Particles without a Box: Brush-first Synthesis of Photodegradable PEG Star Polymers under Ambient Conditions | Protocol (Translated to Danish)\nGeneration og indvinding af β-celle Sfæroider Fra ep-vækst PEG-peptid hydrogeler…\nEn enkel og effektiv protokol til katalytisk Indsættelse polymerisation af funktionelle norbornener…\nNanosponge Tunability i størrelse og Crosslinking æthed…\nPoly (ethylenglycol) (PEG) børste-arm stjerne polymerer (BASPs) med smalle massedistributioner og afstemmelige nanoskopiske størrelser er syntetiseret via ringåbnende metathesis polymerisation (ROMP) af et PEG-norbornen makromonomer efterfulgt af overførsel af portioner af den resulterende levende pensel initiativtager til hætteglas indeholdende forskellige mængder af et stift, foto spaltbar bis-norbornen-tværbinder.\nPraktiske metoder til hurtig, parallel syntese af forskelligt funktionaliserede nanopartikler vil muliggøre opdagelsen af nye formuleringer til drug delivery, biologisk billeddannelse, og støttede katalyse. I denne rapport, viser vi, parallel syntese af børste-arm stjerne polymer (BASP) nanopartikler af "brush-first"-metoden. I denne metode, er en norbomen-termineret poly (ethylenglycol) (PEG) makromonomer (PEG-MM) først polymeriseret via ring-åbning metatese polymerisation (ROMP) til at generere en levende pensel makroinitiator. Portioner af denne initiator stamopløsning tilsættes til hætteglas, der indeholder forskellige mængder af et lysnedbrydelig bis-norbornen tværbinder. Udsættelse for Tværbinderen indleder en serie af kinetisk styret børste + børste og stjerne +-stjernede koblingsreaktioner der i sidste ende giver BASPs med kerner består af tværbindingsmidlet og coronas bestående af PEG. Den endelige BASP størrelse afhænger af mængden af tværbinder tilføjet. Vi udføre synafhandling af tre BASPs på bordplade med ingen særlige forholdsregler for at fjerne luft og fugt. Prøverne er karakteriseret ved gelpermeationskromatografi (GPC), resultater aftalt tæt sammen med vores tidligere rapport, der udnyttede inerte (handskerummet) betingelser. Væsentlige praktiske egenskaber, fordele og potentielle ulemper ved pensel første metode diskuteres.\nPolymere nanopartikler er blevet nøje undersøgt for deres potentielle anvendelse som platforme for drug delivery, understøttet katalyse, biologisk billedbehandling og saml-selv 1-3. Moderne programmer kræver, at nanopartikler synteser være facile, reproducerbare, er forenelig med kemiske funktionaliteter, og gøres til genstand for diversificering 4,5. Ringåbnende metathesis polymerisation (ROMP) anstrengt olefiner er en kraftfuld metode til syntese af funktionelle polymere nanostrukturer med kontrollerede størrelser og smalle massedistributioner 1,6-8. For eksempel kan norbornen-funktionaliserede poly (ethylenglycol) (PEG) makromonomerer (MMS) effektivt polymeriseret via ROMP at generere vandopløselige flaske-børste polymerer. Med denne fremgangsmåde kan nanostrukturer, der bærer flere løsbare medikamentmolekyler, fluoroforer og spin-kontrastmidler forberedes hurtigt og parallelt 6, 9, 10.\nROMP er også blevet anvendt til "arm først" syntese af stjerne polymerer. I armen-første metode, lineære polymerer tværbundet med en multi-funktionel tværbinder at give sfæriske nanostrukturer med polymere arme. Schrock og medarbejdere rapporterede den første arm-first ROMP syntese af stjerne polymerer via krydsbinding af norbornen, dicarbomethoxynorbornadiene og trimethylsilylhalogenider beskyttet dicarboxynorbornene lineære polymerer med et bifunktionelt norbomen tværbinder. 11, har 12 Buchmeiser udvidet denne metode til syntese af materialer med en vifte af applikationer, der omfatter understøttet katalyse, vævs-engineering, og kromatografi 13-17. Otani og medarbejdere har gjort stjerne polymer nanopartikler med funktionelle overflader via en beslægtet "ind-ud" polymerisering strategi 18, 19.\nDe fleste arm-først polymerisationer indebærer et komplekst samspil af monomere, polymer, og stjerne koblingsreaktioner. The sidstnævnte forløber via en trin-vækst mekanisme, der typisk fører til bred molekylvægt (MW) distributioner. For at overvinde denne begrænsning i relaterede arm-første atom transfer radikal polymerisationsreaktioner, Matyjaszewski og kolleger udførte arm-første krydsbinding af præfabrikerede polymere MMS til at give stjerne polymerer med meget smalle MW distributioner 20. I dette tilfælde, den steriske hovedparten af MMS, og den øgede andel af stjerne våben til indvielse sites, hæmmet dårligt kontrolleret stjerne + stjerne koblingsprocesser, og førte til en levende, kæde vækst mekanisme.\nDa vi forsøgte den samme strategi i forbindelse med ROMP med en norbomen-termineret PEG-MM og en bis-norbomen crosslinker blev stjerne polymerer med meget brede, multimodale MW distributioner opnået. Dette resultat antydede, at MM alene i dette system ikke var tilstrækkeligt omfangsrigt til at hæmme stjerne + stjerne kobling. For at øge den steriske hovedparten af de stjerne arme og potentielt begrænse denne uncontrolled kobling, vi forsøgte at først polymerisere MM til at danne flaske børste polymerer i fravær af tværbinder og derefter tilføje krydsbinderen. Vi var glad for at finde, at der under visse betingelser, denne "brush-først"-metoden, forudsat ligetil adgang til "brush-arm stjerne polymerer" (BASPs) med smalle MW fordelinger og tunable kerne og Corona funktionaliteter.