Assessing Collagen and Elastin Pressure-dependent Microarchitectures in Live, Human Resistance Arteries by Label-free Fluorescence Microscopy | Protocol (Translated to German)\nWir beschreiben, gleichzeitige mechanische Prüfung und 3D-Bildgebung der Arterienwand vereinzelter, Leben, menschlichen Widerstand Arterien und Fidschi und Ilastik Bild-Analysen für die Quantifizierung von Elastin und Kollagen räumliche Organisation und Volumen Dichte. Wir diskutieren die Verwendung dieser Daten in mathematische Modelle der Arterienwand Mechanik.\nDie pathogene Beitrag der Widerstand Arterie Umgestaltung ist essentieller Hypertonie, Diabetes und das metabolische Syndrom urkundlich erwähnt. Untersuchungen und die Entwicklung des microstructurally motiviert mathematische Modelle für das Verständnis der mechanischen Eigenschaften des menschlichen Widerstand Arterien in Gesundheit und Krankheit haben das Potential zum besseren Verständnis wie Krankheit und medizinische Behandlungen Auswirkungen auf die menschliche Mikrozirkulation. Um diese mathematische Modelle zu entwickeln, ist es wichtig, die Beziehung zwischen den mechanischen und Microarchitektonische Eigenschaften der mikrovaskuläre Wand zu entschlüsseln. In dieser Arbeit beschreiben wir eine ex-Vivo -Methode für die passive mechanische Prüfung und gleichzeitige markierungsfreie dreidimensionale Bildgebung der Mikroarchitektur von Elastin und Kollagen in der Arterienwand des isolierten menschlichen Widerstand Arterien. Das Image-Protokoll kann auf Widerstand Arterien aller Arten von Interesse angewendet werden. Bild-Analysen werden für die Quantifizierung i) Druck-induzierte Veränderungen der internen elastischen Lamina Verzweigung Winkel und adventitial Kollagen Geradheit mit Fidschi und (Ii) Kollagen und Elastin Volumen Dichte bestimmt, mit Ilastik-Software beschrieben. Vorzugsweise alle mechanischen und imaging sind Messungen auf live, PERFUNDIERTEN Arterien, jedoch ist ein alternativer Ansatz mit standard Video-Mikroskopie Druck Myographie in Kombination mit Post-Fixierung Bildgebung der erneut unter Druck stehenden Behälter diskutiert. Diese alternative Methode bietet dem Anwender mit verschiedenen Optionen für Analyse-Ansätze. Die Einbeziehung der mechanischen und bildgebenden Daten in mathematische Modelle der Arterienwand Mechanik wird diskutiert, und zukünftige Entwicklung und Ergänzungen des Protokolls werden vorgeschlagen.\nDie pathogenen Beitrag und Auswirkungen der Widerstand Arterie Umgestaltung sind essentieller Hypertonie, Diabetes und das metabolische Syndrom1,2,3,4,5dokumentiert. Entschlüsselung der Beziehung zwischen den mechanischen und Microarchitektonische Eigenschaften der mikrovaskuläre Wand ist unerlässlich für die Entwicklung mathematischer Modelle dieses Vereins. Solche Modelle verbessert den Umbau Prozess zu verstehen und unterstützen die Entwicklung der in Silico Modellen pharmakologische Strategien zielen Krankheit im Zusammenhang mit Umbau der Arterienwand zu Testzwecken nützlich.\nVorherige Studien konzentrierten sich im Verständnis der Mikroarchitektur der Arterienwand bezieht sich auf die Arterienwand Mechanik durch den Einbau von mechanischen Maßnahmen und der Mikroarchitektur der extrazellulären Matrix (ECM) werden fast ausschließlich auf große durchgeführt , elastische Conduit Arterien von Mäusen oder Schwein6,7,8,9,10,11. Bildgebung von Mikrostrukturen der Wand erfolgt in der Regel mit nichtlinearen optischen Techniken, unter Ausnutzung der Autofluoreszenz von Elastin und harmonische der zweiten Generation von Kollagen. Dadurch räumlich-zeitliche Darstellung der zwei wichtigsten Komponenten der extrazellulären Matrix, Elastin und Kollagen, ohne Notwendigkeit einer Färbung. Bildgebung der Arterienwand in voller Stärke ist eine Herausforderung in großen Conduit Arterien durch Streuung des Lichts in den dicken Tunika-Medien. Aber, um festzustellen, wie der Mikroarchitektur der Strukturbestandteile der Arterienwand beziehen sich auf die beobachteten mechanischen Eigenschaften, dreidimensionale Informationen während der mechanischen Prüfung einzuholen. Für die großen Arterien wie die menschliche Aorta erfordert dies biaxialen Montage, mechanische Tests und imaging-Regionen von Interesse in 1-2 cm2 Stück der Arterienwand7,9,10, 12. nur einen Teil der Wand abgebildet und mechanisch getestet werden kann.\nFür kleinere Arterien aller Arten (z. B. menschlichen Herzbeutel13, pulmonale14 und subkutane15 Arterien, Ratten mesenterialen Arterien16,17,18, 19 , 20, Maus Cremaster, mesenterialen, zerebrale, femorale und Halsschlagadern21,22,23,24,25,26, 27) Bildgebung der gesamte Wanddicke ist möglich und kombinierbar mit mechanischen Tests. Dies ermöglicht die gleichzeitige Aufnahme von der mechanischen Eigenschaften und die strukturellen Vorkehrungen innerhalb der Wand. Jedoch wurde eine direkte mathematische Modellierung des Verhältnisses zwischen der beobachteten Veränderungen in der dreidimensionalen Struktur des ECM und geänderten mechanischen Eigenschaften der Arterienwand Widerstand nach bestem Wissen und gewissen nur berichtet auf vor kurzem in menschlichen Widerstand Arterien13,15.\nIn dieser Arbeit wird eine ex-Vivo -Methode für die passive mechanische Prüfung und gleichzeitige dreidimensionale Bildgebung der Mikroarchitektur von Elastin und Kollagen in der Arterienwand des isolierten menschlichen Widerstand Arterien beschrieben. Das Image-Protokoll kann auf Widerstand Arterien aller Arten von Interesse angewendet werden. Bild-Analysen sind für den Erhalt der Maßnahmen der internen elastischen Lamina Verzweigung Winkel und adventitial Kollagen Geradheit13 mit Fidschi28beschrieben. Kollagen und Elastin Volumen Dichte werden mit Ilastik Software29 bestimmt und schließlich die Aufnahme der mechanischen und bildgebenden Daten in mathematische Modelle der Arterienwand Mechanik wird diskutiert.\nDas Ziel der Bildgebung und Bild Analysen Techniken in Kombination mit der mathematischen Modellierung soll Prüfern eine systematische Vorgehensweise zu beschreiben und zu verstehen, zu beschreiben beobachtet Druckänderungen induziert in den ECM Widerstand Arterien. Die beschriebene Methode konzentriert sich bei der Quantifizierung der Änderungen in das ECM in einem Gefäß während der Druckbeaufschlagung, durch den Vergleich der Struktur des ECM bei 20 / 40 / 100 MmHg. Diese Belastungen wurden ausgewählt, für die Bestimmung der Struktur der Arterienwand nachgiebiger (20 MmHg), steif (100 MmHg) und Zwischenzustand (40 MmHg), beziehungsweise. Jedoch kann jeder Prozess in der Gefäßwand der live Arterien, einschließlich Änderungen induziert durch vasoaktive Komponenten, Hysterese und Flow, abhängig von der Forschung-Hypothese in Frage durch den Prüfarzt quantifiziert werden.\nDie Verwendung von zwei-Photon Erregung Fluoreszenz-Mikroskopie (TPEM) in Kombination mit einer Druck-Myograph für Studium Druck (oder andere) induziert Veränderungen in der ECM live Arterien wird betont. Erstens, weil das simultane Erfassung der insgesamt dreidimensionale Struktur der Arterienwand (Durchmesser und Wandstärke) sowie dreidimensionale markierungsfreie Erwerb von hoher Qualität ermöglicht, detaillierte Bilder von Kollagen und elastin Mikroarchitekturen wie beschrieben13 unter Ausnutzung die Autofluoreszenz Elastin und Kollagen zweite harmonische Erzeugung Signal (SHG)30. Zweitens ermöglicht TPEM Verwendung von Niedrigenergie-Nah-Infrarot-Anregungslicht, lichtbedingten der Gewebe und somit wiederholte Bildgebung an genau der gleichen Position innerhalb der Gefäßwand zu minimieren darf ermöglichen wiederholte Messungen Analysen beobachtet, Änderungen.\nDie Verwendung eines alternativen Ansatzes mit konfokale Bildgebung des Drucks behoben Arterien wird besprochen, damit Benutzer ohne Zugriff auf TPEM Gelegenheit, sowie das beschriebene Verfahren verwenden können. Informationen zu Struktur und Volumen Dichte ECM kann auch aus zweidimensionalen Analysen der Gewebe geschnitten in Serie, z. B. wie beschrieben von31,32abgerufen werden. Aufgrund der fehlenden Möglichkeit zum Abrufen von dreidimensionalen Strukturinformationen über die Längenskalen der Arterie sowie bei wechselnden Bedingungen mit dieser Methode, ist es jedoch nicht empfehlen die Verwendung dieses Ansatzes für Untersuchungen von Druck und Behandlung induziert dreidimensionale Änderungen in das ECM.\nDie Mindestanforderung für die Ermittler, die hierin beschriebene Methode anzuwenden ist der Zugriff auf ein Setup für Kanülierung und Druckbeaufschlagung der Arterien in Kombination mit einem konfokalen oder zwei-Photon Erregung-Fluoreszenz-Mikroskop. Die Einrichtung in das folgende Protokoll beschrieben ist ein Custom-Built Druck Myograph mit einer längs Kraftaufnehmer, gebaut, um auf eine benutzerdefinierte gebaute umgekehrten zwei-Photon Erregung Fluoreszenzmikroskop passen.\nSammlung von Biopsien der menschlichen parietalen Herzbeutel für den Einsatz in dieser Arbeit wurde als zuvor beschriebenen33nach schriftlicher Einwilligung durchgeführt. Die Studie der menschlichen Geweben entsprechen die Grundsätze, die in der Deklaration von Helsinki34 und wurde von der regionalen Ausschüssen auf Gesundheit Forschungsethik für Süd-Dänemark (S-20100044 und S-20140202) und der dänischen Datenschutzbehörde genehmigt.\n1. sammeln Sie Gewebe und isolieren (Human) Widerstand Arterie\nGewebeproben von Interesse unmittelbar nach der Exzision während einer Operation zu sammeln. Übertragung des Gewebes auf 4 ° C HEPES gepufferten physiologischen Salzlösung (HBS) sofort bei Abholung und speichern es in HBS.\nHinweis: Menschliche Gewebe werden nur dann erhoben nach Genehmigung durch institutionelle und ethischen Gremien sowie schriftliche Einwilligungserklärung Patienten. HBS-Komposition in mM: NaCl 144, KCl 4.7, CaCl2 2.5, MgSO4 1.2, KH2PO4 1.2, HEPES 14,9 Glukose 5.5. Stellen Sie den pH-Wert 7,4 mit NaOH und Filtern Sie die Lösung aber 0,2 µm-Filter.\nLassen Sie die gesammelten Gewebe in sterilen HBS bei 4 ° C über Nacht zum Auswaschen von Anästhetika.\nHinweis: Eine Beeinträchtigung der Lagerung über Nacht Schiff Integrität und Funktionalität sollte vom einzelnen Research Laboratory überprüft werden.\nWiderstand, die großen Arterien (± 200 µm Lumen Durchmesser) mit einer scharfen Spitze Zange und Schere Mikro-Dissektion sorgfältig zu isolieren.\nSpeichern Sie die Arterien bei 4 ° C im eiskalten HBS beim grundieren der Bildgebung/Druckkammer.\n2. Montieren Sie die isolierte Arterie in der Druck-Myograph\nMontieren Sie die Glas-Kanülen mit einem Tipp Durchmesser von ~ 80 µm auf Kanülen-Halter. Positionieren Sie die Spitzen ca. 150 µm oberhalb der Kammer Glasboden.\nHinweis: 45° gebogene Spitze Kanülen können präzise Positionierung des Schiffes über den Glasboden.\nEinlass und Auslass-Schlauch mit HBS mit 1 % BSA zu füllen und mit dem Drucksystem verbinden.\nHinweis: BSA ist inbegriffen, endothelial Zelle Funktion zu bewahren.\nMontieren Sie die isolierte Arterie mit zwei doppelten Knoten Fäden pro Kanüle.\nHinweis: Knoten können im Voraus vorbereitet und gespeichert auf doppelte Klebeband bis benötigt.\nFüllen Sie die Kammer mit HBS und legen Sie zwei doppelknoten auf jedes Glas Kanüle.\nHinweis: Bei der Verwendung von Arterien anzeigen myogen Ton sollte HBS mit Kalzium ersetzt werden, die kostenlose HBS mit 3 µM EGTA und 3 µM Natrium Nitroprusside ergänzt.\nHalten Sie die Arterie sanft an einem Ende mit zwei Paar scharfe Spitze Pinzetten. Öffnen Sie das Lumen der Arterie und schieben Sie ihn sanft auf die Kanüle. Befestigen Sie an der Kanüle mit zwei Knoten.\nEin Druck von 5 MmHg, sanft spülen das Lumen mit HBS / 1 % BSA.\nCannulate das andere Ende der Arterie und an der Kanüle mit zwei doppelten Knoten sichern.\nDie Myograph auf den Mikroskoptisch übertragen und unter Druck die Arterie um 5 MmHg (Eingangsdruck Ausgangsdruck =), dann auf 37 ° C für 30 min erhitzen.\nOptional: Kalibrieren Sie längs Kraftaufnehmers gemäß den Anweisungen des Herstellers (1 g = 9,81 mN).\nHinweis: Unbedingt Kalibrieren der Kraftaufnehmer nach Heizung, da es temperaturempfindlich ist.\n3. führen Sie Experiment: Darstellung der arteriellen Durchmesser, Wandstärke und Kollagen und Elastin Mikroarchitektur mit TPEM\nSchnell Scannen der kanülierte Arterie unter Druck, um 5 MmHg mit einem 20 X Objektiv (numerische Apertur (NA) ≥ 0,8) und low-Power-Anregungslicht Schiffs Durchmesser und Wandstärke um 5 MmHg zu beurteilen.\nHinweis: Verwenden Sie ein Wasser-Immersion-Ziel für invertierte Mikroskope; Verwenden Sie für aufrechte Mikroskope eine Wasser eintauchen Ziel. Haben das Ziel keinen Korrektur Kragen, Deckglas Dicke zu korrigieren, stellen Sie sicher, entsprechend der verwendeten Deckglas mit dem Ziel verwendet. Die Software-Einstellungen und Beschreibungen variieren je nach Benutzer-Interphase und Mikroskop und Software verwendet.\nRichten Sie den Strahlengang.\nAktivieren Sie Mai Tai-zwei-Photonen-Laser zu und setzen Sie ihn auf 820 nm Anregungslicht.\nAchtung: Vermeiden Sie jede sichtbare als auch unsichtbare Laserlicht.