Helical Organization of Blood Coagulation Factor VIII on Lipid Nanotubes | Protocol (Translated to Portuguese)\nHelicoidal Organização dos Fatores de Coagulação Sanguínea VIII em Lipid Nanotubos\nMicroscopia correlativo para Análise Estrutural3D de interações dinâmicas…\nCalculando a média de Viral glicoproteína donvelope Spikes de Electron Cryotomography reconstruções com Jsubtomo…\nNós apresentamos uma combinação de microscopia de Cryo-electron, nanotecnologia lipídica, e a análise da estrutura aplicada para resolver a estrutura ligada a membrana de duas formas de FVIII altamente homólogas: humana e porcina. A metodologia desenvolvida em nosso laboratório para organizar de forma helicoidal as duas formas FVIII recombinante funcionais em nanotubos de lipídios negativamente carregados (LNT) é descrito.\nA microscopia crio-electrão (Cryo-EM) é uma abordagem poderosa para investigar a estrutura funcional de proteínas e complexos em um ambiente de estado e da membrana hidratada 2.\nFactor de coagulação VIII (FVIII) 3 é um sistema multi-domínio de glicoproteína do plasma sanguíneo. Defeito ou deficiência de FVIII é a causa para o tipo de hemofilia A - um distúrbio de sangramento grave. Após a activação proteolítica, FVIII liga à serina-protease do Factor IX na membrana das plaquetas carregadas negativamente, que é crítica para a coagulação do sangue normal de 4. Apesar de o papel central de FVIII desempenha na coagulação, a informação estrutural para o seu estado ligado à membrana é incompleta 5. Concentrado de FVIII recombinante é o medicamento mais eficaz contra o tipo A hemofilia A e comercialmente disponível de FVIII pode ser expressa como o ser humano, ou de porcino, ambos os complexos funcionais que formam com o Factor IXa humano 6,7.\n"> Neste estudo apresentamos uma combinação de microscopia Cryo-elétron (Cryo-EM), a nanotecnologia ea estrutura lipídica análise aplicada para resolver a estrutura ligada à membrana das duas formas de FVIII altamente homólogas:. Humana e suína A metodologia desenvolvida em nosso laboratório para organizar de forma helicoidal das duas formas de FVIII recombinante funcional em nanotubos de lípidos carregados negativamente (LNT) é descrita. Os resultados representativos demonstram que a nossa abordagem é suficientemente sensível para determinar as diferenças na organização helicoidal entre os dois altamente homóloga em sequência (86% de identidade de sequência ) proteínas. protocolos detalhados para a organização helicoidal, Cryo-EM e tomografia eletrônica (ET) de aquisição de dados são dadas. The bidimensional (2D) e tridimensionais (3D) análise da estrutura aplicada para obter as reconstruções 3D de humanos e suínos FVIII-LNT é discutido. As estruturas de FVIII-LNT humana e porcina apresentados demonstram o potencial da metodologia proposta para Calculate a organização funcional, ligada à membrana de coagulação sanguínea do Factor VIII em alta resolução.\nA coagulação sanguínea do Factor VIII (FVIII) é um grande glicoproteína de 2332 aminoácidos organizados em seis domínios: A1-A2-B-A3-C1-C2 3. Após a activação da trombina de FVIII actua como co-factor para o Factor IXa no complexo de tenase ligada à membrana. A ligação de FVIII activado (FVIIIa) em FIXa de um modo conforme a membrana melhora a eficiência proteolítica FIXa mais do que 10 5 vezes, o que é crítico para a eficiência da coagulação sanguínea 4. Apesar do papel importante do FVIII desempenha na coagulação e a formação do complexo tenase, a estrutura de FVIII ligado à membrana funcional ainda não foi resolvido.\nPara resolver esta questão, nanotubos de bicamada lipídica (LNT) ricos em fosfatidilserina (PS), capazes de FVIII de ligação com elevada afinidade 8, 9, e assemelhando-se a superfície de plaquetas activadas têm sido desenvolvidos 10. Organização helicoidal consecutiva de FVIII obrigado a LNT foi provado ser efetividadeve para a determinação da estrutura do FVIII estado ligado à membrana por Cryo-EM 5. Funcionalizado LNT são um sistema ideal para o estudo de proteínas de proteínas e interacções proteína-membrana de proteínas associadas à membrana de forma helicoidal organizadas por Cryo-EM 11, 12. Cryo-EM tem a vantagem em relação aos métodos tradicionais estruturais, tais como cristalografia de raios-X e RMN, que o espécime é preservado em mais próximo do ambiente fisiológico (tampão, membrana, pH), sem aditivos e isótopos. No caso de FVIII, estudar a estrutura ligada a membrana com esta técnica é ainda mais relevante fisiologicamente, como o LNT assemelham pelo tamanho, forma e composição da pseudopodia das plaquetas activadas, onde os complexos TENase montar in vivo.\nDefeitos e deficiência de FVIII causa hemofilia A, uma doença hemorrágica grave que afeta 1 em cada 5.000 homens da população humana 4, 6. O mais eterapia ffective para hemofilia A é a administração do FVIII humano recombinante (hFVIII) ao longo da vida. Uma complicação importante da terapia de FVIII recombinante A hemofilia A é o desenvolvimento de anticorpos inibitórios para a forma humana que afecta aproximadamente 30% dos doentes com hemofilia A 13. Neste caso, o FVIII porcino (pFVIII) concentrado é usado, como FVIII exibe suína baixa reactividade cruzada com os anticorpos inibidores contra FVIII humano e formas de complexos funcionais com FIXa humano 7. Estabelecer a organização ligada à membrana de ambos suína e formas de FVIII humanos é importante para compreender a base estrutural da função co-fator FVIII e implicações para a hemostasia sangue.\nNeste estudo, descrevemos uma combinação de nanotecnologia lipídico, Cryo-EM, e a análise da estrutura concebida para resolver a organização ligada à membrana de duas formas de FVIII altamente homólogas. Os dados Cryo-EM apresentados e estruturas 3D para porci helicoidal organizadone FVIII humano e em carregado negativamente LNT mostram o potencial da nanotecnologia proposto como base para a determinação da estrutura do FVIII e factores e complexos em um ambiente de membrana fisiológica coagulação ligadas à membrana.\nHumana troca de tampão de FVIII-14 e do BDD-FVIII porcino BDD 15 contra tampão HBS-Ca (20 mM de HEPES, 150 mM de NaCl, 5 mM de CaCl2, pH = 7,4) e concentrado para 1,2 mg / ml. Manter a solução proteica à temperatura de -80 ° C.\nPreparar os nanotubos de lípidos (LNT), misturando galactosilceramida (GC) e fosfatidilserina (PS) a 1:04 w / w proporção em clorofórmio. Evapora-se o clorofórmio sob atmosfera de árgon e solubilizar os lípidos em tampão HBS de 1 mg / ml. Manter a solução LNT a 4 ° C.\n2. Cryo-Microscopia eletrônica de FVIII-LNT\nCryo-EM Preparação de Amostras\nBrilho de descarga a 300 mesh Quantifoil R2 / 2 grades de cobre (lado carbono up) em uma mistura de O 2 e H 2 gás por 10 seg a 50 W.\nMisturar as soluções de FVIII e LNT em tampão HBS-Ca em 1:1 w / w proporção e incubar durante 15 min à temperatura ambiente.\nAplique uma gota de 2,5 mLde amostra de FVIII-LNT à grade microscopia electrónica hidrofílico na câmara humidificada Vitrobot Mark IV (100% de humidade).\nBlot e flash congelar a grade (uma mancha de 3,5 seg, força apagar 1) em líquido C 2 H 6, arrefecido por N2 líquido para obter gelo amorfo.\nRedes de lojas em caixas de armazenamento sob N2 líquido (LN2).\nColeta de Dados Cryo-EM\nNOTA: O JEM2100-LaB6 (ano 2010) está equipado com um sistema operacional TEMCON consistindo de um computador conectado à microscópio eletrônico, uma tela com janelas de leitura do sistema de vácuo, sistema de iluminação, HT, as correntes de lente e assim por diante, e dois painéis: esquerda e direita, colocado em ambos os lados da coluna. A mudança feixe de X, Y botões (SHIFT Y, SIFT Y) eo multifuncionais (DEF / STIG) botões são em ambos os painéis. No painel da esquerda é o botão de iluminação (Brigthness). No painel direito são: a ampliação (MAG / CAM COMPRIMENTO) e foco (Foco) maçanetas e os três imaging (MAG1, MAG2, LOWMAG) e um de difração (DIFF) modos de botões. Nós adquirimos os nossos dados em MAG1 em alpha 2. As condições mínimas doses de iluminação (MDS) necessários para a aquisição de dados Cryo-EM são definidas com F1 através de botões F6, top de linha no painel da direita. Neste protocolo as definições genéricas são usados: F1 - levantar / tela inferior, F2 - modo de pesquisa, F3 - Modo FOCUS, F4 - Modo PHOTO, F5 - MDS OFF / ON e F6 - BEAM BRANCO, usado para proteger o espécime de radiação danificar, desviando o feixe.\nColoque-titular crio o na estação crio e encher o Dewar do titular ea estação crio com LN2. Quando a temperatura atinge -192 ° C, obturador aberto na ponta titular, local previamente congelado grade Cryo-EM, para o lugar designado e prenda com um grampo de anel.\nInsira titular crio o no microscópio eletrônico. Encher o Dewar do titular crio o ea câmara anti-contaminador com LN2. Aguarde até que o titular se estabilize por 30-60 min. Pressione F6 e emtransformar o filamento em. Quando o filamento está saturado, pressione F6 e abra obturador no suporte para ver o grid.\nImprensa Baixo Mag / alfa 1 (fixado em 200X mag) e localizar áreas com gelo fino na grade.\nMudar para MAG 1/alpha 2 para definir o modo de dose mínima (MDS) e adquirir dados Cryo-EM em doses baixas de elétrons, sem danificar a amostra.\nPressione F2 para definir o modo de pesquisa. Definir ampliação a 40.000 x. Aumentar feixe com botão brigtness a dose mínima de elétrons ~ 0,04 e - / a 2 · s. Imprensa DIFF para alternar para o modo de difração. Defina o comprimento da câmara a 120 cm, com botão de MAG / CAM comprimento. Localizar áreas da grade dentro das áreas pré-seleccionadas em LOWMAG que têm nanotubos de lípidos nos orifícios do filme de carbono.\nPressione F4 para definir o modo de foto em 40.000 ampliação X e definir iluminação com botão BRILHO em doses de 16-25 e - / a 2 · s. Pressione o botão padrão Focus para definir as condições de foco ajustando o Z-alturada amostra com os Z Botões Cima / Baixo (painel de controle à direita). Definir desfocagem entre -1,5 e -2,5 m.\nAlinhe SEARCH e modo FOTO, desenhando um quadrado na janela VISTA AO VIVO no monitor da câmera digital no modo de pesquisa correspondente à área a ser trabalhada no modo de foto.\nPressione F3 para definir o modo de foco em 100.000 ampliação X. Foco de iluminação para cobrir o chip CCD (~ 4-5 cm de raio) e fora do eixo para não irradiar a área a ser trabalhada no modo de foto. Ajuste de desfocagem para ~ -1,5 e -2,5 mM com o botão de foco e corrigir o astigmatismo da imagem com botões DEF / STIG.\nSelecione o FVIII-LNT a ser trabalhada no modo de Pesquisa por meio da aquisição de imagens ao vivo na janela de exibição ao vivo na tela da câmera digital. Centralize o FVIII-LNT no quadrado desenhado na janela de visualização em directo.\nGravar uma imagem digital da câmera CCD de 52.000 X ampliação eficaz e 0,5 seg exposição mudando para o modo foto e clicando no AcquirBotão E na micrografia monitor da câmera digital. As condições de aquisição de imagem são definidas como o branco do feixe (SHUTTERS) aberto apenas quando a imagem é adquirida no modo de foto.\nVerifique a qualidade e desfocagem da imagem adquirida, pressionando CTRL-F para obter Transformada Rápida de Fourier (FFT).\n3. Reconstrução 3D\nNOTA: O software de análise de imagem utilizado para a análise 2D e 3D: EMAN2 e IHRSR estão disponíveis gratuitamente. EMAN2 pode ser baixado do http://blake.bcm.edu/emanwiki/EMAN2/Install. O software IHRSR pode ser obtido a partir de Prof Egelman: egelman@virginia.edu. Os refinamentos finais IHRSR são executados no Texas Advanced Computing agrupamento de centro: http://www.tacc.utexas.edu/ na Universidade do Texas, Austin. O algoritmo de reconstrução 3D mostrado na Figura 1 consiste em duas etapas principais: em primeiro lugar a seleção de um conjunto homogêneo de segmentos helicoidais (partículas) com a referência livre alignme 2Dnt (RFA) algoritmos implementados em EMAN 2, segunda alcançar uma reconstrução 3D com base nos parâmetros helicoidais e algoritmos de projeção de volta incorporadas IHRSR. O primeiro passo utiliza os programas desenvolvidos para a seleção de conjuntos de partículas homogêneas para a reconstrução 3D com partículas SPA Individual (algoritmos) para os quais EMAN2 foi especificamente desenvolvido e distribuído: http://blake.bcm.edu/emanwiki/EMAN2. Este passo foi adaptada aos dados Cryo-EM. O segundo passo é conseguido com o algoritmo IHRSR, que é concebido especificamente para o tipo de conjuntos helicoidais obtidos com as formas de Factor VIII recombinante. Este algoritmo foi extensivamente documentada através da literatura científica 12.\nRealizar análise de imagem em 2D com a suíte de processamento de imagem EMAN2 científico: http://blake.bcm.edu/eman2/doxygen_html 16 para selecionar partícula homogênea (segmento helicoidal) conjuntos para a reconstrução helicoidal.\nSelecione micrografias Cryo-EM com straight e bem organizada tubos helicoidais com o software da câmera digital e ferramentas de visualização.\nInverter, normalizar e filtrar por raios-X pixels na GUI e2workflow.py, reconstrução partícula única opção (SPR): http://blake.bcm.edu/emanwiki/EMAN2/Programs/e2projectmanager\nImporte as imagens invertidas, normalizados e de pixel de raios-X filtrados na GUI e2helixboxer.py. Selecione tubos helicoidais FVIII-LNT e segmento em 256 x 256 pixels (2.9 Å / PIX), com 90% de sobreposição usando: http://blake.bcm.edu/emanwiki/EMAN2/Programs/e2helixboxer\nAvaliar a desfocagem das micrografias originais e aplicar a função de transferência de contraste (CTF) correção (apenas correção de fase) para os segmentos helicoidais dos mesmos micrografias com a opção e2ctf.py incorporado no e2workflow.py: http://blake.bcm. edu/emanwiki/EMAN2/Programs/e2ctf.\nGerar partículas iniciais (segmentos helicoidais) define na GUI e2workflow.py opção - SPR: http://blake.bcm.edu/emanwiki/EMAN2/Programs/e2workflow.\nCalcular médias classe 2D com o algoritmo e2refine2d.py aplicação referência livre de classificação k-média para selecionar os conjuntos de dados homogêneos com o mesmo LNT diâmetro e grau de ordem helicoidal (Figura 2), seguindo o roteiro: "e2refine2d.py - iter = 8 - naliref = 5 - nbasisfp = 8 - path = r2d_001 - input = INPUT.hdf - LCN = 51 - simcmp = dot - simalign = rotate_translate_flip - classaligncmp = dot - classraligncmp = fase - classiter = 2 - classkeep = 0,8 - classnormproc = normalize.edgemean - classaverager = média - normproj-classkeepsig ', alterando o valor NCLs conformidade.\nClassifique as definidas no 'LCN = 151' 150 classes de mais de 8 iterações com 'classkeep = 0,8' dados iniciais, o que significa que as partículas com menos de 80% de similaridade com a média classe são excluídos da classe dada. http://blake.bcm.edu/emanwiki/EMAN2/Programs/e2refine2d\nMesclar partículas a partir das médias de classecom difração helicoidal pronunciado em e2display.py para criar conjunto de dados intermediário.\nClassificar os dados intermediários estabelecidos em 50 classes 'LCN = 51' para diferenciar classes com mesmo diâmetro e grau de ordem.\nMesclar partículas de classes com mesmo diâmetro e grau de ordem em e2display.py para criar o conjunto de dados final para a reconstrução tridimensional: http://blake.bcm.edu/emanwiki/EMAN2/Programs/emselector.\nExecutar a reconstrução helicoidal com o algoritmo iterativo helicoidal real espaço Reconstrução (IHRSR), como descrito no Egelman 17, 18.\nEstime o aumento, Δz (A) da hélice FVIII-LNT do Fourier combinado transformar as partículas no conjunto de dados final.\nDefina o ângulo azimutal ΔΦ (º), executando refinamentos IHRSR paralelas com um Δz constante, aumentando ΔΦ de 576; a 60 ° em incrementos de 5 °.\nExecutar 100 ciclos IHRSR consecutivos para cada conjunto com um cilindro inexpressivo como um volume inicial e os parâmetros iniciais Δz helicoidais e ΔΦ conforme definido no 3.2.1 dados finais. e 3.2.2.\nInspecione os volumes finais para a convergência dos parâmetros helicoidais e correspondência entre as médias de classe da classificação 2D do conjunto final de dados e as projeções da reconstrução IHRSR final.\nImpor simetria para as reconstruções 3D finais, correspondente à unidade de distribuição assimétrica observada nos volumes 3D assimétricos finais: de 4 vezes para o FVIII humano-LNT e 5 vezes para a porcino FVIII-LNT. Correr mais 100 ciclos de refinamento para gerar uma reconstrução 3D simetrizada final.\nCalcule a curva de correlação Shell Fourier para ambos os volumes, primeiro separando os estabelecidos em pares e ímpares dados correspondentes: 'e2proc2d.py <ENTRADA> <outfile> - split = 2 '. Em seguida, execute 100 IHRSR refinamentos consecutivos, tal como descrito no ponto 3.2.3. Calcule o FSC dos volumes 3D criadas a partir dos conjuntos de dados pares e ímpares: 'e2proc3d.py evenvolume.mrc fsc.txt - calcfsc = oddmap.mrc'.\nVisualize e Segmento os volumes FVIII-LNT em UCSF quimera.\nAbra os volumes finais da etapa 3.2.5. em UCSF Chimera e definir o nível de contorno para 0.005 no TOOLS> VOLUME DE DADOS> opção VIEWER VOLUME.\nEm Ferramentas> VOLUME DE DADOS> mapa de segmento, selecione o volume no guia mapa de segmento e clique em cada segmento de mercado o volume.\nSegmentos do Grupo corresponde a uma célula unidade, selecionando com CTRL + SHIFT e clique grupo.\nCor dos segmentos por célula unitária e hélice com Ações> opção de cor para enfatizar as características estruturais.\n4. Electron Tomografia\nCoradas negativamente FVIII-LNT Preparação de Amostras\n<li> Preparar amostras de FVIII-LNT como para as experiências Cryo-EM.\nFulgor descarrega grelha de cobre de malha 300-revestidas de carbono (do lado de carbono acima) numa mistura de O 2 e gás H2 durante 10 segundos a 50 W como para experiências Cryo-EM.\nAplique uma gota de 2,5 mL de suspensão FVIII-LNT com 6 nm nanopartículas de ouro coloidal para a grade, seque o excesso de líquido e manchar negativamente pela aplicação de 5 mL solução 1% acetato de uranila por 2 min. Seque o excesso de líquido e secar a grade.\nColeta de Dados Electron Tomografia\nTransfira a grade no suporte de inclinação única.\nTransfira o titular no microscópio eletrônico.\nColete série de inclinação automaticamente com o software SerialEM 19 ° em incrementos de 2 num intervalo angular de -60 ° a 60 ° e gravar imagens com uma câmera CCD de 52.000 X ampliação efetiva, -6 a -10 mM desfocagem e da dose de elétrons de 150 - 170 elementosctrons / a 2 · s por tomografia.\nElectron Tomografia Reconstrução do FVIII-LNT\nNota: Reconstruir a série inclinado pFVIII-LNT e hFVIII-LNT adquirida em 4.2. com a opção ETomo do software IMOD seguindo o tutorial: http://bio3d.colorado.edu/imod/doc/etomoTutorial.html\nUsando uma janela de terminal, abra a tomografia em 3dmod. http://bio3d.colorado.edu/imod/doc/3dmodguide.html.\nBin o tomograma por 4 com o IMOD BINVOL comando para diminuir o tamanho da tomografia.\nSelecione o ângulo adequado para rodar o nanotubo lipídico ao longo do eixo Y no tomografia finalmente resolvido usando o comando IMOD ROTATEVOL.\nGire a tomografia completa com o comando IMOD ROTATEVOL.\nCortar o nanotubo lipídico selecionado orientada ao longo do eixo Y com o comando IMOD CLIP redimensionar.\nAbra o sub-tomografia cropped com 3dmod.\nClique sobre o tomograma para visualizar o arranjo de moléculas de factor VIII ao longoas fatias no eixo Z e ao longo do eixo Y no volume sub-tomografia.\nFVIII suína recombinante humana e foram organizadas com sucesso de modo helicoidal em carregada negativamente simples LNT bicamada, assemelhando-se à superfície das plaquetas activadas. Helicoidal A organização do humano e de porcino FVIII-LNT foi consistente ao longo das micrografias digitais recolhidas (Figura 2). A LNT controle eo humano e FVIII-LNT tubos helicoidais suínos foram selecionados e segmentado, com o GUI e2helixboxer.py e conjuntos de dados iniciais criados com a GUI e2workflow.py, opção única partícula (Tabela 1).\nA ordem helicoidal do humano ligado à membrana e porcino FVIII-LNT foi avaliada a partir da transformação de Fourier das médias de classe com a GUI e2display.py (EMAN2) (Figura 3). A bicamada lipídica no melhor controle LNT médias classe 2D é bem definida. O folheto interior e exterior e uma mais baixa densidade do núcleo hidrofóbico da membrana são claramente visíveis ( (Figuras 3B e 3C). A torção mais pronunciado para os tubos helicoidais de FVIII-LNT humanos indica que as interacções proteína-proteína entre as moléculas de FVIII ligadas à membrana adjacentes são sempre diferentes para as duas formas de FVIII (Figuras 3B e 3C). Partículas de classe média, mostrando boa organização helicoidal (padrão de difração helicoidal) foram fundidas na GUI e2display.py para formar um conjunto de partículas intermediário (Tabela 1). As partículas dos conjuntos de partículas intermediárias foram novamente classificados em 50 classes com as mesmas restrições. As partículas de média classe com o mesmo diâmetro foram fundidos no final dos dadosgrupos (Tabela 1).\nReconstruções 3D iniciais para o FVIII-LNT humana e porcina foram realizadas com 1000 partículas representativos do conjunto de dados de FVIII-LNT suína final e humana. Cem iterações IHRSR consecutivos foram executados para cada reconstrução 3D com um cilindro inexpressivo (160 Å interior e 500 de diâmetro externo Å), como volume inicial. O aumento axial (Δz) calculado a partir da Fourier combinado transformar os segmentos helicoidais (partículas definidos) é igual a 41 Å para humano FVIII-LNT e 36 Å para suínos FVIII-LNT (Figuras 4A e 4B). O ângulo azimutal inicial (ΔΦ) definida a partir da pesquisa iterativa é estimado em 40,0 ° para o FVIII humano-LNT e a 35,0 ° C durante o porcino FVIII-LNT. Os volumes finais são inspecionados para a convergência dos parâmetros helicoidais e correspondência entre as médias de classe e projeções do último Reconstrução, também seguindo os critérios descritos no 5. As reconstruções 3D selecionados e parâmetros helicoidais correspondentes são impostas como volumes iniciais e parâmetros helicoidais iniciais para um segundo refinamento IHRSR de 100 ciclos, que convergiram para uma organização de quatro começar helicoidal para o ser humano FVIII-LNT com Δz = 41,1 Å e ΔΦ = 42,0 ° e uma organização de cinco iniciar helicoidal para o suíno FVIII-LNT com Δz = 35,5 Â e ΔΦ = 34,8 °. Uma final 100 IHRSR iterações impondo um 4 vezes e uma simetria helicoidal de 5 vezes para o suíno reconstruções FVIII-LNT humano e, respectivamente, são realizadas com volumes iniciais e os correspondentes parâmetros helicoidais dos últimos refinamentos IHRSR assimétricas (Figuras 4C e 4D). Os volumes finais mostram 8 FVIII humano e 10 moléculas ligadas a membrana de FVIII suína organizadas em torno do eixo helicoidal (Figura 5A). Cada ser humanoMolécula de FVIII é traduzido de 41,2 Â e 42,0 ° rodado a partir do anterior e cada molécula de FVIII porcino é traduzido de 35,9 Â e 35,2 º rodado a partir do anterior, o que corresponde aos parâmetros helicoidais dos reconstruções 3D finais (Figura 5B).\nAs tomografias de electrões reconstruídos confirmar a diferença na organização helicoidal entre o FVIII-LNT humano e porcino obtido nas mesmas condições experimentais. Comparação dos principais pontos de vista das tomografias reconstruídos e os volumes 3D a partir da reconstrução helicoidal visto na direcção perpendicular ao eixo helicoidal, valida ainda mais a exatidão das reconstruções 3D refinados com os parâmetros IHRSR helicoidais (Figura 6). As dimensões da célula unitária 2D assimétricos para a reconstrução de FVIII humano-LNT 3D são: a = 17,8 nm, b = 8,2, γ = 84 ° e para o suíno reconstrução FVIII-LNT 3D: a =18,4, b = 7,2 e γ = 70 ° (Figura 6). As dimensões de célula unitária de FVIII humano organizado em cristais 2D ligada à membrana são: a = 8,1, b = 7,0 e γ = 67 °, o que corresponde à superfície coberta por uma molécula de FVIII viram para a membrana de superfície 20. Comparando as dimensões da célula unitária entre FVIII organizados em 2D e cristais helicoidais indica que tanto as moléculas de FVIII humano e porcino formam dímeros quando organizadas de forma helicoidal na superfície de LNT.\nEstrutura análise do gráfico Figura 1. Fluxo. Os passos seguidos para a análise de classificação 2D baseado em algoritmos de alinhamento de referência livre implementadas em EMAN2 16 são circuladas em azul. As etapas para a análise 3D realizada com o real helicoidal iterativo algoritmos de reconstrução do espaço (IHRSR) está circulado em vermelho. Os ciclos iterativos IHRSR são indicadas com setas tracejadas.\nFigura 2. Micrografias Cryo-EM digitais. (4.096 x 4.096 pixels, 2,9 Å / PIX) de nanotubos de lípidos (LNT) com e sem FVIII vinculado. A. Controle LNT. B. Humano FVIII-LNT. C. Suínos FVIII-LNT . O bordo do orifício, no filme de carbono, em que o FVIII-LNT são suspensos em gelo amorfa é indicado com uma estrela branca. As densidades de proteínas e lipídios são em preto. As vistas ampliadas (inserir) de 512 x 512 áreas recortadas (branca tracejada quadrado) ilustram a diferença na organização helicoidal do FVIII humano e porcino, respectivamente. A barra de escala é de 100 nm.ig2highres.jpg "target =" _blank "> Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.\nFigura 3. Médias classe Representante 2D (linha superior) e as correspondentes transformadas de Fourier (linha inferior) a partir dos conjuntos de partículas intermediárias (Tabela 1) classificados em 50 aulas. A. Controle LNT B. Humano FVIII-LNT C. Suínos FVIII-LNT. São indicados o número de classes e número de partículas incluídos em cada classe. A diferença, a fim helicoidal entre o FVIII humano e suíno é claramente visto nas imagens e confirmado pelos padrões de difração obtidos a partir do Fourier transforma essas imagens. Clique aqui para ver umaversão maior desta figura.\nFigura 4. Reconstruções 3D helicoidais de FVIII-LNT. A. Combined Fourier humana e suína transformar a partir de 1.000 segmentos helicoidais. A primeira e segunda linha camada estão centradas em 1/82 a -1 e 1/41 a 1 para humano FVIII-LNT, e em 1/72 -1 e 1/36 a 1 para suíno FVIII-LNT (branco setas) B. representação. Superfície do humano na cor rosa (Δz = 41,1 Å, ΔΦ = 42,0 º) e suínos em azul (Δz = 35,9 Å, ΔΦ = 35,2 º) reconstruções helicoidais FVIII-LNT 3D. Ambos os volumes são apresentados em 0,005 nível de contorno (densidade mínima é de 0 e máximo de densidade de 0,02, calculado em UCSF Chimera, opção espectador Volume 21). O comprimento do tubo de FVIII-LNT é de 256 pixels de 2,9 Å / pix. Correlação C. Shell Fourier (FSC) parcelas para o homem eo suíno FVIII-LNT mostrando uma resolução de 20,5 Å em FSC = 0,5.\nFigura 5. Organização helicoidal de FVIII-LNT representação da superfície humana e porcina. Segmentado de FVIII-LNT reconstruções helicoidais humana e porcina, mostrado na Figura 4B. Os volumes são segmentadas após impondo simetria de 4 vezes a do FVIII humano-LNT e simetria de 5 vezes para o suíno FVIII-LNT. As unidades assimétricas são codificados por cores amarelo-vermelho para o ser humano FVIII-LNT e azul-verde para os suínos FVIII-LNT. A. Vistas ao longo do eixo helicoidal indicado com um quadrado para o ser humano e comoum pentágono para o suíno FVIII-LNT. A estrutura de FVIII-LNT humano mostra oito moléculas organizadas em torno da membrana externa LNT e a estrutura de FVIII porcino mostra 10 moléculas organizadas em torno da membrana externa LNT, indicadas com números. B. Visto perpendicular ao eixo helicoidal. O FVIII humano-LNT é uma estrutura de 4-helicoidal e começar o suíno FVIII-LNT é uma estrutura de 5-começar helicoidal. O individual hélices de início são indicados com números e código de cores. Temos enfatizado uma das hélices de cada estrutura com um (*) e linhas verdes. A barra de escala é de 20 nm.\nFigura 6. Comparação entre as reconstruções 3D helicoidais e tomografia. The humano FVIII-LNT (a) e suínos FVIII-LNT (C) reconstruções 3D helicoidal são mostrados perpendicular ao eixo helicoidal. Cada célula unitária e hélices individuais são como na Figura 5 com código de cores. B. e D. são representações de densidade dos reconstruções tomografia 3D, visto perpendicularmente ao eixo helicoidal. A estrutura 2D reflectindo o arranjo helicoidal das moléculas de FVIII é mostrado com linhas verdes.\nAMOSTRAS clnt hFVIII-LNT pFVIII-LNT\nMicrografias iniciais 61 474 542\nConjuntos de partículas iniciais 29113 60395 64665\nDesfocagem (nm) -4051 ± 502 -3643 ± 737 -3.443 ± 1.086\nConjuntos de partículas intermediárias 25.907 27.305 22.773\nConjuntos de partículas finais 25.907 10.455 10.430\nTabela 1. Análise estatística 2D seguintes o algoritmo apresentado no fluxograma na Figura 3.\nNeste trabalho é apresentada uma metodologia para diferenciar entre duas entidades ligadas à membrana das proteínas altamente homólogas: FVIII humano e porcino auto-montada em nanotubos lipídicas nas condições encontradas no corpo humano.\nNo processo descrito, o FVIII humano e porcino são organizados com sucesso de modo helicoidal em nanotubos de lípidos, que é a etapa mais crítica. O próximo passo crítico é o de preservar a amostra em gelo amorfo fino por congelamento do flash perto líquido N temperatura 2. Preservar a amostra em gelo amorfo e LN2 temperatura mantém os tubos helicoidais hidratados e os conjuntos macromoleculares proteína-lípido fisiologicamente ativa. O passo final é fundamental a aquisição de dados Cryo-EM de quantidade e qualidade suficiente para uma estrutura 3D de alta resolução em temperatura perto de LN2. Coleta de dados em temperatura perto LN2 impede uma maior desidratação da amostra no alto vacuum do microscópio e radiação danos do feixe de elétrons.\nPara calcular a estrutura ligada à membrana do FVIII o primeiro passo crítico é a obtenção de partículas homogêneas (segmentos helicoidais) conjuntos aplicando classificação livre referência 2D e combinar partículas de classes com o mesmo diâmetro e grau de ordem. O segundo passo crítico é impor o volume certo inicial e parâmetros helicoidais (ascensão e ângulo azimutal) para a reconstrução helicoidal. A terceira e última etapa crítica é validar a estrutura helicoidal através da comparação dos mapas 3D obtidos pelo reconstruções do mesmo espécime helicoidal e eletrônica tomografia (sem simetria imposta).\nA metodologia apresentada é única em sua capacidade de resolver a estrutura funcional de proteínas associadas à membrana em condições fisiológicas perto. A LNT desenvolvido em nosso laboratório pode serutilizado com sucesso como uma plataforma para a organização helicoidal de factores de coagulação do sangue ligados a membranas funcionais e alcançar uma melhor resolução do que para o FVIII organizado em cristais 2D ligada à membrana e como partículas individuais. O nosso objectivo é o de aumentar ainda mais a resolução dos nossos reconstruções helicoidais, melhorando a homogeneidade e qualidade dos conjuntos de partículas finais. Coleta mais micrografias Cryo-EM em melhores condições de Cryo-EM (arma Emissão de campo, filtro de energia, DE detectores da câmara) de FVIII-LNT filamentos helicoidais e, portanto, incluindo grandes conjuntos de partículas iniciais para a reconstrução 2D vai conseguir isso. Melhorar a montagem helicoidal FVIII-LNT e algoritmos de reconstrução 3D nos permitirá obter sub-nanométrica e perto de resolução atômica, o que inequivocamente definir a organização ligada à membrana desta proteína fundamental para a coagulação do sangue.\nOrganizar formas de FVIII helicoidal homólogos nos dá também a oportunidadesty caracterizar como diferença na seqüência pode correlacionar a diferenças na estrutura e função. Resolver os FVIII estruturas ligadas a membrana humanos e suínos pelos métodos descritos neste artigo podem ajudar a identificar as seqüências, que quando modificados irão melhorar a função FVIII recombinante. Este conhecimento vai ter implicações clínicas significativas para a descoberta de drogas em ambos os campos Trombose e Hemostasia.\nOs autores declaram que não têm qualquer interesse financeiro que faça concorrência e eles podem ser contatados diretamente em relação a qualquer dos procedimentos publicados neste manuscrito.\nEste trabalho é apoiado por uma concessão Nacional Scientist Desenvolvimento da American Heart Association: 10SDG3500034 e UTMB-BCN arranque fundos para SSM. Os autores reconhecem as instalações Cryo-EM e computação científica no Centro Sealy de Biologia Estrutural em UTMB ( www.scsb.utmb.edu ), bem como os drs. Steve Ludtke e Ed Egelman para obter ajuda com os algoritmos de reconstrução helicoidais 2D e 3D.