\nVi har for nylig rapporteret brush-første ROMP syntese af PEG BASPs hjælp Grubbs 3. generation katalysator A (figur 1) 21. I dette arbejde, eksponering af PEG-MM B til katalysator A genererede et levende pensel makroinitiator med defineret rygrad længde (B1, figur 1). Overførsel af portioner af B 1 til hætteglas, der indeholdt forskellige mængder af tværbinder C indledt BASPformation. MW, og dermed størrelsen af de BASPs steg geometrisk med mængden af C tilsat. Vi gav en mekanistisk hypotese for denne geometriske vækst proces og viste, at funktionelle, nitroxid core-og Corona-mærket BASPs let kan fremstilles uden behov for post-polymerisationsprodukter modifikation trin eller sekventiel monomer tilføjelser. Men i alle de rapporterede eksempler, var vi bekymrede katalysatordeaktivering, vi udført alle reaktioner under N2 atmosfære inde i en handskerummet.\nSiden vores første rapport, har vi fundet, at børsten-første metode er meget effektiv for dannelsen af BASPs fra en bred vifte af norbornentype opsagt MMS og funktionelle tværbindingsmidler. Vi har også opdaget, at metoden kan udføres i laboratoriet med ingen særlige forholdsregler for at fjerne luft eller fugt.\nHeri vil en serie af tre BASPs af forskellig MWs skal SYnthesized af brush-første metode under omgivende forhold. Kort sagt, vil 10 ækvivalenter af B udsættes til 1,0 ækvivalenter katalysator A (figur 1a) i 15 minutter til opnåelse af en BI med en gennemsnitlig polymerisationsgrad (DP) på 10. Tre portioner af dette parti BI vil blive overført til separate hætteglas, der indeholder 10, 15 og 20 ækvivalenter (N, figur 1b) C. Efter 4 timer, vil polymerisationerne blive undertrykt via tilsætning af ethylvinylether. De stjerne polymer MWs og MW distributioner vil blive præget ved hjælp af en gelpermeeringschromatografi instrument udstyret med en multi-vinkel laserlysspredning detektor (GPC-malls).\nVi først beskriver syntesen og oprensningen af PEG-MM B fra 3 kDa O-(2-aminoethyl) polyethylenglycol (PEG-NH2) og norbornen-N-hydroxysuccinimidyl (NHS)-ester. Den førstnævnte forbindelse kan købes fra Sigma Aldrich Inc. eller fremstillet via anioniske polymerisation ifølge litteraturprocedurer 22,23. Den sidstnævnte forbindelse kan fremstilles i to trin i henhold til en offentliggjort procedure 21. Næste vi beskriver en syntese af katalysator A fra kommercielt tilgængelige Grubbs 2. generations katalysator. Vi derefter demonstrere brugen af dette kompleks for brush-første BASP syntese. Dette eksperiment detaljer proceduren for BASPs med N = 10, 15 og 20 fra en BI med DP = 10. Alle reaktioner blev udført i et stinkskab under anvendelse af standard scintillationshætteglas.\nADVARSEL: Brug altid handsker, en lab-coat og labbriller, og følge fælles laboratorium sikkerhedspraksis, når der arbejdes med farlige kemikalier. Enhver organisk opløsningsmiddel skal håndteres i et stinkskab. Faste stoffer kan vejes på en balance udenfor stinkskabet. Kemiske stoffer bør ikke komme i kontakt med hud, øjne eller mund. Det anbefales kraftigt at læse MSDS for hvert opløsningsmiddel og solid brugt i denne procedure, før du begynder.\n1.. Fremstilling af PEG-MM B\nTilføj PEG-NH2 (300 mg, 0,0001 mol, 1,0 ækv) til en 40 ml scintillationshætteglas udstyret med en omrører.\nOpløs PEG-NH2 i 3 ml vandfrit N, N-dimethylformamid (DMF).\nTilføj 36 mg norbornen-NHS-ester (0,000105 mol, 1,05 ækvivalenter) 21.\nLuk hætteglasset og reaktionsblandingen omrøres natten over ved stuetemperatur.\nFjern omrørerstav og diethylether tilsættes til reaktionsopløsningen for at præcipitere PEG-MM B.\nForetage den hvide influenzaFFY bundfald og vask grundigt med diethylether. Alternativt overføre suspensionen til en 50 m centrifugeglas, centrifugeres ved 4.000 rpm i 5 minutter ved stuetemperatur og derefter dekanteres supernatanten. Tilføj frisk diethylether, centrifuge, og dekantere igen. Vi anbefaler, at gentage denne fremgangsmåde 3x i alt 5x.\nBundfaldet tørres under vakuum i 24 timer for at fjerne tilbageværende diethylether.\n2. Oprensning af PEG-MM\nI vores tidligere rapport, blev PEG-MM B fremstilles ud fra kommercielt tilgængelige PEG-NH2 og blev brugt til BASP syntese uden yderligere rensning efter tørring (dvs. efter trin 1.7). I denne undersøgelse variere vi PEG-NH2 kilde (kommercielt versus hjemmelavet), og vi sammenligne BASP dannelse resultaterne før og efter strengere præparativ højtydende væskekromatografi (prep-HPLC) MM oprensning. I resten af dette studie, drIED MM opnået efter trin 1.7 omtales som B1. Prep-HPLC blev anvendt til oprensning af B1 for at give B2. En analog prep-HPLC oprensede MM syntetiseret i vores laboratorium via anionisk polymerisation benævnt B3. Prep-HPLC blev udført ved anvendelse af et Beckmann Coulter HPLC (127p opløsningsmiddel modul og 166p detektor modul) med en 1 ml prøve loop og en Agilent Zorbax 300SB-C18 PrepHT omvendt fase-søjle ved stuetemperatur.\nSet-up HPLC med opløsningsmiddel A: deioniseret vand (Millipore rensningssystem, 18,2 Ω) med 1% eddikesyre; opløsningsmiddel B: acetonitril.\nPrime pumper og ligevægt kolonne med 95% A og 5% B.\nOpløs PEG-MM acetonitril eller MeOH (150 mg / ml).\nDer filtreres gennem et 13 mm 0,45 pm Nylon sprøjte filter.\n- Flow rate: 20 ml / min\n- 0-1 min: lineær gradient til 10% B og 90% A\n- 1-10 min: linear gradient til 90% B og 10% A\n- 10-13 min: skift til oprindelige betingelser (5% B og 95%) og re-ligevægt kolonne\n- Indstil UV-detektor til at detektere absorbans ved 256 nm\nLoad 0,8 ml prøve på prøvesløjfe.\nSaml den største absorbanstop (under de betingelser, produktet elueres mellem 5-7 min).\nGentag om nødvendigt. Kombiner rene fraktioner sammen i en rundbundet kolbe.\nFjern alt opløsningsmiddel via rotationsfordampning.