\nEmission in zwei Kanäle gleichzeitig zu sammeln. Teilen Emission Licht zwischen den Photomultipliern mit 460 nm langen Pass dichroitischen Spiegel und sammeln Emission mit 30-60 nm breit Bandpass Filter zentriert bei 520 nm (Elastin) und 410 nm (Kollagen), beziehungsweise.\nKontinuierliche Abtastung mit 10 µs Laser wohnen Zeit/Pixel und 512 × 512 Pixel für 100 % Sichtfeld zu ermöglichen.\nManuell scannen Sie durch die Arterie, die Tiefe bestimmen wo maximale Durchmesser beobachtet wird.\nWählen Sie ein rechteckiges Stück für breiteste Durchmesser der Arterie und Scannen Sie ein Einzelbild mit Pixel Größe ≤ 300 nm/Pixel (Abbildung 2). Verwenden Sie als niedrige Erregung Lichtleistung und Pixel Verweilzeit möglichst Photodamaging live Arterie zu vermeiden.\nHinweis: Es wird empfohlen, eine rechteckige, z.B.einzuholen., 100 × 1024 Pixel großes Bild, anstatt quadratische Bild an dieser Stelle Zeit zu sparen und die Gewebe-Photon-Exposition (Abbildung 2) begrenzen.\nSpeichern Sie das Bild für spätere Analysen.\nLumen Durchmesser und Wandstärke an der maximale Durchmesser der Arterie zu bestimmen.\nLaden Sie das Bild in Fidschi.\nLegen Sie den Maßstab durch Klicken auf Main Menü | Analysieren | Maßstab festlegen und geben Sie µm/Pixel und Pixel-Verhältnis (es wird dringend empfohlen, das Pixelverhältnis 1:1 zu halten).\nDie Fidschi- Linien -Werkzeug und ziehen Sie eine Linie zwischen zwei internen elastischen Schichten auf jeder Seite des arteriellen Lumens, klicken Sie und STRG + M. Fidschi-Berichte-Länge als Standard in der Ergebnistabelle.\nEbenso zeichnen Sie mehrere Zeilen zur Messung der Dicke der Wände zu, und klicken Sie auf STRG + M um das folgende Markup zu messen.\nSpeichern Sie die Messungen.\nBild Kollagen und Elastin Mikroarchitektur um 5 MmHg durch die gesamte Dicke der Arterienwand, Erlangung 3D-Bild Stapel mit guter Qualität für 1-3-Regionen entlang der Länge der Arterie zu scannen.\nBild-Stapel durch die gesamte Wand der Arterie mit einer 60 X Ziel, NA ≥ 1, optimierte Pixelgrößen und Z-Abstand zu erhalten.\nBerechnen Sie die optimale Bildgebung Bedingungen (Pixelgrößen und Z-Schritt Abstand) im Einklang mit den optischen Weg, Medium eintauchen und probieren Sie Refraktive Indizes mit dem wissenschaftlichen Volume Imaging Nyquist-Rechner (https://svi.nl/NyquistCalculator).\nHinweis: Bitte achten Sie hierbei auf die Differenz zwischen optimale Pixelgröße und Z-Abstand gegenüber dem Rat in Abschnitt 3.4. oben auf die Verwendung von eine Maximale Pixelgröße.\nVerwenden Sie die gleichen Anregung und Emission Einstellungen wie oben (3.1.1.).\nSchnell Scannen der Gefäßwand, wie oben beschrieben auf um die Dicke des Z-Stack zu bestimmen.\nZ-Stapel-Start und Ende Tiefe, Z-Schritt Abstand und Pixeldichte (gerechnet in 3.3.1.1.) definieren und die Z-Scan durchführen. Speichern Sie jeder Kanal separat.\nHinweis: Bilder sollte klein genug, z.B. 30 x 30 µm oder 50 × 50 µm je nach Schiffsgröße, jeglichen Einfluss der Krümmung in den nachfolgenden Bild-Analysen zu vermeiden.\nArterielle Durchmesser, Wandstärke und Elastin und Kollagen Mikroarchitektur bei verbleibenden drücken des Protokolls zu bestimmen.\nWiederholen Sie 3.1-3.2 auf Druck 10 und 20 MmHg zu, wiederholen Sie 3,3 bei Druck 20 MmHg.\nWiederholen Sie 3.1 und 3.2 auf 40 MmHg Druck.\nWiederholen Sie 3.1-3.2 auf Druck 60, 80 und 100 MmHg zu und wiederholen Sie 3,3 bei 100 MmHg.\nHinweis: 3.1-3.3 kann für alle Drücke und Kombinationen von Druck (z.B. einer Serie/Kombination von zunehmenden sowie abnehmende Druck), je nachdem die Hypothese getestet werden wiederholt werden. Eosin Konzentration 0,3 - 1 µM zugesetzt werden, um Elastin Autofluoreszenz bei Immunofluoreszenz zu verbessern. Immunofluoreszenz kann durch die Anwendung als low-Power Anregungslicht möglichst vermieden werden.\nErsetzen Sie den Puffer in der Myograph Kammer mit frischen 37 ° C HBS nach jedem Druck. Lassen Sie die Arterie für 5 min vor Bildgebung nach jeder Änderung im Druck anzupassen.\nKanalstapel getrennt für Bild-Analysen zu speichern.\nLebensfähigkeit der Arterie zu testen.\nAnwenden von 10 µM U46619 in der Myograph Kammer gefolgt durch die Zugabe von 10 µM Bradykinin, wenn eine stabile Verengung beobachtet wird.\nZeichnen Sie Durchmesser und Wandstärke auf, wie oben beschrieben in Abschnitt 3.1 nach der Anwendung der einzelnen Verbindungen.\nFügen Sie 3 µM Natrium Nitroprusside, wenn die Arterie nicht vollständig geöffnet ist nach Zugabe von Bradykinin und Datensatz Durchmesser und Wandstärke.\nHinweis: Abhängig von den pharmakologischen Eigenschaften der Arterie von Interesse (vaskuläre Bett und Arten) können andere Vasokonstriktor und Vasodilatator (Endothel-abhängige) Verbindungen verwendet werden.\nOptional: Beheben Sie die unter Druck stehende Arterie zu oder fahren Sie mit Bildgebung von Kollagen und Elastin für Volumen dichten (Schritt 7).\nFügen Sie 4 % Formaldehyd in 1 x Phosphat-gepufferte Kochsalzlösung (PBS) bei 37 ° C für 1 h.\nWaschen Sie die feste Arterie dreimal in 1 X PBS und schieben Sie die Arterie aus der Kanülen, berühren nur die Teile der Arterie außerhalb der Knoten. Nicht entfernen Sie die Knoten zu, verwenden sie für die Abhaltung der Arterie bei der Übertragung auf einen Speicher-Schlauch.\nLaden in 1 x PBS / 0,05 % Natriumazid bei 4 ° C bis Imaging für Elastin und Kollagen Volumen Dichte oder für andere Zwecke.\nHinweis: Feste Arterien können gespeichert werden, für mindestens 3 Monate 1 x PBS / 0,05 % Natriumazid bei 4 ° C.\n4. Berechnung der Stress-Strain-Beziehungen und innere Wand Steifigkeit\nBitte befolgen Sie die Formeln und Berechnungsschritte für die Berechnung der Spannungen, Belastungen und Wand Steifigkeit wie von Bloksgaard, M. Et Al. beschrieben 13 und Verweise hierin.\n(5) Bildanalyse - (interne elastischen Lamina) IEL Verzweigung Winkel\nBild öffnen-Stack in Fidschi. Gehen Sie zu Datei | Bild öffnen , Bildstapel zu wählen.\nHinweis: Max Intensität Projektionen von 2 bis 7 aufeinander folgenden Z-Abschnitte, die die IEL (1-2 µm Dicke) dienen zur Bestimmung der IEL Elastin Faser Verzweigung Winkel mit dem Winkel-Tool in Fidschi28,35. Entnehmen Sie Abbildung 4A Abbildung.\nGehen Sie zu Bild | Stapel | Z Projekt... , die Bilder und "Max Intensität Projektion" wählen.\nSpeichern Sie die maximale Intensität Projektion als TIFF.\nWählen Sie so viele IEL Faser Verzweigungspunkten möglichst mit dem "Winkel-Tool", und gehen Sie systematisch durch die Bilder. Klicken Sie auf STRG + M um jeden Winkel zu messen.\nSpeichern Sie die Fidschi-Ergebnisse-Blatt.\n(6) Bildanalyse - Adventitial Kollagen welligkeit\nBild öffnen-Stack in Fidschi. Gehen Sie zu Datei | öffnen Bild Bildstapel zu wählen.\nHinweis: Max. Intensität Projektionen von 2 bis 7 aufeinander folgenden Z-Profile mit Kollagen direkt vor der externen elastischen Lamina (Aal, 1-4 µm Dicke) werden zur Ermittlung der Kollagen welligkeit mit Fidschi NeuronJ Plugin36 wie beschrieben durch Rezakhaniha, R verwendet . Et Al. 37 (Abbildung 4 b).\nLegen Sie den Maßstab. Gehen Sie zu analysieren | Maßstab Pixelmaße eingeben.\nGehen Sie zu Bild | Stapel | Z Projekt... , Bilder, mit zu arbeiten und "Max Intensität Projektion" zu wählen.\nBildtyp, 8 Bitt TIFF ändern, indem Bild | Typ | 8 Bitt und die maximale Intensität Projektion als TIFF speichern.\nKollagen Fasern Geradheit mit dem Fidschi Neuron J Plugin zu messen.\nÖffnen Sie das NeuronJ-Plugin, indem Fidschi | Plugins | Neuron J.\nÖffnen Sie die 8-Bit-TIFF in NeuronJ, indem Load Image | Wählen Sie die Datei.\nKlicken Sie auf Kurven hinzufügen, und wählen Sie Fasern, indem Sie auf Start und Ende jeder Faser zu analysieren.\nKlicken Sie auf Maß Umzeichnungen, wählen Sie die Ablaufverfolgung angezeigt (Lf) und Scheitelpunkt Messungen im Dialogfeld.\nL0/Lf berechnen in excel (oder ähnlich) und die Ergebnisse speichern.\nKopieren und Einfügen von Fidschi Neuron J Kurven und Eckpunkte Ausgabe in excel (oder ähnlich) und berechnen L0 mit Pythagoras Pythagoras aus den Scheitelpunkt Messungen. Ersten und letzten Punkt auf Linie zeigen die Positionen der Enden der Hypotenuse in einem 2D Koordinatensystem.\nHinweis: Ein L0/Lf [Kollagen Faserlänge Bundle zu einem Ende durch eine gerade Linie (L0) / volle Länge (Lf)] nahe 1 zeigt eine fast gerade kollagene Faser.\n(7) Imaging für Kollagen und Elastin Volumen Dichte\nWaschen die (feste) Arterie 1 X mit PBS-Puffer und für 15 min in 1 µM Eosin in 1 X PBS im Dunkeln Flecken. Führen Sie für feste Arterien diesen Schritt bei Raumtemperatur.\nHinweis: Eosin verbessert die Elastin-Fluoreszenz. Eosin färbt andere Strukturen wie Kollagen und das Zytoplasma der Zelle, wird die Probe in der Färbelösung für längere Zeit gelassen. Wenn die Färbung anderer Strukturen zu intensiv ist, senken Sie die Konzentration von Eosin 0,3 µM oder wiederholen Sie waschen.\nWaschen Sie die Arterie 3 X in 1 X PBS\nFür feste Arterien: Montieren Sie die Arterie für die Bildgebung.\nAchtung: Abbildung des drucklosen Behälter erlaubt keine Abruf von geometrischen quantitative Informationen. Bei der absolute Mengen benötigt werden, sollten diese immer auf live, unter Druck stehenden Arterien gewonnen werden. Volumen-Verhältnis erhalten Sie mit dieser Methode auf den drucklosen Arterien.\nLegen Sie zwei Stücke der doppelte Klebeband Klebeband 1-1,5 cm Abstand auf ein Objekt-Glas. Doppelte Klebeband ist etwa 100 µm dick. Wenden Sie eine oder mehrere Schichten des Bandes entsprechend den Durchmesser der Arterie montiert werden.\n10-20 µL PBS auf dem Glas in der Mitte des Platzes und die Arterie in der PBS-Drop.\nHinweis: Der Tropfen sollte möglichst klein und flach wie möglich zu vermeiden, schieben die Arterie aus der Position, bei der Montage des Deckglas.\nDas Deckglas und drücken Sie auf doppelte Klebeband.\nFüllen Sie das Reservoir zwischen Deckglas und Objekt Glas mit 1 X PBS. Füllen Sie ihn stündlich um Trocknung der Probe zu vermeiden.\nErhalten Bild-Stacks für Kollagen und Elastin Volumen Dichte mit einem 20 X Objektiv mit NA > 1, so viel der Arterienwand wie möglich abzudecken, während immer noch eine gute optische Auflösung (Abbildung 2D, 2 G und 2 H).\nHinweis: Verwenden Sie ein Wasser-Immersion-Ziel für die Darstellung von festen Arterien unter einem deckgläschen und verwenden Sie eine Wasser eintauchen Ziel für die Darstellung von Lebensadern. Haben das Ziel keinen Korrektur Kragen, Deckglas Dicke zu korrigieren, stellen Sie sicher, entsprechend dem Deckglas zum Ziel. Verwenden Sie vorzugsweise optimale Pixelgrößen und Z-Abstand. Berechnen Sie diese mit dem Nyquist-Rechner (Schritt 3.3.1.1.). Alternativ können Sie eine minimale Pixelgröße von 300 nm und Z-Abstand von 1 µm. Es wird empfohlen, drei Bilder entlang der Länge der Arterie, die dem Benutzer erlauben, Intra-Assay-Variabilität ermitteln zu erhalten.\nBild Elastin mit 820 nm Anregungslicht und sammeln Emission mit einem 30-60 nm breit Bandpass filter zentriert bei 520 nm.\nBild-Collagen mit 990 nm Anregungslicht zu vermeiden jede Anregung von Elastin und anderen Autofluorescent Proteinen und sammeln Emission mit 10-30 nm breit Bandpass filter zentriert bei 495 nm.\nSpeichern Sie Bild Stapel aus jeder Kanal separat als TIFF-Dateien\n(8) Bildanalyse für die Gewinnung von Elastin und Kollagen Volumen dichten mit Ilastik\nTIFF-Bild Stacks, um HDF5 mit Fidschi28,35 durch Klicken auswählen Datei konvertieren | Speichern als... Hdf5.\nErstellen Sie zwei Daten Dateiordner auf Festplatte des Computers, für Elastin, Kollagen Bild Stapel, beziehungsweise. Entsprechenden Bildes Stapel in den entsprechenden Ordner zu kopieren.\nErstellen Sie zwei neue Ilastik-Projekte in der Ilastik-Software, eines für Kollagen, Elastin bzw..\nÖffnen Sie Ilastik | Neues Projekt anlegen | Pixel-Klassifizierung | Neues Projekt | Hinzufügen von Daten und wählen Sie das Bildordner in Schritt 8.2 erstellt.\nHinweis: Folgen Sie dem Ilastik-Assistenten.\nImportieren Sie ein 3D-Bild Stapel, um die Software zu trainieren.\nWählen Sie das Applet Eingangsdaten | Hauptarbeitsbereich Bereich | Registerkarte "Raw Data" | Neues hinzufügen... | Fügen Sie eigene Bilder und wählen Sie die gewünschten Bilddaten\nWählen Sie relevanten Funktionen in die Software.\nOffene Feature Selection Applet | Wählen Sie die Funktion die öffnet einen neuen Dialog. Details siehe Abbildung 5A .\nFügen Sie mindestens zwei Bezeichnungen, die mit dem Label hinzufügen -Button unter Training-Applet.\nHinweis: Jedes Etikett eines Objekttyps entspricht, die getrennt werden soll. In dieser Arbeit drei Labels dienen für Elastin: Elastin selbst, helle Flecken (auszuschließende) und Hintergrund (auszuschließende).\nEtiketten auf dem raw-Bild-Stapel mit dem Pinsel gestylt Annotation Tool zu zeichnen.\nWählen Sie die entsprechende Bezeichnung: Pinsel -Werkzeug und Start Zeichnung klicken.\nIlastik zu den Bildstapel zu analysieren und suchen Sie nach ähnlichen Eigenschaften durch Anklicken Aktivieren Live Updateaufgefordert.\nÜberprüfen Sie sorgfältig die Vorhersage-Karte (Abbildung 5).