dc.contributor.advisor Moreno Gimeno, Inmaculada\ndc.contributor.author Míguez Forján, José Manuel\ndc.date.submitted 26-09-2017 es_ES\ndc.description.abstract INTRODUCCIÓN La infertilidad es una condición clínica que afecta al 15% de las parejas en edad reproductiva; de las cuales un 28% se ven afectadas por diferentes patologías que resultan en la ausencia de gametos, dentro de este porcentaje se incluyen pacientes con fallo ovárico precoz, mujeres postmenopáusicas y pacientes masculinos diagnosticados de azoospermia no-obstructiva o cualquier otra patología que conlleve la ausencia de espermatozoides funcionales o, al menos, espermátidas elongadas que permitan su uso en tratamientos de reproducción asistida. Estas patologías producen infertilidad en el 1% de las mujeres y el 0.63% de los hombres, en la población general; como consecuencia el uso de gametos de donantes es caso obligado para estos pacientes. Además, aquellas parejas que sean portadores de cualquier trastorno genético con un alto riesgo de transmisión de enfermedades graves a su descendencia o pacientes con fallo recurrente en procesos de fecundación in vitro son considerados como candidatos para terapias que implican donación de gametos. Otro grupo de pacientes que podrían beneficiarse del uso de gametos artificiales son aquellos pacientes que han sido tratados de cáncer en su infancia y han desarrollado infertilidad secundaria al tratamiento contra el cáncer recibido en una etapa en la que no podían preservar sus propios gametos previamente al tratamiento anti tumoral. Por último, existe un grupo poblacional que no sufre de infertilidad y que podría beneficiarse del uso de gametos artificiales generados in vitro; es el caso de parejas del mismo sexo, padres/madres solteras y mujeres post-menopaúsicas. Es por ello que la generación in vitro de gametos artificiales puede ser una excelente oportunidad para estos pacientes para desarrollar sus deseos de ser padres teniendo descendencia genéticamente relacionada. Además del claro beneficio médico para los pacientes de reproducción asistida que subyace tras los modelos de generación de gametos artificiales, su generación contribuiría a una mejor comprensión del proceso de especificación de la línea germinal en humanos de la cual se desconocen sus bases moleculares debido a las restricciones éticas que hacen complicado trabajar con embriones humanos o realizar ensayos funcionales con células germinales obtenidas a partir de células madre pluripotentes o progenitores germinales humanos; así como una mejor conocimiento en potenciales tratamientos de trastornos relacionados con la infertilidad y otras enfermedades genéticas que son susceptibles de ser transmitidas a la descendencia. Las células germinales son la fuente de variabilidad genética y responsables de producir el zigoto totipotente después de la fecundación a partir del cual comienza el proceso de embriogénesis. Durante este período la línea germinal se distingue como un grupo independiente de células conocidas como células germinales primordiales (PGCs de sus siglas en inglés). Los mecanismos que rigen la especificación de la línea germinal en el reino animal varía significativamente según el filo a considerar e incluso, en algunos casos, entre especies muy próximas entre sí. Estas células germinales son cruciales en organismos con reproducción sexual, y en concreto en mamíferos, para completar su ciclo vital. La línea germinal se forma en el momento de la gastrulación a partir de un pequeño grupo de células fundadoras especificadas durante el desarrollo embrionario, estas células PGCs escapan a su destino somático dado por el entorno físico en el que se encuentran dentro del embrión para adquirir un estatus germinal, que las dotará de unas características específicas que les permitirán llevar a cabo con éxito el proceso de meiosis y formar los gametos haploides maduros y funcionales: óvulos y espermatozoides. Actualmente se tiene un relativamente amplio conocimiento acerca de la especificación de la línea germinal durante el desarrollo temprano en mamíferos, aunque este se basa principalmente en el modelo murino debido a la facilidad de acceso a material biológico en todas las etapas de desarrollo y a la relativa facilidad para llevar a cabo modelos funcionales con animales. En este caso las células germinales se originan en la base del alantoides (o epiblasto posterior) en día embrionario 6.25 (E6.25) como un pequeño grupo de aproximadamente 40 células que comienzan a expresar el gen Prdm1 (también conocido como Blimp1) seguido de Prdm14 . Estas células son inducidas mediante señales extrínsecas secretadas por el ectodermo extraembrionario, específicamente BMP4 y BMP8b (bone morphogenetic proteins, en inglés). A su vez, existe una señalización inhibitoria en el eje anterior posterior que procede del endodermo visceral anterior (AVE) que en conjunto con las señales de especificación provenientes del ectodermo extraembrionario restringen el desarrollo de la línea germinal al epiblasto posterior. Prdm1 está considerado como el regulador mayoritario en la especificación de la línea germinal en ratón, su expresión es esencial en la supresión del programa somático, lo que va a permitir la expresión de factores específicos de célula primordial germinal como son Tfap2c, que codifica para AP2 (un factor crítico en la especificación que a su vez participa en la represión de genes somáticos), y Nanos3 (que presenta un rol en la supresión de la apoptosis y participa en la supervivencia y migración de las PGCs); así como marcadores de pluripotencia Sox2, Oct4 y Nanog. La expresión de Prdm1 está promovida en parte por LIN28A, una proteína de unión a microRNAs que interacciona con el microRNA Let7 cuya función es el silenciamiento del mensajero de Prdm1. Así mismo, LIN28A presenta un papel clave en el establecimiento y mantenimiento de la red de pluripotencia puesto que en combinación con OCT4, SOX2 y NANOG es suficiente para inducir este estado en fibroblastos generando así células madre pluripotentes inducidas (iPSCs). El siguiente gen de relevancia en el establecimiento de la línea germinal murina es Prdm14. Su activación también es dependiente de la señalización por BMPs, y actúa sinérgicamente con Prdm1 induciendo la readquisición de pluripotencia e iniciando la reprogramación epigenética necesaria para la especificación; además, junto con Nanog mantiene activas las redes de señalización implicadas en pluripotencia. Prdm14 se expresa en las PGCs entre los estadíos E6.5 y E13.5-14.5; inicialmente su expresión es independiente de PRDM1 pero su mantenimiento depende estrictamente de este. Una vez desencadenada toda esta red de señalización, las PGCs quedan especificadas alrededor del estadio E7.25 como un pequeño grupo de células fosfatasa positivas en el mesodermo extraembrionario (base del alantoides). Una vez que las PGCs son especificadas comienzan a expresar Fragilis (también conocido como Ifitm3) y Stella (Dppa3), mientras que mantienen la expresión de Oct4, Nanog y fosfatasa alcalina. El siguiente proceso clave es el inicio de la migración de las PGCs. El hecho de que las células germinales se especifiquen fuera del embrión propiamente dicho puede ser debido a un mecanismo de plasticidad evolutiva que separa la especificación de las líneas germinal y somática; como consecuencia, las PGCs han de migrar a su localización definitiva que es la gónada. A día 8.5 de desarrollo embrionario, una vez finalizado el proceso de especificación, las células germinales primordiales comienzan a migrar y proliferar a través del endodermo subyacente, alrededor del día E9.5 atraviesan el mesodermo y comienzan a migrar bilateralmente colonizando las crestas gonadales (gónada primitiva), proceso que finaliza aproximadamente a día E11.5. Cuando las PGCs alcanzan la cresta gonadal comienzan a proliferar activamente y forman lo que se conocen como gonocitos, los precursores de las células madre pluripotentes de los gametos, caracterizadas por un alto ratio núcleo/citoplasma. Es a partir de este momento cuando las células germinales cambian su programa de expresión genética, una vez más, y su perfil epigenético, comenzando a expresar genes implicados en la supervivencia y maduración como son Dazl, Vasa y los incluidos en la familia Daz (Daz2 o Boule). Estos genes codifican para un conjunto de proteínas de unión a RNA implicadas en un compendio de procesos celulares como son la identidad sexual, proliferación, supervivencia, migración y regulación de elementos transponibles. Este grupo de proteínas está altamente conservado a lo largo de la evolución y suelen encontrarse asociadas formando grandes complejos en el citoplasma conocidos como cuerpos P. Algunas de estas proteínas con funciones importantes en la línea germinal son, VASA, NANOS, PUMILIO, DND1, DAZL PIWI Y TUDOR. Por ejemplo, DAZL parece ser un elemento crítico en meiosis y DAZ funciona como un regulador clave en el proceso de espermatogénesis en ratón. Todo este conocimiento se ha usado como base para entender el mecanismo de especificación de la línea germinal en mamíferos, suponiendo un mecanismo similar entre todos ellos, con las diferencias obvias. Recientemente se ha comprobado gracias a los modelos in vitro, que las diferencias entre humano y ratón parecen ser más amplias de lo considerado previamente; ya a nivel morfológico existe una clara divergencia en el desarrollo embrionario de ambas especies, el embrión de ratón implanta a día E4.5 y forma una estructura ovoide de ejes proximal-distal y anterior-posterior bien definidos. Sin embargo, tanto humanos como otros mamíferos no-roedores, presentan un embrión plano, en forma de disco bilaminar que después de la gastrulación se convierte en un disco trilaminar que contiene las tres capas germinales (ectodermo, mesodermo y endodermo). Estas diferencias estructurales conllevan también diferencias en los tiempos de desarrollo, expresión génica y señalización requerida para la pluripotencia y la segregación entre linajes. El proceso de especificación en humanos ocurre durante la tercera semana de desarrollo y culmina en la semana 4 dónde las PGCs humanas se identifican como un pequeño grupo de células con una morfología única. A modo teórico el embrión cilíndrico de ratón se ha proyectado en una estructura planar que representa el embrión humano, así el embrión de ratón a día E6.5 (cuando ocurre la especificación de las células germinales) se corresponde aproximadamente con el embrión humano en día E17. El mecanismo de señalización en la especificación parece ser exactamente el mismo en ambos modelos, de este modo nos encontramos con el mismo papel relevante de las BMPs cuyos diversos gradientes restringen la especificación de las PGCs al epiblasto posterior y el incipiente mesodermo. Los mecanismos de especificación comparten muchos puntos clave entre el modelo murino y el humano, pero con diferencias importantes. Por ejemplo, PRDM1 sigue siendo un factor relevante en este proceso, pero en humanos se ha visto que SOX17 juega un papel fundamental siendo el primer factor en ser activado y el encargado de iniciar la expresión de PRDM1. Otra diferencia notable implica a SOX2, un factor de transcripción elemental para la pluripotencia en humanos y ratón, y que se ve sobreexpresado en las PGCs en ratón; sin embargo, en humanos ocurre justamente lo contrario, SOX2 es reprimido en respuesta a la secreción de BMP4 que induce las PGCs. Por el contrario, las PGCs humanas expresan otros factores asociados con el estado de pluripotencia naïve de la masa celular interna (ICM) del embrión, como son TFCP2L1 y KLF4. Los factores de transcripción SOX funcionan en unión con otro factor de transcripción que se une a un lugar adyacente en el ADN, así la función de la proteína SOX depende tanto del contexto del ADN al que se está uniendo como de la identidad de su compañero. Así un cambio entre SOX2 y SOX17 podría ser el responsable de la activación de los genes de célula germinal y endodermo al mismo tiempo, mientras que la expresión de PRDM1 en aquellas células competentes para la línea germinal estaría inhibiendo los genes endodérmicos y permitiendo el desarrollo del perfil germinal. PRDM14, otro factor de gran importancia en la especificación en ratón presenta un perfil de expresión completamente diferente en humanos, llegando a ser incluso prescindible para este proceso. Su expresión es alta en células madre embrionarias humanas competentes para formar células germinales, pero su expresión se silencia rápidamente durante la especificación de las células primordiales humanas-like inducidas in vitro (human PGC-like cells, hPGCLCs, del inglés), hasta unos niveles mínimos. Es probable que esta rápida represión sea necesaria para la salida del estado pluripotente de las células. En este contexto, el papel asociado a PRDM14 en ratón puede haber sido asumido por SOX17 en humanos. Al igual que en ratón las células germinales humanas experimentan un proceso de migración desde