\nGenopløses produktet i dichlormethan, og der tilsættes natriumsulfat. Forsigtigt ryste eller røre kolben jævnligt for ≅ 1 time.\nBlandingen filtreres ved hjælp af et frittet glasfilter.\nKoncentrer via rotationsfordampning. Tør under vakuum natten over.\nPEG-MM kan karakteriseres ved 1H-NMR i CD 2 Cl 2 (15-20 mg/0.7 ml CD 2 Cl 2, 500 MHz eller højere anbefales med over 128 scanninger og afslapning forsinkelse, d1= 2,0 sek) og MALDI-TOF hjælp positiv ioniseringsmode og 2 - (4-hydroxyphenylazo) benzoesyre som MALDI matrix.\nPEG-MM kan opbevares i måneder i et scintillationshætteglas ved 4 ° C.\n3. Fremstilling af katalysator A\nTilføj Grubbs 2. generations-katalysator (500 mg, 0,589 mmol) til en 20 ml hætteglas udstyret med en omrører.\nTilføj pyridin (ca. 0,474 ml, 5,89 mmol, 10 ækv) til hætteglasset. Løsningen farve bør straks skifte fra rødt til grønt. Lad reaktionen til at røre, indtil alle den røde farve er forsvundet, og opløsningen er blevet tyktflydende (15-30 min.)\nFyld reaktionshætteglasset med koldt pentan til fældning kompleks A.\nFiltreres suspensionen til at indsamle den grønne bundfald (katalysator A). Vask 4x med 15 ml kold pentan.\nTør grønt fast stof under vakuum natten over.\nKompleks A kan væreopbevares i måneder ved stuetemperatur i en benchtop ekssikkator uden væsentlig tab af aktivitet. For ekstra sikkerhedsforanstaltning, gemmer vi typisk komplekse i en -20 ° C fryser inde i en handskerummet. For nemheds skyld, vi pre-veje kendte mængder af A i 4 ml scintillationshætteglas umiddelbart efter tørring (trin 3.5). Vi derefter gemme disse hætteglas i handskerummet fryseren. Når du er klar til at køre en ROMP reaktion, vi bare tage et hætteglas ud af handskerummet og brug som beskrevet nedenfor (trin 4.4).\n4.. Udarbejdelse af stamopløsningen af Living Brush Polymer (BI) med DP = 10\nI et 3 ml hætteglas med en gastæt skruelåg forsynet med en omrører, afvejes 65 mg (0,020 mmol, 10 EQ) MM B. Denne mængde svarer til 20 mg MM for hver af de 3 forskellige størrelser af BASPs, og 5 mg tilovers til GPC-analyse af BI. Anvend en spatel til at tilføje MM direkte til bunden af hætteglasset. Try til at forhindre materiale i at klæbe til siderne af hætteglasset, da dette scenario kunne føre til MM kontaminering i den endelige BASP produkt.\nOpløs MM B i 158 pi THF. Umiddelbart cap hætteglasset efter tilsætning THF for at undgå fordampning af opløsningsmiddel. Bemærk: Den endelige koncentration af MM under polymerisationen bør være 0,05 M. Hvis der tilføjes 158 pi THF her, og 243 pi katalysator løsning, trin 4.4, vil blive tilføjet for at give 401 pi THF alt, hvilket svarer til [MM ] = 0,05 M. Mængden af opløsningsmiddel i dette trin kan varieres, så længe mængden af opløsningsmiddel i trin 4.4 også varieres til at give [MM] 0,05. Vi har fundet, at polymerisationer udføres med [MM] <0,05 nogle gange ikke gå videre til at fuldføre konverteringen.\nLad opløsningen omrøres, indtil alle de MM er opløst. Opvarmes let, hvis nødvendigt. Undgå sprøjt den tyktflydende løsning på siderne eller hætten af hætteglasset.\nDernæst tilsættes en kendt mængde (2,8mg for dette eksempel) af katalysator A til et 3 ml hætteglas (eller få et hætteglas med forvejet katalysator A). Der tilsættes vandfrit THF (466 pi i dette eksempel) for at give en 6 mg / ml katalysatoropløsning. Luk hætteglasset straks. Lad katalysator for at opløse. Ryst hætteglasset, hvis behov skulle Denne katalysator løsning umiddelbart bruges til at tumle. Note 1: Den katalysator Opløsningen skal være en skov grøn farve. Hvis det er sort eller grønlig-brun, så er det sandsynligvis har nedbrudt, og det vil formentlig ikke give tilfredsstillende boltre sig resultater. Hvis nedbrydning sker, foreslår vi forbereder frisk katalysator (i henhold til punkt 3 ovenfor), eller ved hjælp af frisk destilleret THF. Note 2: Den mængde THF til A er valgt for at sikre, at den endelige [MM] er ~ 0,05. Dette beløb kan justeres, så længe kompensationsjusteringer er lavet til MM løsningen i trin 4.2.\nTilføj 243 pi (1,46 mg, 1 ækv til B BI urenhed i den endelige BASP.\nLuk hætteglasset straks og lade reaktionsblandingen omrøres i 15 minutter til dannelse af børsten makroaktivator (BI).\n5.. Dannelse af BASPs\nTilføj 3,6 ± 0,1 mg (6,18 pmol, 10 EQ til mængden af BI skal overføres i trin 5.2), 5,5 ± 0,1 mg (9.28μmol, 15 EQ til mængden af BI skal overføres i trin 5.2) og 7,3 ± 0,1 mg (12.4μmol, 20 EQ mængden af BI skal overføres i trin 5.2) tværbinder C til tre separate 3 ml hætteglas er udstyret med stir barer. Forsøge at afveje tværbinderen direkte på bunden af hætteglasset for at forhindre materialet i at klæbe til siderne af hætteglasset. Bemærk: Crosslinker C ikke er meget opløseligt i THF. Af denne grund er det faste stof, som anvendes direkte i dette trin. I tilfælde, hvor tværbinderen er opløselig, og derefter en koncentreret stamopløsning tværbinder kan gøres, og forskellige mængder af denne opløsning kan overføres til hætteglas. Igen bør koncentrationen af de endelige polymerisationer være> 0,05 M, hvis der er tilsat opløsningsmiddel til tværbinderen derefter en kompenserende reduktion af opløsningsmiddel bør andetsteds.\nTilføj 123 pi (0,618 pmol) af BI-opløsning til hver af de tre hætteglas indeholdende C. Prøv at holde nålespidsen lige over den faste crosslinker når de føjes til hætteglasset. Tilføj BI-løsningen på en gang i stedet dråbevis.\nCap hætteglassene og rør reaktionerne på RT for indtilafslutning. Med denne specifikke MM og tværbinder kombination reaktionen er færdig i ~ 4 timer, fortsatte omrøring i op til 24 timer ikke har nogen mærkbar effekt på BASP vækst. Monitor ved GPC for at sikre fuldstændig omdannelse af BI.