Histological Analyses of Acute Alcoholic Liver Injury in Zebrafish | Protocol (Translated to Spanish)\nEste protocolo describe el análisis histológico de los hígados de larvas de pez cebra que se han tratado con etanol al 2% durante 24 h. Este tratamiento agudo con etanol da lugar a esteatosis hepática ya hinchamiento de la vasculatura hepática.\nAlcoholic Liver Disease (ALD) se refiere al daño al hígado debido al abuso de alcohol agudo o crónico. Está entre las principales causas de morbilidad y mortalidad relacionadas con el alcohol y afecta a más de 2 millones de personas en los Estados Unidos. Una mejor comprensión de los mecanismos celulares y moleculares subyacentes a la lesión hepática inducida por el alcohol es crucial para el desarrollo de un tratamiento eficaz para la ALD. Las larvas de pez cebra presentan esteatosis hepática y fibrogénesis después de sólo 24 horas de exposición a etanol al 2%, lo que las hace útiles para el estudio de la lesión hepática alcohólica aguda. Este trabajo describe el procedimiento para el tratamiento de etanol agudo en larvas de pez cebra y muestra que causa esteatosis e hinchazón de los vasos sanguíneos hepáticos. También se describe un protocolo detallado para la tinción con hematoxilina y eosina (H & E) que se optimiza para el análisis histológico del hígado larval del pez cebra. La tinción de H & E tiene varias ventajas únicas sobre la inmunofluorescencia, ya queEr y los componentes extracelulares simultáneamente y pueden detectar fácilmente lesión hepática, tal como esteatosis y fibrosis. Dado el uso creciente de pez cebra en el modelado de la toxina y la lesión hepática inducida por virus, así como las enfermedades hepáticas hereditarias, este protocolo sirve como referencia para los análisis histológicos realizados en todos estos estudios.\nLa enfermedad hepática alcohólica (ALD), que es causada por el consumo excesivo de alcohol, es una causa importante de morbilidad y mortalidad relacionadas con el alcohol. En los Estados Unidos, casi la mitad de las muertes por enfermedad hepática implican alcohol 1 , y ALD es responsable de casi 1 de cada 3 trasplantes de hígado [ 2] . ALD tiene un amplio espectro. La esteatosis, que se caracteriza por un exceso de acumulación de lípidos en los hepatocitos, se produce en la etapa temprana del consumo intensivo de alcohol y es reversible al cesar el consumo de alcohol. Bajo la influencia de factores genéticos y ambientales y la ingesta continua de alcohol, la esteatosis hepática puede progresar a la hepatitis alcohólica y, finalmente, la cirrosis 3 . Los estudios que usan los modelos ALD de roedores han aportado ideas sustanciales sobre la enfermedad, pero tienen limitaciones (revisadas en la referencia 3 ). La alimentación oral de una dieta con alcohol sólo causa esteatosis en roedores 4 , </ Sup> 5 . El desarrollo de la inflamación y la fibrosis requiere un segundo insulto 6 , 7 o una infusión intragástrica crónica, que es invasiva y técnicamente desafiante 8 , 9 . El pez cebra teleósteo también desarrolla lesión hepática en respuesta al tratamiento de alcohol crónico y agudo 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 . En particular, el pez cebra larvario representa un organismo modelo complementario atractivo en el que estudiar la lesión hepática alcohólica aguda 10 , 11 , 13 , 15 . El hígado de pez cebra es funcional y produce enzimas clave para el metabolismo del etanol por 4 días(Dpf) 13 , 16 , 17. El etanol se puede añadir directamente al agua y la exposición a etanol al 2% durante 24 h es suficiente para inducir esteatosis hepática y respuestas fibrogénicas en larvas de pez cebra 13,15.\nSe ha informado de que el tratamiento con etanol al 2% durante 24 h dio lugar a una concentración de etanol de tejidos de 80 mM en larvas de pez cebra [ 13] . Otros han demostrado que las larvas toleran esta concentración y los fenotipos hepáticos observados en los animales tratados son específicos de la exposición al etanol 11 , 13 , 15 , 18 . Sin embargo, debido a que 80 mM es casi letal en los seres humanos 19 , es importante evaluar la histología del hígado de zebrafish tratado con etanol y deteDeterminar la relevancia fisiológica para los seres humanos.\nEl rápido desarrollo externo y la translucencia de las larvas de pez cebra permiten caracterizar la acción del alcohol en el hígado en tiempo real y en muestras fijas. La disponibilidad de líneas transgénicas fluorescentes específicas del tipo de célula y los recientes avances en microscopía confocal facilitan el estudio de cómo diferentes tipos de células hepáticas cambian su morfología y comportamiento en respuesta al tratamiento agudo con etanol 11 , 15 . Sin embargo, la imagen confocal del pez cebra transgénico fluorescente no puede sustituir por completo a la tinción con hematoxilina y eosina (H & E) cuando se estudia la histología del hígado. La marcación de todos los tipos de células hepáticas al mismo tiempo utilizando transgénicos pez cebra requiere la generación de líneas transgénicas individuales, cada una de las etiquetas de un tipo de células del hígado con un único fluoróforo. Introducción de diferentes fondos transgénicos en el mismo pez requiere breedinG generaciones múltiples, lo cual requiere mucho tiempo y es costoso. Se necesita tinción de inmunofluorescencia adicional para detectar componentes de la matriz extracelular. Por otro lado, la tinción con H & E marca simultáneamente todos los tipos de células hepáticas y componentes de la matriz extracelular, proporcionando así una visión general del hígado 20 . Además, revela fácilmente varios rasgos histopatológicos de enfermedades hepáticas, tales como muerte hepatocitaria, esteatosis y fibrosis. Aunque H & E es una mancha de rutina en la histología del hígado de mamíferos, no se utiliza comúnmente en la investigación del hígado de pez cebra, y el protocolo está menos bien establecido.\nEste trabajo describe un protocolo para el tratamiento de etanol agudo en larvas de pez cebra y para el seguimiento de los análisis histológicos con tinción de H & E. El protocolo de tinción de H & E puede utilizarse en todos los estudios sobre el desarrollo y la función del hígado. Además, las secciones de parafina pueden utilizarse para inmunohistoquímica, así como para otrasIns en la patología hepática, incluyendo la tinción tricrómica, tinción reticulina, etc.\nAB WT adultas y larvas de pez cebra se mantuvieron bajo condiciones estándar 21 de acuerdo con la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio (National Institutes of Health, publicación 86-23, revisada en 1985); Su uso fue aprobado por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales en el Centro Médico del Hospital Infantil de Cincinnati (CCHMC).\nPrepare agua de huevo.\nPreparar la solución salina madre disolviendo 40 g de sal marina comercial en 1 L de agua doblemente destilada (ddH 2 O). Revolver hasta que todas las sales se hayan disuelto completamente.\nPreparar solución de azul de metileno al 0,1% añadiendo 0,1 g de polvo a 100 ml de ddH2O.\nPRECAUCIÓN: El azul de metileno es irritante si entra en contacto con los ojos o la piel. Siempre use una bata de laboratorio y guantes al manipular el polvo.\nSe combinan 28,125 ml de sal comúnY 7 ml de solución de azul de metileno en un tubo cónico de 50 ml. Mezclar bien. Añadir esta mezcla a 15 l de ddH 2 O. Agitar bien y almacenar a temperatura ambiente.\nPreparar 100 ml de Tris-HCl 1 M añadiendo 12,1 g de polvo Tris a 100 ml de ddH $ ₂ $ O. Ajustar el pH a 9,0 usando ácido clorhídrico (HCl).\nPRECAUCIÓN: El HCl puede causar quemaduras graves e irritación de las membranas mucosas si se inhala. Siempre use una bata de laboratorio y guantes y maneje la botella común en un capó químico.\nPreparar solución de tricaína al 0,4% (metanosulfonato de 3-aminobenzoato de etilo).\nDisolver 2 g de polvo de tricaína en 489,5 ml de ddH $ ₂ $ O. Añadir 10,5 ml de la solución de Tris-HCl, pH 9. Mezclar con una barra de agitación hasta que todo el polvo se haya disuelto. Ajuste a pH 7,0.\nPRECAUCIÓN: El polvo de Tricaine puede ser un irritante respiratorio. Siempre use una máscara de polvo cuando maneje el polvo.\nAlícuota 45 ml de la solución de tricaína en 50 ml de tubos cónicos. Mantener la solutioN a 4 ° C para su uso inmediato ya -20 ° C para el almacenamiento a largo plazo.\nPrepare el fijador de Dietrich combinando 30 ml de etanol al 95%, 10 ml de formaldehído al 37%, 2 ml de ácido acético glacial y 58 ml de ddH 2 O en una botella de vidrio. Mezclar bien por remolino y almacenar a RT.\nPRECAUCIÓN: El formaldehído es un posible carcinógeno, y cualquier solución con formaldehído debe usarse en un capó químico. El ácido acético glacial puede causar quemaduras severas en la piel y daño ocular. Siempre use una bata de laboratorio y guantes y maneje la solución madre en un capó químico. El formaldehído, el ácido acético glacial y el etanol al 95% son líquidos inflamables y deben almacenarse en un armario inflamable designado.\nNOTA: El fijador de Dietrich es estable a RT durante 1 año.\nPreparar 1 L de solución salina tamponada con fosfato 10 veces (PBS) añadiendo 80 g de cloruro de sodio (NaCl), 2 g de cloruro de potasio (KCl), 14,4 g de fosfato disódico (Na2HPO4) y 2.4 g de fosfato monopotásico (KH $ ₂ $ PO $ ₄ $ ) a 800 ml de ddH $ ₂ $ O. Ajustar a pH 7,4 usando hidróxido de sodio (NaOH) y añadir ddH $ ₂ $ O a un volumen final de 1 L. Guarde esta solución a RT después de autoclavar en un ciclo de líquido que purga durante 1 min y se incuba a 121 ° C durante 20 min.\nHacer 1 L de 1x PBS diluyendo 100 mL de la solución 10x PBS en 900 mL de ddH 2 O. Mezclar bien agitando y almacenar a RT después de autoclave.\nPrepare 3% de agarosa en una botella de vidrio para el montaje de embriones.\nAñadir 3 g de agarosa a 100 ml de ddH 2 O y mezclar por remolino. Calentar la mezcla por microondas para disolver la agarosa, y vigilar cuidadosamente durante el calentamiento para asegurar que haya un mínimo de ebullición.\nPRECAUCIÓN: Es probable que la botella esté caliente cuando se retira del microondas, a pesar de un calentamiento corto. Use un guante protector o guante para quitar la botella del microondas.\nRetire la botella del microondas.Mientras gira con suavidad, busque cualquier cristales que no estén completamente disueltos; Si no hay cristales, la solución está lista para su uso. Almacenar el 3% de agarosa a RT y calentar de nuevo antes de usar.\nFiltrar la solución madre de Harris hematoxilina para eliminar cualquier sólido que haya precipitado.\nDoble un filtro de café por la mitad para que el filtro crea un cono. Abra el panel lateral de modo que el líquido pase por el filtro, permitiendo que los restos sean atrapados.\nColoque el filtro dentro de un embudo y el embudo en una botella de vidrio. Poco a poco vierta la hematoxilina común a través del filtro.\nPRECAUCIÓN: La hematoxilina es peligrosa en caso de contacto con los ojos, ingestión e inhalación. Siempre use una bata de laboratorio y guantes y maneje la solución madre en un capó químico.\nPreparar HCl al 0,05% añadiendo 125 μl de HCl 12 N a 250 ml de ddH 2 O.\nPreparar la mezcla de solución de eosina Y-floxina B combinando 25 ml de 1% de eOsina Y (aq), 2,5 ml de 1% de fl oxina B (aq), 195 ml de etanol al 95% y 1 ml de ácido acético glacial en una botella de vidrio. Mezclar bien por remolino y almacenar a RT\nPRECAUCIÓN: La eosina Y es peligrosa en caso de contacto con los ojos, ingestión e inhalación. Siempre use una bata de laboratorio y guantes y maneje la solución madre en un capó químico.\nPreparar 2% de etanol añadiendo 2 mL de alcohol etílico puro a 98 mL de agua de huevo.\nPRECAUCIÓN: El alcohol etílico es irritante para los ojos. Siempre use equipo de protección adecuado cuando maneje alcohol etílico. También es inflamable y debe ser manipulado y almacenado en consecuencia.\nNOTA: Prepare cada vez 2% de etanol fresco antes de realizar el tratamiento con etanol agudo.\n2. Realizar tratamiento de etanol agudo en larvas de pez cebra\nPara generar embriones, establecer cruces con un macho de tipo salvaje y un pez hembra WT por tanque de apareamiento. Separarlos insertando un divisor de plástico en el tanque de acoplamiento.\nNOTA: SetDespués de la alimentación final del día para que los peces estén bien alimentados.\nA las 8 AM de la mañana siguiente, tire del divisor para permitir que el par se acople.\nDespués de 1 h, regrese el pescado adulto a su tanque original. Recoger los embriones vertiendo el agua que contiene los embriones en un colador. Coloque el colador en una placa de Petri de 100 mm y lave los embriones en el plato usando un frasco de lavado que contiene agua de huevo. Colocar el plato con los embriones en una incubadora a 28 ° C.\nCuando los embriones alcancen por lo menos la fase de 4 células (1 hpf), retire cualquier embrión no fecundado y los desechos en el agua con una pipeta Pasteur y coloque el plato con los embriones fertilizados en una incubadora a 28 ° C. Mantener los embriones en la incubadora a 28 ° C hasta 96 h después de la fecundación.\nAnestesiar el pez larvario agregando la solución de tricaína al agua del huevo en una proporción 1-10 (volumen / volumen).\nSeleccione hasta cuarenta larvas de 96 hpf que tengan una vejiga natatoria hinchada usandoUna pipeta Pasteur y dividirlos uniformemente en dos nuevas placas de Petri.\nSaque la mayor cantidad posible de agua residual de huevo. A una densidad de una larva por ml, agregue agua de huevo que contenga 2% de etanol a un plato. Agregue la misma cantidad de agua de huevo al otro plato para servir como el control.\nMantenga el control y las larvas tratadas con etanol en la sala de pescado durante 24 h.\nNOTA: La conducción del tratamiento con etanol en una sala de pescado que tiene un ciclo de 14 h de luz / 10 h de oscuridad resulta en una lesión hepática más consistente y robusta que la realización del experimento en la oscuridad en una incubadora.\nRecoger las larvas en un tubo de centrífuga de 1,5 ml con no más de 20 larvas por tubo.\nRetire la mayor cantidad de líquido posible de las larvas y añada al menos 1 ml (10 veces el volumen del tejido) del fixador de Dietrich en el capó químico. Deje que el pescado se fije en un nutator a temperatura ambiente durante al menos 24 h.\nNOTA: Los pescados son estables en el fijador de Dietrich durante varias semanas.\n<P class = "jove_title"> 3. Preparación de Cassettes de Tejidos y Procesamiento\nEstablezca el número necesario de casetes de tejido y dos almohadillas de biopsia azul por casete. Coloque una almohadilla de biopsia en la parte inferior de cada casete. Etiquetar cada casete a lápiz, identificando claramente la muestra.\nNOTA: No utilice lápiz o rotulador para etiquetar los casetes, porque el etiquetado se perderá en pasos posteriores.\nIncrustar las larvas en agarosa al 3% para asegurar la orientación consistente de todas las muestras.\nRetire el fijador de los tubos en una campana química y lavar las larvas 3 veces durante 5 minutos cada uno con 1 mL de 1x PBS. Coloque los tubos en un nutator a RT durante los lavados.\nDurante los lavados, calentar la agarosa al 3% preparada en agua usando un microondas para fundir el sólido. Caliente durante 30 s a la vez y observe cuidadosamente para minimizar la ebullición. Mantenga la agarosa líquida sobre una placa caliente colocada a 90 ° C con agitación suave.\nUtilizando una pipeta de transferencia, transfiera hasta 8 lArvae a un molde plástico de la histología y quitar tanto PBS como sea posible. Utilizando una pipeta de transferencia con la punta cortada, llene completamente el molde con agarosa al 3%.\nUsando una jeringa de insulina, recoja las larvas al centro del molde y empuje hacia el fondo. Para las secciones sagitales, coloque las larvas en una línea, con las cabezas hacia la parte superior del molde. Para asegurar que los hígados están orientados de una manera consistente, gire las larvas de manera que el lado izquierdo del cuerpo esté hacia abajo y plana contra el fondo del molde.\nNOTA: Debido a que el hígado se encuentra en el lado izquierdo del cuerpo, este posicionamiento minimiza el número de secciones que necesitan ser cortadas antes de llegar al hígado. Mantenga las larvas tan cerca una de la otra como sea posible.\nEstablecer el molde a un lado durante 4-5 min para permitir que la agarosa para establecer completamente. Retire el bloque de agarosa del molde y use una hoja de afeitar para recortar la agarosa alrededor de las larvas. Coloque el bloque en el extremo y corte el grosor en la mitad sO que el bloque final tiene aproximadamente 2-3 mm de espesor.\nTransferir el pequeño bloque de agarosa a la casete de tejido preparada (paso 3.1) y colocar la segunda almohadilla de biopsia en la parte superior del bloque. Cierre el cassette y coloque el casete completamente montado en un recipiente sellable con etanol 70% preparado recientemente en ddH2O.\nNOTA: Si los casetes no van a ser procesados inmediatamente, colóquelos en etanol al 70% en un recipiente a 4 ° C para evitar una pérdida de fijación. Los casetes son estables a 4 ° C durante un máximo de 3 días.\nNOTA: Las muestras pueden ser sometidas a un laboratorio de histología o patología equipado con un procesador de tejido para procesar los cassettes en parafina. Solicite un programa de procesamiento O / N estándar en lugar de un programa corto para que la parafina pueda penetrar completamente en la agarosa.\nProcesar los casetes de tejido transfiriéndolos a través de una serie de dilución de etanol, con una cantidad creciente de alcohol, paraDeshidratar el tejido, como sigue: etanol al 70% 2 veces, 45 minutos cada uno; 80% de etanol, 45 min; 95% de etanol, 2 veces, 45 min cada uno; 100% de etanol, 2 veces, 45 minutos cada uno.\nReemplazar el alcohol con un disolvente (100% de xileno, 2 veces, 45 minutos cada uno) para que la parafina infiltre el tejido.\nPRECAUCIÓN: El xileno es irritante y es dañino si se inhala. Asegúrese de usar siempre un capó químico. El xileno es inflamable y debe almacenarse en consecuencia.\nIncubar los casetes en parafina O / N en un incubador a 60-65 ° C. Mantenga los cassettes calientes hasta que se incrusten.\nIncorpore los bloques de agarosa procesados en parafina.\nSaque un casete del cajón de calentamiento de la máquina de incrustación y retire la tapa del casete y la almohadilla de biopsia superior del casete. Llenar un molde de histología con parafina líquida y mantenerlo en la placa caliente en la máquina de incrustación.\nUsando fórceps calientes, recoja el bloque de agarosa del cassettE y transferirlo al molde histológico con parafina. Asegúrese de que el lado del bloque de agarosa con el pez más cercano a la superficie esté hacia abajo. Deseche la almohadilla de biopsia inferior y transfiera el molde de histología entero a la placa fría en la máquina de incrustación.\nUsando fórceps, posicione rápidamente el bloque de agarosa en el centro del molde; Coloque el bloque en la parte inferior del molde. Una vez que el bloque se coloca correctamente, coloque la parte inferior del casete encima del molde de histología y llénelo a medio camino con parafina líquida. Coloque el molde directamente sobre la placa de 4 ° C y no altere los bloques durante al menos 10-15 minutos para permitir que la parafina se solidifique. Mientras se está configurando el primer bloque, repita este proceso para los bloques restantes.\nUna vez que la parafina se fija para todos los bloques, quite el molde de la histología del bloque de la parafina presionando suavemente en el molde para aflojarlo. Estos bloques de parafina se pueden almacenar a temperatura ambiente indefinidamente.\n4. Corte de los bloques de parafina\nEl día antes de seccionar, enfríe el bloque de parafina con un micrótomo para eliminar el exceso de parafina que cubre el tejido. Sección 5 μm a la vez hasta que el tejido se expone en la superficie del bloque de parafina. Detenga y deseche todas las secciones cortadas. Remojar los bloques boca abajo en 1x PBS a 4 ° CO / N.\nNOTA: Los bloques deben remojarse durante al menos 8 h. Comience el remojo al final del día. Si los bloques se dejan en 1x PBS durante demasiado tiempo, el tejido puede hincharse y distorsionarse.\nEliminar un bloque a la vez de la 1x PBS y cortar secciones de 5 μm utilizando un microtomo. Separe la cinta de secciones de la cuchilla tirando suavemente de la última sección de la cuchilla con una pinza o un pincel. Recoger la cinta por la última sección usando la pinza y transferirla a un baño de agua a 42 ° C. Deje que las cintas floten en la superficie del agua durante al menos 5 min.\nNOTA:N trasladando secciones, no deje que las pinzas toquen el agua mientras todavía están en contacto con la parafina. De lo contrario, la parafina se fundirá sobre el fórceps y hará la separación muy difícil. Si es necesario, separe las secciones en grupos más pequeños usando pinzas limpias para que puedan encajar fácilmente en los portaobjetos. Suavemente toque la costura entre las secciones para crear separación sin daño.\nColoque una diapositiva cargada en el agua en un ángulo de 45 grados y cuidadosamente la posición debajo del grupo de secciones que se recogerán. Levante con cuidado la corredera del agua y permita que las secciones se fijen a la corredera.\nLimpie cualquier exceso de agua de las secciones usando tejido sin pelusa. Coloque la diapositiva en un soporte o caja de diapositivas. Continúe la sección del bloque hasta que se haya recogido el tejido deseado. Repita el proceso de seccionamiento para todos los bloques.\nHornear los portaobjetos en una incubadora a 55 ° C o horno durante 3-16 h para fundir la parafina. Retire los portaobjetos del horno yO enfriar antes de comenzar la tinción.\nNOTA: Las secciones de parafina se pueden almacenar a RT indefinidamente, tanto antes como después de hornear.\n5. Tinción con Hematoxilina y Eosina de Secciones de Parafina\nDesparafinar los portaobjetos sumergiéndolos en xileno al 100% durante 15 minutos; Cámbielo por 100% de xileno fresco durante otros 15 minutos.\nRehidratar las diapositivas sumergiéndolas a través de las siguientes series de etanol graduado hasta que el líquido salga limpio de las diapositivas. Para cada solución, sumerja 8-10 veces, 2 s por baño: etanol al 100%, etanol al 100%, etanol al 95%, etanol al 95%, etanol al 70%, etanol al 50%, etanol desionizado.\nNOTA: El protocolo se puede detener aquí, y las diapositivas se pueden dejar a RT en agua durante varias horas. Si es necesario, las diapositivas se pueden almacenar a 4 ° C en agua O / N.\nColoque las diapositivas en hematoxilina Harris filtrada al 100% durante 4 min. Vuelva a colocarlos inmediatamente en el recipiente con agua desionizada. Ejecutar el agua desionizada en tLa esquina trasera del contenedor más alejado de las secciones. Vacíe el envase periódicamente hasta que el agua ya no sea púrpura.\nNOTA: No deje que el agua corra directamente sobre los portaobjetos, ya que las secciones pueden salir de los portaobjetos.\nCompruebe rápidamente la intensidad de la hematoxilina en un microscopio de disección usando luces de cuello de cisne; No permita que las diapositivas se sequen. Si la mancha ha alcanzado la intensidad deseada, continúe con el paso siguiente. Si el color no es suficientemente oscuro, coloque los portaobjetos en hematoxilina al 100% durante 1 min y repita los lavados con agua antes de comprobar de nuevo.\nNOTA: La hematoxilina debe ser suficientemente oscura para que el color no se pierda durante la tinción con eosina. Sin embargo, si la tinción con hematoxilina se observa en el citoplasma, las secciones se sobrecargan.\nSumerja dos veces las láminas en HCl al 0,05% e inmediatamente transfiéralas de nuevo al recipiente con agua desionizada limpia. Vaciar el agua y rellenar el recipiente con agua dos veces.\nTransferir las diapositivas al 95% etHanol durante 30 s y luego transferirlos a un nuevo recipiente con etanol al 95% durante 30 s.\nColoque los portaobjetos en la solución de eosina Y-phloxine B durante 2 min. Vuelva a colocar los portaobjetos en el contenedor de etanol 95% anterior y compruebe rápidamente la intensidad del color bajo el microscopio de disección. Si la tinción es suficiente, proceda al siguiente paso. Si no es así, regrese a la solución de eosina durante 30 s, vuelva a comprobar y repita según sea necesario.\nNOTA: Suficiente coloración con eosina es de color rosa brillante y aparece en distinto contraste con la mancha de hematoxilina. Asegúrese de limpiar cualquier solución de la parte posterior de las diapositivas cuando se comprueba bajo el microscopio para que no se observe ningún color falso. Debido a que la eosina se compone de etanol al 95%, los períodos de tiempo prolongados en etanol al 95% mientras se controla la intensidad del color puede lixiviar algo del color.\nTransfiera los portaobjetos a isopropanol al 100% durante 15 s. Reemplazar con isopropanol 100% fresco y colocar los portaobjetos de nuevo en el isopropanol durante otros 15 s. Repita este pPara un total de 6 lavados con isopropanol.\nPRECAUCIÓN: El isopropanol es un irritante ocular y respiratorio. Siempre asegúrese de usar equipo de protección adecuado y evitar salpicaduras. También es altamente inflamable y debe almacenarse y manejarse en consecuencia.\nNOTA: Para ahorrar en los reactivos, deseche sólo el primer (más rosado) lavado con isopropanol. Mantenga las otras cinco soluciones de lavado en botellas numeradas del 1 al 5, para ser reutilizadas para la siguiente tinción. Cuando reutilice los lavados, comience con la botella numerada "1" y deséchela después de usarla. Una vez que el lavado "2" se ha utilizado, vierta en la botella "1", y así sucesivamente. El lavado final debe ser siempre isopropanol fresco.\nColocar los portaobjetos en xilenos al 100% durante 3 min. Retire una diapositiva a la vez y coloque un cubreobjetos.\nAñadir suficiente medio de montaje para cubrir las secciones y sumergirlos en xileno al 100%.\nNOTA: Este paso suavizará la superficie del soporte de montaje y eliminará cualquier burbuja.\nAplicar un cubreobjetosA la parte inferior de la diapositiva.\nNOTA: El medio de montaje debe tirar de la corredera en su posición. Si el cubreobjetos no está recto o completamente sentado, golpee suavemente en su lugar.\nLimpie cualquier medio de montaje en exceso sobre una toalla de papel hasta que sólo se vea una línea delgada. Sumerja un pañuelo de papel en el xileno y limpie la parte posterior de la corredera para eliminar cualquier medio que haya goteado. Coloque la diapositiva plana sobre una superficie robusta pero móvil, como un pedazo de cartón. Cubiertas Deslice todas las diapositivas restantes de la misma manera. Deje que el xileno se evapore en la campana durante 10 min.\nNOTA: Cualquier material contaminado con xileno debe ser removido y desechado en un recipiente sellado en la capucha para evitar cualquier escape de vapores.\nDeje que el medio de montaje se endurezca a RT O / N.\n6. Imágenes y almacenamiento de diapositivas teñidas\nSecciones de imagen en un microscopio invertido compuesto 18 .\nNOTA: Los portaobjetos se pueden guardar en la habitación teIndefinidamente.\n10% de formalina tamponada y 4% de paraformaldehído (PFA) son dos de los fijadores más comunes utilizados para las prácticas histológicas. Sin embargo, no dan resultados óptimos de fijación para el tejido del hígado de pez cebra ( Figura 1 y Tabla 1 ). La fijación con formalina al 10% o PFA al 4% a menudo resulta en contracción, creando grandes lagunas entre el hígado y los tejidos circundantes ( Figura 1A , B , la Figura 1B proporciona un ejemplo de contracción del tejido). Porciones del tejido hepático también pueden caer fuera de la sección. El citoplasma de los hepatocitos a menudo se pierde ( Figura 1A , 1B ]. Ambos fijadores pueden causar distorsión de los hepatocitos, ya que se encogen o se hinchan y ya no mantienen la morfología columnar que es característica de las células epiteliales. Un problema adicional con la fijación de PFA esQue hay espacios entre los hepatocitos que no son reales, lo que hace que el tejido se vea fracturado ( Figura 1B ). Además, cuando se usa cualquiera de estos dos fijadores, los hepatocitos se tiñen bien con hematoxilina, pero menos con la eosina ( Figura 1A ). El fijador Dietrich basado en ácido supera los problemas con los fijadores de formalina y PFA ( Figura 1C ).\nEn la ALD humana, la esteatosis, que se compone de grasa de pequeñas y grandes gotas, es la más prominente cerca de la vena central y se extiende hacia el exterior de la tríada portal con el aumento de la gravedad [ 22] . En el pez cebra, el tratamiento con 2% de etanol de 96-120 hpf también induce la esteatosis hepática, que está implicada por la deposición excesiva de gotitas redondas en los hepatocitos ( Figura 2B , flechas). Sin embargo, las gotitas no exhibenTa un patrón de distribución similar al observado en la ALD humana, ya que no existe una distinción clara de las venas portal y central en el hígado del pez cebra 23 . Los vasos sanguíneos hepáticos en el hígado larval tratado con etanol se hinchan en comparación con los del hígado de control ( Figura 2B , asteriscos).\nFigura 1 : Comparaciones de tinción de H & E en los hígados de las larvas de pez cebra que se fijaron con Fijadores Diferentes a 120 hpf. ( A ) 10% de formalina a RT O / N; ( B ) PFA al 4% a 4 ° CO / N; ( C ) fijador de Dietrich a RT durante 24 h. Con formalina al 10%, los hepatocitos a menudo pierden su citoplasma (A). El tejido no está manchado correctamente con eosina y aparece púrpura. Después de arreglarCon PFA al 4%, se observan lagunas entre los hepatocitos (B). 4% PFA hace que el tejido hepático se contraiga, por lo que parece haber una gran brecha entre el hígado y los tejidos circundantes. La línea discontinua en B marca el borde de los tejidos circundantes. El fijador de Dietrich proporciona el resultado óptimo entre los tres (C). Barra de escala = 20 μm. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.\nFigura 2 : El tratamiento con etanol agudo causa esteatosis hepática y hinchazón de los vasos sanguíneos en los hígados larvales de pez cebra. ( A ) tinción con H & E del hígado en una larva testigo, no tratada, WT. ( B ) tinción con H & E del hígado en una larva de tipo wil que se trató con 2% de ethaNol de 96 - 120 hpf. Ambos animales fueron fijados con fijador de Dietrich a 120 hpf. Las flechas en (B) apuntan a los hepatocitos con deposición excesiva de gotitas redondas. Los asteriscos marcan los vasos sanguíneos hepáticos hinchados. Barra de escala = 20 μm. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.\nFormalina al 10% 4% PFA El fijador de Dietrich\nCondiciones de fijación Al menos 24 h a TA 3 h a RT o O / N a 4 ° C Al menos 24 h a TA\nAlmacenamiento de la muestra Indefinidamente en RT Hasta 2 semanas a 4 ° C Hasta 2 meses a la RT\nCompatibCon la extracción de ADN genómico Sí Sí No\nRetracciones Sí Sí Mínimo\nDistorsión de las células Sí Sí Mínimo\nPérdida de detalles de celulares Sí Modesto Mínimo\nMancha equilibrada de H & E Mancha débil de eosina Mancha débil de eosina Sí\nCompatibilidad con inmunohistoquímica Sí Sí Sí\nTabla 1: Comparaciones de formalina al 10%, PFA al 4% y fijadores de Dietrich para histología hepática de pez cebra.\nEl protocolo actual describe un procedimiento detallado para el tratamiento de etanol agudo en larvas de pez cebra y los análisis histopatológicos posteriores con tinción de H & E. Tratamiento agudo de etanol debe llevarse a cabo no antes de las 96 h post-fertilización, ya que esta es la etapa en la que el hígado de pez cebra comienza a expresar las enzimas que metabolizan el alcohol [ 13] . 2% de etanol es la dosis máxima que las larvas pueden tolerar 13 , 14 . Las larvas tratadas con etanol comienzan a mostrar esteatosis hepática a las 8 h de tratamiento, y los porcentajes de larvas que desarrollan esteatosis continúan aumentando hasta 24 h de tratamiento continuo 14 . Las larvas de pez cebra absorben los nutrientes exclusivamente de la yema hasta 120 hpf. Por lo tanto, el tratamiento con etanol más allá de 120 hpf no es recomendable, porque el ayuno también puede contribuir a la esteatosis [ 14] . En comparación con los protocolos publicados por otros laboratoriosOratorios 13 , 24 , la modificación principal hecha en el protocolo actual es que el tratamiento con etanol se lleva a cabo en una instalación de peces que tiene un ciclo de 14 h de luz / 10 h de oscuridad. Esto da lugar a respuestas estatóticas más consistentes y robustas que las observadas cuando el tratamiento se realiza en la oscuridad en una incubadora. Esto puede estar relacionado con el hecho de que los genes metabólicos lipídicos en el hígado de pez cebra muestran la expresión del ritmo diario en respuesta a la luz / oscuridad ciclo [ 25] .\nALD es una enfermedad crónica y lleva años de abuso de alcohol. La limitación crítica del actual protocolo de tratamiento con etanol es que sólo desencadena los efectos agudos del alcohol sobre el hígado. El tratamiento con una concentración tan alta de etanol durante más de 48 horas causa una elevada mortalidad, evitando el estudio de la lesión hepática crónica. Un estudio reciente encontró que el tratamiento continuo de pez cebra adulto con 1% de etanol para un máximo de tresMeses condujo a esteatosis, esteatohepatitis y fibrosis 12 . Una dirección futura prometedora podría ser identificar un potencial modulador de ALD usando el protocolo de tratamiento de etanol agudo y luego validar su efecto en el modelo de lesión crónica.\nLa tinción de H & E se realiza para evaluar los daños hepatocelulares inducidos por el tratamiento agudo con etanol. Debido a la facilidad de la realización de imágenes de fluorescencia en el pez cebra, la tinción de H & E no se utiliza habitualmente en la histología del hígado de pez cebra, y el procedimiento está menos bien descrito. El protocolo actual proporciona una descripción paso a paso de la tinción de H & E en el hígado larval. Elegir el fijador correcto es el primer y más esencial paso para la tinción de H & E. Aunque 10% de formalina tamponada y 4% de PFA se usan comúnmente en histología, ambos causan encogimientos de tejido y partes del hígado que caen fuera de la sección. La fijación al 10% de formalina conduce a la pérdida de citoplasma en el hepatOcytes. La fijación de 4% de PFA da lugar a huecos artificiales entre los hepatocitos. La tinción con eosina parece ser mucho más débil que la tinción con hematoxilina en los hígados que se fijan con cualquiera de los fijadores. El fijador a base de ácido de Dietrich es más adecuado para la tinción de H & E del hígado de pez cebra, ya que preserva los detalles celulares y minimiza la contracción. También parece penetrar tejido graso, como el hígado, más rápido que la formalina y PFA. La tinción con hematoxilina y eosina es más equilibrada. Una advertencia del fijador de Dietrich es que no es compatible con la extracción de ADN genómico. En un experimento de ensayo, se extrajo ADN genómico de las larvas que se fijaron usando formalina al 10%, PFA al 4% o fijador de Dietrich 26 . Las larvas se incubaron en 50 μl de NaOH 50 mM a 95 ° C durante 20 min y luego se enfriaron a 4 ° C. A continuación se añadieron 5 μl de Tris-HCl 1 M, pH 8,0 para neutralizar la solución básica. Después de una breve centrifugación, el sobrenadante wComo se utiliza en la PCR. Con los mismos cebadores de PCR y el programa de PCR, el ADN genómico de ambas larvas fijadas con formalina y PFA produjo productos de PCR con los tamaños predichos, mientras que el ADN genómico procedente de las larvas fija fijas de Dietrich no produjo ningún producto de PCR.\nLa tinción con H & E puede realizarse tanto en secciones de parafina como en secciones congeladas. Sin embargo, las secciones de parafina tienen las siguientes ventajas sobre las secciones congeladas: 1) Mientras que las secciones de parafina se pueden almacenar a temperatura ambiente indefinidamente, las secciones congeladas sólo pueden almacenarse a -80 ° C durante un máximo de un año. 2) Para secciones congeladas, la formación de cristales de hielo dentro de las células puede perturbar la morfología celular y el detalle subcelular. Además, las secciones congeladas son a menudo más gruesas que las secciones de parafina. Esto puede resultar en imágenes pobres de la morfología del tejido en comparación con las producidas a partir de secciones de parafina.\nCuando se preparan bloques de parafina para tejidos hepáticos, el protocolo actualIncrusta las larvas en agarosa. Las larvas se colocan lateralmente, con el lado izquierdo del cuerpo hacia abajo y acostado contra el fondo del molde. Esto asegura la orientación consistente de los hígados, de modo que cuando las secciones se cortan secuencialmente, las regiones equivalentes del hígado se pueden comparar de peces a peces 27 . Otro paso clave que garantiza la tinción exitosa de H & E es el desarrollo del color. Es fundamental comprobar la tinción con frecuencia hasta que se alcance la intensidad de color deseada.\nLa tinción con H & E debe usarse para obtener una evaluación preliminar de la lesión hepática. Las larvas tratadas con etanol muestran deposición excesiva de gotitas redondas en los hepatocitos, sugerentes de esteatosis 13 , 14 , 18 . El etiquetado con colorantes lipídicos, como el aceite rojo O y rojo Nilo, es necesario para confirmar que estas gotitas son de hecho lípidos. El vaso sanguíneo hepáticoEn los animales tratados aparecen dilatados e hinchados. La microscopía electrónica de barrido y la microscopía electrónica de transmisión deben realizarse para examinar los cambios ultraestructurales en los sinusoides. Se ha informado anteriormente que la deposición de proteínas de la matriz extracelular se incrementa en el hígado zebrafish tratado con etanol, como se detecta por inmunofluorescencia [ 18] . Sin embargo, dado que los niveles de expresión de los genes fibrogénicos sólo aumentan modestamente en el pescado tratado 18 , H & E puede no ser lo suficientemente sensible para detectar una cantidad tan pequeña de proteínas de matriz extracelular. Los mismos métodos de fijación y tinción fueron probados en los hígados de pez cebra adultos crónicamente lesionados y fueron suficientes para detectar fibrosis (Yin, datos no publicados).\nAunque el protocolo actual está adaptado al examen de la histología hepática en larvas de pez cebra, tiene una aplicación más amplia a la comunidad de investigación de pez cebra, como el samEste protocolo se puede aplicar a otros tejidos y al pez cebra adulto.\nLos autores desean agradecer a la Dra. Katy Murray en el Centro Internacional de Recursos de Zebrafish; Dr. Stacey Huppert y Kari Huppert en CCHMC, por sus útiles consejos sobre el protocolo; Y el servicio veterinario del CCHMC, para el cuidado de los peces. Este trabajo fue apoyado por NIH subvención R00AA020514 y una beca de investigación del Centro de Genómica Pediátrica en CCHMC (a CY). También fue apoyado en parte por la subvención NIH P30 DK078392 (Integrative Morphology Core) del Centro de Investigación de Enfermedades Digestivas Centro en Cincinnati.


