Resumen Utophia 28-02-2010 | Opinión Pública\nCHILE: UN PAÍS SIGNADO POR LOS TERREMOTOS. En el país trasandino es histórico éste tipo de movimientos en sus tierras, por desgracia la naturaleza lo golpea seguido. En el año 1939 sufrió el seísmo que causó más muertes: 30000. En 1960 sufrió el terremoto más alto en el mundo de la historia en la escala de Richter, entre 9 y 9.5 grados.\nEL INCREÍBLE VIAJE A LONDRES. Una nueva misión García. Mientras el gobierno protestaba por las operaciones petroleras en Malvinas, Paula Bertol, Adrián Pérez y Oscar Aguad eran invitados de honor del foreign office. El viaje se realizó cuando ya se conocía el envío de Londres de la plataforma Ocean Guardian. Insatisfecha con su periplo por las embajadas denunciando al gobierno de Cristina Fernández Lilita mandó a su joven delfín Adriancito Pérez, al Foreign Office.\n“En el país no se tiene por traición cualquier sacrificio en favor de los ingleses, y aún la completa sumisión”\nNo, no fueron estas las palabras de los integrantes de la delegación argentina, y que se parecen tanto a las palabras de Lilita cuando dijo «si para defender la libertad de expresión es necesario apoyar a las grandes empresas, lo vamos a hacer», sino el mensaje que en 1815, ¡un año antes de declararse la Independencia! el Director Supremo del Río de la Plata Carlos de Alvear, envió al embajador británico en Brasil Lord Strangford. Para qué nos tomamos tanto trabajo en cambiarle el nombre a la calle Canning ¡Scalabrini Ortiz se revuelve en su tumba!\nMURIÓ EDUARDO KIMEL, el periodista cuyo caso terminó con el delito de ‘calumnias e injurias’. El reportero argentino, que se desempeñaba como editor de información latinoamericana de la agencia DPA, falleció sorpresivamente el jueves (10/2) a los 57.\n¡VIVA EL ATEROMA! EL GRAN TRIUNFO DE NÉSTOR KIRCHNER. En el número anterior publicamos la nota “El odio” en la cual su autor Eduardo Aliverti nos describía un escenario de crispación donde los K son susceptibles de ser comparados con Galtieri. y el gobierno tildado de montonero, y los blogs rebosan de felicidad por la carótida de Kirchner y. “Debería ser increíble, pero más de 50 años después parece que volvió el “Viva el Cáncer” con que los antepasados de estos miserables festejaron la muerte de Eva”.\nLa nota del periodista Jorge Fernández Díaz que publicó la Nación muestra hasta que grado el odio se puede disfrazar de nota periodística.\nLA JUSTICIA Y CABLEVISIÓN JUNTITOS, JUNTITOS, JODIENDO A LOS ABONADOS. Un fallo de la Justicia habilitó a Cablevisión (propiedad del grupo Clarín) y a las operadoras de cable a implementar el aumento que la Comisión Nacional de Defensa de la Competencia les había suspendido por 60 días.\nFUEGO CONTRA FUEGO. El periodistas Christian Sanz acusó a Juan José Salinas de ser el periodista que aparece en el listado de buchones del 601 y Salinas le contestó: “Demandaré a este subnormal profundo…” en una nota que nos envió con pedido de publicación.\nOTRO MAMARRACHO DE BINNER. Hermes Binner acaba de adjudicar republicanamente, claro, por decreto y sin licitación un subsidio de un millón y medio de pesos, al empresario Luis Nardi para una “muestra” del “campo” a la que el año pasado asistieron la friolera de 150 personas (10 mil pesos por asistente). Estos campesinos no se conforman de haber sitiado a la ciudad cortando la ruta para no dar un peso más de retenciones de las cifras fabulosas que cosechan, sino que le sacan plata al Estado por cualquier agujero que encuentran. Biolcati cobra más de 300 mil pesos de subsidios por ser productor lechero, obtuvieron un aumento de 1 millón de toneladas para exportar trigo (el mismo trigo que ellos denunciaban por todos los medios que iba a faltar y tendríamos que importar) y este Nardi se llevó un palito y medio para hacer su kermés. Seguro que se hace socialista.\nCON ARMAS NO DEL TODO NOBLES. El Grupo Clarín, en su guerra contra el gobierno, terminó publicando un blog antisemita denunciado por la DAIA. Recuerdos y citas del pasado filofascista del fundador del diario.\nOPERATIVO DE PRENSA DE LA CLOACA DE LA SIDE. En Clarín y Perfil, se le dio amplia cobertura a una denuncia trivial contra Cristina Fernández y el Jefe de Gabinete, Aníbal Fernández, por un montón de delitos por sacarle el negocio del fútbol al Grupo Clarín. Los denunciantes son un dirigente político de derecha sin suerte electoral y un ex agente de la SIDE ligado a sectores oscuros del periodismo, Enrique Pirgagini y Carlos Tórtora.\nCON DROGAS DETIENEN A UN ASESOR DEL SENADOR RADICAL AQUINO. Luis Machado, asesor del senador radical por Constitución Héctor Aquino, fue detenido anoche en un operativo. Se lo acusa de tener en su automóvil 48 bochas de cocaína; unos dos mil pesos falsos y de intentar eludir un control policíal.\nSi esto no es una maniobra del ministro Fernández -que para desviar las acusaciones que pesan sobre él por favorecer al narcotráfico seguro le encajo un par de kilos de merca al pobre asesor de Aquino- pega en el poste.\nURIBE VÉLEZ: ¡¡¡AL MISMÍSIMO CARAJO!!! Toda Colombia escuchó lo inesperado: la maquinaria uribista se quedó sin gasolina en la recta final, los nueve magistrados de la Corte Suprema anunciaron al país su decisión: 7 votos diciéndole no a la reelección, un NO por cada Base Imperial fue el castigo de la voz de justicia en respuesta a la pretensión de perpetuar la masacre, la entrega, el servilismo y la sangre heroica de un pueblo.\nNOTICIAS CON ENLACE A LA FUENTE. Para Leer pulsar en título.\nAlejandro Olmos: Deuda Externa y Fondo del Bicentenario. Jueves 25 de FEBRERO ALEJANDRO OLMOS GAONA en PARANÁ Conferencia y Debate LA DEUDA EXTERNA Y EL FONDO DEL BICENTENARIO “Hay documentación en el Banco Central que prueba que prácticamente 95% de la deuda externa argentina es un fraude. Entonces uno debe preguntarse, ¿por qué hay que pagar un fraude?”.\nSe crea la Comunidad de Estados Latinoamericanos y Caribeños Momento histórico para los pueblos de nuestro Continente Se crea la Comunidad de Estados Latinoamericanos y Caribeños Las 32 naciones presenten dieron el sí a la creación de la Comunidad de Estados Latinoamericanos y Caribeños para que los países del continente sean una sola voz en los foros multilaterales, de esta manera Estados Unidos no tendrá el rol dominante.\nDeclaración de Cancún InSurGente pone a disposición de sus lectores la Declaración Integra de la Cumbre de Países Latinoamericanos y Caribeños que conformaron un nuevo bloque regional donde por primera vez no participan ni Estados Unidos ni Canadá. Participantes de la cumbre sostienen que será un sustituto de la OEA condenada a su desaparición.\nEl Grupo de Río rechazó el bloqueo de Cuba. Las asistentes a la Cumbre del Grupo de Río en Cancún aprobaron hoy una declaración de “enérgico rechazo” al bloqueo económico estadounidense contra Cuba y pidieron al gobierno de Barack Obama “poner fin a su aplicación”. Los participantes de la Cumbre de la Unidad, que sesionó dos días en el paraíso turístico mexicano de Riviera Maya, cerca de la frontera con Belice, repudiaron “las medidas económicas coercitivas y unilaterales aplicadas por motivos políticos contra países soberanos”. Estas acciones “afectan el bienestar de sus pueblos y están concebidas para impedirles que ejerzan su derecho a decidir, por su propia voluntad, sus propios sistemas.\nFF.AA abren archivos secretos “escogidos” y desatan críticas.\nLa documentación clasificada fue seleccionada por el Comando en Jefe de la entidad castrense, lo que molestó a los familiares. El Ministerio Público comenzó ayer a recibir archivos clasificados de la dictadura de Luis García Meza, preparados por el Comando en Jefe de las Fuerzas Armadas (FFAA) en el Estado Mayor, en medio de una reserva absoluta, hermetismo militar y críticas de algunos familiares de los desaparecidos y activistas de los derechos humanos.\nBronca verbal entre Uribe y Chávez El títere Uribe dijo a Chávez: “sea varón ¡usted es un cobarde para hablar de frente!” y Chávez lo mandó p’al carajo Noticias 24 Según relataron periodistas de CNN que asisten a la Cumbre de Cancún, los presidentes de Venezuela y de Colombia, Chávez y Uribe, sostuvieron un muy fuerte cruce de palabras durante el almuerzo de Presidentes que tuvo lugar hoy.\nFARC presenta en vídeo espada de Bolívar recuperada en la selva. Según el miembro del Secretariado de las FARC, la espada fue rescatada por este grupo para convertirse ‘en el símbolo de la libertad y de la unidad de toda la América Latina’.\nLibertad por Los Cinco. Noticias variadas sobre los cinco cubanos detenidos en EE.UU.\nHo Chi Minh, retrato de una celebridad. Vídeo realizado por la Embajada de Vietnam en la República Argentina, cedido a ARGENPRESS.TV para su difusión.\nLos ojos abiertos de América Latina. El gobierno de Panamá pone fin, unilateralmente, a la Operación Milagro, que ha devuelto la vista a 1,8 millones de seres humanos de 35 países.\nUruguay: Alzheimer tupamaro. Por Alfredo Grande “el problema de estos tiempos no es ponerse triste cuando se pierde, sino que no podemos ponernos alegres cuando ganamos” (aforismo implicado) Daniel Hadad dice que Mujica es “El presidente liberal”. El periodista participó del almuerzo que el presidente uruguayo compartió con 1500 empresarios. En la nota publicada hoy en diario Perfil, Hadad no puede disimular su alegría por haber estado con un presidente que “apuesta al liberalismo, a la libre empresa, a la convivencia civilizada”\nMicrosoft ha conseguido cerrar Cryptome, la web dedicada a la publicación de documentos confidenciales y secretos desde 1996, al desvelar Cryptome un PDF en el que se describe cómo Microsoft almacena datos privados de usuarios y los cede a las agencias de seguridad. Cryptome ha publicado fotos de soldados torturados en Iraq, identidades de agentes secretos, mapas de instalaciones militares, documentos sobre criptografía.\nSismo en el país vecino\nChile: Un país signado por los terremotos\n27-02-2010 / En el país trasandino es histórico éste tipo de movimientos en sus tierras, por desgracia la naturaleza lo golpea seguido. En el año 1939 sufrió el seísmo que causó más muertes: 30000. En 1960 sufrió el terremoto más alto en el mundo de la historia en la escala de Richter, entre 9 y 9.5 grados.\nEl terremoto del 60 dejó al país en ruinas por la escala Richter más alta en la historia.\nPor desgracia hay que decir que el pueblo chileno está “acostumbrado” a este tipo de catástrofes, desde el año 1939 se produjeron 8 sismos con el de hoy de diversa intensidad.\nEl primero sufrido el 24 de enero de 1939 fue el de mayor número de muertos, 30000 con un epicentro en la ciudad de Chillán.\nAdemás el sismo de mayor intensidad registrado en el mundo tuvo lugar el 22 de mayo 1960 en Valdivia (sur de Chile), con una magnitud de entre 9 y 9,5 grados Richter (según distintas fuentes), y causó seis mil muertos.\nProvocó un ‘tsunami’ de 10 metros de altura que llegó hasta las costas de Hawai, donde murieron 61 personas.\n-24 enero 1939. Chillán, Chile: 30.000 muertos\n-21-26 mayo 1960. Sur de Chile: Una serie de terremotos de más de 7 grados Richter causa 6.000 muertos. El del día 22, que superó los 9 grados Richter, ha sido el de mayor magnitud registrado en el mundo.\nMichelle Bachelet, tras el terremoto que azotó a Chile: “Tenemos que ponernos de pie”\nDos muertos por un sismo registrado en Salta\nOla gigante inundó la isla de Robinson Crusoe\nAdemás del legislador de la UCR, integraron la comitiva los diputados nacionales Adrián Pérez de la Coalición Cívica, Paula Bertol del PRO, y el miembro del PJ-Santa Fe Federal Walter Agosto, que responde al senador Carlos Reutemann. También participó la presidenta provisional del Senado mendocino, Miriam Gallardo, una dirigente provincial que responde a Juan Carlos Mazzón, un ex Guardia de Hierro que todavía conserva algún vínculo con el kirchnerismo. El viaje fastidió a las autoridades de Cancillería que calificaron la misión como una “torpeza”.