Claudio Gomes: Médicos encontram quatro rins em jovem inglesa durante cirurgia\nUma jovem de 20 anos deu entrada em um hospital da Inglaterra para tratar de uma suspeita de infecção urinária, mas teve de passar por uma cirurgia em que os médicos encontraram nela quatro rins, em vez de apenas dois. Ainda segundo os especialistas, três órgãos funcionavam perfeitamente.\nJessica Curphey foi levada às pressas ao hospital após sentir uma dor intensa do lado direito do corpo.\nEquipamentos de ressonância do Centro Médico St. Helier, no condado de Surrey, detectaram uma anomalia no rim direito e os médicos interpretaram que ali havia um cisto de 17 centímetros de diâmetro.\nMais tarde, outros exames mostraram que se tratava, na verdade, de um rim extra. Durante a cirurgia, outra surpresa: Jessica abrigava, na verdade, três rins do lado direito e um deles estava danificado ao ponto de não cumprir a função de filtrar o sangue para remover resíduos e excesso de água.\nEste órgão foi retirado durante a cirurgia e Jessica permaneceu com três rins que, segundo os médicos, funcionam normalmente. De acordo com o médico urologista Robyn Webber, ter três rins em apenas um lado do corpo é extremamente raro. “Há, talvez, menos de cem casos descritos na literatura”, explica.\nA mãe de Jessica, Alison, de 45 anos, disse que os especialistas drenaram cerca de dois litros de líquido contaminado que estavam no interior do rim danificado. Atualmente, mãe e filha organizam uma campanha para arrecadar fundos destinados às pesquisas sobre os rins no Reino Unido.\nPostado por Blog do coligado às 21:44


Wikiloc | Trilha PRM1 Oliveira de Frades 'Rota dos Rios e Levadas' - Traçado desatualizado\nPRM1 Oliveira de Frades 'Rota dos Rios e Levadas' - Traçado desatualizado\n12.576 414 8483\nVisualizado 461 vezes, baixado 31 vezes\nperto de Porcelhe, Viseu (Portugal)\nUm dos meus PR favoritos. Para quem procura um percurso fresco, com muita água e diversas quedas de água é obrigatório realizar este percurso.\nCom inicio junto à EN16 na localidade de Vila Chã, freguesia de Arcozelo das Maias, decidi efetuar o percurso no sentido contrário aos ponteiros do relógio, na minha opinião é assim que deve ser feito o PR para terminarmos com a beleza do Rio Gaia no final. De Vila Chã, segui em direção a Porcelhe, através de caminho florestal com passagem pela capela desta povoação, após passar pelas ruas de Porcelhe apanhamos a estrada alcatroada para rapidamente sair à nossa direita para visitar um curso de água e uma cascata de água denominada "Pena Quebrada", lugar com muita sombra e muita água. Daqui seguimos ao encontro da maior queda de água deste percurso, sitio que temos de descer com auxilio de apoio em madeira colocado no trilho, mas ao chegar ao fundo da queda de água denominada "Tombos" a beleza compensa todo o esforço, lugar fantástico. Agora descemos através de caminhos florestais e agrícolas até encontramos o Rio Gaia para o seguir através das suas margens, grande parte do percurso percorre junto ao Rio, que torna este trilho fresco e com paisagens de rara beleza. Para descrever a beleza destes locais do Rio Gaia, só mesmo realizando o percurso porque são muitos e diversos sítios para os descrever todos. Depois de deixarmos a margem do Rio Gaia subimos agora em direção ao inicio do PR mas a beleza não termina, uma vez que seguimos por caminhos agrícolas junto à ribeira da Lavandeira, com as quedas de água sempre presente, passamos por túneis em pedra e terminamos na povoação de Vila Chã.\nEste percurso, realizado neste sentido, é no final que tem a maior dificuldade, a subida do rio até Vila Chã, mas derivado a tantos lugares belos que encontramos ao longo do trilho, é um percurso com muitas paragens por isso deve ser realizado com tempo. Para quem gosta de água e de sítios calmos com sombra, aconselho sem dúvidas a realização deste trilho.\nCapela de Porcelhe\nQueda de água 'Pena Quebrada'\nQueda de água 'Tombos'\nQueda de água 'Ribeira da Lavandeira'\nPassagem na Rocha\nOrlando Gomes 1 14 de ago de 2021\nFazer no sentido contrário aos ponteiros do relógio


Mímica > Menu Escolar Mímica > Menu Escolar\nO mímico utiliza o veículo corporal para transmitir seu comunicado. Mas ele não deve ser confundido com o intérprete cômico dos filmes mudos, nos quais o ator desempenha o papel de um personagem desengonçado em um determinado filme. Vários destes profissionais realizam performances em espetáculos, com gestos e manifestações fisionômicas. Nas peças que se valem da mímica, as palavras também podem integrar a interpretação, desde que os principais recursos cênicos sejam a mobilidade e a expressão facial do artista.\nA mímica, enquanto gênero teatral, pode ser Literal, quando o intérprete narra enredos, relata eventos, elabora contextos ou gera atmosferas concretas por meio de movimentos e do gestual apropriado; ou abstrata, quando o profissional enfoca situações nada racionais, baseando suas expressões em símbolos e recursos abstratos.\nHá muitas brincadeiras tradicionais e eventos lúdicos, tanto para crianças quanto para adultos, que também utilizam a mímica, desta vez como entretenimento. Estes jogos são ideais para o aprimoramento da capacidade de raciocinar e para melhorar a relação social entre os participantes.\nNa Grécia antiga ela era um recurso valioso nos palcos; no cinema mudo ela também contribuía para uma melhor comunicação entre os intérpretes e a platéia. O inesquecível Charles Chaplin, com seu memorável personagem Carlito, era um mestre nesta arte. Com o advento do cinema falado, a mímica se deslocou para os palcos teatrais e performances públicas.\nNormalmente, nas brincadeiras, um dos jogadores é escolhido para atuar apenas através da mímica, representando, assim, um objeto ou um tema pré-selecionado. Os demais participantes devem se esforçar para adivinhar o que está sendo transmitido. O vencedor é recompensado com algum prêmio anteriormente combinado.\nArquivado em: Artes, Artes Cênicas\nEsse post foi publicado em Artes, Artes Cênicas. Bookmark o link permanente.


Outubro Rosa - Eurofarma\nA detecção precoce do câncer de mama pode ser realizada por meio do diagnóstico precoce ou do rastreamento. No diagnóstico precoce, o médico identifica os sinais e os sintomas suspeitos de câncer de mama. Os principais são³:\nJá o método de rastreamento é realizado em mulheres de 50 a 69 anos, através do exame da mamografia, feito a cada dois anos. Este exame usa raios X de baixa energia para identificar anormalidades na mama¹. Saiba como realizar o autoexame neste link aqui.\nClique abaixo e confira a cartilha com as dicas!\nFontes: 1. Breast cancer – World Health Organization. Organização Mundial da Saúde. Último acesso em 21 de julho de 2021. 2. Outubro Rosa. Instituto Nacional do Câncer. Último acesso em 21 de julho de 2021. 3. Detecção precoce do câncer de mama. Instituto Nacional do Câncer. Último acesso em 21 de julho de 2021.


Hulk e Camila Ângelo anunciam gravidez do 1º filho: 'tanta felicidade' - Jogada - Diário do Nordeste\nEscrito por Redação, 11:38 / 18 de Setembro de 2021. Atualizado às 12:30 / 18 de Setembro de 2021\nPai de três filhos de outro casamento, o jogador anunciou a gestação do 4º por meio das redes sociais\nLegenda: Hulk e Camila Ângelo casaram em fevereiro de 2020\nO jogador de futebol Hulk e a mulher, Camila Ângelo, esperam o primeiro filho juntos. A novidade foi anunciada pelo casal neste sábado (18), após publicação da ultrassonografia do bebê nas redes sociais.\nPai de três filhos, Hulk aproveitou para agradecer a vinda do quarto herdeiro. "Meu coração transborda de tanta felicidade e só consigo falar obrigado Deus. Nós já estamos ansiosos para te receber filho(a) te amamos incondicionalmente. Venha cheio de saúde meu bebê", escreveu o atleta.\nLegenda: Notícia foi compartilhada nas redes sociais\nNos comentários da postagem, amigos e colegas de profissão parabenizaram a gestação da esposa de Hulk. "Família linda! Parabéns, irmão", escreveu o jogador do Atlético de Madrid Matheus Cunha.\nHulk já é pai de três filhos: Ian, de 13 anos, Tiago, de 11, e Alice, de 6 anos. Todos são fruto do relacionamento com a ex-mulher, Iran Ângelo, tia de Camila, de quem Hulk se separou em 2019.\nLogo após o término da união, o jogador anunciou o relacionamento com a sobrinha da ex-esposa, e oficializou a união em fevereiro de 2020.\nJogos de hoje ao vivo: confira partidas de futebol desta terça-feira (26/10)\nA terça-feira (26) de futebol será de bola rolando na Série B do Campeonato Brasileiro e na Pré-Copa do Nordeste\nA partida entre Corinthians e Fortaleza pela Série A, é válida pela 30ª rodada do Brasileirão de 2021\nVladimir Marques 25 de Outubro de 2021\nPalmeiras x Sport: confira horário, onde assistir, palpites e prováveis escalações\nCeará vence Fortaleza no Clássico-Rainha e se isola na liderança do Campeonato Cearense Feminino\nAs equipes voltam a campo no domingo (31), às 15h30, pela 4ª rodada. O Ceará enfrenta o Menina Olímpica, no Estádio Franzé Morais, enquanto o Fortaleza encara o São Gonçalo, no CT Ribamar Bezerra\nA prova, que foi cancelada em 2020, será realizada sua edição 2021 no dia 31 de dezembro, mas a realização da entrega dos kits serão nos dias 27, 28 e 29 e 30 de dezembro


Caravana da TV Digital passa por Mesquita nesse domingo - Prefeitura Municipal de Mesquita\nCaravana da TV Digital passa por Mesquita nesse domingo\nHome > SEMAS > Caravana da TV Digital passa por Mesquita nesse domingo\nPosted on 6 de outubro de 2017 by PrefeituradeMesquita\nA Seja Digital, entidade não governamental responsável pelo processo de digitalização do sinal de TV no Brasil, promoverá uma edição de sua Caravana da TV Digital no município de Mesquita neste fim de semana. A ação acontecerá no domingo, dia 8 de outubro, na Escola Municipal Ernesto Che Guevara, no bairro da Chatuba, das 14h às 17h. O endereço é Rua Lídia 562 e os munícipes que estão inscritos em programas sociais do governo federal poderão verificar se têm direito ao kit gratuito com antena digital, conversor e controle remoto, além de tirar dúvidas sobre a mudança e agendar a retirada desses kits. O atendimento itinerante oferecerá ainda corte de cabelo, aferição de pressão, atividades recreativas e pintura facial para crianças.\nNo dia 25 de outubro, o sinal analógico de TV será desligado em Mesquita e em outros 18 municípios do estado do Rio de Janeiro. A Seja Digital já está orientando a população a respeito desse processo, que fará com que a programação dos canais abertos de televisão seja transmitida apenas pelo sinal digital. Famílias inscritas nos programas sociais do Governo Federal podem ganhar kits que possibilitarão que os aparelhos de televisão analógicos recebam o sinal digital. A iniciativa permitirá que essas famílias continuem utilizando seus equipamentos antigos após o desligamento do sinal analógico, sem a necessidade do descarte das TVs de tubo ou sem conversor integrado.


