▷ Bestil Crinkle Bedspread Light Blue – HAY – 1299 kr.\nDesignHAY for HAYKonceptCrinkle Bedspread Light Blue er et sengetæppe af blød og let bomuld. Sengetæppet har et rynket mønster med kvaste ender. Sengetæppet kan anvendes til at give soveværelset kant. Indret med Crinkle sengetæppet i dit sovev (Læs mere)\nNavn: Crinkle Bedspread Light Blue – HAY\nKategori: Diverse -> Boligtilbehør -> HAY Boligtilbehør -> Crinkle Bedspread Light Blue – HAY\nEn stor portion internet selskaber udlover til alt held en lang række forskellige muligheder for levering. En af de mest almindelige er p.t. at få leveret til en pakkeshop, og så henter du bare dine nye varer når det passer dig. Leveringsmetoden er altså yderst bekvem, og desuden ligeledes den prisbilligste leveringsløsning ved køb af Crinkle Bedspread Light Blue – HAY.\nDu kan på samme måde forsøge at få ordren sendt til din hjemmeadresse eller ud til dit arbejde. Denne viser sig som regel en anelse mere omkostningsfuld, men samtidig ret uproblematisk. Den mest betalelige leveringsmåde vil dog til enhver tid være selv at hente varerne, men den løsning står og falder med at du er i kort afstand af e-firmaets adresse.\nLeveringstidspunktet på Diverse -> Boligtilbehør -> HAY Boligtilbehør -> Crinkle Bedspread Light Blue – HAY er jo vældig betydningsfuld ifald du står og skal bruge pakken straks, og i det øjemed er det uden tvivl meningsfuldt at vi gransker det anslåede leveringstidspunkt på den pågældende vare.\nStørstedelen af internet foretagender tilsiger levering på næstkommende hverdag på en lang række produkter, eksempelvis Crinkle Bedspread Light Blue – HAY, som er regnet ud fra at du når at bestille før et fastsat tidspunkt, så at de med sikkerhed kan nå at få produktet afsted forinden medarbejderne har fri.\nNogle få e-firmaer garanterer levering uden betaling, men i de fleste tilfælde kræver det at du køber for en bestemt sum. I øvrigt bør man vælge den prisbilligste leveringsudgave, som oftest – uden hensyn til om du befinder sig tæt på Herning, Aabenraa eller Hadsten – er at få fragtmanden til at bringe pakken til et udleveringssted.\nDet er i dag i høj grad uproblematisk for forbrugerne at søge sig frem til priser hos forskellige netshops, og derved har en hel del HAY internet forretninger i Danmark fundet det uundgåeligt at formindske salgspriserne på deres produkter – til børn og babyer, og ligeledes til herrer og damer – betragteligt, og endda nogle gange sikre gebyrfri levering.\nDet kan dog stadigvæk blive lønnende at efterprøve forskellige internet butikker efter tilbud på Crinkle Bedspread Light Blue – HAY forud for at du handler, så man er usvigeligt sikker på at skaffe sig den billigste pris.\nDu bør trods alt være klar over, at hvis en internet forhandler tilbyder varer til salg for en udsalgspris som virker kolossalt overkommelig, kunne det tit være et symbol på en snydagtig online webshop. Kortbetalinger er på den anden side omfavnet af en lov, hvilket dækker dig som køber imod uoprigtige e-forretninger.\nVi anbefaler generelt kortbestillinger eller mobilbetaling. Som et alternativ kunne du anvende en løsning fra fx ViaBill, ifald du tilstræber at afbetale pengene over flere uger.\nInden folk køber i en HAY internet shop burde man reelt skimme e-shoppens handelsaftale, det er dog gerne et omfattende arbejde.\nEn nem løsning kunne derfor være at kontrollere hvorvidt internet butikken er tilsluttet e-mærket, grundet at det burde være et tegn på at webbutikken respekterer dansk lovgivning, og at webbutikken ofte kigges til af specialister der behersker reglerne på området. Dette er desuden en god genvej til en håndsrækning, såfremt du forvoldes udfordringer i forbindelse med din handel.\nForuden dette foreslår vi at kunden er påpasselig med de mest betydningsfulde regler der kan have indvirkning på handlen, eksempelvis hvilken returret webshoppen har. Her er det på samme måde afgørende, at man stadigvæk opbevarer ens faktura, så man altid vil kunne dokumentere sin ordre af Crinkle Bedspread Light Blue – HAY, uden hensyn til om du leder efter et produkt til en mand eller kvinde.\nTrustpilot fremskaffer uden sammenligning udmærkede genveje til at efterse en stor portion eksisterende forbrugeres domme og derfor er det fornuftigt, at du bliver klogere på e-handlens anmeldelser af Crinkle Bedspread Light Blue – HAY forinden du handler.\nFacebook forærer dig for øvrigt en lang række fantastiske genveje til at få en idé om online butikkens pålidelighed. Derudover er der faktisk online varehuse i Danmark som gør det muligt at sammensætte en anmeldelse af deres købsoplevelse, som tillige burde anvendes til at tage stilling til kundetilfredsheden.\nVores hjemmeside er finansieret ved hjælp af reklamer. Vi samarbejder med mange internet forhandlere eftersom vi promoverer butikkernes produkter, og modtager provision forudsat de besøgende vi sender videre laver et køb.\nVejledning angående varer og online selskaber vedligeholdes hyppigt, men vi ønsker ikke at tage ansvar for modifikationer der er realiseret efter sidste opdatering af hjemmesidens oplysninger.


Mads Raaschou mener: Selvfølgelig skal borgerne have penge retur for byggetilladelser - Erhverv København\nFormanden for Dansk Byggeri Hovedstaden, Mads Raaschou.\nRedaktionen har modtaget et indlæg, som kommenter på Københavns Teknik- og Miljøforvaltnings argument for ikke at tilbagebetale for meget opkrævede gebyrer.\nAf formanden for Dansk Byggeri Hovedstaden, Mads Raaschou\nErhvervsvenligheden fik et skub i den rigtige retning, da politikerne under budgetforhandlingerne besluttede at gøre det gratis for borgere og virksomheder at få en byggetilladelse. Jeg kan kun rose den beslutning, som jeg håber, er den første af flere erhvervsvenlige tiltag fra kommunens side.\nTil gengæld er jeg fuld af underen over, at Teknik- og Miljøforvaltningen ved, at der i flere tusinde sager er blevet betalt for meget for byggetilladelsen, men alligevel kommer der ingen penge retur til alle dem, der har betalt for meget.\nHvis jeg ved en fejl har lavet en regning til en kunde, der viser sig at være for stor, så kan jeg ikke bare affærdige kunden med, at det er administrativt dyrt og besværligt at betale pengene tilbage. Hvis der skal være retfærdighed til, så kan kommunen ikke bare putte borgernes for meget betalte penge i egen lomme.\nHvis dét er for dyrt i administration, er der grund til at se administrationen efter i sømmene og erkende, at retfærdighed har en pris.


På Proximo's blog finder du +100 guides til Excel, Word, Outlook og PowerPoint. Artiklerne er meget praktisk anlagt og opdateret i 2020. Mange af artiklerne indeholder gratis øvelsesfiler, som du kan downloade og øve dig i. Leder du efter noget bestemt? Så søg efter det herunder!\nLær at oprette og ændre mødeindkaldelser i Outlook – trin for trin\nLær at oprette og ændre mødeindkaldelser i Outlook - trin for trin Skrevet af Kasper Langmann, Microsoft Office Specialist. I Outlook kan du indkalde andre personer til et møde. Hvis den indkaldte accepterer, registrerer Outlook mødet og reserverer tid i jer begges kalendere. Udover at mødeindkalde, kan der her også vedhæftes filer såsom [...]\nVirker piletasterne i Excel ikke? Sådan løser du det!\nVirker piletasterne i Excel ikke? Sådan løser du det! Skrevet af Kasper Langmann, Microsoft Office Specialist. Har du fået gjort et eller andet, så at piletasterne ikke virker "normalt" i Excel? At du scroller / ruller i stedet for at kunne flytte celle med piletasterne? Du skal bare trykke på én knap - [...]\nGlemt din adgangskode til Outlook? Sådan får du en ny!\nGlemt din adgangskode til Outlook? Sådan får du en ny! Skrevet af Kasper Langmann, Microsoft Office Specialist. I dag får vi tudet ørene fulde med, at vi skal bruge forskellige adgangskoder - og de avancerede af slagsen! Det forringer skumle typer i at hacke sig ind, men kan også forhindre dig selv i [...]\nSådan bruger du Outlooks stavekontrol – nemt og hurtigt\nSådan bruger du Outlooks stavekontrol - nemt og hurtigt Skrevet af Kasper Langmann, Microsoft Office Specialist. Du kan i Outlook til hver en tid tjekke for stavefejl, når du skriver en mail. Men du kan faktisk også indstille Outlook til at tjekke dine mails igennem, inden afsendelse. I denne guide kommer vi omkring [...]\nSådan tilføjer/anmoder du om kvittering for læst mail – trin for trin\nSådan tilføjer/anmoder du om kvittering for læst mail - trin for trin Skrevet af Kasper Langmann, Microsoft Office Specialist. Du kan tilføje forskellige kvitteringer til dine mails i Outlook - både kvitteringer for levering og læsning. En kvittering for modtagelse sikrer dig, at modtageren har fået leveret din mail - men ikke at [...]\n5 alternativer til Outlook\n5 alternativer til Outlook Skrevet af Kasper Langmann, Microsoft Office Specialist. Outlook er en kendt og populær email-klient, som har en masse funktioner i sig. Dog er Outlook naturligvis ikke den eneste, du kan have. Faktisk er der mange andre gode bud. Der kan være mange årsager til, at du ønsker at skifte [...]\nSådan indsætter du en tusindtalsseparator i Excel – nemt og hurtigt\nSådan indsætter du en tusindtalsseparator i Excel - nemt og hurtigt Skrevet af Kasper Langmann, Microsoft Office Specialist. Tusindtalsseparator sættes for hver tredje position fra højre og gør det lettere, at læse store tal. Du kan tilgå separatoren på forskellige vis. Om fire minutter kender du fire (hurtige) måder at vise tusindtalsseparatoren, samt [...]\nGennemstregning i Excel: Sådan gør du\nGennemstregning i Excel: Sådan gør du Skrevet af Kasper Langmann, Microsoft Office Specialist. Du kan stå i en situation, hvor du gerne vil vise noget data, som egentligt potentielt skal slettes. Dette gøres typisk ved at gennemstrege teksten. Dog ser du kun understregning af teksten, som en mulighed på båndet. Jeg viser dig [...]\nSådan får du hævet/sænket skrift i Excel\nSådan får du hævet/sænket skrift i Excel Skrevet af Kasper Langmann, Microsoft Office Specialist. Hævet og sænket skrift er i noget, som jævnligt fremgår i formler. Dog er disse ikke synlige på båndet i Excel, så du skal vide hvor du skal lede efter dem. Du finder dem i denne guide, samt får [...]\nIndsæt og rediger billeder i PowerPoint Skrevet af Kasper Langmann, Microsoft Office Specialist. Billeder er et vigtigt element i en flot præsentation. Både til pynt, men også til at understøtte det, du siger. Her findes forskellige typer billedfiler, som egner sig bedre til noget, frem for andet. Du kan i PowerPoint indsætte billeder [...]\nEt Proximo-medlemskab giver dig adgang til 14 online Office-kurser om:\n14 Office-kurser af den højeste kvalitet\nSkræddersyede Excel-kurser i København