el endodermo del saco vitelino, atravesando el endodermo del intestino posterior y el mesenterio dorsal hasta alcanzar las crestas genitales, proceso que tiene lugar entre las semanas 4 y 5 de desarrollo. Durante el proceso de especificación de la línea germinal, tanto en ratón como en humano, resulta fundamental que estás células experimenten un proceso de reprogramación epigenética que elimine cualquier marca epigenética previa. En el ciclo vital de los mamíferos existen dos grandes eventos de reprogramación epigenética que implican un borrado masivo de marcas de metilación. Uno durante el desarrollo de las PGCs que restaura el potencial de desarrollo y elimina las marcas de impronta. Mientras que el segundo tiene lugar en el cigoto, justo después de la fecundación, que tiene como finalidad el borrado de la firma epigenética heredada de los gametos (a excepción de la impronta) y la readquisición de la totipotencia. El primero de ellos tiene lugar en dos fases, una durante la migración de las células germinales dónde la mayoría de las marcas de metilación son eliminadas a excepción de algunas “secuencias con memoria epigenética” como es el caso de las regiones improntadas, las islas CpG del cromosoma X y las de promotores de genes relacionas con el desarrollo germinal. La segunda fase tiene lugar una vez las PGCs han colonizado las crestas genitales, momento en el que todas las secuencias metiladas remanentes sufren un proceso de desmetilación. Las PGCs especificadas mediante las señales extrínsecas descritas anteriormente presentan un estatus epigenético estable, con el ADN globalmente metilado y el cromosoma X inactivo en hembras; esta condición representa un obstáculo para la adquisición del estado totipotente característico de las PGCs, por lo que durante el proceso de migración (E7.5 en ratón y semana 4-5 en humanos), van a experimentar un borrado epigenético global, la reactivación del cromosoma X extra en individuos XX y un remodelado de la cromatina (caracterizado principalmente por la eliminación de modificaciones represivas de las histonas, generando así una cromatina mucho más accesible). La modificación epigenética más ampliamente estudiada es la metilación del ADN, que se basa en la adición de un grupo metilo en posición 5 del anillo pirimidínico de las citosinas (C); se trata de una modificación covalente que tiene lugar principalmente en las citosinas localizadas en los dinucleótidos citosina-guanina (CpG), que a su vez, se suelen agrupar en las denominadas islas CpG, que no son más que áreas en la secuencia de ADN particularmente enriquecidas en estos dinucleótidos CpG; estas islas suelen encontrarse en regiones promotoras, y regiones 5’UTR, todas ellas regiones de ADN no codificante pero relacionado con funciones de regulación del proceso de transcripción. Cabe destacar que cada tipo celular distinto en un organismo adquiere, a lo largo del desarrollo, un patrón de metilación característico, tejido-específico; en un proceso que se suele caracterizar por un incremento en metilación respecto al estado anterior más indiferenciado y acompañado de represión transcriptómica El proceso de reprogramación epigenética viene dado principalmente por dos genes clave en el proceso de especificación de la línea germinal (basado en el conocimiento obtenido del modelo murino), que son PRDM14 y PRDM1. Ambos en conjunto son los responsables de reprimir dos ADN metilasas, Dnmt3a y Dnmt3b, implicadas en la metilación de novo del ADN; junto con otro factor, Uhrf implicado en la maquinaria de mantenimiento de la metilación del ADN en la célula. Tras este proceso las PGCs se encuentran en un estado epigenético naïve (con la inmensa mayoría de las regiones de ADN susceptibles de ser metiladas, completamente desmetiladas), más una vez iniciado el proceso de gametogénesis el genoma de los gonocitos debe de ser metilado de novo para adquirir así el perfil de metilación sexo-específico característicos de los gametos maduros. En el sexo masculino, este proceso ocurre de forma temprana tras el borrado epigenético anterior (entre E14.5-E16.5) y continúa hasta los estadios de espermatogonia; por el contrario, en hembras el patrón de metilación específico se estable en el ovocito en crecimiento tras el nacimiento del individuo. El siguiente paso crucial en el desarrollo de la línea germinal es el proceso de meiosis y gametogénesis, procesos ambos que conducen hacia la formación de los gametos haploides y maduros capaces dar lugar a un nuevo individuo tras la fecundación. La meiosis es un proceso de división celular mediante el cual una célula diploide (2n2c cromosomas) experimenta dos divisiones sucesivas, una primera división meiótica reduccional (en la cual se generan dos células hijas haploides, 1n2c), y una segunda división meiótica ecuacional en la que dos células haploides se dividen para dar lugar a otras dos células haploides cada una, pero con una única cromátida por cromosoma (1n1c). Este proceso se lleva a cabo en el microambiente de la gónada femenina gracias a la secreción del ácido retinoico (AR) por el mesonefros que se inicia síncronamente con la migración de las PGCs hacia la gónada primitiva. El AR induce el proceso de meiosis promoviendo la expresión del gen Stra8; este proceso se detiene a día E13.5 en ratón y semana 12 en humanos y se continúa en la pubertad tras la activación del eje hipotálamo-hipofisario. En el microambiente testicular los gonocitos se dividen por mitosis hasta llegar al estado de pre-espermatogonia, cuando sufren un arresto en fase G0 del ciclo celular, en este caso el proceso de meiosis no se iniciará hasta la pubertad. Esto es debido a la acción de la proteína citocromo P450 CYP26B1, sintetizada por las células de Sertoli bajo el control del gen Sry, cuya función es inducir la degradación del ácido retinoico, evitando así la entrada en meiosis de los gonocitos en este ambiente gonadal XY, hasta que se alcance la pubertad dónde los cambios hormonales provocan la represión de CYP26B1 evitando así la metabolización del ácido retinoico por parte de las células de Sertoli. En resumen, en un ambiente gonadal masculino los gonocitos experimentan sucesivas rondas de mitosis aumentando exponencialmente el número de células progenitoras de gametos hasta alcanzar un punto en el detienen su ciclo celular. En este estado permanecen hasta que el individuo alcanza su madurez sexual durante la pubertad, caracterizada por la activación del eje hipotálamo-hipofisario-gonadal; momento en el cual las pre-espermatogonias retoman sus duplicaciones mediante mitosis y a la vez entran en meiosis para producir espermatozoides (gametos masculinos funcionales). En un ambiente gonadal femenino, por el contrario, la presencia de ácido retinoico permite a los gonocitos (que previamente habían experimentado varios procesos de duplicación por mitosis, durante la migración de las PGCs y al colonizar la gónada indiferenciada) entrar en meiosis, generando la reserva ovocitaria total del individuo. Al igual que en machos, estas células sufrirán un proceso de arresto, pero en este caso en meiosis I, que finalizará igualmente al llegar la pubertad, dónde los gradientes hormonales serán los responsables de reclutar una cohorte de ovocitos en cada ciclo para su maduración hacia gametos femeninos completamente funcionales. Las gónadas consisten en glándulas endocrinas encargadas de la producción de hormonas sexuales y de la maduración de las células sexuales o gametos. En la gónada madura la población de células de soporte establece una estrecha relación con las células germinales aportando el soporte físico y la secreción de importantes factores que desempeñan un rol clave en la supervivencia y maduración de los futuros gametos. Se genera así una estructura permisiva para la maduración de las células germinales tempranas, promoviendo la proliferación y meiosis de estas células y generando gametos haploides maduros y funcionales; este compartimento altamente especializado se conoce como nicho gonadal. Al comienzo del desarrollo embrionario el sistema reproductivo resulta indistinguible entre sexos, y se encuentra conformado por una gónada indiferenciada y dos conductos acompañantes, el Mülleriano y el de Wolff; el primero de ellos es el precursor del tracto reproductivo femenino (oviducto, útero y la parte superior de la vagina), mientras que el segundo dará lugar al tracto reproductivo masculino, (que incluye el epidídimo, el conducto deferente y las vesículas seminales). Las gónadas se forman como órganos bipotentes que pueden desarrollarse como testículos u ovarios dependiendo del sexo de las células somáticas e independientemente del contenido cromosómico (XX o XY) de las células germinales que las colonicen. Esta plasticidad de la gónada embrionaria de mamíferos está asociada con un estado de equilibrio transcripcional transitorio en el cual los genes relacionados con el destino masculino y femenino se expresan a niveles muy similares. La determinación del sexo ocurre entonces cuando este equilibrio se rompe hacia un lado u otro, esto ocurre cuando en las gónadas XY se comienza a expresar el gen Sry (localizado en el cromosoma Y), suceso que tiene lugar después del día E10.5 en ratón seguido inmediatamente de la expresión de Sox9 (gen dependiente de Sry) a día E11.2, y responsable del establecimiento del programa testicular. La expresión de Sox9 induce la diferenciación de las células de la gónada a diferenciarse hacia células de Sertoli, que reclutará células de su entorno para formar los llamados cordones testiculares, al tiempo que producen la hormona antimulleriana (AMH) responsable de la degeneración del conducto de Müller. Al parecer la gónada bipotente indiferenciada presenta una tendencia natural hacia el desarrollo del fenotipo femenino ante la ausencia de una señalización específica masculinizante; puesto que no existe ningún gen específico para la determinación del ovario como es el caso de Sry en la gónada masculina. El programa femenino comienza en ratón relativamente más tarde que su contraparte masculina, alrededor del día E11.4-11.6 vía activación de la expresión de WNT4/RSPO1 y FST (folistatina). Así como ocurría en el proceso de gametogénesis, durante la especificación gonadal, las células de soporte se comportan de forma diferente según se hable de la gónada masculina o femenina. En el testículo inmaduro los progenitores de las células de soporte comienzan a proliferar inmediatamente después de la activación de Sry; mientras que en el ovario estos progenitores entran en un estado quiescente alrededor del día E12.5 en ratón lo que podría ser explicado como un mecanismo de protección frente a un cambio en su destino. La mayor parte de los hitos alcanzados en este campo se han conseguido en el modelo murino. El primer trabajo acerca de derivación de células germinales in vitro se llevó a cabo a principios de los años 2000 y básicamente se reportaba una diferenciación espontánea de un cultivo de células madre embrionarias de ratón, en el que aparecían unas estructuras que se asemejaban a folículos conteniendo ovocitos, que además eran capaces de formar psuedo-blastocistos al ser activados partenogenéticamente. Los primeros ensayos acerca de generación de células germinales in vitro se basaban en protocolos de diferenciación a partir de cultivos de células embrionarias, al principio de forma espontánea y después forzando el proceso mediante la adición de citoquinas al medio. En la última década los protocolos de generación de células germinales in vitro se han optimizado enormemente, derivando en un proceso en varias en etapas, la primera de ellas sería inducir una población celular competente para responder a las señales que especifican la línea germinal, lo que en el modelo murino se conoce como células de tipo epiblasto (EpiLCs, del inglés epiblast-like cells). Sobre esta población se inducen las PGC-LCs que a su vez podrán ser maduradas hacia espermatozoides u ovocitos dependiendo de las condiciones usadas. En este punto la derivación ha sido abordada utilizando distintas estrategias como la adaptación de las condiciones de cultivo, mediante trasplantes in vivo, y mediante co-cultivo o agregación con células somáticas gonadales. En este último punto se ha alcanzado recientemente un hito puesto que se ha conseguido reproducir el ciclo completo de la línea germinal femenina in vitro en ratón; induciendo PGC-LCs a partir de ESC e iPSCs y generando ovarios reconstituidos in vitro mediante agregación de estas PGC-LCs con células somáticas aisladas de gónadas embrionarias que se cultivaron in vitro produciendo estructuras semejantes a folículos secundarios y ovocitos que pudieron ser fecundados y dieron lugar a descendencia sana y fértil. Una metodología similar se ha usado para reproducir la espermatogénesis in vitro, generando testículos artificiales que fueron capaces de madurar los progenitores germinales dando lugar a espermatozoides funcionales. Todos estos trabajos ponen de manifiesto la importancia