probojuje do vyřazovací části, kde budou bojovat v Bo5 sériích. Informace o letním playoff získáme na začátku druhého splitu.\nZápasy jarní vyřazovací části se budou odehrávat ve čtvrtek a pátek.\nJarní split začíná: 25.ledna\nJarní split: 25.ledna – 22.března\nJarní playoff: 28.března – 19.dubna\nFinále jarního playoff: 18.-19.dubna\nLetní split začíná: 20.června\nLetní split: 20.června – 16.srpna\nLetní playoffs: 16.srpna – 13.září\nJarní split začíná: 24.ledna\nJarní split: 24.ledna – 22.března\nJarní playoff: 26.března – 10.dubna\nFinále jarního playoff: 9.-10.dubna\nV základní části začínají hry:\nPátek 14:00 – Academy Rush\nSobota ve 11:00- LCS a Akademie\nPre-show začíná už v 10:30\nNeděle ve 21:00 - LCS a Akademie\nPre-show začíná už ve 20:30\nPondělí ve 14:30 – Monday Night League a Akademie\nHry Akademie 11:00\nLCS pre-show začíná v 14:00\nKompletní přehled zápasů naleznete brzy v našem eSportovém přehledu – v pravé části webových stránek.


Uchovávání vzorků po odběru a jejich transport – Zdravotní ústav se sídlem v Ostravě\nObecné informace > Uchovávání vzorků po odběru a jejich transport\nUchovávání vzorků po odběru a jejich transport\nVzorky je nutno uchovávat tak, aby byla udržena jejich původní forma a aby se předešlo kontaminaci z jiných zdrojů či znehodnocení vzorku. Odběrové soupravy s biologickým materiálem musí být zasílány uzavřené co nejdříve po odběru, jinak je nutno počítat s možným zkreslením výsledků vyšetření jak ve smyslu falešné negativity, tak i pozitivity nálezu. Při plánování času odběru pacienta před svozem vzorků je nutné počítat s rezervou pro transport a příjem vzorku v laboratoři. Při extrémních vnějších teplotách je nutné zajistit transport vzorku v boxech zamezujících znehodnocení vzorku mrazem nebo horkem (chladicí vložka v létě, vytemperování boxu za pokojové teploty v zimě).\nJe-li materiál odebrán v době, kdy laboratoř není dostupná, zákazníci se řídí pokyny uvedenými v tabulkách.\nZjednodušená pravidla pro uchovávání vzorků klinického materiálu před transportem, která nejsou vyčerpávající pro všechny typy vzorků a vyšetřovaných parametrů, jsou tato:\nvzorky na bakteriologické vyšetření uchovat při pokojové teplotě, chránit před slunečním zářením, moč chladit\nvzorky na mykologická vyšetření chladit\nkrev chladit (výjimkou je krev na hemokultivaci – ta se ponechává při pokojové teplotě!)\nséra chladit, popřípadě zmrazit\nséra, stolici, moč, likvor, stěry pro průkaz antigenů chladit\nstěry na přítomnost Trichomonas vaginalis uchovávat při pokojové teplotě, chránit před slunečním zářením\nvzorky vody na přítomnost mykobakterií uchovávat při pokojové teplotě, chránit před slunečním zářením\nhemokultury na TBC – uložit do termostatu 35 ± 2 ºC\nTransport vzorků klinického materiálu pro laboratoře CKL je zajišťován externí svozovou službou, která dodržuje pravidla Evropské dohody o mezinárodní silniční přepravě nebezpečných věcí (ADR). Informace o svozu vzorků jsou poskytovány zákazníkům buď v rámci činnosti členů obchodního týmu nebo na vyžádání. Optimální trasa svozu je zajišťována pracovníky svozové služby a je upravována na základě aktuálních požadavků zákazníků, kteří dostávají vizitky s kontaktem na řidiče svozu a mohou telefonicky přímo u řidičů nebo u odpovědného pracovníka laboratoře objednat přepravu urgentního vzorku. Během víkendů je transport vzorků do laboratoře zajišťován svozovou službou nebo samotnými zákazníky.\nMateriál pro zprostředkovaná vyšetření na jiných pracovištích ZÚ Ostrava je po roztřídění dopraven do příslušných laboratoří svozovou službou.\nZa zabezpečení materiálu pro transport odpovídá odesílatel vzorku. Za zabezpečení materiálu během transportu odpovídá přepravce.


Skladovací prostory Pařezov | Eurobydleni.cz\nSkladovací prostory Pařezov\nPotřebujete skladovací prostory Pařezov a stále jste ve vašem okolí nenašli nic ideálního? Nezoufejte, neboť právě na Eurobydleni.cz si můžete vybrat sklady Pařezov.\nSkladovací prostory Pařezov (740+)\nPotřebujete skladovací prostory Pařezov a stále jste ve vašem okolí nenašli nic ideálního? Nezoufejte, neboť na Eurobydleni.cz si můžete vybrat přesně takové sklady v místě Pařezov, které se budou hodit k vašemu druhu podnikání. Ačkoliv se může zdát, že skladovací prostor Pařezov je velice těžko k sehnání, u nás zcela jistě natrefíte přesně na takový, který vám bude plně vyhovovat. Našim návštěvníkům přinášíme skvělé nabídky nemovitostí přímo z okolí města Pařezov. Nejinak je tomu i u skladovacích prostor Pařezov, se kterými máte jistotu kvalitních nabídek.\nNa Eurobydleni.cz stačí pouze zadat parametry a my vám již sklady Pařezov dodáme jako na stříbrném podnosu. Využijte výhodných nabídek. Zakládáme si na precizním přístupu. Námi nabízené skladovací prostory Pařezov tudíž budou plně odpovídat všemu, co od nich očekáváte. Proto neváhejte a využijte naší nabídky, právě v okolí města Pařezov nabízíme velice dostupné sklady Pařezov, které vám pomohou při uskladnění všeho, co potřebujete.\nPrávě hledáte své nové bydlení či jiný druh nemovitosti v kategorii sklady Pařezov, pokud v této kategorii nemůžete nalézt vhodnou nemovitosti zkuste i kategorii následující sklady Pařezov, a to sklady na prodej Pařezov, pronájem skladu pronájmy skladů Pařezov, Skladovací prostory Pařezov na dražba.\nPokud nalezené nemovitosti v kategorii sklady Pařezov nesplňují Vaše představy, rozšiřte své hledání na nemovitosti v následujících kategoriích komerční nemovitosti Pařezov, komerční nemovitosti k prodeji Pařezov, komerční nemovitosti k pronájmu Pařezov, Komerční nemovitosti Pařezov na dražba.\nDalší lokality v okolí sklady Pařezov\nPro ještě lepší výsledek ve Vašem hledání v kategorii sklady Pařezov, si můžete upřesnit lokalitu pro Váš současný výběr sklady Pařezov. Určitě lépe naleznete sklady Pařezov, který hledáte.


Vliv vnějších faktorů na dekarboxylázovou aktivitu Bifidobacterium animalis subsp. lactis. Kalousová Iveta - PDF\nVliv vnějších faktorů na dekarboxylázovou aktivitu Bifidobacterium animalis subsp. lactis. Kalousová Iveta\nDownload "Vliv vnějších faktorů na dekarboxylázovou aktivitu Bifidobacterium animalis subsp. lactis. Kalousová Iveta"\n1 Vliv vnějších faktorů na dekarboxylázovou aktivitu Bifidobacterium animalis subsp. lactis Kalousová Iveta Bakalářská práce 2014\n6 ABSTRAKT Využívání mikroorganizmů v potravinářství je v současné době velice rozšířené, především díky jejich pozitivnímu ovlivňování senzorické jakosti produktů. Někteří zástupci jsou však zároveň schopni produkovat metabolity, které mohou pro konzumenta představovat určité zdravotní riziko. Předmětem této práce bylo studium současného vlivu několika vnějších faktorů na tvorbu biogenních aminů u vybraného kmene Bifidobacterium animalis subsp. lactis v podmínkách in vitro a v mléce. Sledovanými faktory v umělých podmínkách byly teplota (10 a 37 C), ph (5, 6 a 7) a koncentrace fermentovatelného sacharidu (0 4,8 % (w/v)). V mléce byl sledován vliv teploty, ph a přídavku volných aminokyselin. Stanovení biogenních aminů bylo provedeno metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Bakterie vykazovala nejvyšší dekarboxylázovou aktivitu v mléce obohaceném o volné aminokyseliny při ph 5 a 6 a teplotě 37 C. Klíčová slova: biogenní aminy, výskyt v potravinách, HPLC, probiotika, Bifidobacterium ABSTRACT The use of microorganisms in the food industry is currently very widespread, mainly due to the positive influence of sensory quality products. Some representatives, however, are also able to produce metabolites which may pose a health risk for the consumer. The objective of this work was to study the influences of several environmental factors on the formation of biogenic amines in selected strain of Bifidobacterium animalis subsp. lactis in vitro and in milk. The monitored factors in artificial conditions were temperature (10 and 37 C), ph (5, 6 and 7) and the concentration of fermentable carbohydrate (0 4,8 % (w/v)). In milk, the effects of temperature, ph and the addition of free amino acids were observed. Determination of biogenic amines was performed by high performance liquid chromatography. The bacteria showed the highest decarboxylase activity in milk supplemented with free amino acids at ph 5 and 6 and a temperature of 37 C. Keywords: biogenic amines, occurrence in food, HPLC, Probiotics, Bifidobacterium\n7 Na tomto místě bych velice ráda poděkovala doc. RNDr. Leoně Buňkové, Ph.D. za odbornou pomoc, trpělivost a ochotu, kterou mi v průběhu zpracování bakalářské práce věnovala. Děkuji také paním laborantkám z Ústavu inženýrství ochrany životního prostředí a Ústavu technologie potravin za výpomoc a odborný dohled během realizace praktické části mojí bakalářské práce. Mimořádně velké poděkování patří mojí rodině, která mě během mého studia psychicky i materiálně podporovala. Prohlašuji, že odevzdaná verze bakalářské/diplomové práce a verze elektronická nahraná do IS/STAG jsou totožné.\n8 OBSAH ÚVOD I TEORETICKÁ ČÁST BIOGENNÍ AMINY CHEMICKÁ STRUKTURA BIOGENNÍCH AMINŮ VZNIK BIOGENNÍCH AMINŮ FYZIOLOGICKÝ VÝZNAM BIOGENNÍCH AMINŮ TOXIKOLOGICKÝ VÝZNAM BIOGENNÍCH AMINŮ FAKTORY OVLIVŇUJÍCÍ TVORBU BIOGENNÍCH AMINŮ VLIV PH VLIV TEPLOTY VLIV SOLI VLIV ZDROJE UHLÍKU VLIV KYSLÍKU VLIV STARTOVACÍ KULTURY VÝSKYT BIOGENNÍCH AMINŮ V POTRAVINÁCH A METODY JEJICH STANOVENÍ BIOGENNÍ AMINY V POTRAVINÁCH A NÁPOJÍCH Biogenní aminy v rybách a mořských plodech Biogenní aminy v mase a nefermentovaných masných výrobcích Biogenní aminy ve fermentovaných masných výrobcích Biogenní aminy v mléčných výrobcích Biogenní aminy v dalších potravinách a nápojích METODY STANOVENÍ BIOGENNÍCH AMINŮ V POTRAVINÁCH Vysokoúčinná kapalinová chromatografie Chromatografie na tenké vrstvě Plynová chromatografie Kapilární elektroforéza Stanovení biogenních aminů pomocí biosenzorů PROBIOTICKÉ BAKTERIE HISTORIE PROBIOTIK SOUČASNÉ VYUŽITÍ PROBIOTIK RIZIKA PROBIOTIK ROD BIFIDOBACTERIUM II PRAKTICKÁ ČÁST CÍL PRÁCE MATERIÁL A METODIKA POUŽITÉ MIKROORGANISMY POUŽITÉ CHEMIKÁLIE, PŘÍSTROJE A POMŮCKY Přístroje a pomůcky Chemikálie... 