\nEn el Ministerio de Relaciones Exteriores deslizaron que un viaje de una comitiva de legisladores de estas características no se puede realizar a sus espaldas en una situación como la actual. En cambio, para los parlamentarios que volaron a Londres, la visita tenía por objeto fortalecer la relación bilateral a través de la discusión y el intercambio entre líderes políticos de ambos países. “Estoy muy agradecida por la invitación de la Embajada Británica”, escribió en su Twitter –tal vez cándida, o no– Paula Bertol, que nada dijo sobre el conflicto bilateral que estos días también llegó a las tapas de la prensa inglesa.\nUna fundación muy de La Nación. El tour de los legisladores fue organizado por la Embajada Británica junto a la Fundación Red Acción Política, cuyo consejo de administración está integrado, entre otros, por Alan Clutterbuck, hijo del empresario Rodolfo Clutterbuck, directivo de Alpargatas que fue secuestrado por la famosa “Banda de los comisarios”, la misma que cobró el rescate de Mauricio Macri. Clutterbuck hijo se introdujo en el mundo de la política de la mano de Patricia Bullrich, aunque luego cambió de bando. También participa del consejo asesor Cecilia Cordeiro, directora de Poliarquía, la encuestadora preferida del diario La Nación.\nLa Misión García ante Lord Strangford. El Foreign Office: la continuación de la guerra a través de la penetración económica y cultural.\nMurió Eduardo Kimel, el periodista cuyo caso terminó con el delito de ‘calumnias e injurias’\nEl reportero argentino, que se desempeñaba como editor de información latinoamericana de la agencia DPA, falleció sorpresivamente el jueves (10/2) a los 57. En 1991 fue condenado por el delito de ‘calumnias e injurias’, pero después de un largo camino la Corte Interamericana de Derechos Humanos falló a su favor y obligó a la Argentina terminar con esa figura penal.\nCIUDAD DE BUENOS AIRES (Urgente24). El periodista Eduardo Kimel, una figura clave en la derogación del delito de ‘calumnias e injurias’, falleció sorpresivamente este miércoles (10/2) a los 57 años. No trascendieron las causa de su deceso.\nEn 1989 publicó el libro ‘La masacre de San Patricio’, en el que abordó el asesinato de tres sacerdotes palotinos y dos seminaristas durante la dictadura de 1976 a 1983 y en el cual denunció la actuación de las autoridades encargadas de la investigación, entre ellas el juez Guillermo Rivarola.\nEn 1995, Kimel fue condenado a un año de prisión en suspenso y al pago de una indemnización de $20.000 (por entonces igual a dólares) como culpable de “injuria y calumnia” contra el juez al que mencionó en su investigación.\nSu caso llegó hasta la Corte Interamericana de Derechos Humanos (CIDH) que resolvió a su favor sentando un importantísimo precedente.\nLos fallos y jurisprudencia de la Corte Interamericana tienen fuerza de ley en la Argentina, por resolución de la Corte Suprema. En el caso de Kimel, la CIDH pidió al Estado anular los efectos de la sentencia penal contra el periodista, como forma de reparación. También le exigió promover reformas a la legislación sobre calumnias e injurias, y “efectuar un acto público de reconocimiento de su responsabilidad”, en un plazo de 6 meses.\nEl libro de Kimel investiga el asesinato de los sacerdotes Alfredo Kelly, Alfredo Leaden y Pedro Duffau, y los seminaristas Salvador Barbeito y Emilio Barletti, acribillados por un “grupo de tareas” de la dictadura dentro del templo católico de ese nombre, en la madrugada del 4 de julio de 1976. Los asesinados pertenecían al sector “progresista” minoritario del catolicismo argentino, duramente reprimido por el gobierno de facto.\nJunto a los cadáveres se halló una leyenda que decía: “Estos zurdos murieron por ser adoctrinadores de mentes vírgenes”. Los autores del múltiple crimen nunca fueron identificados.\nKimel dijo que su libro “tuvo el propósito de sacar a luz uno de los hechos más atroces cometidos por el terrorismo de Estado. Por un breve párrafo del libro, un juez de la Nación me inició un juicio, que terminó en una condena que fue una tremenda injusticia”.\nEl gran triunfo de Néstor Kirchner\nLA NACIÓN Domingo 21 de febrero de 2010 | Publicado en edición impresa\n“Viva el ateroma”, decía un usuario de Internet el día en que operaban de urgencia a Néstor Kirchner. Se remedaba así el tristemente célebre “Viva el cáncer” que le pintaron a Eva Perón.\nLuego otro comentarista expresaba los deseos de que Kirchner saliera vivo pero cuadripléjico del quirófano. Sabemos que una parte de la web se ha transformado en una cloaca de psicópatas anónimos. Pero cuando leí esta clase de reacciones escritas no pude sino pensar que no se trataba meramente de un pecado mortal de cobardes internautas.\nEl odio proclamado en el ciberespacio tiene su correlato diario en las casas, los bares, los taxis, los trabajos y los medios de comunicación de la Argentina. Esa apología del ateroma es un síntoma aberrante y patético, la punta del iceberg de una inmensa montaña helada de rencor y enfrentamientos sociales; un veneno que contamina los discursos públicos y privados, a uno y otro lado de la vereda ideológica, en este país convulso de desprecios y zancadillas donde nadie es capaz de reconocerle al otro una razón. Una sola.\nGanó Kirchner porque el caníbal obligó a sus críticos a la antropofagia. Porque muchos acólitos se transformaron en salvajes irracionales y porque algunos críticos se convirtieron en los demonios que combatían. Y porque a la máquina de picar adversarios que el Gobierno maneja se le va oponiendo una máquina de picar oficialistas. Ya se han borrado los matices en esta guerra.\nCunden los blancos y negros, los buenos y los malos. Y sobre todo, la deshonestidad intelectual. Elogiar una política de Estado o castigar la gestión de un opositor significa “hacerle el juego al kirchnerismo”. Rescatar determinados argumentos de la oposición o denunciar la corrupción de un funcionario es “hacerle el juego a la derecha”. Y al enemigo ni justicia.\nAmistades personales, convivencias políticas, tolerancias entre distintos, respeto democrático, solidaridad y caballerosidades humanas: todo se lo lleva el vendaval de la lógica patria-antipatria, o tiranía-república. Si yo soy la Patria, el otro es algo gravísimo: un traidor a la Patria. Si yo soy la República, el otro es algo gravísimo también: un cómplice del tirano.\nCon estas disyuntivas de hierro no queda más que la refriega irreconciliable y fatal. No queda más que el precipicio entre los unos y los otros, cuando la democracia es un tejido de alternativas, una sucesión de debates ásperos con un fondo de acuerdos permanentes, un lugar donde no caben denuncias de golpismo ni golpes institucionales, sino juegos legales y legítimos entre gente que piensa distinto. Hacer lo que se critica, convertirse en Kirchner para derrotar a Kirchner, implica un error tremendo. Una gran tragedia.\nLa Justicia y Cablevisión juntitos, juntitos, jodiendo a los abonados\nLa sala II de Apelaciones anuló dos resoluciones de la CNDC\nEl Argentino. 24-02-2010.Un fallo de la Justicia habilitó a Cablevisión (propiedad del grupo Clarín) y a las operadoras de cable a implementar el aumento que la Comisión Nacional de Defensa de la Competencia les había suspendido por 60 días.\nSe suele dibujar a la Justicia como una señora con los ojos vendados para ejemplificar que es imparcial y que no ve a quiénes favorece o perjudica con sus fallos. Sin embargo, hay demasíada historia en este país para convencernos de que no siempre se falla “a favor de los pequeños” ni el tiempo está a su favor.\nAyer la Sala II de la Cámara Nacional de Apelaciones Civil y Comercial acaba de dar un ejemplo categórico de cómo la justicia puede perjudicar a un gran número de personas y favorecer, a su vez, a un pulpo económico.\nPosteriormente, el 2 de febrero, la CNDC dictó otra resolución (la 13/10) en la cual les ordenaba a las empresas que en caso de haberse aplicado el aumento anunciado, se ocuparan de devolver ese importe a los consumidores.\nCablevisión alegaba en su presentación que la CNDC “carecía de competencia para dictar medidas cautelares” y se quejaba de que en los últimos años vio incrementados sus costos en un 95%, en tanto que los aumentos en el servicio apenas llegaban al 68%.\nLa Justicia resolvió darle la razón a Cablevisión y a las operadores de cable que anunciaron el aumento, perjudicando de este modo a millones de abonados.\nLo que alega la sala es que la medida cautelar debe ser dictada por el Tribunal Nacional de Defensa de la Competencia, un tribunal administrativo que si bien fue creado aún no está integrado, en los hechos, no existe.\nEs decir que el fallo no sólo favorece al Grupo Clarín sino que además establece que en la controversia debe intervenir un organismo que todavía no existe. El fallo critica además al Poder Ejecutivo por no haber conformado dicho organismo.\nLa sala no sólo se entromete con la decisión de política de integrar el organismo citado, sino que además parece estar muy enterada de los números empresarios y, dando por cierto lo esgrimido por Cablevisión respecto de los costos, dice que “el aumento está justificado con el incremento de sus costos y con el innegable nivel de inflación”.\nEste último magistrado votó en disidencia y argumentó que “no se advierte el peligro irreparable ocasionado por la medida adoptada por la CNDC” y que “no alcanzo a percibir la cantidad que se dice dejará de facturar Cablevisión como consecuencia de la medida impugnada”.\nEl juez Alfredo Silverio Gusmán agrega que\n“no me parece apropiado (…) examinar el alcance de las facultades de la CNDC a raíz de que no se ha creado el Tribunal Nacional de Defensa de la Competencia”.\nTras las argumentaciones del magistrado en disidencia el fallo de la Sala II de la Cámara Nacional de Apelaciones Civil y Comercial hace lugar a la presentación de Cablevisión y deja sin efecto las resoluciones 8/10 y 13/10 de la Comisión Nacional de Defensa de la Competencia.\nEl mismo que en el año 2000 despidió a un centenar de trabajadores, entre ellas a toda la Comisión Interna Gremial, porque osaron organizarse sindicalmente.\n¿O será que un país en serio, en el que los consumidores, los usuarios y los trabajadores sean respetados, no le sienta bien?\nCon fallos como el de la Sala II, Clarín tiene argumentos para pensar que pocas cosas cambiaron en el país.\nEl periodista Christian Sanz acusó a Juan José Salinas de ser el periodista que aparece en el listado de buchones del 601\nEl periodista Christian Sanz publicó en su sitio “Tribuna de Periodistas” un artículo titulado “Juan José Salinas, el periodista que aparece en el listado de buchones del 601” refiriéndose a la lista que la Revistas Veintitrés publicó la semana pasada.\nSalinas que es lector y colaborador de Utophia que ya ha tenido entreveros con Sanz a quien le dedicó una nota en la revista Zoom, “Por la boca muere el pez”, nos ha enviado un correo a modo de desagravio por la difamación sufrida en la que señala:\n“Demandaré a este subnormal profundo, pero por el momento quiero que sepan que quien aparece en la lista es un suboficial principal del Ejército, con estudios primarios, de especialidad arsenales y oficio carpintero, al parecer fallecido”.\nHace una semana, la revista Veintitrés publicó una extensa lista, elaborada por el Ministerio de Defensa, del personal del Batallón 601 de Inteligencia del Ejército durante la dictadura.\nEn dicha lista aparece un “Juan José Salinas”. Como era previsible, mis enemigos se lanzaron a proclamar que se trata de mi. Un imbécil que antes repetía como un loro que en los años en que estuve exiliado fui agente de la Armada de Massera y que trabajo ahora en el Ministerio de Defensa, vocifera ahora exultante que resulté del Ejército, sin dar explicación de como cambié de fuerza ni por qué Defensa me incineraría al revelar mi supuesta calidad de agente.\nDemandaré a este subnormal profundo, pero por el momento quiero que sepan que quien aparece en la lista es un suboficial principal del Ejército, con estudios primarios, de especialidad arsenales y oficio carpintero, al parecer fallecido.