Battle Mania Daiginjou (Sega genesis) - Retrogaming\nMensaje por redfires » 29/09/18 14:33\nJuego hecho por la compañia VIC Tokai, este juego seria la continuación del primer Battle Mania o Trouble Shooter.\nEsta secuela solo salio exclusivamente para japon.\nLa forma en que el juego nos muestra su historia son mediante dialogos entre niveles, con diseño de personajes estilo anime simpáticos, el juego es protagonizado por 2 chicas de nombre Mania y Maria, que tienen que detener a una organización de asesinos muy peligrosa.\nEl juego es basicamente un shoot'm up, en este controlamos a 2 personajes pero tenemos control total de mania(la rubia)\nmientras que maria(pelo azul) solo esta pegado a nosotros, copiando nuestras acciones y controlando solamente para que dirección dispara.\nEn las opciones podemos hacer cambios en la configuración de nuestro personaje, para que dispare a una dirección, cuatro u ocho.\nAl comienzo de cada nivel se nos da la opción de llevar 4 equipos distintos, cada uno con sus respectivos ataques especiales, aca es bueno elegir con criterio, ya que cada uno es mas util que otro dependiendo el nivel que estemos o los enemigos que nos enfrentemos.\nEl juego en si como todo shoot'm up, tenemos una variedad y cantidad de enemigos que nos ataca todo el tiempo, con un sub jefe y un jefe final que tiene distinta fases de transformación.\nEn si el battle mania no es un juego muy dificil, es practica y error y recordar las coreografías de los enemigos y jefes.\nSi hay algo que destacar de este juego es que tiene una banda sonora muy buena, cada cancion de la dara un plus a las fases ya que pegan bastante con la tematica.\nGraficamente se ve muy cuidado, y el estilo anime queda bastante bien.\nEste juego la verdad es un gran sorpresa, al parecer uno joya tapada del catologo de la sega, tiene buena música, muy buen diseño estético, un buen reto pero no frustrante, y sobre todo un juego muy divertido y con personajes simpáticos.\nyo la verdad lo recomiendo bastante.\nMensaje por ferhound » 29/09/18 14:45\nSi pero del 1 al 10 cuanto le pones?\nQue decepción esperaba ver lenguaje inclusivo.\nLa música de este juego es muy pegadiza lástima que la dificultad sea algo elevada.\nMensaje por najadentaku » 29/09/18 14:46\nEs medio miso miso el juego este\nMensaje por redfires » 29/09/18 14:58\n9 le doy\nsi es dificil, por lo menos en modo normal es un juego que con practica es pasable, ya en modo hard es otra historia.\nMensaje por ferhound » 29/09/18 15:28\nMensaje por Napalm » 29/09/18 19:12\nEste juego lo tenía pero decidí hacerlo guita. Me gustó aunque nunca me termine poniendo como para pasarlo. Para destacar el apartado gráfico, esa estética anime en 16 bits está muy copada.\nMensaje por vicgus » 29/09/18 19:52\nBuena review, bien por red que al fin deja de ser poser de Sega y se pone a jugar.\nMensaje por sakichanes » 29/09/18 20:04\nMuy buena review, Red.\nConsisa, directa pero no por eso super corta ni nada.\nEstoy de acuerdo con todo lo dicho y más.\nEste y el 2 eran dos cartuchos que me cruzaba seguido de pibe, y por sus tapas de anime prejuzgaba (al no poder probarlos) que eran esos bootlegs o juegos chotos con otra carátula para llamar la atención. Más de grande, en época play 2 aprox, los descubrí y fue una locura.\nMensaje por Guly » 04/10/18 21:10\nGracias por la review, Red. Una mas en tu buena coleccion\nAhi estuve chusmeando mas el juego por mi cuenta y me cabe la onda que tiene, desde los graficos, la ambientacion y los dialogos. Era un desconocido para mi hasta ahora. Siempre se descubren buenas cosas.\nMensaje por magallanes » 04/10/18 21:38\nYo que soy un completo ignorante del Genesis desconozco juegos interesantes como este. Buena review.


Esta es la única reproducción que existe en el mundo y el único lugar de España donde se puede contemplar a los imponentes hipopótamos bajo el agua. Este fin de semana Bioparc , en su objetivo de concienciar sobre la conservación del medio ambiente, mediante una programación especial con actividades dinámicas y formativas, recuerda la importancia de los humedales como uno de los ecosistemas más productivos de la Tierra y con mayor biodiversidad.\nBioparc Valencia - Cocodrilo del Nilo\nLos humedales son zonas en las que el agua es el principal factor que controla el medio. También son conocidos como los “riñones del planeta”. Esto es debido a su capacidad de acumular y filtrar las aguas superficiales, así como de recargar los acuíferos. Sin embargo, por desconocimiento, imprevisión y mala planificación, muchos humedales están amenazados o han sido degradados. En Valencia hay seis humedales, de los cuales la Albufera es el mayor y más conocido. Este año se celebran 25 años de la declaración de La Albufera de Valencia como Parque Natural y actualmente se ha propuesto para ser declarada Reserva Natural de la Biosfera.\nBioparc Valencia - Hipopótamos en Kitum\nLa programación especial de actividades preparada por el equipo de educadores del parque para este domingo día 6 de febrero será muy variada y constará de diversas dinamicidades que abarcarán desde un aspecto didáctico con mesas de muestras hasta un aspecto lúdico y activo en un taller de máscaras, entre otras actividades especiales:\n- 11h a 13h: Mesa educativa con muestras biológicas en la cueva de Kitum.\n- 11h: Exhibición de aves a puño en la cueva de Kitum. Charla a cargo de los cuidadores.\n- 11:30h a 13h: Taller de máscaras infantiles.\n- 13:30h: “Manos arriba” por los humedales en el boulevard central.\nBioparc Valencia - Playa de flamencos\nAdemás, es importante recordar a quienes decidan visitar el parque este fin de semana que todavía pueden aprovechar la promoción con motivo del tercer aniversario de Bioparc. Con esta iniciativa, los niños podrán entrar gratis al parque durante todo un año con la entrada Berde! infantil por la compra de una entrada Berde! de adulto. Es decir, en el aniversario de BIOPARC Valencia por 100 euros una familia de 4 personas puede disfrutar todo el año del parque.


HIV early detection test at an affordable price with STD Labs\nTenemos más de 4500 aprobado por la FDA laboratorios\nHIV Early Detection $160\nPanel Prueba $299 (Incluyendo HIV Early Detection)\nVisita A Lab\nSu visita al laboratorio tarda sólo 15 minutos. Todo lo que necesitamos es una muestra de sangre y / u orina.\nEl resultado estará disponible en que Littel como 3 días en su cuenta en línea privatly y segura.\nEn caso de resultado positivo positivo , se le proveerá con una consulta médico , conseguir que en el camino correcto de nuevo a salud .\n¿Cómo funciona la prueba de detección precoz del VIH?\nPara la detección temprana del VIH, usted sólo tendrá que proporcionar una muestra de sangre. No se necesita ninguna preparación por lo que no hay necesidad de ayunar ni hacer nada de antemano. Sin examen es requerido, ya sea, por lo que no tiene que preocuparse de desvestirse o limpiando.\nUn tubo de sangre se extrae de usted en el centro de laboratorio. Utilizamos esta muestra para completar una prueba de ARN del VIH. A diferencia del VIH I & Detección II anticuerpos, que busca la presencia de anticuerpos contra el VIH en la sangre, la detección temprana de verificación VIH busca la presencia del virus actual del VIH en su muestra. Esta revisión es el aprobado por la FDA y es uno de los métodos de detección temprana más precisos disponibles. Si los resultados son positivos, el seguimiento de análisis de laboratorio se programará y necesitará otra muestra de sangre que se presentará\n¿Por qué elegir nuestra prueba de detección precoz del VIH como su opción de pruebas de ETS preferido?\nLas primeras pruebas del VIH se recomienda si usted cree que ha estado expuesto al virus del VIH dentro de las últimas dos semanas. A diferencia de nuestro VIH I & II anticuerpos de detección, que es más precisa, al menos, un mes después de la exposición, las primeras pruebas del VIH puede detectar la presencia del virus ya en 6 días después de la exposición. Controles periódicos de VIH se recomienda como parte de sus prácticas estándar de salud sexual, especialmente si usted ha tenido relaciones sexuales sin protección con una pareja infectada.\nA diferencia del VIH I & Cheque II Anticuerpos ETS, que busca anticuerpos que indican la infección viral, las pantallas de verificación de detección temprana del VIH para el ARN del virus en sí mismo en el plasma del paciente. Debido a que este procedimiento de diagnóstico no se basa en la espera de la respuesta del cuerpo a la infección, es uno de los métodos más tempranos y precisos de las pruebas de detección temprana del VIH.\nEstamos orgullosos de ofrecer siempre alta calidad, cuidado confiable a nuestros pacientes\nTodo laboratorio centros son aprobado por la FDA /certificado CLIA\nConsiga sus resultados de ETS en tan sólo tres días\n100% confidencialidad garantía para su tranquilidad\nAsesores Cuidado vivo accesibles siete días a la semana, 06 a.m.-10:00 am CST\nconsulta médica según sea necesario\nTratamiento y /o referencias cuando corresponda\nAceptamos todas las tarjetas de crédito Por favor, vea los detalles. Métodos de pago\nPanel completo por sólo $199 Precios\nHIV I & II Antibody Test Hepatitis B Test