\nQuench reaktionerne ved at tilsætte en dråbe ethylvinylether til den resterende BI-løsning og hver af de N = 10, 15 og 20 BASP reaktionsblandinger. Der omrøres i 10 minutter for at sikre fuldstændig hærdning.\n6.. GPC Prøveforberedelse\nGPC-indkøbscentre resultater blev opnået på en Agilent 1260 LC, der er udstyret med en Shodex GPC KD-806 kolonne, en Wyatt Dawn Heleos II-MALLS detektor og en Wyatt Optilab T-REX brydningsindeksdetektor ved stuetemperatur. DMF med 0,025 M LiBr ved en strømningshastighed på 1,0 ml / min blev anvendt som eluent. Resultaterne blev analyseret ved hjælp af Astra 6 software leveret af Wyatt.\nVed hjælp af en ny glas pipette til hver reaktion hætteglasDyppes pipettespidsen i reaktionsopløsningen at udarbejde et lille udsnit af reaktionen. Vask ned på indersiden af pipetten med 250 pi 0,025 M LiBr i DMF til opnåelse af en slutkoncentration på omkring 3 mg / ml.\nForetage den fortyndede prøve gennem et 0,45 um polytetrafluorethylen filteret, før afsætning af prøven i en GPC hætteglas.\nOpsætning GPC-malls kører og analysere resultaterne, når de kører er afsluttet.\nA: Grubbs 3. generation bis-pyridine katalysator\nB: poly (ethylenglycol) (PEG) makromonomer (MM)\nB1: PEG MM fremstillet ved anvendelse af kommercielt tilgængelige (Aldrich) PEG-NH2 og anvendes uden HPLC-oprensning.\nB2: PEG MM fremstillet ved anvendelse af kommercielt tilgængelige (Aldrich) PEG-NH\nB3: PEG MM fremstilles ved anvendelse af nyligt syntetiserede PEG-NH2 og anvendes efter HPLC-oprensning.\nBASP: brush-arm stjerne polymer\nBI: stue børste initiativtager\nC: lysnedbrydelig tværbinder\nD: molarmasse dispersitet index\nDMF: N, N-dimethylformamid\nDP: Antallet gennemsnitlig grad polymerisering\nPrep-HPLC: præparativ højtydende væskekromatografi\nMALLS: multi-vinkel laserlysspredning\nMw: vægtgennemsnitlig moLAR masse\nN: antal tværbinder ækvivalenter (forholdet mellem C til A)\nPEG-MM: norbomen-PEG makromonomer (også henvist til som forbindelse B)\nROMP: ring-åbning metathesis polymerisation\nFigur 2 viser GPC spor for en række BASPs fremstillet fra B1, B2 og B3. I alle tilfælde skal de data illustrerer, at stigende ækvivalenterne af tværbinder (N) fører til en stigning i størrelsen af BASP. Som det blev observeret i vores tidligere rapport, 10 ækvivalenter tværbinder ikke er tilstrækkelig til at opnå ensartede BASPs, N = 10 prøve viser et tydeligt multimodal GPC spor med en stor mængde af resterende pensel polymer især i tilfælde af urenset MM B1 ( figur 2a). Større mængder af tværbinder resultere i ensartede MW distributioner med meget lidt resterende pensel og MM. Vægten gennemsnit molarmasse (Mw) omtrent fordobles i går fra N = 15 - 20. I tilfælde af B3, nogen resterende MM og mindre end 1% resterende BI fortsat for N = 15 og N = 20 sager.\nFig. 1. Skematisk for Brush-Arm stjerne Polymer (BASP) Syntese. Panel (a) viser syntesen af Grubbs '3. generation bispyridin katalysator (A) ud fra kommercielt tilgængeligt Grubbs' 2. generation katalysator. Også vist er strukturerne i PEG-MM (B) og tværbinder (C), der anvendes i dette arbejde. Panel (b) viser et skematisk diagram af brush-første proces. Polymerisation af PEG-MM (B) med katalysator (A) genererer en 10-unit levende børste initiator (BI), der tilsættes derefter til tværbindingsmiddel (C), hvilket resulterer i dannelsen af en BASP. ig1highres.jpg "target =" _blank "> Klik her for at se større billede.\nFigur 2. Repræsentant GPC resultater af N = 10, 15 og 20 BASPs fremstillet ud fra forskellige PEG MMS. Panels (a), (b) og (c) viser data til MMS B1, B2 og B3, hhv. Urenheder fra kommerciel PEG-NH2, uomsat MM, og resterende BI er mærket med en asterisk. Mw og dispersitet indeks (D)-værdier findes i det indsatte tabeller. Bemærk, at d-værdier opnået ved GPC for højforgrenede nanostrukturer skal overvejes nøje 24,25. Observationen af monomodale, ensartede toppe foreslår en snæver fordeling af partikel radier.tp_upload/50874/50874fig2highres.jpg "target =" _blank "> Klik her for at se større billede.\nDen vigtigste fordel ved brush-første BASP syntese er den unikke evne til hurtigt at syntetisere nanostrukturer med forskellig størrelse og sammensætning parallelt uden behov for specialiseret udstyr. I denne undersøgelse viser vi pensel første syntetiske fremgangsmåde under anvendelse af en norbomen funktionaliseret PEG makromonomer (B, figur 1) og en bis-norbornen nitrobenzylester tværbinder (C, figur 1). PEG-kæderne fra B bibringer vandopløselighed til den endelige BASP struktur. Den nitrobenzyl-baserede tværbindingsmiddel er lysnedbrydelig.\nDenne generelle fremgangsmåde kan modificeres til andre exo-norbomen baserede MMS og krydsbindere. Vi har udarbejdet BASPs fra flere kombinationer af begge. For eksempel har vi brugt norbornen-PEG-baserede MMS, der udfører forskellige anti-cancer medicin, nitroxider og magnetisk resonans imaging kontrastmidler 27. Vi har også brugt MMS består af andre end PEG polymerer. Det er vores erfaring, kan børsten-første metode anvendes på næsten enhver funktionel exo-norbornen imid opsagt MM. I tilfælde, hvor høje konverteringer af MM til BI (> 95%) ikke opnås, en MM urenhed er den mest sandsynlige årsag (i modsætning til katalytisk aktivitet). Mere stringent rensning som skitseret i denne rapport (prep-HPLC) fører typisk til en vellykket ROMP. Bemærk, at vi ikke har forsøgt Romp polymerisationer med MMS, der bærer ubeskyttede funktionelle grupper, som er kendt for at interferere med katalysator A (f.eks frie aminer, olefiner, azider, osv.). Disse grupper kan indføres efter brush-første syntese via post-polymerisation modifikation 27. For eksempel har vi udarbejdet azid-BASPs fra alkylhalid MMS, der blev konverteret til azider efter BASP dannelse. Disse azider blev anvendt til Cu-katalyseret azid-alkyn cycloaddition "klik &# 34; reaktioner.