Infinium Assay for Large-scale SNP Genotyping Applications | Protocol (Translated to Spanish)\nGenotipificación rápida de tejido de ratónilizando extracto-N-Amp tejido Sigma PCR Kit…\nPyrosequencing: Un método simple para determinarel genotipo exacto…\nUn método práctico y novela para extraer el ADNenómico de los kits de extracción de sangre para la Preservación Plasma Protein…\nUn alelo-específicas Gene ensayo de expresiónara probar la base funcional de las asociaciones genéticas…\nUn protocolo se describe que utiliza ensayos Infinium de Illumina para llevar a cabo la genotipificación a gran escala. Estos ensayos pueden determinar el genotipo de forma fiable a millones de SNPs a través de cientos de muestras de ADN individuales en tres días. Una vez generada, estos genotipos se pueden utilizar para comprobar las asociaciones con una variedad de diferentes enfermedades o fenotipos.\nVariantes de genotipado en el genoma humano ha demostrado ser un método eficaz para identificar asociaciones genéticas con fenotipos. La distribución de las variantes dentro de las familias o de las poblaciones puede facilitar la identificación de los factores genéticos de la enfermedad. Panel de Illumina de BeadChips genotipado permite a los investigadores determinar el genotipo de miles o millones de polimorfismos de nucleótido único (SNP) o para analizar otras variantes genómicas, como el número de copias, a través de un gran número de muestras de ADN. Estos SNPs se pueden propagar por todo el genoma o dirigidos en regiones específicas con el fin de maximizar el potencial descubrimiento. La prueba Infinium ha sido optimizado para producir alta calidad, resultados precisos de forma rápida. Con una configuración adecuada, un solo técnico puede procesar desde unos pocos cientos a más de mil muestras de ADN por semana, dependiendo del tipo de matriz. Este ensayo guía a los usuarios a través de cada paso, empezando con ADN genómico y terminando con el escaneo de la matriz. Usando Reage decoronts, las muestras se amplifican, fragmentada, se precipitó, se resuspendió, se hibrida con el chip, prorrogado por una sola base, manchado, y escaneado a cada una de alta resolución del sistema óptico de imagen iScan o Hi Scan. Se requiere un paso durante la noche para amplificar el ADN. El ADN se desnaturaliza y isotérmicamente amplificado por amplificación de todo el genoma, por lo tanto, no se requiere la PCR. Las muestras se hibridan con las matrices durante una segunda etapa durante la noche. Por el tercer día, las muestras están listas para ser escaneado y analizado. El ADN amplificado puede ser almacenada en grandes cantidades, lo que permite matrices de perlas que se procesen todos los días de la semana, maximizando así el rendimiento.\nEscribiendo polimorfismos de nucleótido único (SNP) es un método clave para la identificación de variantes de riesgo asociados con la enfermedad. Históricamente, el alcance de experimentos de genotipado ha sido limitada por la tecnología disponible. Métodos de genotipificación basados en la electroforesis en gel se limitan en la muestra-y SNP-producción . El desarrollo de estos ensayos a menudo puede ser de trabajo intensivo, basándose en la composición y la estructura de la región que rodea la variante para la optimización de . Genotipificación TaqMan, desarrollado por Life Technologies, se puede ejecutar un gran número de muestras de forma rápida y con una mínima participación técnico , pero las restricciones SNP-multiplexación siguen limitando el número total de los genotipos a bastante menos de un millón al día [3,4 ]. Plataforma de Sequenom IPLEX también puede ejecutar muchas muestras a la vez, pero, ya que menos de un centenar de SNPs pueden ser multiplexados juntos, el rendimiento es comparativamente bajo en general . Secuencia tecnología SNP de Beckman Coulterpodría producir teóricamente más de tres millones de genotipos por día, pero este rango de proyecto límites de la tecnología a un máximo de sólo cuarenta y ocho SNPs por reacción de [4,6]. Si bien el ensayo GoldenGate puede procesar casi doscientos muestras de ADN de cada día en cientos o miles de SNPs por muestra, el precio por el genotipo no es competitivo con, técnicas de ultra-alto rendimiento avanzados al escribir más de tres mil SNPs a la vez [4,7 ]. Para procesar varios millones de genotipos por día, la escala necesaria para grandes estudios de asociación de todo el genoma, los ensayos de matriz de hibridación se han convertido en la opción más rentable en el mercado.\nLínea de Affymetrix arrays de hibridación y de la línea de arrays basados en Infinium de Illumina permiten potencialmente cientos de muestras que se escriben en los cientos de miles o millones de SNPs en paralelo [4,8]. Estos SNPs pueden estar dispersos por todo el genoma, localizada en las regiones de interés, como el exomes, o personalizado a la preferencia del usuario. Estas matrices tienen la ventaja de no sólo ser capaz de determinar el genotipo de forma precisa un millón de SNPs por muestra a la vez, sino también para medir el número de copias variación, anomalías cromosómicas potencialmente revelando. Alineados Infinium matrices OMNI BeadChip actualmente tienen la capacidad de determinar el genotipo de hasta casi cinco millones de marcadores por muestra, incluyendo medio de un millón de loci de encargo, en un máximo de casi un centenar de muestras de cada día.\nComo la mayoría de las enfermedades tienen un componente genético, estos experimentos a gran escala puede ser crucial en la búsqueda de genes asociados con la enfermedad. Genotipado de alto rendimiento permite una generación genotipo eficiente de ejemplo establece lo suficientemente grande para detectar de manera convincente de asociación genética en las frecuencias de alelos menores inferiores. Proyectos de genotipado de todo el genoma se pueden utilizar para localizar regiones con estadísticamente significativa frecuencia de los alelos de casos y controles o las diferencias de número de copias [9,10,11]. Según el Ge humano NacionalInstituto de Investigación nome, estudios de asociación del genoma llevó a 1.490 publicaciones separadas entre el 25 de noviembre de 2008 y 25 de enero 2013, derivada del descubrimiento de 8283 SNPs con un p-valor inferior a 1 x 10 -5 (ver http:// www.genome.gov/gwastudies/). Estos estudios, que investigan las condiciones que van desde la altura con el cáncer testicular, se benefició de las líneas generales que ofrece un análisis de todo el genoma. En casos como estos, regiones enteras de interés podrían haber escapado a la atención había el alcance de la tipificación sido demasiado restrictivo. Por lo tanto, para los análisis de asociación a gran escala, una técnica de determinación del genotipo de todo el genoma es la técnica de elección.\nExisten diferentes versiones del ensayo Infinium, cada uno diseñado para ser utilizado con los tipos específicos de arrays. El ensayo InfiniumUltra, discutido en profundidad más adelante, es apropiada para muchos 12 - o 24-muestra fichas de matriz. Estos a menudo genotipo más de cien mil SNPs por muestra de ADN y se centran en tregiones argeted, como en los paneles exoma o personalizados. Otras versiones de ensayo podrían ser necesarias para otros tipos de chips, tales como las matrices de genotipado de todo el genoma. Sin embargo, como todos los ensayos Infinium comparten una base común y difieren principalmente sólo por los nombres de reactivos, los volúmenes de reactivos, o el procedimiento exacto reactivo de tinción, técnicas perfeccionadas en una versión de ensayo a menudo pueden ser de aplicación universal. Otras matrices, tales como arrays de metilación, pueden utilizar un protocolo casi idéntico, también. Se debe tener cuidado al usar sólo la versión del ensayo requerida para el tipo de chip en uso. Algunos tipos, como aquellos que miden el nivel de expresión de genes, podrían requerir el uso de un protocolo nonInfinium.\nLas muestras deben ser procesadas en lotes. Por ejemplo, con el ensayo InfiniumUltra, tubos de reactivo de prehibridación contienen suficiente volumen para funcionar 96 muestras, y los tubos no se pueden volver a congelar. Por lo tanto, las muestras se deben ejecutar en lotes de 96 muestras a la vez. Las muestras se amplifican en los abetost días. Después de aproximadamente 1 hora de benchwork, las muestras deben ser calentados en un horno de convección durante 20-24 h. Al día siguiente, casi 4 horas se gastará fragmentación, lo que precipitó y resuspender las muestras, momento en el que las muestras pueden o bien ser congelados para uso futuro o hibrida con el chip. Cargando fichas toma cerca de 2 horas, después de lo cual las muestras se hibridó durante la noche de 16 a 24 h. En el tercer día, la etapa de tinción y la extensión toma ~ 4 horas. Una hora más se gastará de lavado, recubrimiento, y el secado de las virutas. Finalmente, las matrices se escanean, que puede tardar 15-60 min / viruta, dependiendo del tipo utilizado.\nSe aplican las medidas de seguridad de laboratorio y de limpieza estándar. Aunque la amplificación está basada en la PCR no es así, las estaciones de trabajo separadas para pre y postamplification procedimientos son necesarios con el fin de reducir al mínimo la probabilidad de contaminación. El número de identificación de cada reactivo kit suministrado en uso hay que estar inscrito en una hoja de seguimiento. Reagents deben descongelarse inmediatamente antes de su uso y de invertir varias veces antes de la dispensación. El ADN que ser escrito debe ser ADN genómico de alta calidad (260/280 relación de absorbancia de 1,6-2,0, 260/230 relación de absorbancia de por debajo de 3,0), aislado por métodos estándar y se cuantifica con un fluorómetro. La degradación de ADN es a menudo un factor que contribuye a los resultados del ensayo de baja calidad. Típicamente, se requiere 200 ng de ADN, aunque esta cantidad puede variar para algunos tipos de chips. Un robot de manejo de líquidos Tecan puede automatizar muchas de las etapas del protocolo y minimizar el error humano como factor.\nDispense 200 ng de DNA en una placa de 96 muestras de pozo profundo. Al menos 96 muestras (platos completos) deben ser plateados para asegurar que no reactivo será en vano. Etiquetar el plato con una etiqueta de código de barras suministradas por el kit y centrifugar ella.\nCon el fin de normalizar los volúmenes, dejar las muestras en un cajón o humos durante la noche la campana que se evapore el líquido. Cubrir la placa ligeramente con una toalla tapa o papel para evitar el polvo.\nADVERTENCIA: Las muestras no deben someterse a la amplificación a menos de 4 horas estará disponible al día siguiente para los pasos de fragmentación, de precipitación y resuspensión.\nRetire la caja suministrada por la empresa o el paquete de tubos etiquetados "Pre" de la -20 ° C congelador (un tubo de MA1, MA2, y MSM es suficiente para cada conjunto de 96 muestras). Establecer tubos de MA2 y MSM en el banquillo a descongelarse. Encienda correctamente calibradohorno y se puso a 37 ° C.\nEl uso de un recipiente de los reactivos y un l 10, una pipeta de 8 canales, dispense 4 l de tampón de resuspensión de ADN en cada pocillo para rehidratar las muestras. No es necesario desechar las puntas de pipeta entre cada columna si se tiene cuidado de no tocar el líquido.\nCon una pipeta de 8 canales, dispensar 20 l de MA1 en cada pocillo de la placa. Para cada nuevo reactivo, use un recipiente reactivo fresco. Cubra la placa con un sello reutilizable, pulso-centrifugadora, y agitar durante 1 minuto a 1600 rpm en un agitador de microplacas.\n2.4) Incubar a temperatura ambiente durante al menos 30 min.\nDispensar 4 l de NaOH 0,1 N a cada pocillo de la placa. Cubrir la placa con el sello reutilizable, pulso-centrifugadora, y agitar durante 1 minuto a 1.600 rpm.\nSe incuba a temperatura ambiente durante 10 min.\nDispensar 34 l de MA2 en cada pocillo de la placa.\nDispensar 38 l de HSH en cada pocillo de la placa. Cubrir la placa con elsello reutilizable, pulso-centrifugadora, y agitar durante 1 minuto a 1.600 rpm.\nColoque en el horno durante 20-24 h.\nRetire los tubos FMS del "Post-1" -20 ° C cuadro (un tubo es suficiente para cada conjunto de 96 muestras). Descongele en el banco o en un baño de agua a temperatura ambiente. Después de insertar el inserto MIDI-placa en un sistema de incubación micromuestra mesa, encender el bloque de calor y se puso a 37 ° C.\nUna vez que los tubos se descongelan, retire la placa de la muestra del horno y pulso-centrifugadora. Vierta 25 l de FMS en cada pocillo de la placa de ADN. Vuelva a colocar la tapa, pulse-centrifugadora, y agitar a 1.600 rpm durante 1 min.\nIncubar la placa en el bloque de calor durante 1 hora.\nRetire el tubo de PM1 de "Post-3" caja de 4 ° C o un paquete y se calienta a temperatura ambiente (un tubo es suficiente para cada conjunto de 96 muestras). Retire la placa de bloque de calork y el pulso-centrifugadora.\nDispensar 50 l de PM1 en cada pocillo de la placa. Vuelva a colocar la tapa, pulse-centrifugadora, y agitar a 1.600 rpm durante 1 min.\nIncubar la placa en el bloque de calor durante 5 min.\nRetire la placa de bloque de calor, apáguelo, y deseche la cubierta de placas. Dispensar 155 l de isopropanol al 100% en cada pocillo de la placa. Cubra bien con una nueva tapa e invierta manualmente el plato varias veces para mezclar.\nColoque la placa en 4 ° C durante un mínimo de 30 min. Encienda centrífuga refrigerada y se puso a 4 ° C hasta que se enfríe.\nBalance de la placa y se centrifuga a 4 ° C durante 20 min a 3000 x g.\nInspeccione la parte inferior de la placa sin invertir y confirman las muestras se precipitan en una bolita azul. Si no hay gránulos se pueden ver, centrífuga de nuevo. Recibe las toallas de papel.\nDeseche la tapa y rápidamente eliminar el líquido invirtiendo la placa y golpearla con fuerza en la mesa de trabajo cubierta de toallas de papel. Una vez que la placa es inverted, tenga cuidado de no volver mientras queda líquido. Repetidamente toque la placa contra la mesa de trabajo hasta que se elimine todo el líquido.\nColoque la placa sobre una rejilla de tubo de ensayo, invertida, que se seque. Incubar a temperatura ambiente durante 1 h.\n5. La resuspensión\nRetire RA1 de "Post-2" -20 ° C y caja de deshielo en la sala de baño de agua de temperatura. Encienda el horno y ponerlo a 48 ° C.\nUna vez descongelado, dispensar 23 l de RA1 a cada pocillo de la placa de muestras. No vierta la botella entera de RA1 en la cuenca; ahorre 30 ml para después. Si se hibridan las muestras sobre las matrices más tarde ese día, coloque el RA1 en una C menos 4 °. Si se ejecutan las muestras en una fecha posterior, la etiqueta de la botella y vuelva a congelar el RA1.\nCalor-sellar una nueva tapa sobre la placa. Pulse-centrifugadora de la placa y colocar en el horno durante 1 hora.\nRetirar la placa del horno y agitar a 1.800 rpm durante 1 min.\nLas muestras pueden ser de forma segura held en esta etapa durante un máximo de una semana. Las placas pueden ser almacenadas, y las muestras pueden ser reorganizados para prepararse para la aplicación de chips de cuentas, si es necesario. Si continuar con el procedimiento, deje la placa a temperatura ambiente y encienda el bloque de calor. De lo contrario, guarde la placa a -20 ° C.\nADVERTENCIA: Las muestras no se someten a la hibridación a menos de 5,5 horas están disponibles el día siguiente al de la mancha y lave pasos.\nEncienda el bloque de calor y la puso a 95 ° C. Encienda el horno y ponerlo a 48 ° C.\nUna vez que la temperatura se haya estabilizado, se incuba la placa en el bloque de calor durante 20 minutos.\nMientras que la placa es la desnaturalización, retire la caja de fichas de cuentas entre 4 ° C y la puso en el banquillo. Tome una botella de XC4 (del kit a temperatura ambiente) y añadir 330 ml de etanol al 100%. Agitar bien e incubar a temperatura ambiente durante la noche. Preparar la mezcla formamida / EDTA (95% de formamida, 0,2%EDTA (0,5 M), 4,8% de H2O en volumen), y congelar en incrementos separadas 15 ml. El exceso de formamida puede ser almacenada.\nRetire la placa de la muestra a partir del bloque de calor. Incubar a temperatura ambiente durante 30 min.\nMientras que la placa se está enfriando, preparar la cámara hyb. Se necesitará una cámara por cada cuatro fichas de cuentas procesadas.\nColoque una estera de goma en la parte superior de la base de la cámara Hyb, alineando el orificio más gruesa con la parte frontal de la base. El símbolo de código de barras grabado en la base todavía debe ser visible (véase la Figura 2).\nCon una pipeta 1.000 l, dispense 400 l de PB2 en cada uno de los ocho embalses de humidificación tallados en la base. PB2 se puede encontrar en la caja o el paquete de "Post-3". Coloque la tapa de la cámara Hyb en la base y cierre ambos extremos mediante el cierre de dos cierres en lados diagonalmente opuestos primero.\nEliminar los paquetes de plata individuales de chips de grano de sus respectivas cajas, pero, con el fin de minimizar la exposición de los chips 'Asegúrese de aire y luz, aún no abrirlos. Analizar cuidadosamente los códigos de barras de los chips y registrar el orden en que serán cargados en una hoja de seguimiento, junto con los ID de caja de las que provienen. Una comprensión completa de la que cada muestra de ADN individual se dispensa en los chips de talón es necesario.\nRetire los envases de plata individuales de los chips de cuentas de sus respectivas cajas, pero, a fin de minimizar la exposición de los chips "al aire y luz, aún no abrirlos. Analizar cuidadosamente los códigos de barras de los chips y registrar el orden en que serán cargados en una hoja de seguimiento, junto con los ID de caja de las que provienen. Una comprensión completa de la que cada muestra de ADN individual se dispensa en los chips de talón es necesario.\nJusto antes de los 30 min enfriamiento ha completado, abra los paquetes de chips de perlas de plata. Quite las fichas de sus fundas de plástico transparentes. Sin tocar las bolas, colocar todas las fichas del grano en un inserto de la cámara hyb, orientando el chipCódigo de barras con el símbolo de código de barras grabado en la superficie superior del inserto.\nDespegue y deseche la tapa de la placa de la muestra. Tomar 15 l de muestra de la placa de muestra y dispensar lentamente en la entrada a la matriz (véase la Figura 3). Debe tener cuidado de colocar la muestra correcta en el chip de cuentas correcta en la posición correcta, coincidiendo con el fin de chip de cuentas registradas a principios de la atención extraordinaria. Una pipeta multicanal puede ser utilizado para dispensar líquido sobre los chips, pero la previsión debe tener cuidado para aspirar sólo el número de muestras que se puede colocar de forma segura en el chip del grano, como el número de filas en una placa no siempre coincide con el número de filas en un chip.\nUna vez que todas las muestras se ha colocado en su correspondiente matriz, inspeccionar visualmente el chip de burbujas o regiones no recubiertas de líquido. Si existen estos problemas, mueva suavemente el inserto. Si es necesario, más líquido puede ser añadido a la matriz. Tenga cuidado de añadir la muestra de ADN correcta.\nAbra la cámara de un hybD Coloque los insertos en los embalses de humidificación. El código de barras del chip debe colocarse sobre el código de barras grabado en la base de la cámara Hyb. Vuelva a colocar la tapa de la cámara hyb y cerrar los cuatro cierres cerrando los ganchos en los lados diagonalmente opuestos primero.\nIncubar la cámara Hyb en el horno durante 16-24 h. Tenga cuidado de no inclinar las cámaras cuando se mueven.\nSi más de una placa se va a procesar, vuelva al paso 6.2. El procesamiento de más de 24 fichas de cuentas en un día no se recomienda con el fin de minimizar tanto la probabilidad de error humano al manipular una gran cantidad de artículos de consumo o las virutas y reducir al mínimo la cantidad de tiempo requerido para procesar las fichas en los pasos futuros, ya que se debe tener cuidado tomar para limitar su exposición al aire tanto como sea posible. Una botella de XC4 es suficiente para un máximo de 24 fichas de cuentas.\n7. Preparación de tinción\nRetire las cámaras hyb del horno y se incuba a te habitaciónmperature durante 25 min. Si el procesamiento de más de dos cámaras hyb, escalonar su doble remoción cada 10 min. Con el fin de mantener las fichas de secado, aún no abrir las cámaras hyb.\nMientras que las cámaras hyb están enfriando, retire los tubos de XC1, XC2, TEM, STM y ATM de la "Post-1" -20 ° C y caja de establecer en el banco para descongelar. Tome una botella de RA1 desde el cuadro de "Post-2" a -20 ° C (o 4 º C si la reutilización del reactivo desde el día anterior) y descongelación en un baño de agua a temperatura ambiente. Descongelar un tubo de 95% de formamida, así. Para 8 chips de cuentas procesadas, dos tubos de cada reactivo, 10 ml, 15 ml RA1 formamida, y 150 ml XC3 (que se encuentra en un cuadro suministrado por la compañía a temperatura ambiente) será requerida.\nPor cada chip de procesado, se requerirá que la diapositiva un vaso, una llave de paso de flujo plástico, dos cierres metálicos, y un separador de plástico. Para el separador de plástico, use solamente la clara; separar y desechar el separador opaco. Además, dos platos de lavado de cuentas de chip ySe necesitará una bandeja de fichas de cuentas, junto con una estación de montaje de líquido y una barra de montaje de plástico.\nLimpie las placas de vidrio rociándolos con etanol y limpiándolos seco.\nEncienda el baño de agua caliente que se une al bastidor cámara de flujo continuo y ponerlo a 44 ° C. Agite con cuidado el bastidor cámara para desalojar las burbujas.\nCuando la cámara de Hyb se ha enfriado durante 25 min, llenar un plato de lavado con PB1 (aproximadamente 200 ml). PB1 se puede encontrar en la caja de la temperatura ambiente "Post-4".\nAbra una cámara hyb. Retire la junta de la tapa de un chip de cuentas agarrando el sello en una esquina y con cuidado despegando en diagonal (véase la Figura 4). Una vez que se retira el sello, colocar inmediatamente el chip en una bandeja de fichas talón y sumergirse en PB1 sin tocar las perlas. Repita hasta que la bandeja está llena de virutas de cuentas, teniendo cuidado de que no entre en seco chip.\nAgitar suavemente la bandeja para eliminar las burbujas y dejar las fichas sumergidos durante 1 min.Llene un segundo plato de lavado con PB1. Agitar la bandeja de nuevo.\nMueve la bandeja de fichas de cuentas en el segundo plato de lavado. Agitar suavemente y dejar en remojo durante 1 min, a continuación, agitar de nuevo.\nEn la estación de montaje de flujo continuo de líquido, colocar cuatro abrazaderas de plástico de flujo continuo negros en las ranuras. Llene la estación con PB1 hasta que el líquido casi llega a la altura de los ocho soportes de montaje (aproximadamente 150 ml).\nRetire un chip de cuentas de la bandeja y colóquelo en la estación de montaje de un aparato ortopédico de flujo a través del plástico. El código de barras de chip debe estar alineado encima del símbolo de código de barras grabado en la estación de montaje. Repita el procedimiento para los otros tres chips que pueden caber dentro de la estación de montaje.\nColoque una clara separador de plástico en la parte superior de un chip de perlas. Los bordes exteriores del espaciador deben rodear los soportes dentro de la estación de montaje. Repita el procedimiento para los otros chips sumergidos en el PB1.\nColoque la barra de montaje de plástico en la estación de montaje por su montaje en los surcos. Colocar suavemente un portaobjetos de vidrio en la parte superior del separador de plástico empujando el extremo posterior de la corredera en contra de la barra de montaje y lentamente bajar la parte delantera en el líquido. La ranura en la parte superior de la corredera debe mirar hacia abajo, directamente por encima del código de barras del chip, dejando un espacio entre el grano de la viruta y la corredera al final de código de barras. Repita el procedimiento para los otros chips sumergidos en el PB1. Para ver un diagrama completo conjunto de flujo continuo, ver Figura 5.\nCompruebe si hay burbujas entre el chip y el tobogán. Si aparecen burbujas, levante suavemente el portaobjetos al final del código de barras y vuelva a intentarlo. Burbujas persistentes pueden ser borrados de la copa con una toalla de papel de laboratorio (Kimwipe).\nColoque dos cierres metálicos de todo el portaobjetos de vidrio, una hacia el final del código de barras y uno hacia atrás. Los bordes de los cierres debe sujetar la llave de paso de flujo de plástico bajo el chip. Repita el procedimiento para cada chip sumergido en PB1.\nQuite los conjuntos de flujo continuo completados y colocar en posición horizontal sobre el bench. Tenga cuidado de no inclinar el montaje en vertical, lo que permite que el líquido bajo la placa de vidrio para escapar. Si más chips están esperando en la bandeja de lavado, que se pueden montar bajo el mismo PB1. Si otros chips están esperando en sus cámaras hyb originales, desechar todo el líquido en la estación de montaje y lavar los platos, y vuelva al paso 7.6.\nUna vez que todas las fichas de cuentas están en sus asambleas de flujo continuo, tomar un par de tijeras quirúrgicas y cortar los dos extremos del espaciador apagado, tan cerca de la placa de vidrio como sea posible.\n8. Coloración y Extensión\nVerifique que el estante cámara de flujo continuo ha llegado a 44 ° C en varias posiciones con una sonda de temperatura. Si la temperatura es de más de medio grado, ajuste la temperatura del baño de agua.\nColoque un montaje de flujo a través de chips de cuentas en el estante cámara deslizando el ensamble hacia abajo y enganchar la abrazadera en la parte superior. El lado trasero del chip del talón debe tocar el bastidor cámara. El gdiapositiva lass debe estar mirando hacia fuera, con la ranura en la parte superior para formar un depósito de reactivo. Repita el procedimiento para cada montaje de chips de perlas.\nUsando una pipeta de 200 l, añadir 150 l RA1to los conjuntos de flujo a través de-por dispensar el líquido en el depósito de vidrio. Incubar durante 30 seg. Repita 5 veces.\nUsando una pipeta de 1000 l, añadir 450 l XC1to los conjuntos de flujo a través de-por dispensar el líquido en el depósito de vidrio. Incubar durante 10 min.\nAñadir 450 l XC2 a las asambleas de flujo continuo dispensando el líquido en el depósito de vidrio. Incubar durante 10 min.\nAñadir 200 l TEM a las asambleas de flujo continuo dispensando el líquido en el depósito de vidrio. Incubar durante 15 min.\nAñadir 450 l 95% mezcla de formamida / EDTA para los conjuntos de flujo a través de-por dispensar el líquido en el depósito de vidrio. Incubar durante 1 min. Repita 1x.\nSe incuban las asambleas de flujo continuo durante 5 min.\nAjuste el baño de agua caliente a la temperatura de lISTED en los tubos de STM (o 37 ° C si no se muestra). Asegúrese de que cada tubo STM tiene la misma temperatura que aparece.\nAñadir 450 l XC3 a los conjuntos dinámicos. Incubar durante 1 min. Repita 1x.\nCuando la temperatura del baño de agua caliente se ha alcanzado la temperatura deseada, añadir 250 μLSTM a los ensamblados de flujo continuo dispensando el líquido en el depósito de vidrio. Incubar durante 10 min.\nAñadir 450 l XC3 a las asambleas de flujo continuo dispensando el líquido en el depósito de vidrio. Incubar durante 1 min. Repita 1x.\nIncubar las asambleas de flujo continuo durante 5 min.\nAñadir 250 l de cajero automático para las asambleas de flujo continuo dispensando el líquido en el depósito de vidrio. Incubar durante 10 min.\nAñadir 250 l STM con el flujo a travésensamblados por dispensar el líquido en el depósito de vidrio. Incubar durante 10 min.\nADD 4 50 l XC3 a las asambleas de flujo continuo dispensando el líquido en el depósito de vidrio. Incubar durante 1 min. Repita 1x.\nRepita los pasos 08.14 a 08.19 1x.\nQuite los conjuntos de flujo continuo desde el bastidor de la cámara y desconecte el baño de agua.\n9. Lavado y Sellado\nLlenar un cordón tinción plato lavado chip con PB1 (aproximadamente 315 ml). Se necesitarán dos platos de lavado verticales y una bandeja de fichas verticales de talón, junto con al menos un colector de vacío.\nDesmontar una asamblea de flujo a través de la inserción de una barra de metal delgada entre los cierres y la abrazadera y luego girando. Ponga a un lado el portaobjetos de vidrio y quitar el chip de perlas. Colocar inmediatamente el chip del talón en la bandeja de fichas de cuentas vertical y sumergirse en PB1. Repita el procedimiento para todas las asambleas de flujo continuo, teniendo cuidado de enfrentar each grano de la viruta en la misma dirección y minimizar su exposición al aire.\nAgitar suavemente la bandeja de fichas de cuentas para eliminar las burbujas. Incubar los chips de talón sumergidas en PB1 durante 5 min. Llene el segundo plato de lavado vertical con el XC4 preparado el día anterior. Agite la bandeja de fichas de cuentas de nuevo.\nMueva la bandeja de fichas de cuentas para el plato de lavado llena con XC4. Agitar suavemente la bandeja para eliminar las burbujas. Incubar durante 5 minutos y agitar de nuevo.\nEn un solo movimiento, tire de la bandeja de fichas del talón desde el plato de lavado y fijado sobre una rejilla de tubo de ensayo, a fin de que las cuentas en todas las caras de chip de cuentas hacia arriba. Con unas pinzas de cierre automático, deslice un chip de cuentas de la bandeja y coloque en un estante de tubo de ensayo. Repita el procedimiento para cada chip de perlas.\nTransferir cuidadosamente la Gradilla de fichas a un desecador de vacío. Cierre y encienda el vacío, lo que garantiza un sellado adecuado. Incubar durante 50-55 min. Si es necesario, calentar el escáner durante la incubación.\nTurn fuera el vacío y vuelva lentamente a la presión atmosférica. Compruebe que las fichas de cuentas están secos. Si es necesario, limpie los bordes y el fondo del chip con una toalla de papel para eliminar cualquier líquido o residuos.\nActivar el software de escaneo y moviendo las fichas de cuentas a la bandeja de exploración. Descargar archivos de decodificación del chip (DMAPS) activando el software de cliente de descodificación de archivos y la introducción de los códigos de barras de chips de cuentas deseados, junto con sus documentos de identidad de la caja correspondiente. Fichas de cuentas no escaneadas pueden ser almacenados de forma segura en un lugar oscuro y seco durante un máximo de 72 horas.\nUna vez los chips están colocados correctamente en la bandeja y los archivos de decodificación son reconocidos por el software, iniciar la exploración.\nUn chip de grano procesado correctamente, debe aparecer intensidades de luz láser de color rojo y de color verde brillante y distintas durante la exploración. En la figura 6, el software de exploración iScan muestra una muestra de ADN genómico estándar hibridado con éxito a una costumbre-panel de agrupación en el genotipado de SNP. Los nucleótidos marcados que fueron colocados durante las etapas de extensión y tinción fluorescente bajo las luces de los dos láseres. Como estos nucleótidos se extienden selectivamente la cadena de oligonucleótido de la perla hibridado a la cadena de ADN fragmentado, y como las cadenas de oligonucleótidos están diseñados para terminar en el sitio de la variante, el color y la intensidad de la señal resultante se puede utilizar para determinar los alelos presentes en la SNP sitio.\nUna hoja generado por los usuarios de la muestra, que coincide con los ID de las muestras y la información clínica a ChipID y la posición, y un SNP manifiesto específica de la matriz, que se obtiene directamente de la compañía, son necesarios para poder importar el scaarchivos de salida Nner en el software de análisis GenomeStudio. Hojas Ejemplo de muestra se pueden encontrar en el sitio web de la compañía. Una vez que el proyecto GenomeStudio está construido, los genotipos se pueden obtener a partir de los grupos de intensidad resultantes generados automáticamente por el software. Aunque existen múltiples opciones de visualización, la vista predeterminada, Norm-R (un valor de intensidad normalizada) vs Norma-Theta (una relación de intensidad alélica), es a menudo el argumento más fácil de diferenciar tres grupos distintos. La mayoría de los SNPs deben mostrar uno, dos, o tres grupos, dependiendo de la frecuencia del alelo menor.\nLos tres grupos representan muestras que demuestran AA, AB, BB o alelos (véase la Figura 7). Estos grupos se pueden asignar genotipos, ya sea mediante la importación de una plantilla de la posición estándar de la agrupación directamente de la empresa, mediante la selección de "Cluster Todos SNPs" de la barra de herramientas de análisis del software, o haciendo clic y arrastrando los círculos de colores en las parcelas intensidad para edi manualmente t llama. El color de la muestra en el gráfico de intensidad (rojo, púrpura o azul) indica que la llamada (AA, AB, BB o, respectivamente); negro indica que no hay llamada. Al desplazarse por los SNPs que figuran en el panel de datos completa del software, la agrupación para cada SNP puede ser visto o recordado. Una vez que los grupos se asignan las llamadas satisfactorias, el panel de datos completa del software enumera los genotipos para cada muestra individual en cada SNP particular. La opción Selector de columnas por encima de la tabla puede cambiar los formatos de datos.\nLos datos pueden ser exportados, ya sea a través de la barra de herramientas de análisis o directamente de la tabla completa de datos para un análisis en profundidad.\nFigura 1. Información general - Protocolo de ensayo Infinium.683/50683fig1highres.jpg "target =" _blank "> Haga clic aquí para ver la imagen más grande.\nFigura 2. Complete Chamber Hyb base y colchón, y tapa.  Haga clic aquí para ver la imagen más grande .\nFigura 3 Carga de un BeadChip -.. Dispense la muestra en los puertos de entrada  Haga clic aquí para ver más grande imagen.\nFigura 4 Extracción de la BeadChip Coverseal -.. Sujete el sello en la esquina y quitar con cuidado en diagonal  Haga clic aquí para ver la imagen más grande .\nFigura 5. Conjunto completo BeadChip Flow-through - El BeadChip se separa de un portaobjetos de vidrio con un espaciador y ató con broches.> Haga clic aquí para ver la imagen más grande.\nFigura 6. Exitosa BeadChip Scan - A) El BeadChip se escanea con tanto un láser rojo y verde, el software de escaneo muestra tanto de forma simultánea. Secciones pasan QC intensidad destacarán verde en la pantalla BeadChip a la izquierda. Secciones defecto QC intensidad se destacan rojo en la pantalla BeadChip. B) Una vez finalizado el escaneo, el software se superpondrá a las pantallas de color rojo y verde. Se muestra una imagen con zoom-in. El color y la intensidad de cada grano individual indica el alelo presente. Haga clic aquí para ver la imagen más grande .\nFigura 7. SNP NORMA-R vs Perfiles del clúster NORM-THETA - A) Un SNP es válido con tres grupos distintos que representan a AA, AB, BB y genotipos, de color rojo, púrpura y azul B) Una edición que requiere SNP.. El grupo medio, que debe ser homocigotos AB, se deja llamado-un. El cluster BB está equivocadamente llamado AB. C) Una de bajo rendimiento SNP. No hay genotipos se pueden obtener de esta parcela intensidad, ya que no existen grupos distintos. Haga clic aquí para ver la imagen más grande .\nAplicaciones de genotipado a gran escala se han utilizado para comprender mejor el mecanismo genético subyacente en muchas enfermedades humanas. El descubrimiento de cualquier variante significativa a través de un análisis de asociación amplia del genoma puede destacar una región candidata para el estudio adicional. Además, los datos genotipo es una buena herramienta para el control de calidad en los proyectos de secuenciación.\nPara maximizar el rendimiento de la muestra, múltiples placas de muestra se pueden amplificar y almacenados en sus estados fragmentados, resuspendido. Ocho placas pueden ser amplificados en un solo día, la combinación de las primeras 24 h del protocolo para varios lotes y proporcionar material suficiente para ~ 2-8 días de procesamiento de chip. Si las placas amplificados se almacenan de antemano, y si las nuevas muestras se hibridan a los chips inmediatamente después de la exploración comienza en la ejecución anterior, el procesamiento puede funcionar continuamente sin la necesidad de hacer una pausa para la preparación de la muestra adicional. Por lo tanto, aunque las muestras tendrán tres días para someterse a la completaensayo, los datos se pueden generar todos los días. Fichas Assuming24 se procesan cada día, una semana laboral de 5 días permite más de un 1.000 muestras de ADN para que se ejecuten en un chip de talón 12 muestras. Si cualquier paso o reactivo no ha logrado, sin embargo, varios lotes podrían estar en riesgo de malos resultados antes de cualquier corrección se puede aplicar. Los errores pueden pasar desapercibidos hasta que los arrays se escanean o analizados, por lo tanto, si el rendimiento se maximiza, cientos de muestras en diferentes etapas del protocolo pueden ya han recibido el mismo tratamiento defectuoso sobre el descubrimiento. Como reactivos y la pérdida de datos no se pueden recuperar, el usuario debe sopesar estos riesgos contra la necesidad de un flujo de trabajo acelerado.\nEl software de análisis de GenomeStudio es la primera oportunidad de medir realmente el éxito del proceso de determinación del genotipo. Si la norma-R vs parcelas intensidad Norma-Theta están debidamente agrupados, la tasa media de las llamadas (por ciento del total de SNPs escrito correctamente) de las muestras debe acercarse a 99%, aunque este valor varía slightly dependiendo del tipo de matriz. Los datos de cualquier muestra con una tarifa de llamadas inferiores a 85-90%, no es digno de confianza y deben desecharse. A efectos de control de calidad, los resultados deben ser comparados con ningún genotipos siempre que sea posible previamente conocidos. Si no existe tal información, intencional duplicación de la muestra es una herramienta útil en la verificación de la placa o de matriz colocaciones. Estos pares de duplicados se deben colocar en chips separados, placas, lotes o proyectos; sus genotipos comprueban tras generación. Si bien las limitaciones de CC específicos varían de acuerdo a la preferencia del investigador, las limitaciones SNP comunes se basan en el éxito llamada de ejemplo, Hardy-Weinberg o missingness entre casos y controles, mientras que las restricciones de muestra comunes se basan en las tarifas de llamadas, incoherencias mendelianos, o las referencias cruzadas del cromosoma X heterocigosidad a los datos clínicos de género .\nSi surge algún problema, el Dashboard controles, que se encuentra en la sala de análisis, puede ser sometido a laempresa con el fin de determinar la causa. Estos controles a menudo pueden reducir la cuestión a la etapa más probable o el fracaso de reactivos. Si alguno de los SNPs de interés se encuentran a través de un experimento de genotipado Infinium, sus parcelas intensidad debe ser una doble comprobación en GenomeStudio por errores de agrupación antes de que se realicen más investigaciones.\nUn fallido Infinium experimento de genotipado es probablemente debido a un error de procesamiento humano o ADN de entrada de baja calidad. Ejemplo de cuantificación debe ser exacta y precisa. Para obtener los mejores resultados, ningún reactivo añadido a cualquier muestra o chip deben ser dispensadas en el volumen establecido por el protocolo. Las pipetas se calibran correctamente. Los reactivos no deben ejecutarse después de la caducidad y no deben volver a congelarse una vez descongelado, salvo para el reactivo RA1. Con el fin de minimizar los posibles errores de tinción y extensión, la mezcla formamida / EDTA debe estar preparado fresco cada mes. Todos los -20 ° C, los reactivos deben almacenarse en sólo congeladores de descongelación manual. Todo el material de laboratorio utilizado en la víaaining, de extensión y de lavado de partes del protocolo se deben enjuagar bien con agua y detergente suave inmediatamente después de dejar de usar. Los depósitos en la cámara de humidificación hyb se deben lavar con un cepillo de tubo de ensayo y un detergente suave. Las placas de vidrio se deben lavar con lejía al 10%, según las instrucciones de sus manuales de usuario, una vez a la semana.\nLos autores de este artículo no tienen intereses financieros en competencia a revelar.\nLa financiación de este trabajo ha sido proporcionada por NIH P20 GM103456, NIH RC2 AR058959 y NIH R56 AI063274