42\n9 6.3 PŘÍPRAVA KULTIVAČNÍCH MÉDIÍ PŘÍPRAVA BAKTERIÁLNÍ SUSPENZE ZAOČKOVÁNÍ, KULTIVACE A ODBĚR VZORKŮ EXTRAKCE VZORKŮ PŘEDKOLONOVÁ DERIVATIZACE CHROMATOGRAFICKÉ STANOVENÍ OBSAHU BIOGENNÍCH AMINŮ VÝSLEDKY A DISKUZE SLEDOVÁNÍ VLIVU VNĚJŠÍCH FAKTORŮ NA PRODUKCI BIOGENNÍCH AMINŮ U BIFIDOBACTERIUM ANIMALIS SUBSP. LACTIS CCDM Sledování produkce BA v podmínkách in vitro Sledování produkce BA v mléce SLEDOVÁNÍ ZMĚN PH KULTIVAČNÍHO MÉDIA BĚHEM KULTIVACE BIFIDOBACTERIUM ANIMALIS SUBSP. LACTIS CCDM Sledování změn ph bujónu Sledování změn ph mléka DISKUZE ZÁVĚR SEZNAM POUŽITÉ LITERATURY SEZNAM POUŽITÝCH SYMBOLŮ A ZKRATEK SEZNAM OBRÁZKŮ SEZNAM TABULEK SEZNAM PŘÍLOH... 79\n10 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 10 ÚVOD Biogenní aminy (BA) představují nízkomolekulární dusíkaté organické sloučeniny s významnými fyziologickými a farmakologickými účinky. Vznikají činností živých organizmů jako produkty dekarboxylace aminokyselin přímo v buňkách. Schopnost dekarboxylace aminokyselin mají jen některé rody, respektive kmeny bakterií a do značné míry jsou tyto procesy ovlivněny vnějšími fyzikálně-chemickými faktory. [1, 2] Důvodem, proč se BA, vyskytující se v potravinách, stávají předmětem mnoha vědeckých studií, je jejich možný toxický účinek na lidský organizmus. Některé BA jsou však pro organizmus v nízkých koncentracích prospěšné, jelikož hrají významnou roli v mnoha lidských a živočišných fyziologických funkcích, jako je například regulace tělesné teploty, ph žaludku a mozkové činnosti a nebo plní funkci prekurzorů dalších molekul. [3, 4] Nejvíce studovanými biogenními aminy, právě díky své značné toxicitě, jsou histamin, tyramin, trypamin, spermin, spermidin, kadaverin a putrescin. Jsou to produkty metabolizmu mnoha zástupců čeledi Enterobacteriaceae a bakterií rodů Lactobacillus, Micrococcus, Streptococcus, Pediococcus, Pseudomonas, Propionibacterium a zástupci Bacillus macerans. Biogenní aminy mohou produkovat také zástupci startovacích a probiotických kultur, používaných při výrobě fermentovaných potravin. Probiotika jsou živé mikroorganizmy, které se do potravin často přidávají s cílem příznivého ovlivňování zdraví člověka. Probiotika se po požití dostávají do střev, kde se množí a příznivě ovlivňují složení a rovnováhu střevní mikroflóry. Bohužel tyto mikroorganizmy také patří mezi potencionální producenty BA a je tedy nutné jejich schopnost tvorby biogenních aminů prověřovat. V nefermentovaných potravinách vznikají biogenní aminy činností hnilobných bakterií, které rozkládají přítomné bílkoviny. V těchto potravinách pak mohou BA sloužit jako indikátory mikrobiální kontaminace potravin. [5, 6]\n12 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 12 1 BIOGENNÍ AMINY 1.1 Chemická struktura biogenních aminů Jak už bylo naznačeno v úvodu, biogenní aminy jsou dusíkaté bazické sloučeniny s nízkou molekulovou hmotností.  Podle chemické struktury rozlišujeme BA aromatické, heterocyklické, alifatické diaminy a alifatické polyamidy. Dále rozlišujeme BA primární, sekundární či terciární a to podle počtu alkylových a arylových skupin navázaných na atom dusíku.  Strukturní vzorce a rozdělení nejvýznamnějších BA podle jejich chemické struktury je uvedeno v Tabulce 1. V tabulce jsou také uvedeny systematické a k nim odpovídající triviální názvy biogenních aminů. Tabulka 1. Biogenní aminy vyskytující se v potravinářských výrobcích [8, 9]. Chemická struktura Strukturní vzorec Název triviální/systematický NH 2 Aromatické H O tyramin/4-(2-aminoetyl)fenol NH 2 H N fenyletylamin/2-fenyletanamin N Heterocyklické H 2 N histamin/2-(1h-imidazol-5-yl)etanamin NH 2 Alifatické diaminy N H 2 N H 2 N H tryptamin/2-(1h-indol-3yl) etanamin NH 2 putrescin/butan-1,4-diamin NH 2 kadaverin/pentan-1,5-diamin Alifatické polyaminy N H 2 NH NH NH 2 spermin/n,n -bis(3-aminopropyl)butan-1,4-diamin N H 2 NH NH 2 spermidin/n-(3-aminopropyl)butan-1,4- diamin\n13 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická Vznik biogenních aminů Biogenní aminy v potravinách vznikají především rozkladnou činností hnilobných bakterií během skladování, ale také během fermentačních procesů některými bakteriemi mléčného kvašení.  BA jsou nejčastěji produkty enzymově katalyzované dekarboxylace aminokyselin. Popsán je i vznik transaminací a aminací aldehydů a ketonů. Dekarboxylační reakce aminokyselin jsou katalyzovány specifickými enzymy dekarboxylázami vznikajícími v důsledku metabolické činnosti některých bakterií.  Biogenní aminy mohou být tímto způsobem tvořeny prakticky ve všech potravinách, pokud jsou splněny následující podmínky : 1. přítomnost volných aminokyselin v potravině, 2. přítomnost dekarboxyláza-pozitivních mikroorganizmů, 3. vhodné růstové podmínky pro dekarboxyláza-pozitivní mikroorganizmy. Tvorba BA závisí také na aktivitě dekarboxylačních enzymů, která je vysoká především u bakterií. Dekarboxylace probíhá také v rostlinných a živočišných organizmech.  Při dekarboxylaci se často uplatňuje jako kofaktor dekarboxyláz pyridoxalfosfát. Z aminokyseliny a pyridoxalfosfátu vzniká Schiffova báze. Kladně nabité atomy dusíku pyridinového kruhu přitahují elektrony, čímž se vytvoří příznivý mezomérní stav, který vzniká jen, když se z alfa-uhlíku aminokyseliny odštěpí substituent jako kationt. Nejčastěji se odštěpuje karboxylová skupina, méně často i postranní řetězec (např. u serinu). Mezomérní mezistav se poté stabilizuje adicí jednoho protonu na alfa-uhlík a hydrolýzou Schiffovy báze na primární amin (Obrázek 1). Při dekarboxylaci se zachovává konfigurace molekuly. \n14 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 14 Obrázek 1. Obecné schéma dekarboxylace aminokyselin.  (PLP - Pyridoxal fosfát, P fosfát) Procesem dekarboxylace vzniká například histamin z aminokyseliny histidinu působením enzymu histidindekarboxylázy. Z lyzinu vlivem lyzindekarboxylázy vzniká kadaverin a podobně vzniká i tyramin z tyrozinu, tryptamin z tryptofanu a fenyletylamin z fenylalaninu. Putrescin může vznikat dekarboxylací ornitinu nebo dekarboxylací argininu arginindekarboxylázou na agmatin a následnou hydrolýzou agmatinu na putrescin a močovinu. Z putrescinu může vznikat metylací S-adenosylmetioninem spermidin a dále spermin (Obrázek 2). [12, 13, 14] Obrázek 2. Biosyntetické dráhy vzniku polyaminů v rostlinách.  (Zkratky: ACL5 ACAULIS 5; ADC arginindekarboxyláza; AIH agmatiniminohydroláza; CPA N- karbamoylputrescinamidohydroláza; ODC ornitindekarboxyláza; SAMDC S-adenosylmetionindekarboxyláza; SPDS spermidinsyntáza; SPMs sperminsyntáza; TSPMS termosperminsyntáza)\n15 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická Fyziologický význam biogenních aminů V prokaryotických buňkách není fyziologická role BA zatím zcela objasněna. Syntéza BA bakteriemi je pravděpodobně jedním z obranných mechanizmů proti kyselému prostředí. Při dekarboxylaci bakterie spotřebovávají protony a uvolňují oxid uhličitý a aminy a tím se do jisté míry snaží vyrovnat nízké vnitrobuněčné ph vůči vnějšímu prostředí. Produkce BA může také nabídnout způsob, jak získat energii, a to díky elektrogennímu antiportu aminokyselina/amin, při kterém se generuje na membráně protonový gradient. Aminokyselina je transportována do buňky, kde je specifickým enzymem dekarboxylována. Při reakci se spotřebuje proton a produkt reakce je stejným přenašečem vyloučen z buňky do prostředí. Tento způsob tvorby energie je zvláště důležitý pro fermentující mikroorganizmy, které syntetizují ATP pouze fosforylací na úrovni substrátu, což jim neumožňuje generovat takové množství ATP, které získávají aerobní mikroorganizmy fosforylací na úrovni membrány. [15, 16, 17] BA mohou zprostředkovat i další fyziologické funkce bakterií, jako jsou například reakce na osmotický a oxidační stres. Různé studie podmínek tvorby biogenních aminů prokázaly okamžitou tvorbu putrescinu bakteriemi Escherichia coli, které byly podrobeny hyperosmotickému šoku. Vyšší koncentrace putrescinu byly zjištěny i při oxidačním stresu vyvolaným reaktivním kyslíkem.  V eukaryotických buňkách je biosyntéza BA také důležitá, protože některé z nich plní v organizmu člověka důležitou funkci prekurzorů pro syntézu hormonů, alkaloidů, nukleových kyselin a proteinů. Některé BA mají roli neurotransmiterů, zatímco jiné, jako například putrescin a spermidin, jsou potřebné pro kritické biologické funkce, jako je modulace DNA, RNA a proteosyntézy. [19, 20] Histamin je lokální tkáňový hormon, ovlivňuje krevní tlak, rozšiřuje cévy, má vliv na sekreci žaludečních šťáv a na kontrakci hladkého svalstva bronchů, uteru a ilea. Jako neuromediátor se účastní alergických reakcí a anafylaktického šoku, dráždí kůži a vyvolává hypersenzitivu. [14, 21] Tyramin je lokální tkáňový hormon a prekurzor dopaminu, adrenalinu a noradrenalinu (mediátory sympatických nervů) a stejně jako histamin je neuromediátorem, ovlivňuje krevní tlak a kontrakce hladkého svalstva. Prekurzorem tyraminu je fenyletylamin. \n16 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 16 Tryptamin je lokální tkáňový a rostlinný hormon ze skupiny indolaminů, ovlivňuje krevní tlak, střevní peristaltiku a psychické funkce. Tryptamin je také prekurzorem serotoninu a melatoninu.  Putrescin dokáže stabilizovat makromolekuly a subcelulární struktury (ribozomy), stimuluje diferenciaci buněk, čímž podporuje hojení a regeneraci poraněných tkání, je prekurzorem sperminu a spermidinu a společně s nimi i s dalšími BA může zneškodňovat volné radikály. [10, 14] 1.4 Toxikologický význam biogenních aminů I když BA plní v organizmu mnoho důležitých fyziologických funkcí, nadměrný příjem těchto látek potravou může být pro lidský organizmus toxický.  