Publicadas por Mire a la/s 12:12 a. m.\nManzanas “Al ojo por ciento”:\n4 manzanas MUY verdes.\nRoncito o brandicito\nPelas las manzanas y las descorazonas –pobrecitas ellas- sin partirlas, que te queden como una bola con un agujero en el centro. Esto es muy importante.\nLuego las untas con el limón, pa’que no se pongan negras, las pones en remojo en agua con, limón o con solo jugo de naranja.\nEn otro bol colocas unas 4 y 5 cucharadas grandes de azúcar y la unes con canela en polvo hasta que el azúcar tome colorcito marroncito claro (a no ser que seas una adicta a la canela, claro está)\nEn ese bol colocas las pasitas –si quieres la remojas un ratote antes con el ron- y un chorrote de ron o de brandy. Te haces como una especie de melao con la consistencia de la miel.\nLuego que has embarrado media cocina, sala y parte del garaje. Tomas las manzanas, las escurres y las rellenas con el melao tipo miel que hiciste en el bol. Sustituyendo el corazón que le quitaste por la mezcla.\nDespués las colocas en una fuente y al horno, que ya debería estar como calientito.\nAh! Se me olvidaba, el juguito de naranja es para que la bañes de vez en cuando en el horno.\nY cuando veas que las pasitas están algo sequitas y las manzanas bronceaditas, lo sacas del horno.\nLas dejas enfriar. Las sirves con una cremita chantilly por encima y una discreta lluvia de almendras que previamente le cambiaste el color en el sartén y listo.\nPostre que suelo hacer cuando me llegan amigos a visitar y de paso se quedan a Cenar.\nPS: Voy hacer tu torta ver si me sale tan buena como a ti\nestoy seguro de que esa torta te debe quedar riquisima, sobre todo por el ingrediente secreto que no debe ser otro que mucho amor.\nCreo fervientemente en lo que decía Tita, la protagonista de "Como agua para chocolate": cuando le preguntaban el ingrediente secreto de sus comidas, decía que amor, mucho amor. Por cierto amiga me esta persiguiendo eso de la mamografía: aprovecharé en Octubre, con eso del mes de toma de conciencia sobre el cancer del seno para hacerme una BBB. Hoy en un show de televisión la protagonista se hacía una, y se veía tan dolorosa como el dolor reflejado en el cuento de la tuya. Y ya yo pase de largo por GO (los 40) sin cobrar los $200...\ncómo sigues maga?\ncuéntame de tu vida... no sé nada de ti.\nquisiera unas vacaciones XL.\n...esta muy buena la receta, sobre todo la parte de la decoracion.\nMe gusto mucho tu blog, estare por aqui de vuelta :-)\nsilmariat: gracias por la receta, la haré!!!!\npointdx: organiza algo y hasta hago la torta (siempre pongo la torta, jajaja).\nmartha: sí hay que hacérsela y respirar hondo y profundo. Eso sí, búscate un radiólogo HOMBRE\nAlana: estoy bien, sola con mis hijos, pero bien.


MadridActualizado: 10/09/2018 17:40h\nSoraya Saénz de Santamaría abandona la actividad políticay empieza una nueva etapa.\nLa exvicepresidenta faltó la semana pasada a la convocatoria de Pablo Casado con el grupo Popular en el Congreso, y a la Junta Directiva Nacional en Barcelona. Explicó que hablaría primero con Casado antes de desvelar su futuro.\nEl líder del PP había ofrecido a Santamaría integrarse en su proyecto, pero Santamaría rechazó las opciones planteadas. «He adoptado esta decisión después de una profunda reflexión y desde el convencimiento de que es lo mejor tanto para la nueva dirección del PP como para mi familia y para mí».\nSoraya Sáenz de Santamaría (Valladolid, 1971) se licenció en Derecho en la Universidad de Valladolid con 23 años, quedando primera de su promoción.\nIngresó por oposición en el cuerpo de abogados del Estado. En 2000, comenzó su carrera política como asesora jurídica del entonces ministro Mariano Rajoy.\nEntre 2011 y 2018 se desempeñó como vicepresidenta y ministra de la Presidencia del Gobierno de Mariano Rajoy. Ha sido portavoz del Gobierno de España, entre 2011 y 2016, y desde 2016 también asumía la cartera de Administraciones Territoriales.\nTambién ha ejercido como profesora de Derecho administrativo en la Universidad Carlos III (Madrid), y se la considera una especialista en política territorial\nSe le ha llamado «vicetodo», porque ha sido la mujer con más poder político en España en los últimos años. Además de las competencias que Rajoy puso en sus manos, gestionó las numerosas crisis que el presidente le encargó a ella directamente, para apagar los fuegos que se crearon, o que podían producirse.


Casa en venta en Colina Campestre, Bogotá, Cundinamarca - Casa en Venta en la Colina Campestre\nPropiedad - 3967\nCasa en Venta en la Colina Campestre\nPrecio de venta: $1.050.000.000,0\nSuperficie de terreno: 243,0 m²\nSuperficie de construcción: 342,0 m²\nSuperficie de fondo: 27,0 m\nCasa de tres niveles con un área construida total de 342M2, consta de 3 Habitaciones 4 baños mas cuarto de servicio y estudio, cocina abierta. parqueadero para 3 carros. Excelente estado espacios amplios. Ubicada en la zona residencial de colina campestre rodeada de parques y zonas verdes. facilidades vias de acceso y rutas de transporte publico calle 134 autopista norte, avenida las villas. Cerca a centros comerciales supermercados Carulla Exito, colegios de la zona. Clínica La Colina, Reina Sofia


¿Compensaciones de muerte? | Tribuna Feminista\nDesde donde me alcanza la memoria, o mejor dicho, la memoria virtual, recuerdo un lugar común utilizado por aquellos que se empeñan no solo en criticar la ley integral contra la violencia de género –cosa absolutamente respetable- sino también en atacar y desprestigiar a quienes hemos hecho bandera de la lucha contra la violencia machista. Además, por supuesto, del consabido y nada respetable “feminazi”, que, por tan usado, ya ni duele.\nSe trata de un curioso fenómeno que llamaré, por llamarlo de algún modo, “compensación de muertes”, y que todavía me sigue dejando ojiplática cada vez que alguien lo utiliza.\nLo bien cierto es que éste es el único delito que es contestado con esa agresividad y falta de empatía. Jamás he visto reprochar a alguien que luche contra la corrupción que por eso deje de hacerlo contra el terrorismo, ni que si una persona se queja del incremento de las muertes de tráfico le digan que los muertos por accidentes laborales son más.\nLa ignorancia es muy osada, desde luego. Si no lo fuera, tal vez alguien de los que me ha respondido poniéndome ese enlace se hubiera molestado en averiguar que la fiscal que llevó ese caso era la que suscribe –alguna vez me ha pasado-, precisamente a quien se lo están estampando en la cara como queriéndome decir que de eso no me preocupo o no lo persigo. Con toda mi carga de supuesto feminazismo, que no se diga. Pero, más allá de implicaciones personales, la cosa es para preocuparse, y mucho.\nMe vino a la cabeza el nombre de “compensación de muertes” por relacionarlo con una figura que se usa en Derecho para atemperar la responsabilidad del autor de un hecho cuando la víctima tiene una parte de responsabilidad en su producción, como ocurre con los accidentes de tráfico. Si el conductor circulaba a velocidad excesiva, por ejemplo, pero la víctima atropellada cruzaba con el semáforo para peatones en rojo. Pero esto no es aplicable cuando se trata de un delito doloso y menos si especialmente reprochable como un asesinato. Y lo que es absolutamente marciano es hacerlo cuando entre uno y otro supuesto no existe ninguna relación.\nEstimados señores trols: si toda su argumentación cada vez que asesinan a una mujer es ésa, dice mucho de ustedes, y nada bueno. Porque parece que están afirmando algo así como que lo merecía. Es decir, que como hay mujeres que matan a sus hijos, pues no pasa nada porque otras sean asesinadas por sus parejas. Un argumento perverso, pero es la única explicación que se me ocurre al hecho de que respondan a un asesinato con la más absoluta falta de empatía y espetando un “y tú más”, con el que nada tiene que ver la mujer muerta ni quienes la reivindican.\nY les diré más. Si no se trataba de eso, sino de echarnos en cara que nos quejemos de una cosa y no de otra, también yerran. Que una luche contra la violencia de género no la vuelve insensible ni le incapacita para condenar cualquier otro delito. Pero con su argumento lo que si dejan claro es una cosa: que a ustedes cada mujer muerta les importa un ardite, porque ni siquiera son capaces de reivindicar su memoria. Es más, la utilizan para su particular batalla contra eso que llaman la “ideología de género”, un término que se han sacado de la manga y pretender vender como construcción doctrinal o poco menos.\nLo bien cierto es que éste es el único delito que es contestado con esa agresividad y falta de empatía. Jamás he visto reprochar a alguien que luche contra la corrupción que por eso deje de hacerlo contra el terrorismo, ni que si una persona se queja del incremento de las muertes de tráfico le digan que los muertos por accidentes laborales son más. Pero no hace falta ir a ningún supuesto jurídico. ¿Alguien imagina que a un científico que investiga contra el cáncer infantil le reprochen que no lo haga contra el Alzheimer o la esclerosis múltiple? ¿Osarían argumentar al lamento por una muerte por cáncer que hay une epidemia de Ebola? ¿Verdad que suena absurdo? Pues eso.\nPero no podía acabar este repaso sn aludir a su tema preferido: las denuncias falsas. Un tema que se exacerba si se tiene en cuenta la incidencia mínima según la estadística oficial de la Fiscalía General del estado y del Observatorio del Consejo General del Poder Judicial. También es pintoresco que a ello respondan que esa estadística no es válida, sin más. Volviendo a los ejemplos ¿alguien se imagina que, ante el recuento de víctimas de accidentes de tráfico por la Dirección General alguien dijera que ese organismo las inventa o las manipula sin más argumentos? Porque esto es, ni más ni menos, lo que hacen, hasta el punto de que si buscamos en google “denuncia falsa”, 1 de cada 10 entradas se refieren a la violencia de género. Y de ahí, por supuesto, a la generalización hay un paso: todas las mujeres somos unas mentirosas, y las denunciantes más. Acabáramos.\nTEMAS RECIENTESIsabel Muñoz, Elina Brotherus, Gema Rupérez, Tamara Arroyo, Cristina Almodóvar en JustMAD9\nTEMAS ANTERIORESMi cuerpo, mi decisión. Las feministas polacas y el derecho al aborto


La web de Física - Colección de problemas - Problema id 67\nAnalizaremos las situaciones según la Ley de Lorentz .\nEn el primer caso, siendo , el módulo de la fuera se hace 0, ya que siendo el ángulo formado por ambos vectores. Así pues la trayectoria que seguirá el protón en el campo será rectilínea.\nEn el segundo caso, dado que los vectores y son perpendiculares, el módulo del vector fuerza no se anula y su dirección es (de acuerdo con la significación del producto vectorial) perpendicular a ambos vectores. Por tanto, sobre el protón solo actúa una fuerza perpendicular a su velocidad que actuará como fuerza central proporcionando a la partícula un movimiento circular uniforme. El radio se puede obtener igualando la fuerza magnética con la centrípeta,\nSi el protón es abandonado en reposo, su velocidad es 0. Por tanto sobre él no actúa ninguna fuerza de acuerdo con la Ley de Lorentz. Así pues en este caso la partícula no sufrirá ningún tipo de aceleración y permanecerá en reposo.\nEs de notar que la única diferencia que suscita en la Ley de Lorentz el hecho de que la partícula sea un protón o un electrón es el signo de la carga, además del valor de la masa. Así pues el problema se reduce a considerar la diferencia entre\nSegún las propiedades del producto vectorial, ambos vectores tienen la misma dirección (perpendicular como ya dijimos a y a ), sin embargo difieren en cuanto al sentido, por lo que la fuerza central provocada en el caso b) hará que el electrón gire circularmente en sentido contrario al del protón.\nAdemás, dada la menor masa del electrón, el radio de la trayectoria circular también será menor, como podemos comprobar en la ecuación (2). Este hecho se puede entender mediante el siguiente razonamiento: con menor masa, la fuerza centrípeta necesaria para provocar el mismo giro es menor, por lo que en igualdad de fuerzas -en valor absoluto-, el radio de giro será más pequeño.