R$650 MILHÕES: Empresários Bolsonaristas são autuados pela Receita Federal - Reportando\nR$650 MILHÕES: Empresários Bolsonaristas são autuados pela Receita Federal\npor Equipe Reportando 24 de junho de 2020\nA Receita Federal multou empresários ligados a Jair Bolsonaro por supostas manobras tributárias.\nEntre as irregularidades apontadas está a simulação de operações de compra e venda de aeronaves.\nA Receita vê também uso de documentos falsificados para recolher contribuições previdenciárias.\nLevantamento feito pela Folha de S. Paulo mostra que oito empresários ligados ao governo devem cerca de R$ 650 milhões.\nSão valores cobrados pela Receita, contestados no Carf (Conselho Administrativo de Recursos Fiscais).\nEsta é a última instância de questionamentos no Executivo.\nSegundo empresários consultados pela Folha, na gestão Bolsonaro o Carf se tornou mais amigável.\nAgora, o governo deixou de ter voto de desempate nas autuações superiores a R$ 5 milhões.\nAntes havia a queixa de que o fisco mantinha a punição graças ao voto de minerva do então representante do Ministério da Fazenda em caso de empate no Carf.\nO contribuinte, nesse caso, saía prejudicado.\nNa Receita, a Havan deve ao menos R$ 57,9 milhões.\nHá ainda R$ 13,2 milhões em cobrança pela PGFN e mais R$ 123 milhões parcelados pelo último Refis (programa de repactuação de dívidas tributárias).\nflavio rochaluciano hangrubens meninsallim mattar\nMorte de Cristiano Araújo completa 05 anos\nPlanalto teme Wassef como “homem-bomba”


Como descartar corretamente seus dados e documentos\nComo descartar dados e documentos segundo a LGPD?\nEntenda como descartar dados e documentos segundo a LGPD. Confira:\nA Lei Geral de Proteção de Dados (lei nº 13.709/2018) – LGPD está prevista para entrar em vigor a partir de janeiro de 2021, onde seu foco está na privacidade e proteção de dados das pessoas e o uso deles pelas empresas e órgãos públicos, assim como as sanções administrativas em casos de violação.\nOs fundamentos (Art.2º) da LGPD que são a base da proteção de dados estão dispostos a seguir:\nQual é o impacto da LGPD para empresas e instituições públicas ?\nA revolução digital trouxe consigo a abordagem de diversos aspectos relacionados à privacidade dos dados, que são utilizados em sites, aplicativos e outras plataformas digitais nas transações e também como ferramenta de negócios. Além do cuidado no tratamento dos dados em forma física.\nA lei surgiu como uma medida para prevenir e combater os abusos cometidos no uso de dados como meio de comercialização e campanhas sem a autorização dos usuários e para fins que não correspondem aos objetivos para quais eles foram coletados.\nAs empresas também devem ficar atentas a utilização dos dados de seus colaboradores conforme as disposições da LGPD.\nEntende-se como dados pessoais, as informações que permitem a identificação direta ou indireta de um indivíduo, tais como nome, RG, CPF, data de nascimento, mas não se restringe a somente essas informações.\nCom a Lei Geral de Proteção de Dados, os dados pessoais estão protegidos com o controle e segurança. As normas padronizam os procedimentos e normas para que haja mais concorrência leal entre as empresas devido a igualdade competitiva estabelecida pelas regras da utilização de dados e etc. Além disso, as empresas vão proporcionar mais transparência e confiabilidade para os usuários.\nOs setores mais impactados pela LGPD são: software e tecnologia, direito, financeiro, e-commerce, pesquisa, saúde privada, publicidade e marketing devido ao volume de dados em suas estratégias. Mas a lei é válida para qualquer empresa que opere com dados, independente de seu porte e ramo de atuação, tanto no âmbito online quanto no offline.\nComo consequência da adequação à Lei Geral de Proteção de Dados, as empresas são responsáveis pelo tratamento dos dados inseridos em suas bases, assim, comprometendo-se a manter a privacidade e sigilo dos dados de acordo com os níveis de segurança estabelecidos.\nO que ocorre se a empresa não cumprir a lei ?\nO não cumprimento das diretrizes exigidas pela Lei Geral de Proteção de Dados implicam em sanções administrativas (art.52), como:\nComo descartar dados e documentos segundo a nova lei LGPD\nUm dos quesitos a ser considerado na LGPD é a manipulação das informações contidas num formato físico, ou seja, em documentos. Para assegurar que o tratamentos de dados físicos esteja sendo realizado corretamente, não esqueça de descartar os dados corretamente.\nA exclusão dos dados de forma segura, que pode ser nos formatos de papéis, CDs/DVDs, entre outros, não deve permitir que os dados sejam legíveis quando descartados, pois deixar os documentos em partes permite a reconstrução ou até mesmo a leitura dos mesmos. Assim, colocando em risco o sigilo das informações que podem ser acessadas e utilizadas por terceiros, sujeitas a fraudes e violações.\nPor isso, a fragmentadora de papéis apresenta-se como uma opção segura para fazer o descarte dos documentos, pois uma vez fragmentados, os documentos são irrecuperáveis.\nComo os documentos já foram utilizados e encontram-se no processo de descarte, a fragmentadora ajuda na otimização dos espaços nos ambientes de trabalho.\nA Menno está pronta para ajudar você a entender como descartar dados e documentos conforme a LGPD, oferecendo um amplo portfólio de fragmentadoras, confira:\nFragmentadora Menno Secreta 9520\nNo máximo de folhas (75g): 15 folhas\nTipo de fragmentação: 2 x 10 mm\nTempo de funcionamento: 20 minutos ligada e 20 minutos desligada\nNível de ruído: < 58 dB (A)\nVolume da lixeira: 30 litros\nDimensões (mm): 400 (L) x 310 (P) x 650 (A)\nSaiba onde adquirir a Fragmentadora Menno Secreta 952\nFragmentadora Menno Secreta PX422 D\nTipo de fragmentação: Partículas de 4 x 40 mm\nCapacidade média de fragmentação: 56 Kg/h\nVermelho – Aquecido, excesso de papel e lixeiro aberto\nTempo de funcionamento: 15 minutos ligada e 30 minutos desligada\nDimensões (mm): 373 (L) x 289 (P) x 649 (A)\nSaiba onde adquirir a Fragmentadora Menno Secreta PX422 D\nFragmentadora Menno Secreta – 601 SB\nTempo de funcionamento: 2 minutos ligada / 6 minutos desligada\nDimensões (mm): 295 (L) x 150 (P) x 326 (A)\nSaiba onde adquirir a Fragmentadora Menno Secreta – 601 SB\nFragmentadora Menno – S 300 D\nLed de indicação: Verde – Ligado, Amarelo – Cesto aberto e Vermelho – Aquecido\nTempo de funcionamento: 43 minutos ligada e 1 minutos desligada\nSaiba onde adquirir a Fragmentadora Menno – S 300 D\nSe você quer que a sua empresa esteja em dia com a nova lei fazendo o descarte correto de dados, conheça todas as opções de fragmentadoras de papel em nosso site. A Menno auxilia você na escolha da melhor opção para o descarte de seus documentos! Entre em contato conosco.


Blog do Roberto Moraes: Tudo junto, misturado e com fortes ligações diante da janela histórica\nTudo junto, misturado e com fortes ligações diante da janela histórica\nEscutas telefônicas e da internet, pré-sal e campo de Libra, visita do vice-presidente americano ao Cenpes da Petrobras, Globo, intere$$e$ privado$, força para romper o arco da hegemonia política brasileira e... acabamos diante do trevo que poder ser uma janela histórica.\nDa janela, não será mais possível ver apenas a banda passar, administrando conflitos, sendo golpeado pelas costas dos colaboradores do pacto superado, diante dos mesmos intere$$e$ que buscam levar ao poder, apolíticos controláveis, numa espécie de presidencialismo de coalizão (verde ou de capa preta) ungido pela vénus ex-platinada .\nDiante do trevo, ou enfrentamos o horizonte que a janela histórica nos aponta, ou deixemos que a fechem, enquanto apenas espiamos pela cortina, o encerramento do que passaria a ser apenas um capítulo do limiar de uma longa noite.\nCompartilhar no WhatsApp Postado por Roberto Moraes às 10:44\nOu seja: ou vamos pra direita ou inflexionamos pra a esquerda. É isso?\nColocou palavras a serem entendidas(ESTENDIDAS).\nTemos a sorte de estarmos no lugar certo na hora certa !\nComo disse "diante do trevo".\nQue a inspiração coletiva se faça presente dias e noites para irmos à luz no horizonte.


De Vitor Gonçalves\t Ultima atualização 5 dez 2021 18:12\nO Inter enfrenta o Atlético-GO, nesta segunda-feira (6), às 20h. A partida, válida pela 37ª rodada do Campeonato Brasileiro, será a última no Beira-Rio em 2021. O Colorado precisa vencer o Dragão se quiser ficar vivo na briga por uma vaga na Libertadores.\nOs dois clubes ainda sonham com a vaga para a maior competição de clubes da América do Sul. O Inter é o 10º colocado com 48 pontos, enquanto o Atlético vem logo depois, em 11º lugar com 47 pontos.\nA classificação é fundamental para o Inter, pensando no ano de 2022. Uma maior arrecadação, premiação e aquisição de reforços de melhor qualidade, dependem de estar na Liberta. Para isso, o Colorado precisa fazer contas na reta final do Brasileirão.\nO que é necessário para o Inter ir para a Libertadores\nEm primeiro lugar, precisa vencer os dois jogos que restam para chegar aos 54 pontos. Estatisticamente, esse número é próximo da média dos oitavos colocados dos últimos 10 anos de Brasileirão.\nPorém, o Colorado não depende só de si. É necessário torcer para os tropeços do 9º colocado, o Ceará com 49 pontos, e do 8º, o América-MG também com 49 pontos. As duas equipes se enfrentam neste domingo (5), às 19h.\nO Fluminense, sétimo colocado com 51 pontos, faz parte da matemática do Inter, assim como o Vozão e o Coelho. Com a derrota do Tricolor carioca na rodada, 2 a 0, diante do Bahia, o Internacional pode igualar o número de pontos do Flu e ficar atrás apenas na quantidade de vitórias.\nProvável Inter para enfrentar o Atlético-GO: Marcelo Lomba; Saravia, Bruno Méndez, Cuesta e Moisés; Rodrigo Dourado, Edenilson; Palacios (Mauricio), Taison e Patrick; Yuri Alberto.


Com vaias a Scarpa, Fluminense vence Palmeiras no Maracanã - VAVEL Brasil\nGilberto, aos 42 minutos do primeiro tempo.\nCom vaias a Scarpa, Fluminense vence Palmeiras no Maracanã\nNo reencontro com Gustavo Scarpa, Tricolor leva a melhor e chega ao seu terceiro jogo invicto sob comando de Marcelo Oliveira\nPor Rodrigo Rodrigues 25 de Julho de 2018 às 20:18\nGilberto marcou o único gol da partida (Foto: Mailson Santana/Fluminense)\nO Fluminense fez o seu dever de casa ao vencer o Palmeiras por 1 a 0, no Maracanã, pela 15ª rodada do Campeonato Brasileiro. Graças ao gol de Gilberto, o Tricolor chegou ao seu terceiro jogo consecutivo sem derrota sob o comando do técnico Marcelo Oliveira, que assumiu a equipe após a parada da Copa do Mundo. Com o resultado, o Fluminense pula para a oitava posição, com 21 pontos. O Palmeiras, por sua vez, segue em sexto, com 23.\nA partida marcou o reencontro entre Gustavo Scarpa e o Fluminense. Como já era esperado, o jogador foi bastante vaiado pelos mais de 20 mil torcedores presentes no estádio. Em campo, o camisa 14 teve atuação discreta.\nA derrota também teve um gosto amargo para o meia Dudu, que completou na noite desta quarta-feira (25) 200 jogos com a camisa do Palmeiras. Ele chegou ao clube em 2015 e conquistou dois títulos nacionais: a Copa do Brasil de 2015 e Brasileirão de 2016.\nPalmeiras joga melhor, mas Flu sai em vantagem no primeiro tempo\nMesmo jogando fora de casa, o Palmeiras começou melhor do que Fluminense no primeiro tempo. Com jogadores rápidos e habilidosos, casos de Willian, Scarpa e Dudu, os visitantes não encontraram dificuldades para infiltrar na defesa tricolor. A primeira grande chance de gol aconteceu logo aos quatro minutos. Após falha de Gum, Willian tocou para Dudu, que bateu da entrada da área para a grande defesa de Júlio César.\nSem um meia de criação, o Fluminense via os flancos do campo como uma alternativa para surpreender o Palmeiras. Marcos Jr, pelo lado esquerdo, e Junior Dutra, direito, criavam boas jogadas para Pedro, que desperdiçou boa chance aos nove minutos. Mais encorpado, os visitantes obrigaram Júlio César a fazer outra ótima defesa aos 19, após cabeçada de Moisés.\nNo fim do primeiro tempo, o Fluminense, que pouco havia incomodado Weverton, chegou ao seu gol. Após cobrança de falta, a bola sobrou para Gilberto, que de canhota, abriu o placar da partida. O Palmeiras criou mais chances, mas o Tricolor foi mais efetivo, e por isso, saiu em vantagem na etapa inicial.\nScarpa é observado pelo lateral Ayrton Lucas (Foto: Mailson Santana)\nSegundo tempo truncado e com poucas chances\nAnimado com o gol, o Fluminense voltou melhor do que em relação ao primeiro tempo. Assim, o Palmeiras não encontrou tantos espaços para incomodar Júlio César, mas tinha a posse de bola e iam mais ao ataque, já que estavam atrás no placar. Insatisfeito com a produtividade do Palmeiras, o técnico Roger Machado promoveu as entradas de Lucas Lima e Deyverson.\nEntretanto, pouca coisa mudou. O Fluminense, em vantagem, ficou mais atrás a partir do momento que o jogo chegava ao seu fim. E o Palmeiras, por sua vez, tinha a bola, mas abusava nos erros de passe e, assim, pouco oferecia perigo. Nervoso, o time paulista ainda perdeu o zagueiro Edu Dracena expulso após carrinho violento em Everaldo. Mais inteiro, o Fluminense apenas administrou a vitória no Maracanã.


