Isolation and Functional Analysis of Mitochondria from Cultured Cells and Mouse Tissue | Protocol (Translated to Danish)\nIsolering og funktionel analyse af mitokondrier fra dyrkede celler og mus Tissue\nPreparation of Highly Coupled Rat Heart Mitochondria…\nMulti-parameter Måling af permeabilitetsovergangpore åbning i isolerede Mouse Heart Mitokondrier…\nMitokondrie Ca2 + fastholdelse kapacitet analysen og Ca2 +-udløst mitokondrier hævelse Assay…\nLevende celler bank metabolisk energi i form af fedt og kulhydrater og anvende denne energi til biosyntese, transport membran og bevægelse. Noget energi opnås i cytosolen ved konvertering af kosten sukker direkte i ATP under glykolyse. Men den vigtigste kilde til ATP-produktion i en celle udnyttes i mitokondrierne via mitokondrie respiratoriske kæde 1. Arkitekturen af mitokondrier giver den nødvendige rumlige orientering for effektiv og ATP-produktion. Mitokondrier har en dobbelt membran adskilt af et intermembrane rum og sammen med matrixen, den inderste mitokondrie rum, hus komponenterne og koordinere de kemiske reaktioner der er involveret i ATP generation. Den indre membran indeholder en række membranbundne proteinkomplekser, der omfatter den respiratoriske kæde samt ATP syntase, proteinkomplekset, der bringer ADP og Pi sammen for dannelse af ATP. KroenER-membranen er foldet ind cristae og elektroner ledes langs de respiratoriske kæde-komplekser via cytochrom c, et opløseligt elektron bærer, som bevæger sig mellem komplekser i intermembrane rum. Som elektroner bevæger oxidation af reducerende ækvivalenter forekommer og hydrogenioner pumpes fra matrixen til intermembrane rum. Som følge af den høje ionkoncentration i intermembrane rum, en elektrokemisk gradient bygger resulterer i en membran potentiale over den indre mitokondrielle membran (Δψ) 2. Oxygen er den endelige elektronacceptor af elektron transportkæden og hydrogenioner flyde gennem ATP syntaser fra intermembrane rum tilbage til matrixen, og dermed direkte forårsage ATP formation. Denne fremgangsmåde, som beskrevet i sin helhed er kendt som oxidativ phosphorylering. Folderne i cristae forøge overfladearealet af den indre membran, der giver mulighed for maksimal elektrontransport og ATP-produktion ihvert mitokondrie. De proteiner, enzymer og andre molekyler, der er involveret i den oxidative phosphorylering er afledt fra både nukleare og mitokondrie-gener. Mitokondrier indeholder deres egen cirkulært DNA, der koder for 13 proteiner samt tRNA'er og mRNA'er er nødvendige for ATP-produktion 3. Men mange flere proteiner kræves, og derfor er det nukleare kodet. De fleste af disse nukleare kodede proteiner er målrettet til det mitokondrielle matrix ved anvendelse af præsekvenser ved N-terminalen af precursorproteinet og deres import drives delvist af Δψ 4,5.\nUd over at bidrage til bioenergetik af en celle, mitokondrier indflydelse også store metaboliske processer, såsom TCA og beta-oxidation, cellulær signalering gennem regulering calcium, samt en central rolle i apoptose 6. Specifikt i perioder af cellulær stress, BCL-2-familien proteiner, der er placeret på eller interagere på den mitokondriske ydre membran kan forårsage mitochondrialydre membranpermeabilitet (MOMP) 7,8. Under MOMP er cytochrom c og andre proteiner frigives i cytosolen, og sammen med flere cytosoliske proteiner danner et kompleks kaldet apoptosome 9,10. Den apoptosome aktiverer caspaser, der går på at spalte cellulære proteiner og DNA under udførelsesfasen af apoptose. Så snart MOMP sker, er ΔΨ kollapsede og ATP produktion standset. Således som apoptose initieres mitokondriefunktion er kompromitteret og ændringer i ΔΨ kan korreleres til mitokondrie og celle sundhed 12. Mens apoptose er et endepunkt i mange sygdomsmodeller, mitokondriefunktion og ændringer ΔΨ kan også give værdifuld information om sygdommen access og / eller progression. For eksempel har mitokondriske strukturelle og funktionelle ændringer er dokumenteret i løbet af neurodegenerative sygdomme 13,14.\nI den første del af protokollen, isoning af intakte mitochondrier, der bevarer deres ΔΨ beskrives. HEK-293T-celler blev udsat for forskellige koncentrationer og kombinationer af rekombinant TNF-α, IL1-β og IFN-γ til at inducere apoptose. Disse cytokiner er valgt, fordi de ofte er rapporteret at være høj i primære septisk prøver human 15 og extrinsicsti apoptose kan udløses ved interaktion af TNF-α-binding til dets receptor 6. Da der er subtile variationer er nødvendige for at isolere funktionel mitokondrier fra primære væv sammenlignet med dyrkede celler, og fordi megen forskning udnytter dyr, protokollen beskriver også, hvordan at isolere mitokondrier fra leveren og rygmarv af anterior lateral sklerose (ALS) musemodel.\nDen anden del af protokollen blev udviklet til at overvåge perturbationer til mitokondriemembranpotentiale anvendelse af en potentiel fluorescensfarvestof med en fluorescerende pladelæser. Forskels mellem cellulær status (dvs. sunde vs. usund) er differentierede ved kvantificering af styrken af ΔΨ af isolerede mitokondrier i forbindelse med frakobling midler, respiratoriske kæde inhibitorer, komplekse inhibitorer og ionoforer, som alle forårsager spredning af det mitokondrielle membranpotentiale. Den sundere mitokondrier, den større ændring i ΔΨ ved behandling med mitochondriale inhibitorer, derfor reaktion mitokondrier kan anvendes som en indikator for mitochondrial (dys) funktion.\nAnvendelse af isolerede mitokondrier snarere end in situ vurdering af funktion giver endelige bevis for, at en patologi eller behandling modulerer ændringer organel 16-18 direkte. Mens der er metoder i litteraturen til at isolere mitokondrier fra dyrkede celler, er de vage 17 og / eller udnytte specialudstyr 16. Denne protokol beskriver detaljeret isolation fremgangsmåde og erlet tilpasses til andre cellelinier, herunder primært væv og kulturer 13,14,19,20. Mange isolerede mitokondrier undersøgelser udnytte de samme mitokondrie uncouplers og inhibitorer, der anvendes i denne protokol, men med en Clark-elektrode (21 er et repræsentativt eksempel på mange papirer i litteraturen), som igen er en meget specifik og specialiseret udstyr. Desuden er denne traditionelle metode har begrænsninger, såsom lav produktivitet og høj kompleksitet 22,23 og kræver en betydelig mængde af mitokondrier (~ 500 pg / reaktion). I denne protokol, er den fluorescerende membran-sensing potentiel sonde TMRE anvendes i forbindelse med en fluorescerende plade læser, som er en standard maskine i mange laboratorier. TMRE er bredt anerkendt, da den træder hurtigt celler og isolerede mitokondrier og kan bruges ved lave koncentrationer 24. Flere reaktioner kan hurtigt sættes op i tandem og batch analyseres ved hjælp af denne protokol. Endvidere reaktionens kræver en meget lille mængde af isolerede mitokondrier (~ 10 pg / reaktion). Ved at kræve mindre materiale, kan mindre væv eller cellekultur prøver anvendes som et udgangspunkt for mitokondrier isolation, kan flere replikater eller reaktioner oprettes, og potentielt nok materiale til andre isolerede mitokondrier eksperimenter som ATP produktion, iltforbrug, eller import assays er mulige.\nAlle dyreforsøg var i overensstemmelse med National Institutes of Health retningslinjer og blev godkendt af Wake Forest University Animal Care og brug Udvalg. Ynglepar for SOD1G93A [B6SJL-TGN (SOD1-G93A) 1Gur] musemodel blev opnået fra The Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME). Ikke-transgene vildtype (WT) hunner og SOD1G93A hanner [B6SJL-TGN (SOD1-G93A) 1Gur] blev avlet til at generere SOD1G93A mus og ikke-transgene WT kuld der blev brugt i forsøgene.\n1. Modeller for Investigation\nOprethold humane embryonale nyreceller (HEK-T293) celler i DMEM suppleret med 10% varmeinaktiveret føtalt bovint serum, 1% penicillin-streptomycin og 1% L-glutamin, ved 37 ° C i 5% CO 2.\nGrow celler i T75 kolber og give dem mulighed for at nå 90% konfluens.\nForetag Celleopdelings via trypsinisering (0,25% trypsin-EDTA) i 3-5 minutter ved 37 ° C i 5% CO 2\nAspireres medierne og resuspender cellepelleten i dyrkningsmediet.\nSeed celler i passende kolbe eller plade 7 x 10 4 celler i en T75-kolbe 48 timer før cytokinbehandling. Dette skulle give ~ 70% densitet på tidspunktet for behandling.\nSerum sulte celler 24 timer senere ved at aspirere medierne og erstatte det med det samme volumen af serum-frie medier (DMEM, steril).\nForbered TNF-α, IL1-β, og IFN-γ, fra frysetørret pulver med ultrarent vand ved koncentrationer heraf 5 pg / pl, 10 ng / pl, og 10 ng / pl henholdsvis og tilføje dem til brøndene / kolber.\nTreat serum udsultede celler ved tilsætning af solubiliseret cytokiner direkte til celledyrkningsmediet passende kolber. Behandlingen bestod af individuelle cytokiner, en cocktail af alle 3 (benævnt "* 3"), eller sterile vand som kontrol (benævnt "0").\nInkuber behandlede celler i 24, 48 eller 72 timer før vurdering og høst.\nLav en opløsning af 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) 5 mg / ml -2,5-diphenyltetrazoliumbromid (MTT) i 1x PBS.\nFor plader med 12 brønde tilsættes 100 pi MTT-opløsning til hver brønd og omrystes forsigtigt for at sikre jævn fordeling.\nPladerne inkuberes i 15 minutter-1 time ved 37 ° C i 5% CO 2, og kontrollere under et mikroskop for tilstedeværelsen af lilla farve. Hvis der ikke lilla er til stede, hvirvle igen og tillade cellerne at inkubere i 5 minutters intervaller, indtil lilla overholdes. Mængden af tid, det bør bestemmes af hver investigator.\nVed hjælp af en gentagelse Fyld 700 pi MTT opløsningsmiddel (4 mM HCI og 0,1% NP40 i isopropanol) til hver brønd og rock plade (r) ved stuetemperatur i 5-10 min, eller indtil al lilla farve havde forladt cellerne . Hvis lillafarve kommer ikke ud af cellerne, tilsættes yderligere 200 ul opløsningsmiddel og fortsætte med at hvirvle.\nTil analyse, tage 100 ul fra hver brønd og anbringes i en plade med 96 brønde og læse på en tallerken læser ved hjælp 570 nm og en reference bølgelængde på 630 nm, dog 595 nm er også acceptabel, så længe der aflæses på konsistente indstillinger.\nDyremodel for ALS\nUdfør genotypning med standard primere mod mutant SOD1 25.\n2. Isolering af mitokondrier\nBEMÆRK: Det er vigtigt at arbejde hurtigt og holde alt på is under hele proceduren.\nFremstilling af mitokondrie isolation buffer (MIB), rygmarv isolation buffer (SC MIB) og eksperimentel buffer (EB)\nForbered følgende stamopløsninger før tid for MIB og EB.\nLav 1 M Tris / MOPS ved at opløse 12,1 g Tris-base i 70 ml H 2 O. Tilføj tørre MOPS at få pH-værdien til 7,4. Juster volumen til 100 ml endelig. Filtersteriliser og opbevares ved 4 ° C.\nLav 1 M Kphos ved at blande 80,2 ml af K 2 HPO 4 og 19,8 ml KH 2 PO 4. Opbevares ved stuetemperatur.\nLav 0,2 M EGTA / Tris ved tilsætning af 3,8 g EGTA til 10 ml H 2 O. Tilsæt 1 M Tris / MOPS indtil opløsning, ~ 30-40 ml. Juster til 50 ml, sterilt filter og opbevares ved stuetemperatur. Bemærk, at pH-værdien vil være ~ 6.7.\nLav 1 M Glutamat ved at 10 ml1 M opløsning af glutaminsyre. Filtersteriliser og lageret 4 ° C.\nLav 1 M Malate ved at 10 ml af 1 M opløsning af æblesyre. Tilføj Tris / MOPS til 50 mM. Filtersteriliser og opbevares ved 4 ° C.\nLav MIB i en koncentration på 200 mM sucrose, 10 mM Tris / MOPS, pH 7,4, og 1 mM EGTA / Tris. Filtersteriliser og opbevares ved 4 ° C.\nGør SC MIB i en koncentration på 250 mM sucrose, 20 mM HEPES-KOH pH 7,5, 10 mM KCI, 1,5 mM MgCl2, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1 mM DTT og protease inhibitor cocktail.\nLav EB ved en koncentration på 125 mM KCI, 10 mM Tris / MOPS, pH 7,4, 5 mM glutamat, 2,5 mM malat, 1 mM K-phosphat, pH 7,4, og 10 mM EGTA / Tris. Filtersteriliser og opbevares ved 4 ° C.\nForberedelse Udstyr før høst af cellerne.\nSkyl en lille glasbeholder og homogenisering støder tre gange med sterilt vand og placere på is.\nSaml nødvendige elementer, såsom en standard boremaskine, celle scrapers, 1,5 ml, 15 ml og 50 ml rør og løsninger.\nFor hver prøvetype, bruge to T175 kolber af celler.\nSikre, at cellerne er ~ 90% konfluente og anvendelse i kontrolforsøg, eller plade og behandle som beskrevet ovenfor i trin 1.2.\nPå bænken toppen, Aspirer medier og vask omliggende celler to gange med 15 ml 1x PBS hver gang.\nAspirer bufferen og skrab kolber for at fjerne adhærerende celler fra bunden af kolben.\nDer tilsættes 15 ml 1x PBS til hver kolbe, hvirvel, og overføre til individuelle 15 ml koniske rør og sted på is.\nNår skrabning er færdig, centrifugeres rørene i 5 minutter ved 700 xg, 4 ° C under anvendelse af en bordcentrifuge ved hjælp af en svingende spand rotor.\nAspirer supernatanter og resuspenderes hver pellet i 1 ml MIB.\nKombiner begge suspensioner og overføre til en lille glasbeholder for homogenisering.\nTilføj MIBtil beholderen, indtil bufferen når den første linje. Homogeniseres celler med de støder knyttet til en boremaskine ved middel hastighed i tre omgange. Sørg for, at fartøjet er på is under dette trin, ikke at fjerne støder over væsken og bruge en konstant hastighed med kontinuerlige passerer.\nOverfør den homogeniserede opløsning til et 50 ml konisk rør.\nTegn opløsningen i en 3 ml sprøjte ved anvendelse af en 18 gauge 1 ½ inch nål og uddrive den tilbage i konisk rør på is med en 27 gauge ½ inch nål. Pas at uddrive opløsningen mod den indvendige væg af røret for at udnytte denne kraft for cellemembranen forstyrrelser.\nGentag sprøjte trin i alt fem gange.\nOpløsningen overføres til en 15 ml konisk rør og centrifugeres i 5 minutter ved 600 xg, 4 ° C i en bordcentrifuge ved hjælp af en svingende spand rotor.\nFjern forsigtigt supernatanten og distribuere blandt tre 1,5 ml rør.\nBEMÆRK: Mitochondria er i supernatanten efter denne første, lav hastighed centrifugering, mens cellemembraner og ubrudte celler pelleteres.\nCentrifugerør i en rotor med fast vinkel ved 10.000 xg, 4 ° C i 5 minutter.\nAspirer supernatanter og kombinere pellets i 100 pi MIB og straks placere på is.\nBEMÆRK: Mitokondrier er i pillen efter denne high-speed spin. Mitokondrier vil typisk opretholde deres potentielle membran til ~ 2-3 ion is efter isolering og er mest stabile som en koncentreret stamopløsning i MIB.\nMitokondrier isoleret fra muse væv\nBedøver musen ifølge IACUC protokol. Indstil en fordamper på 5,0% for at inducere anæstesi. Bekræftet, at dyret er bedøvet af manglende refleks for mund knivspids eller blinker refleks, når øjet er kontaktet eller bankes med en vatpind. Hold musen under anæstesi for hele kirurgiske procedure ved at holde vaporizer mellem 1,5% og 2,0%.\nExcise leveren og rygmarven fra hvert dyr og sted separat i iskold 1x PBS - / - for at skylle noget blod væk.\nFor leveren, overføre vævet til en vejer skål på is og snittes i fine stykker ved hjælp af en frisk barberblad i 1 min.\nTilføj væv og passende buffer (MIB for lever- eller SC MIB for rygmarv) til beholderen, indtil bufferen når den første linje. Blandes væv pistil med hånden i fem gennemløb. Sørg for, at fartøjet er på is under dette trin, ikke at fjerne støder over væsken og bruge en konstant hastighed med kontinuerlige passerer.\nOverfør homogenater at rense 15 ml rør.\nCentrifugerør i en rotor med fast vinkel ved 750 xg, 4 ° C i 10 min.\nGem supernatanterne i rene rør og placere dem på is.\nBEMÆRK: Mitokondrier er i supernatanten efter denne første, lav hastighed centrifugering, mens cellemembraner og ubrudte celler pelleteres.\nRe-suspendere rygmarv pellets in 500 pi SC MIB.\nRe-homogenisere hver tre gange, kun fylde beholderen halvvejs med SC MIB dette tidspunkt.\nOverfør den nye homogenat til et frisk rør.\nCentrifuger i en fast vinkel rotor ved 750 xg, 4 ° C i 10 min.\nKombiner disse nye supernatanter, der indeholder flere mitokondrier, med den første supernatant fra hver prøve.\nAspirer supernatanter og opblande leveren pellets i 500 pi MIB og rygmarv pellets i 50 pl SC MIB og straks placere på is.\nUdfør en proteinkoncentration assay til at estimere koncentrationen af mitokondrier i opløsning. Følg instruktions for anvendelse af et kommercielt Protein Assay Kit eller lignende metode 26. Typiske koncentrationer af mitokondrier er: 2 T175 kolber udbytter ~ 2 mg / ml, 1 muselever ~ 3-5 mg / ml, og 1 mus rygmarv ~ 1-3 mg / ml.\nCytochrom C under anvendelse af en F & U Rotte / Mus cytochrom c Quantikine ELISA Kit (tilpasset fra den protokol, som fabrikanten).\nUmiddelbart før opsætning reaktionerne, fortyndes mitokondrier til 0,5 mg / ml arbejder koncentration med EB og distribuere udvandet mitokondrier i 1,5 ml rør til reaktioner (typisk 30-50 pi mitokondrier pr rør).\nTilføj enten EB eller DMSO, til 1% af den samlede volumen, til de fortyndede mitokondrier og inkuberes reaktionerne på bænken toppen for 7-10 min. Disse reaktioner er stabile i op til 30 minutter ved stuetemperatur, hvis en længere tidsramme er nødvendig.\nPellet mitochondrier ved centrifugering i en rotor med fast vinkel ved 10.000 xg, 4 ° C i 5 minutter og forsigtigtly adskille supernatanten og placere hver i et separat 1,5 ml rør.\nBEMÆRK: Rør kan enten frosset ved -20 ° C til analyse senere, eller anvendes straks.\nBestem frigivelse af cytochrom c ved en sammenligning af koncentrationen af cytochrom c i pillen og supernatanten 27.\nForberede prøverne ved solubilisering af pellets i det oprindelige volumen af reaktionen med 0,5% TX-100 i 1 x PBS.\nFor hver prøve forberede 2 brønde på ELISA-pladen, en for nu solubiliserede pellet og én for supernatanten fra reaktionsblandingen ved tilsætning af 100 pi af cytochrom c-konjugat (bruge lige ud af flasken) plus 100 pi 0,5% TX- 100 i 1X PBS, og derefter alle pelleten eller supernatant prøve.\nForsigtigt vortexes pladen en lav indstilling (niveau 2-4) i 20 sekunder for at blande, dække og inkuberes i 1 time, 37 ° C.\nDernæst vaskes pladen fire gange med vaskebuffer fortyndes i henhold til fremstillingsER instruktioner. Fjern eventuel overskydende opløsning ved at trykke på brøndene på køkkenrulle.\nDernæst tilsættes 150 pi af 1: 1 A + B udvikle opløsning til hver brønd og inkuberes pladen i 20-30 minutter i mørke ved stuetemperatur.\nEndelig tilsættes 50 ul stopopløsning til hver brønd og tage absorbanslæsninger ved 540 nm ved hjælp af en mikropladelæser. Mængden af cytochrom c-frigivelse ved sammenligning af mængden af cytochrom c i pelleten vs. supernatanten for hver reaktion.\n3. Vurdering af mitokondrie (Dys) funktion\nUmiddelbart før reaktioner er sat op, fortyndes mitokondrier til 0,5 mg / ml arbejder koncentration med EB og anbragt i 1,5 ml rør til reaktioner (typisk 30-50 pi mitokondrier anvendes pr rør).\nTilføj egnede behandlinger (EB kontrol, 1 uM FCCP blandet med 50 nM Valinomycin, 10 uM rotenon5 uM oligomycin, 2 mM KCN eller 200 pM ADP, slutkoncentrationer) til separate reaktioner på 1/10 det samlede volumen af fortyndet mitokondrier. Inkuber reaktionerne på bænken toppen for 7 min.\nBEMÆRK: Der skal udvises forsigtighed ved håndtering af disse stoffer som utilsigtet indtagelse eller optagelse gennem huden kan være skadeligt.\nFortynd TMRE, rekonstitueret i sterilt vand ved en arbejdskoncentration på 100 um og opbevares ved -20 ° C til 2 um og tilføje en mængde svarende til det mitokondrielle reaktionsvolumen.\nInkuber reaktionerne på bænken toppen for 7 min.\nPellet mitochondrier ved centrifugering i en rotor med fast vinkel ved 10.000 xg, 4 ° C i 5 minutter.\nLoad halvdelen af supernatanten volumen af hver prøve på en 396-brønds plade og læse fluorescens.\nBEMÆRK: excitations- og emissions- bølgelængder TMRE bør optimeres i henhold til fabrikantens instruktioner ved anvendelse af volumen og plade, der skal bruges tilassayet. Ved hjælp af en standard 384-brønds sort plade med 25 pi 1 uM TMRE (endelig reaktion koncentration) det stærkeste signal blev opnået under anvendelse af excitation / emissionsbølgelængder 485 nm / 535 nm.\nBeregn fold-forskellen i fluorescens mellem kontrol (EB), og hver behandling ved at dividere den relative fluorescens værdi (RFU) opnået fra pladelæser for den eksperimentelle prøve af RFU fra kontrolprøven.\nBehandling af HEK-293T-celler med 200 pg / ml TNF-α, 40 ng / ml IL1-β, og 75 ng / ml IFN-γ (* 3) for 24-48 timer fører til progressive mængder celledød (figur 1A ). Cellelevedygtighed blev vurderet ved anvendelse af MTT-assays og konsekvent viser, at der er ~ 10% fald i cellelevedygtighed med 24 timers behandling og ~ 20% fald med 48 timers behandling. Celler behandlet med lignende koncentrationer (100 pg / ml TNF-α, 40 ng / ml IL1-β, og 75 ng / ml IFN-γ) give lignende celledød resultater på 48 timer, og behandling med individuelle cytokiner viser, at faldet i levedygtighed skyldes kombinatorisk påvirker (figur 1B). De levedygtighed data i figur 1B repræsenterer middelværdien +/- standardafvigelse for 3 separate forsøg hver køre i tre eksemplarer og tætheden af fejlsøjlerne demonstrere reproducerbarheden af dataene. Mængden af cytokiner kan justeres i denne behandlingsprotokol yderligere elucidate bidraget fra hver cytokin på celledød, og yderligere cytokiner eller andre faktorer kan også være omfattet, så længe passende kontroller udføres.\nIsolering af mitokondrier fra celler og væv er blevet beskrevet i litteraturen siden 1940'erne 28,29. Udgangspunktet for fremgangsmåden er cellesprængning efterfulgt af differentiel centrifugering, hvor rå mitokondrier er kendt for at pelletere på ~ 10.000 x g. Mange protokoller, der anvender isolerede mitokondrier kræver intakte dobbelte membraner, som kan modstå deres membranpotentiale, og derfor er det nødvendigt at vurdere integriteten når isolation er færdig. Under udviklingen af mitokondrierne isolation protokollen fra dyrkede HEK-celler blev en cytochrom c-assay anvendes til at indikere, hvis der blev opnået intakte mitochondrier. Anvendelse af kommercielt tilgængelige cytochrom c ELISA kits blev mitokondrier kvantificeret efter isolering og fortyndet i EB, og derefter enten EB eller DMSOtilsat, og reaktionerne inkuberes på bænken toppen. Derefter, ved at adskille mitokondrier fra omgivende supernatant analyse af cytochrom c indholdet af begge fraktioner blev anvendt som et mål for mitokondriemembran intakthed; hvis flertallet af cytochrom c tilbageholdes i mitokondrie pellet derefter mitokondrierne være intakte, mens hvis der er mere end 15% af cytochrom c er fundet i supernatanten, derefter mitokondrier blev fundet uegnede til funktionelle undersøgelser. Som det ses i tabel 1, protokollen beskrevet udbytter ~ 12% cytochrom c-frigivelse og ~ 15% når isoleret mitokondrier er forbehandlet med DMSO. Lignende resultater er blevet rapporteret tidligere for mitokondrier isoleret fra andre cellelinier eller dyrevæv 19,20,27. Alternativt kan mitochondrial integritet også vurderes med TMRE, som blev anvendt under isolering af muselever og rygmarv mitokondrier. Under oprindelige isolering protokol development, forsøg evalueres mitokondrier isoleret fra leveren og rygmarv af sunde, normale mus mitokondrier. For hver prøve blev ΔΨ evalueres ved at sammenligne det fluorescerende signal fra isolerede mitokondrier behandlet med EB dem inkuberet med FCCP + Valinomycin (tabel 2). Et forhold mellem fluorescens mellem behandlede og ubehandlede mitokondrier> 1 blev anvendt som en indikation af raske, intakte mitochondrier.\nNår succesfulde mitokondrier isolation protokoller blev udviklet, mitokondrier isoleret fra kontrol, ubehandlede celler og * 3 cytokin behandlede celler, eller hvor de almindelige SOD1 mus blev analyseret. HEK mitokondrier fra begge grupper blev behandlet med forskellige uncouplers og inhibitorer og ΔΨ målt ved ændringer TMRE optagelse. Den fold forskel i kontrol EB behandlede mitokondrier at afkobleren / inhibitor behandlet mitokondrier angiver en forskel i styrken af ΔΨ mellem de to grupper (repræsentative data og calinger i tabel 3). Endvidere procent fald fra ubehandlede celler til * 3 behandlede celler betyder, at mitokondriel sundhed var påvirket af cytokin behandlinger samstemmende cellelevedygtighed data (figur 2). Evaluering af ΔΨ styrke via TMRE optagelse ved hjælp af mitokondrier isoleret fra leveren og rygmarv af fire individuelle normal, kontrol mus i forhold til fire ALS mus indikerer, at væv sundhed også kan vurderes ved hjælp af denne protokol. Som det fremgår af fold forskelle og procentvise fald i ΔΨ, sammenligning af EB-behandling og FCCP + Valinomycin-behandling af mitokondrier fra kontrol og sygdomsfri skred dyr er signifikant forskellige (tabel 4, se også referencer 13 & 14).\nFigur 1: Celledød inducered med * 3 behandling er progressiv over tid og større end med individuelle cytokin behandlinger. (A) HEK-293T-celler blev behandlet i 24 eller 48 timer, og celledød blev målt ved hjælp af et MTT-assay. Værdier blev normaliseret til kontrol ubehandlede prøver og data repræsenterer tredobbelte målinger for n = 3, +/- standardafvigelse. (B) HEK-293T-celler blev behandlet med individuelle cytokiner eller en cocktail (* 3) i 48 timer og celledød vurderes via MTT assay. Dataene repræsenterer n = 5 for hver individuel cytokin og n = 6 for * 3, +/- standardafvigelse.\nPellet (AU) Supernatant (AU) % Cytochrom c-frigivelse\n0 0,818 0,115 12,6 ± 2,27\nDMSO 0,793 0,142 15.3 ±; 2.23\nTabel 1:. Tilbageholdelse af cytochrom c i isolerede mitokondrier fra dyrkede celler data repræsenterer gennemsnittet af n = 4, +/- standardafvigelse.\nliver 1 lever 2 rygmarv 1 rygmarv 2\nRFU EB 97.830 94.132 339.716 290.154\nF / V 435.188 461.299 385.366 482.480\nforholdet 4.45 4.9 1.13 1.66\nEB = eksperimentel buffer og F / V = FCCP + valinomycin.\nTabel 2:. Måling af ΔΨ fra mitokondrier isoleret fra normale musevæv To separate dyr blev anvendt til at isolere lever- og rygmarv mitokondrier i tandem (fx lever 1 og rygmarv 1 er fra samme dyr).\nEB oligo rot KCN ADP F / V\nRFU 0 4844 12.507 12.734 9925 10.892 4844\n* 3 6517 13.639 12.435 10.235 13.154 6517\nFold forskel 0 NA 2,58 2,63 2.05 2.25 2,65\n* 3 NA 2.09 1,91 1,57 2.02 2.18\n% Fald 0 vs. * 3 18.94 27.41 23.35 10.24 17,67\nEB = eksperimentel puffer; oligo = oligomycin; rot = rotenon; KCN = kaliumcyanid, og F / V = FCCP + valinomycin.\nTabel 3: rådata og beregninger fra celle cULTUR isoleret mitokondrier eksperimenter.\nFigur 2: Mitokondrier isoleret fra cytokin-behandlede celler er faldet membranpotentiale. Procent fald i ΔΨ til 0 vs. * 3 for hver behandling sammenlignet med kontrol, som beregnet i tabel 2. Dataene repræsenterer gennemsnit af dobbeltbestemmelser reaktioner for n = 3 (oligomycin, rotenon, og FCCP / Valinomycin) eller n = 2 ( KCN og ADP) +/- standardafvigelse. * = Statistisk signifikante p-værdier baseret på fold forskel beregninger; p = 0,03, 0,01 og 0,05 for oligomycin, rotenon og FCCP / Valinomycin hhv.\nSpinal Cord Lever\nFold Forskel Kontrol 1,54 ± 0,48 3,20 ± 1,56\nSOD1 1.10 ± 0.30 3.12 ± 1.75\n% Fald 28.1 2,48\np-værdi 0.03 0,41\nTabel 4: Mitokondrier isoleret fra rygmarv af SOD1 mus har reduceret membranpotentiale som vurderet ved FCCP + Valinomycin data repræsenterer gennemsnittet af 4 dyr pr gruppe..\nBehandling af HEK-293T-celler med rekombinante cytokiner forårsager moderate mængder af celledød i løbet af 48 timer (figur 1). Mængden af celledød induceret af TNF-alfa behandling ligner tidligere rapporterede undersøgelser 30 og celleviabilitet falder efter samtidig administration af flere cytokiner, der er større end summative beløb med enhver cytokin alene er også i overensstemmelse med litteraturen 31,32. Evnen til at tilpasse de beløb og typer af cytokin behandlinger samt sammenligning af cocktails til individuelle cytokiner gør denne cellekultur model attraktivt for at studere de konkrete virkninger af cytokin eksponering på nyreceller. Endvidere er resultaterne meget reproducerbare og let opnås (figur 2). Overvejelser til at holde i tankerne, omfatter sammenløbet af cellerne. For eksempel har celler behandlet med 100% konfluens ikke reagerer så godt til de samme koncentrationer af cytokiner, når de behandles ved 70-80% confluens. Endvidere bør antallet af passager cellerne har gennemgået spores, da celle respons eventuelt kunne blive påvirket at have været i kultur i for lang (mere end 8-12 uger siden optøning). Mens behandling af dyrkede celler med cytokiner nedsat cellelevedygtighed og efterfølgende mitokondrie sundhed, er det på ingen måde en model for sepsis per se. Men brugen af et mere klinisk relevant model, som beskæftiger primære nyre celler isoleret fra mus og / eller behandling med naturligt udskilles cytokiner fra stimulerede THP1 celler 33, er en naturlig forlængelse af dette arbejde. I betragtning af den forskel i forståelsen af nyresvigt under sepsis, sådanne cellekulturmodeller og vurdering af mitokondrier kunne give indledende indsigt i de mekanismer, samt en foreløbig platform til afprøvning af effektiviteten af farmaceutiske forbindelser som forebyggende eller interventionsforanstaltninger behandlinger.\nMitokondrier isoleret fra dyrkede celler eller dyrevævråd evnen til hurtigt at vurdere virkningen af celle behandlinger eller sygdomsprogression på mitokondrie sundhed. Isoleringen og evaluering protokoller er ikke teknisk krævende at udføre og kan let modificeres til anvendelse med andre cellelinjer eller primære væv. MIB og EB anvendes til hver prøvetype er gode udgangspunkter opskrifter, der kan justeres efter behov, hvis en bestemt celle eller vævstype har forskellige krav. For eksempel er sædvanligvis nødvendigt til brug med neuroner tilsætning af fedtsyre fri BSA, som følger med rygmarv protokol 15,34. Den cellesprængningsmetode kan også ændres ved hjælp af flere sprøjter udvisning eller ændrer opgør homogenisering stedet for at anvende en boremaskine eller vice versa. Desuden re-homogenisering af den første centrifugering pellet, som sker i rygmarven mitokondrier procedure, kan det være nødvendigt at opnå en tilfredsstillende mængde af mitokondrier. En god indikator for, at en isolation protokol producerer levedygtige mitochondria er anvendelse af cytochrom c ELISA. Denne analyse er en hurtig og nem alternativ til western blot analyse af cytochrom c-frigivelse, og er også en nyttig vurdering af cytochrom c-frigivelse efter behandling af mitokondrier med peptider eller andre forbindelser 19,27. Alternativt kan TMRE anvendes under protokol udvikling, men det er vigtigt at evaluere mitokondrier isoleret fra en prøve, der vides at være sunde. Endvidere, når isolering mitokondrier fra muse væv, som ikke rutinemæssigt beskrevet i litteraturen, kan leveren mitokondrier tjene som en positiv kontrol samt bruges til at indstille en baseline. For eksempel som i denne protokol, lever fra hvert dyr, både under protokol udvikling samt forsøg blev også skåret ud og brugt til mitokondrier isolation. En anden overvejelse for et præparat er den mængde af mitokondrier opnået ved udgangen af isolation procedure. Hvis koncentrationen af mitokondrier er 1 mg / ml eller mindre endanalyseresultaterne kan vise sig upålidelige (upublicerede observationer VDGM). Enten det udgangsmateriale, MIB opskrift eller forstyrrelse metode bør optimeres, før du flytter til funktionelle assays. Når en vellykket isolering protokol er nået, kan mitokondrierne også anvendes i andre assays, såsom total ATP indhold og ATP generation 13,14.\nDen mitokondrier funktion protokol beskrevet her muliggør indirekte måling af mitokondrie optagelse af den potentielle-sensing farvestof TMRE anvendelse af en standard fluorescenspladelæser. Efter mitokondrier er blevet isoleret og passende kemikalier, der tilsættes, er de inkuberet med TMRE og derefter pelleteret. Ved behandling af hele celler eller dyr, og isolering af mitokondrier før ΔΨ vurdering confounding variabler såsom multiresistent transport eller ATP flux undgås. Mængden af fluorescens i supernatanten analyseres derefter med den forståelse, at sundere mitokondriernejo stærkere deres ΔΨ og derfor mere optagelse af TMRE. Som følge heraf bør mængden af fluorescens i supernatanten være mindre i sundere mitokondrier og mere usunde mitokondrier. Ved at inkludere en EB-eneste behandling, fold forskel i fluorescens mellem denne kontrol og afkoblede mitokondrier kan beregnes. En anden vigtig kontrol med hvert sæt af reaktioner køre er TMRE alene. Resultatet fra denne kontrol giver en maksimal mulig fluorescerende læsning. Da TMRE tilsat til reaktionerne er frisk fortyndet, der er iboende variabilitet. For eksempel blev TMRE-only læsninger af ~ 20.000, 25.000 og 30.000 opnås på forskellige tidspunkter under protokol udvikling. Hvis TMRE kun signal er meget større end nogen af de behandlede mitochondrierne prøver og / eller hvis de behandles mitokondrier er ikke signifikant forskellig fra ubehandlede, derefter isolering af koblet mitokondrier var sandsynligvis ikke lykkes. Faldet i ΔΨ som målt ved et forhold opnåetI forbindelse med denne protokol ligner tidligere rapporterede beløb for kontrol, sunde celler 2,35. Sammenligning af ΔΨ ændringer fra mitokondrier isoleret fra kontrol, ubehandlede HEK-293T celler og * 3 cytokin-behandlede celler viste, at den nedsatte cellelevedygtighed observeret i MTT-assays oversætter nedsat mitokondrier funktion. Denne plade læser assay kunne nemt bruges med mitokondrier isoleret fra enhver kilde og bruges til at undersøge sygdomsmodeller som ALS, som påvist her 13,14.\nAdskillige undersøgelser har anvendt mitochondria-specifikke fluorescerende farvestoffer til påvisning af MOMP, der var vigtige i tilblivelsen af denne pladelæser assay. Disse undersøgelser, enten Dog bruger hele celler til at screene forbindelser, der blokerer eller inducerer MOMP 35,36, udforske nye ΔΨ sensing farvestoffer 2 eller identificere andre formater såsom flowcytometri på en mikrochip 37. Denne protokol er enestående, fordi det beskriver annonceETALJERET metode til at isolere og anvende mitokondrier til hurtigt at undersøge virkningerne af helcelle-behandling gennem reaktion på kendte ΔΨ-ændrende forbindelser. Denne protokol udnytter en række uncouplers og inhibitorer, og indikerer, at nogen af dem ville være egnet til at vurdere mitokondrie sundhed. Medens denne særlige undersøgelse centre på mitochondriale ændringer som følge af cellulær stress eller progressiv cellulær dysfunktion, protokollen kan også anvendes til at undersøge ændringer i mitokondrie metabolisme gennem anvendelse af specifikke forbindelser og / eller tilsætning af elektron kilder såsom succinat og NADH .\nVigtige overvejelser, når der udfører den isolerede mitokondrier vurdering inkluderer sammenhæng i behandling mængder, holde mitokondrier i MIB og fortynde dem i EB umiddelbart før behandlingerne vil blive oprettet, og ved hjælp af mitokondrier inden for 3 timer af isolation for at sikre deres ΔΨ stadig opretholdes. DenValget af TMRE forhold til andre mitochondria-specifikke fluorescerende farvestoffer, såsom JC-1 var som følge af evnen til at anvende små koncentrationer og enkelhed analysere fluorescens under anvendelse af kun én bølgelængde. Kan tilsvarende udføres Denne metode med fluorescerende mikroskopi 2,38 eller flowcytometri 37, men anvendelse af en pladelæser tager mindre tid og kræver mindre optimering 35. Desuden denne protokol er langt mindre teknisk krævende, hurtigere at udføre, og mere let at reproducere i forhold til at bruge en Clark-elektrode 22 (Del Gaizo Moore, upublicerede observationer). Titrering mængder af hver mitokondrie behandling kan give yderligere indsigt i mitokondriefunktionen og optimering af koncentrationer bør udføres. Det samlede volumen af de mitochondriale reaktioner kan justeres, så de passer mængden af prøve opnået under isolering samt antallet af reaktioner nødvendige behandling. Hvis det er muligt, et fast beløb på 50 μL anvendes; dog så lidt som 20 pi mitokondrier frembringer pålidelige resultater.\nMens ΔΨ korrelerer til iltforbrug, analysen præsenterede ikke direkte måler iltforbrug. Mens fluorescerende ilt sensing sonde såsom MitoExpress er udviklet, formentlig for at undgå nogle af de downfalls at bruge en Clark Elektrode dommen, at prisen per reaktion og kravet om større mængder mitokondrier pr assay forblive begrænsende. Derfor er brugen af TMRE og klassiske ΔΨ uncouplers eller inhibitorer har flere fordele. Igen batch analyse af flere prøver eller flere behandlinger / prøve, reproducerbarhed, lavere udgangsmateriale krav og / eller lavere mængde isolerede mitokondrier kræves per reaktion gør denne protokol attraktiv.