Pokud jsou BA konzumovány v malém množství, jsou běžně metabolizovány v organizmu na fyziologicky méně aktivní formy prostřednictvím působení aminooxidáz (monoaminooxidázy a diaminooxidázy). Histamin může být také detoxikován metylací (pomocí histidinmetyltransferázy) nebo acetylací. Někdy ale organizmus není schopen dostatečně detoxikovat přijaté BA, což může být způsobeno nadměrnou konzumací BA a následným nadměrným zatížením detoxikačního systému, nebo také inhibičním účinkem některých léků a alkoholu na detoxikační enzymy a v neposlední řadě je detoxikační aktivita ovlivněna genetickou výbavou jedince. [22, 23] Aminy pak vstupují do krevního oběhu, podporují uvolňování adrenalinu a noradrenalinu, zvyšují sekreci žaludečních šťáv, srdeční výdej a krevní tlak, jsou také příčinou migrény a zvýšené hladiny cukru v krvi. [19, 24] Významným vazoaktivním biogenním aminem je tyramin, který zvyšuje krevní tlak s možným důsledkem hypertenzní krize, migrenózních bolestí hlavy, v těžkých případech tento stav končí krvácením do mozku nebo selháním srdce. Toxický účinek tyraminu závisí na přijatém množství, přítomnosti jiných biogenních aminů a na celkovém fyziologickém stavu jedince. [25, 26] Negativní účinky histaminu na organizmus člověka jsou způsobené interakcí histaminu se specifickými receptory v buněčných membránách. Vazba histaminu na příslušné receptory cévní stěny vyvolává dilataci periferních krevních cév s důsledkem poklesu tlaku, což může mít za následek silné bolesti hlavy. Interakce histaminu s receptory\n17 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 17 střevní stěny s následnou kontrakcí hladké svaloviny střeva vyvolává břišní křeče, průjmy a zvracení.  Pro histamin se uvádí toxická dávka asi mg na jeden kilogram potraviny, pro tyramin asi mg/kg. Tato množství však závisí na individuálních rozdílech mezi lidmi a na přítomnosti dalších biogenních aminů v potravě. Toxicitu histaminu a tyraminu zvyšují zejména diaminy a polyamidy, které vyčerpají detoxikační kapacitu monoaminooxidáz, diaminooxidáz a histidinmetyltransferázy, čímž se zesílí účinek ostatních BA. [26, 27] Diaminy a polyaminy se negativně podílejí na rozvoji nádorových onemocnění. Jak již bylo řečeno v kapitole 1.3., putrescin, jakožto zástupce diaminů, zvyšuje diferenciaci buněk a tím pozitivně ovlivňuje hojení tkání. Tato vlastnost je však zcela nežádoucí při diferenciaci nádorových buněk. Toxikologický význam polyaminů spočívá také ve schopnosti vytvářet stabilní karcinogenní N-nitrososloučeniny. [14, 28, 29]\n18 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 18 2 FAKTORY OVLIVŇUJÍCÍ TVORBU BIOGENNÍCH AMINŮ Výskyt biogenních aminů lze předpokládat v potravinách obsahujících bílkoviny a nebo volné aminokyseliny, zvláště pokud poskytují vhodné podmínky pro aktivitu dekarboxyláz nebo přítomných mikroorganizmů s dekarboxylační aktivitou. Produkce BA je ovlivněna množstvím a dostupností zdroje uhlíku, přítomností růstových faktorů, koncentrací solí, ph a teplotou prostředí, vodní aktivitou, dostupností kyslíku, podílem mikrobiální populace s dekarboxylázovou činností atd. [25, 2] 2.1 Vliv ph Hodnota ph je důležitým faktorem, který ovlivňuje dekarboxylázovou činnost dvěma způsoby současně. Jedním z nich je vliv na růst mikroorganizmů. Každý mikroorganizmus je schopen se rozmnožovat pouze v určitém rozmezí ph a zvyšováním kyselosti prostředí dochází k inhibici růstu mikroorganizmů. Extrémní ph může mikroorganizmy dokonce usmrtit. Na druhé straně jsou bakterie v kyselém prostředí více stimulovány k produkci dekarboxyláz a tedy i k tvorbě zásaditých biogenních aminů jako součást jejich obranných mechanizmů proti kyselému intracelulárnímu ph. Největší dekarboxylační aktivita byla pozorována v prostředí při hodnotách ph 4,0 5,5. [30, 25, 31, 32] 2.2 Vliv teploty Tvorba BA bakteriemi je značně ovlivněna teplotou. Optimální teplota pro růst a tvorbu biogenních aminů mezofilními dekarboxyláza pozitivními bakteriemi se pohybuje mezi 20 a 37 C. Nízké teploty pod 5 C a vyšší teploty nad 40 C pak působí inhibičně na mikrobiální růst a aktivitu enzymu. V chlazených potravinách (např. chlazené čerstvé ryby uložené na ledu) uchovávaných při teplotách pod 5 C jsou hlavními producenty BA psychrotrofní bakterie: Pseudomonas ssp., Morganella ssp., Serratia marcescens nebo Micrococcus luteus (dříve Sarcina lutea). [7, 31, 33] Tvorbu BA lze výrazně ovlivnit teplotou skladování. U potravin uchovávaných při teplotách blízkých bodu mrazu lze pozorovat negativní senzorické změny v potravině dříve, než hodnoty obsahu BA dosáhnou toxických dávek. Toto tvrzení však neplatí u potravin obsahující již zmiňované psychrotrofní bakterie. Vhodným způsobem, jak snížit obsah BA v potravinách (mléku), je například pasterace. V syrovém mléce se vyskytuje řada mikroorganizmů, z nichž některé vykazují dekarbo-\n19 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 19 xylázovou aktivitu. Mezi tyto mikroorganizmy patří mezofilní bakterie mléčného kvašení (enterokoky, laktokoky, laktobacily nebo Leuconostoc), enterobakterie a psychrotrofní bakterie rodů Pseudomonas a Acinetobacter. Pasterace snižuje bakteriální zatížení mléka, tudíž snižuje i obsah bakterií produkujících BA. Její účinek však není 100% a navíc většina aminů je tepelně stálá. Dokonce i některé dekarboxylázy si po pasteraci uchovávají část své aktivity. [34, 35] 2.3 Vliv soli Dalším faktorem, který má vliv na akumulaci BA, je koncentrace soli v potravině. Tradičně se sůl používá při výrobě potravin s cílem omezit nebo zcela zastavit růst patogenních mikroorganizmů a zabránit kažení potravin během skladování. Současně však obsah soli snižuje růstovou rychlost dekarboxyláza pozitivních bakterií, čímž dochází ke snížení tvorby BA.  Studiem vlivu obsahu soli na produkci BA se zabývali Pleva et al. . Ve své studii pozorovali produkci biogenních aminů u izolátu Enterococcus faecium z králičího masa a dospěli k závěru, že koncentrace soli v prostředí významně ovlivňuje pouze tvorbu tyraminu. Ze získaných výsledků vyplývá, že obsah soli do 3 % (w/v) působí stimulačně na tvorbu BA, zatímco přídavek 6 % (w/v) NaCl tvorbu BA zpomaluje.  Gardini et al.  se zaměřili na produkci tyraminu bakteriemi Enterococcus faecalis ve fermentovaných suchých salámech. Při 5% koncentraci NaCl bakterie produkovaly tyramin v zanedbatelném množství (méně než 0,0001 %), zatímco při 0 % NaCl byl obsah tyraminu více než 0,02 %.  Je však potřeba zmínit, že existují i halotolerantní bakterie, kterým vyšší obsah soli naopak vyhovuje. Například zvýšená aktivita histidin dekarboxylázy byla zjištěna u halotolerantních stafylokoků izolovaných ze solených ančoviček.  2.4 Vliv zdroje uhlíku Přítomnost zkvasitelných sacharidů, jako je glukóza, zvyšuje růst bakterií a jejich dekarboxylázovou činnost. Kimura et al.  zjistili že Tetragenococcus muriaticus produkoval histamin pouze v množství 0,0082 % v médiu bez glukózy, ale obohacením média o 1 3 % glukózy (w/v) se hladina aminu výrazně zvýšila (na 0,041 až 0,077 %). [25, 38]\n20 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 20 Andresová  studovala růst a produkci putrescinu bakterií Serratia marcescens. Autorka dospěla k závěru, že přídavek monosacharidů (zejména fruktózy) do média při ph 6 zvyšoval tvorbu putrescinu a to nejvíce při dodání 0,25 0,75% koncentrace. Při ph 7 a 8 naopak došlo ke snížení produkce putrescinu vlivem přídavku zkvasitelných cukrů. Z toho vyplývá, že jednotlivé faktory se navzájem ovlivňují.  Obecně se jako optimální koncentrace sacharidů pro dekarboxylázovou aktivitu udává 0,5 2 % glukózy v médiu.  2.5 Vliv kyslíku Biogenní aminy mohou být tvořeny mikroorganizmy aerobními, anaerobními i fakultativně anaerobními. Fakultativně anaerobní mikroorganizmy jsou schopny produkovat BA v aerobním i anaerobním prostředí.  Ze studie Valenty  vyplývá, že Lactococcus lactis subsp. lactis (CCDM 53) v prostředí s obsahem glukózy 0,5 % a za aerobních podmínek tvoří 2750 mg.1-1 tyraminu zatímco za anaerobních podmínek jen kolem 1870 mg.1-1 tyraminu.  Zjišťováním vlivu kyslíku na tvorbu BA se zabývali také Pleva et al. , kteří sledovali dekarboxylázovou aktivitu Enterococcus faecium izolovaného z masa králíka. Produkce biogenních aminů byla zkoumána v závislosti na teplotě (6±1 C a 30±1 C), dostupnosti kyslíku a koncentraci NaCl (0; 1; 2; 3 a 6 % (w/v)). Po 16 dnech kultivace při 6 C za anaerobních podmínek byl detekován vyšší obsah tyraminu a putrescinu než při kultivaci na aerobních podmínek, a naopak spermidinu bylo vyprodukováno více za aerobních podmínek. U vzorků kultivovaných při 30 C po dobu 48 hodin byla vyšší produkce tyraminu a spermidinu zjištěna při aerobních podmínkách, obsah putrescinu byl za přítomnosti a nepřítomnosti kyslíku přibližně stejný. Z těchto poznatků je zřetelné, že intenzita produkce BA je výsledkem součinnosti mnoha faktorů.  2.6 Vliv startovací kultury Jedním z nejdůležitějších aspektů při výrobě fermentovaných potravin je typ použité startovací kultury. Jedná se o speciální kmeny mikroorganizmů, které svou činností ovlivňují kvalitu výrobku (chutnost, barva, textura, údržnost, obsah nitrátů), nezávadnost výrobků (potlačení výskytu patogenů) a výrobní postup (zkrácení a standardizace doby zrání).  Bohužel i některé tyto kmeny mohou ve vhodných podmínkách vyka-\n21 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 21 zovat dekarboxylázovou aktivitu. Častými producenty biogenních aminů jsou zástupci rodů Lactococcus, Streptococcus a Lactobacillus.  Tvorbu BA ve fermentovaných produktech lze minimalizovat použitím dobře charakterizovaných startovacích kultur, které netvoří biogenní aminy a zároveň dokáží potlačit růst přirozené mikroflóry s dekarboxylázovou aktivitou.  Další možností vedoucí ke snížení hromadění BA v mléčných produktech může být použití doplňkových bakteriálních kultur, které jsou schopné BA rozkládat. \n22 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 22 3 VÝSKYT BIOGENNÍCH AMINŮ V POTRAVINÁCH A METODY JEJICH STANOVENÍ 3.1 Biogenní aminy v potravinách a nápojích Při posuzovaní výskytu BA se obyčejně potraviny dělí na fermentované a nefermentované, což vyplývá z podstaty vzniku BA. Přítomnost biogenních aminů v nefermentovaných potravinách obecně naznačuje špatné hygienické podmínky při zpracování nebo dlouhodobé a nesprávné skladování. V těchto případech bývají producenty biogenních aminů mnohé bakterie patřící do čeledi Enterobacteriaceae, případně další gramnegativní bakterie. Větší výskyt BA lze však předpokládat ve fermentovaných potravinách, kde hlavní podíl na dekarboxylaci aminokyselin mají některé bakterie mléčného kvašení. Nicméně také v rámci nefermentovaných potravin mohou hodnoty obsahu BA dosáhnout toxických dávek, především jedná-li se o špatně skladované ryby. [7, 8, 49] Biogenní aminy v rybách a mořských plodech Potraviny z ryb, hlavonožců a korýšů jsou zdrojem vysoce kvalitních proteinů, esenciálních vitaminů, minerálních látek a polynenasycených mastných kyselin, které příznivě ovlivňují lidské zdraví. Konzumace těchto potravin může v některých případech sebou nést i zdravotní riziko.  