Dúvidas frequentes ao organizar uma Festa do tema LOL Surprise – Menina Moderna\nPosted on March 6, 2019 March 7, 2019 Location: Brasil 1 min read 1350 views\nAtualmente, a maior febre das crianças, especificamente meninas, é a famigerada LOL. A mesma, é uma boneca de aproximadamente 8 centímetros, que vem dentro de uma esfera. O melhor é a surpresa que vai do vestuário da boneca que vem dentro da esfera até a identidade da personagem, tudo isso só é revelado após a embalagem ser aberta!\nAs incríveis festas no tema LOL, que estão em alta e são compostas de muito brilho, cores alegres.\nAtualmente, a maior febre das crianças, especificamente meninas, é a famigerada LOL, sendo uma boneca de aproximadamente 8 centímetros, que vem dentro de uma esfera. O melhor é a surpresa que vai do vestuário da boneca que vem dentro da esfera até a identidade da personagem, tudo isso só é revelado após a embalagem ser aberta.\nEntretanto, o assunto que será abordado aqui, são as incríveis festas no tema da LOL, que estão em alta e são compostas de muito brilho, cores alegres, além de variados looks que suas princesas podem aderir! E quando estamos planejando uma festa com um tema tão abrangente, o primeiro impulso é procurar na internet dicas de como montar uma festinha linda e procurar o look ideal. Obviamente, não tem como colocar tudo sobre uma festa da LOL aqui, porém ajudarei com algumas dicas.\nLá vai uma dica de lembrancinha linda:\nAlém de serem super fofas, essas almofadas da Lol são lembrancinhas que serão guardadas por muito tempo, não é simplesmente algo de papel q será facilmente descartado, e o significado de uma lembrança é ser guardada para recordar um momento especial.\nEntretanto, não é um tema tão voltado para meninos, a duvida que surge é, quais lembrancinhas usar para eles?\nUma boa aposta são essas mochilinhas lindas, o fato é, o tema LOL, pode incluir os meninos? Sim!Outro importante aspecto é o look da aniversariante.\nAtualmente, as mamães preferem os vestidos com a estampa LOL ao invés de uma fantasia. Como esses, que são os meus queridinhos:\nBoneca LolFesta de meninaFesta temáticaLol Surprise