Trabajadora del aseo, dirigenta sindical, feminista, artista y madre. Joseffe Cáceres va como candidata constituyente por el distrito 12, representando a las comunas de Puente Alto, La Florida, La Pintana, San José de Maipo y Pirque.\nJoseffe Cáceres es una mujer con mucha energía y convicción. Desde temprano, que se prepara para llegar a las 7.30 AM a su trabajo en el ex Pedagógico, mientras que garantiza que Amaru, su hijo de 12 años, llegue al colegio con la tarea hecha. Luego, se encarga de organizar a sus colegas ante la profunda crisis que enfrenta la universidad.\nDesde el año 2016 que Joseffe barre y limpia la extensa universidad, la cual hoy está intervenida tras recibir una calificación deficiente en la acreditación. En la actualidad, Joseffe también se enfrenta a los despidos, donde una vez más la crisis de la pandemia de coronavirus la pagan los trabajadores con despidos injustificados.\nLa joven dirigenta gremial, tiene 33 años y se reconoce su preocupación por las condiciones de sus colegas del ex pedagógico, siendo por segunda vez electa como dirigenta sindical de la Asociación de Funcionarios de la Universidad Metropolitana de las Ciencias de la Educación (ANFUMCE). La primera vez que fue electa, sus colegas la eligieron por primera mayoría, mientras que en la segunda ocasión ganó por segunda mayoría, con una diferencia de cuatro votos.\nAntes de llegar al ex Pedagógico, trabajó siete años como técnico en asistente social en uno de los sectores más postergados de la región metropolitana, se trata de Bajos de Mena en la comuna de Puente Alto, lugar con un fuerte peso en trabajadores a contrata y donde estallaron las primeras protestas por el hambre durante la pandemia.\nPor el derecho al pan, salud, trabajo y vivienda\nEn Puente Alto nació, estudió y comenzó a organizarse a través de la realización de actividades culturales y sociales, destacándose como una activista social y además artista de la cultura hip hop. Su padre es obrero de la papelera y su madre ha trabajado toda su vida desde joven, teniendo una vida sencilla y con mucha colaboración entre vecinos, familiares y amigos.\nJoseffe, se organiza en el Partido de Trabajadores Revolucionarios (PTR) y es dirigenta nacional de la agrupación de mujeres y de la diversidad sexual, Pan y Rosas. Desde su militancia ha puesto sus energías en el fortalecimiento de la organización política de las y los trabajadores, como también se ha preocupado en vincular el movimiento feminista con el mundo obrero. Ha pasado por muchas batallas apoyando huelgas como las de las trabajadoras de Integra, Correos de Chile, el paro portuario del 2014, el paro nacional docente, entre otros.\n"¡Pobres víctimas sus hijos, señor presidente, que gozan de un sinfín de privilegios a costa nuestra!", fue la frase viral de Joseffe tras el polémico viaje de los hijos de Piñera a Asia durante el año pasado, quienes fueron reconocidos por las millonarias licitaciones del Estado que le ha entregado a los queridos retoños de Piñera.\nY es que para Joseffe es necesaria una salida anticapitalista de las y los trabajadores para enfrentar a este régimen de los 30 años de abusos, los mismos que se han expresado en privilegios y de grandes riquezas para una minoría que continúa gobernando en el parlamento. Es por esto, que llama a fortalecer a las organizaciones de base de trabajadoras y de trabajadores, de la juventud precaria y de los estudiantes que dieron inicio a la rebelión de octubre del 2019.


El Corte Inglés cierra una nueva emisión de bonos de 100 millones | Modaes.es\nEl Corte Inglés cierra una nueva emisión de bonos de 100 millones\n16 Ene 2015 — 19:24\nEl grupo de grandes almacenes El Corte Inglés ha cerrado hoy una colocación privada de bonos por un importe de 100 millones de euros, con vencimiento en el año 2020. Esta operación se completa después de que la compañía madrileña cerrara el pasado 9 de enero la colocación privada de bonos senior por un importe de 500 millones de euros.\nLos bonos devengarán un cupón anual de 3,875%, según ha afirmado la empresa, que ha detallado que esta emisión, que se ha colocado principalmente entre inversores internacionales, es una ampliación de la anterior como consecuencia de las "buenas condiciones" que ofrece el mercado y de la "buena aceptación" por parte de los inversores.\nEl gigante español ha explicado que los fondos obtenidos se utilizarán para disminuir deuda bancaria, de acuerdo con la estrategia de diversificar las fuentes de financiación. Morgan Stanley ha actuado como banco colocador de la operación; el cierre y desembolso de la emisión se realizará previsiblemente el 26 de enero y los bonos cotizarán en la bolsa irlandesa.


Maldito lead - Cuando los movimientos sociales pierden el rumbo - Club de Fundraising\nPosted on 28 abril, 2017 11 junio, 2017 by Marcelo Iñarra\nUn día alguien, en una reunión en Holanda hace más de una década y media, me dijo que lo que yo hacía se llamaba lead generation. Me puse a buscar, y sí: parece que esta idea que estaba probando en mi propio laboratorio digital estaba siendo probada simultáneamente -con éxito- por empresas y algunas pocas ONGs internacionales.\nLa idea era simple y hoy ya está instalada: generar comunidades digitales brindando una primera experiencia gratuita para dar la oportunidad de vivir la organización, y luego dar la opción de donar o voluntariar -en el caso de las ONGs- , o comprar o consumir algún producto o servicio -en las empresas-.\nChris Anderson, autor de Freeconomics, habla de que la era digital permitió el acceso a una economía donde nos acostumbramos a acceder gratis a leer las noticias, a hacer llamadas y/o videoconferencias, y mil actividades en donde ya lo hacemos sin cuestionarnos que es «gratis».\nEn los últimos años en el mundo de las ONGs se repiten sin pensar estas dos palabras: lead generation. «Queremos hacer lead generation para captar fondos», «Tal agencia hace lead generation«… Maldito lead.\nCuando comencé a usar los medios digitales, hace más de dos décadas, siempre lo vi como una oportunidad de llegar a muchísima gente, con un costo muy bajo, y de manera democrática. La revolución tenía una nueva herramienta. Como la imprenta revolucionó el acceso al conocimiento, los medios digitales daban la posibilidad de generar movimientos de cambios en la sociedad. En muchos casos ha sucedido pero, en otros, las ONGs están perdiendo el rumbo. Se escucha de manera mercantilista hablar de lead -posible persona para ser contactada para hacer una donación- como un fin, y no como un medio para activar a esa a persona para ser el cambio que buscamos en la sociedad.\nHace 10 años, junto a Alfredo Botti, en una publicación llamamos a estos leads «Probadores sociales», «Social trysumers». Es decir los que, luego de probar lo que se les ofrece, decidirán si dan un paso más para sumarse o no a una organización.\nMuchas ONGs no han entendido el cambio de paradigma que plantea la era digital, donde estos leads no están más para financiar las ideas brillantes de las ONGs. Ellos mismos conforman una nueva dimensión de nuestra organización, redefiniendo el concepto de «nosotros». «Nosotros» somos todos los que hacemos más o menos por una causa. Detrás de un like hay un lead que está sentado en la reunión de equipo. Le abrimos la puerta para que sea parte. Y con ella o él podremos lograr nuestros objetivos. Como buen miembro del equipo, su posible donación nos dará más oportunidades para lograr victorias sociales.\nLes propongo una idea: por una semana cambien el vocabulario de su ONG, cambien lead por «miembro de nuestro movimiento», «activista», «amigo de la causa» o el término que más les guste o se adecue a su causa.\n¡Larga vida a los medios digitales!\nMarcelo Iñarra Iraegui dirige la consultora www.marceloiniarra.com\nAutor: Marcelo Iñarra Iraegui\nEsta nota ha sido categorizada en Editorial, Opinión y etiquetada en Lead, lead generation. Guarda el enlace permanente.\nMore in Editorial, Opinión


Zona de Sentidos, un espacio lúdico para niños con discapacidad - Emprendedores.News\nRedaccion 26 octubre, 2017\tEmprendedores Comentarios desactivados en Zona de Sentidos, un espacio lúdico para niños con discapacidad 2,832 Vistas\nLa necesidad siempre presenta oportunidades. Una hija prematura con encefalopatía crónica no evolutiva impulsó a la madre a emprender un espacio lúdico para niños con discapacidad.\nZona de Sentidos es una tienda online de juguetes, ayudas técnicas (productos de apoyo) y equipamiento especialmente pensados para niños con discapacidad y una red de información para familiares, terapeutas y otras personas interesadas en la materia.\nEl proyecto, definido como “un espacio para chicos extraordinarios”, nació en 2013 a partir de la experiencia familiar de Daniela Briñón. “Detecté que no era tan simple conseguir juegos de estimulación y los productos de apoyo que los terapeutas sugerían para los chicos”, cuenta la emprendedora, cuya hija, nacida prematura, tiene una encefalopatía crónica no evolutiva (ECNE).\nPara aportar a las nuevas dinámicas familiares, la emprendedora también creó una comunidad que funcionara como encuentro: “Me pareció vital contar con un espacio de información y contacto entre familias de chicos con discapacidad porque ingresar en este recorrido es muy complejo y agotador. Entonces, el espacio de Zona de Comunidad pasó a ser tan importante como la tienda. que otros padres podamos brindar contención a las familias que recién inician este camino es muy gratificante y reparador de algún modo”, explica. En el blog, Daniela participa como una mamá más: “Compartimos muchos temas con otros padres. Es común que me llamen y nos quedemos hablando largo rato”, dice sobre las experiencias compartidas.\nEn Zona de Sentidos se pueden encontrar juguetes y materiales didácticos enfocados en el aprendizaje, la autonomía, la creatividad, la comunicación, la estimulación sensorial, socioemocional y motriz. El primer producto diseñado por la marca fue la caja de texturas, “una herramienta para los chicos que por sus propios medios no pueden salir a explorar”, según su creadora.\nHoy son más de 240 los productos que están a la venta, la gran mayoría ideados y desarrollados por la marca, entre los que hay, por ejemplo, mordillos, cepillos vibradores, bodies con y sin apertura de botón gástrico, chalecos y mantas de peso, plataforma de balanceo -como una hamaca-, juegos para palpar y adivinar, cuentos con pictogramas y mesas sensoriales. El proyecto contó con una inversión inicial de $10.000 y en la actualidad tiene facturación anual de $600.000. Para el año próximo, proyecta abrir un showroom y extender las ventas al exterior.\n“Mi sueño es que las familias que tienen niños con discapacidad logren una vida lo mas plena posible, que puedan ser felices con la situación de vida que les tocó. Los padres de chicos con discapacidad solemos escuchar diagnósticos demoledores, recibir malas noticias y sentir que no hay salida. En mi experiencia, sé que hay aspectos que no van a cambiar pero la mirada que tenemos sobre los chicos sí puede cambiar: podemos hacer que lleven una mejor vida, ellos como niños, nosotros como padres y a la vez, impulsar un cambio en la mirada que la sociedad tiene sobre la discapacidad”, cuenta Briñón.\nChaleco de peso: Cómodo y relajante. Para mejorar la atención en clase, al hacer la tarea o durante las sesiones de terapia. Lleva pequeñas bolsitas de peso en su interior, cuyo uso y cantidad debe ser regulado por el terapeuta profesional. Recomendado para chicos con déficit de atención e hiperactividad.\nCircuito de equilibrio: Los ejercicios de psicomotricidad permiten al niño explorar, investigar, superar y transformar situaciones de conflicto, enfrentarse a las limitaciones, conocer y oponerse a sus miedos, desarrollar la iniciativa propia y asumir roles, entre otros tantos beneficios. Es ideal para niños que requieren más desafíos de balance.\nMordillos para lápices: Calma y concentracion durante las actividades de escritura.\nMuchos niños necesitan masticar porque los ayuda a autoregularse. Estos mordillos lisos para lápiz son una solución segura para satisfacer la necesidad de masticar. Tienen un beneficio extra, le suma peso extra al lápiz dándole al niño una mayor conciencia de la mano.\nPrevious Siete recomendaciones para evitar el hacking de información\nNext El marketing digital en las pequeñas y medianas empresas\nEl poder de la inteligencia intrapersonal