\nVi forsøgte at undersøge virkningen af MM renhed i flere detaljer. Små mængder af resterende MM-og BI blev altid observeret i GPC spor når børste-første reaktioner blev udført under anvendelse af MM fremstillet ud fra kommercielt tilgængeligt PEG-NH2 (B1, figur 2a). Vi havde lært af erfaring, at helt rene MMS giver generelt kvantitativ MM konvertering. Endvidere havde vi bemærket, at mængden af tilbageværende MM varieres afhængig af batchnummer kommercielle PEG-NH2. Vi mistanke om, at en ikke-funktionel PEG-NH2 urenhed, måske blot PEG diol, var ansvarlig for den tilsyneladende resterende MM urenhed. Derfor har vi udnyttet prep-HPLC for at oprense B1 for at give ren MM B2 Figur 2b viser, at denne rensning rent faktisk reducere mængden af resterende MM (orange star) er omkring to gange. Det ikke remove det helt. Interessant, B2 gav højere konvertering af BI til BASPs samt, måske en urenhed, der førte til katalysatordeaktivering blev fjernet via prep-HPLC. Stadig utilfredse med mængden af tilbageværende MM, vi fulgte litteratur metoder til syntese af PEG-NH 2 via anioniske polymerisation af ethylenoxid fra ethanolamin (ADVARSEL: Ethylenoxid bør håndteres af uddannede og erfarne kemikere, det er en meget brandfarlig, eksplosiv og giftig gas!). 22,23 MM fremstillet af denne hjemmelavede PEG-NH2 (B3) gav forbedrede resultater i forhold til de kommercielle MMS. GPC-analyse af de tilsvarende BASPs viste ingen påviselig rest MM og meget lille (<1%) resterende BI (figur 2c). Så hvis der kræves høj renhed BASPs anbefaler vi at bruge den renest mulige MM. Bemærk, at resterende MM og BI let kan fjernes frade større BASPs gennem dialyse efter brush-første syntese.\nVi har også brugt andre end C krydsbindere. For eksempel har vi udarbejdet BASPs fra bisnorbornene metalkomplekser, polymerisationsinitiatorer, syrespaltelig indeksobligationer og supramolekylære værter. Vi finder, at crosslinkers med stive afstandsstykker mellem norbornener tendens til at give den mest ensartede BASPs; sådanne tværbindere er mindre tilbøjelige til at gennemgå intramolekylære ringslutningsreaktioner der forbruger norbornener men bidrager ikke til BASP vækst.\nUanset MM og crosslinker kombination, finder vi følgende generelle fremgangsmåder vil føre til den højeste chance for børste-første succes. Først, før du forsøger børste første syntese med nysyntetiserede monomerer, anbefaler vi at gøre DP = 10 børste polymer alene og muligvis længere børste polymerer med DP = 25 og 50 år. Hvis disse prøver er en succes, er der en glimrende chance for, at børste-firstmetode vil også blive en succes. For det andet, den ideelle koncentration for brush-første polymerisation er afhængig monomer kemiske sammensætning og struktur af komponenterne. Vi anbefaler at teste et par koncentrationer på mindre skala, før du foretager et stort parti af BASP. Tredje polymerisationer udføres i dichlormethan eller tetrahydrofuran tilsyneladende giver de bedste resultater, monomerer, som er opløselige i disse opløsningsmidler er ideelle. Som beskrevet ovenfor, hvis tværbinderen er tungtopløselige i disse opløsningsmidler anbefaler vi at tilsætte det som et faststof snarere end at tilføje ekstra opløsningsmiddel. Så længe MM er opløselig, mener vi, at tværbindingen bringer tværbinder fuldstændigt i opløsning inden for få minutter. For det fjerde, selv om polymerisation ikke kræver inerte betingelser, anbefaler vi opbevaring af katalysatoren under inert atmosfære for at øge dens levetid. Vigtigere er det, vil katalysatoren nedbrydes over tid i opløsning; katalysator bør laves frisk fra Grubbs tredje generation catalyst hver gang en række Romp reaktioner udføres. Endelig vil mængden af tværbinder kræves for ensartede BASPs variere meget med tværbinder og MM struktur. Som vist i figur 2, 10 ækv tværbinder C er ikke nok til at levere komplette BI konverteringer. I andre tilfælde finder vi, at tilsætning af 1 ækv tværbinder, og endda op til 40 ækvivalenter, giver gode resultater. Når en ny krydsbinder skal bruges, anbefaler vi en serie af mindre reaktioner med forskellige N værdier til at identificere optimale tværbindingsmiddel beløb.\nSom en sidste bemærkning, er det vigtigt at erkende, at mange alternative metoder der findes til at gøre stjerne formede polymerer (kerne-først, arm-først, osv.) 25, 26. Hver metode har ulemper og fordele, såsom grænser for størrelse, rensning krav og funktionel gruppe kompatibilitet. Vi hævder, at den brede funktionelle gruppe tolerance ROMP,den lette syntese af norbomen-baserede funktionelle monomerer, og evnen til at udføre boltre sig reaktioner i laboratoriet hurtigt, parallelt og ved stuetemperatur, gør pensel første ROMP tilgang værd at overveje for en lang række applikationer. I fremtiden vil vi fortsætte med at udvikle denne metode og BASP nanoarchitectures til forskellige applikationer, herunder stof-og gen levering, cellulære billedbehandling og saml-selv. Det fulde potentiale af disse nye partikler, og deres evne til kombinatorisk syntese, har endnu at blive udforsket.\nVi takker MIT Institut for Kemi og MIT Lincoln Labs avancerede koncepter Udvalget for støtte til dette arbejde.


