BEST anti-HCV (komplekt 2) 12x8\nKass Nr 0772\nReaktiivikomplekt immunogeensüümide tuvastamiseks klassides G ja M klassi C-hepatiidi viiruse jaoks inimese seerumis / plasmas ja veresaadetes (immunoglobuliinid, interferoonid, krürektsitraat, albumiin). Komplekt 2 on mõeldud 96 määramiseks, kaasa arvatud juhtelemendid - 4 ava iga analüüsi jaoks, samuti ühe riba osaline kasutamine ühe uuringu kohta. Kavandatud käsitsi seadistamiseks automaatsete ELISA avatud tüüpi analüsaatorite abil. See meetod põhineb tahke faasi ELISA-ga, kasutades rekombinantseid antigeene. Positiivsuse koefitsiendi võimalik arvutamine. Kontrollide ja näidiste ruumiline võrdsus. Fermentatiivse reaktsiooni tingimuste standardiseerimine kromogeeniga termostaadis 37 ° C juures. Reaktsiooniaeg: 1 tund ja 20 minutit\nSoovitatav kontrollida vereandureid, elundeid, inimese kudesid, viirusliku hepatiidi diferentseeritud diagnoosimist\n1. Kokkupandav tablett - 1 tk.\n2. Positiivsed ja negatiivsed kontrollid - 2x1 fl.\n3. Konjugaat ja lahjendus lahjendamiseks (RK) - 2x1 fl.\n4. Lahus seerumi lahjendamiseks (RS) - 1 fl.\n5. Fosfaat-soolalahuse puhverlahus, kontsentraat (FSB) - 2 fl.\n6. Substraadi puhverlahus (SBR) - 1 fl.\n7. Tetrametüülbensidiini kontsentraat (TMB) - 1 fl.\n8. Peata reaktiiv - 1 fl.\n10. Kleepimise film.\nUuritud proov: seerumi või vereplasma maht mitte üle 40 μl.\nELISA testide protokollide arv: vähemalt 4.\nSäilitamistingimused: temperatuuril +2. 8 ° C kogu etiketil märgitud kõlblikkusaja vältel.\nSeadme säilivusaeg on 12 kuud alates tootmise kuupäevast.\nParim anti vgs\nEnsüüm immuunanalüüsikomplekt klassi M immunoglobuliinide avastamiseks C-hepatiidi viirusele.\nParim anti-HCV-auto (komplekt 1)\nParim anti-HCV-auto (komplekt 2 / Charoite)\nEnsüümi immuunanalüüsikomplekt hepatiit C viiruse klasside G ja M immunoglobuliinide tuvastamiseks automatiseeritud ELISA analüsaatorite jaoks.\nParim anti-HCV (Kit 1)\nParim anti-HCV (Kit 2)\nParim anti-HCV (Kit 3)\nParim anti-HCV (Kit 4)\nEnsüümi immuunanalüüsikomplekt hepatiit C viiruse klasside G ja M immunoglobuliinide avastamiseks.\nEnsüümimonatseutikomplekt klasside G ja M immunoglobuliinide tuvastamiseks C-hepatiidi viiruse (südamiku, NS3, NS4, NS5) individuaalsete valkude suhtes.\nParim anti-HCV-kinnitav test\nEnsüümi immuunanalüüsikomplekt hepatiit C viirusega klasside G ja M immunoglobuliinide esinemise jaoks.\nVGS AG / AT-IFA-BEST (komplekt 1)\nVGS AG / AT-IFA-BEST (komplekt 2)\nEnsüümi immuunanalüüsikomplekt C-hepatiidi viiruse antikehade ja HCV tuumantigeeni tuvastamiseks.\nReaktiivikomplekt C-hepatiidi viiruse tuum-antigeeni immunoensüümide tuvastamiseks.\nReaktiivikomplekt, et kinnitada immunoglobuliini abil C-hepatiidi viiruse antikehade esinemist.\nSeatud laborikvaliteedi kontrollimiseks ELISA "Seerum, mis sisaldab C-hepatiidi viiruse antikehi".\nAnti-HCV seerumi juhtpaneel\nVere-seerumide proovide komplekt, mis sisaldab ja ei sisalda hepatiit C antikehi. HCV-vastaste uuringute sisekvaliteedi kontrollimiseks (õigsuse hindamine).\nVere-seerumite proovide komplekt, mis sisaldab ja ei sisalda hepatiit C antikehi.\nEnsüümimonoomiaanalüüsikomplekt klasside G ja M immunoglobuliinide tuvastamiseks C-hepatiidi viiruse (südamiku, NS3, NS4, NS5) individuaalsete valkude suhtes (parim anti-HCV spekter)\nSäilitustingimused Reaktiivikomplekt immunogeensüümide tuvastamiseks klasside G ja M immunoglobuliinide puhul C-hepatiidi viiruse (südamiku, NS3, NS4, NS5) individuaalsete valkude tuvastamiseks (parim anti-HCV spekter)\nTellige meditsiinitooteid apteekides:\nMihhailov Mihhailov, Epidemioloogia ja Mikrobioloogia Instituut. N.F. Gamalei RAMS, Moskva\nC-hepatiidi diagnoosimisel tuleb kaaluda järgmisi kõige olulisemaid tegureid:\n"maksa" ensüümide aktiivsuse näitajad;\nC-hepatiidi viiruse (HCV) ja teiste hepatotroopsete viirustega nakatumise markerite olemasolu või puudumine;\nepidemioloogilise ajaloo andmed;\npatsiendi kliinilise läbivaatuse tulemused. Nende tegurite põhjalik arvestamine võimaldab selle haiguse diagnoosimist kõrge usaldusväärsusega. Laboratöötaja peab pakkuma objektiivset teavet viiruse antigeenide ja antikehade, samuti HCV RNA tuvastatud spektri kohta, võimaldades oma probleemide lahendamisel kliinilistile, vereülekande teenistujatele ja epidemioloogidele. Enamasti on see:\nHCV-ga isikute identifitseerimine transfusiooni järgse hepatiidi C taseme vähendamiseks;\nägeda ja kroonilise C-hepatiidi diagnoosimine ja eristamine;\nravi määramine, hindamine ja prognoosimine;\nHCV leviku ulatuse uurimine elanikkonna ja erinevate elanikerühmade lõikes.\nSel juhul on laboratooriumitöötajate põhitöödeks järgmised:\nHCV infektsiooni markerite identifitseerimiseks kõige informatiivsemate meetodite väljatöötamine ja valimine;\nsaadud tulemuste objektiivse hindamise kriteeriumide kindlaksmääramine;\noptimaalsete laboriuuringute algoritmide väljatöötamine;\nHCV infektsioonimarkerite avastamise kvaliteedi parandamise süsteemi rakendamine.\nHepatiidi C laboratoorset diagnoosi aluseks on HCV teadmised, selle replikatsioon, teave infektsioonimarkerite esilekerkimise ja kadumise dünaamika kohta, samuti antigeenide, antikehade ja nukleiinhapete avastamiseks kasutatavad kaasaegsed immunokeemilised ja molekulaarbioloogilised meetodid.\nC-hepatiidi viirus. HCV leiti esmakordselt 1988. aastal, kui M. Houghtoni ja Choo Q.L juhitud teadlaste rühm rakendas uusi molekulaarbioloogilisi uurimismeetodeid, viiruse genoomi [I] klooniti ja sekveneeriti. C-hepatiidi viiruse osakesel on sfääriline kuju keskmise läbimõõduga umbes 50 nm [2,3]. Pärast viiruse avastamist on tehtud viiruse hepatiit C viiruse struktuuri visuaalselt tuvastamiseks ja uurimiseks tehtud katsed, kuid nende uuringute kohta ei ole veel hästi dokumenteeritud tulemusi, mis võivad olla tingitud viiruseosakeste kogunemise keerukusest vajalikes kogustes.\nVGS on ainus Flaviviridae perekonna hepatsiviiruse perekonna liige, mis sisaldab viiruseid nagu buli diarröa viirus ja sigade katk (Pestivirus perekond) ja kollapalaviku viirus, Denge viirus ja GB viirused: GBV-A, GBV-B ja GBV-C / HGV (perekond Flavivi-rus). C-hepatiidi viiruse struktuuri võib kujutada järgmiselt (skeem nr 1). Nukleokapsiid sisaldab C-hepatiidi viiruse RNA-d. Altpoolt on nukleokapsiid kaetud lipiidmembraaniga, ümbritsetud sellega ümbritsetud proteiinidega, mida kodeerivad HCV RNA. Viiruse genoomi esindab üheahelaline lineaarne positiivse polaarsusega RNA molekul, mille pikkus on umbes 9600 nukleotiidi. HCV genoomi ülesehitus sarnaneb teiste flaviviirustega. See eristab kahte tsooni, mis kodeerivad struktuurseid ja mittestruktuurseid (funktsionaalseid) valke. Struktuurvalkude kodeerivad geenid paiknevad viiruse genoomi 5 'piirkonnas ja 3' piirkonnast mittekorduvad struktuurid. HCV geenil on üks avatud lugemisraam (ORS) - üks polüpeptiid (ligikaudu 3000 aminohapet), mis lõigatakse struktuurseteks ja mittestruktuurseteks valkudeks viiruslike ja rakuliste proteaaside poolt.\nJoon. 1. HCV struktuurielemendid\nStruktuursed valgud hõlmavad valke, mida kodeerivad HCV RNA Core, El ja E2 tsoonid. Detekteeriti kolme HCV C-valgu vormi: nakatunud hepatotsüütide nukleose leitud täispikad (21 pinnad) molekulkaaluga 21 kD, kärbitud (p19) ja vorm (p16). Sellel pinnal kannab C-proteiin mitmesuguseid väga konserveerunud B-raku epitoope, mille olemasolu on väga oluline HCV antikehade tuvastamiseks hepatiit C laboratoorsel diagnoosimisel.\nHCV RNA tsoonid E1 ja E2 kodeerivad valke molekulmassiga 31 ja 70 kD. Nendel valkudel on mitu N-glükosüülimissaiti; E1 valgus on määratletud kuni 6 sellist saiti ja E2 - 11. E2 osas on andmed väikese valgu - p7 kohta, mida ei leidu viiruse struktuuris.\nHCV RNA 3'-otsast lähemal asuvate piirkondade määramine - kui viiruste mitteseotud struktuurvalgudest informatsiooni sisaldavad piirkonnad näitavad, et need valgud ei ole viiruseosakese struktuursed komponendid. HCV RNA mittestruktuurilises tsoonis on lõigud, mis on tähistatud kui NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A ja NS5B. Enamik valke, mida kodeerivad HCV RNA mittestruktuurilised tsoonid, on viiruse replikatsiooniks vajalikud.\nSellel viirusel on RNA kõrge heterogeensuse näitaja tuvastatud HCV isolaatide RNA nukleotiidjärjestuste võrdlev analüüs erinevates maailma piirkondades ja isegi sama patsiendi haiguse käigus. HCV RNA märkimisväärse geneetilise varieeruvuse positsioon moodustas teooriate aluse, mis selgitasid: pikaajalist (mõnikord eluaegset) viiruse vedu, kroonilise haiguse sagedast arengut, ravi raskusi ja tõhusate vaktsiinide loomist. Kõige olulisemad erinevused HCV RNA järjestustes on kontsentreeritud E2 piirkonna N-terminaalsesse ossa, mis on määratletud kui "hüpervarieeruv piirkond" (HVR) .\nPraeguseks on tuvastatud 6 peamist genotüüpi ja üle 100 HCV alatüüpi. Genotüübid 1a, 1b, 2a, 2b, 2c ja Za moodustavad üle 90% Põhja-ja Lõuna-Ameerikas, Euroopas, Venemaal, Hiinas, Jaapanis ja Austraalias / Uus-Meremaal saadud HCV isolaatide . Vastavad genotüübid 4, 5a ja 6 on registreeritud Kesk- ja Lõuna-Aafrikas ning Kagu-Aasias. Venemaal ja SRÜ riikides registreeritakse genotüübi 16 domineerivus (mitte vähem kui 68,9%) [6,7]. Arvatakse, et genotüübiga 1 nakatunud patsiendid (eriti 1b) reageerivad ravile halvemini kui patsiendid, kes on nakatunud viiruse teistest genotüüpidest.\nPatsiendil tsirkuleerib HCV viiruseosakeste populatsioonina, milles genoomid erinevad üksteisest 1-2% (kvaasikohasuse tõttu) nakkustesse nakatamise ajal nakkust kogenud ja / või patsiendi kehasse sisenenud mutatsioonide tulemusena. Need mutantsed vormid võivad aidata kaasa aktiivsemale replikatsioonile või aidata viirusel vältida organismi immuunvastust ja potentsiaalselt mõjutada akuutse infektsiooni tulemusi, erinevusi haiguse käigus ja interferooni ravivastust .\nANTI-HCV MÄÄRATLUS. Pärast avastamist HCV viirusega ning määrama selle rolli arengus Vereülekandega hepatiit - "ei A ega B" Uurijad nakatati töötada välja meetodeid, mis suudab tuvastada neid, kellel HCV ja sobivad diagnoosi ägeda ja kroonilise C-hepatiidiga On leitud, et HCV antigeene ringle väga madalad kontsentratsioonid ning on selge, et 20. sajandi lõpu 80ndate metodoloogiline tase, mida kasutati viiruslike antigeenide avastamiseks, oli selgelt ebapiisav.\nAastal 1989 teadlaste rühm firma "Chiron Corporation" juhtimise all Q-L.Choo läbi kloonimine HCV RNA ja oli immunoreaktiivne oligopeptiidideks mis reageerivad antikehad veres ringlevate patsientide krooniline hepatiit "ei A ega B". Need oligopeptiidid on saanud diagnostiliste ravimite aluse HCV antikehade tuvastamiseks. See määrati diagnostiliste toodete arendamise ja kommertstootmise kiireid edusamme. Peamine HCV-vastase antikeha tuvastamiseks kasutatav meetod on muutunud ensüümidega seotud immunosorbentanalüüsiks praktilise tervishoiu vajadustele vastava meetodina, st. Sellel on suur tundlikkus, spetsiifilisus ja hõlpsam rakendamine.\nArvestades, et HCV püsib veres ägeda ja kroonilise C-hepatiidiga koostoimes anti-HCV diagnostikatoodete tänu arendajad keskendunud loomist testsüsteemide antikehade tuvastamiseks, annab maksimaalsel võimalikul identifitseerimist viirusekandjad ning võimalikult varakult Ägeda nakkuse diagnoosi. HCV RNA struktuurse ja mittestruktuurse tsooni poolt kodeeritud antigeenide ja antigeensete determinantide mitmekesisus on kindlaks määranud suuna diagnostiliste toodete kujundamisel, valides ja seadistades nende loomiseks kasutatud oligopeptiidid. HCV avastamisest möödunud aja jooksul on loodud kolm põlvkonda kuuluvaid diagnostilisi süsteeme (tabel 1).