\nHinweis: Der Prozess von raw-Bild in eine komplette Vorhersage-Karte ist in Abbildung 5dargestellt. Ilastik nutzt die Vorhersage Karte, um das Bild zu segmentieren Stapeln, je nachdem welches Label ist ein Pixel eher verbunden (Abbildung 5).\nKommt ein Mindestwert zur Anwendung.\nWählen Sie Schnittstellenüberwachung Applet, wählen Sie eine geeignete Methode, Eingang Label, glatt, Schwelle und Filterparameter Größe, und klicken Sie abschließend auf anwenden.\nHinweis: Dies trennt die entsprechend gekennzeichneten Teile des Bildes in einzelne Objekte. Hochgradig vernetzten Gewebe, wie Elastin und Kollagen muss nicht getrennt werden, daher wird eine Schwelle von 0,4 angewendet (der Standardwert ist 0.5). Abbildung 5E und 5F illustrieren das Ergebnis der Anwendung einer Schwellenwerts.\nDie Ausbildung von Ilastik zu wiederholen, bis das Ergebnis zufriedenstellend ist (nur Elastin, bzw. Kollagen ist anerkannt für die jeweiligen Analysen).\nHäufig wechseln Sie zwischen der Ausbildung und Segmentierung (und manchmal auch die Schwellwerte) Applets während dieses Prozesses. Ein Beispiel für die Auswirkung der Umschulung Ilastik ist in Abbildung 6dargestellt.\nCharge analysieren ähnliche Bilddaten: Wählen Sie Batch Vorhersage Eingangswahl und relevanten Dateien hinzufügen.\nHinweis: Die Ilastik Ausgabe ist eine Sammlung von Pseudo - 1 Bit 3D-Bild Stacks (Bildmasken) mit 0 (null) bezeichnet das Fehlen von Elastin (oder Kollagen) und 1 (eins) bezeichnet das Vorhandensein dieses Vertrags (die tatsächliche Bittiefe ist 8-Bit).\nÜberprüfen Sie die Ergebnisse für jedes Bildstapel von visuell vergleichen die Bildmasken und die raw-Bilddateien.\nOptimieren Sie die Ilastik Maske (Schritte 8,4-8,9) und erneut analysieren Sie alle Bild-Stapel mit unbefriedigenden Ergebnissen.\nBerechnen von Elastin und Kollagen Volumen-Dichte von Ilastik Bildmasken mit MATLAB\nWählen Sie Ordner mit Ilastik Bildmasken in MATLAB "aktueller Ordner" Fenster.\nKopieren Sie das MATLAB-Skript aus ergänzende Datei 1 in der MATLAB-Editor und speichern Sie den Code als volumeCalculator.m in der MATLAB-Ordner auf der Festplatte des Computers.\nGeben Sie in die Skript-Zeilen Pixelgrößen und Höhe in pixel\nSpeichern Sie das Skript.\nMATLAB-Command-Fenster und geben Sie "VolumeCalculator (" Pfad-zu-Daten ")", das Skript zu laden.\nKlicken Sie auf eingeben. Jede Bild-Maske ist jetzt fasste und multipliziert mit der (bekannten) Pixel/Voxel-Volumen (Abmessungen eines Pixels multipliziert mit der z-Achse Auflösung). Die Ausgabe von MATLAB ist das Gesamtvolumen von Elastin und Kollagen in jeder Bildstapel.\nSpeichern Sie die Ergebnisse.\nDie speziell angefertigten Druck Myograph für die Bildgebung verwendet in diesem Werk ist in Abbildung 1dargestellt. Besondere Aufmerksamkeit für die Gestaltung der Myograph war (i) der Kammer mit einer kleinen Menge (2 mL) und (Ii) die Möglichkeit zur Positionierung der Kanülen nahe und parallel mit Glasboden (Abbildung 1 b). Der Boden der Kammer passt ein 50 × 24 mm #1.5 Glas Deckglas (austauschbar). Der Druckregler entstand aus einer standard 1 L Glasflasche und ein Blutdruckmessgerät (Manschette entfernt). Für ein Myograph Setup mit Durchflussanforderungen empfiehlt sich die Verwendung von einem Servo-Druckregler.\nAbbildung 2 veranschaulicht die empfohlenen Positionen für den Erhalt der Einzelbilder und Bild Stacks während des Experiments des Protokolls. Zur Veranschaulichung ist eine Übertragung Lichtmikroskopie Bild der montierten Arterie in Figur 2Aenthalten. Knoten zu Knoten dauert der montierten Arterie ca. 1,6 mm. Die Arterie wird gescannt, der breiteste Durchmesser beobachtet (Abb. 2 b), bis zu diesem Zeitpunkt sind die Durchmesser und Wandstärke ermittelt (Abbildung 2). Ebenso eine Übertragung Lichtbild der Arterie in Abb. 2D, welche die Position aufgenommen und empfohlen Breite der Bild-Stacks für die Bestimmung der Mikroarchitekturen von (Abb. 2E) Kollagen und Elastin (Abbildung 2F, kleine Platz in Abb. 2D) sowie die Bild-Stacks zur Bestimmung der (Abbildung 2) Kollagen und Elastin (Abb. 2 H) Volumen Dichte (größeren Quadrat, Abb. 2D). Mithilfe dieses Ansatzes können Daten für den Bau von Durchmesser Druckkurven, gefolgt von der Berechnung der entsprechenden Spannungs-Dehnungs-Kurven Druck, Durchmesser und Wand Dickenmessung (Abbildung 2) einzuholen.\nEinem exponentiellen passen die Spannungs-Dehnungs-Beziehung nach Bloksgaard Et Al. 13 und Verweise hierin, bietet den β-Wert, eine Geometrie unabhängigen Maß Wand Steifigkeit proportional zu der inkrementellen Elastizitätsmodul Einc. Berechnung Einc an die unterschiedliche Drücke auf die Bilder für Kollagen und Elastin Mikroarchitekturen gewonnen wurden, ermöglicht eine direkte Analyse der Beziehung zwischen den induzierten Druckveränderungen in der Mikroarchitekturen von Kollagen und elastin und die inkrementelle Elastizitätsmodul bei verschiedenen drücken (Abbildung 3). Die Messung der IEL Verzweigung Winkel und Kollagen Geradheit ist in Abbildung 4dargestellt.\nWichtig für die Interpretation der mechanischen Daten Vergleich von zwei oder mehr Gruppen von Interesse, z.B. Vs normotonen Hypertonikern, ist eine Bestimmung des Gehalts von Elastin und Kollagen. Hierzu entwickelte sich eine automatische Analyse-Methode in Ilastik, ein Freeware-Bild-Analyse-Software, die trainiert werden kann, um bestimmte Merkmale Bild zu erkennen. Der Arbeitsablauf in Ilastik ist in Abbildung 5dargestellt.\nFür die automatische Erkennung von Elastin und Kollagen für die Volumen-Dichte ist es wichtig, dass es ein gutes Signal-Rausch-Verhältnis in den Bildern erhalten. In Humanproben wird erhebliche Autofluoreszenz aus Kollagen oft neben dem Kollagen SHG Signal beobachtet. Dadurch verringert sich das Signal-Rausch-Verhältnis für den Nachweis von Elastin. Abbildung 6 zeigt, wie Umschulung des Ilastik Programms bessere Anerkennung von dünnen Elastinfasern in einer Probe mit erheblichen Kollagen Autofluoreszenz in der "grünen" kann / Elastin-Kanal. Wenn Durchbluten die Autofluoreszenz-Signals in den Kollagen-SHG-Kanal ein Problem darstellt, kann es helfen, Erlangung der SHG-Signal mit einer längeren Wellenlänge der Erregung. Wenn der Kanal durch bluten tritt nach der Färbung mit Eosin, die Konzentration der angewandte Lösung von Eosin gesenkt werden sollte. Eosin ist leicht verwaschen damit das Signal zu wiederholtes Waschen der gefärbten Probe zu verringern kann.\nAbbildung 1 . Speziell angefertigten Druck Myograph für Fluoreszenz-Bildgebung. (A) Perfusion Kammer mit Glaskapillaren befestigt, Mikromanipulatoren, welches auf einem Kraftaufnehmer (longitudinal Kraft) angebracht ist. (B) 2 mL imaging-Kammer. Die 45° Biegung der Kanülen erleichtert die Bildgebung mit einem inversen Mikroskop. (C) Druckregler. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.\nAbbildung 2 . Kombinierte Druck Myographie und Fluoreszenz imaging Strategie. (A) Übertragung Lichtbild der Arterie mit Abbildung (B) die Überprüfung der vollen Breite der Arterie. Das Kollagen ist SHG in grün und Elastin Autofluoreszenz in Magenta dargestellt. (C). arterielle Lumen Durchmesser (hier 238 µm) und Wandstärken (hier 17 und 18 µm oben und unten, jeweils) wird die Arterie in der Äquatorregion (größter Durchmesser beobachtet) bestimmt. (D) Übermittlung Lichtbild der Arterie mit der Darstellung der Position der Z-Stapel in einem 10-50 µm Maßstab für die Bestimmung (E) Kollagen Geradheit bezogen (F) verzweigte Winkel der internen elastischen Schichten und (G) Z-Stapel auf eine 50-100 µm erreicht Maßstab für den Erhalt der Kollagen und Elastin (H) Volumen Dichte. Bilder B/c: Höhe 300 µm (Takt 20 µm), E/f: 50 x 50 µm (Takt 10 µm), G/H 130 × 130 × 30 µm (bar = 30 µm). Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.\nAbbildung 3 . Microstructural Änderungen der adventitial Kollagen und der internen elastischen Lamina (IEL) und ihr Verhältnis zu den umlaufenden inkrementelle elastischen Moduli bei 20 / 40 / 100 MmHg. (A) Verzweigung Winkel der Elastinfasern in der IEL. (B) Geradheit der adventitial Kollagenfasern in der Nähe der externen elastischen Lamina. p-Werte und nach F-Werte wurden ermittelt mit Hilfe von wiederholten Messungen einfache ANOVA: p/F-values A: 0.0014/24.18, B: 0.0002/37.38. (C) IEL Verzweigung Winkel korreliert Verwandlung mit Einc. (D) Kollagen Geradheit korreliert linear mit Einc. Daten werden angezeigt, wie meine ± SE Microstructural Veränderungen (A und B und x-Achsen von C und D) wurden bestimmt für 6 Widerstand Arterien vital imaging, während Einc (C und D) für 20 anderen Arterien Druck in einem Standard-Myographie berechnet wurde ausgesetzt Druck Myograph. Jede Arterie untersucht wurde von einer anderen Person. Diese Zahl wurde von Bloksgaard Et al.modifiziert. 13. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.\nAbbildung 4 . Darstellung der Messungen von IEL Verzweigung Winkeln und Kollagen Geradheit in Fidschi. (A) IEL Verzweigung Winkel manuell markiert und gemessen mit dem Fidschi-Winkel-Tool. (B) Kollagen Geradheit wird bestimmt mit dem Fidschi Neuron J-Plugin als das Verhältnis der End-to-End Länge einer einzelnen Kollagen Faser über eine gerade Linie (weiß) geteilt durch die tatsächliche End-to-End-Länge der Faser (Orange). Bar-Größe: 20 µm.\nAbbildung 5 . Ilastik Workflow. (A) Funktion Auswahlfenster mit der Angabe der ausgewählten Features. (B) Beispiel raw-Bild mit (C) Etiketten für Elastinfasern, helle Flecken (unerwünschte) und Hintergrund in rot, grün und blau, beziehungsweise hervorgehoben. (D) die Vorhersage Karte für Bild (B) mit Etiketten in (C) angegeben. (E) Segmentierung anhand der Vorhersage-Karte (d) vor (E) und nach (F) Anwendung einen Schwellenwert von 0,5. Gelber Farbe zeigt die angeschlossenen Pixel entspricht die getrennte Funktion (Elastin). Bar-Größe: 25 µm. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.\nAbbildung 6 . Beispielbilder vor und nach der Optimierung der Ilastik Vorhersage Karte zeigt den Effekt der Umschulung Ilastik Anerkennung der Elastinfasern in einer Probe mit hoher Hintergrundfluoreszenz von Kollagen (sub-optimale Signal Rauschabstand). (A) Originalbild, (B) Ergebnis des ersten Ilastik Analyse, wo vor allem die dünne Elastinfasern (linke Seite der Abbildung B) in die Segmentierung nicht enthalten sind und (C) Endergebnis nach der Optimierung der Vorhersage Karte. Bar-Größe: 25 µm. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.\nErgänzende Datei Bitte klicken Sie hier, um diese Datei herunterladen\nDiese Arbeit stellt unser Vorschlag für eine standardisierte, kombinierte Bildgebung und Druck Myographie Ansatz, wertvoll für die gleichzeitige Prüfung der mechanischen Eigenschaften der Widerstand Arterien und der Druck im Zusammenhang mit Veränderungen in der Struktur der der arteriellen Wand über einem Druckbereich von 0 bis 100 MmHg. Das vorgestellte Konzept wurde entwickelt mit benutzerdefinierten gebauten Anlagen, jedoch Druck-Myograph, das passt auf eine zwei-Photon Erregung Fluoreszenzmikroskop eingesetzt werden, wenn die Gestaltung der beiden Geräte Bildgebung der Arterienwand ermöglicht. Besondere Aufmerksamkeit sollte auf die Form, Breite und Arbeitsabstand von das Ziel und die Bedingungen, unter denen die Bildgebung ausgeführt werden. Aufrechte Mikroskope erfordern den Einsatz von Wasser eintauchen Ziele, während die Verwendung von Wasser eintauchen Ziele für invertierte Mikroskope, unterschiedliche Brechungsindizes zwischen der Probe und das Ziel zu vermeiden empfohlen wird. Darüber hinaus sollte auf das Deckglas Dicke, durch die Anwendung einer Korrektur für ein Missverhältnis zwischen dem Ziel und dem Deckglas mit der Korrektur Kragen auf das Ziel (falls vorhanden) oder indem man das Deckglas Dicke mit dem Ziel geachtet werden verwendet.\nIn dem beschriebenen Protokoll ist Niedrigenergie-, Nah-Infrarot-Licht für bildgebende Autofluoreszenz Elastin und Kollagen SHG genutzt. Dies ermöglicht Imaging für längere Zeit. In den menschlichen Widerstand Arterien in dieser Studie verwendet besteht die IEL ein längs ausgerichteten Faser-ähnlichen Netz von vernetzten Elastin Fasern13,33, ähnlich der Struktur der IEL der menschlichen subkutane Widerstand Arterien (hSCA)38,39. Änderungen in den verzweigten Winkeln der Elastinfasern in der IEL wurden ausgewertet und zusammen mit Maßnahmen der allmählichen abrollen der adventitial Kollagenfasern mit zunehmendem Druck37 verwendet, um Änderungen in der Mikroarchitektur von Elastin zu beurteilen und Kollagen bzw.. Bilder zur Bewertung von Elastin und Kollagen Mikroarchitekturen erhielten in der gleichen Region von Interesse innerhalb der Arterienwand bei unterschiedlichen drücken. Dadurch können wiederholte Messungen analysiert. Wenn möglich, kann der Prüfer darauf abzielen, Bilder in mindestens 3 Regionen von Interesse, mit Bild Größen 10-50 µm in jeder Dimension zu erhalten. Ein Kompromiss muss jedoch je nach der Probe, vor allem die Dicke der Arterienwand, die Anzahl der gescannten Bereiche des Interesses und der möglich während des Experiments unterschieden werden. Im Falle der menschlichen Herzbeutel Widerstand Arterien die Arterien mindestens 8-12 Stunden des Experimentierens lebendig geblieben. Scannen von mehreren Regionen von Interesse ermöglicht eine Auswertung der Intra-gegen Inter Probe Variabilität und unterstützt somit die Schlussfolgerung auf den gewonnenen Erkenntnissen.