Trace metaller såsom jern og zink er vitale næringsstoffer kendt for at spille centrale roller i prokaryotiske processer, herunder genregulering, katalyse, og protein struktur. Metal binding af værter fører ofte til metal begrænsning for bakterien. Denne begrænsning inducerer bakterielgen udtryk, hvis proteinprodukter tillader bakterier at overvinde deres metal-begrænset miljø. Karakterisering af sådanne gener er udfordrende. Bakterier skal dyrkes i omhyggeligt tilberedte medier, der giver tilstrækkelig adgang til ernæringsmæssige metaller til at tillade bakterievækst og samtidig opretholde en metalprofil, der fremmer at opnå ekspression af de førnævnte gener. Som sådan skal der skabes en hårfin balance for koncentrationerne af disse metaller. Dyrkning af en ernæringsmæssigt kræsen organisme som Neisseria gonorrée, som har udviklet sig til at overleve kun i den menneskelige vært, tilføjer en ekstra grad af kompleksitet. Her beskriver vi præparatet af et defineret metalbegrænset medium, der er tilstrækkeligt til at muliggøre gonokokvækst og det ønskede genekspression. Denne metode gør det muligt for investigator at chelate jern og zink fra uønskede kilder, mens supplere medierne med definerede kilder til jern eller zink, hvis præparat er også beskrevet. Endelig skitserer vi tre eksperimenter, der udnytter dette medie til at hjælpe med at karakterisere proteinprodukter fra metalregulerede gonokokgener.\nNeisseria gonorrée forårsager den almindelige seksuelt overførte infektion gonoré. Under infektion, patogene Neisseria udtrykke et repertoire af metal-responsive gener, der gør det muligt for bakterier til at overvinde metal begrænsning indsats af den menneskelige vært1,2,3. Trace metaller som jern og zink spiller centrale roller i mange cellulære processer, såsom binding til enzymer i katalytiske steder, deltagelse i redox reaktioner, og som strukturelle faktorer i forskellige proteiner4,5. Under metalbegrænsende forhold er metal-responsive loci derepressed og deres resulterende proteiner kan støtte erhvervelsen af disse næringsstoffer. Karakterisering af disse gener og proteiner udgør en unik teknisk udfordring for investigator. Metalioner skal tilbageholdes fra bakterier for at fremkalde transskription af disse gener fra deres indfødte loci, men effektiv kelation af disse ioner fra metal-laden medier kan være svært at optimere. De forskellige metalprofiler af kildevand og iboende lot-to-lot variation6 af pulveriserede ingredienser betyder, at mængden af chelator, der kræves for at fjerne et bestemt metal fra et rigt medie, vil variere mellem forskellige steder, ingrediensleverandører, og endda over tid inden for et enkelt laboratorium, da den kemiske beholdning udskiftes.\nFor at omgå denne udfordring beskriver vi udarbejdelsen af et defineret medium, der behandles med Chelex-100 harpiks under tilberedningen for at fjerne spormetaller fra opløsningen. Dette medium er tilstrækkeligt næringsstoftæt til at muliggøre vækst af gonococcus, som er vanskeligt at kultur uden for den menneskelige vært, og gør det muligt for investigator at indføre en specifik metalprofil ved at tilføje deres egne definerede kilder og koncentrationer af Metaller. Metoden til kontrolleret add-back af ønskede metaller til forarmet medium øger eksperimentel konsistens og giver mulighed for robuste, replikerbare eksperimenter uanset faktorer såsom vandkilde og kemiske partinumre. Desuden kan dette medie anvendes som enten en væske eller fast med kun mindre ændringer, hvilket gør det ganske alsidigt.\nFor at demonstrere nytten af dette medie, skitserer vi en protokol for dets anvendelse for gonokok vækst og beskrive tre vellykkede eksperimenter til at karakterisere metal-lydhør Neisseria gener. For det første forbereder vi gonokok hele celle lysates fra metal-forarmet eller suppleret kulturer og demonstrere variable niveauer af proteinproduktion fra metal-responsive loci. Vi skitserer derefter en zink-begrænset vækst analyse, hvor gonokok vækst styres ved tilskud af specifikke, brugbare zink kilder. Endelig viser vi bindende analyser, der viser hele gonokokceller, der udtrykker metalresponsive overfladereceptorer, der binder sig til deres respektive metalholdige ligander. Vellykket overfladepræsentation af disse receptorer kræver vækst i metal-forarmet medium.\nDen nuværende protokol blev optimeret specielt til Neisseria gonorrée, men mange andre bakterielle patogener anvender metal erhvervelse strategier under infektion7, så denne protokol kan tilpasses til studiet af metal homøostase i andre bakterier. Optimering af dette medie og disse eksperimentelle protokoller til brug i andre bakterier vil sandsynligvis kræve let ændring af metal chelator koncentrationer og / eller behandlingstid med Chelex-100, som andre bakterier kan have lidt forskellige metal krav end gonococcus. Jern og zink er de primære metaller, der giver anledning til bekymring i forbindelse med de beskrevne undersøgelser, men andre metaller (f.eks. mangan) er blevet påvist som kritiske for bakterier, herunder Neisseria8,9,10,11,12. Desuden er lignende metoder blevet beskrevet for metal karakteriseringer i eukaryotiske celle kultur arbejde, som også kan overvejes. 13.\n1. Udarbejdelse af Chelex-behandlede definerede medium (CDM) Stock Solutions\nKombiner NaCl (233,8 g), K2SO4 (40,0 g), NH4Cl (8,8 g), K2HPO4 (13,9 g) og KH2PO4 (10,9 g) i deioniseret vand til en endelig volumen på 1 L.\nFilter steriliseropløsningen og aliquot i 50 ml koniske rør.\nOpbevares ved -20 °C.\nKombiner thiamin HCl (0,2 g), thiamin pyrophosphat-Cl (0,05 g), calcium pantothenate (0,19 g), og biotin (0,3 g) i 50% (vol/vol) ethanol til et endeligt volumen på 1 L.\nAliquot i 50 ml koniske rør og opbevares ved -20 °C.\nKombiner L-aspartat (4,0 g), L-glutamat (10,4 g), L-arginin (1,2 g), glycin (0,2 g), L-serin (0,4 g), L-leucin (0,7 2 g), L-isoleucine (0,24 g), L-valine (0,48 g), L-tyrosin (0,56 g), L-proline (0,4 g), L-tryptophan (0,64 g), L-threonine (0,4 g), L-phenylalanin (0,2 g), L-asparagine-H2O (0,2 g), L-glutamin (0,4 g), L-histidin-HCl (0.. 2 g), L-methionin (0,12 g), L-alanin (0,8 g), L-lysin (0,4 g) og reduceret glutathion (0,36 g) i 500 ml deioniseret vand.\nL-cystein (0,44 g) og L-cystin (0,28 g) opløses i et minimalt volumen (~1 ml) på 1 M HCl og tilsættes til ovennævnte aminosyreopløsning.\nOpløsningens pH justeres med 10 N NaOH, indtil alle partikler er opløst. Den endelige pH vil være 10,0-11,0.\nBring det endelige volumen til 1 L med deioniseret vand.\nFilter steriliseropløsningen og aliquot i 250 ml volumener.\nOpløs glukose (200 g) i deioniseret vand til et endeligt volumen på 1 L.\nBEMÆRK: Det kan være være ophedet, at opløsningen opløses for at opløse glukose.\nFilter steriliseres og aliquot opløsningen i 50 ml koniske rør.\nKombiner hypoxanthin (5,0 g), uracil (5,0 g) og NaOH (4,0 g) i deioniseret vand til en endelig volumen på 1 L.\nFilter steriliseres og aliquot i 50 ml koniske rør.\nDer fremstilles en 1 M CaCl2-2H2O (147 g/L) opløsning i deioniseret vand. Filtrer steriliseres og opbevares ved stuetemperatur (RT).\nDer fremstilles en 1 M vandfri MgSO4-opløsning i deioniseret vand. Filtrer steriliser og opbevares på RT.\nForbered en 1 M NaHCO3 løsning i deioniseret vand. Filtrer steriliser og opbevares på RT.\n2. Forberedelse af 4x sterilt koncentrat og 1x CDM\nBEMÆRK: Denne procedure skal udføres i enten syrebehandlet sterilt glaseller plast for at forhindre udvaskning af metaller i opløsningerne.\nKombiner aktieopløsninger I (50 ml), II (20 ml), III (250 ml), IV (50 ml) og V (20 ml) med 20,0 g HEPES og rør til at blande.\nJuster pH til 7,4, og bring derefter det endelige volumen til 500 ml med deioniseret vand.\nVask Chelex-100 harpiks i 1 L deioniseret vand for at fjerne konserveringsmidler, før du tilføjer det til 4x sterile koncentrat. Gør dette ved at tilsætte 50 g harpiks til 1 L deioniseret vand og omrøring i mindst 1 time. Fjern vandet ved vakuumfiltrering og brug denne vaskede harpiks til trin 2.4.\nTilsæt 50 g harpiks og rør langsomt i præcis 90 min.\nHarpiksen fjernes ved filtersterilisering, og det 4x sterile koncentrat opbevares ved 4 °C.\nFor at forberede en 1x arbejdskoncentration af CDM skal 4xkoncentratet fortyndes med sterilt deioniseret vand, og opløsning VIII (125 μL pr. 500 ml 1x opløsning), opløsning VII (535 μL pr. 500 ml) og opløsning VIII (10 ml pr. 500 ml).\nBEMÆRK: Selv om alle stamopløsninger allerede er steriliseret, anbefales det at filtrere sterilisere 1x opløsningigen efter klargøring.\n3. Udarbejdelse af CDM-plader\nBEMÆRK: Opskriften nedenfor gør 1 L medier til plader, men det er bedst at forberede disse i mindre mængder. Alt skaleres proportionalt.\n50 g agarose opløses i 1 L deioniseret vand under omrøring i 1 time.\nOpløsningen overføres til en centrifugeflaske og centrifuger ved 1.200 x g i 15 min. Forsigtigt hæld supernatanten af og kassér.\nTilsæt tilstrækkeligt deioniseret vand til at ophænge agarosepelletigenet igen og derefter overføres til en 1 L-kolbe. Bring til en endelig volumen på 1 L med deioniseret vand og derefter røre og centrifuge som i trin 3.1.2. Kassér supernatanten.\nTilsæt tilstrækkelig 100% ethanol til at ophænge pellet, derefter overføre til en ny 1 L kolbe. Bring til et endeligt volumen på 1 L med ethanol. Rør og centrifuge som i trin 3.1.2.\nGentag trin 3.1.4.\nTilsæt methanol til agarose pellet at resuspendere, derefter overføre til en 1 L kolbe. Bring til et endeligt volumen på 1 L med methanol. Rør og centrifuge som i trin 3.1.2.\nGentag trin 3.1.6.\nOverførsel vasket agarose til en bakke foret med aluminiumsfolie og lad det tørre i en røg hætte. Når den er tør, overføres den til en metalfri beholder til langtidsopbevaring.\nTilsæt 10 g vasket agarose og 5 g kartoffelstivelse til 750 ml deioniseret vand.\nAutoklave i 30 min ved 121 °C, 100 kPa over atmosfærisk tryk.\nLad mediet køle af til ~65 °C, og tilsæt derefter 250 ml 4X CDM, 250 μL opløsning VI, 1,07 ml opløsning VII og 20 ml opløsning VIII.\nHvis det ønskes, tilsæt de foretrukne metaller, før der hældes plader. Tilsætning af chelatorer er ikke nødvendig for at opretholde metalfri forhold.\nHæld i petriskåle og lad det størkne.\n4. Metal begrænset vækst af Neisseria gonorrée\nBEMÆRK: For de fleste anvendelser, er det ikke nødvendigt at metal stress bakterierne før inokulering af CDM. Det første fordoblingstrin i CDM og den efterfølgende fortynding er tilstrækkelig til at nedbryde gonococci af deres interne jern- og zinklagre. Som sådan udføres de første to trin i følgende procedure ved hjælp af agarplader fremstillet af GC medium base, der er blevet suppleret med Kellogg's tillæg I14 og 12,5 μM Fe (NO3)3. Hvis der ønskes tidlig metalstress, anbefaler vi, at GC-mellemgrundsplader ne tilberedes uden Fe(NO3)3 og med 5 μM TPEN (N,N',N'-tetrakis (2-pyridylmethyl) ethylenediamin) til zinkchelation eller 10 μM deferoxamin til jernchelation. Al inkubation udføres ved 37 °C med 5% CO2.\nTo dage før forsøget, på dag -2, streak gonococci fra fryser lagre på GC medium plader og inkubere for ikke mere end 24 timer.\nPå dag -1, stribe enkelte kolonier på friske GC mellemstore plader. Prøv at gøre dette 14-16 h før væksteksperimentet.\nPå dagen for forsøget, tilsættes 5-10 ml 1x CDM til en syre vasket 125 ml forbløffet sidearm kolbe (supplerende figur 1) og bruge dette til at tømme en Klett colorimeter.\nBrug en steril, bomuldsspidspodning til at vaccinere CDM fra sunde, enkelte kolonier. Sigt efter 20 Klett enheder.\nBEMÆRK: Hvis der ikke findes et Klett-farvemåler, er et spektrofotometer også egnet. Der er ingen universel konverteringformel for Klett-enheder til OD, men der findes en grov vejledning (https://support.hunterlab.com/hc/en-us/articles/214490283-Klett-Color-Scales).\nInkubermed rystelser ved 250 omdrejninger indtil ca. en massefordobling (40 Klett-enheder). Det skal tage mellem 1-2.\nPå dette tidspunkt er kulturerne tilbage fortyndet ved tilsætning af en tilstrækkelig mængde CDM til at nå halvdelen af den oprindelige kulturtæthed (f.eks. hvis 5 ml kultur er gået fra 20 til 40 Klett enheder, vil 15 ml CDM bringe den tilbage til 10 Klett-enheder), og væksten vil fortsætte som i trin 4.5. Den specifikke mængde rygfortynding, metalbehandlinger osv. Vi giver tre eksempler nedenfor (afsnit 5, 6 eller 7).\n5. Vestlig analyse af metal responsive genprodukter\nBegyndende ved trin 4.6, tilbage fortynde stilkulturer med tre mængder CDM (f.eks 15 ml CDM, hvis du starter med 5 ml). På dette tidspunkt, tilføje metal behandlinger, hvis det ønskes.\nJern-sensing gener kan være nedsættende med 12,5 μM Fe (NO3)3. Zink-responsive gener kan være derepressed med 10 μM ZnSO4.\nYderligere jern- eller zinkstress er ikke nødvendig, da medierne allerede er udtømte, så responsive gener vil allerede blive udtrykt. Hvis der ønskes yderligere stress, anbefaler vi ikke mere end 1-2 μM deferoxamin eller TPEN, da overdreven stress vil forhindre kulturer i at vokse.\nGrow kulturer som i trin 4,5 for 4 timer og registrere den endelige celletæthed af prøverne. Mindre metal-stressede kulturer vil vokse til højere endelige tætheder.\nStandardisere kulturer til en passende tæthed og forberede lysates.\nStandardisere helcellelysates til en tæthed svarende til 100 Klett enheder i 1 ml kultur. For at opnå dette skal du dividere 100 med Klett-enhedstætheden af prøven. Det antal, du får, er mængden, i ml, af kultur, der vil blive brugt til at gøre cellen pellet.\nFølg standard SDS-PAGE og vestlige blotting procedurer15 at sonde for proteiner af interesse.\n6. Metal-begrænset vækst analyser\nBEMÆRK: Disse analyser beskriver premade vækst forblandinger. Udarbejdelsen af disse blandinger er beskrevet i afsnit 8.\nUnder masse fordobling i trin 4,5, pretreat brøndene i en 96 godt mikroplade med 10x premixes. Derudover skal du udpege tre brønde til at tjene som emner. Til disse brønde tilsættes 10 μL 10x forblanding og 90 μL CDM.\nNår kulturerne i sidearmen kolber er fordoblet, tilsættes 100 μL af hver kultur til en ubrugt brønd i mikropladen og måle den optiske tæthed ved 600 nm (OD600). Dette kan gøres med cuvetter i et spektrofotometer, men med et større antal stammer inden for en analyse kan dette blive besværligt og anbefales generelt ikke, medmindre dit spektrofotometer kan måle direkte fra armen af sidearmkolben (supplerende figur 2).\nMens du måler OD, skal kolberne placeres tilbage i rugemaskinen for at sikre, at gonococci forbliver levedygtig.\nDen korrekte mængde fortynding, der kræves for at bringe kulturerne til OD600 = 0,02. De 10x forblandinger har en ubetydelig effekt på OD og kan udelades fra beregningen.\nFortynd kulturer med CDM i små kulturrør og tilsæt tilstrækkelig volumen til at fortynde de 10x forblandinger til 1x i pladen. Hvis der er en pladevarmer, skal pladen holdes ved 37 °C, mens den arbejder.\nInkuber pladen i 8-12 timer med omrystning i en pladelæser, idet OD600 målinger med de ønskede intervaller.\n7. Påvisning af Ligand Binding af ydre membran metaltransportører\nBehandl kulturer som i trin 5.1, derefter inkubere med rysten i 4 timer.\nKort før 4 h-mærket skæres tre stykker filterpapir og et stykke nitrocellulose til den omtrentlige størrelse, der er nødvendig for at passe ind i et prik blot-apparat (supplerende figur 3). Presoak nitrocellulose i deioniseret vand, derefter samle apparatet med filterpapir under nitrocellulose.