del nicho para lograr gametos totalmente maduros y funcionales y de ahí el interés de producir una gónada artificial in vitro. Las aproximaciones que han mostrado mejores resultados implican el uso de células somáticas gonadales aisladas de embriones, sin embargo, esto implica un obstáculo para su futura aplicación clínica. Una alternativa interesante sería la de reproducir el nicho gonadal in vitro (células de Sertoli o granulosa) mediante reprogramación de otro tipo celular somático o a partir de células madre. ANTECEDENTES La derivación in vitro de células germinales a partir de células madre pluripotentes ha sido conseguida recientemente, así como la posibilidad de convertir directamente una línea somática específica en una completamente diferente mediante la sobreexpresión de factores clave. Resultados preliminares obtenidos en nuestro grupo de investigación mostraron que la combinación de seis factores específicos de la línea germinal era suficiente para reprogramar un cultivo de células somáticas humanas (46, XY) hacia células germinales-like inducidas (iGC-LCs). Estas células inducidas in vitro expresaban marcadores de espermatogénesis, entrada y progreso en meiosis y la capacidad de colonizar el nicho testicular después del xenotrasplante en ratón. HIPÓTESIS Y OBJETIVOS Basándonos en este conocimiento previo, la tesis doctoral que se presenta a continuación se basa en la hipótesis de que es posible inducir células germinales in vitro a partir de fibroblastos específicos de cada paciente recapitulando las características fenotípicas, transcriptómicas y epigenéticas de las células germinales, así como su capacidad para llevar a cabo el proceso de meiosis y formar, por ende, células haploides. Así mismo, y puesto que el nicho es fundamental para el desarrollo de estas células hacia gametos completamente maduros se ha propuesto un modelo de cultivo de tejido gonadal in vitro que permita un incremento en la eficiencia de producción de gametos maduros. Para poder contrastar la hipótesis formulada, se diseñaron los siguientes objetivos: Objetivo general: Estudiar nuevos protocolos para la caracterización, mantenimiento y maduración de las células germinales inducidas in vitro (iGC-LCs) obtenidas por reprogramación directa de células somáticas. Objetivos específicos: 1.\tCompletar la caracterización de las iGC-LCs a nivel fenotípico, transcriptómico y epigenético. 2.\tEvaluar mediante técnicas moleculares la capacidad de las iGC-LCs para formar células haploides. 3.\tDesarrollar un modelo de nicho gonadal in vitro para el mantenimiento de la viabilidad de las iGC-LCs. METODOLOGÍA Para llevar a cabo esta tesis se ha partido de vectores de expresión lentivirales que contenían la secuencia codificadora consenso (CCDS) de seis factores relacionados con la línea germinal (PRDM1, PRDM14, LIN28A, DAZL, VASA y SYCP3, referida a partir de aquí como i6F); los sobrenadantes virales obtenidos en la línea celular HEK 293T se utilizaron para la transducción lentiviral de un cultivo de fibroblastos neonatales humanos (46, XY), mientras que como control negativo se utilizaron los lentivirus vacíos (condición MOCK). Para la inducción de las células germinales se empleó un medio enriquecido con factores de crecimiento previamente empleados en el mantenimiento in vitro de células madre espermatogoniales e implicados de algún modo en el proceso de gametogénesis. El óctel empleado incluye, LIF, GDNF, Forskolin, bFGF, 2-mercaptoetanol, SCF y ácido retinoico. Tras un proceso de reprogramación de catorce días se observan cambios morfológicos en la condición i6F con la formación de pequeñas colonias de células redondas. Se aíslan tres poblaciones diferentes para su evaluación: MOCK control, la población total reprogramada con la condición i6F, y las colonias i6F reprogramadas y manualmente aisladas. Así mismo y según el experimento, se aislaron a partir de estas colonias células individuales para su análisis a nivel de ploidía, y una población 1N mediante tinción con ioduro de propidio y FACS. Para la caracterización de las iGC-LCs a nivel fenotípico se llevó a cabo un análisis inmunocitoquímico de marcadores específicamente relacionados con la línea germinal (Tabla 1). Para la caracterización transciptómica se analizaron los niveles de expresión de genes implicados en la línea germinal mediante RT-qPCR (Tabla 2). La confirmación del borrado epigenético se llevó a cabo utilizando tres técnicas complementarias basadas en distintos principios, la detección inmunocitoquímica de los marcadores de metilación 5mC y 5hmC, los arrays de metilación y la conversión-secuenciación por bisulfito (Tabla 3). Para el análisis de generación de células haploides se emplearon dos aproximaciones moleculares de análisis de célula única, PCR para del gen de la AMELOGENINA y array de hibridación genómica comparada (aCGH). El modelo in vitro de nicho gonadal de explantes de tejido testicular tanto murino como humano, se abordó mediante el cultivo y mantenimiento de estos tejidos en medio basal alpha-MEM suplementado con KOSR o AlbuMAX. Las piezas tisulares se cultivaron sobre bloques de agarosa embebidas en este medio, creando así una interfase líquido-gas para la mejora de la supervivencia del cultivo de tejidos. Tras el tiempo de cultivo determinado en cada diseño experimental, las piezas de biopsia testicular se analizaron a nivel morfológico de visu, mediante histología con tinción hematoxilina-eosina, y a nivel transcriptómico mediante RT-qPCR para genes relacionados con la línea somática, pluripotencia y estadíos tempranos y tardíos de la línea germinal (Tabla 4). RESULTADOS Y DISCUSIÓN Los resultados obtenidos en este proyecto de tesis valida el protocolo de reprogramación directa de células somáticas mediante el uso de 6 factores relacionados con la línea germinal (i6F) para la obtención de células iGC-LCs con fenotipo germinal in vitro. Estas células se caracterizan por formar colonias de células redondas en cultivo (Figura 17), que expresan marcadores de células primordiales germinales tempranas, tales como CDH1, SOX17, TFCP2L1 y Brachyury (Figura 21). Así mismo, la co-localización de los marcadores espermatogénicos UTF1, PLZF, VASA, DAZL y HIWI, lo que refuerza la existencia de una población pre-meiótica en las colonias de iGC-LCs (Figura 20). La presencia de células germinales en diferentes estados de diferenciación puede ser debida a la aleatoridad de la internalización de las particulares lentivirales portadoras de los distintos factores de reprogramación durante el proceso de transducción, y la sobreexpresión simultanea de factores relacionados con estadíos diferentes en el desarrollo de la línea germinal; así como, la introducción a tiempo inicial del ácido retinoico en el medio de cultivo, que está forzando a las células hacia la entrada en meiosis. Las iGC-LCs derivadas in vitro mostraron una correcta reprogramación epigenética propia del proceso de especificación de la línea germinal en mamíferos. Este hecho se pone de manifiesto por los cambios en el porcentaje de metilación de las regiones diferencialmente metiladas (DMRs) estudiadas (H19, SNRPN, PEG3 y KvDMR1); que adoptan un perfil correspondiente al de un gameto femenino (Figura 23). Este proceso de reprogramación epigenética viene acompañado de un borrado general de la metilación representado por la hidroxilación del grupo metilo en posición 5 de algunas citosinas. El paso de 5mC a 5hmC es por tanto un indicio del proceso de borrado epigenético. El estudio de estas marcas epigenéticas se ha llevado a cabo mediante inmunocitoquímica (Figura 24). Finalmente, para completar la caracterización de las células iGC-LCs, se obtuvieron células individuales manualmente aisladas de las colonias de iGC-LCs, y se evaluó la presencia de células haploides mediante dos técnicas moleculares distintas. La primera técnica consistió en la evaluación del gen de la AMELOGENINA, un gen asociado a los cromosomas sexuales que difiere en tamaño entre el cromosoma X e Y, de modo que según el tamaño de banda obtenido en la PCR se puede deducir si la célula analizada presenta un cromosoma X, un cromosoma Y, o ambos cromosomas sexuales XY al igual que las células somáticas usadas para la reprogramación (Figura 25). Finalmente, se utilizó una técnica de diagnóstico genético preimplantacional (aCGH) para la evaluación del contenido cromosómico total en células individuales iGC-LCs. El array de CGH ofrece una herramienta de análisis de la ploidía mucho más exhaustiva puesto que presenta la capacidad de analizar todo el conjunto de cromosomas de una sola vez (Figura 26). A pesar de la baja eficiencia del proceso, ambas técnicas indican que hay una media de 1-3% de células haploides en las colonias generadas por reprogramación in vitro. Finalmente, y dada la importancia del nicho para el correcto desarrollo y maduración de las células germinales se ha propuesto un modelo in vitro para el mantenimiento de este microambiente con el fin de emplearlo para generar gametos funcionales a partir de los progenitores germinales previamente inducidos in vitro. Se mantuvo el tejido cultivado in vitro hasta 4 semanas en el caso del modelo murino, con una morfología normal en base a la estructura de los túbulos seminíferos (Figuras 27 y 32). Sin embargo, ninguna de las condiciones testadas fue capaz de iniciar el proceso de espermatogénesis in vitro. El cultivo de muestras humanas mostró una mayor dificultad a la hora de mantener su viabilidad a largo plazo (Figura 38), aunque sí es posible el mantenimiento de la población indiferenciada de la línea germinal. CONCLUSIONES 1.\tLa reprogramación directa de células somáticas mediante expresión ectópica de seis factores transcripcionales relacionados con la línea germinal (PRDM1, PRDM14, LIN28A, DAZL, VASA y SYCP3) resulta en la formación de colonias de células germinales inducidas (iGC-LCs) que muestran características morfológicas y fenotípicas propias de células germinales. 2.\tLas colonias de iGC-LCs generadas in vitro están compuestas de un conjunto heterogéneo de poblaciones celulares germinales en distintos estadios de diferenciación que expresan genes de especificación germinal tempranos, pre-meióticos y post-meióticos, tal y como muestra la expresión de estos marcadores analizada mediante RT-qPCR. 3.\tLas iGC-LCs son capaces de iniciar y completar el proceso de meiosis y producir células haploides, tal y como sugieren los resultados del análisis molecular mediante PCR de AMELOGENINA y array de hibridación genética compada (aCGH), sobre célula única. El aCGH, técnica molecular que permite el análisis de la totalidad de los cromosomas, mostró una eficiencia de generación de células haploides entre 1-2% de la población de iGC-LCs. 4.\tEl análisis epigenético de células haploides (post-meióticas) aisladas de las colonias de iGC-LCs mostró una pérdida de metilación en las regiones diferencialmente metiladas (DMRs) de impronta paterna y un aumento en los DMRs maternos, que correlaciona con un fenotipo ovocitario. 5.\tEl cultivo en interfase gas-líquido de tejido testicular de ratones neonatos demostró la capacidad para mantener la estructura del tejido in vitro, así como el mantenimiento de la población germinal endógena, pero no su progreso hacia gametos maduros, tal y como muestran los resultados de expresión génica de marcadores de pluripotencia, germinales, post-meióticos y somáticos. 6.\tEl mantenimiento de tejido testicular humano para la maduración de células germinales primordiales no es viable a largo plazo en las condiciones testadas. La adición de ciertos factores de crecimiento y hormonas podría contribuir a una mejor simulación del nicho gonadal que permitiera la maduración de progenitores germinales obtenidos in vitro y su progresión en meiosis para producir gametos artificiales funcionales. 7.\tEste estudio demuestra que se pueden generar iGC-LCs in vitro, aunque con baja eficiencia; así mismo, se requiere más conocimiento sobre la generación de un nicho gonadal in vitro capaz de acoger y colaborar en la maduración de estas células para mejorar la eficiencia de generación de gametos artificiales funcionales. es_ES\ndc.subject germ cell-like cells es_ES\ndc.subject transdifferentiation es_ES\ndc.subject gonadal niche es_ES\ndc.title Caracterización y mantenimiento in vitro de células germinales inducidas para la preservación de la fertilidad es_ES\ndc.description.abstractenglish En las instrucciones comenta que sólo es necesario en caso de que la tesis esté escrita en otro idioma distinto del inglés. Si debo adjuntarlo por favor, háganmelo saber. es_ES