\nDiagnostilised preparaadid anti-HCV detekteerimiseks \nHCV RNA tsoonid, milles\nneed on kodeeritud\n% kandja tuvastamine\nC200 NS3 ja NS4\nTäiendavate peptiidide (peamiselt C22-3 (Core) lisamine teise ja kolmanda põlvkonna diagnostilistele preparaatidele aitas lahendada peamist probleemi, st suurendada tundlikkust, spetsiifilisust ja, mis kõige tähtsam, anti-HCV tuvastatavust. Tänu 3. põlvkonna diagnostikale saab tuvastada kuni 97% HCV kandjatest. Samal ajal põhjustas teatud arutelu ka HCV RNA NS5 piirkonna kodeeritud diagnostilise peptiidi sisestamise otsus. Mõnede teadlaste sõnul ei ole selle peptiidi esinemine diagnostilise ravimi kvaliteedi parandamisel kriitiline. [10,11]. Kuid NSV-vastaseid antikehi saab nakkuse avastamiseks varem tuvastada, mis parandab ägeda hepatiit C laboratoorset diagnoosimist. .\nPraegu kasutatakse kogu maailmas, sealhulgas Venemaal, kolmanda põlvkonna diagnostilisi tooteid. Diagnostilistel preparaatidel kasutatavad peptiidid saadi rekombinantse tehnoloogia abil (näiteks firmad diagnostilised testid: diagnostilised preparaadid, Nižni Novgorod, Vector, Novosibirsk, Roche, Abbott jt) või sünteetilised ( 000 MTS "Avicenna", Peterburi, "Organon" jne). Diagnosticumid, milles mõlemat tüüpi peptiide kasutati samaaegselt, määrati 4. põlvkonna ravimiteks. Nende omaduste kohaselt ei ole neil ravimitel olulisi erinevusi. Venemaa tervishoiuministeeriumi korrapäraselt läbiviidud võrdluskatsed näitasid riigisiseste ja välismaiste tootjate diagnostiliste toodete võrreldavat tundlikkust.\nOn kindlaks tehtud, et kolmanda põlvkonna diagnostika kasutamine anti-HCV tuvastamiseks immunokompetentse populatsiooni (näiteks vere doonorite) hulgas on hinnanguliselt 98,8-100%. Samal ajal on immunokompetentsete indiviidide, näiteks pärast neeru-, luuüdi või HIV-nakkusega patsientidel transplantatsiooni saanud patsientide seas märkimisväärselt madalam - 50-95% . S.George et al.  näitas, et 8,4% -l HIV-nakkusega patsientidest registreeritakse HCV-vastase antikeha tuvastamise vale-negatiivsed tulemused. Peale selle võib sellistes patsientides seireversiooniefekti jälgimise ajal registreerida, st positiivse tulemuse registreerimine pärast seronegatiivset anti-HCV perioodi .\nÜks olulisemaid probleeme HCV anti-HCV esinemise uurimiseks on valepositiivsed tulemused. Nende välimus võib olla tingitud reaktsioonikomponentide mittespetsiifilisest vastastikmõjust, võimalikest ristreaktsioonidest teiste viiruslike antigeenidega ja paljude teiste teguritega. Valepositiivsete tulemuste tase anti-HCV-de tuvastamisel erinevate diagnostiliste ravimitega võib ulatuda 10-20% [15, 16]. Selliste tulemuste suurenenud tase oli täheldatud onkoloogiliste ja autoimmuunhaigustega patsientidel, immuunpuudulikkusega inimestel ja süüfilisusega patsientidel [16,17]. Valepositiivsete tulemuste olemasolu seisab laboritöötaja ees ülesandega eristada neid anti-HCV tõelistest avastustest. Selle probleemi lahendamiseks on seerumi HCV RNA tuvastamine vereproovis. Kuid HCV RNA tuvastamise negatiivne tulemus ei viita HCV-vastase valepositiivse avastamise olemasolule. Tuleb meeles pidada, et HCV-vastane antikeha võib tsirkuleerida patsiendi veres, kes on saanud ägeda hepatiit C (10-15%) või kes on ravi tulemusena kõrvaldanud HCV RNA-d.\nKINNITUS (TÄIENDAVAD) TESTID. Valitud positiivsete proovide ja proovide, mis tegelikult sisaldavad HCV antikehi, eristamiseks on välja töötatud täiendavad (täiendavad) testid. Nendes testides kasutatakse sageli immunoblot-põhimõtet [näiteks RIBA-test ("Ortho-Clinical Diagnostics"); "LiaTek HCV" (Organon Teknika)], kui mitmesugused HCV RNA tsoonid kodeerivad antigeenid adsorbeeruvad nitrotselluloosmembraanile nitrotselluloosmembraanis. Anti-HCV interakteerub adsorbeeritud antigeenidega, kasutades ensüümiga märgistatud inimese IgG antikehi ja nende järgnevat avastamist substraadi kompleksiga. Lisaks immuunülekandel samuti lisakatsed kasutada diagnostiliste ainete avastamiseks anti-HCV vastu antigeene poolt kodeeritud erinevate tsoonide HCV RNA [ "Spectrum 4" ( "ImBio" Nižni Novgorod; RecombiBest anti-HCV-SPEKTRITURGUDE "- ZAO" Vector Best ", Novosibirks; ELISA-Anti-NSU-Spectr, NPO" Diagnostikaseadmed ", Nižni Novgorod].\nNende testide väljatöötamine ja rakendamine käib käsikäes skriinimistestide kasutuselevõtuga HCV-de tuvastamiseks, korrates peptiidide laieneva spektri põhimõtet, mida kasutatakse igas järgnevas diagnostiliste toodete genereerimises. Seega erineb diagnostika RIBA-III varasema põlvkonna poolt, lisades NS5 tsooni poolt kodeeritud peptiidi. Principles kinnitada positiivset tulemust avastamine anti-HCV hõlmavad peamiselt: võimalust (teatud juhtudel) täpsemad tulemused ensümaatilise reaktsiooniga üksikpeptiide samuti kasutamiseks spread spectrum DIAGNOSTICUM peptiide, mida ei kasutata sõelumisanalüüsides. Ainult uute peptiidide kasutuselevõtt võib suurendada kinnitavate testide diagnostilist väärtust.\nSaadud tulemuste tõlgendamine näiteks RIBA-III testis sisaldab kolme võimalust: positiivne, negatiivne ja ebakindel tulemus. Viimane neist väljastatakse juhul, kui puuduvad selged märgised (vastavalt diagnostikakomplektile lisatud juhistele), mis võimaldab teil kindlasti hinnata HCV-vastase antikeha esinemist või puudumist uuritavas proovis. Kinnitustestide läbiviimisel registreeritud vastuste spektri suhe varieerub sõltuvalt patsiendi rühmade omadustest, kellel esmakordselt tuvastatakse HCV-vastane antikeha . J.M. Pawlotsky et al. , poolte tulemustega, mida käsitletakse kui "määratlemata", on võimalik tuvastada HCV RNA. Meie arvates legitiimsuse vastus - "määratlemata tulemus avastamine anti-HCV", mille on välja andnud laboritöötajaid arst, ilmne mitte ainult kinnitav katse ja rutiinset kontrolli olemasolu anti-HCV. Tulemuste sellise tõlgendamise vajadus peegeldab hepatiit C laboratoorset diagnoosi.\nIgM anti-HCV määramine. Praegu on ettevõtted loodud IgM anti-HCV-de tuvastamiseks mõeldud diagnostiliste komplektide jaoks: "Vector Best"; "Diagnostika süsteemid"; Imbio, Abbott jt. Diagnostikomplektide projekteerimisfaasis loodi ELISA komplektid, mis põhinevad peptiididel, mida kodeerivad HCV RNA erinevad piirkonnad . Valik tehti HCV RNA Core piirkonna poolt kodeeritud peptiidide ja sellele IgM antikehade tuvastamiseks. Nagu HCV-vastase antikeha (IgG) tuvastamiseks kasutatavate testide kasutamisel, võidakse IgM-vastases HCV-vastases testides ka valepositiivseid tulemusi. Stevensona D.L. et al.  oli kuni 70% -l kroonilise C-hepatiidiga patsientidest koos HCV-vastase IgM-i esinemisega samaaegselt reumatoid-faktori suurenenud tase, mis aitab kaasa valepositiivsete tulemuste ilmnemisele. Kuid Pawlotsky J. M. sõnul ei mõjuta reumatoidfaktori olemasolu IgM anti-HCV-de avastamise kvaliteeti .\nHCV ANTIGENSIDE MÄÄRAMINE. Võime tuvastada HCV antigeene tõi teadlaste tähelepanu kohe pärast viiruse avastamist. Nende katsetamise peamist võimalust näitas K. Krawczynski jt , kes immunohistokeemiliselt avastas HCV antigeenid maksas koes, tõestades immunofluorestsentsi sära eripära. Polü- ja monokloonsete antikehade kasutamine erinevate HCV antigeenide korral näitas Ag HCV tuumade esinemist, HCV RNA NS3 ja NS4 kodeeritud viiruse hepatotsüütide tuumades ja tsütoplasmas kodeeritud antigeene 60-90% patsientidel, kellel esines krooniline HS) . Kuid edasised uuringud näitasid, et HCV antigeene saab tuvastada vähem kui 5% maksasrakkudest.\n1999. aastal avastati immunobiooloogiliste preparaatide turule esimesed diagnostiliste testimissüsteemid ("Ortho antikeha Core antigeenile (hiire monoklonaalne) EL1SA testisüsteem" ja "Imucheck F-HCV Ag Core Kokusai") HCV antigeeni tuvastamiseks. Avastamise sihtmärk oli HCV Core antigeen, mis määratakse kindlaks monokloonsete antikehade põhjal konstrueeritud tahke faasi ELISA variandi abil. Esimesed uuringud nende testide kasutamisel määravad nende suure tundlikkuse, spetsiifilisuse ja paljulubava kasutamise, peamiselt vereülekande teenistuses [25,26]. Paigaldatud:\nvõime määrata Core Ag HCV seerumis või plasmas;\nCore Ag HCV avastamise spetsiifilisus;\nveres tsirkuleeriva antigeeni olemasolu inimestel, kes seronegatiivselt anti-HCV suhtes;\nCore Ag HCV seerumi sagedane (90,3%) avastamine HCV- ja HCV-vastase RNA-ga ;\notsene seos HCV RNA kontsentratsiooni ja Core Ag HCV avastamise vahel ;\n"akna" faasi kokkutõmbumine - infektsiooni hetkest kuni HCV-vastase anti-HCV tuvastamise esimese positiivse tulemuse saavutamiseni. Selgus, et Core-HC HC-d saab avastada 83% -l juhtudest (n = 24) järgmisel päeval pärast HCV RNA esmakordset tuvastamist  ja pikka aega (keskmiselt 26 päeva) enne anti-HCV-i ilmnemist .\nHCV RNA tuvastamise meetodid. Hepatiit C laboratoorset diagnoosi kaasaegset staadiumi võib iseloomustada kui HCV RNA tuvastamiseks kasutatavate molekulaarbioloogiliste meetodite laialdase kasutuselevõtu etappi. Enamik nukleiinhappe tuvastamise meetodeid on testitud HCV RNA tuvastamiseks. Nii vene  kui ka välismaised väljaanded  avaldatud märkimisväärsel hulgal kirjandusülevaateid on pühendatud diagnostiliste toodete projekteerimisele ja nende kasutamisele viiruse DNA või RNA tuvastamiseks. Kõik need meetodid võib jagada kahte rühma, mis põhinevad hübridisatsiooni põhimõtete rakendamisel ilma nukleiinhappe valitud sektsiooni võimendamiseta või nende amplifitseerimiseta, mis võib märkimisväärselt suurendada meetodi lahutusvõimet.\nHübridisatsiooni meetod põhineb märgistatud hübridisatsiooni sondide kombinatsioonil (geenitehnoloogia või sünteetilised molekulaarsed struktuurid, mis sisaldavad nukleotiidjärjestusi, mis on täiendavad RNA valitud lõigud). Tulemuste analüüs viiakse läbi märgistuse intensiivsuse järgi moodustunud kompleksi koostises.\nC-hepatiidi puhul on see meetod HCV RNA tuvastamiseks kasutatud peamiselt selle identifitseerimiseks otseselt hepatotsüütides ja testides, mida nimetatakse in situ hübideerumiseks . HCV RNA otsene tuvastamine koes võimaldas seda tuvastada monoteraapia vererakkudes, süljenäärme rakkudes ja teistes C-hepatiidiga patsiendi kehade kudedes [31, 32].\nHCV RNA tuvastamiseks kasutatav hübridiseerimismeetod võimaldab tõendada HCV RNA negatiivsete (replikatsioonide) ahelate olemasolu, mis näitab viiruse aktiivset replikatsiooni .\nPraegu on polümeraasi ahelreaktsiooni meetod kõige levinum metoodiline meetod, mis põhineb peaaegu kõigil molekulaarbioloogilistel meetoditel HCV RNA tuvastamiseks. Lisaks on HCV RNA määramine võimalik nii kvalitatiivses kui ka kvantitatiivses vormis, mis on eriti oluline rakendatud ravi efektiivsuse määramiseks, jälgimiseks ja hindamiseks.\nMeetodi peamised variandid on järgmised:\nTMA (transkriptsiooni vahendatud amplifikatsioonireaktsioon, transkriptsiooni vahendatud võimendus).\nPolümeraasi ahelreaktsioon on laialt levinud HCV RNA tuvastamise viis nii Venemaal kui ka välismaal. See põhineb mitme tsükli protsessil, mis sarnaneb nukleiinhappe loomuliku replikatsiooniga, kusjuures iga tsükkel koosneb järjestikustest etappidest.