Kasper Elbjørn - Blog - Tag - Rudd\nBlog (Tag: rudd)\nDet australske valgdrama – og hvad vi kan lære af det\n23 August 2010, 09:36\nDramaet i australsk politik synes ingen ende at have, og det er usædvanlig lidt, vi hører om det spændende parlamentsvalg, der tog en ny drejning i går, søndag.\nEfter 78 procent af de cirka 14 millioner afgivne stemmer var talt op så det ud til, at socialdemokraterne mister deres flertal til de nationalliberale.\nImidlertid er der muligvis ingen af de to partier, der har flertal alene, og både Australiens socialdemokratiske premierminister Julia Gillard og de nationalliberales leder Tony Abbott er netop nu i gang med at forhandle med de uafhængige medlemmer af parlamentet samt det lille grønne parti, der er blevet valgt ind.\nValget kommer kun to måneder efter at den stærkt venstreorienterede Julia Gillard blev premierminister efter et kup mod den daværende premierminister Kevin Rudd.\nNogen kan måske huske, hvordan Kevin Rudd blev fejret som en anden Tony Blair, da han vandt valget for små tre år siden efter næsten 11 år under de nationalliberales John Howard.\nKevin Rudd sagde han ville fortsætte den borgerlige regerings økonomiske politik, ligesom han lovede at videreføre de nationalliberales retspolitik og udenrigs- og sikkerhedspolitikken.\nDet var dog en noget anden virkelighed, australierne vågnede op til, da først socialdemokraterne fik magt som de havde agt.\nFinanspolitikken blev overtaget af keynesianerne i partiet. De forvandlede et A$ 19.7 milliard overskud til et A$ 32.1 milliard underskud under påskud af, at beskæftigelsen skulle stimuleres yderligere for at sikre væksten.\nDerudover gik den ekstreme venstrefløj i partiet - med beskæftigelsesminister Julia Gillard i spidsen - i gang med at styrke fagforeningerne, der bakkede regeringen op mod stadig mere magt over regeringens politik.\nRudd kunne heldigvis se, at økonomien var ved at løbe løbsk for regeringen, og for at betale regningen foreslog han en såkaldt »super-skat« for virksomheder. »Super-skatten« fik australierne til at sige fra, og regeringens meningsmålinger tog en hidtil uset rutsjetur – ned ad bakke!\nDe katastrofale meningsmålinger fik venstrefløjen til at lave en kup mod Rudd, og i slutningen af juni i år, blev ingen ringere end Gillard ny premierminister.\nVed valget i weekenden blev endnu en socialdemokratisk regering vraget som følge af en uansvarlig økonomisk politik. Vi ved ikke om den opstår i en ny konstellation, men resultatet taler sit tydelige sprog.\nMan kan diskutere om det er retfærdigt, at Kevin Rudd fik samme behandling som den britiske Gordon Brown, der også blev sat på porten som følge af en uansvarlig økonomisk politik, da Rudd muligvis bare var en svag premierminister, der ikke havde styr på sine partikolleger.\nMen hans tidligere regering fortjener ikke bedre.\nDer er ved at danne sig et mønster, som alle politikere bør lære af.\nVælgerne er langt mere økonomisk ansvarlige end de politikere, de vælger. Det synes jeg, er godt nyt.\nWall Street Journal havde denne sommer en fremragende leder om, hvad der skete i Australien.\nAvisen skrev, at »Kevin Rudd lektionen« er, at vælgerne finder sig i mangt og meget, men når de opdager at politikerne sætter landets økonomi over styr, siger de fra.\nAf Kasper Elbjørn Tags: Australien, Gillard, Rudd, Brown


Favorit kuglerne fra Brink Nordic er i 2020 med håndmalede nøddeknækkere. De fåes i både 8 cm som denne og i 6 cm. I serien er der også 2 nøddeknækker figurer. Nøddeknækkeren er meget kendt fra balletten af samme navn. Den opføres ofte ved juletid. Det har været til stor glæde for både børn og voksne. Det er blevet et klassisk motiv som julepynt. Der er ligeledes lavet en række eventyr og film om samme emne.


Dé ejer enkelte gode og sikkerhedsmæssige måder ad pakke bilerne af, herefter én undgår at der bliver buler, ridser og andre ødelæggelser af ens borde.\nDer gider komplet klart findes ægte super assistance ad hente, forudsat folk sidder også burde flyt blandt eneste af landets en god del dygtige og så erfarne flyttefirmaer. Dét a få eneste flyttefirma indtil ad hjælpe sig medtage flytning er nok på den anden side blandt én af dé sager, dér sagtens kan så præsentere sin at eksistere vildt meget adskillige omkostninger på det hele afhængig af hvilket sted, én beslutter sin imod at få støtte. Enkelte flyttede fra en små baggårdslejlighed foreløbig en bredere luksuslejlighed, evt. fordi dé er nok færdige med at studere og så ejer fået job, og så fåtal flyttede fra etagelejlighed til bolig, sikkert fordi dér er nok ankommet mænd til ellers kvinder af sti.\nFlytning og Flyttefolk også Billige\nIkke man vil at hives gennem det skrækkelige rod som altid opstår, ifald folk skal forsøge a flyt alle deres sager fra én femværelsers til én anden, således er muligvis der megen der vælger a anvende sin af et flyttefirma på Sjælland jeres lokalitet. Medtage én kapacitet af enten 32 GB, 128 GB eller 256 GB behøver du heller slet ikke ad bekymre i såfremt pladsmangel. Den Her er helt sikkert af betydning at tænke under dersom du overvejer da capo du skal håndtere flytningen ego, ellers kontakte en professionelt flyttevirksomhed og få dem indtil ad håndtere dét heftige virksomhed fra sig. Mange penge at spare i forbindelse med flytning i byen København Hvis jeres far, din kæreste, jeres fætre også kusiner også dine optimale kammerater tager deres dont med flyttelæssene, denne bliver det imidlertid slet virkelig ikke essentielt ad brænde en stor midler af på folk udefra, også på det form kan så processen blive én andel rigtig meget mere billig endnu de normalt ville være. At de er næsten sikkert gamle betyder ofte at der overhovedet ikke er elevator eder huset, men ligeledes a dér hyppigt er næsten sikkert meget smalle trapper. Dette er en genial følelse dér rammer os, da de nye standkvarter endelig er helt sikkert af plads.\nDeres ansatte er professionelle, også dé har vældig erfaring med ad flytter felter i første stykke fra E til B. Dét kan findes, a dér er muligvis en sofa der slet ikke har lyst til ned omkring opgangen. De er nok dog så meget anderledes fra person til dame. Dét er muligvis helt sikkert også nogle, der gør sig gældende i flyttebranchen. Hvis i er muligvis én af dem dér burde foreløbig ad flytte og virkelig ikke komplet ved såfremt i gerne vil eje opbakning til dette eller ej, efter tænk i omhyggeligt vedrørende. Hvornår der er helt sikkert dette talstærk, betegne dette ligeledes a der er fleste adskillige områder dé er nok dejlige indtil, man imod dette meste kan dé umiddelbart længst de færreste objekter allesammen samordne.\nDet køber blot da capo a træffe ægte. Flyttefirmaet støtter selvfølgelig også med selve transporten af møblerne fra den ene adresse indtil det anden. En kvalitets pallereol fremstillet af dé bedste matrialer, planlægger bedst opbevaring, der de kan så stole af omend graden af travlhed og så belastning.\nFor kundens egen skyld er helt sikkert dette fantastisk, at eje kontrol på den her, slig man næppe ligger i det krise, og næppe kan så få hver og en hendes møbler medregne på en gang. Rigtignok rigtig meget mere i selv er nok med og så involveret, minsandten bedre er muligvis chancen fra at resultatet bliver som du håber dét. Megen familier ejer én hektisk hverdag og ejer tit svært vedblive ad få alle tingende foreløbig ad hænge lægge sammen med arbejde, indkøb, børnepasning samt rengøring af hjemmet.\nDet er næsten sikkert der næppe noget der ejer lyst foreløbig, og det er næsten sikkert jeres sådanne tilfælde, a dét er fejlfrit ad man kan så gribe på én lille getaway. Flytte Virksomheden klarer det hele til én ægte god pris, og derefter er næsten sikkert servicen helt eder top. Også gerne eje flytningen overstået på de nemmeste, hurtigste og så sikreste måde? Bagefter er næsten sikkert dér helt sikkert ingen usikkerhed om at I burde eje fat jeres ét flyttetransport i København.\nSikkerhed også Privatflytning også Råd\nDet laver dét langt lettere ad anvende én professionel flytteforretning, såsom du skal flytte af. Køretøjet burde helst findes af acceptabelt højde alt afhængig af, hvor talstærk interesseområde du ejer. Der er muligvis meget stirre holde kontrol af i netværk medtage en flytning, også ergo beslutter et stigende antal danskere a lade første flyttehjælp i Cph såfremt at stå for selve flytningen. Jeres Cph er muligvis dér dejlige chancer fra a få de service, man ikke enkelt fra kammerater, man ligeledes fra professionelle. Der er nok rigtig utallig undersøgelser også videnskabelige tests, der har vist, hvoriblandt meget vor personer lader os påvirke af instanser udefra, og få gange kan dét i højeste grad være med foreløbig at klare alt beslutningsprocessen længst dårligere også mere kompliceret.\nForrige Forrige indlæg: Mærkværdig Meddeler Selinay Om Fremstillingen Det Er Vigtigt At Finde Det Rigtige Mobilabonnement\nNæste Næste indlæg: Koroush Værdsætter At En Flytteforretning Er Et Sted Som Kan Hjælpe Dig Videre Med Livet Journalistiken Er Flot


Løgstør U 14 piger blev jyske mestre - lokaltindblik.dk\nLøgstør U 14 piger blev jyske mestre\nI lørdags sluttede Løgstørs U 14 piger sæsonen af med at spille om det jyske mesterskab i 2. division - og vandt.\nJM blev afviklet på holdets hjemmebane i Lanternen, da Jysk Håndboldforbund havde valgt Lanternen som vært. Der har siden jul været spillet i 6 puljer i 2. div. Det var vinderne af disse puljer, der her mødtes i 2 puljer, hvor vinderne mødtes i finalen.\nLøgstør vandt sikkert den ene pulje med 2 sejre over Resen og Gråsten uden dog at have det polerede spil fremme. I den anden pulje var det mere tæt mellem Hadsten, Viby og Silkeborg. Det var først i sidste sekund af den sidste puljekamp det blev afgjort, at det var Hadsten, der skulle møde Løgstør i finalen.\nOm det var hjemmebanen, der gav Løgstør en fordel skal være usagt, men Løgstør-pigerne fejede alt modstand af banen. I finalen kom det flotte angrebsspil også fra hele holdet, der samtidig stod utroligt stærkt i forsvaret og gav målmanden optimale arbejdsbetingelser. Dermed sluttede Løgstør som fortjente vindere af mesterskabet med en overlegen sejr på 10 mål i finalen.\nPigerne holder nu en meget lille pause, inden forberedelserne startes op til den næste sæson, hvor der er udskiftning på trænerposten. Bedre afskedsgave kunne pigerne ikke give deres trænere.


VIDEOPREMIERE: Roskilde-aktuelle girlcrush kører DIY-æstetikken helt ud i ny musikvideo | bandsoftomorrow.com\n26 jun VIDEOPREMIERE: Roskilde-aktuelle girlcrush kører DIY-æstetikken helt ud i ny musikvideo\nPosted at 12:00h in Nyheder\tby\tIda Hummelgaard\nDen queer-feministiske trio girlcrush kom i fredags med den romantiske andensingle “girlcrush”, som nu får en tilhørende charmerende musikvideo.\nDet er gået hurtigt for den københavnske trio girlcrush, bestående af Marie (bas/sang), Andrea (trommer/sang) og Nat (guitar/sang), der med debutsinglen “Take My Clothes Off” fik markeret sig som et af de mest spændende acts på den danske musikscene lige nu. Gruppen dyrker den skramlede pop-punk lyd med taktfaste trommer, en pumpende bas, energiske akkorder og simple korstemmer. Der er ikke så meget pis med girlcrush, og det vidner deres selvbetitlede andensingle også om. Med tekst og melodi i fokus er nummeret en kærlighedserklæring til Nats kæreste, og det upolerede og rå lydbillede afspejler sig også i deres nye musikvideo til nummeret.\nFortællingen om en nyforelskelse bliver smukt portrætteret gennem et lyserødt polaroid-lignende filter. Videoen viser på bedste vis, hvordan man i forelskelsens eufori kan blive betaget af selv de mindste, finurlige hverdagsvaner hos en person.\nDet pladderromantiske tema ender i bedste 00’er-stil med et hjerte der fyldes af de tre bandmedlemmer, som var det et afsnit af ‘hjerteflimmer’. Videoen byder også på flere klip af bandet i live aktion, som kun gør os endnu mere ivrige efter at opleve dem på søndag på Roskilde Festivals Rising scene.\nGirlcrush, Roskilde Festival 2019


Sådan får du adgang til NETGEAR-routere\nSådan finder du IP-adressen til en NAS-enhed\nSådan får du adgang til en Motorola kabelboks via Ethernet\nOpsætning af et trådløst LAN med gæstetjenester\nSlut et Ethernet-kabel til 'Ethernet' -porten på den første computer. Tilslut den anden ende af kablet til 'Ethernet' -porten på den anden computer. Dette skaber et tethered 'Small Network' mellem de to computere.\nFind drevet eller mapper eller filer, du vil dele med den anden computer, og højreklik på ikonet. Vælg 'Deling og sikkerhed.' Klik på hyperlinket titlen, 'Hvis du forstår sikkerhedsrisikoen, men du vil dele filer uden at køre guiden, skal du klikke her.' Klik på, 'Bare aktiver fildeling.' Disse to meddelelser vises kun i den første fil, mappe eller drev, du opretter deling på.\nAnbring et afkrydsningsfelt ved siden af, 'Del denne mappe på netværket' og ved siden af, 'Tillad netværksbrugere at ændre mine filer.' Angiv et netværksnavn i feltet 'share name'. Klik på 'OK'.\nGå til den delte mappe ved at gå til menuen 'Start', klikke på 'Denne computer' og derefter ved at gå til 'Mine netværkssteder. ' Endelig skal du klikke på ikonet med det navn, du har angivet i det sidste trin.\nHvis du ejer to computere, og du vil overføre filer fra en computer til den anden med et Cat5 Ethernet-kabel, kan du gøre det ved at muliggøre fildeling på den computer, du vil overføre filer fra. Dette kaldes et 'lille netværk'. Selv om denne metode er noget primitiv på grund af fremkomsten af nav, omskiftere og trådløse routere, hvis du er på et budget, eller du har brug for at overføre filer hurtigt, får du et arbejde med et Cat5 Ethernet-kabel.