Quais os direitos de visitação e convivência dos filhos em tempos de ...- Migalhas\nA pandemia da covid-19 trouxe inúmeras mudanças em diversos campos do Direito, tais como: Direito do Trabalho, Tributário, do Consumidor e também vem impactando significativamente o Direito de Família.\nNesse sentido, com as diretrizes do isolamento social, vêm surgindo diversos questionamentos quanto ao direito de visitação e convivência aos filhos menores de idade com os pais nos tempos de quarentena.\nCabe destacar que a convivência familiar é um direito constitucional, estabelecido em seu artigo 227¹ da Constituição Federal. Porém, como usufruir de tal direito sem expor a risco ambas as partes?\nA recomendação é de sempre se levar em consideração a saúde, o bem estar e o interesse do menor. Sendo assim, os genitores e responsáveis devem priorizar a preservação a vida da criança. Com isso, o equilíbrio de comunicação entre os genitores se torna demasiadamente essencial, na busca de um acordo amigável. Assim, se evitará a lotação do sistema judiciário.\nNos acordos firmados entre os genitores, a suspensão temporária das visitas deverá ser priorizada, para se evitar o contato físico direto entre pais e filhos, que nesse momento é a principal fonte de contágio da doença. Nesses casos, é importante estabelecer o contato frequente por telefone ou online para a continuidade da convivência familiar. O afastamento momentâneo poderá ser compensado oportunamente em ocasiões futuras, assim que ocorrer a baixa da proliferação da doença.\nCabe esclarecer que deverá ser mantido os casos de compartilhamento de guarda, desde que obedecidas todas as recomendações de higiene e segurança estabelecidos pela OMS e o compartilhamento não apresente qualquer prejuízo à saúde da criança.\nCaso os responsáveis não consigam solucionar de forma amigável a suspensão temporária das visitas ou o revezamento consciente, não restará alternativa senão o acionamento judicial. Nestes casos, será necessário o acompanhamento especializado de advogado. Nestas circunstâncias, o magistrado analisará de maneira criteriosa cada caso, sempre levando em consideração o bem estar da criança em primeiro plano.\nDe qualquer modo, o bom senso, neste período, deve se sobrepor às demais questões pessoais existentes entre os genitores, de modo que, as famílias e, principalmente, as crianças, sofram minimamente os efeitos da pandemia.\nCom tudo se conclui que, a harmonia, a empatia e a paz são armas na luta contra a doença, e com elas, todos sairemos mais fortes preservando ainda mais os laços familiares.\nAtualizado em: 1/7/2020 08:17


