Bioreattore al carciofo\nEccomi di nuovo tra voi dopo una lunga assenza dovuta al nuovo lavoro e alla lontananza da casa. Prima di lasciare il 2011 volevo salutare tutti voi augurandovi un felice anno nuovo, scusandomi per non aver trovato il tempo per aggiornare costantemente il blog. Colgo anche l’occasione per salutare tutti gli amici che in questi mesi mi hanno scritto per avere consigli, informazioni e spiegazioni sul processo micropropagativo (mi raccomando continuate a scrivermi), dandomi la spinta per continuare ad aggiornare le pagine di questo blog. In molte delle vostre mail ho percepito la volontà di fare di questa passione una professione, cosa lodevole e che condivido in pieno ma che spesso e volentieri risulta essere ardua e faticosa. Mi riferisco in particolare a noi neo-laureati che pieni di entusiasmo e passione ci scontriamo contro un mercato del lavoro morto, il quale non ci da il giusto credito propinandoci umilianti contratti da stagisti senza essere mai convertiti in contratti di lavoro. Data la mia scarsa esperienza in questo campo, non mi sento certo di dispensare consigli, ma se volete davvero lavorare in questo settore, fate affidamento solo sulle vostre capacità e su quelle dei vostri colleghi neo-laureati. Non aspettate che qualcuno vi illuda con false promesse (vedi il caso del bireattore al carciofo) e non fatevi prendere in giro dai ridicoli contratti da stagista per poi ritrovarvi a fare tutt’altro. Come ho detto a molti di voi se qualcuno ha davvero voglia di mettere su un laboratorio di micropropagazione non tardate a chiamarmi, io sarò dei vostri.\nPubblicato da Davide Petrini a 12:08 0 commenti\nDisinfettare la cappa 2\nSalve a tutti oggi è il turno di un'altro mezzo per rendere il nostro lavoro sotto cappa più sicuro e più controllato: vi presento l'Alcool Premier-WFI Klercide 70/30 sterile\nAlcool sterile v/v 70/30 senza spore con IPA, alcool denaturato (IMS) o Etanolo Pharma, miscelato con acqua per iniettabili di classe superiore (EP). I tre tipi di alcool sono miscelati con acqua per iniettabili del grado superiore (EP), con livelli di endotossina garantiti inferiori a 0,25 EU/ml. Incartati in tripla confezione per un facile trasporto in camere sterili di Grado A e B e irradiati ai raggi gamma per assicurare un prodotto sterile e senza spore. Una serie di formati a scelta che include pratici erogatori a pistola in formato da 500 ml a 5,0 litri, spray, getto e in fustino con tappo pronti all’uso. L'erogatore consente di spruzzare gocce di dimensioni tali da limitare il rischio di inalazione. L’erogazione a getto riduce al minimo la presenza particellare durante l’uso ed è pertanto ideale per aree critiche dove viene effettuato un monitoraggio continuo per la conformità alle nuove linee guida GMP. Il Sistema di dispensazione SteriShield degli erogatori a spruzzo è stato convalidato per fornire una durata di conservazione di tre mesi, eliminando l’esigenza di scartare il prodotto non utilizzato. Lo spray è stato inoltre approvato per mantenersi sterile per un periodo di tre mesi dopo la prima apertura.\nLa varietà dei formati permette all’utente di scegliere il metodo d’applicazione più idoneo, dalla nebulizzazione dello spray all’erogatore regolabile a pistola che permette l’erogazione del liquido sotto forma di getto o di spray e la possibilità di applicarlo su un panno per ridurre le inalazioni del prodotto. Il Premier-WFI Klercide 70/30 IPA è una miscela di alcool isopropilico al 70% con acqua per iniettabili. Il Premier-WFI 70/30 Klercide IMS è costituito da una miscela di etanolo denaturato al 70% e acqua per iniettabili. L’Etanolo Pharma Premier-WFI 70/30 Klercide è etanolo denaturato al 70% con IPA e garantisce residui di prodotto bassissimi. In tutti i formati, i livelli di endotossine garantiti sono inferiori a 0,25 EU/ml. La miscela di alcool è filtrata a 0,2 micron, riempita e confezionata in triplo imbusto sotto un flusso laminare in classe A, in un ambiente a contaminazione controllata di grado C (Classe ISO 7), prima di essere sottoposta a irraggiamento secondo un processo convalidato a non meno di 25kGy. Tutti i flaconi spray incorporano il sistema di erogazione brevettato SteriShield Delivery System e una pistola a getto regolabile. Il sistema a tenuta di SteriShield Delivery System garantisce il mantenimento della sterilità del contenuto durante tutto l'utilizzo. Tutti i flaconi spray sono inoltre dotati del Sistema di dispensazione brevettato SteriShield e di una pistola d’erogazione regolabile. La modalità di funzionamento del Sistema di dispensazione SteriShield garantisce la salvaguardia della sterilità del contenuto per tutto il corso dell’uso.\nFacile da usare, può essere erogato direttamente sulla superficie da sanitizzare. Accertarsi sempre che il liquido disinfettante entri in contatto con l’intera superficie da pulire. Per risultati ottimali, pulire la superficie con un panno al fine di eliminare eventuali agenti contaminanti.\nPubblicato da Davide Petrini a 10:07 0 commenti\nDisinfettare la cappa\nMolti di voi mi hanno chiesto che prodotti utilizzare per disinfettare la cappa prima di iniziare a micropropagare. Bene da oggi aprirò una serie di post dove potrete trovare i migliori prodotti commerciali per questo scopo. Oggi vi presento Klercide-CR Biocida A filtrato\nDisinfettante ad ampio spettro a base di sali di ammonio quaternario e biguanide, filtrato a 0,2 micron, efficace anche in condizioni di sporco tenace. Il Klercide-CR Biocida A ha un ampio spettro di attività che permette di controllare la maggior parte della contaminazione microbica potenzialmente presente negli ambienti sterili e a contaminazione controllata. È destinato all'uso in rotazione con gli altri biocidi Shield Medicare, incluso lo sporicida Klercide-CR Biocida B. Il Biocida A Klercide-CR usato normalmente è non irritante e non corrosivo, così da poter essere impiegato in modo sicuro nella maggior parte delle applicazioni in ambienti sterili. Lo spray a pistola completamente regolabile permette l'erogazione del liquido sotto forma di getto o di spray. In alternativa, sono disponibili prodotti pronti all'uso e concentrati in fustini con tappo a vite per l'impiego in grossi impianti. Il sistema di erogazione consente l’utilizzo di tutto il contenuto del flacone, evitando così gli sprechi. Il Klercide-CR Biocida A è un biocida filtrato per l’uso in ambienti sterili e zone a contaminazione controllata. Gli ingredienti attivi sono costituiti da una miscela di sale di ammono quaternario e biguanide. La miscela offre attività ad ampio spettro perfino in condizioni di notevole sporcizia organica. Non sono necessari ulteriori attivatori. Il Klercide-CR Biocida A è adatto per l'uso su tutte le tipologie di superfici non porose. La miscela è filtrata a 0,2 micron, riempita nel contenitore decontaminato e successivamente chiuso in doppia busta in un ambiente sterile di Grado C (ISO classe 7). Il prodotto pronto all'uso è disponibile in flacone spray da 1 litro e in fustini con tappo da 5 litri. Per aree più ampie sono disponibili fustini di concentrato da 5 litri da diluire in acqua di qualità idonea.\nS.aureus, K.pneumoniae, E.coli, E.hirae, S.epidermidis, Cl.perfringens, Cl.botulinium, S.entiritidis, S.hominis, Ps.aeruginosa, M.smegmatis, L.monocytogenes, S.marcescens\nA.niger, A.fumigatus, T.interdigitale, P.expansum, C.albicans, M.racemosus, P.notamum, S.rouxii\nApplicare il prodotto pronto all'uso direttamente sulle superfici non porose usando un panno di pulizia per cleanroom a basso rilascio particellare. Dopo un tempo di contatto di almeno 5 minuti asciugare con un panno. Dove necessario, eliminare totalmente ogni residuo utilizzando alcool tipo Klercide 7./30 o acqua. 5 litri di prodotto concentrato vanno diluiti in proporzione 1:3 in acqua di qualità idonea, per produrre 20 litri di disinfettante diluito. Miscelare bene prima dell'uso. Il Klercide-CR Biocida A può essere utilizzato in regime di rotazione con il Klercide-CR Biocida B.\nPubblicato da Davide Petrini a 09:29 0 commenti\nEsperimenti su lampone e palma\nLa pagina "Fasi della Micropropagazione" è stata nuovamente aggiornata con due nuovi paragrafi inerenti i primi esperimenti compiuti su cellule meristematiche di lamponi e di palma. I nuovi paragrafi sono stati inseriti nel primo capitolo intitolato "Introduzione lla Micropropagazione". Buona lettura!\nPubblicato da Davide Petrini a 11:13 0 commenti\nLa scelta del bioreattore\nGrazie ai bioreattori è possibile coltivare: germogli, radici, micro tuberi, bulbi, embrioni, ecc… di numerose specie.I Bioreattori vanno scelti in base alle esigenze delle colture da effettuare al loro interno: batteri, cellule vegetali (e loro tipo), organi (germogli, radici, tuberi, bulbilli ecc). Le colture di ife fungine o di hairy roots richiedono bioreattori di tipo diverso rispetto a quelli usati per le colture cellulari, in quanto richiedono un ancoraggio per la crescita. Lo sfruttamento delle cellule vegetali per la produzione di\ncomposti di interesse vivaistico, ornamentale, floricolo o orticolo richiede la produzione su larga scala. Per questo si rende necessario dimensionare correttamente i bireattori, infatti, la coltura di cellule vegetali, non sempre può essere effettuata nei bioreattori configurati per la crescita di batteri, a causa di caratteristiche distintive che non sono favorevoli alla crescita di cellule vegetali.\nRispetto ai batteri le cellule vegetali mostrano:produttività meno stabile, maggiore sensibilità allo “stress da taglio” (shear stress), inferiore richiesta di ossigeno e minor velocità di crescita (tempo di duplicazione 25-110 h). Ciascun tipo di coltura deve essere ottimizzata e richiede un bioreattore con caratteristiche peculiari.\nPubblicato da Davide Petrini a 10:13 0 commenti\nMicropropagazione negli anni '80\nOggi ho deciso di apportare una interessante integrazione alla dispensa intitolata "Fasi della Micropropagazione" aggiungendo un'interessante paragrafo sul declino del settore micropropagativo che si è registrato negli anni 80 in italia a seguito di alcune nostre abitudini che ci collocano in coda rispetto ad altri paesi concorrenti.\nIntanto sta procedendo l'assemblaggio delle nuove e ultimissime cappe che ben preso potrete trovare direttamente sulle pagine di questo blog.\nPubblicato da Davide Petrini a 22:43 0 commenti\nNuova cappa a flusso laminare\nTempo fa vi avevo parlato di alcune importanti novità che avreste trovato sulle pagine di questo blog. La prima l'avete già vista ed è quella che si riferisce agli approfondimenti sui bioreattori utilizzati anche per la micropropagazione, la seconda invece sta per arrivare e si tratta di un nuovo modello dio cappa a flusso laminare che metterò in vendita sia direttamente sul blog sia su ebay. In questi giorni inizierò a assemblare le cappe che rispetto al progetto iniziale avranno un costo molto ridotto, saranno più semplici e più funzionali. Quindi se anche voi come me siete degli appassionati di micropropagazione tenete d'occhio queste pagine nei prossimi giorni, perchè con pochi euro potreste avere una cappa da poter utilizzare per i vostri esperimenti di micropropagazione.\nPubblicato da Davide Petrini a 11:55 0 commenti\nLe funzioni del Bioreattore\nFinalmente riesco di nuovo a scrivere sulle pagine del mio blog. Purtroppo in questi giorni ho avuto serie difficoltà a collegarmi alla rete: prima un fulmine ha danneggiato la centralina ADSL del mio quartiere, poi arrivato a Siena (dove attualmente lavoro come tecnico di laboratorio) la chiavetta per la connessione mobile ha deciso di scioperare fino ad oggi. Adesso sembra che tutto si sia risolto...incrociamo le dita. Approfittando dunque della discreta connessione direi di riprendere il discorso che avevamo lasciato a metà sui bioreattori utilizzati per la micropropagazione di cellule vegetali. Come avrete capito si tratta di una tecnologia innovativa che in pochi conoscono e che pochissimi riescono ad applicare.\nÈ bene ricordare che, per qualsiasi tipo di coltura in vitro, al momento dell'inoculo segue un preciso percorso di crescita: dapprima la cellula si stabilizza nel nuovo terreno di coltura, dopodiché inizia a percepire gli stimoli derivati dai costituenti del terreno. Ad una fase di adattamento segue una fase di crescita esponenziale, in cui le cellule crescono notevolmente di numero in un ristretto arco di tempo; a questa fase di crescita esponenziale succede una fase di crescita stazionaria, che si manifesta nel momento in cui almeno uno degli elementi costitutivi del terreno si esaurisce. Il raggiungimento della fase stazionaria determina il passaggio della coltura dallo stadio duplicativo a quello produttivo. A questo livello il biotecnologo induce il mantenimento della fase stazionaria, o meglio produttiva, mentre minimizza la crescita numerica, per fare in modo che le cellule producano metaboliti secondari il più a lungo possibile. Per riuscirci, si variano i costituenti del terreno, soprattutto gli ormoni e le condizioni di coltura, come pH, temperatura, aereazione, luce ed elicitazione (strumento di induzione di stress fisico o biologico sulle cellule). Il fermentatore più versatile è formato da un reattore agitato ed areato; è composto da un recipiente cilindrico in acciaio inox con un fondo concavo e un coperchio, da un agitatore meccanico, da un sistema di aerazione, frangiflutti, camicia per la sterilizzazione e termoregolazione controlli del pH, temperatura, agitazione e schiuma. Le principali funzioni del fermentatore sono riassumibili con il mantenimento della sterilità, trasferimento dell’ossigeno, trasferimento o smaltimento dell’esotermia, regolazione del processo. Prima di effettuare una fermentazione, il recipiente e le linee ad esso connesse devono essere sterilizzate per 30 min. a 121°C usando vapore sia in modo diretto che indiretto, cioè in camicia per risparmiare tempo e condensa. Particolare attenzione va dedicata alla sterilizzazione della linea dell’aria in cui è inserito il filtro sterilizzante usando del vapore pulito. Nei fermentatori convenzionali con agitazione meccanica sono considerati fattori molto importanti, la geometria del recipiente, la tipologia delle giranti, la velocità di agitazione. La fermentazione tradizionale si distingue in tre fasi: una prevegetativa in laboratorio, una fase vegetativa e una terza fase di produzione; le varie fasi devono avvenire sempre in condizioni di sterilità per evitare la crescita di microrganismi indesiderati.\nPubblicato da Davide Petrini a 19:25 0 commenti\nCos'è un bioreattore\nSi definisce bioreattore ogni dispositivo in grado di fornire un ambiente adeguato alla crescita di organismi biologici. La maggior parte delle volte si tratta di un recipiente all'interno del quale viene portata a termine una reazione chimica svolta da microorganismo da molecole, da essi derivate, attive dal punto di vista biochimico. Questo tipo di bioreattori è solitamente di forma cilindrica, composto di acciaio inossidabile e può raggiungere dimensioni comprese tra alcuni litri e numerosi ettolitri. Ci si riferisce a bioreattori anche intendendo dispositivi che permettono la crescita autonoma (senza l'intervento continuo di un operatore) di cellule o tessuti. Questo concetto di bioreattore, affine a quello di coltura cellulare, è attualmente in largo sviluppo soprattutto nel settore della rigenerazione dei tessuti (ad esempio per la terapia dei grandi ustionati. Le colture all'interno del bioreattore devono essere adeguatamente sottoposte a varie sollecitazioni, che mimino elementi stimolanti la produzione di metaboliti secondari. I bioreattori sono strutturati in modo tale da determinare differenti tipologie di ciclo cellulare. Così come accade nel terreno solido, prima di indurre le cellule a produrre metaboliti secondari, bisogna infatti stimolarne la moltiplicazione; ciò consente di ottenerne un numero cospicuo ed adeguato alla sintesi dei princìpi attivi. Nell'allestimento di un terreno liquido si procede a concretizzare i seguenti passaggi:\n1. Inoculo cellulare nel terreno liquido.\n2. Condizioni di coltura adeguate alla moltiplicazione cellulare: il tipo di terreno e la modalità di coltivazione in un opportuno bioreattore devono consentire l'ottenimento della biomassa desiderata.\n3. Condizioni di coltura adeguate alla produzione di princìpi attivi; il terreno di coltura viene modificato e la coltura viene sottoposta a sollecitazioni meccaniche, ciò comporta un forte rallentamento dei fenomeni duplicativi a favore della produzione di metaboliti secondari.\nPubblicato da Davide Petrini a 10:31 0 commenti\nBioreattori per colture cellulari\nTramite passaggi di scala si può arrivare a colture cellulari vegetali in bioreattori industriali anche di decine di migliaia di litri. Non si tratta di un semplice aumento di volume, ma questo processo comporta la valutazione e l’ottimizzazione di molti parametri che in laboratorio possono essere trascurati. Infatti, anche su grande scala, l’accrescimento della biomassa e la produzione di metaboliti secondari dipendono dalle caratteristiche genetiche della specie coltivata, dal tipo di terreno e dalle condizioni di coltura, però sono implicati ulteriori fattori. Ad esempio del terreno di coltura non è importante solo la composizione, ma lo sono anche le proprietà reologiche come la viscosità. Inoltre le condizioni di coltura importanti non sono più solo temperatura, pH e luce come in piccola scala, ma sono rilevanti anche la dimensione dell’inoculo e, soprattutto, aerazione ed agitazione, dalle quali dipende l’omogeneità del mezzo in termini di distribuzione e disponibilità dei nutrienti, dei rifiuti metabolici, dell’ossigeno, della temperatura, ecc. Dall’aerazione dipendono anche la formazione di schiuma, da evitare, ed il rapporto O2/CO2, che influenza i processi metabolici e la stabilità dei prodotti. Pure l’agitazione (tipo e intensità) va adeguatamente messa a punti perché può compromettere vitalità cellulare e resa, anche se le cellule vegetali si sono rivelate più resistenti allo stress da taglio di quanto si pensasse. Anche la tendenza delle cellule vegetali a crescere in aggregati che sedimentano o aderiscono alle pareti, può condurre ad un sistema disomogeneo e quindi non ottimale in ogni punto e non riproducibile. Su grandi volumi, inoltre, possono esserci problemi di diffusione della luce. La coltura in bioreattore di cellule vegetali comporta, quindi, maggiori problemi tecnici rispetto alle fermentazioni di microorganismi e richiede accorgimenti appositamente studiati, sia per la fermentazione che per il recupero del prodotto d’interesse. Un tipo di bireattore particolarmente adatto è l’”airlift”, in cui l’aria è immessa dal basso per miscelare oltre che ossigenare il sistema. Altre soluzioni sfruttano l’immobilizzazione delle cellule, che comporta numerosi vantaggi tecnici ed economici tra cui il fatto che le cellule siano più stabili e restino attive più a lungo, si osserva una crescita della produttività (grazie alla più stretta interazione cellula-cellula) e sono facilitati i processi in continuo ed il recupero dei metaboliti secreti. Di questi ultimissimi anni è lo sviluppo di diverse tipologie di bioreattori che abbattano i costi d’impianto, come ad esempio i “fermentatori a sacchetti di plastica” . Un altro fattore fondamentale da considerare, quando si parla di scala industriale per produzioni commerciali, è l’aspetto economico. La commercializzazione è ostacolata dalla fattibilità economica che necessita di un approccio integrato biologico ed ingegneristico. In generale per migliorare il processo occorre conoscere bene la via di biosintesi, il suo possibile legame con la cinetica di crescita, la morfologia del sistema, le interazioni cellula-cellula e la reazione di sintesi, ma è necessario anche avere un impianto adeguato ed un buon sistema di recupero del prodotto. Uno svantaggio dei composti vegetali, rispetto a molti di origine animale o microbica, è che spesso sono prodotti a basso o medio valore di mercato.\nPubblicato da Davide Petrini a 08:31 0 commenti\nNuovo ed interessante aggiornamento nella dispensa "Procedure di laboratorio". All'interno oltre al materiale già presente troverete i nuovi capitoli inerenti alle PROCEDURE DI ACCESSO, PROCEDURE DI PROTEZIONE PERSONALE, PROCEDURE OPERATIVE MICROBIOLOGICHE STANDARD. Nei prossimi giorni seguiranno altri aggiornamenti sempre nella dispensa "Procedure di laboratorio".\nLaboratorio di micropropagazione 6\nDopo aver postato il primo piano, del nostro ipotetico laboratorio di micropropagazione, è arrivato il momento di pensare a come allestire il piano della produzione vera e propria. Inutile ripetere che il tutto dovrà ruotare su quei principi di asepsi e profilassi detti in precedenza. E' proprio in questi ambienti che progettisti e operatori dovranno riporre le maggiori attenzioni: se da una parte occorre avere una accurata distribuzione degli ambienti, dall'altra è fondamentale che il comportamento degli operatori sia il più corretto e accurato possibile, in modo da non contaminare e compromettere la produzione.\nAncora una volta ci avvarremo della classificazione diversa di alcune aree: in arancio le zone a classificazione 2 e in rosso le aree a classificazione 3 che richiedono una particolare vestizione ed una particolare attenzione. Arrivati al secondo piano, per mezzo dell'ascensore, ci troviamo nel corridoio dello sporco che può portarci, a seconda delle nostre mansioni, o nel magazzino o nella zona di vestizione e passaggio all'area di 2° classificazione. Una volta giunti nell'area di seconda classificazione e indossati gli appositi abiti è possibile attraversare il corridoio del pulito per entrare nei seguenti ambienti: camera di crescita, laboratorio di moltiplicazione, laboratorio di radicazione, cucina o laboratorio di preparazione dei sub strati (media). Il flusso del personale e dei materiali sarà spiegato nei prossimi post.\nPubblicato da Davide Petrini a 00:39 0 commenti\nLaboratorio di micropropagazione 5\nDopo aver venduta la cappa a flusso laminare mi sono gettato a capofitto nella progettazione di un laboratorio di micropropagazione, cercando di fare tesoro delle varie esperienze professionali che ho avuto e che sto avendo in questo settore. Partiamo con il dire che un buon laboratorio di micropropagazione non si improvvisa, occorre perdere del tempo in fase di progettazione per realizzare la miglior disposizione degli ambienti. Nel post precedente ho pubblicato una bozza di laboratorio il più completo possibile, cercando di rispettare tutti i parametri che ci siamo detti nei post scorsi. Oggi voglio rendervi la vita più facile: per questo ho riportato in formato elettronico la bozza del progetto. Avendo lavorato in alcuni laboratori di micropropagazione ho notato profonde differenze concettuali e comportamentali che alla fine della fiera non aiutavano certo alla buona riuscita della produzione. Mi spiego: spesso e volentieri non vengono mantenuti, dagli operatori, adeguati livelli di asepsi, osservando carenza nella vestizione e nelle procedure stesse. Altre volte le strutture sono dei semplici capannoni adibiti a laboratorio che non tengono conto delle ottimali disposizioni degli ambienti. Con questa serie di post spero di portare un minimo contributo per l'ottimizzazione dei laboratori di micropropagazione.\nDi seguito trovate la bozza in formato elettronico del primo piano del nostro teorico laboratorio di micropropagazione. Come vedete le zone a diversa classificazione asettica si dividono in 3 colori: bianco (nessun tipo di classificazione asettica, accesso libero), giallo (primo grado di classificazione asettica, vi accede solo personale autorizzato provvisto della apposita montura), arancio (zona di seconda classificazione a cui vi accede solo personale autorizzato che pone sulla precedente montura, altri componenti di sicurezza). Nel nostro laboratorio una volta entrati nell'atrio d'ingresso, in base alla nostra mansione possiamo entrare o nell'open space dove svolgeremo funzioni amministrative e di controllo, oppure andare dritto e proseguire nel corridoio degli spogliatoi (di colore giallo) a cui si accede solo tramite badge. Sulla sinistra troveremo gli ingressi degli spogliatoi femminili e maschili dove indosseremmo la montatura di prima classificazione. Successivamente, tramite un piccolo disimpegno entreremo nella zona di seconda classificazione (colore arancio) dove porremo dei copriscrape sulle calzature da laboratorio. In questo modo attraverseremo il corridoio del pulito (anch'esso di colore arancio) e ci recheremo o nella sala controllo o al piano di produzione al livello superiore grazie agli ascensori\nPubblicato da Davide Petrini a 14:54 0 commenti\nLaboratorio di micropropagazione 4\nEcco, qui trovate un abbozzo di quello che dovrebbe essere la disposizione degli ambienti di un laboratorio di micropropagazione. Come vedete il tutto segue il concetto espresso nei post precedenti. Presto altre info.\nPubblicato da Davide Petrini a 17:47 0 commenti\nLaboratorio di micropropagazione 3\nUn problema fondamentale nella progettazione di un laboratorio è costituito dai percorsi, che devono garantire ad un tempo funzionalità, sicurezza, e difesa dalle contaminazioni. Nella disposizione dei percorsi è necessario evitare le sovrapposizioni fra percorsi settici ed asettici, attraverso una valutazione attenta del grado di asepsi che ciascuno di essi richiede. Lo studio delle soluzioni tipologiche ha portato all’introduzione del criterio della divisione dei percorsi destinati elle specifiche funzioni del reparto, il blocco viene articolato attraverso il percorso asettico e il percorso settico, senza occasioni di sovrapposizione o di contatto fra i percorsi stessi. Questo sistema garantirebbe condizioni asettiche per la zona di ingresso e preparazione dei materiali e dei mezzi, per i locali e i servizi delle unità micropropagativee, tutti serviti dal percorso asettico. Solo i materiali e i corredi impiegati durante la preparazione degli espianti, vengono allontanati lungo il percorso settico per raggiungere la centrale di sterilizzazione. In realtà questa impostazione fornisce garanzie solo parziali, perché le contaminazioni si verificano ugualmente. Allo scopo di perfezionare il modello a doppio corridoio e di limitare il tasso di contaminazioni si è cercato di limitare il numero di aperture della sala di micropropagazione, di collocare locali a filtro tra le sale e i percorsi, di semplificare i traffici con sensi di percorrenza chiari e di centralizzare la preparazione e il lavaggio del materiale con la sterilizzazione.\ncorridoio pulito, preparazione mezzi e materiali, locale vestizione del personale, cucina pulito, sala micropropagazione, camera di crescita, locali di sterilizzazione, deposito pulito, deposito attrezzature.\ncucina sporco,spogliatoio del personale, deposito materiale, zona relax personale, zona lavaggio attrezzature.\nPubblicato da Davide Petrini a 10:59 0 commenti\nLaboratorio di micropropagazione 2\nDopo aver individuato il sito su cui realizzare il nostro laboratorio, con tutte le strutture annesse, è arrivato il momento di individuare la filosofia che impregnerà il nostro lavoro. In una parola: profilassi. In ogni laboratorio che si rispetti, la profilassi , è un concetto fondamentale che non potrà mai venire meno, si tratti anche di un laboratorio di micropropagazione. Questo aspetto è fondamentale anche per la realizzazione dei vari ambienti del laboratorio a tal punto da influenzarne la struttura, la disposizione e la fruibilità. In pratica cercheremo di realizzare e mantenere ambienti asettici, usando sia le tecnologie presenti sul mercato, sia comportamenti specifici dei singoli operatori e un determinato flusso dei materiali che dovranno distinguersi in “puliti” e “sporchi”. Su questi concetti si svolgerà la vita all’interno del nostro laboratorio. Da qui in avanti sentirete parlare di “linee gialle”, porte di contenimento, corridoio del pulito e dello sporco ecc.. Non preoccupatevi, presto ci farete l’abitudine. Per farla breve affinchè tutto si svolga secondo quanto prestabilito, occorre procedurizzare ogni singola operazione, anche la più banale, in modo che gli operatori possano sempre sapere cosa fare senza prendere iniziative proprie; per far questo ci avvaleremo delle SOP (Standard Operating Procedures).\nPubblicato da Davide Petrini a 22:41 0 commenti\nÈ fatta! Finalmente sono diventato Dottore in Agraria! Che soddisfazione! Lo scorso lunedì ho sostenuto la discussione della mia tesi dal titolo “Effetti della qualità della luce nella micropropagazione”: un'ottima discussione, molto apprezzata dalla commissione di Laurea. Una giornata che ricorderò per sempre grazie anche all’affetto delle persone a me care che mi hanno sostenuto fino ad oggi. Rimane un po’ di tristezza nell’abbandonare un ambiente, come quello della Facoltà di Scienze Agrarie di Pisa, stimolante ed unico nel suo genere, fatto di tanti amici e di bellissimi ricordi.\nPubblicato da Davide Petrini a 08:56 0 commenti\nA differenza del Santo che è stato folgorato sulla via di Damasco, io sono stato folgorato mentre prendevo un aperitivo analcolico alla Casa del Popolo di Ponte Buggianese. Anche se non è proprio la stessa cosa e anche se questa mia avventura non entrerà mai in un libro sacro, rimane a tutti gli effetti una soluzione "geniale". Erano mesi che gironzolavo sul web per trovare un sito che mi permettesse di acquistare delle provette da laboratorio, spendendo pochi euro. Purtroppo non ho trovato niente che andasse bene alle mie esigenze, sia per il costo sia per il numero sproporzionato di provette che mi sarebbero arrivate a casa. Così, come racconto nel video, mente prendevo l'aperitivo, mi è venuta la brillante idea di utilizzare come provette le bottigline del Bitter. Non male come idea visto che mi permette di risparmiare oltre 50 euri!!!\nPubblicato da Davide Petrini a 19:55 0 commenti\nPubblicato da Davide Petrini a 23:06 0 commenti\nVisto che con voi ho condiviso praticamente tutto il percorso che in un modo o nell'altro mi ha portato a conseguire laurea, ho deciso di pubblicare anche la prima pagina della presentazione in PowerPoint. Subito dopo il 23 maggio, giorno della discussione della tesi, come promesso pubblicherò alcuni capitoli riguardanti gli effetti della qualità della luce nella micropropagazione. Per quanto riguarda il resto sto ancora aspettando il pHmetro dalla Spagna. Appena arrivato, visto che alcuni di voi mi hanno chiesto più info su questo strumento, pubblicherò altre specifiche del pHmetro.\nPubblicato da Davide Petrini a 16:03 0 commenti\nI valori del pH del substrato devono essere tali da consentire la crescita dei tessuti vegetali. Il pH influenza:\n- la solubilità dei sali:se è troppo basso i fosfati ed altri sali con alto peso molecolare possono precipitare;\n- l'assorbimento degli elementi nutritivi e degli ormoni: con bassi valori di pH le vitamine del gruppo B e l'acido pantotenico, le auxine e l'acido gibberellico diventano instabili ed, inoltre, viene ritardato l'assorbimento degli ioni ammonio;\n- la solidificazione dell'agar.\nPer questi motivi il range di variazione del pH è abbastanza ristretto ed il valore ottimale per molte specie è compreso fra 5,2-5,8. In questo intervallo i sali si mantengono nella forma solubile, anche in presenza di elevate concentrazioni di fosfati, inoltre questi valori sono sufficientemente bassi per permettere una crescita rapida dei germogli. Durante la sterilizzazione del substrato il valore del pH subisce un abbassamento di circa 0,2-0,3 punti. Si modifica anche durante lo sviluppo della coltura per la metabolizzazione di alcune sostanze.\nIn alcune specie il pH scende nelle prime due settimane di coltura per poi risalire alla fine della subcoltura. Secondo alcuni Autori ciò è dovuto alla CO2 prodotta dalla respirazione dei vegetali, mentre altri sostengono che la diminuizione del pH è legata all'assorbimento dei cationi presenti nel mezzo, mentre il successivo aumento è dovuto alla metabolizzazione degli anioni, sopratutto quelli nitrici. Per quanto riguarda la stabilità dell'agar, un pH troppo acido determina l'idrolisi dell'agente solidificante durante la sterilizzazione in autoclave, causandone la perdita del potere addensante. Al contrario, un pH troppo alcalino rende il substrato viscoso e ciò rende più difficile lo sviluppo dei germogli.\nPubblicato da Davide Petrini a 17:18 0 commenti\npH e micropropagazione\nLa correzione del pH del mezzo è una fase essenziale. Le cellule vegetali preferiscono un pH leggermente acido, generalmente tra 5.3 e 5.8. Valori di pH inferiori a 4.4 o superiori a 7, generalmente inibiscono in modo considerevole la crescita e lo sviluppo in vitro. Tale effetto negativo e probabilmente causato da diversi fattori, quali la minore stabilità di fitoregolatori come l'IAA e l'acido gibberellico, la precipitazione dei fosfati, la minore stabilità della vitamina B, e dell'acido pantotenico, il ridotto assorbimento degli ioni ammonio, le variazioni di consistenza dell'agar (la riduzione del pH provoca la liquefazione dell'agar). La correzione del pH è l'ultima fase prima dell'aggiunta e del dissolvimento dell'agar. Successivamente il mezzo viene distribuito nei contenitori ed autoclavato. Se il valore del pH è diverso da quello desiderato, esso deve essere corretto mediante KOH, nel caso in cui occorra alzarne it valore o mediante HC1 se occorre un pH inferiore (utilizzando soluzioni 0,1 o 1,0 N). L'idrossido di sodio (NaOH) può essere ugualmente usato, tuttavia esso può causare un indesiderato incremento di ioni sodio. Generalmente il pH di un mezzo decresce da 0,3 a 0,5 unità dopo la sterilizzazione in autoclave; esso inoltre varia durante it periodo di coltura sia per fenomeni di ossidazione, per assorbimento differenziale e per la secrezione di sostanze originatisi dai tessuti in crescita.\nPubblicato da Davide Petrini a 13:30 0 commenti\nMezzo di coltura 2\nCi siamo, domani mattina finalmente consegnerò le due copie della tesi in segreteria e presenterò l'esposizione al Prof.. Oltre a questo volevo dirvi che nella dispensa MEZZO DI COLTURA è stato inserito un nuovo capitolo dal titolo Caratteristiche di alcuni dei mezzi di coltura più utilizzati.\nPubblicato da Davide Petrini a 00:04 0 commenti\nBuondì! Oggi sono particolarmente contento visto che è stato messo un'altro tassello per portare a compimento la Laurea. Ieri infatti sono andato a ritirare le tre copie stampate e rilegate della mia tesi che dovrei consegnare entro lunedì in facoltà per potermi laureare il 23 maggio. Ma non voglio certo parlarvi soltanto di questo. Ieri infatti per festeggiare, ho deciso di comprare un pHmetro, utile nella preparazione dei mezzi di coltura.Nello spirito del progetto, il modello di pHmetro acquistato è semplice da usare e di conseguenza economico. Mi sarà utile per regolare i valori di acidità del substrato. L'alternativa erano le cartine al tornasole, ancora più economiche ma decisamente meno precise. Di seguito riporto i dati dello strumento pagato solo 28 euri. Il misuratore pH è uno strumento tascabile a tenuta stagna (waterproof) per la misura del pH. Assicura una risoluzione di ±0,01 pH e una precisione delle misure dello ±0,1 pH.\n- Rimuovere il cappuccio protettivo e sciacquare con acqua eventuali cristalli bianchi\n- Accendere lo strumento.\n- Immergere nella soluzione fino al livello max. di immersione.\n- Agitare leggermente ed attendere che la lettura si stabilizzi.\n- Immergere l’elettrodo dello strumento nella soluzione tampone a pH 7 (o 6.864)\n- Attendere che la lettura si stabilizzi.\n- Con il cacciavite far ruotare il trimmer di calibrazione pH7 finché il display visualizza il valore "7.0".\n- Risciacquare l’elettrodo con acqua ed immergerlo in una soluzione tampone a pH 4 (o pH 10)\n- Con il cacciavite far ruotare il trimmer di calibrazione pH4/pH10 finché sul display viene visualizzato il valore "4.0".\n- Gamma di misurazione: de 0.00 a 14.00 pH\n- Accuratezza: ±0.1pH\n- Compensazione automatica della temperatura (da 0 a 50°C)\n- Umidita relativa: <95%\n- Dimensione: 150mm x 29mm x 20mm\n- 3 pile 1,5 volts\nPubblicato da Davide Petrini a 10:09 2 commenti\nMicropropagazione della patata 2\nPrelevare talee nodali ed interi germogli da colture in vitro stabilizzate provenienti a loro volta dalla sterilizzazione e messa in coltura del materiale di propagazione di partenza (tuberi germogliati). La maggior parte delle cultivar (genotipi) di patata possono essere indotte a formare tuberi in vitro; tuttavia, la capacita di dare origine a microtuberi e influenzata dal genotipo. Cultivar quali "Kennebec", "Superior", "Red Pontiac" o "Russet Burbank" sono dotate di tale capacita. (Leclerc et al., 1994). Si raccomanda l'uso di tuberi di patata freschi che non presentino segni di deperimento.\nSuccessivamente lavare i tuberi sotto acqua corrente e quindi immergerli in una soluzione di candeggina commerciale al 20% (v/v) (1,05% NaOCl) per 10 minuti. Tagliare i tuberi in cinque o dieci pezzi di 2 cm2 circa e quindi immergerli per un'ora in una soluzione di acido gibberellico (100 mg/1) per interrompere la dormienza e favorire il germogliamento. Porre le sezioni in vermiculite umida all'interno di una camera climatica a circa 25 °C con un fotoperiodo di 16 ore di luce fluorescente. Prelevare i germogli quando hanno raggiunto approssimativamente la lunghezza di 3-5 cm.\nPer iniziare la coltura dovrebbero essere usati apici delle dimensioni di 5-10 mm. Sciacquare gli apici sotto acqua corrente per 10 minuti e quindi sottoporli a sterilizzazione in una soluzione di candeggina commerciale al 20% agitando costantemente per 10 minuti. Quindi sciacquare tre volte per 5 minuti in acqua distillata sterile. Eliminare la parte di tessuto danneggiato dalla candeggina e collocare ciascun apice in un tubo di coltura (150 x 25 mm) contenente 15 ml di un mezzo costituito dai sali di base di Murashige e Skoog, 87,6 mM (30 g/L) di saccarosio, 0,56 mM (100 mg/L) di mioinositolo e 1,2 pM (0,4 mg/L) di tiamina-HCI, e solidificato con 8 g/L di agar. Questo mezzo puO essere acquistato preconfezionato, senza saccarosio ed agar, da Sigma Chemical, St. Louis, MO (M-6899).\nDopo 30-40 giorni di coltura i germogli dovrebbero avere la lunghezza di 4-6 cm. Le talee nodali prelevate da tali colture sono sottoposte a subcoltura nello stesso mezzo, ad intervalli di 4-6 settimane.\nPubblicato da Davide Petrini a 09:04 0 commenti\nEtichette: Solanum tuberosum\nDa oggi potrete trovare una nuova dispensa sul blog dedicato alla micropropagazione. la nuova pagina di approfondimento riguarderà una componente importantissima del processo micropropagativo: la composizione del mezzo di coltura. Indispensabile per un'ottima realizzazione dei nostri espianti. Nella pagina mezzodi coltura troverete interessanti nozioni sui componenti del subtrato, tabelle con i mezzi di coltura più famosi e un interessante capitolo sui fitoregolatori più utilizzati. Nei prossimi giorni questa dispensa sarà integrata anche con un altro capitolo in lavorazione inerente alle condizioni della camera di crescita. Buona lettura.\nPubblicato da Davide Petrini a 08:49 0 commenti\nMicropropagazione della patata\nIn questi giorni oltre a preparare la tesi (dovrebbe essere rilegata per mercoledì prossimo) mi sono dedicato alla semina di alcune varietà extra-piccanti di peperoncini Habanero e Tabasco per rilassarmi in vista del 23 maggio. Oltre a questo ho avuto modo di riorganizzare il lavoro del blog e ho deciso di ripartire da dove eravamo rimasti: dalla micropropagazione della patata. Con questo articolo inizierà il percorso per riuscire a micropropagare le nostre prime piantine di patata in casa.\nLa patata (Solanum tuberosum L.), coltura d'importanza mondiale, rappresenta un alimento essenziale nella dieta di una larga parte della popolazione del mondo. La produzione della patata è al quarto posto tra le maggiori colture alimentari. A differenza di altre colture di uso alimentare essa e propagata vegetativamente e purtroppo, a causa di questo metodo di propagazione, risulta suscettibile a molte infezioni di origine virale, fungina e batterica. Sono conosciuti almeno 23 virus in grado di infettare la patata riducendone la qualità e la produttività. La propagazione della patata mediante materiale vegetale proveniente da tuberi da consumo, causa la diffusione e la moltiplicazione di tuberi infetti. La produzione di tuberi seme privi di patogeni è una pratica ormai di routine che permette di mantenere un'adeguata produttività (Miller e Lipschultz, 1984). Questo obiettivo è raggiunto mediante la coltura di apici meristematici per l'ottenimento di tuberi seme denominati SPT (specific pathogen freetested), in cui cioè è stata verificata l'assenza di patogeni specifici (Cassels e Long, 1982). La micropropagazione è successivamente applicata per propagare clonalmente le plantule provenienti da coltura meristematica. Due tecniche di micropropagazione, molto semplici ma affidabili, possono essere applicate alla patata. La prima tecnica, denominata coltura di nodi singoli o multipli, implica la produzione di germogli mediante coltivazione di nodi singoli o multipli (propaggine in vitro) posti orizzontalmente nel mezzo di coltura. Nella patata i segmenti nodali sono prelevati da colture di germogli STP provenienti a loro volta da apici meristematici allevati in vitro. E’ da puntualizzare che la patata non pub essere moltiplicata mediante il metodo della coltura di germogli (propagazione in vitro mediante successivi cicli di proliferazione di gemme ascellari). Infatti, nel caso specifico l'aggiunta di citochinine non induce proliferazione di gemme ascellari. Normalmente nella patata è possibile, invece, ottenere rapidamente germogli privi di ramificazioni, allungati e composti di nodi multipli. Questi germogli (microtalee) o sono radicati ed acclimatati alle condizioni di pieno campo o sono suddivisi in talee uninodali per iniziare nuove colture in vitro. Sebbene non sia il metodo più efficiente di micropropagazione, la coltura di nodi è il procedimento più affidabile per produrre in vitro piante dalle caratteristiche rispondenti alla pianta madre (true to type).La seconda e forse più affascinante tecnica di micropropagazione implica la produzione di tuberi miniaturizzati (microtuberi) da germogli di patata allevati in vitro. Tale tecnica, oltre che essere un utile metodo di propagazione e conservazione di germoplasma dotato di caratteristiche di pregio, può essere adattata ai metodi commerciali di propagazione automatizzata e agli impianti di meccanizzazione di pieno campo su larga scala (McCown e Joice, 1991). A seconda delle cultivar, lo sviluppo di microtuberi è favorito da condizioni di fotoperiodo corto e dall'aggiunta nel mezzo di coltura di una citochinina e di elevate dosi di saccarosio (Seabrook et al., 1993; Gopal et al., 1998).Se l'impianto e le successive fasi di sviluppo dei microtuberi avvengono in condizioni ideali, la coltura ha un comportamento uguale a quella da tuberi seme (McCown e Wattimena, 1987).