Dødeligt syg kvinde bad om hjælp på Facebook - blev mødt af kærlighedsstorm - TV 2\nDødeligt syg kvinde bad om hjælp på Facebook - blev mødt af kærlighedsstorm\n23. mar. 2020, 21:58\nPernille Gaarde søgte om hjælp til at komme til kemobehandling på Facebook og modtog en kærlighedsstorm. Foto: Privatfoto\n48-årige Pernille Gaarde søgte en til at gå i karantæne med hende. Hun fandt ikke blot en hjælper - hun også modtog en storm af kærlighed.\n- Sidder der en der ude, som kunne tænke sig/har lyst til at komme i karantæne her hjemme ved mig?\nSådan indledte 48-årige Pernille Gaarde i sidste uge et Facebookopslag, som i dag er delt knap 700 gange. Her efterlyste hun en person til at gå i karantæne med hende og køre hende tværs over landet til kemobehandlinger, da hun er uhelbredeligt syg med kræft.\nOg hun blev noget overrasket over den respons, hun fik. Og Pernille Gaarde fik ikke kun talrige tilbud om kørsel og hjælp.\nHun har også fået over hundrede beskeder fra folk, der er blevet rørte over hendes opslag.\n- Det væltede ind med beskeder fra folk, som var blevet dybt rørt over min situation, og som ville sige, at de tænkte på mig, siger Pernille Gaarde til TV 2.\nHar fundet flere hjælpere\nGrunden til, Pernille Gaarde skrev opslaget, hvor hun bad om hjælp, var, at hun har en fremskreden, sjælden kræftform, som kræver kemobehandling langt fra hendes hjem. Hun bor alene, og har to døtre, som er i isolation grundet egne helbredsproblemer.\nFordi hun tager sløvende medicin, må hun ikke selv køre fra sit hjem i Kolding til kemobehandling på Herlev Sygehus - en køretur på godt to og en halv time.\nPå grund af behandlingens svækkende virkning på Pernille Gaardes immunforsvar, var hun nødt til at finde en person, der garanteret ikke var smittet med coronavirus. Altså skulle hun finde en person, der levede i isolation.\nOg selvom hun til at starte med troede, det var "optimistisk", at nogen ville kunne hjælpe hende, har hun nu både fundet en egnet chauffør og en "backup."\nJeg er dybt, dybt taknemmelig\nFår hjælp af kvinde i isolation\nPernille Gaarde kommer primært til at få hjælp af en jævnaldrende kvinde, som dog ikke går i karantæne i Pernille Gaardes hjem, men som lever i karantæne hos sig selv, da hendes egen far også er kræftsyg.\nSelvom hjælperen altså ikke går i karantæne i Pernille Gaardes hjem, stoler Pernille Gaarde hundrede procent på, at kvinden holder sig smittefri.\n- Jeg stoler på hende, og jeg har forklaret hende, at nu lægger jeg jo faktisk mit liv i hendes hænder, siger Pernille Gaarde.\nKvinden forsikrede hende dog om, at hun for at beskytte sin egen kræftsyge far, har været i karantæne i tre uger allerede.\nPernille Gaarde har en sjælden kræftform: Bløddelssarkom i vævet omkring tarmene. Da sygdommen blev opdaget i 2017, var den i stadie 4 - det sidste stadie. Foto: Privatfoto / TV 2\nDermed er det blevet aftalt, at kvinden kører Pernille Gaarde til sin næste kemobehandling 31 marts.\n- Jeg er dybt, dybt taknemmelig, siger Pernille Gaarde.\nSkulle kvinden en dag ikke kunne køre Pernille Gaarde alligevel, har hun via facebookopslaget også fået kontakt med en "backup"-chauffør - en kvinde fra Aarhus, der ligeledes lever i karantæne.\nJeg kan virkelig mærke deres kærlighed i de beskeder\nHundrede beskeder fra hele landet\nSelvom Pernille Gaarde er lettet over, at hun via facebookopslaget fik den hjælp, hun så desperat havde brug for, er hun også meget rørt over alle de danskere, der har rakt ud til hende, selv om de ikke kunne hjælpe.\nHun har fået over 100 beskeder og opkald fra folk, som fortæller hende, hvor berørte de er over hendes situation. Hun har fået tilbud om hjælp til alle slags ærinder fra hele landet: Bornholm, Aalborg og flere steder på Sjælland.\nAndre skriver blot for at lade Pernille Gaarde vide, at hun er i deres tanker.\n- Det er utroligt, at så mange tager sig tid til at skrive til mig, at de tænker på mig. Jeg kan virkelig mærke deres kærlighed i de beskeder, siger Pernille Gaarde.\nHun oplever, at coronakrisen har gjort, at folk er mere villige til at træde til med hjælp - også til fremmede.\n- Jeg er virkelig rørt over, hvor søde folk er, og hvad de vil gøre for en, de overhovedet ikke kender, siger Pernille Gaarde.\nSe før og efter-billederne: Coronavirus sætter verden på pause


vil kvinder der\nmeget spændende se, når\nbliver skræmt, tuder følger\ngør det meget klart\nJeg har haft ondt i halsen før men denne gang gør det fandme ondt. Har været lidt forkølet, men slet ikke voldsomt. Selvom jeg tager Strepsil og.\nDer kan være flere grunde til en øm hals. Ifølge overlæge i øre-, næse- og halskirugi på Privathospitalet Hamlet, Birgit Claudia Becker, er en virus i form af en Mangler: google.\nKlik ind på daniel-alberts.info og find midlet til at slippe af med ondt i halsen. Vi har et stort udvalg af effektive produkter og vejleder omhyggeligt i anvendelse. Linker lige, hvis andre skulle kunne bruge denne til noget ifb. Derfor kan jeg godt relatere til at klumpfølelsen skyldes noget psykisk, hvor angst spiller en stor rolle. Rømmer sig hele tiden og er generet af noget i halsen. Selve den hjemlige handel med slaver fungerede som en ekstra form for kredit, der kunne bruges til at skaffe kontanter. Ha det godt så længe. Men disciplinen kom med et budskab om en iboende overlegenhed. IS MY DAD GAY? (Google Feud w/ KickThePJ)\nRacismen ikke: Googlel øm på halsen\nGOOGLEM FEBER MORGEN Butler løn kön\nØm i ganen ondt i halsen hele tiden Jeg fandt pludselig mig selv på gulvet i mit kontor ude af stand til at bevæge mig fordi at hele verden roterede. I sidste uge var jeg så ved lægen for at få lavet en test af mine lunger, som viste sig at være normale. Jeg har haft følelsen i lidt over googlel øm på halsen halvt år. Jeg har været igennem følgende behandlinger i omtrent denne rækkefølge — uden held: Som det kan ses på oversigten, havde jeg endnu ikke fundet en løsning på problemet efter over tre år med denne plage. En meget frustreret mand. Linker lige, hvis andre skulle kunne bruge denne til noget ifb.\nBARBERET PIK HVAD BETYDER CASUAL Det nedsætter livkvaliteten meget, googlel øm på halsen. Det er dog sjældent, at folk med de lidelser, beskriver en løsning på problemet. Trump lovede at bevare dem og donere dem til Metropolitan Museum of Art, men det skete aldrig. Problemet kommer og går i periooder og min fornemmelse er at det ofte kommer når der er skift i vejret, især ved skift mellem årstider. Men folk er holdt op med at lytte, de kigger i stedet for og bliver benovede. De virkede kun kortvarigt og problemet kom altid tilbage.\nBEDSTE DATING SIDER JUSTIN BIEBER DATING Bbw dating håndværker dating\nidealet "den herredømmefri kommunikation", som\nblomster hofteholder med\nhar flot udvalg\nlæste interessant artikel\ndebat mest henvendt til udlandet når dating gennem Multiorgasmer eller serieorgasmer består var klar jeg


Sådan undgår du at fare vild i kostrådene | Søndagsavisen\nSådan undgår du at fare vild i kostrådene\n29. apr 2019 Cathrine Lykke-Rasmussen, MY DAILY SPACE\nPalæo, raw-food, glutenfri, vegansk, syre-base-kuren, 5:2-diæt, spis efter din blodtype. Diæter, kure og kostanbefalinger fyger om ørerne på os, ikke mindst på diverse blogs og sociale medier.\nHer kan madbloggerne komme ind i billedet, med deres lækre æstetik og stærke (billedbårne) formidling, som med fordel kan tjene som inspiration, hvis myndighederne i højere grad vil igennem med de officielle kostråd.\nLæs også på MY DAILY SPACE: Alt om antiinflammatorisk kost\nLæs også på MY DAILY SPACE: Opskrift: Italiensk kødboller i tomatsauce med bønner og kikærter\nVælg fuldkorn frem for den lyse hvede, når der lægges i kurven i supermarkedet. Fuldkorn indeholder nemlig mange kostfibre, vitaminer og mineraler, og så fylder det betydeligt mere end i hvidt brød. Du bør sigte efter 75 gram hver dag, men den letteste måde at opnå dette er ved simpelthen bare altid at vælge fuldkornsprodukter.\nSelvom fedt er et vigtigt næringsstof, så bør du være påpasseligt med mængden af fedt. Derfor skal du spise kød, der indeholder en rimelig mængde fedt. Især mættet fedt og transfedtsyrer bør du skære ned på. Derfor bør du spise magert kød såsom okse-, kalve-, lamme- eller svinekød, og du bør helst gå efter kød med mindre end 10 procent fedt i.\nDette punkt handler også om fedt og råder til at vælge mælkeprodukter, der har mindst fedt i sig. Det kan eksempelvis være skummet-, mini- eller kærnemælk. Du behøver heller ikke drikke mere end 0,2-0,5 liter mælk om dagen og mange klarer sig rigtig fint uden mælkeprodukter overhovedet. I osten handler det om at vælge dem med maks. 17 procent fedt (30+).\nVi får dagligt omtrent 8-10 gram salt igennem maden, men vi behøver nok snarere kun fem gram. Du kan undgå for meget salt ved at tilsætte mindre (no shit Sherlock!) og ved at lave mere mad selv, så du undgår det skjulte tilsatte salt.


Dagplejere til Gilleleje, Annisse og Helsinge - Ledig stilling\nDagplejen i Gribskov Kommune udvider, og derfor søger vi dagplejere til Gilleleje, Annisse og Helsinge – hurtigst muligt eller senest 1. oktober 2022.\nBrænder du for at skabe en hverdag for børns betydningsfulde første leveår, præget af tryghed og omsorg? Kan du se dig selv skabe udvikling, dannelse og læring med ro til fordybelse i en lille børnegruppe? Holder du af at bruge kroppen og være ude det meste af dagen? Ser du muligheder frem for begrænsninger? Så er det muligvis dig, der skal være en del af en engageret personalegruppe, der ønsker at skabe de bedste betingelser for et godt børneliv.\nGribskov dagpleje er en institution fordelt på mange matrikler i hele Gribskov Kommune. Dagplejen er en del af det samlede dagtilbud i Gribskov Kommune.\nDagplejen har plads til ca. 85 børn i alderen nul til tre år. Dagplejen er DGI-certificeret, hvilket betyder at vi er optagede af, at vi lærer gennem vores kroppe og sanser.\nStillingen er i eget hjem, med fastlagt arbejdstid på 48 timer ugentligt i tidsrummet 6.30-17.00.\nDagplejerne besøger hinanden indbyrdes, så børnene lærer deres gæstedagplejer at kende. Vi har en engageret forældrebestyrelse og forældre, der vil hinanden og deres børn det bedste.\nHos os betyder et godt børneliv en nærværende og anerkendende atmosfære, med tid og fordybelse til det enkelte barn.\nVi benytter vores daglige rutiner, fysiske rammer, legeplads og nærområdet som læringsmiljø.\nDu vil få en varieret arbejdsdag med skønne børn samt et tæt og højt prioriteret samarbejde med positive forældre.\nDu vil blive en del af en engageret personalegruppe med et godt kollegialt samarbejde, der brænder for at skabe de bedste betingelser for børnene og hinanden.\nVi arbejder ud fra en anerkendende tilgang med inkluderende fællesskaber, hvor børnene er aktiv del af hverdagen. Vi inddrager børnene i de daglige rutiner, bl.a. dækker vi bord sammen, vasker legetøj, rydder af osv.\nVi lægger vægt på børns leg og frie udfoldelse samt på det gode kammeratskab, hvor vi lærer at tage hensyn og hjælpe hinanden. Vi arbejder med børnene i aldersopdelte grupper, så børnene får det største udbytte af aktiviteterne.\nVi bestræber os på at børnene kommer ud af matriklen og oplever verden udenfor.\nVi har personalemøde ca. fire gange om året i aftentimerne, ellers på legestuedage efter behov, pædagogisk lørdag, samt forældremøder.\nVi søger dagplejere med høj faglighed og stor interesse for at arbejde med de nul- til treårige børn. Du skal bo i Gilleleje, Annisse eller Helsinge.\nDu skal være god til at tage initiativ i forhold til de daglige rutiner og pædagogiske aktiviteter. Det er essentielt, at du kan se læringsaspekter i dagligdagens rutiner.\nDu skal have gode kommunikative kompetencer, være fleksibel, have høj arbejdsmoral, evne at reflektere over egen praksis og være åben for dialog om pædagogik.\nVi har sparring med psykolog, familierådgiver, logopæd og ergoterapeut samt hjælp fra kompetente støtte- og flersprogspædagoger, hvis der er behov for dette.\nHvis du har spørgsmål til stillingen eller brug for yderligere oplysninger, kan du kontakte de pædagogiske dagplejekonsulenter - Helle Kierstein på telefon 72 49 71 58 eller Pernille Hecht på telefon 72 49 62 74 - eller den konstituerede leder Lene Nygaard Otto på telefon 72 49 72 09.\nVi glæder os til at modtage din ansøgning, som skal være modtaget senest 15. august 2022.\nTlf. 72 49 71 58