CA2 + imagens de células isoladas ou tipos específicos de células dentro de tecidos intactos, muitas vezes revela padrões complexos de Ca2 + sinalização. Esta atividade requer cuidadosa e detalhada análise e quantificação de capturar o máximo de informação possível sobre os eventos subjacentes. Espacial, temporal e intensidade parâmetros intrínsecos ao Ca2 + sinais, tais como frequência, duração, propagação, velocidade e amplitude podem fornecer algumas informações biológicas necessárias para sinalização intracelular. De alta resolução Ca2 + imagem normalmente resultados na aquisição de grandes arquivos de dados que são demorados para processo em termos de traduzir as informações de imagem em dados quantificáveis e este processo pode ser suscetível a preconceitos e erro humano. Análise de Ca2 + sinais de células no local normalmente se baseia em medições de intensidade simples de arbitrariamente selecionadas regiões de interesse (ROI) dentro de um campo de visão (FOV). Esta abordagem ignora grande parte das informações de sinalização importantes contidas no FOV. Assim, a fim de maximizar a recuperação de informações de tais gravações de alta resolução obtidas com Ca2 +corantes ou optogenetic Ca2 + análise espacial e temporal de imagens, o caso dos sinais de Ca2 + é necessária. Os protocolos descritos neste artigo vou descrever como um alto volume de dados pode ser obtido de Ca2 + imagem gravações para facilitar a mais completa análise e quantificação de Ca2 + sinais gravado a partir de células usando uma combinação de mapa spatiotemporal (STM)-com base em análise e análise baseada em partículas. Os protocolos também descrevem como diferentes padrões de Ca2 + sinalização observados em células diferentes populações in situ podem ser analisadas de forma adequada. Para ilustração, o método examinará Ca2 + sinalização numa população de células no intestino, células intersticiais de Cajal (ICC), usando o GECIs especializada.\nCA2 + é um mensageiro intracelular onipresente que controla uma grande variedade de processos celulares, tais como músculo contração1,2, metabolismo3, célula proliferação3,4, factores de 5, estimulação da liberação de neurotransmissores no nervo terminais6,7e a ativação da transcrição no núcleo. 7 intracelular Ca2 + sinais muitas vezes tomam a forma de elevações transientes em citosólico Ca2 +, e estas podem ser espontâneos ou decorrentes de estimulação agonista, dependendo do tipo de célula8. Espacial, temporal e intensidade parâmetros intrínsecos ao Ca2 + sinais, tais como frequência, duração, propagação, velocidade e amplitude podem fornecer as informações biológicas necessárias para sinalização intracelular5, 7 , 9. citoplasmática Ca2 + sinais podem resultar do influxo de Ca2 + do espaço extracelular ou via Ca2 + lançamento do retículo endoplasmático (ER) através de canais de Ca2 + lançamento como receptores de ryanodine (RyRs) e receptores de inositol-tri-fosfato (IP3Rs)10. RyRs e IP3Rs podem contribuir para a geração de sinais de Ca2 + e a abertura concertada destes canais, o que combinado com vários Ca2 + influxo mecanismos pode resultar em uma miríade de Ca2 + padrões de sinalização que são formados pelos números e abrir a probabilidade de Ca2 + influxo canais, o perfil de expressão deCa 2 + lançamento canais, a proximidade entre o influxo de Ca2 + e canais de liberação e expressão e distribuição de Ca2 + proteínas recaptação e extrusão. CA2 + sinais podem assumir a forma de uniforme, duradouro, oscilações de alta intensidade global que pode durar vários segundos ou até minutos, propagação intracelulares e intercelulares Ca2 + ondas que podem atravessar distâncias intracelulares mais de 100 µm10,11,12,13,14,15,16, ou mais breves, espacialmente localizados eventos tais como Ca2 + sparks e Ca2 + sopros que ocorrem em dezenas de milissegundos prazos e espalhar a menos de 5 µm17,18,19,20.\nMicroscopia fluorescente tem sido usada amplamente para monitorar Ca2 + sinalização em células isoladas e cultivadas e em tecidos intactos. Tradicionalmente, estas experiências envolveram o uso de Ca2 + indicadores fluorescentes, ratiometric e não-ratiometric corantes como Fura2, Fluo3/4 ou Rhod2, entre outros 21,22,23. Estes indicadores foram projetados para ser permeável para as membranas celulares e depois ficam presos em células pela clivagem de um grupo éster via endógenas esterases. Vinculação de Ca2 + para os indicadores de alta afinidade causou mudanças na fluorescência quando as células e tecidos foram iluminados pelo apropriado comprimentos de onda da luz. O uso de célula permeável Ca2 + indicadores bastante reforçada a nossa compreensão de Ca2 + permitido resolução espacial e quantificação destes sinais que não era possível pela análise do Ca2 + sinais e sinalização em células vivas através de outros meios, tais como a eletrofisiologia. No entanto, o tradicional Ca2 + indicadores têm várias limitações, tais como fotobranqueamento que ocorre ao longo de períodos de gravação estendida24. Enquanto o indicador de Ca2 + novo corantes tais como Cal520/590 têm sinal melhorou muito a índices de ruído e a capacidade de detectar o local Ca2 + sinais25, problemas com o fotobranqueamento permanecem uma preocupação para alguns investigadores 26de27,,28. Fotobranqueamento precipitado também restringe a ampliação, a taxa de aquisição de imagem, e a resolução que pode ser usada para gravações, como o aumento de potência objectivo e taxas mais elevadas de aquisição de imagem exigem aumento de intensidade de luz de excitação que aumenta o fotobranqueamento.\nEstas limitações do tradicional Ca2 + indicador corantes são exacerbados durante a gravação de Ca2 + sinais no local, por exemplo quando gravação intracelular Ca2 + sinais de tecidos intactos. Devido aos problemas acima, visualização de Ca2 + sinais em situ usando célula permeável Ca2 + indicadores tem sido limitada a ampliação de baixa potência e reduzidas taxas de captura de imagem, restringindo a capacidade de investigadores para gravar e quantificar o temporal ou espacialmente restrita subcellular Ca2 + sinais. Assim, tem sido difícil de capturar, analisar e apreciar a complexidade espacial e temporal de Ca2 + sinais, que pode ser importante na geração de respostas biológicas desejadas, conforme descrito acima. Análise de Ca2 + sinais de células no local normalmente se baseia em medições de intensidade simples de regiões selecionadas de interesse (ROI) dentro de um campo de visão (FOV). A escolha arbitrária do número, tamanho e posição de ROIs, dependentes do capricho do pesquisador, severamente pode influenciar os resultados obtidos. Assim como a tendência inerente com análise ROI, esta abordagem ignora grande parte da importante sinalização informação contida o FOV, como dinâmico Ca2 + eventos dentro de um arbitrariamente escolhida ROI são selecionados para análise. Além disso, a análise de ROIs falha fornecer informações sobre as características espaciais dos Ca2 + sinais observados. Por exemplo, pode não ser possível distinguir entre um aumento de Ca2 + resultante da propagação de uma onda de Ca2 + e um altamente localizadas Ca2 + liberam o evento de tabulações de Ca2 + sinais dentro de um ROI.\nO advento da geneticamente codificado Ca2 + indicadores (GECIs) mudou radicalmente como Ca2 + imagem latente pode ser realizada em situ29,30,31,32,33 . Existem várias vantagens em usar GECIs sobre corantes. O mais importante talvez seja que a expressão de Lino pode ser executada de maneira específica de célula, que reduz a contaminação de fundo indesejados de células não turísticos. Outra vantagem do GECIs sobre indicadores de Ca2 + tradicionais é aquele fotobranqueamento é reduzido (como fluorescência e, consequentemente, fotobranqueamento só ocorre quando as células são ativas), em comparação com espécimes de corante-carregado, particularmente em alta ampliação e altas taxas de imagem capturam34. Assim, imagem latente com GECIs, tais como a série GCaMP de sensores optogenetic, proporciona a investigadores a capacidade de gravar breve, localizadas sub celular Ca2 + sinais em situ e investigar Ca2 + sinalização em células dentro deles ambientes nativos que não tem sido possíveis anteriormente. Para maximizar a recuperação de informações de tais gravações de alta resolução, análise espacial e temporal adequada dos sinais de Ca2 + é necessária. Deve-se notar que, enquanto o GECIs podem oferecer que algumas claras vantagens, estudos recentes têm revelado que Ca2 + imagem latente pode ser realizada com sucesso de grandes populações de diferentes classes neuroquímicas dos neurônios simultaneamente usando convencional CA2 + indicadores que não são geneticamente codificados para o animal,35. Esta abordagem usado post hoc imuno-histoquímica para revelar várias classes diferentes de neurônios disparando em alta frequência em rajadas sincronizadas e evitou o potencial que as modificações genéticas para o animal podem ter interferido com o fisiológico comportamento, o investigador procura entender35,36.\nOs protocolos descritos neste trabalho facilitam a análise mais completa e quantificação de Ca2 + sinais gravado a partir de células no local usando uma combinação de mapa spatiotemporal (STM)-com base em análise e análise baseada em partículas. Os protocolos também descrevem como diferentes padrões de Ca2 + sinalização observados em células diferentes populações in situ podem ser analisadas de forma adequada. Para ilustração, o método examinará Ca2 + sinalização em uma população especializada de células no intestino, células intersticiais de Cajal (ICC). ICC são células especializadas no trato gastrointestinal (GI) que apresentam dinâmica intracelular Ca2 + sinalização, como visualizado utilizando camundongos expressando GCaMPs37,38,39,40, 41,,42. Transientes de CA2 + no ICC estão ligados à ativação de Ca2 +-ativado Cl– canais (codificados por Ano1) que são importantes na regulação da excitabilidade do músculo de liso intestinal células (SMCs)43, 44,,45. Assim, o estudo de Ca2 + sinalização em ICC é fundamental para a compreensão da motilidade intestinal. O intestino delgado murino oferece um excelente exemplo para esta demonstração, como existem duas classes de ICC que estão anatomicamente separadas e podem ser visualizadas de forma independente: eu) ICC estão localizados na área entre o músculo liso circular e longitudinal camadas, em torno do Plexo mioentérico (ICC-MY). Estas células servem como as células do marcapasso e geram a atividade elétrica conhecida como ondas lentas46,,47,,48,49; II) ICC também estão localizados entre um plexo rico nos terminais dos neurônios motores (plexo muscular profunda, assim, ICC-DMP). Estas células servem como mediadores das respostas a neurotransmissão motor entérica37,39,40,50. ICC-MY ICC-DMP são morfologicamente distintos e seus Ca2 + sinalização comportamentos radicalmente diferem para realizar suas tarefas específicas. ICC-MY são estreladas em forma e formar uma rede de células interconectadas através de lacuna entroncamentos51,52. CA2 + sinais em ICC-MY manifesto como breves e espacialmente localizados Ca2 + lançamento eventos que ocorrem em vários locais de forma assíncrona, através da rede de ICC-MY como visualizado dentro um FOV (fotografada com um objetivo X 60)38. Estes sinais assíncronos são organizados temporalmente em 1 segundo de clusters que, quando juntos, tabulados, elevar-se a um líquido 1 s celular aumento de Ca2 +. Estes sinais propagam de célula para célula dentro da rede da ICC e, portanto, organizam Ca2 + sinalização, gerados a partir de sites sub celulares, em uma tecido grande Ca2 + onda. Temporal de clustering e soma de Ca2 + sinais em ICC-MY foi denominado Ca2 + aglomerados transitória (CTC)38. CTC ritmicamente ocorre (por exemplo, é bastante semelhantes durações e períodos semelhantes entre CTC) 30 vezes por minuto no mouse. Por outro lado, ICC-DMP são células fusiformes em forma, alguns com processos secundários, que distribuem entre SMCs e processos nervosos varizes e não independentemente formam uma rede51,52. ICC-DMP forma junções com SMCs, no entanto e função dentro deste sincício maior, conhecido como o SIP sincício53. CA2 + sinais ocorrem em vários locais ao longo dos comprimentos de células, mas estes transientes não são arrastados ou temporalmente em cluster, como observado no ICC-MY37. CA2 + sinais no ICC-DMP ocorrem de forma estocástica, com intensidade variável, durações e características espaciais. Os protocolos abaixo, usando o exemplo do Ca2 + sinalização no ICC-MY e ICC-DMP, descrever técnicas para analisar a complexa sinalização em tipos específicos de células no local. Utilizamos o sistema de p Cre-Lox inducible para expressar GCaMP6f exclusivamente no ICC, após provocar a ativação da Cre Recombinase (Cre) conduzido por um promotor específico de ICC (Kit).\nTodos os animais utilizados e os protocolos realizados neste estudo estão de acordo com os institutos nacionais de guia da saúde para o cuidado e o uso de animais de laboratório. Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê de cuidados na Universidade de Nevada, Reno e uso institucional do Animal.\n1. geração de ratos KitGCaMP6f\nCruz Ai95 (RCL-GCaMP6f)-D (GCaMP6f ratos) e c-Kit+ / Cre-ERT2 (Kit-Cre ratos) para gerar o ICC específicos GCaMP6f expressando animais (ratos Kit-Cre-GCaMP6f).\nNota: GCaMP6f foi usado devido a sua eficiência relatada em reportagem localizadas, breve intracelular Ca2 + sinais in situ e in vivo de54.\nInjete Kit-Cre-GCaMP6f ratos com tamoxifeno em idades de 6 a 8 semanas para induzir a ativação da Cre Recombinase e subsequente expressão GCaMP6f no ICC (Figura 1).\nPara criar a solução de tamoxifeno, dissolver 80 mg de tamoxifeno (ver Tabela de materiais) em 800 μL de etanol (ver Tabela de materiais) em uma cubeta e vórtex por 20 minutos.\nAdicione 3,2 mL de óleo de cártamo (genérico) para criar soluções de 20 mg/mL e em seguida proceda à sonicação durante 30 minutos antes da injeção.\nInjetar camundongos (injeção intraperitoneal; IP) com 0,1 mL de solução de tamoxifeno (2 mg de tamoxifeno) por três dias consecutivos. Confirmar a expressão de GCaMP6f por genotipagem e usar ratos 10 dias após a primeira injeção.\nRatos de genótipo por recorte um pequeno pedaço da orelha de cada animal. Em seguida, use o método de HotSHOT55 para isolamento de DNA genômico pela incubação clipes de orelha a 95 ° C por 60 min em 75 mL de NaOH e neutralizar em seguida por 75 mL de tampão Tris. Use padrão PCR para determinar o genótipo de cada animal, 2 mL de DNA em uma reação de 20 mL com GCaMP6f iniciadores específicos56. Executar 10 mL do produto do PCR em um gel de agarose 2% para determinar o tipo selvagem (297 bp) e mutante (~ 450 bp) bandas.\n2. preparação dos tecidos para Ca2 + imagens\nAnaesthetize ratos por inalação com isoflurano (4%, consulte Tabela de materiais) em uma campânula ventilada e em seguida sacrifício por deslocamento cervical.\nUsando tesouras afiadas abrir no abdômen dos ratos, retire o intestino delgado e coloque em solução de Krebs-Ringer bicarbonato (KRB). Abra o intestino delgado na borda mesentérica e lavar qualquer conteúdo intraluminal com KRB. Com dissecações afiadas, retire as camadas mucosa e mucosa sub.\nNota: KRB solução tem a seguinte composição (em mM): 118,5 NaCl, KCl 4.7, CaCl2 2.5, MgCl2 1.2, NaHCO3 23,8, KH2PO4 1.2, 11,0 de dextrose. Esta solução tem um pH de 7,4 a 37 ° C quando borbulhar de equilíbrio com 95% O2- 5% de CO2.\nUsando pequenos pinos, pino o tecido do intestino delgado para a base de um volume de 5 mL, prato Sylgard revestido, diâmetro 60mm com a camada circular de músculo liso virado para cima. Perfundir a preparação com solução KRB aquecida a 37 ° C por um período de equilíbrio de 1 hr antes de experimentação.\nApós este período de equilíbrio, realizar in situ Ca2 + imagens de pequenas intestinal ICC-MY e ICC-DMP usando microscopia confocal (as imagens neste protocolo foram adquiridas com um microscópio confocal, equipado com um disco giratório). Devido aos benefícios do GECIs descritos acima, usar imagens de alta resolução de lapso de tempo (> 30 quadros por segundo, FPS) combinado com objectivos de alta potência (60 – 100 x) para adquirir filmes de Ca2 + sinais dinâmicos no ICC.\nNota: Para reduzir o movimento do tecido, aplique nicardipina (0.1-1 μM) durante as gravações, conforme descrito anteriormente,37,38,39,40,41.\nDistinguir ICC-MY e ICC-DMP no intestino usando suas diferente localização anatômica, morfologia e basal Ca2 + padrões de atividade.\nLocalize ICC-MY a nível do Plexo mioentérico, entre as camadas longitudinal e circular de músculo liso do intestino delgado. Eles são estrelados, formando uma rede conectada (Figura 3A). CTC (descrito acima) propaga através da rede de ICC-MY com uma ocorrência regular de ~ 30 ciclos por min.\nPor outro lado, localize ICC-DMP em um único avião a nível do plexo muscular profundo, entre a camada circular de músculo liso e o plexo submucosa. ICC-DMP não formam uma rede e são células em forma de fuso (Figura 2A) que exibem sem eventos de propagação regulares e em vez disso, fogo estocásticas, localizadas intracelular Ca2 + transientes.\nIndependentemente do software de aquisição utilizado, salve filmes como uma pilha de imagens TIFF.\n3. análise de estocástico Ca2 + sinais no ICC-DMP usando mapeamento de espaço-Temporal (STM)\nAnalisar o ICC-DMP usando mapeamento de espaço-temporal com uma combinação de software ImageJ (NIH, EUA, livre para download em http://imagej.nih.jov/ij) e software feito sob encomenda (volumetria, versão G8d, GWH, operável no Mac OS, entre em contato com o Grant Hennig grant.hennig@ Med.UVM.edu sobre inquire de volumetria acesso e utilização)\nNota: Uma abordagem alternativa para analisar totalmente estes mapas espácio-temporal com ImageJ sozinho também é fornecida em seções posteriores (início no passo 3.9).\nAbra a volumetria e usar o direito do mouse cliques para abrir pastas que contêm arquivos de filme. Clique esquerdo sobre o arquivo de filme para ser analisado para abri-lo em volumetria (deve estar no formato TIFF descompactado). Uma vez aberto, o filme será contido dentro de uma janela azul-fronteira (janela de filme) que irá abranger uma grande área da tela à direita. Do lado esquerdo da tela irá conter a janela Plot (4/5ths superior) e a janela de traços (baixa de 1/5th).\nAjuste as dimensões do filme mantendo pressionada a tecla SHIFT e, simultaneamente, rolagem acima com o botão do meio do mouse (MMB, reduz o tamanho) ou a rolagem para baixo com o MMB (aumenta o tamanho). Iniciar ou parar a reprodução pressionando 'A'; a velocidade de reprodução pode ser ajustada premindo a cima e para baixo teclas de seta.\nPara criar um STM usando volumetria, desenhe um ROI sobre uma célula inteira mantendo pressionada a tecla SHIFT enquanto clicando e arrastando o botão esquerdo do mouse. Ajuste a orientação do ROI de rolagem com o MMB nos cantos do ROI. Quando o ROI é lugar sobre a célula para ser analisado (Figura 2A), uso direito clica na janela do filme para acessar ' ROI STMs – STMyAvg > xRow' e clique com o botão esquerdo para criar um STM da atividade celular na janela Plot (há também uma opção para selecionar ' STMxAvg > yRo w ', qual deles está selecionado dependerá se a orientação da célula é mais alinhada com o x ou eixo y, por exemplo, a célula destacada Figura 2A é mais orientado para o eixo y').\nClique com o botão esquerdo sobre o STM na janela Plot e clique em 'P' para subtrair o ruído de fundo e pressione 'H' para aumentar o contraste da STM. Salve o STM clique direito para acessar 'STM Load Save - salvar STM como. tif' e deixou clicando para salvar como TIFF.\nO restante da análise da ICC-DMP realizarão no ImageJ. ImageJ consiste em dois componentes principais, uma barra de ferramentas com uma posição fixa no topo do monitor e uma interface de usuário móvel. Usando o ImageJ, abra o arquivo TIFF STM de ICC-DMP Ca2 + atividade (File-Open na barra de ferramentas imagem J).\nAberta a volumetria criado STM, que terá tempo orientado verticalmente. ImageJ abrirá automaticamente arquivos TIFF como RGB ou imagens de 16 bits. Para melhorar a qualidade da imagem, clique esquerdo 'Imagem' na barra de ferramentas da ImageJ. Rolar na primeira opção ' tipo 'para revelar um menu drop-down de vários formatos de imagem, dirija-se 32-bit' e clique com o botão esquerdo para mudar.\nPara tornar o STM legível contra o tempo da esquerda para a direita, clique esquerdo na barra de ferramentas ImageJ no seguinte caminho: 'Imagem-Transform-gire 90 graus à esquerda'. Também é possível criar STMs de in-situ Ca2 + atividade usando linescans com ImageJ sozinho sem volumetria e isso é detalhada abaixo.\nNota: Uma vez que o STM é criado, eles são analisados da mesma forma, independentemente de qual software foi usado para gerá-los. Para ignorar este método alternativo para a criação de STMs no ImageJ, pule para a etapa 3.19.\nPara criar o STM com ImageJ, abra a pilha de arquivos TIFF que compõem a gravação do ICC-DMP Ca2 + atividade (File-Open na barra de ferramentas ImageJ). ImageJ abrirá automaticamente arquivos TIFF como RGB ou imagens de 16 bits. Para melhorar a qualidade da imagem, clique esquerdo 'Imagem' na barra de ferramentas da ImageJ. Rolar na primeira opção ' tipo 'para revelar um menu drop-down de vários formatos de imagem, dirija-se 32-bit' e clique com o botão esquerdo para mudar.\nRuído de fundo (resultantes de ruído de fluorescência ou câmera auto) agora deve ser subtraído do filme. Clique esquerdo a função de 'Seleção retangular' na interface do ImageJ e desenhar um ROI (pela esquerda clicando e arrastando para a forma e o tamanho desejado) sobre a fluorescência de plano de fundo do filme.\nDepois de selecionar o ROI, esquerda, clique em 'Analisar' na barra de ferramentas da ImageJ, e então clique esquerdo 'Histograma' no menu suspenso resultante. Uma caixa pop-up aparecerá perguntando sobre valores de intervalo de pixel para calcular; ImageJ tem os valores de clique esquerdo então pré-selecionadas de ROI 'Okey'.\nDepois de clicar em 'Okey', será exibida uma caixa de pop-up nova contendo um histograma mostrando a distribuição de valores para o ruído de pixel do fundo dentro do ROI. Tome nota da média abaixo do histograma e feche a caixa de pop-up.\nClique em voltar para o filme de 32-bit e selecione o FOV inteira, deixou clicando em 'Editar' na barra de ferramentas do ImageJ, rolagem a 'Seleção' e saiu clicando em 'Selecionar tudo' no menu suspenso revelada.\nClique esquerdo 'Processo' na barra de ferramentas da ImageJ, vá para 'Matemática' e clique esquerdo 'Subtrair' no menu suspenso revelada.\nSerá exibida uma caixa de pop-up, onde pode ser inserido um valor a ser subtraído o FOV. Digite o valor médio, adquirido a partir do histograma na etapa 3.12 acima e clique em 'Okey'. ImageJ então pedirá para processar todos os quadros na pilha de TIFF (e não apenas o único quadro do filme é atualmente na). Clique em 'Sim'.\nDepois de clicar em 'Sim', o filme vai ficar preto. Para corrigir isto, clique esquerdo 'Imagem' na barra de ferramentas do ImageJ e rolar sobre 'Ajustar'. Esquerda clique sobre a primeira opção revelada para 'Brightness/Contrast"(B & C). Isso irá abrir uma caixa pop-up onde vários aspectos de brilho e o contraste podem ser modificados. Esquerda clique sobre a opção 'Auto', uma vez que revelam o aumento da qualidade do filme. Deixe este B & C pop caixa aberta para uso futuro.\nPara criar uma linha, primeiro clique direito sobre a ferramenta de seleção de linha na interface do ImageJ para revelar as opções para diferentes linhas; esquerda, clique em 'Linha segmentada' para escolhê-lo na lista. Com a ferramenta 'Linha segmentada' selecionada, uso único deixou cliques para desenhar uma linha ao longo do eixo meado de uma ICC-DMP individual. Cada único clique esquerdo irá corrigir a linha em que ponto específico e a linha pode então ser livremente movida mais em qualquer ângulo desejado. Quando a linha estiver concluída, duplo clique esquerdo para corrigir a linha no lugar.\nClique esquerdo de 'Imagem' na barra de ferramentas do ImageJ e rolar sobre 'Pilhas' e clique com o botão esquerdo na opção 'Refatiar'. Aparecerá uma caixa pop-up; Clique com o botão esquerdo na opção 'Girar 90 graus', isso irá orientar a linha da esquerda para a direita para que ele pode ser calibrado e li contra o tempo no eixo x, com espaço no eixo y. Clique em 'Okey' para criar o STM.\nA intensidade do STM será criada em uma escala de cinzentos com alta intensidade Ca2 + sinais mostrados como graus variados de branco, fora cinza branco ou claro, dependendo de sua intensidade. Normalmente, o contraste da linha criado precisa ser melhorada. Fazer isso clicando em 'Auto' no pop B & C caixa.\nA intensidade da fluorescência da linha é apresentada sobre o STM em valores de pixel arbitrário. Para medir com precisão a amplitude de Ca2 + sinais de STM, os valores de fluorescência do STM (F) agora precisam ser normalizada. Usando a função 'Seleção retangular' na interface do ImageJ, desenhe um ROI em uma área de STM que exibe a área menos intensa e mais uniforme da fluorescência (F0).\nRepetir os passos dados em 3.11 – 3.12 para obter um valor médio (F0) da intensidade dentro o ROI selecionado e selecione o STM inteira deixou clicando em 'Editar-seleção-selecionar tudo' na barra de ferramentas do ImageJ.\nClique esquerdo 'Processo' na barra de ferramentas do ImageJ e rolar a 'Matemática'; clique esquerdo 'Dividir' das opções reveladas. No pop-up subsequente, digite o valor médio (F0) obtido da etapa 3.21. Após dividir o STM inteira por (F0) o STM girará o preto; corrigi isso clicando em 'Auto' na B & C pop-up caixa. A linha agora é calibrada para amplitude, com intensidade de fluorescência, expressada como F/F0.\nAtualmente, a STM exibirá o número de quadros na pilha de TIFF no eixo x e o número de pixels que representa o comprimento da célula no eixo y. De forma a quantificar informação espacial e temporal de Ca2 + sinais, calibre o STM para espaço e tempo. Clique esquerdo 'Imagem' na barra de ferramentas da ImageJ e deixou clique em 'Propriedades'. Aparecerá uma caixa pop-up. Dentro desta janela, digite os valores apropriados para calibrar totalmente o STM.\nPara 'Largura', insira o comprimento de tempo que leva para capturar um único quadro em segundos. Para exemplos, a 5 FPS, insira um valor de 0.2, para 50 FPS digite um valor de 0,02, para 33 FPS Insira um valor de 0,033 etc. Para 'Altura Pixel', digite quantos mícrons cada representa pixel (dependerá do objectivo usado e Câmara utilizada para aquisição). 'Profundidade de Voxel' é deixada em 1 antes de clicar em 'Okey'. Sem outros parâmetros devem ser ajustados dentro da janela.\nNota: Depois de clicar em 'Okey', o STM vai ser totalmente calibrado para amplitude, espaço e tempo. Amplitude na STM será expressa como o tempo de0, F/F no eixo x será expressa em segundos e espaço no eixo y será expressa em μm (Figura 2B). CA2 + eventos sobre o STM agora estão prontos para ser medido, a STM calibrado também pode ser salvos como uma única imagem TIFF para analisar em uma data posterior.\nImageJ tem um número de construído na tabela de pesquisa de código de cores (LUTs) que pode ser usada para código de cor do STM. Aplicar um construído em LUT deixou clicando na barra de ferramentas ImageJ no caminho da 'Imagem-Lookup Tables' e escolha uma LUT para aplicar. LUTs de feitas sob encomenda também pode ser importada para o STM deixou clicando na barra de ferramentas ImageJ no caminho 'Arquivo-importar-LUT' e em seguida, selecionando a LUT a importar. Por exemplo mostrado na Figura 2 o STM teve a LUT personalizado 'QUBPallete' (Queens University Belfast, UK) aplicada a ele, para o código de cores quentes (vermelho, laranja, etc.) como áreas de Ca2 + fluorescência intensa e cores frias (preto, azul) como áreas de baixo Ca2 + fluorescência.\nPara inserir uma barra de calibração de amplitude para indicar o intervalo de amplitudes representadas pelas várias cores, deixou clique em 'Analisar' na barra de ferramentas do ImageJ, role até 'Ferramentas' e selecione 'Barra de calibração' do menu revelado. As opções são dadas para o tamanho, zoom, escala e posição sobre o STM para barra de calibração; ajustar essas configurações conforme desejado e clique em 'Okey'. Observe que, quando a barra de calibração é inserida, ImageJ cria um novo STM contendo, deixando a versão original sem a barra de calibração intacta e separado.\nNota: Se a caixa 'Sobreposição' está seleccionada quando inserir a barra de calibração, não será gerado um novo STM.\nPara começar a analisar eventos de Ca2 + individuais, clique esquerdo sobre o seletor de 'Reta' na interface do ImageJ. Clicando inicialmente deixou o STM, desenhe uma linha reta horizontal através do centro de um evento de Ca2 + paralelo ao eixo x (contra o tempo). Complete a linha esquerda clicando uma segunda vez (Figura 2D).\nClique em 'Analisar' na barra de ferramentas ImageJ e clique com o botão esquerdo na 'Traçar perfil'. Uma nova caixa aparecerá com o perfil de trama de Ca2 + de evento (Figura 2E).\nNota: A opção 'Lista' dentro desta caixa irá gerar uma lista dos valores XY do lote gerado, que pode ser copiado para um programa de planilha para criar traços, se assim o desejar.\nPara medir a amplitude de Ca2 + de evento representado no perfil do enredo, clique esquerdo sobre o seletor de 'Reta' na interface do ImageJ. Em seguida, desenhe uma linha vertical da linha de base do perfil do enredo para o pico de Ca2 + de evento; o comprimento da linha (mostrado na interface ImageJ) representará a amplitude do evento expressado em ΔF/F0 (Figura 2E).\nUsando o valor de amplitude adquirida, a duração do Ca2 + evento pode ser medida desenhando uma linha reta em toda a largura do evento no ponto de amplitude máxima de 50% (duração total em meia amplitude máxima, FDHM) ou a duração total do evento pode-se medir se desejado (Figura 2E).\nNota: Experimentadores precisará projetar o critério específico para limiarização válido Ca2 + eventos nestas gravações. Em nossos experimentos, eventos de Ca2 + foram designados como sendo válida para análise se foi sua amplitude > 15% do evento amplitude máxima na seção de controle de gravação. No entanto, estes limiares dependerá dos tecidos específicos e células sob estudo e são apenas orientações arbitrárias que exigem otimização específica para cada tipo de tecidos e células.\nDesenhando uma linha ao longo do movimento ascendente ou descendente do Ca2 + evento enredo perfil, pode ser calculada a taxa de subida ou descida em conformidade. Depois que a linha é desenhada, o cursor do mouse pode ser movido para o ponto onde a linha começa e onde termina. Quando o cursor está estacionário sobre estes pontos, x, y coordenadas para esse local será exibido no lado esquerdo inferior da interface do ImageJ. Assim, através da aquisição de x, y valores para onde começa a linha (x1, y1) e termina (x2, y2), a taxa de subida ou descida (ΔF/s) pode ser calculada como o declive da linha, y2 - y1 / x2 - x1 (Figura 2F ).\nPara calcular a propagação ou disseminação espacial de um evento de Ca2 + , clique esquerdo sobre o seletor de 'Reta' na interface do ImageJ. Em seguida, desenhe uma linha reta vertical ao longo do comprimento de Ca2 + de evento ao longo do eixo y. O comprimento da linha (mostrado na interface ImageJ) representará a propagação espacial do evento expressado em μm (Figura 2).\nDetermine a velocidade de uma propagação Ca2 + evento desenhando uma linha ao longo da frente de propagação do evento e calculando o declive da linha. Isto pode ser executado manualmente, de forma semelhante, descrita na etapa 3,32, determinando valores de y para onde começa a linha x, (x1, y1) e termina (x2, y2); esses valores serão exibidos no lado esquerdo inferior da interface do ImageJ quando o cursor do mouse está situado sobre o STM.