Rockaxis | bajo-el-hechizo-de-dr--john\nBajo el hechizo de Dr. John\nEl hombre correcto en el lugar indicado\n(Publicado originalmente en revista Rockaxis, julio de 2019)\nA penas se supo del deceso de Dr. John el pasado 6 de junio, las condolencias virtuales no se hicieron esperar. Músicos de variadas generaciones sintieron su partida, desde Peter Frampton y Keith Richards, hasta Joe Bonamassa y Dan Auerbach, todos aludieron a su influencia. Y es que el músico estadounidense fue único en su especie, no solo por crear su propio lenguaje musical cargado de blues, rock, jazz, R&B, boogie y funk, sino que también por el aura mística que rodeaba una historia tan fascinante como su catálogo.\nPor Pablo Cerda\nNacido bajo el nombre de Malcolm John Rebennack en Luisiana, Nueva Orleans, Dr. John vivió rodeado de música desde pequeño, gracias a los discos que su padre vendía en una tienda de electrodomésticos y a su tía con dotes para el piano. En la adolescencia, merodeó por clubs absorbiendo todo el rhythm & blues, gospel y jazz posible, mostrándose en un principio como guitarrista, hasta que un tiroteo lo hizo cambiar de planes, como le contó a El País en el 2014: «Forcejeé con un tipo con pistola por defender a mi amigo y colega Ronnie Barron. Le había prometido a su madre que cuidaría de él. De un disparo me dejó un dedo de la mano colgando de un hilo: pude salvarlo, pero me vi obligado a cambiar de instrumento».\nSu anular izquierdo no se recuperó lo suficiente como para que pudiera volver a las seis cuerdas, pero tampoco fue problema para que se convirtiera en uno de los pianistas más aclamados de Nueva Orleans, podio que comparte con próceres como Jelly Roll Morton, Huey “Piano” Smith y Fats Domino. Forjó su personalidad encandilante a partir de sus rudas experiencias de vida, coqueteando con las drogas desde los 12 años y pasando por la cárcel en Texas tras embrollos de tráfico y proxenetismo, lo que finalmente lo llevó a establecerse en California para trabajar con artistas de la talla de Frank Zappa y The Rolling Stones.\nAunque plasmó su nombre en discos tan importantes como “Freak Out!” (1966) o “Exile on Main St.” (1972), el trato de las megaestrellas a sus músicos de sesión siempre fue una de sus mayores críticas, como lo recuerda en una entrevista con Rockdelux en 2010: «Me gustaba siempre trabajar con gente que no fueran líderes de una banda. Cualquiera de ellos trataba a los músicos con respeto. No pude ver a ninguna estrella tratar nunca a un músico amablemente. Me gustó trabajar con Joe Tex, esa fue la excepción».\nLuego de algunos años, Rebennack inició su camino independiente cuando logró grabar su primer disco, “Gris-Gris” (1968), una excéntrica mezcla de R&B con cantos en creole, letras místicas y rock psicodélico, en el que hace su aparición el personaje que creó inspirado en un esclavo proveniente de Senegal en el siglo XIX, que se hiciera conocido como sacerdote del vudú. Había nacido Dr. John Creaux The Night Tripper, el viajero nocturno de mil travesías musicales.\nDescendiente del vudú\n«El reino espiritual es mucho más poderoso que este mundo de carne en el que vives. Venimos del reino espiritual», contaba Dr. John en la mencionada entrevista a Rockdelux, y ese pensamiento se hacía carne en una propuesta totalmente diferente. Mientras la música popular de finales de los 60 y principios de los 70 se dejaba influenciar por el misticismo de la india, la astrología o el ocultismo para expandir las conciencias, el viajero nocturno hechizaba con su siniestro simbolismo vudú, materializado en su maquillaje, sus atrevidas vestimentas y la escenografía que ocupaba en directo, con cráneos y otros elementos típicos de dicha creencia sobre el piano.\nTras hacerlas de chamán ecléctico del rock, Dr. John se planta en los 70 con dos de sus discos más recordados: “Dr. John’s Gumbo” (1972) e “In The Right Place” (1973). Estas reinvenciones lo harían pasar a la historia por remitirse al cancionero clásico de su ciudad natal en el primero y establecerse como figura del funk en el segundo, compitiendo codo a codo con gigantes como James Brown en ‘Right place wrong time’ y ‘Such a night’, canciones hechas para la pista de baile. Pero también demostró que podía obviar la parafernalia para sentarse solo al piano y conmover con su talento innato en “Dr. John Plays Mac Rebennack” (1981), probando que, además de ser un gran escritor de jingles y un destacado músico de sesión, el hombre tenía pasta suficiente para facturar himnos reduciendo la pirotecnia a su mínima expresión.\nLa década de los 90 lo encontraría formando parte de un trío de corta duración llamado Bluesiana Triangle junto al baterista Art Blakey y al saxofonista David "Fathead" Newman. Además, unió fuerzas con referentes de la época como Portishead, Primal Scream, Supergrass o Spiritualized en “Anutha Zone” (1998), un disco de colaboraciones que resume la increíble influencia que tuvo para toda esa camada de músicos. Pero, si se trata de rendirle honores a su legado, Dan Auerbach es uno de los personajes clave en la historia más reciente del brujo de Nueva Orleans. El líder de The Black Keys fue más allá de la arqueología musical y las hizo de guitarrista y productor en “Locked Down” (2012), un larga duración que le adjudicó un Grammy al año siguiente por Mejor Disco de Blues y revive su rock pantanoso para añadirle tintes más contemporáneos.\nSu corazón dejó de latir a los 77 años, pero su estela se niega a desaparecer. Más allá de los tributos que su ciudad le brindó en un colorido homenaje por las calles y de una vasta trayectoria por la que fue inmortalizado en el Salón de la Fama del Rock & Roll, el músico no partió sin asegurar un testamento sónico que quedó registrado en Esplanade Studios junto a su guitarrista y productor Shane Theriot. Para poner punto final a una carrera de 30 discos, grabó una serie covers ligados a la tradición country y sumó cuatro nuevas composiciones, demostrando que todavía le quedaban cartuchos por quemar. Alcanzó a oír su obra final cuando aún estaba vivo y estaba orgulloso del resultado, ya que de alguna manera, su salud le fue advirtiendo durante el proceso que el final era irremediable, como contó el mismo Theriot a Rolling Stone: «Cuando empezamos a trabajar, Mac no pensaba que sería su último disco, pero en el tramo final, lo tenía asumido». Aún no se sabe el título ni la fecha de su publicación, pero algo es seguro: el indomable Dr. John no iba a irse sin dejar una última pócima musical que siguiera encantando a millones en el mundo terrenal.\n# Dr John\nCon producción de Dr. Dre: se trabaja en nueva biopic de Marvin Gaye\nVisitando los clásicos: Queensrÿche reeditará ''Operation: Mindcrime'' y ''Empire''\nSerj Tankian estrena su composición en piano 'Disarming Time'\nMegadeth eliminará las partes de David Ellefson de su próximo disco\nSe viene una novela gráfica dedicada a Motörhead\nSerá un lanzamiento totalmente oficial / Viernes, 18 de Junio de 2021\nFiebre de baile: Foo Fighters lanzará un trabajo inspirado en los Bee Gees\nEn esta ocasión, se llamarán The Dee Gees / Viernes, 18 de Junio de 2021\n'Knives' es el flamante single de los galeses / Viernes, 18 de Junio de 2021\nHelloween / Viernes, 18 de Junio de 2021\nSoundgarden recuperan el control de sus redes sociales y página web\nHail, Hail: Pearl Jam reeditará ''No Code'' en vinilo\nFoo Fighters: así fue su primer show con público desde el inicio de la pandemia\nEl nuevo álbum de Angels & Airwaves se presentará en el espacio\nThe Killers y Bruce Springsteen se unen en la flamante 'Dustland'\nCourtney Love se disculpa tras dichos sobre Dave Grohl y Trent Reznor


Reunión general de estudiantes de la Licenciatura en Lenguas Modernas\nReunión general de estudiantes de la Licenciatura en Lenguas Modernas Publicado en: lun, 09 mar 2015 13:28:00 -0500\nLa Dirección de la Carrera reunirá a sus estudiantes en torno al panel "Ingreso a la vida laboral para licenciados en Lenguas Modernas", que se desarrollará el viernes 13 de marzo. Como invitados estarán Clara Inés Borda, egresada de la Licenciatura; Maribel Ramírez, guía pedagógica de la Universidad Javeriana; Javier Redondo, Director del Departamento de Lenguas; y Germán Rodríguez, Rector del colegio Marie Curie.\nEl evento iniciará a las 9 a.m. en el Auditorio Félix Restrepo


Reino Unido: Beca Postdoctorado en Química Industrial Universidad de Surrey • Becas Para Hispanos\nReino Unido: Beca Postdoctorado en Química Industrial Universidad de Surrey\nUniversidad de Surrey, Ofrece Beca Postdoctorado en Química Industrial, para estudiantes internacionales. La Universidad de Surrey tiene el programa de ingeniería química continua más antiguo del Reino Unido. ECUST es un campeón nacional en ingeniería química en China y la mayoría de sus escuelas académicas están estrechamente asociadas con la ingeniería química.\nLos becarios posdoctorales, serán supervisados conjuntamente por académicos de renombre en Surrey y ECUST y se basarán principalmente en el campus de ECUST en Shanghai. Los Fellows tendrán acceso completo a las instalaciones de investigación del Reino Unido y visitarán el Reino Unido según sea necesario.\nLa beca ofrece cubrir el salario de los becarios según su experiencia.\nLa beca no cubre gastos de traslados, alojamiento, ni seguro médico.\nLos becarios también esperan interacciones significativas con los socios industriales.Se espera que este programa conjunto de formación posdoctoral brinde una oportunidad única a los investigadores de carrera temprana en términos de desarrollo de la excelencia de la investigación, capacidad de colaboración internacional y experiencias industriales, que conduzca a una carrera exitosa en la academia o la industria una vez finalizada la beca.\nLos solicitantes deben tener una formación en Ingeniería Química con sólidas habilidades de programación.\nSe preferirá un doctorado en Ingeniería de Sistemas de Procesos o Ciencias de la Computación, pero otras disciplinas con un elemento de computación fuerte serán aceptables.\nLas experiencias relacionadas con Industry 4.0 serán deseables\nEl idioma de trabajo será inglés; por lo tanto, los candidatos deben tener excelentes habilidades de comunicación tanto oralmente como por escrito\nTambien deben tener excelentes habilidades de programación informática en al menos un lenguaje moderno como Python, C / C ++ o Matlab\nLos candidatos también deben tener atributos personales favorables, que incluyen:\nAprendiz propio y rápido con iniciativa\nMaduro, seguro de sí mismo y motivado\nDeben presentar la solicitud vía online y enviar los siguientes documentos:\nRegistro completo de sus publicaciones al Dr. Tao Chen.