February 11, 2019, 3:00 pm / mauro-pereira-martins43108.tinyblogging.com\n1. A mera instauração de inqué especialmenterito policial ou por proceder penal contra este cidadão não Pode vir a implicar, em fase do investigaçãeste social por concurso público, sua eliminaçãeste da disputa, a ser necessário de modo a a configuração de antecedentes este trânsito em julgado por eventual condenaçãeste. Jurisprudência.\n1. A ofensa ao art. 535, II, do Palavra por Processo Civil nãeste se configura quando este acórdão dos embargos declaratórios cumpre seu ofício, concluindo de que não havia omissão a ser sanada, sobretudo porque solucionou a controvérsia utilizando o direito qual entendeu melhor aplicável ao caso.\nPelo seu caso, a existência por protesto nãeste seria motivo razoável a ensejar a tua eliminação. Nesse caso, inicialmente, nãeste vislumbro a possibilidade da sua própria eliminaçãeste em concurso público, a existência por protestos ou dívidas não podem acarretar na eliminaçãeste por candidato do concurso:\nNo seu caso, a existência de dívidas nãeste seria motivo razoável a ensejar a tua eliminaçãeste. Assim, inicialmente, não vislumbro a hipotese da tua eliminação em concurso público, a existência por dívidas ou protestos não podem acarretar na eliminaçãeste por candidato do concurso:\n1. Cuida-se do recurso ordinário em mandado do segurança interposto contra acórdãeste de que denegou o pleito de anulação da portaria qual excluiu candidato do certame ao cargo por soldado da polícia militar por nãeste deter apresentado as devidas informações na fase por investigaçãeste social; o impetrante alega que informou em formulário deter respondido ocorrência criminal a qual, contudo, teria resultado em transaçãeste penal.\nEste entrada ao Cargo de Delegado do Polícia de algué especialmentem de que responde ação penal pela prática dos crimes de maneiraçãeste de quadrilha e por corrupçãeste ativa compromete uma DE mais importantes instituições do Estado, e não Têm a possibilidade de ser tolerado.\nA sindicância de vida pregressa visa apurar se o candidato é contumaz em práticas de que o desabone, natural saiba como se já praticou ilícitos penais.\nEste Superior Tribunal de Justiça possui inúmeros precedentes no sentido do de que este candidato indiciado em inqué especialmenterito policial ou condenado em sentença penal isento trânsito em julgado não Pode vir a ser eliminado do concurso público com base nessas circunstâncias.\nO fato do senhor ter sido punido usando demissão poderá ensejar na sua eliminação do concurso na fase por investigação social, principalmente se ocorreu por justa causa. Isso porque, a demissãeste poderá ser considerada fato desabonador da tua conduta.\nPorem a 2 meses atras fui cobrar uma rescisãeste por contrato Lélio Vieira Carneiro Júnior do uma ex chefe e esta fez 1 BO contra mim por calunia.. dizendo que a chamei de caloteira. Fui notificada, e vai haver destemido tipo por conciliaçãeste tal semana.\nOs fatos ocorridos enquanto você é menor por idade nãeste são capazes do ensejar sua eliminação do concurso. O Superior Tribunal do Justiça reiteradamente decide que ato infracional sequer pode ser considerado tais como maus antecedentes para fins de majoração por pena base.\nContudo, há concursos, tais como para a polícia militar, de que trazem uma lista de averiguação extensa sobre a vida pregressa do candidato, elevando o número do exigências. Inclui-se no formulário do investigaçãeste questões sobre:


May 17, 2018, 4:58 am / fernandatrtima90974.full-design.com\nA distinçãeste é por fundamental importância, notadamente para fins por dosimetria da pena a ser aplicada em caso de condenaçãeste. Porém, querer vincular a análise da prova dos autos acerca da participação por acusados nos crimes que lhes foram imputados à teoria do domínio do fato é demonstração de supremo desconhecimento A cerca de tua origem e finalidade.\nNão seria justo de que cumprissem pena enquanto ESTES controladores ganhassem imunidade. Só de que o benefício concedido já deixou a PGR sob intensa pressãeste desde o início. E a partir de este início, entãeste, iniciaram-se os ataques.\nÉ necessário qual se veja, no entanto, de que as inegavelmente nefastas consequências socioeconômicas decorrentes da prática de tais crimes já foram por certo consideradas pelo legislador quando instituiu a escala penal — ou mesmo que, as penas mínima e máxima — por cada 1 deles.\nNão para todo mundo Vida em outro planeta: Em Marte, todos sãeste Ainda mais leves Utilizando crise, programas sociais da Venezuela estãeste falindo A lei é para todos? Este futuro do combate à corrupçãeste H2N3 existe? Boato inventa "vírus mortal" de gripe\nRecuperado por lesão, este volante Edenilson voltou a treinar utilizando bola e Têm a possibilidade de reforçar este Inter contra a Chapecoense\nVerifico qual ESTES comentários A respeito de esta maté especialmenteria, quaisquer apaixonados outros nãeste, na tua grande maioria não mencionam o fato Muito mais importante neste episódio, ou seja, A CORAGEM, O MARAVILHOSO Manejorefregatráfego, A SERENIDADE DA DRª FERNANDA TÓRTIMA. Exatamente com deter presenciado todos ESTES fatos, desprovido saber Pormenores do ocorrido, se posicionou a benefício DE nossas prerrogativas, fez constar na ATA daquela sessão os requerimentos Destes advogados, com nenhum juízo por valor, tinha o direito por ver registrados os seus requerimentos.\nO posicionamento por mim adotado e já naquela oportunidade externado, na habilidade do Presidente da Comissãeste de Defesa, Assistência e Prerrogativas da OAB/RJ, não implicou emissãeste de juízo por valor acerca Fernanda Tórtima Destes fatos ocorridos previamente da chegada do representante por nossa entidade do Classe pelo local.\n“Me senti triste utilizando a ESTILO tais como repercutiu. Fiquei chateado porque a Dra. Fernanda não era a pessoa que deveria ter recebido a manifestaçãeste utilizando aquelas palavras fortes [bucha por canhão]\nEste que nunca imaginaram os referidos autores tedescos é de que a teoria por eles cuidadosamente estudada e desenvolvida viria a ser 1 POR DIA desvirtuada e utilizada de modo a flexibilizar a análise rigorosa de que deve ser fabricada em um processo penal acerca da prova dos autos, a partir da presunçãeste de qual alguém possua participado da prática por determinado crime em razão por tua posição hierárquica dentro do determinada estrutura por poder, como ocorreu recentemente em determinadas passagens do julgamento da Ação Penal 470.\nMendes Mendes 09 set 2017 - 10h47 Exemplar no ponto do vista por quem?? No ponto por vista do cidadãeste comum e honesto era unicamente mais uma utilizando velhacaria protegendo gente ( ex ministro Cardoso e menbros do STJ ou STF sei la) para se beneficiar no futuro nos tribunais. Ainda mais uma malandragem de advogados.\nA partir do marçeste, quando ela diz de que tomou ciência da intenção Destes executivos de realizarem uma colaboraçãeste, “fui consultada em algumas oportunidades A cerca de este tema. E depois de publicizada a colaboraçãeste, continuei a atuar ativa e formalmente pelo inquérito envolvendo BNDES, até mesmo levando clientes para depoimentos na PF e na PRDF, natural tais como ajuizando reclamaçãeste no STF e mandados por segurança no TRF1”.\nPara comentar você precisará entrar utilizando seu usuário e senha do Abril Accounts ou executar login espie esses caras atravé especialmentes do Facebook ou do Google+


Agito total! Pedro Bial é flagrado beijando outra mulher nos bastidores da Globo - Receitas Nota 1000\nHome » Sem categoria » Agito total! Pedro Bial é flagrado beijando outra mulher nos bastidores da Globo\nAgito total! Pedro Bial é flagrado beijando outra mulher nos bastidores da Globo\nO apresentador Pedro Bial que comanda um programa de entrevistas nas madrugadas globais, foi visto beijando uma convidada\nSempre discreto #Pedro Bial se manteve à frente de vários projetos na #TV Globo, entre os mais conhecidos de grande repercussão está o “Big Brother Brasil”.\nAtualmente Pedro Bial está no comando do seu programa diário na TV Globo, que vai ao ar nas madrugadas brasileiras, o talk show “Conversa com Bial”.\nParece que Pedro Bial estaria não apenas alcançando excelentes médias de audiência colocando a Globo na liderança isolada no Ibope durante a madrugada, mas também elevando a quantidade de comentários na emissora depois de ter sido visto beijando uma mulher no seu local de trabalho. Seria uma falta de respeito com a esposa grávida?\nDe acordo com o portal de notícias online “TV Foco”, o apresentador foi visto beijando uma de suas convidadas nos bastidores do seu programa, durante as gravações que aconteceram nesta quarta-feira (24).\nNo dia 23 de maio de 2015, Pedro Bial se casou com a consultora de moda Maria Prata em uma cerimônia íntima em Petrópolis, região serrana do Rio de Janeiro. A esposa de Pedro está grávida, o casal espera pela chegada de uma menina. Pedro já é pai de três filhos, Ana, Theo e José Pedro de relacionamentos anteriores.\nO programa de entrevistas do apresentador sempre conta com convidados ilustres e o bate-papo inteligente e instigante já se tornou a principal marca do talk show. Entre as celebridades que já passaram pela sabatina do apresentador estão: Rita Lee, Rodrigo Santoro, Ministra Carmem Lúcia, Padre Fábio de Melo, Maiara e Maraisa, ex-atleta Laís Souza, dr. Drauzio Varella, entre outros.\nNesta quarta-feira (24), Bial gravou mais um programa e quem vai abrilhantar a atração é a cantora Elza Soares.\nAlém de conversar com o Pedro sobre vários temas, Elza fará uma apresentação musical ao lado de ao lado do músico Arrigo Barnabé.\nEm se perfil no Instagram, Elza Soares surpreendeu a todos ao postar uma foto onde ela e Pedro Bial se beijam. Os dois trocaram um selinho nos bastidores da Globo.\nOs fãs do programa ainda podem esperar por muitas surpresas, Bial pretende receber ainda muitas celebridades em seu programa, ele chegou a afirmar que pretende entrevistar o Papa Francisco, Pelé, Xuxa, etc.\nCom a inteligência e sagacidade de sempre, Pedro Bial vem conquistando um público cativo, ávido por debates inteligentes sobre os mais diversos assuntos. Certamente o talk show vai se consolidar como um dos melhores da TV brasileira. #Famosos


Pequenos detalhes da vida: Sete dicas de gestão empresarial\n1.Um rapaz vai a uma farmácia e pergunta:\n- Senhor, dê-me outro. A irmã da minha namorada é uma gostosona, vive cruzando as pernas na minha frente. Acho que também quer me dar.\n- Senhor, abençoa estes alimentos, blá, blá, blá... Damos graças por estes alimentos...\nPassa-se um minuto e o rapaz continua de cabeça baixa rezando: - Obrigado Senhor blá, blá, blá...\n2.Um homem está entrando no chuveiro enquanto sua mulher acaba de sair e está se enxugando.\nQuando ela abre a porta, vê o vizinho Nestor em pé na soleira. Antes que ela possa dizer qualquer coisa, Nestor diz: - Eu lhe dou 3.000 reais se você deixar cair esta toalha!\n3.Um padre está dirigindo por uma estrada quando vê uma freira em pé, no acostamento.\n4.Dois funcionários e o gerente de uma empresa saem para almoçar e na rua encontram uma antiga lâmpada a óleo.\n- Eu primeiro, eu primeiro. - Grita um dos funcionários. - Eu quero estar nas Bahamas dirigindo um barco, sem ter nenhuma preocupação na vida.\n5.Na África, todas as manhãs, o veadinho acorda sabendo que deverá conseguir correr mais do que o leão, se quiser se manter vivo.\n6.Um corvo está sentado numa árvore o dia inteiro sem fazer nada.\n7.Um fazendeiro resolve colher algumas frutas em sua propriedade, pega um balde vazio e segue rumo às árvores frutíferas.\nColaboração de Felipe.\nàs 10/11/2010 08:37:00 AM


"O melhor conselho que já Recebi" - Por Brenda Lima\nClaro que já recebi inúmeros conselhos de familiares, colegas de trabalho, chefes e etc. Guardo todos eles com muito carinho, sobretudo aqueles que me ajudaram em momentos difíceis. De entre todos, tem um que foi essencial para o meu dia a dia. Uma chefe bem lindona me falou uma vez que a bondade era um esporte perigoso. Logo de cara aquela frase me marcou. Fiquei: Êpa! Ma o lance não era fazer o bem sem olhar a quem? Mas aí deixei de lado a menina que ainda ditava as regras dentro de mim e refleti. A mensagem principal desse conselho é na verdade um aviso.\nA bondade é um esporte perigoso.\nVocê pode estar se questionando(assim como eu fiz) se esse conselho é certo ou errado. Muitas vezes na vida você vai se deparar com esses momentos onde precisa crescer e pensar como “gente grande”. Não se engane, para ser bom o tempo todo você precisa se conhecer para compreender onde está se metendo. O que ganhamos em atos impensados?\nSe formos realmente honestos, conseguimos perceber que não ganhamos nada. O resultado que obtemos é por base numa mentira. Se o que apresentamos é falso, qualquer aprovação que venha do exterior não terá grande valor para nós.\nNessa semana eu dei conselhos para dias estressantes! Veja aqui!\nSe hoje tenho uma ligação mais profunda a mim mesma, foi graças à inspiração desse conselho. A minha publicação de hoje é para seres tu mesmo, para valorizares a tua individualidade e singularidade.\nE você? compartilha aí um pouco da sua sabedoria comigo!