\nUuritud materjalist (seerumi või vereplasma, maksa biopsia) eraldatakse HCV RNA. Arvestades, et HCV nukleiinhape on esindatud RNA-ga ja cDNA molekul on vajalik ensüümi pöördtranskriptaasi amplifitseerimiseks, tekib üheahelalise HCV cDNA molekulide moodustumine. Järgmises etapis kinnitatakse HCV cDNA ahela spetsiifiline sektsioon nn "HCV". Praimerid on lühikesed oligonukleotiidid, mis on komplementaarsed tuntud nukleotiidjärjestustega. Erinevate HCV isolaatide 5'UTR piirkonna esmaste struktuuride võrdlemisel ilmnes nende ebaoluline varieeruvus (genotüüpide ja nukleotiidide homoloogia vahel - 92-98% ja genotüüpides 98-99%). Selle tulemusena oli eelistatav valida praimerid sellest HCV RNA tsoonist ja kasutada neid meie riigis ja välismaal toodetud diagnostilistes katsesüsteemides.\nLisaks sellele toimub ensüümi DNA-sõltuva DNA polümeraasi abil uute DNA segmentide süntees. Praegu kasutatakse selle ensüümi allikana kõige sagedamini baktereid Thermophilus termus (Tth polümeraas) või Thermophilus aquaticus (Taq polümeraas). Kasutades termilist stabiilsust mangaani ja magneesiumioonide juuresolekul, saab seda ensüümi samaaegselt kasutada, et sünteesida komplementaarset üheahelalist HCV cDNA molekule ja amplifitseerida valitud cDNA piirkondi. Reaktsiooni ühe tsükli viimasel etapil, kasutades DNA polümeraasi, toimub täiendavate HCV cDNA uute ahelate süntees. Reaktsioonitsüklite korduv kordamine viib HCV cDNA fragmentide akumuleerumiseni, mida saab registreerida polüakrüülamiidgeel-elektroforeesi abil, millele järgneb visuaalne detekteerimine või hübridisatsiooni kasutamine oligonukleotiidsondidega, mis suurendab kasutatud diagnostiliste toodete tundlikkust ja spetsiifilisust. Ensüümidega märgistatud praimerite kasutamine võimaldab ensüümi immuunanalüüsil PCR tulemuste registreerimist.\nHCV RNA tuvastamiseks diagnoosimise süsteemide väljatöötajate jaoks on pidev eesmärk suurendada tundlikkust ja spetsiifilisust. Seda eesmärki teenindab PCR variant, mis on tähistatud "pesastatud PCR" (pesastatud PCR) . Selle meetodi eristav tunnus "klassikalisest" on kahe paari praimerite samaaegne kasutamine, millest üks täiendab amplikoni sisemist osa, mis on saadud pärast esimest amplifitseerimisvooru. Samal ajal arvatakse, et selle PCR-i variandi puhul on suurem proovide saastumise oht, mis võib kaasa tuua valepositiivseid tulemusi .\nHCV RNA määramise äge vajadus ja raskused, mis on seotud ülitundlike ja spetsiifiliste diagnostiliste komplektide suuremahulise tootmisega PCR-diagnostikas, on kindlaks määranud teaduslikes laborites tehtud preparaatide laialdase kasutamise. Nende katsesüsteemide, nn kodutehniliste testide ("maja katsetes") võrdluses ilmnes nende suur tundlikkuse ja spetsiifilisuse varieeruvus ning laboratooriumide ja diagnostikavahendite seeria tulemuste reprodutseeritavuse puudumine. Seega, 136 "laboratooriumist" HCV RNA (1996) avastamiseks mõeldud "välise" kvaliteedikontrolli esimese tsükli läbiviimisest suutsid ainult 22 (16%) kindlaks määrata viiruse RNA esinemise või puudumise esitatud kontrollproovides . Samasugust tulemust täheldati ka meie riigis väljaspool välismaise kvaliteedikontrolli föderaalse süsteemi (2001) sarnase töö raames, kui 14 osalevast laborist ei suutnud ülesannet õigesti lahendada ainult 3 (21,4%) .\nHCV RNA tuvastamise vale-negatiivsete ja valepositiivsete tulemuste ilmnemise põhjused on erinevad. Valenegatiivsete tulemuste korral:\n- HCV RNA kaotus või hävimine kliinilise materjali ravivastuse ettevalmistamiseks;\n- PCR-i erinevate komponentide mõju inhibiitorite sisaldus proovis. Neid inhibiitoreid esindavad mitmesugused keemilised või valgud. Näiteks: pöördtranskriptaasi inhibiitorite spermide vedeliku olemasolu ei võimaldanud tuvastada HCV RNA-d ja rääkida C-hepatiidi seksuaalse ülekande realiseerimisvõimalusest ; hepariini olemasolu ; kõrge seerumi krüoglobuliini tase ;\n- termilise ladustamise ja kliinilise materjali transpordi mittetäitmine. Valepositiivsete tulemuste puhul:\n- proovide saastumine (proovide töötlemisel ja / või reaktsiooniseguga töötamisel), sealhulgas saastumine positiivse kontrollprooviga;\n- saastumine eelneva amplifikatsiooniga toodetega (amplikonid), mis võivad saastata uuritavaid proove ja lahuseid aerosoolide või laboriseadmete abil.\nHCV RNA määratluse kohaselt on PCR diagnostika ulatuslik kasutuselevõtt seadnud ülesande üle viia tervishoiuasutustele laboratoorsete uuringute uus tase. Isolustatud tsoonide eraldamine PCR põhitaste staadiumide rakendamiseks (proovide valmistamiseks, amplifikatsiooniks, saadud tulemuste arvessevõtmiseks); reaktsioonilaborite riide iga etapi eraldi komplekt, automaatpipetid; standarddiagnostikakomplektide olemasolu ja ennekõike kõrgelt kvalifitseeritud laboratooriumide töötajate olemasolu vähendab valede tulemuste esinemist.\nEsimene standarditud komplekt HCV RNA ("AmplicorTM HCV", "Roche Diagnostic Systems") määramiseks valmis 1993. aastal. Aastate jooksul on kujunenud HCV RNA komplektid, mille peamine eesmärk oli suurendada nende tundlikkust ja spetsiifilisust. Amplicor TM HCV projekteerimisel kasutati mitut originaali meetodit, et identifitseerida HCV RNA 100 või enam koopiat milliliitri kohta. Samuti võib komplektina kasutada proovide ja lahuste saastumise võimalikke juhtumeid. Ensüümi - amperside ja dehipüuridiintrifosfaadi (dUTP) kasutamine võimaldab hävitada eelnevate aplikonide esimeses tsüklis, millega saastumine võib tekkida. Esimese amplifikatsioonitsükli lõpus (temperatuuril +55 ° C) amplifikatsiooni hävitamine ei võimalda ensüümi hävitada sihtmärgina valitud amplikoneid. Peamiseks uuenduseks oli sisekontrolli juurutamine. Selle innovatsiooni tähendus seisneb selles, et HCV RNA amplifitseeritud piirkonnaga sarnanev järjestus siseneb igasse prooviprooviasse, mis seejärel tuvastatakse, kasutades samalaadses režiimis amplifikatsioonireaktsiooni vastavaid praimereid. Positiivse reaktsiooni puudumine sisekontrolli tuvastamisel näitab, et reaktsiooni valenegatiivne tulemus on HCV RNA olemasolul uuritavas proovis. Järgmisel põlvkonnal diagnoositi ravim, mida nimetatakse "HCV Amplicor 2.0", mille kasutamisel on 50 HCV RNA molekulide tundlikkus.\nHCV RNA tuvastamise süsteemi Roche'i komplektide abil ei saa lugeda nende seadmetelt eraldatuks, mis määrab testide kõrge kvaliteedi. Meetodi väljatöötajad püüdsid täielikult rekonstrueerida kõiki reaktsiooni etappe. Selle idee teostus oli "COBASAmpliPrepTM" süsteem, mis võimaldab teil täielikult HCV RNA eraldamise protsessi, amplifikatsiooni ja avastamise protsessi automatiseerida, vähendades seeläbi valepositiivsete ja valenegatiivsete tulemuste riski, säilitades samal ajal kõrge tundlikkuse ja spetsiifilisuse .\nLigase ahelreaktsioon HHC RNA tuvastamiseks (LCR). Meetod põhineb ensüümi "DNA-sõltuv DNA ligaas" võimetel, et õmmelda (ligeerida) fosfodiorserühma sidemeid DNA-s ATP ja Mg2 + ioonide juuresolekul. Nagu ka "klassikalise" PCR-i puhul HCV RNA tuvastamiseks, on LCR esimene etapp pöördtranskript, et saada HCV cDNA. Peale selle seondub DNA ligasega kaks praimeripaari (täiendavad HCV RNA 5 'kodeerimata tsooni), mis täiendavalt amplifitseeritakse. LCR-i amplifitseerimisproduktide tuvastamine toimub, võttes arvesse antigeeni-antikeha reaktsiooni. Kõik need kaks praimerit on märgistatud erineva hapteeniga. Esimene neist on kinnitatud mikroosakeste adsorbeeritud antikehadega. Pärast pesemisprotseduuri, kus kasutatakse teist fluorestsentsmärgistusega märgistatud antikehade paari, nad selektiivselt interakteeruvad hapteeniga amplifikatsiooniproduktis, millele järgneb substraadi reaktsioon ja loendatakse fluorimeeter.\nSelle meetodi tundlikkus on ligikaudu 200 koopiat HCV RNA-st milliliitris, mis võimaldab seda kasutada erinevate kliiniliste diagnostiliste probleemide lahendamiseks . Praegu valmistab Abbott toodetud diagnostikakomplekte HCV RNA tuvastamiseks LCR-i baasil.\nNukleiinhapete seakeste amplifikatsioon - NASBA meetod HCV RNA tuvastamiseks põhineb kolme ensüümi - lindude müeloblastoom pöördtranskriptaasi, lindude RNAase ja T7 RNA polümeraasi [43.] samaaegsel toimel. Erinevalt RT-PCR-st ei tohiks esimene samm pöörata HCV RNA transkriptsiooni. Kasutades kasutatavaid ensüüme võib 90 minuti jooksul saada HCV cDNA piirkonna rohkem kui 10 (9) koopiat . Reaktsiooni teostamise võimalus madalatel temperatuuridel (+ 41 C) lihtsustab oluliselt tööd ja välistab vajaduse seadmete järele, mis tagavad tsüklilised muutused kõrgel temperatuuril. Reaktsiooni tulemused salvestatakse elektrokeemiluminestsentsi abil. Vaatamata asjaolule, et NASBA on tundlikkusel RT-PCR-ga sarnane, ei kasutata seda meetodit HCV RNA tuvastamiseks. Praegu töötatakse välja meetodi variant, mis ühendab NASBA ja reaalajalise RT PCR-i põhimõtted.\nTranskriptsiooni vahendatud amplifikatsiooni (TMA) meetod erineb PCR-i ja LCR-i peamiselt sellest, et see suurendab otseselt HCV RNA fragmente, mitte HCV cDNA-d. Reaktsiooni algfaasis kinnitatakse praimer (nr 1) HCV RNA-iga ja sihtmolekuli, cDNA koopia sünteesitakse ensüümi (pöördtranskriptaas) abil. Pöördtranskriptaas, millel on samuti RNaas-H aktiivsus, hävitab viirusliku RNA hübriid-RNA-cDNA-s. Järgnevalt lisatakse cDNA molekulile teine praimer, millele järgneb kaheahelalise DNA lõpetamine pöördtranskriptaasi abil. Teise ensüümi β-RNA polümeraasi abil transkribeeritakse RNA cDNA-st, mille tagajärjel tekib ühe reaktsioonitsükli jooksul HCV RNA amplikoni 100 kuni 1000 eksemplari. Nende RNA aplikonidega on lisatud primer nr. 2 cDNA koopiate edasiseks sünteesiks ja RNA molekuli hävitamiseks. Praimeri nr 1 kinnitamine cDNA-le, millele järgneb kaheahelalise DNA lõpuleviimine, käivitab järgmise amplifikatsioonitsükli. Reaktsiooni tulemuste registreerimine toimub lumenomeetril, kuna saadud RNA-amplikoonid interakteeruvad spetsiifiliselt kemiliimiinidega märgistatud DNA-proovidega.\nTMA-meetodi eelisteks HCV RNA tuvastamisel märgitakse:\nreaktsioon viiakse läbi madalama temperatuuriga võrreldes PCR-ga;\nsuurema hulga amplikonite moodustumine ühes reaktsioonitsüklis, mis vähendab lõpptoodangu saamiseks vajalikku aega (30-40 minutit) ja suurendab reaktsiooni tundlikkust (50 koopiat / ml) .\nsaastumise ohu vähendamine, kuna RNA on vähem stabiilne kui DNA.\nVõrdlusuuringud HCV RNA tuvastamiseks, kasutades TMA-d ja teisi meetodeid, on näidanud tulemuste suuremat kokkusattumist .\nHübridisatsiooni ja amplifikatsiooni põhimõtete kombinatsioon põhineb HCV RNA tuvastamismeetodil, mida tähistatakse kui hargnenud sondide hübridiseerimise meetodit või Branded DNA-analüüsi (bDNA) . Erinevalt PCR-ist ei amplifitseerita seda test mitte HCV cDNA molekule, vaid signaali. Reaktsioon viiakse läbi 96 süvendiga plaadil, kuhu 5 'translatsioonita tsooni HCV RNA fragmendid ja HCV RNA südamiku geen adsorbeeruvad sünteetilise hargnenud DNA molekuli järgneva sidumise tõttu ja hübridiseerimine leeliselise fosfotaasiga märgistatud prooviga koos Saadud signaali järsk tõus saavutatakse võimendi ja sellele järgneva ensümaatilise reaktsiooniga. Praegu on diagnoosimise turule (Vaueg 3.0 Hepatiit-C viiruse RNA), mille tundlikkus on 520 RÜ / ml tuvastamiseks (2500 koopia HCV RNA-st), ilmnenud kolmanda põlvkonna diagnostilised testid..\nHCV RNA KVANTITATIIVNE MÄÄRAMINE. HCV RNA kontsentratsiooni hindamiseks kasutatud kvantitatiivne PCR versioon. Algselt iseloomustati HCV RNA kontsentratsiooni järjestikuste väärtustega nagu "+", "++" jms, mis visuaalselt peegeldavad amplifikatsiooniproduktide elektroforeesi käigus saadud ribade intensiivsust või lõpliku lahjendusmeetodiga, st positiivse tulemuse juuresolekul lõplikus tiitrimispunkt. Raskused PCR kõigi etappide standardiseerimisel ei võimalda HCV RNA kontsentratsiooni objektiivset hindamist, mis toob kaasa saadud tulemuste tõlgendamisel olulisi vigu.