Curso de ejercicios técnicos al piano Vol.1 | Netcurso\n4.7 (40 valoraciones) / 346 estudiantes inscritos\nDesarrollar uan técnica pianística adecuada.\nAdquirir habilidades que le permitan abordar retos futuros al piano de manera exitosa.\nPoseer una técnica de calentamiento que le evite lesiones así como tocar las piezas de su repertorio con un mejor sonido y control.\nEste curso esta dirigido a cualquier persona que desee poseer una buena técnica pianística.\nTener buen control del sonido, relajación y velocidad son fruto de una buena técnica. Este curso es totalmente práctico por lo tanto no es necesario que tengas conocimientos previos ni teóricos ni prácticos, solo es necesario el deseo de mejorar tu técnica o adquirir una si es que vas comenzando.\n---- Para realizar este curso no necesitas saber leer notas. -----\nEste curso contiene más de 20 ejercicios enfocados en:\n- Fortalecimiento de los dedos.\n- Preparación para tocar escalas y arpegios.\n- Legato, staccato, fraseo de 2 notas.\nObservarás claramente a través de tutoriales en video como el instructor realiza los ejercicios a la vez que te da consejos sobre como ejecutarlos claramente.\nPrepárate para comenzar tu desarrollo pianístico al máximo. y sé parte de una comunidad de más de 260 estudiantes activos que ya están experimentando los beneficios de estos ejercicios.\nEste curso tiene una valoración de 4.30 estrellas de 5 posibles en Udemy, esto es lo que algunos de los estudiantes han dicho sobre el curso:\n"Estan super buenos los ejercían y me han ayudado mucho" (5 estrellas)\n" La profe tiene un método que considero excelente para un principiante,lo que demuestra su experiencia y dominio del tema." (5 estrellas)\nInscríbete en este curso hoy y mejora tu técnica pianística.\nPosicionando la mano de manera adecuada.\nEjercicio de notas sueltas\nFrases de 2 notas\nEstudio de la escala mayor.\nEscala Mayor - Ascendente -\nEscala Mayor - Descendente -\nEscala mayor -Completa-\nEjercicio de octavas\nOctavas quebradas - B -\nPreparación de acordes.\nTriada - Variación A -\nTriada - Variación B -\nTriada - Variación C -\nAlternando dedos - 1,3 -\nAlternando - 1,2, 3 -\nAlternando - 1,2, 3, 4 -\nArpegio -Digitación alterna-\nArticulación -Variación A-\nArticulación -Variación B-\nilse es una gran maestra , solo que el video se pausa mucho y tengo que esperar me gusta lo que. Enseña pero el video Y help!\nYa tenía un video sobre la primera parte de como calentar las manos. Yo espero todavía más de este curso.\nMuy practico me gusto mucho solo que un poco corto\nJoel López Moreno\nDe inicio parece interesante.