Irazu - Tolerance For The Absurd [Stale] / Sonorama en Clubbingspain.com\nTítulo: Tolerance For The Absurd\nEscrito por Redwan Chakrani, publicado el 14 de abril de 2016\nA menudo esta web morada nos da alegrías en forma de estreno editorial. Alegrías como la de ver crecer, aprender y progresar a un forero de esta casa. Alegrías que terminan con la publicación de EPs y que empiezan siendo una carrera prometedora. Estamos hablando de Irazu conocido por la oldschool del foro como Vitalic89. Todo un benjamín que se estrena en formato 12”.\nPero vamos por partes, ya que este madrileño es un culo inquieto. Sus primeros pasos los realizó en las fiestas Lumen Et Umbra, de la mano de Svreca, mientras empieza a producir. Luego deja Madrid un tiempo para formar parte de la crew de Hypnotica Colectiva en Valencia, donde continua desarrollando sus sets, dando cabida a las bakaladas - y a mucha honra -demandadas en la capital del Turia, donde también mezcla el ambient más experimental, con el techno más oscuro y mental. De vuelta a Madrid, continua su labor de DJ y productor y le suma la de promotor, donde realiza fiestas en Siroco junto otros ilustres foreros, como Gray Fox y Tanaka, para más tarde unirse a la crew de Giradiscos, que trae semana tras semana el indie más arriesgado y transgresor del panorama nacional e internacional.\nY por fin llegamos al punto que nos concierne. Tras estrenarse con la publicación de Our Myths/Lainotu y a medias con Kastil, Irazu toma la alternativa en solitario, también en Stale, subsello de Soul Notes. Un EP bajo el titulo Tolerance For The Absurd que contiene 3 cortes originales más una remezcla de Acronym en su versión 12” y que además incluye una remezcla extra en la versión digital, de los catalanes No Parfum, residentes del Konvent.0 y gestores de la asociación artística y cultural de Cal Rosal.\nEl primer corte, The Situationist Was Not Alone, nos introduce en el EP constatando el buen nivel adquirido por el madrileño con un track muy en la onda de la nueva hornada sueca. Un corte profundo que nos sumerge en una maraña de drones, que parece querer llegar a las profundidades del asunto. Influencias claras del maestro Dozzy nos acaban de dejar claro por donde van los tiros.\nTolerance For The Absurd es el corte que sigue. Un track más trabajado en la rítmica y que bien nos podría situar en el paralelo Downwards en su vertiente más post-punk. Oscuridad, atmósferas densas y una regusto amargo de insomnio nos recorre el paladar.\nEn la otra cara tenemos la remezcla de Acronym del tema anterior. El sueco mantiene esa densidad abrasiva mientras dota de más dinamismo al tema, consiguiendo un autentico trallazo marca de la casa, es decir, Northern Electronics.\nA continuación tenemos Corrosive Suddenly Breath, donde Irazu vuelve a mostrar sus influencias. Esta vez de su adorado Mike Parker. Un bajo como una taladradora es el centro de un tema, que va llenándose de capas y capas de humo, barro y plomo.\nPor último, en la version digital No Parfum, llevan el tema Tolerance For The Absurd a su terreno. Una versión más pausada rasgada con un bajo poderoso, que da paso a unas guitarras que llenan el espectro de distorsión y reverb, creando una atmósfera de tensión. Una track muy personal que bien pudiera publicarse en Blackest Ever Black.\nUn disco notable para un estreno inmejorable, que abre la puerta, seguro, a futuras alegrías.