\nEste JJS nació en el Palomar el 24 de febrero de 1928, por lo que, de vivir, acabaría de cumplir 86 años. O sea, sería 29 años y un mes mayor que yo.\nEn la foto carnet que pude ver, mi tocayo aparece como un hombre calvo, fornido y posiblemente retacón, con cierto parecido a Danny De Vito.\nTenía Cédula de Identidad de la Policía Federal 8.041.909, Libreta de Enrolamiento 4.781.827, era el afiliado nº 49.708 del IOSE.\nEstaba casado con Nidia Ramona Albornoz y fue padre de Sonia Adriana (1964) y Daniel Julio (1967).\nSe retiró del servicio activo el 31 de diciembre de 1975 e ingreso al Batallón 601 el 1º de diciembre de 1980, jubilándose a partir del 1º de abril de 1995, por lo que es difícil que haya estado directamente involucrado en la “Operación Murciélago” contra los montoneros participantes de “la segunda contraofensiva” u otras acciones represivas similares.\nEste JJS vivía en la localidad de Grand Bourg, partido de Malvinas Argentinas, y su nombre todavía figura en la guía telefonica. Llamé y fui atendido por quien dijo ser su hijo (Daniel), que me dijo que su padre había fallecido hace varios años, aunque no quiso precisar fechas.\nComo se darán cuenta, vi el legajo de mi homónimo, titulado “Antecedentes personales” y que lleva también la inscripción “Ficha nº 1267”, pero no lo pude fotocopiar por razones legales.\nTodas estas complicaciones tienen lugar no sólo porque me granjeé enemigos al revelar la impudicia de agentes del Batallón 601 y de otros servicios como el ex CNU Carlos Tórtora y Jorge Daniel Boimvaser, que fueron las principales fuentes cloacales en las que abrevaron mis enemigos- comenzando por Seprin (cuyo exactísimo nombre original era “Servicios Privados -es decir, carentes- de Inteligencia) y siguiendo por el aludido copión y difamador serial.\nTampoco suceden solamente porque tengo un nombre baste común: según Telexplorer, solamente en la guía telefónica de Capital Federal y Gran Buenos Aires hay once Juan J. Salinas, y ninguno de ellos soy yo.\nTambién suceden porque entre quienes me difamaron hasta el hartazgo hace muchos años en prevención de que fuera a escribir lo que jamás escribí (y que en cambio teminó revelando uno de ellos) se encuentra el mejor periodista del país. Que después de difamarme, no cumplió un trato que hicimos, acuerdo que de haber cumplido hubiera paliado en gran parte el estropicio causado, y que desde entonces se hace olímpicamente el tonto, diciendo a quien le pregunta por el tema que estamos distanciados por el hecho “imperdonable” de que lo ofendí (al señalar su complicidad con Clarín y su dueña apropiadora de niños en ocasión de ser ésta detenida), lo que sucedió… una década larga después de aquello.\nQuienes me difaman ahora no dejan de señalar con fruición el hecho de que fue este gran periodista (con el que en los ’80 fuimos compañeros de agrupación, la Rodolfo Walsh, en la Apba y en la Utpba) quien inició sin odio ni pasión, aviesa, fría y premeditadamente, esta bola de caca que no deja de rodar.\nDesafío a mis enemigos a que encuentre un sola nota periodística o página que yo haya firmado y de la que me tenga que avergonzar. Y confio en el criterio de mis amigos para utilizar estas líneas de modo de parar en seco a quienes se regodean en escupir hacia arriba, mear contra el viento, chapalear en la mierda, tirarla contra el ventilador y chuparse los dedos.\n“Juan José Salinas, el periodista que aparece en el listado de buchones del 601”\nHermes Binner acaba de adjudicar republicanamente, claro, por decreto y sin licitación un subsidio de un millón y medio de pesos, al empresario Luis Nardi para una “muestra” del “campo” a la que el año pasado asistieron la friolera de 150 personas, según el medio amigo (de ellos) cadena 3.\nEl chequecito salió por el decreto 2604, firmado el día de los inocentes, el 28 de diciembre de 2009.\nLa feria de negocios subsidiada por el estado provincial se llama Agroactiva, y según lo que firma como fundamentos Binner para darles un millón y medio de pesos a Nardi (por decreto y sin licitación) son la única empresa que puede hacer Agroactiva, porque claro, Agroactiva, la feria, la hace Agroactiva, la empresa. Teniendo en cuenta institucional y republicanamente este antecedente, se le transfiere la guita. Que los docentes y empleados públicos, esperen. O se encargue el gobierno nacional.\nDado que hay una necesidad imperiosa y que el tema los toma por sorpresa -la feria está a punto de empezar: arranca en junio!!- el tema no puede pasar por el presupuesto y que los legisladores busquen un consenso, sino que se saca por decreto. Algo que en este caso, está bien.\nLa transferencia de dinero estatal a Agroactiva persigue claros beneficios sociales, y de carácter progresista, dado que si bien la entrada no es libre y gratuita, las tarifas son accesibles para los chacareros y paisanos, como acá se muestra. (Los precios no incluyen IVA).\nNo es que se trata del estado bobo, de empresarios amigos, del carácter reaccionario de los gobernantes, ni de elecciones de clase. Ni que se salteen los pasos institucionales, ni que se predique una cosa y se haga otra, nada de eso. Ni ahí.\nYa en la página de agroactiva, la empresa bonaerense que favorece Binner, sobre el final de la página, pueden verse la impresionante cantidad de sponsor con que cuenta, que vienen a ser, digamos, uno solo. El Ministerio de la Producción de Subsidios, del gobierno de Santa Fe.-\nGentileza República de la Soja\n21-02-2010 / El Grupo Clarín, en su guerra contra el gobierno, terminó publicando un blog antisemita denunciado por la DAIA. Recuerdos y citas del pasado filofascista del fundador del diario.\nEl affaire del blog antisemita sólo puede explicarse en el contexto de las lógicas feroces desencadenadas por una guerra corporativa y del ensañamiento contra un gobierno que atentó contra los intereses del Grupo. Se sabe que desde que se inició el debate por la Ley de Servicios Audiovisuales los periodistas del holding recibieron instrucciones para literalmente redoblar, rebuscar, tirar, inventar o titular con toda munición posible.\nLa consecuencia de esa fanatización guerrera es que, con tal de multiplicar toda posibilidad de ataque contra el Gobierno, Clarín terminó derrapando mal, apelando esta vez a antisemitismo puro y duro.\nAl punto que la Daia, con la particular prudencia que caracteriza a esa institución, se decidió a presentar una denuncia penal no ante un juzgado, sino ante la División de Conductas Discriminatorias de la Policía Federal.\nAntes, sus dirigentes habían difundido un comunicado condenando enérgicamente “las manifestaciones antisemitas y judeofóbicas” del blog publicado por el Grupo, firmadas por el presunto periodista Eduardo Arrivillaga, “en donde se desvaloriza el accionar del funcionario diplomático Héctor Timerman por su carácter de sionista militante, sinónimo con el que se pretende cuestionar su pertenencia a la comunidad judía”.\nLa historia comenzó con la aparición del blog firmado por el presunto periodista Eduardo Arrivillaga. Con una prosa cloacal, al peor estilo servicio de inteligencia, allí se trataba al embajador argentino en EE.UU., Héctor Timerman, como un sionista sospechoso, “soldado del Mossad”. No fue la única manifestación antisemita expandida en los blogs del sistema Clarín.\nEn http://blogs.clarin.com/soberanianacional se publicó que “el Matrimonio Delictivo Kirchner da claras muestras de total subordinación al sionismo internacional, al Estado de Israel y a Estados Unidos”.\nOpinión libre, rastros nazis. Aun cuando el hecho denunciado es gravísimo, especialmente por lo que demuestra acerca de la falta de límites del Grupo, sería absolutamente imprudente acusar de antisemitismo a la planta de periodistas del grupo o a su línea editorial.\nSin embargo, parece evidente que Ricardo Kirschbaum se debe haber encontrado en un lugar más que incómodo a la hora de explicar con palabras parcas e insuficientes lo sucedido:\n“Eduardo Arrivillaga no es periodista de Clarín ni sus dichos coinciden con la línea editorial del diario”.\nSobre ese punto de la respuesta de Kirschbaum, Héctor Timerman hizo una aclaración importante:\n“Lo que no dice Kirschbaum es que todo el material de ClarinBlogs tiene el copyright de Clarín y que la directora de ClarinBlogs es Ernestina Herrera de Noble”.\nEl editor responsable de Clarín –cuyos artículos nutren de modo rutinario la batería antioficialista del Grupo– intentó explicar también que “el blog forma parte de la plataforma de blogs de la empresa Clarín Global que abrió un espacio de opinión libre”.\nLibre, tóxico, peligroso… pero además con algún nexo más que llamativo con dos etapas cruciales que hacen a la historia esencial de Clarín. La primera: la biografía misma del fundador del diario, Roberto Noble, quien supo formar parte de grupos germanófilos y antisemitas en los años de auge nacionalista y Fraude Patriótico.\nLa segunda: la íntima alianza política y empresaria con la última dictadura: desde el macizo apoyo inicial al golpe hasta la compra irregular de Papel Prensa.\nSon aquellos años en los militares, servicios y escribas parecían regocijarse con las noticias derivadas del caso Timerman o de lo que –por cadena informativa estatal y privada– se denominaba “el clan Graiver”.\nSiempre enfatizando, tal como lo hizo el tal Arrivillaga, la condición judía tanto de Timerman como de Graiver.\nLas biografías oficiales de Roberto Noble suelen pasar, mediante un salto interesante, de sus orígenes socialistas y su activismo en huelgas estudiantiles a su adscripción al desarrollismo.\nMás allá de que fue en años de la última dictadura, con su marido fallecido, cuando Ernestina Herrera de Noble comenzó a quebrar el pacto con los desarrollistas –lo que colaboró con el ascenso indetenible de la actual cúpula directiva del holding–, esas biografías omiten la relación que sostuvo Noble con lo peor de la cultura política de los años 30 y 40.\nTras una etapa como legislador de la Concordancia –el frente de conservadores y radicales antiyrigoyenistas que se impuso a fuerza de fraude–, Noble asumió como ministro de Gobierno del caudillo conservador Manuel Fresco, emblema del Fraude Patriótico y un líder particularmente destacado en la lucha contra “el capitalismo judío, ateo y comunista”.\nJunto a la esvástica. En un valioso trabajo publicado en capítulos vía internet –Cien años de antisemitismo en la Argentina–, el periodista y ex director del semanario Nueva Presencia, Herman Schiller, aporta información particularmente interesante acerca del Roberto Noble de aquellos años.\nCuenta Schiller que ya para cuando Alemania anexó Austria –es decir, cuando no había engaño posible acerca de la amenaza hitlerista–, tanto Manuel Fresco como Roberto Noble participaron junto con los nazis locales de un gran acto germanófilo. Ocurrió el 10 de abril de 1939.\nEl acto se realizó en el Luna Park –dice Schiller– “con gran despliegue de banderas con la cruz esvástica y una abundante vocinglería contra los judíos, los comunistas y la francmasonería”.\nTal como recuerda Schiller, ni Fresco ni Noble, que siete años después fundaría Clarín, “ocultaban sus simpatías por las potencias del Eje (…) Ambos, en 1937, habían producido la clausura de las escuelas obreras judías que existían en algunos lugares de la campaña bonaerense, apoyando además a los grupos de choque fascistas que realizaban tropelías en los barrios de la Capital densamente poblados por judíos”.\nEl subjefe policial a cargo de la tarea, Carlos Suárez Pinto, fue un estrecho colaborador de Noble, escribió en la ultraderechista Cabildo y se desempeñó como secretario de redacción en los inicios de Clarín.\nOtro dato histórico que aporta la publicación: “Afirmación Argentina tenía relaciones con la embajada alemana”.\nEl dato puede que aporte alguna verosimilitud a una vieja afirmación hecha por un personaje particularmente sinuoso, ya fallecido: Guillermo Patricio Kelly. Hace años el hombre solía afirmar que la fundación de Clarín fue financiada con dinero de la embajada de la Alemania nazi, tesis que hasta hoy suscriben ciertos sitios de internet que no son particularmente confiables.