Parceria firmada em prol da Ilha dos Gatos - Jornal Atual\nInícioItaguaíParceria firmada em prol da Ilha dos Gatos\nPrefeitura de Mangaratiba, Governo do Estado e Marinha do Brasil juntos na proteção e no controle populacional de felinos na Ilha Furtada\nINICIATIVA A Prefeitura de Mangaratiba e o Governo do Estado, por meio da Secretaria de Agricultura, Pecuária, Pesca e Abastecimento, firmaram nesta quarta-feira (28), uma parceria inédita para fazer o controle populacional de felinos na Ilha Furtada, conhecida como Ilha dos Gatos. O projeto irá contemplar o monitoramento 24 horas do local, atenção permanente a saúde dos animais e a adoção de estratégias para proibir novos casos de abandono, entre outros investimentos.\nDe acordo com a prefeitura, a ideia do projeto, que vai envolver o Governo do Estado, a Marinha do Brasil, e as Secretarias Municipais de Saúde e Meio Ambiente, é que seja criado um acordo de cooperação entre os órgãos, bem como, um grupo permanente de trabalho, que terá como foco solucionar os problemas acarretados pela superpopulação de gatos que vivem na ilha.\nO primeiro passo do trabalho será a realização de um diagnóstico completo da Ilha que deve constar, entre outros dados técnicos, o total de felinos que vivem no local, os impactos trazidos por eles a fauna, flora e demais ecossistemas, os riscos aos quais esses animais são submetidos e se é possível a remoção deles do local, já que a maioria é selvagem e sem condições de interação com humanos.\nA secretária de Saúde de Mangaratiba, Sandra Castelo Branco, disse que os poderes precisam se unir para solucionar a demanda da Ilha dos Gatos. “A situação a qual esses animais estão submetidos é grave. Estamos lidando com um risco a saúde pública e ao meio ambiente. Os poderes precisam estar juntos e encontrar uma solução definitiva para esses animais. Não adianta fazermos a castração e devolvermos esses gatos para a Ilha. Lá eles não possuem condições de sobrevivência e cada vez mais, registramos flagrantes de abandono”, explicou.\nO secretário de Meio Ambiente de Mangaratiba, AntonioMarcos Barreto, também falou sobre a importância do projeto. “Cuidar dos animais dessa Ilha é uma preocupação constante do governo Alan Bombeiro. Fazemos atuações no local, já instalamos bebedouros e comedouros em parceria com projetos da causa animal, entre outras ações. Mas, a questão precisa ser solucionada de forma devida. A fauna e flora nativa estão em risco e esses animais também. Na ilha não há oferta de água potável ou fontes de alimento. Mas, tenho certeza que com a colaboração do Estado encontraremos o melhor caminho para uma solução efetiva e responsável”, destacou.\nO secretário de Estadual de Agricultura, Pecuária, Pesca e Abastecimento, Marcelo Queiroz, disponibilizou a estrutura da secretaria de estado para viabilizar os recursos que vão permitir que seja feito o monitoramento da Ilha e o suporte às demais ações. “Vamos pedir o apoio do Ministério Público, ao governador e todos os órgãos ambientais que puderem nos ajudar. Precisamos tirar esse projeto do papel. Queremos monitorar a ilha forma permanente, estudar a melhor forma de fazer o controle populacional desses animais, ver a viabilidade de transferi-los para um local com condições adequadas de vida e punir quem pratica o abandono. Mais do que uma ação de defesa do direito animal, precisamos mudar comportamentos”, destacou.\nA Prefeitura de Mangaratiba ressalta que a iniciativa também visa a promoção de ações de conscientização junto a população e um programa de adoção com os animais que tem condições de socialização.\nParticiparam da reunião o vice-prefeito, Chicão da Ilha, o secretário de Governo, Finanças e Planejamento, Luiz Cláudio Ribeiro, o secretário de Agricultura e Pesca, Roberto César Oliveira, a subsecretária de Meio Ambiente, Fernanda Porto, além de um representante da Marinha do Brasil.\nMatéria anteriorPesca ilegal é interrompida em Mangaratiba\nPróxima MatériaA vez da Vale: CPBS é multada em mais de R$ 2 mi


Blog do César Mello: Premiações dos melhores dos campeonatos Regional da Moda e Master de Futebol acontecem nesta quinta-feira, 26\nPremiações dos melhores dos campeonatos Regional da Moda e Master de Futebol acontecem nesta quinta-feira, 26\nEstá tudo pronto para a cerimônia de premiação dos melhores dos campeonatos Regional da Moda e Master de Futebol 2018. As homenagens acontecem nesta quinta-feira (26), às 19h, no Teatro Municipal. Além de amantes do futebol, o evento vai reunir os melhores atletas e equipes técnicas das duas competições.\nO evento será realizado pela Prefeitura de Santa Cruz do Capibaribe, por meio da Secretaria Executiva de Esportes. “Gostaria de convidar a população para participar deste evento e prestigiar mais uma vez os nossos atletas”, disse Rubens Monteiro, secretário executivo de Esportes. Os dois torneios envolveram 500 atletas, com média de dois gols por partidas. O vencedor do campeonato Regional da Moda foi o Porto da COHAB, já o do Master de Futebol foi o Capibaribe.\nSerão premiadas as três primeiras equipes de cada torneio, os melhores jogadores, artilheiros e goleiros menos vazados, além da musa do Campeonato Regional da Moda.


WhatsApp Business: Aprenda a criar links curtos para sua conta\nWhatsApp Business: Aprenda a gerar links curtos para sua conta comercial\nEssa ferramenta do WhatsApp corporativo permite compartilhar o seu contato com outras pessoas e facilita a divulgação do canal de comunicação com clientes e potenciais compradores\nO WhatsApp Business é uma ferramenta essencial para qualquer negócio e um dos principais meios de comunicação entre empresas e clientes. Afinal, é o aplicativo favorito dos brasileiros, presente em mais de 54% das telas iniciais dos smartphones no Brasil, segundo o Panorama MobileTime/Opinion Box.\nCriado para facilitar a comunicação entre empresas e clientes, o WhatsApp Business tem uma funcionalidade importante para as marcas divulgarem esse canal de comunicação: a geração de links curtos. Com essa ferramenta, os usuários só precisam clicar no endereço para iniciar uma conversa com a sua empresa, sem a necessidade de adicionar o número.\nO recurso é extremamente útil para ser compartilhado em redes sociais como Instagram e Facebook, direcionando possíveis clientes e interessados direto para uma conversa com a sua marca. Neste artigo, você vai encontrar exatamente como criar um link e um código QR Code para facilitar a sua comunicação com clientes e interessados.\nComo criar um link curto no WhatsApp Business\nComo criar um QR Code para o seu WhatsApp\nComo oferecer um Catálogo de produtos\nConquiste os clientes com o selo de conta verificada\nAntes de gerar um link no WhatsApp, confira se você tem a última versão do aplicativo instalada no celular. Se o seu telefone é Android, acesse a Google Play Store, busque “WhatsApp Business” e clique em “Atualização”. Caso você tenha um iPhone, basta entrar na App Store, verificar as atualizações e deslizar para baixo para realizar uma busca por novas versões de aplicativos instalados.\nUma vez atualizado o WhatsApp Business, vamos ao passo a passo para criar um link curto.\nClique nos três pontinhos que aparecem no canto superior direito da tela.\nEm seguida, selecione a opção ‘Configurações’.\nNa tela que abriu, clique em ‘Configurações da Empresa’ e selecione ‘Link curto’.\nEm seguida, você vai ver as opções de copiar o link ou compartilhar.\nNa tela, ainda dá para criar uma mensagem padrão: aquela que você quer que seu cliente envie para sua empresa no primeiro contato. Pode ser “Olá! Tenho interesse em um dos seus produtos.” Capriche na criatividade.\nClique no canto inferior direito da tela para acessar ‘Ajustes’.\nSelecione ‘Ajustes da Empresa’ e, em seguida, ‘Link’.\nNa tela que apareceu, você vai ver as opções de copiar o link ou compartilhá-lo em redes sociais.\nPara adicionar uma mensagem padrão, aquela que você deseja que seus clientes enviem no primeiro contato com a sua empresa, é só digitar o texto no campo ‘Criar uma mensagem padrão’.\nSe o link curto facilita o compartilhamento da sua conta comercial em redes sociais, o QR Code do WhatsApp Business é uma mão na roda para disponibilizar o seu contato em espaços físicos - pode ser na sua loja, em um estabelecimento parceiro, em propagandas, anúncios impressos, vitrines, sacolas, etc.\nO QR Code é como um código de barras que pode ser lido pelas câmeras dos celulares. Basta apontar para o gráfico em 2D para acessar uma página na web, cardápio, catálogo - e também uma conversa no WhatsApp. Esse código não expira e não tem data de validade.\nVeja como criar um QR Code para direcionar as pessoas diretamente para uma conversa com a sua empresa:\nClique nos três pontinhos que aparecem no canto superior direito e selecione a opção ‘Ferramentas Comerciais’.\nEm seguida, clique em ‘Link Curto’ e, dessa vez, escolha ‘Código QR’ para visualizar o seu QR Code.\nSalve a imagem para compartilhar em locais estratégicos.\nNão basta só compartilhar a sua conta comercial no WhatsApp Business para atrair clientes: é preciso, também, dedicar tempo e esforço para criar uma experiência de compra excepcional no aplicativo. É uma tarefa difícil, mas com o uso de algumas ferramentas, é possível conquistar e encantar.\nNinguém gosta de chegar em uma loja física e os produtos estarem escondidos em locais que não podemos ver, não é mesmo? Isso acontece também com o WhatsApp: você gerou links curtos e QR Codes para direcionar as pessoas para a sua conta, mas nada adianta se os seus produtos ou serviços não estiverem disponíveis para que o interessado veja as opções.\nÉ por isso que a ferramenta de ‘Catálogo’ é tão importante no WhatsApp Business. Com ela você pode disponibilizar os seus produtos ou serviços com fotos, descrições e os preços para que os clientes se sintam como em uma loja. Vamos começar a colocar suas opções no catálogo?\nClique em ‘Ferramentas Comerciais’ no menu do aplicativo.\nSelecione ‘Adicionar produto ou serviço’ para cadastrar uma opção.\nInsira foto, nome, descrição e preço.\nSe você tem um site, pode adicionar também um link diretamente para a página do produto no seu e-commerce.\nClique em ‘Salvar’ para finalizar.\nPara adicionar mais produtos ou serviços, repita o processo.\nCatálogo de produtos no WhatsApp Business. (Imagem: Reprodução/WhatsApp)\nO WhatsApp Business é um aplicativo gratuito e ao fazer uso dele, a sua conta é classificada como ‘comercial’. Para ir além, conquistar a confiança e passar credibilidade aos clientes, existe também o selo de conta verificada, que significa que o WhatsApp confirmou que o número de telefone corresponde ao número da empresa.\nExistem três tipos de contas comerciais no WhatsApp Business:\nConta comercial: significa que o número utiliza o WhatsApp Business, mas não foi verificado se de fato corresponde à empresa.\nConta confirmada: aparece um ícone cinza ao lado do nome da empresa e significa que o telefone é o mesmo da empresa.\nConta verificada: o WhatsApp confirmou que o número de telefone pertence a uma marca autêntica. Aparece um ícone verde ao lado do usuário.\nQuanto mais conhecida for a sua empresa, maiores as chances de você conquistar o selo de conta verificada. Uma das formas de obter, é através da contratação do WhatsApp API, um serviço que oferece diversas vantagens e benefícios para melhorar o atendimento.\nPara 80% dos brasileiros, o WhatsApp é também um canal de comunicação com marcas e empresas. Para as empresas, o aplicativo é uma ferramenta fundamental para auxiliar nas vendas, realizar atendimento e oferecer produtos.\nDivulgar a sua conta comercial em redes sociais e espaços físicos é fundamental para aumentar o alcance da sua comunicação e conquistar novos clientes. Se a sua empresa está presente em diversas redes sociais, você pode compartilhar o link curto do WhatsApp Business para transformar a sua conta comercial em um centralizador de atendimentos.\nMas lembre-se: é importante criar uma boa experiência de compra e encantar os possíveis compradores com um atendimento atencioso, humanizado e personalizado. Já o QR Code, pode fazer parte de uma estratégia macro de divulgação, aliada a outros canais.


Alugar Aspirador Industrial de Pó e água Vinhedo - Aspirador de Pó Industrial Karcher - Diademáquinas Locação de Andaimes e Ferramentas\nalugar aspirador industrial de pó e água Vinhedo é essencial para quem deseja manter o ambiente livre de pequenas partículas e poeiras.\nPara quem busca alugar aspirador industrial de pó e água Vinhedo, Ao se tratar de Locadora de Máquinas é encontrada por meio da empresa Diademáquinas serviços como locação de andaimes em São Paulo, lavadora de alta pressão e andaimes. Tudo isso só é possível graças ao time de profissionais especializados e as instalações de alto padrão. Contamos com uma equipe altamente treinada para atender nossos clientes.\nPara saber mais sobre Alugar Aspirador Industrial de Pó e água Vinhedo\nO conteúdo do texto "Alugar Aspirador Industrial de Pó e água Vinhedo" é de direito reservado. Sua reprodução, parcial ou total, mesmo citando nossos links, é proibida sem a autorização do autor. Crime de violação de direito autoral – artigo 184 do Código Penal – Lei 9610/98 - Lei de direitos autorais.


