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Isolation, Purification and Identification of Protein\n世界生命科学的圣地与分子生物学的摇篮 -冷泉港实验室（The Cold Spring Harbor Laboratory）\n化学修饰法对蛋白质进行修饰改造时需要单一的 蛋白质作为原材料 为了研究蛋白质工程的效果，需要单一的蛋白质 作为实验材料研究其结构与功能 为了生产性能更优良的蛋白质，需要对设计改造 过的蛋白质进行大量纯化，从而开发出相关产品\n前言 蛋白质纯化方法 蛋白质纯化总原则及步骤\n材料的选择与预处理 蛋白质的提取 蛋白质的粗分级 蛋白质的细分级 蛋白质的鉴定\n能从成千上万种蛋白质混合物中纯化出一 种蛋白质的原因是不同蛋白质在许多理化 性质上有着极大的不同。\n分子大小 分子形状 带电特性 溶解特性 与配体特异性结合不同 吸附性质 变性和复性\n透析 ? 超滤 ? 凝胶过滤 ? 离心\n形状的不同会导致蛋白质在离心通过溶液时， 或通过膜、凝胶过滤填料颗粒或电泳凝胶中的 小孔运动时，都会受到它的形状的影响。\n梯度离心的影响 ? 电泳的影响\n蛋白质的净电荷取决于氨基酸残基所带正、负 电荷总和。若天冬氨酸和谷氨酸占优势，在pH 7.0时带净负电荷，称为酸性蛋白质。若赖氨酸 和精氨酸占优势，在pH 7.0时带净正电荷，称 为碱性蛋白质。\n电泳 ? 离子交换层析\n由于蛋白质分子表面亲水性和疏水性带电基团不同， 因此在溶剂中的溶解度不同。 通过改变pH、离子强度或加入有机试剂，促进蛋白质 分子的凝聚进而形成沉淀。 盐析法 有机溶剂沉淀法 等电点沉淀法\n蛋白质在高浓度中性盐溶液中会沉淀析出， 称为盐析 盐析原理：\n高浓度盐离子与蛋白质分子争夺水化水，破坏 蛋白质分子表面的水膜，同时盐离子也会影响 蛋白质分子所带电荷，从而引起蛋白质沉淀， 但通常不会引起蛋白质的变性。\n生物大分子的某些特定结构能够同其他分子相互识别并结合，这 种结合是特异的又是可逆的，生物分子间的这种结合能力称为亲 和力。 将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上，利用分 子间亲和力的特异性和可逆性对另一个分子进行分离纯化。\n免疫亲和层析 生物亲和层析 金属螯合亲和层析 拟生物亲和层析\n羟基磷灰石层析 ? 疏水层析\n蛋白质在一定的理化条件下会失去原有的空间 结构、生物学功能及部分理化特性等称为变性。 当变性条件去除后恢复原有的空间结构及生物 学功能即为复性。\n沉淀法 离心法 电泳法 超滤法 相分配法 层析法\n不可能有一套统一的方法适用于分离 纯化所有的蛋白质， 但每一种蛋白质可能都有一套适合的 分离纯化程序， 而且所用的主要技术手段都基本相同。\n以合理的效率、速度、收率和纯度，将目标蛋白从细 胞的全部其他成分特别是不想要的杂蛋白中分离出来， 同时仍保留其生物学活性和化学完整性。\n选择实验材料，实验材料预处理 ? 蛋白质的提取 ? 蛋白质的粗分级 ? 蛋白质的细分级 ? 蛋白质的鉴定\n什么是最好的来源： 蛋白质需要有多纯： 纯化蛋白的量要多少： 蛋白质应该如何进行鉴定： 纯化时间应该多长: 什么是最终花费： 如何纯化蛋白质： 关于蛋白质我们已知什么：\n物种的选择 ? 组织的选择\n过滤 ? 离心\n洗涤：自来水—蒸馏水—提取缓冲液 ? 材料破碎：\n机械剪碎 研磨 反复冻融法 超声破碎法 高压匀浆法 酶解法\n尽可能多地提取目的蛋白，同时避免因热、 pH 或有机试剂、金属离子、蛋白酶等因素造成活 性丢失。\npH 缓冲液：Tris-Hcl, Tris-Gly, Gly-Hcl, 柠檬酸-柠檬酸钠 离子强度：动物 NaCl, 植物KCl 还原剂:DTT, 2-巯基乙醇 蛋白酶抑制剂：EDTA, PMSF, TPCK,TLCK 金属离子螯合剂: EDTA, EGTA\n去污剂:SDS, CHAPS, Triton X-100, Tween-20 甘油\n使用蛋白质提取缓冲液提取实验材料后， 蛋白提取液中目标蛋白质的浓度往往较低， 采取一些简单的方法使目标蛋白质浓缩， 同时去除大量的杂质，这些纯化方法就属 于蛋白质的粗分级。 硫酸铵分级沉淀、有机溶剂分级沉淀、超 速离心、等电点沉淀、透析、超过滤、蛋 白质结晶等。