\nEl razonamiento, sin embargo, dada la germanofilia y las relaciones políticas de Noble, podría tener algún sustento. Y habrá que recordar que Patricio Kelly, por las razones mercenarias que fueran, fue el primero que denunció públicamente la apropiación ilegal de los hijos de Ernestina Herrera de Noble.\nClarinadas. La fundación de Clarín se produjo exactamente después del cierre de una revista llamada Clarinada (1937-1945, ver recuadro), y hay quienes relacionan el cierre de una publicación con la apertura de la siguiente.\nEn un artículo dedicado a la revista (“Un vocero antisemita en Buenos Aires: la revista Clarinada”), Daniel Lvovich, historiador de la Universidad Nacional de General Sarmiento, cuenta que Clarinada llevaba como lema “Revista mensual de propaganda argentina y contrapropaganda roja”.\nPero que “a partir de 1940 ese lema se modificaría por otro que reflejaba de manera más exacta sus contenidos: el de Revista anticomunista y antijudía”.\nApoyada por la Iglesia de la época, en Clarinada –cuyo caricaturista más célebre se llamaba Matajacoibos– se podían leer postulados como los que rescató desde el jurásico el bloguero de Clarín:\n“Clarinada combate a los judíos, porque ellos son los inventores, organizadores, directores y sostenedores del comunismo en todo el mundo. Clarinada combate a los judíos, porque los judíos, cumpliendo con las directivas de los ‘Sabios de Sión’ corrompen la moral cristiana, estimulan los vicios y los defectos humanos, para aniquilar la conquista espiritual de la humanidad hecha por Jesús, primera víctima de los Judíos deicidas”.\nVolviendo a la tesis de los peligros culturales e institucionales que supone una guerra ciega desencadenada por puras necesidades corporativas, es elocuente lo que escribió Héctor Timerman en una columna publicada en El Argentino:\n“Si uno es benevolente, podemos comparar (lo hecho por Clarín) con los diarios partidarios que reflejan un mundo visto desde la paranoia de sus dirigentes. Todo es producto de una persecución…\nClarín ha transformado sus blogs en una secuela de Der Stürmer (N. de R.: órgano oficial del nazismo), o su alter ego argentino, la revista Cabildo”.\nOperativo de prensa de la cloaca de la SIDE\nEn Clarín y mi amigo Faco en perfil, se le dio amplia cobertura a una denuncia tribial contra Cristina Fernández y el Jefe de Gabinete, Aníbal Fernández, por un montón de delitos por sacarle el negocio del fútbol al Grupo Clarín.\nLos denunciantes son ascépticamente llamados “abogados”, y se trata de un dirigente político de derecha sin suerte electoral y un ex agente de la SIDE ligado a sectores oscuros del periodismo, Enrique Pirgagini y Carlos Tórtora.\nPiragini es un denunciador serial buscando prensa para su candidatura. Página 12, en el año 2004, publicaba ésto:\nEnrique Piragini, un abogado que lleva a cuestas un abultado número de denuncias, ganó fama días atrás cuando hizo una denuncia por presunto “abandono de persona” en perjuicio de Diego Maradona. Piragini pidió que se investigue si alguien de su entorno incurrió en ese delito en perjuicio del ex futbolista. El juez de instrucción Marcelo Alvero desestimó la denuncia por “ausencia de delito”. Piragini, asiduo caminante de los Tribunales, suele hacer sus denuncias en nombre de la ONG que preside, denominada “Argentina Recupera Idoneidad en Libertad” (Ariel), más comúnmente conocida como “Ariel somos todos”. El titular de Ariel se enorgullece al asegurar que, en poco más de un año, hizo “más de cien presentaciones”. Hasta él mismo reconoció a este diario que “a veces llaman la atención porque parecen tontas para la gente que no sabe”. Sus denuncias, además, no hacen discriminación de rubro: presentó escritos vinculados con ecología, salud y corrupción.\nFue candidato a diputado en las elecciones últimas, por el ignoto Partido del Campo Popular en la provincia de Buenos Aires (Primero en la lista él, segundo, su esposa Miriam Fontenova. No pusieron un peso ni recibieron un solo peso de aportes de adherentes: sólo cobraron lo que les da el estado para los partidos políticos. El es el presidente del partido y la responsable política, su esposa).\nComo él orgullosamente lo cuenta, sacó 5.000 votos.\nConfeso amigo del “Negro Massera”, Carlos Tórtora fue agente de la SIDE en los años ochenta, ligado a los carapintadas y uno de los dueños -junto a Guillermo Cherasny- del Semanario cloacal “El Informador Público”. También columnista de Ambito Financiero y, posteriormente, operador de Carlos Corach.\nTenía experiencia, ya que le escribía los discursos a Camps.\nEl concejo deliberante de Pilar, votó una censura tras la asunción de Tórtora como Secretario legal y Técnico. Lo hizo basándose en sus contactos con Massera y su cercanía con López Rega.\nEl entonces intendente menemista(del partido de Luis Patti)\nSergio Bivort había sumado a Tórtora impulsado por Alberto Kohan y Luis Patti.\nTórtora fue mencionado por el brigadier Tomás Medina en la causa por la venta ilegal de armas, durante el menemismo, como quien desde la SIDE pretendió construir con Alberto Kohan empresas que lograran tercerizar el negocio de las armas.\nEn las últimas elecciones, al igual que su socio Piragini, fue candidato a diputado pero por el distrito porteño, a través de El Movimiento, el partido de Sosbich, que él preside en Buenos Aires. Salió último.\nLindos chicos, eh.\nEl legislador denuncia “una maniobra” para perjudicarlo\nCon drogas detienen a un asesor del senador Aquino\nLuis Machado, asesor del senador radical por Constitución Héctor Aquino, fue detenido anoche en un operativo. Se lo acusa de tener en su automóvil 48 bochas de cocaína; unos dos mil pesos falsos y de intentar eludir un control policial.\nPara ver el video con las jocosas… jugosas declaraciones del senador Aquino pulsar acá.\nUn colaborador del senador provincial Héctor Aquino fue detenido ayer con 48 bochas de cocaína y unos dos mil pesos falsos cuando intentó eludir un control policial, según informaron fuentes de la fuerza de seguridad a la agencia DyN.\nEl conductor arrestado fue identificado como Luis Machado y, según dijeron a la agencia Diarios y Noticias los voceros policiales, la detención fue concretada anoche por personal de la Dirección General de Prevención y Control de Adicciones, en la ciudad santafesina de Villa Constitución.\nEl procedimiento se realizó a las 22, en la intersección de Colón y Acevedo, cuando Machado escapó de un control policial a bordo de un automóvil Ford Escort blanco, en el que se desplazaba junto a una segunda persona, añadieron las fuentes. Los policías persiguieron al auto evasor y lo alcanzaron a las pocas cuadras, donde iniciaron el chequeo de la documentación y del vehículo.\nLas fuentes dijeron que el conductor se manifestó violento por lo que convocaron a varios testigos para iniciar la requisa. Así, la Policía detectó en la parte inferior del asiento del conductor un paquete con 48 envoltorios de nylon con cocaína fraccionados con un peso de unos 60 gramos, 97 billetes falsos de 20 pesos cada uno (por un total de 1.940 pesos) y 240 pesos de curso legal, añadieron los informantes.\nMachado forma parte de la planta transitoria del Senado y fue nombrado por Aquino como su colaborador. Quedó imputado por infracción a la Ley Nacional de Estupefacientes y declaró esta mañana ante el Juzgado Federal 3 de Rosario. La mujer de 24 años que acompañaba al chofer cuando fue detenido solo declaró en calidad de testigo.\nAquino: “Sabíamos que iba a ocurrir”\nEl senador por Constitución, Héctor Aquino, habló con El Litoral sobre lo sucedido. Aseguró que confía en la inocencia de su colaborador (que parte del personal político del Senado santafesino) y destacó que antes del operativo de control había recibido un mensaje que lo alertaba de “esta maniobra”.\nAquino dijo que “por la confianza que le tengo y por que fuimos advertidos por un mensaje de texto al celular (de Luis Machado), teníamos la información de que iban a pretender implicarlo a él y a vincularme también a mí”.\nRelató que el SMS llegó el jueves pasado y que “el viernes a las 17 me reuní con el jefe y el subjefe” de la Unidad Regional de Villa Constitución.\n“Yo les adelanté que sabíamos que esto iba a ocurrir y que Machado no tiene nada que ver: les pedí que hablen con el jefe de Drogas Peligrosas de Villa Constitución para evitar esta maniobra. Y me dijeron que sí, que iba a encargarse y es evidente que no lo han hecho o que no lo hicieron bien…”.\n“El procedimiento policial ha sido irregular y hay testigos que así lo van a confirmar. Vamos a aportar pruebas para demostrar la inocencia de Luis Machado y la maniobra que se ha montado”.\n“Nos sometemos y confiamos en la Justicia. Vamos a colaborar para aportar pruebas. Si hay alguien interesado en que el caso se esclarezca soy yo: queremos que su nombre quede limpio y que se aclaren las responsabilidades”.\nSobre los motivos de una eventual maniobra para perjudicarlo, Aquino dijo que “explicaciones puede haber varias” y que “no descartamos motivos políticos y personales. Quizá esto es una revancha por el trabajo que desarrollamos contra las drogas y el tráfico en Villa Constitución, en la concientización de los jóvenes para luchar contra las drogas”.\nAquino habló del tema con el ministro de Seguridad, Alvaro Gaviola, y el jefe de Drogas Peligrosas de la provincia, Hugo Tognoli.\n7 votos no a la reelección, un NO por cada Base Imperial!!!\nToda Colombia escuchó lo inesperado: la maquinaria uribista se quedó sin gasolina en la recta final, los nueve magistrados de la Corte Suprema anunciaron al país su decisión: 7 votos diciendole no a la reelección, un NO por cada Base Imperial fue el castigo de la voz de justicia en respuesta a la pretensión de perpetuar la masacre, la entrega, el servilismo y la sangre heroica de un pueblo. Un NO en mayúsculas a la reelección de Uribe Vélez.\nBastó que se conociera el dictamen para que las plazas de toda Colombia se vistieran con la algarabía de la rebelión popular, las fuerzas contenidas de la historia, el dolor inmenso que la vileza ha sembrado en años de sometimiento, salió ¡por fin! Hecha pueblo, hecha grito, a gritar con furia la primera gran victoria.\nDesde el 2002 este macabro narcotraficante, padre de los paramilitares y perro vendido al imperio, llenó de odio y de muerte a la hermana República de Colombia, vendió drogas al norte y asesino pueblos, pacto con las fuerzas del demonio para satisfacer su insaciable sed de dinero y poder. Cuando menos se esperaba, desde su mismo poder judicial, ya con más de treinta detenidos por sospechas de haber sido funcionarios vendidos al dinero del narcotráfico y del imperio, se atrevió toda Colombia a decir ¡NO!.\nSe acabó la pesadilla no solo de Colombia, este rotundo no a la reelección tarifada por la corrupción es apenas el comienzo de un grito de reclamo de justicia en que más de 45.000 seres humanos que fueron asesinados reclaman desde la muerte paz para sus sepulcros, donde más de 4.5 millones de desplazados reclaman su derecho a patria.\nColombia abrió los ojos y mando al Carajo a este presidente diabólico, fue profética la respuesta de Chávez días antes en Cancún. Colombia entera salió a las calles a mandar a Uribe Vélez al mismísimo carajo. Mañana Suramérica despertará con la cara mas limpia y con más esperanzas, las fuerzas indetenibles de la revolución sorprenden al mundo entero. Obama debe tener pesadillas, o debe estar llamando al supuesto sucesor Santos, pero se le está moviendo el piso.\nColombia tiene como llenar de inquilinos al carajo, tiene para mandarle santos y presos, tiene para llenarlo de bases de indignidad, tiene para llenar sus cárceles con los verdugos sanguinarios que han mutilado con motosierras a mujeres y niños, que han acribillado a humildes campesinos, que ha violado a las damas, tiene gringos vestidos de inmunidad que cuidarán la nueva República del Carajo, un lugar garciamarquiano del realismo mágico de nuestro pueblo, que empezó a habitarse desde Cancún y en medio de esta noche de gloria.\nSirvan tinto doble en pocillo grande y tengan todas sus mercedes ¡buenas noches! Despertó Colombia hermanos, la lucha sigue, pero cada día más cerca de la gran victoria.\nDespertó el pueblo hermano de Colombia, sonó atronador el carajazo en la mejilla del narcotraficante numero 82, la historia se mueve y los pueblos despiertan!!!!\nMayo será un mes de Revolución, Santos será el próximo en conocer eso que Chávez les enseño:\nLO MANDARAN A PUNTA DE VOTOS AL MISMISIMO CARAJO!!!\nSIGUE LA MARCHA INDETENIBLE A LA VICTORIA!!\nThis entry was posted on 28 febrero 2010 at 19:54 and is filed under General.\tYou can follow any responses to this entry through the RSS 2.0 feed. Both comments and pings are currently closed.