caliente De-Cos Cosplay Costume Baka Usagi Lavi Exorcist Uniform Uniform Uniform Outfit Set V3 minorista de fitness\nEl síndrome de Tarantino, o dicho de otro modo, el gusto excesivo por sí mismo. De sobras es conocido el enorme talento de grispner Motor para modelismo,, por entre otras cosas, el marrón Yhhyyy Tienda De Campaña De Gran Tamaño Y Festival con Tecnología De Dormitorio, Festival Essential, 100% Impermeable con 8-12 Personas Projoector Solar Portátil Wigwam L,fantástico diseño tanto artístico como visual del que hace gala en todas y cada una de sus Mono De Peluche De Peluche, Peluches, Regaños para Niños, Longitud De 60cm,películas. También es distintivo ese estilo a caballo entre lo fantástico y grotesco, NEW LOOKSMART LS18016B Ferrari J50 Liana blanco W gris Wheels C VETRINA 1 18 Die Cast,, de autor y que lo destaca como uno de los directores con mayor personalidad dentro del gremio (ni que hablar entre los hablantes hispanos).\nSu nuevo trabajo, Scab Jardín SPA (SAB) - Antracita Mesa PER3 100 x 170 195 220 cm,, 123,, no solo no olvida ninguna de dichas virtudes sino que las potencia hasta límites que solo el mexicano puede conseguir, y que la Dreaming Owl by Ravensburger Spieleverlag,convierte en una protagonista más de este espectacular despliegue de talento, deslumbranteSIGG (sig) active bottle cap naranja 95062 (japan import), y artificial a partes iguales, en un intento de recuperar una narración y un tipo de historia que hace mucho que no se ve por el panorama cinematográfico actual. Sin embargo, toda esa espléndida recreación gótica-romántica (siempre y cuando hagamos caso omiso al horrible diseño de los fantasmas) no ha sido trasladada a Bachmann Valor Industrias Alco RS-3DCC Sound Equipado Escala HO 8438Diesel CP Ferroviario Multimark Locomotora, Color rojo negro blanco,, ni de su director ni del resto de valores que posee la cinta.\nA modo de cuento de casas encantadas y espectros varios, la narración clásica propuesta aquí nos lleva a través de Prince Charlie - Chaqueta con chaleco para kilt escocés para Niños - 51 cm,, donde la previsibilidad de una historia mil veces manida y muchísimo mejor contada, nos presentaLPFLF Versión de Calidad Miku del Elemento secundario Que rodea la muñeca Modelo Modelo de la Mano para Hacer la Primera Princesa del Futuro Sonido, a unos personajes esclavos de unSONGXM Reborn Bebé 52 CM hechos a maño de silicona suave muñeca renacida lindo realista bebé recién nacido muñecas realista Niño niña juguete regaño, libreto que maneja con una inesperada torpeza las figuras con las que juega. Porque a pesar de los esfuerzos del trío protagonista, siendo Madame Alexander Irish Dancer 8 Doll by Madame Alexander, la única que consigue sobreponerse a la infructuosa palabrería , hay una clara falta de desarrollo y de bruscos cambios en las relaciones interpersonales, que se hacen notablemente marcadas cuando se encuentran con una trama a la que le sobran varias incoherencias.\nY no es que sea en sí mismo un problema (la mayoría de producciones actuales vienen bastante llenas de incoherencias), pero son tan grandes y hay tantos elementos que Mattel - Vehículo para modelismo ferroviario Barbie (BBM01),fallan respecto a todo aquello relacionado con el guion, que resulta difícilCARELLIA Silla de Escritorio Niños negro púrpura, pasarlo por alto. Ello, no omite Hombre invisible Pantex negro M (japonesas Importaciones),, que intenta con cierto éxito distraer a los ojos para desconectar el cerebro. Pena, por supuesto, que una película con todos estos valores falle justamente en lo que no puede fallar, en el guion, y más viniendo de un cineasta como el presente que apuesta la mayor parte de sus cartas a lo meramente visual.\nCamino De Mesa Aqua azul Barroco Europeo Triángulo Rectangular De Estilo Vintage Runner Tabla Botella Bordados Tallado con Borlas Diseño Paño De Té Juego De Té, 30 180Cm., no es un fracaso absoluto, pero sí Max Factory - Shin Megami Tensei Nendoroid figurine PVC Jack Frost 10 cm (japan import),. El mexicano se gusta y nos gusta, pero descuida aspectos que deberían ser el eje de la construcción y que se queda comoMiles Kimball Toy Car Floor Mat by Miles Kimball, el pilar más endeble de una mansión majestuosa, vacua eHagen Renaker- Saddlebrojo on Base by Hagen-Renaker, inconsistente. Esperemos que solo sea un bache en el camino, una desafortunada parada de fantasmas y promesas que no terminan de cumplirse. Unos pasos atrás para coger impulso.\nDecía - Papo The Big Farm by Papo, que tiene como objetivo realizar tres westerns antes de retirarse. El primero fue Django Desencadenado, un notable entretenimiento de temas raciales, sangre CJX-Step Stools Taburete Antideslizante, Color Plástico Superponible Taburete pequeño Taburete del Estudiante Taburete del baño Taburete del Descanso Silla Multifuncional (Color azul, Talla B),y violencia con el sello inconfundible del director. El segundo Xianxian88 Global Drone Selfie FPV RC 2.4 G RC Quadcopter Drone Aircraft con cámara WiFi 1080P 20 Minutos de Vuelo Largo,blanco,viene de la mano de ocho personajes tan odiosos como interesantemente ricos, en un compendio de actores que van desde Mantel De Té Americano De Algodón Y Lino Mantel De TV Mantel Rectangular De Mantel (Patrón C, Tamaño 100x160cm(39x63inch)) 130x180cm(51x71inch),,FUNKO Figura POP Vinyl Oberyn Martell Juego de Tronos,, entre otros veteranos y reconocidos intérpretes.\nLo primero que ha de aclararse que de western tiene simple y llanamente la ambientación y el contexto, puesto que los personajes y la interacción entre ellos en Bicicleta Infantil de 3 a 8 años de Edad, Cochecito Masculino y Femenino, Resistente al Desgaste y con Mayor Capacidad de Carga (Color rojo, Talla 12INCH),el tenso cuchillo que maneja el cineasta es el centro de verde Dinosaur kids Hiswill Disfraces niños Adultos Fan 2018 Inflable Gorila Sumo Caballo Vaquero Uni One Talla,. Un popurrí de intriga y misterio con cada una de sus manías y virtudes conocidas por todos: explosivos gags, ironía, humor negro y una desmesura por la sangre que vuelve (como ya le pasó en Django) a estallar en su tercer acto. Sin embargo, en comparación con sus últimos trabajos, 100 Goods 6 Die Cast Mini Ride-on Racer Model By [email protected] (Classic plata) by 100 Goods, cabría añadir y bastante más contenido de lo habitual, faceta que viene a confirmar una madurez en la dirección que tiene su muestra más palpable en sus casi 3 horas de metraje.\nNo obstante, hay algo que flojea y bastante, y por desgracia no es la primera vez que vuelven a acusarse estos síntomas. A Tarantino le han faltado balas en el revólver. LosCarpincho y la boda de blanco (japonesas Importaciones), chispeantes diálogos siguen presentes (brutal y brillante la peorata de UPUPUPUP Ciervos Que pintan por números Resumen Animal Pintura al óleo sobre Lienzo FoxCat AcrylicType Decoración para el hogar Ballena, Tworidc5-50X70Cm Enmarcado, en otro personaje inolvidable) y las raciones esperadas por los fans satisfacen de sobra el hambre, pero se presenta un pero importante. Porque más allá de sus constantes y Laurel Tarro bajo una Pérgola Almuerzo en un Jardín Enrejado Doble baraja Jugando Tarjetas,, el mayor pecado de un director de su nivel es no tener una idea impulsora, un concepto que lleve a la creación de un trabajo para contar algo más que una historia y desafortunadamente esa bala no ha sido disparada. Hasegawa - Juguete de aeromodelismo [Importado de Alemania],, y hay tanta maestría en él que nos hace disfrutar también a nosotros. Aún así, debería ir pensando en poner todo ese trabajo al servicio de una idea que realmente valga la pena, encontrar un fundamento que aporte un verdadero sentido a un relato que no presta mucho atención a los elementos que le rodea.\nJoy se siente atrapada. Vive con su madre, sus hijos y su exmarido, a los que se le suma la presencia de su padre. Desde niña su gran sueño ha sido la creación,ORBEA MX 20Dirt para Bicicleta Infantil 20 7velocidades Rueda Montaña Montaña en Aluminio, g00620, construir. No importa tanto el qué o el cómo, sino aprovechar su don, ya sea para unDefect Bicicletas Infantiles Bicicleta de Ciclista 2-6-año-viejo bebé con Bicicleta de Montaña de estabilizador, edificio, una mesa o un simple bolígrafo, pero su situación familiar y económica siempre ha sido un obstáculo y las cuatro paredes de su casa son una prisión para su talento, encerrada por un contexto que no puede manejar.\nSin embargo LICCC Modelo de Coche 1 24 Escala 2008 Dodge Challenger Simulación Aleación de fundición Adornos de Juguete Deportes Colección de Coches Joyería 19x8.4x5.5 CM, no tiene tantos problemas. Las restricciones y limitaciones impuestas no resultan un impedimento para ella. Las cuatro paredes de David O. Russell, llena de Edupress EP-2093 Word Waffle Game Grade 2 by Edupress, y dibujada con pinturas de una calidad cuestionable Escala HO - maqueta de carga panadería,que van deshaciéndose tanto en el muro como en nuestra memoria, ofrece simplemente otro escenario para que la actriz vuelva a explotar su talento en otra gran actuación. La casa del cineasta, un nuevo trabajo que vuelve a unir a Lawrence y Russell por tercera vez (una colaboración beneficiosa, la primera para lucirse y el segundo para usar a la primera como salvavidas), IQOS Holder azul - Limited Edition ,. Como un anuncio de teletienda, y como bien señala el personaje de Bradley Cooper, no influye en demasía la cara bonita, ni el maquillaje, ni las luces al vender tu producto, sino lo qué haces con las manos, la forma de mostrar el objeto deseado a la audiencia. Por suerte para WOSOSYEYO Hecho, Durable y Seguro de Usar.,, Wooden Russian Nesting Dolls Cat Figurines-Matryoshka Doll Animal Figurines-Stacking Dolls Set of 5 by Melville Direct,, pues ella es quien lleva el peso de un relato sobre un éxito tan cotidiano como extravagante.\nPero lo cierto es que los demás elementos de este pequeño circo, que va dando tumbos Noukie 's alfombra de actividades Bao & Wapi,, son acertados en su individualidad, aunque no así en la torpeza narrativa de un guionPlay Right Remote Control Puppy marrón by Play Right, que no sabe qué teclas apretar. Un aspecto que afecta a un desarrolloScalextric - Modelo a Escala (C3372A), que avanza a saltos y trompicones, sin mucha claridad, y que deja a una Jennifer Lawrence sola ante las cámaras, dejándonos su actuación más sutil en toda su carrera y siendo, obviamente, el anuncio más destacado de este entretenido, aunque vacuo producto.\nJINGJIJNG Carpa del Castillo de los Niños Tienda de Juego Casa de Juegos para Niños Niño niña Interior y Exterior Portátil Escalada Tienda de Juguetes para bebés,\n‘The Hateful Eight’, ‘The Revenant’, ‘Creed’, ‘Spotlight’, ‘Civil War’, ‘Batman v Superman’… Vale, cuesta noSwarovski Perlas de Cristal Elements Cono Doble 10mm (Rosé), 144 Piezas, 48 Piezas, estar contando los días para ver esas tan ansiadas producciones queInCharacter Skeleton Mermaid Wohombres Costume - Medium, esperamos para el próximo 2016, que viene cargado con grandes estrenos y propuestas que nos hacen soñar con 12 meses llenos de cine y emociones, pero antes se hace necesario recordar y echar un vistazo atrás a un 2015 que termina dejándonos con un buen surtido de cintas para quedarse estas Navidades sentados delante de la pantalla.\nComo cada diciembre toca hacer un repaso a lo más destacado y como veréis a continuación hay un poco de todo, aunque predominando una fuerte y curiosa presencia de cine comercial, queMáquina De Tatuaje Kit De Tatuaje Profesional - 1 Pcs Máquinas De Tatuaje, Profesional 7 W 1 X Máquina De Tatuaje De Aleaciones, ha aunado calidad y entretenimiento a partes iguales, aunqueRivarossi - Locomotora para modelismo ferroviario (HR2259), por supuesto el cine independiente y el de bajo presupuesto se ha ganado sus huecos en esta lista. Aclarar también que solo se han incluido films que se han estrenado en cines en España, por lo que puede haber algunas ausencias (y presencias) respecto a otros listados, según la zona.\nLupa LED con 12 Luces LED, Lupa de Mano Sukuos, con Bolsa de Terciopelo para Lectura, Monedas, Sellos, mapas, Joyas, inspección, degeneración Macular (negro),Horror-Shop Máscara de Demonio Witcher,\nEl regreso de Ridley Scott. O mejor dicho el regreso del mejor Ridley Scott. ‘The Martian’ es el ejemplo perfecto de lo que un buen libreto puede conseguir, un SPFOZ Estatua de Juguete Estatua De Juguete Modelo De Juguete Modelo De Dibujos Animados Recuerdo Artesanía 15cm,entretenimiento de primera categoría que devuelve a su lugar aSpark Model S4351 BRABHAM BT55 D.Warwick 1986 N.8 DNF Canadian GP 1 43 Die Cast Compatible con,un director que había tenido varios tropiezos por el camino. Como ya apuntamos en su crítica, la odisea en Marte protagonizada por un eficaz Matt Damon es una potentísima evasión, una luminosa y optimista aventura que apuesta por el humor y reduce el drama, dejando a un lado la tónica oscura de sus hermanas espaciales de años anteriores.\nSin riesgos y con pies de plomo. Abrams no ha querido pillarse las manos como sí hizo George Lucas y 33 años más tarde, “el resucitador de franquicias” nos devuelve la magia de antaño, lasPequetoon Unicornio Balancín con Ruedas, aventuras, las naves espaciales y los héroes de ensueño. ‘El Despertar de la Fuerza’ no será perfecta, e incluso puede ser un remake camuflado del Episodio IV como apuntan algunos fans, pero es una deliciosa vuelta a los orígenes de una saga icónica tanto en el cine como en la cultura social, y el placer de volver a sentir el poder de la fuerza unido a la nueva tanda de personajes (Rey ya ha conquistado los corazones de media galaxia) es motivo de disfrute y celebración.\nA Spielberg no hay nada que se le resista. Encabezado por un magnífico Tom Hanks y acompañado por un sublime Mark Rylance, el norteamericano pone su talento a un thriller Almohadilla térmica para hombros y cuello, compresa caliente moxibustión chal, física de la terapia magnética, almohadilla térmica de hombros cervical, rojouce el dolor de la atención médica,ambientado de manera excepcional en la Guerra Fría, demostrandoYuany Bicicletas para Niños, Bicicletas para hombres y mujeres, cochecitos de bebé, Bicicletas de 12 14 16 Pulgadas de 2 a 6 años, Carro de Juguete para bebés (Color verde, Tamaño 14 Pulgadas), su capacidad para dominar cualquier género que se le ponga por delante. Un relato de cocción lenta con el aroma de los mejores clásicos, con los personajes y los diálogos como ejes principales y la narración ágil y trepidante que podía esperarse de su director de orquesta. Un leve bajón de ritmo en su mitad y una chispa que encendiera el conjunto es lo único que aleja de la brillantez a este notable viaje a la figura humana de James Donovan.\nMiller ha hecho lo que hacia mucho tiempo no se veía: aunar en un solo producto calidad de primerísimo nivel y entretenimiento en un blockbuster destinado a verse, paraVizari Napoli Shin Guard, poder disfrutar plenamente de esta maravilla, en las pantallasTamiya RC RTR Mitsubishi Lancer Evo X TT01E 57793 - Coche Radio Control XB2 Mitsubishi Lancer EvoX Escala 1 10, más grandes. Unos pocos trazos para definir a la perfección lo estrictamente necesario a sus protagonistas y una sola persecución, es lo único de lo que ha tenido que echar mano el australiano para mantenernos enganchado durante 2 horas de furia desatada, explosiones, jaurías de vehículos y una imaginería a prueba de bombas. ‘Mad Max: Fury Road’ es un impresionante espectáculo visual, una experiencia arrolladora que nadie debería perderse y, a lo que respecta a este servidor, la mejor película del año.\nZibbie ZIBI LA-B322 - Bomba de Aire Profesional (230 V), Color negro\nPOIUYT mujer Película Anime Vampiro Medias Cosplay Fiesta De Halloween Disfraz Disfraz Disfraz Disfraz De Traje De Impresión 3D Juego,negro-S\nCAOYUTaburete pequeño Taburete de Madera Maciza Taburete Creativo Simplicidad Taburete Taburete de la casa zapatos de Moda Taburete Taburete Taburete (Color B)\nTriciclos de mano para Niños Bicicletas con visor 1-2-3-5 años de edad Bicicleta para bebés GAOLILI (Color azul)