Fertiberia organiza la 4ª Jornada sobre Fertilización para una Agricultura Sostenible - Agricultura\nFertiberia organiza la 4ª Jornada sobre Fertilización para una Agricultura Sostenible\nLa agroenergética es una aportación novedosa del sector agrario cuyo objetivo es la producción de biocombustibles sólidos líquidos o gaseosos aplicables a la generación de electricidad, a usos térmicos o como materias primas para la industria química en las futuras biorrefinerías. Además de contribuir a mitigar la crisis energética y a la reducción de las emisiones de gases de efecto invernadero, esta nueva actividad agraria fomenta el desarrollo rural sostenible mediante la promoción de nuevas agroindustrias.\nLa fertilización de los cultivos energéticos es clave para lograr una abundante producción de biomasa, pero las peculiaridades de este tipo de cultivos, hace necesario un tratamiento especial de este tema, que en algunos aspectos difiere sensiblemente de la fertilización de los cultivos convencionales.\nLa Cátedra Fertiberia de Estudios Agroambientales de la UPM, consciente de la necesidad de impulsar el conocimiento sobre esta actividad emergente, ha querido promover estas Jornadas para tratar de dar a conocer a los agricultores, técnicos y estudiantes del sector agrícola las peculiaridades de la fertilización de los cultivos energéticos, de la mano de un grupo de profesionales expertos en este nuevo campo de la agronomía. Las sesiones están dirigidas a los profesionales del sector agrícola y a estudiantes de la Universidad Politécnica Madrid y tendrá lugar el 16 de Febrero de 2011 en la ETSI Agrónomos de Madrid.\nCNH Industrial, socio corporativo del ecosistema 5GOILab para el desarrollo de tecnologías 5G