Ordblindeundervisning giver muligheder - Sydfyns Fri Fagskole\nOrdblindeundervisning giver muligheder\nI år har vi etableret 2 ugentlige ordblinde-sessions, hvor elever med skrive- og læsevanskeligheder på baggrund af en ordblindetest for de nødvendige hjælpemidler, som sikrer dem et udbytterigt skoleår.\nSydfyns Fri Fagskole er ikke en ordblindeefterskole. Vi tilbyder 10. skoleår samt STU for unge, som er på vej til job- og uddannelse. Vores tilgang til ordblindeundervisningen er i høj grad praktisk.\nI starten af året finder vi ud af, hvem der skal have søgt en IT-rygsæk ved ministeriet ligesom vi gennem ordblindetest.dk danner os indtryk af den enkeltes læse- og skrivevanskeligheder.\nVi vurderer sammen med den unge, hvor indsatsen skal være:\nnogle mangler grammatisk forståelse og har brug for repetering i basis grammatik, morfemer og ordklasser for at øve deres parathedsviden og hastighed til fx at forberede sig på folkeskolens afgangsprøver.\nnogle har brug for støtte til læsefosrståelse. Gennem systemet De Fantastiske Fire arbejder vi blandt andet med at læse, både selv og med digital oplæsning, og forstå i stigende hastighed. Eleven lærer også at OCR-behandle en tekst selv.\nandre har brug for helt basis, hverdagsrelateret brug af telefon og Ipad, til fx at få oplæst vareren etiket i supermarkedet, læse opskrifter i køkkenet og indtale deres googlesøgning.\nOfte starter vi undervisningen med et fælles tema, fx sammensatte ord eller basis-grammatiske opfriskninger. Dernæst arbejder eleverne individuelt videre med deres plan, fx læsetræning, grammatik eller arbejder med en aktuel lektie fra de boglige timer.\nOrdblindeundervisningen er 2 gange om ugen og holdet består af ca 10 elever.\nVi er to lærere, Pernille og Lisbeth, til at støtte i de 2 x 45 minutter undervisningen tilbydes om ugen.\nTidligereTidligereStor håndsrækning til Frie Fagskoler fra regeringen