Během rozkladu těl mořských živočichů dochází k tvorbě různých biogenních aminů v koncentracích, které závisejí na druhu ryb. Při nesprávném skladování a zároveň vysokém mikrobiálním znečištění ryb se může vytvořit toxické množství BA dříve, než se senzoricky projeví ryba jako závadná. Prevencí proti vysoké produkci BA je rychlé zchlazení čerstvě ulovených ryb na teplotu kolem +1 C a dodržení chladírenských teplot během přepravy, distribuce a skladování. [39, 46] Nejčastěji se vyskytující biogenní aminy spojované s kažením ryb jsou histamin, tyramin, putrescin a kadaverin. Toxické koncentrace histaminu jsou nejčastěji zaznamenávány u ryb z čeledi Scombridae (makrelovití), jejichž svalovina je bohatá na histidin. Alimentární intoxikace histaminem je v tomto případě označována jako otrava scombrotoxinem. [7, 39]\n23 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 23 Evropská legislativa stanovuje maximální přípustné množství histaminu v rybách na 200 mg.kg -1. Dodržování tohoto limitu v rybách u nás prodávaných pravidelně kontroluje Státní veterinární správa ČR.  Biogenní aminy v mase a nefermentovaných masných výrobcích Čerstvé maso a nefermentované masné výrobky obsahují jen výjimečně množství BA, které by mohlo představovat zdravotní riziko.  V čerstvém mase jsou přítomny ve významných množstvích spermidin a spermin. Obsah sperminu v mase a masných výrobcích z teplokrevných zvířat bývá obvykle mezi 20 a 60 mg.kg -1 oproti spermidinu, jehož hladina v mase zřídka kdy překročí 10 mg.kg -1. Další biogenní aminy (tyramin, putrescin a kadaverin) se mohou v mase tvořit v průběhu skladování působením kontaminující mikroflóry.  Obsah BA lze využít jako indikátor mikrobiálního kažení masa a nefermentovaných masných výrobků. Čerstvé jatečné vepřové maso má hodnoty kadaverinu a putrescinu do 7 mg.kg -1, zatímco zkažené maso 60 mg.kg -1 a více. Nicméně množství biogenních aminů v těchto potravinách nemusí korelovat s růstem mikroorganizmů způsobujících kažení, protože všechny mikroorganizmy nemusí být dekarboxyláza-pozitivní. [14, 25] Výskytem biogenních aminů v mase různých živočišných druhů se zabývá mnoho studií. Krausová et al.  sledovali změny počátečních koncentrací BA ve vepřovém mase v závislosti na různých tepelných úpravách. U odebraných vzorků byly provedeny tepelné úpravy: vaření, dušení, pečení, pečení na pánvi bez oleje, úprava jako vídeňský řízek. Navíc byl odebírán vývar a tuk pro stanovení obsahu polyaminů. Obsah sperminu ve vzorcích z vepřové panenky klesl asi na 40 % původního množství během úprav vařením, dušením a smažením, pečením na pánvi bez oleje se dosáhlo přibližně 55% ztráty. Vývar a tuk, které vznikly během tepelných úprav masa, spermin neobsahovaly.  Kaniou et al.  se ve své práci zabývali vlivem vakuového balení na trvanlivost hovězího masa. Autoři nakonec dospěli k závěru, že vakuové balení ztrojnásobuje dobu skladování masa a zachovává jeho organoleptické vlastnosti na velmi dobré úrovni. Zároveň navrhují jednoduchý způsob, jak snížit hladiny biogenních aminů v mase. Stačí maso opláchnout pod tekoucí vodou, protože značné množství BA se nachází právě na povrchu masa. \n24 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická Biogenní aminy ve fermentovaných masných výrobcích Trvanlivé fermentované masné výrobky jsou ve Vyhlášce ministerstva zemědělství č. 326/2001 Sb., ve znění pozdějších předpisů, definovány jako výrobek tepelně neopracovaný určený k přímé spotřebě, u kterého v průběhu fermentace, zrání, sušení, popřípadě uzení za definovaných podmínek došlo ke snížení aktivity vody s hodnotou a w (max.) = 0,93, s minimální dobou trvanlivosti 21 dní při teplotě plus 20 ºC. Příkladem těchto výrobků na českém trhu jsou salámy Poličan, Herkules nebo Lovecký salám, z klobás např. Gombasecká klobása, Dunajská nebo Čabajská klobása. [51, 52] BA lze nalézt ve fermentovaných masných výrobcích (dále jen FMV) v důsledku činnosti mikroorganizmů zodpovědných za fermentační procesy a/nebo jsou produkovány kontaminující mikroflórou, jejíž zdrojem byla nekvalitní nebo znečištěná surovina, případně produkt.  Nejintenzivnější dekarboxylace probíhá v masové složce FMV, která obsahuje vysoké množství bílkovin. Zrání FMV je doprovázeno štěpením bílkovin masa, při čemž vznikají prekurzory pro dekarboxylázovou činnost startovacích kultur a divoké mikroflóry. [44, 48] Obsah a zastoupení jednotlivých BA se v různých druzích FMV závisí na složité interakci vnějších a vnitřních faktorů v průběhu výrobního procesu a skladování, jako je ph, oxido-redukční potenciál, teplota, koncentrace NaCl, velikost výrobku, hygienické podmínky výroby a vlastnosti startovací kultury. [44, 48] Vysoké hodnoty BA byly zjištěny u fermentovaných salámů, obsahují průměrně 23,0 23,6 mg.kg -1 histaminu, 136 mg.kg -1 tyraminu, 84,2 84,6 mg.kg -1 putrescinu, 37,4 38,0 mg.kg -1 kadaverinu. Obsah fenyletylaminu je poměrně nízký, kolem 6,6 mg.kg 1. V ostatních vyzrálých masných výrobcích je množství BA výrazně nižší.  Biogenní aminy v mléčných výrobcích Mléčné fermentované výrobky poskytují vhodné prostředí pro tvorbu BA, zejména sýry obsahují potenciálně toxické množství tyraminu, histaminu a putrescinu. V menším rozsahu je zastoupen i kadaverin. Obsah těchto aminů značně kolísá mezi různými druhy sýrů, ale také v rámci stejného druhu a to díky různým vnějším a vnitřním faktorům.\n25 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 25 Nejvyšší koncentrace BA byly zjištěny u zrajících sýrů vyrobených ze syrového mléka a u sýrů se silnými smyslovými vadami (až 1800 mg.kg -1 kadaverinu) [23, 35, 45] Hlavní producenti BA v sýrech jsou většinou bakterie mléčného kvašení, konkrétně zástupci rodů Enterococcus, Lactobacillus, Leuconostoc, Lactococcus a Streptococcus. Tyto mikroorganizmy se do sýrů dostávají společně s hlavní vstupní surovinou mlékem, jako součást jeho přirozené mikroflóry, kontaminací v průběhu celého procesu výroby sýra nebo dokonce mohou být součástí záměrně přidávaných startovacích a pomocných kultur.  Podmínkou vzniku toxického množství BA v sýrech je proteolýza, která je při zrání sýrů považována za jeden z nejdůležitějších pochodů ovlivňujících kvalitu sýra a je také zdrojem aminokyselin pro následnou dekarboxylaci.  Další fermentované mléčné výrobky, jako jsou kefír, podmáslí, kumys a jogurty, většinou obsahují taková množství BA, která nepředstavují pro konzumenta významnější zdravotní riziko. Také v mléce a smetaně bylo zjištěno malé množství BA, převážně polyaminy spermin a spermidin, není však zcela jasné, jsou-li produktem metabolizmu mikroorganizmů nebo mají původ endogenní. [25, 35] Biogenní aminy v dalších potravinách a nápojích Z dalších produktů potravinářského průmyslu obsahující významná množství biogenních aminů jsou fermentovaná zelenina, víno a pivo.  V rámci skupiny fermentované zeleniny je v podmínkách střední Evropy nejrizikovější potravinou kysané zelí, zvláště spontánně fermentované, ve kterém zastoupení BA může být až desítky mg/100 g potraviny. Spontánní kvašení probíhá díky činnosti bakterií mléčného kvašení, které jsou součástí přirozené mikroflóry zelí. Tyto bakterie v průběhu fermentace rozkládají jednoduché cukry na kyselinu mléčnou, kyselinu octovou, etanol a oxid uhličitý. Některé bakterie mléčného kvašení, ale také jiné mikroorganizmy přítomné v surovině, mohou současně produkovat biogenní aminy. [7, 45] Spontánní fermentaci lze nahradit fermentací řízenou, při které je použita vhodná startovací kultura. Tento způsob fermentace umožňuje získat produkty standardní jakosti a s nižším obsahem biogenních aminů. Kulturní kmeny laktobacilů navíc rychle rozkládají sacharidy na kyseliny, díky tomu rychle vzrůstá kyselost a dochází k potlačení růstu nežádoucí mikroflóry a tvorby BA. \n26 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 26 Obsah BA ve vínech je značně variabilní, což bývá způsobeno různými podmínkami výroby a skladování vín, kvalitou suroviny, rozdíly ve vinařském procesu, případně mikrobiální kontaminací během různých operací. Celková koncentrace BA ve víně pak může dosáhnout hodnoty až 130 mg/l, nebo naopak může být téměř nulová. Červená vína většinou obsahují více BA než vína bílá. Nejčastěji nalezené BA ve vínech jsou histamin, tyramin, putrescin, kadaverin, spermin a spermidin. [53, 54] Některé aminy jsou již přirozenou součástí hroznů. Oplodí a semena hroznů jsou bohatá na putrescin a polyamin spermidin, semena v sobě navíc ukrývají ve vysoké koncentraci také kadaverin. K tvorbě dalších BA dochází činností bakterií mléčného kvašení během jablečno-mléčné fermentace nebo činností kontaminující mikroflóry. Kvasinky zodpovědné za alkoholové kvašení většinou nejsou významnými producenty BA. V některých studiích byl naopak popsán pokles BA během fermentace alkoholických nápojů. [45, 54] Přítomnost BA ve vínech ve vysokých koncentracích může mít zdravotní i ekonomické důsledky. O toxických účincích různých BA na lidský organizmus bylo pojednáváno již v kapitole 1.4. Z ekonomického hlediska jsou biogenní aminy zodpovědné za senzorické vady vína, především v jeho chuti.  Pivo je dalším alkoholickým nápojem, jehož konzumace představuje pro některé spotřebitele možné zdravotní riziko v důsledku vysokého příjmu biogenních aminů. Zvláště nebezpečná je spotřeba velkého množství piva během krátkého časového intervalu.  