\nPraegu on uuringu tulemused väljendatud kvantitatiivsetes ühikutes: HCV RNA eksemplaride arv, mis sisalduvad 1 ml. Absoluutsetes või logaritmilistes tingimustes (log 10). Võttes arvesse asjaolu, et tuvastatud HCV RNA kontsentratsioon peegeldab viirusosakeste arvu, nimetatakse seda indikaatorit viiruse ekvivalendiks (eq), millele lisatakse eesliide k (kilogramm, tuhat) või M (miljonit). Veel ühe viiruse osakeste summa väljendamiseks on nende kaalu ekvivalendid. Näiteks grammides või pikogrammides (1 pg vastab ligikaudu 1 miljonile ekvivalendile). Kasutatud väärtuste mitmekesisus raskendab eri laborites saadud tulemuste tõlgendamist. Seetõttu on WHO bioloogilise standardimise ekspertkomitee koostanud HCV RNA sisaldava "rahvusvahelise standardproovi" (1. genotüübiga HCV RNA sisaldav külmkuivatatud seerum), mille kontsentratsioon on väljendatud rahvusvahelistes ühikutes (RÜ / ml) . Eritoodetega saate ümber arvutada saadud kontsentratsiooninäitajad rahvusvahelistes üksustes.\nHCV RNA kontsentratsiooni määramiseks kasutatakse peaaegu kõiki PCR-i variante. Sellisel juhul kehtestatakse diagnoosimispreparaatide jaoks mitmeid konkreetseid nõudeid, millest kõige olulisem on tulemuste range lineaarsus, st registreeritud reaktsiooni signaali suurenemine HCV RNA kontsentratsiooni suurenemisega uuritavas proovis. HCV RNA erinevate tasemete sisestandardite kasutamine võimaldab vältida mitmeid metoodilisi vigu, mis võivad mõjutada reaktsiooni lõpptulemust . Rakendatud diagnostika tundlikkus (Amplicor HCV Monitor v2.0; LCx HCV RNA kvantitatiivne analüüs) võimaldab tuvastada HCV RNA-d, alustades 50 koopiat milliliitri kohta [48,49], mis on eriti oluline valitud viirusevastase ravi efektiivsuse prognoosimiseks.\nReaalajaline PCR ("reaalajaline RT PCR") on üks kõige lootustandvamaid võimalusi HCV RNA tuvastamiseks kasutatava kvantitatiivse meetodi järele. Meetodit ja selle riistvara arendavad ühiselt Roche ja Percin Elmeri spetsialistid. Meetodi põhimõte on võime hüdrolüüsida cDNA järjestusi 5 '- 3' suunas. Reaktsioon kasutab spetsiaalset sondi, mis on märgistatud kahe fluorestsentsvärviga, millel on sarnane imendumine ja fluorestsentsi maksimum. Amplifitseerimisproduktide juuresolekul lagundab Tag polümeraas sondi, mis takistab energiaülekande ühest värvaine molekulist teise ja takistab sellega kvantuva valguse vabanemist. Spetsiaalne vahend registreerib reaktsiooni igas etapis fluorestsentskineetika reaktsiooni ja matemaatilist modelleerimist, mis võimaldab saada teavet HCV RNA algse kontsentratsiooni kohta.\n"Reaalajalise PCRi" eripära on võime saada teavet HCV RNA olemasolu kohta otse reaktsiooniprotsessis, mis võimaldab vähendada analüüsi aega kombinatsioonis tulemuste kõrge tundlikkusega ja lineaarsusega . Tatjana Yashina ja kaasautorite sõnul võimaldab see meetod tuvastada 200 eksemplari HCV RNA-d milliliitri kohta. .\nHCV RNA genotüpiseerimise meetodid. Konkreetsele genotüübile ja alatüübile vastava HCV määratlust on kasutatud mitte ainult teaduslike, vaid ka praktiliste probleemide lahendamiseks. Näiteks: infektsiooni allika otsimine hepatiit C puhangute ajal või kasutatava ravi efektiivsuse prognoosimine.\nHCV genotüpiseerimise "kullastandard" on HCV RNA esmase struktuuri otsene määramine koos sellele järgneva fülogeneetilise analüüsiga , mis võimaldab seda viirusisolaati selgelt iseloomustada. Seda teavet saab järgmiste järjestamisvalikute abil:\nstandardse kloonimise alusel;\nPCR reaktsiooniproduktide järjestus (piiratud järjestus).\nHoolimata tulemuse täpsusest ei kasutata otsese sekveneerimismeetodit praktilistes tervishoiuvaldkondades uuringu tehniliste raskuste ja töö kõrge hinna tõttu. Samal ajal on HCV RNA esmase struktuuri kohta teabe kättesaadavus genotüpiseerimise standardmeetodiks ja automaatse järjestuse vahendite kättesaadavus lihtsustab tulemuse saamist.\nPraegu kasutatakse enamikul juhtudel HCV RNA genotüpiseerimiseks tüübispetsiifiliste praimeritega PCR-i kasutades põhinevaid meetodeid. HCV RNA genotüpiseerimine teostati esimest korda N. Okamoto ja kaasautoritega 1992. aastal, kasutades RT-PCR-i , mis hõlmab kahte amplifitseerimisetappi. Esimene neist viidi läbi universaalsete, kõikide HCV genotüüpide, praimerite ja teise tüübi spetsiifiliste praimerite segu jaoks, saades eri pikkusega spetsiifiliste amplifitseerimisproduktide. Eriti genotüübi olemasolu hinnati amplifitseeritud produkti suuruse järgi. Praimeritena kasutatakse tüübispetsiifilisi sonde, mille andmed paiknevad 5'UTR, Core või NS5-RNVGS piirkondades .\nTestitud "INNO-LiPA HCV, INNO-GENEETIKA"  aluseks on adsorbeeritud geenispetsiifilised sondid (HCV RNA 5'-mitteseotud tsoonist), mis on adsorbeeritud nitrotselluloosmembraanile, amplifitseeritud toodete hübridiseerimine. Esialgu oli seda testi kasutades genotüüpe võimalik kirjutada: la; lb; 2a; 2b; 3a; 3b; 4 ja 5a. Tulevikus võimaldavad teise põlvkonna "INNO-LiPA HCV II, INNOGENEETIKA" katsesüsteemid eristada kõiki 6 genotüüpi ja lisaks ka 2c; 2d; 2i; 3c; 4a-h; 6a ja 10a. \nHCV genotüüpide määramise metodoloogiline arsenal ei piirdu ülalmainitud meetoditega ja hõlmab erinevaid meetodeid:\namplifitseeritud toodete restriktsiooniprofiilide (RFLP) analüüsil põhinev genotüpiseerimine. HCV RNA fragmentide amplifitseerimisproduktid (HCV RNA 5'UTR - piirkond või NS5 piirkond) lõhustatakse restriktsiooniensüümidega. Saadud fragmendid erinevad pikkusega, sõltuvalt neist lõigatavatest restriktsioonisaitidest. Elektroforeesi tulemused ja nende võrdlemine võimaldavad meil uurida uuritavas proovis HCV genotüüpi . Genotüpiseerimise tulemuste võrdlemine PCR-RFLP-ga koos andmete järjestamisega näitas tulemuste kokkulangevuse kõrget taset - 95% .\nSSCP-meetodil põhinev genotüpiseerimine (üheahelaliste DNA fragmentide konformatsioonilise polümorfismi hindamine). Uuringu objektiks valiti HCV RNA 5'-transleerimata piirkond, millel on minimaalne komplekt nukleotiidivariante, mis eristavad genotüüpe üksteisest. See fakt määrab võimaluse kasutada ühiseid praimereid genotüpiseerimise ajal .\nSEROTÜPING Anti-HCV oli võimalik P.Simmondsi ja kaasautorite poolt läbi viidud uuringutega, kes tuvastasid genotüübispetsiifiliste epitoopidega seotud antikehade esinemise, mille informatsiooni kodeerib HCV RNA NS4 piirkond . Sünteetiliste peptiidide baasil valmistatud ELISA diagnostilise testi abil oli võimalik eristada viiruste 1, 2 ja 3 genotüüpide põhjustatud hepatiidi C juhtumeid (89% genotüpiseerimise tulemustest). HCV RNA NS4 ja Core-piirkondade kodeeritud sünteetiliste ja rekombinantsete antigeenide väljatöötamine võimaldas meil laiendada viiruse variantide tüüpe ja määrata alamtüüpide (1a, lb, 2a, 2b, 3a, 4a) olemasolu [61,62]. Praegu serotüpiseerimisega seotud diagnostiliste toodete kaubanduslik tootmine viiakse läbi ELISA kohesel versioonil - "Murekh NA 1-6 serotüptimise test, Murex Diagnostics" ja variandis "immunoblot" - RIBA HCV serotüpiseerimisanalüüs, Chiron Diagnostics. HCV RNA serotüpiseerimise ja genotüpiseerimise tulemuste võrdlusandmed näitasid suurt kokkusattumist, ulatudes 95% -ni .\nHCV-vastase antikehade serotüpiseerimine võrreldes HCV RNA genotüpiseerimisega sisaldab selliseid eeliseid nagu reaktsioonivõime ja madalamate kuludega. Samal ajal ei saa see meetod mingil juhul genotüpiseerimist asendada. Anti-HCV serotüpiseerimise tulemused näitavad HCV-i tüüpi praeguste või varasemate infektsioonide korral. Mõnedel juhtudel (kõige sagedamini hemofiiliaga patsientidel) registreeritakse samaaegselt erinevate alatüüpide anti-HCV, mis võib näidata mitmete erinevate alatüüpide ja HCV genotüüpide mitut infektsiooni . Lisaks sellele võib C-hepatiidi patsientidel ilmnenud immuunpuudulikkuse seisundi taustal olla ainus marker, mis muudab serotüpiseerimise võimatuks.\nHCV SEROLOOGILISTE MARKERIDE INFEKTSIOONI TESTIDE TULEMUSTE IDENTIFITSEERIMINE JA TÖÖTLEMINE. Mitme praeguse või eelmise HCV-nakkuse seroloogiliste markerite olemasolu, samuti kaasaegne metoodiline alus võimaldab lahendada paljusid probleeme labori diagnoosimisel ja hepatiit C ennetamisel. Tabelis 2 on näidatud HCV-nakkuse seroloogilised markerid ja nende olulisemad testimise alad.\nPraeguse või eelmise HCV infektsiooni markerite diagnostiline tähtsus\nÜks C-hepatiidi laboratoorse diagnoosi põhiülesanne on diagnoosida ja eristada kroonilise C-hepatiidi ägedat haigestumist, tuvastades nakkuse seroloogilised markerid. Nagu teistegi ägeda viirusliku hepatiidi korral, ilmnevad ja kaovad HCV infektsiooni seroloogilised markerid nakkuse ja tervenemisprotsessi käigus (joonis 2).\nHCV RNA võib detekteerida päevadel 7-21 pärast HCV nakatamist ja anti-HCV-d päevadel 20-150 (keskmiselt 50 päeva) . Anti-HCV spekter võib varieeruda sõltuvalt ägeda hepatiidi perioodist. Arvatakse, et esimene, kes suudab tuvastada HCV RNA Core ja NS5 tsooni poolt kodeeritud antikehasid. NS4 tsooni kodeeritavate anti-HCV valkude puhul puudub hepatiit C ägeda faasi puhul . Võrdlev uuring anti-HCV, HCV-vastase ja HCV RNA spektri kohta ägeda ja kroonilise hepatiidiga patsientidel näitas mõningaid erinevusi . Meie arvates võivad need erinevused olla seotud nakkusprotsessi individuaalsete omadustega, mis vähendab nende diagnostilist väärtust.\nJoon. 2. Äge C-hepatiit\nAnaloogiliselt A-ja B-hepatiidi laboratoorse diagnostikaga oli oodata, et HCV klassi IgM antikehade määramisel oleks nii palju diagnostilist väärtust kui IgM anti-HAV ja IgM anti-HBc. Kuid ägeda ja kroonilise C-hepatiidi patsientide seerumi katseandmed HCV-vastase IgM-i esinemise kohta näitavad, et nende patsientide seas esineb sageli neid vastavalt 50-93% ja 50-70% [67,68], need tulemused näitavad, et IgM anti - HCV-d ei saa kasutada ägeda HCV-nakkuse markerina.\nÄgeda hepatiidi "kuldse" standardi rolli puudumine näitab, et patsiendi dünaamilisel vaatlusel põhinevate tulemuste terviklik hindamine on vajalik.\nHCV RNA väga tundlike meetodite katsetamine ei ole vähem tähtis, vähendab transfusioonivastase hepatiidi C tekke riski. Sellise töö vajadus määratakse kindlaks akna faasi olemasolu järgi, st aeg HCV RNA esmase avastamise ja HCV-vastase antikeha ilmnemise vahel, samuti vere doonorite (krooniline C-hepatiit) patsientide olemasolu, kellel on HCV-vastase antikehade puudumisel HCV RNA. Praegune HCV doonorvere seire süsteem sisaldab ainult HCV-vastaseid uuringuid ja C-hepatiidi nakatumise risk jääb püsima. Selle põhjal on õigustatud kontrollida vere testimist HCV RNA olemasolule kaasaegsete meetodite abil (NAT-i meetodid - "nukleiinhapete amplifikatsiooni test"). Selle töö piirav tegur on teadusuuringute kõrge hind. Kulude vähendamiseks on soovitatav testida vere seerumite kogumit (8 kuni 96 proovi), millele järgneb positiivse proovi otsimine, kui HCV RNA tuvastatakse seerumis. Vere-seemnevedeliku külvamiseks vajaliku HCV RNA lahjendusteguri arvessevõtmine on kõige tundlikumate avastamismeetodite kasutamise küsimus väga oluline. Arvatakse, et NAT-i diagnostiliste komplektide kasutamine, mille tundlikkus on 50-100 RÜ / ml, võib märkimisväärselt vähendada transfusiooni järgse hepatiidi C ohtu.\nKahtlemata ei piirdu nende kahe valdkonnaga loetelu probleemidest, mida saab HCV infektsiooni kogu spektri testimiseks lahendada. Kaasaegsete katsemeetodite kättesaadavus koos nende võimekuse tundmisega avab laialdased väljavaated teaduslikuks ja rakenduslikuks tööks hepatiit C vastu.