10 TRUCOS DE NUTRICIÓN - Olympus Sport NutriciónOlympus Sport Nutrición\n10 TRUCOS DE NUTRICIÓN\nPARA COMER EN VACACIONES\nPor Nevan Kendall\nEl éxito del culturismo está basado en un elevado porcentaje en la dieta, por eso además de entrenar con rigor los culturistas y entusiastas del fitness todos siguen una dieta relativamente estricta durante todo el año.\nY cuando llegan las vacaciones ¿qué hacer con la dieta?\nHe aquí 10 trucos para que podáis relajaros con la alimentación los días festivos sin que eso signifique dar dos pasos atrás en vuestro desarrollo y buena forma.\nPara muchos, sólo pensar en días festivos o en las vacaciones basta para llenar su imaginación con mesas llenas de alimentos prohibidos y con un desenfreno gastronómico y dietético rebosante de calorías y de azúcares.\nEstá demostrado que ir en contra de los deseos insaciables por comer constituye un esfuerzo mental de no poca magnitud y que en cierto sentido la mente, y el cuerpo, necesitan algo de alivio. En realidad somos criaturas sociales y no vivimos en una burbuja aislada sino con familia, amigos y compañeros y todas las celebraciones están ligadas a la mesa y al consumo de alimentos especiales para la ocasión.\nSean los fines de semana, algunas fechas señaladas individualmente como cumpleaños y otras efemérides, pero sobre todo los días de vacaciones, todo está predestinado desde un punto de vista social y psicológico a la relajación y no hay lugar para la privación en el ámbito dietético.\nSin embargo, la realidad es que los desmanes en la dieta pueden suponer dos pasos atrás en vuestro desarrollo físico y el buen grado de forma que hayáis obtenido después de muchos esfuerzos en el gimnasio y sacrificio con la dieta. ¿Qué hacer?\nTodo es cuestión de control, o mejor dicho de psicología. Cuando os sentís privados de algo eso os hace desear con más ahínco el objeto de esa privación. Si no establecéis una estrategia de control, acabaréis consumiéndolo de forma descontrolada.\nEl truco consiste en permitirse una pequeña o moderada cantidad del alimento (o alimentos) en cuestión para disfrutar de la compañía de la familia o gozar de la celebración, pero sin traspasar un punto límite de control.\nDe hecho, siempre he sido de la opinión de que las dietas excesivamente rígidas, así como ponerse unas expectativas excesivamente altas solamente te predisponen para el fracaso, porque acabas sintiéndote frustrado por todo lo que te pierdes y además culpable porque estás constantemente quebrantando el compromiso de dieta. Y ese es un camino difícil de recorrer que puede conllevar efectos muy negativos.\nUn culturista o alguien que desee alcanzar un buen grado de forma física, con bajos niveles de grasa corporal, no puede actuar como si no perteneciese a este mundo, dónde hay festividades, fines de semana y días de vacaciones en los que tiene que convivir con los demás.\nPor tanto, voy a daros unos sencillos trucos que os permitirán disfrutar de esas fechas especiales, o de las vacaciones bien merecidas sin que parezcáis un monje de clausura y sin que eso suponga tirar por la borda gran parte de los resultados físicos que con tantos esfuerzos habéis conseguido.\n1. Comed antes de comer\nUn error que cometen algunos es no comer antes para compensar la comida que saben que harán fuera de su programa de alimentación limpia. Piensan que de esa manera, al saltarse alguna comida (como el desayuno) eso compensará por el exceso de alimento que acaben consumiendo más tarde. Es un grave error y muy contraproducente.\nNo olvidéis que la dieta culturista está basada en múltiples comidas a lo largo del día, por varias razones, primero porque de esa forma la digestión es más fácil, segundo, el cuerpo recibe nutrientes con mayor frecuencia, lo cual favorece el crecimiento, pero sobre todo también porque eso estabiliza la curva de glucosa y de insulina y por tanto no se sufren picos de hambre.\nSi os saltáis el desayuno u otra comida tendréis tendencia a atracaros luego y como el cuerpo sólo puede procesar una cierta cantidad de calorías de una vez, los excesos irán a engrosar los depósitos de grasa corporal.\nSi coméis con cierta regularidad (pequeñas cantidades), vuestros niveles de azúcar en sangre estarán estables y cuando os sentéis a comer estaréis satisfechos y no os excederéis.\n2. Comed proteína lo primero de todo y luego comed más proteína\nOs insto muy encarecidamente a que vuestro primer plato sea de proteína de cualquier tipo, carnes, pescados o aves.\nLa proteína es más compleja de digerir que otros nutrientes y por tanto su gasto dinámico es mayor, es decir las calorías que el cuerpo ha de quemar para digerirla, con lo que de las calorías que aporta una parte se gasta ya en su procesamiento.\nPor otro lado, la proteína ejerce un efecto estabilizador de la glucosa en sangre, con lo cual también os hace sentiros satisfechos antes. Además, como sabéis, los músculos se componen de proteína, así que éste es el nutriente del que se fabrican los músculos, por tanto debe ser una máxima prioridad.\nDe manera que empezad a comer con los alimentos proteínicos y así luego os atiborrareis menos de panes, patatas, purés, dulces y otros alimentos menos importantes y más perjudiciales para vuestra forma física.\n3. Moderad las raciones\nNo parece que haga falta señalar este punto, porque la alimentación culturista está basada en múltiples comidas de pequeña cantidad, pero lo haré igualmente. Sugiero que consumáis pequeñas cantidades de alimento, por múltiples razones, por ejemplo porque así no ‘dilatáis’ el estómago, lo cual puede hacer cada vez más difícil que os sintáis llenos y satisfechos. Las pequeñas comidas se digieren mejor y mantienen estable los picos de insulina.\nAsí que si os veis tentados o ‘forzados’ a comer de todo, incluidos alimentos poco saludables, hacedlo en pequeñas cantidades y como es evidente el ‘daño’ será menor.\n4. Comed despacio y masticad bien\nOs sugiero que coméis despacio y mastiquéis bien. Los médicos aseguran que deberíamos masticar al menos 10 veces cada bocado antes de tragarlo para ahorrar trabajo al estómago así como para facilitar la mejor digestión de los alimentos. Comer despacio también permitirá que os sintáis más satisfechos y por consiguiente que sintáis menos necesidad de atracaros de comer, por lo que ingeriréis menos calorías.\n5. Procurad ingerir más fibra\nEste es un truco que puede ayudaros mucho a disfrutar de las comidas en familia o fuera de casa sin arruinar vuestro programa de nutrición saludable.\nLa fibra es un hidrato de carbono que el aparato digestivo humano es incapaz de digerir porque carece de las enzimas digestivas para ello.\nPor consiguiente, de la fibra no derivamos ni una sola caloría.\nEso no quiere decir que la fibra no tenga importancia para el organismo porque carezca intrínsecamente de valor nutricional, todo lo contrario, ya que la fibra es indispensable en nuestra alimentación puesto que aunque no aporte valor calórico ni nutricional desempeña numerosas funciones muy importantes.\nPor ejemplo, la fibra regula los niveles de azúcar en sangre y por ello minimiza la producción de insulina, una hormona que provoca picos de hambre y también incrementa los depósitos de grasa corporal. La fibra es indispensable para el buen tránsito intestinal, evita el estreñimiento y limpia los intestinos. Estudios recientes han comprobado que también reduce los niveles de colesterol en sangre.\nPero, con todo ello, lo más relevante de la fibra para mantener una dieta equilibrada en estas ocasiones de excesos gastronómicos, es que se hincha en el estómago ya que absorbe el agua y por tanto os hará sentir llenos y saciados, de tal forma que podréis comer una gran volumen de alimentos fibrosos, sentiros satisfechos mientras que la ingestión de calorías será muy baja.\nPor tanto, procurad comer muchas ensaladas, verduras y hortalizas, cuyo contenido en fibra es muy elevado, así como en vitaminas, minerales y antioxidantes.\n6. Usad sustitutos para las grasas\nLa mayoría de comidas de celebración, así como la de los hoteles y restaurantes suele tener mucha grasa escondida. En ocasiones (cada vez más) se ofrecen dos versiones, la ligera y normal, cuya diferencia es su contenido en calorías y grasas. Si es así optad por la ligera.\nLas salsas de acompañamiento contienen mucha grasa, como las de ensaladas, las de queso y las de barbacoa.\nAliñad la ensalada con una vinagreta o con algo de vinagre balsámico y aceite de oliva virgen, un poco de limón al pescado y especias a las carnes sin otras salsas.\nCuidado con los derivados lácteos, como la leche, los quesos, la mantequilla y las salsas que se hacen con ellos porque añadidos a los alimentos elevarán muy sustancialmente el nivel de calorías y de grasa.\n7. Tirad a la basura los sobrantes\nSin estáis de vacaciones no tendréis acceso a ellos, pero si la celebración la lleváis a cabo en casa, es frecuente que después de una comilona festiva queden restos de todo tipo, especialmente de salsas y postres, que van a la nevera y cada vez que la abráis tendréis la tentación delante y acabaréis consumiendo esas salsas y restos con la excusa de aprovecharlos.\nEsos mismos alimentos en su momento perjudicaron vuestra dieta y ahora pueden volver a hacerlo por segunda vez. Tiradlos a la basura, porque de lo contrario estaréis saboteando aún más vuestra forma y composición corporal.\n8. Ayudaos con enzimas digestivas\nPuesto que durante la mayor parte del tiempo el cuerpo está acostumbrado a una dieta sana, baja en grasa y en azúcares, cuando ahora os salgáis de la norma eso supondrá en cierta manera un choque para el sistema digestivo que tendrá que procesar mucha más cantidad de alimento. Un suplemento de enzimas digestivas puede constituir una gran ayuda muy beneficiosa, especialmente cuando realicéis una comida muy abundante y de paso evitará que os sintáis muy llenos y pesados.\nElegid un complejo enzimático que incluya enzimas de tipo proteasa (como la bromaleína y la papaína) para favorecer la digestión de proteínas, y otras de tipo amilasa y lipasa para los hidratos de carbono y grasas respectivamente. Algunos productos incluso contienen lactasa para ayudar a digerir la lactosa, que suele provocar no pocos problemas de gases y pesadez de estómago.\n9. Evitad que el metabolismo se ralentice y agilizad la digestión\nPuesto que vuestro objetivo es minimizar el impacto negativo que puedan tener sobre vuestro cuerpo esas comidas fuera de la dieta habitual, y puesto que las situaciones sociales y familiares os obligan a tener que comer sin respetar los preceptos habituales de nutrición que forman parte de vuestro programa nutricional, recurrid a la actividad aeróbica para compensar los desmanes de la dieta.\nSi estáis de vacaciones, procurad nadar, correr, ir en bicicleta cada día para mantener el metabolismo activo y quemar más de esas calorías que estáis ingiriendo en exceso.\nIncluso un paseo a ritmo vivo después de comer proporcionará un gran impulso al metabolismo para que éste queme más calorías y de paso también activará la digestión, mucho más de lo que ésta hará si después de una comilona os sentáis en el sofá.\n10. Compensad los excesos en la mesa luego en el gimnasio\nEntrenar con pesas no sólo incrementa los niveles de fuerza y la hipertrofia de los músculos, sino que también quema calorías.\nCuando regreséis al gimnasio al día siguiente de una comilona en la que no habéis podido respetar los cánones establecidos de vuestra dieta, entrenad un poco más largo y haced más series y que éstas sean de un mayor número de repeticiones, porque así compensaréis los desajustes de la dieta al quemar más calorías con el ejercicio y de paso propiciar también un cierto aumento del ritmo metabólico.\nSi habéis estado unos días de vacaciones y no solo se trata de un fin de semana de festividades, entonces os sugiero que las dos primeras semanas las abordéis con el ánimo de reanudar lo antes posible vuestro programa habitual, pero antes pasad esos días realizando un trabajo algo más ligero, pero más largo en su volumen de trabajo para fomentar una mayor quema de calorías.\nBebed agua en abundancia fuera de las comidas para así fomentar que el cuerpo expulse el agua de retención, consecuencia del aumento en la ingestión calórica de esos días.


