Ghostman Af Roger Hobbs → Køb bogen billigt her\nGhostman - Roger Hobbs - Bog\n'Folk ser det, de tror de ser.' Jack er den intelligente bankrøver, en enspænder og fikser, som har specialiseret sig i at forsvinde. Han er en såkaldt Ghostman. Han har gennem mange års øvelse lært sig at skifte udseende og identitet og kan derfor lynhurtigt forvandle sig til et helt andet menneske. Han er manden, der under de store high-performance kup sørger for, at alle spor forsvinder, og at tavlen viskes ren. Men et ambitiøst bankrøveri i Kuala Lumpur kikser, og Jack får skylden. Da bagmanden, en despotisk masterminder ved navn Marcus, flere år senere opsøger Jack i sit skjul, tyder alt på at alvorlige problemer er under opsejling i underverden.\nOmslagsgrafiker: Frederik Lindgaard\nFotograf: Joshua Malik Photography\nFakta om Ghostman\nGhostman, Bøger, Bog\nHos os prioriterer vi sikkerheden utrolig højt, og vi ser den, som det aller vigtigste område ved online handel. For at få den bedste garanti for sikkerheden ved betaling online, har vi opnået at få NETS til at godkende vores løsning for Internetbetaling. Så online køb og betaling hos os er ensbetydende med fuld sikkerhed.\nGucca.dk har 30 dages fuld returret, helt uafhængig af hvilke varer du måtte have købt hos os. Kort sagt, såfremt du ønsker at fortryde købet, kan du sende din vare retur til os, og derefter vil vi sørge for, at dine penge bliver refunderet. Før du sender returvaren tilbage, er det en fordel, at tage kontakt til os først.\nVi ved, at du er utålmodighed efter at få din vare, og vi skruer derfor op for leveringshastigheden, så varen kommer sikkert og hurtigt frem til dig. Hvis vi er lagerførende, så vil du som regel få varen tilsendt indenfor 1-2 hverdage. Bemærk, at du kan se den nøjagtige lagerstatus på den individuelle vare. Har du spørgsmål til leveringstiden eller lagerstatus, er du velkommen til at tage fat i os.\nHos Gucca.dk har du mange forskellige betalingsmuligheder at vælge iblandt. Den betalingsform der passer bedst til dig, er selvfølgelig den du bør vælge. Lige meget hvilken betalingsform, du vælger - så kan du altid føle dig sikker og tryg. Her finder du alle vores betalingsmuligheder. Husk at pengene først hæves fra din bankkonto, når vi sender varen til dig.\nHvis du i forbindelse med dit besøg på Gucca.dk har spørgsmål eller møder udfordringer, er du naturligvis altid velkommen til at skrive eller ringe til os. Imellem klokken 10-15 på hverdage sidder vi klar på e-mail og ved telefonerne, og vi er altid parat til at hjælpe dig - med godt humør og et smil.\nEfter du har bestilt dine varer, kan du altid tracke din forsendelse, og vide hvornår den ankommer. Når købet er helt fuldendt, kan du efterfølgende logge ind på din egen ordreside. Fra ordresiden kan du følge med i, hvor langt pakken er kommet. Du får leveringsinformation via mail, når din forsendelse forlader vores lager og er på vej til dig.\nDin anmeldelse af Ghostman\nproduct_stock_yes product_offer_no product_preorder_no\tproduct_buyable_yes product_group_bog path_bog_forside path_bog_bøger path_bog_skønlitteratur path_bog_ghostman


Chromatin Isolation by RNA Purification (ChIRP) | Protocol (Translated to Danish)\nChirp er en hidtil ukendt og hurtig teknik til at kortlægge genomiske bindingssteder lange kodende RNA'er (lncRNAs). Metoden benytter sig af de særlige anti-sense-tagsten oligonukleotider at tillade optælling af lncRNA-bundne genomiske sites.\nLange noncoding RNA er vigtige regulatorer af kromatin stater for vigtige biologiske processer såsom dosering kompensation, prægning, og udviklingsmæssige genekspression 1,2,3,4,5,6,7. Den nylige opdagelse af tusindvis af lncRNAs i samarbejde med specifikke kromatin ændring komplekser, såsom Polycomb Undertrykkende Complex 2 (PRC2), der medierer histon H3 lysin 27 trimethylation (H3K27me3), foreslår roller, for mange lncRNAs i forvaltningen af kromatin stater i et gen-specifik mode 8,9. Mens nogle lncRNAs menes at virke i cis for tilstødende gener, andre lncRNAs arbejder i trans for at regulere fjernt beliggende gener. For eksempel er Drosophila lncRNAs roX1 og roX2 binder mange regioner på X-kromosomet af mandlige celler og kritisk for dosering erstatning 10,11. Imidlertid er de nøjagtige placeringer af deres bindingssteder ikke kendt med høj opløsning. Tilsvarende kan humant lncRNA HOTAIR påvirke PRC2 belægning på hundreds af gener genom-dækkende 3,12,13, men hvordan specificitet opnås, er uklart. LncRNAs kan også tjene som modulære stilladser at rekruttere samling af flere protein komplekser. Den klassiske trans-virkende RNA stillads er tert RNA, der tjener som template og stativ til telomerase komplekset 14, HOTAIR kan også tjene som et stillads til PRC2 og H3K4 demethylase kompleks 13.\nTidligere undersøgelser kortlægning RNA belægning på chromatin har afsløret væsentlige indsigt 15,16, men kun ved en enkelt genlocus ad gangen. De belægning steder fleste lncRNAs er ikke kendt, og de roller lncRNAs i kromatin forordning er blevet det meste udledes de indirekte effekter af lncRNA forstyrrelse. Ligesom kromatin immunofældning efterfulgt af microarray eller dyb sekventering (Chip-chip eller chip-seq, henholdsvis) har i høj grad forbedret vores forståelse af protein-DNA interaktioner på en genomisk skala, her viser vi en recently offentliggjort strategi for at kortlægge lange RNA belægning genom-dækkende i høj opløsning 17. Denne fremgangsmåde, chromatin Isolation af RNA Oprensning (chirp) (figur 1), er baseret på affiniteten indfangning af mål lncRNA: chromatin kompleks af fliser antisense-oligoer, der genererer derefter et kort over genomiske bindingssteder med en opløsning af flere hundrede baser med høj følsomhed og lav baggrund. Chirp er anvendelig til mange lncRNAs fordi udformningen af affinitets-prober er ligetil givet RNA-sekvens og kræver ingen viden om RNA struktur eller funktionelle domæner.