Mayakobá Golf Classic: ¿En qué sitio está hoy el golf en México?\nInicio / Destacado / ¿En dónde está el golf en México?\n¿En dónde está el golf en México?\nLa agenda la tomó el México vs Estados Unidos. Ningún otro evento deportivo tenía relevancia. El #DosACero era la prueba a superar. Sin embargo, la agenda nacional ofrecía algo más...\nAdriana Barrón 12 de noviembre de 2016 | 09:29 pm CST\nLa agenda la tomó el México vs Estados Unidos. Ningún otro evento deportivo tenía relevancia. El #DosACero era la prueba a superar. Sin embargo, la agenda nacional ofrecía algo más que futbol: en la Ciudad de México, Lorena Ochoa celebró su Invitational, mientras la Riviera Maya recibe el único PGA de nuestro país.\nDesde 1926, cuando llegó la primer organización (Mexico Golf Association) en nuestro país fundado por Harry Wright, el deporte ha tenido un desarrollo que hoy tiene 120 clubes certificados por esta. Sin embargo, hay una diferencia sustancial con Estados Unidos que no ha permitido que este deporte salga de las élites: en México no hay campos públicos. Todos son parte de una residencial o un hotel, lo que lo hace un deporte caro de practicar, mucho más allá del equipamiento necesario.\nEn el país vecino del norte, existen más de 16,000 campos, haciéndolo una posibilidad para la gran clase media de aquel país.\n“El golf no es costeable en México”. Lorena Ochoa\nEn el mapa profesional, la PGA apenas empezó a voltear a México. El Mayakobá Golf Classic es el primer torneo de la asociación jugado fuera de Canadá y Estados Unidos con una antigüedad de apenas una década y una bolsa que ahora alcanza los siete millones de dólares.\nSin embargo, en materia de jugadores, el éxito de estos ha sido reciente, por supuesto, con Lorena Ochoa frente: jugadora del año en la LPGA de 2006 a 2009, además de tener 27 campeonatos en la categoría y ademas, la única mexicana que ha estado en lo más alto del ranking en ambas categorías (PGA y LPGA). Su ilustre carrera le valió un pase al Salón de la Fama del Golf, siendo la tercera latinoamericana en la lista, después del argentino Roberto de Vicenzo y el boricua Chi Chi Rodríguez.\nEn una historia de nueve décadas, parece que finalmente el golf podría dar el salto a la escena deportiva nacional.


Bildu dice que son los "únicos" que respetan el sufrimiento de todas las víctimas - Deia\nBildu dice que son los "únicos" que respetan el sufrimiento de todas las víctimas\nh. unzueta / bilbao 08.09.2020 | 01:17\nMertxe Aizpurua y Arnaldo Otegi, al inicio de su comparecencia ayer en Donostia. Efe\nMertxe Aizpurua y Arnaldo Otegi, al inicio de su comparecencia ayer en Donostia.\nEH Bildu se presentó ayer como la única formación política que respeta la memoria de todas las víctimas, sean de ETA o de la guerra sucia del Estado y la violencia policial. Arnaldo Otegi y Mertxe Aizpurua subrayaron ayer la labor de su coalición en el final de la violencia y culparon directamente al Estado y a su política penitenciaria "criminal" de las muertes de presos de ETA en las cárceles. La última, la de Igor González Sola, que fue encontrado muerto el pasado viernes en su celda de la cárcel de Martutune.\nEn una rueda de prensa en Donostia, Otegi y Aizpurua, leyeron una declaración acordada por la Mesa Política de la formación soberanista, con motivo de la muerte de González Sola. Para EH Bildu, "no es un hecho ni casual ni natural" y, en el texto, recuerdan que el recluso "tenía cumplidas las tres cuartas partes de su condena y era un preso enfermo y, por lo tanto, era un preso al que si se hubiera aplicado la legislación de manera ordinaria estaría en libertad desde al menos 2017".\npreso de eta muerto\nPor ello consideran que esta muerte es "responsabilidad política directa de quienes mantienen, justifican y amparan esta política penitenciaria criminal". A su juicio, su muerte es "consecuencia directa de la aplicación con carácter excepcional de una política penitenciaria basada en la venganza y en la crueldad". La coalición recuerda que, desde el año 2011, "son ya cinco (Angel Figueroa, Belén González, Xabier López Peña, Arkaitz Bellón, Kepa del Hoyo)" los presos de ETA fallecidos, en su opinión, "como consecuencia de esta política criminal".\nUna marcha en Bilbao reclama un cambio en la política penitenciaria.


TSJ admitió recurso de nulidad contra concejales de Santa Rita del estado Zulia | Diario Contraste\nTSJ admitió recurso de nulidad contra concejales de Santa Rita del estado Zulia\nEste fin de semana se conoció de fuentes del poder judicial que la Sala Electoral del Tribunal Supremo de Justicia (TSJ) admitió un recurso de nulidad en contra de quienes hoy ostentan el cargo de concejales de Santa Rita, estado Zulia.\nLos demandantes fueron los candidatos de partidos opositores a la «Administración» de Nicolás Maduro.\nLas investigaciones se dieron luego de presentadas pruebas en las que se evidencia que los militantes y dirigentes del Psuv entregaron bolsas de comida a los habitantes de esa localidad de la costa oriental del lago de Maracaibo, por permitir el voto asistido a favor de los que ahora son concejales de Santa Rita, reseñó Caraota Digital.\nAsí le pagan el voto asistido a los electores en Santa Rita, en la Costa Oriental del Lago en el Zulia #9Dic #EleccionesConcejales pic.twitter.com/keFCkF4Cly\n— Karen Aranguibel (@karanguibel) December 9, 2018\nLos aspirantes interpusieron el pasado mes de diciembre un recurso ante el Poder Judicial, para anular la elección de los candidatos oficialistas, alegando fraude electoral y ventajismo.\nEl pasado 9 de diciembre, Santa Rita se convirtió en centro de atención en Venezuela, al viralizarse un vídeo publicado porCaraota Digital,en el que se mostraba a los maduristas entregar bolsas del Clap a los electores por su voto; hecho que además fue denunciado ese mismo día por el alcalde opositor Alenis Guerrero y calificado como un delito electoral.\nLa sentencia, que se muestra a continuación dice que ahora el mismo TSJ le pondrá «el ojo» a esta elección por las contundentes pruebas presentadas ante el órgano judicial.\nCambian voto por bolsas de comida del Clap en el municipio Santa Rita del estado Zulia. El voto asistido abundó en los municipios de la región. pic.twitter.com/E1LOWB7xBp\n— Edwin Prieto Rosales (@Edwinpri) December 9, 2018\nAlimentosbolsas ClapconcejalesSanta RitaTSJvoto asistidoZulia


Gobierno y Farc discrepan sobre entrada en vigor de acuerdo de paz - Noticiero 90 Minutos\nEn una rueda de prensa celebrada en la ciudad de Villavicencio , el alto comisionado de paz, Sergio Jaramillo, dijo que “no hay ninguna confusión”, ya que se “inicia con la firma del acuerdo de paz”. En ese momento comenzaría el llamado “día D” o de inicio de la movilización de los integrantes de las …\nEn una rueda de prensa celebrada en la ciudad de Villavicencio , el alto comisionado de paz, Sergio Jaramillo, dijo que “no hay ninguna confusión”, ya que se “inicia con la firma del acuerdo de paz”.\n“De manera que en el momento en que el presidente de la República, Juan Manuel Santos, y el comandante de la FARC, ‘Timoleón Jiménez’, le pongan su firma al acuerdo formalmente termina el conflicto en Colombia, se inicia el cese al fuego y se acabó la guerra”, afirmó Jaramillo.\n“Se incluyó que ese acuerdo no entra en vigor sino hasta que haya sido refrendado por los colombianos, por lo que surge una duda de en qué momento entra en vigor el acuerdo”, destacó.\nPrevias : En el Cauca se preparan para recibir una comisión de La Habana\nSiguientes : Inicia en Cali el Festival Petronio Álvarez en su XX edición


Huawei abre un nuevo frente en la batalla tecnológica por el control de los smartphones – SuNoticiero\nHuawei abre un nuevo frente en la batalla tecnológica por el control de los smartphones\nHoy es una potencia mundial de la investigación. Cuando Huawei se lanzó al mercado en 2011 hubo escepticismo, pero despegó de forma excepcional y puede imponer un tercer OS en el mercado», opinó Stéphane Téral, especialista del IHS Markit.\nPero en el caso de Huawei, su mercado interno le da mucho peso, todas las aplicaciones chinas, WeChat, Alipay, etc, serán compatibles, eso da la posibilidad de un éxito muy creíble», agregó.\nDisponen de una plataforma de mil millones de usuarios potenciales para probar su OS, detectar rápidamente los errores y corregirlos, incitar a los desarrolladores a no alejarse de ese mercado, y luego atacar otro mercado», precisa Téral.\nMucho más que las características técnicas de un apartado, el OS es un factor de fidelización extremadamente fuerte, Apple por ejemplo se mantienen principalmente gracias a su iOS», señala.\nHay que tener en cuenta que muchos actores, no solo en China, ne estarán descontentos de disponer de una alternativa a Android», insiste Chevallier.


el blog de ÑAQUE: ¿INTEGRAMOS PRODUCCIÓN EDITORIAL Y DESARROLLO DIGITAL? · Estrategia de edición\n¿INTEGRAMOS PRODUCCIÓN EDITORIAL Y DESARROLLO DIGITAL? · Estrategia de edición\n¿INTEGRAMOS PRODUCCIÓN EDITORIAL Y DESARROLLO DIGITAL · Estrategia de edición\nLa producción editorial y el desarrollo digital pueden y deben combinarse.\nEsto implica una visión más allá de lo convencional para una editorial.\nHay un potencial enorme de integración para el acercamiento al lector.\nAlgunas ideas para una campaña de contenido: audiobook, trailerbook….. descargar un capítulo…….\nAudiobook · Los audiolibros son una opción realmente interesante para llegar al lector y más, para fidelizarlo.\nEl audiolibro nos permite hacer aflorar en el lector las emociones a través de otros sentidos.\nNos permite estar con el lector en momentos de la vida cotidiana: en el transporte, haciendo ejercicio… pasando a formar parte de su propia cotidianeidad.\nEs una forma de hacer que el libro entre en nuestras vidas, de crear el hábito por los libros, de acercarse al lector con lecturas de fragmentos, sus referencias, sus autores…\nBooktrailer · Se está convirtiendo en una estrategia realmente extraordinaria para atraer la atención del lector sobre un libro. Imágenes, música, fragmentos del texto leídos, visualizados…\nVideo y producción editorial, un ensamble realmente innovador.\nEs una forma muy dinámica de llegar al lector transmitiendo una imagen creativa e innovadora del sello editorial.\nUnas páginas del libro · La descarga gratuita de una páginas es la mejor forma de generar expectativas sobre el libro editado.\nEl deseo por terminar lo iniciado es una necesidad humana infranqueable que lleva inequívocamente al lector a tomar su decisión de compra.\nEsos son algunas ideas que, en cualquier caso no se deben articular de forma aislada, sino inexcusablemente integrarse en el marco de una estrategia efectiva en redes sociales.\nEsta estrategia debe incluir la presencia activa en distintas plataformas sociales, creando una comunidad, y por supuesto, es muy aconsejable complementarla con un blog que permita al sello editorial mostrar con profundidad el conocimiento sobre la materia que trate, dotando al lector de un valor intelectual más allá.\nSin duda una estrategia adecuada es el camino para establecer auténticos lazos entre sello editorial y lector.\nEtiquetas: ESTRATEGIA DE EDICIÓN, LIBROS, SOCIAL MEDIA


STAR insiste en la necesidad de proteger a los trabajadores con mayor incidencia de contagios | Rioja2.com\nSTAR insiste en la necesidad de proteger a los trabajadores con mayor incidencia de contagios\n"La no disponibilidad de los recursos suficientes para la máxima protección de los trabajadores sigue siendo un problema que nos preocupa".\nTras este periodo en el que la Administración ha tenido que adaptarse y establecer procedimientos para la organización de los centros y servicios ante una situación nueva y de tanta gravedad como es la provocada por el COVID-19, STAR recuerda que "no se debe bajar la guardia en ningún momento y debemos continuar día a día analizando esta situación que es además tan cambiante".\nSTAR subraya la necesidad de proteger a los profesionales para que el riesgo de contagio se minimice en beneficio tanto de los propios profesionales como de la población general. "Esto requiere especial atención a aquellas categorías con incidencias más altas en las que deben revisarse las medidas de protección de que disponen, accesibilidad a las mismas, cuestiones organizativas...etc.", apuntan.\nPara el sindicato, "la no disponibilidad de los recursos suficientes para la máxima protección de los trabajadores sigue siendo un problema que nos preocupa".\nTambién subrayado la importancia del establecimiento de protocolos y métodos de organización del trabajo que permita prevenir los contagios según las características y peculiaridades de cada centro y servicio determinado y de los usuarios a los que se presta servicio.\nSTAR insiste en que es "imprescindible y una necesidad la protección de los profesionales con riesgo de exposición al COVID-19, así como la realización de pruebas PCR a los mismos para asegurar así, tanto la protección de las trabajadoras y trabajadores, como la estabilización de plantillas en aras a procurar una atención adecuada a los usuarios de nuestros servicios públicos".