TEORIA VIROLOGIA | Virus | ARN\nCargado por Carla Federigi\nguardarGuardar TEORIA VIROLOGIA para más tarde\nGENERALIDADES DE LOS VIRUS - ESTRUCTURA PROPIEDADES - TAXONOMA LABORATORIO DE VIROLOGA CULTIVOS CELULARES - HUEVOS EMBRIONADOS\nObjetivos: Que el alumno conozca: -Las caractersticas generales de los virus, su estructura, la relacin con las propiedades fsico-qumicas. -Los principales conceptos sobre taxonoma y clasificacin viral. -Los conceptos bsicos sobre la metodologa de estudio de los virus (multiplicacin viral) -La importancia de estos conceptos para su futuro desempeo profesional CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS VIRUS Los virus pueden considerarse como un conjunto complejo de macromolculas orgnicas (cido nucleico y protenas), ordenadas tridimensionalmente, que no pueden replicarse fuera de clulas vivas. Las primeras caractersticas diferenciales de los virus con otros agentes fueron: el tamao estimado por su capacidad de atravesar filtros que retienen a las bacterias y su incapacidad para reproducirse en medios biolgicos inertes (como lo son los medios para cultivos de bacterias), requiriendo de clulas para su propagacin. Hoy en da se sabe que estas caractersticas no alcanzan para diferenciar a los virus de otros agentes biolgicos, ya que existen bacterias cuyo tamao puede ser similar al de los virus ms grandes y que otros agentes como Chlamydias y Ricketsias tambin son parsitos intracelulares obligatorios. La organizacin y composicin de las partculas virales ofrecen por s caractersticas diferenciales importantes con otros agentes:\nPoseen un solo tipo de cido nucleico: ADN ARN, cuyo tamao es relativamente pequeo con respecto al de otros agentes biolgicos.\nTienen una estructura simple y esttica. Su tamao oscila entre 20 y 300 nm (1 nanmetro = 10-9 m) No tienen sistema metablico propio y para su replicacin dependiendo de la maquinaria de la clula husped (parsitos intracelulares estrictos).\nAdems de su estructura tan simple y particular, el modo de reproduccin de los virus tal vez sea la caracterstica que justifica que tengan un lugar propio en la escala biolgica. A diferencia de los que sucede con las clulas, en el momento de su multiplicacin, los virus no aumentan de tamao para su posterior divisin binaria, por el contrario la partcula viral es desintegrada y luego se multiplica en cada uno de sus componentes (protenas y cido nucleico) para finalmente dar lugar a mltiples copias de partculas (progeie) similares a las originales, en el ltimo paso del proceso de replicacin denominado ensamblaje y maduracin. Los virus (del latn: veneno) estn ampliamente distribuidos en la naturaleza afectando\na los organismos de los reinos animal y vegetal, protistas y hongos. Pueden infectar a clulas eucariotas (virus animales y vegetales) como as tambin a clulas procariotas (bacterifagos). ESTRUCTURA VIRAL El cido nucleico del genoma viral vara entre las diferentes familias virales. Puede ser ADN, ARN, de cadena simple o doble, lineal o circular y de sentido positivo (+) o negativo (-). El material gentico est rodeado por una capa proteica denominada cpside que est constituida por copias de un nmero determinado de protenas codificadas por el genoma viral que se ordenan en unidades denominadas capsmeros. El ordenamiento final de las protenas de la cpside define la pertenencia a alguna de las siguientes simetras: icosadrica, helicoidal compleja. Algunas protenas se asocian tan estrechamente al cido nucleico que se denominan nucleoprotenas constituyendo la nucleocpside. Algunos virus (ej: adenovirus) pueden tener proyecciones (fibras) en la cpside, generalmente en los vrtices del icosaedro. Rodeando a la cpside de algunos virus existe una membrana que proviene de la membrana celular modificada de la clula donde se replic el virus y que se denomina envoltura (envelope). Esta membrana, que se puede originar en la membrana plasmtica (ej.: virus de la influenza) nuclear (ej.: Herpesvirus), est formada por una bicapa lipdica y posee glicoprotenas (protenas + hidratos de carbono) con caractersticas antignicas propias del virus y en muchos casos forman parte de ciertas proyecciones denominadas espculas. Los virus envueltos, debido a la estructura lipo-glico-proteica son ms sensibles a las condiciones ambientales y pH extremos y a los solventes orgnicos. Estructura de un virus con envoltura\ncapside acido nucleico\nNOMENCLATURA y TAXONOMIA VIRAL El nombre de los virus obedece a diferentes consideraciones. En algunos casos ste se debe a la enfermedad que ellos producen (ej.: el poliovirus que se llama as porque produce la poliomielitis), a palabras compuestas (ej.: Papovavirus que corresponde a la contraccin de los nombres papiloma, polioma y vacuolizante), al nombre de los descubridores (virus de Epstein-Barr) o hacen referencia al tejido de donde fueron aislados (ej.: adenovirus aislado de adenoides humanas). Tambin puede deberse a las caractersticas estructurales (ej.: coronavirus pues parte de su estructura se asemeja a\nuna corona), al tamao como el parvovirus (parvo: pequeo), o a una derivacin del lugar donde se detectaron por primera vez (ej.: virus Sendai o el Norwalk, Hantavirus -del Ro Hantann-). La Taxonoma viral se utiliza para la identificacin, clasificacin y agrupamiento sistemtico de los virus en categoras que revelan mutua vinculacin entre ellos mediante relaciones que a su vez indican el orden en que fueron apareciendo en la naturaleza. En 1973 se crea para ello el Comit Internacional de Taxonoma Viral (ICTV) que agrupa a los virus teniendo en cuenta los siguientes criterios: 1. La naturaleza del genoma viral (ADN, ARN) 2. Nmero de cadenas del genoma viral (una cadena o dos cadenas) 3. Propiedad de realizar transcripcin inversa 4. Polaridad del genoma viral (para los de una cadena que pueden ser positiva (+) o negativa (-) De esta forma se crean diferentes clases de virus, diversas familias y numerosos gneros El sistema utiliza una serie de taxones como se indica en negrita a continuacin: Orden (-virales) Familia (-viridae) Subfamilia (-virinae) Gnero (-virus) Especie Ejemplo: Orden: Herpesvirales Familia: Herpesviridae Subfamilia: Alphaherpesvirinae Genero: Simplexvirus Especie: Human herpesvirus 1\nOtro tipo de clasificacin es la denominada CLASIFICACIN DE BALTIMORE basada en el modo de replicacin de los genes y su expresin. Nos referiremos a ella mas adelante.\nMULTIPLICACION VIRAL Los virus son parsitos intracelulares obligados y pueden multiplicarse solamente en clulas vivas existiendo cierta especificidad para que un virus penetre a la clula husped y multiplique. Esta especificidad de unin depende tanto de las propiedades de la cubierta del virin como de receptores especficos en la superficie celular como as tambin de la existencia de factores celulares necesarios para la replicacin. Cuando se iniciaron los estudios experimentales y se desarrollaron los primeros mtodos de diagnstico de infecciones virales, debido a que no siempre era posible utilizar el husped natural (hombre, animales, etc.) se recurri a los animales de laboratorio (pequeos roedores) y huevos embrionados para multiplicar los virus. Tiempo despus aparecieron los cultivos celulares. La multiplicacin de un virus en un hospedador experimental suele presentar problemas de adaptacin por lo que se deben realizar una serie de pasajes sucesivos denominados "pasajes ciegos" hasta que se observen los signos o lesiones caractersticas o propiedades de los mismos. Cultivos celulares El desarrollo de cultivo de clulas es una de las tcnicas bsicas del Laboratorio de Virologa. Constituye el elemento fundamental para la multiplicacin viral in vitro ya que ofrece clulas vivas rodeadas de un medio inanimado que provee el mximo de condiciones favorables para lograr la infeccin y multiplicacin viral. La adaptacin de un sistema celular a un medio que permita su crecimiento y mantenimiento ofrece muchas ventajas para estudiar la interaccin virus-clula, como por ejemplo: 1- Acceso directo del virus a la clula husped\n2- Comportamiento previsible para la infeccin con determinados virus lo que hace que\npuedan mantenerse con relativa facilidad en el laboratorio. 3- Permiten el estudio de alteraciones metablicas o citopatognicas 4- Estn libres de interferencias tales como anticuerpos, hormonas, etc. Las condiciones ptimas de un cultivo varan con los diferentes tipos de clulas, lo cual exige el conocimiento del sistema para asegurar buenos resultados. Son muchas las variables a tener en cuenta y cada una de ellas merece particular atencin segn el tipo de cultivo que se realice y las clulas con que se trabaje: monocapa esttica, monocapa en sistema roller, cultivos en suspensin, cultivos de alta densidad (microcarriers). Los factores ms importantes son: 1) 2) 3) 4) Temperatura Composicin del medio de cultivo pH Concentracin de gases disueltos\n5) Caractersticas del soporte inerte en el cual se propaga el\ncultivo 6) Otros factores especficos.\nCultivos celulares primarios: Es el primer cultivo de clulas a partir de un tejido (embrin de pollo, membrana corioalantoidea, dermis, rion, pulmn, tumores).\nConstituye una poblacin mixta de clulas obtenida a partir de la dispersin del tejido original por accin digestora de una enzima (tripsina) asociada a una sustancia quelante (Acido Etilen Diamino Tetra-Actico-EDTA-). Cultivos celulares secundarios: Son los subcultivos de un cultivo primario. En la mayora de los casos solo son posibles un nmero limitado de subcultivos. deben subcultivarse con un conteo inicial relativamente alto. Lnea celular: Es una poblacin uniforme de clulas, con un ndice de Estas clulas\nmultiplicacin adecuado, derivadas de un cultivo celular primario que ha sido subcultivado durante un gran nmero de subpasajes (generalmente mas de 50 pasajes) y que a travs de seleccin espontnea a lo largo de los pasajes o por clonacin mltiple llegan a la unformidad. La American Type Culture Collection" (ATCC) es el Banco de clulas de los Estados Unidos, que describe en publicaciones varias las caractersticas de una amplia variedad de lneas celulares, su disponibilidad para diversos fines y donde son provistas como as tambin las instrucciones para la preparacin de los medios de culivo necesarios para su multiplicacin, almacenamiento y congelamiento de las mismas ("Catlogo de lneas celulares e hibridomas de ATCC") Actualmente la ATCC posee lneas celulares de referencia, ya caracterizadas, derivadas de una amplia gama de especies, hibridomas, lneas obtenidas por ingeniera gentica, etc. Todas estn conservadas en nitrgeno lquido. En Argentina existe, cumpliendo similares tareas, la Asociacin\nBanco Argentino de Clulas (ABAC) que funciona en el "Instituto Viral de Enfermedades Humanas" (INEVH) de Pergamino y en el Instituto Nacional de Tecnologa Agropecuaria (INTA) de Castelar. D re te tip s ife n s o d c lu s u a a e v lo a e la s d s n iro g A C ltiv p a d c lu s fib b s a d m m ro : u o rim rio e la ro l tic s e a fe . B L e c lu r d c lu s fib b s a . : n a e la e la ro l tic s C L e c lu r e ite id . : n a e la p lio e\nAnimales de experimentacin El uso