\nSobre a coleção dos parâmetros desejados para Ca2 + evento quantificação, piscina estes média de valores para gerar valores médios para cada parâmetro em uma base por célula; Como alternativa, coloque todos os valores brutos em um histograma de distribuição para mostrar sua gama (Figura 2 H).\n4. quantificação da CTC no ICC-meu usando partículas com base em análise\nAntes de analisar filmes em volumetria com PTCLs, a calibração espacial e temporal do filme precisará ser inserido o nome do arquivo. Edite todos os arquivos a serem analisados em volumetria para conter dentro o título, o número de segundos que cada quadro é igual e também o número de mícrons que cada pixel é igual a separados por um traço único, com os valores envolvidos em colchetes. Por exemplo, um filme que adquiriu em FPS 33 com um objectivo de 60 x (512 x 512) deveria ter [0,22 – 0.033] inserido seu nome de arquivo.\nAbra a volumetria e usar o direito do mouse cliques para abrir pastas que contêm arquivos de filme. Clique esquerdo sobre o arquivo de filme para ser analisado para abri-lo em volumetria (Figura 3A, deve estar no formato TIFF descompactado).\nPara calcular com precisão o Ca2 + sinais do FOV inteiro, o filme passará primeiro por diferenciação e suavização para remover a interferência (ruído da câmera, fluorescência auto etc.) e aumentar a relação sinal / ruído. Na janela do filme, clique direito para abrir um menu e usando acesso direito cliques ' STK filtro-diferenciar ', botão direito do mouse novamente para introduzir um valor para diferenciar, pressione ENTER e clique esquerdo para aplicar (para filmes adquiriram em 33 FPS um valor de 2 (∆ t = ± 66-70 mseg) funciona bem, o valor é maior que a taxa de aumento de captura de imagem).\nNota: Diferenciação neste contexto irá reduzir a intensidade das áreas de gravação (pixéis) que não mostram nenhuma atividade dinâmica sobre o número de quadros especificado. Assim, se for inserido um valor de '2', cada pixel em cada frame da gravação é analisado e se dentro desse quadro, não há alteração dinâmica no quadro de fluorescência 1 pixel antes e 1 quadro depois, a intensidade dentro os pixels será subtraída a gravação. Assim, ruído de fundo não-dinâmico é removido e sinal de ruído é maior.\nAlise o filme diferenciado aplicando um filtro Gaussian. Clique com o botão direito na janela do filme para abrir um menu e usando acesso direito cliques 'STK filtro-Gauss KRNL', clique novamente para inserir um valor (sempre usar um número ímpar, para filmes adquiridos em FPS 33, um valor de 5 funciona bem, 1,5 x 1,5 µm StdDev 1.0) um valor de entrada, pressione ENTER e clique esquerdo para aplicar (Figura 3B).\nComeçamos a criar PTCLs selecionando um período do filme que inclui um período quiescente (20 – 40 frames), seguido pela ocorrência de um CTC e também de 20 – 40 quadros depois do CTC. Para fazer isso, percorrer o filme usando o MMB para rolar a esquerda para a direita na barra amarela.\nCom a seleção feita, uso direito clica na janela do filme para acessar 'STK Ops – rampa DS PTCLinfo' e clique com o botão esquerdo para aplicar. Esta função executa uma rotina de análise PTCL rampas progressivamente o limiar de intensidade máxima de intensidade mínima. Isto será exibido graficamente na janela do enredo como um enredo de ruído e também na janela de traços como três traços coloridos, com o traço verde, mostrando o número de PTCLs, o traço vermelho mostrando tamanho médio PTCL e o traço azul mostrando a intensidade absoluta limite.\nNota: O tamanho médio e número de PTCLs cada limiar é calculado automaticamente e em seguida um limiar semi manual é aplicado usando a intensidade em que em que o tamanho médio de PTCLs começa a cair, que ocorre no ponto de inflexão do traço vermelho em a janela de rastreamento (Figura 3D, ou seja, devido ao grande número de ruído espacialmente limitado PTCLs, reduzindo o tamanho médio de PTCLs).\nDentro da janela de plotagem, pressione 'H' para equilíbrio de histograma a trama mostrada de ruído PTCL. Ciclo através de esquemas de cores pressionando ' [' até que o fundo é de cor branca com traços coloridos na parte superior.\nPressione 'F' para trazer um instrumento de medição e clique com o botão esquerdo sobre a trama no cruzamento onde as tramas coloridas se deslocar para o lado de mão direita. Isso marcará uma única linha vertical na barra de rolagem da janela de traços abaixo.\nDentro da janela de rastreamento, role MMB esquerda para a direita do ponto de inflexão do traço vermelho até linha vertical branca marcada criado na etapa 4.10 e certificando-se que o traço azul é selecionado clicando com o botão direito sobre ele, leia o 'yAVG' que será exibido em t ele abaixar o lado esquerdo da janela de vestígios. Desmarque a seleção pressionando o MMB uma vez dentro da janela de vestígios.\nDentro da janela do filme, pressione 'C' para abrir uma roda de cor e, em seguida, pressione ' para ajustar o limiar. PTCLs válidos agora serão mostrados como vermelho na janela de filme (Figura 3) e aqueles que saturar será branco. Remova as áreas brancas deslocando-se com o botão esquerdo do mouse.\nRolar para cima ou para baixo com o MMB para ajustar o valor numérico amarelo na roda de cor, ajuste esse valor para o valor de yAVG retirado passo 4.11. Isto irá atribuir tudo em vermelho como um ativo Ca2 + PTCL transitória no ponto determinado limiar. Para salvar como um arquivo de partículas baseado em coordenadas, uso direito clica para acesso ' STK 3D-Save PTCLS 0' e depois à esquerda clique para salvar o arquivo.\nPare de volumetria e reabrir. Abra o PTCL arquivo (.gpf) criado na etapa 4.13. Neste tipo de arquivo, todos os ativos Ca2 + transientes são salvos como um uniforme azul PTCL (Figura 3E). Como cada PTCL é uma entidade individual com seu próprio ID, área e perímetro coordenadas, sinalizadores de estado (veja abaixo) e matrizes de resultado, a análise das características espácio-temporais, de PTCLs, ou entre PTCLs é simplificada.\nPara começar a análise PTCLs, remover qualquer ruído PTCL restante (pequenas PTCLs inválidos criados quando é gerado o arquivo de .gpf) usando certo cliques no filme janela para acessar ' PTCL STKOPS-bandeira ptcls > Min = 70' e clique com o botão esquerdo para aplicar. Esta ação sinalizará o PTCLs superiores a 6 µm2 (~ diâmetro > 2µm) e volumetria irá atribuir-lhes a seleção de 'Bandeira 1'. Quando isso for concluído, PTCLs que estão acima desse limite (bandeira 1) aparecerá como uma cor roxa clara na janela do filme, Considerando que qualquer PTCLs abaixo limiar permanecerá sua base cor azul (Figura 3F).\nCriar representações de mapa de calor da atividade PTCL usando certo cliques no filme janela para acessar ' PTCL STKops-StatMap bandeira ='. Clicando neste caminho final, pode ser inserida uma atribuição de bandeira para analisar. Assim, se desejar quantificar os PTCLs atribuídos a FLAG1, basta digitar '1', pressione ENTER e em seguida, clique esquerdo para aplicar. Isso irá gerar um mapa de calor, mostrando os totais PTCLs para todo o período de gravação, com cores diferentes, representando a ocorrência (%) em toda a gravação (Figura 3, cores quentes indicam maior ocorrência naquele local).\nSalve os mapas de calor clique com o botão direito nelas para acessar 'STM Load Save - salvar STM como. tif' e deixou clicando para salvar como TIFF.\nQuantificar a atividade PTCL usando certo cliques no filme janela para acessar ' PTCL medida-PTCLStats STK =', clicando neste caminho final, pode ser inserida uma atribuição de bandeira para analisar. Assim, se desejar quantificar os PTCLs atribuídos a FLAG1, basta digitar '1', pressione ENTER e em seguida, clique esquerdo para aplicar. Isso vai gerar uma série de traços na janela de rastreamento.\nVolumetria será por padrão sobrepor os traços PTCL gerados na etapa 4.17 em cima do outro. Separá-los usando o direito do mouse clicar na janela de rastreamento para acessar 'Align-separe Trace' e clique com o botão esquerdo para aplicar. Isto irá revelar os traços PTCL quatro diferentes que quantificam o Ca2 + atividade PTCL no filme mostrando área PTCL (verde), PTCL contagem (vermelho), tamanho PTCL (ciano) e desvio-padrão tamanho PTCL (azul) plotada contra o tempo (Figura 3 H).\nEsses traços podem ser salvos como um arquivo de texto que pode ser importado para um programa de planilha para análise adicional. Para salvar os traços, mantenha pressionada a tecla SHIFT e use direito clica na janela para acessar 'Assorted-Dump ROI como texto' e clique com o botão esquerdo para salvar o arquivo de rastreamento. Esta informação é então coletada e ilustrada em histogramas ou outras representações gráficas apropriadas (Figura 3 H).\nA fim de examinar a ocorrência inicial de PTCLs (ou seja, olhar para disparar sites), essas PTCLs iniciais recebem uma atribuição de bandeira diferente. Para melhor isolar disparando sites ocorrendo dentro da rede, apenas aqueles PTCLs que não se sobrepõem com as partículas no quadro anterior, mas se sobrepõem com partículas no próximo 70 ms são considerados sites a disparar.\nPara aplicar esse limite, uso direito clica na janela do filme para acessar ' PTCL comportamento-F1 InitSites > F = 3' e esquerda clique para aplicar. Isto irá atribuir iniciando PTCLs como 'Bandeira 3', e PTCLs que atendem a esse critério aparecerá como uma cor verde-limão no filme (Figura 4A).\nVolumetria também proporciona a capacidade de quantificar e plotar o número de locais de tiro PTCL em um determinado FOV, bem como traçando sua probabilidade de disparo durante uma CTC. Para analisar esses parâmetros, crie um mapa de calor de iniciar PTCLs (pavilhão 3), conforme descrito na etapa 4.16 (Figura 4B).\nClique com o botão esquerdo na janela Plot e então pressione 'C' para abrir uma roda de cor e a imprensa que ' ao limiar. O mapa de calor de iniciar PTCLs vontade então virar cinza e branco. Remover todo branco por rolagem com o botão esquerdo do mouse e o limiar da PTCLs no mapa de calor para que apenas válidos PTCLs são cobertos em cinza (ajustar o limite de rolagem para cima e para baixo com o MMB).\nUso direito do mouse clicar sobre o mapa de calor na janela Plot para acessar 'STM PTCLs-Find PTCLs 70' e clique com o botão esquerdo para aplicar. Isto irá atribuir todas as PTCLs cinzas no mapa de maiores que 70 pixels2 no tamanho a ser alocado como uma iniciação codificados por cores separadas PTCL ou PTCL disparando local (Figura 4).\nTraça a atividade de cada um desses sites de disparar contra o tempo clicando com o botão direito sobre o PTCL disparando mapa e acessar 'STM PTCLs-criar PTCL rois' e botão esquerdo para aplicar. Isso irá gerar uma nova imagem na janela do filme com todos o separado PTCL colorida disparando sites exibidos com um ROI em torno deles.\nUso direito clica na janela do filme para acessar ' PTCL medida-PTCLpixROIBM > = 1' e clique com o botão esquerdo para aplicar. Isto irá identificar todos os ROIs na janela do filme que contêm pelo menos um PTCL e traçará toda a atividade dentro destes ROIs na janela de vestígios. Por padrão, esses traços vão ser sobrepostos a uma outra. Para separá-los, uso direito clica na janela de rastreamento para acessar 'Align-separe Trace' e clique com o botão esquerdo para aplicar. Para salvar os traços, mantenha pressionada a tecla SHIFT e use direito clica na janela para acessar 'Assorted-Dump ROI como texto' e clique com o botão esquerdo para salvar o arquivo de rastreamento.\nA atividade de cada local de disparo também pode ser plotada como um mapa de ocorrência. Para fazer isso, uso direito clica na janela do filme para acessar ' PTCL Pianola de medida-ROI = 10' e clique com o botão esquerdo para aplicar. Isso irá gerar uma trama de todos os sites de disparar contra o tempo na janela Plot. Cada site de disparo será exibido como uma entidade colorida separadamente, cada um em seu próprio 'faixa' e essas parcelas correspondem à Ca2 + PTCLs iniciando durante CTC (Figura 4E) salvar estes mapas de ocorrência clicando com o botão direito nelas para acessar ' STM Load Save - salvar STM como. tif ' e em seguida, botão esquerdo para salvar como TIFF.\nPara quantificar a probabilidade de disparo em cada local de fuzilamento durante um CTC, uso direito clica na janela do filme para acessar ' PTCL comportamento-Mark é = 1' e clique com o botão esquerdo para aplicar. Isto irá identificar todos os quadros do filme que contêm PTCLs acima do limiar, e estes serão marcados na parte inferior da janela do filme como linhas verticais azuis.\nCTC manifesta como cluster rápida de disparo assíncrono de múltiplos locais de tiro dentro o FOV com lacunas de s ~ 1 entre cada ciclo CTC. Esta regularidade e longa gap de nenhum PTCLs ativos entre CTC é usado para definir um CTC para análise.\nUso direito clica na janela do filme para acessar ' Gap PTCL comportamento-bloco é < =' e usar um clique direito sobre o ponto final para introduzir um número. Este comando agrupará os quadros PTCL ativo identificados na etapa 4.28 em blocos e blocos são baseados no número de quadros que separam PTCLs ativos. Para as gravações de 33 FPS por exemplo, um valor de 10 funciona bem. Se PTCLS ativos são menos de 10 quadros separados (330 ms) eles são agrupados em um único bloco para análise (os blocos são então mostrados como retângulos rosa sobre as linhas verticais azuis na parte inferior da janela do filme, com cada retângulo rosa agora indicando um CTC).\nUso direito clica na janela para acessar 'PTCL medida-PTCL evento Prob' do filme. Isso irá gerar um arquivo de texto que pode ser importado para um programa de planilha. Este arquivo de texto irá fornecer uma vasta quantidade de dados sobre a natureza dos sites iniciação que foram definidos a partir de etapas 4.16 – 4,23 e sua contribuição para o CTC.\nNota: O arquivo de texto mostrará o número de sites de iniciação (referido como 'domínios'), o tamanho do site em pixels e μm2, probabilidade de cada site de iniciação disparar ou uma vez ou várias vezes durante cada CTC (dado como um %), a duração média e tamanho de PTCLs ocorridos nesse site de iniciação, o número de ciclos CTC (como definido na etapa 4.23) e a percentagem de locais de tiro que disparou durante cada ciclo CTC. Esta informação é coletada e ilustrada em histogramas ou outras representações gráficas apropriadas (Figura 4F).\nUsando ratos Kit-Cre-GCaMP6F (Figura 1), dinâmica Ca2 + sinalização de comportamentos de ICC no trato gastrointestinal podem ser fotografados no local. Com microscopia confocal, imagens de alta resolução de populações específicas de ICC podem ser adquiridas sem contaminar os sinais de outras populações de ICC dentro do mesmo tecido mas em planos anatomicamente distintos do foco (Figura 2A)37 , 39 , 40 , 41. é possível registro breve (< 100 ms), localizadas a Ca2 + eventos que não eram possíveis com membrana permeável Ca2 + indicadores. Mapeamento de espaço-temporal com volumetria ou ImageJ software pode ser usado para gerar STMs de todos Ca2 + eventos dentro das células no local. Usando essa abordagem, Ca2 + eventos em um FOV inteira podem ser visualizados e mapeado (Figura 2BC), ao invés de só gravar a actividade limitada de um único ROI. Esses métodos podem ser estendidos para cada célula dentro de um determinado FOV, garantindo coleção de dados representativos de todas as células e fornecendo informações quantitativas sobre relativos amplitudes, durações transitórias, taxa de ascensão e queda de transientes, etc (Figura 2E , F). Análise do STM, em oposição a intensidade baseada em ROI parcelas, também fornecem a capacidade para monitorar e gravar características espaciais de Ca2 + sinalização, tais como disseminação espacial e a velocidade de propagação, como mostrado na Figura 2. Esta informação pode ser acumulada para proporcionar uma visão bastante completa de Ca2 + sinalização comportamentos nas células em seus ambientes nativos (Figura 2 H).\nPTCL análise pode ser usada para quantificar mais complexo Ca2 + sinalização de comportamentos, tais como os que ocorrem dentro de redes interconectadas de celulares. Um exemplo desta aplicação é fornecido pela análise realizada na ICC-MY (Figura 3A). Normalmente em tais preparações complexas, ruído de fundo e sinal de ruído podem ser um problema. No entanto, usando software de volumetria para aplicar filtros de suavização e diferenciais em filmes de atividade de Ca2 + e em seguida, aplicando protocolos de limite de ruído para filtrar o ruído de fundo do ruído (Figura 3B-D) podem ser removidos do complexo gravações de atividade dinâmica. Usando a análise PTCL, tais como as mostradas na Figura 3E-G, informações quantitativas sobre Ca2 + sinalização pode ser calculada medindo-se a área de PTCL, contagem PTCL e tamanho PTCL que indicam escalas espaciais de ativação de Ca2 + sinais em um FOV. Estes dados podem ser compilados como mostrado na Figura 3 H e analisados estatisticamente, conforme apropriado. A Figura 4 ilustra como PTCL análise permite na quantificação de profundidade de sub celular Ca2 + sinalização examinando o local e disparar as probabilidades de Ca2 + sites a disparar. Alocando PTCLs em bandeiras diferentes com base em suas características temporais, iniciar PTCLs pode ser com precisão mapeado como mostrado na Figura 4-E e uma riqueza de dados adquiridos no número de sites de iniciação (conhecido como ' domínios), o tamanho do site em pixels e µm2, a probabilidade de cada iniciação do site disparar ou uma vez ou várias vezes durante cada CTC (dado como um %), a duração média e o tamanho de PTCLs que ocorrem no local de iniciação, o número de CTC ciclos (como definido na etapa 4.23) e a % de locais de tiro que disparou durante cada ciclo CTC. Essas técnicas permitem um alto nível de mineração de dados e quantificação in-situ Ca2 + sinais ocorrendo dentro de uma rede celular intacta que não são possíveis com análises baseadas em ROI.\nFigura 1: geração de ratos KitGCaMP6f. Diagrama esquemático de como Ai95 (RCL-GCaMP6f)-D (GCaMP6f ratos) foram cruzados com c-Kit+ / Cre-ERT2 (Kit-Cre ratos) para gerar ratos Kit-Cre-GCaMP6f. Estes ratos são injetados com tamoxifeno em idades de 6 a 8 semanas para induzir Cre Recombinase e subsequente expressão GCaMP6f exclusivamente no ICC. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.\nFigura 2: Análise de estocástico Ca2 + sinais de ICC-DMP usando mapeamento de espaço-temporal (STM). (A) imagem representativa de vários ICC-DMP do intestino de um rato de Kit-Cre-GCaMP6F in situ. Um ROI verde indica o tamanho e a orientação de ROI para desenhar em torno de um único ICC-DMP dentro o FOV para criar um STM em volumetria. (B) STM de Ca2 + atividade em destaque no painel A depois o ICC-DMP foi devidamente calibrada para a amplitude, espaço e tempo. (C) o STM mesmo mostrado no painel B após ele tem sido cor codificada com uma tabela de pesquisa (QUBPallete). (D) imagem expandida de ICC-DMP Ca2 + transientes exibido em uma cor codificada STM, indicando onde desenhar uma linha através de um evento de Ca2 + através de seu eixo de tempo (x) para criar um perfil de parcela de sua atividade no ImageJ. (E) trama do perfil do evento Ca2 + destaque no painel D, indicando onde linhas mostradas ser desenhados para medir com precisão a amplitude e a duração do evento. (F) trama do perfil do evento Ca2 + destaque no painel D, indicando onde linhas mostradas ser desenhados para medir com precisão a taxa de ascensão e queda do evento. (G) imagem expandida de ICC-DMP Ca2 + transientes exibido em uma cor codificada STM, indicando onde desenhar uma linha através de um evento de Ca2 + através de seu eixo (y) de espaço para medir com precisão a sua propagação espacial. (H) representante histogramas de dados em pool de ICC-DMP ilustrando como exibir graficamente a amplitude, duração e valores de propagação espacial adquiridas de seguir os passos acima. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.\nFigura 3: quantificação da CTC no ICC-MY usando partículas com base em análise. (A) imagem representativa de uma ICC-minha rede do intestino de um rato de Kit-Cre-GCaMP6F in situ. (B) imagem tirada da gravação mostrada no painel A depois que passou por um filtro de diferencial de Δt = ±66 – 70 ms e um filtro gaussiano de 1,5 x 1,5 µm, StdDev 1.0. (C) imagem tirada do vídeo no B após limiarização foi concluída com PTCLs acima do limiar, mostrado em vermelho. (D) vestígios de PTCL contar e dizer tamanho PTCL em um protocolo de limiarização para eliminar o ruído no filme mostrado no painel B. PTCLs foram criados usando um algoritmo de inundação-preenchimento que marcou a estrutura de todos os pixels adjacentes que tinha intensidades acima do limiar, Ca 2 + transientes PTCLs eram maiores que o ruído PTCLs. O limite no qual um grande número de PTCLs de ruído pequeno porte surgiu e começou a reduzir o tamanho médio de PTCLs pode ser usado como um limite comum para todas as gravações. (E) a imagem representativa do baseados em coordenadas Ca2 + PTCL arquivo criado da gravação em imagem representativa de C. (F) retirada o arquivo PTCL de E depois de um critério de seleção de thresholded > 6 µm2 (diâmetro ~ 2 µm ou menor) foi aplicado; PTCLs acima deste limite são sinalizados (bandeira 1) como partículas de luz roxas e considerado válido mapa de calor PTCLs. (G), mostrando os totais PTCLs (bandeira 1) para a gravação do vídeo mostrado no painel F, com totais PTCLs somadas com cores representando ocorrência em toda a gravação (cores quentes indicam maior ocorrência naquele local). (H) traços representativos da área PTCL (azul) e PTCL contagem (vermelho), derivado do arquivo PTCL criado no painel de A-G. Histogramas representativas de dados em pool de vários experimentos são mostradas abaixo os traços. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.\nFigura 4: Análise de Ca2 + sites em ICC-MY usando a disparar partículas com base em análise. (A) representante imagem tirada do arquivo de Figura 3E PTCL, depois bandeira 1 PTCLS são ainda mais refinados no pavilhão 3, o status de bandeira para Ca2 + sites a disparar. BANDEIRA 3 PTCLs são exibidos como verde-limão (apenas aquelas PTCLs que não se sobrepõem com as partículas no quadro anterior, mas se sobrepõem com partículas no próximo 70 ms foram considerados locais de tiro). (B) calor mapa mostrando os totais PTCLs (pavilhão 3) para a gravação do vídeo mostrado no painel A, com totais PTCLs resumidas com cores representando a ocorrência em toda a gravação (cores quentes indicam maior ocorrência naquele local). (C) mapa representativo de Ca2 + disparando sites mostrados no painel que b, com cada local de disparo diferentes atribuídos uma cor diferente de identificação. (D) traços representativos de área PTCL (azul) e PTCL contam (vermelhos), derivado do arquivo PTCL criado na Figura 3A-G. E um mapa de ocorrência da atividade de locais de tiro individual. Cada local de fuzilamento dentro o FOV é exibido como um bloco colorido em seu próprio 'lane' contra o tempo. (F) representante histogramas de dados em pool de vários experimentos são mostradas ilustrando valores acumulando para Ca2 + disparando a probabilidade de disparo local / CTC e o número de Ca2 + sites em um FOV de cozedura. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.\nCA2 + imagem de tipos específicos de células em tecidos intactos ou dentro de redes de células, muitas vezes revela padrões complexos de transientes de Ca2 + . Esta atividade requer cuidadosa e detalhada análise e quantificação de capturar o máximo de informação possível sobre os eventos subjacentes e cinética destes eventos. STM e análise PTCL fornecem uma oportunidade para maximizar a quantidade de dados quantitativos, resultantes das gravações deste tipo.\nO estreito, morfologia do eixo em forma de ICC-DMP tornam adequada para análise STM derivado da STMs descritas acima. No entanto, esta análise não é adequada para ICC-MY que são estreladas em forma e conectados em uma rede (Figura 3A). Além disso, os Ca2 + sinalização padrões no ICC-MY são mais complexos, manifestando-se como propagação CTC de diversos sites de origem em toda a rede MY-ICC. Assim, de forma a quantificar a atividade ocorrendo em toda a rede ICC-MY dentro um FOV, análise de partículas (PTCL) foi implementado usando o software feito sob encomenda (volumetria, versão G8d, GWH, operável no Mac OS, entre em contato com o Grant Hennig grant.hennig@med.uvm.edu Quanto inquire de volumetria acesso e utilização).\nAnálise STM permite que todos os eventos de Ca2 + células únicas e dentro de todas as células em um FOV para ser analisado criticamente em toda uma gama de parâmetros espaciais e temporais. O protocolo descrito ilustra como essas técnicas podem ser aplicadas a ICC-DMP do intestino delgado do rato. Quantificando totalmente Ca2 + sinalização no ICC-DMP, conforme mostrado na Figura 2B-G, Ca2 + sinalização padrões foram caracterizados em detalhe37. Essas análises têm sido aplicadas para gravações onde ICC-DMP sofrer intervenções finamente quantificar os efeitos do bloqueio ou estimular a liberação de Ca2 + / influxo de Ca2 + / vias de neurotransmissão37,39 , 40 , 41. estas técnicas podem ser facilmente aplicadas a outras preparações de tecido intacto. Por exemplo, análise STM conforme descrito aqui tem sido utilizada para identificar novos caminhos mecanicistas envolvidos na geração de Ca2 + ondas intracelulares, gravado em uretral músculo liso em situ57.\nA preparação do STM em volumetria exige alguma cautela, como a função em volumetria que cria o STM do ROI desenhado (Figura 2A) é um valor médio de intensidade. Assim, a amplitude de Ca2 + sinais potencialmente pode ser diluída se o ROI é desenhado mais larga ou mais do que o Ca2 + evento ou célula de interesse. Assim, os usuários devem ser cuidadosos desenhar ROIs que são como encaixe firmemente quanto possível para o Ca2 + sinais ou célula específica que eles estão analisando a fim de aliviar esse problema. Da mesma forma, criar STMS usando pixel único linescans no ImageJ significa que precisas de mapeamento de eventos de Ca2 + é sujeita a proximidade do sinal de Ca2 + para linha desenhada. Tais preocupações são menores no eixo fino em forma de células como ICC-DMP, no entanto outra célula tipos com uma morfologia mais estrelada ou redonda podem fazer este tipo de análise inadequada para mapear todos os sinais de Ca2 + com precisão. Ao preparar STMs para análise, independentemente se eles foram feitos em volumetria ou com ImageJ linescans, existem algumas áreas a serem destacadas para fins de solução de problemas. É importante alterar a qualidade da imagem para 32-bit antes de executar qualquer calibração no STMs. falha ao fazer isso, ou fazê-lo depois de calibrar para F/F0 pode levar a medidas inconsistentes através de experiências. Verifique sempre a qualidade de imagem do STM, que é declarado na área superior da borda branca de STM em si quando abriu com ImageJ. Outra área potencial de inconsistência é selecionar o valor de0 F quando calibrando para amplitude. É vital que para selecionar a região para F0, que cobre uma área da célula que é uniforme e em foco. Por esta razão, áreas da célula que têm uma fluorescência basal instável ou que mudar devido ao movimento ou outros artefatos não são ideais e protocolos de estabilização de movimento rigorosa devem ser empregados nesses casos.\nDentro in situ ou cultivadas preparações contendo interligados redes celulares, tais como ICC-MY na análise PTCL pequena intestino, fornece uma técnica simplificada para quantificar o complexos, subcellular Ca2 + eventos que ocorrem na rede. Além disso, ele também permite que todos os eventos de Ca2 + na rede dentro de um determinado FOV para ser analisado, em vez de usando ROIs arbitrários, que só fornecem informações sobre a frequência e intensidade dentro o ROI. Uma vantagem da análise PTCL descrita aqui é que através da aplicação de diferencial e Gaussian suavização de filtros para gravações, uma grande quantidade de ruído pode ser removida de filmes que podem conter contaminante luz de células não de interesse ou devido ao não-dinâmico pontos brilhantes ou inclusões. É importante notar que a quantidade de diferenciação aplicada a gravações dependerá em grande medida a taxa de aquisição usada pelo experimentador. Diferenciar os filmes conforme descrito no protocolo fornece um meio de aplicação de um filtro para o filme para remover o ruído de alta frequência de gravações. Aplicando um valor de diferenciação de '2', quando adquirir em FPS 33 funciona bem para remover o ruído de fundo, mantendo o bom sinal para ruído (se o valor for muito baixo, ruído vai ser escolhido mas sinal para ruído pode ser comprometido se o valor for muito alto). O valor de diferenciação aplicado deve ser aumentado com taxas mais rápidas de aquisição, por exemplo em 100 FPS, um valor de diferenciação do '7' dá aproximadamente o mesmo sinal à relação de ruído como um valor de "2" para uma gravação de 33FPS. Experimentadores precisará otimizar essas configurações em conformidade para seus produtos e condições de gravação.\nO protocolo de limiarização descrito na Figura 3D permite que um procedimento de limiarização consistente ser aplicado a diferentes gravações feitas em diferentes sistemas com software de aquisição diferente. Essa flexibilidade permite que dados de vários pesquisadores trabalhando em diferentes sistemas para compilar suas gravações para os mesmos conjuntos de dados. Usando o sistema de bandeira em volumetria, PTCL análise permite a visualização e a quantificação de individual Ca2 + sites dentro de uma rede em detalhe a disparar. Informações podem ser obtidas no número de sites de iniciação, do tamanho do site em pixels e µm2e a duração média das PTCLs ocorrem nesse local. Esta análise PTCL permitiu a primeira caracterização da atividade CTC no intestino delgado em um nível celular secundário, e, usando as diferentes bandeiras em volumetria software, PTCLs em ambos a rede e fuzilamento individual site nível foram quantificados no tecido intacto preparações de Kit-Cre-GCaMP3 ratos38. Partir dessas observações iniciais, esta análise tem sido mais utilizada para estudar a novela Ca2 + influxo vias no GI ICC-MY como loja-operado-Ca2 +-entrada42 e o papel da mitocondrial Ca2 + sinalização em GI pacemaking 41. muito como análise STM descrito acima, PTCL análise pode ser facilmente adaptado a diferentes preparações intactas diferente daquele descrito neste protocolo. Por exemplo, um estudo recente usado análise PTCL para estudar o romance rítmica Ca2 + eventos que ocorrem nas redes de celular intactas da propria do lamina do rato bexiga urinária58,59 e, portanto, poderia ser facilmente aplicado a outros sistemas celulares complexos, intactos como sistemas neuronais. Enquanto este trabalho focado em Ca2 + imagem em tecidos intactos com GECIs, estas técnicas de análise também podem ser executadas em células isoladas e carregados com tradicional Ca2 + indicador corantes de tecidos. A análise STM com base tem sido utilizada para quantificar com sucesso Ca2 + sinais localizados e Ca2 + ondas do eixo em forma de células intersticiais e células de músculo liso de uma variedade de preparações11,60 , 61 , 62 , 63. Além disso, as rotinas de análise PTCL descritas aqui também foram aplicadas às preparações in situ rede visualizadas com Cal 52058,59. No entanto, estes estudos também conservam as desvantagens de tal corante carregamento protocolos tais como identificação de célula ambíguo e problemas com sinal para ruído.\nOs exemplos ilustrados acima demonstram que a análise tanto STM e PTCL são técnicas altamente maleáveis que podem ser usadas para quantificar complexo Ca2 + sinalização em uma variada gama de preparações de tecido intacto. As abordagens oferecem muitas vantagens sobre ROI tradicional com base em parcelas de intensidade que têm sido rotineiramente utilizadas anteriormente e devem fornecer os investigadores mais valiosas informações quantitativas sobre Ca2 + sinalização do que poderia ser alcançado anteriormente.\nFinanciamento foi fornecido pelo NIDDK, através de DK41315 P01.