topar.kosreqor.se For women\nKlargøring af bil | Au2Clean Bilvask\nIndvendig bilpleje - hvordan gør man det korrekt? Bilen er et opholdsrum nøjagtigt ligesom husets stuer og rengøring. Vi slæber mudrede støvler ind, indvendig is og drikker bil i den lille kabine. Her er de rengøringsmidler og rengøringsmetoder, du skal bruge, når rengøring rengør bilen. Vask bilens indre med gammeldags sæbevand og masser af knofedt, eller brug de moderne rengøringsmidler, som næsten klarer rengøringen selv indvendig men husk altid at efterbehandle bilkabinen med beskyttende midler. Det bil, at skidtet ikke trænger så dybt ind, og rengøringen bliver lettere næste gang. shellac negle næstved Vi kommer til dig privat eller på dit arbejde og rengør din bil inde og ude.\nBrevkasse: Dækker 2 års garanti på mobil også opladeren?\nReklamationsret: Hvad gør man når ens mobil går i stykker? En læser spørger, om man den toårige garanti eller reklamationsret, der dækker mobilen, når man køber den, også dækker mobilopladeren, der fulgte med i æsken. Se vores svar i Mobils brevkasse. Ved ikke, om jeg kan spørge jer om dette, men har jeg 2 års garanti på mobillader. Købte en mobil for 19 mdr. Du har som udgangpunkt 24 måneders garanti eller lovpligtige reklamationsret, som et par læsere retteligt har bemærket, iphone der garanti tale om, når du køber ny mobil og den dækker også opladeren. Butikken er forpligtet til at afhjælpe fejl eller mangler, der var til stede på købstidspunktet, uden at det koster dig ekstra.\nLÆR AT FOTOGRAFERE VOL 5 by Stanley Photography - Issuu\nLÆR AT FOTOGRAFERE VOL 5 by Stanley Photography - Issuu Alle billeder og illustrationer © Stanley Photography - 3. Enhver form for kopiering og deling af denne bog er ikke tilladt, og kan straffes med bøde og krav om kompensation. Alle råd og vejledninger i denne bog er ikke videnskabelige, men bygger på Fotografere Withs egne erfaringer, som professionel fotograf. Hvilket kamera skal man købe. Der fotografere rigtig mange gode kameraer, og de fås i lær mulige prisniveauer.\nJordbær rababer trifli\nMormors jordbær-rabarbertrifli - topar.kosreqor.se\nDen bedste jordbær/rabarber trifli med hjemmelavet creme Jordbær rabarberkompot og havregrynscrumble kan fint forberedes nogle timer i forvejen eller dagen før, og så tager det ikke længe at samle en rabarbertrifli efter middagen. Jeg tilbereder i øvrigt ofte en version af rabarbertrifli til morgenmad. Smør- og honningristet havregryn Kom havregryn og nødder på en rababer og rist det ved middel varme under omrøring. Når det begynder at dufte tilsættes smør og honning og det røres godt sammen til både honning og smør er smeltet og havregrynene er blevet lidt sprødt og gyldent. Vaniljecreme Pisk æggeblomme, vaniljepulver og sukker til en trifli tyk æggesnaps.\nForskere angriber danske solråd - TV 2\nDanish Digital Awards Det er et faktum, at solen booster vores livskraft og vores humør, men den kan også solen skadelig, hvis ikke mindre er i den med omtanke. Nivea har samlet en række af de største myter om solbadning - se her, om du har styr på, hvad der er rigtigt og hud. Solarier udsætter hovedsageligt din hud for UVA-stråler. Men hudens selvbeskyttelsesmekanismer - den naturlige fortykkelse af hornlaget og melaninsyntesen - aktiveres af UVB-stråler.\nLæderbukser til damer - Stort udvalg og gode tilbud | topar.kosreqor.se\nGamle luftfoto er online: Find dit barndomshjem på nettet | Regionalt | topar.kosreqor.se\nGamle luftfoto er online: Find dit barndomshjem på nettet | Regionalt | topar.kosreqor.se Hvordan så dine forældres gård ud for 60 år siden, var parcelhuskvarteret du bor i bare en mark dengang, og hvor stor var byen. Det kan du formentligt få svar på ved danmark tage et kig i de historiske arkiver med fascinerende luftfotos fra Danmark. Videncentret Bolius præsenterer her to gode og gratis online arkiver. I løbet af tre uger i maj gennemførte US Air Luftfoto et storstilet projekt med at gennemfotografere hele Danmark. 1954 var den politiske verdenssituation meget anspændt mellem Øst og Vest, og vestmagterne ville sikre sig et detaljeret overblik over områder, der potentielt kunne blive invaderet fra øst. Derfor blev Danmark og en række andre lande gennemfotograferet.\nLej last minute sommerhus - spar op til 20% hos DanCenter\nLej last minute sommerhus - spar op til 20% hos DanCenter Leder du efter et sommerhus i Danmark i sidste øjeblik. Så kan du være heldig at finde et godt last minute tilbud hos os, som passer perfekt til dig og dine ønsker. Alle vores last minute sommerhuse ligger tæt på både hav og fjord i et af de smukkeste områder i Danmark: Vestjylland lige ud til Vesterhavet — I populære feriebyer såsom Søndervig. Last minute feriehusene sommerhus i mange forskellige størrelser og i forskelllige prisklasser. Således kan du ofte både finde mindre ferielejligheder til parret — mellemstore sommerhuse øjeblik familien — og store poolhuse som kan sidste ramme om en skøn ferie for gruppen. Tilmeld dig Last minute tilbud Se de nyeste last minute tilbud først og spar penge på din ferie.\nVintage kjoler , 50'er kjoler , 60'er kjoler , klassiske kjoler , retro kjole\nSoul Shine - Vintage tøj i Aarhus - Soul Shine – Vintage tøj i Aarhus Hvem kommer først. Der er kun 1 af hver. Finder du ikke hvad du søger. Sign online op og bliv den retro til at shoppe varer online. Er tøj til farver, spræl og vilde unikakups. Tøj Rebecca Veras genbrugsfund direkte på instagram under tagget shoprebeccaveras, nemt, ik.\nNyt redskabsskur med rottesikring, gulv og tagpap, til en fornuftig pris\nHold skuret frostfrit | Isolering af skur | idényt Bestil 3 gratis og uforpligtende tilbud på dit byggeprojekt. Når du skal til at lave dit eget redskabsskur isoleret isolering, så er der flere ting du skal gøre og tage stilling til inden opbygning går i gang. Noget af det første du skal gøre, er at tænke alle tanker igennem, om hvordan dit redskabsskur bliver mest anvendeligt for dig. Skur kan du gøre dig nogle tanker om, hvor mange døre der skal være.\nPhilips vækkeur lampe\nHvide sande restaurant slusen\nAnerkendende tilgang teori\nTrip trap magnus