Hlavní příčinou zdravotních problémů po konzumaci piva bývá intoxikace tyraminem a histaminem, jejichž účinek může být ještě zesílen jinými v pivu přítomnými BA. Kromě toho se spekuluje o možném synergickém vztahu mezi etanolem a aminy. Etanol totiž působí inhibičně na enzymy detoxikačního systému lidského organizmu. [45, 55] Agmatin, putrescin, spermin a spermidin se do piva dostávají společně se sladem, zatímco tyramin, histamin a kadaverin jsou tvořeny v průběhu hlavního kvašení kontaminující mikroflórou bakterií mléčného kvašení. Také kvasinky mohou během fermentace produkovat menší množství BA, konkrétně putrescin, spermin a spermidin, tato vlastnost je však přirozenou součástí jejich metabolizmu. Tvorba tyraminu a histaminu nebyla u kvasinek spodního kvašení Saccharomyces cerevisiae var. uvarum prokázána. [45, 56]\n27 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická Metody stanovení biogenních aminů v potravinách Existují dva důvody proč sledovat výskyt BA v potravinách. Zaprvé je to jejich potenciální toxicita a zadruhé poskytují informace o čerstvosti nebo znehodnocení potravin. Stanovení BA je náročné s ohledem na nároky na citlivost a přesnost stanovení a vliv matrice na předseparační kroky. Analytické metody pro kvantifikaci BA jsou založeny hlavně na chromatografických metodách, z nichž nejpoužívanější je vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC). Dalšími chromatografickými metodami jsou chromatografie na tenké vrstvě (TLC), plynová chromatografie (GC) a kapilární elektroforéza (CE). BA se v potravinách stanovují také metodami enzymatickými, imunologickými, kapilární izotachoforézou, fluorometricky nebo s pomocí biosenzorů. [47, 57, 58] Před detekcí je u většiny analytických technik nutné provést extrakci vzorku vhodných extrakčním činidlem. Těmito činidly jsou 0,6M kyselina chloristá, 5 10% kyselina trichloroctová a 0,1M kyselina chlorovodíková. U mléčných výrobků je vhodná extrakce biogenních aminů metanolem při zvýšené teplotě. Pro extrakci při zásaditém ph lze použít i butanol nebo směs butanolu a chloroformu.  Vysokoúčinná kapalinová chromatografie Detekční limit testů založených na HPLC je kolem 0,1 mg BA/kg vzorku. HPLC je uváděna jako referenční metoda pro zjišťování obsahu histaminu v potravinách, ale lze s ní kvantifikovat i ostatní BA. Tato metoda vyžaduje speciální vybavení a proškolený personál.  Úprava vzorku před vlastní detekcí zahrnuje homogenizaci, extrakci, filtraci resp. centrifugaci a alkalizaci alikvotního podílu kyselého extraktu. Jelikož alifatické BA nevykazují výraznější absorpci záření v UV oblasti, je potřeba aminy převést na vhodný derivát, který bude zároveň stabilní. Existuje několik postupů derivatizace, těmi základními jsou předkolonová a postkolonová. Předkolonová derivatizace se provádí před vlastní chromatografickou separací, kdy volné aminy reagují v alkalickém prostředí s derivatizačním činidlem. Nejčastěji se používá dansylchlorid (5- dimetylaminonaftalen-1-sulfonylchlorid; DANS-Cl). Dalšími vhodnými činidly jsou benzoylchlorid, dabsylchlorid (dimetylamino-azobenzensulfonylchlorid; DABS-Cl), 9- fluorenylmetoxykarbonylchlorid (FMOC), p-toluensulfonylchlorid (TSCl) a o-\n28 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 28 ftaldialdehyd (OPA). Při postkolonové derivatizaci reagují aminy s činidlem až po separaci na koloně. Používanými derivatizačními činidly jsou ninhydrin a OPA. [58, 59, 60] Separace složek vzorku probíhá v koloně se stacionární fází, kterou protéká mobilní fáze. Dnes je nejpoužívanější metodou HPLC systém s reverzní fází (RP-HPLC), kde stacionární fáze je nepolární a mobilní fáze polární rozpouštědlo. Nejčastějším nosičem stacionární fáze je silikagel s kovalentně navázanými alkylovými řetězci různé délky. Mobilní fázi běžně tvoří voda a s ní mísitelné polární rozpouštědlo (metanol, acetonitril, tetrahydrofuran).  Detekce složek vzorku se provádí elektrochemickými, fluorescenčními a UV/VIS detektory. Výsledkem HPLC analýzy je chromatogram. K identifikaci separovaných látek ve vzorcích se používá porovnání retenčních časů standardů a přítomných látek ve vzorku. [29, 59] Chromatografie na tenké vrstvě Tenkovrstvá chromatografie (TLC) slouží pro svou jednoduchost a instrumentální nenáročnost hlavně pro rychlé orientační stanovení aminů. Rozlišujeme TLC rozdělovací a absorpční. V prvním případě je stacionární fáze tvořena kapalinou zachycenou v tenké vrstvě, kdežto u adsorpční TLC je stacionární fází tuhý adsorbent, který je již součástí tenké vrstvy. Mobilní fáze je v obou případech kapalná. [60, 61] Podstata TLC spočívá v různé interakci složek vzorku se stacionární fází. Vzorek se nanese ve formě malé kulaté skvrnky na tenkou vrstvu a poté se mobilní fáze nechá vzlínat póry tenké vrstvy, přičemž s sebou unáší dělené látky ze vzorku. Tyto látky se různě adsorbují nebo rozpouštějí ve stacionární fázi a tím se více či méně zpožďují.  Separaci látek na tenké vrstvě předchází jejich derivatizace. Derivatizačním činidlem může být DANS-Cl, který reaguje s primárními i sekundárními aminoskupinami, nebo fluorescein reagující s primárními aminoskupinami.  Plynová chromatografie Plynová chromatografie (GC) nepatří mezi běžně používané metody pro stanovení BA. Tato metoda je vysoce senzitivní, jejíž detekční limity se pohybují v rozmezí jednotek pikomolů. Příprava vzorku pro GC analýzu vyžaduje derivatizaci aminů za účelem dosažení dostatečné těkavosti analytů. Výtěžek derivatizace je však variabilní a v důsledku toho mohou v kvantifikaci BA vznikat nepřesnosti. [58, 62]\n29 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 29 Mobilní fází je v tomto případě nosný plyn přiváděný z tlakové láhve. Podle typu detektoru se volí jako nosný plyn helium, vodík, argon nebo dusík. Kapalné vzorky se do plynu vstřikují přes septum, kde se vlivem vysoké teploty kapalina okamžitě vypaří. Plynné vzorky jsou do plynu vstřikovány plynotěsnou stříkačkou. Chromatografické kolony podle provedení rozlišujeme na náplňové a kapilární. Náplňové kolony jsou naplněny granulovaným nosičem s mikrofilmem stacionární fáze. Kapilární kolony jsou tenké šroubovitě stočené kapiláry, jejichž vnitřní stěny jsou povlečeny stacionární fází. Na výstupu z chromatografické kolony je umístěn detektor. Pro stanovení BA je nejčastěji používán plamenově-ionizační detektor (FID flame ionization detektor), tepelněvodivostní detektor (TCD thermal conductivity detector) a detektor elektronového záchytu (ECD electron capture detector). [58, 63] Kapilární elektroforéza Kapilární elektroforéza (CE) patří mezi separační metody využívající pohyb nabitých částic, ať už anorganických iontů nebo organických makromolekul (proteiny, fragmenty DNA), v elektrickém poli. Mezi největší výhody této metody patří především její vysoká účinnost, krátké časy analýz a nízká spotřeba chemikálií a dávkovaných vzorků. Ve spojení s laserem indukovanou fluorescenční (LIF) detekcí poskytuje CE vysokou citlivost. [64, 65] Transport analyzovaných iontů (analytů) a jejich separace probíhá v kapiláře, která propojuje dvě nádobky naplněné roztokem základního elektrolytu (anglicky background electrolyte, BGE). Kapilára je většinou z taveného křemene s vnitřním průměrem řádově desítky či stovky mikrometrů a délkou mezi 10 centimetry až 1 metrem. Do roztoku základního elektrolytu v nádobkách jsou vnořeny také elektrody, jimiž se přivádí elektrické napětí obstarávající pohyb iontů. Před vlastním měřením je kapilára naplněna BGE přetlakem nad hladinou kapaliny v jedné nádobce. Potom se jeden konec kapiláry ponoří do nádobky s analyzovaným vzorkem a nasaje se malý objem vzorku. Kapilára se vrátí do nádobky s BGE, vloží se napětí a tím se zahájí separace. Jednotlivé složky vzorku se pohybují rozdílnými rychlostmi směrem ke katodě a v různých časech tak prochází detektorem. Často používanými detektory jsou UV/VIS absorpční detektor, elektrochemický, vodivostní, LIF a MS detektor. [64, 65] Stejně jako u předešlých chromatografických metod, i zde je potřeba nejprve převést aminy na vhodné deriváty s vysokou absorpcí UV záření a fluorescencí. Volba derivati-\n30 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 30 začního činidla je ovlivněna typem detektoru, který bude použit pro detekci separovaných složek, vlastnostmi prostředí, složením analytu a požadovanou úrovní citlivosti.  Stanovení biogenních aminů pomocí biosenzorů V posledních letech je stále více věnována pozornost metodám stanovení BA pomocí elektrochemických biosenzorů. Tyto metody se vyznačují jednoduchostí, reprodukovatelností, nízkými náklady, krátkou dobou analýzy, nízkým detekčním limitem a také možností aplikace mimo laboratoř. [58, 67] Biosenzor je analytický přístroj obsahující citlivý prvek biologického původu (např. enzym), který je buď součástí, nebo v těsném kontaktu s fyzikálně-chemickým převodníkem poskytujícím elektrický signál. Tento signál je přímo úměrný koncentraci analyzované látky.  Biosenzory používané pro detekci BA využívají katalytických schopností animo-oxidáz, které katalyzují oxidaci aminů molekulárním kyslíkem na aldehydy za současného vzniku amoniaku (NH 3 ) a peroxidu vodíku (H 2 O 2 ). Enzymatická reakce je poté sledována ampérometrickou detekcí elektrochemické oxidace H 2 O 2 (Obrázek 3).  Obrázek 3. Sledování enzymatické reakce ampérometrickým měřením elektrochemické oxidace proudu H 2 O 2.  Enzymatické optické senzory pro detekci biogenních aminů vyvíjené Ústavem chemických procesů AV ČR jsou také založeny na enzymově katalyzované oxidační deaminaci aminů vzdušným kyslíkem. Spotřeba kyslíku v reakci je v tomto případě detekována zvyšující se fluorescencí, resp. dobou trvání fluorescence organického komplexu ruthenium tris-(1,10-fenantrolin)chloridu. \n31 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 31 4 PROBIOTICKÉ BAKTERIE Probiotika jsou definována jako živé mikroorganizmy, které přispívají ke zlepšení zdravotního stavu hostitele, a to pokud jsou podávány v adekvátním množství. Jako probiotické kultury jsou obvykle používány bakterie, které přirozeně obývají lidský trávicí trakt. Nejpoužívanější jsou bakterie rodů Lactobacillus a Bifidobacterium.  