KV17 - debat Syddjurs: Min dybeste respekt for vores lokalpolitikere\nJørgen Brøgger og resten af Borgerlistens bagland i Syddjurs opgav at opstille en liste til kommunalvalget. Den tidligere Ebeltoft borgmester udtrykker sin dybeste respekt for de kandidater, der lige nu kæmper om en af de 27 pladser i byrådssalen.Foto: Lars Norman Thomsen\nMin dybeste respekt for vores lokalpolitikere\nAf Jørgen Brøgger, tidligere medlem af Syddjurs Byråd for Borgerlisten og før endnu borgmester i Ebeltoft:\n“Strøtanker i en kommunalpolitisk valgkamptid.\nDet er ikke sjældent, at jeg (og uden tvivl også mange andre) må lægge øren til diverse udtalelser om politikere. Både landspolitikere og lokalpolitikere. Og jo da ikke mindst i denne kommunale valgkamptid.\nPolitikerne – både dem på Christiansborg og især de lokale – bliver som oftest benævnt som ”de” eller ”man”. Og der er på det nærmeste ingen grænser for, hvad de bliver benævnt som og beskyldt for. ”De” benævnes som oftest som uduelige, inkompetente, direkte dumme og ”åndssvage” – undskyld udtrykket, men det er faktisk et ofte anvendt udtryk.\nDet, der derfor undrer mig meget, er, hvorfor det er så vanskeligt at få nogen til at opstille for de forskellige partier og lister, som f.eks. nu her til kommunalvalget?\nNår der nu findes så mange kloge mennesker, der har ”løsningen” på dette og hint – ovenikøbet uden behov for at sætte sig ind i realiteterne og baggrunden for de beslutninger, som ”de dumme politikere” træffer, hvorfor er der så ingen af alle disse kloge mennesker, der stiller op for at komme til at gøre en forskel – til forskel for de ”dumrianer”, der ”bare sidder der” og åbenbart ikke ved, hvad de har med at gøre ?\nJeg er fuld af beundring for alle de kandidater, der stiller op til kommunevalget, uanset hvilket parti, I stiller op for. – Tak fordi, I er parate til at yde en indsats til gavn for lokalsamfundets – og dermed borgernes – bedste. Uanset hvilket ståsted, I har.\nDe fleste af Jer vil ikke blive valgt, der er kun plads til 27. En del af de ”garvede” vil formentlig blive genvalgt, og andre skiftet ud med nye og yngre kræfter. Sådan må og skal det være. Men I, der bliver nyvalgt, skal vide, at I går ind til et spændende, men også meget krævende, arbejde. Det er spændende at være med til at præge lokalsamfundet ud fra, hvad man selv synes, er det rigtige. Men I skal også vide, at det er hårdt. Hvis man vil gøre det godt og ”rigtigt”, kræver det et enormt tidsforbrug. Det er under ingen omstændigheder noget, man kommer sovende til.\nOg I skal også vide, at det kan være verdens mest utaknemmelige ”job”. I kan nemt komme ud for at blive ringet op både tidligt og silde af borgere, der gerne vil have jer til at indtage en bestemt holdning, ofte ud fra personlige ønsker, eller som vil skælde ud over et eller andet. Ofte har de, der foretager sådanne opkald, ”oceaner af tid”, uanset tidspunktet for telefonopkaldet. – Det samme gælder journalister, der kan ringe på alle tidspunkter af døgnet og afkræver Jer en stillingtagen til et eller andet emne – ”her og nu” og uforberedt ”på stående fod”.\nMen lykke til, til alle I, der er parate til at tage en tørn – og tak for det.\nOgså en stor tak til alle I, der har været med i flere år, og formentlig kommer til at tage en periode mere. Jeg synes, at I (næsten) alle har gjort det godt, - meget bedre, end ”folkedomstolen” bedømmer jer til. Det håber jeg, at I vil blive ved med – i et godt og positivt samarbejde til gavn for vores alles kommune, Syddjurs.\nJeg er på det seneste blevet mødt med flere udtalelser, om ”hvem skal vi nu stemme på, når Borgerlisten Syddjurs ikke er der mere” ? – Det kan naturligvis kun glæde mig som parti-upolitisk Borgerlistemand, men jeg har indtil nu kun kunnet svare ”Det ved jeg heller ikke”. – MEN til de, der har nævnt muligheden af slet ikke at stemme, har jeg sagt: ”Du SKAL stemme – du skal ikke kun tænke på din stemmeret, men også på din stemmePLIGT”. - ”Hvis du er helt tom for, hvad eller hvem, du skal stemme på, så må du stemme blankt. Du må ikke blive sofavælger”.\nMin opfordring til alle skal være: Mød frem, udøv din ret og din pligt, - og stem personligt på en kandidat, som du har tillid til, som du føler, nærer de samme tanker og ønsker for vores kommune, som du selv, og som du føler er troværdig og ordholden. – Husk, dette er ikke landspolitik, men lokalpolitik. Det kræver nogle byrådspolitikere, der sætter kommunens og lokalsamfundet ve og vel over landspolitisk parti-ideologi.”\nPubliceret 11 November 2017 16:04


Mandag, 16. juli 2018 - 13:21\nFoto: Jacob Heinel Jensen\nNadia-Shilas mor er blevet indlagt på hospitalet\nNadia-Shilas mor Heidi Pedersen måtte i nat indlægges, efter at hun blev ramt af en smertefuld omgang galdesten.\nDet skriver Nadia-Shila på sin instagram-profil, hvor hun har delt et billede af sin indlagte mor.\nGaldesten kan give anfald af milde til kraftige smerter i øvre højre del af maven og opstår ofte efter et måltid. De voldsomme smerter kan vare i timevis, og for nogle kan det blive nødvendigt med en operation.\nMin lille mus er gået i brædderne efter at have været oppe med mormor klokken tre i nat grundet galleblære anfald. Mormor er nu indlagt og musen tager en veltrængt lur på mama Vi sender en masse tanker til momse indtil vi tager op til hende\nEt opslag delt af Nadia Hope & Jeremy (@thegozdanfamily) den 14. Jul, 2018 kl. 7.31 PDT\nNadia-Shila har dog ikke oplyst, om hendes mor får brug for en operation for at komme til hægterne igen.\nHeidi og Nadia-Shila bor begge i USA, hvor Nadia-Shila i dag er gift med den HIV-smittede Jeremy. Parret har desuden datteren Hope.\nNadia-Shila blev tidligere på året idømt seks måneders ubetinget fængsel, mens hendes mor blev idømt fire måneders ubetinget fængsel for omfattende bedrageri.\nParret har dog søgt tilflugt i USA, hvor de i dag lever af at tigge – og de fortæller også gerne åbent om deres liv på gaden.\nSenest har Nadia-Shila og hendes mor truet Radio24syv-værtinde Ditte Okman med tæsk.\n- Du er bange for mig. Jeg bider dig nok ikke, men du skal nok ikke komme i nærheden af mig, hvis du ser mig herovre, for så kan jeg ikke love dig, hvad der vil ske. Du kan tage det som en advarsel, du kan tage det som en trussel. Det bliver ikke særlig kønt, tordnede Nadia Shila, 23, mod Okman på YouTube.\nBaggrunden for raseriudbruddet er, at Ditte Okman flere gange har beskæftiget sig med Nadia Shila i programmet, ”Det, vi taler om” på Radio24Syv.\nDesuden tror Nadia-Shila og hendes mor, at Ditte Okman står bag hjemmesiden Skipper Mamma (skippermama.dk), der dagligt forholder sig kritisk til Nadia Shilas liv.\nOkman tager dog truslen med knusende ro:\n- Jeg har kun set knap halvdelen af videoen, men har sjældent set så meget vrøvl. Hun refererer nogle udtalelser fra min YouTube-kanal. Sagen er bare, at jeg ikke har en YouTube-kanal, siger Ditte Okman til SE og HØR.


We Still Kill The Old Way | DVD Film | Dvdoo.dk\nFakta om We Still Kill The Old Way\nSteven Berkoff Alison Doody Ian Ogilvy James Cosmo Lysette Anthony Tony Denham Christopher Ellison Danny-Boy Hatchard\nDougie Brimson Sacha Bennett Gary Lawrence\nWe Still Kill The Old Way, Dvd, Movie\nDin anmeldelse af We Still Kill The Old Way\nDvdoo.dk har gennem årene solgt alt ud i tv-serier og film på Dvd. Årsagen til vi kan gøre dette, er fordi vi har rigtig mange genrer. Lige fra actionfilm til romantiske film.\nPå trods af at der kan opstå uoverensstemmelser og venskabelige diskussioner ved bordet, så er vores kæmpe fælles lidenskab altid uændret. Det er netop også denne passion, der binder os sammen og gør, at vi er på hjemmebane, når vi anbefaler gode TV-serier og film.\nRigtig god fornøjelse med at se We Still Kill The Old Way. Vi håber du får en rigtig god oplevelse.\nVi har været forhandler af musik, spil og film siden 1999, og vi er derfor i dag den ældste forhandler indenfor vores branche i Danmark. På tværs af alle markeder er vi derudover en af landets ældste webshops. Da dvdoo.dk blev startet var det som en DVD webshop. Og i årenes løb, mens vores lidenskab for nye tekniske formater og nye film bare udviklede sig mere og mere, begyndte en tilsvarende interesse for musikken og spiluniverset at tage form. Så det var klart for os, at både CD'er og spil blev en del af dvdoo.dk's sortiment.\nAt frembringe den optimale oplevelse for kunden, er noget vi konstant bestræber os på. Og branchekendskabet, som vi over tid har samlet, har givet os et nuanceret billede af, hvilke ønsker kunderne har, når de leder efter musik, spil eller film hos os. Vi ønsker bl.a., at vores store lidenskab for musik, spil og film er helt tydelig, og smitter af på dig og alle andre, der besøger vores verden af topunderholdning.\nHar du spørgsmål eller er du i tvivl om noget, så finder du ofte svaret i vores FAQ. Vores kundeservice står endvidere altid til din rådighed til at svare på dine spørgsmål, og du kan få fat i os enten via e-mail eller per telefon. Rigtig god fornøjelse med besøget i vores netshop.


Heidi og Mads fra 7-9-13: Derfor er de ikke med længere – Ekstra Bladet\nMandag d. 23. feb. 2015 - kl. 21:42 0\nHeidi og Mads fra 7-9-13: Derfor er de ikke med længere\nHeidi og Mads deltog i første sæson af DR's program 7-9-13. Men de ville ikke være med i anden sæson\nTorben og Astrid er et af de fire par, der har valgt at fortsætte endnu en sæson i programmet 7-9-13. Sæsonen havde premiere i dag. (Foto: Jonas Olufson)\nAf: Kirstine Østrup , Kicki S. Bengtsen\nI første sæson af DR's program 7-9-13, følger man Heidi og Mads, som mødte hinanden på farmer-dating.dk, men parret har takket nej til at fortsætte i DR's program, som ellers har til formål at følge parrene i de næste år.\nIfølge redaktør fra DR, Dorthe Thirstrup, er det en beslutning der er taget på baggrund af en fælles snak.\n- Vi snakkede længe om det og undervejs nåede vi frem til, at det ikke var en god ide, at de fortsatte, siger hun til Ekstra Bladet.\nDet er en beslutning, som ifølge Dorthe Thirstrup er truffet af begge parter.\n- Det er en beslutning, der er taget i fællesskab. Jeg skal ikke gøre mig klog på, hvilke overvejelser parret har haft undervejs. Det var smartest, at de ikke var med længere, fordi det var sådan de havde det.\n- De tilbagemeldinger, som jeg har fået fra dem var, at det kunne være svært at overskue. Både rent praktisk med kameraer og tid, men også den opmærksomhed, som det skabte omkring dem, siger redaktør Dorthe Thirstrup.\n- Hvis det er den følelse, som deltagerne sidder tilbage med, har man så været god nok til at forberede dem på, hvad der ventede dem?\n- Ja, det vil jeg sige. Produktionsselskabet bag serierne har stor erfaring med at lave dokumentarserier, der går helt tæt på almindelige mennesker. Så ja, jeg er meget tryg ved, at de har informeret dem ordentlig.\n- Ligger ansvaret for at orientere deltagerne ordentligt så hos dem?\n- Nej, ansvaret ligger altid hos mig. Men det er dem, der har kontakten til dem i det daglige.\n- Er de gået ind til noget, som de ikke kendte konsekvenserne af?\n- Nej, det vil jeg ikke mene. Men hvordan skal man kunne forberede folk på, at det potentielt ikke er sjovt? Man kan jo godt have lyst til en tur i rutschebanen, men når man kommer ned, så kan man alligevel godt tænke: ’Uh, det gik alligevel lidt for stærkt', siger Dorthe Thirstrup fra DR.\nI sidste sæson fulgte man Heidi, som boede i Skagen. Heidis hendes mor drillede med, at hun burde finde sig en landmand, som hun kunne dele en stille tilværelse med. Derfor lavede Heidi lavede en profil på farmer-dating.dk. Her mødte hun Mads fra Samsøe, og da han nogle få uger senere kom på besøg i Skagen, slog det gnister. Da de havde været kærester i et halvt år, flyttede Heidi til Samsøe med den ene af sine sønner. Danskerne kunne i programmet følge parret kæmpe sig i gennem Heidis arbejdsskade og Mads' konkurs.\nEkstra Bladet har forsøgt at få en kommentar fra Mads og Heidi for at høre, hvordan det går dem i dag, men det har desværre ikke været muligt.\nBøvl med familien\nI aftenens program kom det i øvrigt frem, at flere af deltagerne har problemer med deres familie, fordi de har valgt kærligheden til. Det gælder blandt andet Ronnies familie, som har svært ved at forstå, at han har giftet sig ind i en familie med fire børn og en eksmand, og derfor ser Ronnies forældre ikke han og konens fælles datter, Ibi.\nRonnie er dog ikke den eneste, der har familieproblemer. Torbens børn har nemlig svært ved at forstå, at han forlod deres mor for Astrid så sent i livet, og det skaber knas i deres forhold.\nDeltageren Jesper står dog over for et helt andet dilemma end Ronnie og Torben. Han er nemlig gået med til at få et barn med Christina, selvom han dybest set ikke ønsker det.\nDu kan følge med i programmet 7-9-13 på DR1 de kommende tre mandage.