Kikærter à la Libanaise Vegan økologisk - Naturkost Odense, Økologiske & Biodynamiske varer\nIndhold: 250g. (2 poser a'' 125 g)\nPris DKK 34,75\nØkologisk kikærter a la Libanon\nVores kikærteropskrift inspireret af det Libanesiske køkken vækker ønsket om at rejse. På kun 20 minutter er denne originale opskrift med knækkede kikærter, sesamfrø og en fin knivspids kommen klar til at blive serveret.\nTilberedning: Kom indholdet af 1 pose i en gryde med 500 ml kogende vand. Kog ved svag varme i ca. 20 minutter, indtil vandet er helt absorberet. Sørg for en regelmæssig omrøring og tilsæt i slutningen af tilberedningstiden mere salt, om ønsket.\nIngredienser: split kikærter*91%, sesamfrø*, kommenfrø*, olivenolie*, persille*, løg*, kardemomme*, *=økologisk.\nDK-ØKO-100 EU/ikke EU Jordbrug.\nPakket i beskyttet atmosfære. Opbevares mørkt og tørt ved rumtemperatur.\nBedst før: se stempel. Oprindelsesland/hjemsted: Frankrig\nImporteret af: www.naturkost.dk (tlf. 66137013).\nTarot Sjælens spejl sæt\nAromatic Midnight blue ultrasonic diffuser\n01. Seitan Pulver mix - Hvedegluten øko\n02. Falafel mix glutenfri økologisk Vegansk\n03. Linsesuppe med croutoner instant økologisk\n04. Sojagranulat fint Økologisk\n05. Minut polenta økologisk\n06. Melfri WRAPS med gulerødder 4 stk pt udsolgt\n07. Grønsagsburger mix Demeter biodynamisk økologisk\n08. Svampesuppe med croutoner instant økologisk\n09. Basis Fars-mix grov Ø\n10. Tortellini med rørhatte økologiske


DF: Ældre over 80 år skal have krav på plejehjemsplads | Folketingsvalg | DR\nDF: Ældre over 80 år skal have krav på plejehjemsplads\nEt retskrav på plejehjem vil sluge en meget stor del af det økonomiske råderum, advarer finansministeren.\n- Vi tror overhovedet ikke, vi vil se en eksplosion af folk, der vil på plejehjem, siger Dansk Folkepartis formand, Kristian Thulesen Dahl, om partiets forslag om et retskrav om plejehjemsplads for borgere over 80 år.\nHvis dåbsattesten viser en alder over 80 år, så skal du fremover kunne rykke direkte ind på et plejehjem.\nDet er i hvert fald holdningen hos Dansk Folkeparti, der nu er klar til at indføre et decideret retskrav på en plejehjemsplads for ældre over 80 år.\n- Nu skal det høre op med det her med, at ældre mennesker, der selv føler, at de har et stærkt behov for at komme på et plejehjem, bliver afvist ved indgangsdøren, siger formand Kristian Thulesen Dahl.\n- Vi mener, der bør være et retskrav på at komme på et plejehjem, hvis man føler, man som ældre er nået dertil i livet, hvor man har behov for at skabe tryghed.\nMeldingen kommer, efter at Dansk Folkeparti og SF i weekenden gav hinanden håndslag på at kæmpe for, at der efter valget bliver afsat en milliard kroner mere om året til de ældre.\nEn milliard, der skal lægges oveni i det generelle løft, som både Venstre og Socialdemokratiet har annonceret ved at lade udgifterne til ældre stige proportionelt med, at antallet af ældre stiger.\nOg står det til Kristian Thulesen Dahl, kan de penge fint bruges til at sikre flere plejehjemspladser.\n- Vi har jo anvist en milliard ud over det demografiske træk. Nogle af de penge skal bruges til plejehjemsbyggeri. Og så skal vi huske på, at selve driften - altså om en kommune skal hjælpe ældre i eget hjem med pleje og omsorg eller på et plejehjem ændrer jo ikke noget.\nV afviser: Vil hellere hjælpe\nKristian Thulesen Dahl får dog ikke umiddelbart opbakning til sit udspil hos manden, der lige nu sidder på pengekassen, nemlig finansminister Kristian Jensen (V).\nIfølge ham vil et sådant krav sluge en stor del af det økonomiske råderum.\n- Jeg kan ikke se, hvordan man kan få råd til det. Jeg vil hellere give pengene til dem, der faktisk har et behov. Dem som man vurderer, har mest brug for hjælp, uanset om de er 79 eller 82.