4.1 Historie probiotik Jako počátek teorie probiotik je nejčastěji uváděn rok 1907, kdy Ilja Mečnikov ve své knize o prodlužování věku The prolongation of life. Optimistic studies poukázal na příznivé účinky jogurtových bakterií na lidské zdraví. Vycházel při tom z vlastního zjištění, že kavkazští pastýři se dožívají vyššího průměrného věku, oproti obyvatelům Paříže a Američanům, a to právě díky pravidelné konzumaci mléčných kysaných výrobků obsahujících živé bakterie. Mečnikov v knize vysvětluje, že ne všechny mikroorganizmy jsou škodlivé pro lidské zdraví. Některé mikroorganizmy mohou mít naopak přínos v léčbě střevních onemocnění, protože vytlačují škodlivé mikroby a zabraňují tak hnilobným procesům ve střevech. Terapeutických účinků kysaných mléčných výrobků se začalo využívat už v roce 1906, kdy francouzská společnost Le Fermente dodávala do lékáren fermentované mléko pod názvem Lactobacilline. S první probiotickou bakterií se však vědci setkali už v roce 1899, kdy se Henrymu Tissierovi podařilo izolovat bifidobakterie ze stolice kojenců. [69, 70] Do historie výzkumu probiotik se zapsal také německý lékař a vědec Alfred Nissle, když v roce 1916 izoloval nepatogenní kmen Escherichia coli ze stolice vojáka, který jako jediný odolával infekci úplavice. Tento bakteriální kmen, dodnes používaný k léčbě střevních onemocnění, byl pojmenován Escherichia coli Nissle 1917 [69, 72] Za necelých deset let po smrti Mečnikova se začal prodávat výrobek získaný kyselým srážením mléka, nazývaný jogurt, který se rychle rozšířil po Evropě a Severní Americe. Již v této době byla výroba jogurtů založena na fermentačních schopnostech dvou mikroorganizmů izolovaných právě z mléka od kavkazských a bulharských pastevců, Streptococcus thermophilus a Lactobacillus delbruekii subsp. bulgaricus. Tehdejší vědci však brzy začali zesměšňovat Mečnikova a jeho tvrzení, protože u konzumentů jogurtů nebyl ve stolici prokázán výskyt těchto dvou bakterií. Terapeutické využití fermentovaných potravin tak přestávalo mít své zastánce. [70, 72]\n32 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 32 Ve dvacátých letech japonský mikrobiolog Minoru Shirota zjistil obrannou schopnost některých střevních bakterií proti bakteriálním patogenům a následně se mu podařilo izolovat a kultivovat bakterii, která byla pojmenována Lactobacillus casei Shirota. V roce 1935 se v Japonsku začalo s výrobou nápoje obsahující tento mikroorganizmus, tzv. Yakult.  V roce 1936 byl zaznamenám další významný příspěvek k Mečnikově teorii. Studie dvou veterinářů, Zobella a Andersena, hovoří hovoří o mikrobiálním filmu v tlustém střevě, což je vlastně vrstva z mnoha druhů bakteriálních populací ulpívajících na střevní sliznici, které tak představují komplexní ekosystém s intenzivní metabolickou aktivitou.  Termín probiotikum poprvé použili Lilly a Stillwell v roce 1965 pro popis látky vylučovanou jedním prvokem, která stimulovala růst jiného prvoka. Při uvedení tohoto termínu vycházeli autoři z řeckého slova pro bios, což znamená pro život. [69, 71] Až do konce 80. let byly jako probiotika označovány nejen živé bakteriální kultury, ale také určité látky (mikrobiální metabolity, enzymy, aminokyseliny apod.) s příznivými účinky na mikroflóru trávicího traktu. Některé z těchto látek však byly v rozporu s významem slova probiotikum, protože jejich účinek byl antibiotický. Se smyslu platnou definicí probiotik přišel v roce 1989 Fuller, který probiotika popsal jako živé mikrobiální krmné a potravní doplňky, které příznivě ovlivňují hostitele zlepšením jeho střevní mikrobiocenózy. Dnešní definice probiotik byla přijata Světovou zdravotnickou organizací (WHO) a Organizací pro výživu a zemědělství (FAO) při Organizaci spojených národů (OSN) v roce Evropský úřad pro bezpečnost potravin (EFSA) však tuto definici odmítá, protože obsahuje zdravotní tvrzení, které není měřitelné. [69, 72] Problematika probiotik, a s nimi souvisejících prebiotik, je dlouhodobě studována celou řadou vědeckých týmů a institucí po celém světě. Také u nás se tato problematika řeší, např. ve Vědeckých výborech pro potraviny (VVP) a pro výživu zvířat (VVVZ), které spadají pod Ministerstvo zemědělství ČR. V roce 2006 byla v ČR založena Společnost pro probiotika a prebiotika (SPP). Cílem všech zmiňovaných institucí je mimo jiné posuzování kvality probiotik a prebiotik. SPP zahájila přípravu udělování loga pro výrobky, které obsahují kvalitní probiotické a prebiotické doplňky. \n33 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická Současné využití probiotik Zájem o probiotika v posledních dvaceti letech zaznamenal značný nárůst, ať už v oblasti výzkumu nebo u spotřebitelů. Pokrok v laboratorních technikách umožňuje identifikovat bakteriální geny a prohlubovat tak znalosti o jednotlivých probiotických kmenech. V současné době se mezi probiotické mikroorganizmy řadí některé bakteriální kmeny rodů Lactobacillus, Enterococcus, Streptococcus, Lactococcus, Bifidobacterium, Escherichia, Bacillus a Propionibacterium, dále pak některé kmeny kvasinky Saccharomyces cerevisiae a plísně Aspergillus oryzae. [69, 71] Probiotické mikroorganizmy mají uplatnění jak ve výživě lidí, tak zvířat. Běžně se přidávají do mléčných kysaných výrobků (hlavně bifidobakterie a Lactobacillus casei), sýrů (bifidobakterie, laktobacily, propionové bakterie), fermentovaných masných výrobků (různé mléčné bakterie), ale i do náplní sušenek a oplatků (Enterococcus faecium). Do potravin se společně s probiotiky mohou přidávat i prebiotika. Podle definice od Gibsona a Roberfroida z roku 1995 jsou prebiotika nestravitelné potravní ingredience, které příznivě ovlivňují hostitele prostřednictvím selektivní stimulace růstu a/nebo aktivity určitých bakterií v tlustém střevě. Laicky lze prebiotika nazvat jako potrava pro probiotické bakterie. Další možností podávání probiotik lidem je v podobě různých probiotických preparátů, většinou jako součást alternativní terapie. [69, 71] Do skupiny probiotických mikroorganizmů, vhodných pro použití v lidské výživě, lze zařadit pouze kmeny, které splňují tyto požadavky : nesmí ztrácet své vlastnosti během skladování, běžně se vyskytují ve střevech člověka, musí odolávat kyselému prostředí žaludku, působení žaludečních šťáv, střevních enzymů a žlučových solí, musí kolonizovat střevo a přilnout ke střevním buňkám, mají blahodárné účinky na lidské zdraví a jsou antagonisty patogenních mikroorganizmů tím, že produkují antimikrobiální látky, jsou bezpečné, nevyvolávají imunitní či jinak škodlivé reakce, musí být podávány ve vhodných dávkách při příznivém poměru ceny a účinku. V klinické praxi je příznivý účinek probiotik pozorován při prevenci a terapii průjmových onemocnění, zánětlivých chorobách a syndromech střev, alergických nemocech\n34 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 34 jako je atopický ekzém a astma, v prevenci kolorektálního karcinomu a rakoviny močového měchýře a regulaci hladiny krevního cholesterolu. Některá probiotika také přispívají ke správné funkci metabolizmu, podporují imunitní systém, jsou významným zdrojem vitaminu B 12 a K, napomáhají trávení potravy a mohou zvyšovat nutriční hodnotu některých potravin tím, že jejich složky dále rozkládají. Navíc udržují ve střevech kyselé ph a vytváří tak nepříznivé životní podmínky pro patogenní mikroorganizmy. [69, 71, 72] Rozšířené je používání probiotik také v chovu hospodářských zvířat, kde se očekává příznivý vliv jak na zdraví, tak užitkové vlastnosti zvířete.  4.3 Rizika probiotik Jednou z podmínek použití probiotik je jejich nepatogenita vůči hostitelskému organizmu a tudíž zdravotní komplikace, jako bakteriemie nebo fungemie, vyvolané právě probiotickými mikroorganizmy jsou vcelku vzácné. Odhaduje se, že riziko vzniku bakteriemie po požití probiotických laktobacilů je méně než 1: a riziko vzniku fungemie způsobené kvasinkami Sachcaromyces boulardii je asi 1: Vznik těchto komplikací je pravděpodobnější u jedinců se sníženou imunitou, po hospitalizaci, závažném onemocnění nebo předchozí antibiotické léčbě.  Dalším teoretickým rizikem spojeným s probiotiky je možný transfer antibiotické rezistence probiotických kmenů na patogenní bakterie. Tento jev však dosud nebyl pozorován.  Zde je také potřeba připomenout, že někteří zástupci probiotických kultur patří mezi potenciálními producenty biogenních aminů.  4.4 Rod Bifidobacterium Bifidobakterie byly objeveny v roce 1899, kdy se Henrymu Tissierovi podařilo izolovat ze stolice kojenců nepravidelné bakterie ve tvaru "Y", které pojmenoval jako Bacillus bifidus. V roce 1917 byly tyto bakterie zařazeny do čeledi Lactobacillaceae a o tři roky později přejmenovány na Lactobacillus bifidus. V roce 1924 dánský mikrobiolog Orla- Jensen navrhl zařazení těchto bakterií do samostatného rodu Bifidobacterium. V současné době rod Bifidobacterium zahrnuje více než 30 druhů (Tabulka 2). [69, 75]\n35 UTB ve Zlíně, Fakulta technologická 35 Zástupci rodu Bifidobacterium jsou gram-pozitivní, obligátně anaerobní, nepohyblivé, nesporulující tyčinky různého tvaru (krátké, pravidelné, tenké buňky se špičatými konci, dlouhé buňky mírně zahnuté nebo s výčnělky), různě větvené, jednotlivě, v řetízcích, ve hvězdicovitém nebo palisádovém uspořádání. V závislosti na životních podmínkách mohou buňky růst také ve tvaru "Y" nebo "V" (Obrázek 4). [73, 74] Obrázek 4. Bifidobacterium spp.; rastrovací elektronová mikroskopie; měřítko 1 μm; mikrofotografie byla pořízena na Istituto di Microbiologia, Piacenza University, It.  Optimální teplota pro růst bifidobakterií je 37 až 41 C, při teplotách pod 20 C a nad 46 C nerostou. Výjimkou je B. thermacidophilum, který je schopen růst za mírně termofilních podmínek (49,5 C) a B. psychroaerophilum, jehož růst byl pozorován i při 4 C. Bifidobakterie jsou acidotolerantní mikroorganizmy. Optimální ph růstu je mezi 6,5 a 7,0. Při ph nižším než 4,5 a vyšším než 8,5 růst bakterií již nebyl pozorován. Výjimku tvoří opět B. thermacidophilum, který vykazuje pomalý růst i při ph 4. [75, 85] Bifidobakterie patři do skupiny sacharolytických mikroorganizmů. Hexózy fermentují pomocí charakteristického enzymu fruktóza-6-fosfát-fosfoketoláza po fosfoketolázové dráze (označované také jako "bifid shunt") na kyselinu mléčnou, octovou, mravenčí a etanol. Právě díky schopnosti tvorby kyseliny mléčné jsou bifidobakterie často nesprávně zařazovány mezi bakterie mléčného kvašení. [75, 76] Bifidobacterium spp. mohou být detekovány v různých ekologických prostředích, jako jsou mléčné výrobky, zubní kazy, odpadní vody a především střeva různých obratlovců a bezobratlých, kde jako součást střevní mikroflóry koexistují s mnoha dalšími bakteriemi. Odhaduje se, že střevní mikroflóra člověka je složena z 500 až 1000 různých bak-


Federer stále neztratil ani set a už je ve čtvrtfinále US Open — Tenis — ČT sport — Česká televize\nFederer stále neztratil ani set a už je ve čtvrtfinále US Open\n7. 9. 2010 07:44, autor: ČT24\nNew York - Švýcarský tenista Roger Federer postoupil bez ztráty setu do čtvrtfinále US Open. Světová dvojka zdolala v New Yorku v osmifinále Rakušana Jürgena Melzera ve třech sadách 6:3, 7:6 a 6:3 a v dalším kole narazí na Robina Söderlinga ze Švédska. Po jednoznačném úvodu doplatil rakouský semifinalista z Roland Garros na nepřízeň pásky v tie-breaku druhé sady a na neproměňování brejkových šancí. Využil jen dva z dvanácti brejkbolů, naopak Federer sebral soupeřův servis ve čtyřech případech a dál prochází turnajem bez ztráty setu.\nCibulková prošla přes Kuzněcovovou do čtvrtfinále US Open, 6. 9. 2010