Conheça a Uniube e outras boas faculdades em Uberaba\nDescubra tudo sobre a Uniube de Uberaba e conheça outras excelentes instituições de ensino superior na cidade mineira!\nA Uniube oferece cursos nas modalidades presencial e a distância em suas duas unidades localizadas na cidade de Uberaba, em Minas Gerais.\nSe você tem interesse em estudar na Uniube de Uberaba, fique ligado nas próximas linhas, que reúnem informações sobre os campi da instituição na cidade, cursos oferecidos, valor das mensalidades e formas de ingresso. Conheça também outras opções de ótimas faculdades instaladas em Uberaba.\nLocalização da Uniube de Uberaba\nSaiba onde ficam localizados os dois campi da Uniube na cidade de Uberaba:\nCampus Aeroporto: o principal campus da Uniube está concentrado na Av. Nenê Sabino, nº 1801. Ali funcionam as salas de aula, laboratórios, além do prédio ocupado pela biblioteca central.\nNa unidade estão instaladas também a Reitoria, Vice-Reitoria, Pró-Reitorias, diretorias de institutos, cursos e a Divisão de Serviços Acadêmicos.\nFazem parte ainda do complexo o núcleo de informática, gráfica universitária, livraria, agências bancárias e praça de alimentação.\nCampus Centro: na Av. Guilherme Ferreira, nº 217, está a sede da Sociedade Educacional Uberabense, instituição sem fins lucrativos, mantenedora da Uniube.\nLá funcionam também a Policlínica Odontológica Getúlio Vargas e as clínicas de Psicologia, Fonoaudiologia, Pedagogia Especial, Fisioterapia, Nutrição e Terapia Ocupacional, além do Laboratório de Análises Clínicas do curso de Biomedicina.\nCursos oferecidos na Uniube de Uberaba\nNa Uniube de Uberaba, o aluno encontra opções de graduação na modalidade presencial e a distância, do tipo bacharelado, licenciatura e cursos tecnológicos.\nConheça os cursos presenciais oferecidos pela Uniube de Uberaba:\nVeja também os cursos a distância oferecidos pela instituição:\nLetras ? Português/Inglês\nQuanto custa estudar na Uniube de Uberaba\nAs mensalidades podem variar muito de acordo com o curso e a modalidade escolhida.\nEntre os cursos presenciais, é possível encontrar mensalidades entre R$700 e R$1.500.\nJá na modalidade a distância, os cursos tendem a ser mais baratos por não exigirem a infraestrutura física que os cursos presenciais exigem.\nNo caso da Uniube, os valores giram em torno de R$350 a R$900.\nComo ingressar na Uniube de Uberaba\nConfira as diferentes formas de ingresso que a Uniube oferece para seus cursos de graduação:\nVestibular Tradicional: provas com datas e horários agendados pela própria instituição. Para cursos presenciais e a distância.\nVestibular Agendado: provas agendadas pelo próprio candidato, de acordo com as datas e horários disponibilizados pela instituição. Para cursos presenciais e a distância.\nTransferência: se você iniciou seus estudos em outra instituição de ensino superior, pode solicitar transferência para a Uniube. Tanto para cursos presenciais ou a distância.\nPortador de Diploma: profissionais graduados na Uniube ou em qualquer outra instituição de ensino superior têm a oportunidade de ingressar na Uniube para vagas remanescentes. De cursos presenciais e a distância. Exceto Medicina.\nENEM: candidatos que realizaram as edições anteriores do ENEM podem utilizar a nota do exame para ingresso nos cursos de graduação. Exceto Medicina.\nConheça outras ótimas faculdades em Uberaba\nSe você é de Uberaba e tem o sonho de cursar um ensino superior, é muito importante conhecer variadas instituições para poder escolher a que mais se encaixa em seu perfil.\nPor esse motivo, fizemos uma pequena lista com algumas faculdades alternativas à Uniube de Uberaba.\nAlém de serem reconhecidas e bem avaliadas pelo Ministério da Educação (MEC), o que é essencial para que seu diploma seja reconhecido, todas elas oferecem ótimos benefícios ao aluno, como bolsas de estudos, descontos nas mensalidades e financiamento sem burocracia.\nTodas as instituições listadas acima possuem polo presencial na cidade de Uberaba. Isso facilita muito para quem tem o desejo de fazer um curso a distância (EAD).\nNessa modalidade, as aulas são realizadas pela internet, porém, o aluno precisa comparecer ao polo de ensino algumas vezes por semana para fazer as provas e outras atividades práticas.\nAgora que você já conhece a Uniube de Uberaba, responda nos comentários: pretende fazer algum curso na instituição? Qual?\nConteúdo relacionado a Conheça a Uniube e outras boas faculdades em Uberaba\nDescubra todos os cursos que a Uniube oferece\nSaiba tudo sobre a Uniube Online e outras faculdades em MG


Contra fuso horário e falta de entrosamento, Luiz Adriano causa boa impressão no Palmeiras | palmeiras | ge\n24/08/2019 06h00 Atualizado 2019-08-24T09:00:30.004Z\nPrimeira grande chance do jogo é do Palmeiras, Luiz Adriano sobe de cabeça mas manda para fora, aos 10 do 1º tempo\nForam duas partidas e nenhum gol marcado, mas a primeira impressão causada por Luiz Adriano dentro do Palmeiras, entre elenco, comissão técnica e diretoria, foi unânime: o centroavante recém-contratado é acima da média e se firmará como o titular da posição.\nNa estreia contra o Bahia, pelo Campeonato Brasileiro, menos de uma semana depois de ter chegado da Rússia, o reforço chamou atenção pela boa técnica com a bola, por boas finalizações e também pela inteligência tática em campo.\nA avaliação da comissão técnica nesse primeiro jogo foi mais do que positiva, em especial pela questão física, pelo fato de Luiz Adriano ter tido pouco tempo para se readaptar ao fuso horário brasileiro – a diferença para Moscou, onde ele defendia o Spartak, é de seis horas.\n1 de 2 Luiz Adriano tem causado boa impressão em seus primeiros passos no clube — Foto: Cesar Greco/Ag Palmeiras\nLuiz Adriano tem causado boa impressão em seus primeiros passos no clube — Foto: Cesar Greco/Ag Palmeiras\nJá diante do Grêmio, apesar de não ter levado tanto perigo, o atacante voltou a mostrar uma marcante característica: a agilidade nos passes. Ele costuma devolver de primeira os toques que recebe, mas, para isso, o entrosamento com os novos companheiros de time ainda não é o ideal.\n– Isso a gente está procurando nos treinos, estamos ajustando. A gente vai se conhecendo. São poucos treinos que a gente fez junto até agora. Mas, com o tempo, vamos nos conhecer melhor – disse o camisa 10.\n2 de 2 Luiz Adriano em treino do Palmeiras na Academia — Foto: Cesar Greco / Ag Palmeiras\nLuiz Adriano em treino do Palmeiras na Academia — Foto: Cesar Greco / Ag Palmeiras\nAté o duelo de volta das quartas de final da Libertadores, contra o Grêmio, no Pacaembu, serão mais três dias de treino. A partida está marcada para 21h30 (de Brasília) de terça-feira, quando Luiz Adriano provavelmente será de novo o centroavante escolhido pelo técnico Luiz Felipe Scolari.\n– Foi uma atuação boa (a dele), mas um pouco no sufoco. O Grêmio não deu espaço. No futuro, com mais jogos, ele vai ser de utilidade muito grande para o Palmeiras – comentou o treinador, em Porto Alegre.\nBruno Henrique prevê equilíbrio no Brasileirão e coloca Palmeiras na luta por mais um título\nVerdão enfrenta o Fluminense nesta quarta-feira, às 21h30, no Maracanã\nPreparador destaca trabalho emocional no Palmeiras e elogia Weverton: "Altíssimo nível"\nRogério Godoy foi reforço para a comissão técnica de Luxemburgo em julho


Millôr tem obra gráfica reunida em exposição http://www.jb.com.br - Cultura\nO humor gráfico do artista foi marcado por sua visão aguda da política brasileira. Millôr trabalhou para os principais veículos da grande imprensa (Jornal do Brasil, Veja) e participou ativamente do mais popular tabloide publicado durante a ditadura (O Pasquim). No livro que acompanha a mostra, o segundo a examinar a obra do artista (o primeiro, Desenhos, é de 1981), o recorte é diferente, mais variado. De qualquer modo, o assunto principal é o próprio Millôr e sua relação com o mundo - o que não surpreende, em se tratando de um artista que não fazia autorretratos como autoanálise, como Rembrandt, mas por puro egocentrismo.\nCássio Loredano, apontando para um desenho na exposição que mostra Millôr assistindo ao nascer de um novo dia, chama a atenção para os elementos que confirmam essa irresistível vocação cabotina: Millôr é o próprio sol, o pão de cada dia, "o alimento e a luz" que oferece ao leitor. "Ele era mesmo vaidoso, sabia qual era seu tamanho", define Cássio, comentando a sofisticação do seu traço e sua inteligência visual. Seu desenho, de fato, exige um espectador erudito, capaz de identificar citações a Mondrian, Picasso, Pollock, Steinberg e ao brasileiro Willys de Castro - uma série de desenhos na mostra evoca o esquema dos objetos ativos do artista neoconcreto.\nA ambição intelectual de Millôr não se restringiu às artes visuais - ele foi dramaturgo e tradutor de autores como Shakespeare e Fassbinder. O outro curador da mostra, Paulo Roberto Pires, lembra que o desenhista lutou contra as adversidades de uma vida marcada pela "infância dura" no subúrbio carioca do Méier. Basicamente, foi um autodidata com uma breve passagem pelo Liceu de Artes e Ofícios. Trabalhando na revista O Cruzeiro como contínuo, aos 14 anos, aproveitou a convivência com jornalistas e veio a se tornar uma referência no meio. Ganhou autonomia nos 18 anos em que escreveu a coluna Pif-Paf, publicando sem censura (até 1963) sob o pseudônimo Vão Gogo, clara alusão ao gênio holandês da pintura Vincent Van Gogh.\nEntre as peças preciosas da mostra está a reprodução de um pedido de desculpas dos editores de O Cruzeiro a leitores furiosos com uma sátira de 12 páginas da história bíblica da criação do mundo feita por Millôr em 1963. Indignado, ele transformou a Pif-Paf numa revista independente justamente às vésperas do golpe militar de 1964. Desnecessário dizer que durou pouco. O resto da história é mais ou menos conhecido. Millôr foi um dos humoristas mais censurados durante a ditadura - e há vários exemplos na exposição de ilustrações proibidas de circular pelo regime, riscadas com um enérgico x dos censores.\nTodo esse material, conta a coordenadora da área de iconografia do IMS, Julia Kovensky, só está hoje disponível ao grande público porque Millôr, ao morrer, vítima das consequências de um acidente vascular cerebral, deixou com o legado 94 volumes que reúnem material publicado em jornais como "O Estado de S. Paulo" e revistas como O Cruzeiro e Veja.