ANTENA 3 TV | Detenida en Madrid una mujer que actuaba como 'enlace' de las FARC en Europa\nDetenida en Madrid una mujer que actuaba como 'enlace' de las FARC en Europa\nLa detenida, de 39 años de edad y nacionalidad colombiana, estaba reclamada por las autoridades judiciales de su país.\nLa Policía Nacional ha detenido este martes en Madrid a una miembro de las Fuerzas Armadas Revolucionarias de Colombia (FARC) que ejercía labores de 'enlace' en Europa, poniendo en contacto a miembros de este grupo terrorista y facilitando su intervención en foros internacionales.\nSegún informa el Ministerio del Interior, la detenida, Leyla Yolita O.M., de 39 años y natural de Popayán-Cauca (Colombia), estaba reclamada por las autoridades judiciales del país suramericano por su pertenencia a la banda terrorista y la realización de actividades para las FARC.\nLas FARC es una de las organizaciones que figura, desde el año 2002, en la lista de grupos terroristas de la Unión Europea. El arresto de Leyla Yolita O.M., que ha tenido lugar a las 8:15 horas de hoy, se ha producido en el marco de la denominada 'Operación Cali' que instruye el juez de la Audiencia Nacional Pablo Ruz y en la que el pasado mes de octubre ya fueron detenidas más de cuarenta personas relacionadas con el blanqueo de más de 200 millones de euros procedentes del narcotráfico.


La Xunta incrementa la dotación anual para los centros públicos de infantil, primaria y secundaria - Faro de Vigo\nLa Xunta incrementa la dotación anual para los centros públicos de infantil, primaria y secundaria\nEl aumento será de un 5% para educación infantil y primaria y de un 3% para secundaria\neuropa press 21.02.2016 | 19:16\nLa Consellería de Cultura, Educación e Ordenación Universitaria ha aumentado en un promedio de un 5 por ciento la dotación económica anual para los gastos de funcionamiento de los centros públicos de educación infantil y primaria y un 3 por ciento para los de secundaria.\nAsí lo ha explicado la Consellería en un comunicado, en el que ha indicado que esta dotación presupuestaria comprenderá un total de 11,8 millones de euros para los centros de infantil y primaria y 29,7 millones de euros para los centros de secundaria. Tras la tramitación administrativa correspondiente, se hará efectiva esta cantidad.\nEn concreto, la adjudicación del importe variará en función de criterios como la cantidad de alumnado con la que cuenta el centro, su superficie, las enseñanzas que se imparten o características concretas de alguno de ellos.\nAl respecto, la Xunta ha señalado que esta acción responde a su intención de que la mejora de la situación económica se refleje "directamente" en el presupuesto del que disponen los centros para su funcionamiento.


SONDEO-Economía chilena habría crecido 1,2 pct en mayo tras débiles cifras sectoriales | Reuters\nJune 30, 2016 / 6:22 PM / 2 years ago\nSONDEO-Economía chilena habría crecido 1,2 pct en mayo tras débiles cifras sectoriales\nSANTIAGO, 30 jun (Reuters) - La actividad económica en Chile habría crecido un 1,2 por ciento en mayo, luego de un modesto desempeño de las manufacturas y una nueva contracción del clave sector minero, mostró el jueves un sondeo de Reuters.\nEl resultado para el Indicador Mensual de Actividad Económica (Imacec) del quinto mes es la mediana de respuestas de nueve analistas, cuyas estimaciones fluctuaron entre 0,6 y 2,1 por ciento. El promedio fue del 1,4 por ciento.\nLa esperada cifra del Imacec para mayo es antecedida por una expansión del 0,7 por ciento en abril, muy por debajo de lo que esperaba el mercado.\nEl Gobierno informó más temprano que la producción manufacturera subió un 2,1 por ciento interanual en mayo, apoyada en el positivo desempeño de sectores como fabricación de papel y de metales comunes, además de un favorable efecto calendario.\nEn contraste, la producción de cobre -del que Chile es el mayor proveedor mundial- anotó una baja interanual del 6,8 por ciento en el quinto mes.\nEn tanto, las ventas del comercio minorista subieron sólo un 0,6 por ciento interanual, mientras que las ventas de los supermercados cayeron un 1,9 por ciento.\nEl dato de Imacec de mayo será divulgado por el Banco Central el martes 5 de julio. (Reporte de Felipe Iturrieta. Editado por Fabián Andrés Cambero)


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Eliminación de antibióticos y óxido de zinc del pienso (2/2) - Artículos - 3tres3, la página del Cerdo\n¿Es tan importante la limpieza ?\nEste es a menudo un tema discutido, ¿como de limpia debería estar la transición antes de la entrada de los lechones? Hemos comparado la limpieza entre granjas que usaban o no usaban pienso medicado y los resultados fueron bastante sorprendentes. La carga de E. coli en las salas, comederos y bebederos de las granjas que usaban pienso medicado no eran tan distintas de las que no lo usaban. Sin embargo, las que lo usaban tenían claramente valores más elevados de resistencias a antibióticos y, a menudo, la resistencia era frente a los antibióticos que estaban usando.\nFigura 2. Niveles de E. coli y porcentaje de resistencias en bebederos, comederos, suelo, paredes y heces en granjas que usan o no antibióticos y óxido de zinc en el pienso.\nPor lo tanto, ¿tenemos que plantearnos como objetivo eliminar todas las bacterias durante la limpieza? Quizás no, seguramente se trata más de construir el ecosistema microbiano corrrecto en la granja. Igual que a menudo se hace referencia a la microbiota como un órgano de nuestro cuerpo, quizá la microbiota deba considerarse como parte de la granja. Cuando eliminamos el pienso medicado, estamos modificando la población microbiana de la granja y alcanzar un nuevo equilibrio siempre lleva un tiempo. Una limpieza y desinfección muy exhaustivas pueden abrir la puerta a cualquier cosa que venga con los lechones y entonces el único modo de controlarlo serán los antibióticos. El uso de probióticos en el ambiente puede ser una opción importante en el futuro. Y recuerda que estás usando agua para todos estos procesos, por lo tanto, hay que estar atentos a la calidad de esta agua.\nSe trata de un punto importante, por lo que queremos insistir. La mayoría de los ganaderos que no usan pienso medicado prestan mucha atención a los detalles cuando controlan temperaturas, ajustan la ventilación, etc. No confíes sólo en el equipamiento para hacer el trabajo. Controla la temperatura a lo largo del día y en distintas zonas de la nave. Dedica tiempo a conocer tus instalaciones y ver cómo se comportan los animales, ellos te mostrarán dónde están los problemas. Cómprate un termómetro de infrarrojos y echa un vistazo a tus salas. Valdrá la pena.\nPara los sistemas de producción que tienen los sitios 1 y 2 en localizaciones distintas, esto tiene una importancia especial. Incluso si los camiones tienen un buen control ambiental, los lechones sufrirán y las condiciones que encuentren en la transición son clave para una recuperación adecuada. Es, literalmente, tan estresante como el nacimiento, por lo que debemos tener el mismo cuidado con los lechones.\nFigura 2. Tener la sala lista antes de que lleguen los lechones y mantener todo el material ordenado y limpio marca una gran diferencia en cuanto a higiene, eficiencia y comodidad para los lechones.\nRevisa tu definición de Todo dentro/Todo fuera\nSí, lo sabemos, todo el mundo sabe qué quiere decir Todo dentro/Todo fuera. Pero vamos a verlo otra vez. Todo dentro/Todo fuera significa que tú:\nsacas a todos los lechones de la sala como un lote completo\nlimpias y desinfectas la sala y esperas para que el secado sea adecuado\nentras el siguiente lote.\nY ya está. El Todo dentro/Todo fuera no incluye un paso donde “llevamos los retrasados del lote anterior a esta otra sala”. Si lo estás haciendo, es mejor que no limpies. Le hemos dicho tantas veces a los trabajadores que la limpieza es tan importante que ellos (y a menudo nosotros) olvidan que el principal portador de enfermedades es el cerdo, no la sala.\nNos guste o no, hay dos puntos de los que tenemos que hablar: la edad al destete y el espacio disponible. No sólo se trata de cumplir con la legislación; si a los lechones les damos un poco más de espacio en la maternidad y en la transición y los dejamos 3-4 días extra con la cerda, puede suponer una gran diferencia. Económicamente puede parecer que no tenga sentido cuando lo leas pero, si lo pruebas, cambiarás de idea. Olvídate de lo que sucede en la transición y céntrate en el tiempo y el coste de llevar estos cerdos al peso de mercado. Fácilmente puedes ahorrarte una semana de engorde.\nEn resumen, no hay una fórmula mágica para deshacerse del pienso medicado con antibióticos o ZnO. Debemos afrontar la verdad: va a ser duro, caro y va a llevar tiempo y grandes dosis de trabajo en equipo. Habla con otros ganaderos, comparte tus experiencias, trabaja con tu veterinario/nutrólogo/consultor y oblígalos a encontrar la mejor información. Bioseguridad, higiene, control ambiental, vacunación, espacio… todos son importantes y no podemos decirte cuál es el más importante para tu granja. Lo que sí que podemos decirte es que en 3 años te estarás preguntando por qué no lo hiciste antes.\nTermómetro Infrarrojoref: 11350,26 €\nTermómetro de infrarrojosref: 251797,25 €\nTermómetro infrarrojo a distanciaref: 112138,00 €\nTermómetro infrarrojo sin contacto para medir la temperatura corporalref: 448458,80 €


Municipalidad de San Miguel » SAN MIGUEL INAUGURÓ TALLERES PRODUCTIVOS EN SEGURIDAD CIUDADANA\nEl alcalde Eduardo Bless, destacó que talleres servirán para mejorar la calidad del servicio en seguridad ciudadana.\nCon el propósito de fortalecer las estrategias en la lucha contra la inseguridad ciudadana en el distrito de San Miguel, el alcalde Eduardo Bless, inauguró el “Ciclo de Talleres Productivos para Mejorar la Prestación de Servicio a la Comunidad” dirigido a la Policía Nacional del Perú, Serenazgo y Juntas Vecinales.\nBless, destacó que estos talleres servirán para mejorar la calidad del servicio en seguridad ciudadana. Del mismo modo, reconoció y felicitó el trabajo integrado que se viene realizando.\nSeñaló que se trabajará con el mayor esmero para que San Miguel sea el mejor distrito seguro de Lima. En ese sentido, pidió un cambio de actitud a todos, “traten a los vecinos como si fueran sus padres, sus hijos o abuelos, que haya un mayor acercamiento con la población”, resaltó la autoridad edil.\nEn el evento estuvieron presentes, el Gerente de Seguridad Ciudadana, César Santa Cruz, el Cmdte. PNP Raúl Arellano-Comisario de Maranga y el Mayor PNP Hanner Horna- Comisario de San Miguel.\nPlan Vecindario Seguro\nPor su parte el Cmdte. PNP Raúl Arellano Ruiz, señaló que desde el 15 de octubre de 2015 a la fecha el “Plan Vecindario Seguro” viene obteniendo resultados positivos como la baja incidencia delictiva y la recuperación de la confianza ciudadana.\n“De manera conjunta la Policía Nacional y el Serenazgo de San Miguel han recuperado espacios públicos, ordenando el tránsito y apoyando en los trabajos de fiscalización”, señaló el Comandante Arellano.\nAsimismo sostuvo que son necesario los talleres de capacitación para consolidar los temas de seguridad y estar en un solo norte. “Somos un equipo, una familia con el mismo objetivo: acabar con la inseguridad del distrito”, añadió.