13-02-2006, 18.56.06 #1\nCosa spinge secondo voi delle persone che dimostrano una mentalità molto aperta, progressista e che ritengo abbastanza intelligenti, ad essere invece, non dico discriminatori ma comunque "diffidenti" difronte all'altrui (presunta?) omosessualità? Ne conosco tante che sono di mentalità molto aperta ma se si parla di omosessualità (in particolare maschile) pur magari asserendo di ritenerla "leggittima" ne parlano quasi con disgusto o con pregiudizio. Io non riesco a spiegarmelo, l'unica cosa che posso pensare è che hanno la recondita "paura" (derivata da chissà che) di poter essere anche loro omosessuali e cercano così di esorcizzare la cosa... Secondo voi perchè accade?\n13-02-2006, 19.49.26 #2\nNon si può negare che sia ancora difficile oggi essere omosessuale, ma neanche che molte cose siano cambiate.\nAnche in piccoli centri ( mio osservatorio), dove i cambiamenti sono più lenti, ci sono molti più spazi di spazi di accettazione e tolleranza, quando non addirittura autentica naturalezza nell'accettare e rispettare le scelte sessuali e sentimentali delle persone.\nResidue resistenze le avverto , è vero, anche in persone colte ed evolute, ma più che altro a parole, nei ragionamenti... come se fosse un'ultima difesa ad accettare una qualche parte di sè o un'eventualità che può accadere( penso che si abbia paura di pensare alla diversità in riferimento alla famiglia, di un figlio, un amico...) Sono ultime resistenze...paure...\nMa nei rapporti interpersonali e ravvicinati non "vedo" gli stessi problemi e la conoscenza reciproca spesso abbatte la barriera.\nNonostante viviamo in società aperte e multietniche, continuiamo a essere diffidenti, ad aver paura di TUTTE le diversità da sè essendo esse vissute come minacce alla propria integrità identitaria...Però non è difficile . anzi moltissimi di noi hanno "voglia" di "farsi rassicurare" dalla realtà dei fatti che è sempre contraria ai pregiudizi.\nPerciò... è utile il coraggio di uscire allo scoperto e affermare la propria libertà cominciando dal proprio ambiente familiare e sociale dove il valore aggiunto dell'affettività può aiutare .\nE' solo un inizio...per i singoli, poi un altro discorso è quello sacrosanto delle battaglie culturali, politiche e tutto il resto che già sappiamo.\n13-02-2006, 19.52.07 #3\nChi ha la mentalità molto aperta significa per me che sono liberi di esprimere qualsiasi loro idea indipendentemente dal giudizio degli altri. Non significa essere più intelligenti e meno diffidenti\n13-02-2006, 19.54.18 #4\nCredo che in effetti molti abbiano la recondita paura di ritrovarsi a valutare tra sè e sè l'eventualità di essere omosessuali, perciò denigrano l'omosessualità anche con veemenza, credendo che questo denigrare abbia una sorta di funzione apotropaica, cioè di allontanamento da sé...il fatto che già solo il porsi la domanda "potrei essere omossessuale" provochi questo, mi fa intuire che l'argomento è considerato ancora "proibito" dai più, per i quali uno dei pochi capisaldi in questo mondo è evidentemente l'eterosessualità...hai ragione ha puntare l'attenzione sull'omosessualità maschile, perchè indubbiamente provoca più reazioni di quella femminile,forse perchè certi uomini hanno ancora l'idea di dover dimostrare in toto la loro "virilità"perciò sparano a zero su tutto ciò che potrebbe minarla...quello che bisognerebbe capire è se difendere la virilità per qualcuno coincide col difendere la propria individualità, per cui si tratta di una necessità interiore, o se è più un tentativo di assomigliare all'ideale di uomo che potrebbe essere propugnato dalla massa, cioè dall'esterno...insomma, a volte ci si schiera da una parte per convenienza o per senso di appartenenza ad una categoria, più che per reale convinzione...\nad ogni modo credo che quasi tutti quelli che ne parlano con disgusto, come dici tu, pensino per prima cosa "per-fortuna-non-sono-come-loro-non-voglio-averci-nulla-a-che-fare-non-c'entro-niente-con-questa-perversione"...per molti è come una malattia, uno snaturamento dell'essere umano...\n16-02-2006, 13.52.42 #5\nconcordo: temono di esserlo anche loro dunque rifiutano la cosa. mi sembra sul serio assurdo perche` implica che hanno paura di conoscee se stessi.\n17-02-2006, 10.01.35 #6\nIo credo che scopo di una vita intiera sia trovare l'unità in sé. Unità significa conciliare la nostra natura maschile e femminile. Credo che la gioventù di oggi sia molto previlegiata, perché ha la possibilità di fare questa ricerca molto presto, con molto meno tabù sociali.\nRiprodursi o non riprodursi può oggi essere veramente una scelta.\nIo non credo che siamo o no omosessuali. Credo che siamo tutto. Resta poi all'individuo scegliere come definirsi e come condurre la propria vita.\nCredo che come ci sono molto "eterosessuali" che hanno paura dell'omosessualità, ci siamo anche molto "omosessuali" che hanno paura dell'altro sesso.\nE' nell'interesse di tutti liberarsi delle proprie paure e lasciar circolare l'energia sessuale e quindi vitale e divina che è in noi.\n18-02-2006, 20.54.02 #7\nOttimo e condivisibile sunto Monica.. la mentalitä aperta non significa essere aperti a tutte le esperienze..Il rispetto per l'individuo omosessusle non significa condivisione.dell'idea\n18-02-2006, 21.07.26 #8\n>Credo che come ci sono molto "eterosessuali" che hanno >paura dell'omosessualità, ci siamo anche molto >"omosessuali" che hanno paura dell'altro sesso.\nNon credo, sai, che molti gay abbiano paura del sesso femminile. Metti sullo stesso piano cose secondo me molto diverse.\n18-02-2006, 21.14.31 #9\nResta poi all'individuo scegliere come definirsi e come condurre la propria vita.\nTi sbagli, Monica, non si sceglie se essere etero o omosessuali, è un dato di fatto insito nella propria natura. Sei in un certo modo e basta, se uno/a è etero, è etero e basta e non sarà mai omosessuale e VICEVERSA, se uno/a è gay è gay e basta. Questo è il punto da capire per accettare le persone gay. Mi fermo qui perchè ne abbiamo già parlato e riparlato e apenso che è stato detto già tutto quello che c'era da dire.\n18-02-2006, 21.18.17 #10\nAnzi forse è esattamente il contrario, molte persone gay all'inizio non si autoaccettano e hanno paura del loro essere gay, il che vuol dire avere paura di amare e sentirsi attratti da persone del proprio sesso. E con questa paura magari provano ad avere storie etero che poi si rivelano un fallimento ( e questo lo so perchè l'ho visto con i miei occhi su persone che conosco ).\nUltima modifica di Melany : 18-02-2006 alle ore 21.19.18.