\nVed 4 timer registreres celletætheden og standardiseres til en passende endelig tæthed. Det anbefales at bruge ~10% af den tæthed, der anvendes til fremstilling af cellen lysates i trin 5. For eksempel, hvis du bruger 100 KU i 1 ml til lysates, betyder det ~ 10 KU i 1 ml for disse blots. Beregningen er ellers den samme som beskrevet i 5.3.1, og kulturer tilsættes direkte til nitrocellulose i de beregnede mængder i stedet for at blive fremstillet i lysates.\nPipetcellekulturer på nitrocelluloseog og giver filterpapiret tilstrækkelig tid til at absorbere al væsken.\nAfmonter apparatet, lad skamplet tørre, og bloker nitrocellulosemembranen i 1 time i 5% kvægserumalbumin eller fedtfri mælk (w/v) i Tris-buffered saltvand.\nSaml prikblot-apparatet igen og udskiftning af filterpapiret med paraffinfilm for at skabe en lækagetæt forsegling under nitrocellulose.\nMetalbindingen af interesse for 0,2 μM i blokker- og sondeceller fortyndes i 1 time.\nSifon off væsken med et vakuum, vask blot, derefter følge standard immunologiske procedurer for at udvikle signalet16. Vasketrinnene kan udføres ind eller ud af apparatet.\n8. Metal loading af Transferrin, S100A7, og Calprotectin, og forberedelse af 10x Premixes\nBEMÆRK: Som med CDM-tilberedning skal der anvendes syrevasket glas eller plast til klargøring af opløsning.\nHuman transferrin opløses ved 10 mg/ml (125 μM) i indledende buffer (100 mM Tris, 150 mM NaCl, 20 mM NaHCO3, pH = 8,4). S100A7 og calprotectin er suspenderet i buffer bestående af 20 mM Tris, 100 mM NaCl, 10 mM 2-Mercaptoethanol, og 1 mM CaCl2, pH = 8,0).\nTilsæt ferrationsopløsning (100 mM natriumcitrat, 100 mM NaHCO3, 5 mM FeCl3-6H2O, pH = 8,4) til transferrinopløsningen for at opnå 30% jernmætning (f.eks. er 75 μL ferrationsopløsning egnet til 5 mL transferrin, hvis den foretages ved 10 mg/ml).\nTilføj ZnSO4 til S100A7 eller calprotectin ved et 50% molar forhold til proteinet for at skabe 25% mætning (hvert proteinmolekyle har to metalbindingssteder). Præparater på 100 μM S100A7 eller calprotectin med 50 μM ZnSO4 kan anvendes.\nI begge tilfælde skal end-over-end blanding tillades i mindst 1 time for metalbelastning.\nForbered 4 L dialyse buffer (40 mM Tris, 150 mM NaCl, 20 mM NaHCO3, pH = 7,4). Opdel dette i to separate 2 L-volumener, og placer et ved 4 °C.\nTilsæt metalbelastede proteiner til en dialysekassette ved hjælp af en sprøjte og dialyze mod den første buffervolumen i 4 timer ved RT.\nFlyt kassetten til den anden buffervolumen og dialyze natten over ved 4 °C. Efter disse trin skal alle ubundne metaller fjernes.\nBEMÆRK: Vi anbefaler en bicinchonininsyre analyse til at bestemme proteinkoncentrationer efter dialyse.\nBrug en 10x transferrin premix til transferrin udnyttelse som en eneste jernkilde.\nDenne forblanding tilberedes ved at fortynde 30% humanfe-transferrin og kvægapo-transferrin (fremstillet ved 125 μM som beskrevet for humantransferrin, uden jernbelastningstrin) til henholdsvis 75 μM og 30 μM i PBS. En positiv kontrolforblanding erstatter 30% Fe-transferrin med 75 μM Fe(NO3)3, og en negativ kontrolforblanding udelader eventuelt tilsat jern, idet der kun bevares kvægapo-transferrin. I vækstanalysen fortyndes 10 μL af disse koncentrater med 90 μL kultur. De endelige koncentrationer er 7,5 μM 30% humanFe-transferrin og 3 μM kvægapo-transferrin.\nBrug en modificeret version af transferrin 10x forblandingen til S100A7 eller calprotectin-udnyttelse som en eneste zinkkilde.\nFor en positiv kontrolforblanding skal 50 μM ZnSO4 indarbejdes i transferrin-forblandingen. For en negativ kontrol, indarbejde 50 μM TPEN og udelade zink. Derefter skal du tage 10 μL af hver af disse for hver prøve godt behov, og flytte denne volumen til et nyt rør. Tilføj til denne halve så meget volumen af sterile PBS. Hvis 10 brønde for eksempel får den positive kontrolforblanding, skal du tage 100 μL forblanding, flytte den til et nyt rør og tilsættes 50 μL PBS. Gør det samme for den negative kontrol.\nFor at gøre S100A7 eller calprotectin premix, tage 10 μL af den negative kontrol premix per behov, flytte til et nyt rør, og tilføje halvdelen af volumen af 25% Zn-S100A7 eller calprotectin. I vækstanalysen anvendes 15 μL forblanding og fortyndes med 85 μL kultur. De endelige koncentrationer for transferrinerne forbliver de samme som i trin 8.5 med tilsat 5 μM Zn, TPEN eller S100A7/calprotectin.\nEt specifikt defineret medium i mangel af spormetaller til vækst af Neisseria gonorrée blev udviklet og implementeret til karakterisering af metal-responsive gener og deres genprodukter. I den optimerede protokol, metal profil af medier styres ved at tilføje metaller tilbage på skøn investigator, snarere end ved titreret kelation af et metal mål, giver mulighed for øget kontrol og konsistens fra lab til lab og eksperimentere for at eksperimentere. Dette medie kan anvendes i både flydende og solid state, hvilket gør det alsidigt på tværs af mange eksperimentelle opsætninger.\nDifferentialproteinproduktion i variable metalkoncentrationer kan ses i de medfølgende repræsentative vestlige blots (figur 1). Billedet viser zink-responsive ydre membran transportører TdfJ og TdfH, som blev upregulated som reaktion på zink kelation af TPEN. TdfJ var stort set målbart, da zink blev tilføjet tilbage til medierne, og TdfH var knappe. Desuden er tdfJ promotor kendt for at være induceret, snarere end undertrykt, af jern. Dette er også synligt i skamplet. Disse blots udnyttet jern-lydhør lipoprotein TbpB2 som en belastning kontrol. Under forhold med jernadd-back blev TbpB-produktionen reduceret.\nMetalbegrænsede vækstanalyser viser, at gonococcus(Figur 2) udnytter specifikke, definerede zinkkilder ( figur 2 ). Figur 2A viser N. gonorrée vokser i nærvær af Zn-loaded calprotectin (CP), som kræver virkningen af zink-responsive TdfH17,18. Når der ikke var nogen brugbar zinkkilde til rådighed, enten uden zinkadd-back eller ved fraværet af TdfH, var væksten begrænset. Figur 2B viser lignende resultater i tilstedeværelsen af S100A7, som kan fungere som en eneste zinkkilde, når den ydre membrantransportør TdfJ produceres19. Alene i overværelse af TPEN, eller da TdfJ var fraværende, blev væksten hæmmet, men tilføjelsen af Zn-S100A7 genvundet vækst på en TdfJ-afhængig måde. Endelig viser figur 2C en eksperimentel fejl. I dette eksempel var fortyndingstrinnet i gonokokkulturer ikke tilstrækkelig til at nedbryde bakterierne i interne zinkbassiner i forhold til den samlede kulturvolumen i mikropladen. Som sådan oversteg væksten i den negative kontrol den ønskede OD.\nSpecifik binding af hele gonokokceller til deres respektive ligander påvises ved prik blots fra kulturer, der er fremstillet under metalbegrænsende og metalnedbrydelige forhold (figur 3). Figur 3A,B viser, at gonococci, der dyrkes i CDM, var i stand til at binde henholdsvis CP og S100A7, når de producerede henholdsvis TdfH og TdfJ som følge af zinkknaphed. Figur 3C sammenligner transferrinbinding, som udføres af de cognate proteiner fremstillet af jern-sensing gener tbpA og tbpB20, når gonococci dyrkes i CDM alene vs GC medium bouillon behandlet med jernchelator deferoxamin. Dette tal viser øget binding af transferrin af kulturer dyrket i CDM, hvilket er tegn på højere niveauer af protein udtryk på grund af den mere jern-forarmet karakter af CDM i forhold til chelated GC bouillon.\nFigur 1: Repræsentativ Western blot viser differentieret produktion af metal responsive proteiner. (A) Neisseria gonorrée stamme af vildtype FA19 blev dyrket i CDM suppleret med ZnSO4, Fe(NO3)3eller TPEN i de angivne koncentrationer. Efter behandlingen blev kulturer dyrket i 4 timer, før helcellelysates af standardiseret massefylde blev produceret og udsat for SDS-PAGE og vestlige blotting. Differentierede produktionsniveauer for TdfJ, som både er undertrykt af zink og induceret af jern, kan tydeligt ses som reaktion på zink tilsætning / udtynding og jern tilsætning. (B) Relative signalintensiteter for den vestlige blot blev kvantificeret via densitometri. Dette tal er tilpasset fra Maurakis etal. Klik her for at se en større version af denne figur.\nFigur 2: Zinkbegrænset vækst af gonococci. Vilde typestamme FA19, eller isogene mutanter af denne stamme, der ikke producerer tdfJ eller tdfH, blev dyrket i (A) ubehandlet CDM indtil den eksponentielle fase blev nået,(B) derefter tilbage fortyndet til OD600 = 0,02 og (C) OD600 = 0,1. Prøverne i A blev behandlet med forblanding indeholdende calprotectin (top) eller ingen tilsat zink (bund) og dyrkes i 8 timer. Prøverne i B og C blev suppleret med forblanding indeholdende fri zink, ingen zink (5 μM TPEN) eller S100A7, og dyrkes i 6 timer. Væksten i disse betingelser blev kun genvundet ved tilskud af medier med en brugbar zinkkilde, såsom CP, S100A7, eller gratis zink i A og B, mens C ikke var tilstrækkeligt fortyndet til at nedbryde interne cellulære zinkpuljer. Figur 2A er tilpasset fra Jean et al.17Figur 2B er tilpasset fra Maurakis etal. Klik her for at se en større version af denne figur.\nFigur 3. Repræsentativ bindende analyser viser vært ligands bindende for metal-stressede gonococci. (A) Vilde type stamme FA1090, eller mutanter af denne stamme, der ikke producerer tdfJ, tdfH, eller begge dele, blev dyrket i CDM uden supplerende metaller og blev prikket på nitrocellulose i standardiserede tætheder. Celler blev undersøgt med calprotectin, som er anerkendt af zink-responsive TdfH, og bindende blev vurderet ved påvisning med en anti-calprotectin antistof (top). Relativ calprotectin binding blev kvantificeret via densitometri, vist her på en log skala (nederst). (B) Bindende eksperimenter blev udført som beskrevet i A, men i stedet ved hjælp af FA19 vilde type stamme og tdfJ mutant og suppleret stammer i denne baggrund. Celler blev undersøgt med HRP-mærket S100A7, som er anerkendt af zink-responsive TdfJ. (C) Vilde type stamme FA19 blev dyrket side om side i CDM eller GC medium bouillon med 25 μM deferoxamin tilsat chelate fri jern, at stiplede nitrocellulose i standardiserede mængder, og probed med transferrin, som binder jern-følsomme TbpA. Disse side-by-side tests viser, at CDM, i modsætning til GC medium bouillon, krævede ingen yderligere kelation for at opnå et jern-begrænset miljø. Figur 3A er tilpasset fra Jean et al. og bunden fra Maurakis etal. 19. Klik her for at se en større version af denne figur.\nSupplerende figur 1. Klik her for at se en større version af denne figur.\nSupplerende figur 2. Klik her for at se en større version af denne figur.\nSupplerende figur 3. Klik her for at se en større version af denne figur.\nVækstmedier tjener en række roller inden for mikrobiologisk forskning. Specialiserede medier bruges til udvælgelse, berigelse og forskellige andre applikationer til mange unikke typer af undersøgelse. En sådan anvendelse er induktion af metal-responsive gener, som typisk opnås ved tilsætning af en bestemt chelator, der er rettet mod en bestemt metal ion. Denne metode er begrænset, da mængden af kelation er nødvendig for forskellige spormetaller sandsynligvis vil være variabel på grund af forskellige vandkilder, der indeholder unikke metalprofiler, og to partier af samme medieingrediens, der indeholder forskellige metalkoncentrationer6. For at undgå denne iboende mangel har vi beskrevet præparatet og brugen af et defineret medium, der behandles med Chelex-100 harpiks for at fjerne alle spormetaller i løs vægt, hvilket giver kontrolleret tilsætning af specificerede metaller tilbage i mediet efter behov.\nI den nuværende protokol er det første vigtige diskussionspunkt kildevandet. Protokollen beskriver en Chelex behandling, der er tilstrækkelig til at fjerne metaller fra laboratoriet Type 2 (1,0 megaOhms-cm i henhold til ISO 3696 specifikationer) vand. Forskellige vandkilder vil sandsynligvis kræve kortere eller længere Chelex behandlinger. Vi har konstateret, at vand af højere renhed end type 2, såsom molekylærbiologi grade vand, vil ikke støtte bakterievækst i denne ansøgning. Valget af fartøj til medieforberedelse er lige så vigtigt som vandkilden. Vi anbefaler stærkt rene plastbeholdere, da glaskan udvaske metalioner i opløsningen. Hvis der ikke er plastvarer til rådighed, skal glasvarer vaskes for at minimere forureningsrisikoen. Den samme syre vask er nødvendig for kultur kolber, når du bruger CDM.\nVækst af Neisseria gonorrée i en in vitro indstilling kan være ganske udfordrende, da denne organisme har udviklet sig til at trives specifikt i menneskelige værter21. Cdm er velegnet til at understøtte væksten i forsøgsperioden, men der skal udvises forsigtighed under vaccinations- og fortyndingstrinene for at sikre, at gonococci ikke er længere end nødvendigt i atmosfæriske forhold. På grund af den capnofile karakter af gonococci22 og dens forkærlighed for temperaturer, der findes i menneskelige værter, anbefaler vi ikke at holde kulturer i atmosfæriske forhold i længere tid end ~ 15 min. Hvis den første massefordoblingshændelse, der er beskrevet i trin 4.5 af metoden, tager længere tid end 2 timer, er det sandsynligt, at gonokokkulturer ikke er blevet håndteret korrekt, og forsøget bør afbrydes.\nMens fokus for denne metode er på metoder til vækst og karakterisering af Neisseria gonorrée specifikt, brug af denne specifikke CDM er sandsynligvis også egnet til undersøgelse af andre Neisseria arter. Desuden kan det let anvendes til karakterisering af andre metal-sensing systemer i andre bakterier. For eksempel har en lignende metal-fri medier blevet brugt til at karakterisere metal optagelse i Staphylococcus aureus23 og Escherichia coli24. Udnyttelse af den beskrevne opskrift på andre bakterier vil sandsynligvis indebære små ændringer eller tilføjelser, afhængigt af de specifikke ernæringsmæssige behov hos de pågældende bakterier. F.eks. er tillæg VIII inkluderet i opskriften for at hjælpe med gonococcus' behov for supplerende CO2. Som beskrevet ovenfor, vækst udføres ved 37 °C med en 5% CO2 atmosfære, men vi har konstateret, at tilsætning af supplerende bikarbonat i medierne hjælper de indledende faser af gonokok vækst i defineret medium. For organismer uden et sådant krav kan denne ingrediens udelades. Desværre skal der fastlægges yderligere eksempler på disse ændringer empirisk.\nPå trods af behovet for at tilpasse metoden noget til brug med andre bakterier bør de grundlæggende rammer være hensigtsmæssige til bred anvendelse. Karakterisering af metal-responsive gener og metal transportører er en løbende bestræbelse i mikrobielle undersøgelse, med bakterier, herunder Neisseria meningitidis18,25,26,27,28, S. aureus9, Hæmofili influenzae29, Salmonella enterica30, og E. coli31 alle får opmærksomhed i denne niche. Vores egen fremtidige udnyttelse af denne teknik vil sigte mod at fremme forståelsen af andre gonococcal metal optagelse systemer ud over de allerede nævnte, som gør det muligt for gonococcus at erhverve jern fra vært proteiner såsom lactoferrin32,33, hæmoglobin34,35, og også fra bakterielle xenosiderophores36, og at udvide vores undersøgelser i virkningerne af andre metaller såsom mangan, som har været impliceret i oxidative forsvar af Neisseria12,37.\nDette arbejde blev støttet af NIH tilskud R01 AI125421, R01 AI127793, og U19 AI144182. Forfatteren vil gerne takke alle lab medlemmer, der har bidraget til korrekturlæsning og gennemgang af denne metode.