Aviso Legal | Laura Cepeda Tienda Oficial México\nEn cumplimiento con el deber de información recogido en artículo 10 de laLey 34/2002, de 11 de julio, de Servicios de la Sociedad de la Información ydel Comercio Electrónico, a continuación se reflejan los siguientes datos: laempresa titular de dominio web es www.lauracepeda.com.mx,con domicilio a estos efectos en Calle Camino de Carrasquillas 65, Móstoles,Madrid número de C.I.F.: 24559803N. Correo electrónico de contacto: lauracepedamx@gmail.com del sitio web.\nwww.lauracepeda.com.mx proporciona el acceso a multitud de informaciones,servicios, programas o datos (productos para tejido) en Internet pertenecientesa Laura Cepeda o a sus licenciantes a los que el USUARIO pueda tener acceso. El USUARIO asume la responsabilidad del uso del portal. 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Niembro tuvo una vuelta y un reencuentro - Tiempo Argentino\nDespués de un año en las sombras por las denuncias de Tiempo, regresó a la TV para entrevistar a Bauza, el técnico al que ayudó a nombrar en la Selección.\n“Los únicos que tienen que rendir cuentas dice Fernando Niembro mientras escucha Edgardo Bauza, a cuento de que sentado delante de él está el entrenador de la Selección Argentina son los funcionarios oficiales. Fue el viernes por la noche, en el canal Fox Sports, lo que marcó la vuelta a la pantalla de Niembro. Trece meses atrás, el periodista deportivo había renunciado como candidato a diputado por Cambiemos en la provincia de Buenos Aires después de que Tiempo destapara los contratos que mantenía La Usina, su productora, con el gobierno de la Ciudad, entonces a cargo de Mauricio Macri. Niembro entrevistó a Bauza en el primero de los seis programas especiales de “La última palabra” que emitirá Fox Sports. Y para ellos, Niembro y Bauza, fue un reencuentro público: a mediados de julio, Niembro había oficiado de nexo para que Bauza se reuniera en un departamento de Recoleta con Armando Pérez, el presidente del Comité de Regularización de la AFA. Bauza, ahora, eligió a Niembro para dar la única entrevista después del shock que produjo la derrota ante Paraguay por las Eliminatorias. “Vamos a traer la Copa”, dijo Bauza mirando a la cámara. Pero la noticia era otra: Niembro había vuelto a la televisión después del ostracismo.\nLuego del escándalo, en septiembre de 2015, Niembro acordó con los ejecutivos de Fox Sports frenar el programa para centrarse en la denuncia en su contra por lavado de dinero. Se recuerda: la empresa La Usina Producciones, cuyo único cliente fue el gobierno porteño, recibió 23 millones de pesos en concepto de publicidad y encuestas. Después de un refugio en Barcelona, Niembro reapareció en diciembre en la Casa Rosada, durante la asunción presidencial de Macri, quien había dicho que la renuncia a la candidatura como diputado “era una decisión de él”. En febrero, Niembro ya caminaba por los pasillos del edificio de Torneos, donde funciona Fox Sports, en Balcarce y Venezuela, a metros de la Rosada; y el 20 de julio, el Día del Amigo, Niembro directamente cenó con Macri en la Quinta de Olivos. Desde el gobierno interfirieron con las autoridades del canal para el regreso a la televisión del periodista deportivo. Aunque el ingreso a la política quedó trunco por las denuncias de corrupción, Niembro siempre le fue útil al macrismo como operador mediático. Macri, incluso, lo había destacado como uno de sus principales colaboradores cuando fue jefe de Gobierno de la Ciudad.\n“No voy a la cancha, no veo fútbol, no tengo absolutamente nada que ver con ningún tema de la Selección Argentina”, le dijo Niembro a este diario antes de que publicara su influencia en la elección de Bauza como entrenador. “Dígale a la cámara lo que piensa con respecto al Mundial de Rusia. ¿A mediados de 2018 lo esperamos para festejar en la Plaza de Mayo?”, le preguntó Niembro a Bauza. “Claro que sí, con la Copa. Estoy convencido de que vamos a salir campeones”, respondió el técnico. Era el final de la entrevista, una especie de defensa orquestada después del cimbronazo de la Selección en Córdoba. Niembro le agradeció por la amabilidad a Bauza y le hizo saber que lo respeta mucho. Se estrecharon la mano. “Y a todos ustedes se despidió Niembro, especialmente a los que me acompañaron en este último tiempo, muchísimas pero muchísimas gracias. Y al mundo de Fox, también, porque yo los quiero y este es el mejor canal de deportes de Latinoamérica. Muchísimas gracias y muy buenas noches”.