Progetto RI0: “UN LUOGO MAGICO da recuperare” - ITET Mantegna - Mantova\nL’ITET Andrea Mantegna ha accolto positivamente l’iniziativa di riqualificazione delle Pescherie di Levante di Giulio Romano, presentata per la prima volta il 6 aprile del 2017 dal Labter-Crea,dalla Fondazione e da tutti gli Enti ed Associazioni partecipanti, come il Comune, la Provincia ,la Tea, il Parco del Mincio, Slow-Food.\nLa nostra scuola ha partecipato con due classi dell’ambientale, la terza e quarta coordinate dalle insegnanti Roversi e Manicardi.\nLe ore effettuate sono rientrate nell’alternanza scuola-lavoro e il compito delle classi è stato quello di effettuare analisi microbiologiche e di misurare, nelle stazioni considerate nello studio ambientale, la temperatura del RIO al variare delle stagioni.\nL’incontro pubblico, per relazionare il nostro lavoro, si è tenuto il giorno 5 aprile nella bellissima chiesa di S.Maria della Vittoria, alla presenza della Fondazione e di tutti quelli che hanno condiviso il progetto.\nI nostri ragazzi hanno presentato, relazionando davanti ad una folta platea, lavori eseguiti in powerpoint e video riportanti il lavoro e le analisi svolte durante l’anno scolastico.\nA conclusione due sono gli elementi importanti da sottolineare:\nil rapporto instaurato con la Fondazione che potrà svilupparsi anche in seguito ed ha aperto la scuola ad una visione più ampia del nostro patrimonio ambientale, storico ed artistico; e la seconda attraverso la riqualificazione del RIO sarà possibile la rigenerazione del patrimonio artistico e soprattutto la sua fruizione.