IBM fyrer over 1000 ansatte | BT Erhverv - www.bt.dk\n7. jun. 2019 - 17.03\nIBM fyrer over 1000 ansatte\nIBM offentliggjorde torsdag, at de må afskedige en del af deres ansatte.\n1700 medarbejdere må vinke farvel til deres stilling i IT-virksomheden. Det svarer til en halv procent af hele virksomhedens ansatte, der i alt tæller 340.000.\nFyringerne sker som del af en udviklingsproces, der skal sørge for, at selskabet øger sit overskud.\nIBM er nemlig midt i en opkøbningsproces af software-giganten Red Hat.\nAftalen om opkøbet på 224 milliarder kroner forventes at lukke i slutningen af i år.\nLige nu har IBM sin egen offentlige cloud-infrastruktur til at implemetere apps, men ved at købe Red Hat forsøger IBM at gøre indtog hos andre virksomheder, der har andre offentlige skyer - eksempelvis Amazon Web Services og Microsoft Azure, der begge har langt større makredsandel i forhold til IBM.\nIBM-aktier er siden begyndelsen af 2019 steget med 16 procent. I april rapporterede virksomheden en omsætning i første kvartal, der var 5 procent lavere end året før og under analytikernes forventninger.


Pub in the Pines, South Lake Tahoe - Restaurantanmeldelser - TripAdvisor\nUSA Californien Lake Tahoe (California) South Lake Tahoe Restauranter i South Lake Tahoe Pub in the Pines\nNr. 85 af 112 Restauranter i South Lake Tahoe $$ - $$$\nAmerikansk, Pub 3901 Saddle Rd, Tahoe Seasons Resort, South Lake Tahoe, CA 96150-8707+1 530-541-6700+ Tilføj website\nVis også KortSatellit Kortopdateringer er sat på pause. Zoom ind for at se opdaterede oplysninger. Nulstil zoom Opdaterer kortet... Tilbage til kortet Oversigt 4,0 10 anmeldelserFremragende40 %Rigtig god40 %Gennemsnitlig10 %Dårlig10 %Frygtelig0 %29. marts 2016“Not bad for a hotel eatery”19. februar 2016“Convenient in the Tahoe Seasons Resort”Restaurantens åbningstider + Tilføj åbningstiderKØKKENER Amerikansk, Pub PRIS $$ - $$$VURDERINGER ServiceMadGod prisStemningPLACERING 3901 Saddle Rd, Tahoe Seasons Resort, South Lake Tahoe, CA 96150-8707Alle oplysninger Forbedr denne registreringHar denne restaurant tjenere?Ja Nej Ved ikke Tager denne restaurant imod reservationer?Ja Nej Ved ikke Er denne restaurant god til frokost?Ja Nej Ved ikke Er denne restaurant god til middag?Ja Nej Ved ikke Er priserne på denne restaurant i mellemklassen?Ja Nej Ved ikke Er denne restaurant familievenlig?Ja Nej Ved ikke Er denne restaurant god til store grupper?Ja Nej Ved ikke Er dette en amerikansk restaurant? Ja Nej Ved ikke Er dette en pub?Ja Nej Ved ikke Er denne restaurant god til en aften i byen?Ja Nej Ved ikke Tak for din hjælp! Del en anden oplevelse, inden du smutter. Skriv en anmeldelse\nMedlemsvurdering Fremragende4Rigtig god4Gennemsnitlig1Dårlig1Frygtelig0Type rejsendeFamilierParAleneForretningVennerTidspunkt på året Mar.-majJun.-aug.Sep.-nov.Dec.-feb.Sprog Alle sprog Dansk (9)Engelsk (10)Sprog Dansk (9)Engelsk (10)\nDenne anmeldelse er maskinoversat fra engelsk Hvad er det? For at du kan få gode råd fra så mange rejsende som muligt, er denne anmeldelse blevet oversat automatisk til dansk, og den er muligvis ikke en tro gengivelse af originalen. Vi håber, at den er en hjælp, når du planlægger din rejse. Vis maskinoversættelser? JaNejAudi_ChrisLondon9148Anmeldt 29 marts 2016 Ikke dårligt for et hotel spisestedHvordan var denne oversættelse?Tak, fordi du indsendte en redigering. Vi gennemgår dit forslag. Vurder den God OK Dårlig Forbedr oversættelse Tak for din vurdering.\nDenne anmeldelse er maskinoversat fra engelsk Hvad er det? For at du kan få gode råd fra så mange rejsende som muligt, er denne anmeldelse blevet oversat automatisk til dansk, og den er muligvis ikke en tro gengivelse af originalen. Vi håber, at den er en hjælp, når du planlægger din rejse. Vis maskinoversættelser? JaNejJeriLGSanta Cruz, Californien417173Anmeldt 19 februar 2016 Praktisk i Tahoe Seasons ResortHvordan var denne oversættelse?Tak, fordi du indsendte en redigering. Vi gennemgår dit forslag. Vurder den God OK Dårlig Forbedr oversættelse Tak for din vurdering.\nDenne anmeldelse er maskinoversat fra engelsk Hvad er det? For at du kan få gode råd fra så mange rejsende som muligt, er denne anmeldelse blevet oversat automatisk til dansk, og den er muligvis ikke en tro gengivelse af originalen. Vi håber, at den er en hjælp, når du planlægger din rejse. Vis maskinoversættelser? JaNej166MarilynBMariposa, California, United States386Anmeldt 11 november 2015 Meget venlige bartendere.Hvordan var denne oversættelse?Tak, fordi du indsendte en redigering. Vi gennemgår dit forslag. Vurder den God OK Dårlig Forbedr oversættelse Tak for din vurdering.\nSherri HEl Dorado Hills, Californien72Anmeldt 9 juli 2015 BarGoogle Oversæt Tak, Sherri H Denne anmeldelse er maskinoversat fra engelsk Hvad er det? For at du kan få gode råd fra så mange rejsende som muligt, er denne anmeldelse blevet oversat automatisk til dansk, og den er muligvis ikke en tro gengivelse af originalen. Vi håber, at den er en hjælp, når du planlægger din rejse. Vis maskinoversættelser? JaNejMichele AWildomar, Californien195Anmeldt 24 juni 2015 Lækker og rigelig madHvordan var denne oversættelse?Tak, fordi du indsendte en redigering. Vi gennemgår dit forslag. Vurder den God OK Dårlig Forbedr oversættelse Tak for din vurdering.\nDenne anmeldelse er maskinoversat fra engelsk Hvad er det? For at du kan få gode råd fra så mange rejsende som muligt, er denne anmeldelse blevet oversat automatisk til dansk, og den er muligvis ikke en tro gengivelse af originalen. Vi håber, at den er en hjælp, når du planlægger din rejse. Vis maskinoversættelser? JaNejkim hPembroke Pines, Florida5432Anmeldt 18 februar 2015 Fantastisk stedHvordan var denne oversættelse?Tak, fordi du indsendte en redigering. Vi gennemgår dit forslag. Vurder den God OK Dårlig Forbedr oversættelse Tak for din vurdering.\nDenne anmeldelse er maskinoversat fra engelsk Hvad er det? For at du kan få gode råd fra så mange rejsende som muligt, er denne anmeldelse blevet oversat automatisk til dansk, og den er muligvis ikke en tro gengivelse af originalen. Vi håber, at den er en hjælp, når du planlægger din rejse. Vis maskinoversættelser? JaNejcrlpooh61Anmeldt 6 august 2014 Fantastisk mad!Hvordan var denne oversættelse?Tak, fordi du indsendte en redigering. Vi gennemgår dit forslag. Vurder den God OK Dårlig Forbedr oversættelse Tak for din vurdering.\nDenne anmeldelse er maskinoversat fra engelsk Hvad er det? For at du kan få gode råd fra så mange rejsende som muligt, er denne anmeldelse blevet oversat automatisk til dansk, og den er muligvis ikke en tro gengivelse af originalen. Vi håber, at den er en hjælp, når du planlægger din rejse. Vis maskinoversættelser? JaNejJohnsonMerrittKey Largo5531Anmeldt 20 februar 2014 Fantastisk sted efter pisterne.Hvordan var denne oversættelse?Tak, fordi du indsendte en redigering. Vi gennemgår dit forslag. Vurder den God OK Dårlig Forbedr oversættelse Tak for din vurdering.\nDenne anmeldelse er maskinoversat fra engelsk Hvad er det? For at du kan få gode råd fra så mange rejsende som muligt, er denne anmeldelse blevet oversat automatisk til dansk, og den er muligvis ikke en tro gengivelse af originalen. Vi håber, at den er en hjælp, når du planlægger din rejse. Vis maskinoversættelser? JaNejfishinfool2014Port Charlotte, Florida142Anmeldt 11 januar 2014 God atmosfæreHvordan var denne oversættelse?Tak, fordi du indsendte en redigering. Vi gennemgår dit forslag. Vurder den God OK Dårlig Forbedr oversættelse Tak for din vurdering.\nDenne anmeldelse er maskinoversat fra engelsk Hvad er det? For at du kan få gode råd fra så mange rejsende som muligt, er denne anmeldelse blevet oversat automatisk til dansk, og den er muligvis ikke en tro gengivelse af originalen. Vi håber, at den er en hjælp, når du planlægger din rejse. Vis maskinoversættelser? JaNejtruegrimCalifornia510Anmeldt 5 september 2013 Kun åben i weekendenHvordan var denne oversættelse?Tak, fordi du indsendte en redigering. Vi gennemgår dit forslag. Vurder den God OK Dårlig Tak for din vurdering.\nOpdaterer listen... I nærheden Restauranter i nærhedenNephele's202 anmeldelser 1,48 km væk Himmel Haus157 anmeldelser 0,26 km væk Chimayo BBQ Tacos y Tortas84 anmeldelser 1,59 km væk Blue Angel Cafe207 anmeldelser 1,6 km væk Seværdigheder i nærhedenThe Gondola at Heavenly1.741 anmeldelser 0,46 km væk Van Sickle Bi-State Park138 anmeldelser 1,71 km væk Heavenly Mountain Resort575 anmeldelser 0,45 km væk Wyland Galleries30 anmeldelser 1,81 km væk Spørgsmål og svarFå hurtige svar fra personale og tidligere besøgende på Pub in the Pines.Bemærk! Dit spørgsmål vil blive offentliggjort på siden Spørgsmål og svar.Retningslinjer for indlægSendBekræftelse: Forbedr denne registrering\n3901 Saddle Rd, Tahoe Seasons Resort, South Lake Tahoe, CA 96150-8707 Placering:\nDenne restaurant er en del af Tahoe Seasons Resort