\nDesign anti-sense DNA fliseopsætning prober til selektiv udtagning af RNA-målet af chirp.\nDesign anti-sense-oligo-sonder ved hjælp af online-sonden designer hos singlemoleculefish.com 18.\nAnvendes følgende parametre: antal prober = en probe / 100 bp af RNA længde, 2) Target GC% = 45, 3) oligonucleotid længde = 20, 4) afstand længde = 60-80. Break RNA ind i segmenter, hvis for længe for designeren. Udelade regioner gentagelser eller omfattende homologi.\nOrdens anti-sense DNA-prober med BiotinTEG ved 3-prime enden.\nMærkeprober efter deres positioner langs RNA. Adskille dem i to puljer, således at "selv" pool indeholder alle prober nummerering 2, 4, 6, osv., og den "ulige" pulje indeholder prober nummerering 1, 3, 5 osv. fortyndes pulje af prober til 100 uM koncentration og Opbevar ved -20 ° C.\nAlle eksperimenter skal udføres ved hjælpbegge puljer, der tjener som interne kontroller for hinanden. Fast RNA-afhængige signal ville være til stede fra begge puljer, mens probe-specifikke støj vil være unikt for hver pulje. Dette gælder for både Chirp-qPCR og Chirp-ff.\n2. Harvest Celler\nIndsamle cellerne, der skal anvendes til chirp eksperiment.\nDyrke celler i vævskulturplader eller-kolber til konfluens. Skylning med phosphatbufret saltvand (PBS) gang Trypsinisér. Dæmpning trypsin med> 2x volumen medier pipette op og ned for at fjerne celler og resuspenderes i en enkelt cellesuspension. Overfør alle medier og resuspenderede celler i 50 ml Falcon rør. 20 millioner celler er typisk tilstrækkelig til en chirp prøve.\nSpinde cellerne ved 800RCF i 4 minutter. Aspirer medier og resuspender 40 millioner celler i 40 ml PBS, kombinere rør om nødvendigt. Spinde cellerne ved 800RCF i 4 minutter. Dekanteres PBS forsigtigt aspireres i en vinkel den resterende væske.\n3. Cross-link celler og indsamle cellebundfaldet\nTværbinding opsamlet celler med glutaraldehyd for at bevare RNA-chromatin interaktioner og forberede cellepellet.\nUdfør alle trin ved stuetemperatur.\nForbered 1% glutaraldehyd i stuetemperatur PBS. Fremstilling af 10 ml pr 10 millioner celler (0,4 ml 25% glutaraldehyd lager + 9,6 ml PBS). Glutaraldehyd skal anvendes frisk.\nTryk bunden af Falcon-rør til at løsne pellets. Resuspender cellepelleten i 1% glutaraldehyd, startende med et lille volumen for at undgå klumper, og derefter supplere op til fuld volumen. Invert at blande. Tværbinding af 10 min ved stuetemperatur på en ende-til-ende rysteapparat eller rotator.\nStandse tværbindingsreaktionen med 1/10th volumen 1,25 M glycin ved stuetemperatur i 5 min.\nRotere med 2000RCF i 5 min. Aspirer supernatanten og vask pelleten med 20 ml afkølet PBS gang centrifugering ved 2000RCF i 5 min.\nAspirer og resuspender wforaskede, tværbundet pellet med 1 ml afkølet PBS pr 20 millioner celler. Overfør hver ml til et Eppendorf-rør og centrifugering ved 2000RCF i 3 minutter ved 4 ° C. Fjern så meget PBS som muligt med pipettespidsen omhyggeligt.\nLynfryser cellepellets i flydende nitrogen og opbevares ved -80 ° C på ubestemt tid.\nLyse tværbundne celler til fremstilling af cellelysatet.\nOptø frosne cellepellets ved stuetemperatur. Tryk vanskeligt at fjerne og blande cellepelleten. Vågeblus pelleten ved 2000RCF i 3 minutter ved 4 ° C. Anvende en skarp 10 ul pipettespidsen at fjerne eventuel resterende PBS.\nPå en elektronisk vægt (nøjagtighed på 1 mg) tara massen af et tomt Eppendorf rør (vores rør vejer 1.060 gram meget konsekvent). Vejes hver pellet og registrere sin vægt. En fuld 15 cm skål af krydsbundne HeLa celler typisk vejer 100 mg.\nSupplement lyseringsbuffer (10X massen af pelleten, fx 1 ml til 100 mg) med Fresh proteasehæmmer, PMSF og Superase-in (se vedlagte buffer liste). Bland godt.\nTilsættes 10X volumen suppleret lyseringsbuffer til hvert rør og resuspender pelleten. For små pellets <25 mg, resuspenderes i 250 pi suppleret lysisbuffer. Suspension skal være glat. Hvis ikke, opdele suspension i 500 pi alikvoter og anvende en motoriseret pellet mixer til at bryde op klumper. Fortsæt straks til lydbehandling.\nForskydning DNA ved sonikering tværbundne cellelysater.\nSonikeres cellelysat i Bioruptor i 15 ml Falcon-rør. Anvende <1,5 ml lysat i hvert rør, og for hurtigere sonikering, ikke mere end to rør sonikeres ad gangen.\nSonikeres i et 4 ° C vandbad ved højeste indstilling med 30 sekunder på, 45 sekunder fra impulsintervaller. Se lysat hver 30 min. Fortsætter sonikering, indtil cellelysatet ikke længere uklar. Dette kan tage så lidt som 30 minutter og så mange som 4 timer. Antalletaf rør, vil det prøvevolumen, badtemperaturen, og perioden af lydbehandling tid påvirker hvor lang tager. Rør vil sandsynligvis sonikeres ved forskellige hastigheder, så samle dem sammen hver 30 min og videredistribuere ind originale rør for at sikre homogenitet. Bemærk: glutaraldehyd-tværbundet celler tager betydeligt længere tid at sonikeres end formaldehyd ækvivalenter.