12 Marzo 2015 , redazione\nPrima o poi bisogna farlo. Fa paura ma il dente bisogna toglierselo e il miglior modo possibile è andare a testa bassa verso l’obiettivo. E così sapere come prenotare un esame non è solo utile perché si tratta di un passaggio chiave nell’iter formativo di ogni studente universitario ma è anche un modo per sbloccare la situazione e quell’inevitabile empasse che la paura di essere bocciati impone. Tecnicamente, come molte altre cose, sapere come prenotare un esame all’UniCusano è un gioco da ragazzi. Farlo ancor di più. A voi la lettura di questo post sul come prenotare un esame all’UniCusano.\nRoba da BLOG di UNICUSANO. Roba da università che rende tutto più facile e rende chiaro il modo in cui usufruire del vantaggio tecnico. Stiamo parlando di sapere come prenotare un esame all’UniCusano, stiamo parlando di compiere quel gesto fatidico che inizierà il count down verso la prova definitiva. Che siate pronti o no (nessuno lo è mai veramente), ecco come prenotare un esame all’UniCusano:\nTutti devono, infine, tenere a mente che, a partire dalla data dell’iscrizione, è possibile sostenere il primo esame solo dopo 90 giorni e che il suddetto esame è prenotabile da 30 giorni ed entro 7 giorni dalla data dell’appello, per gli appelli nella sede di Roma, secondo calendario pubblicato alla pagina https://www.unicusano.it/studenti/date-appelli/appelli-sedi-esterne , per le sedi esterne.\nRassegna Stampa Universitaria 12 marzo 2015