Publicado por Malas Calles León en 7:49 No hay comentarios:\nPublicado por Malas Calles León en 5:27 No hay comentarios:\n"Bla, Bla, Bla, Blaaaa"\nPublicado por Malas Calles León en 8:16 No hay comentarios:\n27 y 28 Abril gira solidaria por el DONBASS.\n✊ ¡No Pasarán!\nPublicado por Malas Calles León en 8:33 No hay comentarios:\nPublicado por Malas Calles León en 8:25 No hay comentarios:\n75 años de la victoria de la Unión Soviética sobre los nazis en Stalingrado.\n75 años del fin de la batalla más importante de la historia de la humanidad: Stalingrado.\n1.150.000 soldados soviéticos cayeron luchando y venciendo al nazismo.\nGracias Ejército Rojo y gracias Stalin.\nPublicado por Malas Calles León en 7:33 No hay comentarios:\nPublicado por Malas Calles León en 9:06 No hay comentarios:


Aviso Legal - Dermonatur - Productos innovadores para la salud\nEn cumplimiento del artículo 10 de la Ley 34/2002, de 11 de julio, de Servicios de la Sociedad de la Información y del Comercio Electrónico (LSSICE), Actiup Tecnologies, S.L. (en adelante, “Actiup Comunicación y Publicidad”), Responsable de esta tienda online, pone a disposición de los Usuarios la presente información, para definir sus Condiciones de Uso.\nDenominación Social: Actiup Tecnologies, S.L.\nNombre Comercial: Actiup Comunicación y Publicidad\nCIF / NIF / NIE: B62766563\nInscrita en el Registro Mercantil de Barcelona: Tomo 34202, Libro/Folio 0198, Secc. Gral., Hoja/Dup 244837 / Prov. 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En un torneo olímpico el arquero recorre durante sus desplazamientos a la diana una distancia aproximada de diez kilómetros y según datos de la FITA el tirador desarrolla un esfuerzo similar a ocho o nueve toneladas de tensión sobre el arco al lanzar las 300 flechas que utiliza durante los dos días que dura la competición.\nEl campo de tiro en el que se realizan las competiciones internacionales es una superficie plana, preferentemente de hierba, en la que se marca la línea de tiro desde donde se realizan los lanzamientos. Por delante de ésta se trazan unas líneas paralelas a las distancias de 30, 50, 70 y 90 metros en modalidad masculina, y a 30, 50, 60 y 70 metros en la femenina. En ellas se indican los puntos sobre los que se colocarán los centros de las dianas.\nDe acuerdo con las normas de la FITA, el arco utilizado en alta competición debe estar compuesto por una empuñadura y dos palas flexibles, cada una de la cuales termina en una punta con dos muescas para la cuerda y, además, debe usarse tan sólo una cuerda sencilla. La normativa contempla la existencia de arcos de una sola pieza y desmontables, y dentro de éstos los recurvos y los de poleas. Su longitud oscila entre 162 y 178 centímetros, y su potencia o fuerza para asegurar su apertura, en razón de la longitud de la flecha, está comprendida entre 11,3 y 22,5 kilos.\nLa diana puede ser redonda o cuadrada, y en la actualidad se fabrica de materiales sintéticos tipo foam. Está situada sobre un trípode de madera y su centro debe estar a 130 centímetros del suelo; la inclinación de las patas delanteras con respecto a la vertical es de quince grados. Los blancos están compuestos por piezas de papel o de cartón colocadas sobre la diana.\nEn la competición serie FITA de tiro con arco se lanzan 144 flechas en cuatro series de 36. Cada arquero da cuenta de cada serie en tandas de seis o tres disparos y dispone de cuatro y dos minutos respectivamente para completar cada serie. Tradicionalmente, los campeonatos del mundo y los Juegos Olímpicos se diputaban a doble round, es decir, con 288 flechas en cuatro jornadas. Pero la FITA modificó este reglamento con motivo de los Juegos Olímpicos de Barcelona 1992, en donde por vez primera se empleó un sistema de eliminatoria de arquero contra arquero.\nExiste también la modalidad competitiva de tiro de campo, y tiro de bosque.\nEl Parque Deportivo de Puerta de Hierro acoge el Centro de Tecnificación de Tiro con Arco de Madrid, uno de los mejores de Europa e incluso del mundo. Aquí se promociona y se apoya el alto rendimiento de este deporte olímpico aunque, también tienen cabida los arqueros menos entrenados.\nIntroducción al Tiro con Arco Sobre F.M.T.A. --Asamblea General , Comisión Delegada y Junta Directiva --ELECCIONES 2020 --Memoria Deportiva FMTA 2019 --Transparencia --Protección de datos --Instalaciones --Clubes (direcciones) --Historia de la F.M.T.A. C.T.T.A.M. Normativas, circulares, seguros --Circulares --Estatutos FMTA --NORMATIVAS CAM --Circulares informativas RFETA --Normativas COVID-19 --LICENCIAS TEMPORADA 2020/2021 --SEGUROS --Normativas FMTA --Calendarios FMTA Multimedia Cursos --Cursos FMTA-CTTAM --Cursos RFETA --Otras Federaciones --Seminarios - Talleres --OTROS CURSOS Tiro con Arco --Introducción al Tiro con Arco --Historia del Tiro con Arco Competiciones --Convocatorias ---Ligas FMTA aire libre ---Ligas FMTA tiro en sala ---Otras competiciones FMTA ---Eventos clubes y otras federaciones ---Competiciones RFETA --Resultados ---RESULTADOS 2020/2021 ---Histórico de resultados ---Ranking FMTA --Resultados competiciones RFETA Noticias --Entrevistas INFORMACION CORONAVIRUS MINISTERIO DE SANIDAD NORMATIVAS Y PROTOCOLOS CORONAVIRUS ENTRENAMIENTOS Y COMPETICIONES


Invasión felina superó la expectativa económica del estado – Antena San Luis\nInvasión felina superó la expectativa económica del estado\nLa llamada “invasión felina” que se registró durante el fin de semana pasado en la capital potosina, logró superar las expectativas económicas que se tenían para el estado de San Luis Potosí en cuanto a la ocupación hotelera, prestación de servicios turísticos y comercios, la cual se estima superó los 25 millones de pesos.\nEn este sentido, la presidenta de la organización Nuestro Centro, Ysabel Gómez Galán, comentó que durante todo el fin de semana se percibió en la capital de estado un lleno total, situación que benefició la economía de la entidad a consecuencia de la derrama económica de varios miles de pesos que dejaron los aficionados tigres.\nAseguró que se rebasaron las expectativas que se tenían previstas para estas fechas, ya que la ocupación hotelera fue del 100 por ciento y los prestadores de servicios también se situaron en altos porcentajes.\nPor otra parte, el titular de la Secretaría de Turismo (Sectur), Enrique Abud Dip, indicó que los eventos deportivos que llegaron a la entidad generaron una derrama económica no sólo en hospedaje, sino en materia de servicios turísticos, ya que se pudo constatar un aglutinamiento significativo de paseantes por las diferentes plazas y museos, restaurantes y centros de entretenimiento de la capital potosina principalmente.\nAunque aseveró aún no hay cierre oficial entorno a los demás eventos deportivos celebrados en la capital, debido a que aún hay registro de turistas en las principales calles de la ciudad, pero se estima que la cifra es superior a los 25 millones de pesos.\nAsimismo comentó que se percibieron notas positivas del estado, hecho que contribuye a que San Luis Potosí se sitúe en la preferencia que tiene el visitante de regresar a la entidad, “esta afluencia de turistas previo a la Semana Santa permite consolidar la parte de la ocupación hotelera, ya que son eventos que sirven para la promoción del estado” concluyó Abud Dip.\nCon información de: http://www.elexpres.com/noticias/news-display.php?story_id=37911


La necesidad de conocer los procesos en las Pymes | Herramientas para Pymes\n2009/02/28 2011/03/08 Daniel Borrego Administración Pymes\nLa importancia de conocer los procesos dentro de una empresa parece una práctica olvidada por las pymes, más no así por las grandes compañías las cuales han sabido aprovechar al máximo todas las ventajas que les trae el conocer sus procesos. Muchas invierten grandes cantidades de dinero para adquirir los mejores software para elaborar diagramas de procesos.\nEs triste ver la realidad en que se encuentran muchas de las pequeñas y medianas empresas hoy en día. Las cuales en promedio no pasan los 2 años de vida. Si bien es cierto que la mayoría de las pymes fracasan por los altos costos de financiamiento, la falta de controles, así como también por negligencia, falta de experiencia y preparación de los fundadores o emprendedores en cuanto a la administración se refiere. Debemos considerar que los empresarios centran sus esfuerzos en actividades tales como ventas y comercialización, pero también descuidan y van dejando a un lado los procesos de la empresa.\nLas acciones que le permitieron tener éxito al emprendedor durante los inicios de la empresa, ya no pueden ser consideras como lineamientos a seguir, esto debido a que ya no arrojan los mismos resultados que durante la fase de creación de la empresa. Este esfuerzo desarrollado por los “emprendedores”, es excelente durante algún tiempo. Sin embargo llega el momento a toda empresa donde los problemas muchas veces rebasan la capacidad del empresario, por lo cual es necesario recurrir a otras alternativas para lograr: resolver problemas, reducir costos, pero el aspecto más importante es el de satisfacer las necesidades del cliente. Este debe ser el objetivo principal por el cual debemos de conocer los procesos de nuestra empresa.\nNo debemos olvidar que una pequeña empresa que desea lograr el crecimiento a largo plazo, debe de conocer muy bien todos sus procesos.\nEstas son sólo algunas razones que han venido a mi mente y por las cuales considero que las empresas no deben de olvidarse de sus procesos.\nPara lograr mejoras dentro de la organización debemos de conocer claramente ¿qué es lo que hacemos?, ¿cómo lo hacemos? y ¿para quién lo hacemos? Una vez que hayamos podido contestar estas preguntas estaremos un paso adelante para lograr mejoras sustanciales dentro de la empresa. Existen muchas herramientas para lograr contestar esas preguntas sin embargo estas se verán más adelante en artículos posteriores.\n¡Ojo! no debemos de caer en tentación que una vez que hayamos mapeado o documentado los procesos, los problemas desaparecerán por si solos. Esto es sólo el primer paso para lograr mejoras sustanciales en la empresa.\nEn resumen la necesidad de conocer los procesos es y siempre deberá ser satisfacer las necesidades del cliente, a través de la optimización de los recursos internos de la organización. Es decir, incrementar los ingresos y reducir los costos de la organización.\nUna vez que hayamos comprendido la importancia que representa tener documentados nuestros procesos, podremos empezar a utilizar las herramientas necesarias para su documentación, análisis y mejora.\nIdeas para Pymes en tiempos de crisis\npagina web google analytics software libre libros de negocios Herramientas para Pymes redes sociales software para pymes analítica web creatividad marketing en buscadores twitter ideas para pymes SEO capacitacion ubicacion del negocio clientes Administración Pymes campaña de e-mail marketing herramienta social media marketing gestion de clientes software revistas gratuitas Revistas Gratis Marketing para Pymes