\nNår lysatet bliver klar, overføres 5 pi lysat til en frisk Eppendorf-rør. Tilsættes 90 uL DNA Protease K (PK) puffer (se puffer liste) og 5 ul PK. Vortex at blande og spin ned kortvarigt. Inkuber i 45 minutter ved 50 ° C.\nEkstrahere DNA med Qiagen PCR Purification Kit. Eluatet DNA i 30 uL Qiagen elueringsbuffer (EB) og kontrol DNA størrelse på 1% agarosegel. Hvis størstedelen af DNA'et smear er 100-500 bp, sonikering er fuldstændig. Hvis ikke, fortsætter med at sonikeres.\nCentrifugeres sonikerede prøver ved 16100RCF i 10 minutter ved 4 ° C. Kombiner supernatanter og alikvote i 1 ml prøver og flash-frost i flydende nitrogen. Opbevares ved -80 ° C.\nHybridisering af biotinylerede DNA-prober til RNA og isolere bundet kromatin.\nTø rør af kromatin ved stuetemperatur.\nForberede hybridiseringsbuffer (se puffer listen fremstilling af 2 ml per ml af kromatin). Vortex for at blande.\nFor en typisk chirp prøve ved anvendelse af 1 ml af lysatet, fjernes 10 pi for RNA INPUT og 10 uL for DNA input og anbringes i Eppendorf-rør. Hold på is indtil videre brug.\nOverføre 1 ml chromatin til 15 ml Falcon-rør. Tilsættes 2 mL hybridiseringsbuffer til hvert rør. For samlede volumen <1,5 ml, skal du bruge Eppendorfrør.\nTø prober ved stuetemperatur. Nanodrop sonder at kontrollere beløbet, hvis du ikke har brugt det i lang tid (100 uM sonder bør spec ~ 500-600 ng / ul anvendes enkelt DNA indstilling). Tilsættes passende rumfang af prober specifikke rør (100 pmol probe pr 1 ml chromatin, 1 pi 100 pmol / ul probe per 1 ml kromatin).Bland godt. Inkuber ved 37 ° C i 4 timer med rystning.\nMed 20 min resterende for hybridisering, fremstille C-1 magnetiske perler (opbevaret ved 4 ° C). Bruger 100 pi 100 pmol af prober. Vaskes med 1 ml usuppleret lyseringsbuffer tre gange med DynaMag-2 magnet strimmel til at adskille perlerne fra buffer.\nResuspender perler i oprindelige volumen lysisbuffer, supplerer med frisk PMSF, PI og Superase-in. Efter 4 timer hybridisering reaktionen er fuldstændig, tilsættes 100 ul perler til hvert rør. Bland godt. Inkuber ved 37 ° C i 30 minutter under omrystning.\nForberede Vaskebuffer (5 ml per prøve). Vortex for at blande. Præ-opvarmes til 37 ° C. Tilsættes PMSF før brug.\nVaskes perlerne med 1 ml vaskebuffer fem gange. Den første vask, anvendes DynaMag-15 magnetisk strimmel til separate perler, dekanteres og resuspender i 1 ml vaskebuffer. Overfør volumen på 1,5 ml Eppendorf-rør. Inkuber ved 37 ° C under omrystning i 5 minutter.\nPå de efterfølgende vaske, spin ned hvert rør på et minicentrifugeSatte prøve på DynaMag-2 magnetstribe til 1 min. Dekanteres, skal du aftørre eventuelle dryp med en Kimwipe, resuspender i 1 ml vaskebuffer. Inkuber ved 37 ° C under omrystning i 5 minutter. Gentag for fem i alt vaske.\nEndelig vask resuspenderes perlerne godt. Fjern 100 uL og der er afsat til RNA isolering. Reserve 900 uL for DNA-fraktionen. Læg alle rør på DynaMag-2 magnetstribe og fjern vaskebuffer. Spin alle rør ned kort, placere dem på magnet strimmel. Fjerne den sidste bit i vaskebuffer fuldstændigt med en skarp 10 pi pipettespids.\nEkstrahere RNA-fraktion fra Chirp prøver til kvantificering af QRT-PCR.\nTag 100 ul perle prøver og 10 uL RNA INPUT prøve. Tilsættes 85 uL RNA PK-puffer pH 7,0 til RNA INPUT. Resuspender perlerne i 95 ul RNA PK pH 7,0. Tilsæt 5 uL Proteinease K og inkuber ved 50 ° C i 45 min med ende-til-ende rystning.\nKort spin ned alle rør ogkoge prøver i 10 minutter på varmeblok ved 95 ° C.\nChill prøver på is, tilsættes 500 ul TRIzol, vortex kraftigt i 10 sek. Inkuber ved stuetemperatur i 10 min. Opbevares ved -80 ° C eller fortsæt til trin 4.\nTilsæt 100 pi chloroform TRIzol behandlede prøver. Vortex kraftigt i 10 sek. Rotere med 16100RCF på en bordcentrifuge i 15 minutter ved 4 ° C.\nFjern ~ 400 uL vandig supernatant, undgå organisk og interface.\nTilsæt 600 uL (1,5 volumen) 100% ethanol og bland godt. Spin prøven gennem MIRNeasy minisøjler. Vaskes 1 gang med rWT (MIRNeasy mini kit), 2x med RPE ifølge producentens protokol. Eluering med 30 ul nuclease-frit H2O (NFH H2O).\nBehandle RNA eluatet med DNA-fri ifølge producentens protokol. Efter at reaktionen er fuldstændig, opvarmes prøven i 15 minutter ved 65 ° C til fuldstændig inaktivering af eventuelt resterende DNase.\nAnvende 1 pi RNA isolering per brønd for QRT-PCR-analyse for at bekræfte lncRNAhentning. GAPDH er ofte anvendt som en negativ kontrol.\nEkstrahere DNA fraktion fra Chirp prøver til identifikation ved sekventering eller kvantificering af qPCR.\nFremstille DNA elueringsbuffer (se puffer liste), 150 gl pr prøve, herunder DNA INPUT.\nTilsættes en 0μL RNase A (10 mg / ml) og 10 pi RNase H (10 U / ul) per ml af DNA elueringspuffer og vortex at blande.\nResuspendere hver prøve af perler i 150 pi DNA elueringsbuffer med RNaser. (Resuspender DNA INPUT i 140 uL) Inkuber ved 37 ° C i 30 minutter under omrystning.\nSeparate perler og supernatanten på DynaMag-2 magnetisk strimmel. Fjerne supernatanten, og der tilsættes til mærkede rør.\nFremstilling af en anden portion af DNA elueringsbuffer med 10 pi RNase A (10 mg / ml) og RNaseH (10 U / ul) nøjagtigt som det gøres i 8,2). Tilsæt 150 pi af hver prøve (herunder DNA INPUT), inkuber og fjern supernatanten. Saml alle supernatant (skuldred er ~ 300 uL).\nTilsæt 15 uL PK til hver prøve. Inkuber ved 50 ° C i 45 minutter under omrystning.