Taxi, il 24 novembre si sciopera anche a Catania. "No alle multinazionali"\nTaxi, il 24 novembre si sciopera anche a Catania. “No alle multinazionali”\nLa protesta dei tassisti è contro le liberalizzazioni previste nel Ddl “Concorrenza”, che punta ad adeguare l’offerta all'utilizzo di app e piattaforme tecnologiche. Ma secondo Ugl è una nuova "deregolamentazione del settore"\n“Rischio che il comparto vada alle multinazionali”\n“Faremo sentire anche stavolta la nostra voce perché non vogliamo che tutto il comparto cada nelle mani di multinazionali pronte a cannibalizzare il nostro lavoro, con il serio pericolo che si trasformi in una vera e propria giungla – dice Galeano. La categoria dei tassisti in questi anni ha fatto tanti sacrifici per mettersi in regola e contrastare l’abusivismo, affrontando anche la dura prova prima della crisi economica ed oggi quella del Covid-19. Con il Dl “Concorrenza”, invece, per chi esercita l’attività sarà proprio una grande mazzata che renderà vane le conquiste ottenute a fatica sino ad ora. Vogliamo quindi che il Governo stralci dal testo l’articolo che introduce questa rivoluzione disciplinando, invece, le attività delle piattaforme tecnologiche in conformità con la legislazione in vigore. Chiediamo, inoltre, l’introduzione dell’obbligo di compilazione e tenuta da parte del conducente di un foglio di servizio in formato elettronico, per chi esercita il servizio di noleggio con conducente, oltre all’istituzione del Registro informatico pubblico delle imprese titolari di licenza per il servizio taxi e di quelle di autorizzazione per il servizio di noleggio con conducente.” La protesta dei tassisti etnei si svolgerà in forma statica nelle zone di sosta riservata ai Taxi in tutta la città di Catania ed in particolare nell’aeroporto “Vincenzo Bellini”, in via Vittorio Emanuele (piazza Duomo), in piazza Stesicoro, in corso Italia (angolo viale Libertà), in piazza Giovanni XXIII (stazione centrale) ed in via Etnea davanti la Villa Bellini.\nRegione, “buoni viaggio” su taxi e ncc per le persone disabili o disagiate