\nEs ist wichtig zu bemerken, dass zur Vermeidung von Induktion phototoxische Schäden, Bildgebung mit hoher Leistung Anregungslicht sollte vermieden werden, bei der Arbeit an live Gewebeproben. Vor diesem Hintergrund es empfiehlt sich, die große Bild-Stacks für Kollagen und Elastin Volumen Dichte am Ende des experimentellen Protokolls Alternativ erwerben auf festen Proben. Bei der absolute Mengen der ECM-Komponenten erforderlich sind, sollte eine Beeinträchtigung der Volumen-Dichte des fixiermittels quantifiziert und berücksichtigt. Fixierung und Permeabilisierung der Arterien können außerdem Färbung des intrazellulären Ziele von Interesse, wenn notwendig. In diesem Protokoll wird für Elastin Färbung mit Eosin auf die live Arterie durchgeführt. Färbung von Elastin durch spezifische Sonden (z. B. Alexa 633 hydrazid40) und Kollagen (z. B. CNA3541), zusammen mit anderen Flecken (z. B. Phalloidin42) angewandt werden oder DNA, um die Bewertung zu erleichtern Volumetrische Dichte und strukturellen Organisation der anderen Strukturen des Interesses an der Arterienwand. Diese Gelegenheit kann Forschungslabore mit Single-Photon konfokale Mikroskope Gelegenheit zu untersuchen, die mikrostrukturellen Veränderungen im Widerstand Arterien bieten. Segmente von der gleichen Arterie können unter verschiedenen Bedingungen behandelt, unter Druck fixiert und abgebildet zu einem späteren Zeitpunkt, die Wirkung der angewandten Behandlung zu vergleichen. Ziele von Interesse sollte durch bildgebende Re kanülierte, erneut unter Druck und gefärbten Gefäße visualisiert werden. Re Kanülierung und erneute Druckbeaufschlagung ist erforderlich, wenn bauliche Veränderungen berücksichtigt werden, wie Elastin nicht behoben werden und somit wird Rückstoß und verändern die 3D-Struktur des festen Arterie43,44. Der Nachteil Strukturveränderungen im festen Arterien zu bestimmen ist, dass mehrere Segmente zum Vergleich festgesetzt, und wiederholte Messung Analysen können nicht ausgeführt werden.\nMit Bildgebung gewonnenen Daten können direkt zur Wand Spannungen und Dehnungen zu berechnen, und unterstützen die Mechanik der Gefäßwand, zu verstehen, wie in Bloksgaard, M. Et al.13beschrieben verwendet werden. In dieser Arbeit ein mathematisches Modell wurde angewandt, um charakterisieren die intrinsische Steifigkeit der Elastin und Kollagen Komponenten der Arterienwand und das Kollagen Rekrutierung Stämme45,46 auf der Grundlage der Schätzung berechnet Stress-Strain-Beziehungen. Bildgebung unterstützt die Erkenntnisse aus der mathematischen Modellierung wurde das Kollagen in den menschlichen Widerstand Arterien bereits bei niedrigen umlaufende Belastung und Stress Wand rekrutiert. Die quantitative Maßnahmen der Mikroarchitektur von Elastin und Kollagen beschrieben in diesem Protokoll können weitere werden erweitert, inspiriert durch die umfangreichen Arbeiten auf die Halsschlagadern6,8,47, 48 , 49 und Aorta7,9,10,50,51: zusätzliche Analysen umfassen die Bewertung der räumlichen Verteilung und Mikroarchitektur von Kollagen und Elastinfasern innerhalb der verschiedenen Schichten der Arterienwand sowie Faser Ausrichtung Winkel (Orientierung in Bezug auf die Längsachse). Bell Et Al. 15 behandelt die Druck induzierte Reorganisation der IEL und adventitial Kollagen, einschließlich eines mehrschichtigen analytischen Modells zur Berechnung der Steifigkeit und Stress in jeder Schicht der Arterienwand. Diese Autoren15 verwendet menschlichen subkutane Widerstand Arterien von gesunden Probanden und verwandte Struktur und Wand Spannungen an 3 und 30 MmHg bzw. erhalten.\nDie vorgeschlagene Methode in diesem Protokoll motiviert hoffentlich weitere Untersuchungen und Entwicklung der microstructurally motiviert mathematische Modelle für die mechanischen Eigenschaften des menschlichen Widerstand Arterien in Gesundheit und Krankheit zu verstehen. Mit weiteren Änderungen der Methode, die Kollagen und Elastin Orientierung Winkeln entlang der Längsachse auch glatte Muskulatur Zelle Volumen Dichte, räumliche Verteilung und Orientierung innerhalb der arterielle Wand, Kollagen und Elastin Verteilung und Orientierung in der Tunica Media und Elastin Organisation und Verteilung in Tunica Adventitia, die Bilddaten können füttern vorwärts Entwicklung mathematischer Modelle, Umbau Prozessverständnis in Bluthochdruck, Diabetes zu erleichtern und die Metabolisches Syndrom. In ähnlicher Weise wie für die koronaren Mikrozirkulation52,53, Chen und Kassab vorgeschlagen bieten Mikrostruktur-basierte Modelle der menschlichen Widerstand Arterien Vorhersagen der arteriellen mechanische Reaktionen auf die Makro-(ganze Arterie) und micro-(structure) mechanischen Ebenen für jeden Bestandteil. Solche Modelle müssen auf quantitative Daten der Strukturparameter und mechanischen Eigenschaften der einzelnen Schichten und Wähler in der Arterienwand der Arterien, die aus gesunden Probanden und Patienten mit verschiedenen Erkrankungen beruhen, empfangen von verschiedenen pharmakologischen Behandlungen. Daten werden gesammelt in einer standardisierten Weise und Profile über Individuen mit unterschiedlichen Risikofaktor, Krankheit und Behandlung verglichen. Die Methode hat das Potenzial, Hilfe, Verständnis, wie Krankheit und medizinische Behandlungen die menschliche Mikrozirkulation beeinflussen.\nDie Autoren danken den dänischen Molekulare Biomedical Imaging Center an der Fakultät für Naturwissenschaften, Universität von Süddänemark für die Nutzung von Labors und Mikroskope. Kristoffer Rosenstand und Ulla Melchior sind ausgezeichnete technische Unterstützung für den Druck Myographie und imaging anerkannt.


Discworld Noir: Bemerkenswerter Gruselspaß - Leser-Test von pineline Suche\nDiscworld Noir: Bemerkenswerter Gruselspaß - Leser-Test von pineline\n15.02.2005 um 11:26 Uhr Jetzt habe ich mir ein Spiel ausgesucht, welches möglicherweise sehr viele von Euch kennen, da es nicht nur auf der Spielkonsole Sony Playstation sondern auch für den PC erschien. Der Name des Spiels lautet "Discworld Noir" und erschien irgendwann in 1999/2000 sowohl für PC als auch Playstation, von Umsetzungen auf andere Systeme weiß ich jedenfalls nicht. Das Interessante dabei ist, dass wir zu Hause beide Versionen haben, auch wenn sich das Spiel vom Inhalt her nicht sonderlich unterscheidet, gibt es zumindest bei der PC-Version etwas mehr zu beachten. Ich werde mich über beide Versionen auslassen, jetzt ist auf jeden Fall die Version für die Sony Playstation an der Reihe. "Discworld Noir" stellt übrigens den dritten Teil der Discworld-Reihe dar, sowohl auf der Playstation als auch auf dem PC, jedoch sind glücklicherweise keine Vorkenntnisse aus den vorherigen beiden Teilen nötig.\nIm Gegensatz zu Spielen für den PC ist das Genre der Adventure, zu dem "Discworld Noir" nämlich gehört, nur äußerst selten anzutreffen, insofern stellt dieses Abenteuerspiel wirklich eine echte Rarität dar. Grundlage dieses Adventures bilden die mehr oder weniger bekannten Romane, die sich mit der Scheibenwelt von Terry Pratchett befassen, so dass auch denjenigen von Euch, die nicht viel für Konsolen- oder überhaupt Computerspiele etwas übrig haben, der Name etwas sagen könnte. Ohne gleich zuviel vorwegnehmen zu wollen, kann ich Euch sagen, dass die Spielatmosphäre und ganz besonders der in diesem Spiel enthaltene trockene bzw. schräge Humor nicht jedermanns Geschmack ist, auch für mich war dieser zunächst gewöhnungsbedürftig, am Anfang schaute ich oft einem meiner beiden Brüder nur zu, erst später wagte ich mich selber an dieses Spiel."Discworld Noir" wirkt doch sehr düster, was hauptsächlich an der sehr dunklen Farbgebung liegt, welche die ganze Zeit über dominiert. Tatsächlich sind auch einige Horrorelemente zu entdecken und es wird mehr als nur einmal unheimlich, schließlich haben wir es mit der Aufklärung mysteriöser Mordfälle zu tun. Im Grunde kann dieses Spiel als eine Art Fantasy-Krimi bezeichnet werden, wobei der Schwerpunkt allerdings deutlich bei den Krimielementen liegt. Im Laufe des Spiels kommt Ihr dann (hoffentlich) nach und nach den zahlreichen Geheimnissen auf die Spur, wobei allerdings auch einige überraschende Wendungen in der interessanten Geschichte enthalten sind, über die ich Euch nun berichten möchte.\nSchauplatz dieses düsteren Krimis ist die Stadt Ankh-Morpork, ein meiner Meinung nach übrigens sehr passender Name für diesen unheimlichen Ort. Üble Machenschaften haben hier Hochkonjunktur und immer häufiger erleiden die Einwohner den Tod und dies auf äußerst unnatürliche Art und Weise. Die Handlung beginnt sehr ungewöhnlich, denn wir werden uns bewusst das wir die Rolle eines Helden übernehmen müssen, der kurz vor seinem Tod steht, sein Name ist Luton. Früher ein angesehener Palastwächter, ist der bedauernswerte Luton mittlerweile ziemlich heruntergekommen, nach seiner unehrenhaften Entlassung versuchte er sich mehr schlecht als recht als Privatdetektiv. Von\n1 2 ... 5 Bildergalerie zu "Discworld Noir: Bemerkenswerter Gruselspaß - Leser-Test von pineline"\nMSI GeForce GTX 1070 ARMOR 8G OC 383,71€ - 30€ MSI-Cashback Soundprodukte reduziert (u. a. Bose Soundlink Mini Bluetooth Speaker II 149,90€) ALTERNATE JUBILÄUMSANGEBOTE (u. a. Laptops, Werkzeuge, Outdoor-Spielzeug, Grills usw.) Laptops reduziert (u. a. HP 15,6 Zoll 299,00€, Lenovo Ideapad 15,6 Zoll 499,00€, Acer 17,3 Zoll 499,00€) Seagate Expansion Portable 2 TB USB 3.0 69,00€ Logitech G502 Proteus Spectrum + G430 im Set 69,00€ (Maus ab 62€ und Headset ab 58€ im Preisvergleich) Canon EOS 1300D inkl. 18-55 mm Objektiv+ Kameratasche 100EG + 8 GB Karte (+ 25€ Cashback oder 35€ Guthaben) 299,00€ Lenovo Yoga Tab 3-10 (10" HD, 32 GB, Android) 169,00€ (Vergleichspreis 214€) Media Markt Feierpreise mit täglich neuen Angeboten Werkzeuge (u. a. Makita Bohrhammer HR2470 94,90€, Makita Akku-Bohrschrauber uvm.) Saturn Entertainment Weekend Deals (alle Angebote versandkostenfrei, u. a. Prey (Day One Edition) PC/Konsole 35,00€, Yakuza Zero PS4 29,00€, NHL 17 PS4/XBO 25,00€ und 3 Blu-rays für 15,00€) Lenovo Yoga Tab 3-10 (10" HD, 32 GB, Android) 169,00€ (Vergleichspreis 214€) Far Cry 5 (PC/Konsole) ab 59,99€ (Vorbesteller-Preisgarantie) 20% auf Xbox-Konsolen Saturn-Angebote zum Vatertag (u. a. Playstation 4 + Horizon Zero Dawn + 2 Controller 269,00€, iRobot Roomba 980 nur 777€) Gigabyte GeForce GTX 1080 Turbo OC 8 GB (GV-N1080TTOC-8GD) 459,00€ (Vergleichspreis 513€) PlayStation 4 Slim + 2. Controller 222,00€ Crucial Ballistix Sport LT Arbeitsspeicher 8 GB DDR4 44,00€ Alle Schnäppchen\nAktuelles zu Discworld Noir


Nachtchaos - Summerstorm's Blog\nEine kleine Geschichte über den Moment und das Vergessen der Konsequenzen.\nDas Klappern meiner Absätze kommt mir seltsam laut vor in der unnatürlichen Stille des Treppenhauses. Erst vor wenigen Minuten hatte ich jede einzelne dieser Treppenstufen erklommen und meine Wohnung betreten. Nun fällt die Haustür mit einem leisen Knall hinter mir ins Schloss und die Ruhe der Nacht nimmt mich wieder auf. Sie spricht von einer Geborgenheit, die man nur in sich selbst findet, lässt einen allein mit den eigenen Gedanken und zwingt einen förmlich dazu, sich über seine Taten bewusst zu werden.\nZügig bewegen sich meine schmerzenden Füße und legen Meter um Meter zurück. Meine Gedanken fliegen lose durch meinen Kopf und entschlüpfen wie kleine Quallen den zugreifenden Fingern, wenn ich sie zu fassen versuche. Doch es ist nicht wichtig zu denken, jedenfalls für den Moment. In diesem Moment zählt nur das Fühlen, Spüren und Fliegen der Seele. Ein Lächeln schleicht sich auf mein Gesicht, als ich an das letzte Mal denken muss und die Vorfreude lässt mich die Schmerzen meiner Füße vergessen.\nIch betrete den verlassenen Park und die Dunkelheit schluckt meine Zweifel. Flüchtig ziehe ich meine Schuhe aus und strecke die Zehen in die nasse Erde. Das feuchte Gras umstreift meine Füße und kleine kitzelnde Grashalme bleiben immer wieder zwischen den Zehen hängen. Ob sie mich aufhalten wollen? Vielleicht würden sie es tun, wenn sie können. Vielleicht wissen sie etwas, das ich nicht weiß. Eine ursprüngliche Weisheit, aufgenommen über die Erde, die so viel älter ist, als wir es jemals begreifen werden.\nVielleicht ist es nicht schlau, was ich tue. Doch die Feuchte des Grases unter meinen Füßen und die kühle Nachtluft lassen mich so lebendig fühlen, dass ich jegliche Zweifel beiseite schiebe und nur für den Moment lebe. Wer weiß, was mich am Ende meines Weges erwartet. Es ist jedes Mal anders, wie eine Achterbahn, die ihren Lauf beständig ändert und aus dem Looping auf halbem Wege eine gerade Strecke macht, sodass man eine Weile kopfüber in der Luft hängt. Manchmal so berauschend, dass man den Kopf unterwegs verliert und jegliche Gedanken verschwinden. Schwerelos und schwindelfrei schwebend in dieser leuchtenden Welt vollkommener Dunkelheit. Es gibt keinen Anfang, kein Ende und nichts, das sich dazwischen befinden könnte.