Farveblok og geometriske mønstre i den nye Blik-vinyl - Supplerer\nfirma Blik har præsenteret en ny vinylkollektion der er inspireret af farveblok og har geometriske former. Der er flere linjer i den samme samling, men den, som jeg kunne lide mest, er den med overlagrede rektangler i flere intense farver, som vi kan se på billederne på disse linjer.\nSamlingen er et design af Javid mine, inkluderer vinyl i forskellige farvesæt, og ud over dem, der er dannet af rektangler, er der også mere asymmetriske dem med skrå linjer. Mange tør ikke med farveblokken, selvom andre længe har forsøgt at omdanne den til en trend, måske kan vinyl som disse hjælpe.\nNu hvor vi er i foråret kan det være et godt tidspunkt at turde med muntre farver, men alligevel for dem, der ikke ønsker særlig stærke farver vinylerne fås også i grå kombination. På billedet på disse linjer kan du se vinyl i skråformer, hvilket svarer til den anden del af samlingen.\nSå hvis du tænker på at give et strejf af farve med blokfarveteknik til et af værelserne i dit hus, og du har ikke besluttet, hvordan vinyl kan være en god mulighed. De er lette at placere, og vi kan fjerne dem og ændre dem for andre, når vi bliver trætte af dem.\nDet nye sommerkøkken i Karlos Arguiñano\nÆndringen af køkken, som Karlos Arguiñano giver i sit daglige program, er allerede en klassiker i Decoesfera, i hænderne på Fagor, da det allerede er en klassiker, Arguiñano forlader studiet til side og drager fordel af udsigten over hans hjemland for at tage ud dit program Jeg må sige, at med det scenarie har du det meget let med udsmykningen, med det ønske, som vi alle har fra stranden og ser på havet bag det, er det svært for os at være opmærksomme på køkkenet, men ... vi bliver nødt til at gøre en indsats.\nForuden sanger, sangskriver og skuespiller har Lolita Flores - ligesom mange andre berømtheder - også besluttet at tage sine første skridt i designverdenen, men fra hendes egne tegninger, som skal værdsættes, som afspejler en meget unik smag. Alt drejer sig om et centralt billede, en sigøjner bagfra, der ifølge hendes beretning på sin hjemmeside er den første hukommelse, hun har af sin mor.\nSplit Hanger, den perfekte bøjle til at hænge alle dit tøj\nEn stemmeassistent til hjemmet, fremtidens tæpper og en støvsuger, der genoplader vores telefon i Xataka Smart Home (II)


League of Legends har taget verden med storm, da den blev frigivet i 2009. Siden da er den blevet et kendt navn og et af de mest populære MOBA-spil derude.\nNogle spillere har oplevet problemer med spillet, der ikke startes på Windows 10-maskiner. Heldigvis er udvikleren Riot Games hurtig til at patchere de fleste problemer, men hvis League of Legends stadig ikke starter på din pc, hjælper denne guide dig med at løse det.\nHooked on League of Legends? Se på det andet indhold, der er tilgængeligt på vores League of Legends-side.\nFor endnu mere spilindhold, gå videre til vores fantastiske spilhub, hvor vi regelmæssigt sender guider, anmeldelser og rettelser.\nAt starte League of Legends på Windows 10 kan undertiden være vanskeligere end at bekæmpe horder af onde fjender.\nMange spillere rapporterer, at de ofte ikke kan starte spillet på grund af forskellige fejlmeddelelser eller simpelthen fordi der ikke sker noget, når de trykker på play-knappen.\nHvis du oplever League of Legends startproblemer, er du kommet til det rette sted. I denne artikel vil vi liste et par løsninger, der hjælper med at løse disse problemer og starte spillet.\nLad os først se, hvordan en spiller beskriver dette problem:\nJeg opdaterede til den nye klient i går, og alt var godt. Jeg loggede af og i dag starter launcheren, men efter at jeg har trykket på "Launch" forsvinder launcheren, men ingen klient. Jobliste viser to forekomster af “League Client (32 bit)”, der kører under 'Baggrundsprocesser', men jeg kan ikke bringe det op overalt. Forsøg på at starte launcheren igen giver mig 'spillet kører allerede' pup-up, så det er ingen hjælp.\nSådan løses League of Legends-lanceringsproblemer\n1. Geninstaller dine grafikkortdrivere\nIfølge brugere starter League of Legends nogle gange ikke på grund af problemer med dit grafikkort.\nDit grafikkort er afgørende for spilsessioner, og hvis der er et problem med dine grafikkortdrivere, kan du muligvis slet ikke starte League of Legends.\nFor at løse dette problem tilrådes det at fjerne dine grafikkortdrivere og i stedet bruge standarddriverne.\nDer er flere måder at gøre det på, men hvis du vil afinstallere dine drivere fuldstændigt, foreslår vi at du bruger Display Driver Uninstaller til at fjerne dem.\nNår dine drivere er fjernet, skal du genstarte din pc, og Windows 10 skal installere standarddriverne i stedet. Når du har installeret standarddriverne, skal du kontrollere, om problemet stadig vedvarer.\nUd over at bruge standarddriveren anbefaler nogle brugere at installere en ældre version af grafikdriveren, så du kan også prøve det.\nPrøv den næste løsning, hvis dette ikke fik hugget.\nLeague of Legends patch problemer? Vi har også løsninger til det! Tjek denne guide for at se selv!\nInstaller, opdater og reparer dine drivere på ingen tid, og løs dine spilforsinkelser ved hjælp af dette fantastiske pc-værktøj! Gratis prøveversion Download her\n2. Skift user.cfg og slet LeagueClient.exe\nGå til din League of Legends standardinstallationsmappe> gå til RADSsystem .\nFind filen user.cfg , og åbn den med Notesblok .\nSkift leagueClientOptIn = ja til leagueClientOptIn = nej .\nGem og start League of Legends igen.\nNår den er åbnet, skal du gå tilbage til din LoL-mappe> slette filen LeagueClient.exe .\nGem og gå til din League-installationsmappe, og kør lol.launcher.exe .\nHvis LoL stadig ikke starter, skal du prøve at bruge launcheren kaldet “lol.launcher.admin.exe” i stedet.\nIfølge brugere, hvis League of Legends ikke starter på din pc, kan problemet være din user.cfg- fil. Du kan dog løse problemet ved blot at følge ovenstående trin.\n3. Geninstaller spillet\nHvis ingen af disse løsninger kan løse problemet, skal du muligvis fjerne spillet og installere det igen. Der er flere måder at gøre det på, men den bedste er at bruge afinstallationssoftware.\nHvis du ikke er bekendt, er afinstallationssoftware et specielt program, der fuldstændigt kan fjerne ethvert program fra din pc.\nUdover at fjerne det valgte program, fjerner afinstallationssoftwaren alle filer og poster i registreringsdatabasen, der er tilknyttet det program.\nSom et resultat vil det være som om applikationen aldrig blev installeret på din pc.\nDer er mange fantastiske afinstallationsprogrammer, men en af de bedste er IOBit Uninstaller , så vi opfordrer dig til at prøve det. Når du har fjernet spillet ved hjælp af dette værktøj, skal du geninstallere det, og dit problem skal løses.\nTjek vores guide for at geninstallere spillet som en rigtig ekspert!\n4. Start spillet direkte fra installationsmappen\nHvis League of Legends ikke starter på din pc, kan problemet være din genvej.\nIfølge brugere fungerer din genvej undertiden muligvis ikke korrekt, og for at løse dette problem tilrådes det at starte spillet direkte fra installationsmappen.\nFor at gøre det skal du bare gå til installationsmappen, som standard skal det være C: Riot GamesLeague of Legends og dobbeltklik på LeagueClient.exe .\nHvis dette løser problemet, skal du altid bruge denne metode til at starte spillet.\nAlternativt kan du oprette en genvej til LeagueClient.exe på dit skrivebord og bruge den til at starte spillet.\n5. Deaktiver alle igangværende League of Legends-processer\nFind nu både LoLLauncher.exe og LoLClient.exe processer og afslut dem. For at gøre det skal du blot højreklikke på den proces, du vil afslutte, og vælge Afslut opgave i menuen.\nNår du har deaktiveret de krævede processer, skal du prøve at starte spillet igen og kontrollere, om problemet igen vises.\nHvis League of Legends ikke starter på din pc, kan problemet være baggrundsprocesser.\nIfølge brugere kører nogle gange visse League of Legends-processer i baggrunden, og det kan medføre, at dette problem vises.\nDu kan dog løse problemet ved blot at deaktivere alle League-relaterede processer fra Jobliste.\nJobliste fungerer ikke? Løs dette problem på ingen tid med vores guide!\n6. Luk problematiske applikationer\nIfølge brugere kan nogle gange andre applikationer forstyrre League of Legends og forårsage problemer som denne.\nEt program, der kan forstyrre dit spil, er Steam , så hvis du bruger Steam, skal du sørge for at lukke det, før du starter League.\nNår du har lukket Steam, skal du prøve at starte spillet igen og kontrollere, om problemet stadig er der.\nEn anden applikation, der kan forårsage dette problem, er Razer Synapse , så hvis du har det installeret, skal du sørge for at lukke det, før du starter spillet.\n7. Tving spillet til at opdatere sig selv\nGå til LoLs installationsmappe, og naviger derefter til RADS> Projekter .\nSlet begge luftklienter og lol- startmappen.\nGå nu til downloadsmappen og slet dens indhold.\nGå til løsningsmappen, og slet klientmappen .\nNår din pc er genstartet, skal du finde genvejen til spillet og køre det som administrator. Dette vil tvinge spillet til at opdatere, og dit problem skal løses.\nHvis du ikke kan starte spillet, kan problemet være en beskadiget installation. Dette kan være et stort problem, og for at løse det anbefales det at slette bestemte filer fra spillets installationsmappe.\nHvad skal jeg gøre, hvis League of Legends ikke opdateres? Intet enklere med denne guide!\n8. Reparer installationen\nStart League of Legends som administrator . Du kan gøre det ved at højreklikke på genvejen og vælge Kør som administrator i menuen.\nNår launcheren åbnes, skal du klikke på tandhjulsikonet i øverste højre hjørne og vælge Reparer .\nReparationsprocessen starter nu. Husk, at reparationen kan tage et stykke tid, så du bliver nødt til at være tålmodig.\nHvis League of Legends ikke starter på din pc, er problemet muligvis din installation. Nogle gange kan din installation blive ødelagt, og det kan medføre, at problemer som denne vises.\nIntet sker, når du vælger Kør som administrator? Løs problemet hurtigt med vores guide!\nIkke at kunne starte League of Legends kan være et stort problem, men vi håber, at det lykkedes dig at løse dette problem ved hjælp af vores løsninger.\nLeague of Legends er et fantastisk spil, men mange brugere rapporterede, at de slet ikke kan starte det på deres pc. Apropos League of Legends-problemer, her er nogle problemer, som brugere rapporterede:\nLeague of Legends starter ikke efter at have klikket på launch - Dette er et relativt almindeligt problem, der sker med League of Legends. Dette problem skyldes normalt applikationer som Steam eller Razer Synapse, så sørg for at lukke disse applikationer, før du starter spillet.\nLeague of Legends åbner ikke, fungerer, starter Windows 10 - Ifølge brugere opstår dette problem i alle versioner af Windows. Imidlertid er næsten alle vores løsninger kompatible med ældre versioner af Windows, så du kan bruge dem, selvom du ikke har Windows 10.\nLeague of Legends starter ikke - Flere brugere rapporterede, at League of Legends slet ikke starter. Dette kan skyldes din genvej, og for at løse problemet anbefales det at starte spillet lige fra installationsmappen.\nLeague of Legends starter ikke rads-fejl, exe starter ikke, sort skærm på grund af firewall - Der er forskellige problemer, der kan opstå og forhindre League of Legends i at starte, men du skal være i stand til at rette de fleste af dem ved at bruge en af vores løsninger.\nHvis du oplever andre problemer, så lad os det vide i kommentarfeltet nedenfor.\nFAQ: League of Legends almindelige problemer\nHvorfor åbner min League of Legends ikke?\nMest sandsynligt på grund af, at spilfilerne er beskadiget. For at løse dette skal du følge vores guide og komme i gang på få minutter.\nKan Windows 10 køre League of Legends?\nLeague of Legends fungerer på Windows 10 og endda ældre versioner af Windows-operativsystemet. Hvis du har problemer med at køre det, skal du følge trinene ovenfor eller geninstallere spillet.\nHvordan starter jeg League of Legends?\nDownload spilklienten fra den officielle hjemmeside, installer spillet ved at følge installationsguiden, og når du er færdig, skal du klikke på knappen Afspil for at starte spillet.\nHvordan løser jeg League of Legends er stoppet med at virke?\nLeague of Legends kan undertiden gå ned på Windows 10, men der er flere ting, du kan gøre for at få spillet i gang igen.\nEr League of Legends gratis?\nJa, League of Legends er en gratis at spille titel. Der er køb i spillet, der kan foretages.