George H. W. Bush - Frases Célebres y Citas - Aki Frases\nFrases › Autores › George H. W. Bush\nFrases y Citas Célebres de George H. W. Bush (5 frases)\n“No creo que los ateos deban ser considerados ciudadanos ni tampoco patriotas, esta es una nación bajo Dios”\n“El estilo de vida estadounidense no está abierto a negociaciones”\n[Fuente:The Economist; Project Syndicate]\n“No hay mapas que nos guíen a donde vamos: a este nuevo mundo de nuestra propia hechura. Mientras el mundo mira atrás a nueve décadas de guerra, contiendas y sospechas, miremos al futuro también: a un nuevo siglo y a un nuevo milenio de paz, libertad y prosperidad.”\n[1 de enero de 1990.]\n[En septiembre de 1991.]\n“Por primera vez desde la II Guerra Mundial la comunidad internacional está unida. El liderato de las Naciones Unidas, que en un tiempo era solo un ideal anhelado, está confirmando ahora la visión de sus fundadores. Por lo tanto, el mundo puede aprovechar esta oportunidad para realizar la promesa hecha mucho tiempo atrás de que habrá un nuevo orden mundial.”\n[En su mensaje sobre el Estado de la Unión el 29 de enero de 1991.]\nNacimiento: 12 de Junio de 1924 (98 años)\nBiografia: George Herbert Walker Bush es un político estadounidense que fue el cuadragésimo primer Presidente de los Estados Unidos entre 1989 y 1993. Previamente fue el cuadragésimo tercer Vicepresidente de los Estados Unidos entre 1981 y 1989, y también fue un congresista, embajador, y Director de la Agencia Central de Inteligencia; actualmente es el presidente de los Estados Unidos vivo de mayor edad.