\n粗分级只是使蛋白质得到浓缩和初步分离 纯化，多数情况下还要根据蛋白质分子大 小、分子形状、分子表面特征或分子带电 状况进一步纯化，这就是蛋白质细分级。\n4.1. 层析（ chromatography ）\n分子筛层析（ Gel filtration ）\n离子交换层析（ Ion exchange ） 疏水作用层析（ Hydrophobic interaction ）\n亲和层析（ Affinity ）\nPharmacia Sephadex glucose (dextrose) Sepharose agarose Sephacryl glucose + acrylamide Sephacel cellulose\nBioGelA BioGel P agarose acrylamide\n蠕动泵 层析柱 检测器 记录仪\nGel filtration Hydrophobic interaction Ion exchange\n4.1.1 分子筛层析 Gel filtration chromatography\n分子筛层析, 也称为凝胶过滤、分子排阻层析。是以多孔 性凝胶材料为支持物，当蛋白质溶液流经此支持物时，分 子大小不同的蛋白质所受到的阻滞作用不同而先后流出， 从而达到分离纯化的目的。\n葡聚糖 （glucose） ? 琼脂糖 （agarose） ? 聚丙烯酰胺（acrylamide） ? 纤维素（cellulose）\nHydrophilic No spontaneous binding to proteins. Chemically and physically stable\n分子筛层析 Gel filtration chromatography\n4.1.2 离子交换层析（ Ion exchange ）\n蛋白质是两性分子，在一定的pH条件下带有电荷，不 同的蛋白质带有的电荷的种类和数量不同，因此它们 与带电的凝胶颗粒间的电荷相互作用不同。利用蛋白 质和带电凝胶的作用力的差别从而把蛋白质分开的层 析方法。 阳离子交换柱：凝胶带负电荷，蛋白质带正电荷 阴离子交换柱：凝胶带正电荷，蛋白质带负电荷 惰性支持物：琼脂糖，葡聚糖 带电基团：羧甲基—带负电 二乙基氨基—带正电 平衡离子：负电基团的平衡离子氢或钠离子 正电基团的平衡离子氢氧根离子或氯离子\n选 择 离 子 交 换 介 质\n离子交换层析（ Ion exchange ）\n亲合层析是利用蛋白质与配体专一性识别并结 合的特性而分离蛋白质的一种层析方法。 将与目标蛋白质专一性结合的配体固定于支持 物上，当混合样品流过此支持物时，只有目标 蛋白能与配体专一性结合，而其他杂蛋白不能 结合。先用结合缓冲液洗脱杂蛋白，然后改变 洗脱条件，将目标蛋白洗脱下来。\n蛋白质表面的疏水基团与介质 的疏水配体的可逆相互作用， 高浓度的盐会增强相互作用， 低浓度的盐会减弱相互作用。\n高离子强度下待分离的样品吸 附在疏水介质上，然后降低离 子强度选择性将样品解吸，疏 水弱的物质先洗脱，疏水强的 物质后洗脱。\n4.2.电泳（ Electrophoresis ）\nSDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS--PAGE） 等电聚焦电泳（ Isoelectric focusing- IEF） 双向电泳（ Two Dimensional Electrophoresis ）\n1、由于SDS是阴离子，使多肽表面覆盖的 负电荷远远超过蛋白质分子原有的电荷量， 消除了原来的电荷差异。\n2、改变了蛋白质单体分子的构象，不同蛋 白质的SDS复合物的短轴长度都相同，长轴 长度随其分子量的大小成正比变化\n在不连续电泳系统中，所带电荷、分子大小和 形状不同的蛋白质在凝胶中能够被分离。 原理\n电荷效应 ? 浓缩效应\n快慢离子效应 ? 凝胶浓度差效应\n第一向通常根据蛋白质的等电点不同进行 等电聚焦电泳，然后再根据分子质量的不 同进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳作为第二 向。\n双向电泳技术是蛋白质组学研究中蛋白质 多肽链分离纯化和鉴定的主要实验技术之 一。