Nu kan blinde over 67 år også få en ledsager | Dansk Blindesamfund\n24.5.2021 06:00:00 CEST | Dansk Blindesamfund\nMed en politisk aftale bliver det muligt for blinde og svagsynede, der er fyldt 67 år, at få tildelt en ledsager\nIndtil nu har ledsageordningen været lukket land for ældre med synshandicap. Hvis du var fyldt 67 år og mistede synet, var der førhen ingen hjælp at hente hos kommunen, hvis du havde brug for en ledsager til at tage på indkøb eller deltage i kulturelle og sociale aktiviteter.\nMen det bliver der ændret på nu. For med en politisk aftale, er der afsat midler på finansloven til et fireårigt landsdækkende forsøg med ledsagelse til blinde og stærkt svagsynede, der er fyldt 67 år.\nAllerede tilbage i 2018 blev der indgået en finanslovsaftale, der afsatte midler til denne forsøgsordning, men processen omkring udmøntning af midlerne har trukket i langdrag. Derfor vækker det stor glæde i Dansk Blindesamfund, at forsøgsordningen er blevet en realitet.\n”For Dansk Blindesamfund har det i mange år været en mærkesag at få fjernet aldersbegrænsningen på ledsageordningen. Det er derfor rigtig dejligt, at det endelig er faldet på plads, så ældre med synshandicap også har mulighed for at leve et aktivt liv og deltage i sociale aktiviteter på lige fod med andre”, siger Ask Løvbjerg Abildgaard, landsformand i Dansk Blindesamfund.\n”Jeg så selvfølgelig helst, at det var blevet en fast ordning. Men nu starter det som en forsøgsordning, der forhåbentlig kan bane vejen for en permanent ordning med ledsagelse til ældre med synshandicap. Det vil vi kæmpe for i Dansk Blindesamfund, for det giver ikke mening, at yngre og ældre skal forskelsbehandles”, forklarer Ask Løvbjerg Abildgaard.\nÆldre synshandicappede oplever ofte, at deres synshandicap fører til isolation, da det er vanskeligt at begå sig uden for hjemmet, når synet svækkes i en sen alder. Men med forsøgsordningen kan ældre søge om syv timers ledsagelse om måneden med mulighed for opsparing.\n”Det er urimeligt, at der hidtil har været en aldersgrænse på 67 år, for det går ud over livskvaliteten, hvis mennesker med synshandicap ikke har mulighed for at komme rundt. Forsøgsordningen får positiv betydning for mange blinde og svagsynedes hverdag, da de får mulighed for at deltage i samfundslivet og undgå ensomhed og isolation”, siger Ask Løvbjerg Abildgaard.\nEn af dem som glæder sig over ordningen er 82-årige Tove. Hun er glad og lettet over, at hun har fået tildelt en ledsager, der kan være hendes øjne og bidrage med en støttende arm til aktiviteter uden for hjemmet. Hun har allerede brugt ordningen, da hun skulle til tandlæge og i banken. Ærinder som ellers ville have været meget mere ressource- og tidskrævende, hvis ikke Tove havde en ledsager ved sin side.\n”Jeg kan godt færdes alene, men bagefter er jeg hamrende træt. Det er blevet for besværligt og alt for ressourcekrævende. Derfor er det en utrolig lettelse i det daglige, at jeg kan få en ledsager. Nu kan jeg trygt komme fra A til B uden at være bekymret for at gå ind i noget eller fare vild. Det har jeg prøvet, og der gik panik i mig, da jeg ikke vidste, hvor jeg var”, siger Tove Bildt Kurup Hinrich, der også vil bruge sin ledsager til kulturelle aktiviteter og til gåture i Hillerød.\n”En ledsager er med til at give mig en større frihed og gøre mit liv rigere på oplevelser. Det betyder utrolig meget at have et par øjne, der beskriver, hvad vi går forbi, så jeg kan føle mig tryg og nyde turen”, fortæller Tove Bildt Kurup Hinrich.\nDet fireårige forsøg med ledsageordning for ældre med synshandicap er finansieret gennem finansloven med Socialstyrelsen som tilsynsmyndighed. Dansk Blindesamfund visiterer til ordningen, og DUOS, der er en af landets største leverandører af velfærdsydelser, herunder ledsagelse, forestår alle opgaver i forbindelse med selve ledsagelsen.\nHvis du er fyldt 67 år, og er blind eller stærkt svagsynet, kan du få 7 timers ledsagelse om måneden med mulighed for opsparing\nDu vælger selv, hvilke aktiviteter du har brug for en ledsager til\nDu har mulighed for selv at pege på en ledsager, eller du kan lade DUOS finde én til dig\nLæs mere om ordningen og søg om ledsagelse på https://blind.dk/ledsageordning eller ring til Dansk Blindesamfunds visitationsmedarbejdere på telefon 69 16 16 58\nAsk Løvbjerg Abildgaard glæder sig over, at ældre med synshandicap får frihed til at kunne bevæge sig trygt rundt med den nye forsøgsordning om ledsagelse\nFor Tove Bildt Kurup Hinrich er forsøget med ledsageordning en stor lettelse og hjælp i dagligdagen