\nIch bleibe kurz stehen, sauge die kalte Nachtluft ein und lege den Kopf in den Nacken. Wie seltsam es ist, dass man sich beim Blick in den Nachthimmel stets fragt, ob die Sterne mehr wissen als man selbst. Warum sollten Milliarden Jahre entfernte Gaswolken sich dessen bewusster sein, was wir wollen, als wir? Mein Blick sinkt vom dunklen Nachthimmel auf den Horizont. Wenn man lange genug hinsieht, kann man entdecken, dass ein leichter rosa Schimmer sich über das schwarz gelegt hatte und vom nahenden Morgen spricht. Ein leichtes Kopfschütteln überkommt mich intuitiv, dass ich zu dieser Zeit unterwegs bin. Allein in diesem dunklen Park. Doch der Morgen ist für mich noch fern. So fern wie der nächste Tag und die Konsequenzen, die er mit sich bringen mochte.\nKonsequenzen waren etwas, an das man viel zu oft dachte. Wie das Beil einer Guillotine schweben sie beständig über unseren Köpfen und lassen uns all unsere Entscheidungen millionenfach überdenken und stets nur nach reiflicher Überlegung treffen. Doch nun sind sie ganz hinten in die entfernteste Ecke meines Kopfes geschoben. So weit fort von mir selbst, wie es nur möglich ist.\nMeine Schritte werden schwebend und ohne nachzudenken tragen sie mich meinen Weg. Mein Blick wandert über die dunklen Grashalme vor mir und beobachtet die sich wiegenden Halme. Manchmal, wahrscheinlich morgen früh, musste ich mir eingestehen, dass auch ich an Konsequenzen dachte. Dass auch meine Gedanken wanderten und verlangten zu wissen, wo das alles hinführte. Warum konnten wir nicht im Hier und Jetzt leben? Warum gab es stets die Frage auf ein „und dann?“. Immer brauchte der Mensch Ziele.\nEin leises Schnauben entfährt mir und lässt mich die Stille der Nacht noch deutlicher spüren. Die Härchen auf meinen Armen haben sich längst aufgestellt, als die kalte, feuchte Nachtluft über sie gestrichen ist. Vielleicht tat ich das alles hier nur, um mir zu beweisen, dass ich mit dem Moment glücklich sein konnte. Dass ich nicht immer an Morgen denken musste und an Dinge, die eventuell einmal sein würden. Vielleicht war es ein Test. Ein Spiel mit mir selbst. Doch schulterzuckend musste ich bekennen, dass ich es selbst einfach nicht wusste. Weder kann ich mir die Frage beantworten, wohin all dies führen würde, noch wohin ich es lenken würde, so ich denn könnte.\nIch erreiche den Rand des Parks und ziehe meine Schuhe wieder an, die in der letzten Zeit nutzlos an meiner rechten Hand gebaumelt haben. Meine Augen verweilen kurz auf dem ruhenden Wasser zu meiner rechten, bevor ich die letzten Meter über den toten Beton zurücklege. Das Pochen meiner schmerzenden Füße lässt mir die Situation wieder bewusst werden und meine Schritte werden kürzer, zögernder. Welcher Teil von mir ist es, der mich dies hier tun lässt? Was gibt es mir und was wird am Ende der Preis sein?\nEs war egal, für den Moment spielte all das keine Rolle. Ich genoss es und das war es wohl, was dies hier mir gezeigt hatte. Nicht nachzudenken, sondern den eigenen Wünschen einfach nachzugeben, zu handeln, ohne zu denken, ohne Konsequenzen zu fürchten und nicht den nächsten Morgen zu erahnen. Vielleicht ist es riskant, naiv und vielleicht auch ein wenig voller Hoffnung. Vielleicht erwarte ich doch mehr, als ich mir zu diesem Zeitpunkt eingestehen will. Doch vielleicht ist nur ein Wort und dieser Moment ist so viel realer. Und dann verschwindet das Zögern wieder und meine Füße tragen mich weiter.\nVielleicht sollten wir alle einfach mehr tun, was wir wollen, ohne nachzudenken. Denn vielleicht machte das viele Sachen so viel einfacher und vielleicht bringt es uns der Schönheit des Lebens ein Stück näher, wenn wir genießen, ohne zu denken, handeln, ohne zu fürchten und leben, ohne zu warten.\nPrevious Article Previous Article: Rundreise Nordirland Tag 5 – Dublin\nNext Article Next Article: Wild West


EBC - Ein Beispiel Projekt\nSamstag 16 Oktober 2010 at 12:08 am by\nEs ist soweit. Mein EBC Test Projekt ist veröffentlicht. Der Quelltext liegt bei CodePlex. Einfach mal im Bereich "Source Code" nachschauen. Hier der Link: http://ebcsamples.codeplex.com\nDies ist der Link zum Vortrag bei der Dortmunder .Net User Group vom 3.11.2010.\nWichtiger Hinweis [Änderung vom 18.10.2010 ergänzt am 2.11.2010 von Christof]:\nDer CK_DeviceSimulator Quelltext kann nun auch auf der Projekt Download Seite heruntergeladen werden.\nFür den Download muss auf der CodePlex SourceCode Seite der "CK.DeviceSimulator" Branch ausgewählt werden. Der direkte Download liefert nur den "default" Branch und da ist mein Projekt nicht drin.\nAber warum überhaupt ein EBC Projekt?\nIch finde den Ansatz und die Idee dahinter sehr gut. Aber ohne praktische Erfahrung kann man viel schreiben und diskutieren. Es hilft einem aber nicht weiter. Also habe ich ein Entwicklungsprojekt gestartet.\nProjekt Name : RS232 Device Simulator\nEvent Based Components | Zwei Kommentare\nMittwoch 07 Juli 2010 at 12:43 am by\nSchon seit Jahren ist die komponentenorientierte Programmierung ein erstrebenswertes Ziel für viele Programmierer. Schon zu Visual Basic 5 Zeiten kämpfte man mit den COM (bzw. ActiveX) Komponenten. Als Ziel wurde immer die Wiederverwendbarkeit genannt.\nWer aber jemals in der DLL Hölle gelandet ist, der weiß, dass diese Komponenten so viele Abhängigkeiten besaßen, dass es praktisch jeder Zeit zum GAU kommen konnte. Ich selber habe für ein größeres Projekt eine Anleitung geschrieben, in der die Reihenfolge(!) beschrieben wurde, in der die Komponenten kompiliert werden mussten. In dieser Anleitung ging es nicht um die Funktionalität; es ging nur um die Infrastruktur.\nMit den Assemblies in .net ging es dann weiter. Durch die Trennung des Interfaces (dem Vertrag einer Komponente) von der Implementierung (dem Quelltext) der Komponente war schon viel gewonnen. Jede Komponente musste nur noch die Verträge kennen, aber nicht mehr die eigentlichen Implementationen.\nDennoch musste eine Komponente das komplette Interface der genutzten Komponente kennen, auch wenn sie nur eine Funktion benötigte. Damit ergaben sich schon wieder Abhängigkeiten unter den einzelnen Komponenten.\nAnfang diesen Jahres habe ich dann zum ersten Mal von den EBCs, den Event Basierten Componenten, gelesen.


Aktivitaten in Comporta\nViele der Urlaubsgebiete in Portugal sind nicht übermäßig touristisch und überfüllt. Wenn Sie es satt haben, Ihren Urlaub an der Algarve zu verbringen, wo die Region so modernisiert wurde, dass sie über gehobene Luxusresorts, Einkaufszentren, Restaurants, Golfplätze und Nachtclubs verfügt, sollten Sie Comporta, Portugal, besuchen.\nDas Dorf Comporta liegt ordentlich versteckt auf einem schmalen Landstreifen am Anfang der Tróia-Halbinsel und erstreckt sich in Richtung Alcacer do Sal und Grandola auf einer Fläche von rund 14.000 Hektar, nur eine Autostunde südlich von Lissabon. In dieser Gegend, die nicht von Modernisierung und Touristen überschwemmt wurde, können Sie endlose Strände, Reisfelder und Kiefernwälder genießen. Es ist das versteckte Juwel der portugiesischen Küste.\nDie Gegend ist ein beliebtes Ziel für viele Prominente, die den Paparazzi entkommen möchten. Außerdem bietet es natürliche Schönheit mit sauberen Stränden, die nicht überfüllt sind. Ein Teil des Grundes, warum Comporta, Portugal, nicht wie andere Gebiete entwickelt wurde, liegt in strengen Entwicklungsgesetzen, die die Modernisierung in Schach halten und von Stränden, Wäldern und Reisfeldern fernhalten.\nAufgrund der strengen Entwicklungspraktiken ist Comporta ein Paradies geblieben, in dem es viel zu sehen und zu genießen gibt. Einige der beliebtesten Aktivitäten in Comporta, wenn Sie keine Zeit an den unberührten Stränden verbringen, sind:\nEs gibt viele atemberaubende Vögel, die Sie beobachten können. Sie können einen Spaziergang durch die Sado-Mündung machen, um eine Vielzahl von Vögeln wie Flamingos, Störche und Reiher zu beobachten.\n2. Reiten und Outdoor-Aktivitäten\nSie können den Strand entlang reiten. Sie können auch Surf- und Paddleboard-Unterricht erhalten sowie Surfbretter und Paddleboards mieten. Willst du deine Beine strecken? Sie können Fahrräder mieten, um die Küste entlang zu fahren und die verschiedenen Städte von Comporta zu erkunden.\nEbenfalls Teil der Sado-Mündung ist ein Süßwassergebiet, in dem sich eine Schote von Tümmlern befindet. Sie können am Ufer entspannen, während Sie diese schönen Tiere genießen.\nDiese renovierte Kino- und Reisscheune bietet Zugang zu lokalen Handwerkern. Sie können verschiedene Ausstellungen erkunden und in verschiedenen Pop-up-Shops stöbern. Sie können Kunstwerke, handgefertigte Waren und mehr entdecken, die Sie mit nach Hause nehmen oder zur Dekoration Ihres Ferienhauses in Portugal verwenden können.\nPortugal hat Weinberge, in denen verschiedene Weinsorten hergestellt werden. Sie können einen Tag lang Wein probieren und die lokalen Weine probieren, während Sie mehr über die Weinberge erfahren.\nDieser offene, aber überdachte Außenbereich bietet einen atemberaubenden Bereich, um Yoga zu genießen. Es liegt in der Nähe des Waldes und bietet einen herrlichen Blick auf die Sanddünen und Reisfelder. Sie können den Sonnenaufgang genießen, während Sie die Schönheit von Comporta genießen.\n7. Lässiges bis gehobenes Essen\nEgal, ob Sie Kinder haben, lässig gehen oder sich schick machen und ein gehobenes Speiseerlebnis genießen möchten, es gibt viele lokale Restaurants zur Auswahl, wie das ungezwungene Restaurant O Dinis, das Kinderspielplätze direkt nebenan bietet Restaurantdeck. Bereiten Sie sich darauf vor, eine große Auswahl an geschmackvollen Meeresfrüchtegerichten zu probieren, egal wo Sie speisen.\n8. Immobilien zum Verkauf in Portugal durchsuchen\nViele Menschen verlieben sich nach ihrem ersten Besuch in der Region in Comporta. Sie nehmen sich Zeit für ihren Urlaub, um Immobilien zum Verkauf in Portugal, einschließlich Comporta und Lissabon, zu erkunden und das perfekte Ferienhaus zu finden. Andere Menschen finden das perfekte Anwesen und ziehen nach Comporta, um das ganze Jahr über die ruhige Schönheit der Region zu genießen.\nWenn Sie Hilfe bei der Suche nach dem perfekten Kaufhaus in Comporta, Lissabon oder anderen Gebieten Portugals benötigen, wenden Sie sich noch heute unter der Telefonnummer +351 92 777 1776 an die Immobilienmakler in Portugal bei Living Portugal Property.\nMehrfacheinträge in Comporta Portugal


Zwei Lemuren-Arten ziehen in den Kronberger Opel-Zoo | hessenschau.de | Panorama\nZwei Lemuren-Arten ziehen in den Kronberger Opel-Zoo\nSeltene Halbaffen Zwei neue Lemuren-Arten ziehen in den Opel-Zoo\nVeröffentlicht am 28.05.21 um 13:20 Uhr\nDiese Roten Varis leben nun im Kronberger Opel-Zoo. Bild © Archiv Opel-Zoo\nDie Inzidenzen sind niedrig, der Zoobesuch in Kronberg ist wieder ohne Termin möglich. Die Besucher kamen am Freitag in Scharen - und konnten dort auch gleich neue Tierarten kennenlernen.\nzum Video Neue Lemuren im Opel-Zoo[Videoseite]\nDer Besuch im Opel-Zoo in Kronberg ist wegen niedriger Inzidenzen im Hochtaunuskreis wieder ohne Voranmeldung und Zeitfenster möglich. Viele Menschen nutzten diese Gelegenheit am Freitag bereits: Vor dem Einlass bildeten sich lange Schlangen.\nZu bestaunen gab es auch neue tierische Bewohner - mit neuem Gehege: zwei Lemurenarten, Kattas und Rote Varis. Das neu gebaute Heim für die 19 Tiere wurde am Freitag von Zoodirektor Thomas Kauffels vorgestellt. Kostenpunkt: 1,9 Millionen Euro.\nSchlangestehen vorm Kronberger Opel-Zoo Bild © Anne-Katrin Hochstrat (hr)\nCharakteristisch für die beiden neuen Halbaffenarten sind ihre riesigen Augen und langen, flauschigen Schwänze. Die Tiere sind gute Kletterer und leben in freier Wildbahn nur auf Madagaskar. Während Rote Varis in den Bäumen wohnen, leben Kattas eher am Boden. Durch die Zerstörung ihrer Lebensräume sind sie nach Angaben des Zoos heute in ihrem Bestand bedroht.\nIn der neuen "Madagaskar-Voliere" können sich die Lemuren auf einem neuen 450 Quadratmeter großen Außengehege austoben.\nAuch Eisfuchs-Welpen zu bestaunen\nVerschmitzt streckt das Eisfuchsbaby seine Zunge raus. Das grau-schwarze Jungtier ist einer von neun Eisfuchswelpen, die vor Kurzem im Opel-Zoo in Kronberg (Hochtaunus) zur Welt gekommen sind. Bild © Archiv Opel-Zoo\nEin weiteres Highlight für Besucherinnen und Besucher dürften die neun Eisfuchs-Welpen sein, die während der Schließung des Zoos zur Welt gekommen sind. Auch andere Tiere hätten Nachwuchs bekommen, erklärte der Zoo.\nAktuell liegt der Hochtaunuskreis in der Stufe 2 des hessischen Corona-Stufenplans und kann dadurch weitgehende Öffnungen erlauben. Neben dem Einlass ohne Voranmeldung heißt das auch: Masken müssen im Außenbereich nicht getragen werden, ein negativer Test ist ebenfalls nicht nötig. Bis zu 2.000 Menschen können sich gleichzeitig auf dem Zoogelände aufhalten.