\nTwo Dimensional Electrophoresis of E. coli Proteins\n- more than 2,000 proteins were visualized\n三、蛋白纯化原则 Guidelines for Protein Purification\npurity, activity and quantity\nto simplify technique selection and optimisation\nfast detection of protein activity/recovery and critical contaminants\nextra steps reduce yield and increase time, combine steps logically\nASSAY: A method that measures the amount of a specific protein, in a mixture of others. If possible, the assay should give an estimate of the absolute concentration (e.g. mg/ml). Relative concentration is the next best. The method chosen will ultimately depend on the properties of the target protein. Most common are:\nenzymatic assays. ligand-binding assays immunological assays\nto avoid lengthy procedures which risk losing activity/reducing recovery 减少添加物 ? additives may need to be removed in an extra purification step or may interfere with activity assays 早期除去降解物 ? for example, proteases 每步使用不同的纯化方法 ? to take advantage of sample characteristics which can be used for separation (size, charge, hydrophobicity, ligand specificity)\n凯氏定氮法 紫外吸收法 分光光度法\n蛋白质分子质量与等电点的测定 氨基酸组成及顺序分析 蛋白质结晶与结构分析 蛋白质活性及功能测定\n芳香族氨基酸在280nm附近有最大光吸收，核酸在260nm 附近有最大光吸收. 经验公式 蛋白质含量（mg/mL）=1.45× 0.74A 260nm\nA 280nm —\n蛋白质样品与特定的显色剂反应，反应产物在特定的波长的光吸收 与蛋白质含量成正比，利用标准曲线即可查得样品的蛋白质含量 考马斯亮兰法等\n色谱纯：在层析图谱中只有一个洗脱峰 ? 电泳纯：在电泳图谱中只有一条电泳条带 ? 结晶纯：能够获得蛋白质晶体\n相互验证：在某一种鉴定方法下表现为均一的 蛋白质在另一种方法可能表现为不均一，因此 需要互相验证。\n氨基酸组成及顺序分析 结晶及结构分析 免疫印迹（western-blotting）鉴定\nSDS-PAGE ? PAGE\n水解蛋白质为氨基酸 ? 全自动氨基酸分析仪或高效液相色谱进行测定\n质谱法 ? 推定法：从已知基因序列推断蛋白质氨基酸序列\n? 水解法 ? Sanger法、Edman降解法、氨肽酶法 ? 肼解法、羧肽酶法\nX射线晶体衍射法—蛋白质晶体 ? 核磁共振—溶液中蛋白质的三维结构 ? 电子显微镜\n蛋白质分离纯化的总原则是什么？ 蛋白质分离纯化的一般步骤如何？ 蛋白质细分级和蛋白质粗分级主要技术？ SDS—PAGE测定蛋白质分子量的主要原理 如何？ Western blotting原理和主要步骤。\n蛋白质纯化与鉴定实验指南，朱厚础等译， 2000，科学出版社 The Recombinant Protein Handbook, Protein Amplification and Simple Purification, 18-1142-75 Protein Purification, Handbook, 18-1132-29\n搜试试 5 悬赏文档 全部 DOC PPT TXT PDF XLS 广告 百度文库 教育专区 ...