ԱՐԱԲԻՏԻԿԱ  Պրոբիոտիկ մանրէները նման նյութերի արտադրողներն են:   Կաթնաթթվային բակտերիաները (կաթնաթթվային բակտերիաներ), բիֆիդոբակտերիաները, խմորիչները, աղիքային ձողերը, streptococci- ն համարվում են իրական թերապևտիկ միջոցներ, որոնք կարող են ընտրողաբար վերահսկել անցանկալի բակտերիաների քանակը, որոնք մուտք են գործել մեր մարմին:  Պրոբիոտիկ մանրէների անտագոնիստական ​​ակտիվությունը պայմանավորված է եզակի հակաբակտերիալ նյութերի ՝ օրգանական թթուների, կարճ շղթայական ճարպաթթուների, ջրածնի պերօքսիդի [6] արտադրմամբ:  Բացի այդ նյութերից, կաթնաթթվային բակտերիաները սինթեզվում են մանրեասպաններով [1, 4, 5]:   Բակտերիաների սինթեզը եզակի հատկություն է:   Դրանք անվտանգ են մարդու համար և պրոբիոտիկ մանրէների հետ միասին մեծ հետաքրքրություն են ներկայացնում հատկապես սննդի արդյունաբերության համար:   Մանրէները սինթեզվում են ռիբոսոմներում և ենթարկվում հետընտրական թարգմանական մուտացիաների, ինչը կարող է հանգեցնել մոլեկուլին ճարպաթթուների, ածխաջրերի կամ այլ միացությունների ավելացմանը:   Սովորաբար դրանք ունեն 2-6 կԴա փոքր մոլեկուլային զանգված:   Բակտերիաների գործողության մեխանիզմը տարբեր է. Դրանք քայքայում են բջջային պատը, արգելակում բջջային պատի կենսասինթեզը կամ ածխաջրերի յուրացման ֆերմենտները:   Դրանք բաժանվում են 2 խմբի ՝ լանտիբիոտիկներ, որոնք պարունակում են եզակի ամինաթթուներ, ոչ լանտիբիոտիկներ β-մեթիլանտիոնիոն [7, 9, 10]: Ընդհանուր առմամբ, պրոբիոտիկ մանրէները չեն կարող ամբողջությամբ փոխարինել հակաբիոտիկներին:  Միևնույն ժամանակ, այդ մանրէներն անփոխարինելի են աղիքային միկրոբիոտան կարգավորելու համար: Այս աշխատանքի նպատակն է ուսումնասիրել Հայաստանի տարբեր մարզերից թթու բանջարեղենից մեկուսացված ԿԲԴ հակամանրէային ակտիվությունը, դրանց վրա տարբեր գործոնների ազդեցությունը, ինչպես նաև այդ գործունեությամբ օժտված նյութերի քիմիական բնույթը: ՆՅՈՒԹԵՐ ԵՎ ՄԵԹՈԴՆԵՐ Հետազոտական ​​օբյեկտներն էին Lactobacillus sp. 1.9, Leuconostocsp. 2.V և Leuconostoc sp.2.X KTB շտամներ, որոնք մեկուսացված են Հայաստանի տարբեր մարզերի փոքր տնտեսությունների թթու բանջարեղենի նմուշներից:   Մաքուր CBT մշակույթները մեկուսացվել են մեկ գաղութից, որը առաջացել է հիդրոլիզացված կաթնամթերքի միջավայրում թթվային նմուշների հերթական նոսրացումից:   Բոլոր մեկուսացված շտամները պահվում էին -32 oC ջերմաստիճանում 20% գլիցերինով:   Անհրաժեշտության դեպքում շտամները ակտիվացվեցին 10% յուղազերծված կաթի մեջ, որը պարունակում էր 0,1% պեպտոն, 0,1% խմորիչի քաղվածք, pH 7,0: Մշակույթի հեղուկի օպտիկական խտությունը չափվել է սպեկտրոֆոտոմետրիկորեն (λ = 595 նմ) (Thermo Scientific, GENESYS 10S UV-VIS, ԱՄՆ):   Ուսումնասիրված մանրէների հակամանրէային ակտիվության կախվածությունը ցնցման ուժից (լուծվող թթվածնի քանակը) որոշվել է բակտերիաների աճը 20-22 ժամ MRS- ում (Man, Ragoza, Sharp) 37 ° C ջերմաստիճանում, ակտիվ ցնցումով (80 rpm) ), առանց ցնցելու: ստորև նկարագրված եղանակով: Հակաբակտերիալ գործունեության ուսումնասիրություն:   Մեկուսացված մաքուր մշակույթների հակաբակտերիալ հատկությունները որոշվել են ագարի մեջ տարածմամբ:   Որպես փորձարկման օրգանիզմ օգտագործվել են միկրոօրգանիզմների տարբեր խմբերի ներկայացուցիչներ. WDCM-5233, Bacillus subtilis WT-A1:  ԿԲ-ները մշակվել են մինչև 48 ժամ: Ուսումնասիրվել է հակաբակտերիալ բաղադրիչների սինթեզը `կախված աճման փուլից:   Այնուհետև Petri- ի ուտեստները պահվում էին սենյակային ջերմաստիճանում 30 րոպե `նպատակ ունենալով տարածել ագարի մեջ:   Փորձարկվող օրգանիզմի աճի համար օպտիմալ ջերմաստիճանային պայմաններում