Imaging Membrane Potential with Two Types of Genetically Encoded Fluorescent Voltage Sensors | Protocol (Translated to Danish)\nImaging membranpotentialet med to typer af genetisk kodede Fluorescerende Spænding Sensorer\nDen største fokus i dette papir er at demonstrere den optiske billeddannelse af ændringer i membran potentialer in vitro ved hjælp af genetisk kodet fluorescerende proteiner. Imaging ændringer i membranpotentiale giver spændende mulighed for at studere aktiviteten af neuronale kredsløb. Når ændringer i membranpotentialet resultat i en fluorescensintensitet forandring, hver pixel i kameraet bliver et surrogat elektrode muliggør nonintrusive målinger af neuronal aktivitet. For over fyrre år har økologiske spændingsfølsomme farvestoffer været nyttigt til at observere ændringer i membranpotentialet 1-4. Men disse farvestoffer mangler cellulære specificitet. Desuden er nogle celletyper er vanskelige at farve. Genetisk indkodede Spændingsindikatorer (GEVIs) overvinde disse begrænsninger ved at have cellerne, der skal undersøges specifikt udtrykker det fluorescerende spændingsfølsomme probe.\nDer er tre klasser af GEVIs. Den første klasse af GEVI bruger voltage-sensing domæne fra den spændingsdrevne sensing phosphatase med enten en enkelt fluorescerende protein (FP) 5-9- eller en Forster resonans (FRET) pair 10-12. Den anden klasse af sensorer anvender mikrobiel rhodopsin som en fluorescerende indikator direkte 13-15 eller via elektrokrome FRET 16,17. Den tredje klasse anvender to komponenter, den genetiske komponent er en membran forankret FP og en anden komponent er en membranbundet quenching farvestof 18-20. Mens den anden og tredje klasser er nyttige til in vitro og skive eksperimenter 19,20, kun den første klasse af sensorer er i øjeblikket anvendelige til in vivo analyser 6.\nI denne rapport vil vi demonstrere billeddannelse af membranpotentialet ved hjælp af den første klasse af GEVIs (figur 1) in vitro. Denne første kategori af spændingssensorer er den nemmeste at overgangen til in vivo-afbildning. Da GEVIs utilizing en spænding-sensing domæne fusioneret til et FP er ca. 50 gange lysere end den rhodopsin klasse af sensorer, de kan afbildes ved hjælp af belysning buelampe snarere end at kræve en ekstremt kraftig laser. En anden konsekvens af forskellen i lysstyrke er, at den første klasse af GEVIs let kan overstige autofluorescens af hjernen. De rhodopsin-baserede prober ikke kan. Den tredje klasse af sensoren er lige så lyse som den første klasse, men kræver tilsætning af en kemisk quencher, som er vanskelige at administrere in vivo.\nVi vil derfor demonstrere erhvervelsen af en sonde med en enkelt FP (Bongwoori) 8 og en sonde, der består af et FRET-par (Nabi 2) 12. Den FRET konstruktioner i denne rapport, er sommerfugl versioner af VSFP-CR (spændingsfølsomme fluorescerende proteiner - Clover-mRuby2) 11, der består af et grønt fluorescerende donor, Kløver, og en rød fluorescerende acceptor, mRuby2, opkaldt Nabi 2,242 og Nabi 2,244\nFigur 1. To typer af genetisk kodede Spændingsindikatorer (GEVIs) Trykte i denne rapport (A) En mono FP baseret GEVI have en trans-membran spænding-sensing domæne og et fluorescerende protein. (B) En FRET baseret GEVI består af en trans-membran spænding-sensing domæne, et FRET donor og acceptor. Klik her for at se en større version af dette tal.\nEtik erklæring: Dyret eksperiment Protokollen blev godkendt af Institutional Animal Care og brug Udvalg på KIST dyr protokol 2014-001.\n1. Opsætning Udstyr\nPlacer en inverteret fluorescensmikroskop på et vibrationsisolering tabel. Brug en stor forstørrelse (60X nedsænkning olie objektiv med 1,35 numeriske åbning) objektiv og et filter terning udstyret med et dikroisk spejl og filtre er egnede til de fluorescerende proteiner, der anvendes til spænding billeddannelse.\nBemærk: Denne opsætning anvender et inverteret mikroskop for at anvende mål med højere NA, men opretstående mikroskoper kan også anvendes. Faktisk omvendt mikroskop er kun for probe udvikling siden højere numerisk åbning (NA) objektivlinsen indsamler mere lys end den ene med en lav NA derved forbedre signal-støjforholdet (SNR; kan beskrives som toppen optiske signal divideret med standardafvigelse for baselinefluorescens) af optagelsen. For ikke-udviklere, vil vi anbefale en opretstående mikroskop til applikationer såsom skive eller in vivo optagelser.\nForbered en lyskilde, f.eks., Xenon buelampe, udstyret med en mekanisk lukker til effektiv epifluorescens wide-field billeddannelse. Rette lyset til mikroskopet via en lysleder montere. Lyset vil passere gennem excitation filter og reflekteres af det første dichroic spejl i filteret terning. Juster lys til at belyse prøven jævnt med maksimeret lysintensitet i synsfeltet 21.\nBemærk: Traditionelt blev en 75 watt bue lygte da højere pærer watt lys skabe større men ikke lysere belysning felter. Lasere kan anvendes, men er begrænset til en enkelt bølgelængde. Lysdioder bliver lysere og kan faktisk være lyskilden valg tilbyder flere bølgelængder og ikke kræver en mekanisk lukker.\nMonter de to CCD-kameraer til fluorescerning mikroskop, som vist i figur 2D.\nBemærk: Den første CCD-kamera har høj rumlig opløsning og anvendes til identifikation af en celle, der udtrykker GEVI i plasmamembranen, der skal testes. For imaging ændringer i membranpotentiale, sikre, at den anden CCD-kameraet har en høj frame rate, såsom 1000 ramme pr sek (fps). Brug en dobbelt port kamera adapter (figur 2D (3)) for at skifte det billeddannende sti mellem de to CCD-kameraer. I denne opsætning er en demagnifier bruges til at tilpasse billedet fra objektivets på CCD-chip i den anden CCD-kamera.\nInstallere et billede splitter mellem den første (langsom) og anden (hurtig) CCD-kameraer til afbildning af FRET baseret GEVI. Sæt et filter terning har et dikroisk spejl (560 nm) og to emissioner filtre (520 nm / 40 & 645 nm / 75) i billedet splitter. Dette vil resultere i to synsfelter, en for donorfluorescensen og den anden repræsenterer acceptor fluorescens. Fjern denne second filter terning når billeddannelse en GEVI med en enkelt FP.\nBemærk: Den enkelte FP baseret GEVI afprøvet i denne metode er Bongwoori som bruger FP, super ekliptika pHluorin A227D (SE A227D). Excitationsfiltret (472 nm / 30), emission filter (497 nm / lang pass) og det dikroiske spejl (495 nm) blev udvalgt baseret på dens excitations- og emissionsspektre 5. Generelt bør excitations- og emissionsfiltre har den største overlapning med hvert spektrum af fluoroforen til at erhverve et lyst billede, mens de dikroiske spejl blokerer enhver excitation lys transmitteret gennem emission filter. Udvælgelsen af filtre og dikroiske spejle til FRET-parret 11 baseret GEVI optagelse efter samme princip, bortset fra at det nødvendiggør et andet filter terning i billedet splitter for samtidig observation af donor og acceptor-fluorescens. Det første filter kube placeret i mikroskopet filter boksen skal have en excitationsfilter (475 nm / 23) for kløver. Derefter udsendes fluorescence fra både rammeprogrammer vil blive sendt til det andet filter terning gennem den første dichroic spejl (495 nm). Det andet filter terning har et dikroisk spejl (560 nm) og to emissionsfiltre (520 nm / 40 for Clover og 645 nm / 75 for mRuby2) for hver FP således separere fluorescens fra to forskellige rammeprogrammer.\nEnkelt FP baseret GEVI\n(Bongwoori) FRET-par baseret GEVI\n(Nabi 2.42 & Nabi 2.44)\nFørste filter terning placeret i mikroskopet excitationsfilter 472 nm / 30 475 nm / 23\ndichroic spejl 495 nm 495 nm\nemissionsfilter 497 nm / lang pasning -\nAndet filter terning placeret i stråledeleren dichroic spejl -\nemission filter 1 - 520 nm / 40\nemission filter 2 - 645 nm / 75\nTabel 1. To forskellige filtersæt anvendes til en enkelt FP Baseret GEVI og en FRET Based GEVI Recordings\nMonter ikke noget udstyr med bevægelige komponenter på vibrationsisolering tabellen. Sørg for, at de kabler, der er knyttet til ikke-isoleret udstyr er løse for at undgå vibrationer af prøven.\nPatch clamp kammer\nForsegl bunden af patch-clamp-kammer med et tyndt # 0 dækglas siden arbejdsafstand på målet er forholdsvis lille. Dette er en ulempe ved omvendt mikroskop setup.\nBemærk: Som en afvejning af at have en høj NA objektivlinse, formindsker arbejdsafstand. For at placere specimen inden for meget kort arbejdsafstand, dækglasset og dækglasset (trin 2) skal være så tynd som muligt.\nSørg for, at badet løsningen strømmer gennem en temperaturregulator at opretholde de lappede-cellerne omkring 33 ° C under hele forsøget.\nForbind patch clamp forstærker og den mekaniske lukker af lyskilden til Bayonet Neill-Concelman (BNC) kommandoen kasse af den høje hastighed CCD-kameraet. Dette vil gøre det muligt for imaging software til at styre forstærkeren, kamera, og lyskilden samtidigt.\nBemærk: De elektriske og billeddannende komponenter skal synkroniseres for at tilvejebringe samtidige elektriske og optiske optagelser af elektrisk aktivitet.\nFigur 2. Equipling Opsætning til Voltage Imaging med GEVIs Arbejdsgangen efter strålegangen, (A) 75W Xenon buelampe, (B) excitationslyset fra lysbuen lampen filtreres af excitation filter og derefter reflekteres af den første dichroic spejlet, før den når til prøvebordet, en indsat i øverste højre hjørne viser helcelle konfiguration, (C) den langsomme CCD-kameraet bruges til at støtte både valget af en celle og patch-clamp, (D) erhvervelse billedet del; (1) den høje hastighed CCD-kamera, (2) det billede fordeler til både FRET-par og mono FP GEVIs, (3) den demagnifier at tilpasse billedet på CCD-chip i den høje hastighed CCD-kamera, (4) den dobbelt port kamera adapter til at skifte imaging vej og (5) den langsomme CCD kamera med høj rumlig opløsning til identifikation af cellen til plaster, (E & F) erhvervelsen billede med en enkelt-FP baserede GEVI (E) og en FRET-baserede GEVI(F). Klik her for at se en større version af dette tal.\n2. Ekspression af GEVIs\nI humane embryonale Kidney 293 celler\nKultur human embryonisk nyre 293 (HEK 293) celler med Dulbeccos modificerede Eagle-medium (DMEM) suppleret med 10% føtalt bovint serum ved 37 ° C i en CO2-inkubator (5% CO2). Brug en vævskulturskål med 100 mm diameter og 20 mm højde. Start kultur med 2 x 10 3 - 6 x 10 3 celler / cm2 og inkuberes, indtil de når 80-90% konfluens til efterfølgende transfektion.\nPå dagen for transfektion, aspireres cellemediet og forsigtigt vaske én gang med Dulbeccos phosphatbufret saltvand. Sprede HEK 293 celler med 0,25% trypsin-EDTA-opløsning for 1-2 min, aspireres løsningen og forsigtigt trykke den side af skålen for at frigøre calen. Tilføj frisk DMEM (10% FBS) og dissociere de klumpet celler ved pipettering. Bestemme koncentrationen celle ved anvendelse af et hæmocytometer.\nPlacer 0,08 - 0,13 mm tyk, 10 mm diameter dækglas præ-coatet med poly-L-lysin i en 24-brønds vævskulturplade. Seed HEK 293-celler på dækglas ved 1 x 10 5 celler / cm2 celledensitet.\nBemærk: Da HEK 293 celler er i stand til at danne gap junctions med hinanden, frø tal skal give isolerede celler.\nTransient transfektion af cellerne med en passende gen konstruktion, der koder en GEVI ved anvendelse af en lipofektionsreagens følge fabrikantens instruktion.\nBemærk: De genkonstruktioner anvendes til dette trin udnyttet pcDNA3.1 (Bongwoori) og pUB2.1 (Nabi 2,242) som backbone vektorer. Mængden af DNA anvendte var 100 ng for hver dækglas; dog transfektionsbetingelser behøver at bestemmes empirisk for hver GEVI der skal testes.\nI dissocieret mus hoftepocampal primære neuroner\nDissekere hippocampi fra embryonisk dag 17 C57BL6 / N-mus og derefter dissociere hippocampale neuroner som tidligere beskrevet 22,23.\nPlade de dissocierede neuroner på poly-D-lysin overtrukne 0.08-0.13 mm tyk, 10 mm diameter dækglas på 1 x 10 5 celler / ml celletæthed. Inkuber cellerne ved 37 ° C i CO2-inkubator (5% CO2).\nTransficere dissocierede neuroner transient ved 6 - 7 dage in vitro (DIV) med en genkonstruktion der koder for et GEVI ved anvendelse af en calciumphosphat-transfektionsreagens som tidligere beskrevet 24.\nBemærk: De genkonstruktioner anvendes til dette trin udnyttet pcDNA3.1 (Bongwoori) og pUB2.1 (Nabi 2,244) som backbone vektorer. Mængden af DNA anvendte var 1 mg for hver dækglas. Igen, transfektion betingelser skal bestemmes empirisk for hver testet GEVI.\nKontroller udtrykket niveauet før spænding imaging\nTag vævskulturpladen fra CO2-inkubator og observere fluorescensen fra de transficerede celler under et epifluorescensmikroskop.\nEfter bekræftelse af fluorescens fra membranen, overføre dækglasset til patching kammer til spændingen billeddannelse i afsnit 3.\nBemærk: Spændingen billeddannelse udføres 16 - 24 timer efter transfektion. Men som forskellige fluorescerende proteiner har forskellige modning gange, nogle GEVIs brug for mere tid i post transfektion. For eksempel kan FRET-par indeholdende mRuby2 i denne protokol tager længere tid at udtrykke da modningen af mRuby2 tager betydeligt længere end Clover 11. Fluorescensen af både donor og acceptor bør kontrolleres.\n3. Spænding Imaging Protocol\nVælg en sund celle med god membran udtryk\nBrug af mikroskopi, finde en sund celle (figur 4B), der viser stærkmembran lokaliseret fluorescens i forhold til indre fluorescens. Prøv ikke at lappe afrundede celler. Cirkulære celler enten dividere eller døende og er vanskelige at lappe. Påfør en test puls 5,0 mV i amplitude og 5,0 ms varighed at hjælpe efterfølgende patch clamp-forsøg.\nForbered cellen for spænding imaging\nEfter at have valgt en celle til plaster, placere patch clamp pipette over cellen. Bring pipette ned, indtil det netop rører cellemembranen. I dette trin observere 1 MW - 2 MOhm stigning i membran modstand på patch-clamp-software 25.\nBEMÆRK: Indimellem kan en god giga-ohm tætning ske blot ved at røre ved cellemembranen. Så længe giga-ohm tætning er stabil, bør det være OK.\nEtablere et giga-ohm tætning ved forsigtigt at anvende undertryk gennem pipetten. Indstil pipetten potentiale ved en ønsket holdepotentiale.\nSamtidig med at den giga-ohm segl, billede the celle med den høje hastighed CCD kamera og fokusere det til membranen område.\nSprænge cellemembranen ved at anvende pulser af sugning gennem munden eller sprøjten for at få en helcelle konfiguration 26.\nBillede plasteret fastspændt celle under en hel celle clamp arrangement ifølge det eksperimentelle design ved hjælp af en billedbehandlingssoftware\nStart imaging-softwaren. Klik på [Acquire] - menuen [SciMeasure Kamera] for at åbne op for "CCD Acquire 'side.\nOpret en ny datafil at gemme billederne.\nKlik på [analog udgang] og derefter [Læs en ASCII] for at åbne op for en puls-protokol-fil til at gennemføre billeddannelse. Klik på 'Beregn gennemsnittet af de interne gentagelser ", hvis data skal beregnes. Luk derefter "analog udgang 'side.\nBemærk: Denne puls protokol skal være konstrueret og gemmes som en ".txt" fil i henhold til formålet med hvert forsøg forud for dette skridt.\nSæt specifikke regelværkition parametre fra "CCD Acquire 'side. Input særlige værdier for 'Antal rammer for erhvervelse «og» Antal forsøg «.\nBemærk: Antallet af frames er bestemt af hastigheden af køb og timingen af puls-protokollen. For eksempel, hvis billeddannelse ved 1 kHz, 1.000 frames lig med 1 sek af optagetid.\nKlik på [TAGE DATA (Optik + BNC)] for at starte optagelsen. Mens spændingen billeddannelse finder sted, se oscilloskop vinduet fra patch-clamp-software for at sikre stabil helcelle konfiguration hele optagelsen.\nBemærk: For at teste GEVI s lydhør spændingsområde, signal størrelse i bf / F værdi eller tidsmæssig opløsning hele fysiologiske spændingsområde, gennemføre en hel celle spænding clamp eksperiment med en puls-protokol har aftrappede spændingsimpulser spænder fra -170 mV til 130 mV. For at bestemme GEVI præstation i løsningen af aktionspotentialer fremkaldt fra dyrkede primary neuroner, billede cellen under en hel celle strømtang konfiguration.\nBeregning af bf / F\nStart imaging-softwaren. Klik på [FILE] - [Læs datafil] for at åbne op for en datafil, der skal analyseres. Overhold cellen billedet i sin Resting Light Intensity (RLI) på højre side\nBemærk: Den software gennemsnit de første 5 billeder til at bestemme RLI af optagelsen.\nKlik på 'Vis BNCs' for at bringe de nuværende og spænding værdier målt til skærmen.\nSkift side mode fra 'RLI ramme' til 'Ramme subtraktion "at udnytte rammen subtraktion funktion til at identificere pixels med responsive optiske signaler. Dette er den sande magt billedbehandling da hver pixel kan undersøges for potentielle ændringer i fluorescens.\nVælg to tidspunkter (F 0 og F 1) til subtraktion. Identificer hvilket område af cellen erviser signaler som reaktion på membranpotentialet forandring.\nBemærk: SNR for rammen subtraktion billeder kan forbedres ved at udvælge flere rammer for hvert tidspunkt til tidsmæssigt gennemsnit signalet. Softwaren fratrækker den gennemsnitlige lysintensitet taget fra valgte rammer og beregner F 1 -F 0 værdier (bf). Normalt vælger man et tidspunkt erhvervet på bedriften potentiale og et andet tidspunkt taget under stimulering periode.\nUdpege de pixels, der skal analyseres ved at trække eller klikke hver pixel med computermus. Observere den grafiske fremstilling af den gennemsnitlige fluorescensintensitet fra de udvalgte pixler på venstre side af softwaren vinduet. Figur 4B & 5B viser repræsentative billeder fra rammen subtraktion analyse.\nOpdel trækkes pixels af RLI (F 0). Klik på [Divide af RLIs] at erhverve bf / F-værdier\nBeregn bf / F værdier for hver spænding skridt til yderligere at analysere GEVI spænding sensing egenskaber. Brug disse værdier til at tegne grafer såsom bf / F versus spænding for efterfølgende dataanalyser.\nFjern strøm og spænding grafer ved unclicking 'Vis BNCs' i menuen. Gå til [OUTPUT] - [Gem Spor som vist (ASCII)] for at eksportere fluorescens spor i en ASCII-fil format til kurvetilpasning analyse af standard graftegning software.\nSpænding sensing ejendom GEVI\nTegn fluorescens forandring versus spænding graf (FV) ved at plotte bf / F-værdier versus spænding i en dataanalyse program. Monter kurven til en Boltzmann-funktion (tabel 2) for at bestemme den af spændingerne det optiske signal ved at klikke på [Analysis] - [Montering] - [S-formet fit] - [dialogboksen Åbn], og vælg derefter Boltzmann-funktion.\nBemærk: Montering til en funktion gør det possible at karakterisere spænding sensing egenskaber af forskellige spændingsniveauer sonder eller at sammenligne deres præstationer i forskellige celler. Boltzmann-funktionen kan anvendes til de testede i dette papir prober fordi FV Kurverne fra disse prober viser sigmoidal mønster.\nNormalisere hver bf / F værdien ved hjælp af første og endelige værdier (A 1 og A 2) beregnet af funktion.\nBemærk: I Boltzmann ligning, minimum er A 1 og maksimum er A 2. For normalisering, bruge et regneark software til at justere bf / F-værdier ved at definere en 1 som nul og A 2 som én. Gennemsnittet af normaliserede bf / F-værdier og beregne standardafvigelsen for statistisk analyse.\nReplot den normaliserede bf / F-værdier versus spænding som tidligere beskrevet i afsnit 5.1.1).\nHastigheden af den optiske respons\nÅbn ASCII-filen erhvervet fra trin 4.2.2) med en dataanalyseprogram og plotte bf / F spor mod tiden.\nKlikke på "Data selector« i dataanalyse software og vælg en gang punkt, der svarer til begyndelsen af en aftrappet spændingsimpuls og en anden gang punkt, når det optiske signal har nået steady state. Monter dette interval til både en enkelt og dobbelt eksponentiel henfald funktion ved at klikke på [Analysis] - [Montering] - [Eksponentiel fit] - [dialogboksen Open], og vælg en eksponentiel henfald funktion. Rapporter det bedre pasform.\nBemærk: Ved montering på de enkelte eller dobbelte eksponentielle henfald funktioner, kan de kvantificerede tidskonstanter repræsenteret ved τ erhverves. Dette vil hjælpe eksperimentatorer sammenligne kinetik deres målinger udført med forskellige spændingsniveauer indikatorer. Fluorescensen spor kan vise hurtige og langsomme komponenter, der kan beskrives med en dobbelt eksponentiel henfald funktion. I dette tilfælde vil beregningen resultere i to tidskonstanter med forskellige amplituder.\nBeregn the vægtet τ konstanter sammenligning af kinetikken af sonder udviser to temporale komponenter til sonder med en enkelt komponent.\nBemærk: En vægtet tau beregnes som summen af τ 1 multipliceret med den relative amplitude, A 1, plus τ 2 ganget med den relative amplitude, A 2, som defineret ved følgende formel;\nForbigående transficerede celler kan udvise signifikant variation i fluorescensintensiteten og graden af plasmamembran-ekspression. Selv på den samme dækglas nogle celler vil have varierende niveauer af intern fluorescens. Dette er mest sandsynligt på grund af mængden af transfektion middel absorberes af cellen. Lejlighedsvis, for meget ekspression forårsager cellen at opleve den udfoldede protein respons resulterer i apoptose 27 (lyse, afrundede celler, med stor indre fluorescens). Eksperimentatoren derfor advares om at teste både skarpt celler og dim celler med så lidt indre fluorescens som muligt, da den interne ekspression skaber en ikke-responsiv fluorescens, som sænker signal-støjforholdet (SNR).\nEn anden overvejelse er modning på kromoforer. Figur 3 viser forskel i fluorescens af acceptor chromophmalm (mRuby2), som har en længere modningstid end donorchromophoren (Clover).\nFigur 3. Konfokal Billeder af HEK 293-celler transient transficeret med en FRET Based GEVI, Nabi2.242. (A) Konfokal billeder af en HEK-celle viser membran lokaliseret fluorescens fra FRET donor og acceptor, (B) Konfokal billeder, der viser en mulig konsekvens af langsom modning af mRuby2. Alle fire celler udviser Clover fluorescens mens kun to udviser mRuby2 fluorescens. Klik her for at se en større version af dette tal.\nBillederne blev erhvervet af et konfokalt mikroskop. For FRET donor, Clover, 488 nm laser blev anvendt til excitation og emissionen blev captmåles med 525/50 nm båndpasfilter. Den FRET acceptor, mRuby2 blev belyst med 561 nm laser til excitation og 595/50 nm båndpasfilter blev brugt til emission. Prøverne til konfokal billeddannelse blev fikseret med 4% paraformaldehyd / saccharoseopløsning i phosphatbufret saltvand justeret ved pH 7,4 og derefter monteret med et anti-fade reagens.\nNår transfektionsbetingelser optimeres, den næste kilde til variation kommer fra bestemmelse af området af interesse, der skal analyseres. Brug af ramme subtraktion at identificere de regioner i cellen med den højeste fluorescens ændringen anvendes ofte til at maksimere bf / F-værdi. Et alternativ er at vælge alle de pixels, der modtager lys fra cellen. Dette øger antallet af pixel resulterer i reduktionen af støj, men formindsker signalet størrelse eftersom ikke-responsiv indre fluorescens er inkluderet. Begge metoder er fint, så længe eksperimentatoren forbliver foreneligt.\n"1"> Figur 4A viser fluorescens ændring af en HEK-celle udtrykker en enkelt-FP baserede GEVI, Bongwoori. Dette er en typisk fluorescens ændring i respons på trindelte spændingspulser. Ud fra disse data kan man plotte spænding følsomheden af GEVI og bestemme den til og fra τ konstanter ved forskellige spændinger ved montering på et enkelt eller dobbelt eksponentiel henfald funktion. 16 forsøg er typisk gennemsnit når billeddannelse HEK celler for at forbedre SNR små spænding trin og at erkende en potentiel blegning under optagelsen. Disse prober, der giver et robust signal ved 100 mV kan testes i dissocierede hippocampale neuroner (figur 4C). Den fluorescens spor fra hippocampus neuron er en enkelt retssag.\nFigur 4. Spænding Imaging med en enkelt FP Based GEVI Udtrykti HEK 293 celler og Hippocampal Primary neuroner. (A) bf / F spor af en enkelt FP baseret GEVI, Bongwoori, viser reaktioner på trindelte spændingspulser optaget ved 1 kHz med en høj hastighed CCD-kamera. (B) En HEK 293 celler afbildet med den høje hastighed CCD kamera; (Til venstre) Resting Light Intensity (RLI) af en celle, der udtrykker Bongwoori & (til højre) rammen subtraktion billedet angivelse af pixels, hvor fluorescens ændringen blev observeret. (C) Optisk registrering af inducerede aktionspotentialer fra mus hippocampus primære neuroner udtrykker Bongwoori. De aktionspotentialer blev fremkaldt under hele celle strømtang tilstand. Den bf / F spor blev valgt fra de pixels, korreleret til soma. Klik her for at se en større version af dette tal.\nEt repræsentativt fluorescence udlæsning af donor og acceptorchromophorerne er vist i figur 5A. Polariteten af fluorescensen ændring er modsat for donoren og acceptoren muliggør ratiometrisk analyse at reducere korrelerede støjkilder, f.eks., Bevægelse. For eksempel vil bevægelse korreleret støj udvise en ændring i fluorescens i den samme retning for både donor og acceptor fluorescens. Mens FRET baseret probe er i stand til ratiometrisk billeddannelse, er det ofte bedre at kun analysere lysere kromofor. Dette skyldes, at lysdæmper kromofor væsentligt kan øge støjen af optagelsen. 5B viser denne effekt. Rammen subtraktion i figur 5B fra lysere Clover viser klart, hvor det optiske signal er i cellen. I modsætning hertil rammen subtraktion af mRuby2 fluorescens viser højere grader af støj i hele cellen. Derfor er kun donoren signal om Clover vist i en hippocampal neuron i Figur 5C.\nFigur 5. Spænding billeddannelse med en FRET baseret GEVI udtrykt i HEK 293 cellen og hippocampale primære neuroner. (A) Bf / F spor af en FRET baseret GEVI, Nabi2.242, viser svarene på to bølgelængder til stepped spændingspulser optaget ved 1 kHz med en høj hastighed CCD-kamera. (B) Top; donor (Clover-RLI, Clover-frame subtraktion) og acceptor (mRuby2-RLI, mRuby2-frame subtraktion) billeder behandlet med to forskellige tærskler for hver FP, Bund; den samme tærskel blev brugt til både donor (Clover-RLI, Clover-frame subtraktion) og acceptor (mRuby2-RLI, mRuby2-frame subtraktion) billeder til at illustrere den relative dimness af mRuby2. Alle billederne blev taget fra den samme HEK 293 celler, der udtrykker Nabi2.242. (C) Den 520 nm bølgelængde tres af inducerede aktionspotentialer fra en mus hippocampus primær neuron udtrykker Nabi2.244 sensor. Den bf / F spor blev valgt fra de pixels, korreleret til soma. Klik her for at se en større version af dette tal.\nFigur 6. Konsekvenser af varierende lysniveauer for bf og bf / F Værdier. (A) Et billede af en HEK 293 celler, der udtrykker en enkelt FP baseret GEVI, Bongwoori, vist i Resting Light Intensity (RLI), (B) fluorescens spor viser kerne gennemsnit Bf (F x -F 0) værdier fra tre forskellige regioner, region 1: membran region med godt lokaliseret fluorescenssignal, region 2: en region med lyse intern fluorescens, end region 3: region fjernt fra optisk signal, (C) fluorescens spor viser kerne gennemsnit bf / F-værdier fra de samme regioner i (B). Klik her for at se en større version af dette tal.\nBegreber ligninger Bemærkning\nFractional fluorescens ændring (bf / F) F 1 = lysintensitet målt til tidspunktet, F 0 = lysintensitet målt ved holdepotentiale\nBoltzmann-funktion y = bf / F, V = membranpotentialet i mV, V 1/2 er membranpotentialet i mV ved halvmaksimal bf / F, A A 2 = den maksimale værdi, dx = hældning\nDobbelt eksponentielt henfald funktion y = y 0 + A 1 e - (t - t 0) / τ 1 + A 2 e - (t - t 0) / τ 2 τ 1, τ 2 = tidskonstanter, A 1, A 2 = amplituder, t, t 0 = to tidspunkter, y 0 = offset\nTabel 2. Ligninger\nNervesystemet anvender spænding på flere forskellige måder, inhibering forårsager en mindre hyperpolarisering, synaptisk input forårsager en mindre depolarisering og et aktionspotentiale resulterer i en relativt stor spændingsændring. Evnen til at måle ændringer i membranpotentiale af GEVIs giver lovende potentiale analysere flere komponenter af neuronale kredsløb samtidigt. I denne rapport demonstrerer vi en grundlæggende metode til billeddannelse ændringer i membranpotentialet hjælp GEVIs.\nEn vigtig nøgle til billeddannende ændringer i spændingen er den effektive ekspression af GEVI i plasmamembranen. Intracellulær ekspression skaber en ikke-responsiv fluorescens, som reducerer SNR af sonden. Optimering af transfektionsbetingelser markant forbedrer konsistensen af de optiske målinger. Faktisk ved test af en hidtil ukendt GEVI er det tilrådeligt at også teste en kendt probe for at sikre, at forskelle i optisk aktivitet skyldes fuldstændigt til NEw probe og ikke betingelserne for cellerne.\nFigur 6 viser virkningen af indre fluorescens i faldende følsomheden af spændingen imaging, bf / F-værdi. Figur 6B viser bf værdier en HEK celle, der udtrykker den enkelt-FP baseret GEVI, Bongwoori. Trace 2 kommer fra region 2 (blå farve) hvor relativt lyse indre fluorescens ses i figur 6A. Dette spor har samme niveau af bf værdi som spor 1. I figur 6C, hvor sporene i figur 6B blev divideret med RLi værdier for bf / F-værdier, spor 2 dråber væsentligt på grund af den lyse interne fluorescens, som nedsætter bf / F værdier. Fluorescens spor 3 har en meget lille bf men har også en meget lille RLI værdi (F). Resultatet er en misvisende bf / F signal, der har en væsentlig stigning i støjen af optagelsen. Dette eksempel blev medtaget for at vise bf er ogsåvigtig. En stor ændring i bf / F ikke nyttigt, hvis F er meget lav til at begynde med.\nAnvendelsen af et billede splitter muliggør samtidig måling af to bølgelængder på en enkelt CCD-kamera. Dette i høj grad hjælper måling af FRET afhængige fluorescerende ændringer for sonde udvikling og reducerer omkostningerne til opsætningen. Men på grund af kromatisk aberration, vil disse to billeder være lidt ude af fokus nødvendiggør behovet for en apokromatiske mål. Jo mere lys jo bedre SNR, så vælger mål med den højeste numeriske åbning forbedrer også fluorescens billeddannelse. Desuden kan man anvende stærkere lyskilder såsom lysemitterende dioder (LED) eller laser til at øge SNR. Lysdioder kræver ikke en mekanisk lukker.\nI denne rapport viser vi de optiske signaler fra en enkelt FP GEVI og en FRET-baserede GEVI. Den største fordel ved et FRET-baseret GEVI er, at ratiometrisk billeddannelse muliggør reduktion af korreleret støj due til respiration og blodgennemstrømningen in vivo. Det modsatte polaritet fluorescerende signaler bekræfter en reel ændring i membranpotentialet. Men da fluorescensintensiteterne af de to kromoforer ofte variere betydeligt, SNR vil også variere. Dette forvirrer den ratiometrisk analyse og begrænser dets anvendelighed 28. Der kan også være en FRET-uafhængig signal 29. Det er derfor nogle gange bedre til at anvende den lysere fluorescerende kromofor ved brug af FRET til at analysere ændringer i membranpotentialet.\nSpænding imaging er mere udfordrende end calcium imaging på grund af hastigheden og variabilitet af ændringerne i membranpotentialet i forhold til calcium imaging der måler calcium flux. Membranpotentialet ændringer i meget hurtige tidsfrister i forhold til calcium-ion flux, og tærskelværdien begivenheder i neuroner kan ikke måles med calcium imaging 30. Endvidere skal spændingsprobe være i plasmamembranenat være effektiv som reducerer mængden af probe til rådighed for optisk rapport ændringer i membranpotentialet. Derved også antallet af fotoner, der rent faktisk kan nå frem til CCD-chip er relativt få. Dette kræver behovet for en høj hastighed og lav udlæsning støj kamera med høj kvanteeffektivitet og en probe, som fremkalder en høj SNR af ændringer i membranpotentiale. Ved billeddannelse celler in vitro, vil forskerne bedre at forstå de potentielle fordele og faldgruber GEVIs inden du forsøger in vivo målinger.