\nPre-spin ned gule fase-lock gel-rør (5PRIME). Overføre DNA-prøver til faselåste gelrør, og der tilsættes 300 pi PhOH: chloroform: isoamylalkohol per prøve. Omrystes kraftigt i 10 minutter, og spin ned på en bordcentrifuge ved 16100RCF i 5 minutter ved 4 ° C. Tager vandig fra toppen (~ 300 uL). Tilsæt 3 uL GlycoBlue, 30 uL NaOAc, og 900 pi 100% EtOH. Bland godt og opbevares ved -20 ° C natten over.\nSpin prøver ved 16100RCF i 30 minutter ved 4 ° C.\nDekanteres supernatanten omhyggeligt. Tilsæt 1 ml 70% EtOH og vortex at blande. Rotere med 16100RCF i 5 min. Fjerne supernatanten ved pipette. Lufttørre i 1min. Resuspender i 30 uL EB.\nDNA-prøver er klar til analyse af qPCR eller tilberedning af high-throughput sekventering biblioteker pr Illumina protokol.\nFigur 1 Figur 2 viser berigelsen af human telomerase RNA (tert) fra HeLa-celler end GAPDH, en rigelig cellulært RNA, der tjener som en negativ kontrol. Størstedelen af tert RNA'er (~ 88%) til stede i cellen, blev trukket ned ved at udføre chirp, hvorimod kun 0,46% af GAPDH-RNA blev udtaget, viser en berigelsesfaktor på ~ 200 fold. Uspecifikke prober såsom prober rettet LacZ-RNA, som ikke udtrykkes i mammale celler (figur 2), kan anvendes som yderligere negative kontroller.\nDNA-regioner forventes at binde målet lncRNA typisk beriget med negative regioner, når målt ved qPCR. Figur 3 viser qPCR validering af fire HOTAIR-bundne steder i primære humane forhudsfibroblaster, at vi bestemt ved at udføre Chirp-seq i den samme cellelinje, mens tert og GAPDH DNA sites selvRVE som negativ kontrol regioner. Både "selv" og "ulige" sonde sætter gav sammenlignelige berigelse af forventede HOTAIR-bundne steder end negative regioner, et adelsmærke for ægte lncRNA-bindingssteder.\nHigh-throughput sekventering af Chirp beriget DNA giver et globalt kort over lncRNA-bindingssteder. Drosophila lncRNA roX2 vides at interagere med X-kromosomet på en måde, der er nødvendig for dosering erstatning. Figur 4 viser roX2 binding profil over en del af X-kromosomet. Både "selv" og "mærkelige" prøver er blevet sekventeret og deres unikke lyde er blevet fjernet for at frembringe et spor af overlappende signaler. Hver "peak" her viser en kraftig sted roX2 binding. Den komplette spor og over roX2 målgener er blevet beskrevet i Chu et al. 2011 17.\nFigur 1. Rutediagram af chirp procedure. Chromatin tværbindes til lncRNA: proteinaddukter in vivo Biotinylerede flisebelægning prober hybridiseret til målsekvensen lncRNA og chromatin komplekser oprenses under anvendelse af magnetiske streptavidin-perler, efterfulgt af strenge vaske.. Vi eluerede lncRNA bundne DNA eller proteiner med en cocktail af RNase A og H. En formodet lncRNA bindingssekvens er skematiseret i orange. Tidligere offentliggjort i Chu et al. 2011. 17\nFigur 2. Chirp beriger for menneskers tert-RNA. Tert-asDNA prober hente ~ 88% af cellulær tert RNA og upåviselig GAPDH. LacZ-asDNA prober anvendes som negative kontroller og hente hverken RNA'er. Gennemsnit ± SD er vist. Tidligere offentliggjort i Chu et al. 2011. 17\nFigur 3. HOTAIR chirp-qPCR i primær human tilEskin fibroblaster. NFKBIA, HOXD3-4 SERINC5 og ABCA2 er områder, der interagerer med HOTAIR. tert og GAPDH tjente som negative kontroller. Gennemsnit ± SD er vist. Tidligere offentliggjort i Chu et al. 2011. 17\nFigur 4. Chirp-seq data for roX2 RNA i SL2 Drosophila-celler. "Selv" og "ulige" blev sekventeret separat, deres data fusionere kun afspejler fælles toppe i både. Den fusionerede spor vises. Tidligere offentliggjort i Chu et al. 2011. 17\nHer beskrev Chirp-ff, en metode til kortlægning in vivo lncRNA bindingssteder genom-dækkende. De vigtigste parametre for succes er delte puljer af fliser oligonukleotidproberne og glutaraldehyd tværbindings. Udformningen af affinitets-prober er ligetil givet RNA-sekvens og ikke kræver forudgående kendskab til RNA struktur eller funktionelle domæner. Vores succes med roX2, tert, og HOTAIR - tre ret forskellige RNA i to arter - tyder på, at Chirp-seq sandsynligvis generaliseres til mange lncRNAs. Som med alle eksperimenter, der er pleje og korrekt kontrol forpligtet til at fortolke resultaterne. Forskellige lncRNA kan kræve titrering af betingelser, og velovervejet ændring af betingelser, såsom udvælgelse af forskellige affinitets-prober eller tværbindere, kan fremhæve de forskellige aspekter af RNA-chromatin interaktioner. Ligesom Chip-seq, er ikke alle bindende begivenheder nødvendigvis funktionelle, og kræver yderligere undersøgelser at fastslå de biologiske konsekvenser af RNA occupancy på kromatin. Ikke desto mindre forventer vi mange interessante anvendelser af denne teknologi for forskere fra andre kromatin-associerede lncRNAs, som nu nummer i tusindvis 8,9. Ligesom Chip-seq har åbnet døren for genom-dækkende undersøgelser af DNA-protein interaktioner, kan Chirp-seq undersøgelser af "RNA Interactome" afsløre mange nye veje i biologi.\nC. Chu og HY Chang er navngivet som opfindere på en patentansøgning baseret på denne metode.\nVi takker T. Hung, MC. Tsai, O. Manor, E. Segal, M. Kuroda, T. Swigut, og I. Shestopalov for drøftelserne. Understøttet af agenturet for Videnskab, Teknologi og Forskning i Singapore (CC), NIH R01-CA118750 og R01-HG004361 (HYC), og California Institute for regenerativ medicin (HYC). HYC er en Early Career Scientist af Howard Hughes Medical Institute.