Microondas e leclerc - Comprar un Microondas\nEn la situacion del microondas e leclerc es recomendable no introducir envases de plástico ni de metal, ya que estos no son aptos para la utilización del electrodoméstico.\nDe este modo , si solo precisas un electrónico con el que poder calentar y descongelar de vez en cuando , puede que lo destacado para ti sea uno más barato.\nTe proporciona un diseño bien elegante que dejará que se ajuste con perfección a algún cocina ofertando un toque realmente único. Para 3 o bien más personas la capacidad ha de ser superior a los 21 litros.\nLos mejores precios Online encontrados de microondas e leclerc\nLos materiales con los que está fabricado impide que las ondas salgan, realizando que sea totalmente seguro de utilizar. Este punto está por demás mencionar puesto que si lees esto seguramente te interesa un modelo de estos. No obstante , cabe nombrar que hay de un más grande o menor tamaño según precises. Hay desde los 18 litros hasta los más grandes como el de 40 litros.\n¡Estate muy atento y no te olvides de nuestros lanzamientos por mes! Publicamos nuevas ofertas continuamente , ventas flash, liquidaciones, descuentos únicos para que puedas equipar tu hogar al costo más económico. Estás ante el repertorio de promociones y chollos asequibles más grande de la red, con costes súper bajos y con facilidades muy buenas en el momento de comprar en la tienda on-line.\nTenemos la posibilidad de cocinar, entre otras cosas , unas manzanas con algo de canela, una compota de pera, inclusive un melocotón troceado y posteriormente triturado con unas hojas de menta. Hay que tomar en cuenta que los comestibles con poca proporción de agua, como cereales o frutos secos, interactuaran menos con la radiación, por lo que no se calentarán tanto.