Nyfundet mineral kan ændre historien om Mars' skabelse\nEt nyt mineral fundet på Mars kan måske ændre på historien om, hvordan planeten er opstået. Det skriver NASA i deres nyhedsbrev. Forskere har nemlig fundet mineralet tridymite, som normalt opstår ved vulkanudbrud, viser et nyt studie.\n»På Jorden er tridymite dannet under høje temperaturer i en eksplosiv proces kaldet silicic volcanism. Kombinationen af den store koncentration af grundstoffet silica og de høje temperature i vulkaner danner tridymite,« fortæller Richard Morris, der er planetforsker ved NASA og hovedforfatter på det nye studie, i nyhedsbrevet.\nOpdagelsen er en overraskende for forskerne, fordi tridymite normalt forbindes silicic volcanism, hvilket er kendt på jorden, men man troede ikke at det var vigtigt for eller til stede på Mars.\nFundet af tridymite kan måske ændre ved forståelsen af, hvordan Mars er opstået. Det tyder nemlig på, at planeten måske engang har haft vulkanudbrud, som gør at mineralet er til stede i dag.\nDet var rumkøretøjet Curiosity, som fandt mineralet i Gale Crater på Mars. Curiosity har undersøgt krateret siden 2012 og udtager prøver. Sidste sommer fandt Curiosity så den stensamling, som senere viste sig at indeholde tridymiten.\n»Opdagelsen af tridymite var totalt uforventet. Denne opdagelse udfordrer spørgsmålet om, hvorvidt Mars har været ude for en meget mere voldelig og eksplosiv vulkanisk historie ved udviklingen af planet, end man hidtil har troet,« fortæller Doug Ming, der er chefforsker ved NASA’s ARES mission og medforfatter på studiet, i nyhedsbrevet.\nForskerne skal nu finde ud af, om Mars har haft en eksplosiv opvækst eller om mineralet tridymite kan dannes under koldere temperaturer, som det ses på Mars.


