8. apr 2018 kl. 10:00 27\n#1 jacob schønberg 8. april 2018 - 10:32\nHvorfor skal økonomi diktere vores samfundsudvikling ? Har vi brug for mere biltrafik imellem landsdele ? Har vi brug for en større koncentration af investeringer og aktivitet i landets største byer? For mere end 60 milliarder kan man lave ganske mange andre investeringer, der giver mere mening end endnu en bro. København har i mange år spist langt hovedparten af vores investeringskroner og det er på høje tid at få udflyttet langt flere arbejdspladser. Virksomheder skal i højere grad lægges der hvor folk bor !\n#2 Kim Tausen 8. april 2018 - 12:02\n#3 Niels Abildgaard 8. april 2018 - 12:14\nDen er der allerede. Skinner-skrot og asfalt på . Transportydelsen stiger med mere end en størrelsesorden. De sparede jernbanetilskud luner.\n#4 Joan Schmidt 8. april 2018 - 13:21\n#5 Morten Telling 8. april 2018 - 14:15\n#6 Tomas Loft 8. april 2018 - 17:25\n#7 Steen Bundgaard 8. april 2018 - 17:39\n#8 Jan C Damgaard 8. april 2018 - 19:33\n#9 Anders Hedelund 9. april 2018 - 09:45\n#10 Torben Worm 9. april 2018 - 10:08\nVejtrafikken kommer til at stige også i de kommende år. Dermed bliver behovet for en udbygning eller aflastning af forbindelse over Fyn påtrængende. Det giver derfor god mening at overveje andre ruter. Kattegatforbindelsen er en af dem. Men at køre med tog over denne strækning giver ikke mening. Det er for dyrt og trafikken kan givet klares via Storebælt og en Fehmrenforbindelse. Spar derfor pengene til jernbanen og brug dem på udretning af eksisterende jernbane og gerne med flere spor så nedlukninger ved sporarbejde og øget fremkommelig af godstog IKKE belaster højhastighedstog. Brug penge på en forbindelse mellem Als og Fyn, mellem Lolland og Langeland og mellem Helsingør og Helsingborg og her også med tog.\n#11 Ebbe Holleris Petersen 9. april 2018 - 13:57\nØKONOMI Flercifrede milliardbeløb årligt til ny infrastruktur (samt løbende vedligehold) Infrastruktur der lægger beslag på store landområder / natur, er meget synlig i landskabet (og ikke særligt kønne) og ofte kræver ekspropriering af privat ejendom at etablere Belastning af handels- og valutabalance grundet import af biler Belastning af private familiers økonomi - en bil er typisk det næststørste investering de fleste almindelige mennesker laver i deres liv (efter deres bolig) Ekstra udgifter til sundhedsvæsnet pga. dræbte og kvæstede i trafikken. Kolossalt spild af tid og dermed ressourcer der kunne have været brugt konstruktivt (på arbejde eller sammen med familien), i stedet for på (motor)vejen.\nMILJØ OG RESSOURCER Utallige dyr dræbt i trafikken hvert år Væsentligt bidrag til klimaforandringer Reduceret udbytte på landbrugsarealer beliggende tæt på fx. motorveje grundet fotokemisk smog Skader på miljøet som følge af uheld og ulykker ved olieudvinding samt transport og raffinering af olie (fx ulykken i golfen, eller den iranske olietanker der sank for nyelig nær Kina) Anvender store mængder fossile brændsler, der som bekendt er en ikke-fornyelig ressource.\nSUND Et par hundrede dræbte og flere tusinde kvæstede (nogle livsvarigt skadet / invalideret) i trafikken hvert år Et par tusinde for tidlige dødsfald pga. luftforurening (bl.a. partikler og NOx) Reduceret livskvalitet og stress for 100.00’er af danskere der dagligt lider under trafikstøj\nPOLITIK Støtter korrupte og ikke-demokratiske olieproducerende lande, der i nogle tilfælde ser os, vores værdier og samfund som fjender som de aktivt arbejder på at undergrave\n#12 Morten Telling 9. april 2018 - 18:15\n#13 Torsten Pedersen 10. april 2018 - 10:03\n#14 Torsten Pedersen 10. april 2018 - 10:11\n#15 Torsten Pedersen 10. april 2018 - 15:54\n#16 Niels Abildgaard 10. april 2018 - 19:36\nJeg var ikke klar over at der var så god dobbeltsporet plads på begge sider af broen. Hvis den tredje limfjords forbindelse kun tillader max 3.5 ton biler, kan der bygges i to etager og vi har en firesporet forbindelse for peanuts.det er selvfølgelig ikke så godt for politikere og entreprenører men ville virkelig flytte noget. Den enlige togpassager man ser på videoen,kan nok komme over på anden vis.\n#17 Niels Abildgaard 10. april 2018 - 20:19\nDen østlige jernbanebro over Limfjorden har båret tyve meterlange damplokomotiver, der vejer 140 tons mere end en gang. Fundamenterne ,som er dyre ved bro,kan derfor tåle mindst 14 vejbaner hvis disse kun benyttes af 6 meter/3.5 tons biler. En Kattegatbro kun for lettere busser og biler bliver en bragende økonomisk succes og miljøforbedring.\n#18 Karsten Henneberg 10. april 2018 - 20:42\n#19 Niels Abildgaard 10. april 2018 - 21:36\n#20 Niels Abildgaard 10. april 2018 - 21:47\nHvad taler for at de tonstunge lastbiler og busser som Femern og Kattegat dimensioneres til ,vil køre i fremtiden? Hvis der ikke skal betales chauffør med hviletid etc er der ingen grund til at lave køretøjerne større og større? Bortset fra dem ,der kører med vindmølleskrammel og fjernvarmerør selvfølgelig\n#21 Torsten Pedersen 10. april 2018 - 22:07\nKøbenhavn har i mange år spist langt hovedparten af vores investeringskroner og det er på høje tid at få udflyttet langt flere arbejdspladser. Virksomheder skal i højere grad lægges der hvor folk bor !\n#22 Torsten Pedersen 10. april 2018 - 22:13\n#23 Niels Abildgaard 10. april 2018 - 22:39\nDer kører ingen tog i fremtidens Danmark. Dyrt og miljø-forstyrrende. Lastbiler har bevæget sig frem mod kæmpemæssige vogntog med uhyrlige hjultryk for at een chauffør kan flytte 40 tons.Når der ikke skal medtages chauffør er ti styk 4tons biler mindre energikrævende,vejdestruerende,støjende etc da de ikke behøver køre så stærkt for samme transport arbejde.Det samme med busser hvor en chauffør flytter 70 pax intercity. En 4 tons max selvkørende flytter vel 10-12 stykker.Det er ikke ligemeget om de enkelte gummihjul trykker eet ton eller ti.\n#24 Torsten Pedersen 11. april 2018 - 10:26\nDer kører ingen tog i fremtidens Danmark. Dyrt og miljø-forstyrrende. Lastbiler har bevæget sig frem mod kæmpemæssige vogntog med uhyrlige hjultryk for at een chauffør kan flytte 40 tons.Når der ikke skal medtages chauffør er ti styk 4tons biler mindre energikrævende,vejdestruerende,støjende etc da de ikke behøver køre så stærkt for samme transport arbejde.\nDet samme med busser hvor en chauffør flytter 70 pax intercity. En 4 tons max selvkørende flytter vel 10-12 stykker.Det er ikke ligemeget om de enkelte gummihjul trykker eet ton eller ti.\n#25 Niels Abildgaard 11. april 2018 - 11:35\nHitler disponerede penge på at udarbejde planer for et transeuropæisk jernbanenet med 3meter sporvidde og 7 gange5 meter profil. Jernbaners ubrugelighed gør at de måske er væk fra europa om 30 år.Forhåbentlig før. Det er ganske svært at forudsige fremtid men derfor er spørgsmålet om fremtidige transport klumpers størrelse interesant i forbindelse med infrastruktur projekter. Der vil desværre være veje som kan tage tunge transporter i uendelig mange år endnu når tidligere skinneforurenede arealer asfalteres for at stoppe nedsivning af sprøjtegifte. Men hvis 90% af godstransport fremover er billigere med selvkørende 4 tons enheder end 40 tonnere ,kan man god overveje om Fehmern eller Kattegat projekteres fornuftigt.\n#26 Torsten Pedersen 11. april 2018 - 22:43\nMen der skal da være faciliteter til bortskaffelse af dem der er døde af underernæring, efter at alle jernbaner og motorveje er lukkede? https://en.wikipedia.org/wiki/Dutch_famine...\n#27 Christian Lundstrøm 29. april 2018 - 10:22\n58 mia. er en helt afsindig pris for at forbinde to byer, der i forvejen er præget af tiltagende trafikproblemer. Hvor meget kunne man udrette af forbedringer på det eksisterende vej- og skinnenet for den samme eller mindre pris? Det er der hårdt brug for - man tror jo det er løgn som toget hopper og slingrer selv med de beskedne hastigheder vi kører med i DK. Jeg mener f.eks. opgradere hele banenettet fra Kbh. - Århus - Ålborg til 250 - 300 km/t? Så kunne Kbh - Århus tage godt 1 time.


Vi er meget flittigt udvalgte pornografiske video klip Sommer land sjælland asian kropspleje esbjerg, så du kan nyde at se eksplicitte videoer på din mobil eller pc. Gør dig klar til at svælge i alle former for pornografisk produktioner af de forskellige stilarter af fucking. Fremragende kvalitet, video, billede og lyd, lyd Sommer land sjælland asian kropspleje esbjerg vil fordybe dig i den malstrøm af dyr af erotisk begær. Du ved, vi arbejder udelukkende for dig.\nAsian house køge trækker torsk i land\nHerning zoo pasfoto esbjerg


Detection of Cell-Free DNA in Blood Plasma Samples of Cancer Patients | Protocol (Translated to Danish)\nI dette papir præsenterer vi en detaljeret protokol for ikke-invasiv flydende biopsi teknik, herunder blodopsamling, plasma og buffy pels adskillelse, cfDNA og kimbar DNA ekstraktion, kvantificering af cfDNA eller kim kim DNA, og cfDNA fragment berigelse analyse.\nIdentifikation mutationer i tumorer af kræftpatienter er et meget vigtigt skridt i sygdomshåndtering. Disse mutationer tjene som biomarkører for tumor diagnose samt for behandling udvælgelse og dens reaktion hos kræftpatienter. Den nuværende guld standard metode til påvisning af tumor mutationer indebærer en genetisk test af tumor DNA ved hjælp af tumor biopsier. Denne invasive metode er imidlertid vanskelig at udføre gentagne gange som en opfølgningstest af tumormutationsrepertoiret. Flydende biopsi er en ny og spirende teknik til påvisning af tumormutationer som en brugervenlig og ikke-invasiv biopsi tilgang.\nKræftceller formere sig hurtigt. Sideløbende gennemgår mange kræftceller apoptose. Snavs fra disse celler frigives i en patients kredsløbssystem sammen med fint fragmenterede DNA-stykker, kaldet cellefri DNA (cfDNA) fragmenter, som bærer tumor-DNA-mutationer. Derfor indsamles der blodprøver fra kræftpatienterne til identifikation af cfDNA-baserede biomarkører ved hjælp af flydende biopsiteknik efterfulgt af adskillelse af plasma og buffy coat. Dernæst behandles plasma til isolering af cfDNA, og den respektive buffy frakke behandles til isolering af en patients genomiske DNA. Begge nukleinsyreprøver kontrolleres derefter for deres mængde og kvalitet; og analyseres for mutationer ved hjælp af næste generations sekventeringsteknikker (NGS).\nI dette manuskript præsenterer vi en detaljeret protokol for flydende biopsi, herunder blodsamling, plasma og buffy coat separation, cfDNA og kim-DNA-ekstraktion, kvantificering af cfDNA eller kim-DNA og cfDNA fragmentberigelsesanalyse.\nTeknologiske fremskridt har ført til sekventering af hundredvis af kræftgenomer og transskriptioner1. Dette har bidraget til at forstå landskaber af molekylære ændringer på tværs af forskellige kræfttyper2. Yderligere undersøgelser af disse landskaber har hjulpet med at karakterisere de sekventielle somatiske ændringer og gengenfusioner3, der er involveret i kræft eller tumorprogression, ved serielt at forstyrre apoptoseveje4. Derfor kan somatiske mutationer og gen-genfusioner give oplysninger om tumorer ved at tjene som biomarkører hos individuelle patienter for en bestemt tumortype5, identificere eksisterende primære tumorer prognose6, kategorisere sekundære tumorer baseret på molekylære ændringer7og identificere druggable tumormål8. Sådanne oplysninger kan gøre det lettere at vælge personlig behandling af kræftpatienter og ved bestemmelse af positive og negative behandlingsresponser9. Men at opnå tumormateriale til identifikation af genomisk profilering af tumorvæv er en invasiv procedure10. Desuden, en tumor biopsi omfatter kun en lille del af en heterogen tumor; og kan derfor ikke være repræsentativ for den molekylære profil af heletumoren 11. Seriel overvågning og tumor genotyping kræver en gentagen samling af tumorvæv, hvilket normalt ikke er muligt på grund af invasiviteten af tumorbiopsiproceduren og de sikkerhedsproblemer, der opstår ved sådanne procedurer12.