Erfa 210 stålreol: 240 x 50 x 60 cm - 6 hylder. Lave priser\nDu er her: Hjem \_ Reoler \_ Stålreoler \_ Stålreol 240cm x 505cm x 60cm 6 hylder\n(Varenummer stb5f2400606) Har du brug for hjælp?\nErfa 210 galvaniseret stålreol med 6 hylder\nVores galvaniserede stålreol er produceret i vores populære Erfa 210 reolsystem. Den kraftige stålreol har 6 hylder, hvilket sikrer dig en holdbar og stabil arkiv- og lagerreol. Reolen er produceret i galvaniseret stål med mange hylder, som hver har en bæreevne på op til 100 kg. Vores hyldeforstærkere kan hæve dette til 160 kg per hylde.\nVi producerer og fremstiller den galvaniserede stålreol på vores danske fabrik i Herlev. Derfor kan du altid regne med og stole på den kraftige kvalitet. Samtidigt kan vi levere hurtigt til din hoveddør. Med en Erfa 210 galvaniseret stålreol har du skaffet dig en lager- eller arkivreol i den næste årrække. Stålreolen kan leveres med pulverlakeret overflade i alle RAL-farver.\nMål på Erfa 210 reol: 240 cm x 505 cm x 60 cm - 5 hylder\nDen galvaniserede Erfa 210 stålreol leveres som samlesæt. Men hvis du følger vores monteringsvejledning, som du kan finde ude til venstre under billederne af reolen, kan du hurtigt om simpelt samle den holdbare Erfa 210 stålreol.


Vil du vide mere? Bare læs vores guide og fortsæt til en af vores anbefalede casinoer, der tilbyder bankoverførsler på vores liste for at agere Blackjack-bordet eller give det spilleautomat, hvordan du kun har ønsket at agere i lang tid! Hvad er bankoverførsel? En bankoverførsel nogle gange kaldet kreditoverførsel er en måde at overføre gysser fra en enhed til en øvrig — eller fra en spiller indtil et casino og omvendt. Bankoverførsler kan foretages via din lokale bank ellers et specialiseret kontor og online kasino brugere tilbyder en af de nemmeste metoder til banker, hvilket gør kompagni så populære og tiltrækkende for spillere overalt. Disse gebyrer varierer afhængigt af din valgte bank, og det er meget vigtigt, at du altid gennemgår de relevante vilkår — vores tæsk overførsel Online Casino anmeldelse hjælper dig her. Hvordan indbetaler du på et online casino? Se vores omfattende franarre over vurderede og gennemgåede casinoer nedenfor for at vælge en der passer til dine behov.\nEt advokatkontor pr. den tekniske aftenskole. Esbjerg-Fanø Tæsk novice firma. Banken ovis advokatfirma pr. købmandsforretning Hans Pedersens eje på Torvet. Forleden gik aldeles affældig mand ind på rådhuset [Ting- plus Arresthuset] pr. den tillid at det var et udvandrerkontor pga. Dengang døren var opladt gik andrik ind plus styrtebad omkring aldeles 65-billet indtil Amerika til sønnen. Dengang andrik blev gjort årvågen på fejltagelsen, var det lige før andrik ikke troede på berigtigelsen - Skiltet anhænger ja udenfor.\nDer barriere indbetales min. Bonussen barriere omsættes 10x, inden den kan udbetales. Spil ansvarligt, på. Giroindbetaling plus afkast skal omsættes 10x inden der kan udbetales, gyldigt pr.


Guess - Dameur - Rund 36 Mm - Stål - Sort Guld → Køb billigt her - Gucca.dk\nHer får du et smart og unikt ur fra Guess, til kvinden der godt kan lide at tilføje den ekstra detalje til sin hverdag! Dette flotte ur fra Guess er lavet af det fineste stål samt behageligt... Læs mere.\nHer får du et smart og unikt ur fra Guess, til kvinden der godt kan lide at tilføje den ekstra detalje til sin hverdag!\nDette flotte ur fra Guess er lavet af det fineste stål samt behageligt silikone, hvis urglas er af mineral. Uret kommer i en yndig, sort farve, og ligeledes urskiven, samt guld.\nUret er designet unikt og feminint, og det vil passe til enhver lejlighed, uanset om det er den normale hverdag eller måske den specielle aften. Du bestemmer selv!\nDette ur har en vandtæthed på 5 atm, med flere funktioner, og æske medfølger.\nNår man handler på Internettet er sikkerheden uhyre vigtig, og det er selvfølgelig noget, Gucca vægter højt. NETS er din garanti for sikker betaling på Internettet, og vores løsning for Internetbetaling er selvfølgelig NETS godkendt. Så når du handler og foretager betaling via nettet hos Gucca, er det sikkert.\nNår vi siger 30 dages returret, så mener vi det naturligvis på alle vores varer. Det betyder kort sagt, at hvis du har fortrudt købet, eller af andre årsager alligevel ikke måtte ønske varen, kan du uden videre returnere din vare til os, herefter vil du få dine penge refunderet. Du kan med fordel kontakte os, før du vælger at sende dit produkt retur til os.\nAt du som kunde hos Gucca får leveret din vare både hurtigt og sikkert, er essentielt for os. Helt konkret modtager du varen indenfor 1-2 hverdage, hvis varen er på lager. Der vil aldrig være tvivl om lagerstatus, for det fremgår inden, du bestiller varen. Vi er klar på e-mail og ved telefonen, hvis du er i tvivl om leveringstiden og lagerstatus.\nNår du køber hos Gucca, er det muligt at vælge mellem mange forskellige muligheder for betaling. Du gør bare brug af den betalingsform, der passer lige til dig. Du er altid garanteret en sikker og tryg handel, og det er uanset hvilken betalingsmetode du ender med at benytte. Se hvilke betalingsmuligheder du har hvis du benytter førnævnte link. Husk at pengene først trækkes fra din konto, den samme dag vi sender dit produkt - såfremt du gør brug af betalingskort.