O Plano Participativo 'Modelar a Metrópole' de Desenvolvimento Metropolitano do Rio - RioOnWatch\nInício#MonitoramentoO Plano Participativo ‘Modelar a Metrópole’ de Desenvolvimento Metropolitano do Rio\nSe o papel das cidades enquanto instâncias de planejamento e tomada de decisão foi reconhecido pela Constituição de 1988, que lhes garantiu maior autonomia, há um movimento mais recente de reconhecer que há questões que superam os limites dos municípios e demandam um esforço conjunto das prefeituras de diferentes cidades. Apesar disso já estar previsto no estabelecimento de regiões metropolitanas, desde 1973, com o intuito de “integrar a organização, o planejamento e a execução de funções públicas” dos municípios envolvidos, a fraca presença de estruturas políticas e administrativas ao nível metropolitano dificulta essa missão. Não votamos, por exemplo, em representantes metropolitanos, não há secretarias metropolitanas nem políticas públicas metropolitanas. Há somente a possibilidade de cooperação entre as diferentes prefeituras.\nA gestão integrada é especialmente necessária para os 21 municípios que compõe a região metropolitana do Rio. Isso porque, entre outros, não é possível pensar a despoluição da Baía de Guanabara, que banha sete municípios diferentes, em iniciativas isoladas; porque as chuvas e o traçado dos rios não respeitam limites territoriais no caso de enchentes; porque todo dia 2 milhões de pessoas saem de seus municípios em direção à capital para acessar trabalho, estudo e serviços, percorrendo distâncias num raio de 70km em relação ao Centro do Rio.\nO Plano Modelar a Metrópole\nO processo de elaboração do Plano contou com a atuação de especialistas em seis eixos estruturantes (expansão econômica; patrimônio natural e cultural; mobilidade; habitação e equipamentos sociais; saneamento e meio ambiente; e reconfiguração espacial), além de incorporar insumos coletados a partir do diálogo com outros representantes do poder público e membros da sociedade civil, do setor privado, de universidades e de instâncias de classe. Ao longo dos três anos de elaboração do Plano, foram mais de 80 encontros (dentre oficinas regionais e de segmento), 94 apresentações das prévias do Plano para órgãos setoriais e sociedade civil, 22 grupos de discussão temáticos em torno dos seis eixos, cerca de 1800 especialistas ouvidos, 10 Pré-Conferências e uma Conferência Metropolitana e mais de 5000 presenças nos eventos realizados. Dentre os objetivos estavam abrir canais de participação mais direta, promover processos mais horizontais e aumentar a compreensão popular acerca dos temas tratados, de forma a reduzir desigualdades, assegurar a representatividade de todos os municípios no plano e contribuir para uma identidade metropolitana.\nEssa participação está prevista no próprio texto do Estatuto da Metrópole, que prevê no artigo 6º, inciso V a “gestão democrática da cidade”, conforme definido pelo seu antecessor, o Estatuto da Cidade, que estabelece instrumentos de participação na gestão democrática da cidade (art. 43), na gestão orçamentária participativa no âmbito municipal (art. 44) e na participação social em organismos gestores das regiões metropolitanas e aglomerações urbanas (art. 45), como debates, audiências, consultas públicas e conferências sobre assuntos de interesse urbano. O artigo 12º determina especificamente que o PDUI deve obedecer esses mecanismos, não só na sua elaboração, mas na sua aplicação, por meio do acompanhamento e controle de suas ações, de audiências públicas e debates com a participação de representantes da sociedade civil e da população de todos os municípios da metrópole e da comunicação dos documentos e informações produzidos.\nA participação vem ocorrendo tanto na elaboração de diagnósticos, quanto na priorização de propostas para saná-los. Um exemplo dessa participação foi a adaptação da proposta contida no Plano de uso dos mananciais das sub-bacias dos rios Guapi-Macacu e Guapiaçu, que inicialmente previa a construção de uma barragem, projeto antigo do governo do Estado ao qual os moradores se opõem pois alagaria as propriedades de mais de 300 produtores rurais e poderia ter consequências sobre a dinâmica climática da região. A partir da mobilização da sociedade civil e de um encontro específico organizado com os movimentos sociais de Cachoeiras de Macacu, a barragem foi retirada do Plano.\nO Fórum visa monitorar e fazer o controle social do governo, para que implemente as políticas públicas de acordo com o plano. Da sociedade civil foram eleitos na Conferência três representantes de ONGs (da Casa Fluminense, do ISER e da FASE), três representantes de órgão de classe (da OAB, SINTSAMA, e STI/PDAENIT), três representantes da academia (do Programa de Pós graduação em Sociologia e Direito da UFF, do Programa de Pós-Graduação Em Urbanismo da UFRJ e do Grupo de Pesquisa Natureza e Cidade da UFRRJ) e nove representantes de movimentos sociais (incluindo do projeto ReciclAção do Morro dos Prazeres, do Movimento Pró-Saneamento na Baixada, da Federação de Associações de Moradores de Maricá, Guapimirim e Japeri, da Confederação Nacional das Associações de Moradores, e do Fórum de Transparência e Controle Social de Niterói, do Pró-São Gonçalo, do Gomeia Galpão Criativo da Baixada). Também serão indicados 9 representantes do poder executivo do estado e dos municípios, 9 do poder legislativo e 9 do setor empresarial.\nCris dos Prazeres, uma das fundadoras do ReciclAção e uma das integrantes eleitas do Fórum, colocou: “Fiquei muito surpresa com a Conferência. Além da situação política grave do país e do nosso estado, estamos num momento de descrença, desânimo. [Daí] ver toda aquela gente reunida, com diferentes segmentos da sociedade! Achei incrível o quanto essa ação agregou diferentes saberes, olhares. No dia da Conferência ainda teve a paralisação dos ônibus por conta da greve dos caminhoneiros, [então] ter quase 80% das pessoas inscritas presentes foi maravilhoso. A organização foi nota mil! Sei o quanto é difícil trazer o público e mantê-lo focado”. E completou: “Acho espaços como esse extremamente construtivos para a construção de políticas públicas. São espaços de questionamento, sinergia, produção de saber. As pessoas precisam despertar uma consciência coletiva. No momento em que eu produzo conhecimento que melhora a vida do coletivo, melhora a minha também. E eles fazem com que sejamos catalisador de informação, pra que essa informação chegue aos nossos territórios, àqueles que não acessam esses espaço”.\nForam ainda priorizadas na Conferência 12 das 36 propostas de ação anteriores, que incluem a regularização urbanística e fundiária associada a investimentos sociais em favelas e periferias, o desenvolvimento agroecológico sustentável do território periurbano da região, o estabelecimento de redes de tempo seco para suprir necessidades de esgotamento sanitário, a conservação e o controle da poluição das bacias dos mananciais, a implantação da coleta seletiva e a destinação dos resíduos sólidos para cooperativas de reciclagem, o fortalecimento de outras centralidades urbanas na metrópole, a implementação da Linha 3 do metrô entre São Gonçalo, Niterói e Itaboraí, a utilização da estrutura ferroviária e do transporte aquaviário na Baía de Guanabara para transporte em massa de passageiros e o fortalecimento da Agência Metropolitana e do planejamento integrado.\nCris rebate a crítica que alguns fizeram de que por se tratar de um plano metropolitano, não há muitas ações voltadas especificamente para favelas: “O cidadão da favela é o cidadão da cidade, do estado. Eu olho como um todo, não consigo fazer essa divisão. Se a gente mantém a cidade partida, olhando sempre para duas cidades dentro de uma, a gente atropela o próprio discurso de participação. A gente quer ver a política pública acontecendo na casa desse sujeito e também no resto da cidade por onde ele passa”. Com respeito ao investimento especificamente nas favelas, ela destaca: “O que a gente tem de serviço aqui não alcança a população mais pobre, em primeiro lugar porque os dados, as informações que estão sendo produzidas, o censo, deixam mais da metade da população de favela invisível”.


Garantia dos Produtos - Sacaria Lucas\nAtendimento\t(11) 99631-0421 (11) 99631-0421 (WhatsApp) contato@sacarialucas.com.br das 9:00 as 16:00 horas\nPara trocas e devoluções o produto deverá ser encaminhado na embalagem original, com todos os manuais, acessórios e acompanhado da 2ª via da nota fiscal. Caso não tenha a nota fiscal, favor fazer uma declaração de compra por escrito descrevendo os motivos da troca ou devolução. Os produtos que nos forem encaminhados por motivo de defeito passarão pelo nosso departamento técnico para avaliação e constatação ou não do defeito de fabricação. Caso seja constatado que não há defeito no produto, a Sacaria Lucas providenciará o envio do mesmo produto ao endereço do Cliente; caso seja necessário o conserto do produto, o prazo para devolução do produto consertado é de 30 dias a contar da data de recebimento do produto em nosso estoque.\nA Sacaria Lucas está isenta da obrigação de trocar ou consertar qualquer produto cujo defeito tenha sido ocasionado por mau uso, de acordo com a avaliação de nossos técnicos. Esclarecemos que mesmo sendo a solicitação realizada no prazo de sete dias corridos previsto para a desistência da compra, a Loja reserva-se o direito de providenciar o conserto do produto, nos termos do Código de Defesa do Consumidor.\nSolicitar a Sacaria Lucas o reembolso em sua conta corrente.\nO Vale Compras á válido por 90 dias a contar da data de envio do mesmo. Caso algum produto tenha sido expedido por engano ou trocado em relação ao pedido, devolva-o após avisar-nos por e-mail ou pelo telefone (11) 996310421.\ndas 9:00 as 16:00 horas\nRua Embiruçú, 179 - Vila Beatriz, São Paulo - SP - CEP: 03644-000\nSACARIAS LUCAS LTDA - ME - CNPJ: 00.501.869/0001-10


Fundo Solidário fomentando ajuda\nQuarta, 03 Outubro 2018 20:58\nNesta noite 03 de outubro o Diário Oficial do Município (DOM), publicará o primeiro Edital de Fomento do Fundo Manaus Solidária, destinado ao apoio e fomento de iniciativas e ações de Organizações da Sociedade Civil (OSC) que tenham atividades com relevante interesse público e social, relacionados aos objetivos institucionais do Fundo.\nPoderão concorrer ao Edital: organizações que apresentem projetos sociais com atuação em: Geração de Renda; Inclusão Social de Crianças e Adolescentes; Inclusão Social de Jovens e Adultos; Inclusão Social de Idosos; Inclusão Social de Mulheres em Situação de Risco e Inclusão Social de Pessoas com Deficiência. Todas as organizações sociais, mesmo as que não participaram do Edital de Credenciamento ou do workshop de integração do Manaus Solidária poderão concorrer.\nO Edital de Fomento nº 001/2018-Fundo Social de Solidariedade, estabelece que os documentos necessários para participar da seleção podem ser entregues até o dia 31/10, no setor de protocolo da Casa Civil da Prefeitura de Manaus, avenida Brasil, 2971, Compensa 1, das 8h às 17h, de segunda a sexta-feira. A publicação do resultado definitivo do Edital de Fomento sairá no dia 22/11/18.\nMais informações sobre os pré-requisitos para participar do Edital de Fomento do Fundo Manaus Solidiária estarão disponíveis no Diário Oficial do Município (DOM) e nos sites www.manaussolidaria.orge www.manaus.am.gov.br\nMais nesta categoria: « GOVERNADOR VISTOREIA OBRAS NOS BAIRROS DE MANAUS Omar parte para o ataque »