\nDen flydende biopsi teknik, på den anden side, har fået enorm opmærksomhed i præcision onkologi i løbet af det sidste årti13,14. Det skyldes hovedsageligt denne tekniks ikke-invasivitet og muligheden for, at den gentages på flere tidspunkter, hvilket muliggør en brugervenlig og sikker overvågningsteknik til sygdomskurserne15,16. Flydende biopsi er baseret på et fænomen, som tumorceller formere sig hurtigt, og samtidig mange af dem gennemgår apoptose og nekrose. Dette fører til frigivelse af apptotisk cellerester i patienternes blod sammen med de DNA-fragmenter, der skæres i præcise størrelser under apoptose17. Apoptose af ikke-kræftceller fører også til frigivelse af dets cellulære snavs i blodet, men apoptosehastigheden i disse celler er relativt meget lavere end tumorceller18. Rationalet i den flydende biopsiteknik er at fange tumorrelaterede molekyler som DNA, RNA, proteiner og tumorceller14,19, der cirkulerer kontinuerligt i blodet. Forskellige teknikker20 kan bruges til analyse af disse molekyler, herunder next-generation sekventering (NGS), digital dråbe polymerase kædereaktion (ddPCR), real-time PCR, og enzym-forbundet immunosorbent assay (ELISA). Flydende biopsi teknik gør det muligt at identificere biomarkører, der er kendetegnende for tumorceller. Disse biomarkørmolekyler frigives ikke kun fra specifikke dele af en tumor, men snarere fra alle dele af tumoren21. Derfor repræsenterer markører identificeret i flydende biopsi den molekylære profilering af en hel heterogen tumor, ud over andre tumorer i kroppen, og har således fordele i forhold til vævsbiopsibaseret teknik22.\nCFDNA har en kort halveringstid i det cirkulerende blod fra et par minutter til 1-2 timer23. Den korte halveringstid for cfDNA letter imidlertid realtidsanalyser ved at evaluere behandlingsrespons og dynamiske tumorvurderinger. Den tumor-afledte cfDNA niveauer indikerer prognostication af tumor fase / størrelse fremgår af flere undersøgelser, som viste en sammenhæng mellem cfDNA niveauer og overlevelse resultater24. Desuden har undersøgelser vist, at cfDNA har en bedre forudsigelseskapacitet end eksisterende tumormarkører25. Prognosen for cfDNA er endnu mere udtalt efter kræftbehandling, højere niveauer af cfDNA efter behandling korrelerer godt med en reduceret overlevelsesrate og modstand mod behandling. Mens lavere niveauer af cfDNA efter behandling generelt svarer til positiv behandlingsrespons. Derudover letter cfDNA tidlig påvisning af behandlingsrespons end de traditionelle detektionsmetoder.\nCFDNA øger muligheden for tidlig påvisning af kræftrelaterede mutationer: i den tidlige fase sygdom15, symptomernes begyndelse26 og før kræftdiagnose op til 2 år27. Da cfDNA frigives fra flere tumorregioner eller foci, giver dens analyse et omfattende overblik over tumorgenomet, det repræsenterer28. Derfor gør cfDNA det muligt at opdage somatiske mutationer, der kan være gået glip af i vævsprøverne29. Som intra-tumor heterogenitet og subklonale mutationer kan påvises ved dyb sekventering af genomiske regioner spænder over tusindvis af baser, derfor analysen af cfDNA gør det muligt at afdække specifikke molekylære undertyper med forskellige genomiske signaturer13. For at opnå et tilsvarende niveau af information gennem vævsprøve mange faste biopsier ville have været nødvendig.\nDesuden cfDNA niveauer hos patienter med en lokaliseret sygdom som tyktarm, æggestokkene, og lungekræft efter en kirurgisk behandling og / eller kemoterapi, viste sig at være en kraftig prognostisk markør for kræft tilbagefald og behandlingsresultater20. Desuden, hos patienter med tyktarms-, bryst- og lungekræft, kunne analyser af cfDNA fra blodet med succes opdage de tumorspecifikke ændringer, hvilket førte til den præcise forudsigelse af gentagelse flere måneder i forvejen13. Endvidere behandlingsresistensmarkørerne, såsom KRAS-mutationer hos patienter med CRC, der modtager anti-EGFR-behandling30; VAF for gener som PIK3CA, MED1 eller EGFR hos patienter med brystkræft efter behandling med forskellige behandlingsformer31; og EGFR T790M resistensmutation hos lungekræftpatienter behandlet med EGFR-målrettede TKIs32 kan også identificeres ved cfDNA-analyse.\nKort sagt kan cfDNA-analysen bruges til at identificere præcise biomarkører inden for onkologi13,33. I denne protokol blev blodprøver af 3 gliompatienter og 3 sunde kontroller behandlet for at opnå genomisk DNA fra WBCs og cfDNA fra plasmaet. I glioma cancer fungerer mutationer i IDH, TERT, ATRX, EGFR og TP53 som en diagnostisk såvel som prognostiske markører, der kan hjælpe med tidlig diagnose af glioma tumorer, klassificere forskellige typer glioma tumorer, vejlede den nøjagtige behandling for den enkelte patient og forstå behandlingsresponset34,35. Mutationsstatus for disse gener kan identificeres ved hjælp af blod-afledt cfDNA. I dette manuskript præsenterer vi en detaljeret protokol over plasma-afledt cfDNA, der er blevet brugt til at studere mutationsændringer i glioma cancer12. En sådan cfDNA-baseret flydende biopsiprotokol forklaret i denne artikel kan bruges til at studere mutationsændringer i mange andre typer kræft. Desuden har en nylig undersøgelse vist, at cfDNA-baseret flydende biopsi kan detektere 50 forskellige typer kræft36.\nBlodprøveindsamling, opbevaring og forsendelse er afgørende trin i denne protokol, da ukontrolleret temperatur under disse trin forårsager lysis af WBC'er, hvilket fører til frigivelse af genomisk DNA fra WBC i plasmaet og forårsager forurening af cfDNA-prøven, hvilket påvirker resten af proceduren37. Hæmolyse på grund af ukontrolleret temperatur kan forringe downstream prøveforberedelsesprocesserne for cfDNA, såsom PCR-trin38. Serumet indeholder en høj andel af kim-cfDNA snarere end plasma, selv om det præsenterer en stor baggrundsstøj for tumor-associeret cfDNA39. Derfor er plasma til isolering af tumorrelateret cfDNA en egnet prøve39. Blod, der trækkes i et antikoagulerende middel, der indeholder blodopsamlingsrør, skal centrifuges straks eller inden for op til to timer for at adskille plasmaet og undgå cfDNA-kontaminering. I denne protokol anvendes dedikerede kommercielle cfDNA-konserveringsblodopsamlingsrør (se Materialetabel), som er et alternativ til antikoagulerende, der indeholder blodopsamlingsrør. Disse dedikerede blodopsamlingsrør bevarer cfDNA og cfRNA og forhindrer lysis af WBCs i op til 30 dage ved omgivelsestemperatur og op til 8 dage ved 37 °C. Dette gør det lettere at opretholde en passende temperatur under en blodprøveforsendelse, og indtil plasmaet og WBC adskilles40.\nDer findes i øjeblikket tre typer cfDNA-ekstraktionsmetoder: faseisolation, siliciummembranbaseret spinkolonne og magnetisk perlebaseret isolation41. Den siliciummembranbaserede spin-kolonnemetode gav en stor mængde cfDNA med høj integritet sammenlignet med andre cfDNA-ekstraktionsmetoder42.\nDen kvantitative evaluering af DNA er et grundlæggende krav i flydende biopsi, der er behov for at udvikle en enkel, overkommelig og standardiseret procedure for deres nemme implementering og brede brug. Tre almindeligt anvendte metoder til cfDNA-kvantificering er spektrofotometrisk, fluormetrisk og qPCR. Den fluormetriske metode er bevist bedre i forhold til de andre metoder vedrørende nøjagtighed, omkostninger og letledning43.\nCFDNA's integritet og renhed kan estimeres ved enten agaroseelektroforese eller kapillærelektroforese. Agarose elektrophoresis hverken viser følsomhed ved lav koncentration af cfDNA eller har høj opløsning til at vise præcis fragmentstørrelse af cfDNA. På den anden side har kapillær elektroforese en fordel i forhold til agaroseelektroforesen ved at overvinde de tilknyttede udfordringer og derfor i vid udstrækning anvendes af forskerne til cfDNA fragmentstørrelsesanalyse. I denne protokol blev fragmentstørrelsesfordelingen af isolerede cfDNA anslået ved hjælp af et automatiseret kapillærelektroforeseinstrument (se materialetabel).\nForud for blodindsamling kræves informeret samtykke fra forsøgspersoner, der deltager i forskningen, og skal indhentes. Den forskning, der er beskrevet i dette manuskript, blev udført i overensstemmelse med og i overensstemmelse med Rabin Medical Center, Israels etikudvalg (etikkode: 0039-17-RMC) og Det Medicinske Fakultet Der Christian-Albrechts-Universität zu Kiel, Tysklands etikudvalg (etikkode: D 405/14).\n1. Opsamling og opbevaring af blodprøver i cfDNA- eller cfRNA-konserveringsrør\nKorrekt mærkning af konserveringsrørene\nSaml ~ 8 mL blod i cf-DNA konserveringsrøret (se Materialetabel), ved hjælp af en blodopsamling sæt og en holder, som pr standard institutionelle protokol for venipuncture som beskrevet nedenfor.\nBEMÆRK: Brugen af et blodopsamlingssæt kan forhindre mulig tilbagestrømning af blodet fra røret.\nJuster patienten med armen i en nedadgående position.\nHold røret oprejst med hætten opad, samtidig med at det sikres, at rørets indhold ikke rører hætten eller nålespidsen.\nNår blodet begynder at strømme ind i røret, skal du slippe årepressen langsomt.\nUmiddelbart efter at røret er fyldt med blod (maksimal kapacitet: 8,4 mL fuldblod), skal røret forsigtigt vendes (vend håndleddet på armen, der holder røret med 180° nedad og tilbage) 5 gange for at stabilisere prøven.\nBEMÆRK: Inversion sikrer, at konserveringsmidlet blandes ensartet med prøven. Men ryst ikke indholdet igen, selv før plasmapræparatet. Utilstrækkelig blanding af konserveringsmidler med blodprøven fører til destabilisering af indholdet og dannelse af mikropropper eller hæmolyse. På dette stadium kan protokollen straks fortsættes, for plasmaadskillelse eller blodfyldte rør kan vente i op til 30 dage ved omgivelsestemperatur (15-25 °C) og op til 8 dage ved 37 °C.\n2. Plasma og buffy frakke adskillelse og opbevaring\nCentrifuge det blodfyldte konserveringsrør ved 425 x g i 20 minutter ved stuetemperatur for at adskille plasma.\nBEMÆRK: Trin 2.2 og 2.3 skal udføres i et biosikkerhedsskab.\nPipetter forsigtigt det øverste plasmalag ud til et frisk rør i 1 mL aliquots uden at forstyrre de nederste lag.\nOverfør forsigtigt det næste lag buffy frakke til et frisk rør (laget vises som en ring over RBC pellets), samtidig med at RBCs undgås i det nederste lag.\nFortsæt til trin 3 med plasma og trin 4 med buffy frakken. Opbevar om nødvendigt det adskilte indhold ved -80 °C.\n3. Rensning af cirkulerende cfDNA fra 1 mL plasma\nBEMÆRK: Dette trin udføres med et kommercielt sæt (se Materialeoversigt). Alle buffere leveres sammen med pakken.\nFremstilling af buffere og reagenser\nADVARSEL: Tilsættes ikke sure opløsninger eller blegemiddel direkte til prøveforberedelsesaffaldet. Guanidinsalte til stede i Lysis buffer, Binding buffer, og Wash Buffer-1, når det kombineres med blegemiddel eller syrer kan producere meget reaktive forbindelser.\nBindingsbuffer: Bland 300 mL bindingsbufferkoncentrat med 200 mL 100% isopropanol for at lave 500 mL arbejdsbindingsbuffer. Opbevares ved stuetemperatur.\nBEMÆRK: Bindingsbufferen giver mulighed for optimal binding af de cirkulerende nukleinsyrer til silicamembranen. 500 mL af bindingsbufferen er tilstrækkelig til behandling af henholdsvis 276, 138, 92, 69 eller 55 prøver af henholdsvis 1, 2, 3, 4 eller 5 mL plasma og er stabilt i 1 år ved stuetemperatur.\nVask Buffer-1: Bland 19 mL Vask Buffer-1 koncentrat med 25 mL 96-100% ethanol til at gøre 44 mL arbejde Wash Buffer-1. Opbevares ved stuetemperatur.\nBEMÆRK: Vask Buffer-1 eliminerer de forurenende stoffer, der er bundet til silicamembranen. 44 mL arbejdende vaskebuffer-1 er tilstrækkelig til behandling af 73 prøver af 1/2/3/4/5 mL plasma og er stabil i 1 år ved stuetemperatur.\nVask Buffer-2: Bland godt 13 mL Vask Buffer-2 koncentrat med 30 mL 96-100% ethanol til at gøre 43 mL arbejde Wash Buffer-2. Opbevares ved stuetemperatur.\nBEMÆRK: Vask Buffer-2 eliminerer de forurenende stoffer, der er bundet til silicamembranen. 43 mL bearbejdning Wash Buffer-2 er tilstrækkelig til behandling ~56 prøver af 1/2/3/4/5 mL plasma og er stabil i 1 år ved stuetemperatur.\nTil et rør, der indeholder 310 μg lyofiliseret bærende RNA, tilsættes 1.550 μL Elution-buffer for at forberede en bærende RNA-opløsning på 0,2 μg/μL. Efter en grundig opløsning af bære-RNA'et skal opløsningen opdeles på passende aliquots og opbevares ved –30 °C til –15 °C. Må ikke fryse-optø disse aliquots mere end 3 gange. Føj det rekonstituerede bærende RNA, der er opløst i Elution-bufferen, til Lysis-bufferen som vist i tabel S1.\nBEMÆRK: Da bærende RNA ikke opløses direkte i Lysis-bufferen, skal det først opløses i en Elution-buffer og derefter i Lysis Buffer. For det første forstærkes bindingen af silicamembran-nukleinsyrer, når der er meget få målmolekyler til stede i prøven. For det andet reduceres risikoen for RNA-nedbrydning på grund af tilstedeværelsen af store mængder bærende RNA.