分离纯化蛋白质的方法及原理 (一)利用分子大小 1、透析:原理:利用蛋白质分子不...\n分离纯化蛋白质的方法及原理 - (二)利用溶解度差别 影响蛋白质溶解度的外部因素有:1、溶液的 pH;2、离子强度;3、介电常数;4、温度。但在同一的特定外部条件...\n蛋白质的提取与纯化 - 蛋白质的提取与纯化 一,蛋白质的提取 大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质 则溶于乙醇、丙酮、丁醇等...\n搜试试 2 悬赏文档 全部 DOC PPT TXT PDF XLS 广告 百度文库 专业资料 ...分离纯化蛋白质的方法及原理(一)利用分子大小 1、透析:原理:利用蛋白质分子不...\n分子实验14蛋白质纯化 - 蛋白质纯化 一、亲和层析 1、绪论 亲和层析是基于待分离物质,如蛋白质、多肽、糖蛋白和核酸等生物分子,与固定化在 载体上的配基分子...\n蛋白质纯化仪的使用 (1)_生物学_自然科学_专业资料。蛋白质纯化仪使用说明 1...蛋白质的纯化课件 82页 5下载券 蛋白质纯化技术(上) 27页 2下载券 AKTA...\n蛋白质纯化原理 - 蛋白质的纯化原理 一)根据蛋白质溶解度不同的分离方法 1、蛋白质的盐析 中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,...\n分离纯化蛋白质的方法及原理. - 分离纯化蛋白质的方法及原理 (一)利用分子大小 1、透析:原理:利用蛋白质分子不能透过半透膜的性质,使蛋白质和其他小分子物质 如...\n蛋白质分离纯化的一般程序解析 - 蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤: (一)材料的预处理及细胞破碎 分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或...\n搜试试 3 帮助 全部 DOC PPT TXT PDF XLS 百度文库 专业资料 自然科学 生物...蛋白质纯化_生物学_自然科学_专业资料。蛋白质纯化一.可溶性蛋白的纯化方法 AC ...\n王镜岩生化第三版考研课件 第7章 蛋白质的分离纯化和表征\n大学无机及分析化学蛋白质课件第三章 蛋白质的通性 纯化和表征\n王镜岩生化第三版考研课件 第7章 蛋白质的分离、纯化和表征


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哪位说说外地户口可以在上海买二手房吗 - 蓝莓团\n林内燃气热水器 室内装修合同 ktv音箱 黄梅天装修 墙壁纸 美的空调价格 紫色壁纸配什么壁橱 购房流程\n位置： 首页 > 商品房 > 哪位说说外地户口可以在上海买二手房吗\n标签： 专业二手房装修公司, 二手房装修流程, 二手房装修风水, 深圳二手房装修公司, 上海二手房装潢, 二手房装饰, 二手房局部装修, 二手房水电改造, 二手房重新装修, 80平米二手房装修, 二手房装修全包, 二手房装修合同, 二手房装修费, 海景房二手房, 经济适用房二手房, 搜房网二手房, 搜房二手房, 外地户口在北京买房, 外地户口买房, 海二手房\n一般二手房交易买卖双方需要交纳的税费清单如下:一. 买房人应缴纳税费:1. 契税:房款的1.5% (面积在144平米以上的需要缴纳3%,即俗称的豪宅税)2. 土地出让金:按成本价的1.5%×建筑面积,住房面积是140以上需要3%(公房才需要,即没有土地证)3. 印花税:房款的0.05% 4. 测绘费:按各区具体规定 5. 权属登记费及取证费:按各区具体规定,一般情况是在200元内.6. 营业税:成交价*5.5%(房产证未满5年的)7. 中介费:房款的1%二. 卖房人应缴纳税费: 1. 印花税:房\n根据国务院<住房公积金管理条例>第二十四条第一款的规定:(一)购买.建造.翻建.大修自住住房的,可以提取职工住房公积金帐户内的存储余额: 第二十五条 职工提取住房公积金帐户内的存储余额的,所在单位应当予以核实,并出具提取证明.职工应当持提取证明向住房公积金管理中心申请提取住房公积金.住房公积金管理中心应当自受理申请之日起3日内作出准予提取或者不准提取的决定,并通知申请人:准予提取的,由受委托银行办理支付手续. 