La quinta marcha | La tele que me parió\nPosts tagged ‘La quinta marcha’\nProgramas musicales, la tele mató a la estrella de la radio\nQué tiempos aquellos es los que los programas musicales eran, predominantemente, de actuaciones y entrevistas. Ahora el género reality se ha impuesto en todas sus formas posibles y los espacios que hace unos años eran la vanguardia han quedado relegados a un segundo puesto. En Casal Rock (TV3), hemos visto cantar a un grupo de jubilados, en Operación Triunfo y similares se fabrican estrellas, en El coro de la cárcel son los presos los que muestran su realidad a través de la música. Ejemplos diferentes que nos enseñan una televisión que, en lo musical, ha sabido separarse de la oferta radiofónica, cuyos esquemas estaban mucho más presentes al principio, ya fuera en versiones de onda media o de FM. Todo esto sin contar los programas de variedades de los sábados por la noche que, aunque ahora ya no se llevan, se han estado emitiendo hasta hace bien poco.\nEscala en hi-fi (1961 – 1967), en Televisión Española. Tengo debilidad por los años 60 y ver a Mochi, el presentador, cantando la sintonía me llena de ternura. En Escala en hi-fi los actores cantaban en play-back los éxitos de la época al tiempo que desarrollaban una historia, como si fuera un videoclip pero sin serlo, porque no se habían inventado aún. Este programa tuvo hasta una película protagonizada por lo más de lo más del momento.\nAplauso (1978 – 1983), en Televisión Española. Llamaban a este programa “vídeo-revista” y desde la discoteca difundían la música comercial de las listas de éxito con estructura de revista en papel. Ahora hacer algo así sería un atraso. ¿Quién compra hoy en día revistas de música? El vídeo de abajo es de su segunda etapa, cuando quisieron conectar con los adolescentes y se trasladaron a la discoteca. Durante sus cinco años de vida lo dirigió José Luis Uribarri, el experto de Eurovisión.\nConvivió con propuestas más minoritarias como Popgrama (1979 – 1981), o Musical Express (1978-1983), que empezó su andadura en el circuito catalán de Televisión Española para luego dar el salto a lo nacional.\nSobre el enfrentamiento entre Popgrama (en la segunda cadena) y Aplauso he encontrado este interesante artículo en el que sale a la luz la miseria de dos ofertas totalmente contrapuestas: la mayoritaria en la cadena principal, y la minoritaria pero de más calidad, en la segunda. ¿Os suena de algo? Y eso que entonces sólo había dos cadenas.\nTocata (1983 – 1987), en Televisión Española. Evolución natural de Aplauso pero enfocado a un público joven, con música comercial y gran presencia de artistas anglosajones. La canción melódica empezaba a ceder su sitio a tendencias más modernas. Popularizaron los videoclips, que hasta el momento no tenían presencia en nuestra televisión. Los canciones eran como conciertos, con el público a pie del escenario. Aquí empezó el ahora célebre José Antonio Abellán.\nLa edad de oro (1983 – 1985), en Televisión Española. Programa de culto asociado a la Movida Madrileña que, basando gran parte de su estructura en la difusión de las modernas tendencias musicales, dedicaba también reportajes a todo tipo de artes. España tenía que salir de la oscuridad de la dictadura y se mostraba a los ciudadanos los avances culturales que estaban por llegar a un país que empezaba a despertarse.\n¡Qué noche la de aquel año! (1987), en Televisión Española. Presentado por Miguel Ríos, repasaba las últimas veinticinco décadas en la música. El componente nostálgico saltaba a la palestra y en cada programa, uno por año, artistas de cada momento volvieron al escenario.\nRockopop (1988 – 1992), en Televisión Española. Sucesor de Tocata, introdujo la lista de ventas como contenido. Beatriz Pécker fue la presentadora más emblemática. Había cierta división de opiniones entre cuál era mejor, si Tocata o Rockopop. Teresa Viejo copresentó el espacio.\nLa quinta marcha (1990 – 1993), en Telecinco. Irrupción de la locura con este programa mucho más cercano a la FM que a la onda media, como había venido haciendo hasta el momento Televisión Española. Reportajes, actuaciones, juegos y música, todo orientado a un público joven. Ahí estaban Penélope Cruz, Jesús Vázquez, o el insoportable Kike Supermix. Antena 3 tuvo su Leña al mono que es de goma por aquel entonces (mirad qué dice Tony Aguilar del programa). De hecho, Telecinco demandó por plagio a Televisión Española, que viendo el éxito de La quinta marcha se sacó de la manga Ponte las pilas (1991 – 1992), en La 2.\nSéptimo de caballería (19881997 – 1999), fue presentado por Miguel Bosé y pese al éxito inicial terminó siendo cancelado en su segunda temporada por la poca respuesta de la audiencia. Este programa supuso una vuelta al intimismo, a las entrevistas cercanas, al tratamiento en profundidad, a la música menos comercial y a las actuaciones en directo, después de los derroteros que había tomado el género en otras cadenas. Su sustituto es No disparen al pianista, que se emite actualmente en La 2.\nY esto es todo, amigos. No he incluido propuestas como Del 40 al 1 (Canal +), porque eran radiofórmula pura y dura con un deje publicitario demasiado importante para mi gusto, aunque es innegable que la lista de ventas de los Cuarenta Principales, con canal de televisión propio, ha recogido los destinos y aficiones musicales de muchas generaciones. De hecho, otras emisoras, como Cadena Cien, forman parte activa de Operación Triunfo, y M-80 estuvo en Factor X, para sacar su tajada de la industria.\nEmpezaba hablando de programas basados en revistas, hemos visto cómo aparecieron el play-back, el vídeoclip, las listas de ventas, y cómo los programas iban dejando de lado al público más adulto para ir centrándose en los jóvenes, que es el punto en el que nos encontramos ahora, pese a que haya propuestas minoritarias. ¿De qué estaremos hablando dentro de diez años? A saber.\n18 octubre 2009 at 11:57 16 comentarios


Ensayo De Como Se Hace Un Proceso - Trabajos de investigación - 892 Palabras\nPágina principal Ensayos Ensayo De Como Se Hace Un...\nPáginas: 4 (892 palabras) Publicado: 11 de abril de 2011\nLa discriminación de género es un fenómeno social, puesto que son necesarias representaciones de ambos sexos para que pueda darse esta situación: noexiste una igualdad de género a partir de la cual denunciar la discriminación o desigualdad. Al contrario: la base de este fenómeno es la supuesta supremacía de uno de los géneros. Los géneros en lasociedad pueden señalar funciones y responsabilidades que tiene cada uno según su físico o que considera que es para cada quien, formando la discriminación se de sexos.\nLas mujeres no son objeto de ladiscriminación, básicamente por su físico de no poder compararse con los hombres en ciertas actividades, trabajar en actividades sencillas en la casa o en la sociedad; trabajos que no necesitafuerza. Esta clase de discriminación se da por la cultura que hace parte de la sociedad; los hombres han aprendido a respetar, admirar o temer a otro hombre física o intelectualmente por ser iguales ypertenecer al mismo género, pero no se tiene un igual criterio de la mujer; puede ser considerada como un instrumento de placer o exhibición, hecha para trabajos monótonos y de poca responsabilidad.Existen sociedades en la mujer no puede alcanzar diferentes puestos de alta responsabilidad aunque estén capacitadas para ello, básicamente por la desigualdad física y que la mujer no esté presente encargos de esta responsabilidad, negándole a la mujer ocupar un puesto acorde con sus capacidades intelectuales para desempeñarse exitosamente en cualquier cargo público. En otros casos la mujer no escapaz de trabajar, en su núcleo familiar no está estipulado por el esposo que trabaje, el mantiene la casa, mujer y hace que ella se dedique a la labor domestica, porque la diferencia de género estápresente en el hogar y se estipula que la mujer solo obedece lo que el marido vea conveniente.\nLa discriminación no solo se da en el hogar ni en el trabajo, está presente también en la escuela,...\n...NOVIEMBRE DE 2012 COMO SE HACE UN PROCESO FRANCESCO CARNELUTTI OPINION PERSONAL CONCLUSIONES PRESENTACION, CONTENIDO Y FUENTES DE INFORMACION El libro “como se hace un proceso” se divide en 15 capítulos en los cuales habla de cada elementó para poderse darse un proceso completo como el autor decía que es una obra teatral y que se necesita de todos para que la función se...\n...COMO SE HACE UN PROCESO Ensayo EL PROCESO PENAL: En se sugiere la idea de la pena, este se hace para castigar los delitos o los criminales, también este trata de castigar a esas perturbaciones del orden social. Esto para que la gente se abstenga de cometer otros delitos. También como se da el delito ya sea premeditado o instantáneo y en riña, según como se dio el hecho, si...


Ministerio de las Culturas entregará más de $573 millones para financiar proyectos de bibliotecas públicas del país - Maule News\nHome PROVINCIA DE TALCA RegionDelMaule Ministerio de las Culturas entregará más de $573 millones para financiar proyectos de bibliotecas públicas del país\nAdministradora febrero 08, 2021 PROVINCIA DE TALCA, RegionDelMaule,\nNoticias Región del Maule: La edición 2021 del Programa de Mejoramiento Integral de Bibliotecas Públicas permitirá acceder a fondos en las categorías de Equipamiento/mobiliario e Infraestructura, además de una línea que financia la reapertura y el funcionamiento seguro de los recintos bibliotecarios en contexto de pandemia.\nConvocatoria abierta hasta el 19 de marzo, excepto la “Línea Covid 19”, que estará disponible hasta el 12 de febrero.\nCon un importante aumento en los montos para infraestructura y una nueva “Línea Covid 19”, el Ministerio de las Culturas, las Artes y el Patrimonio abrió la convocatoria para participar en los Fondos Concursables del Programa de Mejoramiento Integral de Bibliotecas (PMI) 2021, que entregará recursos por un total de $573.703.000.\nDurante 2020 la mayoría de las bibliotecas públicas, al igual que otras instituciones culturales y educativas del país, debieron suspender su atención presencial debido a la pandemia que afecta a Chile y el mundo. A pesar de este gran obstáculo, el Ministerio de las Culturas decidió mantener sus esfuerzos tendientes a respaldar la gestión y mejor las condiciones de los recintos bibliotecarios del país.\nLa ministra de las Culturas, Consuelo Valdés, destacó: “Estos fondos concursables se han convertido en la alternativa más accesible y que más recursos entregan a las bibliotecas nacionales” y agregó que “es algo que adquiere especial relevancia en el contexto de pandemia en el que estamos, ya que la lectura, la cultura y la educación siguen siendo asuntos prioritarios”.\nEs por eso que se abrió la convocatoria a la décima versión de estos fondos, que tienen por objetivo financiar mejoras en materia de infraestructura y equipamiento/mobiliario para las bibliotecas públicas del país que no cuentan con las condiciones óptimas para desarrollar su trabajo en las comunidades que atienden.\nEntre las novedades este año destaca la incorporación -dentro de la categoría equipamiento y/o mobiliario- de la “Línea Covid 19”, alternativa de postulación extraordinaria con plazos prioritarios destinada a la adquisición de elementos de protección que permitan la reapertura o funcionamiento seguro de las bibliotecas en el contexto de la pandemia.\nAdemás, se incrementó el monto para la categoría de Infraestructura, pudiendo financiarse iniciativas completa o parcialmente por hasta $300.000.000. Se rebajó también el aporte municipal de un 10% a un 5% y en caso de existir disponibilidad de recursos adicionales, los proyectos en espera podrán ser directamente seleccionados para su financiamiento dentro del año presupuestario 2021, siguiendo el orden de prelación establecido y hasta agotarse los nuevos fondos, sin necesidad de concurrir a un nuevo llamado a concurso.\nLa seremi de las Culturas, las Artes y el Patrimonio, Pía Soler, invitó a todas las bibliotecas públicas de la región a participar en este llamado y repensar su equipamiento e infraestructura. “Hemos vivido momentos complejos y, en vías de la reactivación de sector, debemos adecuar los espacios para recibir nuevamente a la ciudadanía en condiciones óptimas y seguras. Invitamos a los sostenedores de estos importantes espacios culturales a que se sumen a esta convocatoria”, manifestó.\nEl plazo para postular a la línea regular del PMI vence el viernes 19 de marzo las 23:59 horas, mientras que los proyectos que se postulen a la “Línea Covid 19” pueden hacerlo hasta el viernes 12 de febrero a las 23:59. En ambos casos la postulación se realizará a través de la plataforma digital One Drive.\nEl programa, que nació en 2012 y cuyo piloto se desarrolló un año después, tiene por finalidad generar mejoras en las bibliotecas públicas del país que no cuentan con las condiciones óptimas para desarrollar su trabajo en las comunidades que atienden.\nEn su versión 2020 fueron 37 bibliotecas públicas, de trece regiones del país, las que resultaron favorecidas con fondos para financiar sus proyectos de mejoramiento, por un monto de $483.421.000.\nBases, formulario de postulación, anexos y material referencial de apoyo en https://www.patrimoniocultural.gob.cl/portal/Contenido/Noticias/98710:Ministerio-de-las-Culturas-abre-convocatoria-a-fondos-de-mejoramiento-integral-de-bibliotecas-publicas-2021.