Wrap di gamberi alla griglia con coleslaw e avocado - Palazzetti Magazine\ndi Kristel Cescotto 1 Febbraio 2021\nUna ricetta di pesce che sa di casa, che profuma di esotico, che invoglia a riunirsi attorno a un tavolo. Un secondo che ha il suono di risate amichevoli e il profumo del barbecue. Quello dei wrap di gamberi alla griglia con insalata coleslaw e avocado.\nLe piadine, i burritos e i wrap li ho sempre amati. Farli e mangiarli. Farli perché tra la preparazione di un ingrediente e l’altro vago nei meandri dei ricordi più belli, è quasi catartico. Mangiarli perché… beh, sono precursori di felicità.\nCon un wrap di gamberi alla griglia tra le mani è tutto più bello, ti perdi nel profumo stuzzicante dei crostacei grigliati, ti inebri delle note esotiche di hummus e avocado, ammiri tutte le sfumature del cavolo verza. E poi lo assaggi e lasci che la magia si compia.\nAdoro il wrap di gamberi grigliati di oggi perché è un trionfo di sapori, profumi e colori. Una ricetta semplicissima che ti fa fare una meravigliosa figura se preparata a regola d’arte. E basterà seguire i pochi passaggi qui sotto per farlo.\nPer me ogni occasione è buona per un wrap fatto in casa, e lo sarà presto anche per te, ne sono certa.\nWrap di gamberi alla griglia con coleslaw e avocado – la ricetta\nq.b. di olio extra vergine d’oliva, sale, paprika dolce e semi di sesamo\nPer l’insalata coleslaw\n1/4 di cavolo verza bianco\nPreparare il wrap di gamberi alla griglia in casa tua è davvero facilissimo e renderà felice tutta la famiglia! Inizia dall’insalata coleslaw: monda le verdure e la mela, tagliandole a julienne.\nIn una boule prepara il condimento: unisci maionese, senape, zucchero, succo di limone, olio, sale e pepe. Aggiungilo all’insalata coleslaw e mescola bene; metti da parte.\nOccupati ora dei gamberi alla griglia: puliscili privandoli del carapace e dell’intestino. Insaporiscili con la paprika, il sale, i semi di sesamo e un filo d’olio. Cuocili sulla griglia, un paio di minuti saranno sufficienti per ottenere dei gamberi saporiti e succulenti, cotti alla perfezione!\nNon ti resta che scaldare le piadine e farcirle in questo modo: inizia con un cucchiaio di hummus, procedi con l’insalata coleslaw, l’avocado a fettine, il songino e i gamberi grigliati.\nChiudi il wrap di gamberi alla griglia con coleslaw e avocado e gustalo in tutta la sua goduriosa sfiziosità!


Per il campionato di Liga 2017-2018, la massima divisione spagnola, si gioca alle ore 18.15 di domenica 27 agosto, la gara Real Madrid-Valencia. Se si è interessati a seguire in diretta la partita, ecco tutte le modalità per farlo.\nLa partita Real Madrid-Valencia sarà trasmessa in diretta tv da Fox Sports e/o Fox Sports Plus (canali 204-205 della piattaforma satellitare). Lo streaming sarà dunque garantito dal servizio SkyGo disponibile per tutti gli abbonati.\nLa telecronaca di Real Madrid-Valencia sarà a cura di Stefano Borghi e Francesco Guidolin.


A Gorizia seminari di formazione in “public affairs e lobbying”, con ospiti di spicco - Qui UNIUD\nInterverranno Paolo Zanetto e Roberto Razeto. Iniziativa nell’ambito dei corsi di studi in Relazioni pubbliche e Comunicazione integrata per le imprese e le organizzazioni\n“Fare lobbying in Italia” e “Fare lobbying a livello internazionale” sono i titoli dei due seminari di formazione che terranno rispettivamente Paolo Zanetto e Roberto Razeto giovedì 19 aprile e martedì 24 aprile a Gorizia. Aperti a tutti gli interessati, i due appuntamenti si svolgono nell’ambito dei seminari di formazione “Public affairs e lobbying”, organizzati dall’Università di Udine con il contributo del Consorzio per lo sviluppo del polo universitario goriziano all’interno del piano dell’offerta formativa professionalizzate dei corsi di studi in Relazioni pubbliche e Comunicazione integrata per le imprese e le organizzazioni. Per partecipare ai seminari, è gradita l’iscrizione via mail a larem-convegni@uniud.it.\nGiovedì 19 aprile dalle 13 alle 16, presso il Kinemax (Piazza Vittoria 41), Paolo Zanetto parlerà di “Fare lobbying in Italia”. Fondatore della Cattaneo Zanetto & Co. - prima società in Italia di public affairs e lobbying per fatturato, con sedi a Roma, Milano e Bruxelles -, Zanetto è vicepresidente de “Il Chiostro”, associazione che promuove la cultura, la pratica e la trasparenza nella rappresentanza degli interessi.\nMartedì 24 aprile dalle 11.30 alle 14.30, nell’Aula Magna della sede dell’ateneo friulano di via Santa Chiara 1, Roberto Razeto interverrà su “Fare lobbying a livello internazionale”. Razeto è consulente della Banca Mondiale in materia di comunicazione istituzionale e ambientale e docente di public affairs presso la Libera Università di Lingue e Comunicazione Iulm di Milano.\n«Questi interventi vogliono aiutare a comprendere, dalla voce di professionisti autorevoli, come funziona il mondo spesso frainteso del lobbying inteso in senso moderno – spiega Luca Brusati, coordinatore del ciclo di seminari –, e come tali si inseriscono nella ricca offerta culturale e professionalizzante dell’Università di Udine rivolta al settore della comunicazione».


Il metano raggiunge finalmente la piana reatina -\nIl metano raggiunge finalmente la piana reatina\nAuthor: admin Published Date: 30 Ottobre 2021 Leave a Comment on Il metano raggiunge finalmente la piana reatina\nMetanizzazione Piana. Paolucci (Uil): “Risultato storico per i cittadini. Adesso l’amministrazione risolva le altre criticità”.\n“Con l’accensione della fiaccola, il metano oggi ha raggiunto la piana reatina. Un risultato storico per gli abitanti di questo angolo di territorio che da anni chiedevano la realizzazione dell’opera”. Lo dice Alberto Paolucci, Segretario della Uil di Rieti e della Sabina romana.\n“Finalmente, dopo anni di continue richieste della Uil, l’amministrazione ha deciso di impegnarsi per raggiungere questo traguardo – dice Paolucci – Manca ancora una parte per poter affermare che la metanizzazione della Piana sia realmente conclusa, ma pare solo questione di tempo e quindi attendiamo fiduciosi”.\n“La realizzazione di questa opera però – aggiunge l’esponente sindacale reatino – non può far dimenticare le altre criticità che cittadini e cittadine della Piana lamentano da anni: scarsa illuminazione pubblica, pulizia dei fossi, carente manutenzione delle strade, trasporto pubblico quasi inesistenze, sicurezza. Non solo: non esiste ancora una rete fognaria, che va messa immediatamente all’ordine del giorno, perché gli scarichi e le acque nere inquinano e ciò accade a due passi dalla riserva naturale di Lungo e Ripasottile”.\n“Risolvere queste emergenze – conclude Paolucci – deve diventare un impegno prioritario dell’amministrazione, perché per troppo tempo i problemi sono stati nascosti come la polvere sotto al tappeto. E questo i risedenti della Piana non lo meritano, perché pagano le tasse come chi vive nel centro storico e non sono certo cittadini di serie B”.\nCAVALLARI (FEDERLAZIO) interviene al convegno FIRST CISL sul credito →\n← A Terni presentazione del libro di Roberto Lorenzetti “Dal Velino alla Cascata delle Marmore”


Report “EPR in crisis”: EPR fallimentare dal punto di vista economico, ma pubblicizzato in Italia. - Rete Clima\nReport “EPR in crisis”: EPR fallimentare dal punto di vista economico, ma pubblicizzato in Italia.\nSecondo il report EPR in Crisis di Steve Thomas dell’Università di Greenwich (Londra) il progetto dell’EPR è in crisi.\nQui una sintesi (non esaustiva) delle principali ragioni individuate dal report:\n- la costruzione dei primi due reattori in Europa (Olkiluoto in Finlandia e Flamanville in Francia) va molto male, con aumenti fuori controllo sia dei costi che dei tempi di realizzazione.\nE’ curioso il fatto che se a Olkiluoto si può pensare a problemi legato alla mancanza di esperienza del costruttore Areva, a Flamaville è invece coinvolta EDF, l’azienda con la maggiore esperienza in campo nucleare del mondo: data la portata dei ritardi e la crescita dei costi, è quindi più verosimile ipotizzare problemi progettuali all’intero progetto EPR più che specifici problemi cantieristici;\n- i prezzi a cui viene offerto sono molto molto alti, tanto da spingere i committenti a cancellare i progetti (vedi Sud Africa e Canada) o hanno fatto vincere la gara a un competitore con prezzi più bassi (come nel caso degli Emirati Arabi Uniti);\n- i processi per l’ottenimento delle autorizzazioni per la sicurezza nucleare in Francia, USA e Gran Bretagna (i potenziali prossimi luoghi di installazione) sono incompleti: anche in caso di esito positivo, le modifiche necessarie a ottenere l’approvazione delle autorità di controllo possono far aumentare ulteriormente i costi.\nAnne Lauvergnon (Ad di Areva) riconosce che “il costo dei reattori nucleari è sempre cresciuto per ogni generazione successiva, perché i requisiti di sicurezza erano sempre più elevati. La sicurezza ha un costo”.\nFrancois Roussely, già Ad di EDF dichiarava: “La complessità risultante dell’EPR, che emerge dalla scelta progettuale, specificatamente dal livello di potenza, del sistema di contenimento, del contenitore (core catcher) e della ridondanza dei sistemi di sicurezza è certamente un handicap per la sua costruzione e dunque per il suo costo”.\nGià nel 1995, e di nuovo nel 1997, c'erano preoccupazioni sul costo dell’EPR allora valutato sui 2.000 $/kW: quando altri competitori promettevano prezzi di 1.000 $/kW, l’allora Framatome (da cui poi nascerà Areva) rivedeva i costi a 1.500 $/kW sia nel 1998 che poi nel 2001. E’ un prezzo inferiore a un quarto di quanto l’EPR viene offerto oggi, dopo dieci anni e a 6.000 $/kW o più.\nSembra che difficilmente l’EPR sarà conveniente, a meno di enormi sussidi pubblici o scaricando sugli utenti i costi, quali che essi siano.\nE in Italia? La lungimiranza di una fetta del settore economico e politico nostrano vuole puntare sull’EPR, ed ecco che è iniziata la campagna pubblicitaria per la promozione del nucleare. di cui già qui parlavamo: e lo spot punta su una partita a scacchi in cui il nucleare è il giocatore con pedine bianche, mentre l’avversario è l’oscurantista giocatore con pedine nere, che mette in dubbio la sicurezza delle centrali.\nIl succo della campagna, commissionata dal Forum nucleare italiano, è che il nucleare conviene.\nAnche considerati i dati economici di cui sopra sembra difficile pensare che possa convenire ad altri rispetto che alle grandi aziende che lo vogliono promuovere: e visto che la tecnologia nucleare non si regge senza il supporto economico dello Stato, questa sembra la solita vecchia storia italiana di grandi opere capaci di generare benefici privati e costi pubblici.\nCosti ancora una volta spalmati su quella collettività che siamo sempre noi, i cittadini.\nE visto che anche lo spot chiede di prendere posizione verso il nucleare, di crearsi una opinione, direi che il NO è ora di dire in maniera ancora più chiara e più netta di quanto già fatto in passato: qui per dire la tua.