购买自住房屋时需提取公积金的应提供的相关证明资料:提供购房契约(或合同).购房发票(\n申请二手房抵押贷款时应填写借款申请表,并向贷款银行提交下列资料: 1)身份证明(居民身份证.户口簿或其他有效居留证件).学历证明.婚姻状况证明: 2)经济收入证明,并可有选择性地提供包括存款证明.有价证券在内的其他财产证明:以上证明资料越全面,银行在放贷评审中的评分越高,享有贷款金额及时间的条件越优越: 3)买卖双方签订的购房协议书:4)同意以所购房屋作抵押的证明:5)有不低于购房价款30%的自有资金:6)贷款银行要求提供的其他文件或材料.而售房人须提供如下资料:1)售房人(含共有人)身份证明及\n一般二手房首付3成.贷款7成. 费用看你购买的是否为普通或者非普通住房,找家正规的中介.2015-06-19 11:53:59要看你买那的房子,金桥附近的大约180万左右,差不多没平方2.7万左右,世博园附近的差不多130万,每平方3万,这个建议你去实地看下,不然很难找个适合你的地方,你可以从网上查一下看看有没有合适的,在联系看看,希望你早日找到合适的住所.谢谢2015-06-20 22:03:08首付可以付30%,如果150万的房子首付差不多要付45万左右的首付,商贷最长是30年,公积金最长是\n您好,,,,很高兴为您解答...外地人是可以在石家庄买房的,,,,买了之后,户口就会迁入石家庄,,,希望被您采纳,谢谢2014-11-08 14:38:19可以,但是不能贷款,最好您能提供在石家庄工作一年以上的养老保险或者是一年的纳税证明2014-11-08 14:43:04可以的,但前提是要在石家庄居住一年以上或者社保缴满五年以上2014-11-08 15:18:54只要有钱在那边都是可以买到房子的 但是户口本 身份证 还是需要的 这些东西本来就是随身携带的2014-11-18 13:30:1\n1.外地户籍必须满足缴纳一年以上社保.或提供一年以上的纳税证明(个税证明)且必须以家庭为单位,换句话说:单身未婚人士也不具备买房资格; 2.社保必须在购房同时还在缴纳,如果买房时你的社保处于停缴状态,也审核无法通过的,所以,你在买好房子之前一直要保持正常缴纳直至取得房产证为止; 3.公积金是单位替在职职工向住房公积金管理中心定期缴纳用于改善职工居住条件的专项基金,你自己承担一半.单位承担一半,上海住房公积金管理条例规定必须连续缴纳满六个月以上并且余额大于7500元才可以申请住房公积金贷款;你原来\n外地户口上海买房条件:在上海工作,满一年有一年的税单或社保,并且是非单身才可以,单身外地人不可以在上海买房.且拥有1套及以上住房的非本市户籍居民家庭以及不能提供相关个税缴纳证明或社会保险缴纳证明的非本市户籍居民家庭,则暂停向其售房.希望对您有帮助2015-11-10 09:42:36 一.外地人上海买房条件限制条件 对非本市户籍居民家庭购房的,需要提供一年以上(13 个月)纳税或社会保险缴纳证明,才可购房!不过要缴纳房产税: 地人上海买房条件,对于在本市工作生活的非本市居民的基本居住需求,给予优\n外地人上海买房条件--买房政策 现在外地人上海买房政策如下: 1:已婚人士,能提供结婚证(婚姻证明) ps:这也促成了很多因为买房的速配情侣,欢喜的背后尽是无奈. 2:本人在上海本地无房3:能提供出在上海2年内累积缴纳13个月的税单或是社保.(注意:这里说的是累积而不是连续)2015-10-28 12:43:55近年来,上海市对于外来人口的入住法律规定还是比较明确的.非本市户籍居民家庭购房的,需要提供一年以上(13个月)纳税或社会保险缴纳证明,才可购房!不过要缴纳房产税 外地人上海买房条件,对于\n您好,外地人在苏州限购一套房子,如果要在苏州购房必须2年内 缴纳一年社保或者能够提供缴纳一年的税单证明,如果要贷款购房必须到房款日持续满1年. 如果都没的话,可以找点漏洞也可以想办法贷款购房的.2015-11-19 15:59:08目前外地来苏州购房.就业人员落户苏州执行以下政策:1.如果你毕业时已入苏州集体户口,不受面积和其他条件的限制.2.如果你是外地户口,要求及操作流程如下:购买市区成套商品住房75平方米以上,取得房屋所有权证3年以上,且被单位合法聘用3年以上,按规定参加社保3年以上,具有\n买房可以,但是要落户,就不能买二手房,收入证明肯定是有的,不论你在那买房都需要这个证明,一般首付是你的房款的30%,可以贷款 税费 收费标准: 1.