\nFør isoleringen påbegyndes, bringes kolonnerne og prøverne til stuetemperatur, og prøvemængderne justeres til 1 mL med steril fosfatbufferet saltvand (PBS), hvis det er nødvendigt. Forvarm 2 vandbade eller varmeblokke, der indeholder henholdsvis 50 mL centrifugerør og 2 mL opsamlingsrør til henholdsvis 60 °C og 56 °C.\nTil et 50 mL centrifugerør tilsættes 100 μL Proteinase K, 1 mL plasma og 0,8 mL Lysis buffer indeholdende 1,0 μg bærende RNA (tilberedt i trin 3.1.4). Luk centrifugerøret med en hætte, og bland indholdet ved pulshvirvel i 30 s, samtidig med at der sikres en synlig hvirvel i røret. Grundig blanding af indholdet er vigtigt for effektiv lysis.\nBEMÆRK: Umiddelbart efter hvirvelvridning skal du straks gå videre til trin 3.4.\nOpløsningen inkuberes ved 60 °C i 30 min.\nFjern hætten, tilsæt 1,8 mL af bindingsbufferen til røret, og bland grundigt med pulshvirvel i 15-30 s efter placering af hætten.\nInkubat den resulterende blanding i 5 minutter på is og indsæt silicamembrankolonnen i vakuumapparatet, der er tilsluttet vakuumpumpen. Sæt derefter en 20 mL rørforlænger fast i den åbne kolonne for at forhindre prøvelækage.\nHæld forsigtigt den inkuberede blanding i kolonnens rørforlænger og tænd vakuumpumpen. Efter at alle lysatblandingen løber helt gennem søjlerne, skal du slukke for vakuumpumpen, frigive trykket til 0 mbar og fjerne og kassere rørforlængeren.\nBEMÆRK: For at undgå krydskontaminering skal rørforlængeren kasseres forsigtigt for at forhindre, at den breder sig over tilstødende søjler.\nKolonnen fjernes fra vakuumapparatet, indsættes i opsamlingsrøret og centrifuges ved 11.000 x g i 30 s ved stuetemperatur for at fjerne eventuelt restlysat. Kassér gennemstrømningen.\nDer tilsættes 600 μL vaskebuffer-1 i kolonnen, centrifuge ved 11.000 x g i 1 min ved stuetemperatur, og gennemstrømningen kasseres.\nDer tilsættes 750 μL vaskebuffer-2 til kolonnen, centrifuge ved 11.000 x g i 1 min ved stuetemperatur, og gennemstrømningen kasseres.\nTilsættes 750 μL ethanol (96-100 %) til kolonnen, centrifuge ved 11.000 x g i 1 min ved stuetemperatur og kassér gennemstrømningen.\nKolonnen centrifuges ved 20.000 x g i 3 min. ved at placere den i et rent 2 mL opsamlingsrør.\nMembransøjlesamlingen tørres helt ved at placere den i et nyt 2 mL opsamlingsrør med låget åbent og inkuber ved 56 °C i 10 minutter.\nKolonnen anbringes i et rent 1,5 mL elueringsrør. Til midten af søjlemembranen påføres 20-150 μL Elution-buffer og inkuberes ved stuetemperatur i 3 minutter med låget lukket.\nBEMÆRK: Sørg for, at Elution-bufferen er ekvilibreret til stuetemperatur. I tilfælde af brug af elueringsbuffer mindre end 50 μL skal det sikres, at det dispenseres forsigtigt på membranens centrum. Dette hjælper med den fuldstændige elution af det bundne DNA. Elutionsvolumenet er dog ikke fast og kan ændres i henhold til downstream-applikationerne. Det genvundne eluat kan være op til 5 μL og bestemt mindre end det elueringsvolumen, der påføres kolonnen.\nCentrifuger det genvundne eluat i en mikrocentrifuge ved 20.000 x g i 1 min. for at eluere nukleinsyrerne og opbevares ved -20 °C.\n4. Rensning af genomisk DNA fra buffy coat\nBEMÆRK: Kommerciel kit, der anvendes i denne protokol er nævnt i tabellen over materialer. Buffere og reagenser, der er nævnt i nedenstående protokol, dvs. Lysis buffer A, Lysis buffer B, Wash buffer X, Wash Buffer Y, Proteinase Buffer, Elution buffer og Proteinase K er en del af dette kommercielle sæt.\nUdarbejdelse af stødpuder og reagenser\nADVARSEL: Tilsættes ikke sure opløsninger eller blegemiddel direkte til prøveforberedelsesaffaldet. Guanidinsalte i Lysis buffer B og Wash buffer X, når de kombineres med blegemiddel eller syrer, kan producere meget reaktive forbindelser.\nVask Buffer Y: Bland godt 12 mL Vask Buffer Y koncentrat med 48 mL ethanol (96-100%) for at opnå 60 mL fungerende vaskebuffer Y. Opbevares ved stuetemperatur.\nBEMÆRK: 60 mL vaskebuffer Y er tilstrækkelig til behandling af 100 buffy frakkeprøver og er stabil i 1 år.\nProteinase K: Forbered Proteinase K-opløsning ved at opløse 30 mg lyofil proteinase K i 1,35 ml Proteinase Buffer.\nBEMÆRK: Den samlede arbejdsopløsning af Proteinase K er tilstrækkelig til behandling af 52 buffy coat prøver. Proteinase K arbejdsopløsning kan opbevares i mindst 6 måneder ved -20 °C.\nTrin før indledning af proceduren\nEkvilibrere buffy pels til stuetemperatur.\nSæt varmeblokken eller vandbadet til 56 °C.\nOphæng buffy coat i Lysis buffer A for at opnå et endeligt volumen på 200 μL. Derefter tilsættes 25 μL Proteinase K-opløsning og 200 μL Lysis buffer B. Blandes ved hvirvelstrøm og inkuberes ved 70 °C i 10-15 min. Sørg for, at prøverne er helt dækket af lysisopløsningen.\nBEMÆRK: Til behandling af serier af prøver kan Proteinase K og Lysis buffer A forblandes 10-15 minutter før proceduren, men ikke længere før det, da Proteinase K selv fordøjer i Lysis buffer A uden substrat.\nTilsæt 210 μL 96-100% ethanol til ovennævnte blanding og vortex kraftigt.\nBEMÆRK: Tilsætning af ethanol kan danne et trævlet bundfald; Dette vil dog ikke påvirke DNA-isoleringen. Sørg for at indlæse bundfaldet også på kolonnen som vist i følgende trin.\nHele prøven anbringes på silicasøjlen i et opsamlingsrør. Centrifuge i 1 min ved 11.000 x g. Placer kolonnen i et nyt opsamlingsrør, og kassér det forrige rør sammen med gennemstrømning.\nBEMÆRK: Gentag centrifugeringstrinnet, hvis prøven ikke trækkes helt gennem matrixen.\nDer tilsættes 500 μL vaskebuffer X, centrifuge i 1 min ved 11.000 x g, og gennemstrømningen kasseres.\nKolonnen anbringes i opsamlingsrøret, der tilsættes 600 μL vaskebuffer Y på kolonnen, centrifuge i 1 min ved 11.000 x g, og gennemstrømningen kasseres.\nIgen skal kolonnen placeres i opsamlingsrøret og centrifuge kolonnen i 1 min ved 20.000 x g for at tørre silicamembranen.\nKolonnen inkuberes ved stuetemperatur i 1 min., anbringes i et mikrocentrifugerør på 1,5 mL og tilsættes derefter 100 μL Elution-buffer. Derefter elute DNA ved centrifugering i 1 min ved 11.000 x g og opbevares ved -20 °C.\n5. Kvantificering af CFDNA og genomisk DNA ved hjælp af fluorometer\nFør du starter protokollen, skal du udføre følgende trin.\n2 μL elueret genomisk DNA fortyndes (fra trin 4.9) i 1:10 proportioner med ultrapur kernefrit vand. På grund af forventede lave koncentrationer må cfDNA-prøverne ikke fortyndes fra trin 3.15.\nEkvilibrere analysen Standard #1 og assay Standard #2 til stuetemperatur.\nForbered i alt 6 tyndvæggede klare rør på 0,5 mL størrelse.\nBEMÆRK: Den fremlagte protokol er til kvantificering af 2 cfDNA og 2 genomiske DNA-prøver, derfor kræver 4 rør til 4 prøver, og denne analyse kræver 2 standarder.\nMærk rørets låg.\nBEMÆRK: Mærkning på siden af røret kan forstyrre aflæsningen. Derudover er assaystandardrørene mærket omhyggeligt, da kalibrering af fluorometeret kræver, at standarderne er i den rigtige rækkefølge.\nAnalysereagenset fortyndes i 1:200 med Assay-bufferen for at forberede arbejdsopløsningen. For 4 prøver og 2 standarder skal der anvendes 6 μL assayreagens plus 1.194 μL Assay-buffer til fremstilling af 1.200 μL (200 μL i hvert rør) af arbejdsopløsningen.\nBEMÆRK: Brug ikke en glasbeholder, brug i stedet et rent plastrør. Hvert rør skal indeholde ca. 200 μL af det endelige volumen (et analysestandardglas skal indeholde 190 μL af arbejdsopløsningen, og prøveglasset skal indeholde 180-199 μL af arbejdsopløsningen). Der skal være tilstrækkelig arbejdsopløsning til at rumme alle assaystandarder og -prøver.\nI arbejdsanalysestandardrørene tilsættes 190 μL arbejdsopløsning og 10 μL assaystandard og blandes opløsningen ved hvirvelstrømning i 2-3 s. Undgå dannelse af bobler i opløsningen.\nI prøverørene tilsættes 198 μL arbejdsopløsning og 2 μL cfDNA eller genomisk DNA. Opløsningen blandes ved hvirvelstrømning i 2-3 s, og den inkuberes ved stuetemperatur i 2 min.\nPå fluorometerinstrumentetsstartskærmskal du trykke på 'DNA' og vælge 'dsDNA Høj følsomhed Assay', for at vise skærmen 'Standarder', og tryk derefter på 'Ja' på fluorometeret 'Standards' skærmen for at læse standarderne.\nIndsæt analysen Standard #1 rør i prøvekammeret, luk låget, og tryk på 'Læs'. Fjern røret, når aflæsningen er afsluttet (ca. 3 s), og gentag det samme trin for Standard #2.\nDer vises en prøveskærm, når kalibreringsprocessen er afsluttet, hvorefter der indsættes et prøverør og gentages trin '5.8'. "Prøveskærmen" viser derefter en værdi, der svarer til prøvens koncentration efter fortynding i prøveglasset.\nFor hvert eksempel gentages trin '5.9', indtil alle prøver læses.\nBrug følgende ligning til at beregne stikprøvens faktiske koncentration.\nBEMÆRK: Analyseværdierne er i ng/mL og svarer til koncentrationen efter fortynding i assayrøret. Ligning nævnt i ovenstående trin 5.11, QF-værdi er den værdi, der er angivet af fluorometerinstrumentet, og x er antallet af mikroliter af prøven, der tilsættes analyserøret. Enhederne for QF-værdier, der genereres af ligningen, svarer til den værdi, der leveres af fluorometeret. Hvis fluorometerets værdi f.eks.\n6. DNA-fragmentstørrelsesfordeling af cfDNA efter fragmentanalysator\nTrinnet før proceduren påbegyndes: Ekvilibrere DNA-farvestofkoncentratet og DNA-gelmatrixen til stuetemperatur i 30 minutter.\nFremstilling af gel-farvestof mix\nADVARSEL: Håndter opløsninger med forsigtighed, da DMSO er kendt for at lette indtrængen af organiske molekyler i væv.\nTø DMSO grundigt op ved at hvirvle DNA-farvestofkoncentratglasset i 10 s. 15 μL af dette koncentrat pipetters ud i et DNA-gelmatrixglas og opbevares ved 4 °C i mørke.\nIgen, vortex det udjævnede hætteglas i 10 s indtil blanding af gel og farvestof er visualiseret.\nHæld blandingen på et spinfilter til den øverste beholder.\nSpinfilteret mikrocentrifuge ved 2.240 x g ± 20% i 10 minutter ved stuetemperatur.\nMærk det tilberedte gelfarvestof i røret, og kassér filteret i henhold til god laboratoriepraksis. Mærk røret, og registrer tilberedningsdatoen.\nBEMÆRK: Kassér filtratet i henhold til god laboratoriepraksis. Gelfarveblandingen kan bruges til 5 HS DNA-chips (High Sensitivity). Hvis den ikke bruges i mere end 1 time, opbevares den ved 4 °C. Opbevaring i mørke er mulig i op til 6 uger.\nFor at indlæse gelfarveblandingen skal du sikre placeringen af bundpladen på spånprimingstationen og justere klemmen på den laveste position.\nUdjævning af gel-farvestofblandingen til stuetemperatur i 30 minutter, mens lyseksponering overvåges.\nTag en ny HS DNA-chip fra en forseglet pose og læg den på spånprimingstationen, fjern derefter 9,0 μL af gelfarveblandingen og dispenser den i bunden af chippen, markeret som 'G'.\nBEMÆRK: Tegn gelfarveblandingen, og undgå partikler, der kan ophobes i bunden af hætteglasset. Mens du dispenserer gelfarveblandingen i HS DNA-chippen godt, skal du indsætte spidsen af pipetten helt for at forhindre dannelsen af store luftbobler. Desuden vil berøring af pipetten i kanterne af brønden give dårlige resultater.\nPlacer stemplet ved 1 mL, og luk spånprimingstationen. Sørg for, at låsen af låsen klikker og indstille timeren til 60 s, og tryk derefter stemplet ned, indtil det holdes af klippet, og præcis efter 60 s, slip stemplet med klip-release mekanisme.\nNår stemplet trækker sig mindst tilbage til 0,3 mL-mærket, skal du vente i 5 s og derefter langsomt trække sig tilbage til 1 mL-positionen, derefter åbne spånprimingstationen og igen fjerne 9,0 μL af gelfarveblandingen og dispensere i bunden af HS DNA-chippen, mærket som 'G'.\nFor at indlæse DNA-markøren skal du dispensere 5 μL af DNA-markøren i brønden, markeret med stigesymbolet. Gentag proceduren for alle de 11 prøvebrønde.\nFor at indlæse stigen og prøverne skal 1 μL af DNA-stigen anbringes i brønden, markeres med stigesymbolet, og der tilsættes derefter 1 μL prøve (brugte brønde) eller 1 μL markør (ubrugte brønde) i alle 11 prøvebrønde.\nHvirvel HS DNA-chippen i 60 s ved 2.400 omdrejninger i minuttet ved at placere chippen vandret i adapteren. Sørg for, at den bule, der fikserer HS DNA-chippen, ikke beskadiges under hvirvelstrømning.\nHvis du vil indsætte HS DNA-chippen i fragmentanalysatorinstrumentet, skal du åbne låget og sikre, at elektrodepatronen er korrekt indsat, og at spånvælgeren er placeret til 'dsHigh Sensitivity DNA' i fragmentanalysatorinstrumentet.\nMonter forsigtigt HS DNA-chippen i beholderen, som kun passer én vej, og tab derefter låget ved at sikre, at elektrodepatronen passer nøjagtigt ind i HS DNA-chippens brønde.\nDisplayet på fragmentanalysatorsoftwareskærmen angiver den indsatte HS DNA-chip og det lukkede låg gennem chipikonet øverst til venstre på skærmen.