No prosperó diálogo para frenar la matanza en Yemen\nLa guerra en Yemen es hoy uno de los peores dramas humananitarios del mundo. Los rebeldes hutíes, protagonistas en el conflicto, ni siquiera asistieron a la mesa de diálogos. AFP\n5 Violaciones a los derechos humanos\nAFP | Publicado el 08 de septiembre de 2018\nTras un largo suspenso, las discusiones de paz sobre la guerra en Yemen fracasaron antes incluso de empezar, por lo que se teme una escalada en el terreno con el llamado a la “resistencia” lanzado por el jefe de los rebeldes hutíes.\n“Nuestra elección es la de la determinación y la resistencia ante la agresión”, declaró Abdel Malek al Huthi, en un discurso retransmitido el sábado por la noche por el canal de televisión de los rebeldes Al Masirah.\nEl llamado se produce unas horas después de que en Ginebra el enviado especial de Naciones Unidas, Martin Griffiths, lamentara que los rebeldes hutíes no acudieran a la cita, dejando en evidencia el fracaso de las negociaciones.\n“No conseguimos que acudiera aquí [...] la delegación de Saná [de los rebeldes hutíes]. Simplemente no lo logramos”, lamentó ante la prensa el diplomático de nacionalidad británica, que se mostró muy prudente sobre la evolución de los acontecimientos.\n“Es muy pronto para decir cuándo se celebrarán las próximas consultas”, añadió.\nEl ministro de Relaciones Exteriores yemení, Jaled al Yamani, criticó rápidamente ante los periodistas la actitud “totalmente irresponsable” de los hutíes, y les reprochó una “falta de seriedad en el camino hacia la paz”.\nEl ministro se mostró igualmente muy duro con el enviado especial de la ONU, al que acusó de ser “conciliador” con los rebeldes hutíes, al no responsabilizarlos del fracaso de las negociaciones.\n“La falta de presión [sobre los hutíes] les ha llevado [...] a ver con desprecio los esfuerzos desplegados”, dijo.\n“Estamos decepcionados con las declaraciones [...] de Griffiths pero apoyamos totalmente sus esfuerzos y continuaremos haciéndolo”, continuó el ministro.\nAbdel Malek al Huthi instó a todos los yemeníes a “ir a todos los frentes” y pidió a sus partidarios que refuercen “la defensa, la seguridad” y que recluten “voluntarios en el terreno”.\n- Cerca de 10.000 muertos -\nLas discusiones de Ginebra, que debían empezar el jueves, iban a ser las primeras desde el fracaso en 2016 de un largo proceso de paz para intentar acabar con el conflicto que ha sumido a Yemen en la peor crisis humanitaria del mundo.\nEstos reclamaban poder volver a Saná después de las discusiones. La capital yemení está en manos de los rebeldes desde 2015.\nPero la coalición militar dirigida por Arabia Saudita, que lucha contra los rebeldes y apoya a las fuerzas progubernamentales, impone un bloqueo aéreo en Yemen. Por ello, los rebeldes temían no poder regresar al país.\nEn este encuentro no se había previsto ningún intercambio cara a cara entre las partes adversas, salvo alguna sorpresa, lo que evidencia el abismo que divide a las partes.\nEl Consejo de Seguridad de la ONU exhortó sin embargo el miércoles a los beligerantes a “dar un primer paso hacia el fin del conflicto”.\nMartin Griffiths, consciente de las dificultados para iniciar las discusiones, había puesto el listón muy bajo, asegurando que sólo se trataba de “consultas” en vista de futuras negociaciones.\nGriffiths es el tercer mediador implicado en la compleja guerra en Yemen.\nHasta ahora, los beligerantes se mantienen firmes en sus posiciones. La coalición y sus protegidos yemeníes insisten en el respeto de la resolución 2216 del Consejo de Seguridad de la ONU que reconoce “la legitimidad” del presidente Abd Rabo Mansur Hadi y exigen la retirada de los hutíes de los territorios que conquistaron, así como la entrega de las armas pesadas.\nLos hutíes piden, por su parte, “parar la agresión” de Arabia Saudita antes de hacer cualquier concesión.\nEl conflicto dejó alrededor de 10.000 muertos, según la ONU.