18 – ja unistused käes! - Tänane leht\nAro Velmet: miks pole USA rassiline ebavõrdsus kadunud? (29)\nJüri Saar: Ameerika antiiktragöödia (6)\n18 – ja unistused käes!\n4. jaanuar 2014, 0:00 3 min lugemist\nÕnn ja rõõm: Jüri-Mikk Udam Harvardis. FOTO: Erakogu\nOn vaja töökust ja tahtmist, ning on vaja usku. Nii usku iseendasse kui ka usku millessegi suuremasse: oma tegemisse, oma rahvasse ja oma Jumalasse. Sellise uskumise ja tahtmisega lendame me tähtede poole.»\nNii nagu seisab ülapealkirjas, kõneles Jüri-Mikk Udam Tallinna reaalkoolis Eesti Vabariigi 95. aastapäeva aktusel. Vähemalt praegu tundub, et Udam lendabki tähtede poole. Kõrgemale kui paljud temaealised unistadagi oskaks.\nKui enamik Eesti abituriente seisab keskkooli lõpetades valiku ees, kas Tallinna või Tartu Ülikool, siis Udamil olid laual Cambridge, Harvard ja Yale. Mitte just kõige viletsam valik.\nSeda enam, et Udam kuulub omaealiste maailma tippu ka sõudmises. 2012. aastal võitis ta koos Geir Suursillaga Euroopa noorte meistrivõistlused. Samal aastal pääsesid nad paljudele üllatuseks Londoni olümpiale, kus said paarisaerulisel kahepaadil 13. koha.\nKõigest 18-aastase noormehena oli Udam täitnud kaks suurt unistust: pääsenud sportlasena olümpiale ja lisaks maailma parimasse ülikooli, Harvardi. Geenius?\nMatemaatika riigieksamil 100 punkti saanud Udam vaid muigab selle küsimuse peale ning vastab: «Ma pole mingi geenius. Olen lihtsalt perfektsionist, kes on harjunud oma eesmärkide nimel vaeva nägema.»\n60 000 dollarit\nJuba põhikooli lõpus otsustas Udam, et tahab välismaale õppima minna. Eesmärk oli ühildada tipptasemel sõudmine ja tipptasemel haridus.\nMullu augustis pühkiski ta Eestimaa tolmu jalgelt ja lendas USAsse. Harvardi ülikool võttis ta lahkelt vastu, andis 60 000-dollarilise stipendiumi ning korraliku treeningurühma. Stipp tagab prii elamise ja söögi, isegi lennukipiletid.\n«Arvasin, et Harvardi on võimatu sisse saada! Tundus kuidagi kättesaamatu. Aga eksisin. Juba päev pärast avalduse sisseandmist võeti minuga koolist ühendust,» räägib inseneriteadust tudeerima asunud Udam.\nMis talle aga samavõrd oluline – tänu heale kehalisele vormile pääses ta kooli esimese aasta tudengite esinduskaheksapaati, mille treeningutel ei anta armu kellelegi. Koormus kasvas senisega võrreldes kohe kahekordseks. Nüüd harjutab Udam kaks korda päevas. Esimesse trenni peab jõudma juba hommikul kella seitsmeks. Aga ta ei kurda. Vastupidi. Ta on pakutud kogemuse eest rohkemgi kui tänulik.\n«Päevad lendavad nagu pudrukuulid!» kirjeldab ta. «Ärkan üles, lähen trenni, pärast seda õpin, siis järgmine trenn ja seejärel jälle õpin. Siia tulles olin eelkõige põnevil oma treeningukaaslaste pärast, sest ei teadnud, kuhu nende suhtes asetun. Valdavalt on nad tugevatest Inglismaa ja Austraalia klubidest, kuid õnneks suudan nendega konkureerida.»\nTeine asi, mis põnevust tekitas, oli Harvardi haridustase ja tudengielu. Ta valmistas end vaikselt ette, et kursusekaaslasteks on valdavalt üliinimesed. Inimesed, kellega ühist keelt pole just kõige kergem leida...\n«Seniste õpitulemuste põhjal võib öelda, et tulen väga edukalt toime,» kinnitab Udam. «Tunnen ennast õpetajate ja õpilaste keskel väga enesekindlalt ja mõnusalt. Siinsed inimesed ei olegi üksnes oivikutest geeniused, vaid enamjaolt hoopis huvitavad ja toredad kaaslased, kellega igav juba ei hakka!» Reaalkoolist saadud keskharidusega võib tema sõnul enam kui rahule jääda. «Eesti keskharidussüsteem on üks maailma parimaid,» lisab ta. «See õpetab mõtlema ja lahendusi leidma.»\nHarvardis kulub Udamil loengutele ja seminaridele nädalas keskmiselt 13 tundi, millele lisandub umbes 40 tundi iseseisvat tööd. Tema hinnangul oli reaalkoolis diskussiooni tase kõrgem, Harvardis pannakse rohkem rõhku sellele, et tudengid omandaks võimalikult palju infot võimalikult kiiresti. Erandiks on Udami sõnul kirjutamistund, kus «targast hämast» ei piisa. «Kui Eestis pöörati kirjandite kirjutamisel rohkem tähelepanu õigekirjale ja vormile, siis siin on eelkõige oluline läbimõeldud väide ning oma argumendi kaitsmine.»\nKõige rohkem üllatas Udamit aga see, et Harvardis hinnatakse koduseid töid. «Meile antakse nädal aega probleemülesannete lahendamiseks,» räägib ta. «Iga nädal õppejõud kontrollib tehtut. Tegelikult polegi need üldse niivõrd keerulised, kuivõrd pigem aeganõudvad. Vahel lahendan neid ülesandeid öösel kella kaheni.»\nOma kaugema tuleviku seob noor sõudja, kes soovib edaspidigi pääseda olümpiale ja seal midagi korda saata, – see tähendab vähemalt medalile pretendeerimist – kindlasti Eestiga. Sest Eesti, põhjendab Udam, on tema kodu, kus on head võimalused millegi suure ärategemiseks. «Praegu töötangi selle nimel. 30-aastaselt enam tippspordiga tegeleda ei tahaks. Selleks ajaks peaksin oma sportlikud eesmärgid täitma.»\nUdami aktusekõne lõpust võib aimata, mis tulevik talle toob: «Nii 30ndates eluaastates tulen ma tagasi Eestisse, võtan punapõskse ilusa eesti neiu omale naiseks, tekitan Eestisse juurde paar-kolm last ning hoolitsen selle eest, et neist kasvaks täisväärtuslikud inimesed.»\nUdami tegusid vaadates ja juttu kuulates võib vaid oletada, kui palju on neid punapõskseid neide teda kodumaal ootamas.\nMartin Kiik, õpib neurobioloogiat ja riigiteadusi


Kui kaugtöö paneb ikka veel imestunult kulmu kergitama, loe nõuandeid ja saa kaugtöö profiks - ÄRILEHT\nKui kaugtöö paneb ikka veel imestunult kulmu kergitama, loe nõuandeid ja saa kaugtöö profiks\n04.august 2018 07:15\nMeid ümbritseva tehnoloogia ülikiire areng tundub meile loomuliku ja iseenesestmõistetavana. Miskipärast pole aga muidu nii innovaatilises Eestis sama kiires tempos uuenenud töötegemise viisid. Nii mõneski ettevõttes kergitatakse veel üllatunult kulmu, et kuidas saab teha kaugtööd välisriigist, viljeleda kuuetunnist tööpäeva või neljatunnis töönädalat. Elisas on see kõik igapäevane normaalsus. Selleks, et lihtsustada teistelgi ettevõtetel kaugtöö kasutusele võtmist, toob Elisa telekomiteenuste valdkonna juht Mailiis Ploomanni välja soovitused, millele tähelepanu pöörata.\nKaugtöö on ideaalne viis era- ja tööelu integreerimiseks\nPõhjus, miks töötajad kaugtöö ja teisi uudsete tööviiside vorme niivõrd kõrgelt hindavad peitubki selles, et nad saavad sujuvamalt ühendada töö- ja eraelu. See loob võimaluse oma tööpäev jagada nii, nagu kõige efektiivsem parajasti tundub. Elame kliimas, kus päikesekiiri jagub loetud päevadeks (välja arvatud käesolev suvi ning töökaaslastel ei ole vahet, kas saad oma töölõigu valmis päeval kell 14 või õhtul kell 22. Seega, miks istuda kõige ilusamal ajal toas arvuti taga? Kui inimesel on mõtestatud mõõdikud ning ta tahab oma tööd teha ja mõistab, et tema taha ei tohi kellegi teise töö seisma jääda – siis täiskasvanud inimene tunneb kella ja kalendrit ning suudab ise otsustada, millal töö on kõige viljakam ning milline osa ajast kulutada iseendale ja perele. Samas, kui inimene ei taha oma tööd teha või ta ei saa päris täpselt aru, miks seda vaja on, siis võib ju teda 9 – 17 arvuti taga jõuga kinni hoida, kuid ega produktiivsus sellest ei kasva.\nTöö asukoht ei muuda eesmärke – ole kindel, et need on olemas!\nKaugtöö oma olemuselt tähendab seda, et asukoht, kust tööd tehakse, ei ole oluline. Oluline on, et kaugtöötajaga kokku puutuvad töökaaslased või koostööpartnerid teaksid, et füüsiline eemalolek ei tähenda tööst kõrvale jäämist. Töö jätkub ka kontoriseinte vahelt väljaspool, ikka eesmärgistatult ja kindlate objektiivsete mõõdikute alusel. Ükski töötaja ei saa teha oma tööd ilma, et ta teadvustaks, mis on tema fookus ning kuidas õnnestumist hinnatakse.\nPilv kaotab vahemaad – vali vaid sobiv välja!\nEnne kaugtööle asumist veendu, et koduse lauaarvutiga või sülearvutiga pääseb tõrgeteta töömaterjalidele ligi. Suuremates ettevõtetes on sisevõrku pääsemiseks kasutusel VPN-ühendused, seega tuleks uurida, kas kõik vajalikud õigused ja paroolid on olemas. Juhul, kui eraldi turvatud sisevõrku ettevõttes kasutusel ei ole, siis tulevad edukalt appi ühised pilveruumid (näiteks Office 365 Pilvekontor). Väga hästi sobivad andmete hoidmiseks ka Google Drive ja Dropbox. Kõik need lahendused tuleb läbi katsetada ja testida enne kusagile geograafiliselt kaugele suundumist. Paberil tunduvad kõik lahendused väga loogilised ja lihtsad – aga iga bit ja bait tasub enne kaugtööle asumist iseseisvalt läbi testida ja veenduda, et kõik töötab. Sest nagu me kõik ju teame, kurat peitub pisiasjades.\nLadus suhtlus on koostöö aluseks – vali sobivad video- ja kõnesuhtlusprogrammid\nSujuva töö tegemise aluseks on suhtlus. Distantsilt töötamine ei tohiks takistada kellegagi ühenduse saamist. Seega on enne kaugtööga alustamist väga oluline kokku leppida, milliseid suhtlusvahendeid kasutatakse. Kui koosolekuid ja nõupidamisi on rohkem, tuleks valida kõikidele osapooltele sobiv\nvideo- ja/või ekraani jagamise tarkvara. Tasuta rakendustest on levinud Google Hangouts või JoinMe. Tasulistest versioonidest kasutatakse näiteks lahendusi nagu Skype For Business, GoToMeeting või Videra. Niisama videovestluseks sobib tänapäeval ideaalselt ka Facebooki videokõne (sh ka grupivestluseks).\nKriitiline pilk töövahenditele – kas kõik vajalik on sinuga kaasas?\nKui kontoris on kõik vajalikud töövahendid käe-jala juures, siis tasub mõelda, kas need on olemas ka seal, kus kaugtööd tehakse. Mida vaja läheb, sõltub suurel määral töö iseloomust. Kui töö on valdavalt iseseisvat laadi ning aeg-ajalt teistega kooskõlastamist vajav (näiteks raamatupidajad, analüütikud, programmeerijad, kliendikirjadele/päringutele vastajad jne), siis tuleb kontoris kriitilise pilguga vaadata, milliseid töövahendeid vaja läheb. Tihti piisab suuremast monitorist, klaviatuurist, hiirest ning märkmepaberitest. Kui aga suhtlust ja liikumist on rohkem, tuleb mõelda järgmisele:\n* Kvaliteetsed kõrvaklapid. Selleks, et koosolekutel kaugtöötajat hästi kuulda oleks või teiste jutt kaduma ei läheks, tasuks soetada kvaliteetsed juhtmeta ehk bluetooth handsfree kõrvaklapid või head-set ehk peakomplekt koos klappide ja mikrofoniga. See teeb nii kaugtöötaja kui ka kontoris viibijate elu kordades lihtsamaks, sest sülearvutite mikrofonid ja kõlarid on tavaliselt üsna nigelad. Selliseid lahendusi leiab kõikvõimalikes hinnaklassides. Kui kõrvaklappe on vaja kasutada lühemat aega, sobib ka odavam versioon. Pika aja jooksul need aga väsivad. Seetõttu on soovitatav siiski kohe teha veidi suurem väljaminek. Vastupidavamad komplektid maksavad umbes 40-60 eurot.\n* Ekraanikate päikese ja võõraste pilkude kaitseks. Kui tööd tehakse avalikus kohas (kohvikus, pargis, lennujaamas), siis tasub varuda ekraani varjundav kate (sarnane lahendus, mis on kasutusel näiteks pangaautomaatide puhul). Seda kasutades on otse ekraani vaadates kõik näha, küljelt või kaugemalt aga mitte. See on äärmiselt oluline, kui tehakse tööd klientide, personali andmete või ärisaladusi sisaldava materjaliga. Küll aga tuleb meeles pidada, et taolised ekraanikatted väsitavad silmi – seega pikki päevi nii tööd teha ei ole tervislik.\nTurvalisus on kaugtöötaja prioriteet – avalik wifi-võrk vs isiklik netipulk\nTurvaline internetiühendus on distantsilt töötades ülioluline. Välistada tuleks kõik avalikud wifi-võrgud, sest nende kaudu kellegi arvutisse sisse häkkimine on tänapäeval sama nagu 30 aastat tagasi naabri juures õunaraksus käimine. Keegi ei taha otseselt halba ja keegi ei pea seda päriselt varastamiseks. Samas on see põnev ja rahuldust pakkuv, kui saab veel kellelegi ka tõestada, millise kurja koera (või naabritädi) valvatavast aiast õunad ära toodi.\nSeega on liikvel olles avalikule wifi-võrgule alternatiiviks isiklik mobiilse interneti modem arvutis ehk netipulk või kaasaskantav taskuruuter. Mobiiltelefonist hotspot’iga ühenduse jagamine peaks olema hädavariant, mitte eelduslik töö tegemise viis. Kellegi teise hotspot’i kaudu tööasju ajada võib olla ebaturvaline ja lisaks kulutab see telefoni akut. Koduse püsiühenduse kasutamisel tasuks üle kontrollida wifi-parool. See ei tohiks olla kodune aadress, lapse sünnipäev, koera nimi või muu kergesti aimatav kombinatsioon.\nJa lõpetuseks, kui ettevõttes on olemas soov, töötahe ja usaldus, sobivad uudsed tööviisid ideaalselt ning ettevõte võidab sellest palju, sest loob unikaalse ja suurepärase viisi töötajate motivatsiooni tõstmiseks.