Coronavirus de EE. UU .: 'Un desastre natural ... en los 50 estados' se está desarrollando justo cuando los viajeros se dispersan por todo el país después del Día de Acción de Gracias\nInicio /Top News/Coronavirus de EE. UU .: ‘Un desastre natural … en los 50 estados’ se está desarrollando justo cuando los viajeros se dispersan por todo el país después del Día de Acción de Gracias\nEs la tercera vez que más de 90,000 estadounidenses han sido hospitalizados con Covid-19; la primera fue el jueves con 90,481 antes de una caída a 89,834 el viernes que podría atribuirse a inconsistencias en los informes sobre el Día de Acción de Gracias.\n“No hay forma de que los hospitales puedan estar completamente preparados para lo que estamos enfrentando actualmente”, dijo la doctora Megan Ranney, médica de emergencias.\n“Esto es como un desastre natural que ocurre en los 50 estados al mismo tiempo. No hay camas adecuadas. No hay personal adecuado. Y debido a la falta de preparación nacional, todavía no hay suministros adecuados”, dijo Ranney, un Analista médico de CNN y director del Centro Brown-Lifespan para la salud digital en la Universidad de Brown.\n“Aquí en Rhode Island, actualmente estamos planeando abrir nuestro hospital de campaña el martes porque nuestros hospitales están llenos de pacientes enfermos de Covid-19. Pero no todos los estados tienen esa opción”, dijo.\n“E incluso si abre un hospital de campaña, si tiene cientos de empleados que están enfermos, que es lo que enfrentan actualmente muchos estados en todo el país, si no tiene enfermeras, médicos y técnicos respiratorios, incluso un campo hospital no lo va a salvar. Nuestro sistema de atención médica está literalmente en un punto de quiebre en este momento, gracias a Covid-19 “.\nLos nuevos casos ahora significan nuevas hospitalizaciones para Navidad\nSe espera que el domingo sea el el día de viaje aéreo más concurrido de toda la pandemia a pesar de Los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades recomendaron que los estadounidenses no viajen para Acción de Gracias.\nAproximadamente 6 millones de viajeros pasaron por seguridad en los aeropuertos de EE. UU. después de la advertencia de viaje de los CDC en la semana previa al Día de Acción de Gracias.\nPero pasarán semanas antes de que alguien sepa qué importancia tienen las reuniones de Acción de Gracias y los viajes en las nuevas hospitalizaciones y muertes.\n“Cuando miras a las personas que están hospitalizadas hoy, se infectaron hace dos semanas, tal vez más”, dijo el Dr. Jonathan Reiner, profesor de medicina en la Universidad George Washington. “Y luego, por lo general, la gente tarda una semana más en sucumbir a la enfermedad”.\nPor lo tanto, las infecciones detectadas el Día de Acción de Gracias “aparecerán en tres semanas y aparecerán en muertes durante Navidad y Año Nuevo y se propagarán en todos los estados”, dijo Ranney.\nLas estadísticas informadas en los días posteriores a las vacaciones podrían mostrar una caída relativa en los casos de Covid-19, seguida de un aumento debido a un retraso en los informes de las agencias gubernamentales durante el fin de semana largo.\nY dado el largo tiempo de incubación del coronavirus y cuánto tarda una persona infectada en dar positivo, es poco probable que los casos relacionados con el Día de Acción de Gracias aparezcan en los datos públicos hasta la primera semana completa de diciembre como muy pronto.\nIncluso antes de eso, Covid-19 está matando a estadounidenses a un ritmo asombroso. Solo el sábado se reportaron al menos 1,189 nuevas muertes, según la Universidad Johns Hopkins.\nMas que 266.000 personas han muerto en EE. UU. de Covid-19 desde que comenzó la pandemia.\nBirx: ‘Si eres joven y reuniste’, hazte la prueba\nLos expertos en salud dicen que cualquier persona que se reúna con personas fuera de su hogar debe tomar precauciones serias en los próximos días, especialmente los jóvenes que pueden estar cargando y propagación del coronavirus sin ningún síntoma.\n“Si eres joven y te has reunido, debes hacerte la prueba entre cinco y diez días después”, dijo la Dra. Deborah Birx en “Face the Nation” de CBS el domingo. “Debes asumir que estás infectado y no acercarte a tus abuelos, tías y otras personas sin una máscara”.\nBirx, miembro del grupo de trabajo sobre el coronavirus de la Casa Blanca, recomendó que las personas mayores de 65 años se hagan la prueba de inmediato si desarrollan algún síntoma.\n“Si tiene más de 65 años o tiene comorbilidades y se reunió en Acción de Gracias, si desarrolla algún síntoma, debe hacerse la prueba de inmediato”, dijo.\nEl médico de urgencias quiere que la gente siga las órdenes de quedarse en casa\nMuchos hospitales están al borde de exceder su capacidad, amenazando la atención reducida para todos, incluso aquellos sin coronavirus. Entonces, los funcionarios de todo el país han restablecido o revocado las restricciones. En el condado de Los Ángeles, el lunes entra en vigencia una orden de permanencia en casa de tres semanas.\n“Lo que deseo es que la gente siga esas órdenes de quedarse en casa”, dijo Ranney, médico de medicina de emergencia en Rhode Island.\n“No puedo decirte cuántos pacientes cuido y que me dicen: ‘Bueno, acabo de ir a un restaurante interior’. O, “Simplemente fui a una fiesta con algunos amigos. En realidad, no pensé que iba a atrapar a Covid”. Por eso, esos pedidos para quedarse en casa son fundamentales “.\nLa orden de quedarse en casa del condado de Los Ángeles prohíbe todas las reuniones públicas y privadas con personas que no pertenezcan a un mismo hogar.\n“Se aconseja a los residentes que se queden en casa tanto como sea posible y que siempre se cubran la cara con la nariz y la boca cuando estén fuera de su hogar y alrededor de otras personas”, dijo el departamento de salud pública del condado.\nLa orden está en vigor hasta el 20 de diciembre. No se aplica a “servicios basados en la fe y protestas, que son derechos protegidos constitucionalmente”, dijo el departamento de salud.\nLos negocios minoristas esenciales se limitarán a una ocupación del 35%, mientras que el límite de ocupación para las operaciones minoristas no esenciales, los servicios de cuidado personal y las bibliotecas será del 20%, dijo el condado.\n“Incluso si no se siente enfermo, el simple hecho de reunirse con personas fuera de su hogar pone a todos en riesgo”, dijo la directora de salud del condado, Barbara Ferrer.\nRanney dijo que es posible que algunas escuelas y lugares de trabajo puedan operar de manera segura si se cumplen las precauciones.\n“Creo que es muy importante que mantenga abiertos los lugares de trabajo y las escuelas seguras”, dijo. “Sabemos que en esos entornos estructurados, donde las personas están enmascaradas, manteniendo la distancia, con una ventilación adecuada, la propagación del virus es bastante baja en esos entornos”, dijo.\n“Tengo la esperanza de que ese tipo de orden sea efectiva. Y hemos visto en Francia que funciona”, dijo Ranney. “Seguro que espero que sea (efectivo) en Los Ángeles, y espero que el resto del país pueda hacer lo mismo. Porque tenemos que hacer algo, o, de nuevo, este virus simplemente seguirá creciendo fuera de controlar.”\nCalifornia estableció un nuevo récord de pandemia el domingo con 7,415 pacientes de Covid en sus hospitales, según datos proporcionados por el Departamento de Salud de California.\nEso eclipsa el récord anterior de hospitalizaciones de California de 7.170 personas el 21 de julio.\nMelissa Alonso, Leanna Faulk, Chuck Johnston y Alta Spells de CNN contribuyeron a este informe.