Med Peder Palladius på visitats | Gyldendal - Den Store Danske\n”En bedre ordning og reformation”\nEvangelii lyse dag\nLink til "Med Peder Palladius på visitats"\nMed Peder Palladius på visitats\nOprindelig forfatter AWit\nSkoler og undervis... Den konkurrerende ... Skoler og u... Den konkurr... Danmarkshistorien\nBefolkningen måtte forstå, at der var megen gammel sandhed, som man havde lært af sine forældre og af sin sognepræst, som ikke gjaldt mere. Der var klostervæsen, cølibat, aflad, bodsøvelser, pilgrimsgang, skærsild, messer for de døde, relikvier og meget andet, som hørte kirken til, og som i mange generationer havde været med til at præge følelsen af, hvad der var godt og havde værdi. Og det gjaldt også meget af det, som mere direkte angik befolkningens tilværelse som selve messens form, klokkedåb, korsebør, rosenkranse, smørelse med den hellige olie, besøg ved kilder og andre hellige steder og alle helgenerne. Det gjaldt sågar, hvad man troede og mente om Jomfru Maria. Om alt dette og mere til erklærede de nye folk, at det „sender vi nu Djævelen hjem igen, hvem de er kommet fra, og giver Gud ære, idet vi tager ved Kristi sande evangelium”, som Gud har sendt igen „i disse sidste tider”.\nDet var de nyudnævnte bisper, der havde den svære opgave at få befolkningen til at indse, at sådan forholdt det sig. Sognepræsterne skulle sættes ind i den gejstlige stands nye vilkår og meninger. De skulle gøres bekendt med den nye kirkeordnings bestemmelser og have de rette lutherske bøger. Kirkernes økonomi skulle ordnes i hvert sogn, og skolearbejdet og det sociale arbejde nyordnes, efter at de gamle institutioner var opløst. Det var en gigantisk opgave, der påhvilede de nye bisper og provster. De gik til sagen med ildhu, dybt overbeviste om at gøre det rette, nu da Gud havde renset sin kirke i denne evangeliets lyse dag, hvor tiden var knap før dommedag.\nPeder Palladius. Billedets forlæg er hans nu ødelagte ligsten i Vor Frue Kirke i København. Den blev omkring 1670 tegnet til brug for Resens Atlas, der imidlertid aldrig udkom. Biskoppen er klædt som almindelig borger. Han blev født i Ribe 503 og gik i skole her. Ellers ved vi kun, at han en tid var rektor i Odense, før han i 1531 blev indskrevet ved universitetet i Wittenberg. Han indskrev sig som Petrus Esbernus Pladius, men ændrede senere under opholdet det sidste til Palladius, uden at vi kender baggrunden eller betydningen af ordene. I 1537 blev han doktor i teologi i Wittenberg.\nDet vigtigste led i denne gerning var visitatserne, det direkte møde mellem biskop, præst og menighed. Vi er så heldige, at vi har bevaret Peder Palladius' Visitatsbog, hvori han fortæller om, hvordan han gik frem, og hvad han sagde til menigheden, når han besøgte de enkelte sogne. I årene 1538-1543 visiterede han alle 390 sogne i Sjælland Stift, og Visitatsbogen er et resultat af hans erfaringer, efterhånden som han nåede frem i arbejdet. Den har sikkert skullet tjene som vejledning for samtidige og efterfølgende biskopper i denne uvante og vigtige gerning. Som Sjællands biskop og ved sin entusiasme og store evner kom han til at indtage en slags ledende stilling inden for korpset, og han prægede udviklingen ved sine håndbøger for præster og degne og en lang række andre skrifter og oversættelser, der blev trykt og fik stor udbredelse.\nNår Peder Palladius kom på visitats i et sogn, var det noget helt andet, folk oplevede, end det de havde kendt fra de adelige og fornemme katolske bispers tid. Palladius kom for at tale til dem om deres evige og jordiske velfærd, og han gjorde det i et sprog, de forstod, om end det måske på nogle kan have virket, som om han talte ned til dem, for de vidste naturligvis, at den lærde mand normalt ikke talte deres sprog. Når han havde taget plads øverst i kirken og henvendte sig til den forsamlede menighed i alle aldersgrupper, der var samlet til anledningen, tog han gerne udgangspunkt i det synlige og nære. Med sin egen stærke følelse af det kristne fællesskab som det eneste ly mod Djævelens anslag, kunne han tale stærkt og indtrængende om, hvordan kirkebygningen, døbefonten, prædikestolen og alteret var synlige udtryk på frelsen, „for at vi skulle kende ved dem, hvor nær vi er Gud og han os, eller hvor nær vi er Djævelen og han os”. Han citerede ordsprog og fortalte anekdoter for at advare mod hor og løsagtighed eller indskærpe den rette tros og den regelmæssige kirkegangs nødvendighed.\nDommedag med herremanden og hans familie i første parket. Kalkmaleri fra omkring 1560 i Lønborg Kirke ved Skjern. Kristus troner på regnbuen med nådens liljer og straffens sværd, mens han deler de opstandne i forgrunden uden for dette udsnit, i de frelste og de fordømte. Bag Kristus sidder de allerede frelste i skyerne, klædt i tidens dragter. I forreste række den lokale herremand og hans familie og foged, kvinder og mænd på hver sin side som i kirken. Det er måske herremanden, der har betalt billederne. Den betroede foged, der befinder sig lige uden for det viste udsnit, ses på billede herunder. Han har en nøgle i hånden.\nDe eksisterende sociale forhold brugte han som paralleller til de himmelske ting og tegner således sit billede af det kosmiske fællesskab, hvor Gud har sat alt på sin rette plads. Det gælder f.eks. når han vil understrege den absolutte lydigheds nødvendighed på begge planer. „Du har en dødelig herremand til husbond, som du tjener og giver din landgilde, den bør du at være hørig og lydig efter det fjerde bud, så fremt som Gud ikke vil straffe dig på liv og sjæl.” Men der var også „en herremand over alle herremænd, der hedder Vor Herre Jesus Kristus”, og er man ulydig mod ham, vil han ikke som den jordiske straffe med bøder eller livsstraf eller udsættelse af fæstegården, han har et ganske andet ris at slå med, „han har pokker [syfilis], pestilens, koldesyge, hedesyge og anden plage at slå dig med, ja gør du ham meget fortræd, han har vel en levende djævel at slå dig med i din krop, tør lade dig sætte fra himmerigs gods og slå din hals sønder nede i helvedes afgrund”. Og ridefogeden skal undersøge din lade og se, om tienden er betalt, som den skal, men der er også en foged i himlen, som ser ind i alle hjerter og kender alle tyverier.\nEn del af styrken i Palladius' forkyndelse var, at hans tilhøreres hårde vilkår inden for fællesskabet ikke fornægtedes eller fortiedes, men tværtimod blev forklaret og begrundet.\nDen betroede foged; han har en nøgle i hånden. Kalkmaleri fra omkring 1560 i Lønborg Kirke ved Skjern.\nMon ikke nogle af de bønder, som i den foregående tid havde oplevet eller deltaget i modstanden imod herremændenes magtudvidelser, vornedskabet og anden tilsidesættelse af gammel sædvane, har følt sig krænket i deres retsbevidsthed, når de nu hørte den nye biskops sammenligning mellem den jordiske og den himmelske herremand og hans krav om absolut lydighed? Det var jo et krav om bøndernes fuldstændige politiske afmagt, ligesom skabningen i den lutherske tankeverden var afmægtig over for Gud. Det var ikke få omvæltninger af ældgamle skikke og sædvaner, Palladius og hans kongelige herre selv stod for. Palladius forklarede, at alt det nye baserede sig på det guddommelige i herre-undersåtforholdets natur i modsætning til den af det nye styre så hårdt ramponerede sædvane. Det var nemlig ikke alt gammelt, der stammede fra Gud, „vi skal se tilbage og ihukomme, hvad vildfarelser, vi har været udi, på det at vi skulle ikke falde tilbage i dem igen”. Nu vidste man bedre i denne evangeliets lyse dag. Man skulle holde sig til kongen, som var det kristne fællesskabs leder, og man skulle takke Gud for en sådan konge, der ikke blot ville deres saligheds bedste, men også deres legemers gavn og velfærd. Ganske vist havde bønderne dårlige erfaringer med kongens landsknægte, men hvis soldaterne ellers opførte sig ret i deres kald, havde også de godkendelse i Skriften. Nu gjaldt det om at „bede om fred, fred, fred, hvo vil ikke æde sit brød og have fred og ro hos sit bord, hvo vil ikke ligge med ro udi sin seng om natten”.\nAlex Wittendorff: Med Peder Palladius på visitats i Gyldendals og Politikens Danmarkshistorie, Olaf Olsen (red.), 2002-2005. Hentet 18. januar 2019 fra http://denstoredanske.dk/index.php?sideId=307506\nForrige afsnitSkoler og undervisni...Næste afsnitDen konkurrerende ma...\nNæste afsnitDen konkurrerende ma...\nForrige afsnitSkoler og undervisni...\nPeder Palladius. Billedets forlæg er hans nu ødelagte ligsten i V... © Nationalmuseet\nDommedag med herremanden og hans familie i første parket. Kalkmal... © Nationalmuseet\nDen betroede foged; han har en nøgle i hånden. Kalkmaleri fra omk... © Jens-Jørgen Frimand\nAntal visninger2264 besøg


##### Pik s stor det gr ondt – Pik s stor det passer ikke - Tiru.\nHome Pik s stor det gr ondt\nPik s stor det gr ondt\nUanset hvor stor en pik er, gr det ikke ondt hvis du er vd "tndt". Den er 26 cm lang og 19 cm i omkreds, bare s vi har det p det. Hvis din pikstreng er knkket vil du helt sikkert vide pik s stor det gr ondt det, for det gr meget meget ondt. Har dog ikke prvet s tyk en pik som du beskriver. Under sex udvider skeden sig nemlig helt naturligt, og s er der faktisk plads til en. Havde sex med min kreste i gr og s sprang min pikstreng.\nMin frste gang var med en fyr med en relativt stor pik, og jeg syntes. Det er p tide, at vi fr Pik-fitness p dagsordenen, og at du gr det til en vane i din hverdag. Nogle kvinder tnder p en stor pik, andre p en mindre, og nogle er helt. Jeg synes, der er flere tilflde af, at den kan blive for lille, s. Alt det, der gr sex virkelig sjovt. Find det bedste ln til dig, der lige str og mangler penge her og nu til. Alle kvinder synes, min pik er alt for stor, og de ved slet ikke, hvad de skal stille op med den. Lidt senere fortalte han mig s, at det var begyndt at gre ondt i penissen, efter den.\nSvar: Kre dig. Jeg kan forst p dit brev at pik s stor det gr ondt du har fundet en. Og selvom skeden bliver lngere. Find stillinger der passer - s det ikke gr ondt p hverken dig eller hende du er. Her forleden prvede jeg s. men opdage at nr min pik var stiv og jeg prvede. Det gr faktisk ondt, trods stor forsigtighed at f den ind. At s mange mnd i dag barberer deres knshr af, det anede jeg. Hans pik er for stor. S stor at det gr ondt at have. Hvis problemet er lngden p hans pik, alts s det gr ondt nr han Mor er. Er den bare for stor, og det hele gr ondt, s skal I ikke blive ved. Men jeg kan ikke, det gr for ondt.\nAt onanere og om onani. Angende strrelsen p din penis, s er den bestemt i den store ende. Det gr ofte ikke den store forskel om drengens pik er stor eller lille, det der har. Men fordi du beskriver smerterne s intense, vil jeg foresl, at du kontakter. Som jeg skriver i artiklen Drengens knsorganer, er der stor variation i penis' strrelse. Det kan vre en god hjlp at bruge glidecreme (hvis du ikke er s vd selv). Ud fra dit brev virker det p mig, som om at I taler godt sammen, s mske kan I. Lgen kan drne blodet ud af pikken ved hjlp af en kanyle, s rejsningen.\nHuu haaajj og hiv og sving den kan gre sjove ting. Han er meget hensynsfuld og sprger om det gr ondt og om det er dejligt osv. Tilstanden gr ondt, og typisk er forhuden hvet og stor. At din penis er stor, og at hun er stram kan betyde, at I skal bruge lngere tid p forspil og andre ting. Hvis jeg. gene, men pikken er alligevel ikke den knneste kropsdel, s det er ikke vrd at bekymre sig om. De store pikke gjorde ondt p mig men ikke de sm. Hans pik er for stor. S stor at det gr ondt at have samleje. Hvis du gr ondt, s trykker du for hrdt. Andre ord for penis. Diller. Tissemand. Den er m idag og det gr ondt hvis jeg rr ved den men er det ikke megete normalt? Kolleger til kvinde: 'Har du ondt i halsen - s skal du sutte noget pik'.\nNr musklerne arbejder, opstr der et stort krav til, at der kommer ilt ud i. Testiklerne er ikke altid lige store, de er hrde, og s gr det ondt helt op i. Men selvflgelig er der en chance, men det er ikke vrre. Jeg beklager, men nogen gange m de mindre pikke ogs have. Jeg er nsten 100 sikker p, at det er strrelsen, der gr, at det gr ondt. Det kommer sledes hverken til at gre ondt eller delgge din. Hej cyberhus hber i kan hjlpe.. Vi mistede begge vores mdom til hinand.\nstor, pik, det, ondt\nDet er vigtigt at man ikke bare maser sig ind i skeden, det kan gre ondt. Nr jeg er i seng med en pige gr det ondt p hende, fordi jeg er ret stor. For et par dage siden, begyndte det at gre rigtig ondt i mit penishoved. Der kan vre flere grunde til, hvorfor det kan gre ondt p en pige/kvinde og p en. Read more ...\nYbela on Sexede hornede billeder\nQudot on Doraemon hentai porno\nQiqygilo on Sorte piger fede fisse billeder\nTag p skadestuen. Hvis du har en meget langvarig rejsning og den begynder at gre ondt uden at. Jeg fr enormt ondt hver gang min kreste og jeg skal have samleje. S kort sagt er det strrelsen eller grelsen der betyder mest. Jeg havde fet det undersgt og. Read More ...\nKan ogs vre derfor, og han s derfor rammer din livmoder nr han. Men jeg har oplevet at nr jeg rider ham, gr det mere ondt fordi han. Ofte er lngden p en slap pik ikke s vigtig, fordi strrelsesforskellen udjvner. Read More ...\nJeg anede ikke, om den var s stor, for jeg havde slet ikke set den. En stor eller bred pik ger risikoen for, at det kan gre ondt p partneren ved. Forhuden er med til at bevare denne flsomhed, som har stor. De her sexstillinger er geniale (og gode), hvis han har en stor pik Read More ...\nRejsning ger ogs flsomheden i pikken, s en stiv pik er mere flsom end en. Dermed bliver du stille og roligt udvidet, og s vil det ikke gre lige s ondt, nr pikken skal ind. Mnd fantaserer ofte om at have en stor pik, fordi det giver dem en. Jeg havde. S bare srg for at i har et langt forspil og at han tnder dig ordenligt. Det gr ondt, nr han skal ind i mig, og han kan heller ikke g srlig dybt. Jeg har fundet ud af at det gr ondt nede omkring penis roden og nogle gange. Hver gang du alligevel str og tisser, s start med at lave en leg med dig selv, hvor du kniber tissestrlen. Forhuden glider da ikke s let mellem dine fingre.\nHvis han har en stor pik, og du er ganske gennemsnitlig i strrelse, s vil det. Hvis du ikke kan f forhuden trukket helt tilbage, nr penis er slap, s er det. Det er blevet er stort problem for mig. Det er et blevet et strre og strre problem fordi det faktisk gr ondt, fordi det strammer meget. Jeg har ikke fr set eller hrt om grnlig nakkeost, s jeg tnkte at det var vigtigt. Har du nogensinde mdt en mand, der mente, at hans pik var for stor til kondom? Smertefuld vandladning dvs. det gr ondt, nr. Om hvorfor vi br stoppe glorificeringen af store peniser. Men alts han er virkelig den sknneste og jeg tnder helt vildt p ham, men hver gang vi har sex gr det simpelthen for ondt. Hvad gre jeg min pik er lidt for stor til min kreste og hun har ondt efter i 2 dage.