Atualização do Portal de Clãs | Clãs | World of Tanks\nAtualização do Portal de Clãs\nContinuamos aperfeiçoando o portal de Clãs e adicionando novos recursos para visualizar realizações de Clãs. Nesta nova atualização, mudamos a maneira como alguma informação crucial sobre clãs é apresentada. Dê uma conferida abaixo.\nClassificação de Clãs Agora Tem Relevância Diária!\nCom o lançamento do novo Mapa Global, o filtro temporal para exibição da Classificação de Clãs (CC) foi alterado. O portal de Clãs atualizado vai agora apresentar o valor atual da Classificação de Clãs (CC), no lugar de usar períodos de tempo de 1, 7 ou 28 dias, respetivamente. A informação sobre a Classificação de Clãs vai ser atualizada todos os dias e isso significa que os jogadores sempre poderão consultar informação relevante sobre cada Clã.\nPor exemplo, se durante o dia tiver alterações na estrutura de um Clã - jogadores deixando o Clã ou novos jogadores experientes se juntando - essas mudanças vão aparecer imediatamente no dia seguinte!\nCom a introdução de novas Frentes de nível VI, VIII e X no Mapa Global, o cálculo da Classificação de Clãs (CC) vai agora ser feito para Clãs que tenham pelo menos 10 membros. Isso vai levar em consideração o sucesso dos Clãs com poucos membros que jogarem em veículos de níveis inferiores.\nClassificação de Clãs ELO no Mapa Global & Fortaleza\nOs valores da classificação ELO no Mapa Global (eMG) e em Fortaleza (eF) vão ser divididos e exibidos separadamente, para cada Frente.\nNo Mapa Global, a classificação ELO vai ser dividida em:\nBatalhas em veículos de nível X - eMGX\nBatalhas em veículos de nível VIII - eMGVIII\nBatalhas em veículos de nível VI - eMGVI\nBatalhas em veículos de nível X - eFX\nBatalhas em veículos de nível VIII - eFVIII\nPara ter em consideração o nível geral da classificação ELO do Clã, foram introduzidos novos indicadores: wMG e wF, que apresentam o valor médio da classificação ELO por batalhas que um Clã tem nos respetivos modos de jogo. Esses indicadores serão considerados na fórmula de cálculo da Classificação de Clãs (CC), que está detalhada no Guia da Classificação de Clãs. Para ter os indicadores wMG e wF contados na Classificação de Clãs (CC), os Clãs devem:\nTer pelo menos 10 batalhas em modos de batalha para Clãs;\nTer 5 batalhas em modos de batalha para Clãs disputadas nos últimos 28 dias.\nExibição das Rendas do Clã\nNo perfil do Clã, a exibição principal das rendas do Clã foi redesenhada:\nJogadores que não estão no Clã ou não estão nas categorias adequadas vão ver as rendas possíveis de um Clã, de acordo com o número de províncias do Clã no Mapa Global e há quanto tempo o Clã as possui;\nJogadores de um Clã, exceto recrutas e reservas, vão poder ver as rendas reais desse Clã durante um período de tempo.\nAlterações no Top 3 de Jogadores em um Clã\nPara chegarem no Top 3 de jogadores em um Clã por percentagem de vitórias e dano por batalha, os jogadores precisam ter pelo menos 20 batalhas dentro dos últimos 28 dias. Esta mudança vai mostrar com maior precisão uma lista dos melhores jogadores de cada Clã.\nEstação de Recrutamento