\nFor at starte HS DNA-chippen skal du vælge dsDNA High Sensitivity Assay i menuen 'Assay' på instrumentskærmen og derefter udfylde tabellen med eksempelnavne korrekt ved at fodre oplysninger som eksempelnavne og kommentarer og starte chippen ved at klikke på knappen'Start' øverst til højre på skærmen.\nElektroderensning efter en HS DNA-chipkørsel: Fjern straks den anvendte HS DNA-chip, så snart analysen er afsluttet, og kassér den i henhold til god laboratoriepraksis. Udfør følgende procedure for at sikre, at elektroderne er rene, uden rester fra den foregående analyse.\nFyld langsomt 350 μL deioniseret analysekvalitetsvand i en af elektroderenseringsbrøndene, og placer elektroderenseren i fragmentanalysatorinstrumentet ved at åbne låget og luk derefter låget og vent i ca. 10 s.\nFjern elektroderenseren ved at åbne låget og vente på yderligere 10 s, for at vandet på elektroderne fordamper, før låget lukkes.\n8,5-9 mL blod indsamlet i cfDNA eller cfRNA konserveringsmiddel rør giver omkring ~ 4 mL plasma i volumen. Mængden af plasma adskilt fra blod indsamlet i EDTA-rør kan variere afhængigt af temperaturen. Eksponering af EDTA-rør, der indeholder blod ved en temperatur på over 37 °C, fører til nedsat udbytte af plasmavolumen44.\ncfDNA-koncentrationen i 1 mL plasma hos hver af gliompatienter #1 og #3 og sunde kontroller #H1, #H2 og #H3 var henholdsvis 137 ng, 12,6 ng, 6,52 ng, 2,26 ng og 2,48 ng. Hos gliompatienten var #2 cfDNA-koncentration imidlertid for lav til at blive påvist i et fluorometer. cfDNA koncentration i en kræftpatients 1 mL plasma varierer fra 0,5 til >1000 ng18, med en gennemsnitlig værdi på 20 ng. Hos raske personer varierer cfDNA-koncentrationen fra en ikke målbar koncentration til 16 ng med en middelværdi på 8 ng45. Genomisk DNA isoleret fra 200 μL buffy coat (PBMCs) giver omkring 25- 50 μg DNA.\nIfølge en tidligere undersøgelse, cfDNA er beriget i 166-bp lange fragmenter, som tegner sig for ~ 85% af den samlede cfDNA i en patients plasma. I modsætning hertil tegner 332-bp lange fragmenter sig for 10%, og 498 bp lange fragmenter tegner sig for 5% af cfDNA46. To hovedfaktorer, der påvirker cfDNA fragmentanalysatoranalyseresultaterne, er genomisk DNA-forurening fra PBMCs og lav koncentration af cfDNA. Figur 1 viser den forventede cfDNA-bioanalyzergraf af gliompatient #1, hvor cfDNA-fragmenter beriges ved 166 bp, og der ikke er nogen genomisk DNA-kontaminering i prøve21. Figur 2 viser fragmentberigelsesgrafen, efter at NGS-biblioteksforberedelsen af gliomapatientens cfDNA #1 og fragmentberigelse flyttes fra 166 bp til 291 bp på grund af fastgørelse af 125 bp-indekser og adaptere til den. Figur 3 viser meget let berigelse af cfDNA-fragmenterne af gliompatient #2. På trods af den lave cfDNA-koncentration i gliompatient #2 fører tilføjelsen af NGS-adaptere til cfDNA- og PCR-forstærkningstrinnene til den synlige cfDNA-bibliotekstop på fragmentberigelsesgrafen Figur 4. Biblioteket blev derfor udarbejdet med succes ud fra denne cfDNA-prøve med lav koncentration, som vist i figur 4. I figur 5, cfDNA fragmenter af gliom patient #3 har vist sig at toppe nær 166 bp, men genomisk DNA-forurening er også synlige i nærheden af 10380 bp reference stigen peak.\nFigur 1: En ideel cfDNA fragment analysatoranalyse graf af gliom prøve #1 cfDNA. Et stort højdepunkt blev observeret ved 166 bp og en mindre top blev observeret på 332 bp. Der blev ikke set nogen genomisk kontaminering i denne prøve, som forekommer tæt på den øvre markør på 10.380 bp. Klik her for at se en større version af dette tal.\nFigur 2: En ideel cfDNA fragment analysator analyse graf af gliom prøve #1 cfDNA bibliotek. Efter ligating 125 bp næste generation sekventering bibliotek adaptere, 166 bp og 332 bp cfDNA fragmenter viste en stor top på 291 bp og en mindre top på 457 bp hhv. Klik her for at se en større version af dette tal.\nFigur 3: cfDNA fragment analysatoranalyse graf af gliom prøve #2 cfDNA, viser en meget lille top på 166 bp. På grund af den lave koncentration af cfDNA, peak på 166 bp var næppe synlig. Klik her for at se en større version af dette tal.\nFigur 4: cfDNA fragment analysatoranalyse graf af cfDNA bibliotek af gliom prøve #2. Efter ligating 125 bp næste generation sekventering bibliotek adaptere og udfører PCR cykler under biblioteket forberedelse, knap synlige cfDNA peak på 166 bp eller helt usynlige toppe på 332 bp og 498 bp, var tydeligt synlige. Et stort højdepunkt var til stede tæt på 291 bp og et mindre højdepunkt på 457 bp, 623 bp, 789 bp og nær 2.500 bp blev observeret. Klik her for at se en større version af dette tal.\nFigur 5: cfDNA fragmentanalysatoranalyse, der viser genomisk DNA-kontaminering i gliomprøven #3 cfDNA. En lille top på 166 bp indikerede tilstedeværelsen af cfDNA og berigelse nær øvre markør (10.380 bp) var genomisk DNA-forurening. Klik her for at se en større version af dette tal.\nTabel S1: Mængder af lysis buffer og bæretøj RNA (opløst i Buffer AVE), der kræves til behandling af 1 mL plasmaprøver. Klik her for at downloade denne tabel.\nIndsamling af en patients blod i et rør, forsendelse og opbevaring er afgørende indledende skridt i flydende biopsi. Forkert håndtering kan forringe plasmaets kvalitet og kan derfor forstyrre resultaterne af den flydende biopsi47. Hvis der opsamles en blodprøve i et EDTA-blodrør, skal plasmaet adskilles inden for to timer efter blodopsamlingen for at undgå lysis af WBCs og frigivelse af dets genomiske DNA i plasmaet48. WBCs kan også gennemgå apoptose i et EDTA-rør, hvis de opbevares i længere tid, og de resulterende cfDNA-fragmenter kan forurene original cfDNA i plasmaet48. Udsættelse af en blodprøve for en høj temperatur (>37 °C) eller overdreven omrystning af røret før plasmaadskillelse forårsager hæmolyse. Hæmoglobinet, der derfor forbliver som forurenende stof i plasma, påvirker cfDNA's downstream-processer, f.eks. Høj temperatur (>37 °C) påvirker også udbyttet af plasma i et EDTA-blodrør. Derfor er hurtig adskillelse af plasma efter dets indsamling i et EDTA-rør50 et vigtigt skridt i kvalitetskontrol af metoden. Hvis der opsamles blod i kommerciel cfDNA- eller cfRNA-konserveringsrør, skal konserveringskemikaliet blandes med blodet umiddelbart efter blodopsamlingen40. Hvis konserveringskemikaliet ikke blandes korrekt, føres der til dannelse af mikroclots i plasmaet. Disse tilstopper silicamembranerne i en kolonne under cfDNA-ekstraktionsprocessen og sænker udbyttet af cfDNA. Moderat rystelse af blod i røret forårsager ikke hæmolyse; selv om overdreven rysten kan forårsage hæmolyse selv i disse rør40. Derfor bør overdreven omrystning undgås under forsendelse eller håndtering af disse rør. Blodrør anbefales at blive afsendt i oprejst stilling.\nDen nøjagtige kvantificering og vurdering af cfDNA-koncentrationen pr. enhedsplasma er et vigtigt skridt i flydende biopsi, da plasma cfDNA-koncentrationen er direkte forbundet med fysiologiske og patologiske processer51. CFDNA-koncentrationen er højere hos patienter med kræft end hos raske forsøgspersoner52. Øget cfDNA koncentration i humant blod er ikke specifik for kræft; gravide kvinder og patienter, der modtager transplantationer også en tendens til at have forhøjet cfDNA koncentrationer i blodet21. Foreninger har også vist sig for inflammation, vævstraume, diabetes, myokardieinfarkt og sepsis med et øget niveau af cfDNA-koncentration53. Koncentrationen af plasma cfDNA i tidlig fase kræftpatienter tendens til at være lavere end hos patienter med avancerede eller metastatiske tumorer. Dette understøtter en direkte tilknytning af cfDNA med en tumorbyrde54. CFDNA-koncentrationen i blodet varierer betydeligt mellem 0,5 og >1000 ng/mL hos kræftpatienter og mellem 0 og 100 ng/mL hos raske forsøgspersoner18. Til biblioteksforberedelsen kræves mindst 0,5 ng cfDNA. For at opnå den mindste efterspørgselsmængde af cfDNA til sekventering kan man starte med mindst 2 mL af en blodprøve eller 1 mL plasmaprøve. Desuden reducerer tekniske fejl under plasma cfDNA-ekstraktionen også cfDNA-udbyttet og den deraf følgende koncentration og afviger derved fra den faktiske plasma cfDNA-koncentration. cfDNA-nedbrydning kan forekomme på grund af antikoaguleringsmidler i EDTA-rør eller på grund af processen med flere optøning og frysning af plasmaprøver. En dårlig aktivitet af proteinase K under lysis processen resulterer også i et lavt udbytte af cfDNA. Proteinase K aktivitet falder på grund af sin langvarige eksponering for høje temperaturer. Brugen af lav koncentration ethanol i stedet for 96-100% under cfDNA ekstraktion vask trin forårsager også et lavt udbytte af cfDNA. Derfor er det vigtigt at undgå tekniske fejl i den flydende biopsiteknik for at opnå nøjagtige og pålidelige resultater.\nKvalitativ analyse af cfDNA er et centralt trin, hvor den faktiske fordeling af DNA-fragmenter, der er til stede i den udvundne cfDNA-prøve, anslås. Kvantitative resultater af cfDNA er først pålidelige efter at have bekræftet dens renhed ved kvalitativ analyse. Derfor viser en ideel graf over cfDNA genereret i DNA-fragmentanalysatoranalysen berigelse af den store top af cfDNA-fragmenter nær 166 bp og en mindre top nær 332 bp længde. Dette indikerer, at den udvundne CFDNA-prøve ikke er forurenet med genomisk DNA fra WBCs. Hvis et fragment er beriget fra 7.000 bp til referencestigen (10.380bp) og videre, indikerer dette forurening af en cfDNA-prøve med WBC genomisk DNA. Hvis genomisk DNA-kontaminering ses i en cfDNA-prøve efter skøn over DNA-fragmentstørrelse, kan prøven køres på 2% agarosegel med en 100 bp stige, og gel kan fjernes mellem intervallet ~ 150-200 bp, efterfulgt af en gelekstraktionsanalyse. En vis mængde cfDNA går tabt under agarose gel størrelse udvælgelsesprocessen. NGS-bibliotekets forberedelsestrin kræver dog mindst 0,5 ng og maksimalt 1.000 ng input-DNA-materiale for at forberede biblioteker til sekventering. Derfor, hvis den samlede mængde cfDNA er lig med eller mere end 0,5 ng, er det nok mængde til biblioteksforberedelsestrin. Desuden passerer sådanne prøver biblioteksforberedelsesprocessen med succes, og det resulterende bibliotek viser et stort højdepunkt tæt på 291 bp og en mindre top på 457 bp på grund af tilføjelsen af 125 bp-indekser og adaptere.\nNGS-dataanalysen er det sidste trin i den NGS-baserede flydende biopsiteknik, og lister over mutationer og gengenfusioner3,55,56,57 genereres i dette trin. Mutationer og gengenfusioner, der identificeres, kan vurderes i henhold til tidligere undersøgelser af kræftmutationslandskaber58,59, tidligere karakteriserede genmutationer60 eller gengenfusioner61,62,63. Disse kan tjene som prognostiske64 og diagnostiske7 biomarkører hos kræftpatienter. For eksempel er R132H-mutationen i isocitrat dehydrogenase 1 (IDH1) genet et afgørende tegn på sekundær glioblastoma kræft, og adskiller det også fra primær glioblastoma, hvor denne mutation normalt er fraværende65. Desuden er kronisk myelogen leukæmi (CML) karakteriseret ved en BCR/ABL1 genfusion som følge af en afbalanceret translokation mellem kromosom 9 og 2261. BCR/ABL1-genet og dets mRNA- og fusionsprotein er unikke for CML-forfædre og udgør derfor et godt mål for behandling66.\nAvanceret diagnose, den korrekte iscenesættelse af tumor og behandling overvågning er en aktuel strategi for effektiv forvaltning af kræft. Indtil for nylig har vævsbiopsi været guldstandarden for den histologiske evaluering af tumorvæv. Men efter stor forskning på dette område og fremkomsten af teknologi har det vist sig, at en enkelt biopsi ikke er i stand til at give hele mutationslandskabet af en tumor, og at serielle biopsier normalt er upraktiske at udføre på grund af deres invasivitet, især i glioblastoma og lymfom, hvor biopsier er meget invasive. Derudover er ca. 16% af nålebiopsier forbundet med proceduremæssige komplikationer67. Desuden kræver genomisk profilering af høj kvalitet en tilstrækkelig mængde væv, et krav, der normalt ikke opfyldes af nålebiopsi68.\nDen flydende biopsier, fra en rutinemæssig blodprøve ved at analysere tumor-afledt DNA viser sig at erstatte eller adjungere den rutinemæssige nål væv biopsi procedurer12. Analyse af tumor-afledt DNA / cfDNA gennem plasma ved flydende biopsi er en minimalt invasiv og effektiv procedure for molekylær profilering af tumorer. Det kan i det væsentlige tillade behandling overvågning ved seriel prøveudtagning over tid uden de potentielle risici og komplikationer normalt forbundet med traditionelle tumorvæv biopsi på grund af sin invasive karakter69. Desuden fandt undersøgelser, der sammenligner nålebiopsien med cfDNA-analyse ved flydende biopsi af en enkelt tumorlæsion, at cfDNA-profilering kan tilbyde en fuld molekylær heterogenitet, at en tumor kan huses af flere forskellige klonpopulationer70.