Hetkel panen ülesse laagrite ajakava, kohe varsti lühikirjeldused ja iga laagri pika sisu kolm kuud enne algust. Kel uudishimu suur ja soov kuhugi tulla, siis andku kohe teada.\nSuvine Pööripäev on 22 juuni kell 18.00, kes saab, siis eelmisel õhtul algavad ka pikad talgud, on juba oodatud!\nPäevakäänaku rituaalidele on oodatud kõik, nii suured kui väikesed, kel huvi vanade Eesti kommete järele. Kellele meeldib rituaalsus ja püha olek, kes armastavad sauna ja metsa. Kindlasti anna teada, kes oled ja millal tuleb. Hea on kui Leesojal saavad kokku saranase maailmavaatega inimhinged, siis on kõigil hea olla.\nMida kaasa võtta ja kuidas kõik toimub, vaata kodulehe Rituaalide ja Naiste pudurituaali alt.\n26.mai (19.00) – 29.00 (18.00)\nNaine, see on kursus sulle, kui tunned, et vajad avanemist, sul on olnud kurbi perioodi või justkui miski ei liigu, pole leidnud oma voogu ja paarisuhteid ei anna naudinguid. Naiste ühine vägi, erilised rituaalid, Tuletants ja hirmude äraviskamine, teadlik taotluse loomine ja emaka väkott, mis täidetakse iskilike taimedega loovad su elule uue mustri. Vaid sina ise saad valida, sina ise teed, et oled ilus, siis näed seda ka teised. See on väga helge loomise vägi, ära kahtle, sest mai, kus õitsevad sel ajal viljapuud ja magnooliad toovad naise elule uue päikese.\n21. juuni (18.00)- 25. juuni (18.00)\nTalgud on ühine tore ettevõtmine Leesoja aia ja hoonete korrastamisel . siin koos sauna, taimetünni ja õhtuste filosoofiliste vestluste, mängude, tantsu, gongi ja pillide lõdvestumise keskel. Kes tunneb tunnet, ja kel ikka jõudu ja ägedat meelt, on oodatud. Kindlasti tuleb teada anda oma tulekust kuni 15. juuniks. Töökad sõbrad ja foorumid lapsed võivad kaasa haarata. Siis teame totidupaja suurust...Seekordne läbiv teema on õhtutes Salapära ja müstika.\nTeadliku lõdvestuse laager\n5. juuli (19.00)- 10. Juuli (18.00)\nLõdvestumine on kõige alus. Ükskõik, kas praktiseerime jooga või seksuaalsust. Keha ja meele teadlik lõdvestumie läbi sporte harjtutuste, hingamiste, rituaalide, ilu ja grupitehnikate, mängude, ravimtaimede sauna ja aurude , selguse leidmise, kella mitte teadmise , oma saatuseraja ladumise, ise otsustamise, läbi südame hingamise. elementidele tantsimise ja kallistuse vastuvõtmise (see polegi nii lihtne), saad sa ühtäkki aru, et sa oled jätnud maha kõik selle, mida sa ei vaja, märkamatult, ja see ei tule tagasi. See on tugevate, tarkade, teadlike, heasoovlike inimeste koostöö.\n13.juuli (19.00)-14.juuli (01.00)\nTuletantsu saavad tantsida ainult naised, sest, nad on sündinud emakaga! Just emakasse tõmmates pöörast , kirge ja tuld sel õhtul viid sa selle oma maailma, väestamaks oma kaaslast või tõmbamaks ligi õiget inimhinge. See on tants, kus naise avab oma väe tulele, kingib oma voo, et vastu saada armastust. Tuli võtab sinult selle, mida sa enam ei vaja ja siis annab sulle naiseks olemise sära!\nVäikeste Nõidade laager- Ilmaruumi tunnetajad\n18. juuli (19.00)- 21. juuli (18.00)\nSee on 12-17 aastaste väekate, tundlike, loodust armastavate ja maailma "parandajate" tarkade laste laager.Neile, kes tunnevad, et tahavad teada, kuidas käituda müstiline nõiamaailm, miks ei tohi niisama midagi looduses murda, kuidas käituda tuleb, mida kaarnad räägivad . miks kividel on hinged. Kuidas nõiduda vihma, ja luua päikest. Kuidas olla siin maailmas ja käia oma rada, kui näed ja tunned rohkem. Mida saab teha enda avardamiseks.S laagris räägin lastele nõia, sest kui alustada tunnet omaväe teed noorena, nad õitsva sõnajalaõie!\nMaaema üsk -higitelgi rituaal ja müstiliste gongide heli.\n7.august (15.00)-8. august (11.00)\nKohtudes neija elemendi emaga, viid ennast sünnieelsesse voogu. Palve ja laul, häälestus, hingeline puhastus, uustisünd siia maailma. On rituaal, on oodatud inimhinged , kuhu suudavad pühenduda, kes meid võib taaskord leida end, sisemist olemust, kes tunnevad, et vajavad rääkimist nelja ilmaema, kes sünnitavad. Iga ema annab oma väe. Kuid, pead lubama talle, mida teed enda jaoks sina.\nTantristlik KALI vägi-Sisemine tuli\nNaiste kursus kui sulle meeldib oskuslikkus, sina ise tead, mida elult soovid. Sa tahad teada ja kogeda sügavat rituaalsust, Kali kehastuste (neid on 10 ) eirlist jõudu. Sa oled tark ja iseseisev isiksus, sinus on naiselikku müstilist jõudu. Sa austad ehedust ja ürgsust, oled julge. Sulle meeldib tunda oma kehal liiva, muda, vee ja käte puudutust. Sa suudad end kokku võtta, olla metsik, kui hunt. Olla õrn kui sulg ja teadvel kui kotkas. Sulle meeldib jagada oma väge ja tunned end hästi kui sinu ümber on väekad, pöörased , siirad ja nõiduslikud naised ja hinged. Sulle meeldib seksuaalsus ja selle äratamine enese sees. Sa austad naisi ja oma kaaslast (või tahad teada, kuidas tõmmata ilmaruumist endale kaaslast). Sa oled elus!\nVärskendades kirge-tantra paaridele\n24. august (19.00)- 28. august (18.00)\nKursus paaridele, kes tahavad avastada oma naudingute piire. Kellele meeldib teineteisele pühendatud aeg ja hoolitus. Sooviksid oma suhtes tuua uusi ideid ja rituaalsust, teada, miks teema ajab kogu aeg pingesse ja mida on tegelikult seksuaalses vaja, et hoida ära kirge. Kuidas rahuldada naist või kuidas leida teineteises kirg, mis põleks ja selle taas armunud tunde...\nMeeste initsatsiooni rituaalide vägi ja harmoonia taasleidmine\n7. sept. (19.00)- 11. sept (18.00)\nMis siis on mehe vägi? Kui mees on sirge, kasvanud oma loodud keskonnas, teinud läbi sisemise puhastuse, ehk initsatsiooni-sest see avab mehelikkuse ja täiskasvanuliku raja. Mees on sõdalane heas mõttes, kes on julge või teab, kuidas olla juilge. Kes on aus, kelle süda on enesele avatud. Kes tahab vastu võtta otsuseid. Kes ei karda enam edasi, kelles on tundlikust mõista looduse salapära, kelles on kohalolu-ilma et mõtete virr-varr ja pidev kohusetunne seda sööks. Kes paneb oma märkmikusse kirja aasta puhkuse ja puhkuse aja ja alles siis töö. Kes on lojaalne isendale, kes mõistab, et kui ta ise ei ole tugev ja ei jäta eilset päeva, siis ei saa ta rahu. Mees olles terve ei otsi pidevalt lohutust, (sest minevikus oli lapsepõlv raske, esimene naine pettis jne. ). Initsiatsiooni rituaalid toovad mehe ellu heas mõttes surma mõiste,\nMõtete rahunemise, jooga ja meditatsiooni laager\n20. okt. (19.00)- 23. okt. (18.00)\nKui sa tunned, et mõtted on kui kiirtee, kus pole kohta parkida. Sa soovid tagasi oma rahu ja oled valmis õppima igapäeva elu korrastama. Kui teile meeldivad rahulikud, tasakaalu ja harmooniat pakkuvad prakitkad, kus pole kiirustamist sageli, vaheldust. Kui oled lummatud sügise võlust ja sulle meeldib gurmaanlus, lõdvestus ja õnnelik olek, siis koge erinevat tehnikat.\nRuunide praktiline voog (neile, kes natuke juba teavad ja neile, kes alustavad)\n2. november (19.00) - 6. november (18.00)\nRuunide vägi 1 (jätkukursus Runoloogidele...)\n17.nov (19.00)-20.nov (17.00)\nRuunide vägi 2 (jätkukursus Runoloogidele)\n1.detsember(19.00)- 4. detsember (17.00)\nI.M.E.L.I.K laager 5.jaanuar 19.00 -8 jaanuar 17.00 2023


2x Täispuhutav SUP Balance 11'0" | Tahe Outdoors\nVaata kõiki ALE tooteid\nFIT 111 on stabiilne kajak algajatele ja kesktasemega aerutajatele, millega päevast hobiaerutamist nautida. Hea valik Eesti jõgede ja järvede avastamiseks.\n499 €/ 794 €\n2x Täispuhutav SUP Balance 11’0″\n898 € 698 €\nKuumakse al. 22.95€ / 60 kuud\nEripakkumine sisaldab 2 täispuhutavat SUP Balance 11’0″ komplekti. Keegi ei pea kaldale ootama jääma, koos on alati lõbusam!\nBalance 11’0″ on väga hea hinna-kvaliteedi suhtega SUP igale vanusele. Laud on ka äärmiselt multifunktsionaalne – seda saab suurepäraselt kasutada nii aerulauana, stabiilse veejooga lauana kui ka lihtsalt lõbusa veemänguasjana, millega rannapäevad meeldejäävaks teha.\nKuid Balance 11’0″ pole vaid rannalaud. Tänu madalale süvisele ja lihtsasti eemaldatavale keskuimele saab sõita pea igal pool kus vett on, sh. sügavatel jõgedel, laidael järvedel, madalatel tiikidel ning kasvõi linnatänavatel üleuputuse ajal.\nAlgajasõbralikuks teeb selle SUP laua kompromiss stabiilsusest ja kiirusest. Kolme uime konfiguratsioon aitab lauda nii sirgel kui ka kurvides paremini juhtida. Tugevad kokkusulatatud liitekohad võimaldavad laual surve all äärmiselt jäigaks muutuda ning pealmine libisemisvastane kate hoolitseb selle eest, et laud alati jalge all püsiks.\nKui oled SUPi ostule mõelnud ära enam kahtle. Tegemist on tõesti hea lauaga!\nBalance 11’0″ SUP komplektis on kaasas kõik vajalik:\nBalance 11’0″ SUP laud\nReguleeritav aer, lahti võetav 3 osaks\nKäsipump manomeetriga, kahesuunaline\nParanduskomplekt (ventiili võti, 2 PVC-paranduslappi)\nKõik see mahub ilusti kaasasolevasse SUPi seljakotti, millega kõik vajalik hõlpsalt kasvõi bussiga liigeldes randa saab kanda.\nSiin on näidisvideo sellest mida täispuhutava SUP laua kasutamine endast kujutab (videos on teine toode):\n335 cm (11'0'')\n86 cm (34')\n15 cm (5.9')\nTäispuhutav SUP Balance 11’0″\n-11% 449 € 399 €


Saab 9-3, 2.0T, 2000, cilpkonn - Eesti Saabiklubi foorum\nSaab 9-3, 2.0T, 2000, cilpkonn\nR Apr 24, 2015 12:48\nSedasi see siis läks. Jälle..\nMitte, et ma nüüd väga sügavalt saabismi oleksin nakatunud, aga Anny müügist jäi siiski miski okas hinge... ja ravimi leidsin alles mõni aeg tagasi.\nSeekord käis ost pooleldi emotsiooni ajel, erilisi konsultatsioone ja läbirääkimisi ei pidanud. Kui ka omad vitsad peaksid peksma, siis võtan koosa vastu ja ajan jonni edasi, miski lihtsalt tõmbas selle sõiduki poole, vajagu ta siis nokitsemist rohkem või vähem...\nPeategelaseks on juba nädalajagu hoovi peal uue koduga harjumas kosmosesinine Saab 9-3.\nVanadusest pisut-pisut räsitud, aga päris reipa südamega :)\nMasin pärit siitsamast foorumist, kasutaja 9-5 LPT endine Rootsi numbritega sõiduk. Hetkeseis selline, et arvele sai probleemideta, liigub täitsa iseseisvalt, käivitub võtmest, kiirendab, lubab käike vahetada, pidurdab, keerab ja pöörab ka.\nAll veel talverattad, valuveljed ootavad allapanekut. Tibake leidub siin-seal kraapse ja pisut roostet ning mõningaid pisivigasid veel. Puudu on esistange sees udukate kõrval ja keskel olevad plastikvõred (äkki annaks asendada võrguga?)\nArvestades aga ostusummat, numbreid nimetamata, on masinat veel üsnagi kõvasti alles ja esmaste vigade likvidatsioon jääb eelarvestuste piiridesse.\nTuuningupilli (ILMSELT) ehitama ei kavatse hakata, tahaks visuaali heaks saada ja enda turvamõttes vajadusel ka veermiku ja südame tasapisi üle käia.\nKas ma siin just päevikut ja mutriarvestust pidama hakkan, pole kindel, aga peale esimest suuremat pesu nägi ta igatahes päris armas välja, et temast foorumisse uus teema tekitada :)\nÜhesõnaga.. lehvitame ja sõidame :drive:\nR Apr 24, 2015 13:38\nNo mis muud kui õnnitlused :)\nJa et ta ikka kestaks :drive:\nTeatud põhjustel ma liikude kohta midagi ei küsi :)\nR Apr 24, 2015 15:51\nR Apr 24, 2015 15:59\nOotasingi teemat, nüüd on see koht, kus heietada võin ja öelda, et olid head ajad Temaga Pestuna ikka sigailus see cosmic blue!\nK Juun 03, 2015 22:54\nVäike updeit 03.06.15 seisuga.\nVahetatud üks jahutusvedelikku lekitanud tjuub ja käsipidur tahab kohendamist saada. Üle tagasilla viivast väljalasketorustiku osast avastatud "natuke" roostet :)\nJa Porschedega enam Viljandist väljudes võidu ei sõida. Ausalt.\nVäike klõps ka:\nK Juun 03, 2015 23:32\nVeljed on täitsa kenad ;)\nGrilli värvisid ise mustaks? (maitse asi ilmselt :o)\nToetasid riiki võidusõidul? :D\nN Juun 04, 2015 0:27\nVeljed on kasutatuna ostetud ja pärit 9-3 SS'i alt. Hullult meeldisid.\nLappasin enne ostu kõikvõimalikke variante guuglis, aga ei näinud ühegi 9-3 pilti, millel oleks need all olnud. Mäletamistmööda olid samasugused ka kasutaja VVS'i lennukil talvevelgedena kasutusel, kui tema autoteema esimesi pilte vaadata. Rehvirida on Pirelli Cinturato 225/45 R17 ja isegi üllatuseks ei otsi väga rada, käitub täiesti mõistlikult linnarööbastes ja niiskel asfaldil.\nGrill oli ostes värvitud, koloreering püsib päris hästi peal, paar vähemärgatavat täket.\nPorschega võidusõitmise kohta.... ei toetanud riiki, 911 kadus liiga kiirelt eest ära :)\nN Juun 04, 2015 0:33\nJah..ei maksa unustada et see on siiski stock saab! Tundub, et võib lubade puhul õnne soovida! :)\nN Juun 04, 2015 10:07\nIlus auto nende velgedega. 911-le järgi jõudmiseks peab saabi ikka omajagu tuunima :)\nK Juun 16, 2021 9:27\nTaaskord on üks saaga lõpule jõudnud ning Cosmicul Saab olema käesoleva nädala lõpust uus omanik.\nKui soovib, teeb tema siia juba uue teema, minupoolt tänud ning teema lukus.\nReg. märgid jätsin endale, seega 77ZMX varsti uue sõiduki küljes.\nLehvitame ja sõidame!