Estée Lauder Double Wear Foundation - 3c2 Pebble → Køb billigt her\nDouble Wear foundation er det mest ikoniske og populære makeup produkt fra Estée Lauder. Den er super populær og et 'must have' i enhver makeupsamling. Her får du virkelig en god foundation, der dækker og forbliver perfekt hele dagen. Den virker problemfrit og naturlig. Denne foundation kan holde til varme, høj fugtighed og anstrengende aktiviteter. Den skifter ikke farve, skaller ikke og smitter ikke af på tøj. Brug Double Wear foundation for at opnå et look, der holder hele dagen - uden at skulle fixe det. Denne foundation er perfekt til normalt, kombineret og olieret hud.\nFakta om Estée Lauder Double Wear Foundation - 3C2 Pebble\nVi vægter sikkerhed utrolig højt, da det er noget af det vigtigste at have styr på, når vi snakker e-handel. NETS er din garanti for sikker betaling på Internettet, og vores løsning for Internetbetaling er selvfølgelig NETS godkendt. Så online køb og betaling hos Gucca.dk er altid forbundet med fuld sikkerhed.\nVi giver altid 30 dages returret, og det er uagtet hvilket produkt, du har købt hos os. Det betyder kort sagt, at hvis du fortryder dit køb, eller af anden grund alligevel ikke måtte ønske varen, kan du sende din vare tilbage til os, herefter refunderer vi dine penge. Det er altid en god ide at kontakte os, før du vælger at returnere din vare.\nSom kunde hos Gucca, skal du naturligvis ikke vente for længe på dit produkt. Vi leverer sikkert og hurtigt. Det medfører, at hvis varen er på lager, så modtager du den indenfor 1-2 hverdage. Du er aldrig i tvivl om lagerstatus, for det fremgår inden, du bestiller varen. Er du alligevel i tvivl om et produkts lagerstatus eller leveringstiden, så tag fat i os.\nI vores shop har du mulighed for at vælge mellem flere forskellige typer betalingsmetoder. Du bør selvfølgelig gøre brug af den betalingsform, der passer lige til dig. Lige meget hvad du gør brug af, kan du føle dig sikker og tryg, når du handler hos Gucca.dk Alle vores betalingsmuligheder finder du her. Bemærk at pengene først hæves fra din konto, når vi sender varen til dig.\nOpstår der tvivl eller spørgsmål til Gucca.dk, så tag endelig fat i os. Vi er ved telefonerne og besvarer e-mails mellem klokken 10-15 alle hverdage, og vi er altid parat ved telefonen eller på e-mailen til at yde dig profressionel hjælp i godt humør og med et smil på læben.\nNår du har købt dine produkter, kan du tracke forsendelsen, og vide hvornår du modtager den. Når du modtager din kvittering, efter betaling er foretaget, så får du mulighed for at få adgang til din egen ordreside. På ordresiden har du mulighed for at følge med i, hvornår dine varer er blevet afsendt. Når vi har sendt din pakke, vil du samtidig modtage en e-mail fra os.\nDin anmeldelse af Estée Lauder Double Wear Foundation - 3C2 Pebble\nproduct_stock_no product_offer_no product_preorder_no\tproduct_buyable_no product_group_diverse path_diverse_forside path_diverse_andreafdelinger path_diverse_makeup path_diverse_flydendefoundation path_diverse_estéelauderdoublewearfoundation3c2pebble


Karrierefejlen du ikke ved du begår | ChriChri\nKarrierefejlen du ikke ved du begår\nDine kollegaer og din chef tænker måske på dig som kontorets sludrechatol. Når du skal pitche en opgave på arbejdet, lægger du så mærke til at folk ser på uret eller deres telefon? Når du snakker over frokosten, hører du så dig selv plapre videre inden dine kollegaer overhovedet får færdiggjort deres sætning? Ryger du ofte ud på et sidespor når du fortæller en historie og svarer folk blot ”jaja” når du taler? Så er du formentlig en overtaler.\nLÆS OGSÅ: Sådan lander du drømmejobbet\nDe fleste som taler for meget, opfatter det som regel ikke. Uanset om det skyldes usikkerhed eller en hel masse selvtillid, så kan denne kvalitet være karriereselvmord – Især som verden er nu. I dag er der fart over feltet, uanset hvilken branche du befinder dig i og det betyder at man ikke længere har tid til at sidde en time til et møde for at få svar på et par spørgsmål. Dine overordnede begynder måske at undgå dig, hvis du bruger en stor del af deres tid, hver gang de ser dig og hvis du heller ikke kan få dine pointer frem hurtigt til et møde, kan det være at de begynder at tvivle på dine evner til at kommunikere med store kunder. Til et jobinterview kan det også være en ulempe da du måske får snakket så meget at du slet ikke får fremlagt de kvalifikationer du har og derfor ikke får jobbet.\nDet lader til at kvinder er dem der betaler den højeste pris for at være et sludderchatol. Ifølge undersøgelser viser det sig at kvinder i høje stillinger som taler meget på arbejde bliver opfattet som mindre kompetente end mænd. I en anden undersøgelse viser det sig også at folk har en tendens til at ville belønne mænd som er snaksalige, ved enten at ansætte dem eller give dem mere ansvar i virksomheden, mens kvinder der taler meget bliver set som dominerende og anmassende. For enhver medarbejder er evnen til at kunne give klare informationer hurtigt dog en god værdi. Vi har derfor samlet nogle gode råd for at du kan undgå at blive set som et snakkehoved.\nBliv bevidst omkring dig selv\nSe efter de røde flag nævnt ovenfor. Det vigtigste tegn på at du snakker for meget, er hvis du taler ind over en anden som taler. Det kan være en fatal fejl hvis det sker under et jobinterview, og det kan ligefrem blive karriereselvmord hvis det sker ofte med din chef. Desuden kan det gøre at dine kollegaer vælger dig fra hvis du bliver kendt for at afbryde og hijacke samtalen. Sørg for at være opmærksom – i det mindste i et par dage – på hvordan andre reagere når du taler. Hvis dine kollegaer går med på dine sidespring når du ryger væk fra emnet, så klarer du dig sikkert okay, men hvis du taber dem undervejs i historien, så skal du passe på.\nLæg mærke til kropssprog\nDu er formentlig ved at miste din kollegaer, hvis personen pludselig begynder at kigge på uret, stopper med at holde øjenkontakt eller ikke længere tager noter (hvis det er under et møde) – Her er det vigtigt at du ender din historie hurtigst muligt!\nSkriv et manuskript\nDer er helt sikkert tidspunkter hvor du skal fortælle noget om dig selv. Derfor kan det være en god idé at skrive et lille manuskript på et 90 sekunders langt svar (og huske det) så du er forberedt når chefen til et jobinterview eller nogen til et netværksevent siger ”nå, fortæl mig lidt om dig selv”. Det samme gælder hvis du skal holde en tale eller lave en præsentation – Find de vigtigste punkter og hold dig til dem. Hold samtidig øje med de ovenstående tegn for at se om du skal finde tilbage på sporet undervejs. Detaljerne er vigtige i en historie, men prøv at skrue det ned til de vigtigste. Det irriterende ved at være et sludrechatol er også den tilhørende egenskab hvor man fortæller alt for mange detaljer i en historie, som hurtigt bliver for personlige, irrelevante eller upassende.\nLÆS OGSÅ: Hvorfor skal man være robust for at trives på arbejdsmarkedet?\nDu skal ikke bare lytte overfladisk mens du venter på du kan sige noget. Lyt godt efter til hvad der bliver diskuteret og stil relevante opfølgende spørgsmål. At vise sine lytteevner kan være mindst ligeså vigtige som at vise sine talegaver. Hvis personen du taler med føler at du er oprindeligt interesseret i det du fortæller, vil de tænke positivt om dig.\nGreen & Golden – 6 fund til dit hjem\nDit horoskop: Januar\nMin skamfulde kropshistorie, er min sande motivation for en ny


Hvordan laver Ginger Chicken Opskrift? | Stilarter på livet - Skønhed og mode - 2021\nHvordan laver Ginger Chicken Opskrift?\nEr du nogen der virkelig er glad i kylling og dens forskellige opskrifter? Elsker du virkelig kylling og vil bryde monotoni i at spise det samme præparat hver dag igen og igen? Hvis du er på udkig efter nogle lækre opskrifter til at lave kylling sammen med at genoprette mange fordele, så er det bedste at kende opskriften på Ginger Chicken. Det er en af de mest aromatiske og godt flavored kylling opskrifter, som du kan prøve en gang imellem for at forbedre smagsløgene.\nFor dem, der elsker at lave mad og prøve nye opskrifter, er en af de bedste muligheder at prøve ginger kylling. Her er en af de nemmeste måder, hvorpå du kan lave mad, denne vejledning nedenfor hjælper dig ud. Alt du behøver at gøre er at følge instruktionerne på en velplanlagt måde.\nSe mere: Kylling Sandwich Opskrift\nDu søger efter en nem ginger kylling opskrift slutter her. Her er trin-for-trin instruktion om, hvordan man laver gingerkylling.\nKylling: 1 kg.\nTomater: 4, hakket.\nMælk: 1 kop.\nRød Chili Pulver: 1 spiseskefuld.\nGurkemeje Pulver: ½ teskefuld.\nKoriander Frø: 1 spiseskefuld.\nGinger: 100 gram skåret i slidser.\nOlie: ¾ kop.\nI en blender tilføj tomaterne såvel som mælken og bland den i en glat og fin væske, samtidig med at der ikke sikres tomater. Lad det være i blenderen for øjeblikket og fortsæt til resten af arbejdet.\nTag olien i en kogepande og varm det godt.\nRør kyllingen i gryden, indtil den bliver hvid.\nNår kyllingen er stegt, tilsæt noget salt efter smag og hold koge indtil kyllingen bliver lyserød.\nTilsæt den røde chili pulver, koriander frø pulver og gurkemeje pulver til kyllingen. Sørg for at du blander det godt for at sikre, at kyllingen er overtrukket godt med krydderierne.\nNår dette er gjort, skal du tilføje tomat- og mælkeblandingen til kogepoten.\nI den samme blender tilsættes ca. 1½ kopper vand og blander vandbrønden for at tage al pastaen af tomat og hæld vandet i kogepanden.\nNu øge flammen og bring hele karryen i kog. Tilsæt den hakkede ingefær. Dæk kogepanden og lad den koge yderligere på medium varme.\nSørg for at du rører kyllingen fra tid til anden for at forhindre den i at holde fast i basen, indtil kyllingen er kogt sammen, og blandingen er fortykket lidt.\nFjern nu dækslet og lad det ekstra vand blive reduceret ved at koge det på høj flamme. Du vil vide, om curryen bliver kogt, når saucen fortykkes godt, og olien forlader blandingen. Denne ingefær kylling er klar til at blive serveret varmt.\nSørg for at du serverer ingefærskurven med enten brød eller med hot rotis som en perfekt kombination.\nSe mere: Kyllingevinger Opskrift\nSørg for, at kyllingen er varm, når den serveres, ellers vil den miste sin smag og aroma.\nRotis eller brød skal også være varmt for en forbedret smag. Dette ville være en ideel kombinationsboks til ingefær kylling curry indisk stil.\nBrug frisk kylling til at forberede fadet til godt helbred og ideel smag.\nSørg for at du altid er der for at holde kyllingen kogt, når den koger for at undgå enhver brændende lugt eller smag.\nGinger bør også være friske for at få den maksimale aroma og smag af dette vidunderlige naturlige produkt.\nDe kyllingestykker du vælger gør forskel på smagen. Kyllingelårene er smagere end brystet og saftige også. Du kan også vælge at gøre dette med udbenet kylling, og du skal bare følge denne nemme ginger kylling opskrift. Alternativt kan du parre denne skål med stegte ris eller nudler. Denne velsmagende ingefær kylling er must-make parabol, og det tager mindre end 45 minutter. Det er frisk, sund og smagere end din lokale kinesiske takeaway.\nSe videoen: Ginger Chicken Recipe - Homemade Ginger Chicken Curry - Chicken Recipe - Smita (Januar 2021).\nCopyright 2021 \_ Vigtigste \_ Hvordan laver Ginger Chicken Opskrift?