de animales receptivos fue el primer mtodo utilizado para la multiplicacin de los virus. En algunos casos tambin pueden emplearse para el diagnstico si se induce y se considera una respuesta clnica positiva o negativa ante\nuna infeccin experimental. Los animales de laboratorio ms utilizados son: ratones, hmsters, cobayos, conejos, hurones, monos y embriones de pollos. Pequeo roedores de laboratorio: Las vas de inoculacin a utilizarse dependen del virus estudiado y su posible histotropismo. La inoculacin puede realizarse por va subcutnea (SC), intramuscular (IM), endovenosa (EV), intracardaca (ICa), intraperitoneal (IP), intranasal (IN) e intracerebral (ICe). Se dan casos especiales de inoculacin intratesticular y por ej. escarificacin de la crnea del conejo para el caso de demostracin de virus varilico. Los animales deben estar perfectamente identificados. Los que mueren dentro de las primeras 24-48 horas pos-inoculacin son descartados debido a que se consideran muertes inespecficas producto de la inoculacin o de la va empleada. Los inoculados se observan diariamente para detectar la presencia de signos clnicos posibles; los que mueren deben ser necropsiados y al final de la experiencia los sobrevivientes deben ser sacrificados. En las necropsias se observar si existen lesiones, se recoger material, en caso de que sea necesario, y finalmente los cadveres se esterilizan en autoclave o se incineran en horno crematorio. Huevos embrionados: Los huevos utilizados para estudios virolgicos deben ser obtenidos de aves en buen estado, sanas, libres de infecciones bacterianas o virales. Las principales razones que llevan a utilizar huevos embrionados en estudios virolgicos son:\nSe pueden adquirir con facilidad Son baratos Poseen tamao adecuado No se forman anticuerpos contra el virus inyectado porque carecen de respuesta\ninmune El xito de una infeccin en huevos embrionados puede manifestarse como:\nmuerte del embrin. alteraciones macro y/o micropatolgicas. formacin de cuerpos de inclusin presencia de depsitos de urea hemorragias sobre las membranas retraso del crecimiento embrionario engrosamiento, edematizacin y fibrosis de las membranas\nlesiones focales caractersticas (ej. virus de la viruela) En algunos casos pueden no producirse manifestaciones visibles y, en tal caso, el xito de la infeccin se manifiesta por la demostracin de antgenos especficos en los tejidos y en los lquidos. Algunos de los factores que influyen sobre la multiplicacin del virus en el embrin de pollo son: Edad del embrin Va de inoculacin Dilucin y volumen del inoculo\nTemperatura y humedad de incubacin Tiempo de incubacin Antes de ser inoculados, los huevos deben ser incubados durante el tiempo ptimo\npara que el embrin, las cavidades extraembrionarias y sus membranas posean el tamao necesario segn la va de inoculacin a emplear. La va de inoculacin a seleccionar depender de la afinidad del virus por el tipo de clula constituyente del embrin y sus membranas (origen endodrmico, mesodrmico, ectodrmico) y de acuerdo a la va que se utilizar ser la edad de los embriones a utilizar. Vas de inoculacin Membrana coroalantoidea: se utilizan embriones de 10-12 das. Cavidad alantoidea: se emplean embriones de 9-12 das. Cavidad amnitica: se pueden utilizar embriones de 7-15 das. Saco Vitelino: se emplean embriones de 5-8 das de incubacin. Va intracerebral: puede practicarse en embriones de 8-14 das. Va endovenosa: de muy poca aplicacin en virologa. Se utilizan embriones de 10-15 das.\nCavidad amnica Casca ra\nMembrana d la cascara areo Inoculacin amnitca Inoculacin en Inoculacin alantoidea\nPATOGENIA DE LAS INFECCIONES VIRALES TOMA DE MUESTRA - AISLAMIENTO VIRAL Objetivos: Que el alumno conozca: - Los conceptos generales sobre patogenia viral - Los efectos de una infeccin viral sobre la clula husped - Los conceptos bsicos sobre la metodologa de estudio de los virus: toma de muestras a partir de casos clnicos para el diagnstico por aislamiento viral. GENERALIDADES SOBRE PATOGENIA DE LAS INFECCIONES VIRALES El trmino patogenia se refiere a los mecanismos de generacin del dao o enfermedad, en este caso, producidos por una infeccin viral. La patogenia puede estudiarse a distintos niveles segn se considere como husped a la clula, al individuo o a la poblacin. Los factores que intervienen en su desarrollo se pueden clasificar en tres grupos que interactan entre s: Factores dependientes del virus: Son los inherentes a la estructura viral. Se conoce que slo cierto tipo de virus pueden infectar clulas del aparato respiratorio y por lo tanto originar enfermedades como bronconeumona y otros el sistema nervioso central (SNC) y producir encefalitis. Incluso, dentro de ellos, algunas cepas resultan ms virulentas (Ej. adenovirus 3 y 7 causantes de enfermedades respiratorias). Factores dependientes del ambiente: Condiciones medioambientales como, temperatura, humedad, salinidad, pH, ventilacin, etc., pueden influir en la viabilidad del virus antes de llegar a la clula husped y afectar su capacidad de infectar. La presencia de envoltura lipoproteica le confiere mayor labilidad a la partcula viral, por lo tanto los virus desnudos resisten mejor las condiciones ambientales adversas. Factores dependientes del husped: Factores innatos como, raza, sexo, estado inmune, estado nutricional y otros, definen la resistencia o susceptibilidad ante los virus; a travs de receptores celulares especficos y la capacidad de montar una respuesta inmune. Patogenia a nivel celular Los virus producen diversas alteraciones al infectar las clulas. Estas se conocen con\nel nombre de efecto citoptico o citopatognico (ECP) y ocurren tanto en las clulas de los organismos vivos como en las clulas de cultivos in vitro. A menudo este ECP es tan caracterstico que permite tener una idea aproximada del virus que lo produce; por lo tanto, esta propiedad es importante en el diagnstico de laboratorio. Las alteraciones que producen los virus en las clulas infectadas van desde aqullas que no conducen en forma inmediata a la muerte celular, a aquellas que destruyen la clula y que se denominan efectos citolticos o lisis. Principales efectos citopticos: 1.- Lisis celular. La destruccin celular se debe fundamentalmente a la detencin de la sntesis de macromolculas celulares, por algunas protenas virales. Con posterioridad, durante la fase tarda del ciclo replicativo de ciertos virus, (ej: adenovirus, virus polio) la acumulacin de grandes cantidades de protenas capsulares puede producir la inhibicin general de los procesos de biosntesis de macromolculas, tanto virales como celulares, ocasionando la lisis y liberacin de gran cantidad de viriones. 2.- Fusin celular. Ciertos virus codifican y poseen en su estructura, algunas protenas que tienen la propiedad de fusionar membranas celulares. La presencia de estas protenas en la superficie de las clulas infectadas o la presencia de partculas virales entre dos clulas vecinas permitir la fusin celular, dando origen a clulas multinucleadas que reciben el nombre de clulas gigantes, policariocitos o sincicios. Los virus como el del sarampin, el respiratorio sincicial, el herpes simplex y algunos retrovirus, poseen este tipo de protenas y son capaces de pasar de una clula a otra. 3.- Expresin de protenas y antgenos. Durante la infeccin viral, en la clula, aparecen y desaparecen protenas, tanto celulares como virales. En la infeccin por virus envueltos aparecen en la superficie de la clula infectada las protenas de la envoltura viral. Por ejemplo, en la infeccin por virus influenza aparecen en la superficie de la clula infectada las hemaglutininas virales que puede unir glbulos rojos produciendo un fenmeno de hemadsorcin. Tambin es posible detectar estas protenas mediante el uso de anticuerpos especficos, considerando que son antgenos virales. 4.- Cambios morfolgicos. Algunas protenas virales y otras celulares, inducidas durante la infeccin, pueden actuar sobre el sistema del citoesqueleto celular. Su alteracin origina que la clula se redondee, como ocurre con aqullas infectadas por los herpesvirus y los adenovirus. Las clulas que poseen cilios, como las del tracto respiratorio, pierden su funcionalidad ciliar durante la infeccin por virus respiratorios. 5.- Cuerpos de inclusin. Son estructuras que aparecen durante la infeccin por determinados virus. En algunos casos podran corresponder a sitios de agregacin de\nprotenas virales o viriones. Tambin poseen la propiedad de teirse con colorantes cidos o bsicos, presentan una localizacin intracitoplasmtica y/o nuclear. 6.- Proliferacin celular. Ciertos virus inducen la sntesis de ADN celular y determinan que las clulas infectadas proliferen antes de provocar su destruccin. Este hecho es fcilmente observable en las infecciones por virus papiloma, responsables de las verrugas. 7.- Alteraciones cromosmicas. Los virus pueden provocar cambios a nivel nuclear que conducen a la desintegracin de la cromatina de las clulas infectadas, como ocurre en las infecciones por virus herpes simplex. En otros casos las alteraciones nucleares pueden ser tan sutiles que no se detectan sino por metodologas moleculares. 8.- Transformacin celular. Ciertos virus DNA y los retrovirus pueden integrar el ADN viral sintetizado durante la replicacin en el genoma celular, generando clulas transformadas que se comportan in vitro en forma semejante a las clulas cancerosas. Mecanismos de lesin El dao en las clulas infectadas afecta a los tejidos y rganos y constituye uno de los elementos esenciales y determinantes en la patogenia. Este dao se puede producir directamente por la accin de los virus, o bien indirectamente, por accin de otros mecanismos, en especial los del sistema inmune. El reconocimiento de alteraciones celulares, como expresin de antgenos en la superficie celular, permite a las clulas del sistema inmune (especialmente linfocitos T citotxicos) y a los anticuerpos especficos, (actuando en conjunto con el complemento), destruir a las clulas infectadas por virus. Este mecanismo se ha denominado tambin de tipo inmunoalrgico. Otro mecanismo indirecto guarda relacin con la activacin de genes que controlan la llamada muerte celular programada o apoptosis. Patogenia a nivel del individuo Los factores que intervienen en la patogenia de las virosis a nivel del individuo son los que se describen a continuacin: Fuentes de contagio: El origen de las enfermedades virales que afectan al hombre y los animales son generalmente otros humanos o animales infectados. Mecanismos de transmisin: Se clasifican en directos o indirectos segn la forma de transmitirse desde la fuente de contagio al individuo susceptible de infectarse: A.- Directos: A1 con contacto fsico. A2 sin contacto fsico. A1 Aquellos que necesitan contacto fsico entre los individuos para propagarse se favorecen por la presencia de lesiones en las barreras mecnicas, representadas por\nla piel y las mucosas. Estas actan como puerta de entrada y en general requieren de un contacto fsico relativamente estrecho. Ej: verrugas causadas por virus papiloma. A2 Las enfermedades virales que no requieren contacto fsico se contagian a travs de las secreciones eliminadas por los individuos infectados, cuyo ejemplo ms ilustrativo es el aerosol de partculas que se emiten al hablar, estornudar, etc. y que contienen virus. Este mecanismo es muy efectivo y es usado por la mayora de los virus exantemticos, respiratorios y otros para propagarse. B.