过户费用: 普通住宅 * 契税:评估价 × 1.5%: * 土地出让金:评估价 × 1%(需办理土地证的交纳): * 图纸资料费:20.00元(需办理土地证的交纳): * 印花税:评估价 × 0.1%: * 转让手续费:建筑面积 × 6.00元: * 登记费:80.00元(需贷款的再交80.00元): 非普通住宅 (单价河西在6300以上含6300南\n外地户口广州买房条件有:一,必须是在广州没有物业: 二,提供一年的个人纳税证明或一年的社保: 三,提供按揭所需资料:1.公司开具的收入证明:2.半年的银行流水帐:3,婚姻状况证明:4.身份证:5.户口本:6,户籍所在地的无房产证明.2015-10-19 11:44:55外地户口广州买房条件,非广州市户籍居民家庭提供缴纳个人所得税缴纳证明或社会保险缴纳证明的年限从之前的1年调整为3年.这是硬指标.三.抑制不合理住房需求.自本意见发布之日起,暂定对能提供购房之日前5年内在本市连续缴纳3年以上个人所得\n外地户口郑州买房条件第一:外地人(非本地居民)在郑州购房.如不能提供一年以上当地纳税证明或社会保险缴纳证明,银行不得向上述非本地居民提供按揭贷款. 第二:如能提供一年以上当地纳税证明或这回保险缴纳证明,可按二套房贷款处理. 第三:无法提供在本市1年以上纳税证明或社会保险缴纳证明的非本市户籍居民家庭暂停在人口过密区域购房,只能在其他区域新购1套商品住房.2015-10-22 13:47:53身份证(原件复印件) 户口簿(原件复印件) 婚姻证明(或者未婚证明三至五份) 收入证明(或者个体户的营业执照\n济南外地户口买房条件:外地人济南买房条件1.能提供在济南缴存满一年的社保或纳税证明:外地人济南买房条件2.有不低于拟购房屋房款30%的首付款:外地人济南买房条件3.有稳定的工作和收入,具备按时足额还款的能力:外地人济南买房条件4.信用记录良好:外地人济南买房条件5.能提供购房合同或协议:外地人济南买房条件6.能提供有效身份证明.居住证明.婚姻证明:外地人济南买房条件7.具有完全民事行为:外地人济南买房条件8.贷款行要求满足的其他条件.2015-11-27 12:42:04外地户口在济南买房 首先\n外地户口在济南买房 首先一点是必须两年内缴满一年的社保证明. 或者是纳税证明. 办理房产证的时候 带着身份证 户口本 结婚证. 就可以.2015-10-25 18:28:30办理济南集体户,可以解决买房限购问题.根据济南出台的限购政策,拥有1套及以上住房的济南市户籍居民家庭.不能提供两年内在济南累计缴纳1年以上个人所得税缴纳证明或社会保险缴纳证明的非济南市户籍居民家庭,暂停向其售房.. 济南集体户口买房,不限购,不限贷,不受面积限制直接落户.本公司提供专业的人事代理服务(户籍服务 社保 公积金


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當前位置: 首頁 > 公告公示 > 招標信息\n來源： 重慶市鐵路集團 編輯：李林晉 責編：譚詩賞 終審：張小蓉\n3.1.1 本次招標要求投標人同時具備的資質條件：具有建設行政主管部門頒發的工程勘察綜合類甲級資質證書和中華人民共和國自然資源部（原國家測繪地理信息局（原國家測繪局））頒發的測繪甲級（專業范圍必須包含工程測量）并取得 CMA 計量認證證書，且認證證書附表有相應監測項目（須全覆蓋本標段工程量清單項目）；\n4.1 本招標項目采用全流程電子招投標，投標人在投標前可在重慶市公共資源交易網（www.cqggzy.com）下載招標文件、工程量清單、電子圖紙等資料。參與投標的投標人需在重慶市公共資源交易網（www.cqggzy.com）完成市場主體信息登記以及 CA 數字證書辦理，辦理方式請參見重慶市公共資源交易網（www.cqggzy.com）導航欄“主體信息”頁面中“市場主體信息登記”“CA 數字證書辦理”。若投標人未及時完成市場主體信息登記和 CA 數字證書辦理導致無法完成全流程電子招投標的，責任自負。\n電 話：023-88755693 88212307\n聯系人：霍先生 馮女士 文先生\n電 話：023-67706832 67734170 67606963\n友情鏈接 : 重慶市交通委員會 | 重慶城市交通開發投資(集團)有限公司 | 重慶市公共交通控股(集團)有限公司 | 重慶市軌道交通(集團)有限公司 | 重慶城市通卡支付有限責任公司 | 重慶交通樞紐集團\n渝ICP備16007280號-1 ???? 版權所有：重慶市鐵路(集團)有限公司 ???? 地址：重慶市渝北區交通開投大廈\n訪問量（PV）： 獨立訪客量（UV）： 當前人數：