Spareøvelse forklædt som inklusion | Information\nDe ressourcestærke elever vil tage flugten, hvis svage forsøges integreret i folkeskolen, uden at der følger ressourcer med til at løfte opgaven.\nSiden midten af 1990'erne har udgifterne og henvisningsfrekvensen til specialundervisningsområdet været støt stigende. Det har sprængt kommunale budgetter landet over.\nAlene i perioden 1995-2008 er specialundervisningens andel vokset fra 6 pct. til 12 pct. af de samlede udgifter til folkeskolen. I samme periode er udgifterne til den pædagogisk-psykologiske rådgivning (PPR), der bl.a. står for udrednings- og diagnosearbejde, steget fra 0,72 milliarder kroner til 1,15 milliarder kroner — altså en stigning på hele 59 pct.\nDet lyder det ikke som en dårlig idé set i lyset af, at mange specialskolebørn landet over dagligt bruger timer i taxa for at komme frem og tilbage mellem skole og hjem og dertil bor langt fra deres legekammerater. Salamanca-erklæringen er altså bl.a. et forsøg på at undgå at udskille børn med særlige behov.\nOg der er flere vigtige demokratiske elementer knyttet til inklusionstanken. F.eks. kan den stigende henvisningsfrekvens tolkes som, at vores opfattelse af normalitet bliver stadigt mere snæver. Hvis andelen af 'normale' elever skrumper, skyldes det måske, at vores normalitetsbegreb ikke er særligt mangfoldigt og rummeligt. Man kan spørge sig selv, om demokratiet ikke styrkes, hvis børn vokser op i et samfund, hvor forskellighed ikke ses som en hindring for fællesskabet.\nAlligevel er det ikke så let. I kølvandet på Salamanca-erklæringen har utallige politiske visioner og programmer haft lidet held til at ændre den eksisterende henvisningspraksis.\nI mit igangværende ph.d.-projekt har jeg studeret en folkeskole, der deltog i et kommunalt inklusionsprojekt med blandede erfaringer. Projektet bestod primært i efteruddannelse af skolens lærere, som blev introduceret til inklusionsvenlige pædagogikker. Skolens pædagogiske leder udtrykte problematikken på følgende vis: »Idealet er ingen uenige i. Problemet er, at man siger, at man skal inkludere, uden at der gives ressourcer. Men vores system har jo sine begrænsninger.«\nHvis ikke der investeres tilstrækkeligt i inklusion på skolen vil inklusionsøvelsen ende som en kortsigtet besparelse. Dermed risikerer vi ikke bare barnets tarv, men folkeskolen som et demokratisk grundelement.\nDet skal ikke meget til, før ressourcestærke forældre flytter deres børn til andre (privat) skoler. Det viste de mange skolesammenlægninger med al tydelighed.\nSamtidigt pynter inklusion sjældent på karaktergennemsnittet. Som en skoleleder forklarede, er det lave karaktergennemsnit på hendes skole et succestegn — for det illustrerede, hvor mange elever med særlige behov, de inkluderede. Derfor er det også positivt, at den nye regering har sløjfet planer om ranglister. Offentliggørelse af karaktergennemsnit øger nemlig risikoen for, at forældre vælger skoler fra med høj inklusionsrate. I så fald ville udskillelsen fortsætte, blot i andre klæder end special- og normalskoler.\nHelene Ratner er ph.d.-studerende ved Center for Skoleledelse, Institut for Ledelse, Politik og Filosofi, CBS\nCa. 84.000 elever eller 14,3 pct. af alle 6-16-årige elever modtog specialundervisning i skoleåret 2008/09.\n51.000 af dem var fortsat en del af den almindelige folkeskoler og modtog specialundervisningen ved siden af den almindelige undervisning. De resterende ca. 33.000 elever modtog undervisning i segregerede undervisningsformer, idet 13.383 gik i specialklasser og 19.371 gik i specialskoler.\nUdgifterne til specialundervisning har de seneste mange år været stigende. De samlede bruttoudgifter til specialundervisning udgjorde i skoleåret 2008/09 9,68 milliarder kroner på landsplan. Det er overvejende den segregerede specialundervisning, der får udgifterne til at stige. Udgifterne til specialklasser og specialskoler udgjorde således 7,95 milliarder kroner i 2008/09, hvilket svarer til mere end 80 pct. af de samlede bruttoudgifter til specialundervisning.\nI gennemsnit kostede en elev, der modtog specialundervisning som en del af folkeskoletilbuddet 33.926 kroner mere end en ’almindelig’ folkeskoleelev.\nKilde: Finansministeriet og KL, Specialundervisning i folkeskolen – veje til en bedre organisering og styring, 2010\n08. november, 2011 - 21:01\n10. november, 2011 - 13:53\nHvis man tænker og forstår inkulsions-tanken som et idealistisk projekt og som et pædagogisk paradigmeskift så vil man kunne forstå at det ikke er et spørgsmål om for eller imod "Den inkluderende skole", da den må ses som et naturligt led i udviklingen af skolen.\nDen inkluderende praksis i høj grad et spørgsmål og ledelse om hvordan man driver skolen og dermed er det ikke et spørgsmål om økonomi. Spørgsmålet som er relevant er hvordan man laver den bedste skole.\n11. november, 2011 - 10:49\nDet er nyttigt at skelne mellem to begreber her:\nInklusion: en pædagogisk praksis som betyder at eleven i højere grad for mulighed for at kunne deltage i undervisningsmiljøet med sine kompetencer. Der vil naturligvis stadigvæk være nogen der kræver special undervisning.\nRummelighed: som er det at klassen skal rumme alle som et værested, hvor nogen ikke deltager i undervisningsmiljøet, men reelt bare er parkeret.\n11. november, 2011 - 11:05\nHvis begrebet "Den rummelige inkluderende folkeskole", ikke skal ende som en fin hensigtserklæring, så kræves det at der fyldes noget på.