\nMen selv om plasma cfDNA baseret diagnose har mange fordele i forhold til tumorvæv biopsi, der er stadig nogle afgørende begrænsninger, der hæmmer dens anvendelighed i den generelle kliniske praksis. Begrænsninger af cfDNA-baseret væskebiopsidiagnose omfatter de højere omkostninger ved den overordnede procedure, behovet for DNA af høj kvalitet og en dedikeret bioinformatiker for nødvendigheden af en omfattende dataanalyse71. På grund af datastyringsproblem forbundet med cfDNA-analyse giver NGS også problemer i sin umiddelbare anvendelse i klinikken. Udfordringerne ved den datastyring , som NGS udgør , skyldes primært vanskeligheden ved at skelne mellem den iboende baggrundsstøj fra dyb sekventering og de afvigelser , der er forbundet med tumoren72. Endelig er de på grund af den manglende adgang til de kliniske validitets- og nyttedata for størstedelen af de flydende biopsianalyser i øjeblikket kun begrænset til kliniske undersøgelser og grundforskning13.\nDen fremtidige udvikling inden for den flydende biopsi teknik, forventes gennem kombineret indsats fra grundforskning inden for biologi, fysiologi, molekylær biologi, analyseteknikker, statistisk analyse til datastyring og maskinlæringsteknologi73,74. Derudover er adskillige kliniske forsøg baseret på cfDNA biomarkør evaluering i gang, og deres resultater vil bidrage til at fastslå gyldigheden af teknikken. Disse kombinerede indsats forhåbentlig vil etablere den flydende biopsi platform gennem cfDNA analyse som en kraftfuld prognostiker, diagnostiske og behandling overvågning værktøj i onkologi kliniske indstilling inden for de næste fem år70,75.\nAfslutningsvis tilbyder cfDNA-baseret flydende biopsi en sikker og ikke-invasiv tilgang til identifikation af genomiske biomarkører, der er nyttige i kræftsygdomsstyring. For at opnå pålidelige og nøjagtige resultater kræves der dog især standardiserede protokoller for blodindsamling, plasma/WBC-adskillelse, cfDNA-ekstraktion og cfDNA-kvantitativ og kvalitativ analyse74,75.\nForfatterne vil gerne takke medlemmerne af Laboratoriet for Cancer Genomics og Biocomputing af komplekse sygdomme for deres ivrige observationelle input og deres deltagelse i flere diskussioner på forskellige stadier af dette projekt. Finansieringsstøtten omfatter Israel Cancer Association (ICA-tilskud til M.F-M 2017-2019) og Kamin-tildeling af Israel Innovation Authority (til M.F-M.).


Forord. Jeres forening spiller en central rolle på energibesparelsesområdet. Konstruktørforeningens beretning - PDF\nForord. Jeres forening spiller en central rolle på energibesparelsesområdet. Konstruktørforeningens beretning\nDownload "Forord. Jeres forening spiller en central rolle på energibesparelsesområdet. Konstruktørforeningens beretning 2008-2010"\n2 Konstruktørforeningens beretning Forord Jeres forening spiller en central rolle på energibesparelsesområdet. Klimaminister, Lykke Friis Sådan skrev klimaminister Lykke Friis til Konstruktørforeningen i Vi har i de seneste 2 år været meget synlige på tinge med vores forslag til, hvordan vi kan finansiere energirenovering, og hvordan vi mere aktivt kan anvende bygningers energimærker. Læs om: Økonomien. 3 Organisationen 4 Lavkonjunkturen 5 Overenskomster. 6 Tillidsrepræsentanter 9 Uddannelse 10 Byggepolitik. 12 Studerende 13 Regioner. 14 Mange ledige, mange konkurser og mange bygningskonstruktører, der har haft brug for Konstruktørforeningen. Det er nogle af de temaer, som du kan læse om i denne beretning for Men det hele har da heldigvis ikke været negativt, og det vil du selvfølgelig også se, når du læser videre. Lige her vil jeg nøjes med at fremhæve, at det nu lovmæssigt er slået fast, at bygningskonstruktører senest i 2015 skal uddannes på en professionshøjskole. Dér, hvor mange andre med en professionsbacheloruddannelse, uddannes. Det siger næsten sig selv, at det anerkender vores profession på det høje niveau, som vi rent faktisk uddannes og arbejder på, og det kan vi med stolthed bruge, når vi skal ud at forhandle løn og andre arbejdsvilkår. En anden god nyhed er, at vi sammen med en lang række europæiske søsterorganisationer har vedtaget en gensidig anerkendelse af vores uddannelser. I den forbindelse udvikler vi et pas, et Professional Card, som vil gøre det meget nemmere for den enkelte bygningskonstruktør at få anerkendt sin uddannelse og sine kompetencer i hele Europa og resten af verden. Vi er også nået i hus med generationsskiftet i foreningen. Ved denne generalforsamling siger vi goddag til Morten Gass, der siden 1. august har været vores nye sekretariatschef, og vi siger farvel til Jens Staunsager Larsen, der nu velfortjent er gået på pension. Jens har været forretningsfører og sekretariatschef for Konstruktørforeningen siden 1980, og han spiller en stor og væsentlig rolle i vores historie. Han har været med til at opfinde og starte foreningen tilbage fra begyndelsen i 1966, og efterfølgende været en af de drivende kræfter i at styrke og udvikle foreningen til den stærke organisation, den er i dag. Det er derfor med stolthed, at vi kan takke Jens for hans indsats og overlade stafetten til næste generation. Når du fortsætter med at læse, vil du nok lægge mærke til, at beretningen denne gang er anderledes, end den plejer. Det skyldes, at vi har lyttet til medlemmerne, der i medlemsundersøgelsen 2009 har udtrykt ønsker om klarere kommunikation. Vi har derfor bestræbt os på ikke kun at referere, men også at gøre det tydeligt, hvor foreningen gør en forskel for medlemmerne. God læselyst Redaktionen er afsluttet 1. juli Ansvarshavende redaktør: Gert Johansen, formand for Konstruktørforeningen Redaktion og tekst: Ida Andkjaer Koch- Bjørnager, Jacob Ravn Thomsen, Jens Krarup Nielsen, Hans Erik Truelsen, Mette Nissen, Sanne Smith, Steen Engelund, Sanne Lindberg, Lisbet Praëm og Jens Staunsager Larsen. Foto: Gert Johansen Layout: KF Kommunikation Tryk: KF Oplag 200 eksemplarer September 2010 Formand for Konstruktørforeningen Gert Johansen 2\n3 Konstruktørforeningens beretning Pengene arbejder for medlemmerne På trods af krise er KF s økonomi sund. Udgifter og indtægter balancerer, og sådan skal det være, siger KF s bestyrelse. KF s penge skal nemlig arbejde for medlemmerne. I Konstruktørforeningen har vi nu fastholdt kontingentet på det samme niveau i 7 år. Det skyldes en medlemstilgang og en stram økonomistyring. Vores budgetter ændres løbende af bestyrelsen i forhold til medlemstilgangen og de medlemskrav og -ønsker, der stilles til foreningen. Dette er også sket i 2008 og Medlemsroser: Samlet ét sted Konstruktørforeningens medlemmer roser i medlemsundersøgelsen fra 2009 de faglige sekretærer for god rådgivning og for at være nemme at komme i kontakt med. Det skyldes, at Konstruktørforeningen for længst har valgt et koncept, hvor alle rådgivere er samlet ét sted. Det giver god tilgængelighed og høj kvalitet i rådgivningen med den sidegevinst, at administrationsomkostningerne er lave, fordi der kun er kontor ét sted. Til gengæld tager de faglige sekretærer ud i landet, eller medlemmerne får betalt billet til København, når der er behov for at mødes. Gode tillidsrepræsentanter Også vores tillidsrepræsentanter får i medlemsundersøgelsen stor ros for god dialog med medlemmerne. (Læs mere om medlemsundersøgelsen side 4). Større medlemstilgang end forventet i 2008 Af det fremlagte budget på generalforsamlingen i 2006 fremgik det, at bestyrelsen budgetterede med et overskud på kr ,- i Det blev dog lidt større og endte på kr ,-. Det skyldes især en større medlemstilgang end forudset. I 2008 blev budgettet ændret primært på ledelses- og informationsområderne. Vi ansatte flere medarbejdere for at klare et voksende krav om medlemsservice, og vi havde et ønske om at satse kraftigere på informationsområdet. Det sidste lykkedes ikke helt, da vi samtidig var i gang med en omstillingsproces på det organisatoriske område. Omstillingsprocessen betød desuden, at der blev brugt færre penge på de øvrige områder. Derfor kom vi ud med et større overskud, end det fremgår af det reviderede budget. Ny hjemmeside udskudt i Regnskabet for 2009 viser ligeledes et mindre overskud. I revisionen af budgettet for året 2009 blev der lagt en væsentlig udgift ind til ny hjemmeside. Som en direkte følge af den økonomiske krise måtte bestyrelsen ændre indsatsen og skifte fokus mod andre akutte opgaver. Derfor er ny hjemmeside udskudt til 2010/ Konstruktørforeningens regnskabsår følger kalenderåret, derfor er de regnskaber, der forelægges generalforsamlingen, regnskaberne for 2008 og 2009, selv om vi for denne generalforsamling i øvrigt aflægger beretning for 2009 og\n4 Konstruktørforeningens beretning Medlemmerne siger: Vi skal råbe højere Ved udgangen af 2009 undersøgte vi medlemmernes tilfredshed. Resultaterne rummer ros, men også forslag til forbedringer. De, der kender og bruger os, er meget tilfredse med vores service og tilbud. De, som endnu ikke har brugt os, er mere beherskede i deres tilfredshed. Vi skal derfor være bedre til at fortælle medlemmerne, hvad vi tilbyder f.eks. møder, kurser, forsikringer, rabatordninger mv. Kompetent og pålidelig Sammenlignet med andre faglige organisationer ligger medlemmernes loyalitet og tilfredshed i den høje ende af spektret. Organisationsprojekt i hus Bestyrelsens projekt om udvikling af organisationen er lykkedes over al forventning og på rekordtid. Målet var større politisk indflydelse, og det har vi fået. I sidste generalforsamlingsperiode startede vi et større projekt om udvikling af organisationen. Vi fik en mindre bestyrelse og en fuldtidsformand, Gert Johansen. Det betyder, at vi i dag har et endnu tættere samarbejde mellem politikere og medarbejdere, så vi kan arbejde effektivt og hurtigt. En anden gevinst er øget synlighed. Vi har fået mere bevågenhed fra store dele af branchen. Det giver muligheder for indflydelse, og det er en god udvikling, som vi skal understøtte og udbygge. Samtidig har vi fået større politisk indflydelse hos vores samarbejdspartnere, hovedorganisationen FTF og a-kassen FTF-A. På bagsiden af denne beretning kan du se, hvor vi er repræsenteret i dag. På grund af finanskrisen har vi været nødt til at opnormere på medarbejdersiden for bedre at kunne betjene de mange medlemmer, der er blevet berørt af krisen. Det har blandt andet betydet, at vi har nedprioriteret udviklingen af vores hjemmeside. Dygtige rådgivere Der er især stor tilfredshed med den individuelle rådgivning og med vores indsats for at sikre gode løn- og ansættelsesvilkår. Også arbejdet for at sikre kvalitet og udvikling af konstruktørfaget er der generel tilfredshed med. Kilde: Danmarks Statistik 4\n5 Konstruktørforeningens beretning Den økonomiske nedtur kan mærkes Den økonomiske krise har sendt ledighedstallene i vejret fra omkring to % i slutningen af 2008 til godt ti % i Mange bygningskonstruktører er kommet i klemme, og de faglige sekretærer har prioriteret at hjælpe dem over næsten alt andet. Vi har især set mange frivilligt tvungne kollektive arbejdstidsnedsættelser, masseafskedigelser, manglende lønudbetalinger, betalingsstandsninger og konkurser. Det sidste i et omfang, der overstiger alt andet i vores 44-årige historie. Udviklingen af konkurssager i Konstruktørforeningen År Antal sager Beløb (kr.) afregnet af Lønmodtagernes Garantifond , , , (indtil 30.06) ,- Rentefri lån giver tryghed Vi må ofte indgive konkursbegæring for at sikre, at medlemmerne kan få lønnen udbetalt gennem Lønmodtagernes Garantifond (LG). Ventetiden på at få lønnen udbetalt gennem LG har været usædvanlig lang omkring ti uger i snit. Medlemmerne har mulighed for at få et rentefrit lån hos os i månederne, mens de venter. Kreativ brug af korttidsansættelser mm. Mange medlemmer har oplevet, at arbejdsgivere, for at undgå opsigelser, indgik aftaler om frivillige arbejdstidsnedsættelser eller opsagde løntillæg. Det har haft en vis effekt, men for det meste har det bare udskudt opsigelserne. Samtidig har arbejdsgiverne gjort udbredt brug af gentagne korttidsansættelser, forlængelser af opsigelsesvarsler, bortvisninger og for korte opsigelsesfrister. Lovgivning