Hvad er læring i eget tempo? Betydning forklaret | Easy LMS\nHvad er læring i eget tempo? Betydning forklaret\nLæring i eget tempo betyder, at du kan lære i forhold til din egen tidsplanlægning og skema. Du behøver ikke at gennemføre de samme opgaver eller lære på samme tid, som andre. Du kan gå videre fra et emne eller segment til det næste i dit eget tempo.\nKlasseværelseopsætning har været mere populært end læring i eget tempo, hvor medarbejdere kunne lære selvstændigt. For nyligt er læring i eget tempo blevet mere populært i takt med at undervisning skifter ftra traditionelle modeller til internettet.\nDe største fordele ved læring i eget tempo\nLæring i eget tempo kommer med flere fordele, som kan fremme ydeevnen hos medarbejdere. Her er nogle af de største fordele [NCBI]:\nIntet pres, større tilbagevenden\nDet er intet pres til at gennemføre opgaverne\nLæring i eget tempo fjerner tidspresset, som eksissterer i live-undervisning. Der er intet pres til at gennemføre opgaverne og lære i samme tempo som andre. Ingen behøver at lade som om, de har forstået noget, som de ikke har. I stedet kan de gennemse materialet selvstændigt. En i Journal of Memory and Language offentliggjort undersøgelse indikerede, at læring i eget tempo endda også giver en større tilbagevenden til læringsmaterialet [E-learning Industry].\nLæring i eget tempo muliggør for medarbejdere at oprette deres egne skemaer. Det er specielt nyttigt for deltagere, som har andre opgaver og ikke kan deltage i personlig undervisning eller træning. Selv hvis der eksempelvis er en deadline til at gennemføre et kursus, kan de vælge hvordan og hvornår de kan gennemføre den.\nMuligvis mindre distraktioner\nHvis medarbejdere opretter deres egne læringsskemaer, kan de lære, når de bedst kan have fokus på det. De kan vælge tidspunkter, hvor de har færre afbrydelser fra kollegaer eller andre opgaver. Naturligvis kræver det selvdisciplin til at opnå det. De vil være nødt til at lukke distraktioner ud hjemme og ignorere deres telefoner.\nPassende til forskellige læringsstile\nPersoner har forskellige læringsstile. Visse personer lærer hurtigt, mens andre har brug for mere tid. Personer, der foretrækker at gennemføre materialet hurtigt, behøver ikke at vente på andre. Læring i eget tempo gør det muligt for dine deltagere at tilpasse deres forskellige læringsstile.\nHvordan kan du implementere læring i eget tempo i din organisation?\nOnlineværktøjer hjælper dig med at implementere læring i eget tempo i din organisation. De muliggør dig at oprette og hoste træningsmaterialer, som medarbejdere kan tilgå, som det passer dem bedst. Du kan endda optage personlige undervisningssessioner og offentliggøre dem online.\nPenge anvendt på et learning management system vil spare din virksomhed mange penge og tid\nAt planlægge en dag eller flere dages træning koster mange af virksomhedens resourcer. Et online træiningsakademie, hvor alt dit træningsmateriale samles på ét sted er en bedre løsning. Alle materialer vil være tilgængelige med blot nogle få kliks. Du kan tilføje deadlines til materialet, men dine medarbejdere kan fortsat lære i eget tempo og i forhold til deres eget skema.\nPenge anvendt på et learning management system vil spare din virksomhed mange penge og tid. Du vil i sidste ende opnå mere vidende medarbejdere og kunder.\nEr læring i eget tempo muligt med Easy LMS?\nDet er nemt at oprette og dele forskellige typer af tests og kurser med vores LMS. Vi udbyder delingsmetoder til brug i læring i eget tempo. Du kan ganske enkelt dele linket til dit materiale, offentliggøre det på din hjemmeside eller invitere deltagere sikkert via email. Hvis du ønsker, kan du indstille en tidsramme til dem i forhold til gennemførslen. Der er også muligt at give deltagerne flere forsøg til at gennemføre en opgave.\nDeltagere kan vælge at gennemføre deres træning via deres smartphones og uden for normal arbejdstid. Derefter kan du gennemse deres resultater og statistikker for at lære, hvordan du kan forbedre dine læringsmaterialer.\nLæring i eget tempo fjerner skemaproblemer og tillader deltagere til at lære i deres eget tempo. Som opsummering: det er en løsning på mange problemer 😀!\nLæring i eget tempo betyder, at du kan lære i forhold til din egen tidsplanlægning og skema. Der er ikke brug for at gennemføre opgaverne og gennemføre kurser på samme tid, som andre deltagere.\nHvilke er fordelene ved læring i eget tempo?\nLæring i eget tempo reducerer tidspres, eliminerer nødvendigheden for et skema, nedsætter distraktioner samt er egnet til forskellige læringsstile.\nHvordan kan jeg implementere læring i eget tempo i min organisation?\nVed at anvende online værktøjer til at oprette træningsmaterialer kan dit publikum tilgå disse, når det passer dem bedst.\nDet er nemt at oprette forskellige typer af tests og kurser med vores LMS. De kan deles til anvendelse i læring i eget tempo.\nHvad er læring? Fra teori til praksis


Et Al ApS som arbejdsplads | Jobindex\nEt Al ApS som arbejdsplads\nEr du eller har du været ansat hos Et Al ApS?\nSom nuværende eller tidligere ansat kan du også fortælle, hvad du synes om at arbejde hos Et Al ApS.\nAnnoncestatistik for Et Al ApS\nHer kan du danne dig et overblik over jobannoncer fra Et Al ApS. Du kan se hvilke kanaler og regioner annoncerne var placeret i og hvordan antallet af indrykkede jobannoncer har ændret sig fra kvartal til kvartal.\nEr du fra Et Al ApS? Så kan du oprette en profil der beskriver virksomheden for de jobsøgende.


Unik oplevelse på Kamchatka | Bjørnejagt i Sibirien\nDen lange Kamchatka halvø som strækker sig over 1.500 km ligger i den fjerne nordøstlige del af Sibirien og er en del af vulkanbæltet i Stillehavet. Det bjergrige landskab er imponerende; Klar luft, sneklædte bjerge på over 3.000 meters højde, mennesketomme højsletter, skovklædte dale som er gennemskåret af bække og floder med krystalklart vand. Der findes endda 120 vulkaner, hvoraf ca. 20 stadig er aktive.\nPå Kamchatka lever der foruden brunbjørn og elg også Kamchatka snefår lige såvel som caribou, ulve, los, rød- og polarræve, oddere, urfugle og ryper. Ved siden af de forskellige sælarter findes der i den nordlige kystregion også hvalrosser på op til 1.500 kg samt isbjørne. Men Kamchatka er ikke kun for jægeren, idet der for fiskeren er et righoldigt fiske udbud – med mange forskellige ørred- og laksearter i bækkene og i floderne. Om sommeren og i det tidlige efterår stiger utallige laks op i floderne.


Flask K væglampen er en af de rigtigt mange lækre væglamper - fra Chors.\nDenne væglampe er hvad man, måske, kunne kalde en gallerilampe – Altså, en lampe der egner sig, specielt godt, til brug i gallerier eller steder, hvor den smukke Flask Væglampe Sort kan oplyse et kunstværk, eller trække opmærksomheden hen til et element i indretningen man vil have fokus på – Om det er praktisk eller skulpturelt er sådanset underordnet, med en smuk væglampe som denne.\nTakket være den lange arm og, delvist, anonyme udtryk, er Flask K væglampen perfekt til, at hænge over et billede eller maleri. Flask K væglampen vil ikke fjerne opmærksomheden unødigt fra det belyste og fremhævede område – og vil derfor blot virke som praktisk spotbelysning.\nLyskeglen kan, af samme simple årsager, derfor også indstilles i vinkler fra 8° til 40°. praktisk og smukt lys fra en væglampe, der i sig selv er tiltænkt et praktisk formål – Fra Chors