\nHvis der opstår problemer eller spørgsmål, når du besøger vores webshop, er du selvfølgelig velkommen til at tage fat i os. Kundeservice er åben for henvendelser alle hverdage imellem 10-15, og med godt humør og et smil tager vi imod din henvendelse.\nVi giver dig selvfølgelig mulighed for at tracke din forsendelse hele vejen til den er dig i hænde. Du kan få adgang til din personlige ordreside, så snart købet er færdiggjort. På ordresiden kan du følge med i, hvornår vi afsender din forsendelse. Vi sender en e-mail, lige så snart vi har sendt din pakke.\nDin anmeldelse af Guess - Dameur - Rund 36 Mm - Stål - Sort Guld\nproduct_stock_yes product_offer_no product_preorder_no\tproduct_buyable_yes product_group_armbåndsure path__forside path__andreafdelinger path__armbåndsure path__dameure path__armbåndsure path__dameure path__guess path__guessdameurrund36mmstålsortguld


Stephen King bliver musikalsk - Avisen.dk\nStephen King bliver musikalsk\nHvem ved? Måske er der en musiker gemt i Stephen King. (Foto: Foto: Pinguino/ Creative Commons Attribution 2.0/Wikimedia)\nDen amerikanske gysermester laver sin egen rockmusical og deltager på nyt konceptalbum.\n7. januar 2010 14:23\nDen legendariske gyserforfatter Stephen King er begyndt at vise større og større interesse for musikken.\nOg musikerne ser ud til at gengælde interessen. En lang række af de største musikalske stjerner har i hvert fald meldt sig klar til at medvirke i Stephen Kings rockmusical 'Ghost Brothers of Darkland County', som han har skrevet sammen med musikeren John Mellencamp.\nIndtil videre har Sheryl Crow, Elvis Costello og bokseren Joe Frazier bekræftet, at de deltager i projektet, og nu har den 73-årige skuespiller og countrylegende Kris Kristofferson ifølge BT bekræftet, at han skal spille hovedrollen i musicalen, som efter planen skal sættes op i Atlanta.\nMen en rockmusical er dog ikke Stephen Kings eneste musikalske eventyr. Forfatteren har netop færdiggjort en række optagelser, som skal indgå i musikerens Shooter Jennings kommende konceptalbum 'Black Ribbons'.\nPå albummet lægger Stephen King stemme til en radiovært, som kun har én time tilbage i æteren og bruger tiden på at fortælle lytterne, hvad der er galt i USA.\nStar Trek-instruktør vil lave King-film


Norden skal satse på bæredygtighed, frivillighed og trivsel, når de byder på værtsskabet for EM 2024 eller 2028. Det besluttede de nordiske fodboldformænd på et møde i dag.\nNår der skal spilles EM-fodbold i 2024 eller 2028 bør det ske med kampe og arrangementer fordelt over hele Norden – og med et tydeligt fokus på frivilliges indsats for fodbold, bæredygtighed både økonomisk og miljømæssigt og fodboldens betydning for trivsel blandt børn.\nDet besluttede formændene for de nordiske fodboldformænd, der i dag holdt møde om blandt andet at byde på værtsskabet for EM i 2024 eller 2028. De nordiske formænd ønsker en fælles nordisk ansøgning om værtsskabet, så kampene bliver fordelt på tværs af Danmark, Sverige, Norge og Finland, mens der også skal være arrangementer i Island og Færøerne. Samtidig overvejer de nordiske formænd at søge om fælles værtsskab for en anden UEFA- eller FIFA-turneringfor at afprøve den fælles afvikling forud for buddet på EM-værtsskabet.\n“De nordiske lande deler værdier på mange måder og ønsker sammen at sætte fokus på blandt andet frivillighed og trivsel til et fælles værtsskab for en EM-slutrunde. Vi ønsker samtidig at afholde de mange kampe på en bæredygtig måde, der er ansvarlig både økonomisk og miljømæssigt,” lyder det i en udtalelse fra de nordiske formænd.\nSelve søgeprocessen forventes først at finde sted i 2018, men de nordiske lande ønsker allerede nu at gøre sig de indledende forberedelser. Det skal ske med en arbejdsgruppe med repræsentanter fra hvert land og drøftelser, når de nordiske formænd skal mødes i august i Grønland.\nDBU’s formand, Jesper Møller, glæder sig over enigheden blandt de nordiske formænd og ser frem til arbejdet med at forberede et bud på EM-værtsskabet. Han forventer, at et EM-værtsskab kan have kæmpe betydning for alle i dansk fodbold. Også selv om Danmark i forvejen skal være vært for fire kampe under EM 2020, der spilles over 13 forskellige lande i hele Europa.\nI forlængelse af offentliggørelsen af Amnesty Internationals rapport om arbejdstageres rettigheder og arbejdsmiljø i forbindelse med bygningen af stadioner til VM i Qatar i 2022 bekræftede de nordiske formænd, at de tager på en inspektionstur til Qatar i november 2016 for at undersøge forholdene nærmere.


Det Fedtede Hjørne Hornbæk\nArrangementer, Caféer & Restauranter, Caféer & Restauranter - Hornbæk, Take away\nPå Det Fedtede Hjørne i Hornbæk er omdrejningspunktet super mad og drikke.\nDer er noget for enhver smag i hyggelige omgivelser med en skøn Hornbæk-stemning.\nStedet har i mange år været et samlingspunkt i Hornbæk. Det oprindelige navn var Grill Rossinol, som var berømt for sine grill kyllinger og kolde fadøl. "Det Fedtede Hjørne" blev lukket ned i 2006.\nVi har overdækket spiseplads til 150 mennesker og 6 forskellige madboder der tilbyder Caribisk, Mexicansk, Burgere, Fisk, Pasta, samt Indisk/Nepalesisk mad. Herudover har vi en veludrustet bar der tilbyder alt i drikkevare.\nI løbet af sommeren vil der være forskellige live musik arrangementer - følg med på vores arrangementskalender.