Wide-Field, Real-Time Imaging of Local and Systemic Wound Signals in Arabidopsis | Protocol (Translated to Spanish)\nExtracelular glutamato desencadenado por la señalización sistémica de calcio es fundamental para la inducción de las respuestas de defensa de las plantas a las heridas mecánicas y ataques de herbívoros en las plantas. Este artículo describe un método para visualizar la dinámica espacial y temporal de ambos estos factores usando las plantas del thaliana de Arabidopsis que expresan los biosensores fluorescentes calcio y glutamato-sensibles.\nLas plantas responden a tensiones mecánicas como heridas y herbívoros induciendo respuestas de defensa tanto en las partes dañadas como en las distales no dañadas. Sobre herir de una hoja, un aumento en la concentración cytosolic del ion del calcio (señal de Ca2+) ocurre en el sitio de la herida. Esta señal se transmite rápidamente a las hojas no dañadas, donde se activan las respuestas de defensa. Nuestra investigación reciente reveló que el glutamato que se escapa de las células heridas de la hoja en el apoplasto alrededor de ellos sirve como señal de la herida. Este glutamato activa los canales permeables de Ca2+ similares a los receptores de glutamato, lo que luego conduce a la propagación de señales de Ca2+ a larga distancia en toda la planta. Las características espaciales y temporales de estos eventos se pueden capturar con imágenes en tiempo real de plantas vivas que expresan biosensores fluorescentes codificados genéticamente. Aquí introducimos un método planta-ancho, en tiempo real de la proyección de imagen para supervisar la dinámica de las señales de Ca2+ y de los cambios en el glutamato apoplásico que ocurren en respuesta a herir. Este enfoque utiliza un microscopio de fluorescencia de campo amplio y plantas transgénicas de Arabidopsis que expresan proteína verde fluorescente (GFP)-basado en Ca2 + y biosensores de glutamato. Además, presentamos la metodología para provocar fácilmente herida-inducida, glutamato-accionado rápido y a larga distancia Ca2+ propagación de la señal. Este protocolo también se puede aplicar a estudios sobre otras tensiones de plantas para ayudar a investigar cómo la señalización sistémica de la planta podría estar involucrada en sus redes de señalización y respuesta.\nLas plantas no pueden escapar de las tensiones bióticas, por ejemplo, los insectos que se alimentan de ellas, por lo que han desarrollado sofisticados sistemas de detección de estrés y transducción de señales para detectar y luego protegerse de desafíos como la herbivoría1. Al herir o atacar a los herbívoros, las plantas inician respuestas de defensa rápidas, incluida la acumulación del ácido fitohormona jasmónico (JA) no sólo en el sitio herido, sino también en los órganos distales no dañados2. Este JA entonces ambos acciona respuestas de la defensa en los tejidos directamente dañados e induce preventivamente defensas en las partes no dañadas de la planta. En Arabidopsis,la acumulación de JA inducida por heridas se detectó en hojas distales e intactas a los pocos minutos del daño en otra parte de la planta, lo que sugiere que se está transmitiendo una señal rápida y a larga distancia desde la hoja herida3. Varios candidatos, tales como Ca2+,especies reactivas de oxígeno (ROS), y señales eléctricas, se han propuesto para servir como estas señales de heridas de larga distancia en las plantas4,5.\nCa2+ es uno de los elementos de segundo mensajero más versátiles y ubicuos en los organismos eucariotas. En las plantas, la masticación de orugas y las heridas mecánicas causan aumentos drásticos en la concentración citosólica de Ca2+ ([Ca2+]cyt)tanto en la hoja herida como en las hojas distantes desenrolladas6,7. Esta señal sistémica de Ca2+ es recibida por proteínas intracelulares de detección de Ca2+,que conducen a la activación de las vías de señalización de defensa aguas abajo, incluida la biosíntesis de JA8,9. A pesar de los informes numerosos tales que apoyan la importancia de las señales de Ca2+ en respuestas de la herida de la planta, la información sobre las características espaciales y temporales de las señales de Ca2+ inducidas por herir es limitada.\nLas imágenes en tiempo real utilizando indicadores de Ca2+ codificados genéticamente son una herramienta poderosa para monitorear y cuantificar la dinámica espacial y temporal de las señales de Ca2+. Hasta la fecha, se han desarrollado versiones de dichos sensores que permiten la visualización de señales de Ca2+ a nivel de una sola célula, a tejidos, órganos e incluso plantas enteras10. El primer biosensor codificado genéticamente para Ca2+ utilizado en plantas fue la proteína bioluminiscente aequorina derivada de la medusa Aequorea victoria11. Aunque esta proteína quimioluminiscente se ha utilizado para detectar cambios de Ca2+ en respuesta a diversas tensiones en plantas12,13, 14,15, 16,17, 18,no es adecuada para imágenes en tiempo real debido a la señal luminiscente extremadamente baja que produce. Förster Resonance Energy Transfer (FRET)-basado en indicadores de Ca2 +, tales como los cameleons amarillos, también se han utilizado con éxito para investigar la dinámica de una gama de eventos de señalización de Ca2 + en las plantas19,20,21,22,23,24. Estos sensores son compatibles con los enfoques de imagen y más comúnmente están compuestos por la proteína de unión a Ca2+ calmodulina (CaM) y un péptido de unión a CaM (M13) de una quinasa de cadena ligera de miosina, todos fusionados entre dos proteínas fluoróforas, generalmente una proteína fluorescente cian (CFP) y una variante de proteína fluorescente amarilla (YFP)10. La unión de Ca2+ a CaM promueve la interacción entre CaM y M13, lo que lleva a un cambio conformacional del sensor. Este cambio promueve la transferencia de energía entre el CFP y el YFP, lo que aumenta la intensidad de fluorescencia del YFP al tiempo que disminuye la emisión de fluorescencia del CFP. El monitoreo de este cambio de CFP a fluorescencia YFP entonces proporciona una medida del aumento en el nivel de Ca2 +. Además de estos sensores FRET, los biosensores ca2+ basados en proteínas fluorescentes individuales (FP), como GCaMP y R-GECO, también son compatibles con los enfoques de imágenes de plantas y se utilizan ampliamente para estudiar los cambiosde ci cyt [Ca2+] debido a su alta sensibilidad y facilidad de uso25,26,27,28,29,30. GCaMPs contiene un solo circular permutated (cp) GFP, otra vez fusionado a CaM y el péptido M13. La interacción dependiente de Ca2+entre CaM y M13 provoca un cambio conformacional en el sensor que promueve un cambio en el estado de protonación del cpGFP, potenciando su señal fluorescente. Por lo tanto, a medida que aumentan los niveles de Ca2 +, la señal cpGFP aumenta.\nPara investigar la dinámica de las señales de Ca2 + generadas en respuesta a heridas mecánicas o alimentación de herbívoros, hemos utilizado plantas transgénicas de Arabidopsis thaliana que expresan una variante de GCaMP, GCaMP3, y un microscopio de fluorescencia de campo ancho6. Este enfoque ha tenido éxito en la visualización de la transmisión rápida de una señal de Ca2 + de larga distancia desde el sitio de la herida en una hoja a toda la planta. Así, un aumento en [Ca2+]cyt fue detectado inmediatamente en el sitio de la herida pero esta señal de Ca2+ entonces fue propagada a las hojas vecinas a través de la vasculatura dentro de algunos minutos de herir. Además, encontramos que la transmisión de esta señal de herida sistémica rápida se suprime en plantas de Arabidopsis con mutaciones en dos genes similares a receptores de glutamato, Glutamato Receptor Like (GLR), GLR3.3, y GLR3.66. Los GLRs parecen funcionar como canales de Ca2+ bloqueados por aminoácidos involucrados en diversos procesos fisiológicos, incluyendo la respuesta de la herida3,el crecimiento del tubo de polen31,el desarrollo de la raíz32,la respuesta fría33y la inmunidad innata34. A pesar de esta función fisiológica amplia y bien entendida de los GLRs, la información sobre sus propiedades funcionales, como su especificidad de ligando, selectividad iónica y localización subcelular, es limitada35. Sin embargo, estudios recientes informaron que GLR3.3 y GLR3.6 están localizados en el floema y el xilema, respectivamente. Los GLRs de plantas tienen similitudes con los receptores ionotrópicos de glutamato (iGluRs)36 en mamíferos, que son activados por aminoácidos, como el glutamato, la glicina y la D-serina en el sistema nervioso de los mamíferos37. De hecho, demostramos que la aplicación de glutamato de 100 mM, pero no de otros aminoácidos, en el sitio de la herida induce una señal rápida y a larga distancia de Ca2+ en Arabidopsis,lo que indica que el glutamato extracelular probablemente actúa como una señal de herida en las plantas6. Esta respuesta se suprime en el mutante glr3.3/glr3.6sugiriendo que el glutamato puede estar actuando a través de uno o ambos de estos canales similares a receptores y, de hecho, AtGLR3.6 recientemente se demostró que está bloqueado por estos niveles de glutamato38.\nEn las plantas, además de su papel como aminoácido estructural, el glutamato también se ha propuesto como un regulador clave del desarrollo39; sin embargo, su dinámica espacial y temporal es poco conocida. Al igual que para el Ca2+,se han desarrollado varios indicadores genéticamente codificados para el glutamato para monitorizar la dinámica de este aminoácido en células vivas40,41. iGluSnFR es un biosensor de glutamato de fp único basado en GFP compuesto por cpGFP y una proteína de unión a glutamato (GltI) de Escherichia coli42,43. El cambio conformacional de iGluSnFR, que es inducido por la unión de glutamato a GltI, resulta en una emisión de fluorescencia GFP mejorada. Para investigar si el glutamato extracelular actúa como molécula de señalización en la respuesta de la herida de la planta, conectamos la secuencia de iGluSnFR con la secuencia básica de secreción de péptidos de señal quitinasa (CHIB-iGluSnFR) para localizar este biosensor en el espacio apóplásico6. Este acercamiento permitió la proyección de imagen de cualquier cambio en la concentración apoplástica del glutamato ([Glu]apo)usando las plantas transgénicas de Arabidopsis que expresaban este sensor. Detectamos aumentos rápidos en la señal del iGluSnFR en el sitio que hería. Estos datos apoyan la idea de que el glutamato se escapa de las células/tejidos dañados al apoplasto al herir y actúa como una señal de daño que activa los GLRs y conduce a la señal de Ca2+ de larga distancia en las plantas6.\nAquí, describimos un método de imágenes en tiempo real en toda la planta utilizando biosensores codificados genéticamente para monitorear y analizar la dinámica de ca2 + de larga distancia y señales de glutamato extracelular en respuesta a la herida6. La disponibilidad de microscopía de fluorescencia de campo amplio y plantas transgénicas que expresan biosensores codificados genéticamente proporciona un enfoque potente, pero fácil de implementar para detectar señales de larga distancia transmitidas rápidamente, como las ondas ca2 +.\n1. Preparación de material vegetal\nEn un microtubo de 1,5 mL, esterilizar en superficie las semillas de arabidopsis thaliana (col-0 accesión) planta que expresa ya sea GCaMP3 o CHIB-iGluSnFR agitando con 20% (v / v) NaClO durante 3 min y luego lavar 5 veces con agua destilada estéril.\nNOTA: Las líneas transgénicas de Arabidopsis que expresan GCaMP3 o CHIB-iGluSnFR han sido descritaspreviamente 6.\nEn una capucha estéril, siembre 13 semillas esterilizadas en superficie en una placa de Petri de plástico cuadrada de 10 cm llena de 30 mL de murashige estéril (autoclave) y medio Skoog (MS) [1x sales ms, 1% (p/v) sacarosa, 0,01% (p/v) myoinositol, 0,05% (p/v) MES y 0,5% (p/v) goma gellan; pH 5,7 ajustado con 1N KOH]. Substituya la tapa y envuelva con cinta quirúrgica.\nDespués de la incubación en la oscuridad a 4 °C durante 2 días, colocar las placas horizontalmente a 22 °C en una cámara de crecimiento bajo luz continua (90-100 μmol m-2 s-1) durante aproximadamente 2 semanas antes de su uso. Después de 2 semanas, cuente el número de hojas de Arabidopsis de mayor amenor 44 (Figura 1). Las respuestas de la herida se desplazan preferentemente de la hoja dañada (n) a las hojas numeradas n ± 3 y n ± 56.\nNOTA: En este protocolo, la placa de Petri se abrirá para obtener imágenes de los efectos de la herida y el glutamato bajo un microscopio de fluorescencia. Por lo tanto, los pasos posteriores de este experimento deben llevarse a cabo en condiciones ambiente controladas por temperatura y humedad. Esto se debe a que las señales de Ca2+ también son provocadas por cambios en estas condiciones ambientales. También se sabe que la luz azul, emitida por el microscopio durante el registro para la excitación de la fluorescencia de la proteína biosensor, puede provocar un aumento de la concentración citosólica de Ca2 + 45 y por lo tanto la planta debe aclimatarse a la irradiación de luz azul durante varios minutos antes de comenzar el experimento.\n2. Preparación química\nDisuelva el L-glutamato en un medio de crecimiento líquido [1/2x sales ms, 1% (p/v) sacarosa y 0,05% (p/v) MES; pH 5,1 ajustado con 1N KOH] para hacer una solución de trabajo de 100 mM.\nNOTA: Evite el uso de sales de glutamato como el glutamato de sodio para prevenir posibles efectos relacionados con cationes sobre la dinámica de Ca2 +.\n3. Ajuste del microscopio y realización de imágenes en tiempo real\nEncienda el estereomicroscopio de fluorescencia motorizado equipado con una lente objetivo 1x (NA = 0,156) y una cámara sCMOS (Figura 2) y configure los ajustes del dispositivo para irradiar con una luz de excitación de 470/40 nm y adquirir una luz de emisión que pase a través de un filtro de 535/50 nm.\nNOTA: Cualquier microscopio de fluorescencia sensible a GFP se puede utilizar para detectar señales GCaMP3 e iGluSnFR en tiempo real, pero se recomienda una lente objetivo de baja potencia y una cámara altamente sensible con un chip sCMOS ancho para adquirir señales de toda la planta. El objetivo de baja potencia permite la obtención de imágenes de la respuesta de toda una planta de Arabidopsis y el uso de una cámara altamente sensible permite la rápida adquisición de datos necesaria para capturar el rápido curso de tiempo de la onda de Ca2 + activada por heridas. Para el microscopio de fluorescencia utilizado en este estudio, los valores máximos del campo de visión y la resolución temporal son de 3 cm x 3 cm y 30 cuadros por segundo (fps), respectivamente.\nRetire la tapa y coloque el plato debajo de la lente objetivo.\nCompruebe la señal de fluorescencia de la planta y luego espere aproximadamente 30 minutos en la oscuridad hasta que las plantas se adapten a las nuevas condiciones ambientales. Este paso de adaptación es necesario porque los cambios en la humedad provocan [Ca2 +]elevación cyt en las plantas que pueden interferir con cualquier evento relacionado con la herida.\nAjuste el enfoque y la ampliación para ver toda la planta en el campo de visión. En el protocolo actual, se utilizó un aumento de 0,63x.\nAntes de comenzar las imágenes en tiempo real, configure los parámetros de adquisición para detectar las señales de fluorescencia utilizando el software de imágenes de microscopio. Los ajustes para la proyección de imagen en el protocolo actual son: tiempos de la exposición y del intervalo fijados a 1.8 s y 2 s (es decir, 0.5 fps), respectivamente. Establezca el tiempo de grabación en 11 min.\nImagen durante 5 minutos antes de comenzar el experimento para aclimatar la planta a la irradiación de luz azul del microscopio, luego comience a grabar haciendo clic en Ejecutar ahora,o el comando equivalente en el software de microscopio que se está utilizando. Para determinar la fluorescencia basal promedio, registre al menos 10 fotogramas (es decir, al menos 20 s en el protocolo actual) antes de la herida o la aplicación de glutamato (consulte la Sección 4).\nPara obtener imágenes en tiempo real de los cambiosde cyt y [Glu]apo inducidos por heridas [Ca2+],corte el pecíolo o la región media de la hoja L1 con tijeras (Figura 3 y Figura 4).\nPara obtener imágenes en tiempo real de los cambiosde cyt desencadenados por glutamato [Ca2+],corte el borde (aproximadamente 1 mm de la punta) de la hoja 1 a través de la vena principal con tijeras. Después de al menos un período de recuperación de 20 min, aplique 10 μL de glutamato de 100 mM a la superficie de corte de la hoja (Figura 5).\nNOTA: Este pre-corte fue necesario para permitir el acceso del glutamato al apoplasto de la hoja con el fin de desencadenar respuestas. Además, se encontró que la aplicación de una gota de agua destilada a la superficie de corte de la hoja L1 era crítica para evitar que las muestras se desecaran durante la recuperación antes de aplicar glutamato.\nDespués de terminar la grabación de 11 minutos, guarde los datos.\nPara el análisis de la intensidad de fluorescencia a lo largo del tiempo, defina una región de interés (ROI) en el lugar donde se va a analizar la intensidad de fluorescencia (Figura 6 y Figura 7). Para el cálculo de la velocidad de la onda Ca2+, defina 2 ROI (ROI1 y ROI2) para el análisis. En el software de imágenes, haga clic en Medición de tiempo | Definir | Círculo. Mida la distancia entre ROI1 y ROI2 haciendo clic en Anotaciones y | Longitud | Línea simple (Figura 6).\nMida los valores de fluorescencia sin procesar (F) en cada ROI a lo largo del tiempo haciendo clic en Medir. Exportar datos sin procesar a un software de hoja de cálculo para convertir la señal de fluorescencia en números en cada punto de tiempo haciendo clic en Todo a Excel | Exportar.\nDetermine el valor de fluorescencia basal, que se define como F0,calculando el promedio de F durante los primeros 10 fotogramas (es decir, antes del tratamiento) en los datos registrados.\nNormalice los datos de F (calculando ΔF/F) usando la ecuación ΔF/F = (F−F0)/F0, donde ΔF es el cambio dependiente del tiempo en fluorescencia.\nPara el análisis de onda de velocidad de onda de Ca2+, defina un punto de ascenso de señal significativo por encima de los valores preestimulados como representación de la detección de un aumento de Ca2+ en cada ROI(t1 y t2)utilizando el criterio de un aumento a 2× la desviación estándar (2x SD) que se calcula a partir de los datos de F0 utilizando software estadístico. El 95% de los datos de F0 se encuentra dentro de 2x SD de la media, lo que indica que un aumento de la señal por encima de este nivel por casualidad es ≤5%. Calcule la diferencia de tiempo del aumento de Ca2+ entre ROI1 y ROI2 [t2- t1 time-lag (Δt)] y mida la distancia entre ROI1 y ROI2, luego determine las velocidades de cualquier onda de Ca2+.\nLa propagación de la señal de [Ca2+]cyt y [Glu]apo en respuesta a la herida se presenta en la Figura 3, figura 4, película S1y película S2. El corte del pecíolo de la hoja 1 en plantas que expresan GCaMP3 (a 0 s) llevó a un aumento significativo de [Ca2+]cyt que fue rápidamente inducido localmente a través de la vasculatura (a los 40 s) (Figura 3 y Película S1). Posteriormente, la señal se propagó rápidamente a las hojas vecinas (hojas 3 y 6) en pocos minutos (a los 80 s) (Figura 3 y Película S1).\nAl cortar la hoja 1 en plantas que expresan CHIB-iGluSnFR, se observó un rápido aumento de [Glu]apo alrededor de la región de corte (a 2 s). Esta señal se propagó a través de la vasculatura localmente en pocos minutos (a 160 s) pero no se observó en hojas sistémicas(Figura 4 y Película S2).\nPara la obtención de imágenes en tiempo real de la propagación de la señal de Ca2+ desencadenada por la aplicación de glutamato, se cortó el borde (aproximadamente 1 mm de la punta) de la hoja 1 en plantas que expresan GCaMP3 como se muestra en la Figura 5A y la Película S3. Cortar el borde de la hoja 1 causó un aumento local decyt [Ca2+] (a 40 s) pero esta señal desapareció en pocos minutos (a 124 s). Después de esperar aproximadamente 10 min para que la planta se recuperara, se aplicaron 10 μL de glutamato de 100 mM a la superficie de corte de la hoja 1, lo que provocó un aumento rápido y significativo de [Ca2+]cyt localmente (a 56 s) y propagación de la señal a las hojas distales (a 104 s) (Figura 5B y Película S4).\nPara medir los cambios en [Ca2+]cyt inducidos por heridas en la hoja sistémica, se establecieron dos ROIs (ROI1 y ROI2) en la región base y la punta de la hoja 6 en plantas que expresan GCaMP3 como se muestra en la Figura 6A. Se midió el cambio de curso de tiempo de la intensidad de la señal GCaMP3 en ROI1 y ROI2 al cortar el pecíolo de la hoja 1 (Figura 6B). Se detectó un aumento significativo de [Ca2+]cyt en ROI1 antes que el de ROI2 (Figura 6B). [Ca2+] cyt alcanzó un máximo de aproximadamente 100 s después de la herida, duró más de 10 min y exhibió dos fases(Figura 6B).\nPara determinar las velocidades de la onda de Ca2+ tras la herida mecánica, se determinó el punto de tiempo de una señal significativa de aumento por encima de los valores preestimulados en ROI1 y ROI2 (time-lag; ver Sección 4) (Figura 6C). Debido a que la distancia entre ROI1 y ROI2 fue de 2,7 mm en este caso (Figura 6A), la velocidad de la señal de Ca2+ en la hoja 6 se calculó como 0,15 mm/s. Para medir loscambios de apo [Glu] en respuesta al daño mecánico, roi1 se estableció en las proximidades del sitio de corte de la hoja marcada como L1 como se muestra en la Figura 7A. [Glu] la firma apo en ROI1 ha exhibido un solo pico en aproximadamente 100 s al herir (Figura 7B).\nFigura 1: Numeración de las hojas de roseta de Arabidopsis. Las hojas de Arabidopsis están numeradas de mayor a menor (panel izquierdo). Un diagrama esquemático de la posición de las hojas se indica en el panel derecho. L: hoja, C: cotilledones. Haga clic aquí para ver una versión más amplia de esta figura.\nFigura 2:Un microscopio de fluorescencia utilizado en este estudio. [Ca2+]cyt y [Glu]apo dinámica se fotociró con un estereomicroscopio de fluorescencia de campo amplio. R: Mando a distancia, O: lente objetivo 1x, C: cámara sCMOS, T: Tubo basculante trinocular, S: Etapa, P: Material vegetal. Haga clic aquí para ver una versión más amplia de esta figura.\nFigura 3:Transmisión de señal ca2+ de larga distancia inducida por heridas. El corte del pecíolo (flecha blanca, 0 s) de la hoja 1 (L1) en la planta que expresa GCaMP3 desencadenó un aumento local [Ca2+]cyt (flecha roja, 40 s) que se transmitió a las hojas sistémicas [hoja 3 (L3) y hoja 6 (L6)] (flechas naranjas, 80 s). Barra de escala, 5 mm. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.\nFigura 4:Elevaciónapo desencadenada por heridas [Glu]. El corte de la hoja 1 (L1) (flecha blanca, 0 s) en plantas que expresan CHIB-iGluSnFR causó una rápida elevación de [Glu]apo (flecha roja, 80 s) que se propagó a través de la vasculatura (flecha naranja, 160 s). Barra de escala, 2 mm. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.\nFigura 5:Transmisión deseñal de Ca2+ de larga distancia activada por glutamato. (A) Cortar el borde (aproximadamente 1 mm desde la punta) de la hoja 1 (L1) en plantas que expresan GCaMP3 (flecha blanca, 0 s) causó un aumento de [Ca2+]cyt (flecha roja, 40 s). (B)La aplicación de glutamato de 100 mM a la superficie de corte de L1 (flecha blanca, 0 s) causó un aumento local de[Ca 2+] cyt (flecha roja, 56 s) que se propagó rápidamente a las hojas distales [por ejemplo, hoja 3 (L3), hoja 4 (L4) y hoja 6 (L6)] (flechas naranjas, 104 s). Barras de escala, 5 mm. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.\nFigura 6:[Ca2+] firmacyt en hojas sistémicas en respuesta a heridas mecánicas. (A)Una imagen expandida de la hoja 6 (L6) en plantas que expresan GCaMP3 se muestra en la Figura 3. Roi1 (círculo azul) y ROI2 (círculo rosa) se establecieron en la base y la región de la punta, respectivamente. La flecha blanca indica el sitio de corte del pecíolo de la hoja 1 (L1). En este caso, la distancia entre ROI1 y ROI2 fue de 2,7 mm.(B)Cuantificación de [Ca2+] firmascyt en ROI1 y ROI2. Los cambios de la intensidad de la fluorescencia eran analizados usando software de la proyección de imagen. (C) Un rastro ampliado de datos en (B) entre 0 s y 80 s. Los puntos de detección de un aumento de Ca2+ en ROI1 y ROI2 se definieron como t1 y t2,respectivamente, utilizando como criterio un aumento a 2x de la desviación estándar de los valores de prestimulación (2x SD, línea punteada). El valor de t2 - t1 se definió como time-lag (Δt) en el protocolo actual. La flecha negra indica el tiempo de corte. Haga clic aquí para ver una versión más amplia de esta figura.\nFigura 7:[Glu]apo firma en respuesta a heridas mecánicas. (A) En la Figura 4se muestra una imagen expandida de la hoja 1 (L1) en plantas que expresan CHIB-iGluSnFR. ROI1 se estableció en las inmediaciones del sitio de corte. La flecha blanca indica la región de corte. (B)La cuantificación de la firma [Glu]apo en ROI1 se supervisa utilizando software de imágenes. La flecha negra indica el tiempo de corte. Haga clic aquí para ver una versión más amplia de esta figura.\nPelícula S1: Transmisión ca2+ de larga distancia después de heridas mecánicas. La herida mecánica en el pecíolo de la hoja 1 (L1) causó un aumento delcyt [Ca2+] transmitido a las hojas distales [e.g., hoja 3 (L3) y hoja 6 (L6)]. Por favor, haga clic aquí para descargar esta película.\nPelícula S2: Elevación de los niveles de glutamato apoplásico en respuesta al corte. La herida mecánica de la hoja 1 (L1) causó un aumento inmediato en [Glu]apo. Por favor, haga clic aquí para descargar esta película.\nPelícula S3: Elevación de [Ca2+]niveles decyt en respuesta al corte. La herida mecánica en el borde de la hoja 1 (L1) causó una elevación inmediata, local delcyt [Ca2+]. Por favor, haga clic aquí para descargar esta película.\nPelícula S4: La aplicación de glutamato desencadena sistémicos [Ca2+]cyt aumenta. La aplicación de glutamato de 100 mM desencadenó la transmisión de Ca2+ a hojas sistémicas [por ejemplo, hoja 3 (L3), hoja 4 (L4) y hoja 6 (L6)]. Por favor, haga clic aquí para descargar esta película.\nLa señalización sistémica es importante para que las plantas respondan a estímulos ambientales externos localizados y luego mantengan su homeostasis a nivel de toda la planta. Aunque no están equipados con un sistema nervioso avanzado como los animales, emplean una comunicación rápida tanto dentro como entre órganos basados en factores como las señales eléctricas móviles (y posiblemente hidráulicas) y las ondas de propagación de ROS y Ca2+46,47. El protocolo descrito anteriormente permite obtener imágenes en toda la planta y en tiempo real de la actividad de este sistema de señalización mediante el monitoreo de la dinámica de Ca2 + y glutamato apoplásico en respuesta a la herida. Este método proporciona una herramienta robusta para comprender señales rápidas y de larga distancia en plantas que combinan alta resolución espaciotemporal y facilidad de uso. Este protocolo también ofrece el potencial de proporcionar nuevos conocimientos fisiológicos sobre los mecanismos moleculares subyacentes a la señalización de heridas a larga distancia a través de, por ejemplo, el uso de mutantes que son defectuosos en los elementos putativos del sistema de señalización rápida o la exploración de los efectos de reactivos farmacológicos como los bloqueadores de canales de Ca2 + (por ejemplo, LaCl3)o inhibidores de otras actividades de señalización potencialmente clave6.\nUna ventaja importante del método de imágenes de biosensores descrito es el uso de biosensores de un solo FP con alto rendimiento fluorescente, simplificando en gran medida tanto el equipo necesario para realizar estas mediciones como su uso en planta. Por lo tanto, los indicadores codificados genéticamente basados en fluorescencia se dividen en dos clases: 1) biosensores de fp único basados en la intensidad y 2) biosensores ratiométricos basados en FRET10. Aunque los sensores basados en FRET ratiométricos son cuantitativamente precisos, los indicadores de Ca2+ basados en la intensidad, incluidos los GCaMP3 e iGluSnFR utilizados aquí, proporcionan una mayor resolución temporal y facilidad de uso debido a su señal de respuesta de Ca2+generalmente más brillante y sus requisitos de microscopio más simples10. Por ejemplo, se informó que el indicador R-GECO1 R-GECO1 basado en proteínas mono-fluorescentes de un solo FP Y2+ muestra un cambio de señal mucho mayor en respuesta al ATP extracelular y a los elicidores de defensa vegetal flg22 y quitina, en comparación con el biosensor ratiométrico YC3.627. Para el análisis de sensores ratiométricos basados en FRET, también es necesario utilizar un microscopio especializado con múltiples filtros para recopilar datos en dos longitudes de onda, mientras que los biosensores basados en FP único requieren que el dispositivo recopile los datos en una sola longitud de onda, una capacidad que se encuentra en todos los microscopios de fluorescencia estándar10. Sin embargo, es importante tener en cuenta que hay algunas desventajas de usar biosensores de un solo FP. Estos biosensores de fp único basados en la intensidad no son los preferidos para cuantificar los cambios absolutos de concentración o para obtener imágenes a largo plazo durante muchas horas o días. Esta limitación se debe a que, además de, por ejemplo, el nivel de Ca2+ para GCaMP3, se cree que la intensidad de la señal de estos biosensores de un solo FP se ve afectada por otros factores como el nivel de expresión del sensor o parámetros como el pH celular que pueden cambiar con el tiempo.\nHasta la fecha, muchas nuevas variantes de estos indicadores codificados genéticamente se han diseñado para mejorar la relación señal/ruido, el rango dinámico, la cinética y la estabilidad del sensor. Por ejemplo, después de que Nakai et al.26 desarrollaran el primer GCaMP, varias variantes sucesivas, como los GECOs, han sido generadas por una combinación de mutagénesis y caracterización cuidadosa48,49,50. Se informó de que el rango dinámico de G-GECO (Green-GECO) era aproximadamente dos veces mayor que el de GCaMP328. Además, la sustitución por diferentes proteínas fluorescentes en estos indicadores dio lugar a la generación de variantes de GECO con diferentes espectros de emisión, como B-GECO (Blue-GECO) y R-GECO (Red-GECO), lo que permite el uso de estos indicadores junto con otras variantes espectrales de GFP en aplicaciones de imagen multicolor28. Del mismo modo, GCaMP ha seguido desarrollándose y mejorando con una serie de sensores mejorados para la velocidad de respuesta y la amplitud de la señal que ahora están disponibles50. Para el monitoreo de la dinámica del glutamato, distintos de iGluSnFR, se han desarrollado una serie de biosensores de glutamato basados en FRET, se han desarrollado las proteínas indicadoras FLuorescent para glutamato (FLIPE)40. FLIPE se compone de CFP y YFP que se unen a través de la proteína de unión al glutamato ybeJ tomada de E. coli. Sobre el glutamato que ata a ybeJ, una disminución dependiente de la concentración del glutamato de la eficacia del traste se observa. Por lo tanto, tanto para Ca2+ como para glutamato hay múltiples sensores de un solo FP y ratiométricos disponibles. Los investigadores deben considerar el biosensor apropiado para detectar la dinámica de la señal en función del diseño experimental y los requisitos para los factores de medición, como la señal alta: ruido (sensores de un solo FP) frente a la necesidad de una cuantificación de alta precisión (donde sobresalen los sensores FRET).\nEl método de la proyección de imagen del ancho-campo, solo-FP descrito aquí para herir debe también ser útil cuando está aplicado a otros procesos sistémicos de la señalización de la tensión. A pesar de la presencia de numerosos informes que sugieren un papel crucial de la señalización de Ca2 + a larga distancia en diversas respuestas de estrés, como el ataque de herbívoros6,51,52,sal20y la sequía53,solo unos pocos estudios han proporcionado la información espaciotemporal relacionada con las señales rápidas de Ca2 + de larga distancia inducidas por estas respuestas deestrés 6,7,20,52. El uso de un microscopio de fluorescencia de campo amplio en este protocolo también permite la observación en tiempo real de la dinámica de la señal móvil no sólo en la comunicación hoja a hoja, sino también en la comunicación de raíz a brote, como se ha demostrado recientemente38. Aunque nos hemos centrado en los protocolos para Arabidopsis,este método de imágenes en tiempo real para toda la planta también proporciona una herramienta robusta para comprender las características espaciales y temporales de la señalización sistémica de Ca2 + en las respuestas de estrés biótico y abiótico en otras especies de plantas como el tabaco30.\nEste trabajo fue apoyado por subvenciones de la Sociedad Japonesa para la Promoción de la Ciencia (17H05007 y 18H05491) a MT, la Fundación Nacional de Ciencias (IOS1557899 y MCB2016177) y la Administración Nacional de Aeronáutica y del Espacio (NNX14AT25G y 80NSSC19K0126) a SG.