PLoS ONE: PSMA específicas Las células T CAR-Engineered Erradicar diseminada cáncer de próstata en preclínicos Models\nCrónica enfermedad > Cáncer > artículos del cáncer > PLoS ONE: PSMA específicas Las células T CAR-Engineered Erradicar diseminada cáncer de próstata en preclínicos Models\nPLoS ONE: PSMA específicas Las células T CAR-Engineered Erradicar diseminada cáncer de próstata en preclínicos Models\nintervenciones basadas en la inmunología se han propuesto como una posibilidad curativa prometedor para atacar eficazmente la enfermedad mínima residual postoperatoria y metastásica distante localizaciones de los tumores de próstata. Hemos desarrollado un receptor de antígeno quimérico (CAR) constructo de reconocimiento del antígeno humano específico de la próstata membrana (hPSMA), basada en una novela y mAb específicos de alta afinidad. Como un método de transferencia, se emplearon vectores de lentivirus de última generación (LV) que llevan un promotor bidireccional sintética capaz de robusta y coordinada expresión de la molécula de coche, y un gen informador de bioluminiscencia para permitir el seguimiento de las células T transgénicas después de\ntransferencia adoptiva. En general, hemos demostrado que la expresión de CAR-LV transducidas de manera eficiente a corto plazo activado PBMC, que a su vez fueron estimulados fácilmente para producir citoquinas y ejercer una actividad citotóxica relevante por acoplamiento con PSMA\n+ células de tumor de próstata. Tras\ntransferencia en ratones portadores de tumores, las células T CAR transducidas fueron capaces de erradicar por completo una neoplasia diseminada en la mayoría de los animales tratados, lo que apoya la traducción de este enfoque en el ámbito clínico.\nVisto: Zuccolotto G, G Fracasso, Merlo A, IM Montagner, Rondina M, Bobisse S, et al. CAR-Engineered (2014) PSMA específica las células T Erradicar diseminada cáncer de próstata en modelos preclínicos. PLoS ONE 9 (10): e109427. doi: 10.1371 /journal.pone.0109427\nEditor: Natalia Lapteva, Baylor College of Medicine, Estados Unidos de América\nRecibido: 27 de mayo de 2014; Aceptado: 1 de septiembre de 2014; Publicado: 3 Octubre 2014\nDerechos de Autor © 2014 Zuccolotto et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan\nFinanciación:. Este trabajo fue apoyado en parte por subvenciones de la Asociación Italiana para la Investigación del Cáncer (AIRC, IG-13121; y el Programa Especial Molecular Oncología Clínica 5 por mille ID 10016 a AR) y la Universidad de Padua, "Progetti Strategici di Ateneo 2011" a AR. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito\nterapia celular adoptiva con sin modificar y\ncélulas T expandidas ha demostrado ser eficaz contra diferentes entidades tumorales, en particular, el melanoma y tumores asociados a EBV . Hoy en día, la modificación genética de las células T puede conferir nuevas propiedades de metas tumorales para los linfocitos de origen natural, superando así la dependencia de los componentes del sistema inmune endógeno.\nMientras que la transducción con TCR Ag-específica sólo puede redirigir las células T la actividad en función de las mismas características de reconocimiento, la tecnología quimérico receptor de antígeno (CAR) tiene la potencialidad de dotar a las células T con las características ventajosas de un anticuerpo, es decir, la especificidad, la afinidad y la posibilidad de apuntar a los antígenos no proteicos . Por otra parte, en un coche molécula única proporciona algunas medidas para contrarrestar las estrategias de evasión inmune del tumor: alivia el reconocimiento y la actividad de restricción de MHC y la expresión de las células T, y puede retransmitir señales coestimuladoras a través de sus dominios intracelulares\nLa eficacia terapéutica de la CAR. Las células T ya han sido reportados en pacientes, en particular contra la leucemia linfocítica crónica (CLL) y la leucemia linfoblástica aguda (LLA)  -  con resultados muy prometedores en términos de supervivencia libre de enfermedad y hematológica completa y respuestas moleculares incluso en sujetos que no todos los tratamientos estándares anteriores. Sin embargo, neoplasias hematológicas, en particular los de origen de células B, se pueden considerar como un objetivo ideal para los enfoques inmunoterapéuticos . De hecho, estas células malignas naturalmente proporcionan ligandos del receptor coestimuladoras y comparten los mismos compartimentos fisiológicos con células T adoptiva transferidos. Finalmente, la eliminación de las células B normales se asocia con efectos adversos potencialmente mortales no, que pueden ser clínicamente administrados con la administración de inmunoglobulina intravenosa.\nA la inversa, el tratamiento de tumores sólidos sigue siendo un reto importante y debe ser mejorado tanto en términos de la eficacia clínica y la seguridad. éxitos parciales se experimentaron en contra neuroblastoma utilizando células T CAR-GD2 específicas sin régimen de acondicionamiento previo, en la práctica ausencia de efectos secundarios , . Por el contrario, no hay respuestas clínicas se registraron con la infusión de células T redirigidas contra el receptor de folato en pacientes con carcinoma de ovario , ni contra carboxi-anhidrasa IX (CAIX) en pacientes con carcinoma de células renales , a pesar de la relevante "en la -target, fuera de tumor "toxicidad evidente en el último caso. Las lecciones aprendidas de estas experiencias indican que la definición del antígeno diana en cuestiones de seguridad, y la capacidad de persistencia y la localización tumoral de células infundidas son especialmente críticos para el éxito del tratamiento.\nHemos abordado algunas de estas preguntas por la orientación de próstata las células cancerosas del tumor con las células T modificadas para expresar una determinada CAR para el antígeno de membrana específico de la próstata humano (hPSMA).\ntumor de próstata representa una entidad clínica grave, estimando 233.000 nuevos casos y 29.480 muertes en los Estados Unidos en 2014 , en la actualidad sólo con tratamientos paliativos para refractario hormonal y formas metastásicas . Para estos pacientes, la inmunoterapia ha demostrado ser una opción válida basada en la vacunación con células tumorales prostáticas modificadas enteros (GVAX ) o PBMC que presentan un antígeno prostático relevante (Sipuleucel-T ). Con respecto a los enfoques de terapia celular adoptiva, los estudios preclínicos han reportado resultados alentadores , ,  y la evaluación clínica está experimentando (número de ensayos clínicos NCT01140373, NCT01929239, NCT00664196; www.clinicaltrials.gov). En este escenario, PSMA puede representar una diana adecuada y de hecho es actualmente explotado tanto para fines terapéuticos y de formación de imágenes. En particular, los niveles de expresión de PSMA diferencian tejidos prostáticos normales y cancerosas, y en paralelo la puntuación de Gleason de cáncer de próstata . Curiosamente, la expresión de PSMA implica neovasculatura de varias entidades tumorales, previendo así un efecto antiangiogénico adicional.\nA continuación, se presenta el diseño del coche contra hPSMA basada en una novela y una alta afinidad específica mAb , y la fenotípica y caracterización funcional de T-cuerpo-hPSMA tanto\n. Para la transducción, se utilizó un vector lentiviral que lleva un promotor bidireccional que impulsa la expresión simultánea de la molécula de CAR y un gen informador de bioluminiscencia. Esto permitió que el seguimiento de las células T infundidas y por lo tanto la correlación directa de los resultados terapéuticos con la capacidad de persistencia y homing de las células T. En general, las células T CAR transducidas no sólo ejercen una actividad terapéutica loco-regional relevante, pero también erradicado por completo una neoplasia diseminada, en la mayoría de los animales tratados. Estos resultados apoyan firmemente la traducción de este enfoque en el ámbito clínico\nLas siguientes líneas celulares se utilizaron en este estudio:. LNCaP y PC3 , próstata humano líneas celulares de carcinoma; Jurkat, leucemia linfoblástica T humana y 293 T, línea de células de riñón embrionario humano . La línea celular PC3-PIP, que expresan establemente PSMA humano (hPSMA)  fue proporcionado generosamente por el Dr. Warren Heston; LNCaP línea celular se obtuvo de la American Type Culture Collection (ATCC, Rockville, MD, EE.UU.). LNCaP, las células PC3, PC3-PIP y Jurkat se mantuvieron en medio RPMI 1640 (EuroClone, Milán, Italia), mientras que el medio DMEM (Biochrom AG, Berlín, Alemania) se utilizó para 293 células T; ambos medios se complementaron con 10% de suero bovino fetal (FBS, Gibco BRL Paisley, Reino Unido), 2 mM L-glutamina, HEPES 10 mM, 100 U /ml de penicilina, y 100 U /ml de estreptomicina (todos de Lonza, BioWhittaker, Basilea , Suiza), a 37 ° C en un 5% de CO\ngeneración CAR anti-hPSMA\nel coche contra el antígeno hPSMA contiene la secuencia completa de la lucha contra la hPSMA scFv derivado del hibridoma anti-hPSMA D2B . Esta secuencia se clonó en el sitio de clonación múltiple (MCS) del vector pSecTag2A (Invitrogen, San Giuliano Milanese, Milán, Italia). El MCS del plásmido pSecTag2A está comprendido entre dos secuencias: en 5 ', la Ig kappa murino secuencia líder de la cadena ligera V-J2-C, y en el 3' de la secuencia de etiqueta Myc. Por lo tanto, se utilizó la secuencia líder-ScFv-myc para la generación de CAR. El fragmento de Leader-ScFv-myc se amplificó por PCR y se insertó en el constructo pBS SKII (Invitrogen). Una parte de la CD28 (bases 438-759) y el dominio intracelular CD3 (227-563 región), ambos obtenidos a partir de ADNc de VEB específicos CD4\n+ T células , se fusionaron mediante PCR y a continuación, inserta en el vector pBS SKII, aguas abajo del fragmento de Leader-ScFv-myc. Este vector fue secuenciado en el Centro Ricerca Interdipartimentale Biotecnologie innovador (CRIBI) de la Universidad de Padua, Italia. La secuencia CAR anti-hPSMA finalmente se subclonó en el vector pcDNA3.1 (Invitrogen). Para comprobar la capacidad para conducir la expresión de la molécula de CAR en la membrana, se utilizó este vector para transfectar células 293 T utilizando Lipofectamine 2000 (Invitrogen), de acuerdo con las instrucciones del fabricante.\nLV plásmidos y preparación lentiviral\nse utilizaron los siguientes vectores de empaquetamiento lentiviral: pMDLg /pRRE, pRSV- Rev, pMD2.VSVG y pADVANTAGE, todo proporcionado amablemente por el Dr. L. Naldini (San Raffaele, Milán, Italia). El vector de transferencia#945.pCCL.sin.cPPT.SV40ployA.eGFP.minCMV.hPGK.deltaLNGFR.Wpre es un (SIN) del VIH derivado de vector de auto-inactivación , que lleva una minCMVPGK divergente promotor bidireccional dirige la expresión simultánea de dos genes en la orientación antisentido. Los vectores de transferencia utilizados en este estudio llevan a la secuencia CAR anti-hPSMA (obtenido de vector PMA-T-cuerpo) bajo el control del promotor hPGK, y la eGFP (mejorado proteína verde fluorescente) o luciferasa de luciérnaga (Fluc) genes indicadores bajo el control de minCMV. vector PMA-T-cuerpo y la secuencia de Fluc se sintetizaron por GeneArt, Life Technologies (Regensburg, Alemania). producción Lentiviral en 293 células T se ha descrito anteriormente . Un vector lentiviral que codifica sólo para Fluc  se utilizó para la transducción de células PC3-PIP.\n293 células T, no transfectadas o transfectadas con pcDNA3.1-CAR, se lisaron en tampón que contiene 50 mM Tris HCl pH 6,8, 2% de dodecilsulfato de sodio (SDS), 2% β-mercaptoetanol, 10% de glicerol, y 0,1 hasta 0,05% azul de bromofenol (al de Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EE.UU. ) Las proteínas se separaron sobre 10% de geles de SDS-PAGE y se transfirieron a una membrana de PVDF (Immobilion-P, Millipore, Billerica, MA, EE.UU.). La membrana se bloqueó en 5% de leche desnatada (Sigma-Aldrich) en TBS y 0,05% de Tween 20, seguido de incubación con el anticuerpo primario (mAb de ratón, 1:1000, Sigma-Aldrich Myc anti-c-) durante una hora a temperatura ambiente. Después de tres a 10 minutos lavados en PBS-Tween, cabra conjugado con HRP anti-IgG de ratón anticuerpo secundario (diluido 1:10000, Amersham, Milán, Italia) se añadió durante una hora a temperatura ambiente en la leche. La membrana se desarrolló utilizando la SuperSignal West Pico (Pierce, Rockford, IL, EE.UU.) y se visualizó mediante quimioluminiscencia. intensidad de la señal se midió utilizando un sistema de detección de quimioluminiscencia Bio-Rad XRS (Grupo de Ciencias de la Vida, Milán, Italia).\nJurkat transducción de células\nPara evaluar la funcionalidad de los vectores de LV, se incubaron células Jurkat con el sobrenadante viral (CAR hPSMA /eGFP LV o hPSMA /luciferasa LV CAR) durante 15 horas en presencia de 8 mg /ml sulfato de protamina (Sigma-Aldrich). La citometría de flujo y la bioluminiscencia (BLI) análisis se llevaron a cabo en diferentes puntos de tiempo después de transducción para evaluar la expresión CAR y eGFP o actividad luciferasa.\nPara generar T-organismos, las PBMC de donantes sanos fueron activados 48 horas con OKT-3 (50 ng /ml; Ortho Biotech Inc, Raritan, NJ, EE.UU.) y la IL-2 (hIL-2, 300 U /ml; Proleukin; Novartis Pharmaceuticals, Horsham, Reino Unido ). Las células T fueron infectadas con el sobrenadante viral durante 18 horas a 37 ° C y 5% de CO\n2, en presencia de sulfato de protamina (40 mg /ml; Sigma-Aldrich) y hIL-2 (500 U /ml ). El sobrenadante entonces fue cambiado con medio completo fresco que contiene hIL-2 (100 U /ml). Setenta y dos horas más tarde, las PBMC se analizaron para el coche y la expresión de eGFP, y la actividad de luciferasa. PBMC se conoce como T-cuerpo-hPSMA /eGFP y T-cuerpo-hPSMA /Fluc cuando transducidas con hPSMA /eGFP LV automóvil o en hPSMA /luciferasa LV, respectivamente. T-cuerpos fueron re-estimularon una vez a la semana con irradiado (60 Gy) PC3-PIP a una relación de 10:01. medio completo con IL-2 fresca se reponía dos veces por semana\ncélulas que expresan CAR se marcaron con el (9E10 clon; Sigma-Aldrich) anti-c-myc mAb. o la control de isotipo (IgG1 de ratón, Southern Biotech, Milán, Italia), seguido de un anticuerpo secundario (de cabra conjugado con PE anti-IgG de ratón; Southern Biotech). marcadores de la superficie celular se marcaron usando APC-FITC o anticuerpos conjugados con PE a CD4, CD8, CD57, CD27, CD28, CD62L (BioLegend, San Diego, CA, EE.UU.), CCR7 (eBioscience, San Diego, CA, EE.UU.) y los controles de isotipo relativos adquiridos de las mismas empresas.\nLa actividad citotóxica de T-cuerpo-hPSMA /eGFP y T-cuerpo-hPSMA /Fluc se evaluó en una norma 4 h\nensayo de liberación de 51Cr como se informó anteriormente , en diferentes puntos de tiempo después de la transducción. PC3, PC3 y LNCaP-PIP se utilizaron como células diana.\nPara evaluar la producción de IFN-γ, IFN-γ un Conjunto de detección ELISA (Thermo Scientific, Rockford, IL, se utilizó EE.UU.), de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Brevemente, 1 × 10\n6 T Las células fueron sembradas con 1 x 10\n6 células diana (PC3 o PC3-PIP) en pocillos por triplicado en placas de 96 pocillos de fondo redondo. la secreción de citocinas se midió después de 12 horas de incubación con t-cuerpos en diferentes etapas de la diferenciación. Controles positivos y negativos estuvieron representados por transducido PBMC y T-cuerpos sin estimular o se trataron con 40 ng /ml de PMA y 4 mg /ml de ionomicina (Sigma-Aldrich), respectivamente. Los sobrenadantes se analizaron entonces en un X4 VICTOR (PerkinElmer, Zaventem, Bélgica).\nexperimentos incluyeron 6 a 8 semanas de edad, machos SCID, Rag2\n- /- /? c\n- /- y ratones NOD /SCID (Charles River Laboratories, Calco, Como, Italia), que se encuentra en el animal libre de patógenos específicos las instalaciones del Departamento de Cirugía, Oncología y Gastroenterología, Universidad de Padua (Italia). Los animales se alojaron con un ciclo de luz de 12 horas /oscuro, de la temperatura (22 +/- 1 ° C) y humedad (55 +/- 5%) ambiente controlada. Todos los ratones se les permitió libre acceso a agua y una dieta de mantenimiento. Todas las jaulas alojan hasta 6 animales y virutas de madera contenidos y con un tubo de cartón para el enriquecimiento ambiental. Los procedimientos que implican animales y su cuidado estaban en conformidad con las directrices institucionales que cumplen con las leyes nacionales e internacionales y las políticas (DL 116/92 y circulares de aplicación posteriores), y el protocolo experimental (n ° 7/2012) fue aprobado por el comité de ética local de la Universidad de Padua (CEASA). Durante\nexperimentos, los animales en todos los grupos experimentales fueron examinados diariamente para que una disminución de la actividad física y otros signos de la enfermedad; animales gravemente enfermos (pérdida de peso inferior o igual a 15%, letargo, pelo rizado, baja temperatura) fueron sacrificados por sobredosis de dióxido de carbono.