Servicios para sus referidores y socios con el programa MORE THAN IMPLANTS™\nEl tercer grupo de servicios del programa de clientes MORE THAN IMPLANTS™ cerramos el ciclo de los ámbitos de influencia que tienen un efecto directo sobre el éxito de su consulta o laboratorio.\nCon la oferta de servicios dentro de este campo les apoyamos activamente en la atención y obtención de colaboradores u odontólogos referidores. Para ello, la comunicación y las acciones de marketing desempeñan un papel fundamental.\nEVENTOS PARA REFERIDORES\nDesorrollo de su red profesional\nEn los eventos con referidores Straumann le ayuda en la planificación, preparación y ejecución. Esto le facilita que usted pueda concentrarse en la parte más interesante, encontrar nuevos referidores y establecer una relación profesional con ellos.\nSu clínica desde el punto de vista de sus referidores\nUn análisis de su clínica desde el punto de vista de sus referidores. Benefíciese de la encuesta realizada por el Instituto Riegl, especialista en Gestión y Dirección de clínicas y centros sanitarios. Con esta encuesta usted podrá conocer las opiniones de sus referidores respecto a su colaboración profesional. Una buena base para diseñar la estrategia de trabajo y colaboración de su clínica.


DINERO burocracia > trabas > meses\nLa aterradora burocracia hace que un trámite de importación se prolongue 6 meses. Los peores resultados atrasan el crecimiento de jóvenes emprendedores.\n26 de octubre de 2021 - 19:47\nLa burocracia decolora las iniciativas de jóvenes emprendedores textiles\nEl sector textil, uno de los más afectados por la pandemia, ahora está empeñado en disminuir las trabas que le impiden importar lo que necesita sin que pasen, hasta seismeses, para hacerse de lo que compró y pagó. La burocracia le pide que tramite (SIMI y la DJCP), gestiones cuyos tiempos pueden superar la mitad un año. En ese plazo llegarán al final. meses\nPor lo pronto es como emprender un desafío, acotan quienes buscan innovar o apostar a ganar en un negocio o idea propia. "Es una aventura que en la mayoría de los casos está rodeada de obstáculos por sortear". consideran.\nSE CAMBIO A BRASIL POR CHINA\nImportaciones textiles: Otro fracaso de las trabas\nTextiles: Gobierno, empresarios y sindicalistas de La Rioja piden el cierre de importaciones\n“Emprender en el mundo de la indumentaria en Argentina, es todo un desafío. Sobre todo en los últimos tres años donde pasamos por varias crisis económicas propias de Argentina, sumado a una pandemia global. Por lo cual, el principal requisito para lanzar un negocio en esta industria y en este país, es la paciencia”, explica Sole Silva, creadora de su marca que importa y exporta telas de las principales marcas del país.\nMientras que la producción dentro de la Argentina aumentó (42,5% interanual en el primer semestre del año) las trabas a las importaciones crecieron de manera proporcional lo que hace lentos los procesos y encarece el precio de los productos finales.\nTraer productos del sector textil desde otros países, hacia Argentina, puede tardar desde 6 meses, hasta un año.\nLos procesos de aprobación son muy lentos y a ellos se les suman cada vez más requisitos que terminan convirtiéndose en trabas.\nLa burocracia impide que los innovadores entrelacen sus creaciones


Algunas técnicas experimentales: microscopio de fuerza atómica | The Túzaro\nPosted in Divulgación by thetuzaro on 19 marzo 2012\nEstás ante una nueva entrega de la serie Lo que hace este tío para ganarse el pan. En esta ocasión quiero describir otra técnica de las que utilizamos en el laboratorio para caracterizar los materiales semiconductores que se utilizan para fabricar dispositivos electrónicos. Hoy voy a hablar de una técnica que nos permite ver cosas muy, muy pequeñas que se encuentran en la superficie del material. Me refiero a la microscopía de fuerza atómica. Eso sí, lo voy a contar a lo sencillo para que no se me asuste nadie.\n¿Qué es lo que se puede ver con esta técnica que no se pueda ver con otras?\nPor microscopía entendemos el uso de aparatitos para poder ver cosas que son tan pequeñas que no las podemos ver a simple vista, con el ojo desnudo, que se suele decir. Todos conoceréis los microscopios ópticos convencionales, que son los que suelen salir en las noticias cuando hablan de algo relacionado con la ciencia: ya sabéis, esos cacharritos que están formados por lentes y que tienen unos tubos por los que se asoma uno y ve lo que sea que se esté estudiando. Con estos microscopios podemos ver cosas de hasta más o menos 1 µm (que se lee un micrómetro o una micra, y equivale a 0.0001 cm).\nPara ver cosas aún más pequeñas tenemos que tirar de los microscopios electrónicos. En este otro tipo de microscopio, en lugar de tener luz corriente y unas lentes que aumentan lo que queremos ver, tenemos electrones. Básicamente, lo que se hace es lanzar un chorro de electrones, que pega con el material e interactúa con él. Como resultado, otros electrones salen del material, se dirigen con unas lentes especiales para electrones, y se detectan con unos dispositivos especiales, del mismo modo que en el microscopio óptico detectamos la luz con nuestros ojos o con una cámara. Con un microscopio electrónico, se pueden ver cosas bastante más pequeñas, de hasta unos 10 nm (que se lee diez nanómetros, y equivale a 10-7 cm, o 0.0000001 cm). Si me animo, otro día os cuento un poco más de algunos de estos microscopios.\nComo alternativa a los microscopios electrónicos, están los microscopios de fuerza atómica (o AFM, por sus siglas en inglés, que son las que utilizaré todo el rato). Con ellos, podemos ver cosas quizá algo más pequeñas que con algunos microscopios electrónicos, de hasta fracciones de 1 nm, que tampoco supone una enorme diferencia. En realidad, a la hora de elegir está técnica o la que he descrito más arriba de los microscopios electrónicos, más que el límite de cuán pequeñas son las cosas que podemos ver, se tienen en cuenta (al menos en mi campo) otros factores que pueden nivelar la balanza de uno u otro lado.\nLas ventajas y los inconvenientes de los AFM\nUna de las ventajas que los AFM tienen sobre los microscopios eléctronicos es la poca preparación que hay que hacer a la muestra que queremos estudiar para poder visualizarla con el microscopio. Normalmente, con limpiar un poco tu trozo de material con algún disolvente en más que suficiente para poder tomar unas fotos de lo más chulo. En cambio, los microscopios electrónicos suelen requerir algo más de preparación, además de tener que operar en concidiones de vacío.\nOtra de las ventajas es lo poco o nada invasiva o destructiva que es la técnica. Es decir: el AFM no modifica ni estropea la superficie del material mientras lo inspecciona. Además, el AFM nos da un mapa topográfico en tres dimensiones de la superficie del material, mientras que los microscopios electrónicos no (o no tanto).\nNo todo son ventajas, obviamente. Con un AFM tenemos bastante limitado el area de la muestra que podemos fotografiar, que suele estar limitada a cuadrados de 100-200 micras de lado. Además es una técnica bastante lenta. Esto último repercute en dos aspectos. El primero es que, obviamente, nos gusta que las cosas funcionen rápido para poder hacer más en menos tiempo. El segundo aspecto es que, como estamos haciendo fotos de trocitos muy pequeños del material, y las estamos haciendo muy despacito, puede pasar que la muestra se mueva lentamente (por lo que sea, variaciones en tempratura, vibraciones…) y que, igual que con la cámara del móvil, la foto nos salga distorsionada o movida.\nEl funcionamiento de uno de estos microscopios es bastante ingenioso, y se puede entender bastante bien de forma intuitiva. Alguna vez he escuchado a algún vendedor de AFM comparar el funcionamiento de uno de estos microscopios con los ciegos que caminan con la ayuda de un bastón y es una comparación muy acertada. Nuestro amigo invidente va por la calle y va golpeando el suelo con el bastón para ver si hay obstáculos. Con él puede hacerse una idea mental de la topografía del suelo, puede ver si hay un agujero en la acera o un bordillo. También puede distinguir entre los diferentes tipos de baldosa que se ponen para la parte normal de la acera, los pasos de peatones, las paradas de autobús…\nFigura 1. Imagen de microscopio electrónico de una punta de AFM usada. Se puede ver la palanca que se flexiona y la punta que inspecciona la superficie. Fuente: Wikimedia Commons.\nNuestro AFM funciona de una manera muy similar. La parte sensible del microscopio es una palanquita, como un trampolín de los de la piscina, que, en su parte inferior, tiene una punta pequeña y afiliada. Al desplazar dicha punta sobre la superficie del material, nuestro trampolín se flexiona hacia arriba y hacia abajo, y registrando esas flexiones, nos hacemos una idea de la topografía de la superficie de nuestro material. En la Figura 1 podéis ver una imagen (tomada con un microscopio electrónico de los que hablaba arriba, qué cosas) de uno de estos trampolines con punta. Las más sencillas y comunes de estas puntas están fabricadas con silicio, que se prepara con un método relativamente complejo que se puede consultar aquí.\nAsí que tenemos un trampolín con una punta que deslizamos sobre la superficie del material y que responde a las irregularidades de la superficie. Pero, ¿cómo hacemos para detecar las pequeñísimas flexiones del pequeñísimo trampolín? Para eso hacemos uso de un láser, como podéis ver en la Figura 2. La luz del láser incide en la parte superior del brazo del AFM, del trampolín. Es reflejada, y se detecta con cuatro fotodiodos (unos detectores de luz, vaya) que están colocados muy juntos, formando un mosaico. Cuando la superficie es lisa (Figura 2 (a)), el sistema está alineado de manera que la intensidad de la luz se reparte entre los cuatro fotodiodos, de manera que todos registran la misma señal, y el ordenador que maneja todo el cotarro se da cuenta de que la superficie es lisa. Bien: esto es fácil.\nFigura 2. Esquema que muestra como se detecta la flexión del brazo de un AFM. (a) Cuando la superficie es lisa, el láser da en el trampolín, se refleja, y su intensidad se reparte entre los detectores, que registran la misma señal. (b) Cuando la superficie es más baja de lo normal, el brazo se flexiona menos, y la luz del láser que se refleja incide mayoritariamente en los detectores de abajo, que registran más señal que los otros. (c) Cuando la superficie es más alta de lo normal, el brazo se flexiona más, y la luz del láser que se refleja incide mayoritariamente en los detectores contrarios, que esta vez registran más señal que sus compañero.