Visão | “Boarding House Reach”, a enciclopédia elétrica de Jack White\n“Boarding House Reach”, a enciclopédia elétrica de Jack White\n31.07.2018 às 15h19\nNo seu terceiro disco a solo, o músico de Detroit, Jack White, continua a aprofundar a sua obsessão com as guitarras\nQuando se recordar a carreira musical de Jack White − e não temos quaisquer dúvidas de que ele vai merecer um lugar de destaque na história do rock no século XXI −, Boarding House Reach não vai aparecer na lista das suas melhores e mais marcantes obras. É um estranho álbum, este, com igual dose de exibicionismo e de academismo. Um disco em que os defeitos se podem confundir com qualidades, e vice-versa. Who’s with me? − quem está comigo? − já surgiu em Corporation, tal como ele repetiu ao vivo no palco principal do último festival NOS Alive, com um look a meio caminho entre o Johnny Depp, de Eduardo Mãos de Tesoura, e Robert Smith, dos The Cure.\nJack White parece sempre alguém que, apesar de introvertido, precisa de ser reconhecido, adulado e adorado. Para o conseguir, apostou todas as suas fichas num objeto: a guitarra elétrica. Além de músico, é uma espécie de estudioso obcecado com o assunto. Daí o academismo deste disco – cheio de quebras, mudanças bruscas a meio de cada faixa, meio louco, irrequieto e fragmentado – que parece querer mostrar tudo o que é (e foi) possível fazer com uma guitarra nas mãos. Aqui pode evocar tanto os Black Sabbath como o jazz, os Rage Against the Machine ou o balanço latino, bem como Hendrix ou os mais clássicos escritores de canções norte-americanos.\nA viagem é rápida e alucinada (também com a ajuda de muitos sintetizadores e de parafernália variada). Daí, também, o exibicionismo. E pode a exibição de virtuosismo ser uma qualidade? No caso de Jack White até nos arriscamos a responder que “sim”. Nestas canções desiguais parece haver, ainda, alguma ingenuidade, como se Jack White estivesse sempre a descobrir tudo com o entusiasmo genuíno das primeiras vezes. E isso, sim, é uma qualidade rara nos dias que correm.\nApenas com uma guitarra e uma bateria, Jack White conseguiu, com os seus The White Stripes, criar um imaginário e um som só seu que tem, ainda, alimentado a sua carreira a solo (Boarding House Reach é o terceiro disco em nome próprio) e outros projetos, como os Dead Weather e The Raconteurs\nVeja o vídeo de Connected by Love:


Apartamento à venda - Perdizes, São Paulo - 200m², 4 dorms., 3 vagas, Cód:reo140402 | 123i\nVenha conhecer o espaço para a sua família viver com privacidade e elegância. Apartamento iluminado em todos os ambientes, amplo e acolhedor, próximo a todo o conforto que o bairro tem de melhor. Um por andar, living para 2 ambientes com sacada ,4 dormitórios sendo 2 suítes. Prédio com lazer. Oportunidade única, agende já a sua visita. Características do Imóvel: Área de Serviço, Closet, Despensa, Home Theater, Sala de Jantar, Terraço, WC Empregada - Ref.: REO140402\nR$ 2.290.000 Apartamento à venda Apartamento à venda com 3 quartos, 200m² Apartamento à venda\nR$ 1.650.000 Apartamento à venda Apartamento à venda com 3 quartos, 200m² Apartamento à venda\nR$ 2.650.000 Apartamento à venda Apartamento à venda com 4 quartos, 200m² Apartamento à venda


Road Show Recife tem apoio da KGMLan\ncurso de Fusão é totalmente prático\né parceira no Road Show Recife com condições exclusivas para os participantes.\nDistribuidor das melhores marcas do mercado de tecnologia. Soluções completas com produtos de alta qualidade.\nToda linha de fibra óptica, cabeamento estruturado, telefonia, detecção de incêndio, segurança eletronica, GPON , Ferragens e acessórios.\nA KGMLan tem logística própria, profissionais capacitados em todos os produtos que comercializa; e faz treinamentos gratuitos.\nCurso Fusão de Fibra Óptica\nO curso foi realizado no dia 24 de abril, na KGMLan, parceira no evento em Recife.\nPara técnicos que trabalham com a infraestrutura física da Internet:\nEmendas ópticas, uso do clivador e máquina de fusão, montagem de caixa de emendas e de atendimento.\nEncontro de Provedores de Internet\nO encontro de Provedores ocorreu no Hotel Onda Mar, em Boa Viagem. Entre os temas abordados, Sérgio Alves Cavendish falou sobre a Regulamentação da Anatel em Relação aos Provedores de Internet. Maria Imaculada Teixeira trouxe noções básicas de Gestão Tributária para ISP. Segundo a instrutora, um conhecimento essencial para quem planeja crescer.\nAntônio Moreiras, do NIC.BR, (foto) falou sobre "Boas práticas operacionais para Sistemas Autônomos".\nAo final, uma mesa redonda com os palestrantes e a participação dos provedores debateu a otimização do uso do PTT de Recife.\nO serviço "InternetnomeuCEP" oferecido pela Anid, foi apresentado por Percival Henriques e teve grande adesão por parte dos provedores. Trata-se de um site de busca de provedores com serviços de acesso à Internet pelo CEP.\n15 estados brasileiros\nDebate sobre inovações atrai ISPs\nmarço 29, 2019 17:41