sætter grænser for, hvor ofte/hvor længe, man må hænge i en konstant opsagt stilling. I en række tilfælde har vi grebet ind over for arbejdsgiveren eller i forhold til a-kassen, så vores medlemmer har fået det rigtige opsigelsesvarsel eller har undgået 3-ugers dagpengekarantæne. Der har også været flere bortvisningssager end tidligere nogle gange i et forsøg på at spare løn i opsigelsesperioden. Opsigelser blandt tillidsrepræsentanter og i kommuner Et tydeligt tegn på krisens omfang er, at mange tillids - og arbejdsmiljørepræsentanter er blevet sagt op; ofte i forbindelse med at hele afdelinger har lukket. Virksomhederne har ind imellem været for hurtige til at fyre de tillidsvalgte og har i en del tilfælde måttet betale for det. Vi følger denne udvikling meget tæt, så vi kan hjælpe og støtte vores tillidsvalgte på bedste vis. Også kommunerne opsiger bygningskonstruktører på grund af spareplaner. Foreløbig er 3 opsagt, men flere opsigelser kan forventes, da antallet af byggesager har været faldende. (fortsætter næste side). Særligt til ledige Populær jobavis Konstruktørforeningen søsatte i marts 2009 KF s Jobavis med ledige stillinger fra avisannoncer og hjemmesider. Avisen har mere end 1000 abonnenter, og er det medie, der scorede den allerhøjeste tilfredshed i Konstruktørforeningens medlemsundersøgelse Netværk styrker jobsøgningen Ni ud af ti jobs inden for byggebranchen fås via netværk. Konstruktørforeningen samarbejder derfor med FTF-A om at oprette og støtte netværk for ledige konstruktører. Netværkene styrker den enkeltes kompetencer til at søge job og støtter dem, der føler sig alene i jobsøgningen. Der er oprettet netværk i Aalborg, Århus, Odense og København. Målrettet jobsøgning Vi har i samarbejde med Arkitektforbundet afholdt jobsøgningskurser målrettet bygningskonstruktører og arkitekter. De, der har deltaget, vurderer, at kurserne er meget udbytterige. De er glade for undervisningen og den meget individuelle feedback. Relevante kurser Vi har foranlediget, at uddannelsesinstitutionerne nu udbyder konstruktørrelevante kurser, som ledige kan deltage i, mens de modtager, hvad der svarer til dagpengesatsen. 5\n6 Konstruktørforeningens beretning Internationalt: Netværk giver forståelse For at kunne rådgive medlemmer, der ønsker at søge arbejde i udlandet, samarbejder vi med en række organisationer i udlandet. I 2009 har vi tilføjet endnu en samarbejdspartner til de efterhånden mange, nemlig CIAT, som er standsforening for de engelske Architectural Technologists (AT). AT definerer sig selv som dem, der integrerer viden om byggeproces og byggeteknik i projekteringen af byggeriet. Vi udveksler erfaringer om andre landes arbejdsmarkeder og om at definere vores professioner som bygningskonstruktør og som Architectural Technologist. Vi deltager også i et internationalt netværk af organisationer og uddannelsesinstitutioner for Architectural Technologists. Nordisk samarbejde: Netværk på nordisk Vi deltager på tiende år i Nordisk Byggesymposium, som er et årligt møde for en række organisationer på byggeområdet. Her holder vi øje med, hvad der sker på det byggepolitiske område i de lande, som vi ofte sammenligner os med. Det styrker Konstruktørforeningens viden om uddannelse og byggepolitik, og det gør os bedre til at give de danske lovgivere input i forbindelse med høringer om ny lovgivning. Det giver også viden om at arbejde i de andre skandinaviske lande. (fortsat) Efterspørgsel efter opstartspakke til selvstændige Flere bygningskonstruktører har i det forløbne år valgt at gå vejen som selvstændige, så vores opstartspakke med relevant materiale til start af egen virksomhed har været brugt flittigt. Stigningen er dog ikke voldsom. Måske fordi krisen gør det svært at være nystartet rådgivningsvirksomhed. Bred vifte af klassiske medlemssager Ud over de nævnte kriseskabte aktiviteter, har vi hjulpet medlemmer i arbejdsskadesager og sager om dårligt arbejdsmiljø. Vi har rådgivet ved jobskifte, nyt job og støttet jobsøgere med sparring omkring ansøgninger og udformning af CV samt ydet bistand ved lønforhandling. Det har flere gange været nødvendigt at føre fagretslige sager, ydet retshjælp og ført civile retssager om overholdelse af overenskomster, ansættelseskontrakter og ved uberettigede afskedigelser. Vi har også henvist medlemmer til erhvervspsykologisk bistand. Overenskomstforberedelser i fuld gang Vi er i fuld gang med at planlægge de overenskomstforhandlinger, der skal gennemføres i 2010 og Vi forbereder i øjeblikket de overenskomstforhandlinger, som vi efter planen skal have i 2011 med arbejdsgiverforeningerne Danske Ark, Kommunernes Landsforening, Danske Regioner og Finansministeriet/Personalestyrelsen. Vi har sendt spørgeskema om overenskomstkrav ud til alle vores medlemmer, der er ansat under en af de overenskomster, der skal forhandles. På den baggrund forelægger vi kravene i vores bestyrelse i efteråret. Selv om resultaterne kun vanskeligt lader sig overføre til vores overenskomstområder, så kan det ikke undgås, at man skeler til de overenskomstresultater man har opnået på det private område i foråret Her er aftalt meget beskedne, samlede rammer på 1,5-2,5 % pr. år i 2-årige overenskomstperioder. Man har haft fokus på andre emner end løn. For eksempel bedre tryghed i ansættelsen gennem længere opsigelsesvarsler for timelønnede. I Grønland har vi bedt Selvstyret om et udspil til en køreplan for de overenskomstforhandlinger, der skal foregå i 2010, og vi forsøger at koordinere forhandlingerne med dem, der skal foregå på området for akademikere. Arkitektområdet: Nyt arbejdstids- og lønsystem drøftes I overenskomstforliget med arbejdsgiverforeningen Danske Ark aftalte vi i 2008, at vi inden næste overenskomstforhandling skulle drøfte nyt arbejdstids- og lønsystem. 6\n7 Konstruktørforeningens beretning Drøftelserne er i gang, og i samarbejde med vores overenskomstparter har vi gennemført en holdningsundersøgelse blandt alle ansatte og medlemsvirksomheder om: Fordele/ulemper ved det nuværende lønsystem. Nyt lønsystem med kortere lønskalaer, men større plads til individuelle lønforhandlinger. Holdninger til det nuværende arbejdstidssystem og til forenklinger af samme. Det er dog vores vurdering, at overenskomstforhandlingerne i 2011 enten bliver udskudt eller vil foregå inden for beskedne økonomiske rammer og med fokus på bløde forbedringer uden megen plads til at drøfte store reformer af løn - og arbejdstidssystemet. Det vurderer vi blandt andet på baggrund af tilkendegivelser fra Danske Ark om, at OK 2008 blev alt for dyr i lønstigninger. Antageligt vil Danske Ark gå langt for at opnå endnu lavere rammer, end dem man har aftalt på det private område. Ud over vores overenskomst med Danske Ark, så har vi på arkitektområdet overenskomster med 11 enkeltvirksomheder. Langt de fleste vil følge det resultat, vi opnår med Danske Ark i Kommuner/regioner: Overenskomstforhandlinger starter i minus De offentlige overenskomster bygger på aftalte procentvise lønstigninger i overenskomstperioden og en reguleringsordning, der regulerer lønnen ud fra lønudviklingen på det private område. Dette har altid givet en positiv lønregulering, men på grund af krisen har lønudviklingen på det private område denne gang været negativ. Det betyder en negativ regulering på det offentlige område i 2010 og Man har betalt en del af den negative regulering ved at formindske den aftalte lønstigning pr. 1. april 2010, men alligevel skyldes der måske 1,70 % i En stor modregning, som nødvendigvis må indgå i aftalen om en ny overenskomst. Sammenholdt med overenskomstresultatet på ca. 1,5-2,5 % på det private område i 2010 vil det være svært at finde plads til lønstigninger eller andet. Spørgsmålet er, om de nuværende overenskomster skal forlænges med et år, for på denne måde at betale så meget som muligt af gælden, inden næste forhandling. Staten: CO10 et nyt navn ved forhandlingsbordet Konstruktørforeningen er pr. 1. januar 2010 medlem af centralorganisationen CO10, som er en sammenlægning af centralorganisationerne, CO2 og OC, hvor vi tidligere var medlem. CO10 forhandler alle de generelle overenskomstkrav og forhandler sammen med Konstruktørforeningen kravene til vores organisationsaftale, der er den del af overenskomsten, der gælder for bygningskonstruktører. CO10 er med ved forhandlingsbordet ved samtlige forhandlinger, så forhandlingerne kan forløbe bedst muligt for den enkelte organisation. Det betyder, at vi på Statens område sender vores krav videre til centralorganisationen CO10, der koordinerer alle organisationernes krav, og sender dem til Finansministeriet/ Personalestyrelsen. Vi forventer, at egentlige overenskomstforhandlinger begynder omkring 1. november og slutter februar I forbindelse med overenskomstforhandlingerne holder vi tæt kontakt til tillidsrepræsentanterne. Ligesom vi vil udsende nyhedsbreve efter behov. (fortsætter næste side). Arkitektområdet: Voldgift om lønforhøjelser Vi har været uenige med arbejdsgiverforeningen, Danske Ark, om hvor store lønstigninger vi aftalte ved overenskomsten i Derfor har vi sammen med de faglige organisationer TL og Arkitektforbundet været igennem en voldgift. Den endte med, at fagforeningerne vandt klart. Kommunerne: Fornuftig lønforhandling Den kommunale overenskomst giver mulighed for, at der kan forhandles løn hvert år. I 2010 var der afsat 1,25 % af lønsummen til lønstigning, og der har været forhandlet i alle 98 kommuner i perioden oktober 2009 til april Konstruktørforeningens repræsentant har mindst én gang været til forhandling i 63 af kommunerne. Lokale tillidsrepræsentanter har stået for forhandlingen i fire kommuner. I ti kom-muner har vi ingen medlemmer ansat, og i resten af kommunerne er forhandlingen sket pr. eller lignende. Vores medlemmer har opnået ca. 3,5 % af lønsummen, og forhandlingerne er oftest endt med et resultat ca. dobbelt så stort som kommunens første udspil. Et resultat som kun få andre organisationer har opnået. 7\n8 Konstruktørforeningens beretning Helt konkret Fik sin fulde løn Et medlem med høj løn og ekstra langt opsigelsesvarsel blev under arbejdsgivers konkurs ramt af garantiloftet hos Lønmodtagernes Garantifond (LG). Efter LG s dækning manglede medlemmet ca kr. i løn efter skat. Konstruktørforeningen anmeldte kravet i konkursboet, der halvandet år senere tilkendegav, at medlemmet fik den manglende løn. Fik længere opsigelsesfrist Et medlem var projektansat på en tegnestue i fem måneder. Kontrakten blev forlænget med fire en halv måned og igen med to måneder. Konstruktørforeningen gjorde arbejdsgiver opmærksom på, at man ikke kan forlænge en projektansættelse tredje gang. Derfor havde vores medlem ret til tre måneders opsigelsesvarsel fra sidst aftalte forlængelse. Medlemmet fik udbetalt en månedsløn ekstra. Fik ønsket kursus En arkitektvirksomhed mente ikke, at der var penge til et kursus på en efteruddannelseskonto, fordi man havde trukket moms fra på efteruddannelseskontoen samtidig med, at momsen også blev trukket fra i virksomhedens regnskab. Først da sagen kom forbi vores sekretariat, erkendte man, at momsen ikke bør trækkes af efteruddannelsesmidlerne, og medlemmet kom på det ønskede kursus. (fortsat) Grønland: Mærkbare lønforbedringer i Grønland Den 2-årige overenskomst med Grønlands Selvstyre som vi underskrev i juni 2009 har en samlet bruttoramme på 8,42 %. Nyt er, at man nu kan anvende efter og videreuddannelsesfondens midler i kommende overenskomstperioder. Men først og fremmest indeholder overenskomsten en række mærkbare lønforbedringer bl.a. omklassificering af kvalifikationstillæg i forbindelse med kommunesammenlægningen i 2009, hvor Grønlands mange kommuner blev sammenlagt til 4 store. Det har skabt jobs, som medlemmerne i stigende tal har søgt. I den forbindelse har vi rådgivet flere, som var blevet indplaceret forkert ved omklassificeringen, og som reelt har fået nye stillinger med væsentlige ændringer i omfang/kompleksitet. Undervisere: Fælles overenskomst I foråret 2010 blev indledt forhandlinger om en ny overenskomst/organisationsaftale for undervisere på erhvervsakademierne. Der har været afholdt indledende møder mellem lønmodtagerorganisationen CO10 og Personalestyrelsen som arbejdsgiverrepræsentant og mellem CO10 og medlemsorganisationerne, herunder Konstruktørforeningen. De forskellige lærergrupper aflønnes ikke ens i dag, hvorfor kapitlet om aflønning kunne blive en af knasterne i indgåelse af en ny aftale. Forhandlingsforløbet er p.t. stoppet af Personalestyrelsen, uden at vi har fået oplyst grunden hertil. Internationalt Professional Card på vej I takt med at flere og flere virksomheder i rådgiver- og byggebranchen arbejder på projekter i udlandet, stiger antallet af bygningskonstruktører, der har brug for, at den danske uddannelse som bygningskonstruktør er anerkendt både i Danmark og i udlandet. I den anledning er vi sammen med organisationerne i AEEBC foreningen af europæiske bygningseksperter ved at lægge sidste hånd (red. juni 2010) på et internationalt legitimationskort, der sammen med en fælles europæisk titel, forhåbentlig kan få arbejdsgivere i udlandet til at anerkende vores uddannelse. Den europæiske titel bliver EurBE som føjes efter bygningskonstruktør. EurBE står for Europæisk Bygningsekspert. Det vil kræve en meget grundig vurdering af de faglige kompetencer, før man får lov til at søge om at bruge titel og legitimationskort. Som bygningskonstruktør skal man have minimum 2 års relevant erhvervserfaring. 