Forklæder en fyldigere figur | DK.DSK-Support.COM\nForklæder en fyldigere figur\nChris Govender giver tips til, hvordan at klæde den flotte, fuld-cifret krop af din.\nDen gennemsnitlige kvinde ligner ikke noget eksternt tæt på de papirtynde supermodeller, der er stillet til skue på forsiden af hver magasin om displayet.\nSå bare hvordan kan du gå om at se og føle sig som en supermodel i din egen hud?\nDe dos og don'ts af dressing en fyldigere figur\nDet handler om at klæde med stil og elegance, mens den stadig væskende den indre følelse af tillid til, at vi alle besidder. At gøre dette vil straks fremhæve alle dine bedste bidder og til gengæld gøre din nabo, deres fætter og selv den kvinde ned på gaden lidt misundelig på dine naturlige kurver.\nUndgå baggy eller stramtsiddende tøj\nBær altid tøj, der passer dig godt. Baggy tøj gøre dig vises frumpier mens stramtsiddende tøj blot fremhæve problemområder. Du vil ikke tro, hvad en forskel god montering tøj gør at både dit udseende og din tillid niveauer!\nAf en eller anden mærkelig grund, de fleste fuld regnede kvinder frygter den frygtede bælte. Jamen det er tid til at sparke den frygt til kantstenen fordi frygtede bælter er lige så 'old-school.\nBælterne er perfekt til at skabe en midtersektion og give din form, der begærede-efter timeglas look. Slidte under din bustline kan være meget lidet flatterende, så sørg for at bære denne alsidige tilbehør omkring livet i stedet, og du vil være en god start!\nJa, vi er alle klar over, at sort tøj er ekstremt slankende og er nyttig til at skjule disse klumper og bump, men som helt sikkert betyder ikke, du skal bære det hver dag som om du er i sorg!\nDet er på høje tid, du levede livet på kanten og indførte en lidt farve ind i dit liv og din garderobe! Vælg farver, der komplimenterer din teint, da dette vil tilføje en øjeblikkelig boost af udstråling til din hud tone.\nToppe til fyldigere tal\nMonteret toppe er mere gratis på vise din smukke silhuet, end den græske, lagdelt udseende.\nV-hals og collared skjorter er dine mest flatterende halsudskæringer og er fremragende på at gøre opmærksom på din torso.\nUndgå pufærmer og alle de girly buer og dikkedarer.\nToppe med store, larmende udskrifter er distraherende, så gå til subtile, bløde trykte stoffer som erstatning.\nGlem alt om vandrette linjer og vælger at forlænge lodrette linier til en slankende effekt.\nAldrig bære lave bukser! Pant talje bør altid findes et eller andet sted under den naturlige talje for en bedre pasform. Low-stigning og højtaljede bukser er en enorm mode faux pas og gøre absolut intet at smigre din figur.\nSpil op pæne ben med A-line nederdele, der ender lige omkring knæet området. Denne længde er lige på penge, som det gør du synes lang og langstrakt.\nSpring kræsen detaljer som store cargo lommer, rouching eller overdreven lynlåse findes på last- og faldskærm bukser.\nEt lige eller let bootcut ben er den mest flatterende af alle de forskellige bukser nedskæringer.\nPocket-mindre jeans er en stor no-no som deres primære mål er at fremhæve områder, du bør nedtoner. Kig ikke længere end standard fem-lomme hæftning, når det kommer til at vælge en stor par jeans. Front lommer på jeans henlede opmærksomheden væk fra mave problemer, mens baglommer kan faktisk slank linie din bageste.\nKig efter kjoler, der kvæle dig i i taljen og lidt flare ud nogensinde-så-lidt på hofter og lår.\nÆrmeløse og stropløs kjoler er ideelle til accenting smukke skuldre og arme og opmærksom opad.\nKæmp at trangen til at dække op fra top til tå! Viser off en smule hud, hvad enten det er dine arme, skuldre eller lidt ben er langt mere flatterende og faktisk gør du ser en hel masse slankere.\nJakker og frakker til fladere din figur\nJakker og frakker bør altid falde til under dine hofter. Korte jakker / frakker, der ender på din talje gør noget, men forkorte længden af din krop og fremhæve din bund og hofte områder.\nMoralen af historien\nSer smart og moderigtigt er aldrig om designermærker, men om at fejre kurverne du har været velsignet med, og kun iført hvad smigrer din figur.\nMed blot et par visuelle 'tricks og lidt tillid smidt i for ekstra foranstaltning, man også kunne se og føle, at du hører på forsiden af enhver blankt mag!\n4 Make-up tips til en helt ny dig i 2017\nNegle gør det selv: splatter manicure\nHot vinter skønhed trends for 2017\nDen trendy pige guide til London\nSætte et tydeligt ansigt på plastikkirurgi\nStrækmærker er væk\nNye skønhedsudgivelser runde op\nFletninger, boller, twirls og swirls... glam ideer til matrisk dans hår\nHvorfor skal du bruge korrektiver samt din regelmæssige mosituriser


Kanel-sjov kan være vold | TV2 Nord\nKanel-sjov kan være vold\nOpfindsomheden er stor, når vennerne beslutter sig for at fødselaren skal have kanel eller peber til en 25-års eller 30-års fødselsdag. Hos anklagemyndigheden advarer man dog om, at det, der er ment som festlige løjer, kan ende som en voldssag.\n23. jun 2016, kl. 14:17\nEn 25-årig mand er bundet til et kors. Hans venner har fyldt en løvblæser med flere kilo kanel, og de blæser det hele i hovedet af manden der hænger på korset. Sådan her kan en de videoer, som TV2 Nord har fået tilsendt fra 25-års fødselsdage opsummeres.\nSenioranklager hos Nordjyllands Politi Peter Rask advarer om at det der starter som en frivillig kanelgimmick kan ende i en voldssag, hvis ikke vennerne stopper i tide.\n- Hvis det begynder at kamme over og folk siger ”stop, nu vil jeg ikke mere”, så skal de respekteres. Ellers er der tale om at man udøver vold, hvis man ikke stopper, siger Peter Rask.\nPå internettet kan man finde flere hjemmesider hvor man til en 25-års fødselsdag kan leje en pulverslukker med kanel eller finde opskrifter til hvordan man bygger en selv. Men det er en aldeles farligt, mener man hos Falck.\nHvis det begynder at kamme over og folk siger ”stop, nu vil jeg ikke mere”, så skal de respekteres. Ellers er der tale om at man udøver vold, hvis man ikke stopper.\n- Jeg tænker at det er en dårlig ide for man genanvender nogle gamle pulverslukkere, som man lader op igen. Det kan der være nogle farer i, som jeg ser det. Hvis trykket er for højt, så er der risiko for at en pulverslukker kan eksplodere, siger Tommy Sørensen, der er Områdeleder for brand hos Falck i Aalborg.\nDet var netop hvad der skete til en 30-års fødselsdag på Brovstegnen tilbage i 2010. En pulverslukker fyldt med peber eksploderede og en 24-årig mand blev alvorligt kvæstet.\n- Jeg synes det er dumt at bruge pulverslukkere på den her måde. Det er min egen personlige mening, siger Tommy Sørensen.\nSelvom grænsen mellem løjer og vold tilsyneladende er hårfin, så har man hos Nordjyllands Politi ikke nogen eksempler på at en fødselar efterfølgende har meldt vennerne for vold.\n- Jeg forestiller mig at dette r fordi det netop er i en vennekreds det foregår og man vil jo ikke fremstå som pivet, siger senioranklager Peter Rask.


• Køb Bøllehat på Østfyn – Stort udvalg\nEr du på udkig efter bøllehat på Østfyn? Vi anbefaler følgende webshops…\nAdskillige butikker på nettet frembyder efterhånden alverdens fragtformer. En af favoritterne er i vore dage at få afleveret pakken hos en pakkeshop, hvor du selv henter pakken lige præcis når det passer ind i din kalender. Fragtmetoden er nemlig virkelig simpel, og i mange tilfælde desuden den mest letkøbte leveringsmulighed.\nDu kan endvidere vælge at få produkterne leveret hjem til din privatadresse eller til hvor du arbejder. Fragtmetoden bliver desværre et hak mere bekostelig, men ligeledes super ligetil. Den billigste mulighed for levering af bøllehat på Østfyn er dog at hente pakken selv, men den løsning er betinget af at du befinder dig i kort afstand af bøllehat på Østfyn internet butikkens lager.\nLeveringshastigheden er jo meget bestemmende ifald man absolut skal bruge dine nye produkter omgående, og med det formål er det aldeles centralt at man kigger nærmere på tidshorisonten for levering på den pågældende vare.\nAdskillige bøllehat på Østfyn online shops lover levering på næstkommende hverdag på en hel del varenumre, hvilket antager at der bestilles tidligere end et bestemt klokkeslæt, så at de har udsigt til at kunne nå at få bøllehat på Østfyn ordnet forud for at logistikmedarbejderne drager hjemad.\nEn hel del outlets på nettet yder fragt uden beregning, men ofte kræver det at der erhverves for et fastsat beløb. Alternativt skulle man foretrække den mest letkøbte leveringsmåde, der gerne – hvad end du er nær Næstved, Nyborg eller Skagen – vil være at få fragtmanden til at levere bestillingen til et afhentningssted.\nDet har vist sig at være ultra uproblematisk for enhver at finde de bedste priser på bøllehat på Østfyn hos diverse online webshops, og på grund af dette har en lang række shops på nettet ikke kunne slippe for at nedskære priserne på en række af deres varer – til babyer og børn, og endvidere også til voksne – betragteligt, og endda nogle gange frembyde fri fragt.\nDet kan dog ikke desto mindre være udbytterigt at efterprøve nogle forskellige internet handler efter bøllehat på Østfyn rabat forud for at du gennemfører din handel, således at du er tryg ved at antage den laveste pris.\nDu skal lige meget hvad være så påpasselig, at såfremt en e-shop markedsfører bøllehat på Østfyn for en salgspris som er uendeligt billig, så er det undertiden være en varsel om en uærlig online webshop. Køb med betalingskort er på den anden side omsluttet af en lovbestemmelse, hvilket passer på folk imod uægte online shops.\nGenerelt tilråder vi betalinger med kort eller mobilbetaling. Som et alternativ bør du anvende en afbetalingsordning fra f.eks. ViaBill, forudsat du foretrækker at godtgøre prisen over en længere periode.\nFør nogen shopper bøllehat på Østfyn hos en internet shop bør man i princippet gennemgå webbutikkens forretningsvilkår, men det er oftest ikke videre interessant.\nEn anden valgmulighed kunne være at se om online webshoppen er e-mærke godkendt, som skulle være en antydning af at e-handlen efterfølger gældende dansk lovgivning, og at netshoppen undertiden monitoreres af fagmænd som mestrer de gældende regulativer. Det er en rigtig god chance for at få assistance, ifald du får besvær i processen med din shopping.\nDertil foreslåes det at man er opmærksom på de mest vedkommende vilkår der indvirker på transaktionen, for eksempel den returrettighed på bøllehat på Østfyn online firmaet anvender. I den sammenhæng er det i øvrigt essesentielt, at man stadigvæk sikrer sin kvitteringsmail, således man i fremtiden kan dokumentere ordren, ligegyldigt om man er på shopping til en kvinde eller mand.\nTrustpilot forærer dig en række belejlige løsninger til at beskue en hel del andre kunders meninger og på grund af dette er det en hjælp, at du besigtiger online forretningens bøllehat på Østfyn bedømmelser inden du køber.\nFacebook medfører ligeledes visse fortræffelige muligheder for at få indblik i internet shoppens kundetilfredshed. Foruden det er der en del online butikker hvor du kan ytre en kritik af deres køb, som tillige må bruges til at få et indtryk af kundetilfredsheden.\nWebsitet er finansieret af reklamer. Vi har faste samarbejder med en gruppe internet butikker i form af at vi formidler virksomhedernes varer, og får kommission såfremt den besøgende vi sender videre foretager en ordre.\nOplysninger om bøllehat på Østfyn og e-butikker vedligeholdes jævnligt, men der tages ikke ansvar for korrektioner der muligvis er implementeret siden nyligste opdatering af sidens oplysninger.\nBøllehat på Østfyn – Køb bøllehat på Østfyn


Blogsbjerg: Heksen, hjælperne og den første skoledag.\nDa gennemsnitsalderen i omgangskredsen var 25, havde alle med respekt for sig selv, en eller flere åndelige vejledere, de gjorde brug af. Nogle valgte den alternative vej, og brugte tiden hos clairvoyante, andre var mere traditionelle og tog en tur på briksen hos en psykolog.\nImidlertid lader det til, at vi nu, hvor alle er i 30erne, stille og roligt opdager, at psykologer, håndlæsere og coaches har gjort for os, hvad de kunne. Desillusion eller realisme: Man når et punkt, hvor man erkender, at de kan være en hjælp – men at de trods alt ikke kan trylle. Når man har været i selskab med sig selv i 30+ år, kender man efterhånden sine issues, og er ved at acceptere, at man selv må arbejde sig igennem dem. Man må selv lære at sige fra, når man synes, at chefen går over stregen. Man må selv lære ikke at gå i panik og tro, at alting slutter, fordi kæresten råber af én. Man må selv acceptere, at man ikke altid får det, man har brug for af mennesker, man mener, er forpligtede til at give det. Det er hårdt arbejde, og ingen andre kan gøre det for dig. Det kræver imidlertid overskud at arbejde med sig selv, og det fandens er, at de fleste uhensigtsmæssigheder bunder i usikkerhed og frygt, og derfor altid dukker op i underskudssituationer. Derudover er kimen til mange af mønstrene lagt mange år tilbage, hvilket betyder, at vaner og tanker er solidt indarbejdede i systemet.\nNår man finder ud af, at evnerne til at være Den Sygemeldt Medarbejder Med Depression eller Nogens Gravide Kæreste ikke er programmer, der automatisk installeres og opdateres, fordi man fylder 30, kan det næsten ikke undgås, at man mærker en snigende panik. Hvordan har andre fundet ud af, hvordan man gør? Hvorfor virker de så tjekkede i rollerne, når man selv føler sig som et barn, der hele tiden skal lære at cykle? Igen? Hvordan opgraderer man til Voksen 2.0? Kommer man nogensinde i mål? Eller er det først, når man har en tung sten placeret over panden, at man er færdig med at have fornemmelsen af, lige at være startet i skole?\nIndsendt af Linda kl. 13.13\nSuzy Q 19. juli 2008 kl. 11.04\nEssensen af mit liv.