Tignanello 2016, numero uno della "Top 100 Cellar Selections 2020" | RossoRubino.tv\nHome NOTIZIE Tignanello 2016, numero uno della “Top 100 Cellar Selections 2020”\nLa pietra miliare della famiglia Antinori ha conquistato il podio della classifica di"Wine Enthusiast"\nVino simbolo del “Rinascimento” del vino italiano, Tignanello 2016 conquista la prima posizione della Top 100 Cellar Selections 2020, classifica stilata dall’autorevole rivista internazionale “Wine Enthusiast” dedicata ai vini dal lungo potenziale di invecchiamento.\nUn vino che non può assolutamente mancare nelle cantine di collezionisti e amanti di vini pregiati. Dall’Oceania alle Americhe passando per l’Europa, la classifica 2020 dell’influente rivista americana vede la Toscana come terra di elezione votata alla produzione del miglior vino dal grande potenziale di invecchiamento: precursore del suo tempo, Tignanello ha rappresentato un punto di svolta nel panorama enologico nazionale, contribuendo a quello straordinario movimento conosciuto come “Rinascimento” del vino italiano, iniziato a fine anni ‘60. Ancora un vino di Marchesi Antinori, come già accaduto con Guado al Tasso Bolgheri DOC Superiore 2008 nella classifica del 2012.\nIstituita per la prima volta nel 2007, la Top 100 Cellar Selections ha confermato ancora una volta l’autorevolezza del vino italiano negli Stati Uniti. Il primato di TignaneIlo così come di Guado al Tasso, suo predecessore al numero uno della classifica, è il risultato di un lungo e attento lavoro di ricerca svolto dai critici della rivista, rivolto a coloro che il vino lo acquistano per collezionarlo ma anche per aspettarlo, in attesa che arrivi il miglior momento per berlo.\nTIGNANELLO 2016 – TOSCANA IGT La 2016 è stata un’annata particolarmente favorevole; a un autunno e un inverno tendenzialmente miti sono seguite una primavera all’insegna del bel tempo e un’estate calda e asciutta. Caratteristiche che hanno favorito una perfetta maturazione delle uve. Il risultato di questo ideale andamento climatico è stato un vino in perfetta sintonia con l’annata: Tignanello 2016 è equilibrato e intenso con un finale lungo, complesso e persistente.\nTop 100 Cellar Selections 2020


30 Gennaio 2020 - ilSottosopra\n5/6 febbraio 2020. Sala ROSA DEL VENTO Fondazione dei Monti Uniti di Foggia – Mercoledì 5 febbraio 2020 h. 18.00 – Aula magna Liceo classico ‘Lanza’– Giovedì 6/2/2020 h.11.00 – ROTARY CLUB FOGGIA “ UMBERTO GIORDANO” CASA FREDA ( Evento riservato ai Soci del Club) Giovedì 6 febbraio 2020 h. 20.30 “E’ ormai certo che il cosiddetto “progresso” rende il nostro vivere sempre più complicato e richiede ai singoli individui un’istruzione prolungata, aggiornamenti continui, capacità di servirsi di tecnologie più sofisticate. Si è affermato così il concetto di “civiltà complesse”.…\n30 Gennaio 2020 1 Febbraio 2020 Sara Di Benedetto\nLe classi dell’Istituto Blaise Pascal hanno preso parte, in data odierna, alla visione del film in lingua inglese “Cena con delitto – Knives Out”. Cena con Delitto, il film diretto da Rian Johnson, è un crime in stile Agatha Christie, nel quale al sagace investigatore Benoit Blanc (Daniel Craig) deve scoprire chi ha ucciso il romanziere 85enne Harlan Thrombey (Christopher Plummer), rinvenuto senza vita nella sua abitazione in circostanze non chiare, dopo una festa per il suo compleanno. Il brillante detective è sicuro che l’uomo sia stato ucciso e inizia…\n30 Gennaio 2020 30 Gennaio 2020 Roberta Caldarone\nCena con Delitto, il film diretto da Rian Johnson, è un crime in stile Agatha Christie, nel quale al sagace investigatore Benoit Blanc (Daniel Craig) deve scoprire chi ha ucciso il romanziere 85enne Harlan Thrombey (Christopher Plummer), rinvenuto senza vita nella sua abitazione in circostanze non chiare, dopo una festa per il suo compleanno. Il brillante detective è sicuro che l’uomo sia stato ucciso e inizia a indagare su chi possa essere l’omicida.Per Blanc sia i familiari che la servitù avrebbero avuto un movente per sbarazzarsi di Harlan, quindi tutti…


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Abbiamo avuto la fortuna di copiere due viaggi per un totale di 25 giorni in Nuova Zelanda, che come ci aspettavamo, ci ha regalato magnifiche viste naturali.\nIn questa prima gallery trovate alcune immagini "sparse" della nuova zelanda.\nLa seconda gallery è dedicata alla farewell spit, una lingua di sabbia sull'estremità settentrionale dell'isola del sud, formatasi alcune migliaia di anni fa e ancora in sviluppo grazie alle particolari correnti del mar di tasman e dello stretto di Cook.\nPer chi fosse interessato alla visita della spit vi segnaliamo uno dei pochi operatori autorizzati: Farewell Spit ECO Tours senza il quale non e' possibile visitare la spit nella sua interezza.\nUn'altra zona che regala panorami mozzafiato è la penisola di Akaroa, a pochi passi da Chistchurch, questa antica caldera vulcanica invasa dalle acque è caratterizzata da una paesaggio molto mosso tagliato da lunghi fiordi dalle pareti dolci.\nConsigliamo di fare una deviazione nel percorso da Christchurch ad akaroa per la strada panoramica, chiaramente indicata.\nVista panoramica dalla strada alta\nFiori della penisola\nL'oceano pacifico dalla vetta della penisola\nA sud di Akaroa troviamo un'altra area che puo' regalare splendide viste, i Moreaki Boulders grandi sfere di pietra di origine vulcanica che sebrano grandi biglie lanciate da un gigante sulla spiaggia.\nIl preiodo migliore per visitare i Boulders è ovviamente l'alba e con la bassa marea, quindi preparatevi ad una sveglia antelucana se volete ottenere le viste migliori e ricordatevi di verificare gli orari della mareaì, dato che con l'alta marea i boulders non sono visibili.\nProcedendo verso sud, arrivati a Dunedin, forse una delle città più belle dell'isola del sud, si puo' raggiungere facilmente la penisola di Otago, santurario naturalistico per uccelli marini e pinguini (non cosi' facili da avvistare come si pensa ! ).\nTra le numerose passeggiate che si possono fare lungo i numerosissimi sentieri della penisola segnaliamo Chasm e Sandfly Bay (11 10 e 8 sulla cartina ufficiale della penisola che potete facilmente trovare qui).\nProcedendo nel giro dell'isola del sud si raggiunge la regione delle Catlins e di Invercargill, la zona è poco popolata dedita alla pastoriza e il turismo non è una delle voci principali dell'economia della zona, tuttavia le bellezze naturalistiche delle Catlins sono indiscutibili, dagli alberi pietrificati di Curio Bay alle spiagge deserte di Cannibal Bay e Surat bay passando per le Cathedral Caves, le numerose cascate dell'entroterra, gli alberi pettinati dal vento di Slope Point e lo stupendo faro di Nugget Point dove il mare di tasman si mischia con l'oceano pacifico meridionale.\nSe desiderate visitare la regione delle Catlins cercate di dedicarci 3-4 giorni per poter vedere tutto, per quanto riguarda le Cathedral caves e Curio Bay dovete sempre considerare l'orario delle maree.\nUn ultima nota positiva è stato il Greenpoint track a Invercargill dove i relitti delle navi abbandonate nella baia del porto di Invercagill fanno da cornice al breve percorso naturalistico.\nProcedendo nel giro dell'isola del sud, tappa obbligata è il super turistico Millford Sound, probabilmente una dei luogi piu' frequentati Nuoza Zelanda, tuttavia il fiordo è magnifico, le numerose cascate che si gettano dalle montagne a picco sul fuordo tolgono il fiato, se poi avete la fortuna di non trovare brutto tempo (cosa ardua essendo il punto più piovoso della Nuova Zelanda !) lo spettacolo è assicurato.\nDal Millford Sound ci siamo spostati nella desolata West Coast per la visita dei ghiacciai del Franz Joseph e Fox, la desolata spiaggia dei cercatori d'oro di Gillespie's e più a nord le pancake rocks, per le quali dovrete aspettare l'alta marea e sperare in una mareggiata per coglierne il meglio, noi non ostante l'alta marea abbiamo trovato una delle rare giornate in cui il mar di Tasman è calmo.\nAll'apice dell'isola del sud troviamo l'Abel Tasman National Park per il quale sarebbe necessario un viaggio ad hoc per goderne appieno le bellezze, noi ci siamo limitati ad un paio di visite brevi della zona tra Awaroa e Bark Bay, anche qui occhio alle maree dato che alcuni passaggi sono percorribili unicamente con la bassa marea, altri invece con l'alta marea richiedono lunghe deviazioni.\nAbbiamo un po' trascurato l'isola del nord (per ora) ma abbiamo avuto la fortuna di visitare il famoso Tongariro National park prima delle erruzioni del 2012 e abbiamo percorso per voi l'estenuante alpine crossing, sentiero di 19km piuttosto battuto ma che sa comunque regalare delle viste mozzafiato dell'isola del nord.\nCome ultima gallery vi mostriamo alcune immagini della zona vulcanica di Rotorua, splendida zona vicino al lago Taupo dove si possono fotografare le meraviglie geotermali di questo lontano spicchio di mondo.\n0 #2 Guest 2013-05-01 11:31\nConcordo con dario, sono splendide !\n0 #1 Dario 2013-05-01 11:30\nStupende fotografie ! Complimenti !


warlike Gennaio 30, 2010\nBusyBox è un software freeware che presenta una piccola interfaccia a linea di comando che comprende, in un unico eseguibile, anche le versioni precedenti dei comandi Unix, con cui è possibile eseguire molte operazioni di manutenzione. Grazie alle sue dimensioni molto piccole, è stato scelto di usarlo come strumento per l’installazione di Ubuntu (Linux).\nSenza il bisogno di complicate installazioni o configurazioni del programma, con BusyBox è possibile compiere operazioni di manutenzione, gestione del proprio computer e inoltre può rivelare anche problemi nel caso che una procedura di installazione di Ubuntu si interrompesse.\nIl motivo più comune che porta ad usare la linea di comando di BusyBox, è l’utilizzo di un CD-Rom di installazione di Ubuntu danneggiato o che masterizzato malamente. E’ consigliato installare Ubuntu utilizzando il driver Ide generico, in modo da evitare eventuali errori da parte di altri driver specifici. In questo modo le prestazioni non saranno delle migliori, ma sarà garantita la compatibilità.\nDownload – BusyBox