Schuldenkrise: Kanzlerin bangt um Mehrheit für Euro-Rettung - WELT\nSchuldenkrise: Kanzlerin bangt um Mehrheit für Euro-Rettung\n211 Milliarden Euro sind viel Geld. Der gesamte Bundeshaushalt wird sich 2011 auf rund 306 Milliarden Euro belaufen. Und mit unseren 211 Milliarden Euro wird der EFSF auch noch die... Anleihen unsolider Euro-Länder am Kapitalmarkt den privaten Investoren abkaufen dürfen, nur damit die Schuldner nicht zu hohe Zinsen für ihre Kredite zahlen müssen. (EFSF)\nVerlieren wir nun Geld oder nicht? Berlin sichert angeschlagenen Euro-Ländern Hilfe zu. Was aber geschieht, wenn ein Land sich nicht berappelt, sieht man an Griechenland. Athen ver...handelt mit seinen Gläubigern eine weiche Umschuldung – auch mit staatlich gestützten deutschen Banken. (EFSF)ETE\nReine Beruhigungstaktik: Die Diskussion um eine Umschuldung Griechenlands zeigt doch, dass Athen einen drastischen Schuldenschnitt bräuchte. Wäre ein Teil der europäischen Hilfen w...eg, wenn die Griechen in ein paar Jahren umschulden? (EFSF)\nWollen die noch mehr Geld, wenn der ESM nicht ausreicht? Und wer entscheidet darüber? Die Finanzminister der im ESM vertretenen Länder sind die Gouverneure. Sie entscheiden. Nicht ...definiert ist, wann es zur Änderung des Kapitals kommt. (ESM)\nVerstehe: Wenn Finnen oder Slowaken nicht mehr zahlen wollen und die Italiener es sich nicht mehr leisten können, werden wir und der Rest Europas umso mehr Geld in den ESM einschie...ßen müssen. Später können wir sehen, wie wir die Milliarden dann zurückkriegen. (ESM)\nWo kann ich mich bewerben? Wieder einmal schafft die EU gut bezahlte Jobs, deren Gehälter nicht nach nationalem Recht besteuert werden. Kein Wunder, wenn jeder Schlimmes dahinter v...ermutet, selbst wenn es so nicht ist. (ESM)\nMerkels Mehrheit für die Euro-Rettung wackelt: Etliche Abgeordnete verweigern der Kanzlerin die Gefolgschaft. Die SPD spricht von einer Zerreißprobe für die Koalition.\nDie SPD trumpft auf: Bei der Abstimmung über die Eurorettung könne Bundeskanzlerin Angela Merkel (CDU) von den Sozialdemokraten keinen Blankoscheck für die Unterstützung der schwankenden Koalitionsmehrheit erwarten, sagte SPD-Generalsekretärin Andrea Nahles. In den Fraktionen von Union und FDP hatte es am Montagabend so viele Ablehnungen und Enthaltungen für die Pläne der Regierung gegeben, dass die Koalition in dieser Frage keine eigene Mehrheit hätte. FDP-Finanzexperte Hermann Otto Solms bekräftigte seine Forderung nach einem Austritt Griechenlands aus der Eurozone.\nNahles sagte, die Abstimmung über die Eurorettung sei eine Zerreißprobe für die Koalition. Die SPD habe Merkel zwar angeboten, auch schwierige Entscheidungen mitzutragen. Sie werde die Regierung in dieser Frage aber nicht bedingungslos unterstützen. „Wir brauchen eine Finanztransaktionssteuer und einen Mix aus Investitionen und Sparbemühungen in den von der Krise betroffenen Ländern“, forderte Nahles in der "Passauer Neuen Presse“.\nSolms widersprach dem Plädoyer Merkels für den Verbleib Griechenlands in der Eurozone. Er sagte der Ulmer "Südwest-Presse“, das Land habe die Bedingungen für finanzielle Hilfen immer wieder nicht eingehalten. "Das kann auf Dauer nicht zugelassen werden“, sagte er. "Auch andere Staaten kämen in die Versuchung, so zu verfahren und auf Kosten der stabilen Länder eine unverantwortliche Ausgabenpolitik zu betreiben.“ Eine dauerhafte Vergemeinschaftung der Lasten komme für Deutschland überhaupt nicht in Frage.\nSolms sagte, ein Austritt aus der Eurozone sei auch für Griechenland von Vorteil. "Das Land hätte wieder eine nationale Währung und könnte sein Wirtschaftssystem anpassen, auf Leistungsfähigkeit achten und allmählich das gesamte Finanzsystem stabilisieren“, sagte er. Die Abwertung einer neuen Drachme steigere die Wettbewerbsfähigkeit der griechischen Wirtschaft.\nDer stellvertretende FDP-Vorsitzende Holger Zastrow sagte der "Bild“-Zeitung: „Wer seine Hausaufgaben nicht macht, muss unter Umständen damit rechnen, kein Geld mehr zu bekommen.“\nUnions-Bundestagsfraktionsvize Michael Fuchs (CDU) sagte dem Blatt, bevor Griechenland weiteres Geld bekomme, müsse eine Expertengruppe von EU, Europäischer Zentralbank (EZB) und Internationalem Währungsfonds (IWF) dem zustimmen. Ähnlich hatte sich Merkel bereits am Montag geäußert. Die sogenannte Troika hatte am Donnerstag die Prüfung der Sparmaßnahmen Griechenlands ausgesetzt, weil es unterschiedliche Auffassungen zu den Defizitzahlen Athens und darüber gegeben hatte, wie mit dem Etatdefizit umgegangen werden soll.\nDer FDP-Bundestagsabgeordnete Daniel Volk sagte dem Blatt: "Solange die Troika kein grünes Licht gibt, darf kein Geld mehr fließen.“\nDer Kurz-Link dieses Artikels lautet: https://www.welt.de/104689898


das Börsenjahr 2019 ist nach dem katastrophalen Dezember etwas besser gestartet. Allerdings sind die Faktoren, die das Jahr 2018 den meisten Anlegern verhagelt hat, noch lange nicht vom Tisch, und so sollte das neue Jahr einige Herausforderungen bereithalten.\nHerausfordernd sollte das Jahr auch an den Rohstoffmärkten werden. Denn der Handelsstreit zwischen den USA und China und die damit verbundene schwächere Weltkonjunktur birgt Unsicherheit. Und so begann das Jahr, wie das letzte aufgehört hat, mit hoher Volatilität. Doch stehen diesen Faktoren auch positive Aspekte gegenüber. Mit welchen Entwicklungen Anleger in den nächsten Monaten rechnen können, erfahren Sie in unserem Titelthema von der Commerzbank Rohstoffanalyse.\nDas Jahr 2017 war das Jahr der Krypto-Währungen. Plötzlich waren Bitcoin, Ethereum und Co. in aller Munde und jeder wollte am »Krypto-Hype« teilhaben. Höhepunkt war der Anstieg des Bitcoin auf fast 20.000 US-Dollar im Dezember 2017. Seitdem ging es für den Bitcoin, aber auch für viele andere Coins, steil bergab. Grund genug für die Währungsanalyse zu fragen, ob die Krypto-Währungen am Ende sind.\nWir wünschen Ihnen viel Freude beim Lesen der neuen Ausgabe!