I de nuværende realtid streams data strømmer ind fra top til bund i en enkelt kolonne. Det giver en dårlig læseoplevelse fordi den tekst, du er fokuseret på bliver pludseligt og uventet flyttet hundredvis af pixels. Ved at stable elementerne i en enkelt kolonne og skiftende hele kolonnen, når det fylder gør for en meget stabler og forudsigelig bevægelse, samtidig med at en kontinuerlig tilførsel af nye emner.\n* Let at installere / tilpasse\n* Bruges Prototype / Scriptaculous biblioteker\n* Timeline er trækbart\n* Tweets flyde ind i tidslinjen i realtid i en stabling / glidende bevægelse gør bevægelse mere forudsigelig for læseren\n* Tilsluttes til Twitter ved hjælp jsonp så du don € ™ t nødt til at bekymre sig om sats grænser eller oprette en proxy. (Ingen php / rubin påkrævet)\n* Garbage indsamling holder DOM ren. (Kan tilpasses)\n* Iscenesættelse poster i DOM, før du tilføjer til åen reducerer antallet af Twitter anmodninger. Brugerne bør være i stand til at lade dette køre kontinuerligt og ikke ramt Twitter rate grænsen på! (Medmindre du fremskynde det med omkring 4-5x)\neCommerce, eCommerce, alle varer, horisontale, jsonp, prototype, scriptaculous, rulle, tidslinje, tweet, tweets, twitter, twitter api


Proces-overvågning - SCANVIEW\nProces-overvågning med Night Line kameraer, af hele anlægget, ude og inde.\nLemvig Biogasanlæg er Danmarks største, termofile biogasanlæg. Anlægget har produceret biogas siden 1992 og udnytter i dag gylle fra ca. 75 landbrug. Desuden omdannes affald og restprodukter fra industriel produktion til biogas.\nBiogassen købes af lokale kraftvarmeværker, som i gasmotorer omsætter gassen til 33 millioner kWh-el om året, hvilket dækker det årlige elforbrug for 22.000 mennesker. Biogassen producerer desuden varme. Overskudsvarmen fra gasmotorernes kølesystem er årligt på 55 millioner kWh-varme, hvilket svarer til over 3.000 husstandes årlige varmeforbrug.\nVed at udnytte affald til noget nyttigt i stedet for blot at kassere det kan Lemvig Biogasanlæg forsyne mange tusinde mennesker med el og varme. Som en ekstra gevinst er gylle langt mere miljøvenlig og langt mindre ildelugtende, efter den er afgasset. Det er bæredygtig udnyttelse af ressourcerne.\nOvervågning giver tryghed i processen\nI forbindelse med en større istandsættelse af Lemvig Biogasanlæg har SCANVIEW leveret en videoovervågningsløsning til hele anlægget.\nDer er installeret 32 Night Line kameraer. Hver af de 4 store tanke har 2 indvendige kameraer, der overvåger processen dels fra siden dels oppefra. Desuden overvåges hele det udendørs område, så man fx kan se folks færden på området, trafik og aflæsninger. Installeringen er med en IPS-10.000 server, som kan håndtere op til 100 kameraer. Der er lavet kabling, dels med fiber dels almindelig kabling.\nProces-overvågning giver tryghed for ansatte og materiel. Fejl observeres hurtigt, så der kan reageres, før der sker stor skade. Desuden spares mange ressourcer ved ikke at skulle lave manuel overvågning.\nProces-overvågning med night vision\nNight Line kameraer sikrer, at der kan overvåges, også når lyset forvinder. På billedet til højre kan man se, hvordan den ypperlige teknologi virker i praksis. Billederne er taget fra en af de udendørs overvågningspositioner på Lemvig Biogasanlæg\nBillede 1 er taget med et helt almindelig kamera og viser således, hvad øjet ser.\nBillede 2 er taget med det installerede overvågningskamera, uden hjælpelys.\nBillede 3 viser det samme med hjælpelys, som er en del af kameraets udstyr.\nUdover løsningen for Lemvig Biogasanlæg har SCANVIEW leveret andre tilsvarende løsninger.\nVi har bl.a. leveret proces-overvågning til Svendborg Kraftvarme og Inter Terminals, Stigsnæs.\nFørstnævnte løsning er med termiske kameraer installeret i tankene, hvilket sikrer, at for store temperaturstigninger udløser en alarm, så der kan reageres før, der udbryder ild.


folketidende.dk - Lolland og Falster samlet et sted - Forside - Sport - Den evige toer tager kvindernes VM-guld i enkeltstart\nAnna van der Breggen fik vekslet sine fire sølvmedaljer til en guldmedalje på torsdagens VM-enkeltstart.\n24. september 2020 kl. 16:44 Af Ritzau\nEn dramatisk enkeltstart for verdens bedste kvindelige cykelryttere endte i en stor triumf for Hollands Anna van der Breggen ved VM i italienske Imola.\nEfter at være blevet nummer to ved VM tre år i træk og fire gange i alt i disciplinen lykkedes det endelig Van der Breggen at ramme podiets øverste trin.\nDen danske mester i linjeløb, Emma Norsgaard, blev nummer syv efter længe at have haft bedste tid, indtil de dygtigste ryttere kom i mål.\n- Jeg havde ikke et sekund mere at give, så jeg er glad og tilfreds med min præstation.\n- Jeg følte faktisk ikke, at jeg havde særligt gode ben, men på vej "hjem" fik jeg ligesom samlet lidt selvtillid og prøvede bare "at slå mig selv ihjel", siger Emma Norsgaard.\nTiden var så god, at det 21-årige talent nåede at sidde næsten en time i det såkaldte "hot seat", hvor løbets aktuelle top-tre blev placeret.\nHer kunne hun se den ene rival efter den anden komme i mål på racerbanen i Imola i dårligere tider end hendes egen.\n- Hver gang, der kom en rytter i mål, fik jeg et sug i maven. Det var sjovt at prøve, specielt til et elite-VM. Jeg nåede at drømme lidt, men jeg vidste også godt, at de hårde damer kom senere, siger Emma Norsgaard.\nMed sin syvendeplads indfriede hun rigeligt sit eget mål om en plads blandt de ti bedste.\nSølvet gik til schweizeren Marlen Reusser, som var 15 sekunder langsommere end Anna van der Breggen på den 31,7 kilometer lange rute.\nBronzen gik til hollænderen Ellen van Dijk.\nEnkeltstarten fik dog også en god portion dramatik, som var medvirkende til at sikre den hollandske triumf.\nFor den forsvarende verdensmester, amerikaneren Chloe Dygert, lå med bedste mellemtid, men hun mistede kontrollen over sin cykel på en nedkørsel.\nDet sendte hende ud i og ud over autoværnet, og så var hendes titelforsvar slut.\nDanmark havde også Pernille Mathiesen til start, men hun skuffede og sluttede som nummer 32.\n- Det var rigtig skidt, hvis jeg skal være helt ærlig. Jeg kunne ikke finde nogen rytme, og jeg kunne allerede se efter fem minutter, at jeg ikke kunne holde de watt-tal, jeg normalt kører.\n- Det var en ret god indikator på, at det bare ikke spillede for mig, siger Pernille Mathiesen.\nDen tidligere U23-europamester kom på grund af coronapandemien først i gang med sæsonen for en måned siden og har blot haft tre løbsdage som forberedelse.\nDet kan være en af forklaringerne på den skuffende præstation, mener hun.\n- Normalt bruger jeg mange løb til at køre mig i form. Nu har jeg skullet gøre det hele selv under træningen. Det har selvfølgelig givet mig nogle gode ting, men jeg kunne godt have brugt nogle flere løb, siger Mathiesen.


Tag et kig i min butik... — zimpl.dk\nDet var egentlig tilfældigt, at Zimpl kom til at omfatte en webshop.\nHele ideen med Zimpl udsprang netop af en trang til at reducere ligegyldigt forbrug og impulskøb, give plads til kreativitet og initiativ i hverdagen - og i det hele taget træffe nogle bedre og mere bæredygtige valg.\nIkke kun bæredygtige valg i forhold til indkøbsvaner og forbrug, men bæredygtighed generelt i forhold til at skabe et liv med større balance mellem forbrug og ressourcer.\nDer findes heldigvis mange ildsjæle derude, som virkelig ønsker at producere gode produkter og varer af høj kvalitet uden at gå på kompromis med omkostninger for miljø og helbred. Da lejligheden bød sig i efteråret 2018, og jeg fik mulighed for at have en salgsvogn på Zirkus Nemos Hjulemarked i Aarhus, gik jeg (sammen med min kæreste nu also-known-as “Manden der får ting til at ske”) på jagt efter producenter af gode, lokale sager!\nDet blev til en blandet Zimpl butik med sæber, kropsprodukter, fodpleje, gammeldags strikkede håndklæder og klude, gin og krydderier, hånddrejet træjulepynt, gourmet-glögg og forskellige varianter af Bees Wrap. Meget blev solgt og noget har jeg tilbage. En del af det kunne jeg endda have lyst til at tage mere hjem af, fordi det bare er lækre sager.\nGin og krydderier har jeg på lager, men sender ikke - derfor er det heller ikke lagt på shoppen endnu, men det kommer. Alt kan hentes i Brædstrup efter aftale.\nKig forbi butikken og lad dig inspirere til forårsindkøb med god samvittighed. Alle produkter er økologiske og fremstillet lokalt. Det gælder fx de økologiske sæber fra SæbeRiget og de skønne kropsolier fra Sweet Lily. Du finder dem lige her og her.\nBodyoil fra Sweet Lily fås i tre varianter til kr. 145,-\nMarianne Miller March 19, 2019 Comment\nMarianne Miller March 14, 2019