8\n9 Konstruktørforeningens beretning Tillidsrepræsentanter i god dialog Vi har knap 80 tillidsrepræsentanter, der repræsenterer Konstruktørforeningen på arbejdspladserne. I har vores tillidsrepræsentanter jævnligt været samlet i de enkelte overenskomstgrupper blandt andet til seminarer om forhandlingsteknik og overenskomstforståelse. Alle var samlet til et fælles seminar med bestyrelse og regionsledelse i marts 2010 på Kolding Fjord. I august var 40 tillidsrepræsentanter samlet til seminar om overenskomster og forhandlingsteknik. 30 tillidsrepræsentanter i arkitektvirksomheder Konstruktørforeningen har i dag godt 30 tillidsrepræsentanter, der arbejder under vores overenskomst med arbejdsgiverforeningen Danske Ark. Til denne gruppe har vi udarbejdet en ny håndbog og nyt hvervemateriale samt tilbudt dem en del emnekurser om blandt andet stressforebyggelse og tillidsrepræsentantens roller ved opsigelser m.v. Vi har desuden iværksat en introduktionsuddannelse for nyvalgte i forhandlingsteknik og overenskomstforståelse. Det første kursus fik en meget positiv modtagelse. 47 tillidsrepræsentanter i kommuner og stat I kommunerne har Konstruktørforeningen i dag tillidsrepræsentanter i 41 % af kommunerne. Der er valgt 40 tillidsrepræsentanter og 26 suppleanter, og tallet er stigende. I øjeblikket har vi ingen tillidsrepræsentanter i regionerne, da det kræver, at der er mindst fem medlemmer af Konstruktørforeningen på en arbejdsplads. På Statens område er der i dag syv tillidsrepræsentanter. Forhandlingskartellet, der er en sammenslutning af 12 lønmodtagerorganisationer herunder Konstruktørforeningen, arbejder i øjeblikket på, at Forhandlingskartellets medlemmer får mulighed for at vælge en fælles tillidsrepræsentant i kommunerne. Det vil give mere indflydelse i det lokale MED-system. MED-systemet er en samarbejdsform, der skal sikre medarbejderne en ret til medindflydelse og medbestemmelse i kommunen og regionen. Vi forventer, at vores tillidsrepræsentanter i mange kommuner vil få en central rolle, når de repræsenterer medarbejdere fra hele 12 organisationer. Helt konkret Fik sin bonus Et medlem stoppede i en entreprenørvirksomhed, hvor arbejdsgiver ikke ville udbetale bonus, fordi det er virksomhedens faste politik ikke at give opsagte medarbejder bonus. Vi indgik forlig i sagen, og medlemmet fik udbetalt bonus som sine kolleger: kr. Fik sygedagpenge Et ledigt medlem havde gennem længere tid været sygemeldt med rygsmerter. Men kommunens sygedagpengekontor vurderede, at medlemmet var rask nok til at gå på arbejde og ville stoppe sygedagpengene. Hos a-kassen vurderede man omvendt, at medlemmet ikke var rask nok til at arbejde, og medlemmet kunne derfor ikke få dagpenge. Vi klagede over kommunens afgørelse og fik medhold. Medlemmet beholdt sygedagpenge. Kurser og rabat Vi samarbejder med en lang række partnere om at udvikle og udbyde kurser til bygningskonstruktører. Lige nu har vi især fokus på kurser for bygningskonstruktører i lederstillinger og for ledige. Vi har faste rabataftaler om kurser med Dansk Byggeri, Arkitektskolen i Aarhus, Akademisk Arkitektforening, Nohr-Con, Danske Byggeøkonomer, Dansk Brand- og Sikringsteknisk Institut og CadSkolen. Vi har rabataftaler på udvalgte kurser hos Byggecentrum og Energitjenesten. Desuden samarbejder vi om bl.a. kurser for ledige med de uddannelsesinstitutioner, der uddanner bygningskonstruktører. 9\n10 Konstruktørforeningens beretning Uddannelsesudvalget: Kvalitet i uddannelsen Vores medlemmer skal have de bedste beskæftigelsesmuligheder. Derfor arbejder vi i Konstruktørforeningens Uddannelsesudvalg for, at uddannelsen er relevant og af høj kvalitet. Uddannelsesudvalget bidrager til arbejdet i de lokale/regionale uddannelsesudvalg på skolerne. Det giver os relevant kontakt til og information om uddannelsesstederne. Uddannelsesudvalget (UU) består af: Konstruktørforeningens repræsentanter i de lokale/regionale uddannelsesudvalg på de enkelte uddannelsessteder, Konstruktørforeningens repræsentanter i FTF's Uddannelsesudvalg, i 19-udvalget og andre personer med særlig interesse eller viden om uddannelsen. De Konstruktørstuderendes Fælles Råd (KFR) kan udpege to til tre medlemmer til UU. Sammen med de øvrige professionsbachelorer For at sikre anerkendelsen af bygningskonstruktørens uddannelsesniveau har Konstruktørforeningen i flere år kæmpet for, at bygningskonstruktører skal uddannes sammen med andre på samme uddannelsesniveau. Ifølge Lov om Erhvervsakademier og Professionshøjskoler skal al uddannelse af bygningskonstruktører senest i 2015 rykkes over på professionshøjskoler. Det er vi glade for, fordi det giver de bedste lærings- og studiemiljøer på det rigtige kompetenceniveau, når vores uddannelse foregår sammen med de øvrige professionsbachelorer. Midlertidigt betyder den nye lovgivning dog, at bygningskonstruktøruddannelsen i overgangsfasen udbydes i forskellige samarbejder mellem erhvervsskoler, erhvervsakademier og professionshøjskoler. Det skaber et noget forvirret billede af, hvor man hører hjemme som bygningskonstruktørstuderende. (Se grafikken side 11). Godkendelse af lektorer forsinket Undervisere på professionshøjskoler er omfattet af Undervisningsministeriets såkaldte lektorbekendtgørelse og skal godkendes som lektorer. En godkendelse, der har til formål at sikre, at undervisere har det rette høje, faglige kompetenceniveau. Desværre kan man på uddannelsesinstitutionerne ikke gennemføre disse godkendelser, fordi arbejdet med den bekendtgørelse, der skal sætte rammerne for processen, endnu ikke er i gang. Vores repræsentanter i de lokale uddannelsesudvalg Pr University College Nordjylland, Aalborg: Anne Grete Andreassen. VIA University College, Horsens: Christian H. Thomsen. Århus, udlagt fra VIA UC: Jens Bech Vestergård. Holstebro, udlagt fra VIA UC: Kasper H.Ø. Jensen. Københavns Erhvervsakademi: Jakob Weidlich. EUC Sjælland (BTH-Haslev): Carsten Møller. Erhvervsakademi Sjælland: Gert Johansen. Erhvervsakademi Lillebælt, Odense: Poul Jørgen Christensen. Erhvervsakademi SydVest, Esbjerg: Poul Jørgen Christensen. Se vores bestyrelsesposter og repræsentationer i FTF og FTF-A på bagsiden af denne beretning. 10\n11 Konstruktørforeningens beretning Her bliver du bygningskonstruktør I dag kan man blive professionsbachelor i bygningskonstruktion i hele 8 byer. Men kun 2 steder foregår uddannelsen på en professionshøjskole. Nyt navn til udvalg Konstruktørforeningen har gennem en årrække samarbejdet med en stribe andre interessentorganisationer bl.a. Dansk Byggeri, Danske Arkitektvirksomheder, TL m.fl. i Erhvervsakademiudvalget for at sikre udvikling, kvalitet i og relevans af konstruktøruddannelsen. Med de nye love for erhvervsakademi- og professionsbacheloruddannelser er udvalget blevet et såkaldt 19-udvalg og hedder Professionsudvalget for bygningskonstruktører, byggeteknikere og kort- og landmålingsteknikere (PE- BA). Udvalget bistår Rådet for Erhvervsakademi og Professionsbacheloruddannelser (REP). Det overordnede formål er at sikre udvikling, kvalitet i og relevans af uddannelsen. Vi har overtaget næstformandsposten, og udvalget vil i den kommende tid beskæftige sig med: 1. Uddannelsens udvikling frem til evaluering af den nye lovgivning i 2013 og den endelige udmøntning i Fremtidens krav til kompetencer. 3. Internationalisering. 4. Digitalisering. 11\n12 Konstruktørforeningens beretning Kvalitet i byggeriet Stræben efter kvalitet i byggeriet giver gode arbejdsvilkår og spændende jobtyper til bygningskonstruktører. Det er baggrunden for, at vi i Konstruktørforeningen hele tiden arbejder på at opnå bedre kvalitet i byggeriet. Internationalt: Bedre lovgivning om byggeri Konstruktørforeningen samarbejder også med organisationer i andre lande for at få en fornuftig lovgivning om byggeri i EU. Vi er medlem af: Bips: (Byggeri, informationsteknologi, produktivitet og samarbejde). Bips er en forening, der samler og prioriterer udviklingsbehov og indsats for fælles metode og værktøjer på tværs af branchen. Dansk Facilities Management Netværk: Foreningens formål er at udbrede og udveksle viden om Facilities Management. Industrinetværk: Netværket henvender sig bredt til byggeriets aktører og benyttes til at udbrede viden om industrialisering af byggeriet. Lean Construction-DK: En forening der arbejder for bedre byggeprocesser. AEEBC: (Association d Experts Européens du bâtiments et de la Construction). AEEBC er en europæisk forening af eksperter i byggeri, der blandt andet arbejder for international anerkendelse af uddannelsen som bygningskonstruktør. Konstruktørfaget ER Ledelse og byggeprocesser Vi er repræsenteret alle steder, hvor vi kan fortælle, at konstruktører er de eneste i byggeriet med en uddannelse, der har fokus på byggeprocessen. Det er ikke noget, der giver os bedre jobmuligheder fra i morgen, men på sigt Konstruktørerne er de eneste i byggeriet med en uddannelse, som har fokus på byggeprocessen. Hvad enten konstruktører arbejder med projektering, udførelse eller andet, er det bygbarhed og selve processen frem mod det færdige produkt, der er kernen. Indflydelse gennem foreninger og offentlig debat Hvad en bygningskonstruktør kan er noget, vi fortæller alle steder, hvor historien kan og skal fortælles. F.eks. ved medlemskaber i foreninger som Lean Construction DK, Bips m.m. Vi har desuden kontakt til en lang række andre, Vinterkonsulenterne, Erhvervs- og Byggestyrelsen m.fl. Byggeriets kvalitet er fortsat det overordnede mål i vores politik, og vi har været synlige i medierne i forbindelse med rækken af bygningskollaps som følge af sne på tage i Nordjylland. Her førte vores offentlige kommentarer om bl.a. manglende byggesagsbehandling til, at oppositionen i Folketinget kaldte ministeren i samråd. Direkte indflydelse på arbejdsmiljølovgivningen I kraft af vores medlemskab af hovedorganisationen FTF, har vi deltaget i et regeludvalg, som har foreslået nye bekendtgørelser på området for arbejdsmiljø. Nogle af ændringerne handler om obligatoriske opstartsmøder og sikkerhedsrunderinger på større byggesager. Vi er desuden kommet med i Arbejdsmiljørådets temagruppe 3, hvor byggeriets parter diskuterer relevante tiltag. Her er vi bl.a. kommet med input til hjemmesiden byggeproces.dk og til den nye uddannelse som arbejdsmiljøkoordinator. Vi støtter udgivelsen af Bogen, Bedre Byggeprocesser Bogen, Bedre Byggeprocesser dokumenterer, at bedre samarbejde, 3D projektering og metoder fra trimmet byggeri kan give bedre byggeri og en bedre indtjening for branchen. Flere historier handler om konstruktører, der gør en forskel. Konstruktørforeningen har med sin Innovationspulje givet støtte til trykning af bogen, som udgives af Foreningen Lean Construction DK. Udbyttet for medlemmer: Synlighed og måske kan de lære noget Medlemspris: 100 kr. Bestil den på leanconstruction.dk Vi er repræsenteret i Styregruppen, MBA - Malerfaglig Behandlingsanvisning. Styregruppen, MBK Malerfagets Behandlings Katalog. EU kommissionens arbejdsgruppe om Guide til implementering af- Byggepladsdirektiv (for AEEBC). Følgegruppen til arkitektur på Bornholm. Arbejdsmiljø Rådets Regeludvalg på byggeområdet (for FTF). Branchearbejdsmiljørådet for Bygge & Anlæg. Temagruppe 3, styregruppe for forskningsprojekt Indikatorer på det fejlfrie byggeri. Vinterkonsulenterne. 