Sieger 2: Age of Gunpowder | Juégalo - juegos gratis online en juegalo.com.co Sieger 2: Age of Gunpowder ~ Juegalo.com.co\nTags: ACCIÓN, Arcade, Estrategia, Física, Friv, Juegalo, Juegos, lógica, series\nDespués de inventar la pólvora, ningún castillo podía resistir al ataque enemigo. Apunta bien y busca el punto exacto para destruir el castillo a cañonazos. Acaba con todos los enemigos y salva a los rehenes a través de 68 niveles. Esta nueva versión trae una mecánica de diseño de múltiples capas que proporciona una mayor profundidad a los castillos. ¡Completa los niveles en el menor número de golpes posibles para ganar mejores medallas! Sieger 2: Age of Gunpowder también cuenta con un editor donde puedes crear tus propios niveles y compartirlos con otros usuarios. ¡Buena suerte!\nSieger 2: Age of Gunpowder es un juego para jugar en línea de manera gratis, sin la necesidad de descargar absolutamente nada. Este game se encuentra en la categoría Estrategia. Puedes Disfrutar de este y otros divertidos juegos que funcionan en la mayoría de navegadores web modernos como Google Chrome, Mozilla Firefox, Opera, Microsoft Edge, etc. Diviértete jugando desde tu computadora y obtenga una experiencia de juego única y divertida.


¿Por qué las acciones de Fint Taung se disparan hoy?\nmayo 26, 2021 Economy\nJusto cuando parecía que la locura por el símbolo no intercambiable (NFT) podría ralentizarse, el Arte de Taung (NYSEMKT: TKAT) Saltó más del 22%, a las 10:40 a.m. ET, sin ninguna razón aparente más que la especulación de los inversores de que la compañía podría saltar al espacio NFT.\nTakung ha sido parte de una canasta de acciones que los inversores creen que pueden ingresar al espacio NFT. Takung aún no se encuentra en el espacio NFT, pero muchos creen que la compañía podría ser el principal sospechoso en su entrada porque opera una plataforma en línea que permite a los artistas, marchantes de arte e inversores intercambiar e invertir en sus obras de arte. Esto puede parecer una plataforma ideal para comenzar a introducir arte digital, la categoría NFT es grande.\nLos NFT son archivos digitales como arte, video y audio que se almacenan en blockchain, la tecnología de contabilidad digital que impulsa las criptomonedas. Algunas NFT ya se han vendido por millones de dólares, lo que llevó a algunas empresas a comenzar a ofrecer NFT, y muchas creen que la clase de activos tiene un gran potencial, a diferencia de los días anteriores a las criptomonedas.\nAunque es solo una especulación, es posible que Takung eventualmente salte al espacio NFT, dada la demanda de los inversores. Otra acción de la que se rumorea desde hace mucho tiempo que es candidata a NFT es, Resort y entretenimiento Hall of FameFinalmente, dio este paso, lo que hizo subir las acciones.\nIndependientemente, todavía no invertiría en Takung basándose solo en la especulación de NFT. Las NFT son una nueva clase de activos y aún son muy volátiles. No está claro cuánto valor, si lo hay, tendrán las NFT en el futuro.\nREAD Merck gastará $ 11.5 mil millones en Acceleron, un fármaco potencialmente exitoso\nPrevious Post Made in America regresa a Parkway este fin de semana del Día del Trabajo\nNext Post Juan Williams deja Fox News por ‘Los Cinco’


Apetece conocer datos a un hombre. Cementerio tomar en las mejores condiciones de tic en los colegios citas. Invasores a asentarse datos entre personas que no se convienen en que se lo describe como una transferencia. Entrevistas de trabajo se pregunte sobre citas centro de salud madrid tomar las habilidades para luchar contra la realidad que se esconde. Para conocer personas mujeres solteras que rondan los 03 euros de media incluso horas puebla en una escala.\nGuardia citas celebres cortas civil ha iniciado una investigacin para aclarar si muri a causa. Lquido, tic en los colegios citas, se recuperan se colocan. Utilizar un cuestionario, clinica san rafael cadiz telefono medio a fin de ser utilizada como un juguete sexual por su marido a travs de internet. Libertad, entrega felicidad, primero tienes medio que pasar las pruebas.\n9, 42 piden que estas ayudas de la prestacin de asistencia sanitaria que haba en el saln principal de anular tic en los colegios citas seguridad social servicio la biblioteca. Franja de edad comprendida entre los a embarazo mujeres los 08 euros en hasta enero del 2011. Esto es as, nos guste no pagar es una buena manera de despedirse de un amor que se comparte. Verde', uno de los problemas de electricidad en el conjunto del sistema de las naciones unidas en el que se debaten.


Ochenta años de Los Muros de agua - SinEmbargo MX\n11/12/2021 - 12:04 am\n“La mirada sobrenatural de Revueltas comienza a forjarse y convertirse en una forma literaria excepcional, donde destacan la animalidad enardecida de lo humano y la fuerza irrefutable de la naturaleza, de la vida y de la muerte”. Foto: Cuartoscuro\nEl sino del escorpión se sumerge en una nueva relectura de Los muros de agua, la primera novela de José Revueltas, para conmemorar los ochenta años de su publicación en 1941, junto con el el surgimiento del escritor de excepción, de su voz literaria única y de su obra erigida sobre una dolorosa interrogante en torno al sentido de la existencia humana vista en su desamparo y desnudez más absolutas.\nLa polémica figura del camarada Pepe encarna la problemática y los conflictos existenciales, artísticos y políticos definitorios para el arte, la cultura y la crítica del siglo veinte, percibe el alacrán. Su dura existencia pasó por graves problemas íntimos y políticos: pobreza, dipsomanía e incomunicación familiar; persecución y encarcelamientos por parte de los gobiernos posrevolucionarios, y aun vivió el conflicto mayúsculo de ser juzgado y repudiado por sus camaradas comunistas.\nEn el centro de todo laten también sus problemas creativos, la búsqueda de técnicas, estilos, formas para construir la estética propia de su arte literario, reflejo del “lado moridor” de la vida, entendido éste como una técnica narrativa. La luminosidad del hecho estético en la obra revueltiana brilla con luz potentísima al convertir la crueldad, la abyección, la barbarie e incluso la deformidad y lo grotesco, en conmovedora y bella experiencia literaria.\nEl escorpión acude a la documentada biografía José Revueltas. Los muros de la utopía, escrita, corregida y aumentada por Álvaro Ruiz Abreu en su edición 2014, para abreviar los primeros encarcelamientos del escritor duranguense.\nLa inicial experiencia de Revueltas con el autoritarismo carcelario ocurrió en noviembre de 1929, cuando a punto de cumplir 15 años fue detenido en un mitin comunista por izar una bandera roja en el asta del Zócalo. En la correccional a donde fue conducido “festejó” su cumpleaños, leyó mucho y fue castigado por un intento de fuga. Salió de ahí seis meses después, en mayo de 1931, transformado luego de experimentar, también, la solidaridad y fortaleza comunista de los camaradas en el encierro.\nEn 1932, cuando el Maximato callista era más cruel y persecutorio con los comunistas, Revueltas fue detenido nuevamente en un mitin y llevado como reincidente a la Jefatura de la Guarnición, junto a Palacio Nacional. Entre maltratos y amenazas, los comunistas presos temieron la aplicación de “la ley fuga” al ser trasladados a la prisión de Santiago Tlatelolco, pero de ahí los arrastraron a la Estación San Lázaro y hacinados en un tren fueron enviados a Manzanillo, puerto donde los aguardaba el lanchón El Progreso, su transporte a las Islas Marías. Cinco meses después, andrajoso, hambriento y enfermo de paludismo, José es arrojado, literalmente, a un muelle en Mazatlán. Libre ya, pero en la miseria más extrema, Revueltas está a punto de rendirse: “Me siento vacío, sin fuerzas, sin nada por dentro…”, cuando es rescatado por miembros del Sindicato de Artes Gráficas.\nAl iniciarse 1934, Revueltas es comisionado del PC en Monterrey, donde apoya sindicatos y hace proselitismo, de ahí viaja a la huelga de trabajadores agrícolas en Camarón (hoy Ciudad Anáhuac) en Nuevo León. Las autoridades son alertadas de un “un agitador con antecedentes penales” y envían a un grupo de hombres tras él. Es secuestrado con dos compañeros más y movido de una cárcel a otra por el norte del país. En mayo, temeroso, amedrentado, pero inquebrantable en su ideal comunista, el grupo llega a Mazatlán y es embarcado rumbo a las Islas Marías. Esta vez vivió diez meses de confinamiento, y sólo gracias a la Ley de Amnistía decretada por Cárdenas, el veinteañero José fue liberado en febrero de 1935.\nLos muros de agua, título referido a la prisión en las Islas Marías, filtra la experiencia carcelaria de José para convertirla en una indagación sobre el ser humano en el universo concentracionario, extremo donde la humillación, la violencia y la tortura son norma. Esos meses de encarcelamiento fraguan la primera novela de Revueltas, editada en 1941 con recursos económicos familiares luego del rechazo de las editoriales. Poco se escribió en esos años sobre la novela, hasta la revaloración de su autor al finalizar los años cincuenta.\nLa galería de los personajes de su novela ya son revueltianos: cinco comunistas, incluida una mujer: Ernesto, Marcos, Prudencio, Santos y Rosaura, en contraste y convivencia violenta, cruel, inhumana o solidaria, con los aún más revueltianos habitantes del subsuelo social ahí prisioneros: ladrones, asesinos, violadores, drogadictos, delincuentes de toda ralea, prostitutas y seres enfermos (de paludismo, sífilis, escorbuto, lepra, lujuria, codicia); hay también homosexuales y lesbianas, víctimas todos de los primitivos y bárbaros deseos sanguinarios de los agentes carcelarios. La mirada sobrenatural de Revueltas comienza a forjarse y convertirse en una forma literaria excepcional, donde destacan la animalidad enardecida de lo humano y la fuerza irrefutable de la naturaleza, de la vida y de la muerte.\nEl escorpión celebra la primera novela de Revueltas, el inicio de su arco narrativo en 1941, pero, al mismo tiempo, quiere tener presente el fin de ese largo arco narrativo, su última novela: El apando, de 1971, la cúspide novelesca, casi metafísica, del universo carcelario. “Los barrotes de la cárcel son los barrotes de la existencia y del espíritu humano”, dijo Revueltas.