I broderloge nr. 39 Sct. Kjelds møde den 5. oktober 1999 havde broder daværende storrepræsentant Henning Hedeland et indlæg, hvori han opfordrede til dannelse af en ny loge.\nIdéen blev modtaget med meget blandede følelser blandt brødrene – de fleste var direkte imod.\nI løbet af foråret 2000 gik bølgerne højt – for eller imod.\nInitiativet stoppede brat, da modstanden på dette tidspunkt var for stor\nPå opfordring blev der i logemødet 3. februar 2004 givet fyldestgørende information om, hvordan man etablerer en Odd Fellow forening og senere en ny loge.\nDet medførte, at der i løbet af meget kort tid var grundlag for at afholde det 1. møde i Odd Fellow foreningen under stiftelse.\nDet skete den 15. marts 2004. Her blev den kommende forenings-ledelse valgt: broder Henning Hedeland, formand, broder Henrik Aaskov, sekretær og broder Bendix Riis, kasserer.\nVedr. navnet på foreningen var flere bragt i forslag, men forsamlingen enedes om ”Erik Glipping” blandt andet fordi han er den eneste konge, der er kronet i Viborg Domkirke og den eneste konge, der ligger begravet i her – Han er også den første danske konge der underskriver en håndfæstning – ”Danmarks første grundlov”.\nVi valgte også navnet fordi, vi gerne vil ”gå kongebud”\nI den kommende tid blev der afholdt mange møder under næsten konstant modstand fra brødre i nr. 39 Sct. Kjeld.\nDet betød blandt andet at flere brødre blev usikre og at medlemslisten skrumpede ind.\nDet betød blandt andet at flere brødre blev usikre og at medlemslisten skrumpede ind. Men der blev ufortrødent arbejdet videre for at skabe et sikkert grundlag for en Odd Fellow forening.\nOg heldigvis sluttede flere brødre sig til. Selv et krav fremsat i logemødet den 16. februar 2006 om omgående at stoppe initiativet, havde ingen virkning – brødrene var enige om at fortsætte arbejdet.\nOg den 29. november 2006 afsendtes så endelig ”Anmodning om dannelse af Odd Fellow Forening”\nInstituering af Odd Fellow foreningen Erik Glipping\nDen 5. marts 2007 blev Odd Fellow foreningen Erik Glipping institueret i ordensbygningen i Viborg.\nBroder storsire Hans Pedersen foretog institueringen bistået af broder storsekretær Mogens Lind og broder stormarskal Kurt Rahbek.\nUnder den efterfølgende middag talte broder Storsire for foreningen og broder sekretær Henrik Aaskov for Ordenen.\nDen tidligere valgte bestyrelse supplerede sig straks med broder Ernst Hundrup og broder Bent P. Larsen.\nDisse fem brødre arbejdede ihærdigt for at skabe det nødvendige grundlag for instituering af ny loge. Foreningens øvrige medlemmer var en uvurderlig hjælp og støtte – mange gode og brugbare idéer kom fra brødrene. På et tidspunkt behandlede den udvidede bestyrelse op mod 80 forskellige forslag.\nDen nye loge blev således et resultat af en fantastisk fælles indsats – en holdning, der stadig præger broderloge nr. 119 Erik Glipping.\nVi var enige om, at den nye loge ikke skulle være en kopi af det, vi kendte – vi ville skabe vore egne traditioner og måder at gøre tingene på.\nSom noget absolut grundlæggende var vi enige om, at vi til enhver tid ville følge Grundloven og alle bestemmelser, der måtte komme fra Storlogen – herunder ikke at ændre noget i ritualerne.\nSom en følge heraf og i overensstemmelse med embedernes pligter anmoder ydre vagt og indre vagt om hhv. årspasordet og gradens pasord. Ligeledes har broder arkivar nu sin faste plads i logesalen. Ved hver logemødes begyndelse tændes alterlysene og symboltavlen åbnes. Vi har indført musikstafetten og besluttet, at eksvalgembedsmænd bortset fra overmesteren skal bære deres embedes insignie på et 3.grads regalie.\nEfter mange forhandlinger indgik vi en samarbejdsaftale med nr. 39 Sct. Kjeld om fælles brug af diverse ordensmæssige effekter.\nIndkøb af de nødvendige regalier ville have kostet logen ca. 40.000 kr. Men på initiativ af daværende distrikts deputeret storsire Peter Skafte, forærede flere af landets broderloger os deres overskud af regalier. Vi havde så kun udgiften til evt. reparation og rensning.\nForeningens medlemmer valgte den nye loges første embedsmænd, udarbejdede budget, fastsatte mødedag og kontingent. Foreningen forberedte også et forslag til Særlige Love, der efter institueringen blev vedtaget af brødrene og godkendt af Storlogen uden bemærkninger.\nEn særlig, men meget vigtig del af forberedelserne var den regnskabs-mæssige side, som blev klaret af brødrene Per Olesen og Bendix Riis.\nStadig var der rigtig mange opgaver, der skulle løses blandt andet ift. til Byggeforeningen. Der skulle findes plads til arkivrum, til vore rekvisitter, til billedgalleriet og meget andet – alt blev løst på bedste vis. Etableringen af en loge mere medførte også, at Byggeforeningen af loge nr. 39 Sct. Kjeld købte al inventar, der gennem årene var indkøbt til brug for logerne i bygningen - dog bortset fra de ordensrelaterede effekter.\nI lighed med de øvrige loger i bygningen underskrev vi en lejekontrakt med Byggeforeningen, der bl.a. fastsatte den årlige husleje til 20.000 kr. – dog først efter 5 år.\nEfterhånden følte vi, at vi var klar til at blive en selvstændig loge.\nDen 20. maj 2008 afsendte vi ”Ansøgning om Bevilling til oprettelse af en loge af Odd Fellow Ordenen” til Storlogen. Storlogen fastsatte datoen for institueringen til lørdag den 25. april 2009.\nSidste møde i broderloge nr. 39 Sct. Kjeld\nSå kom dagen, hvor vi skulle sige farvel til nr. 39. Tirsdag den 21. april 2009 var alle 30 brødre, der ønskede overflytning til den nye loge, mødt op. En efter en gik vi på tæppet og da alle stod der, forlod vi på ritualmæssig måde vor moderloge – med en blanding af vemod, stolthed og forventning.\nInstituering af broderloge nr. 119 Erik Glipping\nLørdag den 25. april 2009 var vi endelig i mål: broderloge nr. 119 Erik Glipping blev institueret! I overværelse af flere end 100 ordenssøskende og gæster forestod broder storsire Lars Jørgensen institueringen. Fra Storlogen deltog desuden broder deputeret storsire Erling Stenholdt Poulsen, broder storsekretær Henning Petersen, broder stormarskal Hans Strunge Madsen, broder storvagt Jørgen Christian Johansen og broder storherold Finn Stegeager – som storskatmester fungerede broder Kurt Rahbek.\nDet var et stort øjeblik for os alle, da broder Storsekretær overrakte Fribrevet til stifterne:\nHenning Hedeland, Ernst Hundrup, Bent P. Larsen, Niels Hagn-Meincke og Erik Linnemann\nStorlogens embedsmænd indsatte på ritualmæssig vis logens første embedsmænd i deres embeder:\nOvermester Henning Hedeland\nUndermester Henrik Aaskov\nSekretær Mads Salling\nKasserer Per Olesen\nSkatmester Bendix Riis\nFungerende eksmester Bent P. Larsen\nI logens første møde den 29. april 2009 valgte brødrene broder Ernst Hundrup og broder Bent P. Larsen til storrepræsentanter for resten af valgperioden frem til 1. maj 2010.\nVi nåede målet, fordi vi aldrig lod os slå ud af modgang, men altid så lys forude og når man går mod lyset, har man altid skyggerne bag sig.\nVi nåede målet, fordi nogle brødre fik ting til at ske – fordi nogle brødre var fast besluttet på at se mulighederne og ikke begrænsningerne – fordi vi stod sammen om at skabe et fælles værk.\nUden dette fællesskab var det måske aldrig blevet til noget.\nLogen første embedsmænd 2009 – 2011\nEfter installationen blev der afholdt festloge efter ritualet. Vi modtog mange gaver i dagens anledning – her skal blot nævnes en enkelt: på vegne af logens unge brødre overrakte broder Peter Schøler ambolt og hammer – gaven blev straks taget i brug.\nLoge nr. 119 Erik Glipping’s fribrev\nBroder 1. storrepræsentant Ernst Hundrup for Ordenen og broder 2. storrepræsentant Bent P. Larsen for Dronningen og broder Peter Schøler talte for damerne.\nDen første tid som loge\nDer skete rigtig meget i den første tid efter institueringen. Mange af de idéer, vi havde arbejdet med, blev nu gennemført. Vi var godt i gang med i fællesskab at skabe vor egen loge.\nLige fra begyndelsen har der været arbejdet på at gøre nr. 119 Erik Glipping til brødrenes loge – til et fælles projekt. Det er et krav, at embedsmændene skal inddrage brødrene mest muligt i arbejdet. Derfor afholder vi hvert år en debataften. Her vurderer brødrene logens nutid og sætter pejlemærker for dens fremtid.\nI maj 2009 fremkom broder Brian Pedersen helt på eget initiativ med en oplysningspjece, der fortalte lidt om Ordenen og rigtig meget om nr. 119 Erik Glipping. I foråret 2014 var samme broder igen forfatter.\nDenne gang til en folder om det at være proponent.\nI efteråret 2009 opstod ønsket om at få eget logetæppe. Brødrene Jens Kornum, Ernst Hundrup og Bendix Riis tog opgaven på sig. Efter at have arbejdet med flere idéer, forelagde gruppen forslag til tæppe – brødrene vedtog forslaget, der senere blev godkendt af storembedsmændene. Tæppet er fremstillet hos Ege-Tæpper i Herning og broder Kurt Jensen stod for finansieringen. I vort møde den 1. september 2010 blev logetæppet ved en lille ceremoni indviet til brug i broderloge nr. 119 Erik Glipping.\nFor at sikre en vis kontinuitet i gradearbejdet ønskede embedsmændene at knytte en erfaren broder til gradestaben. Broder Bent P. Larsen indvilgede i at påtage sig opgaven som gradestabsformand.\nDer var også et stort ønske om at inddrage vore familier noget mere i logelivet.\nVi arrangerer således hvert år 3. juledag en juletræsfest med næsten 100 deltagere. De øvrige tre loge i Viborg er indbudt til at deltage.\nVi har foredrag et par gange om året og med broder Peter Schøler som initiativtager og tovholder mødes vi hvert år sammen med vore ledsagere til sensommerfest i Bakkehuset i Vranum.\nBålhygge i Vramun\nKong Erik Glipping underskrev jo en håndfæstning, hvori han måtte love at indkalde rigets stormænd til Danehof hvert år.\nDerfor afholder også vi Danehof hvert år. Her må broder overmester stå til regnskab for sin ledelse af logen. Danehoffets form, indhold, ”ritual” og rekvisitter er skabt af brødrene Ernst Hundrup og Bendix Riis.\nSiden efteråret 2010 har broder Overmester ved slutningen af tildelingen af indvielsesgraden givet en kort reces for at vi alle kan byde den nye broder velkommen.\nAllerede fra efteråret 2009 blev der arbejdet ihærdigt for at få en ven-skabsloge tilknyttet vor loge.\nBrødrene Jens-Ulrik Vesterdal, Ernst Hundrup og Bendix Riis tog kontakt til en loge i Gjøvik i Norge.\nDeres forslag blev forelagt i logen og vedtaget.\nOg i logemødet den 28. april 2010 deltog flere brødre fra broderloge nr. 99 Petrus Beyer i Gjøvik. I dette møde blev der ved en kort ceremoni underskrevet en aftale om blandt andet retningslinjer for gensidige besøg.\nBesøg af vor venskabsloge Petrus Beyer Norge i 2012\nBroder Jens Kornum tog hurtigt initiativet til at få fremstillet hæftet ”Ritualsange”. Det indeholder de sange, vi bruger i det rituelle arbejde.\nArbejdet med at udvikle vor loge fortsætter – flere nye idéer kommer frem – bliver bearbejdet og måske taget i brug.\nSenest forslaget om et humanitært udvalg fælles for alle fire loger i Viborg.\nLogens valgte embedsmænd og storrepræsentanter\nFor terminen 2011 – 2013 kom listen over valgte embedsmænd til at se sådan ud:\nOvermester Henrik Aaskov\nUndermester Mads Salling\nSekretær Torben Alstrup-Nielsen\nKasserer Jørgen Jensen\nSkatmester Bendix Riis/Peder Schøler\nFungerende eksmester Henning Hedeland\nI 2014 blev broder Ernst Hundrup og broder Bent P. Larsen genvalgt som logens Storrepræsentanter for terminen 2014-2018:\nLogens nuværende valgte embedsmænd, der er valgt for terminen\n2013 – 2015, er:\nOvermester Mads Salling\nUndermester Torben Alstrup-Nielsen\nSekretær Brian Pedersen\nKasserer Karl Otto Rybjerg\nSkatmester Peter Schøler\nFungerende eksmester Henrik Aaskov\nI 2014 valgte logen broder Bent P. Larsen og broder Henning Hedeland som storrepræsentanter for terminen 2014-2018


Gardena Robotplæneklippere Robotplæneklipper SILENO city, 350 m²\nStille, alsidig og intelligent designet - det er GARDENA-robotplæneklipperen SILENO city 350 m². SILENO city er ideel til mindre græsplæner, der leverer høj ydeevne og bekvem klipning. Ved hjælp af GARDENA Bluetooth®-appen tager du simpelthen din smartphone, indtaster plænestørrelse, ønskede klippedage og foretrukket starttid. Din robotplæneklipper laver en tidsplan og er klar til at gå igang uden stor ståhej. Du kan nemt styre din SILENO by via Bluetooth® fra op til 10 m væk. Din robotplæneklipper beregner den nødvendige klippetid, og GARDENA Bluetooth®-appens planlægningsassistent hjælper dig med at holde din have helt skarp. Takket være sin stille motor med en af de bedste støjniveauer på kun 57 db (A) bemærker du og dine naboer ikke engang, at din robot er i aktion. Den sofistikerede CorridorCut styrer robotklipperen, mens den skærer i smalle rum og tætte hjørner på kun 60 centimeter i bredden uden problemer. CorridorCut navigerer endda din robotklipper ud af vanskelige blindgyder. Vejledt af SensorControl bedømmer robotten selv, hvor ofte din græsplæne har brug for en trimning, idet den nøjagtigt finder den bedste frekvens i forhold til græsvæksten. Din kloge lille hjælper, hjælper med at klippe græsset så effektivt som muligt. SILENO-cityen er en frygtløs auto-vejr- og arbejdsom arbejdshest, og kører ud og klipper plænen alene, uanset vejr, regn eller solskin. Den smarte robotplæneklipper bemærker, om jorden er frossen eller for kølig, og robotten stopper sit program, indtil jorden er optøet. Afgrænsningskablet indikerer over for SILENO byen, hvilket område af haven der skal klippes. Tilsvarende styrer guidekabler robotplæneklipperen pålideligt og fuldautomatisk omkring alle klippeområder. Din plæneklipper har ingen problemer med at klemme gennem smalle rum og endelig komme hjem til ladestationen. Det klipper helt autonomt og giver dig mere tid til at fokusere på at gøre de ting, du elsker i haven. Selv skråninger eller hældninger på op til 35 procent er ikke noget problem. SILENO city kan let rengøres med en haveslange, det kan ikke være enklere. Plæneklipning bliver så let med SILENO city, bare læn dig tilbage, slap af og lad robotklipperen gøre det hårde arbejde for dig. Du vil undre dig over, hvordan du nogensinde klarede dig uden det! GARDENA Bluetooth® App guider dig intuitivt gennem den første installation. Din græsplæne vil altid se vidunderligt velplejet ud med SILENO: DEN intelligente robotplæneklipper. SILENO.\n350 m² ±20%\nDokumenter til Robotplæneklipper SILENO city, 350 m²


Deep Groove Ball Bearing Retainer Leverandører & Fabrikanter & Fabrik - Engros Deep Groove Ball Bearing Retainer På lager - Jianan Trading\nHjem > Produkt > Bearing Cage\nBæreholder (bæreholder, også kendt som bæreholder) henviser til lejedele, som delvis dækker hele eller en del af valsekroppen og bevæger sig med den for at isolere valsekroppen og som regel lede det rullende legeme og holde det i lejet.\nNår rullende lejer er i drift, især når belastningerne er komplekse og roterende ved høj hastighed, skal fastgørelsesrammen have en stor centrifugalkraft, slag og vibration. Der er en stor glidfriktion mellem fastgørelsesrammen og det rullende legeme, og der opstår en stor mængde varme. Resultatet af den kombinerede virkning af kraft og varme vil føre til fejl i buret, hvilket i alvorlige tilfælde vil forårsage forbrændinger og brud på buret. Derfor er det nødvendigt at opretholde god termisk ledningsevne, god slidstyrke, lav friktionskoefficient, lille densitet, vis styrke og sejhed, god elasticitet og stivhed af rammematerialerne. Ekspansionskoefficienten svarer til den for rullende krop. Og god forarbejdning ydeevne. Derudover udsættes buret for kemiske midler, såsom smøremidler, smøremiddeladditiver, organiske opløsningsmidler og kølemidler.\nHot Tags: dyb rille kuglelejer holder, leverandører, fabrikanter, fabrik, engros, køb, på lager\nBensin Knapsack Power Sprayer Landbrug Mist Duster\nHånddrevne motor sprøjter\n42,7cc benzin motor