Metro asume negligencia en falla de Línea 5 y remueve a gerente de mantenimiento, Plataforma Urbana          \nEstás en Plataforma Urbana » Ciudad en la Prensa » Metro asume negligencia en falla de Línea 5 y remueve a gerente de mantenimiento\nMetro asume negligencia en falla de Línea 5 y remueve a gerente de mantenimiento\nPor Diego Villegas y Valentina Mery, La Tercera.\nProblemas de energía comenzaron 20 horas antes del colapso y el tren funcionó durante la jornada con baterías de emergencia.\nAunque fue cerca de las 19.30 horas del miércoles que los 41 trenes que transitaban en la Línea 5 se quedaron quietos por falta de energía, la falla que originó el segundo colapso de la red en menos de una semana, afectando a cerca de 400 mil usuarios y que obligó a evacuar a 50 mil personas desde los vagones, comenzó 20 horas antes.\nSegún reconoció Metro ayer, el desperfecto en la alimentación de energía -cuyo origen está siendo investigado- se inició en la madrugada de ese día, pero no se pudo detectar debido a que no estaba activada la alarma que avisa al comando central de este tipo de anomalía. Lo anterior provocó que durante toda la jornada la Línea 5 -la más larga de la red, con 30 estaciones que van desde Maipú hasta La Florida- funcionase con baterías de emergencia.\n“Nuestros equipos de ingeniería se encontraban realizando unos trabajos en un sistema para información de pasajeros, que hizo que la alarma de paso de sistema eléctrico a baterías no pudiese ser detectada por nuestro personal de regulación que trabaja en el centro de control (ubicado en el edificio corporativo). Eso hizo que funcionáramos todo el día con el sistema de baterías y no pudiéramos detectar que no estábamos siendo alimentados por la fuente principal”, comentó el gerente de operación de la empresa de transportes, Rodrigo Terrazas. “Esta falla se produce entre la 1.30 y 2.00 del 20 de agosto, situación que elimina la alimentación del sistema de tracción de la Línea 5”, agregó (ver infografía).\nSin embargo, las explicaciones ante la doble falla, que se sumaron a la “fisura sorpresa” que obligó a suspender el servicio en la Línea 4 el 13 de agosto, no quedaron ahí. Fue el presidente de Metro, Aldo González, quien detalló las tres medidas que tomó la empresa, luego de una junta de directorio extraordinaria realizada ayer para analizar los dos desperfectos.\nAuditoría y salida\nLa primera de ellas consistió en pedir la renuncia de Raúl Elgueta, quien se desempañaba hace dos años como gerente del área de mantenimiento de la empresa. La renuncia, explicó González, “ya se hizo efectiva, por lo que se nombró a uno de forma interina”.\nAdemás, se acordó realizar una auditoría externa, compuesta por expertos internacionales en redes de metro, para analizar la forma en la que se mantienen las vías y el material rodante, además de los sistemas eléctricos. Para esto, la empresa solicitó la opinión de los trabajadores a través del sindicato (ver secundario).\nLa tercera disposición anunciada apunta a revisar todos los protocolos de acción e información para casos de emergencia, en lo que respecta a evacuación e interrupción del servicio.\n“Me hago cargo del tema. El directorio manifestó la preocupación por la información que se le entrega al público. Hubo deficiencias y se tomó la determinación de mejorar los protocolos de comunicación. Como empresa, estamos dispuestos a tomar todas las medidas”, detalló.\nGonzález comunicó estos anuncios en el edifico corporativo de Metro, ubicado en la Alameda, junto al ministro de Transportes, Andrés Gómez-Lobo. El secretario de Estado destacó que, a pesar de la falla ocurrida, la empresa sigue manteniendo su alta calidad en los traslados de los capitalinos.\n“Para el Metro, garantizar un servicio de calidad es la primera prioridad y estamos satisfechos con las decisiones que se han tomado. Metro siempre ha cumplido con su frecuencia y su capacidad operativa de forma muy buena, y hasta el momento no hemos visto necesidad de cambiar la relación contractual”, dijo Gómez-Lobo. “Estamos haciendo tremendos esfuerzos por expandir la red de Metro, con una inversión de US$ 3.000 millones, y los buses, en ese sentido, han quedado rezagados. Queremos avanzar equilibradamente y tener otros modos ayuda a tener mejores sistemas”, agregó el ministro.