Køb Båndstrammer online i dag → Se udvalget her\nEn hel del byggecentre foreslår nu alverdens billige leveringsmåder til båndstrammer. Det mest almindelige er efterhånden levering til et afhentningssted, hvor du kan afhente produkterne når du har tid. Muligheden er nemlig temmelig ukompliceret, og typisk tilmed den billigste mulighed for fragt.\nDu kan også forsøge at få pakken leveret til din hjemmeadresse eller ud på din arbejdsplads. Leveringsmetoden viser sig af og til en lille smule mere bekostelig, men derudover i høj grad simpel ved køb af båndstrammer online. Den mest billige leveringsmetode vil dog utvivlsomt være at du selv henter produkterne, men dette står og falder med at du lever med kort afstand til internet firmaets butikker, fx Jem og Fix, Harald Nyborg, Silvan eller Bauhaus.\nLeveringsdygtigheden på båndstrammer kan vise sig at være særligt væsentlig når du står og skal bruge produkterne om et øjeblik, så herved er det rigtig centralt at man besigtiger det anslåede leveringstidspunkt på båndstrammer. De fleste netbutikker – eksempelvis Silvan, Jem og Fix, Bauhaus og Harald Nyborg – præsterer billig 1 hverdags levering på en række af deres produkter online, men vær opmærksom på at det er betinget af at du bestiller tidligere end et givent tidspunkt, så de højst sandsynligt kan nå at få produktet afsted forinden de pakkeansatte har fyraften.\nFlere byggeforretninger sikrer gratis fragt på båndstrammer online, men oftest kun når man aftager for en fastsat sum. Ellers kunne du snuppe den billigste slags levering, der mange gange vil blive at få fragtfirmaet til at køre din pakke til et udleveringssted.\nFlere kæder udlover afhentning hvor du handler billig båndstrammer derhjemme og afhenter i byggemarkedet. Eksempelvis 10-4, Bauhaus, Jem og Fix, Stark, Bygma, Harald Nyborg, Davidsen, XL-Byg og Silvan. De tildeler for eksempel afhentning af båndstrammer i følgende områder:\nIkast, Ishøj, Varde, Frederikshavn, Ølstykke, Herlev, Aalborg, Stenløse, Esbjerg, Kolding, Solrød Strand, Nyborg, Albertslund, Ringsted, Nærum, Herning, Lyngby, Risskov, Lystrup, Vejle, Frederiksberg, Silkeborg, Hedensted, Næstved, Kalundborg, Odder, Horsens, Allerød, Brønshøj, Tårnby, Vallensbæk, Roskilde, Nørresundby, Gladsaxe, Holbæk, Odense, Frederikssund, Brabrand, Hillerød, Dragør, Haslev, Randers, Taastrup, Hobro, Farum, Svendborg, Birkerød, Hvidovre, Ballerup, Hørsholm, Højbjerg, Struer, Brønderslev, Glostrup, Sønderborg, Thisted, Haderslev, Værløse, Vanløse, Tilst, Frederiksværk, Charlottenlund, Viborg, Slagelse, Skive, Rødovre, Lillerød, Fredericia, Virum, Aarhus, Helsingør, Korsør, Rønne, Gentofte, Vordingborg, Skanderborg, Køge, Grenaa, Nakskov, Holstebro, Hjørring, Nykøbing Falster, Middelfart, Aabenraa, Rudersdal, Brøndby, Greve, Valby, Jyllinge, Hedehusene, Søborg, Kokkedal, København, og Åbyhøj, .\nClick-and-collect af båndstrammer er muligt i samtlige områder af Danmark: Sjælland (Sydsjælland, Vestsjælland, Falster, Amager, Nordsjælland, Hovedstaden, Østsjælland, Midtsjælland, Bornholm, Lolland), Fyn (Sydfyn, Vestfyn, Midtfyn, Østfyn, Nordfyn) og Jylland (Syddanmark, Sønderjylland, Østjylland, Midtjylland, Nordjylland, Sydjylland, Vestjylland).\nNår vi kigger i søgedata fremstår det markant, at mennesker ofte søger bl.a. båndstrammer tilbud og køb båndstrammer. Derudover ser vi som regel netshoppere lede efter eksempelvis billig båndstrammer, båndstrammer priser og båndstrammer online, plus de gængse byggekæder som Stark, XL-Byg, 10-4, Harald Nyborg, Jem og Fix, Silvan, Bygma, Davidsen og Bauhaus.\nFå den bedste pris på båndstrammer\nDet er efterhånden meget hensigtsmæssigt for almindelige dødelige at søge sig frem til tilbud på billige båndstrammer online på tværs af internet foretagender, og med det motiv har utallige forhandlere på nettet været presset til at at mindske prisniveauet på båndstrammer helt i bund, og ydermere sikre billig levering.\nTrods dette kan det stadigvæk være gavnligt at besigtige visse internet handler efter udsalg og tilbud på båndstrammer online forud for at du placerer ordren, så man er skråsikker på at opnå den mest billige pris. Se ikke kun på de kendte byggecentre som Silvan, Bauhaus, XL-Byg, Harald Nyborg, 10-4, Bygma, Jem og Fix og Stark.\nDu skal ikke desto mindre være opmærksom på, at ifald en e-handler tilbyder billige båndstrammer online for en pris som virker utopisk beskeden, bør det undertiden være et signal om en bedragerisk internet forhandler. Kortkøb er ikke desto mindre dækket ind under en forordning, der værner køberen imod bedrageriske internet forretninger.\nVi tilråder generelt kortkøb eller mobilbetaling. Som en anden løsning kunne du benytte en billig afbetalingsløsning fra for eksempel ViaBill, ifald du hellere vil dække regningen på båndstrammer af flere omgange. Det foreslåes som regel i niche netbutikker, men ikke de store byggekæder som for eksempel Stark, Harald Nyborg, Silvan, Jem og Fix, Bauhaus, Davidsen, 10-4 og Bygma.\nNår man kigger i data står det tydeligt, at folk mange gange søger efter eksempelvis båndstrammer online og båndstrammer tilbud. Vi ser derudover jævnligt internet shoppere kigge efter blandt andet billig båndstrammer, båndstrammer priser og køb båndstrammer.\nTrustpilot resulterer i relativt fornemme løsninger til at kigge nærmere på en stor portion forhenværende konsumenters vurderinger og herved anbefaler vi, at du eksaminerer netbutikkens vurderinger forinden du placerer din ordre på billige båndstrammer online.\nFacebook yder ydermere relativt gode chancer for at få indblik i online shoppens kundefokus. Her er der nogle internet handler hvor du kan ytre en kritik af ordreforløbet, som også burde udnyttes til at få et indblik i tilfredsheden hos kunderne.\nFør nogen køber billige båndstrammer online hos en butik behøver man principielt løbe igennem virksomhedens regler, dog er det tit ikke særlig sjovt, i særdeleshed på de kendte byggemarkeder som Bauhaus, 10-4, Davidsen, Bygma, Silvan, Harald Nyborg, Stark, XL-Byg og Jem og Fix.\nEt alternativ kunne være at granske om internet forhandleren er verificeret af e-mærket, siden det almindeligvis er en indikator for at online butikken tilslutter sig gældende dansk lovgivning, foruden at shoppen nu og da overværes af eksperter der har nøje kendskab til reglerne.\nDerudover giver det dig mulighed for at få hjælp, såfremt du forvoldes problemer med din ordre på båndstrammer. Udover dette er det prisværdigt at køberen er obs på de primære vilkår der har betydning for købet af båndstrammer online, som for eksempel den byttepolitik internet webshoppen benytter.\nI den sammenhæng er det tilmed essesentielt, at man når som helst gemmer sin faktura e-mail, således man fremadrettet kan bevise bestillingen af båndstrammer, uafhængig af om man har handlet ved XL-Byg, Jem og Fix, Davidsen, Harald Nyborg, Silvan, Bygma, Bauhaus, Stark eller 10-4.


I brug igen..........: 2011\nIndsendt af Gitte Jensen kl. fredag, oktober 28, 2011 3 kommentarer:\nIndsendt af Gitte Jensen kl. torsdag, oktober 13, 2011 5 kommentarer:\nSå kom posten med endnu en pakke til mig :)\nJeg vandt kulørte og dekorative hæklenåle hos LLL & Co, som nu har fået en facebook side. Også her var jeg lige ved ikke at få dem, da Lisbet ikke modtog mine mails. Hvorfor ved jeg ikke, men det lykkedes til sidst.\nDe er af aluminium og der er 12 styks i størrelsen 2,0 til 8,0. Med var også 5 hæklede flotte blomster i bomuld. Jeg har allerede taget hæklenålene i brug og de er lækre at bruge.\nIndsendt af Gitte Jensen kl. onsdag, oktober 12, 2011 3 kommentarer:\nIndsendt af Gitte Jensen kl. tirsdag, oktober 11, 2011 1 kommentar:\nIndsendt af Gitte Jensen kl. lørdag, oktober 01, 2011 6 kommentarer:


Celebrity krydstogt | Caribien, New Orleans og karneval\nGastronomisk helpension og Classic drikkepakke om bord\nFantastisk rejse, som starter med oplevelser i solrige Florida. Dernæst krydstogt med Celebrity Reflection til smukke strande i det Caribiske Hav og 3 dage i New Orleans - endda under det berømte Mardi Gras karneval! Om bord venter udsøgt service, lækker helpension, drikkevarer og udsigt fra jeres balkonkahyt.\nFor jer der sætter pris på stilren luksus og forkælelse\nCelebrity Reflection er et af Celebrity Cruise Lines nye generation af 4+* skibe. Designet er lækkert, stilrent og i en klasse for sig. I bliver forkælet med lækre måltider, musik, teater og velvære, og I skal nyde havudsigten fra sengekanten fra jeres balkonkahyt. Desuden har I Classic drikkepakke inkluderet, som kan opgraderes til Premium drikkepakke.\nGlæd jer også til at flyde i poolområdets store daybeds og til besøgene i Mexico, Caribien og New Orleans.\nØnsker I at bo i en indvendig kahyt er prisen ca. 7.000-10.000 kr. mindre per person. Kontakt os for dagspris.\nI starter med 2 nætter på Eden Roc 4* på Miami Beach, og kommer på tur rundt i byen samt til The Everglades. I Miami kan I nyde de smukke art deco-huse og trimmede palmetræer. I kan også shoppe i den hyggelige gågade Lincoln Road Mall og kigge på folkelivet på Ocean Drive.\nPå krydstogtet sejler I først til karneval i New Orleans, dernæst George Town på Grand Cayman og Cozumel i Mexico, inden I vender tilbage til Fort Lauderdale.\nInkluderet udflugt i miami\nVi inkluderer en udflugt, hvor I både får en byrundtur og oplever en af Floridas største attraktioner - The Everglades. Det enorme vådområde byder på et rigt fugleliv og alligatorer. I sejler i en airboat, så I får den største oplevelse med det bedste udsyn.\nNår Celebrity Reflection sejler gennem det Caribiske Hav, kan I sidde på jeres balkon og nyde udsigten til det azurblå hav.\nGeorge Town på Grand Cayman i Caribien byder på den vidunderlige Seven Mile Beach, der er en af verdens bedste og med utallige vandsportstilbud. I kan også tage på snorkeltur til Stingray City, hvor I kan svømme med de enorme elegante pilerokker. Eller gå blot en tur gennem byen og nyd de mange små, hyggelige butikker, markeder og cafeer.\nPå den skønne mexicanske ø, Cozumel, kan I kan svømme rundt blandt papegøjefisk og skildpadder ved verdens næststørste koralrev. Her er fine strande, Maya-ruiner, skønne restauranter og god shopping til lave priser.\nVelkommen til Louisiana og New Orleans, hvor jazzen blev født. Fra køkkenerne kommer en duft af creole og cajun, musikken strømmer ud fra gader og stræder, og floddampere sejler på Mississippifloden. Besøg bl.a. French Quarter, som er den mest livlige del af New Orleans, og den berømte Bourbon Street.\nGlæd jer til det farverige og festlige Mardi Gras karneval, der er højdepunktet i de 3 dage, skibet ligger i byen. Hele byen syder af livsglæde. Tag del i løjerne, køb en maske, kostume eller en paryk, dans, følg med strømmen eller i kølvandet på de flotte optogs vogne.\nCelebritys private tribune\nØnsker I at se karnevallet lidt fra oven, så skal det ske fra en tribune. Fra Celebrity's private tribune på St. Charles Avenue er udsigten fantastisk, stemningen i top, og der er større chance for at gribe en perlekæde, et truthorn, en lysstav eller nogle af de utallige andre farverige ting, der bliver kastet fra vognene. Der er rift om pladserne, hvorfor vi anbefaler hurtig bestilling, som skal ske direkte hos rederiet.\nØnsker I ekstra dage i Miami, Fort Lauderdale - eller måske et helt andet sted? Kontakt vores krydstogteksperter, som gerne hjælper.\nDen nøjagtige rute, varighed og pris afhænger af den afrejsedag, I vælger. Klik på den enkelte rute nedenfor og tal med vores rejserådgivere, hvis I har brug for yderligere hjælp til valg af afrejsedag og kahytstype.\n05.02.21 Vis rute 14 37.000-39.000\nTransport fra lufthavn til hotel i Miami\n2 nætter på Eden Roc 4*, Miami Beach\nOplevelse: Byrundtur og Everglades i airboat\n10 nætters krydstogt i balkonkahyt på Celebrity Reflection eller Celebrity Equinox\nUdflugter under krydstogtet kan bestilles hjemmefra eller direkte om bord på Celebrity Reflection Afregnes direkte med rederiet\nPlads på tribunen under karnevallet i New Orleans bestilles og betales hos rederiet\nØvrigt, som ikke er nævnt under inkluderet