Søren Gade: Jeg blev ikke tilbudt en ministerpost | Politik | DR\nVenstres Søren Gade afviser at være skuffet over, at Lars Løkke Rasmussen ikke tilbød ham en ministerpost.\nSøren Gade blev ikke en del af Lars Løkke Rasmussens ministerhold i denne gang.\nVenstres formand, Lars Løkke Rasmussen, ringede sent lørdag aften til Søren Gade.\nMen det var ikke for at tilbyde ham en ministerpost, oplyser han.\nI stedet spurgte Løkke, om Gade ville kandidere til posten som gruppeformand i Venstres folketingsgruppe.\nLæs også:Flere Venstre-profiler forbigået på ministerliste\n- Og så gør jeg jo selvfølgelig det, siger Søren Gade.\nSå du blev ikke tilbudt en ministerpost først?\n- Nej, han ringer til mig, og så snakker vi om det. Han har et ønske om, at jeg bliver gruppeformand. Det er i den rolle, han gerne vil bruge mig, og jeg er jo partisoldat, så det gør jeg selvfølgelig. Det er jeg meget ydmyg over for, og nu må vi se, om gruppen er enig i hans vurdering, siger Søren Gade.\n- Nej, for så kunne jeg have sagt nej til at være gruppeformand. Jeg har været minister i seks år, og der er ikke nogle, der går ind i politik uden at have drømmen om at være minister, men det var her, Lars gerne så mig, og så kandiderer jeg naturligvis til posten, siger Søren Gade.\nLøkke: Håber på Gade\nPosten som gruppeformand er blevet ledig, efter at Kristian Jensen (V) er blevet udnævnt som udenrigsminister. Senere i dag beslutter Venstres folketingsgruppe på et møde, om Søren Gade bliver hans efterfølger.\nLæs også:Søren Gade: Dansk Folkeparti fortjener ministerposter\nStatsminister Lars Løkke Rasmussen (V) sagde følgende om Søren Gade i går:\n- Jeg tror og håber, at Søren Gade kan blive ny gruppeformand, men det er noget, som Venstres gruppe skal afgøre, lød det.\nDet kom som lidt af en overraskelse, da Søren Gade annoncerede sit comeback til dansk landspolitik den 1. maj i år.\nDen forhenværende forsvarsminister havde nemlig flere gange tidligere slået fast, at han var færdig som politiker.\nMen den beslutning blev altså ændret.\nVed folketingsvalget fik Søren Gade et kanonvalg i Nordjyllands Storkreds, hvor han stillede op.\n28.916 personlige stemmer fik han. Det er en del højere end hans seneste valg i 2007, hvor han fik 23.993 personlige stemmer.


Hvem skulle have troet, at hver tredje foretrækker at læse, mens der er andre til stede i rummet? At mere end halvdelen læser flere bøger ad gangen? At en halv procent læser mere, end de har lyst til? Og ikke mindst, at hver tredje drømmer om at skrive en bog? Dette og meget, meget mere er visualiseret i det materiale, Saxo offentliggør i dag.\nIndholdet i rapporten stammer fra Saxos store læserundersøgelse og fra al den data, som internetboghandlen indsamler om deres kunders købsadfærd. Læserundersøgelsen er en omfattende spørgeskemaundersøgelse, Saxo årligt sender ud til omkring 250.000 kunder. Saxos enorme kundebase udgør en broget blanding af læsere og dermed en mulighed for at få et unikt indblik i konsumeringen af litteratur blandt Danmarks læsere.\n"I Saxo bruger vi data i næsten alt, hvad vi laver. Vi interesserer os for kunder og deres præferencer, så vi hele tiden kan blive bedre til at møde dem præcis der, hvor de får mest værdi ud af det," udtaler Jørgen Balle Olesen, stifter af Saxo.\nHent rapporten på BogForum\nSådan læser danskerne: En visualisering af danskernes læsevaner offentliggøres i dag i forbindelse med BogForums åbning. En del af Saxos stand på messen består af et galleri med store visualiseringer af netop denne omfattende viden om danskernes læsevaner. Her kan publikum gå på opdagelse i de mange tal og endda tage et fysisk eksemplar af rapporten med hjem.\nResten af standen er dedikeret udgiverplatformen Saxo Publish. "Vi oplever en stigende interesse for skrivning og udgivelse, så det kommer ikke bag på os, at hver tredje drømmer om at skrive en bog. Grunden til, at de endnu ikke har skrevet bogen, de drømmer om, er simpelthen, at de ikke ved, hvordan de skal gøre. Og det er netop det, vi kan hjælpe med i Saxo Publish," udtaler Saxo Publish Manager, Mette Jørgensen.\nSaxo er af samme årsag partner på BogForums nye, store initiativ: Skriv Selv-området, hvor Saxo Publish står klar til at hjælpe de mange skrivelystne. Derudover har områdets officielle scene, Saxo-scenen, mere end 40 indlæg weekenden over om alt om udgivelse lige fra idé, skabelse og publicering til markedsføring og salg. Diverse større og mindre forfattere og eksperter fra den skabende del af bogmarkedet deler ud af deres erfaringer og anekdoter om skriveprocesser - og giver dermed tips videre til de mange forfatterspirer.\nLæs mere om Saxos aktiviteter på BogForum\nSådan læser danskerne: En visualisering af danskernes læsevaner


PERSONDATAFORORDNINGEN – Kan Færøerne danse rundt om den? – NOTION\nPERSONDATAFORORDNINGEN – Kan Færøerne danse…\nTÌÐINDI I Njord Law Firm\nOm kort tid træder den nye persondataforordning i kraft, hvis formål er at beskytte individers personlige oplysninger – såkaldt persondata – og forordningen vil derfor komme til at påvirke det daglige arbejde for blandt andre HR-medarbejdere og personale-, kunde- og IT-ansvarlige.\nNogen har sammenlignet forordningen med ulven, der kommer – og dét med god grund. Reglerne er mange, og konsekvenserne er store, hvis organisationer, virksomheder og nu også offentlige myndigheder ikke overholder dem. Selvom forordningen kun træder i kraft i EU-landene, kan øvrige lande desværre ikke danse let rundt om den.\nHos det nordiske advokatfirma, NJORD Law Firm, rådgiver de virksomheder og offentlige myndigheder med at tilpasse behandlingen af personlige oplysninger til de kommende krav. Julie Klingsholm Borg er advokatfuldmægtig med speciale inden for arbejds- og ansættelsesret, og hun er særligt skarp i krydsfeltet mellem persondataret og HR. Hun giver her et indblik i den kommende persondataforordning og peger på, hvad vi på Færøerne særligt skal være opmærksomme på.\nHandler du med personer fra EU-lande? Så gælder forordningen også for dig\nDen 25. maj 2018 træder persondataforordningen i kraft i alle EU-lande. Herefter er alle organisationer, virksomheder og myndigheder, der opbevarer persondata, forpligtet til at efterleve de nye regler.\nDet vil dog ikke kun være virksomheder beliggende i EU-medlemslandene, som er forpligtet til at efterleve de nye regler i persondataforordningen, fortæller Julie Klingsholm Borg:\n”Også virksomheder, som ikke er beliggende i EU, men som retter deres ydelser eller produkter mod individer, som er bosat i EU, vil blive forpligtet af forordningen – og forordningen vil derfor også gælde for færøske virksomheder, som sælger ydelser eller produkter til f.eks. Danmark.”\nForordningens regler gælder desuden for alle myndigheder og virksomheder, der indsamler, registrerer og behandler personoplysninger på individer bosiddende i et EU-land – eksempelvis Danmark. Reglerne gælder for alle personoplysninger, uanset opbevaringsmetoden, og både digitale data opbevaret i IT-systemer og data opbevaret på fysiske opbevaringssteder er således omfattet af de nye regler.\n”Hvis en færøsk virksomhed opbevarer oplysninger om en kunde eller medarbejder bosiddende i f.eks. Danmark, vil dette individs personlige oplysninger være underlagt persondataforordningens krav”, forklarer Julie Klingsholm Borg.\nForordningen synes derfor ikke umiddelbart til at komme udenom for de fleste færøske virksomheder og myndigheder. Men hvilken betydning får forordningen for de virksomheder, den rammer?\nHvilken betydning får forordningen?\nPersondataforordningen vil medføre markante ændringer for håndteringen af personoplysninger, siger Julie Klingsholm Borg:\n”Den kan få stor økonomisk betydning, hvis ikke man overholder den. Overtræder man reglerne, kan det give bøder på op til 4 % af virksomhedens årlige globale omsætning.”\nJustitsministeriets betænkning om forordningen er alene på over 1200 sider. Opgaven kan derfor synes uoverskuelig. Julie Klingsholm Borg peger dog på otte centrale krav, som også virksomheder i ikke-EU-lande, der opbevarer personlige oplysninger om EU-borgere, skal være særligt opmærksomme på at kunne efterleve fra maj 2018:\nAnsvarlighed: Enhver dataansvarlig skal kunne redegøre for, hvordan reglerne overholdes. Det stiller høje krav til interne procedurer og ansvarsfordeling.\nDatabeskyttelsesrådgiver (DPO): Offentlige myndigheder og virksomheder, der behandler persondata som en del af deres kerneaktivitet eller i stort omfang, skal have en DPO. Det kommer f.eks. til at gælde alle offentlige myndigheder.\nDataportabilitet: Enhver dataansvarlig skal kunne udlevere personoplysninger til de registrerede individer på et læseligt og almindeligt anerkendt medie.\nRetten til at få oplysninger slettet: Alle har som udgangspunkt ret til at få deres data slettet. Dette har særligt relevans ved ophør af et ansættelsesforhold, hvor en fratrådt medarbejders personoplysninger skal slettes efter medarbejderens fratræden, medmindre der er et relevant og sagligt formål med fortsat opbevaring af oplysningerne. Særligt for en fratrådt medarbejders e-mailkonto gælder eksempelvis, at denne maksimalt må holdes aktiv 12 måneder efter ansættelsens ophør.\nGennemsigtighed: Der skal informeres på en korrekt og letforståelig måde. Særligt ved indhentelse af et samtykke til behandling af persondata er der tale om en skærpelse af gældende regler.\nMinimumsbehandling: Der må kun behandles data, hvis det er strengt nødvendigt. Privatlivsbeskyttelse skal sikres gennem IT-løsningers design eller standardindstillinger.\nDelt ansvar: Databehandlere er underlagt samme krav som dataansvarlige – også selvom parterne har indgået en databehandleraftale. En dataansvarlig er som udgangspunkt den virksomhed, der ligger inde med personoplysningerne. En databehandler er en tredjepart, som får adgang til den dataansvarliges persondata, fordi databehandleren skal udføre en opgave på vegne af den dataansvarlige.\nNotifikation: Der er pligt til at give relevante myndigheder besked inden for 72 timer, hvis der sker et sikkerhedsbrud. I Danmark er det Datatilsynet, man skal kontakte.\nTre gode råd: Sådan bliver du klar til maj 2018\nHvis man som virksomhed, organisation eller myndighed ikke er gået i gang med forberedelserne til at kunne overholde forordningens regler, når de træder i kraft i maj 2018, skal man gå i gang straks. Ifølge Julie Klingsholm Borg er det en proces, det tager 3-4 måneder at gennemføre:\n”Processen skal gennemføres trin for trin, hvor resultatet af den indledende Data Flow Analyse afgør, hvordan den efterfølgende proces skal tilrettelægges. Så virksomhederne kan godt nå det, hvis de går i gang umiddelbart efter nytår.”\nJulie Klingsholm Borg har sammenfattet sine erfaringer i tre gode råd til, hvordan også din virksomhed bliver klar til at overholde persondataforordningens regler, når de træder i kraft den 25. maj 2018:\nSørg for at starte arbejdet nu: Det betaler sig at starte arbejdet hurtigt, for I undgår bøder, hvis I er i overensstemmelse med forordningens regler på tidspunktet for dens ikrafttræden.\nInddrag den øverste ledelse i processen fra starten: Det er en proces, der vil tage tid og koste penge. Det anbefales, at ledelsen vurderer, om virksomheden selv har ressourcerne til at håndtere forordningens regler, eller om der er brug for juridisk bistand.\nSkab overblik over jeres dataflow: Udarbejd en Data Flow Analyse, hvor I vurderer, i hvilket omfang og på hvilke områder jeres behandling af personoplysninger er i overensstemmelse med eller i strid med persondataforordningens regler.\nFAKTABOKS: NJORD Law Firm\nJulie Klingsholm Borg er advokatfuldmægtig i NJORD Law Firm med speciale i individuel og kollektiv ansættelsesret, og hun er særligt skarp i krydsfeltet mellem persondataret og HR.\nJulie rådgiver særligt inden for reglerne om persondata samt individuelle ansættelsesforhold, herunder diskriminationsforbud, usaglig afskedigelse, udarbejdelse af ansættelsesaftaler og de forskellige ansættelsesformer, centrale løn- og arbejdsvilkår samt ændringer i og ophør af ansættelsesforhold.\nI NJORD er de et team af HR-jurister, der dagligt rådgiver HR-ansvarlige over hele landet. På baggrund af mere end 15 års erfaring fra alle sider af HR- og ansættelsesretten har de udviklet HR eBogen som et essentielt HR-værktøj til store og små virksomheder. Læs mere om HR eBogen her\nHar du spørgsmål til persondataforordningen eller HR eBogen, kan du kontakte Julie Klingsholm Borg på jkl@njordlaw.com/(+45) 77 40 10 35.\nDirect: +45 77 40 10 35\nDirect: +45 77 40 11 66\nFyrraPrevious post:Kjakgluggin – Vælkomin innNæstaNext post:Arbeiðsgleði – Stjørnustundir á arbeiðsplássinum