要在各级党政机关中深入开展好“不忘初心、牢记使命”主题教育活动,推动“两学一做”学习教育常态化制度化,在广大机关党员、干部的头脑中解决好”我是谁、为了谁、依靠谁“这个根本问题,回应好群众需求,解决好群众困难,把机关各项工作做得更深入、更细致、更扎实。，第六条交易定金该房地产交易定金为人民币:________亿______仟______佰______拾______万______仟______佰______拾______元______角______分(小写:____________元)。，该行在抗疫期间推出的系列降成本、简流程、优效率的举措以及高效优质的服务水平得到工信厅的认可和支持。， 临淄区 临淄区委副书记、区长白平和: 临淄区委副书记、区长白平和坚持靠前指导调度,每天研究部署疫情防控各项工作。，作为区域内标杆项目,融创城在这片热土之上,延续融创始终不变的精工匠心,打造建筑面积约83万㎡低密人居城市范本,为业主提供融享繁华、自然、品质兼得的城市大盘生活。，为帮助南宁市民解决“一罩难求”的问题,并避免出现排队聚集的情况,将以小程序预约的方式进行销售。。\n这个课目就是要考验特战队员能否在体能消耗的状态下保持清醒头脑,做出正确的判断。，”“我们坚信,一个更加开放的中国,将同世界形成更加良性的互动,带来更加进步和繁荣的中国和世界。，短短两周内,学校就与莫斯科大学联动共同开发了网课直播系统和课程录播平台,让线上教学得以在3月2日如期启动。， 历史数据 节后一周上涨概率大 “如果是已经浮亏了20%至30%,不太建议止损,因为以目前市场估值处于历史相对低位,以及股指目前面对利空依然具有一定韧性,一旦利空出尽或者迎来更大利好,则有望迎来短期阶段性反弹。，红三军团也于14日抵达于都休整。。\n同年8月1日,中共中央决定人民日报为中国共产党中央委员会机关报,并沿用l948年6月l5日的期号。， 三、活动中不能丢弃任何垃圾。，”星合资本董事长郭宇航认为,目前现金贷存在息费不清、罚息过重等问题,很容易沦为“掠夺性借贷”。，而安阳县公检法机关的做法,将最高指示精神于不顾,已经严重背离了党性原则,严重抹黑了公检法机关的形象,严重破坏了当地的法治环境。，折算市盈率较低的还有大华股份、春秋电子、聚飞光电、新国都、恒华科技、海康威视等。， 题记:不知不觉,年已过。，参加雅集的16人被分五组。，但他同时也表示,不应当因为美国政府在芬太尼等药品上的强硬态度,而在国内引发对精麻类药物滥用过于紧张的情绪。。\n对卢聪来说,入伍第一天就是挑战。，随着社会发展和经济的发展,生育保障只会越来越好,不会降低。，冬休归来后首轮联赛0-2负于克拉斯诺达尔遭遇开门黑。，很重要的原因是联储选择超预期降息的可能性比较小,在总需求和通胀存在为微幅下降的趋势下,名义利率和实际利率恐怕难出现较大幅的下降。， 那么,5G流量资费到底会怎样?运营商又该如何在5G时代实现盈利? 5G免费的可能性不大 5G具有更快的网络传输速度,高网速也使得用户流量激增。。\n在社区出入口处,突击队携带一批宣传资料,一个扩音器,进行全天候语音广播疫情期间交通安全提示,大力开展“口罩加头盔出行更安全”劝导活动;在街道重点卡口处,突击队严格落实“定路段、定时间、定人员、定职责”的管段责任;协助交警部门开展核对证件、预约登记、秩序维持、分时导流等工作;复工企业上,突击队到辖区快递外卖、重点车辆车属企业挨家挨户走访,在对企业疫情防范工作进行检查的同时,对涉及快递、外卖行业电动自行车亮尾及戴头盔情况进行督查。成功来自于努力。真人真钱轮盘。点赞湖南速度现场,湖南除了园区组团引才人气旺,记者还发现不少高层此人才对湖南速度点赞。,党组织要在一线考察识别干部,及时选优配强重点地区、重要部门领导班子,大胆使用政治可靠、工作急需、表现突出的优秀干部,选派优秀年轻干部到一线接受历练。 对于高科技企业来说,创新是公司的灵魂,对纪律性、执行力的崇拜和强化,严厉苛刻的狼性文化究竟会激励创新还是鼓励创新? 作为一种有争议的企业文化,狼性文化在中国一面招致非议,一面仍广受追捧、大行其道。