Gremios de Mendoza rechazaron el proyecto de horario corrido - Mendoza Post\nEl Centro Empleados de Comercio (CEC), la Asociación Bancaria y Uthgra Seccional Mendoza (Unión de Trabajadores del Turismo, Hoteleros y Gastronómicos de la República Argentina) rechazaron el horario corrido para la atención del comercio y de bancos en la provincia, propuesta por el legislador Diego Costarelli.\nEn un comunicado, expresaron cuál es la situación de la pandemia y manifestaron que "nadie puede soslayar la opinión de trabajadores, pequeños empresarios y hacedores de actividades directas o indirectas ligadas al movimiento comercial de los centros urbanos cuando se pretende modificar unilateralmente sus condiciones organizativas y estructurales, anteriores al 20 de marzo de 2020, desconociendo la realidad de la actividad comercial".\n"Por lo expresado, rechazamos la iniciativa de modificación del horario de comercio y bancos del senador Diego Costarelli, que además de inconsulta y extemporánea, contiene un alto desapego con la realidad ya que especula con supuestas ventajas que de ninguna manera generarán beneficios algunos, al contrario, pondrían en peligro más actividades y empleos al hacer que empleadores y trabajadores enfrenten mayores costos en tiempos post-pandémicos", manifestaron.\nLos gremios rechazaron el horario corrido.\n"La responsabilidad de gobernar implica no desacomodar la vida a miles de mendocinos y mendocinas; en todo caso, debería facilitar el desarrollo y el crecimiento de los ciudadanos. Nada de esto ocurre con el Proyecto que aspira tratamiento legislativo", agregaron.\nAdemás, pidieron construir "a partir de grandes acuerdos, nuevos paradigmas sustentados en factores culturales vinculados a nuestra idiosincrasia. Qué son los pueblos sino un cúmulo de costumbres que nos marcan como comunidad. Invitamos a pensar nuestra provincia, con la necesaria participación de todos y no desde la estrecha visión de unos pocos".\n"De prosperar la iniciativa del ssenador Costarelli, con seguridad podríamos afirmar desde la Bancaria, CEC Mendoza y UTHGRA, que el cambio de horario nada mejora y lo que es peor, perjudica a aquellos cuyos trabajos se ven involucrados", finalizaron.