Murió el bombero que continuaba internado y ya son diez las víctimas – eju.tv\nMurió el bombero que continuaba internado y ya son diez las víctimas\n18/02/2014 - 08:48 Seguridad\nPor Florencia Coplan – Pablo Novillo\nAl dolor, más dolor. Compañeros de Facundo, ayer en el cuartel donde velaban sus restos. El día del incendio, los bomberos de Vuelta de Rocha habían perdido a Sebastián Campos. / DANIEL DELDMAN\nCasi dos semanas después, la tragedia de Barracas sigue generando dolor y bronca. Facundo Ambrosi, bombero voluntario de 25 años, murió ayer en el hospital Argerich, donde estaba internado desde el día del incendio. Se convirtió así en la décima víctima fatal que produjo el derrumbe de la pared en el galpón de la empresa Iron Mountain.\nLa salud de Ambrosi venía muy delicada desde hacía varios días. Había ingresado al Argerich con fracturas en ambas piernas, el brazo derecho, la cadera y dos costillas. Lo operaron de urgencia y lo mantuvieron en terapia intensiva, pero con el correr de los días su cuadro se agravó con una complicación pulmonar y una inflamación cerebral.\nAmbrosi había pasado la mitad de su vida en el cuartel de Vuelta de Rocha. A los 12 años ingresó de la mano de su padre, Ricardo, quien comandó el cuartel hasta que falleció, el año pasado.\nA los 18 años comenzó a combatir incendios y con el paso de los años llegó a ser 1° oficial superior y 2° jefe de cuerpo. Su mamá Nora Fernández y su hermano Rodrigo también son bomberos.\nAsí como sus padres le pasaron la pasión por el oficio, Facundo transmitió esa vocación a su primer hijo, Abel, que tuvo con su primera mujer y que con apenas seis años ya pasaba todo el día en el cuartel con su padre. “Si le preguntás te dice que de grande quiere ser bombero”, cuentan en el cuartel. Ambrosi tenía otros dos hijos, una nena de dos años y un recién nacido, de su segunda pareja, Daiana.\nPese a que sólo tenía 25 años, mantenía a su familia con trabajos ocasionales en comedores y museos, y también era percusionista de la murga “Bombo, Platillo y Elegancia”, de La Boca. Anoche lo velaban en el cuartel, su segundo hogar. “Tenía una casa a una cuadra, pero igual vivía en el cuartel de bomberos, la vida y pasión de Facu era eso”, contó Juan Meszaros, 3° oficial de los voluntarios de Vuelta de Rocha.\nAyer por la tarde, en el cuartel todas las miradas eran silenciosas y enrojecidas por el llanto de amigos y familiares, que se unían en abrazos. Allí estuvieron la mujer, que se acercó al lugar llevando puesta una remera con la foto de su pareja y la frase de “Fuerza Facu”, la madre, el hermano y allegados de Facundo que no se habían separado de su lado desde que ingresó de urgencia al Argerich. “Era alegre, divertido, solidario con sus compañeros, en cada incendio se preocupaba por que todos estuvieran a salvo ”, agregó su amigo y colega, Meszaros.\nEl director del cuartel de bomberos, Antonio Sette, se acercó también al lugar y contó que Facundo, al igual que la mayoría de los bomberos de Vuelta de Rocha, es donante de órganos, “lo que resalta su vocación solidaria”, remarcó. Todos sus compañeros y amigos del cuartel coinciden en que Ambrosi era “una gran persona”, “un amigo del barrio ” y “divertido y solidario”.\nPara los bomberos de Vuelta de Rocha, el dolor se reavivó de la peor manera. El día de la tragedia ya habían perdido a Sebastián Campos, de 35 años y otro de los integrantes del cuartel. “Seba y Facu, además de ser muy amigos, eran la alegría de Vuelta de Rocha, cuando llegabas siempre alguno contaba un chiste. No me imagino el cuartel sin ellos, va a ser muy duro”, contó Meszaros y agregó: “A quien le preguntes, todos te vamos a decir que esto fue y es una gran hermandad. Acá somos más que amigos, somos hermanos”. También pidió “que las muertes no sean en vano. Lo único que espero luego de esta tragedia es que el Gobierno cumpla por completo la ley N° 1.240 de bomberos voluntarios”. Esta ley obliga al Gobierno de la Ciudad a incluir a todos los bomberos voluntarios a su obra social, y esto no sucede”.\nAdemás, esta no es la primera tragedia entre el cuerpo de bomberos voluntarios de Vuelta de Rocha. En noviembre del 2008 un incendio en un depósito de neumáticos en La Boca les costó la vida a dos bomberos: uno de ellos murió en el acto y el otro permaneció un mes internado, pero no pudo recuperarse.\nEn tanto, el cuerpo de Bomberos de la Policía Federal perdió a seis integrantes. El comisario inspector Leonardo Day (55 años), Eduardo Conesa (47), Carlos Veliz (33), Maximiliano Martínez (32), Juan Matías Monticheli (26) y Anahí Garnica, de 29 años y quien fuera la primera mujer bombero de la Federal. Además, fallecieron dos rescatistas de Defensa Civil de la Ciudad, Pedro Baricola y José Luis Méndez.


Definición de paquetería - Qué es, Significado y Concepto\nDefinición de paquetería\nLa noción de paquetería se utiliza para aludir al género comercial que se vende o almacena en paquetes. Un paquete, en tanto, es un bulto o embalaje bien preparado de uno o varios elementos.\nPor lo general la idea de paquete se emplea con referencia a la caja utilizada para el transporte y/o la entrega de un producto. La paquetería, en este marco, es el servicio que permite dicho traslado de paquetes.\nUn mensajero entregando un paquete a domicilio\nTanto en Argentina como en Uruguay, por otra parte, se habla de paquetería para aludir a la compostura en la ambientación, la decoración o la vestimenta. Por ejemplo: “Mira cómo está vestido tu padrino, ¡qué paquetería!”, “Me sorprendió la paquetería del restaurante, no esperaba que fuera tan elegante”, “La paquetería no es lo mío, no me gusta la moda”.\nOtra acepción que se usa en estos mismos países hace referencia a los adornos o la ropa que se pone un individuo cuando desea lucir su aspecto, por ejemplo, para ir a una fiesta. Se trata de un significado muy similar al anterior, aunque en este caso el enfoque está puesto en los objetos usados y no en el resultado. Si quisiéramos reformular la primera situación hipotética del párrafo anterior, podríamos decir «Tu padrino ha sacado toda su paquetería para esta fiesta».\nY esto nos lleva a relacionar estos dos usos del término paquetería con dos de los significados que el diccionario le adjudica a paquete: «dicho de alguien: que exhibe una notable dedicación en su comportamiento, su forma de vestir o al arreglarse»; «dicho de una casa, una celebración o un artículo de indumentaria: elaborada de forma elegante y con dedicación». Dado que aquí la palabra actúa como un adjetivo, y no un sustantivo, debemos alterar su género para que concuerde con el sustantivo al que modifica: «un traje paquete», «una casa paqueta».\nUn servicio de paquetería, de este modo, contempla toda la logística y los recursos que se necesitan para que una persona pueda despachar un paquete y lograr que el destinatario de este paquete lo reciba. Esta prestación la realizan las empresas de mensajería o correo.\nSupongamos que un hombre quiere enviarle un libro de regalo a su hijo, que vive en una ciudad a 500 kilómetros de distancia. El padre se acerca con el libro a la oficina de correo, adquiere una caja para armar el paquete y completa la etiqueta con los datos de su descendiente (nombre, dirección postal, etc.). Así, la compañía de correo que brinda el servicio de paquetería se encarga de llevar el paquete al depósito correspondiente hasta proceder al traslado de la caja y a su posterior entrega al destinatario.\nEn sus comienzos, los servicios de paquetería eran muy simples: el cliente debía dirigirse a la oficina correspondiente con el paquete que deseaba enviar y realizar allí el trámite (incluyendo el pago) para dar comienzo al envío. Pero en los últimos tiempos, sus características han cambiado considerablemente, incluyendo cada vez más ventajas.\nLos servicios de paquetería también ofrecen recogida a domicilio\nUno de los beneficios que ofrecen casi todas las empresas de paquetería de la actualidad es la recogida de los paquetes a domicilio. Eso significa que podemos completar todo el proceso sin movernos de nuestro hogar: simplemente debemos indicar un día y una hora para que el mensajero venga a recoger el paquete, y el resto es esperar a que el destinatario lo reciba.\nEl pago contra reembolso es otro de los servicios que se pueden escoger como complemento al envío de productos. Esto resulta especialmente útil en una compra por medio de Internet, ya que brinda una mayor seguridad al destinatario, porque no se ve obligado a pagar hasta que no se complete el proceso.\nDefinicion.de: Definición de paquetería (https://definicion.de/paqueteria/)