\nSegún deslizamos nuestra punta por la superficie de la muestra, puede ser que nos encontremos con un trozo que está más bajo de lo normal, como en la Figura 2(b). Como la superficie está más baja de lo normal, el brazo del AFM está más estirado de lo normal, lo que resulta en que el láser se refleje un poquito más abajo de lo normal. Ahora los cuatro cuadrantes del detector no ven la misma intensidad. De hecho, los detectores de abajo ven más de lo normal, y así el ordenador sabe que la superficie es un poco más baja en ese punto.\nPor supuesto que también ocurre al revés, como en la Figura 2(c). La superficie puede tener alguna elevación. Entonces nuestro trampolín se flexiona más de lo normal y, de nuevo, unos cuadrantes del detector ven más luz que otros, y así sabemos que la punta está sobre una elevación del terreno. Por supuesto que la cosa es más delicada y la punta también se puede torsionar hacia los lados, pero eso también se puede detectar con nuestro sistema de cuatro fotodiodos.\n¡Pero ponnos unas fotos sacadas con ese cacharro! ¡Algún ejemplo concreto, tírate el rollo!\nYa sabía yo que me ibais a pedir algo así. Buscando un poco por la red se pueden encontrar imágenes guapísimas obtenidas con la técnica que os estoy describiendo. Yo he juntado cuatro en la Figura 3, para que os hagáis una idea. La primera foto (Figura 3(a)) la he sacado de Wikimedia Commons. Lo que se puede ver son los bultos (o surcos, según se mire) de un CD-ROM. La imagen reproduce un cuadrado de 15 µm sobre la superficie del CD (o, más bien, de la lámina reflectante que hay dentro).\nEn la Figura 3(b) (que he sacado de esta referencia) podéis ver dos reconstrucciones superficiales adyacentes en un trozo de silicio. ¿Que qué es una reconstrucción superficial? Como sabréis, los materiales cristalinos están compuestos por átomos ordenados de una dterminada manera. Y se ordenan de esa manera porque están rodeados por todas partes de átomos igulaes a ellos. Pero, ah, amigo, los átomos de la superficie sólo tienen vecinos por un lado, así que se pueden ordenar de varias maneras diferentes que son compatibles con el resto de la estructura del cristal. Lo que veis en la figura son dos de esas posibles configuraciones de los átomos de un cristal de Si. La figura representa un área cuadrada de 26 nm de lado.\nEn la tercera (extraída de aquí) podéis ver una capa de grafito (que es el material presente en las minas de los lápices, entre otras cosas). El grafito está formado por átomos de carbono, que forman una red en dos dimensiones enlazándose fuertemente entre sí con tres de sus cuatro electrones de valencia. El electrón sobrante se utiliza para enlazar, más debilmente, las diferentes capas entre sí. En la foto podéis ver una de esas capas, y el lugar que ocupa cada átomo de carbono, en cada vértice de los hexágonos de la figura. La imagen tiene 2 nm (0.000000002 m) de lado.\nFigura 3. Imágenes tomadas con un AFM de (a) un CD-ROM, (b) dos reconstrucciones superficiales coexistiendo en Si(111), (c) una capa de grafito, y (d) puntos cuánticos de arseniuro de indio crecidos sobre GaAs.\nLa cuarta está sacada de mi propia tesis doctoral (que por cierto, me voy a hacer publicidad: la podéis consultar aquí) y es cortesía del Dr. José María Ulloa Herrero. Se trata de una capa de puntos cuánticos de arseniuro de indio crecidos sobre un sustrato de arseniuro de galio. Los puntos cuánticos son una estructura muy interesante para, entre otras cosas, fabricar dispositivos emisores de luz, como LED y láseres. La foto representa un área cuadrada de 700 nm de lado (es decir, 0.0000007 m) y los puntitos blancos son los puntos cuánticos, que tienen unos 30 nm de lado y unos 5 nm de alto.\nObviamente, la técnica es bastante más sutil y compleja de lo que he contado aquí. El lector que quiera saber un poquito más, está invitado a buscar, por ejemplo, la entrada de la Wikipedia, o alguno de estos enlaces que he encontrado por ahí, como éste, éste, éste. Algunos de estos enlaces tienen referencias que pueden estar bastante bien.\nTagged with: afm, cantilever, microscopia, microscopio de fuerza atómica\n« El cierre de Megaupload: las cosas que hubo que oir\nParadojas de la vida: menos humos »\nMicroscopio said, on 10 abril 2013 at 21:18\nthetuzaro said, on 10 abril 2013 at 21:19\nAna said, on 10 septiembre 2014 at 15:47\nEnhorabuena! Entré aquí de casualidad, buscando fotoluminiscencia, y me quedé leyendo el resto. Tienes un blog (cat. divulgación) didáctico, entretenido y facil de leer. Gracias por compartir sabiduría 😉\nthetuzaro said, on 10 septiembre 2014 at 16:40


Arbus: cómo moverte después del aeropuerto en Buenos Aires\nmayo 3, 2017 by juanjocoronell\nImaginate que recién llegaste al aeroparque Jorge Newbery y querés aprovechar cada momento de tu estadía. El tiempo es tirano, y más cuando de conocer lugares se trata. Por eso, para no estar esperando de más un taxi y para ganar minutos, subite al ArBus, dejá las valijas en el hotel y empezá a recorrer Buenos Aires.\n¿Qué es el ArBus?\nEl ArBus es un servicio de transporte terrestre que une el aeroparque Jorge Newbery hasta seis puntos en la Ciudad de Buenos Aires: Retiro, Obelisco, Puente Pacífico, Belgrano, Shopping Alto Palermo y Puente Saavedra. Además, conecta con el Aeropuerto Internacional Ministro Pistarini (Ezeiza).\nCuando comenzó a funcionar Mariano Recalde, el ex Pte. de Aerolíneas Argentinas lo describió como “un servicio de calidad de lujo y más barato que muchos colectivos que ofrecen este servicio”. Además, ofrece Wifi, Televisión digital abierta, cámaras de seguridad para beneficiar la seguridad y choferes entrenados.\nHoy en día es Marca País. Esta denominación es una estrategia para capitalizar la reputación del país en mercados internacionales. Por lo que es mucho más que un logo y se trata de un reconocimiento a lo que se hace desde el Ministerio de Transporte de la Nación Argentina.\nTodo lo que tenés que saber…\nEl ArBus funciona los 365 días del año, desde las 5:30 hasta las 00:00 hs. Que es el tiempo en el que el Aeropuerto está abierto. Con una frecuencia que no supera los 30 minutos, el servicio se destaca y es cada vez, más utilizado por los usuarios.\nEl servicio que conecta el aeroparque Jorge Newbery con cualquiera de los destinos antes mencionados cuesta $60 –hay tarifas especiales- y el servicio que conecta el aeroparque con el Aeropuerto Internacional cuesta $180; puede abonarse en los puntos de venta, arriba del bus con la tarjeta SUBE o a través de internet en los siguientes puntos de venta:\nAEROPARQUE: Sector Arribos Nacionales\nOBELISCO (CENTRO): Av. Corrientes 983 y Carlos Pellegrini 487\nBELGRANO: Juramento 2163\nPUENTE SAAVEDRA: Av. Cabildo 4969\nRETIRO: Terminal de Ómnibus, plataforma 9\nALTO PALERMO: Bulnes 2158\nInformación a tener en cuenta para los recorridos desde y hacia Aeroparque y los 6 destinos de la Ciudad:\n$27 Jubilados, pensionados, empleadas domésticas, beneficiarios de la Asignación Universal por Hijo, asignación por embarazo y ex-combatientes de Malvinas (sólo con tarjeta SUBE).\n$15 para cualquier pasajero que suba al ArBus con bicicleta plegable (sólo con tarjeta SUBE) – Tarifa #BiciAmigable\n$15 Empleados del Aeropuerto Jorge Newbery y las aerolíneas adheridas al convenio con ArBus (sólo con tarjeta SUBE).\nNo abonan boleto los menores de 3 años y pasajeros discapacitados que porten fotocopia autenticada del certificado de discapacidad y D.N.I. (cuando el certificado indique la necesidad de contar con un acompañante, éste también viajará sin costo).\nInformación a tener en cuenta para el recorrido entre Aeroparque y Ezeiza:\nNo abonan boleto los menores de 3 años.\nTags: aeroparque Jorge Newbery, aeropuerto en Buenos Aires, Aeropuerto Internacional Ministro Pistarini (Ezeiza), ArBus, Retiro\nCancelaron al menos 43 vuelos de Aerolíneas desde Aeroparque y Ezeiza\nA partir de 2018 Aeroparque dejará de operar vuelos regionales


¿Por qué comprar acciones de Palantir? ¿Es una buena acción? – Mejor Broker de Bolsa\n¿Cómo van las acciones de Palantir?\n¿Crees que la industria del software tendrá un papel relevante en los mercados durante los próximos años?\nCotización de Palantir\nCómo invertir en acciones de Palantir paso a paso\nPalantir en Bolsa\nPalantir ingresos y beneficios\nPalantir BPA y PER\n¿Es buena idea invertir en Palantir?\nRazones para invertir (o no) en acciones de Palantir\n¿Cuándo comprar acciones de Palantir?\nPalantir Technologies Inc es una empresa estadounidense fundada en el 2003 encargada del desarrollo de software para 2 tipos de cliente: instituciones privadas e instituciones gubernamentales.\nAsí, en su recorrido ha creado programas de software como Palantir Gotham, con el que se pueden analizar millones de datos y tiene aplicaciones tanto en marketing como en defensa o Palantir Foundry, que genera un sistema operativo con todos los datos de una organización.\nAdemás, a pesar de su corta edad, Palantir hace negocios con un montón de entidades públicas, como puede ser la Comunidad de Inteligencia de los Estados Unidos.\nPor ello, muchos inversores están centrando su atención en Palantir, sobre todo con el crecimiento en Bolsa que han tenido otras empresas de software.\nLas acciones de Palantir llevan cotizando en Bolsa tan solo desde finales de 2020, y aunque durante sus primeros meses de cotización vivieron una subida importante, en la actualidad cotiza a un precio cercano al de su IPO.\nSi quieres comprar acciones de Palantir, necesitarás un broker online con el que acceder a la Bolsa.\nSi aún no tienes ninguno, te recomiendo que pruebes eToro, pues es una opción fácil de utilizar, regulada y con unas comisiones muy competitivas.\nEstos son los pasos para comprar acciones de Palantir desde eToro:\nAccede al sitio web de eToro y regístrate.\nEscribe “Palantir” en la barra superior del sitio web.\nPulsa sobre el primer resultado.\nHaz clic en “Invertir” en la zona superior derecha de la pantalla.\nModifica los detalles de tu orden y ejecútala.\nCompra acciones de Palantir con eToro\nEstos son los datos bursátiles más importantes de Palantir Technologies:\nNúmero de acciones: 2.010.000.000\nPeter Thiel: 15 %\nThe Vanguard Group: 14 %\nSompo Holdings: 9 %\nBlack Rock Institutional Trust Company: 7 %\nARK Investment Management: 4 %\nCapitalización bursátil: 26.010.000.000 $\nIngresos: 1.542.000.000 $\nBeneficios: – 520.000.000 $\nComo puedes observar en estos datos, Palantir es una empresa relativamente pequeña, pues tiene una capitalización de mercado inferior a los 30.000 millones de dólares.\nDe los datos que te acabo de mostrar, seguro que también te ha llamado la atención la parte de los ingresos y los beneficios, ¿verdad?\nY es que aunque Palantir sea capaz de facturar cifras superiores a los 1.500 millones de dólares, durante el ejercicio de 2021 perdieron la friolera de 520 millones.\nDesde luego, estas no parecen unas cifras especialmente positivas para la empresa, aunque tener pérdidas es algo muy normal en empresas de alto crecimiento, como es el caso de Palantir.