Enn Säde hümn Pärnule - Kirjandus - Kultuur\n8. veebruar 2019, 21:00\nEnn Säde, «Kadri-Katariina».\nMa pakun lugejale lihtsa lapitekilise ülesehituse: üks poiss, üks perekond, üks maja, üks tänav, üks linn. Ning üks aeg – sõda“ (lk 9). Aga pakkuja on filmiklassik, helirežissöör ja režissöör, filmirahva Suur Mäletaja, kes läheneb oma mälumaterjalile filmitegemise võtetega: kirjutaja mälu on vaid tikkimisriide kanvaa sarnane, millele autor vajutab säilinud piltide ja intervjuudega täiendatud kujutised mälestustest. Filmitegijana ta aina võrdleb eri allikatest pärit infot, ei pelga ajalehesabade kuulutusigi, selleks et pilt saaks pädevam, montaaž vaheldusrikkam.\nTõsi, kuulutused trükib ümber ajaloohõngu kaotavasse tänapäevasesse mundrisse – ruumi kokkuhoid või isikuandmed? (Lk 89–92, 98, 117, 153, ühe soojaga läbilugemisel – alasti elu.) Režissöör Säde teab kogemustest, kuivõrd perutavate hobuste sarnased on intervjueeritavate mälestused ja kui lihtsalt võivad nad sulle filmi tegemisel/raamatu kirjutamisel vajalikul kohal katkeda.\nVõiks märkida, et Enn Säde esimene raamat „Säde filmist: lood Eesti filmimetsadest“ (2016) on sisuliselt jätk käesolevale raamatule „Kadri-Katariina“ (2018). Kui esimesena ilmunus on kõneks terve eesti filmiareen, siis selles raamatus on autor end ankurdanud sünnimajja Pärnus ja avab lugejale teda lapsepõlves ümbritsenud inimvõrgustiku, sõjast rääkimata – sõda podiseb enamasti foonil –, aeg-ajalt tuleb järjekordse ohvri järele päris lähedale, suisa Kadri tänavale.\nPendelrände uurija: Eesti tööandjad ei taha Soomest naasnud «pehmosid» (15) Loe artiklit Kuula saadet


Eurojackpoti Internetis mängimiseks\nKas ma saan mängida uusi Eurojackpot online?\nPlay Eurojackpot onlineThe uus Eurojackpot Lottery on Euroopa vastus suur jackpot'i USA ja teiste riikidega. Küsimus kohe Tekib kas saate mängida Eurojackpot online. Kahjuks on õiguslik olukord Saksamaal keelab Saksa loterii ettevõtted müüa Internetist piletid Euro Jackpot.\nEsiteks - kui sa elad Saksamaal, siis tuleb osta endale pilet Eurojackpot oma loterii pood lihtsuse huvides. Aga kui sa ei ela Saksamaal või muude osalevate riikide, sa ei saa mängida Eurojackpot - vähemalt mitte minnes loterii kiosk ja osta pilet ... Aga siis on veel üks võimalus, sest veebilehe kaudu kohta RedFoxLotto (kliki siia), kus saab juba mängida tavalise Saksa Lotto veebis välismaalt, samuti kõik teised suured loteriid maailmas on ka Eurojackpot online. Kogu asi on lihtsalt nii lihtne, nagu ka kõigi teiste loteriide pakutud RedFoxLotto: Vali jackpot, klõpsake numbrid, saata maksma online ja sa oled teinud!\nAlternatiivid Eurojackpot, et saate mängida võrgus\nPeale selle, et RedFoxLotto pakub palju alternatiive Eurojackpot. Peaaegu kõik suuremad jackpot'i ülemaailmse on mängitav läbi RedFoxLotto on Lottolos kulleriga kõikjal maailmas. Nii et sa ei pea elama vastavas riigis, kuid on võimalik mängida loterii Brasiilia, Hispaania või Austraalia Saksamaalt õiguslikult ja tõsiselt.\nParim asi on see, et te ei saa mängida ainult Eurojackpot online, kuid võite ka valida nimekirjast jackpot'i jackpot, mis on praegu kõrgeim (vt ka paremas veerus meie kodulehel). Sel viisil saate suurendada oma võimalusi võita optimaalselt (sama kaalul, kuid suurenenud win = maksimaalne võimalus võita!).\nMis juhtub, kui sa võidad?\nMuide, RedFoxLotto ei ainult teile online pilet loterii oma valik. Kui võidate, siis ka kasumit lõpetamist jookseb üle RedFoxLotto. Kõik võidud alla 500 € kantakse otse RedFoxLotto oma kliendi konto, kust sul võib olla see üle oma pangakonto. Kui suurem võit, siis saadetakse võitnud vorm, kuhu tuleb end identifitseerida. RedFoxLotto siis edastab selle vormi vastava loterii vahendustasu. Sealt tšekk saadetakse teile. Erand: Sa crack suur jackpot - siis on hammustavad kuuli ja lennata USA, näiteks, et saada oma kontrolli isiklikult. Aga kes oleks vastu sellise reisi? võiks teha siis sellegipoolest koos värskelt võitnud miljonite väike Shopping marsruuti USA!\nEurojackpot Internetis võrreldes teiste loteriide\nKui võrrelda Eurojackpot teiste online-loteriide, siis algab 10 miljonit eurot auhinnaks, kuid teiselt poolt on praktiliselt alati jackpot kusagil maailmas, mis on oluliselt kõrgem. Nii kaua kui Eurojackpot ei tõusnud oluliselt, sest see ei ole pragunenud paar nädalat, seal on palju (parem!) Alternatiive seal. Ja kes ei tahaks vähemalt unistus on võimalik koju megamillions jackpot (nagu täna: 334 miljonit USA dollarit!) Või rohkem?\nMeie kodulehel on alati ajakohane ja näed lühidalt, kus saab võita parim suur auhindu! Ja kui sa elad Saksamaal, võite muidugi mängida uusi Euro Jackpot traditsioonilisel viisil ja osta oma pileti loterii kauplus. Siiski, teine suur loterii jackpot'i maailmas on kindlasti huvitav teile. Nii et proovige oma õnne erineva loterii - parim ikka täna, sest ainult siis, kui pilet on, saab ka võita!


Uued tarneahelad ja turud – meie tee edasi — Eesti Gaas\nSügistalvised energia hinnalaed ja Ukrainat laastav sõda on meid kõiki läbi raputanud. Eesti Gaasi uue juhatuse esimehena tänan Sind, et oled neil rasketel ja rabedatel aegadel jätkuvalt meiega. Olen kindel, et me tuleme raskustest lõpuks läbi ning Eesti ja Euroopa julgeolek, sh energiajulgeolek, saab olema tugevamal alusel kui varem.\nMargus Kaasik, Eesti Gaasi juhatuse esimees\nGaas oli, on ja jääb. Paljudele kodudele on ta tähtis ja tööstustele isegi asendamatu. Küll aga muudab LNG gaasi senisest mobiilsemaks ja rahvusvahelisemaks ning rohegaasi tootmise laienemine kohalikumaks ja rohelisemaks. See juba aastaid tagasi alanud liikumine saab nüüd riigi ja erasektori ühisel pingutusel tuntava kiirenduse. Tulevik jõuab lihtsalt varem kohale.\nGaasiturg on regionaalne ning eeldab riigiüleseid, kõiki võrdselt kohtlevaid otsuseid. Tänase teadmise ja prognooside kohaselt annaks uus ühine LNG terminal kliendile nii tarnekindluse kui hinnastabiilsuse. Mõistame, mis on kaalul – kindlast tarnest ja mõistlikust hinnast ei sõltu mitte üksnes energiajulgeolek, vaid kogu Eesti majanduse konkurentsivõime.\nEesti Gaas on suurendanud oma gaasivarusid Lätis asuvas hoidlas ning sõlminud lähiajaks lepingud uute tarnijatega. Esimene suurem LNG tarne jõuab peagi hiiglaslikul gaasitankeril Klaipeda terminali. Tarnekindlust suurendavaid uudiseid tuleb ka kaugemalt – mai alguses avatakse gaasiühendus Leedu ja Poola vahel, mis sisuliselt tähendab ühist gaasiringlust terve Euroopaga. Põhja suunas Soomega on Balticconnectori näol ühendus meil juba varasemalt.\nNäen endal kolme peamist ülesannet: kliendi vaates uute pikaajaliste tarneahelate loomist, ettevõtte poolt vaadates Eesti Gaasi jätkuvat kasvu naaberturgudel ning rohepöörde valguses pakutava energia mitmekesistamist ja uute taastuvenergiaprojektide käivitamist.\nTurg ja ühes sellega meie ettevõttena oleme jõudnud järgmise arenguetapini, võtame seda koos võimalusena.