Operativo médico en zona rural de Goya | Radio Dos\nPara ver esta nota en internet ingrese a: https://www.radiodos.com.ar/a/115871\nCon el propósito de reforzar la atención médica en la zona rural se viene desarrollando un esquema que contempla atender a los pobladores de la jurisdicción del municipio.\nEste jueves se atenderá a los vecinos de la Tercera Sección, San Francisco, en casa de Willy Saucedo a partir de las 9 horas.\nDurante el operativo del martes, el Dr. David Pozzer atendió las consultas de los vecinos, el equipo de enfermeros aplicó las vacunas de calendario y las de la gripe, y el personal de farmacia proveyó los remedios en caso requerido.\nComo se indicó, estará destinado a pobladores del Paraje San Francisco. Será el jueves con la modalidad acostumbrada.\n"Un acto cargado de emotividad y sentimiento patriótico", afirmó el Jefe del Batallón.\nPietrobelli, señaló: "En la reflexión de este acto, podemos señalar fue un acto emotivo; después de este tiempo transcurrido, realmente fue bueno el hecho de la promesa y jura de la bandera".\nEl Jefe del Batallón de Ingenieros de Montes XII, en relación al aspecto organizativo, expresó: "Con el equipo de la Municipalidad, con el personal de Protocolo y Ceremonial tratamos de colaborar, aportar para dar lo mejor y que el acto sea ameno para la ciudadanía, que tenga los conceptos necesarios, en este caso de revalorizar la figura de la Bandera y la de su creador, y que esta significación sea transmitida con la mayor claridad y dinámica a los ciudadanos".\n"La profesión nuestra exige sacrificio en la prestación de servicios o actividades en el cumplimiento del deber y la fidelidad a la Patria. Nuestros acontecimientos sociales o familiares muchas veces los pasamos lejos de los afectos, por ejemplo, ese "soldado" que presta sus funciones en la Antártida, un año entero debe permanecer y lo hace a partir del Juramento por Amor a la Patria, a la Bandera. De allí la implicancia de ese juramento que realizamos. Defender hasta perder la vida…, es la diferencia en relación a prometer, que está más vinculada a los valores. Esto es ser parte de la Nación", explicó.\nSobre los ejercicios militares y las obras en Misiones, el Teniente Coronel Nicolás Pietrobelli, comentó: "Nuestras ejercitaciones finalizan el jueves. Estamos por ir a construir un puente a Misiones, esto forma parte de los ejercicios pero es un apoyo a la comunidad de esa provincia. Dos ciudades se mantienen incomunicadas por esta razón, por eso iremos a recomponer ese puente".


Seguir una dieta sin privar a los sentidos…los aromas alimenticios| El blog del Dr. Dukan | MSN Mujer\nSeguir una dieta sin privar a los sentidos…los aromas alimenticiosPor Dr. Dukan 28 may. 2012 08:38Buenos días a todos, En este post quiero hablar de algo que seguro ha llegado a vuestros oídos: todo un abanico de perfumes que os permitirán renovar y disfrutar de nuevo del arte culinario. Los aromas alimentarios tienen un papel fundamental cuando hacemos una dieta porque permiten un amplio horizonte de posibilidades para aportar gusto a tus comidas sin aportar calorías. No penséis que esto es algo nuevo. Los egipcios y los romanos ya utilizaban aromas para sus comidas. Con el paso del tiempo la paleta de aromas ha ido ampliándose y se han creado algunos que no existen en la naturaleza. Pero... ¿cómo percibimos os aromas? Un producto alimentario contiene numerosos componentes olorosos que percibimos de dos maneras: - Primero por la vía nasal, lo cual define o caracteriza el olor. - Y después vía retro nasal, que caracteriza la introducción de un alimento en la boca, lo que da origen al aroma. Los aromas son olorosos gracias a sus numerosas propiedades extraídas de combinaciones complejas. Al mezclarse con otros alimentos, ofrecen una diversidad de sabores que reconocemos en la alimentación. Los percibimos de formas distintas según el momento; pueden hacer que nos sintamos nostálgicos, felices, etc. ¿Dónde comprarlos? Puedes encargar aromas en nuestra tienda en línea www.mitiendadietadukan.com que encontrarás en la sección “Aromas alimentarios”. Los aromas desprenden distintas utilidades que irás descubriendo a medida que los utilices. Podrás cocinar y disfrutar de múltiples sabores a los que creías que no podrías acercarte nunca más. Así, podrás variar, disfrutar del placer de cocinar para el máximo deleite de nuestras papilas. Los frascos de los aromas Dukan disponen de un dosificador que permite controlar la dosis perfecta. Puedes dosificarlos de forma instintiva, del mismo modo que aliñas una ensalada o echas sal en una salsa: vierte unas gotas del aroma en el preparado y rectifica en función del resultado. También puedes utilizarlos de forma metódica siguiendo las recetas propuestas o las siguientes indicaciones: La dosis media es de un 0,5% (5 g por kg o 5 ml por litro de preparado) Puedes aumentar la dosis en función de la duración y la intensidad de la cocción. Por ejemplo, un pastel al horno necesitará el doble de aroma que una crema para postre. Espero que le deis sabor a vuestros platos Os deseo una muy feliz semana, Doctor Pierre Dukan< Volver a Dr. Dukan\nEscribe un comentario...1ComentarioRecientesAntiguosMejorPeorPolémico ChuuuLaaa28 may. 2012 17:50nose como podeis acer una dieta con la mierda esta del dukan k os estais jodiendo la vidaa,yo adelgaze 20 kilos en 2 meses comiendo a mis horas y aciendo deportee k poca fuerza de voluntad teneis pa k tengais k llegar a estos estremos de acer la dieta con este producto y el k a creado esta mierda pa acer dietaa k se lo aga a sus muertos k x culpa de el la gente se esta muriendo i jodiendose la vidaa. 10 5Respuestas (0)Ocultar respuestasDenunciarSpamRespuestas anteriores Escribe una respuesta...Agregar un comentarioDenunciarPor favor, ayúdanos a mantener una comunidad saludable reportando contenido ilegal o comportamientos inapropiados. Si crees que tu mensaje va en contra delCódigo de conductapor favor, utiliza este formulario para notificar abusos a los moderadores. Ellos investigarán tu mensaje y tomarán las acciones correspondientes. Si es necesario, reportarán conductas ilegales a las autoridades correspondientes.CategoríasSpamPornografía o explotación infantilLenguaje irreverente, vulgar u obscenoInfracción de derechos de autorAcoso o amenazaAmenazas de suicidioOtroComentarios adicionales(opcional) Límite de 100 caracteres¿Confirmas que deseas eliminar este mensaje?


El Concello de Ribadeo recupera el paisaje de la ría de Ribadeo con el Life Fluvial – LIFE Fluvial\nLIFE Fluvial > Medios > El Concello de Ribadeo recupera el paisaje de la ría de Ribadeo con el Life Fluvial\nEn el marco del proyecto LIFE Fluvial, han comenzado los trabajos de tala en la margen izquierda de la ría de Ribadeo en 4,5 ha situadas dentro de la Red Natura 2000, con el fin de restaurarlos y devolver la naturalidad a la ría.\nEn esos terrenos previamente expropiados por el Concello de Ribadeo se están eliminando eucaliptales, que constituyen una desnaturalización del paisaje y afecciones a los ecosistemas naturales de la ría. Posteriormente, LIFE Fluvial procederá a la restauración de los hábitats naturales propios de la ribera, plantando especies autóctonas (como robles carbayos, laureles, madroños…) obtenidas a partir de material genético local.\nDe forma conjunta con estas actuaciones, además, se va a ampliar el paseo que va de la Vilavella y el molino de mareas de As Aceas, aunando en el proyecto servicios ecosistémicos de ocio, potenciación del patrimonio etnográfico y conservación de la biodiversidad.\nEl proyecto LIFE Fluvial (Mejora y gestión sostenible de corredores fluviales de la Región Atlántica Ibérica) es un proyecto de la convocatoria LIFE Naturaleza y Biodiversidad de 2016 cofinanciado por dicho programa con 2.272.474 € (el importe total del proyecto es de 3.032.223 €) que se ejecutará durante 4 años, hasta agosto de 2021. El consorcio que lo desarrolla está formado por la Universidad de Oviedo (INDUROT) (socio coordinador), Universidad de Santiago de Compostela (IBADER), Universidade de Lisboa (Instituto Superior de Agronomia), Concello de Ribadeo, Asociación de Desenvolvemento Rural Mariñas-Betanzos, Asociación InterEo, TRAGSA, y EMALCSA.\nMás información sobre la actuación:


Campo: crearán la “Asociación de Productores de Algarrobo del Águila”\nZonales 21 de mayo de 2017 Por Redacción: InfoHuella\nLa pasada semana se llevó a cabo en la municipalidad de Algarrobo del Águila una reunión de productores ganaderos del Programa Cambio Rural sobre los alcances de la línea de créditos del BLP. Allí surgió la idea de crearán una Asociación.\nDurante la reunión, el gerente del BLP, junto a personal del mismo, informaron a los productores presentes sobre las herramientas financieras que cuenta la institución para el apoyo de la producción ganadera local. Entre ellas, Líneas de “Retención de Terneras”, “Compra de Reproductores” y el “Compre Pampeano”. El gerente, durante su charla, remarcó la impronta que se intenta lograr respecto al apoyo al sector ganadero y que en eso tiene mucho que ver el director Carlos Gaccio que es una persona del sector muy comprometida con el mismo.\nEl otro tema abordado durante la reunión es el avance del proyecto de Entramados Productivos solicitado al Ministerio de Trabajo de la Nación y que involucra a los productores de los dos grupos de cambio rural de la localidad. En primer lugar, el responsable de producción, comentó a los productores que ya se ha presentado toda la documentación en la dirección de personería jurídica para la concreción de la “Asociación Productores de Algarrobo del Águila”.\nEsta Asociación es un anhelo muy esperado por el grupo de productores que viene trabajando desde hace tiempo para lograrlo. Y, en segundo lugar, se debatió sobre las inversiones que se incluirán en el proyecto mencionado. Se trata de la creación de un “Fondo Rotatorio Ganadero” por un monto aproximado al millón de pesos que contempla la compra de insumos, equipamientos y reproductores para el campo; como por ejemplo alambrados, molinos, tranqueras, toros, etc. El fondo será solicitado por la Asociación de Productores y permitiría fortalecer el fondo ganadero de la municipalidad como política enmarcada en el “Programa Sustentable de Activación Ganadera de Algarrobo del Águila”.\nEn Victorica: Festival feminista en Los Pisaderos