\nAquí puedes ver cuáles han sido sus ingresos y sus beneficios durante los últimos años:\nAño Ingresos Beneficios\n2021 1.542.000.000 – 520.000.000\n2020 1.093.000.000 – 1.172.000.000\n2019 743.000.000 – 588.000.000\n2018 595.000.000 – 637.000.000\nTal y como puedes observar, los resultados obtenidos en 2021 no están fuera de lo normal, aunque también se puede apreciar que son sustancialmente mejores que los de otros años.\nDe este modo, en el periodo que va desde 2018 hasta 2021, la empresa ha conseguido incrementar su facturación en un 160 %.\nY esto es precisamente lo que buscan los inversores, una empresa con mucho potencial de crecimiento aún por explotar.\nEso sí, si le echas un ojo a la columna de los beneficios, podrás darte cuenta de 2 cosas. En primer lugar, que el año 2020 el resultado fue especialmente malo, aunque esto puede deberse a las complicaciones de la pandemia del COVID-19.\nY en segundo lugar, a que la diferencia entre las pérdidas de 2018 y 2021 no es tan elevada como la de sus ingresos.\nEs decir, aunque la empresa ha conseguido una mayor cifra de negocio, sus gastos se han incrementado casi al mismo ritmo. Por ello, el resultado final después de impuestos es tan similar en ambos ejercicios.\nEl reparto de dividendos entre los accionistas es una actividad voluntaria para las empresas, y teniendo en cuenta los resultados de Palantir, es lógico que hayan optado por no repartirlos.\nAdemás, esta es una práctica muy extendida entre las empresas que como Palantir, están en pleno crecimiento, pues necesitan todos sus recursos para seguir desarrollando y mejorando sus productos.\nJunto a los ingresos y los beneficios de la empresa, hay un par de parámetros que me gusta analizar cuando estudio una compañía, estos son el BPA y el PER.\nEl BPA (Beneficio Por Acción) hace referencia a cuánto dinero gana la empresa por cada acción que tiene en el mercado. Por ello, se calcula dividiendo el beneficio neto entre el número total de acciones.\nEl resultado del cálculo no nos dice mucho de forma aislada, ya que la idea de este ratio es ver cómo ha ido evolucionando a lo largo de los años.\nNo obstante, aquí nos topamos con un problema, y es que Palantir no lleva mucho tiempo cotizando, por lo que no hay muchos datos de años anteriores disponibles.\nPor el momento solo conocemos estos BPA o EPS (Earnings Per Share):\n2020 – 1,19\n2019 – 1,02\n2018 – 1,11\nPor este motivo, aún es pronto para sacar conclusiones con este ratio.\nEn cuanto al PER (Price to Earnings Ratio), es una medida que se utiliza para saber si el precio de las acciones de una empresa es caro, barato o justo en función de los beneficios obtenidos por la empresa.\nPara calcularlo tan solo hay que dividir la capitalización bursátil de la compañía entre su beneficio neto, y los resultados pueden ser:\nInferiores a 15: la empresa está infravalorada.\nSuperiores a 25: la empresa está sobrevalorada.\nEn el caso de Palantir aún no es posible calcular el PER, pues su beneficio neto aún es negativo. Por lo tanto, habrá que esperar para poder emplearlo.\nAdemás de todos estos datos sobre Palantir, para hacer un análisis completo sobre la compañía, es muy importante saber quiénes son sus competidores y qué papel tienen en el mercado.\nEn este aspecto, lo cierto es que el análisis de Palantir se complica, pues las empresas de software han proliferado de una forma muy rápida, sobre todo por las pocas barreras de entrada que hay en este sector.\nPor ello, aunque hay muchas empresas que compiten en este sector, voy a hablar de 2: Tyler Technologies y Alteryx.\nTyler Technologies (TYL) es una empresa estadounidense que desarrolla soluciones de software para administraciones públicas, servicios de salud y educación y otras muchas aplicaciones, tanto dentro como fuera de Estados Unidos.\nSe trata de una compañía con una capitalización bursátil similar a la de Palantir, rondando los 20.000 millones de dólares, aunque cuenta con varias ventajas; se trata de una empresa que genera beneficios (161 millones durante 2021), tiene un catálogo de productos más diversificado y la presencia de inversores institucionales es mucho más elevada.\nEso sí, aunque la empresa presenta un crecimiento constante y sostenido, y tiene una buena evolución tanto en BPA como en patrimonio neto y otros indicadores, su crecimiento es bastante más lento que el de Palantir.\nPor otro lado destaca Alteryx (AYX), otra compañía estadounidense dedicada al desarrollo y comercialización de soluciones de software.\nEn esta ocasión hablamos de una empresa con una capitalización de tan solo 4 mil millones de dólares, aunque con productos como su programa Trifacta es capaz de plantarle cara al software Foundry.\nTambién hay que mencionar que los ingresos de la empresa son mucho más reducidos que los de Palantir, y del mismo modo que esta, también produce pérdidas.\nSin embargo, lo que llama la atención de ella son 3 cosas; disponen de una amplia variedad de productos, los inversores institucionales representan el 83 % de su accionariado y, últimamente los insiders han incrementado sus compras de forma notable.\nTras haber leído el análisis de Palantir, es muy posible que aún te quede alguna duda sobre si invertir en Palantir es una buena idea o no.\nSi es tu caso, lo primero que debes saber es que es imposible saber con certeza si una inversión será buena antes de realizarla.\nPor el momento, y con los datos disponibles, podemos decir que Palantir es una empresa con un gran potencial, y con un modelo de negocio que realmente funciona.\nAdemás, a pesar de ser una empresa relativamente joven ha irrumpido con mucha fuerza en su sector, llegando a acuerdos incluso con administraciones públicas y con el servicio de defensa estadounidense.\nEso sí, no hay que olvidar que Palantir es una empresa que aún no reporta beneficios, y aunque muchos inversores esperan que esto cambie en los próximos años, puede que ese momento nunca llegue.\nPor ello, debes ser tú quien decida si Palantir es una buena inversión para ti u tu cartera de inversión.\nEl patrimonio neto de la empresa evoluciona a una gran velocidad, sobre todo por la gran cantidad de efectivo que han ido acumulando durante los últimos años y la reducción de sus deudas.\nEl beneficio de la empresa está escalando de forma muy buena, y si sigue a este ritmo puede que pronto llegue a ser rentable.\nAunque Palantir no cuenta con un catálogo de servicios tan amplio como ocurre con otros competidores, lo cierto es que sus softwares se pueden utilizar para una gran cantidad de industrias y finalidades.\nLa inteligencia artificial es una de las tecnologías que más se desarrollará en el futuro, y aunque Palantir no cuente con este tipo de servicios, se trata de una empresa de big data, fundamental para el desarrollo de estas tecnologísa.\nAlgunos miembros de la junta directiva han vendido algunas acciones durante los últimos, algo que aunque no tiene por qué ser negativo, da “mala imagen” de la empresa.\nLa presencia de inversores institucionales en la empresa es de alrededor del 35%, una cifra que aunque no es mala, podría ser bastante más elevada.\nEl mercado del software tiene muy pocas barreras de entrada, por lo que en cualquier momento pueden surgir nuevos competidores.\nSi finalmente has decidido invertir en Palantir, estarás buscando el momento adecuado para hacerlo, ¿verdad?\nSi es así, te recomiendo que no te comas demasiado la cabeza, pues encontrar el momento ideal para invertir en una empresa es muy complicado.\nPor ello, si crees que Palantir es una empresa con un gran potencial, confías en su equipo directivo y crees que se merece un puesto a largo plazo en tu cartera, te recomiendo que hagas una o varias entradas en el momento que quieras.\nEn cambio, si quieres hacer una inversión a corto o medio plazo, trataría de buscar rebotes en zonas de soporte o roturas de resistencias.\nEso sí, Palantir no lleva mucho tiempo cotizando, por lo que estas zonas del gráfico no están muy consolidadas. Por ello, te recomiendo utilizar siempre una buena gestión del riesgo y/o stoploss.\nPor último, si quieres comprar acciones de Palantir, personalmente te recomiendo que lo hagas invirtiendo directamente en las acciones de la empresa.\nPara invertir en Palantir de este modo tendrás que utilizar un broker online, y bajo mi experiencia te recomiendo eToro, un broker bien regulado, seguro y con unas comisiones muy competitivas.\nEso sí, cuando utilices eToro recuerda que debes dejar el apalancamiento en “X1”, pues de lo contrario estarás invirtiendo en CFDs, no en acciones.\nMás información en la página web de la empresa: https://www.palantir.com/


Jaua llegó a Bielorrusia para estrechar lazos con Lukashenko\nND / Alejandro Carranza / 24 abr 2014.- El canciller Elías Jaua llegó este jueves a la ciudad de Minsk, capital de Belarús, donde sostendrá una reunión con su homólogo Vladimir Makei con miras a profundizar y fortalecer la alianza estratégica que mantienen ambas naciones.\nCorreo del Orinoco: Parque en Belarús honra memoria del presidente Hugo Chávez\nCorreo del Orinoco / 11 ene 2014.- Un parque inaugurado con el nombre del Comandante Supremo de la Revolución Bolivariana, Hugo Chávez, concreta el homenaje de Minsk, capital de Belarús, al líder venezolano.\nDiputada Figuera denuncia irregularidades en el convenio Venezuela-Belarús\nND.- La parlamentaria Dinorah Figuera, Presidente de la Comisión Permanente de la Familia para la Asamblea Nacional y miembro de la dirección nacional de Primero Justicia, denunció el fraude al pueblo venezolano por parte del Ministerio del Poder Popular para la Vivienda y Hábitat en la entrega de hogares por medio de acuerdos suscritos con otras naciones.\nLukashenko asume su cuarto mandato presidencial consecutivo en Belarús\n[caption id="attachment_20375" align="alignleft" width="210" caption="El presidente de Belarús, Alexandre Lukashenko, asumió este viernes su cuarto mandato consecutivo. AFP PHOTO / SERGEI GRITS "][/caption] MISNK, 21 enero 2011 (AFP) - El presidente de Belarús, Alexandre Lukashenko, asumió este viernes su cuarto mandato consecutivo, en una ceremonia boicoteada por los embajadores de la Unión Europea (UE) debido a las controvertidas circunstancias de su reelección.\nVenezuela prevé aumentar a 200.000 barriles diarios envío de crudo a Belarús\nCARACAS, 30 octubre 2010 (AFP) - Venezuela estima aumentar el envío de petróleo a Belarús hasta alcanzar los 200.000 barriles de crudo diarios entre 2011 y 2013, informó este viernes el ministro de Energía y presidente de la estatal Petróleos de Venezuela (PDVSA), Rafael Ramírez, en un comunicado.\nVenezuela prevé exportar aluminio a Belarús\nND.- El presidente Chávez anunció desde Belarús que Venezuela estudia la posibilidad de exportar aluminio a Belarús. “En el futuro podemos mandar aluminio, así como ahora estamos mandando petróleo” dijo.