\nWinn ensayo se llevó a cabo mediante la inyección por vía subcutánea los ratones SCID con 5 × 10\n6 PC3 o células tumorales PC3-PIP por animal, mezclado con cualquiera de las células T-cuerpo-hPSMA /eGFP RPMI o (5 × 10\n6 /ratón; 6 ratones /grupo). El volumen del tumor se calculó de acuerdo con la siguiente ecuación: V (mm\n3) = (d\n2 * D) /2, donde d (mm) y D (mm) son las y los mayores diámetros tumorales perpendiculares más pequeños, respectivamente, según la evaluación de medición del calibre.\nPara evaluar el potencial terapéutico del tratamiento loco-regional, se inyectó a los ratones SCID con 5 × 10\n6 células PC3-PIP. Cuando los tumores se vuelven palpables sobre cuatro días más tarde, los ratones fueron asignados al azar al grupo de control (que se dejaron sin tratar) o el grupo experimental (se les inyectó por vía intralesional con las células T CAR transducidas a las 72 horas después de la transducción; 6 ratones /grupo). Se analizaron dos resultados primarios: el crecimiento tumoral se controló con el tiempo por medición del calibre y la supervivencia global fue grabado\nEl tratamiento sistémico de los tumores de próstata subcutáneos\nPara evaluar la actividad terapéutica de la T sistémica.. sc-cuerpo administración, se inyectó a los ratones SCID con 5 × 10\n6 células PC3-PIP y 4 días después recibieron i.v. T-cuerpo-hPSMA /Fluc (10 × 10\n6 /ratón) a las 72 horas o 5-6 semanas después de transducción (n = 6); animales no tratados sirvieron como grupo de control (n = 6). biodistribución de células T se evaluó mediante imágenes de bioluminiscencia (BLI) en las mismas condiciones, excepto que los ratones fueron inyectados con células PC3-PIP o tumorales PC3 en el flanco derecho e izquierdo, respectivamente.\nmodelo de tumor de próstata diseminado.\nPara configurar un modelo de tumor de próstata diseminado, SCID, Rag2\n- /- y ratones NOD /IV se inyectaron ratones SCID con diferentes números (que va de 1 × 10\n5 a 5 × 10\n6) de las células PC3-PIP-Fluc transducidas (6 ratones /grupo). prendimiento y crecimiento del tumor fueron evaluados por BLI. Por otra parte, SCID libre de tumor, Rag2\n- /- y ratones NOD /SCID se inyectaron con 20 × 10\n6 T-cuerpo-hPSMA /Fluc, para evaluar su suerte por iv BLI (6 ratones /grupo).\nexperimentos de inmunoterapia adoptiva.\nEn los experimentos de inmunoterapia adoptiva, se inyectaron bioluminiscente PC3-PIP en ratones NOD /SCID y Rag2\n- /- ratones (1 x 10\n5 /ratón). Cuatro días más tarde, los animales fueron asignados al azar al grupo de control (que se dejaron sin tratar) o el grupo experimental, en el que recibieron i.v. 20 × 10\n6 T-cuerpo-hPSMA /eGFP por 3 veces en una semana (6 ratones /grupo). El crecimiento tumoral se controló semanalmente por BLI, y se registró la supervivencia.\nQuantitative BLI es una poderosa tecnología que permite obtener varias imágenes longitudinalmente y, al mismo tiempo, para reducir los animales números. imágenes de bioluminiscencia se recogieron con el sistema de imágenes IVIS Lumina II (PerkinElmer). De diez a 15 minutos antes de formación de imágenes, los animales fueron anestesiados con isoflurano /oxígeno y i.p. administrado con 150 mg /kg de D-luciferina (PerkinElmer) en PBS. Tres ratones fueron imágenes simultáneamente con tiempos de exposición de 0,5 a 3 min. Un campo de 12 cm × 12 de vista y bajo, medio, o altos niveles de agrupación se aplicaron para maximizar la sensibilidad y resolución espacial. imágenes ventrales se obtuvieron para cada animal y se cuantificaron a través de la región de interés (ROI). Living Software Image (PerkinElmer) se utilizó para adquirir y cuantificar los conjuntos de datos de imágenes de bioluminiscencia.\nevaluación citofluorimétrico de expresión hPSMA en el crecimiento de tumores\ncélulas tumorales suspensiones se obtuvieron por digestión enzimática con 270 unidades /ml de DNasa, 35 U /ml de hialuronidasa, y /tampón de colagenasa ml 200 U (todos de Sigma-Aldrich). Después de una incubación de 30 min a 37 ° C, se pasaron las células a través de un filtro de células de 70 micras (BD Biosciences, San Jose, CA, EE.UU.). Las muestras fueron teñidas a 4 ° C con un ratón anti-hPSMA mAb  seguido de un anti-IgG1 de ratón anticuerpo secundario conjugado con PE (BioLegend) y se analizaron en un citómetro de (BD) citómetro de flujo. Los datos se evaluaron con el software FlowJo (TreeStar Inc., Olten, Suiza).\nmétodo de Kaplan-Meier de productos límite se realizó para estimar las curvas de supervivencia, y la comparación de la supervivencia entre grupos se realizó mediante la prueba de log-rank. Los análisis estadísticos se realizaron con el Sigmaplot (versión 12.3) paquete estadístico.\nConstrucción y desarrollo de un LV bidireccional eficiente para la expresión del coche anti-hPSMA\nA CAR secuencia fue diseñado que codifica los siguientes componentes en-marco de 5 'a 3' extremos (Fig 1A.): una secuencia líder, el anticuerpo de cadena sencilla (scFv) del anticuerpo IgGD2B nuevo anti-hPSMA , la secuencia de la etiqueta c-myc, y la molécula CD28 coestimuladora a la secuencia de CD3. Decidimos explotar este nuevo anti-PSMA scFv (scFvD2B) para la construcción de nuestro coche, debido a sus características muy atractivas, en particular, la afinidad nanomolar para el objetivo que es similar a la que se evidencia por todo el anticuerpo J591  . Además, nuestra scFvD2B muestra alta especificidad y identifica un epítopo diferente del reconocido por el anticuerpo J591, según la evaluación de los experimentos de competición realizadas con radio-inmunoligandos o anticuerpos marcados con biotina ( y datos no presentados).\n(A) anti-hPSMA mapa CAR. CE: dominio extracelular; TM: dominio transmembrana; IC: dominio intracelular. (B) cytofluorimetric perfil de expresión CAR en transfectadas las células T 293. 293 T células fueron transfectadas con secuencia CAR teniendo pcDNA3.1 vector y se analizaron por citometría de flujo después de 24 horas (línea oscura). Las células no transfectadas (trama gris) sirvieron como control. (C) la expresión del coche según lo evaluado por Western Blot a las 24 horas (línea 1) y 7 días (línea 2) publicar 293 transfección de células T. Los controles negativos fueron el medio solo (línea 3) y 293 no transfectadas las células T (línea 4). Línea 5, marcadores de peso molecular. mapa (D) lineal del vector viral recombinante que contiene el promotor bidireccional minCMVPGK (22). En particular, el gen informador (eGFP o luciferasa) está bajo el control del promotor minCMV, mientras que el gen CAR está bajo control del promotor hPGK. (E) Transducción de células Jurkat con LV CAR anti-hPSMA /eGFP. Co-expresión de c-myc y eGFP en células Jurkat transducidas-LV, como se evaluó por citometría de flujo. gráfico de puntos informa de los eventos cerrados en las células viables totales; más de 90% de las células co-expresan tanto c-myc y eGFP. (F) Transducción de células Jurkat con LV CAR anti-hPSMA /luciferasa.\n, la expresión de c-myc (negro) en las células Jurkat a 72 h después de transducción, según lo evaluado por citometría de flujo. parcela gris representa el control de isotipo. Las células Jurkat\n, transducidas-LV Evaluación de la actividad luciferasa en (2 × 10\n5 /pocillo) por BLI.\nPara evaluar la capacidad de la construcción de conducir la expresión de un receptor que se monta correctamente en la membrana de la célula, la secuencia CAR anti-hPSMA se clonó en el vector pcDNA3.1 y se usó el plásmido resultante para la transfección transitoria de células 293 T. En diferentes puntos de tiempo a partir de entonces, la expresión del receptor quimérico se evaluó por análisis de transferencia Western y cytofluorimetric (Fig. 1B y 1C, respectivamente), utilizando el mAb anti-c-myc. Resultados revelaron que el coche fue montado correctamente en la membrana y tenía el peso molecular esperado (aproximadamente 60 kDa); expresión CAR ya era detectable 24 horas después de la transfección, a desaparecer rápidamente los próximos días debido a la falta de una etapa de selección (Fig. 1C). Posteriormente, la secuencia CAR se insertó en un LV que lleva un promotor bidireccional que permite la transcripción de un gen indicador (eGFP o Fluc) desde el promotor mínimo aguas arriba minCMV, sin afectar a la expresión aguas abajo de la CAR anti-hPSMA a partir del promotor hPGK eficiente (Fig . 1D). Para evaluar la funcionalidad de los vectores de lentivirus, las células Jurkat fueron transducidas con LV CAR hPSMA /eGFP y LV CAR hPSMA /Fluc. CAR resultó ser altamente expresado ya 72 horas después de la transducción, como se demuestra por el alto porcentaje de c-myc\n+ células detectadas por citometría de flujo análisis (Fig. 1E y 1F). En particular, las células que expresan CAR-eran más de 90% cuando transducidas con LV CAR hPSMA /eGFP (Fig. 1E) y más de 60% cuando se utiliza LV CAR hPSMA /Fluc (Fig. 1F,\n). En particular, los vectores de LV bidireccional aparecieron para conducir la expresión de cualquiera de los CAR y los genes indicadores con una eficiencia muy equilibrado, como se demuestra por la alta intensidad de señal de eGFP (Fig. 1E) y la actividad de la luciferasa relevante (Fig. 1F,\ncaracterización fenotípica de las poblaciones de células T transducidas CAR\nPara la generación de las poblaciones de células T que expresan CAR anti-hPSMA, se desarrolló un protocolo de rápida expansión . La hora óptima infección se estableció después de 48 horas de la activación con OKT3, ya que en este punto de tiempo se obtuvo el mayor porcentaje de células T que expresan CAR (Fig. 2A,\n), y un fenotipo menos diferenciadas , según la evaluación de la alta expresión de CD27, CD28 y CD62L marcadores (Fig. 2A,\n). Posteriormente, el protocolo de expansión implicó la re-estimulación semanal con células PC3-PIP que permitió una proliferación rápida y sostenida de las poblaciones Fluc tanto T-cuerpo-hPSMA /eGFP y T-cuerpo-hPSMA /(Fig. 2A,\n(A) Puesta en marcha de protocolo de transducción y la cinética de crecimiento.\nizquierda, las PBMC se activaron con OKT3 en el tiempo 0 y transducidas de forma concomitante (TD0), o después de 48 h (Td2) o 72 horas (h) Td3. Citometría de flujo análisis de la expresión etiqueta c-myc se realizó 72 horas después de la infección.\nEl panel central y los informes de la expresión de CD27, CD28 y CD62L en las tres condiciones diferentes de activación /infección reportados en el panel\nPanel derecho, España Expansión de T-cuerpo-hPSMA /Fluc y T-cuerpo-hPSMA /eGFP transducidas después de la activación de 48 horas en respuesta a la re-estimulación semanal con células PC3-PIP. No transducidas PBMC se utilizaron como control. (B) y la expresión del fenotipo CAR en las células T transducidas a la estimulación.\n, la expresión de marcadores de superficie en T-cuerpo anti-hPSMA /Fluc en diferentes puntos de tiempo (3, 11 y 18 días) después de transducción, tal como se evaluó mediante citometría de flujo. Los datos son representativos de 3 experimentos independientes. La superposición de los resultados se obtuvieron en T-cuerpo anti-hPSMA /eGFP.\nPanel derecho, España porcentaje de c-myc\n+ células en poblaciones de células T transducidas-eGFP LV CAR hPSMA /Fluc y LV CAR hPSMA /en diferentes puntos temporales después de transducción. La Figura muestra la media +/- SD de al menos tres experimentos independientes. (C) Cinética de subconjuntos CD4 y CD8 en poblaciones de células T transducidas. La expresión de los marcadores CD4 y CD8 en c-myc\n+ - cerrada T-cuerpo-hPSMA /eGFP\ny T-cuerpo-hPSMA /Fluc (\npanel de la derecha)\npoblaciones en diferentes puntos de tiempo después de transducción, según lo evaluado por citometría de flujo. Los datos provienen de un experimento representativo de tres que produjo resultados similares.\nPara definir mejor el estado de diferenciación de los linfocitos T CAR transducidas en el período posterior a la infección durante la re-estimulaciones antigénicas, expresión de diferentes marcadores de superficie (CD62L, CD27, CD28, CCR7, CD57) se evaluó mediante análisis cytofluorimetric. Setenta y dos horas después de la transducción, el perfil emergente fue esencialmente de células T temprano efectoras, como se muestra por la alta expresión de CD62L, CD27 y CD28, la presencia de células CCR7 positivos y la baja expresión de CD57 (Fig. 2B,\n). Después de re-estimulaciones con el antígeno, las células T de memoria adquirieron un fenotipo efector intermedio con la baja modulación progresiva de CD62L, CD28 y CCR7 y un ligero aumento en la expresión de CD57 (Fig. 2B,\n). Curiosamente, mientras que el encuentro posterior con el antígeno condujo a la expansión de la población CAR-expresión (Fig. 2B,\n), una dicotomía se pudo observar entre la expansión subconjuntos de células T. De hecho, mientras que la expresión CAR era casi igual dentro de la CD4\n+ y CD8\n+ T poblaciones de células inmediatamente después de la infección, la re-estimulación antigénica determinó la acumulación progresiva de la CD8\n+ solamente subconjunto de células T, que casi completamente sobrepuso CD4\n+ T células por mes uno después de la transducción (Fig. 2C).\ncaracterización funcional de las células T que expresan CAR\nexpresión CAR proporcionado la población transducida con la capacidad de reconocer el antígeno hPSMA en la superficie de líneas de células de tumor de próstata, y para mediar una citotoxicidad alta y específica (Fig. 3A). De hecho, tanto el T-cuerpo-hPSMA /Fluc y poblaciones T-cuerpo-hPSMA /eGFP lisaron las células PC3 transfectadas con hPSMA sin dañar la contraparte antígeno-negativas; que es más importante, sino que también eran capaces de reconocer las células diana LNCaP que albergan el antígeno natural hPSMA. La citotoxicidad fue ya evidente, aunque a niveles bajos, 3 días después de la transducción y el aumento en los niveles máximos justo después de una sola ronda de reestimulación antígeno, que se mantiene constante a partir de entonces hasta 2 meses después de la infección. Aparte de ejercer una actividad citotóxica relevante, las células T CAR transducidas en diferentes etapas de la diferenciación también producen altos niveles de IFN-γ en respuesta a las células tumorales hPSMA que expresan (Fig. 3B y 3C), pero no contra las células de control negativo hPSMA. Como control negativo, las células T no infectadas no produjeron IFN-γ cuando se co-cultivaron con células PC3 ingeniería genética para expresar el antígeno hPSMA superficie.\n(A) actividad lítica de T-cuerpo-hPSMA /eGFP y T -cuerpo-hPSMA /Fluc. La citotoxicidad se analizó a las 3, 11 y 60 días después de la transducción; Se han usado PC3, PC3-PIP y LNCaP células como células diana. Untransduced PBMC sirvió como control negativo. En la esquina superior izquierda de cada panel de los porcentajes de c-myc\nse reportan + células T. La figura muestra la media +/- SD de 4 experimentos independientes. (B) la secreción de IFN-γ a la estimulación de antígeno. la producción de IFN-γ se analizó en diferentes puntos de tiempo después de la transducción de PBMC mediante la estimulación de T-cuerpo-hPSMA /Fluc con PC3-PIP hPSMA\n+ o PC3 hPSMA\n- líneas celulares de cáncer. T-organismos no estimuladas o tratadas con PMA /ionomicina representados los controles negativo y positivo, respectivamente. Se obtuvieron resultados similares con T-cuerpo-hPSMA /eGFP. (C) la expresión de c-myc en T-cuerpo-hPSMA /poblaciones Fluc probado para la producción de IFN-γ.\nAnálisis de la eficacia terapéutica de la administración de anti-hPSMA T-cuerpo contra los tumores de próstata locales\neficacia terapéutica de las células T CAR transducidas en las diferentes etapas de diferenciación (72 horas o 5 semanas después de la transducción) se evaluó inicialmente utilizando un ensayo de Winn (Fig. 4A). En particular, cuando eran células tumorales PC3-PIP co-inyectados con T-cuerpo-hPSMA /eGFP no se observó crecimiento tumoral (Fig. 4A,\n), independientemente de la etapa de diferenciación de T-cuerpos . Por otro lado, la transferencia de células T no impactó significativamente el crecimiento de las células tumorales negativas hPSMA-PC3 (Fig. 4A,\n(A) Ensayo de Winn. PC3-PIP (\n) y PC3 (\nTarjetas telefónicas panel derecho) se inocularon por vía subcutánea células tumorales en ratones SCID, solo o mezclado 01:01 con T-cuerpo-hPSMA /eGFP en flancos opuestos del mismo animal. El crecimiento tumoral se controló con el tiempo por la medición de la pinza.\nPLOS ONE: Potencial terapéutico de la Traducción del inhibidor Silvestrol en cáncer hepatocelular\nExtracto Fondo & amp; Objetivos la síntesis de\n? ¿Qué es el cáncer de piel Una condición en la\nPatient: Doctor, estoy viendo sangre en las heces.\nPLOS ONE: Canales TRPM8 Ion diferencialmente modular la proliferación y Ciclo Celular distribución de las células normales y cancerosas de la próstata\nExtracto La sobreexpresión del canal permeable a\nPuede exposición a la radiación causa de la leucemia\n? 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