\nFolkeskolens primære opgave i dagens Danmark er at gøre leverne uddannelsesparate til det videre uddannelsessystem. Og spørgsmålet er om børnene/ de unge bliver uddannelsesparate, hvis det, som Tomas Fugl så rigtigt er inde på, reelt er en "parkering" der finder sted ?.\nSå hvis folkeskoeln skal inkludere flere elever end hensigtsmæssigt er, så kunne det være en ide med 2-lærer-ordning i visse klasser i visse timer.\nMen mon det bliver billigere og bedre ?\nFor at elever skal på uddannelsesparate skal de først være undervisningsparate og det helt store spørgsmål er om man ikke gør børnene en bjørnetjeneste ved at springe den første forudsætning over ?.\n11. november, 2011 - 11:06\nPS: "Skal blive uddannelsesparate" skulle der stå i sidste sentens.\n11. november, 2011 - 22:03\nInklusion er virkelig meget krævende, og det er jo det der nemt overses hvis det blandes med en økonomisk dagsorden. Først og fremmest kræver det meget dygtige praktikere, der mestrer en række pædagogiske redskaber på højt niveau. Dernæst kræver det en nærmest pervers høj grad af glad enighed - også kendt som konsensus - blandt alle omkring det barn, der ellers ville blive ekskluderet. Og med alle mener jeg virkelig ALLE: Barnet, barnets forældre, alle børn i klassen, alle klassens professionelle voksne, alle forældre til børn i klassen, alle børn og voksne i SFO'en, alle ledelsesniveauer i skole og på GFO, PPRs visitationsudvalg, skolepsykolog og så videre. Hvis bare der er eet svagt led i kæden - f.eks. en lille gruppe uforstående forældre, der ikke bliver mødt af en kompetent og insisterende ledelse - bliver hele projektet svækket, og rationaler som: 'Det trækker klassens niveau ned', eller 'hvad laver et barn som N hér?' vinder hurtigt terræn over inklusionens ideelle formål.\n12. november, 2011 - 16:12\n"rationaler som: ‘Det trækker klassens niveau ned’, eller ‘hvad laver et barn som N hér?"\nDer er vist ikke tale om rationaler, men snarere idiosynkraiser. Iøvrigt enig i dét rationale som fremgår af indlægget, nemlig at en kæde ikke er stærkere end sit svageste led. Af samme årsag har vi brug for et opgør med de mange tåbelige forestillinger om at man kan høste stordriftsfordele via centraliseringer af folkeskolen. Typisk er der kun små besparelser at hente på den korte bane ... og øgede udgifter på den lange. Foruden at vi altså med disse store skolefabrikker 'producerer' blaserte tremmesvin med primært fokus på kapitalisering af egne evner.\n13. november, 2011 - 15:08\nHvordan burde det være? Hvordan skaber vi en (økonomisk)bæredygtig folkeskole hvor individet motiveres til at være produktiv for det fælles og herigennem, i en forestilling om, opnå social tilfredsstillelse af den 'helt naturlige egoist' iboende de fleste?


Det er ikke så ofte vi spiser pandekager, men jeg tror alle æbleskive-reklamerne her op til Jul har fået mig aktiveret. Søndag var vi lidt sent oppe, så frokosten blev tilsvarende sen og derfor luftede jeg tanken om LCHF pandekager og gløgg som en kombi frokost/eftermiddagskaffe. Det forslag faldt i god jord hos Henrik. Det er nærliggende at servere fibersirup til pandekagerne. Men det får diabetikere højt blodsukker af, så det har vi slet ikke i huset. I stedet lavede jeg den karamelsauce, som jeg lavede til valnøddekagen – i dag lod jeg være med at tykne den med xanthan gummi, og hældte den over pandekagerne, som man ville gøre med en sirup. Jeg pyntede med lidt dyre friske jordbær og lidt ristede kokosflager.\nTil karamelsaucen skal du bruge: (jeg lavede halv portion af karamelsaucen)\neventuelt lidt vanille\nsmelt smør og sukrin gold i en gryde, lad det simre i 2-3 minutter\ntilsæt vand og fløde\ntilsæt et lille drys salt og eventuelt lidt vanille\nserveres varm ellers krystaliserer den\nTil kokospandekagerne skal du bruge:\n1 dl kokosmælk – jeg bruger light fra Santa Maria, ikke fordi jeg er fedtforskrækket, men fordi den er flydende\n2 3/4 spsk kokosfibermel\n1½ tsk sukrin gold\nbland bagepulveret i kokosfibermelet, så der ikke er nogen klumper\nbland herefter alle ingredienser sammen i en skål – jeg brugte stavblenderen og tilsatte kokosolien kold\ndu kan også smelte kokosolien og bruge en håndmixer\nkokosfibermel opfører sig lidt forskelligt efter hvilket mærke det er, men konsistensen skal være som en tyk pandekagedej\nlad dejen stå lidt før du vurderer tykkelsen\ntilsæt evt. lidt mere kokosmælk eller kokosfibermel\nbages på en pande – jeg brugte ikke fedtstof andet til den første, det der var i dejen var nok\nJeg bagte pandekager til 3 personer, for at have nogen i køleskabet til i morgen. Denne opskrift giver luftige og lette pandekager. Man skal passe på med at bage dem for længe, så kan de godt blive hårde. De skal bages lige nøjagtig “nok” så er de bedst. De smagte virkelig godt og forbudt og gav helt fint fornemmelsen af, at man spiste en stor portion af noget virkeligt syndigt. Der var intet at se på blodsukkeret 1½ time bagefter. Tricket med karamelsaucen var også en vinder, det var let at fordele ud over pandekagerne og så flot ud.\n(Visited 3.542 times, 12 visits today)\nCognac-konfekt af lazy marcipan »