Z berlínské zdi vypadla první cihla, železná opona se začala trhat. Před 30 lety se konal Panevropský piknik | Reflex.cz\nVojenský převrat a zavření parlamentu? Českem se opět…\nMaďarský zmocňovací zákon je pro EU v pořádku, potvrdila…\nReportáž o Gretě jen s povolením vlády? S médii v…\nMerkelová a Macron zase chtějí rozhodovat za ostatní. A…\nOliver Adámek18. srpna 2019 • 17:45\nPanevropský piknik, symbolický začátek pádu železné opony\nZatímco v Československu se tou dobou ještě rozháněly demonstrace, na maďarsko-rakouské hranici aspoň na pár hodin padla železná opona. 19. srpna 1989 se u Šoproně konal Panevropský piknik, klidná demonstrace s tolerancí maďarských úřadů, které dokonce nechaly utéct na západ několik set občanů NDR. Helmut Kohl piknik pojmenoval jako vyndání první cihly z Berlínské zdi, k výročí se letos setkají i Angela Merkelová s Viktorem Orbánem.\nMaďarští pohraničníci měli přitom v době Panevropského pikniku pořád ze zákona povinnost prchající lidi střílet. Na hranicích s Rakouskem se ale zátarasy odstraňovaly postupně už během léta, při náporu stovek lidí pak velitelé strážím povolili situaci nekomplikovat a nechat Němce utéct. Na ty už na rakouské straně čekal hromadný převoz do Západního Německa.\nPiknik ale nebyl zdaleka první vlaštovkou konce komunismu v Maďarsku. Už 16. června se konala obří demonstrace na budapešťském náměstí Hrdinů, kde mimo jiné pronesl slavný projev tehdy neznámý předák studentského odboje Viktor Orbán. Zahraniční kritici dnešního premiéra často opomíjí, že ve své zemi platí za jeden z největších symbolů boje s komunismem i samotného roku 1989.\nUvolňování poměrů napomohl i fakt, že už o rok dříve odstoupil z čela státu János Kádár, strůjce „gulášového socialismu,“ a nahradil ho reformista Károly Grósz. Pád režimu se zdál být už jen otázkou času.\nAle zpátky do Šoproně. Už 2. května začali ministři zahraničí Gyula Horn s Aloisem Mockem stříhat ostnatý drát – i proto, že postupně zrezivěl a Maďaři už nechtěli investovat do nového. V době, kdy bylo zřejmé, že k otevření hranic u Šoproně dojde, začali východní Němci plnit kempy u Balatonu a budapešťské parky. Na většinu z nich se sice ještě tehdy nedostalo, vzhledem k dalšímu průběhu revolučního roku toho ale nemuseli litovat.\nI místo konání pikniku v sobě neslo symboliku. Šoproň měla po první světové válce připadnout nově vzniklému Rakousku, po nepokojích se však ve městě uspořádalo referendum, kde se místní 65% většinou vyslovili pro připojení k maďarskému státu. Na pikniku se před 30 lety setkali jako zástupci obou zemí opozičník Imre Pozsgay a syn posledního rakouského císaře Otto von Habsburg a začali obnovovat rakousko-maďarské vztahy.\nV pondělí se mají na místě konání pikniku setkat dva státníci, kteří jinak většinou stojí proti sobě: německá kancléřka Angela Merkelová a již zmíněný premiér Orbán. Merkelová už minulý týden poděkovala Maďarům za přínos k německé jednotě a dodala, že svůj podíl na ní měli i Poláci a Čechoslováci. A určitě by souhlasila s kancléřem Helmutem Kohlem, že na Panevropském pikniku se na dálku vyrvala první cihla z berlínské zdi.\nKlíčová slova: Panevropský piknik, Evropa, železná opona, Maďarsko, komunismus, Viktor Orbán, Angela Merkelová\nBouřky dorazily do Česka, blýskalo se už i v Praze.… (Blesk.cz)\nMini šortky z úpletu: Nečekaný módní hit, který přinesla … (Ženy.cz)\nNový Maslák? Talent Krsek už ho porazil, utíká ale i k…


Grafik / grafička - marketingový pracovník / praco - Volné pracovní místo PRAHA\nGrafik / grafička - marketingový pracovník / praco Praha\nZprostředkováváme personální inzerci pro klienta, kterým je společnost Au-Mex s.r.o. - dodavatel dřevařských výrobků více než 24 let. Společnost patří mezi přední importéry a exportéry dřevařských materiálů. V případě exportní činnosti se společnost zaměřuje na prodej exotických dřevin z Malajsie, Indonésie, Jižní Ameriky a Kanady, překližek, dřevěných podlah a fasád po celém světě.\n•\tpříprava grafiky pro firemní weby, Facebook a digitální kampaně v českém a anglickém jazyce\n•\tfocení, upravování produktových fotografií\n•\ttvorba a úprava videí pro ukázku produktů\n•\ttvorba a úprava videí pro ukázku aplikací a montáží\n•\ttvorba bannerů, reklamních bilboardů, vizitek, katalogů a dalších firemních propagačních materiálů\n•\tvyžadujeme pečlivost, kreativitu, tvůrčí přístup, uspokojení potřeb nadřízeného a zákazníka\n•\tSŠ vzdělání - zkušenost s grafickou tvorbou a znalost grafických programů AdobeCC, Photoshop, Indesign, Adobe Premiere - vhodné i pro absolventy avšak se znalostí programů\n•\tschopnost psané i mluvené AJ na komunikativní úrovni, minimální úroveň je B1\n•\tmarketingové myšlení a schopnost navrhovat grafická řešení pro firemní letáky, nabídky, inzerci produktů a prezentace na webu\n•\tochota a příjemné vystupování se zájmem tvořit v týmu\n•\tvyžadujeme trestní bezúhonnost\n•\tpráce na HPP v příjemném pracovním prostředí\n•\tpráci v kolektivu, který je na vysoké profesní úrovni ve svém oboru\n•\tzákladní hrubá mzda 30 000 Kč + 5 000 Kč stálý bonus s možností navýšení (fixní mzda a motivační mzdové ohodnocení)\nMísto práce: Poděbradská 574/40, Praza 9 - Vysočany\nPro odpověď na tuto pozici, prosím, používejte pouze e-mailovou adresu: egrundova@jobsystem.cz nebo tel.: 283 933 452 - Šárka Hanzalová - jednatelka.\nNa tuto pracovní pozici, můžete reagovat pouze do 5. 12. 2021. Po tomto datu, prosím, neodpovídejte.\nVloženo: 29. 11. v 09:45\nGrafik / grafička - marketingový praocvník / praco - Profil společnosti: Zprostředkováváme personální inzerci pro klienta, kterým je společnost Au-Mex s.r.o. - dodavatel dřevařských výrobků více než 24 let. Společnost patří mezi přední importéry a...


Rozhlasové hlášení 9.8.2019 - Oficiální stránka města Ronov nad Doubravou\nRozhlasové hlášení 9.8.2019\nProdejna Rabbit oznamuje, že zítra v sobotu 11. srpna bude zavřeno. Dále vyhlašuje akci na kuřecí prsní řízek za 119,90 Kč a kuřecí prsa s kostí a kůží za 89,90 Kč.\n*Tento víkend 10. a 11. srpna od 13 – 19 hodin se koná v přízemí bývalé restaurace Tunel výstava nazvaná „Přestavba a využití restaurace Tunel“. Bude zde možnost prohlédnout 8 studií studentů architektury VUT Brno. Srdečně zve město Ronov nad Doubravou\n*Sbor dobrovolných hasičů v Ronově nad Doubravou, Vás srdečně zve na tradiční pouťové zábavy. V pátek 9. srpna zahraje kapela Starý Klády. V sobotu 10. srpna zahraje kapela PUNC. Začátek zábav je od 21 hod. Srdečně zvou pořadatelé.\n*Hospůdka U Vavřince vás zve na pouťové diskotéky, které se konají v pátek a v sobotu 9. a 10. srpna vždy od 20 hodin. V neděli od 15 hodin jste zváni na dechovou hudbu pana Semeráda.\n*Sportovní klub Ronov nad Doubravou zve své příznivce na sportovní stadion na fotbalové utkání Ronov „A“ – Heřmanův Městec v neděli 11. srpna od 17 hodin.\n*Spolek cyklistů z Ronova nad Doubravou a blízkého okolí si vás dovoluje pozvat na desátý ročník Pouťového pivního triatlonu, který se koná tuto sobotu od 11.00 hodin u místní hasičské zbrojnice. Prezentace účastníků je do 10:30. Nově zařazeny i štafety. Po skončení závodu proběhne tombola, ve které nebudou díky sponzorům chybět hodnotné ceny. Zváni jsou i diváci, kteří tak mohou povzbudit závodníky při jejich výkonech. Občerstvení je zajištěno po celou dobu trvání akce.\nDatum vložení: 9. 8. 2019 10:04\nDatum poslední aktualizace: 9. 8. 2019 10:22


Ze schůzky s předsedou Vlády ČR s panem Petrem Nečasem (NRZP)\nZe schůzky s předsedou Vlády ČR s panem Petrem Nečasem (NRZP)\nStředa, 23 Leden 2013 08:50 |\nV ážení přátelé, včera jsem se sešel s předsedou Vlády ČR s panem Petrem Nečasem. Prvním bodem našeho jednání byla situace poradních orgánů vlády, a to především Vládního výboru pro zdravotně postižené občany (VVZPO). Předseda vlády mne ujistil, že můžu veřejně oznámit, že VVZPO nebude převeden do kompetence MPSV ČR, ani jiného ministerstva, a že zůstane kompetenčně na Úřadu vlády ČR.\nHovořil také o tom, že i ostatní poradní orgány vlády zůstávají v kompetenci tohoto úřadu. Je to významný posun. Z prohlášení pana premiéra vyplývá, že v tomto volebním období by již nemělo dojít k žádné změně v této věci.\nSpolečně jsme hovořili také o sKartě. Požadoval jsem na předsedovi vlády, aby byla pokud možno sKarta zrušena. Pan premiér mi sdělil, že není nakloněn žádnému radikálnímu řešení. Nyní se bude připravovat nová legislativa, a teprve pokud by se ukázalo, že právní rozbor neumožňuje současnou sKartu dobře zákonem ošetřit, došlo by k radikálnímu řešení.\nTřetím bodem našeho jednání byla neudržitelná situace na Úřadech práce. Informoval jsem předsedu vlády o současném stavu, kdy občané čekají na vyřízení jakékoliv záležitosti osm a více měsíců, stojí ve frontách i tři a více hodin, anebo je jim vnucována sKarta, i když zákon takovou možnost neumožňuje. Snažil jsem se vysvětlit panu premiérovi, že dlouhé čekací lhůty jsou porušováním správního řádu, a pokud vláda chce, aby občané dodržovali zákony, tak je nezbytné, aby je také dodržovaly státní orgány. Předložil jsem panu premiérovi několik stížností občanů, abych dokumentoval pravdivost svých slov. Vysvětlil jsem předsedovi vlády, že právě tyto věci, které se dotýkají tisíců lidí, způsobují špatnou atmosféru v této zemi a vytvářejí negativní postoj k současné administrativě. Předseda vlády mne pozorně vyslechl, řekl, že uznává, že toto je vážný problém, a že se tím bude zabývat. Více jsem ani nemohl očekávat, protože předseda vlády nemůže rozhodovat za jiného ministra a samozřejmě musí projednat takovýto problém s příslušným resortním ministrem, což je v tomto případě paní ministryně Ludmila Müllerová. O tomto problému jsem hovořil ve čtvrtek 17. 1. 2013 také s paní ministryní L. Müllerovou, která přislíbila, že se tímto problémem bude intenzivně zabývat. Věřím, že vláda, ve spolupráci s MPSV ČR, přijme takové opatření, aby došlo ke zlepšení situace na Úřadech práce.