Inicio → Inversión → Banxico conmemora 20 años de autonomía\nEl Banco de México (Banxico) conmemorará este lunes el 20 aniversario de su autonomía con una conferencia internacional, en la que el presidente Enrique Peña Nieto será uno de los oradores principales.\nDurante dos días, el banco central llevará a cabo la conferencia ‘Independencia de los bancos centrales, avances y retos’, encabezada por su gobernador actual Agustín Carstens, en la que además participarán funcionarios y especialistas nacionales e internacionales.\nDestaca la participación de Miguel Mancera Aguayo, quien desde 1982 fue director general del Banco de México y tras las reformas legales que le dieron autonomía se convirtió en su primer gobernador, cargo que abandonó en 1998.\nA la ceremonia asistirá el secretario de Hacienda y Crédito Público, Luis Videgaray, además de los ex secretarios del ramo, Pedro Aspe, Francisco Gil y Guillermo Ortiz.\nTambién estarán presentes el ex gobernador del instituto central y el saliente presidente de la Reserva Federal de Estados Unidos, Ben Bernanke, vía videoconferencia.\nEl instituto central es autónomo en sus funciones y administración por mandato constitucional y tiene como finalidad proveer a la economía del país de moneda nacional y procurar la estabilidad del poder adquisitivo de dicha moneda.\nDe manera adicional promueve el sano desarrollo del sistema financiero y propicia el buen funcionamiento de los sistemas de pago, de acuerdo con una semblanza histórica del propio banco.\nSu fase de modernización definitiva inició con el otorgamiento de su autonomía, la cual empezó a regir a partir de abril de 1994.\nSu autonomía, explicó, implica que ninguna autoridad le podrá exigir la concesión de crédito, con lo que se garantiza el control ininterrumpido del instituto central sobre el monto del dinero (billetes y monedas) en circulación.\nDicha autonomía tiene como finalidad que la operación del banco central sea conducente a la conservación del poder adquisitivo de la moneda nacional y está sustentada en tres pilares.\nEl primero, de naturaleza legal, en su parte medular se integra con el mandato constitucional que establece que la misión prioritaria de la institución es procurar el mantenimiento del poder adquisitivo de la moneda nacional.\nLo anterior, está especificado en la vigente ley de la institución promulgada a finales de 1993.\nEl segundo pilar, detalla al institución, reside en la forma en que está integrada su Junta de Gobierno y las normas a que está sujeto su funcionamiento.\nExpuso que dicho órgano colegiado está conformado por un gobernador y cuatro subgobernadores; funcionarios que son designados por el Ejecutivo pero que no pueden ser destituidos de su cargo discrecionalmente y cuyos periodos de servicio son alternados.\nEl gobernador de la institución ocupa dicho cargo durante seis años e inicia en la mitad del sexenio gubernamental para concluir al término de los primeros tres años del siguiente. En tanto que los subgobernadores desempeñaran sus funciones en un periodo de ocho años y su reemplazo es de cada dos años, de manera alternada.\nEl tercer pilar de la autonomía del banco central es la independencia administrativa que la ley le concede.\nEtiquetas: banco de mexico banxico aniversario banca banco central autonomia 20 anos sistema financiero billetes monedas dinero


Selfie Con Cris: ¡¡¡ SELFIE CON FRAN RUIZ !!!\n¡¡¡ SELFIE CON FRAN RUIZ !!!\n¡¡¡ HOLA MIGÜIT@S !!!\nEstrenamos sección y qué mejor que hacerlo con unas fotos que traen, sol, playa y verano, de la mano de Fran Ruiz.\nOs pongo un poco en situación, Fran Ruiz es mi mejor amigo, una persona diez y un jugador de voley que para los que no seáis seguidores de este deporte, si le veis jugar una sola vez ya no querréis separaros del monitor del ordenador cada vez que haya partido.\nEste año Fran está jugando en Palma de Mallorca, en el equipo C´an Ventura Voley Palma, y este sábado se disputan el título de Campeones de Liga. Y como van a ganar pues he dicho Voy a hacerle un homenaje subiendo las fotos que hicimos hace unos días en las maravillosas playas de esta isla ^^\nY en esta sección, no hablaré de ropa (aunque en este shooting tampoco había mucha de la que hablar 🙈)\nPero en esta sección hablaré de la persona a la que le he hecho las fotos, contando un poco su vida profesional,y hablaré también del tema fotográfico, luces, retoque, color, etc...\nHablando de Fran como ya he dicho, es jugador de voley profesional, juega en el C´an Ventura y es jugador también de la selección española. Y por cierto uno de los mejores.\nPese a medir tan solo 1,78 es de los jugadores que más salta. A parte de bloquear bien, y de atacar de lujo, defiende que da gusto. Y esto no lo digo yo porque le quiera como le quiero, que lo dicen los entendidos de este deporte, que yo tampoco soy experta, ^^\nEmpezó jugando desde chiquitín, y viendo lo que saltaba y como le daba a la pelota se supo que llegaría lejos, y efectivamente así fue.\nY hablando un poco del tema fotográfico, este día el sol estaba muy fuerte, no había nubes, el sol estaba alto y la luz era muy muy dura... Peeeero bueno, cogiendo una buena orientación del cuerpo fuimos consiguiendo lo que queríamos. En cuanto al retoque no ha sido nada extremo, al contrario, un poquito de dodge & burn, unas imperfecciones pequeñitas con el pincel corrector, un poquito de contraste, bajar un poco las luces para crear sombras que el sol se comía y la verdad que de temperatura de color me gustaba como estaba asi que no he tocado nada.\nEspero que os gusten las fotos y bienvenidos a mi nueva sección.\nFotografía y edición: Cristina Dao\nModelo: Fran Ruiz\nPublicadas por selfieconcris a la/s 13:20\nEtiquetas: blog, canon, cristinadao, fotografia, franruiz, jugador, mallorca, palmademallorca, photoshop, playa, retoque, saycheese, selfiecon, siempresonriendo, tatuaje, verano, viaje, voley


Barkley Marathons - carreras de ultrafondo\nBarkley Marathons, la carrera mas loca del mundo\nDicen que es la carrera más dura del mundo, lo que no se puede discutir es que estamos ante un original disparate, como dice el vídeo oficial de la edición de 2015 es "la carrera que se come tu juventud" y es que a su creador Gary "Laz" Cantrell le gusta asociar un slogan de pegadizo humor sádico en el dorsal de los corredores en cada edición, del tipo “En qué estaría yo pensando”o "Barkley, donde los sueños van a morir"\nViene celebrándose desde 1986 y en estos treinta años tan solo 15 personas han podido terminarla, lo que supone un 1% del total que lo han intentado. En la edición de este año 2017, que tuvo lugar el pasado fin de semana, solo John Kelly logró acabarla por debajo del tiempo máximo de 60 horas, rozando el límite con 59:30:33, mientras que Gary Robbins se perdió y superó en 6 segundos el tiempo, protagonizando una de las entradas mas agonizantes y tristes que he visto.\nEn 1977 el asesino de Martin Luther King, escapó de la penitenciaría de Brushy Mountain State en Tennessee, donde se encarcelaba a los peores criminales al estar enclavada en medio de unas montañas con espesa vegetación, conocidas como el tercer muro de la prisión. Fue capturado 54 horas después a tan solo 14 kilómetros, ya que el terreno del parque de Frozen Head había cumplido su misión, imposibilitando la huida de tan mediático asesino.\nEsta historia despertó años después en los dos organizadores, Laz Cantrell y Karl Henn la idea de una carrera de 100 millas a completar en 60 horas y que reviviera la fuga protagonizada por James Earl Rays, mezclando la resistencia con la orientación, ya que se realiza sin ayuda de sistemas de navegación por gps, tan solo se puede utilizar un mapa y una brújula para recoger las ansiadas hojas con el número de dorsal, que demuestran el paso por los distintos puntos de control.\nEs mi desafortunado deber informarle que ha sido seleccionado para la Barkley Marathons, así comienza la carta que reciben los 40 "desafortunados" que cada año son seleccionados para tomar la salida. La carrera consiste en dar 5 vueltas a un circuito de 20 millas completando cada vuelta en 12 horas, por lo que el tiempo total es de 60 horas y el recorrido se supone que tiene 100 millas, y digo se supone porque el organizador afirma que incluso tiene más distancia, aunque se desconoce la longitud exacta.\nEl trazado se varía cada vez que alguien consigue terminarla, metiendo alguna colina más o aumentando su dureza. Solo se sabe que que se atraviesa la penitenciaría de la que escapó James Earl Ray, pasando por un antiguo túnel que conectaba la prisión con el exterior. El resto de la ruta se realiza a través de un bosque de vegetación muy densa y no hay sendas, con subidas y bajadas muy pronunciadas, siendo el desnivel acumulado de 18.300. Las reglas que rigen la carrera consisten en el siguiente cúmulo de despropósitos:\nNo hay una página web con información sobre la carrera, no se sabe en que fecha será, sino que cada uno debe buscarse la vida y conseguir la información necesaria para entrar en una lista de e-mail donde el corredor debe intentar ser aceptado mientras los veteranos de la prueba le cuentan historias falsas para desanimarlo. Hay que aportar un currículum de carreras finalizadas y una carta con los motivos por los que deseas realizarla.\nEl plazo de inscripción dura 5 segundos.\nLa inscripción cuesta 1 dolar 60 centavos, un centavo por cada milla.\nNo hay una hora fija para la salida, sino que existe un plazo de 12 horas en el que la carrera puede comenzar en cualquier momento, una cosa así como el salto de la verja en el rocío. Se hace sonar una concha y la carrera comienza a la hora siguiente, cuando su director de carrera se enciende un cigarrillo. Preguntado Laz Cantrell el porqué de esta costumbre, su respuesta fue: "pensaba que todas las grandes carreras empezaban de esa forma".\nNo esta permitida la ayuda por navegación gps, la orientación se debe realizar con mapa y brújula. Preguntado de nuevo el bueno de Laz sobre si la gente podría perderse, dijo "no creemos que se pierdan, simplemente no saben donde están con la precisión que lo suelen saber".\nLos 11 libros por vuelta que contienen las páginas con el número de dorsal de los corredores y que éstos deben recoger como prueba de su paso por los puntos de control, los envían los propios corredores y suelen tener títulos tan motivadores como “Qué hacer cuando te sientes solo, perdido y sin ayuda”.\nLos corredores no consiguen trofeos, es la Barkley la que colecciona trofeos, por eso la primera vez que un corredor la hace tiene que llevar una matrícula de coche de su lugar de origen y si acude más de una vez, tiene que llevarle al organizador algún artículo que le evite ir a la tienda, como una camisa o unos calcetines. El premio es que puedes dejar de correr.


Tecnología es el conjunto de conocimientos técnicos, ordenados científicamente, que permiten diseñar y crear bienes y servicios que facilitan la adaptación al medio ambiente y satisfacer tanto las necesidades esenciales como los deseos de las personas. Es una palabra de origen griego, τεχνολογία, formada por téchnē (τέχνη, arte, técnica u oficio, que puede ser traducido como destreza) y logía (λογία, el estudio de algo). Aunque hay muchas tecnologías muy diferentes entre sí, es frecuente usar el término en singular para referirse a una de ellas o al conjunto de todas. Cuando se lo escribe con mayúscula, Tecnología, puede referirse tanto a la disciplina teórica que estudia los saberes comunes a todas las tecnologías como a educación tecnológica, la disciplina escolar abocada a la familiarización con las tecnologías más importantes. La actividad tecnológica influye en el progreso social y económico, pero su carácter abrumadoramente comercial hace que esté más orientada a satisfacer los deseos de los más prósperos (consumismo) que las necesidades esenciales de los más necesitados, lo que tiende además a hacer un uso no sostenible del medio ambiente. Sin embargo, la tecnología también puede ser usada para proteger el medio ambiente y evitar que las crecientes necesidades provoquen un agotamiento o degradación de los recursos materiales y energéticos del planeta o aumenten las desigualdades sociales. Como hace uso intensivo, directo o indirecto, del medio ambiente (biosfera), es la causa principal del creciente agotamiento y degradación de los recursos naturales del planeta.\nrecomendaciones para los cibernautas\nLa tecnologia en la actualidad y los ultimos acontesimientos que se han dado\n¿A qué hace referencia la palabra "tecnología"?La tecnología puede referirse a objetos que usa la humanidad (como máquinas, utensillos, hardware), pero también abarca sistemas, métodos de organización y técnicas.El término ... Leer más\nTecnología es el conjunto de conocimientos técnicos, ordenados científicamente, que permiten diseñar y crear bienes y servicios que facilitan la adaptación al medio ambiente y satisfacer tanto las necesidades ... Leer más