Foco en estandarizar para optimizar la producción gráfica\n21 | Septiembre | 2016\n¿Está capacitado un alumno de tercer año de Producción Gráfica dar recetas de Estandarización? Ricardo Ekardt demuestra que sí y lo explica y fundamenta desde los conocimientos adquiridos en GUTENBERG y la experiencia ganada en la práctica.\nEstándar, otra palabra maldita, que cae dentro de los cánones del NoPoder.\nPensar que establecer Estándares es imposible forma parte de los mitos que nos creamos cuando tratamos de racionalizar nuestras tareas, cuando tratamos de pasar en blanco las cosas que hacemos diariamente, ponemos todas las variables en la mesa y nos abrumamos por la cantidad de situaciones que resultan de su combinación.\nEsto nos da la sensación que nada puede repetirse, que estamos condenados a improvisar siempre una nueva respuesta ante cada situación que se nos presente, sin notar que cotidianamente seguimos normas, que estuvieron siempre ahí y no tuvimos que analizarlas, sino simplemente adoptarlas como algo natural y evolucionar alrededor de ellas.\nEstablecer un Estándar implica conocer las variables con las que se trabaja, cruzarlas y poder llegar a un resultado por cada combinación de estas, obviamente a mayor cantidad de variables tendremos mayor cantidad de resultados, con mayor nivel de exactitud, lo que es igual a mayor nivel de proyección de la tarea a realizar, ya sea en tiempo, en costos, en insumos requeridos, etc.\nResumiéndolo, a mayor nivel de Estandarización, más Exactitud en la planificación.\nAhora bien, ¿Qué quiero decir con cruzar variables?\nPor ejemplo, cuanto tiempo nos tomará realizar un trabajo en la máquina de impresión.\nPodemos establecer, de acuerdo al cumplimiento de distintas condiciones, un resultado por cada una.\n10.000 en adelante\n217 a 300\nPodemos ver entonces como varía la velocidad de impresión a medida que cruzamos las variables de Material, Gramaje, Cantidad de Colores y Cantidad de Pasadas; esto es solo un ejemplo, bastante acotado, de una de tantas situaciones complejas que se nos presentan día a día, solo hay que unir los datos sueltos para poder obtener un resultado esperado.\nQuizás pensar en desarrollar Estándares sí sea un trabajo insalubre si se lo ve como el acto de burocratizar tareas que normalmente fluyen, justamente la idea es totalmente la opuesta, la idea de trabajar de manera Estandarizada es garantizar que las tareas fluyan.\nLos recorridos innecesarios no solo tienen un costo monetario sino que también frustran. Es frustrante tener que repetir un trabajo, o reprogramar fechas de entrega, si la posibilidad de reducir la incertidumbre sobre las tareas que realizamos está a nuestro alcance, empecemos de a poco, con las más simples en un principio para entender el cómo.\nSeparar la tarea en estaciones, ver qué pasos están de más o bien qué falta realizar, qué variables las afectan, registrar cuánto tomaba una tarea antes del cambio de una variable y si mejoró o empeoró al realizar los ajustes pensados.\nEl análisis de los resultados es, quizás, la parte más importante de todo este trabajo; poder visualizar el tiempo optimizado, encontrar que lo que se invirtió en análisis de mejora generó un resultado positivo, conforman la base motivadora para continuar con este proceso ya que, por lo general, uno cree en lo que ve.


"Un mundo multipolar es uno que requiere relaciones abiertas y generosas" | Sintesis de Prensa Internacional\nAdemás del caso de Uruguay, el 19 de febrero, por primera vez, un vuelo de la línea brasileña TAM salió de las islas, aterrizó en la provincia argentina de Córdoba y luego siguió su viaje hasta San Pablo, Brasil. ¿Qué va a hacer Argentina al respecto?\nSon dos temas distintos. El segundo tuvo que ver con lo que fue llamado el comunicado conjunto Foradori-Duncan, que nosotros no lo consideramos un acuerdo porque los acuerdos tienen que pasar por el Congreso de la Nación. Lo que hizo el Gobierno de Macri fue escamotearle al Congreso la posibilidad de acordar o no sobre este tema. Seguramente el Congreso lo hubiera rechazado, entonces hicieron este simulacro que llamaron comunicado conjunto, y por lo tanto no tiene la relevancia de un acuerdo.\nLo que tienen en común es que son países hermanos, como Brasil y Uruguay, que de alguna manera está colaborando con los ocupantes de las islas Malvinas.\nEl Gobierno de Macri pidió a Brasil que una compañía aérea vaya a Malvinas, así que no se puede tomar como algo que haya hecho Brasil a espaldas de Argentina. Ese es un caso. En el otro, hay que decir que Buenos Aires permite que los vuelos que tienen carácter humanitario puedan abastecerse en países vecinos. El embajador en Uruguay, Alberto Iribarne, llamó la atención sobre estos 13 vuelos británicos que fueron informados por Uruguay como "humanitarios", pero que Argentina quiere investigar para ver si son realmente eso o son vuelos militares.\n¿El Brexit puede modificar la situación?\nEl Brexit está en proceso. Hay todo un año hasta que se fijen las nuevas normas de la relación entre la UE y el Reino Unido. De cualquier manera, a uno le parece bastante claro que el compromiso de los países europeos en su apoyo al Reino Unido se hace más tenue. La UE reconocía a Malvinas como un territorio de ultramar del Reino Unido.\nLa semana pasada hubo un hecho muy importante para los argentinos. El embajador ruso en Argentina, Dmitri Feoktistov, afirmó el jueves 13 de febrero, en Tierra del Fuego, que "la hora del colonialismo pasó y los ingleses deben devolver las Islas Malvinas a la Argentina". ¿Cómo interpreta el Gobierno estas declaraciones?\nArgentina respeta al embajador, que reafirma una posición tradicional de Rusia que era la misma de cuando era la Unión Soviética. Moscú siempre apoyó a la Argentina en su reclamo de soberanía y por el diálogo. Lo mismo hace China y todos los países del mundo, menos el Reino Unido. La resolución 2065, donde la ONU reconoce el diferendo territorial, no tuvo ningún voto en contra. Ni siquiera el Reino Unido votó en contra, se abstuvo. China y Rusia son dos miembros permanentes del Consejo de Seguridad.\nHace muy poco estuvo en Etiopía. ¿Qué frutos trajo de esa gira?\nFuimos invitados especialmente para la reunión de la Unión Africana en Addis Abeba hace dos semanas. Hemos tenido oportunidad de participar como observadores y estar con más de 20 cancilleres y jefes de Estado de los 54 países que forman parte de la Unión Africana. Estuvieron además el primer ministro canadiense Justin Trudeau y su par de Noruega. El secretario general de la ONU, Antonio Guterres, y Michelle Bachelet.\nEn los últimos cuatro años Argentina bajó la intensidad del trabajo por Malvinas. El mes próximo vamos a estar en la reunión del G77 + China en Kampala, Uganda. Vamos a presentar una declaración propia por Malvinas que esperamos sea acompañada.\nUsted ocupó esta secretaría hasta el fin de la gestión de Cristina Fernández de Kirchner y, ahora, cuatro años después la retoma. ¿Cómo la encontró?\nNo la encontramos. Una de las primeras medidas que tomó el expresidente Macri fue degradar la Secretaría. En su discurso inaugural, fue el primer presidente en no hablar sobre Malvinas. No lo mencionó como una de las prioridades de Argentina. Hubo una baja en la intensidad del reclamo. Esta Secretaría tiene además el tema de la Antártida y del Atlántico Sur. La nueva Plataforma Continental Argentina que se elevó a la ONU muestra que es el doble de la parte continental. Tenemos una riqueza enorme.\nEn el sector antártico tenemos litigios con una potencia como el Reino Unido y con Chile. ¿Cómo se piensa abordar?\nEn su artículo IV, el Tratado Antártico resguarda los reclamos de soberanía. Pero acto seguido, cada país hace su propio reclamo. Después habla solo la Antártida como un espacio de trabajo científico. A futuro tenemos una discusión de soberanía. Argentina, debido a sus leyes, es dueña de una parte de la Antártida, pero en lo cotidiano es un trabajo conjunto entre científicos de distintos países que generan muchísimo conocimiento que luego sirve para el desarrollo de medicamentos, de la investigación geológica, paleontológica, de biodiversidad, porque la Antártida es un continente que tiene condiciones únicas.\nEstamos participando ahora en investigaciones espaciales en la Antártida, porque en situaciones muy adversas, uno no encuentra espacio mejor que este para estudiarlas sobre el cuerpo humano o sobre alimentos.\nHace pocos días hizo 18 grados en la Antártida, algo inusual. Uno piensa en una posible catástrofe ecológica. ¿Están trabajando en eso?\nSí, Argentina es pionera en las investigaciones ambientales. Tenemos la Base Carlini dedicada a ese tipo de investigación. Además Argentina es vicepresidenta de la comisión que toma el tema ambiental a nivel mundial en la Antártida y juega un papel muy importante.\nQuiero terminar con una buena noticia: un Juzgado de Río Grande dictó el procesamiento sin prisión preventiva de cuatro militares imputados por torturar a los soldados bajo sus órdenes durante la guerra de las Malvinas.\nSí. Es muy importante. La Corte Suprema había desestimado este tipo de hechos y los soldados tuvieron que ir a la Corte Interamericana de DDHH a denunciar esta situación que quedaba impune. Fue una violación a los derechos humanos practicada por el Estado y como tal no prescribe. Hay muchos testimonios en ese sentido. Es una acción de la justicia que puede generar que se conozca la verdad y se castigue a los culpables.


Comprar Confesiones de un anciano mientras le juzgan en Miami de Iván Cerdán Bermúdez en LibrosCC - Comprar Libro\nIván Cerdán Bermúdez (Autor)\nConfesiones de un anciano mientras le juzgan en Miami es más que una confesión, que un juicio y que sea en Miami. Porque la acción puede ocurrir en cualquier lugar. En la literatura de Iván Cerdán todo es arriesgado, pulveriza los géneros, los mueve y los retuerce, como le retuerce al lector empeñado en que la convulsión de la realidad, el interior caos de cada uno, las palabras que son las sombras que aletean en cada página se transformen o metamorfoseen como estelas extravagantes – qué personajes soñados y vividos pueblan los espacios invisibles de esta obra - ociosas y atormentadas.\nIván Cerdán Bermúdez nació en Madrid en 1976. Licenciado en Teoría de la Literatura y Derecho. Sus pasos en la escritura han seguido siempre varias direcciones. Con su obra Elsenor ganó el premio a mejor guion de la Comunidad de Madrid. A partir de ese instante, se aventuró del mismo modo tanto en el cine, la narrativa o el teatro. Ha realizado varios cortometrajes que han sido premiados tanto a nivel nacional como internacional. Ha colaborado como crítico en el ABC y ABCD de las letras. En la actualidad pública críticas cinematográficas en la Revista de Occidente. Ha impartido talleres de guión cinematográfico y documental y ha formado parte del elenco del Taller de Escritura de la UCM. Ha publicado los libros: Turbio, Desgaste, Raíles y Fotografías de un hombre triste. Ha puesto en escena las obras: El adiós de Fernando el Católico y Los pijos acabaron con el periodismo. Ha dirigido un largometraje de ficción: Donde nos toca estar y co-dirigido el largo documental: Con la cuchara en el bolsillo. Actualmente está inmerso en la preproducción del largometraje Desidia y la producción del documental Libreros en librerías. Confesiones de un anciano mientras le juzgan en Miami fue finalista del Premio Internacional Irreverente de novela erótica.