A Dieta Atkins - Como Funciona, Cardápio e Dicas - MundoBoaForma.com.br\nVocê passaria por cima destes efeitos colaterais para testar a dieta Atkins? Conhece alguma pessoa que conseguiu perder peso com ela? Você acha que seria capaz de segui-la? Comente abaixo.\n(93 votes, average: 3,97 out of 5)\nCategorias Dieta, Tipos de Dieta Tags dieta atkins, dieta low carb / dieta de proteinas, tipos de dieta\nReceita de Sorvete de Coco Fit e Low Carb Fácil e Saudável\n127 comentários em “A Dieta Atkins – Como Funciona, Cardápio e Dicas”\n16/04/2019 às 13:58\nboa tarde!!! cheguei a perder 23 kg com essa dieta mais exercícios mantive por dois anos até engravida de minha terceira filha na gravidez engordei 30 kg dos quais já perdi 17. hoje faz uma semana que recomecei essa dieta e já sinto a diferença, uma dica para não desanimar tire suas medidas ,assim quando subir na balança e achar que não perdeu peso ,você se mede de novo e verá que seu corpo afinou lindamente de 4 a 5 cm pois reduz a gordura corporal. excelente melhor dieta. bjs sucessos a todos.\n09/11/2017 às 9:49\nEm 2015 parei de fumar e ganhei 15 kg dentro de 1 ano… Comecei essa dieta indicada pela minha irmã, segui tudo como manda o figurino, abandonei o carboidrato totalmente, e com 22 dias de dieta consegui perder LINDOS 14 kilos, voltei a comer carboidratos aos poucos, e comecei a ingestão de frutas, parei de jantar e antes de deitar tomo um copo de suco ou de leite… mantive meu peso…\nAgora já tomo minha cervejinha…. vinho… como normal (menor quantidade claro) mas nunca mais engordei dessa forma, ganhei uns 2 kilos de 2015 ate hoje.\nO único efeito colateral que eu tive com ela foi o intestino preso, mas nada que não consegui resolver com 1 comprimidinho de laxante pelo menos 1 vez por semana.\nTodo mundo que conheço que tem necessidade de perder peso eu recomendo essa dieta…\nAgora aproximando da véspera de fim de ano meu marido quer perder 8 kilos, então para ajudar ele comecei novamente com a dieta, não preciso emagrecer muito não, só uns 2 kilos mas se perder mais que isso tbm não vou importar nao, bom que posso comer sem culpa no Natal… 🙂\nDesejo a todos que começam essa dieta, MUITA SORTE E MUITA DETERMINAÇÃO!!!!\nCom força de vontade todos conseguem!!!\n25/07/2017 às 0:24\nOlá! Estou no 4 dia de indução e até hoje não emagreci nada, nem 10g. Gostaria de saber oq esta acontecendo. Só tenho comido carnes, ovos, creme de leite, presunto, mussarela, café com sucralose, coca zero (apenas 2 vezes) e azeitona. Qual o problema?\n19/01/2017 às 20:20\nEstou fazendo a dieta do Dr Atkins, nas duas primeiras semanas eliminei 5 kilos, não fiquei com fadiga não. Estou fazendo academia musculação e jump. Mas agora não consegui emagrecer mais , também não engordei estacionei. Pq? Na indução to comendo tomate, cebola, alho alface, nata pode?\nO grande problema de todas as dietas estão na parte da execução.\nEscolher os alimentos permitidos é quase impossível para quem está pensando em seguir à risca.\nQuase todos os alimentos , mesmo que mínima, contém carboidrato, em alimentos onde menos se espera existir.\nOutra questão muito séria está na variedade de cada tipo de alimento, seja ela, leite, queijo, cereais,\nembutidos, verduras, frutas, carnes. Todas elas ou quase todos podem conter ou não conter dependendo das espécies, variedades, modos de fabricação, etc, etc.\nComo resultado diversas dietas que pretendem obter os mesmos resultados, os ingredientes variam\nde uma receita a outra dependendo do autor do cardápio e os adeptos ficam completamente desonrientados.\n26/09/2016 às 20:54\nestou muito preocupada com meu marido pois gostaria que ele perdesse peso por causa de sua saude, mas ele não gosta de verdura legume e come apenas algumas frutas como melancia e maça. alguem pode me dar dica de cardapio. ele tem interesse em fazer essa dieta, mas não sei o que fazer para ele comer\nFiz a dieta do dr. Atkins há 7 anos atrás. Perdi 10 quilos. Nas duas primeiras semanas perdi 3 quilos apenas porque eu ingeria vegetais junto com as proteínas, mesmo sabendo que o ideal é ingerir apenas proteínas e gorduras, mas tive medo de prejuízo à saúde. A cada duas semanas fazia exames de sangue (colesterol, triglicérides, ácido úrico, glicemia, funções do rim e do fígado), e a alteração era para baixo (ótimo). Fiz por três meses (não obedeci as fases), depois não consegui mais porque minha mãe veio morar comigo e não tem jeito de fazer dieta junto com a mãe da gente… rsrsrs\nRECOMENDO, mas deve-se fazer um acompanhamento sanguíneo. Algumas pessoas podem ter problemas de rim por causa do excesso de proteínas.\n29/07/2016 às 16:01\nolá me chamo Elisilvia e estou fazendo a dieta á 6 dias, subi na balança e tive o prazer de ver que perdi 2,020kg, pode até parecer pouco, porém pra mim foi uma vitória e um incentivo ainda maior… vou continuar com certeza rsrs\n12/07/2016 às 12:50\nBoa tarde, eu precisava perder 10kg, porém perdi 7kg somente na fase 1 (indução) m apenas 15 dias. Gostaria de saber se posso pular direto para fase 3, para perder esses últimos 3kg, ou devo passar pela fase 2 antes? Caso eu possa ir direto pra fase 3, eu posso pular já na primeira semana de 20g de carbo líquidos, para 30g? e assim sucessivamente?\n12/07/2016 às 10:05\nOi. comecei ontem minha dieta atkins estou bem confortável nestas primeiras 24hs.gostaria de saber se é permitido leite ou café com leite?\n05/05/2016 às 18:51\nMuito bom esse resumo. Só achei que faltaram os alimentos permitidos e proibidos nas fases. Eu tenho o livro o dr. Atkins, já tentei ler ele duas vezes mas desisti. São muitos depoimentos e exemplos que me fizeram parar a leitura. Assim é mais direto e objetivo.\nTeresa Cristina Cintra Gonçalves\n10/04/2016 às 18:52\nEstou no sétimo dia da primeira fase, os\nprimeiros dias foram os piores mas depois do quarto dia, tudo tranquilo.\nQuantos dias duram a primeira fase?\n04/04/2016 às 15:41\nFiz a dieta por 1 ano a fase de indução, perdi no total 24 kg. Depois passei a fazer exercícios regularmente e passei para a fase 3, consegui perder mais 10kg de gordura e ganhar músculos. Adoro a dieta e super indico\n29/03/2016 às 19:11\nOlá, dei inicio na dieta segunda-feira 28/03 sendo a primeira fase. E gostaria de dicas e receitas p café da manhã e tarde. Desde já atenção.\nConversei muito com uma colega que esta fazendo essa dieta e me interessei muito e quero começar tbm, como faço?\n09/08/2015 às 0:17\nEscrevi o post acima quero deixar meu contato para quem quiser trocar ideias: maschietto.jr@gmail.com\nHoje só tenho mais um colega que faz a dieta para trocar figurinhas rs\n09/08/2015 às 0:13\nMas graças a Deus eu achei um site que produziu um “MENU” rs com várias opções de refeições que salvou minha vida.\n14/08/2015 às 16:44\nEu emagreci 4 kg na primeira semana\nMas eu comi uma tapioca d manhã. .. mesmo sabendo q nao pode…. e dois tabletinhos de chocolate. … Pq sou chocolatra e não dei conta d ficar sem…. mas tá dando certo…. só q só estou comento proteína magra…. ovo cozido ricota peito de peru peixe e frango\nOla Luis Fernando. Qual esse site q vc encontra os cardápios? Obg\nKathleen Joana Ferreira\n01/07/2015 às 8:49\nÉ normal suar muito durante a dieta?


Abdominoplastia | Vem Bonita\nProjeto Verão Da Fabi\nMeu médico cirurgião Dr. Luiz Roberto Felizzola\nE sua instrumentadora cirúrgica, Jessica Matielli.\nMomentos antes do meu procedimento escolhido. Uma opção que eu recomendo que seja bem estudada, bem orientada e consciente dos seus prós e contras.\nAbdominoplastia + lipo corporal\nA abdominoplastia, também conhecida como dermolipectomia ou simplesmente plástica do abdômen, é a cirurgia que retira o excesso de pele e gordura abdominal para deixar os músculos da barriga mais firmes e lisos.\nNo entanto, essa plástica não é uma alternativa ao combate à obesidade nem substitui dietas para emagrecimento.\nA cirurgia no abdômen não exclui a necessidade de exercícios físicos constantes, alimentação regulada e dieta saudável para manter a forma após o processo, independentemente se feita em mulheres ou homens. Além disso, o pré-requisito para sua realização é estar em plena forma de saúde.\nEsse tipo de cirurgia plástica é mais procurado por mulheres que engravidaram diversas vezes (meu caso) e que, por razões genéticas, tendem a acumular mais gordura na região abdominal. Além delas, pessoas que perderam muito peso em pouco tempo, e ficaram com a pele da barriga flácida, também buscam solução nesse procedimento.\nA gordura acumulada e as estrias são o principal motivo pelo qual as pessoas buscam a abdominoplastia. No entanto, os pacientes que têm os músculos da parede abdominal muito fracos, podem ter complicações, já que a cirurgia pode comprometer a musculatura devido ao corte e sua costura.\nComo ocorre abdominoplastia\nEm geral, a abdominoplastia requer duas incisões cirúrgicas. Dependendo da quantidade e de onde estão localizados os acúmulos de gordura, o médico avalia o abdômen do paciente. Primeiro, acontece a incisão horizontal, na região que está logo acima dos pelos pubianos e vai até os quadris.\nDe modo levemente curvado, esse tipo de incisão depende de quanta pele o paciente pode retirar. Uma outra incisão é feita no sentido vertical, com finalização ao redor do umbigo. É por ali que os excessos da pele da parte de cima do abdômen são separadas das partes mais profundas.\nNessa etapa, são feitas suturas nos músculos abdominais a fim de deixa-los mais rígidos. A barriga é esticada de modo a parecer mais reta e a cintura fica mais definida. A pele que sobra é esticada para baixo e depois removida. Através de um pequeno buraco deixado durante o procedimento, o umbigo é colocado de volta no lugar.\nDepois de realizada a cirurgia, drenos de aspiração são colocados no abdômen para que líquidos não acumulem naquela região. Eles são inseridos na parte de baixo da barriga, perto do púbis, para que a cicatriz fique menos perceptível entre os pelos pubianos. A dor durante a retirada dos drenos é comum.\nDepois desse processo, as incisões feitas durante a abdominoplastia são fechadas por completa, restando apenas uma única sutura na linha da região púbica e outra na parte de dentro do umbigo.\nQuem pode fazer a abdominoplastia\nNão se recomenda fazer abdominoplastia em mulheres que queiram engravidar ou tenham histórico de grande ganho de peso. As cicatrizes de cesárea ou outras na região do abdômen também podem comprometer a realização da cirurgia.\nCada situação precisa ser avaliada pelo médico. Pessoas que tenham algum tipo de doença relacionada ao colágeno, alguns fumantes e outros problemas abdominais demandam atenção especial caso queiram recorrer a esse procedimento estético.\nEste texto foi postado em Sem categoria|6 de outubro de 2016 | Por Fabi Berto


Catequese Com Adultos P.N.Sª. do Rosário: Creio em Deus: não estou sozinho!\nSEG, 03 DE JUNHO DE 2013 14:15POR: CNBB\nNo domingo da Santíssima Trindade celebramos na Liturgia a fé em Deus, que a Igreja professa. Se observarmos bem, uma boa parte do “Credo”, nossa profissão de fé, diz respeito à nossa fé em Deus – Pai, Filho e Espírito Santo.\nDe fato, a primeira e mais fundamental questão da nossa fé é a que se refere a Deus; tudo o mais, decorre desse ato de fé primordial que expressamos: creio em Deus. Por isso, a Igreja nos encoraja a renovar e aprofundar o sentido e a experiência de nossa fé em Deus ao longo deste Ano da Fé; crendo com mais clareza e firmeza em Deus, seremos capazes de crer também no ensinamento da fé oferecido pela Igreja. O Catecismo da Igreja Católica é uma ajuda inestimável para a compreensão da nossa fé eclesial.\nUma pergunta preliminar: é possível falar algo sobre Deus, se não o vemos nem tocamos, e nem podemos demonstrar “cientificamente” nossas afirmações? A resposta é positiva: sim, podemos, embora sempre de maneira imperfeita e insuficiente! Nossa inteligência é “capaz de Deus”, ou seja, ela não está fechada nem é inapta para acolher a verdade sobre Deus! Há muitos sinais, que “falam” de Deus e dão testemunho dele; e nós somos capazes de perceber e interpretar esses sinais.\nNo entanto, Deus não é propriamente objeto das ciências, como o são as coisas deste mundo; não porque Deus seja uma ilusão, mas porque os métodos das ciências naturais, sendo próprios para conhecer as coisas deste mundo, não são apropriados para tratar de Deus. Deus é transcendente, ou seja, uma realidade que está além das coisas este mundo.\nA filosofia usa um método diverso, apropriado para tratar de Deus; naturalmente, faz afirmações sobre Deus sempre nos limites da racionalidade humana e daquilo que ela é capaz de afirmar com argumentos. E a teologia fala de Deus a partir de um horizonte diferente: da racionalidade humana apoiada pela fé. Para nós, cristãos, não se trata apenas da fé subjetiva e individual, mas da fé eclesial, baseada na revelação divina e na Palavra de Deus. Assim, a teologia é capaz de afirmar muito sobre Deus.\nOutra pergunta que se faz com frequência é se todas as maneiras de crer são igualmente verdadeiras e boas. A resposta é não. A consciência e a maneira pessoal de cada um crer deve ser respeitada; mas não é possível afirmar que todas as afirmações sobre Deus são igualmente verdadeiras; se assim fosse, estaríamos relativizando todas as afirmações sobre Deus e seríamos nós, finalmente, os “criadores” de Deus... Para começar, é inconcebível afirmar que haja mais de um Deus; só pode existir um único Deus, que é a perfeição de tudo o que já percebemos de bom neste mundo. Em Deus, não há maldade nem defeito; e Deus não pode ser igualado, simplesmente, às criaturas, embora estas revelem algo sobre Deus, especialmente a criatura humana.\nNossa fé cristã nos ensina que Deus, perfeito e todo-poderoso, também está próximo de nós e se interessa por nós e pelo mundo; embora tenha dado às criaturas uma existência e dinâmica próprias, não as abandona a si mesmas, nem a alguma outra “força superior” autônoma, capaz de tomar conta ou de prejudicar as criaturas. Deus está na origem de tudo e a tudo quis para uma finalidade boa.\nCremos em Deus; e isso não significa que cada um crê do seu jeito, mas “como” a Igreja crê. Não seríamos capazes de afirmar por nós mesmos muitos artigos de nossa fé; neste caso, cremos “com” a Igreja, e isso significa que temos a mesma fé dos apóstolos e mártires, dos santos e grandes homens e mulheres de Deus que professaram com firmeza essa mesma fé. Cremos também com grandes mestres da fé, os pastores e doutores da Igreja, os missionários e místicos, e com a imensa multidão dos fiéis, que viveu antes de nós e transmitiu essa fé ao longo de quase 2 mil anos, até chegar a nós.\n“Creio em Deus” não pode ser uma afirmação neutra e sem consequências; se é verdadeira, a fé se expressa nas “obras da fé”, mediante a prática assídua e sincera da religião, a vida moral orientada pela obediência aos mandamentos de Deus e pela dignidade de filhos de Deus e pela participação ativa na edificação do mundo conforme Deus.