Barva vanilka - vše o tématu | Ahaonline.cz\nAhaonline.cz >Wiki.Ahaonline.cz >b >barva vanilka\nAktuální informace o tématu: barva vanilka\nPřečtěte si o tématu "barva vanilka". Abychom vám usnadnili vyhledávání zajímavého obsahu, připravili jsme seznam nejoblíběnějších článků s klíčovými slovy "barva vanilka", které hledáte. V naší encyklopedii najdete články, fotografie i videa k tématu "barva vanilka".\nJedlé květiny – voňavé a plné vitaminů: Krása na talíři!\nKvětiny jsou krásné, pěkně voní a k létu patří. Nemusí nás těšit jen ve váze, ale mohou vám rozehrát chuťové buňky i na talíři. Na kterých…\nAha! testuje vanilkové zmrzliny!\nZmrzlina patří k nejoblíbenějším pochoutkám. Podle průzkumů jsou Češi velmi konzervativní a už tradičně si nejčastěji dopřávají tu s vanilkovou…\nKterá znamení se nemohou přátelit? Tahle se umí nenávidět až…


NASTAVENÍ – Nápověda Storyous\nNa webové stránce onemenu.cz evidujeme všechny restaurace, u kterých je možné si objednat jídlo s sebou nebo umožnit objednávku s vlastním rozvozem. Zákazník si na webové stránce zvolí restauraci, ze které si chce objednat a proklikne se rovnou k menu. Případně je možné vyhledávat i v mapě, kde také vždy najdete proklik na menu a objednávku. Zákazník vybere dané produkty, vybere si čas vyzvednutí nebo zvolí, zda chce, aby mu restaurace objednávku dovezla (a na jakou adresu) a po potvrzení objednávky bude automaticky přesměrován na platební bránu, kde provede platbu.\nNávod, jak objednávky s sebou můžete propagovat, najdete na tomto odkazu.\nNASTAVENÍ WEBOVÉ ADMINISTRACE\nV tomto článku zjistíte jak nastavit webovou administraci pro správné fungování služby OneMenu jídlo s sebou.\nTaké jsme pro vás připravili video návod, kde vám stručně vysvětlíme, jak nastavit vaše menu pro online objednávky.\nPoté, co Vám službu aktivujeme, se Vám ve webové administraci v sekci Podniky, v záložce Produkty zobrazí ve sloupci Externí služby další možnost "OneMenu Takeout". Produkty, které chcete nabízet svým hostům k objednání s sebou, jednoduše označte v tomto sloupečku OneMenu Takeout (1). Tuto akci lze provést pomocí hromadné akce v prvním sloupci. Je také nutné, aby tyto produkty měly nastaveno "Zobrazovat v tabletu". (2)\nDo menu na webové stránce se propíší produkty i s danou kategorii či podkategorií. (3)\nTyto produkty se poté budou zobrazovat v nabídce zákazníkům po kliknutí na Vaši restauraci na webové stránce onemenu.cz. V nabídce na webové stránce se budou zobrazovat produkty i kategorie produktů pod STEJNÝM NÁZVEM jako v naší webové administraci, doporučujeme proto brát na tuto skutečnost zřetel. Obalový materiál je nutné zahrnout v ceně, není možné ho naúčtovat navíc.\nV nabídce restaurace na webu se také zobrazuje popis produktu (4), který si můžete jednoduše nastavit v detailu každého produktu. (symbol tužky v posledním sloupci - akce) V detailu produktu je také možné nahrát v fotku produktu (5), který se poté zákazníkům bude zobrazovat na stránce onemenu.cz.\nPokud chcete zvolit jiné názvy, než ty, které jsou v administraci, můžete vytvořit tzv. marketingový název. Přes tlačítko Upravit sloupce (6) otevřete výběr a zaškrtnete pole "marketingový název" (7). Díky této funkce se Vám vytvoří nový sloupec (8) a zde můžete napsat nový název vašeho produktu. Marketingový název může mít maximálně 45 znaků. (Např.: Tradiční česká gulášová polévka v chlebu)\nNOTIFIKACE O NOVÝCH OBJEDNÁVKÁCH\nKromě toho, že se vám v tabletu objeví notifikace o nové objednávce, je možné nastavit, aby vám přišla sms na váš telefon. Vždy lze zvolit pouze jedno telefonní číslo. V sekci Podniky, záložka Nastavení podniku jednoduše vyplňte své telefonní číslo a o všech nových objednávkách budete včas informováni. (9)\nPokud například nebudete stíhat připravovat nové objednávky, je možné kdykoliv jejich příjem pozastavit. Pro pozastavení příjmu objednávek přejděte na sekci Podniky, záložku Nastavení podniku a zde ve spodní části naleznete Takeout integraci. (10)\nPokud není checkbox u "Přijímat externí objednávky" zaškrtnutý znamená to, že vaše restaurace není k dispozici pro on-line objednání. Integrace se automaticky zapíná a vypíná podle vaší pracovní doby, kterou jste nám sdělili.\nPeníze z objednávek provedených přes onemenu.cz, ponížené o provizi z objednávek dle podmínek, vám budeme zasílat 1x týdně na váš bankovní účet. Nezapomeňte si jej vyplnit ve webové administraci (Sekce Fakturace/Nastavení firmy). (11)\nInspirace pro vaše OneMenu:


Průmyslová historie textilní výroby je součástí brněnského DNA. Dočká se vlastního muzea? | Vltava\nJitka Kostelníková mluví o Brnu, které už neexistuje, s kurátorkou Technického muzea v Brně Petrou Mertovou, průvodcem Martinem Koplíkem a ředitelkou TIC Brno Janou Tichou Janulíkovou\nDélka audia 46:31\nFoto Technické muzeum v Brně\nV brněnském Turistickém a informačním centru (TIC Brno) dlouhodobě sledují komplexnější témata, která pomáhají návštěvníkům objevovat nevšední rozměr města. Cílem projektu Brno Industrial, který se rozběhl v roce 2020 je předat informace, příběhy a v novém kontextu lidem zprostředkovat zážitky z vybraných lokalit i objektů. Součástí programu jsou komentované prohlídky s průvodci pěšky nebo šalinou a přednášky vznikající ve spolupráci s Technickým muzeem v Brně. Jakmile to situace dovolí, projekt se rozběhne v plné šíři.\nBrno si zaslouží stálou připomínku textilní historie\nK tématu moravského Manchesteru se vrací brněnské kulturní instituce opakovaně. Zároveň ale v moravské metropoli nenajdeme žádnou stálou tematickou expozici, památník nebo muzeum, které by toto téma pokrývalo. Město je přitom doslova protkané odkazy na fenomenální epochu textilek, která jej proměnila z města středověkého rázu do podoby moderního velkoměsta. Podporu zviditelňování tohoto tématu a jeho zpřítomnění v prostoru města vnímá ředitelka TIC Brno, Jana Janulíková, jako nejvyšší metu v rozvíjení historického odkazu a rozhodně se jí nevzdává: „Existují pamětníci, publikace, ale chtělo by to vše dostat na jedno místo.“ Inspiraci je možné hledat například v Industriálním muzeu v Gentu, které sídlí v budově bývalé textilky nebo třeba v manchesterském Muzeu vědy a průmyslu.\nPoselství 19. i 20. století\nKdyž mluvíme o etapě takzvaného moravského Manchesteru, odrážíme se od data 1764, kdy byla založena první textilní manufaktura – známá jako Köffillerova manufaktura. „Boom textilního průmyslu stojí na zkušenostech, které načerpali první zaměstnanci Köffillerovy manufaktury. Právě oni se později stali majiteli továren,“ vysvětlila v ArtCafé kurátorka Technického muzea v Brně, Petra Mertová.\nBrno Industrial - Paláce průmyslové aristokracie - Bochnerův palác\nVideo of Brno Industrial - Paláce průmyslové aristokracie - Bochnerův palác\nKdyž Mertová mluví o období textilního rozmachu Brna, vyzdvihuje význam příběhů rodin podnikatelů i dělníků, kteří začali do Brna ve velkých počtech přesidlovat s vidinou nového živobytí. Mertová upozornila také na to, že přítomnost továren a poptávka po kvalifikovaných pracovnících ovlivnily i vzdělanostní potenciál města: „Díky tomu, že byl ve městě dominantní textilní průmysl, prošla většina obyvatel vzděláním ve středních textilních školách.“ Industrializace město hluboce ovlivnila, změnila sociální klima společnosti i demografickou strukturu lokality.\nTouha uspět i progresivnost a blízkost Vídně byly výrazným katalyzátorem textilního boomu v Brně.\nNejvyšší koncentrace budov spojených s textilní historií představují dvě oblasti: ulice Cejl, Hybešova a Václavská na Starém Brně. „Málokterá z budov je ale památkově chráněna, a tak většinou chátrají. Konverze velkých komplexů jsou nákladné. Výjimkou jsou paláce, které si stavitelé v éře před módou vil stavěli jako součást továrních komplexů,“ přiblížil současný stav budov brněnský průvodce Martin Koplík, který provází právě po stopách průmyslové aristokracie a méně známých palácích – jako je například Bochnerův nebo Schoellerův palác.\nTovárna Br. Schoellerů na Cejlu|foto:Technické muzeum v Brně\nPřetrhla se po válce nit?\nTugendhatovi, Löw-Beerovi, Furhmannovi nebo Offermannovi – to jsou významná jména rodin textilních podnikatelů, kteří své kariéry i životy spojili právě s Brnem. Většina z nich byla židovsko-německého původu. Po druhé světové válce zůstali v zahraničí, nebo tragicky zahynuli v koncentračních táborech. Know-how ale zůstalo díky jejich zaměstnancům v Brně. Správu továren tehdy převzali vedoucí zaměstnanci a některým podnikům se velmi dobře dařilo.\nTovárna fa Auspitz und Enkel na Václavské ulici v Brně|foto:Technické muzeum v Brně\nPo znárodnění v únoru 1948 se továrny staly součástí Moravskoslezských vlnařských závodů, což byl národní podnik sdružující desítky závodů. Tak v Brně vznikla Mosilana a Vlněna, které přečkaly až do 90. let. „Tyto podniky byly úspěšné a specializovaly se na export,“ popsala poválečný vývoj textilek Petra Mertová. V současné době funguje v Brně jen jeden textilní provoz, Nová Mosilana, vlastněná globálním koncernem, a soustředí se výhradně na export.\nVlněna – tkalcovna, 80. léta|foto:Technické muzeum v Brně\nPrůvodce Martin Koplík doporučuje procházku areálem bývalé Mosilany v Křenové ulici. Tímto poměrně zachovalým komplexem textilního průmyslu protéká svitavský náhon, který tvoří zelenou osu lokality, najdete tam několikapatrové přádelny nebo zbytky barvíren.\nJaké příběhy nese epocha brněnského textilního rozmachu? A slušel by Brnu pomník nebo samostatné muzeum, které by zrcadlilo industriální historii města? Má dnešní Brno potenciál rozvíjet textilní odkaz? O tom všem se dozvíte z ArtCafé věnovanému moravskému Manchesteru a projektu Brno Industrial.\nV rámci projektu Brno Industrial probíhá sbírka příběhů lidí, kteří textilní průmysl v Brně ještě pamatují. Pokud i vy takový máte, obraťte se na Petru Mertovou z Technického muzea v Brně.\nHudbu vybrala: Veronika Lucassen\nKompletní záznam ArtCafé z 18. 11. 2020\nKaždé město má svůj Bronx. Povídková kniha Krvavý Bronx oživuje brněnské předměstí konce 19. století\nHistorik a autor jedné z povídek, Michal Konečný, a vedoucí komunitního centra Všechny barvy Bronxu, David Oplatek, představují literární i žitou krajinu Bronxu.\nBrno – moravský Manchester. Historie brněnského textilního...\nVýstava v Uměleckoprůmyslovém muzeu v Brně mapuje 250 let tamního textilního průmyslu. V souvislosti s rozvojem a úpadkem brněnských továren ukazuje i proměny města...\nInez Tuschnerová – umělkyně, která oblékala architekturu i divadlo\nInez Tuschnerová byla česká textilní výtvarnice, kostýmní návrhářka a akademická malířka. Jak vznikaly její jedinečné autorské textilie, které v sedmdesátých a...\nKolářova Revue K slaví 40 let. Jak se proměňuje literatura na trase Praha – Paříž?\nSkrýše v Domě U Kamenného zvonu. Najděte hezké v sobě na výstavě inspirované klubovou kulturou\nKonejšivá hudba Keatona Hensona přichází ze závětří tiché a plaché galaxie\nCirkus ve škole! Akrobacie i žonglování jako cesta k vlastnímu tělu, sebedůvěře a kolektivu