Thomas Evers Poulsen på Club La Santa | Familie Journal\nThomas Evers Poulsen: "Jeg er altid i godt humør"\nLivet har ikke altid været en dans på roser for Thomas Evers Poulsen, men han har bevidst valgt ikke at lade negative ting sætte sig fast. Vi har mødt ham på Club La Santa, hvor han har undervist danseglade gæster i de seneste 11 år.\nTorsdag, 24. august 2017 - 13:40 - af: Elisabeth Wille, Foto: Nellie Møberg.\nThomas Evers Poulsen er om nogen indbegrebet af ”Vild med dans”. Han har været med i samtlige udsendelser, siden han vandt det første program med skuespiller Mia Lyhne. Året efter var han med i dommerpanelet, men siden har han været på dansegulvet i hver eneste sæson, bortset fra én enkelt.\n– Vi havde aldrig troet, at det skulle fortsætte så længe. Normalt siger man vist, at et underholdningsprogram kører i tre til fire år, men nu har vi været i gang i 11 år, fortæller Thomas om programmet, der i høj grad har været med til at gøre ham til et kendt ansigt i Danmark.\n– Da jeg startede, var målet jo bare at nå trofæet. Jeg er 100 procent konkurrencemenneske i alt, hvad jeg gør, om det er brætspil, madlavning eller dans. Jeg går altid efter guldet. Og det var først med årene, at jeg fandt ud af, at ”Vild med dans” kunne noget andet også. At vise et andet menneske noget, jeg holder så meget af. Min passion. Få dem til at tage det ind og få dem til at udvikle sig. Det er faktisk større for mig i dag, og derfor bliver jeg ved med at sige ja.\n– Selvfølgelig er det rigtig hårdt arbejde, men det at se et andet menneske blomstre, det bliver man simpelthen afhængig af. For selv om det er det mest naturlige for mig, så kan det være noget af det mest angstprovokerende for andre.\nVild med dans? Tag testen her og se om du også er klog på dans\n– Jeg kan huske, da jeg dansede med Ena Spottag i 2015. Det har altid været latindansene, der er sådan de forførende, som folk har haft det lidt svært med, og så skulle vi danse standard, og der står man jo mave mod mave, og så siger Ena, ”Gud, hvor står vi tæt”. ”Tæt?”, siger jeg, det havde jeg jo slet ikke tænkt på. Men det er rigtigt, i latin er man jo væk fra hinanden, og der er det mere spillet i det, men i standard har vi jo decideret kontakt hele tiden.\nÅrsagen til, at Thomas er på Club La Santa, skal man faktisk lige så langt tilbage for at finde som første sæson af ”Vild med dans”. På samme tid blev han nemlig overtalt til at undervise i pardans på en danseskole i Farum. Indehaveren Elisabeth Dalsgaard havde spottet hans evner til at få det bedste ud af de uprøvede dansere.\n– Da Elisabeth ringede midt i den første omgang ”Vild med dans” og ville have mig til at undervise på sin danseskole, tænkte jeg bare, nej, det har jeg simpelthen ikke tålmodighed til. Jeg havde jo kun undervist elitepar, og jeg kunne slet ikke se mig selv undervise i begynderdans. Men jeg syntes, jeg var nødt til sige nej på en pæn måde, så jeg tog op for at møde hende og havde besluttet, at hvis det nu var, så ville jeg i hvert fald kun sige ja frem til jul. Men da jeg gik derfra, havde jeg sagt ja til hele sæsonen, og jeg endte med at undervise der i 10 år, for jeg fandt jo ud af, at det simpelthen gav mig så meget. Her så jeg mennesker komme og være lidt trætte, men de smilte altid, når de gik.\nLæs også om SØNDAGs arrangement "Ballroom Fitness" med Thomas Evers Poulsen og køb din billet\nAllerede efter den første sæson foreslog Elisabeth, at de skulle lave en ”Vild med dans”-rejse til Club La Santa, og da Thomas drømte om at komme på ferie netop der, sagde han ja med det samme. Og nu har han været med på alle ugerne siden.\n– Nogle tænker nok, hvem gider tage på ferie og danse i en hel arbejdsuge, men folk er helt høje, når de kommer hjem herfra. Og føler, de har haft ferie, selv om de har danset i seks-otte timer om dagen. Og ja, de bliver trætte, men de får også et kæmpe overskud. Og det er alle slags mennesker, der deltager.\nLæs også: Lær at danse cha cha cha hjemme i stuen\n– Et af de første år var der et par med, hvor han arbejdede på en olieboreplatform. De var så fantastiske – fordi han havde altså dansen i sig. Men vi måtte ikke tage billeder af ham, for det måtte ikke komme ud, at han havde været på danseferie. Men det var så fedt at se, hvordan den her hårde, seje mand kunne stå der og lave superfede dansetrin. Så det kan ramme alle.\nTil VM og EM med sklerose: På banen har jeg det altid godt\nVi på 60+ kan også: Hiphop – og ih, hvor går det godt\nAltid på slankekur


ASUS ZenBook Pro UX501JW Core i7 16GB 512GB SSD 15.6" | Dustinhome.dk\nASUSZenBook Pro UX501JWCore i7 16GB 512GB SSD 15.6"\nASUS varenummer UX501JW-FJ192H\nDustin varenummer 5010856427\nLet og tynd med en skærm i verdensklassen\nIntel® Core™ i7-processor og grafik fra Nvidia\nLet, tyndt og elegant design\nLuksuriøs bærbar med lang levetid\nASUS ZenBook Pro UX501 giver dig den bedste ydeevne i en luksuriøs indpakning. Her er man ikke gået på kompromis med hverken design, valg af materialer, komponenter, køling eller batteritid. Uanset om du er en gamer eller arbejder med tunge programmer, er dette en computer, der vil føles moderne i lang tid.\nDen bedste ydeevne\nI denne computer får du en af Intels bedste processorer samt et grafikkort fra Nvidias flagskibsserie. Disse køles af en effektiv kølingsløsning, som holder både temperatur- og lydniveau på et minimum. På trods af høj ydeevne er komponenterne energieffektive, og batteritiden er op til 6 timer. Dette kombineres med markedets hurtigste WiFi og lagring for den bedste brugeroplevelse.