- Indirectos: B1 a travs de un vehculo. B2 a travs de un vector: - mecnico. - biolgico. El mecanismo indirecto implica la accin intermediaria de un elemento inerte (vehculo) o vivo (vector) en el contagio. El rol del agua y los alimentos como vehculo de transmisin de infecciones virales entricas ser eficiente en aquellos virus que estructuralmente estn condicionados para permanecer viables en el medio ambiente, como sucede con los enterovirus, rotavirus y otros. Los vectores pueden ser mecnicos, si el virus es transmitido en forma pasiva (ej.: moscas en infecciones entricas, tbanidos en el virus de la anemia infecciosa equina), o biolgicos, si el virus se multiplica y desarrolla un ciclo reproductivo en ellos (ej: virus de la Encefalitis del Nilo). Puerta de entrada: Lugar por donde los virus pueden ingresar al organismo a travs de la infeccin de uno o varios tejidos. El hecho fundamental para que un rgano constituya una puerta de entrada de la infeccin es que las clulas de stos tengan receptores para permitir la adsorcin y penetracin de determinados virus. Las puertas de entrada tambin representan barreras defensivas contra las infecciones virales, por ejemplo la mucosa respiratoria tiene cilios, secreciones, inmunoglobulinas y enzimas que dificultan la adsorcin viral; el pH gstrico es una barrera para los virus que ingresan por va digestiva.Para actuar como sitio de ingreso del virus estas barreras tienen que estar alteradas por ejemplo la piel que habitualmente requiere de una solucin de continuidad para permitir el ingreso de un virus. Vas de diseminacin: Dependiendo del modelo de infeccin viral, el virus puede permanecer en la puerta de entrada (infeccin local) permaneciendo en este sitio o a clulas vecinas o bien diseminarse a rganos distantes (sistmica) por diferentes vas. Las principales formas de diseminacin son: a) Local. Ej. Bronconeumona por virus respiratorio sincicial, verruga por virus papiloma. b) Sistmica: - sangunea (a traves de clulas sanguneas). Ej. Virus de la viruela - neural (por las terminaciones nerviosas). Ej. Virus de la rabia.\n- vertical (de madre a hijo). Ej. Virus de la diarrea viral bovina En este ltimo caso puede ocurrir por varios mecanismos: 1) va sangunea transplacentaria. Ej: virus rubola; HIV, virus hepatitis B. 2) contigidad a travs del canal genital durante el parto. Ej. virus herpes simplex, HIV, virus papiloma. 3) Alimentacin con leche materna. Ej. citomegalovirus, HIV. rgano blanco. La infeccin viral debe alcanzar los rganos que tienen receptores para los virus infectantes, para poder replicar en sus clulas. As, se originan las manifestaciones propias de la enfermedad. Este tropismo de los virus por ciertos tejidos fue utilizado para clasificarlos en: virus neurotrpicos (Ej. virus de la poliomielitis), virus dermatotrpicos (Ej. virus del sarampin), virus respiratorios (Ej. adenovirus), virus entricos (Ej. Enterovirus), etc. Posteriormente se demostr que este tropismo no era exclusivo y que muchas veces el fenmeno ms interesante no corresponda a su clasificacin. As, por ejemplo, la muerte por sarampin se debe generalmente a bronconeumona; ya que el aparato respiratorio es uno de sus rganos blanco. La forma ms habitual de presentacin de una infeccin por virus polio es la asintomtica, en que el virus slo se replica en el aparato digestivo, sin alcanzar el SNC. Las infecciones por adenovirus pueden provocar muerte por compromiso generalizado de hgado, pulmn, encfalo; etc. Y los enterovirus ECHO y Coxsackie frecuentemente provocan exantemas o meningoencefalitis. MODELOS DE INFECCION VIRAL A nivel del individuo, el destino final del contacto de un virus con un individuo estar determinado por la interaccin de los factores antes mencionados, pudiendo evolucionar de distintas formas: Infeccin aguda: Infeccin limitada en el tiempo, donde el virus es eliminado del organismo y el husped se recupera. Esta puede presentarse con o sin sntomas. Ej: resfro comn por rinovirus, laringitis por virus parainfluenza, diarrea por rotavirus. A veces puede seguir una evolucin grave y producir la muerte. Infeccin persistente: Despus de la infeccin inicial sintomtica o no, el virus completo o su genoma se mantienen en el organismo por tiempo prolongado -meses, aos o de por vida (con o sin manifestaciones clnicas). Segn su condicin o estado replicativo, la infeccin persistente puede ser: a.- Latente. El virus permanece oculto en el organismo por tiempos variables posterior a la infeccin inicial, pudiendo reactivarse una o ms veces. Tanto la primoinfeccin como las reactivaciones pueden ser con o sin manifestaciones clnicas. Durante la latencia puede detectarse el cido nucleico viral, pero el virus infectivo no es\ndemostrable. b.- Crnica. El virus infecta en forma clnica o inaparente, y permanece en multiplicacin continua, con o sin integracin al genoma celular. Esta replicacin viral puede demorar aos en producir manifestaciones clnicas. Ej. Hepatitis crnica por virus hepatitis B, rubola congnita y HIV. c.- Lenta. La primoinfeccin generalmente es asintomtica y el virus no es detectable. Aos despus, se manifiesta como un cuadro severo, progresivo, que en meses lleva a la muerte. Los ejemplos se encuentran en infecciones virales convencionales, como la panencefalitis esclerosante subaguda por el virus del sarampin y en otros denominados no convencionales, porque todava no est bien determinada la naturaleza del agente (Ej. priones). Infeccin transformante: En este tipo de infeccin, el virus es capaz de infectar las clulas, pero no puede producir partculas virales en forma significativa que implique destruccin celular. Generalmente el genoma viral est presente en la clula (integrado) y slo parte de sus genes se traducen en protenas virales. Estas originan cambios en las propiedades celulares o transformacin celular, a travs de la interaccin con genes y protenas celulares, originando un tumor benigno o maligno. Ej: verruga por virus papiloma 2, carcinoma crvico uterino por virus papiloma 16-18.\nMODELOS DE REPLICACIN VIRAL CUANTIFICACIN VIRAL Objetivos: Que el alumno conozca: - Las caractersticas generales y las diferentes etapas del mecanismo de replicacin viral - Los principales conceptos sobre la clasificacin de Baltimore - Los mtodos de cuantificacin viral REPLICACION VIRAL Los virus son parsitos intracelulares obligados por cuanto carecen de organelas que les permitan una vida auttrofa. La cintica de replicacin viral vara dependiendo del tipo de genoma que posea el virin. La replicacin viral requiere de una interaccin entre los distintos compartimentos celulares y las macromolculas virales. Las protenas virales son sintetizadas en los ribosomas libres en el citosol o asociados al retculo endoplsmico rugoso (RER) y son transportadas por sistemas de vesculas hacia los distintos componentes del aparato de Golgi como se observa en el siguiente esquema. La localizacin celular de las protenas virales est sujeta a informacin presente en las mismas en el conjunto de los primeros aminocidos sintetizados en el ribosoma y que constituye el cdigo de direccionamiento de la protena en un determinado espacio celular. Es por eso que algunos virus tienen replicacin estrictamente citoplsmica, mientras que otros alcanzan el ncleo celular, todo dependiendo de la adaptacin realizada entre los virus y las clulas que las hospedan.\nLas protenas que se dirigen al aparto de Golgi son modificadas mediante un proceso de maduracin que requieren del sistema enzimtico presente en los diferentes compartimientos del aparto de Golgi y la protena as madura poseer las funciones de protena estructural o no estructural. Las glicoprotenas virales requieren de este sistema de transporte para garantizar su localizacin en la membrana celular, mientras que otras protenas que constituyen las cpsides virales pueden realizar su proceso de sntesis y transporte en el sistema de citosol y dirigidos por el citoesqueleto celular.\nLa produccin de partculas virales requiere que la clula sintetice ARNm y de esta manera se utiliza la maquinaria biosinttica celular para la sntesis de protenas virales. La clula eucariota slo posee a nivel nuclear las enzimas necesarias para la produccin de ARNm a partir de ADN de doble cadena, por esta razn en caso que el virus posea un genoma diferente al ADN de doble cadena debe aportar a la clula las enzimas necesarias para la sntesis de ARNm. Por convencin se denominan cadenas genmicas (+) aquellas que se escriben en direccin 5-3 o en el caso de los ARN aquellos que se reconocen como ARNmensajeros. Las familias virales se organizan entonces y de acuerdo a la composicin genmica en 7 grupos arbitrarios que se reconoce como la Clasificacin de Baltimore que consiste en clasificar a los virus teniendo en cuenta el modo de replicacin de los genes y su expresin. En ella el ARNm juega un papel central, de modo que los virus que constituyen un grupo siguen el mismo camino para la sntesis del ARNm. Todos los virus independientemente de cul sea su genoma confluyen por diferentes mecanismos de transcripcin en la produccin a nivel intracelular con la\nformacin de ARNm para la sntesis final de protenas virales. El tipo viral segn la clasificacin de Baltimore se asigna en nmeros romanos: Grupo I: virus con genoma de tipo ADN de doble cadena (Adenoviridae, Herpesviridae, Papovaviridae, Poxviridae). Las familias Adenoviridae y Herpesviridae replican en el ncleo celular. La familia Poxviridae se replica en el citoplasma y posee sus propias enzimas para la replicacin genmica. Grupo II: virus con genoma de tipo ADN de cadena nica (Parvoviridae). La replicacin de esta familia viral se realiza en el ncleo. Se sintetiza la cadena (-) de ADN que a su vez sirve de molde para la sntesis de genomas virales y para la sntesis de cadenas de ARNm. Grupo III: virus con genoma de tipo ARN de doble cadena (Reoviridae). El genoma de los miembros de esta familia viral es segmentado. Cada segmento se transcribe en forma independiente para producir un ARNm. Grupo IV: virus con genoma de tipo ARN de cadena nica y sentido positivo (+) (Astroviridae, Caliciviridae, Coronaviridae, Flaviviridae, Picornaviridae, Togaviridae). Grupo V: virus con genoma de tipo ARN de cadena nica y sentido negativo (-) (Arenaviridae, Bunyaviridae, Filoviridae, Paramyxoviridae, Orthomyxoviridae, Rhabdoviridae). Estos virus requieren de una ARN polimerasa ARN dependiente. Grupo VI: virus con genoma de tipo ARN de doble cadena, sentido (+) y ADN intermediario en su ciclo (Retroviridae). Son los nicos virus diploides en los que el ARN no codifica sino que sirve de molde para la transcripcin inversa. Grupo VII: virus con genoma de tipo ADN con ARN intermediario (Hepadnaviridae). Como los retrovirus tambin hacen retrotranscripcin pero a diferencia de ellos se lleva a cabo durante el proceso de maduracin viral. Para una observacin global y grfica de este tipo de clasificacin y, a modo de representacin esquemtica y como material complementario, se presentan en esta gua las siguientes figuras que representan a cada uno de los grupos:\nentonces la patogenia de la infeccin viral es\nimportante conocer cual es la secuencia de acontecimientos observados en el interior de la clula husped. Si bien los pasos que se enumeran a continuacin no son un esquema rgido y nico en el interior de la clula infectada, sirven como organigrama para comprender como funcionan los virus y los mecanismos patognicos. A pesar de las diferencias que existen en las estrategias de replicacin, los\ndiferentes esquemas contienen los siguientes pasos bsicos: 1. UNION, ANCLAJE o ADSORCIN: depende de la interaccin fsica entre el virin y la superficie de la clula husped. Esta interaccin determina especificidad de especie. De un lado el virus aporta las protenas de unin y por otro lado las clulas aportan los receptores de membrana. Este paso involucra el concepto de afinidad entre virin y clula, lo que nos explica porque los virus pueden ser selectivos de rgano o tejido (tropismo) y el porque hay agentes que causan infecciones localizadas generalizadas. 2- PENETRACIN: se refiere a la introduccin de la partcula viral dentro de la clula, la internalizacin de la nucleocpside por endocitosis o por fusin de la envoltura viral con la membrana plasmtica. 3- DECAPSIDACIN O DESNUDAMIENTO: el cido nucleico se libera de la nucleocpside. En general participan enzimas de la clula husped y es un prerrequisito para la expresin del genoma viral. 