Aars Golfklub - Retningslinjer for spil på banen\nRetningslinjer for spil på banen\nAars Golfklub åbner nu efter DGU's anbefaleringer for greenfeespillere, firebolde og træningsfaciliteter. Åbningen er gældende fra onsdag den 15. april.\nI takt med, at dele af det danske samfund genåbner i disse dage, kan der også åbnes flere muligheder for golfspil. Det vurderer Dansk Golf Union, som har udarbejdet et sæt anbefalinger til, hvordan spil på vores golfbane bør foregå i perioden frem til den 10. maj. Derfor åbner vi op for en kontrolleret adgang til greenfeespil, firebolde og træningsfaciliteter\nPrivat spil kan foregå i op til fire-bolde. Afstand på mindst ti minutter mellem bolde\nSpil på banen foregår blandt spillere fra samme husstand eller med faste spillemakkere\nMedlemmer og greenfeegæster kan spille. Der anbefales separat transport til golfbanen for spillere fra forskellige husstande\nAnkomst til golfbanen sker tidligst ti minutter før reserveret starttid eller umiddelbart før opvarmning på træningsfaciliteterne i forbindelse med spil. Spillerne kører hjem umiddelbart efter afsluttet spil\nFlaget forbliver i hullet og må ikke berøres\nHullet tilpasses så bolden kan fjernes uden berøring af flag, hulkop eller hulkant. Der kan reguleres handicap\nMan må ikke opholde sig i klubben, når man ikke skal spille eller træne, klubhuset er stadig lukket, og man bør kun køre til og fra banen med nogen, man er i husstand med. Samtidig vil der fortsat ikke være foreningsaktiviteter som turneringer eller klub-i-klub.\n© 2021 Aars Golfklub