Troglio: “No supimos liquidar a Boca” | Que Pasa Web - Diario de la Zona Norte y Oeste del conurbano\nInicio Sólo Tigre Noticias del Matador Troglio: “No supimos liquidar a Boca”\n¿Qué opinas de este empate, te pareció justo?\nMe parece otro empate en el cual no supimos cerrar el partido, le perdonamos la vida a Boca y a estos equipos no hay que perdonarlos y lo hicimos. En un momento hay que liquidarlo y lo dejamos vivos hasta que pasó lo que preveíamos. Igualmente me voy muy conforme con mis jugadores y el rendimiento de equipo.\n¿Es algo psicológico o físico que en tres partidos les empaten faltando pocos minutos?\nNo, físico no es porque han corrido hasta el último minuto Y psicológico tampoco porque si no hubiera entrado la de Insaurralde hubieran dicho que fue un gran partido, que se mataron, pero lamentablemente el gol cambia las opiniones.\n¿Tenés a misma espalda que en Gimnasia? ¿Con el resultado de ayer creció o se achicó esa espalda?\nLógicamente no tengo la misma espalda que en Gimnasia porque allá me abalan muchísimos años que en Tigre no los tengo. Sin embargo acá deje una muy buena impresión el campeonato pasado pero ahora no lo estoy demostrando y esto es domingo a domingo. Admito que el calendario fue durísimo para empezar porque en el inicio del campeonato es cuando un equipo se acomoda, pero no es excusa, en todos los partidos vi buenas cosas. Pero hay que empezar a ganar.\nYo ahora entro al vestuario y los jugadores están súper calientes al igual que el partido contra Independiente y esto es más que positivo porque significa que los jugadores sabían que le podían ganar a dos equipos de primer nivel. Como dije anteriormente, todos los partidos vi muchísimas cosas buenas y ahora para demostrarlo hay que ganar.\nArtículo anteriorAgenda Cultural de Zona Norte: del lunes 3 al domingo 9 de octubre\nArtículo siguienteEl Festival de Cine Próximo llegó a San Fernando


Criptoday | Información transparente descentralizada OMS, IBM, Oracle y Microsoft lanzan Centro Blockchain para combatir el virus COVID-19 - Criptoday\nEl proyecto se llama MiPasa, y recopilará y verificará datos sobre la pandemia. Según informó Jonathan Levi, CEO de Hacera, la compañía que construyó la plataforma. Se espera que MiPasa, construido en Hyperledger Fabric, evolucione a medida que se agregue una gama de herramientas de análisis de datos, seguido de pruebas de datos y otra información para ayudar con la detección precisa de los puntos críticos de infección con COVID-19.\n«Sentimos que no hay suficiente información para tomar decisiones informadas. ¿Cómo podemos ayudar a todas las personas que desean obtener acceso a los datos, analizarlos y proporcionar información?»\n«Comenzamos con una lluvia de ideas sobre cómo recopilar, proporcionar y utilizar información verificada sobre el virus», dijo Singh. «No es que estuviéramos tratando de forzar blockchain en esta solución, pero pensamos que necesitamos replicar datos, necesitamos tener fuentes confiables, debemos asegurarnos de que no puedan ser manipulados».\nEn la actualidad un grupo multidisciplinario de profesionales de la salud, desarrolladores de software y aplicaciones y expertos en privacidad ya está apoyando el proyecto. La plataforma descentralizada Unbounded Network es responsable del proceso de incorporación.\nEl CTO de IBM Blockchain, Gari Singh, afirmó que todos con los que había hablado estaban de acuerdo en que era importante «poner en marcha un consorcio» lo antes posible.\nblockchain Cadena de bloques Covid-19 Hacera microsoft MiPasa OMS


Luis Enrique Dussán Archives » Page 4 of 8 » N-24 - Noticias 24 Horas\nInicio / Tag Archives: Luis Enrique Dussán (página 4)\nRutas de cicloturismo unen al Huila con cinco departamentos del país\n9 febrero, 2021\tLo que está pasando\nEl proyecto es liderado por la RAP-E, Región Central y cuenta con todo el respaldo del gobernador del Huila Luis Enrique Dussán López, quien reconoce el potencial inmenso que tiene la región para los amantes del ciclismo. En mes y medio el Huila tendría su primera ruta de cicloturismo, con …\nGobernación del Huila firmó convenio para vivienda nueva urbana en nueve municipios\n8 febrero, 2021\tHuila\nLos municipios de Elías, Tarqui, Tello, Íquira, Gigante, San Agustín, Tesalia, Santa María y Teruel, serán beneficiados con la construcción de vivienda urbana a través de FONVIHUILA y de la mano de CAMACOL. En cabeza del gobernador del Huila, Luis Enrique Dussán López, se firmó un convenio con 9 alcaldes …\nGobernador del Huila sigue dispuesto para ayudar en la reconstrucción del Estadio de Neiva\n5 febrero, 2021\tNeiva\nEl mandatario de los huilenses , Luis Enrique Dussán López, manifestó su disposición para coadyuvar con el caso estadio de Neiva. Igualmente, expresó que el gobierno departamental está sujeto a decisiones de orden municipal. Ante el panorama del estadio ‘Guillermo Plazas Alcid’ de Neiva, el gobernador del Huila, Luis Enrique …\n5 febrero, 2021\tPaz\nEl trabajo avanza en coordinación con la Agencia de la Renovación del Territorio y los secretarios de Gobierno, Educación, Salud, Infraestructura, Agricultura, el grupo de Vivienda y PDA del Huila. El asesor de Paz de la Gobernación del Huila, Diego Tello, indicó que en una mesa técnica liderada por la …\nPescadores artesanales de Yaguará recibieron canoas y kits para pesca\n4 febrero, 2021\tLo que está pasando\n72 canoas y kits que contienen elementos para la pesca artesanal fueron entregados por la Gobernación del Huila y la Alcaldía de Yaguará en la capital turística y ganadera del departamento. “Éstas canoas llegan en el momento justo porque las estábamos necesitando mucho y más en estos tiempos de pandemia …\nEn medio de la pandemia también se lideran obras para el Huila\n4 febrero, 2021\tHuila\nLa construcción de un parque temático, pavimentación de vías, placa huellas para el campo, baterías sanitarias y desarrollo agropecuario, son entre otros, los proyectos que lidera para su ejecución el mandatario de los huilenses. El gobernador del Huila Luis Enrique Dussán López, dio a conocer las obras y proyectos que …\nEn el Huila preparan nuevas restricciones para afrontar el Covid-19\n2 febrero, 2021\tHuila\nEl gobernador del Huila, Luis Enrique Dussán López, anunció que gracias a las restricciones tomadas, se han reducido los niveles de contagio y la ocupación de Unidades de Cuidados Intensivos; por tal motivo en consulta con el gobierno Nacional se preparan nuevas medidas para modificar horarios del comercio y restringir …\nEn el Huila destinarán recursos del impuesto al consumo del cigarrillo al deporte\n1 febrero, 2021\tHuila\nLa Gobernación del Huila, distribuirá entre los municipios huilenses $573 millones correspondiente al 30% del total de los valores recibidos del departamento durante la vigencia 2020 por el impuesto al consumo de tabaco. Para la distribución de estos recursos, se tendrá en cuenta lo establecido en la Ley 1289 de …\nEl Huila está listo para jornadas de vacunación contra el Covid-19\n29 enero, 2021\tHuila\nEl departamento cuenta con una red de IPS vacunadoras de orden público y privado con idoneidad y experiencia en procesos de inmunización. “Estamos listos para la hora cero” dijo el Gobernador del Huila Luis Enrique Dussán López. Con la expectativa de lo que será la puesta en marcha del Plan …