12\n13 Konstruktørforeningens beretning Tæt kontakt til de studerende Vi vil gerne have en tæt kontakt med uddannelsesstederne og de studerende, så vi kan bidrage positivt til den lokale udvikling af uddannelsen og studiemiljøet. Konstruktørforeningen besøger jævnligt uddannelsesinstitutioner og studerende og holder møder for studerende på 1. og 7. semester. På møderne i 1. semester får de studerende et indblik i fagets historie, professionen, brancher og beskæftigelse. Samtidig får de en introduktion til Konstruktørforeningen og medlemsfordele i studietiden samt tilbud om gratis medlemskab. På 7. semester tilbyder vi de studerende en introduktion til arbejdsmarkedet, a-kassens regler samt et mini-kursus i jobsøgning. P.t. med øget fokus på ledigheden. Som den eneste organisation kun for bygningskonstruktører, der er skabt af og ledes af bygningskonstruktører, er det vores mål at være den faglige organisation for alle bygningskonstruktørstuderende. Pr var 85 % af de studerende medlemmer af Konstruktørforeningen i 7. semester. Fælles råd for studerende I 2008 stiftede aktive bygningskonstruktørstuderende De Konstruktørstuderende Fælles Råd (KFR). Det skete ud fra et generelt ønske om større indflydelse og mere formelle rammer for arbejdet i de råd, der findes for studerende på uddannelsesstederne. Formålet med KFR er at videndele og sparre med andre konstruktørstuderende for at forbedre studiemiljøet på uddannelsesstederne samt yde en indsats ved at tale de studerendes sag og sikre kvalitet i studiet og uddannelsen. KFR består i dag af to til tre bygningskonstruktørstuderende fra de råd for studerende, der findes på uddannelsesstederne. I løbet af 2009 er det lykkedes, at få alle de nye skoler repræsenteret i rådet. De studerende har et klart ønske om, at alle landets skoler er repræsenteret i KFR. KFR giver de studerende indflydelse og et talerør, for eksempel gennem Konstruktørforeningens Uddannelsesudvalg og i 19- udvalget mm. Vi yder sekretariatsbistand til rådet, der i øvrigt er selvbestemmende. (Læs mere side 10-11). Medlemsroser: Studerende er velkomne Konstruktørforeningens medlemmer giver tilbuddet om gratis medlemskab for studerende topkarakterer i medlemsundersøgelsen Gratis a-kasse i FTF-A Er du under 30 år og i gang med konstruktøruddannelsen, kan du overveje, om du vil melde dig i A-kasse senest 1 år, før du dimitterer. Det er gratis for de fleste studerende, og det giver dig ret til at modtage dagpenge allerede fra dagen efter, at du er dimitteret. Men a-kasse-reglerne er komplicerede, så spørg specifikt i FTF-A, om den gratis a- kasse også gælder dig. Billig studieforsikring Runa tilbyder rabat på mellem 25 % - 50 % på forsikringer, hvis du er SU berettiget og medlem af Konstruktørforeningen. Studieforsikringen tegnes på RUNA's normale vilkår. Studiekonto i Lån & Spar Konstruktørforeningen tilbyder i samarbejde med Lån & Spar en studiekonto, der er svær at matche. Som studerende og medlem af Konstruktørforeningen får du en lang række fordele i Lån & Spar. Særlige tilbud til studerende Gratis medlemskab for studerende Gratis fagblad og nyhedsmail Adgang til billig studieforsikring i RUNA Fordelagtige priser i Lån & Spar Bank Gratis a-kasse i FTF-A for de fleste Tilskud til studieture og arrangementer Faglige regionsarrangementer, Konstruktørdag og generalforsamling Politisk indflydelse. 13\n14 Konstruktørforeningens beretning Vores græsrødder Fem regioner erstattede pr. 1. juli 2007 Konstruktørforeningens daværende syv lokalafdelinger. De fem regioner fik ved organisationsændringen følgende opgaver: Deltage i aktiviteter og repræsentation på uddannelsesstederne. Medvirke ved lokale arrangementer. Medvirke til opstilling af kandidater til bestyrelsen. Medvirke til hvert andet år at arrangere Den Regionale Konstruktørdag. Udover de konkrete opgaver, så er regionerne også et vigtigt bindeled mellem bestyrelse og medlemmer. Under regionernes arbejde mødes medlemmer og bestyrelse. Det er her, medlemmerne har mulighed for at lufte ønsker og overvejelser over for bestyrelsen, og det er her, at bestyrelsen har mulighed for at møde og lytte til medlemmerne. Region Nordjylland 629 medlemmer pr Mange mødes i det nordjyske Mange arrangementer med mange deltagere og mange nye aktive i region Nordjylland. Det har været kendetegnende for de seneste to år i Region Nordjylland. Blandt de mange velbesøgte arrangementer kan nævnes: Foredrag om Komforthusene i Vejle. Familiearrangement i Aalborg Zoo. Foredrag om skimmelvækst og undertage og Konstruktørdag i Utzon Centret i Aalborg. Samtidig deltager flere i regionens arbejde. Jakob Larsen, tillidsmand i Frederikshavn Kommunes Tekniske Forvaltning har siden 2. april 2009 deltaget i regionsledelsens møder. Også Thomas Sloth Larsen, der er studerende, har vist interesse for at være med. På Konstruktørdagen 2009 blev Lisbeth Fjordvald valgt ved fredsvalg til bestyrelsen. Peter H. Staun, Torben Hvidsten, Line Kærsgaard Hansen og Jakob Larsen blev valgt til regionsledelsen. Regionsledelse: Lisbeth Fjordvald, Torben Hvidsten, Peter Helge Staun, Jakob Larsen, Line Kærsgaard Hansen, Thomas Andersen (studerende). Planlagte arrangementer: Region Nordjylland planlægger i øjeblikket et besøg på den nye betonelementfabrik AmberCon i Støvring. Region Midtjylland 1433 medlemmer pr Fuld turbo på Midtjylland Sædvanen tro er der fuld gang i arrangementerne i Midtjylland. Her skal nævnes to. Nemlig foredraget om Byggeskik og Bygningsbevaring den 22. september Her mødte ca. 20 medlemmer op, og Konstruktørdagen 2009 med temaet energi og bæredygtighed, der blev afholdt den 21. oktober i Andelssamfundet i Hjortshøj. Der var tilmeldt 26 deltagere men desværre mødte kun frem. Desuden har Anders Mortensen i april 2010 holdt foredrag for arbejdssøgende konstruktører i FTF-A i Århus. Christian Thomsen, som har været formand i regionsledelsen i KF Region Midtjylland i en lang årrække, har valgt at fratræde. Vi siger tak for en stor indsats. Jens Bech Vestergård trådte ind som nyt medlem i bestyrelsen. Anders Mortensen er siden på bestyrelsesmøde den 2. marts konstitueret som ny formand. Regionsledelse: Anders With Kaas, Maj-Britt Lillelund, Jens Bech Vestergård, Ulrich Monse, Allan Bamberg Ernstsen, Anders Klejs Mortensen. Kommende arrangementer: Vi drøfter en Københavnertur og muligheden for en tur til Berlin. Gerne i samarbejde med andre regionsledelser. 14\n15 Konstruktørforeningens beretning Region Syddanmark 921 medlemmer pr En helt ny ledelse i Syddanmark I region Syddanmark har en helt ny ledelse taget over efter Vivi Riis og Peter Holm, der begge var med i regionsledelsen frem til Regionens seneste arrangement var Konstruktørdag 09, der blev holdt hos virksomheden Fiberline Composites i Middelfart. Regionsledelse: Erik Jung-Jensen, Anders Krogsgaard, Brian Hedegaard-Jensen, Maria Bernadette Bernard Riise, Lars Aalund Kruuse. Region Hovedstaden 1686 medlemmer pr Flere aktive i København Region Hovedstaden er i de seneste to år gået fra at være tre til at være seks i selve ledelsen. Samtidig har regionen afholdt en del arrangementer. Der har blandt andet været foredrag om Den Københavnske Metro, Cityringen og dens indvirkning på den omkringliggende bygningsmasse. Et andet foredrag har handlet om skimmelsvamp og undertage. Derudover har der været rundvisning på Holmen, og på Konstruktørdag 09 var der blandt andet mulighed for at se Green Lighthouse, et energiproducerende hus bygget af Københavns Universitet. Regionsledelse: Jakob Munk Weidlich, Jens Pryds Hansen, Jette Leth Fejerskov Djælund, Morten Kristiansen, Esther Bernhard Clemmensen, Kristian Mikkelsen. Planlagte arrangementer: Region Hovedstaden vil i de næste år blandt andet følge byggeriet af Cityringen i foredrag og rundvisninger. Region Sjælland 712 medlemmer pr Mange arrangementer på Sjælland I Region Sjælland har regionsledelsen sat rigtig mange arrangementer i søen. Det gælder blandt andet foredrag om skimmelvækst og undertage. Dette arrangement var meget velbesøgt og alle fremmødte have stor spørgelyst. Der har også været Konstruktørdag 09, der blev holdt i center for Energibesparelser i Høje Taastrup. Her var emnet energibesparelser og påvirkning af klimaet, og der var en række spændende indlæg fra forskellige foredragsholdere, og forsøgsbyggeriet Energy Flex House blev besigtiget. En forsættelse af emnet om byggeri, der tager udgangspunkt i energibesparelse og samtidig er bedre for miljøet, var arrangementet om Grønne tage. Her fik de tilhørende den nyeste viden inden for projektering og anvendelsesmulighederne for grønne tage. De hørte også om Københavns kommunes plan for brugen af grønne tage som en konstruktion, der er bedre for miljøet og CO2 udslippet. Regionsledelse: Kirsten Nielsen, Søren Bjørndahl Hansen, Hanne Dorte Stenbek, Lars Kristian Rasmussen, Kasper Kammersgaard Pedersen (studerende). 15\n16 Foreningsoplysninger pr : 5381 medlemmer 14 ansatte i Konstruktørforeningens sekretariat. Bestyrelse Formand: Gert Johansen Næstformand: Lisbeth Fjordvald, Valgt i Region Nordjylland Valgt på landsplan: Henrik Grønbech, Anders With Kaas, Jens Bech Vestergård Valgt i regionerne: Allan Bamberg Ernstsen, Region Midtjylland, Poul Jørgen Christensen, Region Syddanmark, Kirsten Nielsen, Region Sjælland, Jacob Munk Weidlich, Region Hovedstaden Konstruktørforeningen er medlem af: FTF, der er hovedorganisation for i alt personer på det danske arbejdsmarked. Blandt andet konstruktører, sygeplejersker og bankansatte. I alt ca. 90 forskellige fagforeninger og forbund, der arbejder sammen i forhold til arbejdsgivere, politikere og offentligheden. I kraft af vores medlemskab af FTF er vi repræsenteret i de forhandlingsfælles-skaber, der forhandler løn på det offentlige område. For Statens vedkommende CFU (Centralorganisationernes Fællesudvalg) og CO10 (Centralorganisationen af 2010) og for kommunernes vedkommende i KTO (Kommunale Tjenestemænd og overenskomstansatte), FTF-K og FK (Forhandlingskartellet). FTF-A, der er KF s a-kasse og en af Danmarks billigste og bedste. Her kan du tegne en arbejdsløshedsforsikring og evt. en ekstra lønsikring, så du er sikret økonomisk, hvis du bliver arbejdsløs. KF er repræsenteret i: FTF s Kongres, FTF s Repræsentantskab, FTF s Sektion P (Sektion for privatansatte i FTF), FTF s Forretningsudvalg, FTF Udvalget om uddannelse, kompetence og faglighed, FTF Udvalget om Velfærd, vækst og beskæftigelse, FTF Region Hovedstaden, FTF Region Sjælland, FTF Region Nordjylland, FTF Region Midtjylland, FTF Region Syddanmark (bestyrelsespost sektion P), FTF-K Forhandlingskartellet, FTF-K Sekretariatsudvalg, FTF-K Bestyrelse, FTF-A s Hovedbestyrelse, FTF-A s Repræsentantskab, KTO Sekretariatsudvalg, CO10, Bestyrelsen for Erhvervsakademi Sjælland. Gode tilbud Runa Forsikring tilbyder en bred vifte af private forsikringer til lave præmier med gode dækninger. PFA Pension tilbyder pensionsordninger med flot forrentning og lave administrationsgebyrer. Du kan også forsikre dit liv, din erhvervsevne og dit og familiens helbred. Forbrugsforeningen tilbyder dig et medlemskort, som giver dig bonus på alt lige fra bøger, telefoni, rejser, elektronik og sko og tøj i og på 4300 forskellige butikker og hjemmesider. Lån & Spar Bank Pr. 1. oktober 2010 har Konstruktørforeningen indgået en aftale med Lån & Spar Bank. Du får du 5 % i rente af de første kr. på lønkontoen og 0,25 % af resten. Begge rentesatser er variable. Kravene er, at du er medlem af Konstruktørforeningen og flytter hele din privatøkonomi til Lån & Spar. Kurser til rimelige priser Konstruktørforeningen udbyder i samarbejde med en lang række institutioner kurser, som Konstruktørforeningens medlemmer kan deltage i til rimelige priser. Følg med på kf.dk/kalender.\nKonstruktørforeningen. Beretning 2010-2012\nKonstruktørforeningen Beretning 2010-2012 Forord... 3 Arbejdsmarkedet og konstruktørerne... 4 Hvor arbejder konstruktørerne?... 4 Indsatsen for flere arbejdspladser og færre ledige... 4 Konstruktører som\nBeretning 2007-2008 GENERAL FORSAMLINGO 8. Åbent og forpligtende fællesskab\nBeretning 2007-2008 2 GENERAL FORSAMLINGO 8 Åbent og forpligtende fællesskab Indledning Heftige overenskomstforhandlinger, Konstruktørforeningens (KF s) arbejde imod forringelser af byggesagsbehandling,\nBeretning 2004-2005. Beretning 2006 Side 1 ud af 15 sider\nBeretning 2004-2005 Resume Indledning: Også i 2004-2005 har Konstruktørforeningens arbejde været præget af forandringsvilje. En af milepælene er det forslag, som bestyrelsen sætter til debat og efterfølgende