4. TRANSCRIPCION: se define transcripcin como el proceso por el cual se transfiere la informacin gentica de una secuencia de nucletidos de una molcula de cido nucleico a otra. Este paso requiere la formacin de un ARNm a partir de una molcula de ADN o la formacin de una cadena de ARN complementario en caso de virus con genoma en forma de ARN monocatenario de polaridad negativa. En los virus que poseen ARN (+) el genoma se comporta como un ARNm por lo tanto puede ser usado directamente para la sntesis de protenas. En los virus con ARN (-) el material gentico posee la secuencia de nucletidos necesaria para la sntesis del ARN complementario el cual funcionar como mensajero. Este ARN (-) requiere de una ARN polimerasa ARN dependiente (transcriptasa) que es codificada por el virus. Para la produccin de ARN mensajero o para la replicacin genmica los virus poseen unas enzimas que se denominan ARN polimerasas ARN dependientes. Estas enzimas cumplen con funciones de replicacin cuando la funcin es la de copiar el ARN viral para formar nuevos genomas. Cuando las enzimas producen ARNm se designa que tienen una funcin de transcripcin. La mayora de los virus ADN se multiplican en el ncleo y dependen de ARN polimerasas celulares ADN dependientes. 5- TRADUCCIN: El ARNm, tanto de virus ARN como ADN, es traducido y se sintetizan las protenas. Se lleva a cabo en el citoplasma por los ribosomas celulares, dando lugar a la biosntesis de protenas virales. 7- REPLICACION : durante esta fase tiene lugar la sntesis de ARN o ADN viral que sigue el esquema de Watson y Crick de bases complementarias. En el caso de virus o\ncon genoma de tipo ADN estos pueden utilizar durante esta fase las ADN polimerasas de la clula presente en el ncleo celular o poseer su propia ADN polimerasa. En el caso de virus cuyo genoma se encuentra en forma de ARN se utilizan replicasas que tienen como funcin la formacin de ARN a partir de cadenas complementarias o intermediarios replicativos que sirven de molde o templado. 8- ENSAMBLAJE : durante esta fase hay organizacin de las macromolculas virales (protenas y cidos nucleicos) tendientes a la formacin de viriones maduros. En el caso de partculas virales con envoltura, la nucleocpside se organiza y ensambla por debajo de la unidad de membrana celular, donde se han localizado la glicoproteinas virales. En el caso de virus desnudos la cpside se ensambla alrededor del genoma viral.\n9- LIBERACION: Durante esta fase ocurre la salida de los viriones infectantes. Hay dos procesos que pueden tener lugar, de un lado la citlisis y de otra parte los virus pueden ser liberados por un proceso de gemacin; este ltimo es un proceso de endocitosis inversa (exocitosis) que si no produce dao a la membrana celular puede conllevar a infecciones latentes. Debe recordarse adems que en la fase inicial ocurre lo que se conoce como periodo de eclipse, el cual estara dado in vitro como el lapso transcurrido entre la desaparicin de los viriones en el medio circundante, la denudacin, la liberacin del genoma viral a nivel intracelular y la aparicin de nuevos viriones. Otros definen lo que se conoce como periodo de latencia el cual estara comprendido entre la captacin de viriones infectantes hasta la aparicin del primer nuevo virin en el medio circundante.\nLos periodos de eclipse y latencia pueden hacerse iguales en el caso de los virus cubiertos que maduran tomando parte de la membrana celular.\nLa replicacin viral es entonces un proceso complejo y variado que depende fundamentalmente del tipo de cido nucleico y de la organizacin gentica de cada virus en particular.\nPara la identidad, actividad y/o potencia de una preparacin viral deben utilizarse mtodos de cuantificacin adecuados y perfectamente estandarizados. Es importante que el profesional posea los conocimientos bsicos sobre este tema ya que en su actividad se encontrara frecuentemente con inmungenos contra enfermedades virales en los que se detalla cmo estn elaborados y la cantidad de partculas virales que poseen, si las mismas estn activas o inactivadas, etc. Las partculas virales pueden ser cuantificadas desde dos puntos de vista: a- constitucin fsico-qumica b- actividad biolgica En el primer caso solo contabilizamos partculas sin determinar si son o no infecciosas. En el segundo caso cuantificamos infectividad. a) Cuantificacin por propiedades fsico-qumicas Teniendo en cuenta su constitucin fsico-qumica podramos utilizar por ej.: * Microscopa electrnica. * Propiedades hemaglutinantes (HA) * Presencia de enzimas especficas * Propiedades antignicas (Fijacin del complemento, precipitacin) Microscopa electrnica La ME permite cuantificar las partculas virales presentes en una muestra. Se puede determinar el nmero de partculas virales por campo y conociendo el volumen en la grilla de muestra se puede calcular el ttulo del virus en partculas virales por ml. Sin embargo se debe tener en cuenta que en este mtodo solo contamos partculas virales sin poder determinar si las mismas son infecciosas o no.\nImagen de herpesvirus al Microscopio electrnico Hemoaglutinacin Se denomina Hemoaglutinacin (HA) a la capacidad que presentan ciertos virus de aglutinar los glbulos rojos de distintas especies animales La capacidad de hemoaglutinacin refleja el hecho de que algunos eritrocitos poseen receptores para ciertos componentes de la superficie de las partculas virales que funcionan como protenas de adherencia a las clulas. En el caso de los Ortho y Paramixovirus estos componentes de la superficie de las partculas virales llamados hemoaglutininas son espculas glicoproteicas. Los Orthomixovirus poseen dos tipos de espculas, unas con actividad de hemaglutinina (HA) y otras con actividad de enzima neuraminidasa (NA). Los Paramixovirus poseen las dos actividades en una sola espcula. Los virus que poseen propiedades hemoaglutinantes son heterogneos en cuanto a tamao, afinidad de receptores, condiciones en que se produce la hemaglutinacin y caractersticas del antgeno hemoaglutinante, pero el fenmeno de la HA es bsicamente similar en todos los casos. Una hemoaglutinina se une simultneamente a dos glbulos rojos establecindose un puente entre ellos. Si el nmero de clulas excede al nmero de partculas virales, se forma un nmero pequeo de dmeros celulares que por lo general no es detectable, pero si la concentracin vrica es bastante elevada se forman puentes mltiples que dan lugar a un enrejado de clulas aglutinadas que se depositan de una forma muy caracterstica, perfectamente diferenciable del patrn de sedimentacin que presentan las clulas noaglutinadas. La prueba de HA es una reaccin fsico-qumica y se utiliza para la titulacin adecuada de una suspensin viral que aglutinar un nmero estandarizado de eritrocitos. La prueba de HA no es muy sensitiva ya que son necesarias\nhemoaglutinante. Por ello, cuando dicha suspensin viral es titulada, la misma es diluida solo en base 2 (1:2, 1:4, etc.) Los anticuerpos producidos en respuesta a la infeccin por cierto tipo de virus que, como anteriormente se mencion, presentan en su envoltura hemoaglutininas, las que actan como potentes antgenos (Orthomixo, Paramixo y Togavirus) son inhibidores de la hemaglutinacin y esta tcnica se utiliza entonces para evaluar la capacidad de los anticuerpos para bloquear una infeccin viral especfica. La reaccin de HI es una verdadera reaccin inmunolgica\nb) Cuantificacin por propiedades biolgicas Desde el punto de vista de su actividad biolgica (infectividad), la titulacin de un virus es un ensayo cuantitativo en el que se utilizan diluciones sucesivas de la suspensin viral (de un factor constante determinado) y se contabilizan el nmero de respuestas positivas sobre el nmero total de respuestas posibles producidas en un sistema hospedador determinado. La actividad biolgica de un virus puede manifestarse por su accin sobre una sola clula o bien sobre varias clulas. Todos los mtodos de cuantificacin viral en los que se emplea infectividad como factor determinante son de 105 - 107 veces ms sensibles que los mtodos que se basan en las propiedades fsico-qumicas.\nExisten dos sistemas fundamentales de determinacin viral por medio de su actividad biolgica o infectividad: Mtodo de placa, pocks o tumor: Es un mtodo enumerativo y se basa fundamentalmente en que se considera que una partcula viral infecciosa es capaz de producir un efecto observable, por lo tanto un efecto observable = una partcula viral. Se utilizan monocapas celulares mantenidas bajo una capa de medio semislido para impedir el pasaje de la progenie viral al sobrenadante lo que posibilitara la aparicin de nuevos focos (alejados del sitio inicial de infeccin) con el consiguiente error de los resultados. Pueden utilizarse otros sustratos celulares como el embrin de pollo (membrana corioalantoidea) donde es posible observar la presencia de pocks. Para el caso de virus tumorales se contabilizan los focos neoplsicos producidos en animales o en monocapas celulares. La actividad biolgica del virus sobre la clula puede registrarse de varias formas como por ejemplo: A- Efecto citopatognico (ECP) como la lisis celular: se detecta por colorantes especficos (azul tripn que tie clulas muertas o rojo neutro que tie clulas vivas) B- ECP como la formacin de clulas multinucleadas (Tincin H-E) Si el nmero de efectos observables es elevado, se hace confluente y dificulta la observacin, se deben realizar diluciones hasta lograr un N adecuado que permita el conteo. Si el nmero de efectos observables en los sustratos infectados con diferentes diluciones de la misma mezcla viral son proporcionales a la concentracin del virus, tendremos entre ambas (concentracin de virus versus nmero de efectos) una relacin lineal\nMtodo de punto final 50%: Este tipo de anlisis cuantitativo se basa en la estimacin del nmero de respuestas positivas sobre el total de respuestas posibles, utilizando un clculo estadstico que determina la cantidad de dosis infectantes contenidas en el inculo. Las diluciones menores de virus contendrn ms Dosis infectantes que las mayores y entre ellas habr un gradiente de actividad. Se ha establecido determinar el 50 % de actividad y tomarla como Dosis infectante 50 %. El mtodo mas comnmente utilizado para la interpolacin del Punto Final 50% es el Mtodo de Reed y Muench. Se basa en la respuesta todo o nada es decir positiva o negativa sin que haya calificaciones intermedias. La respuesta o reaccin producida en el hospedador debe ser tpica de la infeccin producida por el virus de tal modo que permita su interpretacin sin dificultad. El virus a estudiar se inocula en diluciones a su respectivo hospedador: ratas, ratones, embrin de pollo, cultivo celulares, etc. Entre los criterios a utilizar para la lectura tomamos por ej: * Muerte o alteraciones del animal embrin * Efecto citoptico sobre cultivos celulares Los resultados deben expresarse de acuerdo al mtodo utilizado y solo podrn ser reproducibles siempre que se use el mismo mtodo y el mismo sistema, el que deber ser referido en el resultado. Ej: Dosis letal ratn 50%; Dosis infecciosa pollo 50%, Dosis paralizante ratn 50%, Dosis letal embrin de pollo 50%, Dosis infectante cultivo de tejido 50%, etc.\nRESUMEN: El punto final 50% en la titulacin de una suspensin viral, es la dilucin de virus que produce el 50% de efectos positivos. El ttulo es la inversa de aquella dilucin a la cual reaccionan, estadsticamente, la mitad de los sujetos infectados o unidades reveladoras. Figura 1: Modelo de titulacin en microplaca. Lectura de presencia de ECP en celulas infectadas con 0, 1 ml de diluciones en base 10. Mtodo de Reed y Muench A B C D E F G H -1 + + + + + + -2 + + + + + + -3 + + + + + + -4 + + + + + + -5 + + + -6 -7 -8 9 10 11 12\nVemos que el punto final 50% del virus est en la dilucin de 10 -5 (tres de seis reacciones positivas). La inversa de este valor = 105 DICT50 es el ttulo de la suspensin vrica original que es equivalente a 100.000 partculas virales. En el caso de que el 50% de los efectos observables se encuentre entre una u otra dilucin debe realizarse un clculo estadstico conocido como Mtodo de Reed y Muench .\nDocumentos similares a TEORIA VIROLOGIA\nMás de Carla Federigi


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