América Latina se enfrenta al desafío de la globalización\nMonthly Review, diciembre 2014\n(Pese a sus achaques en el último tiempo, el viejo maestro nos manda un regalito de Navidad que no es despreciar)\nEl continente americano fue la primera región en ser integrada al capitalismo global recién nacido y para conformarse en una periferia de los centros atlánticas europeas, aún en fase de formación. Esa formación era un proceso de brutalidad sin precedentes. Los ingleses, tal como lo hicieron en Australia y Nueva Zelanda, procedieron de inmediato al genocidio total de la población indígena. Los españoles los redujeron a un estado de esclavitud virtual que, a pesar de sus efectos demográficos catastróficas, no borraron la presencia india. Ambos, junto con los portugueses y los franceses, terminaron con la conformación del continente con el comercio de esclavos. La explotación de esta primera periferia del capitalismo histórico se basa en la creación de un sistema de producción agrícola para la exportación (azúcar, algodón) y productos minerales.\nLa independencia, cuando se ganó por las clases dominantes locales blancos, no cambió esa configuración. América Latina (con la actualidad un mero 8,4 por ciento de la población mundial) y África tienen pequeñas poblaciones, en relación con este, sur y sureste de Asia, pero están dotados de una fabulosa riqueza de recursos naturales (en yacimientos minerales y tierra potencialmente cultivable). Por esa razón esas regiones fueron condenados a seguir siendo objeto de pillaje sistemático a gran escala, exclusivamente con fines de acumulación de capital en el dominantes centros de Europa y Estados Unidos.\nPor supuesto, las formas políticas y sociales establecidos a tal fin han evolucionado a lo largo de los siglos; pero en cada etapa, hasta nuestros días, sus adaptaciones siempre sirven a ese propósito. En el siglo XIX, la integración de América Latina en el sistema capitalista mundial se basa en parte en la explotación de sus campesinos transformados en asalariados rurales. Fueron subyugados por un régimen de brutalidad perpetrado directamente por los mayores propietarios de tierras agrarias, así como su explotación en las minas por las empresas americanas y europeas más importantes mineras. El sistema de Porfirio Díaz, en México, fue uno de sus mejores ejemplares.\nEn el siglo XX la profundización de esta integración resultó en la "modernización" de la pobreza. El éxodo rural acelerado, tan sorprendente, y más en América Latina que en Asia o África, ha traído la sustitución de las formas anteriores de pobreza rural en el mundo urbano moderno de "favelas". Junto a este desarrollo, el control político de las masas fue también "modernizado "con la imposición de dictaduras fascistas. Esto incluyó la abolición de la democracia electoral, la proscripción de los partidos políticos y los sindicatos, los servicios especializados de la policía de investigación con técnicas -junto a la "modernizada" autoridad extra-legal de detener, torturar y "desaparecer" los adversarios reales o potenciales. Estas dictaduras sirven a las coaliciones locales reaccionarias (terratenientes latifundistas, burguesías compradoras y clases medias que se benefician de este modo de "lumpendesarrollo") y el capital extranjero dominante, el de Estados Unidos.\nA día de hoy el continente conserva los estigmas de la brutal superexplotación a la que se ha sometido. Las desigualdades sociales son aún más extrema que en otras partes. Brasil es un país rico (por ejemplo, la proporción de tierras cultivables a la población es diecisiete veces mayor que la de China), donde los pobres se puede ver, mientras que China es un país pobre donde la pobreza extrema es mucho menos visible. Pero en Brasil, como consecuencia de su desarrollo capitalista periféric temprano y profunda, sólo el 10 por ciento de la población se encuentra todavía en el campo: la pobreza se ha convertido en urbana. En Venezuela, el petróleo ha destruido por completo la economía y la sociedad: no hay ni agricultura ni industria, y todo es importado. Los muy ricos y los muy pobres viven o sobreviven sólo de las rentas del petróleo.\nEn estas condiciones, para la reconstrucción de una agricultura capaz de alimentar a la población de manera adecuada, así como la construcción de sistemas industriales coherentes y eficaces, se requieren políticas específicas de largo alcance que sin duda difieren de lo que uno puede imaginar para Asia o África.\nAlgunas conquistas revolucionarias notables\nDel mismo modo, hay un contraste visible entre los avances consistentes obtenidos por las luchas populares en América del Sur en los últimos treinta años y la ausencia de tales logros en Asia (excepto China, Taiwán y Corea del Sur) o en cualquier lugar de África.\nEstos avances se originaron cuando las dictaduras de 1960 fueron derrotados por enormes movimientos populares urbanos. Comenzando en Brasil con la presidencia de Fernando Henrique Cardoso y profundizado por el de Lula (2003), junto con la primera victoria electoral de Chávez en Venezuela (1999), la demanda de la democracia avanza indiscutiblemente en América Latina. Esta demanda no implica meramente a unos pocos segmentos de las clases medias, también a la gran mayoría de las clases trabajadoras urbanas y rurales. Ha permitido a los éxitos electorales en Bolivia, Ecuador, Argentina y Uruguay (¡pese a lo cual, en la historia antigua y moderna, constituyen la excepción y no la regla!) Que han llevado a los gobiernos a una nueva generación de líderes cuya cultura política progresiva no tiene nada en común con los de los siglos XIX y XX. Una generación de líderes se han atrevido a cuestionar las políticas económicas y sociales reaccionarias del neoliberalismo, al menos en los asuntos internos, aunque lamentablemente -en la medida en que llegan a sus límites- sin cuestionar ni modificar la forma en que esos países se posicionan dentro del capitalismo global.\nLas principales mejoras positivas han sido el establecido de un inicio de la renovación de la gestión política democrática (como el presupuesto participativo y el derecho de cuestionar el rumbo de la política oficial a través de referéndums), las políticas sociales correctivas (pero que son principalmente por redistribución en lugar de ser través de nuevas formas de actividad productiva), y por último, el reconocimiento del carácter plurinacional de los países andinos.\nEstos avances logrados se combinan con los intentos en América Latina de liberarse de la tutela estadounidense- como a política formulada en la Doctrina Monroe- sin, por desgracia, cualquier reducción en la dependencia económica del continente. La Organización de Estados Americanos (el "ministerio de Ultramar" del gobierno de Washintong) ha pasado a ser un cero a la izquierda desde la formación del ALBA (Alianza Bolivariana para los Pueblos de Nuestra América) y la CELAC (Comunidad de Estados Latinoamericanos y del Caribe) en 2011. En agrupamiento en la CELAC de todos los Estados del continente, con excepción de los Estados Unidos y Canadá. México sigue sujeto a los requisitos de la integración del mercado de América del Norte, y forzado por lo tanto a cometer un "suicidio nacional" que se puede superar sólo a través de una gran revolución popular y nacional como la de la década de 1910-1920.\nSin embargo, estos avances iniciales tienen limitaciones evidentes: el continente no sólo mantiene su compromiso global con la producción primaria (todavía representan el 75 por ciento de sus exportaciones actuales mientras que Asia, especialmente China, está avanzando rápidamente en su industrialización y en una exitosa competencia en la exportación de productos manufacturados ) sino que incluso es el que figura en el "modelo extractivista", un retorno a la dominación económica de los productos primarios (plantación y mineral). Es el éxito coyuntural reciente de las exportaciones primarias lo que ha permitido a la liquidación de la deuda externa masiva, está alimentando una ilusión peligrosa: que es posible mantener el progreso social y político sin un escape del sistema imperante de la globalización.\nLas ganancias del continente, en sus límites y contradicciones, son un desafío al pensamiento social progresista actual. Estos avances son el resultado de un movimiento político de un pueblo poderoso que se ha desprendido de las viejas formas de lucha, tanto los dirigidos por los viejos partidos comunistas o los políticos populistas, así también como el experimento de lucha armada de la década de los sesenta.\nPara atender a este problema he presentado un marco analítico, del que me limito a reiterar aquí las grandes líneas. Hablo de una "proletarización que es a la vez generalizada y extremadamente segmentada." De hecho, es una proletarización, en el sentido de que todos los trabajadores (tanto en el sector formal e informal) no tienen nada que vender aparte de su fuerza de trabajo, incluidas, en este caso, sus capacidades intelectuales. La segmentación en sí es por lo general el resultado de estrategias sistemáticas llevadas a cabo por los monopolios que controlan el sistema económico global, la orientación de la investigación e invención tecnológica, y el poder político. Por otra parte, también una garantía militar de la permanencia del control estrictamente restringido de los monopolios generalizados del imperialismo de la tríada (Estados Unidos-Unión Europea-Japón) a través de un despliegue geoestratégico en todo el planeta de las fuerzas armadas de los Estados Unidos y sus aliados subalternos (OTAN y Japón). Este análisis se plantea en contradicción con Hardt y Negri y su énfasis exagerado en el ámbito de los "efectos liberadores" de la "multitud" (una palabra flácida con intención de ocultar la proletarización) que he criticado en realación a luchas de resistencia. Supone un juicio erróneo de las políticas de Washington cuyos proyectos militares, según ellos, ya han "fracasado", incluso aunque, en mi opinión, el establishment de la política exterior de Estados Unidos no ha renunciado en absolutamente a su continuación (y Hillary Clinton, si es elegida presidente en 2016, va a perseguirlos persistentemente).\nFormidables desafíos por superar\nLos avances de los últimos treinta años han creado condiciones favorables para su continuación y profundización. Pero se necesitan ciertas condiciones para que esto sea una realidad. Doy una visión sintética de su naturaleza con mi propuesta de proyectos soberanos que vinculan la construcción de modernos sistemas industriales coherentes, la reconstrucción de la agricultura y la vida rural, la consolidación del progreso social, y abierta a la invención de un progreso y democratización ilimitada. Mi énfasis en la soberanía nacional, que debemos entender como vinculados a la soberanía de las clases trabajadoras y nunca visto como ajeno a ella, está igualmente en contradicción con el discurso de Negri que trata como obsoleta cualquier afirmación de la nación y cualquier objetivo de construir un orden mundial multicéntrico. En mi opinión, no sólo son estas metas lejos de ser "anacrónicas", aún no están obsoletas. Imaginando así las cosas se hace que la fomulación de una estrategia efectiva paso-a-paso sea imposible.\nLa reconstrucción de la agricultura orientada hacia la consolidación de la soberanía añimentaria requerirá la formulación de políticas que difieren de país a paíz. La realidad de que el 80 por ciento (o más) de la población de América Latina vive en ciudades hace ilusoria la noción de un posible "retorno a la tierra" por los trabajadores urbanos pauperizados. Debemos mirar a una forma de reconstrucción muy diferente que todavía es posible y necesaria en Asia y en África. Esta reconstrucción, sin embargo, requiere el abandono de las políticas actuales basadas en enormes estancias que degradan el suelo (el modelo argentino, en particular). Ni en México ni en los países andinos sería posible una reconstrucción basada en la ilusión de la restauración de las antiguas comunidades indias, que sin lugar a dudas no pueden responder a las necesidades futuras y han sido desfigurados por su sometimiento a las exigencias del lumpendesarrollo periférico, específico a sus respectivos países.\nLa construcción de sistemas industriales que sean modernos y dirigido hacia el interior (orientado hacia el mercado masivo nacional y sólo en segundo lugar hacia las exportaciones) se puede imaginar claramente para Brasil, tal vez para la Argentina, y ciertamente para México -en caso de que logren escapar de las garras de la integración de América del Norte. Pero las políticas actuales están muy por debajo del nivel necesario para tal construcción, nunca va más allá de los límites impuestos por los sectores dominantes del capital industrial y financiero, y el gran capital nacional grande relacionado a los monopolios de los países imperialistas. Las nacionalizaciones, estatizaciones e intervenciones estatales activas son inevitables, al menos en esta primera etapa, abriendo entonces en la medida de lo posible la socialización real y permanente de su gobierno.\nEn lo que respecta a los demás países del continente, se me hace difícil prever grandes avances hacia la construcción industrial sin la integración regional sistemática, que incluso ahora está apenas avanzada, y menos aun construir nuevas solidaridades en la escala del Gran Sur (los tres continentes). China por sí sola, pero quizás también algunos de los llamados "emergentes" países podría apoyar algunos proyectos de industrialización emergente (en Venezuela, por ejemplo). Pero esto implicaría que Pekín reconociera su interés en hacerlo, que no es el caso. La complicidad latente entre los detentadores del poder de América Latina sigue apostando sus recursos naturales y a una China que necesita acceso a esos dilatados recursos. Para todas las partes, el reconocimiento de las necesidades a largo plazo para una perspectiva diferente, requiere a su vez diferentes formas de "cooperación” que no son los que está actualmente en marcha.\nY así llegamos de nuevo a las dificultades que presenta el "movimiento progresista popular," en América Latina como en otras partes de los tres continentes: que sus componentes, en lucha entre ellos, ir más allá de la especificidad individual de sus demandas, y crear nuevas formas políticas para la construcción unidad en la diversidad.\n(Traducción: Fernando Moyano)


Puericultura Archives - Hecho para peques\nBlog, Prueba de productos, Puericultura\nCómo viajar con un bebé sin silla de paseo\nMuchas veces me ha pasado que cuando me voy de viaje con mis peques, siempre tengo que llevarme un montón de cosas. Da igual que nos vayamos solo un fin de semana, como quince días, que siempre vamos muy cargados. Muchas de ellas son necesarias, pero hay otras que yo las llamo los “por si…\nNo Comments 26 noviembre, 2018 Marta\nBlog, Puericultura, Secciones\nTodo lo que necesitas para el nacimiento de tu bebé\nEn las últimas semanas como habrás visto he estado recopilando cosas y productos que seguro que podrán serte muy útiles para la llegada de tu bebé. Hoy quería enseñarte una tienda que particularmente me parece muy completa y que puede ayudarte con todo lo que necesitas para el nacimiento de tu bebé: Palacio del bebé. Palacio…\nNo Comments 20 marzo, 2018 Marta\nBlog, Puericultura, Regalos para niños, Secciones\nEste año varios papás de nuestro entorno van a tener un bebé y ya estoy pensando en qué puedo regalarles para sorprenderles. Me gustaría que fuera algo personalizado y único para su hijo. Algo que puedan guardar de recuerdo. Así que se me ha ocurrido compartir mis ideas de regalos personalizados para un bebé por…\n4 Comments 14 marzo, 2018 Marta\nCuando estás embarazada y queda poco para tener el bebé, es cuando te planteas que tienes que ir pensando en comprar aquellas cosas básicas que necesita el bebé para que cuando nazca esté todo organizado. Por ello, hoy quiero contarte cómo elegir la ropa de cuna más adecuada para el bebé, para que cuando llegue, lo…\n2 Comments 2 febrero, 2018 Marta


Tatay Oslo Portarrollos papel higiénico (Sin tapa, Cromo, Aluminio) | BAUHAUS\nTatay Oslo Portarrollos papel higiénico\nSin tapa, Cromo, Aluminio\nNúmero de producto 25094088\nEl portarrollos Oslo de Tatay destaca por su diseño moderno y elegante con líneas rectas, lo que le permite encajar en cualquier cuarto de baño. Gracias a este complemento, puedes disponer del papel higiénico a mano en todo momento. Está fabricado de aluminio, por lo que es muy ligero y no se oxida. Además, incluye material de fijación, lo que facilita su instalación. Dispones de todos los accesorios de la serie Oslo para mantener una línea homogénea en la decoración del baño.


Taller de tampografía, en el CEIP Manuel Azaña - Fundación Yehudi Menuhin España\nTaller de tampografía, en el CEIP Manuel Azaña\nInma Haro sigue con sus trabajos originales a través del MUS-E en la Comunidad de Madrid. Y lo que nos trae en esta ocasión, para arrancar con fuerza febrero, es un taller de Tampografía. Vamos a ver en qué consiste.\nSe trata de construir sellos y estampaciones para un producto final muy bonito. “Hoy en la sesión del MUS-E en el CEIP Manuel Azaña hemos aprendido la técnica de la tampografía. Hemos creado nuestros propios bosques y hemos disfrutado de algo totalmente desconocido para nosotros y nosotras”, apunta Inma sobre una actividad que se ha desarrollado con alumnado de 5º y 6º de Primaria.