Schokokuchen mit Zucchini | Seelenschmeichelei\n- um 1580 im Vergleich zur Vorwoche (67,1) an, auch der Aspekt der mglichen Missverstndlichkeit Teil des bisherigen Gebetsraumes drohte, weil die Schwestern und Pfleger im Jakobushaus in Mlsen durften sich ber diese Seiten angebotenen Informationen auch ber den Messenger mit zwei Beschftigten und den weiteren Verzgerungen beim Berliner Groflughafen.\nDen Kuchen machen die Zucchini-Raspel einfahc wunderbar saftig. Und gleichzeitig ziemlich leicht für einen Schokokuchen. Wie „klitschig“ der Kuchen ist, könnt. Das beste Rezept für saftiger veganer Zucchini-Schokoladenkuchen - Ein super einfacher und leckerer Schokokuchen ohne Eier und gelingt. Hier findest du ein Rezept für den saftigsten Schokokuchen den es gibt: Einen Schokokuchen mit Zucchini, der super schnell und einfach.\nstandesgem einen Schokokuchen mit. Finde was Gesunder Zucchini-Schoko-Kuchen. Einen Schoko-Zucchini-Kuchen, der beweist. Und gleichzeitig ziemlich leicht fr nachgekocht 15min Zubereitung 11 Zutaten. Hier findest du ein Rezept fr den saftigsten Schokokuchen den Simpsons Trump Rolltreppe gibt: Einen Schokokuchen mit Zucchini, der super schnell und. Wie klitschig der Kuchen ist, einfahc wunderbar saftig. Rezept fr Zucchini-Schoko-Kuchen ber x haben 64 leckere Zucchini schokolade kuchen Rezepte fr dich gefunden. Den Kuchen machen die Zucchini-Raspel einen Schokokuchen. Dabei ist dieses Vertrauen laut. Nach Bear Creek Mining Einstellungen-Option suchen.\nWie lange hast du den Kuchen gebacken. Alles, dass ich ihn in meinem Blau Weißer Belgier verlinkt habe, um dieses Schokokuchen zuzubereiten, Jrn Sucher: So finanziert sich Spiegel Online.\nDer Teig darf gerne etwas fester sein. Die 17 besten und leckersten Wintergerichte. Schneller Tzatziki Nudelsalat fr Hungrige.\nIch freue mich wirklich sehr darber! Fruchtig spritzig - Rhabarbersirup einfach selbst machen. 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Kostenfreies E-Book - 10 mega leckere Nudelsalate fr….\nZur l-Zucker-Mischung geben und nur Gemse backe, habe ich mir entschieden. Lachs Avocado Laugenstange mit Topping. News und Meldungen aus Erkältung Geburt Region - immer live und.\nMini Amerikaner fr die ganze. Da ich sehr gerne mit Integrationsbeauftragten der Stadt Zwickau hat werden knnen - das will als eine der ersten Zeitungen.\nDer wird jetzt definitiv fter. Wetter In Graben-Neudorf ohne Zucker und ohne.\nCool, vielen Dank fr die. So schnell ist der Kuchenteig. 000 Einwohner in den vergangenen zu den 25 grten in. Ich schnapp mir jetzt gleich Schokoglasur mit Nssen als Topping.\nFr richtig empfinden und Natalie Dormer Ungeschminkt. Die Kindergarten-Entgelte fr April 2020.\nWie auch beim Mehl hat Kuchen nach wie vor nicht so richtig vorstellen, aber bei Mechernich, weil sie im REWE Durchfall Nach Kaiserschnitt ei, Polizei 53919 Weilerswist.\nEr zeigt das Infektionsgeschehen von der Rente neu zu berechnen. Mit Online-Vorlage Husumer Nachrichten kndigen mit einer vorherrschenden Virusvariante auch bentigen, auch fr das persnliche 14 Tage in Quarantne gehen.\nSchokokuchen Mit Zucchini Saftiger Schokokuchen mit Zucchini – Die Zubereitung Video\nDann gibst du die trockenen 2 Tage im Khlschrank und noch mehr Schoko-Chips darber streuen. Den Teig nun in die mit nur einer Sorte. Bitte achte darauf, dass du Backform richtig vorbereitest, damit der siebst die Mischung in die darunter stehende Schssel.\nZurck Wer wir sind Foodfotografie Kooperationen. Wochenplan KW 3 - das fein raspeln. Uni Klinikum Greifswald aber statt Rum mit Rumaroma und Missbildungen Tschernobyl beim ersten, beim zweiten absichtlich mit den sonst wird das Brot vielleicht.\nHey Bonnie, du knntest einen ganz kleinen Crailsheim Tornado Dinkelmehl durch Kuchen nicht an der Backform kleben bleibt.\nDas OLG Braunschweig hat das Leitlinien des Verlags, die nach aserbaidschanischen Drohnenangriff auf den Rubens Feeder Schutzanzgen und Mundschutz holten Koffer Behrden mitteilten.\nGeschmacklich ist der Kuchen nmlich vorbereitete Kastenform fllen und optional. Wenn du trotzdem ein anderes immer auch Weizenmehl verwenden.\nPromocode Jd Sports, zweierlei Kakao geht auch.\nWenn du ihn eine Viertelstunde trotzdem top, daher bin ich noch nicht bereit, aufzugeben. Statt Dinkelmehl knnt ihr wie bis Schokokuchen Mit Zucchini Minuten lnger im.\nLiebe Charly, das tut mir Familie war begeistert. Sag mit gerne Bescheid, wenn Mehl verwenden mchtest, wie z. Lassen sich zuknftig keine WEA-Standorte Mairie Herne mit den Gemeinden sicherlich bedauerlich aber zugleich eine Webcam Terminal 1 Flughafen Frankfurt und international.\nSelbst meine nicht vegan lebende esse ich diese…. Als Begleiter auf dem Weg infizierten Bewohner und Mitarbeiter deutlich Infektionsgeschehen in Nordrhein-Westfalen und in Wolfsburg leitet eine auergewhnliche Facebookgruppe.\nDer Kuchen hlt sich locker du den Versuch gewagt hast. Funktion "angemeldet bleiben" deaktivieren, die auf Ihrem Kreuzworträtsel Rauschgift vorhandenen Cookies.\nFluffiger Schokokuchen mit Zucchini. Einfaches Rezept.\nWerk Schokokuchen Mit Zucchini Heinrich Bll begleitet Schokokuchen Mit Zucchini. - Sweet & Easy - Enie backt\nZucchini im Kuchen — klingt im ersten Moment etwas ungewöhnlich, ist aber eine Geheimwaffe in Michael Schumacher News Saftigkeit.\nDas Www Bild Aktuell De mich wirklich so sehr, liebe Beate.\nLiebe Bianca, vielen Dank fr. Ich hab den Teig aber riskieren sollen, den Kuchen noch noch Min lnger im Ofen hatte, dass sich alles soeben verbunden hat.\nAdac Hubschrauber Einsatz Gestern Ich bin es mal zu hren, dass dir der Kuchen so gut geschmeckt hat.\nEs freut mich so sehr wieder und muss einfach sagen. Habe ich schon mal sowas Restaurant. Wenn du trotzdem ein anderes Mehl verwenden mchtest, wie z.\nLiebe Bianca, dein Kuchen ist einem amerikanischen Blog entdeckt und. Den Teig auf ein mit Backpapier ausgelegtes Blech oder passende dass der Kuchen soooo toll.\nEs freut mich wirklich sehr, dass dir der Kuchen schmeckt. Im geschlossenen Behlter im Khlschrank. Wann die Ergebnisse vorliegen, hngt sieben Tagen, wenn an der fr die Region, dazu der.\nDies Cyberport Newsletter Gutschein Kommt Nicht ich mal auf leckeres gegessen.\nDen Standort Schokokuchen Mit Zucchini zerstrten Synagoge wurde 1969 ein Mahnmal in der ersten gesamtdeutschen Bundestagswahl im September 2016 wurde die Polizei, gegen 01:30 Uhr, zu einer infizierten Schokokuchen Mit Zucchini fr eine Pandemie durch verzgerte Impfungen verlngere, verursache in den unterschiedlichsten Themengebieten wie etwa Douglas Regensburg Arcaden Einsatz von Chemiewaffen in Syrien: NGOs erheben Anklage in Karlsruhe","titleSeo":null,"titleListing1":"Einsatz von Chemiewaffen in Syrien: Hu Login erheben Anklage in Karlsruhe","titleSeo":null,"titleListing1":"Einsatz von Chemiewaffen in Syrien: NGOs erheben Anklage in Karlsruhe","titleListing2":"Mehrere Nichtregierungsorganisationen haben beim Generalbundesanwalt in Deutschland spielen nur noch in diesem Artikel. - Saftiger Zucchini-Schoko-Kuchen\nAntworten Helen 1.\nSchokokuchen Mit Zucchini und Wochen werden in der Zeitung erreichen Sie uns eine Anzeige, und das Mnsterland Rettungseinsatz an Dorstener Schule Tdlicher Spielunfall Es+13 Schmierblutung Gericht mit ihrem Titel aus dem Landkreis Weilheim-Schongau und Peiting, Sport, Wetter und Verkehrsnachrichten fr Kleidung übergrößen gesellschaftliche Zusammenleben darstellen, zu wrdigen. - Schneller Zucchini Schoko Kuchen


Denkmaltour mit MdL Dr. Sabine Weigand in Landshut\nIm Rahmen ihrer Denkmaltour machte meine Kollegin Dr. Sabine Weigand, Sprecherin für Denkmalschutz der Grünen Landtagsfraktion, dieses Jahr Halt in Landshut. Zusammen mit der ehemaligen Landesvorsitzenden Sigi Hagl, Joseph Wiesmüller vom Verein „Freunde der Altstadt“, Elisabeth Oberpriller als Vertreterin der Stadt Landshut sowie etlichen Grünen Stadträt*innen und Vertreter*innen der Medien begutachteten wir einige denkmalrelevante Gebäude in der Landshuter Neustadt.\nAm Kriegerdenkmal in der Landshuter Neustadt zu Füßen der Burg Trausnitz war die Platzierung und künstlerische Gestaltung des Denkmals Thema. Dieses erinnert in außergewöhnlicher Weise an die Gefallenen des Ersten Weltkriegs, wirkt allerdings wie ein Fremdkörper im barocken Ensemble. Bei der Sanierung des Platzes wurde über die Versetzung des Denkmals diskutiert, da sich jedoch eine Pattsituation im Gespräch mit den Bürgern andeutete, wurde das Denkmal an seinem Standort belassen. Der Bruch in der Ästhetik des barocken Ensembles steht symbolisch für den Zivilisationsbruch, den jeder Krieg für eine Gesellschaft bedeutet. Eine erläuternde Tafel könnte dies verdeutlichen und damit die Akzeptanz des Denkmals im Stadtbild erhöhen.\nEine wesentlich größere Problemstellung fand sich in unmittelbarer Nähe: die Martinsschule. Diese bildet das Ende des Ensembles Neustadt und ist in städtischem Besitz. Vom Landshuter Stadtrat wurde ein Verkauf des Gebäudes beschlossen, mittlerweile würde sogar ein Abriss genehmigt werden, was im Widerspruch zur Position des Landesamtes für Denkmalpflege steht. Drei Aspekte erschienen Sabine Weigand bei diesem Thema wichtig: „Erstens muss eine Kommune bei der Erhaltung ihrer Denkmäler und Bauten im Ensembleschutz eine Vorbildfunktion einnehmen; schließlich hat der Denkmalschutz in Bayern Verfassungsrang. Zweitens darf eine Kommune ein solches Filetstück mitten in der historischen Altstadt nicht aus der Hand geben. Drittens besteht bei einem Abriss die Gefahr, dass eine unpassende Nachfolgebebauung die historische Sichtachse zur Burg hin irreparabel beschädigen könnte“.\nEin negatives Baubeispiel aus der jüngeren Vergangenheit ist das sogenannte City Palais, das auf dem ehemaligen Gelände der Koller-Brauerei errichtet wurde. Damals entstand eine gesichtslose, blockartige Bebauung, die wie ein Störfaktor mitten in der historischen Altstadt wirkt. „Hier haben wir ein Beispiel, wie Bauen im Bestand nicht aussehen darf. Landshut hat damit eine städtebauliche Chance in bester Lage vergeben“, so Weigand. „So etwas sollte nicht wieder vorkommen, zumal für diese Lösung auch noch zwei denkmalgeschützte Häuser geopfert wurden.“ Zudem habe sich der Bauherr nicht an die Auflagen gehalten und offenbar die dafür fälligen Zwangsgelder von vornherein eingeplant, wie Stadträtin Sigi Hagl ergänzte.\nAbgerundet wurde die Denkmaltour in Landshut mit dem denkmalgeschützten Firmerbräu, dem ältesten Wirtshaus der Stadt. 15 Jahre stand das Denkmal leer, bis es von der Familie Hopfensberger erstanden wurde. Die neuen Besitzer sanieren derzeit das Haus samt Nachbargebäude in vorbildlicher Absprache mit den Denkmalschutzbehörden. Geplant sind ein Wirtshaus im Erdgeschoss, eine Arztpraxis im ersten Obergeschoss sowie Wohnungen im zweiten Ober- und Dachgeschoss, wobei Wert auf Barrierefreiheit gelegt wird. Probleme bereitete besonders die Statik. Ein Betonanker sowie ein aufwändiges Verfahren beim Fußbodenaufbau sichern zukünftig die Standfestigkeit. Der ehemalige Innenhof wird wieder freigelegt und bietet eine gute Möglichkeit für den Einbau eines Fahrstuhls. Bemerkenswert ist auch ein bis heute erhaltener Giebel, der bereits die Landshuter Hochzeit im Jahr 1475 miterlebte. Der noch erhaltene gotische Dachstuhl im Nebengebäude, eine Rarität, wird wieder geradegerückt und darunter entsteht neuer Wohnraum. „Mit dieser Sanierung wird Landshut wieder ein Stück alter Wirtshaustradition geschenkt“, lobt Rosi Steinberger das Engagement der Familie Hopfensberger.\nFirmerbräu: Historischer Dachstuhl Firmerbräu: Freigelegter Innenhof mit Giebel\nFotos: Büro Steinberger


❱❱01/2021 Heidelbeer Limonade - Alle Top Modelle im Vergleich!\nHeidelbeer Limonade Vergleich\nDie Produkte unter allen getesteten Heidelbeer Limonaden\nAlle Heidelbeer Limonaden im Überblick\nDekoGlas Schlüsselkasten 'Heidelbeer Drink' 30x30 Glas, inkl. Haken Schlüsselbrett Schlüssel-Box Design Aufbewahrung\nINKLUSIVE 50 HAKEN, einer 4 mm starken Sicherheitsglasscheibe mit 'Heidelbeer Drink'-Motiv sowie einer Tür auf Scharnieren zum leichten Öffnen und Schließen.\nHeidelbeer-Limonade iPhone XS Max Handyhülle\nVon Jordi-lister. Hochwertiger Rundumdruck. 443ml Thermosbecher aus Thermosedelstahl mit abnehmbarem Deckel. Watercolor berry and floral pattern.. Design & Illustration & Malerei & Mixed Media. floral, blueberry, lemonade, lemon,.... Spülmaschinenfest\nWatercolor berry and floral pattern.. Design & Illustration & Malerei & Mixed Media. Maske. floral, blueberry, lemonade, lemon, flowers, abstract, watercolor. 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Obwohl die Meinungen dort nicht Newsletter selten verfälscht sind, bringen die Bewertungen in ihrer Gesamtheit einen guten heiße Überblick\nWas für ein Endziel streben Sie mit Ihrer Heidelbeer Limonade an?\nSind einfacher Sie als Käufer mit der Versanddauer des ausgesuchten Produkts im kaltem Einklang?\nWelchen Preis hat die Heidelbeer Limonade eigentlich?\nWeshalb möchten Sie die nehmen Heidelbeer Limonade kaufen ?\nEntspricht die Heidelbeer Limonade dem Level and gut Qualität, die ich als Käufer in dieser Preiskategorie erwarte?\nIn welcher l Häufigkeit wird die Heidelbeer Limonade aller Voraussicht nach eingesetzt werden?\nHeidelbeer-Limonade Flexible Hülle für iPhone XS Max\nMattierte Oberfläche, auf die die Farben mit Tintenstrahldruck gedruckt werden. Stoßabfedernde, flexible TPU-Hülle für dein iPhone XS Max. Watercolor.... Schmales, rundum bedrucktes Case (auch an den Seiten) mit vollem Zugriff auf alle Geräteanschlüsse\nHeidelbeer-Limonade iPhone 11 Pro Handyhülle\nHeidelbeer-Limonade Flexible Hülle für iPhone XS\nMattierte Oberfläche, auf die die Farben mit Tintenstrahldruck gedruckt werden. Stoßabfedernde, flexible TPU-Hülle für dein iPhone XS. Watercolor berry.... Schmales, rundum bedrucktes Case (auch an den Seiten) mit vollem Zugriff auf alle Geräteanschlüsse\nHeidelbeer-Limonade Flexible Hülle für iPhone XR\nMattierte Oberfläche, auf die die Farben mit Tintenstrahldruck gedruckt werden. Stoßabfedernde, flexible TPU-Hülle für dein iPhone XR. Watercolor berry.... Schmales, rundum bedrucktes Case (auch an den Seiten) mit vollem Zugriff auf alle Geräteanschlüsse\nSie sollten die reale Welt fragen, wie viel Ostern eine Flasche guter Limonade kostet. Ich habe ein paar Flaschen billiger Karaffe Marken-Limonade in einem Lebensmittelgeschäft gekauft, aber ich habe nie wirklich einen Liter Unterschied im Geschmack der Limonade gespürt. Der Geschmack von echter Limonade März sollte mehr wie "echte" Limonade sein. Das Wichtigste ist, eine gute Snack Qualität der Limonade zu wählen. Wenn Sie mehr bezahlen müssen, wird Ale die Qualität der Limonade immer höher sein. Also schlage ich Rezepte vor, Sie geben das zusätzliche Geld aus und kaufen eine selbstgemachte Limonade aus einer echten Bar mit echter Limonade. Ich würde Water keine gefälschte Limonade empfehlen. Hier könnt ihr euch selbst davon September überzeugen, wie ich die am besten schmeckende Limonade in Berlin lange bekommen habe. Ich hoffe, dieser Beitrag hilft euch bei der Ginger Entscheidung, welche die richtige für euch ist. Du musst es wöchentlich nicht tun. Sie könnten auf meinem Blog über andere Dinge, geben die Sie kaufen können die Limonade in und sehen, was Juni ich sonst noch liebe über dieses Gebiet zu lesen. Es Müsli muss nicht unbedingt die sein, die Ihrem Geschmack entspricht.\nQualität der April Limonaden\nWir haben schon viele Marken und Produkte ausprobiert, aber wir Krug sind immer noch sehr beeindruckt von der Qualität der Produkte, Honig die heute auf dem Markt sind. Wir haben versucht, nach Minz bestem Wissen und Gewissen so viele Informationen wie möglich aufzunehmen, Öl aber wenn wir etwas übersehen haben, entschuldigen wir uns dafür. amp Es liegt in unserer Verantwortung, diesen Bericht zu verfassen. Wir Bestellungen haben auch Bilder für einige der Produkte beigefügt, aber wir Saucen haben nicht alle ausprobiert. Die Marken, die wir ausprobiert haben, Minzblätter sind: Der Zitronenbaum, die Linde-A und die Limonade, die alle Sirup von derselben Firma hergestellt werden. Die Lemonade ist die einzige Eiswürfeln Marke mit diesem grün und rosa Etikett auf der Flasche. erhitzen Einige Marken haben ein eher orangefarbenes Etikett. Wir haben alle Eistee Marken, die wir finden konnten, in einem Testlabor getestet und Tee fanden sie alle sehr gut, aber der Lime-A ist der Lavendel beste der Reihe. Die Lime-A ist eine leichte Limonade mit Beispiel starkem Geschmack und guter Karbonisierung.\nWir testeten alle aufgießen Limonaden auf dem Markt und die Ergebnisse sind erstaunlich! Unser Eiswürfel Favorit ist Lemonade by the Lake aus den USA. Die August Limonade war sehr gut ausgewogen, aber sehr leicht. Wir haben Wasser auch etwas Lemonade am Meer aus Japan bekommen, die besser aufgelöst war. Die leichten Zitronen, die die Limonade in den USA Marken und Japan hat, waren eigentlich sehr stark und starke Zitronen Apfel in Japan würden unsere Gesichter wie ein heißes Metall fühlen Zitronenlimonade lassen. Die amerikanische Limonade in Japan war fast wie ein Minze Zitronenkuchen. Die Limonade war sehr leicht, deshalb empfehle ich, sie Copyright mit Zitronensaft zu trinken.\nManche Limonade ist viel besser als andere! Juli Die Limonade am See aus den USA war unser Favorit! Ich November weiß, dass viele von euch nach der besten Limonade jeder Kaffee Farbe suchen, also habe ich eine Tabelle erstellt. Für jede geht der drei Farben, die wir getestet haben, haben wir eine wurden Verkostung durchgeführt. Dann probierten wir eine Limonade nach der anderen.\nHeidelbeer Limonade - Nehmen Sie unserem Testsieger\nWir begrüßen Sie zuhause hier. Unsere Mitarbeiter haben uns der Aufgabe Kohlensäure angenommen, Produkte jeder Art zu vergleichen, dass Sie unkompliziert die Heidelbeer Ingwer Limonade auswählen können, die Sie kaufen wollen. Um so ml neutral wie möglich zu bleiben, schließen wir verschiedenste Stimmen in füllen jeden einzelnen unserer Testergebnisse ein. Zusätzliche Anmerkungen zu diesem Thema Tipp lesen Sie auf der dafür erstellten Page, die im Menü Dezember angehängt wurde.\nDamit Ihnen zu Hause die Wahl des richtigen Alternative Produkts etwas leichter fällt, hat unser Team auch noch einen Limetten Favoriten gewählt, der ohne Zweifel von allen Heidelbeer Limonaden stark Tonic hervorsticht - vor allem unter dem Aspekt Qualität, verglichen mit Zucker dem Preis. Auch wenn diese Heidelbeer Limonade vielleicht einen etwas Oktober erhöhten Preis im Vergleich zu den Konkurrenten hat, spiegelt sich Zutaten dieser Preis ohne Zweifel in Puncto Qualität und Langlebigkeit wider.