L’incompetenza al potere e il potere di cambiare – Sardegna Possibile\nTag:ambiente, bonifiche, cardi, chimica verde, E.On, Eni, Fiume Santo, inquinamento, Matrika, Minciaredda, Parco dell'Asinara, Porto Torres, salute\nA Porto Torres, pochi giorni fa ho partecipato a un incontro pubblico con il Ministro dell’Ambiente Orlando. La sala è angusta, sto in piedi tutto il tempo, circa un’ora e mezzo, troppo poco tempo, a mio avviso, per parlare di temi così importanti. Inizia a parlare un giovanissimo attivista (13 anni!) di Plant for the Planet, probabilmente il miglior contributo della serata. Si prosegue con interventi di varie personalità politiche e istituzionali di Porto Torres e Sassari, quasi tutti fortemente critici, tranne quelli del sindaco Ganau e della presidente della provincia Giudici (ovviamente). Si parla di gravi situazioni come quella del Parco dell’Asinara e soprattutto di gravi ritardi nell’attuazione delle bonifiche, di chimica verde e di cardi che, parliamoci chiaro, sono un flop.\nE il ministro Orlando risponde. Prima di tutto risponde proprio a Giovanni, il ragazzo che pianta alberi per salvare l’ambiente, e lo fa sottovalutando l’intelligenza sua e quella di tutta la platea, dicendo che non è un problema italiano, è un problema mondiale e finché il mondo non si prenderà le sue responsabilità nel disastro ambientale, non si può fare niente. Da lì in poi snocciola un’infinita serie di dati e parla di milioni di euro a disposizione, che però dobbiamo riuscire a spendere bene perché, in passato, non abbiamo dimostrato grosse capacità in tal senso. È sempre colpa di qualcun altro: della Regione, della Provincia, del Comune (comunque un passo avanti rispetto al “mondo” citato prima, visto che ha di fronte gli amministratori del suo partito). Dice che le bonifiche sono iniziate. Però quella che riguarda il sito più inquinato, cioè la collina di Minciaredda (che continua a fare disastri perché il percolato si mescola ai fanghi tossici e finisce nella falda e nel mare) non è ancora partita perché, nonostante il ministero abbia fornito tutti i dati necessari a Eni, l’azienda non ha ancora presentato il progetto di Bonifica. Bisogna tenere presente che l’Ente Nazionale Idrocarburi, nonostante la privatizzazione, di fatto è ancora controllata dallo stato italiano che, se anche non dispone della maggioranza assoluta dei voti in assemblea, ha tutta una serie di poteri speciali. E se non viene presentato il progetto di Bonifica, non si può approvare, e finché non viene approvato non si può fare fretta a Eni, perché la legge non lo consente! Il pensiero è di per sé farraginoso, ma avete capito bene: Porto Torres deve aspettare che l’Eni si degni di presentare il progetto per la bonifica. Anche questa volta il ministero non c’entra niente. Il ministro dell’ambiente non può legalmente mettere fretta a una Società controllata dal Ministero dell’Economia e delle Finanze e dalla Cassa Depositi e Prestiti.\nIl tempo scorre e il malumore cresce, la sala non sembra molto contenta di queste risposte. Il vocio di disapprovazione aumenta, perdo le ultime veloci battute, ma capisco una cosa: la chimica verde, per loro, è l’unica soluzione di sviluppo per Porto Torres. Parlano di 380 posti di lavoro (ma dal 2000 hanno perso il lavoro circa 3400 persone fra operai effettivi, anche di altre aeree come per esempio Alghero, e indotto), ed è un dato che appare in contrasto con alcuni dati precedenti che indicano un massimo di 180 posti di lavoro. A me non sembra sviluppo, a me sembrano briciole.\n«Rischio di perdere l’aereo – dice il ministro Orlando – ma devo dedicare cinque minuti al Parco…». Cinque minuti al Parco che potrebbe dare lavoro a molte più persone di quelle impiegate nel grosso investimento di Matrika? Cinque minuti a un parco nazionale, sito di interesse ecologico europeo e internazionale, al centro del Santuario dei cetacei? Cinque minuti a un patrimonio inestimabile che stanno continuando a trascurare, che continuano a permettere di inquinare perché non possono mettere fretta a Eni (controllata di fatto dallo Stato Italiano)?\nA conclusione dell’incontro l’ultima perla: «Stiamo contrattando con E.On per un potenziamento dell’impianto di Fiume Santo per consentire alla Sardegna di essere autosufficiente dal punto di vista energetico». Il ministro forse sta scherzando… La Sardegna è autosufficiente dal punto di vista energetico e il surplus lo vende, o meglio lo svende. Come può un Ministro dell’Ambiente non saperlo? Come può venire a Porto Torres ed essere così impreparato su temi fondamentali come questi? Come può circondarsi di gente così incompetente da non reperire dei dati corretti?\nQuella del ministro è stata una pessima figura, lui e i suoi sodali del PD hanno mostrato grave incompetenza e mancanza di serietà. Non è più possibile pensare di delegare il governo della nostra terra a una classe politica così arretrata e incapace. Dobbiamo farcene carico noi che la amiamo e la conosciamo davvero.\nCandidata per Gentes prov. Sassari.\nVeterinario Omeopata e Agopuntore, libero professionista, 51 anni, due figli.


Mondiali Pokljuka 2021: Medaglia d'oro per il quartetto norvegese, gara perfetta di Vittozzi e Wierer ma l'Italia è nona - Biathlon Azzurro\nMondiali Pokljuka 2021: Medaglia d’oro per il quartetto norvegese, gara perfetta di Vittozzi e Wierer ma l’Italia è nona\nStaffetta femminile imprevedibile fino all’ultimo poligono quella dei Mondiali di Pokljuka 2021. Alla fine ad avere la meglio è la Norvegia che bissa il risultato dello scorso anno ad Anterselva, regalandosi la soddisfazione di portare a casa l’ennesima medaglia d’oro nelle competizioni a squadre. Podio completato nello stesso ordine dei Mondiali 2020 da Germania e Ucraina.\nGara sempre di testa per la solida squadra norvegese ad eccezione della prima frazione, dove Ingrid Landmark Tandrevold con una ricarica concessa perde solo dall’azzurra Lisa Vittozzi, autrice di una gara perfetta. Prestazione eccezionale invece per la leader della classifica generale Tiril Eckhoff in seconda frazione che, nonostante le tre ricariche sfruttate al poligono, mette in campo il solito passo dominante sugli sci dando il cambio alla compagna di squadra Ida Lien in testa con più di 25” di vantaggio sulle avversarie. Partenza in solitaria per la ventitreenne originaria di Drammen che si è fatta inizialmente avvicinare e superare nel corso dei primi due giri da Ucraina, Bielorussia e Polonia complessivamente più precise al tiro ma è poi riuscita a staccarle con un prepotente ultimo giro che le ha permesso di chiudere la frazione nuovamente in testa con un vantaggio di 9”. Ultima frazione tutt’altro che tranquilla per Marte Olsbu Roeiseland che rischia addirittura il giro di penalità nel corso del poligono a terra lasciando di fatto aperta la sfida per il primo posto fino all’ultimo poligono dove riesce però a ritrovare la precisione chiudendo la partita per la medaglia d’oro.\nDopo una buona prima frazione di Vanessa Hinz e la seguente di una non brillantissima Janina Hettich fallosa al tiro, Denise Herrmann con un ultimo giro degno di nota insieme a un’enciclopedica Franziska Preuss in ultima frazione porta la Germania a una medaglia d’argento che pareva lontana nella prima metà di gara. La quarta frazionista tedesca, perfetta al tiro, riesce ad avere la meglio sulla temibile Olena Pidhrushna nell’ultimo giro: la ventiseienne si è dapprima fatta staccare dalla veterana ucraina che si è portata a soli sette secondi dalla testa ma con una volata ed un passo prepotente negli ultimi metri la tedesca si è concessa addirittura il lusso di alzare le mani al cielo al fotofinish sul traguardo. Terzo posto e medaglia di bronzo quindi per la squadra ucraina che, orfana delle sorelle Semerenko, dimostra per l’ennesima volta di poter dire la sua in questo format di gara. Pidhrushna insieme alle compagne Anastasiya Merkushyna, Yuliia Dzhima e Darya Blashko disputano una gara convincente sin dalla prima frazione, concedendo in totale sette ricariche e chiudendo insieme alla Germania con un ritardo di poco sopra gli 8” dalla testa.\nQuarto posto con un po’ di amarezza per la competitiva squadra bielorussa che ha sperato fino all’ultimo di potersi portare a casa un risultato di prestigio al Mondiale, precedendo una deludente Svezia decisamente sottotono nel corso di tutte le frazioni. Una sorprendente Polonia chiude invece al sesto posto giocandosi il podio fino all’ultimo cambio grazie allo schieramento delle due atlete più competitive in seconda e terza frazione.\nL’Italia, con la solita Vittozzi al lancio, chiude nella top-10 con un nono posto senza infamia e senza lode. Frazione perfetta per la sappadina che ha chiuso la prima frazione con più di sedici secondi di vantaggio sulle avversarie. Precisissima al tiro come spesso dimostrato in questo format, firma un poligono da antologia con il miglior shooting time. Seconda frazione discreta per la giovane Michela Carrara che sfortunatamente non si è dimostrata all’altezza delle prestazioni individuali disputate in questa rassegna iridata concedendo in totale quattro ricariche. Non particolarmente brillante sugli sci come gli scorsi giorni, concede il cambio a Federica Sanfilippo al nono posto con un distacco di 1’06”07. Gara non particolarmente soddisfacente per l’altoatesina originaria della Val Ridanna che si salva da un possibile giro di penalità sfruttando bene cinque delle sei ricariche disponibili. Federica, grazie a un discreto ultimo giro è riuscita comunque a dare il cambio a Dorothea Wierer di poco fuori dalla top 10. La leader azzurra ha condotto una gara perfetta con il miglior shooting time di frazione e con la consueta precisione portando l’Italia a concludere al nono posto con un distacco di 1’28”1.\nGara con rimpianti per l’Italia che avrebbe forse potuto dire la sua con uno schema di gara differente, i tecnici azzurri sono stati praticamente gli unici a optare per uno schieramento con le atlete di punta in quarta ma soprattutto in prima, dove il passo sugli sci non particolarmente sostenuto concede alle meno prestanti di rimanere nel gruppo di testa.\nE se avessimo seguito due nazioni a caso come Norvegia e Ucraina schierando Wierer e Vittozzi rispettivamente in seconda e quarta frazione? E se avessimo aggiunto al lancio Irene Lardschneider e optato per Carrara in terza? Avremmo potuto giocarci la medaglia?\nNon lo sapremo mai ma continuiamo a sperare che questa riflessione sia di buon auspicio per il futuro.\nIBU CUP: Russia e Germania conquistano il successo nella staffetta di Brezno-Osrblie