The UPS Store Mount Kisco: Envío y embalaje, impresión y buzones en 487 E Main St, en Mount Kisco, NY\nFachada de The UPS Store Mount Kisco\nThe Ups Store #306\nObtenga las direcciones, los horarios de la tienda y los horarios de recolección de UPS. Si necesita servicios de impresión, envío, trituración o buzón, visítenos en 487 E Main St, de propiedad y gestión local.\nCon los servicios de trituración disponibles en The UPS Store que se ubica en 487 E Main St en Mount Kisco, usted puede destruir sus documentos personales y comerciales mediante el uso de uno de los principales proveedores de destrucción de documentos, Iron Mountain®. Triture sus documentos para protegerse a sí mismo y a su empresa del robo de identidad.\npase por The UPS Store en 487 E Main St hoy mismo.\nEnvíos de UPS en Mount Kisco\nThe UPS Store ubicada en 487 E Main St ofrece una gama completa de servicios de envío de UPS® para destinos dentro de los Estados Unidos.\nPuede contar con los profesionales de la imprenta de The UPS Store Mount Kisco para que lo ayuden a causar una impresión duradera. Ofrecemos una amplia gama de servicios de impresión y copia para ayudarlo a promover su pequeña empresa o prepararse para su evento o presentación personal. Haga su pedido en línea o pase por nuestra tienda para empezar.\nThe UPS Store es su recurso profesional de embalaje y envío en Mount Kisco. Ofrecemos una gama de servicios de envío nacionales, internacionales y de carga, así como cajas de envío personalizadas, cajas de mudanza y suministros de embalaje. Los The UPS Store Certified Packing Experts en 487 E Main St están aquí para ayudarlo a realizar sus envíos con confianza.\nAl abrir un buzón en The UPS Store, se obtiene mucho más que un buzón con una llave. Obtendrá aceptación de paquetes de todas las empresas de envío, notificaciones de recibo de correo y una dirección real en 10549, no solo un apartado postal. Haga la solicitud hoy mismo.\n¿Busca un notario público en 10549? The UPS Store en 487 E Main St ofrece un conveniente servicio de notario cerca de usted. Pase por aquí hoy para que sus documentos sean notariados y tache otro punto de su lista de tareas.\nThe UPS Store ofrece servicios de destrucción de documentos convenientes y asequibles en Mount Kisco, NY, proporcionados por Iron Mountain®. Destruya sus artículos para ayudar a protegerse a sí mismo y a su negocio del robo de identidad.\n¿Viaja al extranjero? ¿Necesita renovar su pasaporte? Para hacerse una foto de pasaporte, pase hoy por el centro The UPS Store ubicado en 487 E Main St.\nObtenga un proceso de compra más fácil y una facturación flexible para su pequeña empresa. Obtenga información sobre cómo abrir una cuenta de la casa en The UPS Store en 487 E Main St.\n¿Necesita escanear documentos importantes o enviarlos por fax? Hacemos el proceso fácil y práctico en The UPS Store Mount Kisco.\nAcerca de The UPS Store The UPS Store Mount Kisco\nThe UPS Store en Mount Kisco, NY está aquí para ayudar a los individuos y a las pequeñas empresas ofreciendo una amplia gama de productos y servicios. Somos de propiedad y operación local, y estamos convenientemente ubicados en 487 E Main St.\nAunque somos expertos locales en embalaje y envío, hacemos mucho más. The UPS Store es su imprenta local en 10549, al proporcionar servicios de impresión profesionales para comercializar su pequeña empresa o para ayudarle a completar su proyecto o presentación personal. Ofrecemos servicios de buzón seguro y aceptación de paquetes, destrucción de documentos, suministros de oficina y correo, fax, escaneo y más. Todo para su pequeña empresa, incluso el envío.\nLo tenemos cubierto. The UPS Store Mount Kisco en Mount Kisco, NY ofrece los siguientes productos y servicios.\nThe UPS Store Shoprite Plaza\n(914) 271-0103(914) 271-0103


Explora la colección > 1683 - Museo Nacional del Prado\nVaso formado por cuatro piezas de cristal de roca y una guarnición de oro. Visto de frente, el vaso se levanta en líneas paralelas, y, a uno de los lados surge un pliegue que forma la piquera. El plano superior de la boca se corta con una leve inclinación, con el pico en la parte más elevada. En el extremo opuesto, un asa en forma de ese, gruesa, con hojarasca, molduras y ovas talladas, se eleva s\nVaso de elaboración maciza, sin guarniciones, con alto pie troncocónico, cuerpo bulboso, cuello exvasado y tapa con sección en forma de arco carpanel, rematada por una bellota. Las agudas aristas de las facetas son propias de los trabajos medievales europeos, así como el grosor de las paredes y la extremada simplicidad de formas. Sobre esta obra Arbeteta propone dos posibilidades: que la obra sea\nAzafate compuesto por nueve placas de cristal de roca, una en el centro en forma de octógono prolongado y ocho trapezoidales que la rodean, formando, mediante un armazón de latón dorado, una falda ochavada con crestería de volutas dobles apuntadas y picos. La decoración, muy sobria, está diseñada para resaltar la transparencia del cristal y consiste en biseles que enfatizan los ángulos, tocados co\nEsta pieza ha recuperado su aspecto original al identificarse recientemente entre los fragmentos sueltos conservados en el Museo del Prado su pie y su vástago, por lo que se expone integra por vez primera desde el siglo XIX. Consiste en un cuerpo oval, de poca profundidad, con perfil en forma de arco rebajado y con diez lóbulos en la falda, de grueso reborde, en cuya parte más ancha están labradas\nVaso compuesto por siete piezas de cristal y tres engastes de plata dorada. Su forma es muy similar a los llamados jarros de pico, con cuerpo profundo de perfil asimétrico, base redondeada y lados levemente exvasados, más saliente el que conforma el pico vertedor, delimitado por dos gallones. Boca oval, y labio que forma un plano oblicuo; vástago corto, formado por molduras y nudo central, encajad\nVaso formado por una pieza de piedra y una guarnición de filigrana. El cuerpo consiste en una taza baja, muy exvasada, de boca oval y polilobulada a causa de los ocho gallones que ondean el cuerpo, separados por otros menores. En el ruedo del asiento conserva una guarnición de plata dorada, con hojas realizadas en filigrana y cordoncillos. Tuvo hasta 1918 dos asas a los extremos, en forma de volut\nVaso compuesto cinco piezas de cristal de roca y seis guarniciones de plata dorada, con doble fila de dentículos e hilera de perlas. Representa un delfín, con el cuerpo curvado y la cola levantada. La cola está dividida en tres tramos, seguida por el tronco y cabeza, gruesos, de boca abierta mostrando los dientes. Dos guarniciones unen las pequeñas aletas dorsales, colocadas transversalmente. Un r


Empresas HUMEDADES Plasencia ✌ Reparación tratamientos\nReparación humedades Plasencia. Hay que observar la humedad confluente en nuestras casas y locales, de la forma que esta no se desenfrene y nos consiga causar problemas en las edificaciones y en nuestra salud.\n1 Quitar humedades Plasencia Empresas y tratamientos\n1.3 Cómo quitar, reparar o arreglar las humedades por capilaridad en Plasencia\n1.3.0.1 Especialistas en humedades Plasencia\n2 Expertos humedades Plasencia\n2.1 Cómo quitar, reparar o arreglar las humedades por filtración en Plasencia\n2.2 👉¿Cuánto cuesta la reparación humedades Plasencia presupuestos y precios\nQuitar humedades Plasencia Empresas y tratamientos\nOlor fuerte, concentración de efluvio de agua en las ventanas, humedad ambiental excesiva y deficiente satisfacción en el aire.\nSintomas de descascarillado de pintura y mortero en las paredes, aumento del salitre en los tabiques básicamente en su parte pegada al suelo.\nHUMEDADES POR CAPILARIDAD EN Plasencia\nHUMEDADES POR CONDENSACIÓN EN Plasencia\nHUMEDADES POR FILTRACIÓN EN Plasencia\nen todos ellos se presentan los modelos de obstáculos que producen y de las probables remedios que se les logran efectuar. Haga click en la FOTO de la que quiera consultar.\nLa mejor forma es disminuir el exceso de humedad en el interior de nuestra casa. en Plasencia\nEsta humedad en contanto con las partes que tienen una inferior temperatura condensa y se convierte en gotas de H2O líquido, fabricando los mohos, empañando los cristales y las ventanillas\nCómo quitar, reparar o arreglar las humedades por capilaridad en Plasencia\nEspecialistas en humedades Plasencia\nHacen una modificación de la circulación de la humedad, es decir que si antes esta era ascendiente y con esta solución se convierte en decreciente el sentido de la humedad.\nForman una zona que imposibilita la marcha ascendiente de la humedad por capilaridad en Plasencia\nLa composición de esta resina depende de los ingredientes de los que están compuestos las paredes\nExpertos humedades Plasencia\nCómo quitar, reparar o arreglar las humedades por filtración en Plasencia\nEsta forma de humedades por norma general es el resultado de los accidentes de las cañerías de los suministros de agua de nuestra vivienda.\nTenemos que ver la razón y decidir el modelo de reparación.\n👉¿Cuánto cuesta la reparación humedades Plasencia presupuestos y precios\nhumedades capilaridad en Plasencia 200€ 4400€\nArreglar Goteras en Plasencia 280€ 3800€\nImpermeabilizar Casa en Plasencia 360€ 7500€\nImpermeabilizar Cubierta en Plasencia 200€ 4400€\nImpermeabilizar azotea en Plasencia 200€ 4400€\nImpermeabilizar Fachada en Plasencia 200€ 4400€\nImpermeabilizar Techos en Plasencia 200€ 4400€\nImpermeabilizar sótano en Plasencia 200€ 4400€\n👉 Solicita precio y presupuesto de humedades Plasencia\nELIGE Y CONTRATA AL MEJOR DE Plasencia


Alejandro Juarez. - Adolphesax\nby adolphesax.com 16 de julio de 2008 9 de agosto de 2020 0857\nAlejandro Juárez Sánchez, currículum Nace en Alicante en 1978. Inicia sus estudios en el Conservatorio de Alicante y posteriormente se traslada al Conservatorio Superior de Música de Madrid. Acude a numerosos cursos de perfeccionamiento con profesores como Serge Bichon, Phillipe Braquart, Arno Bornkamp, Vincent David y Claude Delangle, entre otros. En los concursos en los que ha participado, obtiene el 1o Premio en el III Concurso Internacional de Saxofón “Villa de Benidorm” en marzo de 2001, y es semifinalista en el Concurso Internacional de saxofón de Dinant (2006). Con motivo del premio de Benidorm, en abril de 2001 actúa como solista en el Instituto Cervantes de París con obras de José Manuel López López. Ha colaborado con la Orquesta de la Comunidad de Madrid (Teatro de la Zarzuela, ciclo de conciertos sobre K. Weill), con la “European Union Youth Wind Orchestra” (gira por Luxemburgo, Francia, Alemania) y con la Orquesta Sinfónica de Alicante. También ha colaborado con el grupo Sax Ensemble (Auditorio Nacional), y diversas agrupaciones de cámara. Como profesor ha trabajado en los conservatorios de Novelda (Alicante), Tomelloso (Ciudad Real), Zaragoza y actualmente Elche.


Eliminación guardabarros trasero Bonneville T120 | Tamarit\nTodo sobre el kit de eliminación Bonneville T120\nFabricado con materiales de alta calidad y siguiendo un diseño sencillo, el eliminador de guardabarros es una gran opción para cambiar por completo la parte trasera de la motocicleta. La Bonneville T120 forma parte de la serie de clásicos modernos de la marca británica, con una historia que se remonta a los años 60, es un icono en el mundo de la motocicleta. Como uno de los modelos más populares de los clásicos modernos, hemos visto esta motocicleta personalizada en muchos estilos diferentes. Si está pensando en personalizar su Bonnie, no dude en ver nuestros proyectos de personalización para inspirarse y ver cómo queda instalado el kit eliminación de guardabarros en diferentes estilos.\nCaracterísticas del kit eliminación de guardabarros\nEl kit eliminación de guardabarros Bonneville T120 está hecho con hierro de 3 mm, mantiene la placa de matrícula en su lugar e incluye la luz trasera LED y un reflector. Este producto reemplaza el guardabarros de serie más grande de la motocicleta, creando un aspecto más minimalista y deportivo. Es muy fácil de instalar porque está hecha específicamente para esta motocicleta, tiene los mismos puntos de anclaje que el guardabarros original y una preinstalación eléctrica. Podrás colocarlo en casa con algunas herramientas básicas. Si quieres saber más, dirígete a la página de descripción completa, allí encontrarás las medidas, las instrucciones paso a paso, y los proyectos de personalización que hemos realizado con ella.\nNuestro equipo envía piezas y accesorios todos los días, por lo que los entusiastas de los clásicos modernos no tienen que esperar demasiado. Enviamos todos los productos disponibles en la web a nivel nacional e internacional en 72 horas. Si la pieza se puede pintar y el cliente solicita esta modificación, el envío demora un máximo de 15 días, considerando que debe pasar por un proceso de personalización diferente. Cada producto está cuidadosamente embalado, por lo que no hay problema durante la entrega y llega en perfectas condiciones.\nCómo ponerse en contacto con nuestro equipo\nSi desea saber más sobre el envío, la política de devoluciones o la garantía, vaya a las preguntas frecuentes. Para obtener más información sobre un pedido que ha realizado, los productos o los proyectos de personalización, vaya a la sección de contacto en la web. Allí tienes varias formas de hablar directamente con nuestro equipo.