Sønderborg Teaterforenings vedtægter\nForeningens navn er Sønderborg Teaterforening.\nForeningens hjemsted er Sønderborg.\nForeningen er medlem af Danmarks Teaterforeninger.\nTeaterforeningens formål er at administrere teaterlovens bestemmelser med henblik på at fremme og udvikle teaterinteressen med et alsidigt, professionelt repertoire bestående af klassisk, nutidigt og eksperimenterende scenekunst.\n§ 3. Opgaver\nTeaterforeningen skal tilbyde forestillinger til børn og voksne.\nTeaterforeningen bør formidle aktiviteter vendt mod børn, unge og grupper, der sjældent kommer i teatret.\nTeaterforeningen kan medvirke til at skabe tilfredsstillende bygningsmæssige og tekniske forhold for og ved teatret.\nTeaterforeningen kan medvirke til at skabe og øge interessen for andre kulturelle aktiviteter.\nTeaterforeningen samarbejder med Center for Kultur i Sønderborg Kommune\nTeaterforeningen kan indgå i samarbejde med andre teaterforeninger eller udbydere af scenekunst.\n§ 4. Medlemskreds\nSønderborg Teaterforening er et interessefællesskab af brugere af teaterforeningens forestillinger. Enhver, der har løst billet til en forestilling i foregående eller kommende sæson, kan deltage i fællesskabet. Deltagelse i fællesskabet er kontingentfrit.\n§ 5. Indtægter\nTeaterforeningen har indtægter fra billetsalg, salg af annoncer samt tilskud fra stat og kommune. Der kan indgås aftaler om sponsorater.\nOrdinær generalforsamling afholdes hvert år inden udgangen af september måned. Indkaldelse sker ved bestyrelsens foranstaltning med mindst 14 dages varsel, ved bekendtgørelse i et lokalt dagblad eller en lokal ugeavis, samt på foreningens hjemmeside på internettet. Indkaldelsen skal angive dagsorden samt mødested og mødetid. Forslag fra deltagere i fællesskabet om emner, der ønskes behandlet på en generalforsamling, skal tilsendes formanden og være denne i hænde senest den 31. august.\nEkstraordinær generalforsamling afholdes, når bestyrelsen bestemmer det, eller når mindst 50 stemmeberettigede i interessefællesskabet fremsætter skriftlig begæring herom til bestyrelsen med angivelse af forslag, der ønskes behandlet. Den ekstraordinære generalforsamling skal afholdes inden 4 uger efter begæringens modtagelse, og indkaldelsen skal ske med mindst 8 dages varsel på samme måde som ved indkaldelse til ordinær generalforsamling.\n3. Det reviderede regnskab for seneste regnskabsår fremlægges til godkendelse.\n4. Budget for den nye sæson fremlægges til efterretning.\n§ 8. Beslutninger og stemmeret på generalforsamlingen\nBeslutninger på generalforsamlingen træffes ved almindelig stemmeflerhed blandt de fremmødte stemmeberettigede jfr. dog § 13. Stemmeberettiget er enhver over 18 år, der har løst billet til en forestilling i foregående eller kommende sæson. Der kan ikke stemmes ved fuldmagt.\nVed valg til bestyrelsen må der højst stemmes på et antal medlemmer, svarende til antallet af personer, der skal vælges til bestyrelsen.\nTeaterforeningens bestyrelse består af mindst 7 medlemmer og højst 9 medlemmer.\nBestyrelsen søges sammensat af personer, der teaterfagligt, kunstnerisk, ledelsesmæssigt, markedsføringsmæssigt, økonomisk og juridisk dækker teaterforeningens behov.\nBestyrelsesmedlemmer vælges af generalforsamlingen for en treårig periode ved simpelt stemmeflertal.\nPå hvert års generalforsamling er 3 medlemmer på valg.\nBestyrelsen konstituerer sig med formand, næstformand, kasserer og regnskabsfører samt sekretær.\nBestyrelsen fastsætter sin forretningsorden.\nBestyrelsen er beslutningsdygtig, når mindst 5 medlemmer deltager.\nBeslutninger træffes ved simpelt stemmeflertal. Ved stemmelighed er formandens stemme afgørende.\nOver forhandlingerne føres beslutningsprotokol, der sendes til alle bestyrelsesmedlemmer og revisorer.\nBestyrelsen har ansvaret for tilrettelæggelse og gennemførelse af det årlige teaterprogram.\nBestyrelsen fastsætter de til enhver tid gældende billetpriser inkl. evt. rabatordninger, herunder også priser gældende for billetter købt i abonnementsordning.\nBestyrelsen kan ansætte lønnet medhjælp i henhold til budget.\n§ 11. Hæftelse\nTeaterforeningen tegnes af formanden eller i dennes fravær næstformanden. Bestyrelsen kan meddele prokura.\nFor de af bestyrelsen på teaterforeningens vegne indgåede forpligtelser hæfter alene teaterforeningens formue.\n§ 12. Regnskabsår\nTeaterforeningens regnskabsår er fra 1. juli til 30. juni. Bestyrelsen forvalter teaterforeningens midler. Bestyrelsen har ansvar for udarbejdelse af regnskaber og budgetter og disses rettidige indsendelse til de tilskudsgivende myndigheder.\nRegnskabet revideres af en statsautoriseret revisor, registreret revisor eller anden godkendt revision. En godkendt revision kan være et valgt revisorat bestående af to valgte medlemmer af foreningen. Revisor/revisorat vælges for et år ad gangen.\n§ 13. Ændring af vedtægter\nBeslutning om ændring af vedtægter kræver et kvalificeret flertal på mindst 2/3 af de stemmeberettigede deltagere i generalforsamlingen.\nBeslutning om teaterforeningens opløsning kan kun træffes, når det sker på to på hinanden følgende generalforsamlinger med mindst 14 dages mellemrum. Vedtagelse på første generalforsamling kræver et kvalificeret flertal på mindst 2/3 af de fremmødte stemmeberettigede. Ved 2. generalforsamling kræves alene simpelt flertal til vedtagelse af forslaget.\nVed foreningens ophør eller ophævelse skal dens formue anvendes i overensstemmelse med foreningens formål, idet fordelingen foreslås af den siddende bestyrelse og godkendes af Center for Kultur i Sønderborg Kommune.\nVedtaget på generalforsamlingen 10. september 2014.\nBra kondition är också positivt när det gäller att ha sex.\nCloudflare Ray ID: 59459e27cd7f3268 • Your IP : 193.\nDas soll einige Frauen ja total anmachen.\nDesiderato e mezzo alle misurazioni.\nGenerisk Viagra i Danmark Online.\nSounds good to me, but I’ll let you be the judge.


De nominerede er fundet til Skriverprisen | BogMarkedet\nDe nominerede er fundet til Skriverprisen\nEn gang om året tildeles Skriverprisen en forfatter, men der er sket noget nyt i år.\nSkriverprisen er Undervisningsministeriets årlige pris til forfattere, der skriver læsevenligt. Den første modtager af prisen var Esther Skriver i 1955, og hun lægger navn til prisen. Formålet med prisen er at hædre den danske litteratur, der har fokus på læsevenlighed ud fra sproglig, indholdsmæssig og grafisk tilgængelig.\nDerfor kan prisen på de 25.000 kr. tildeles et enkelt værk, en serie eller et helt forfatterskab, der inkluderer et værk, som er udkommet siden seneste frist for indsendelse af værker til prisen, som var den 12. juni 2018.\nDet er en pris, der uddeles én gang om året, men der er sket noget nyt, fordi i år er der tre nominerede. De forhenværende år er det ikke blevet annonceret, hvem de nominerede er, der er i stedet blot blevet fundet en vinder og meddelt det. De nominerede vil fremadrettet blive bekendtgjort cirka en måned før Bogforum.\nDe tre nominerede i år er:\nSarah Engell og Lilian Brøgger for den grafiske roman 'Fuglemanden” (Forlaget Carlsen)\nMarie Duedahl for bogen 'Sne' (Forlaget Straarup & Co)\nTroels Gollander for sit forfatterskab\nDet er skriveprisudvalget, der udvælger de nominerede ud fra udgivelser af litteratur, der er blevet indsendt siden den seneste frist. Dette udvalg består af fem medlemmer:\nEt medlem udpeget af Dansk Forfatterforening\nEt medlem udpeget af Landsforeningen af Læsepædagoger\nEt medlem udpeget af Ordblinde/Dysleksiforeningen i Danmark\nEt medlem udpeget af Danmarks Lærerforening\nEt medlem udpeget af Pædagogisk LæringsCenterForening\nBlandt de tre nominerede finder udvalget én vinder, og uddelingen af prisen vil som altid finde sted på Bogforum den 26. oktober, på Bellascenen kl. 14.00, hvor prisen vil blive overrakt af Undervisningsministeren, Merete Riisager.


Svigtende afsætning af jomfruhummer - FiskerForum\nTags: Hummerfiskeri, Jomfruhummer, Kattegat, Strandby\nDe sydeuropæiske hovedaftagere af nordjysk hummer, Spanien og Grækenland fravælger i stigende grad den luxuriøse spise fra Kattegat.\nDer fanges ellers mange hummer for tiden, men med et stort udbud på marked og en vigende efterspørgsel, er aldrig den bedste sammensætning når prisen sættes.\nAuktionsmester Jesper kajgaard fra Strandby Fiskeauktion fortæller da også til P4.Nordjylland, ”prisen på jomfruhummer er faldet med tyve procent siden sidste år, hvor prisen lå på 80,- kr. pr. kg til en nuværende kilopris på kun 65,- kr. i indeværende år.”\nOveni det dalende salg af hummer viger afsætningen ligeledes katastrofalt, forøvrigt til de samme markeder, på et ligeledes traditionelt godt sælgende produkt, som skærising.\nSå krisen i Euro zone landene omkring middelhavet, rammer nu også de nordjyske fiskere hårdt, fortæller formanden for Strandby Fiskeriforening, Claus H. Pedersen til P4.Nordjylland. ”Markedet er vigende – det er ellers dem der gerne skulle købe store mængder af vores fisk, men efterspørgslen svigter.”\nPrevForrige nyhedTing tager tid – men..\nNæste nyhedØstersø-fiskerne får færre torsk – men flere sild og rødspætterNext


Hyundai i40 - Lige nu har vi 40 brugte til salg\nLæs mere om Hyundai i40 her\nFrederik Patzlaff | 20-12-2012\nHyundai I40 er flagskibet hos den sydkoreanske bilproducent, og den er egentlig en videreudvikling af den tidligere Hyundai Sonata. Altså er Hyundai I40 en stor mellemklasse bil præcis som den tidligere Sonata, som op igennem 00’erne blev mere og mere populær i Danmark.\nI 2011 skiftede Hyundai Sonata så navn til Hyundai I40 som et led i Hyundais I-serie, der blandt andet også tæller Hyundai I10 og Hyundai I20. Som navnet antyder, så er Hyundai I40 den største i serien, og den kan både købes som sedan og stationcar.\nHyundai I40 havde i forbindelse med introduktionen en rigtig favorabel beskatningsværdi, hvilket gjorde den forholdsvis populær som firmabil. Derfor er der også et fornuftigt udbud af brugte Hyundai I40 på brugtbilsmarkedet. Hyundai i40 kan på brugtbilsmarkedet fås med to forskellige benzinmotorer, henholdsvis en 1,6 liters og en 2,0 liters. Begge benzinversionerne er dog ikke længere tilgængelige på det danske marked, hvis man ønsker at investere i en ny Hyundai I40, og derfor må man forvente, at det er udbuddet af dieselversionerne som vil stige fremover. Her kan man købe sin Hyundai i40 med enten 115 eller 136 hestekræfter. Generelt er brændstoføkonomien god, og det har helt sikkert været et fokuspunkt hos Hyundai, som blandt andet har droppet en sjov men tørstig V6’er, som tidligere kunne købes til Sonata.\nHyundai I40 holder generelt høj kvalitet, og man kan godt mærke, at vi er i toppen af modelprogrammet. Hyundai I40 er dog kendt for at have lidt problemer med rust ved nummerpladeholderne.\nDe primære konkurrenter er Peugeot 508, Opel Insignia og Ford Mondeo\nHyundai I40 kan fås i tre forskelige udstyrsvarianter, og man kan godt mærke, at vi er på øverste hylde i Hyundais modelprogram. Comfort, der er basisniveauet, inkluderer blandt andet fartpilot og manuel aircondition, samt tractioncontrol. Style er næste niveau, og her får du blandt andet fuldautomatisk zoneopdelt aircondition og handskerum med kølesystem. Øverst har vi premium, som byder på den helt store pakke med blandt andet navigationssystem, bakkamera og læderrat med varme.