Kuidas edastada kontakte Android-ist iPhone'ile\nÜks tavalisi asju, mida tehakse Android-telefonilt iPhone'ile vahetamisel, on oluliste failide, sealhulgas kontaktteabe teisaldamine. Kontaktide ülekandmist Android-ist iPhone'ile saab teha mitmel erineval viisil, sealhulgas allpool loetletutega. Vaadake seda juhendit alati, kui vajate Androidi kontaktide sünkroonimise, importimise või uude iPhone'i ülekandmiseks vihjeid.\nKontaktide teisaldamine Android-ist iPhone'ile Bluetoothi kaudu\nAlustamiseks kontrollige ja veenduge, et Bluetooth on lubatud mõlemas teie seadmes (Android ja iPhone). Veenduge ka, et mõlemad seadmed asuvad Bluetoothi levialas ja leitavas režiimis. Seejärel järgige järgmisi samme kontaktide teisaldamise alustamiseks:\nKoputage oma Android- seadmes avakuval rakendusi.\nKerige ja seejärel koputage Kontaktid .\nPuudutage ROHKEM .\nValige suvand Jaga .\nToksake, et valida kontaktid, mida soovite oma iPhone'iga Bluetoothi kaudu jagada .\nToksake Bluetooth . Kui edastate ainult ühte kontakti, koputage suvandit vCard file (VCF) .\nPuudutage, et valida sihtseade (iPhone). Nüüd hakkavad kontakte saatma.\nKontaktide vastuvõtmiseks Android-seadmest järgige vajadusel oma iPhone'i ekraanil kõiki täiendavaid juhiseid.\nKontaktide teisaldamine Android-ilt iPhone'ile oma Google'i kontoga\nNii Androidi kui ka iOS-i seadmed toetavad Google'i ja seega saate sama Google'i konto kaudu jagada Androidi kontakte oma iPhone'iga. Seda tehakse järgmiselt:\nToksake oma Android- seadmes rakenduse Seaded avamiseks.\nSeejärel valige Kontod ja Sünkrooni.\nSisestage oma Gmaili (Google) konto ja lubage sünkroonimisvalik.\nAvage oma iPhone'is avakuval sätted.\nValige Kontaktid .\nPuudutage valikut Konto lisamine.\nSeejärel lisage sama Google'i konto, mis teil on Androidi seadmel.\nPärast oma Google'i konto edukat lisamist oma iPhone'is logige sisse oma Google'i kontole ja lubage valik Kontaktid.\nSeejärel sünkroonitakse kõik sellele kontole salvestatud kontaktid teie iPhone'iga.\nKontaktide teisaldamine Android-ist iPhone'ile iTunes'i kaudu\nKui teil on Windowsi arvutisse installitud iTunes, saate seda kasutada Androidi kontaktide sünkroonimiseks oma uue iPhone'iga. Kuidas see töötab:\nÜhendage oma Android-telefon Windowsi arvutiga ja sünkroonige kontaktid Windowsi aadressiraamatu või Outlook Expressiga.\nÜhendage oma iPhone arvutiga ja avage siis iTunes.\nKlõpsake iTunes'i ekraanil oma iPhone'i ikooni valimiseks.\nKerige alla ja valige vasakpoolses veerus menüü Info valikud.\nSeejärel valige suvand Sünkrooni kontaktid Windowsi kontaktide või Outlookiga ja klõpsake raadionuppu Kõik kontaktid .\nSee peaks ajendama iTunes'i alustama kõigi teie Androidi kontaktide teisaldamist oma iPhone'i.\nKontaktide teisaldamine Android-telefonilt iPhone'ile SIM-kaardi kaudu\nTeie Android-telefoni SIM-kaardile salvestatud kontaktteavet saab ka teie iPhone'i edastada, pannes sama SIM-kaardi oma Android-telefonist teie iPhone'i. Kuidas see töötab:\nVarundage kontaktide teave oma Android-telefonist SIM-kaardile.\nSeejärel eemaldage SIM-kaart oma Android-telefonist.\nSisestage SIM-kaart oma iPhone'i.\nMinge oma iPhone'is menüüsse Seaded-> Kontaktid, seejärel valige võimalus importida SIM-i kontakte.\nSee meetod on rakendatav ainult siis, kui teie Android-telefonis kasutatav SIM-kaart ühildub (sama kaardi tüüp) teie iPhone'iga.\nKontaktide teisaldamine Android-ist iPhone'ile, kasutades Teisalda iOS-i\nTeine viis kontaktide edastamiseks Android-seadmest iPhone'ile on kontaktide importimine, kasutades rakendust Teisalda iOS-i. See on vaieldamatult üks populaarsemaid ja laialdasemalt kasutatavaid võimalusi kontaktide lisamiseks Android-seadmest iPhone'ile. See meetod viiakse läbi teie iPhone'i esmase seadistusprotsessi ajal. Kuidas see töötab:\nKäivitage oma iPhone'is häälestusviisard, kuni jõuate ekraanile Rakendused ja andmed .\nKerige rakenduste ja andmete ekraanil alla ja koputage valikut Andmete teisaldamine Androidist.\nSeejärel minge oma Android-seadmesse ja laadige Google Playst alla rakendus Teisalda iOS-i . Kui rakendus on installitud, käivitage see oma Android-seadmes ja koputage seejärel Jätka .\nMinge oma iPhone'i ekraanile ja valige Jätka . Seejärel kuvatakse ekraanile kood. Sisestage see kood oma Android-seadmesse.\nValige oma Android-seadmes kontaktid ja koputage faili edastamise alustamiseks nuppu Edasi .\nSaate ka muid faile oma Android-seadmest oma iPhone'i üle kanda. Valige lihtsalt failid, mida soovite edastada koos oma kontaktteabega.\nKontaktide teisaldamine Android-ist iPhone'i, kasutades CardDAV-i\nCardDAV on protokoll, mida Google kasutab oma kontaktide sünkroonimiseks seadmete vahel. Seda protokolli toetab ka iPhone, nii et saate seda kasutada kontaktide teisaldamisel Android-telefonist iPhone'i. Alustamiseks peate oma iPhone'is oma Google'i kontole sisse logima ja järgima järgmisi juhiseid.\nPuudutage avakuval Seaded .\nKerige ja puudutage Paroolid ja kontod.\nValige suvand Lisa konto.\nJätkamiseks puudutage Muud .\nSeejärel valige konto tüüp, mida soovite konfigureerida. Valige e- posti konto jaoks E- post, kalendri jaoks CalDAV ja kontaktide jaoks CardDAV .\nSisestage vajalik kontoteave ja toksake Next .\nSeejärel koputage kontaktide sünkroonimise lõpuleviimiseks Valmis .\nKui teil on kunagi probleeme kontaktide teisaldamisel Android-seadmest oma iPhone'i, võtke arvesse kõiki veateateid, kuna need annavad teile vihjeid, mis valesti läks ja kuidas seda parandada. Või andke meile julgelt teada, kui vajate probleemi lahendamisel rohkem abi.


Huumoriga kontseptuaalset jalgratast leiutamas — Sirp\nJohannes Kreidleri „Wittgensteinway B“ interdistsiplinaarse kontserdisarja „Afekt“ avakontserdil 8. V Vabal Laval.\nUus interdistsiplinaarne nüüdismuusika kontserdisari „Afekt“ esitles väga selgelt oma esteetikat ja huvisfääri, rõhutades seda nii multimeediumliku avaetenduse kui ka esinemiskoha – Telliskivi Loomelinnakus asuva Vaba Lava – valikuga. Sarja avas noor Saksa helilooja-tegevuskunstnik Johannes Kreidler soolo-show’ga „Wittgensteinway B“.\nJohannes Kreidlerit võib pidada uuskontseptualismi esindajaks muusikas. Ta on nii Saksamaal kui ka mujal pälvinud tähelepanu oma ühiskonna- ja muusikatööstusekriitiliste aktsioonide ning videoteostega ning tekitanud uue muusika maailmas rohkesti poleemikat, eriti just protestiaktsiooniga kahe tuntud Saksa sümfooniaorkestri pealesunnitud ühendamise vastu. Selle käigus purustas Kreidler 2012. aasta Donaueschingeri muusikapäevade lõppkontserdi ajal laval tšello ja viiuli.\nSaksa kultuuriruumist pärit heliloojale ehk ootuspäraselt on Kreidleri loomingus tunda filosoofide Theodor Adorno ja Ludwig Wittgensteini ideede kohalolu, viimasele vihjab väga otseselt ka sooloetenduse pealkiri. See pani arutlema seoste üle nüüdismuusikaga äärmiselt relevantse Wittgensteini nn skeptilise mõistatusega (skeptical puzzle, Whitney Davis’e termin1), mille kohaselt võib tavakäitumine jagatud keele- ja märgisüsteemi piirides küll kanda üldmõistetavat tähendust, kuid ometigi pole mingit garantiid, et sama käitumine tähendaks kõigile inimestele sama asja või üleüldse midagi. See tuletab meile meelde, et tuleb olla ettevaatlik tähenduse omistamisega mis tahes tegevusele, seda eriti nüüdismuusika kuulamisel ja mõistmisel, kuna viimases puudub üldkehtiv tava. Matthias Spahlinger, üks Kreidleri õpetajatest, on nüüdismuusika kohta öelnud, et see on „esimene ja meie teada ainus muusikaline traditsioon, mis on teinud omaenda süntaktilised ja keelelaadsed süsteemid toimimisvõimetuks ega ole vanu tavasid ka millegi uuega asendanud”.2\n„Wittgensteinway Bs“ rekontekstualiseeris Kreidler mänguliselt traditsioonidega muusikainstrumendid, mängu- ning noteerimistehnikad, pöörates pea peale nende tavapärase otstarbe ja ilmnemiskeskkonna ning pannes publiku endalt aktiivselt küsima, mida mingi aktsioon, heli või helikogum uues kontekstis võiks tähendada, mida helilooja sellega on mõelnud või kas üldse on midagi erilist tahetud öelda.\nSamuti kompas Kreidler ilmselgelt muusika ning kontseptuaalse kunsti/tegevuskunsti piire: kui kaugele võib minna, et tegemist oleks ikka veel muusikaga?\nSamasugusel piirialal opereerib vahel ka Briti kujutav kunstnik ja muusik Martin Creed, kes ise küll keeldub kontseptuaalse kunstniku silti kandmast, nimetades end pigem ekspressionistiks. Creedi 2014. aasta näitusel Haywardi galeriis Londonis võis näha noodigraafilisi „pilte“ – noodisümbolid olid üle toodud kujutava kunsti valdkonda. Pean ka Kreidleri Vabal Laval esitusele tulnud repertuaaris üheks õnnestunumaks teoseks noodigraafilisi lehti, mille kujundlikud pealkirjad rõhutasid nende kujutava kunsti valdkonda kuuluvat olemust, avades noodigraafikasümbolite taga avaraid maailmu, laiendades ja rekontekstualiseerides nende mõtestamisviise.\nTheodor Adornole viitas ilmselgelt Kreidleri „Introduction to the Sociology of Music“ ehk „Sissejuhatus muusikasotsioloogiasse“. Ta luges mitu minutit ette metal-muusika stiilide nimekirja, illustreerides iga stiili paarisekundilise helikatkendiga. Absurdihuumori maiguga teost võiks vaadelda ka nüüdismuusikaringkondade getostumise paroodiana.\nSeoseid iiri helilooja Jennifer Walshe’i defineeritud uue distsipliiniga (The New Discipline) võis märgata mitmes muusiku kehalisust rõhutavas videos, kus nägi inimkeha, instrumentide ja muude objektide, nt kingade kokkupõrkeid.\nKreidleri videod aga kaotavad tihti oma suhtelise pikkuse tõttu löövuse ning suhtelise lühiduse tõttu kordumisest tekkiva absurditunde ja transsi viiva mõju. Kestus on just piiri peal, et väikeste variatsioonidega korduvad aktsioonid, kus Kreidler näiteks jookseb kas vastu seinale riputatud klaviatuuri või kukutab klaviatuuri maas asuvatele täringutele (kas viide John Cage’i aleatoorilistele kompositsioonimeetoditele?), hakkaksid mõjuma meditatiivselt. Kreidler laseb videol kesta küllalt kaua selleks, et uudse idee vastu tekkinud huvi kaoks, ent uus meeleseisund, mis laseks sügavamalt keskenduda väikestele variatsioonidele aktsiooniga esile kutsutud helis, ei jõua publikul veel tekkida. Niisiis jääb tulemus kahe seisundi vahele, justkui eikellegimaale.\nHoopis õnnestunumalt on inimese kehalisust uurinud näiteks Bristolis tegutsev kontseptuaalsete kunstnike paar John Wood ja Paul Harrison teoses „Twenty Six (Drawing and falling things)“ ehk „Kakskümmend kuus (Tõmbavad ja kukkuvad asjad)“, mida sai 2011. aastal Tallinna Kunstihoones näha ka Eesti publik. Lühikeste äärmiselt minimalistlike videosketšidena jäädvustatud aktsioonid toimuvad valges kuubikutaolises ruumis kunstnike keha ja rekvisiitide koostoimel. Need näitlikustavad elementaarseid ruumisuhteid ning gravitatsiooni ja hõõrdejõu mõju inimkehale lakoonilise absurdihuumori võtmes, demonstreerides nii sisult kui ka vormilt puhast kontseptuaalset minimalismi ning sellele lisaks veel kehavalitsemise meisterlikkust.\nÕnnestunumas vormis näeme Kreidleri kehalisust videos, kus ta lõikab kitarrikeeled pillilt maha, paneb need endale suhu ning mälub neid järjest suureneva ebamugavustundega. Lähedalt on näha ebamugavust ja vastupanureflekse, mida see sööjas tekitab, samuti oleme teadlikud tegevuse ohtlikkusest – kitarrikeeled on metallist, tugevad ja teravate otstega.\nEtendusel jäi Kreidleri kehalisus aga väheseks. Lõviosa moodustasid videod, esineja enamasti ainult saatis või dubleeris videos toimuvat, tekitades küsimuse, kas tema viibimine laval on alati tingimata vajalik. Samuti tundus, et Kreidler polnud esinemissituatsioonis piisavalt tugevalt kohal.\nSeevastu kontserdi apsakas, mil heli jäi mõneks minutiks ilma videota, oli üks etenduse õnnestunumaid hetki, põhjendades suuresti live-situatsiooni vajalikkust ja näitlikustades selle eeliseid. Ühest küljest andis see puhkust ühetooniliseks kiskuvast videopildi-heli-esineja suhtest, mõjudes virgutavalt ja andes ruumi kujutlusvõimele. Ühtlasi oli põnev tajuda, et lavategevuse ettenähtud korras juhtus midagi ettearvamatut, ja jälgida esineja enda reaktsiooni.\nKokkuvõtteks võib öelda, et muusika tundub teiste kunstivaldkondadega võrreldes konservatiivsem ning näib, et paljut, mida kontseptuaalse kunsti vallas on juba ammu tehtud, võib muusikamaailmas veel uuesti avastada: kontseptualistina saab muusikaringkondades tee rajajana n-ö jalgratast leiutada. Õnneks ei puudu Johannes Kreidleri sellealases tegevuses huumor.\n1 Kasutusel Brian Kane’i artiklis „Aspect and Ascription in the Music of Mathias Spahlinger“. Contemporary Music Review, nr 27(6), lk 595–609.\n2 Mathias Spahlinger, This is the time of conceptive ideologies no longer. – Contemporary Music Review 2008, nr 27(6), lk 579–594.