\nDet elegante design af aluminium med diamantskårne kanter har en speciel overfladebehandling, som giver en hårdfør, titaniumgrå finish. Computerens kraft og enorme batteri imponerer, når man ser på den lave vægt og tynde profil.\nBillede og lyd i topklassen\nDen ekstremt detaljerede 4K-skærm i ASUS ZenBook Pro UX501 giver 4 gange højere opløsning end en Full HD-skærm. Sammen med ASUS VisualMaster-teknologi får du et så naturtro billede, at skærmen opleves som et vindue til en anden verden. Lyden er mindst ligeså vigtig, og højtalerne er derfor af højeste kvalitet med yderligere optimering fra ASUS SonicMaster Premium-teknologi, der bygger på ICEpower®; en teknologi fra Bang & Olufsen.\nSpecifikationer ZenBook Pro UX501JW\n1 x 8 GB + 8 GB (loddet)\n72% NTSC farveområde, Refleks, WideView\nMørkegrå med spinhårlinje (LCD-omslag), Sølvsandblæsning (top)\nStrømadapter, USB Gigabit Ethernet-adapter\n3 x USB 3.0, HDMI, Kombostik til hovedtelefon/mikrofon, LAN (på leveret kabel), Mini DisplayPort/Thunderbolt-kombi\nDokumenter ZenBook Pro UX501JW


Brun Rotte » Øens Skadedyrsservice\nBrun rotte, også kaldt vandrerotte, er nok det mest upopulære pattedyr i Danmark. Brun rotte er frygtet som sygdomsspreder, bl.a. af den farlige Weils syge. Desuden æder den masser af korn og andre fødevarer – og det, den ikke æder, forurener den med urin og ekskrementer.\nDet latinske navn norvegicus (= norsk) menes den at have fået i midten af 1700-tallet, idet man troede, at den kom til England fra Norge, men den forekom slet ikke i Norge på det tidspunkt.\nBrun rotte er vores største mus. Den tilhører familien ægte mus, som kan kendes på en lang hale, store øjne og ører og en lang spids snude. Rottens hale er stort set nøgen modsat halen hos alle vore andre gnavere. På ryg og sider har pelsen forskellige brune nuancer. Undersiden er grålig eller hvidlig.\nBrun rotte kan forveksles med husrotte, også kaldt sort rotte, selv om den også forekommer i brune nuancer. Husrotten har imidlertid et mere klassisk rotteudseende. Den er mindre og slankere og har større øjne og ører, længere hale og en mere ensfarvet pels end brun rotte. Mosegris kan også ligne brun rotte lidt, men mosegrisen er en studsmus og har derfor kort snude, små øjne og ører samt kort, pelsklædt hale.\nRottens størrelse afhænger meget af mængden af tilgængelig føde. Hos brun rotte ligger vægten normalt omkring 200-250 g, og hanner er større end hunner. Den største rotte man har fundet de seneste år, var en han på 545 g.\nSynssansen er ikke specielt god, men til gengæld har rotten en fantastisk lugte- og smagssans, ligesom den kan høre ultralyd. Man har fundet ud af, at rotter er i besiddelse af en såkaldt metakognitiv bevidsthed, dvs. at de er i stand til ”at tænke over deres tanker”, noget som ellers kun er fundet hos mennesket og andre primater.\nBrun rotte lever ofte i store kolonier, hvis vilkårene er gode. En koloni er sammensat af flere mindre, familiebaserede grupper eller klaner, som hver består af hanner, hunner og unger. Hver klan ledes af en dominerende han.\nRotten er især knyttet til menneskelig aktivitet. Som det eneste pattedyr kan den leve i vores kloaksystemer, faldstammer m.m., hvilket er en ganske ekstrem tilpasning. Men her er der frostfrit, fugtigt og helt frit for fjender.\nRotten er en ganske habil svømmer, men graver især underjordiske gangsystemer, som bruges til ophold og ynglereder. Den er hovedsagelig nataktiv, men ses da også om dagen.\nSom andre gnavere har brun rotte en stor formeringsevne. Med en ynglesæson, der inden døre dækker hele året, er der virkelig basis for en opformering. Brun rotte får normalt 4-12 unger i et kuld, alt efter hunnens fodertilstand. I sjældne tilfælde kan den få 15 unger.\nRotter kan få op til 7 kuld om året, og da hunnen er kønsmoden efter ca. 3 måneder, kan flere af årets unger sagtens nå at formere sig samme år. Hunnen kan befrugtes umiddelbart efter hver fødsel, og derfor kan et rottepar under meget gunstige forhold blive til over 800 stk. på bare et enkelt år.\nUngerne fødes i en rede foret med fx plastic, dun og halm. De er nøgne og blinde ved fødslen, men er allerede selvstændige efter ca. en måned.\nBrun rotte er altædende. Den er primært planteæder og foretrækker de tørre former som korn og frø. På listen over mulige fødeemner står også affald, ådsler, fugleæg og -unger, muslinger, snegle, fisk, krabber og kødvarer. Den skal æde ca. 10 % af sin kropsvægt om dagen for at overleve.\nRotten tager også levende dyr som husmus og mosegrise. En tommelfingerregel siger, at hvis man har rotter, har man ikke mus og mosegrise – for de stikker simpelthen af! Som andre gnavere samler den brune rotte depoter, når der er overflod af føde.\nBrun rotte er utrolig mistænksom over for ukendte lugte og smage, og så har den en hukommelse som en elefant. Hvis den støder på nye fødeemner, smager den forsigtigt på dem, og hvis oplevelsen er dårlig, vil den aldrig igen sætte tænderne i noget, der ligner.\nRotten kan gnave igennem alt, der er blødere end jern, hvilket gør den vanskelig at holde ude af vore huse.\nMiljø og Fødevareministeriet har lavet nye regler hvor der er anmeldelses pligt, se link for vejledning: https://mst.dk/natur-vand/vand-i-hverdagen/rottebekaempelse/\nHalelængde: 17-23 cm\nVægt: Han 250 g, hun 200 g\nParringsperiode: Året rundt (i naturen dog marts til november)\nDrægtighedstid: 22 dage\nAntal unger/kuld: 4-12 unger, 5-7 kuld/år\nLevetid: Gennemsnit 0,3 år, rekord 5 år (i naturen)\nUdbredelse, Danmark: Findes overalt i landet på nær enkelte øer\nBeskyttelse: Er som eneste pattedyr i Danmark dømt officielt fredløs\nFjender: Foruden mennesket stor hornugle, natugle, slørugle, rovdyr som ræv og kat\nAndre navne: Vandrerotte