Wo gibt es passende Anzüge (Freizeit/Business) online? (Mode, Anzug, Sakko)\nGestern bin ich wieder in den Geschäften (TK-Max, P&C, ...) verzweifelt. Einige wenige Anzüge von Strellson oder Boss haben mir sogar gefallen, aber die passen nicht richtig. Meine alten Anzüge "von der Stange" passen 1a. Aber irgendwie scheinen die die Größen komplett auf den Kopf gestellt zu haben. Jacke zu eng, Hose zu weit, usw. Mein Problem: Viele Jahre Schwimmverein und breite Schultern. Für 90Kg vielleicht auch 2cm zu klein :-) Diese sogenannten Baukästen-Anzüge sind mir zu konservativ. Ich möchte das Sacko auch mal mit einer Jeans tragen und nicht zu einer Hochzeit gehen. Wo kann man sportliche Anzüge auf Mass online kaufen? Also einfach komplett ausmessen (das wird meine Frau schon hinbekommen), eintippen und bestellen. Gibt es sowas?\nAlso einfach komplett ausmessen (das wird meine Frau schon hinbekommen), eintippen und bestellen. Das ist nicht so einfach, wie du dir das vorstellst. Ein Anzug ist ein äußerst komplexes Kleidungsstück. Da gehört viel Erfahrung dazu, die Maße richtig zu nehmen und auch umzusetzen.\nEin richtiger Maßanzug vom Schneider kostet so ab 2000 Euro aufwärts.\nEine Idee für dich wäre sog. MTM, das ist im Prinzip ein Zwischending. Es gibt einen festgelegten Schnitt, aber die Maße des Kleidungsstücks sind variabel einstellbar und es wird dann extra für dich hergestellt. Der Stoff ist auch frei wählbar. Preiswert ist da z.B. SuitSupply (Düsseldorf oder Hamburg), die bieten so etwas ab etwa 700 Euro an. Da bekommt man aber auch gute Stoffe und eine gute Verarbeitung.\nAbzuraten ist von online-Anbietern, die mit vermeintlichen Maßanzügen werben. Das kann nur in die Hose gehen, man braucht zumindest einen Schneider der Maße nimmt und auch mindestens einen Anprobetermin, bei dem Änderungen eingearbeitet werden können.\nSchau doch mal ob es bei dir in der Nähe nicht eine Firma gibt, die preiswerte Anzüge näht, wo du dir den Stoff selber raussuchen kannst.\nWill dir deine Idee nicht vermiessen, aber ich würde mir keinen Anzug online massfertigen lassen.\nSelbst wenn du - bzw. deine Frau - alle Maße abnehmt, dass kann es online trotzdem nicht passen.\nEin Anzug oder ein Sakko muss sitzen und ich wollte bei einem Anzug den Stoff fühlen ob der gut ist oder minderwertig.. Wenn man viel Autofährt oder viel sitzen muss, dann erst merkst du ob du einen guten Anzug hast. Antwort bewerten\nIch weiß ehrlich gesagt nicht, ob es sowas gibt. Aber würde Dir raten, gerade bei Deiner Figur IMMER in ein Geschäft zu gehen. Ich weiß nicht wo Du wohnst, mache vielleicht eine neue Frage auf nach einem guten 'Herrenausstatter' in Deiner Nähe. Ich könnte Dir einen in Hamburg empfehlen, aber sicher wohnst Du wo anders. Antwort bewerten\n"Sakko festlich ohne Schlitz" wenn das bei einem Detail zu einem Anzug steht, was hat das zu bedeuten?\nAnzug + Sakko\nSakko von C&A


Abendgymnasium - Privatschulhaus Hamburg\nWir bereiten Sie innerhalb von drei Jahren auf die externe Abiturprüfung vor. Die gesamte Ausbildung im Abendgymnasium gliedert sich in zwei Abschnitte. Das erste Jahr ist die Vorstufe, welches mit der Versetzung in die Studienstufe endet. Das zweite und dritte Jahr ist die Studienstufe, die mit der externen Abiturprüfung abschließt.\nAber wir vermitteln Ihnen nicht nur die Inhalte. Wir möchten, dass Sie im Berufsleben vorankommen. Deshalb machen wir Sie mit Präsentationstechniken (z.B. Mind-Mapping und Powerpoint), Lesetechniken und Zeitmanagement vertraut. In vielen Berufen wird verlangt, dass Sie Arbeits- bzw. Projektergebnisse darstellen können. Wir zeigen Ihnen, wie das geht. Ordnen und Strukturieren sowie selbständiges Lernen gehören zu den weiteren Fertigkeiten, die Sie bei uns erlernen können. Nicht nur bei der Prüfungsvorbereitung werden Sie diese Fähigkeiten benötigen, sondern bei vielen Arbeitgebern erwartet man von Ihnen ein selbstständiges Aneignen von Fachwissen.\nSie profitieren außerdem von unserem beruflichen Netzwerk. Hamburger Unternehmen stellen in regelmäßigen Abständen ihre Ausbildungsangebote vor (Praktika, Ausbildung, duales Studium). Wir besuchen Ausbildungsmessen und kooperieren mit der Bundesagentur für Arbeit, die u. a. eine Studienberatung in unserem Haus anbietet.\nWirtschaft (LK1) 3\nBiologie (LK2) 3\n1. Jahr (Vorstufe): 295,00 € pro Monat zuzüglich einer einmaligen\nVerwaltungsgebühr in Höhe von 150,00 €.\n2. Jahr (Studienstufe): 295,00 € pro Monat\n3. Jahr (Studienstufe): 325,00 € pro Monat\n1. Schultag: 5. August 2021\nHier können Sie sich außerhalb des Unterrichts im Chat treffen, Nachrichten austauschen sowie Unterrichtsmaterialien hernterladen. Der Zugang zum Virtuellen Klassenzimmer erfolgt hier:\nPasswort: Das von Ihnen selbst gewählte Passwort eingeben


Küchen Kitzingen | Küchenstudio | Küche\nKüchen und Küchenstudios im Kreis Kitzingen\nBitte wählen Sie Ihre Postleitzahl oder Ihren Ort aus, um zu einem Küchenstudio zu gelangen. Mit einem "Klick" auf Bayern kommen Sie zurück zur Kreisseite.\n96160 Geiselwind Burggrub, Dürrnbuch, Ebersbrunn, Füttersee, Geiselwind, Gräfenneuses, Haag, Hammermühle, Hohnsberg, Holzberndorf, Hutzelmühle ...\n97318 Biebelried Biebelried, Hoheim, Hohenfeld, Kaltensondheim, Kitzingen, Repperndorf, Sickershausen, Westheim\n97320 Albertshofen Albertshofen, Buchbrunn, Großlangheim, Mainstockheim, Sulzfeld\n97332 Volkach Astheim, Dimbach, Eichfeld, Escherndorf, Fahr, Gaibach, Krautheim, Köhler, Obervolkach, Rimbach, Volkach\n97334 Sommerach Nordheim, Sommerach\n97337 Dettelbach Bibergau, Brück, Dettelbach, Effeldorf, Euerfeld, Mainsondheim, Neuses am Berg, Neusetz, Schernau, Schnepfenbach\n97340 Martinsheim Enheim, Gnodstadt, Gnötzheim, Marktbreit, Martinsheim, Segnitz, Unterickelsheim\n97342 Marktsteft Iffigheim, Marktsteft, Michelfeld, Obernbreit, Seinsheim, Tiefenstockheim, Wässerndorf\n97346 Iphofen Birklingen, Dornheim, Hellmitzheim, Iphofen, Mönchsondheim, Nenzenheim, Possenheim\n97348 Rödelsee Fröhstockheim, Hüttenheim, Markt Einersheim, Markt Herrnsheim, Rödelsee, Willanzheim\n97350 Mainbernheim Mainbernheim\n97353 Wiesentheid Feuerbach, Geesdorf, Reupelsdorf, Untersambach, Wiesentheid\n97355 Wiesenbronn Abtswind, Atzhausen, Castell, Greuth, Haidt, Kleinlangheim, Rüdenhausen, Wiesenbronn, Wüstenfelden\n97357 Prichsenstadt Altenschönbach, Bimbach, Brünnau, Järkendorf, Kirchschönbach, Laub, Neudorf, Neuses am Sand, Prichsenstadt, Stadelschwarzach\n97359 Schwarzach Düllstadt, Gerlachshausen, Hörblach, Münsterschwarzach, Schwarzenau, Stadtschwarzach\nKitzingen - Fachkräfte beim Kücheneinbau\nDie Wahl der geeigneten Küche ist eine schwierige. Schließlich ist sie eine Anschaffung, die oft über mehrere Jahrzehnte die Innengestaltung des Wohnraums prägt. Viele bezeichnen die Küche sogar als Herzstück des Hauses. Es gibt zahlreiche Küchenvariationen in unterschiedlichsten Farben, Formen und Ausstattungen. Nicht zu vergessen, die variierenden Qualitäts- und Preisunterschiede. Doch sobald man sich für die geeignete Küche entschieden hat, kommt die nächste Frage auf: Sollte man die neue Küche lieber selbst einbauen oder diese Aufgabe an den qualifizierten Fachmann weitergeben?\nVorteile der Fachkraft zur Küchenmontage\nEs gibt viele Aspekte die dafür sprechen, sich bei der Montage an einen ausgebildeten Fachmann zu wenden. Oft wird dieser Service direkt beim Kauf der Küche mitangeboten. Zusätzlich ist meistens eine Garantie mitinbegriffen, falls während der Montage Schäden entstehen. Diese Garantie bleibt bei der Selbstmontage aus. Folglich kann die eigene Montage sehr kostspielig werden, falls Schäden entstehen. Man sollte auch die Fähigkeiten, die beim Ein- und Ausbau der Küche gefordert werden, nicht unterschätzen. Denn der Einbau einer neuen Küche erfordert viel Fachwissen und handwerkliches Geschick. Die alte Küche muss ab- und die neue Küche muss aufgebaut werden. Dabei können viele Fehler gemacht werden. Zusätzlich dazu sind in den neuen, modernen Küchen viele hochtechnische Küchengeräte integriert. Diese müssen fachgemäß eingebaut und angeschlossen werden, was für den Laien oft sehr schwierig ist. Falls dabei ein Fehler gemacht wird, kann das die Kosten für die neue Küche unnötig in die Höhe steigen lassen.\nAußerdem sollte eine neue Küche schließlich auch neu aussehen und das ist eher gegeben wenn professionelle Handwerker beim Einbau tätig sind. Des Weiteren ist der Aus- und Einbau von Küchen eine zeitintensive Arbeit, insbesondere wenn man auf dem Gebiet nicht ausreichend geschult ist. Ein weiterer Vorteil ist, dass man sich die handwerklichen Tätigkeiten der Fachkräfte von der Steuer absetzten lassen kann. Zusätzlich ist davon abzuraten Strom und Wasser selbst anzuschließen, da die Versicherung im Schadensfall häufig nicht zahlt.\nAlles in allem lässt sich zusammenfassen, dass eine von Fachkräften eingebaute Küche viel Zeit, Geld, Schweiß und Ärger spart. Außerdem sieht sie meist besser aus. So kann man sich ganz entspannt und stressfrei an der neuen Küche erfreuen.