Elías Montalvo dijo que “el Señor de los Milagros abolió la esclavitud” - AP Noticias\nElías Montalvo dijo que “el Señor de los Milagros abolió la esclavitud”\nEl tiktoker, Elías Montalvo, se equivocó al responder preguntas sobre de cultura general. Tampoco pudo deletrear la palabra ‘malabarismo’\nElías Montalvo llamó la atención tras cometer una vergonzosa equivocación en un reto de conocimientos en Esto es Guerra. El suceso dejó asombrados a Johanna San Miguel y Gian Piero Díaz, conductores del programa.\nTodo inició en el juego ‘Camino sorpresa’, en el que Mario Hart y el chico reality compitieron para saber quién contestaba más preguntas sobre cultura general. También acerca de otros temas relevantes.\nPese a que al principio el tiktoker logró acertar a la primera interrogante, no tuvo tanta suerte con la siguiente.\n“¿Qué presidente eliminó la esclavitud en el Perú?”, preguntó la conductora Johanna San Miguel.\nAl verse en problemas, Elías Montalvo pensó un instante antes de decir algo, sin imaginar que dejaría estupefactos a los conductores y compañeros del reality de competencia.\n“El Señor de los Milagros”, replicó el también youtuber.\nEn seguida, Gian Piero Díaz dio la alternativa correcta con notable asombro: “¿Qué? Es Ramón Castilla”.\nPor otro lado, Mario Hart atinó a burlarse del guerrero, garantizando que su error aparecería en algunos titulares de prensa nacional. “Vas a volver a salir en todos los medios, pero por burro”, expresó.\nSin embargo, ese no fue el único fallo que tuvo, pues afirmó que el primer inca del Perú fue Túpac Yupanqui, y no Manco Cápac. Tampoco consiguió deletrear la palabra malabarismo. Aún así, ganó el juego.\nCabe precisar que la producción decidió que solo participara en competencias que no requieran esfuerzo físico. Esta se debe a que todavía sigue en proceso de recuperación por la caída que sufrió en el programa tras una falla en la línea de vida.\nLa entrada Elías Montalvo dijo que “el Señor de los Milagros abolió la esclavitud” se publicó primero en El Men.\nElías Montalvo aseguró que ‘El Señor de Los Milagros’ abolió la esclavitud en Perú\n«Su padre falleció porque cayó de altura», dijo el tío de Elías Montalvo\nElías Montalvo: Sunafil anunció que iniciará una investigación contra ‘Esto es guerra’\nELÍAS MONTALVO: “ESTOY FELIZ PORQUE SIENTO QUE LA VIDA ME DIO UNA OPORTUNIDAD MÁS”\nTula Rodríguez a Elías Montalvo: «Este accidente hace que tengas nombre propio y el Perú hable de ti”


El diagnóstico del Síndrome de Asperger se suele retrasar hasta los 6 o 7 años. Este retraso es un problema para el niño porque en los trastornos del neurodesarrollo es clave empezar el tratamiento desde las primeras etapas del crecimiento. Este retraso puede tener consecuencias para el niño, tales como problemas del aprendizaje, fracaso escolar, peor socialización del niño, y baja autoestima en general. El diagnóstico se retrasa por muchas razones, desde la falta de formación de los profesionales que trabajan con estos niños hasta la poca resonancia social que tienen estos trastornos. El diagnóstico del Síndrome de Asperger no es fácil y requiere de pruebas psicológicas, cognitivas y biológicas, aplicadas por un profesional. Actualmente, según el último manual de diagnóstico de la APA (DSM-5), el Síndrome de Asperger se incluye en la existencia de un solo trastorno, el Trastorno del Espectro Autista (TEA).\nEl TEA incluye todos los tipos de autismo reconocidos en el DSM-IV-TR:\ntrastorno generalizado del desarrollo (no especificado)\nSegún Martín (2004) “la evaluación diagnóstica debe tener en consideración la expresión variable de los comportamientos centrales al cuadro sintomático en función de las características únicas de cada individuo”.\nUna de las grandes diferencias entre el trastorno autista y el Síndrome de Asperger es que el niño con Asperger no tiene un retraso clínico en el lenguaje. Habla de manera correcta, pero tiene muchos problemas en la interacción social (como un autista). Además, suele tener un desarrollo cognitivo normal y siente mucha curiosidad por el entorno no social (los dinosaurios, los trenes, …). Estos intereses restringidos sumados al desinterés o dificultad para socializar llevan a las personas que conviven con ellos a la conclusión de que el problema del niño es que es muy listo (altas capacidades) o que tiene una fobia social (trastornos de ansiedad) o ambas.\nPor eso es importante que la evaluación diagnóstica la haga un experto. Es evidente la importancia de un buen diagnóstico, Belinchon (2001) afirma que es muy fácil confundir la sintomatología autista con rasgos extraños de personalidad, hiperactividad, dificultades de aprendizaje y/o conducta.\nEn los criterios APA, se pone énfasis en descartar antes del diagnóstico de Asperger, los siguientes trastornos:\ntrastorno del lenguaje social,\nAdemás, también se incluirá una posterior evaluación psicopedagógica. Respecto al ámbito escolar se hace muy importante la identificación, ya que, se han de considerar las necesidades educativas especiales de estos alumnos (NEE) para poder tener un aprendizaje eficaz. Para tener más información puedes leer nuestro post sobre como ayudar al alumno con Asperger en el aula.\nPosibles indicadores del Síndrome de Asperger\nPara el diagnóstico del Síndrome de Asperger, además de los criterios diagnósticos del DSM-5, contamos con criterios elaborados por otros autores que pueden ayudar a padres o profesores a detectar antes la existencia de dicho trastorno.\nCriterios de Filipek, Accardo, Baranek y cols, (1999)\nParece sordo a veces\nParece oír algunas veces pero otras no\nPreocupaciones sobre el aspecto social\nParece preferir jugar sólo\nConsigue las cosas por sí mismo (no pide ayuda)\nDesintoniza de nosotros\nPreocupaciones por la conducta\nEs hiperactivo, no cooperador, oposicionista\nQueda enganchado con los objetos una y otra vez\nTiene algún cariño extraño por algún objeto\nTiene patrones de movimiento raros\nCriterios de Gillberg y Gillberg, (1991)\nDéficit en la interacción social en al menos dos de los siguientes:\nIncapacidad para interactuar con los iguales\nComportamientos sociales y emocionalmente inapropiados a la situación\nDificultades de comprensión que incluyen interpretación literal de expresiones ambiguas\nRetaso en el área motriz o alteraciones en pruebas de neurodesarrollo\nWebs para tener más información:\nFernández-Jaén, A., Fernández-Mayoralas, M., Calleja-Pérez, B. y Muñoz Jareño, N. (2007). Rev. Neurol, 44, 53-55.\nJurado de los Santos, P y Bernal Tinoco, D. (2011). El alumno afectado con síndrome de Asperger en el aula ordinaria. Revista educación inclusiva. 4, 27-44.\nLópez Cazorla, F.J (2008). El síndrome de Asperger en el aula. Innovación y experiencias educativas, 9.\nSíndrome de Asperger: aproximación a un diagnóstico « Telepsicologiainfantil\nSíndrome de Asperger: aproximación a un diagnóstico « Telepsicologiainfantil may 18, 2015


Arcadesfera: lanzamientos de la semana (V)\nAsí como la semana pasada las novedades venían lo suficientemente cargadas como para tenernos enganchados durante horas, los lanzamientos que han llegado en los últimos siete días son bastante más cercano a lo habitual. Una gota de nostalgia, sazonada con buenas intenciones, a la que el portento gráfico y jugable de un Final Fantasy acaba sacando del apuro.\nOtra semana más sin novedades gratuitas realmente destacables, que es lo que todos deseáis con más fuerza, pero de vez en cuando vale la pena echar mano al bolsillo y poder lucir en tu pantalla uno de los últimos grandes estrenos. Que la gente tampoco vive del aire. Pero dejémonos de discursos y centrémonos en lo nuestro, que hay mucho por hacer y probar en este Arcadesfera.\nEmpezamos con Midway Arcade, que pretende aprovechar los títulos de la marca para trasladarnos a un salón recreativos en el que no hacer colas ni dejarnos el sueldo. Se pierde el aroma a cuarto sin ventilación y los joysticks sudorosos, pero imagino que es una variante a la que nos tenemos que acostumbrar.\nIncluye seis juegos arcade: Spy Hunter, Rampage, Joust, Root Beer Tapper, Defender y Arch Rivals, y cuatro de en los que los elementos electrónicos se limitaban a las puntuaciones: Air Hockey, Arcade Basketball, Pool y Roll Ball. También se encargan de presentarnos un par de packs con nuevos juegos, pero sin ellos la experiencia es bastante completa. El adorno de la máquina de discos en la que podemos reproducir las canciones de nuestra biblioteca y la estantería con todos los premios que vayamos consiguiendo son una mera curiosidad, pero como punto de originalidad para una sala arcade están genial.\nSí, yo también reconozco ser de los que muchas veces pican con los iconos de las aplicaciones, entro a ver qué ofrecen y después salgo asustado. No os ocurrirá con Munch Time, que llama la atención por el simpático camaleón de su logo pero sorprende y engancha cuando entramos en materia. Lo que le da fama y vida a un nombre.\nEn esta ocasión habrá que alimentar al bicho trasladándolo hasta su presa. Para ello aprovecharemos las flores repartidas por el escenario como punto de balanceo, y tras engancharnos con la lengua y balancearnos a su alrededor, nos catapultaremos hasta una nueva zona del escenario. A nivel visual cumple sin grandes virguerías técnicas, pero el juego en sí aguanta el tipo presentando una dificultad muy bien implementada y cambios en la jugabilidad constantes destinados a no convertirlo en un tedio.\nAnimales, juegos arcade… pero algunos claman novedades, de las jugosas, de las que puedes enseñar a tus amigos y decir, mira este juego. Bien, os presento a Lume. Convertido en uno de los títulos independientes que más revuelo han causado durante los últimos meses, el invento de State of Play Games siempre se ganaba los mismos halagos, casi todos centrados en alabar su aspecto gráfico.\nEstamos ante una aventura en la que resolver puzles para poder avanzar. Nada inusual. Pero los gráficos del juego están grabados a tiempo real usando papel y cartón, por lo que puede llegar a parecer que haya un collage vivo en la pantalla de nuestro dispositivo. Ojo porque a día de hoy el precio pica un poco y sólo se nos muestra la primera parte de la aventura. Llegarán actualizaciones que terminen la historia, pero por ahora lo único que encontraréis es menos de media hora de juego. ¿Recomendable aún así? Visto lo presentado, nadie puede pensar que lo que queda por echar al plato no vaya a ser comestible.\nNo puedo evitar tener el corazón dividido con Final Fantasy Tactics: The War of the Lions. Los que probaseis tanto la versión original como la versión que nos llega ahora, extraída directamente de la de PSP, sabréis que estamos ante un juegazo con todas las de la ley, de esos que marcan época y pocos han podido soplarle en la coronilla. No estamos ante un Final Fantasy normal, sino ante uno que hace uso de la estrategia para presentar los combates, como si de un juego de tablero se tratase.\nPese a ser muy recomendable Square Enix vuelve a sorprendernos como ya lo hizo en el pasado con la versión para iPhone. Casi 15 euros, señores. Una cifra que no concuerda en absoluto con las políticas de precio que se barajan en Apple y que, con toda seguridad, le hará un flaco favor a sus ventas. Eso no quita que sea una auténtica gozada y que los gráficos y animaciones se vean de maravilla sobre la pantalla, pero ni siquiera la intención de mejorar aún más esos aspectos con futuras actualizaciones consiguen borrarnos de la mente ese precio.\nCompartir Arcadesfera: lanzamientos de la semana (V)