աճելուց հետո 24 ժամ հետո չափվել են աճի բացակայության գոտիները: Ուսումնասիրվել է սննդանյութերի բաղադրության ազդեցությունը հակաբիոտիկ ակտիվության վրա:   CBD- ներն աճեցվել են MRS- ում և 10% յուղազերծված կաթում 24 ° C ջերմաստիճանում 24 ժամվա ընթացքում, ապա ուսումնասիրվել է հակաբակտերիալ ակտիվությունը:   Նվազագույն արգելակիչ խտությունը (MAC) որոշվեց վերը նշված մեթոդով [2]:   Նմուշը զտվել է 0,5, 1, 2, 2,5, 3, 3,5 և 4 անգամ ստերիլացված ֆոսֆատային բուֆերով (20 մմ, pH 6,5):  Յուրաքանչյուր նոսրացումից 100 μl կաթել են Petri- ի ափսեներում ցանված փորձանման օրգանիզմի մարգագետին:   Հետագա բոլոր քայլերը նման էին վերը նշված հակաբակտերիալ ակտիվության ուսումնասիրման մեթոդին:  Ուսումնասիրության մեջ մշակույթի հեղուկի քանակը, որը առնվազն 2 մմ աճի պակաս է առաջացրել, համարվել է NAK: Ուսումնասիրվել է հակաբիոտիկների ազատող նյութերի բջջային թաղանթին կապելու ունակությունը ՝ որոշելով մնացորդային ակտիվությունը բջիջներից զերծ հեղուկ լուծվող բջջային քաղվածքում:  Բջջի էքստրակտը ստացվել է ուլտրաձայնային եղանակով (40 րոպե 20 կՀց և 300 Վտ) (Labsonic 2000, B. Braun, Գերմանիա) կամ ապակե գնդիկներով 20 րոպե թափահարում 5000 պտույտ / րոպեում: PH- ի փոփոխության ազդեցությունը CBD- ի հակաբակտերիալ ակտիվություն ունեցող բաղադրիչների վրա որոշվել է MRS միջավայրում ԿԲ շտամների աճով `24 ժամում 37 ° C ջերմաստիճանում, հետագա pH- ի տիտրմամբ` 5 6,5 և 10 մ NaOH լուծույթի 8 արժեքներով: Հակաբակտերիալ գործակալի ջերմային դիմադրությունը որոշվել է 15 րոպե 40 ° C- ից 85 ° C սահմաններում ջրի լոգարանում մշակույթի հեղուկը պահելու միջոցով:  Հակաբակտերիալ միջոցների մնացորդային ակտիվությունն ուսումնասիրվել է դիֆուզիոն մեթոդով: Ֆենոլի նկատմամբ ցողունային դիմադրությունը ուսումնասիրվել է 10% յուղազերծ կաթում ցանելու միջոցով, որը պարունակում է 0,1, 0,3, 0,5 և 0,7% տիտրացված ֆենոլ:  Վերջինս տիտրացվել է 1 M Tris HCl լուծույթով (pH 8) մինչև H pH 7: Հակաբիոտիկների նկատմամբ շտամների դիմադրողականությունն ուսումնասիրվել է սկավառակի տարածման մեթոդով: Դոքսիցիկլին (30 մկգ), ջենտամիցին (10 մկգ), ցիպրոֆլոքսացին (5 մկգ), կանամիցին (30 մկգ), բացիտրացին (4 մկգ), լոմիցետին (30 մկգ), բենզիլպենիցիլին (10 մգ), գ Ամոքսիցիլինի սկավառակներ (20/10) մկգ), ամպիցիլին (10 մկգ), մոքսիֆլոքսացին (5 մկգ), ֆուրազոլիդոն (50 մկգ): Հակաբակտերիալ նյութի քիմիական բնույթի պարզաբանումն իրականացվել է KTB շտամների աճեցմամբ `10% յուղազերծ կաթում կամ MRC- ում 24 ժամ 37 ° C ջերմաստիճանում:   Դրանից հետո 100 մկմ մշակութային հեղուկին ավելացվել է 2 μl 1 μg / ml պրոտեինազ K (BioUltra, 30 միավոր / մգ Sigma-Aldrich, ԱՄՆ):  Հակաբակտերիալ գործակալի մնացորդային ակտիվությունը ուսումնասիրվել է վերը նշված եղանակով: Ստացված արդյունքները երեք անկախ փորձերի միջին տվյալներ են: ԱՐԴՅՈՒՆՔՆԵՐԸ ԵՎ ՔՆՆԱՐԿՈՒՄԸ ԵՊՀ մանրէաբանության, բույսերի և մանրէաբանության և կենսատեխնոլոգիայի ամբիոնում պահպանված բոլոր 28 շտամները ուսումնասիրվել են ըստ դրանց հակասական գործունեության:   MRH միջավայրում աճելը ցույց տվեց ավելի բարձր հակասական ակտիվություն, քան կաթում:   Ուսումնասիրված բոլոր շտամները հակաբակտերիալ ակտիվություն չեն ցուցաբերել Candida guilliermondii HM-12- ի դեմ:  Բոլոր շտամների առավելագույն հակաբակտերիալ ակտիվությունը նկատվում է 18 ժամ աճից հետո (Նկար 1): Օպտիկական խտության աճի ճնշումները Նկար 1. CBամանակի ընթացքում ԿԲ-ների աճի, թթվայնացման և հակաբակտերիալ ակտիվության կախվածությունը: Թթվածնի ազդեցության ուսումնասիրությունը առավելագույն հակաբակտերիալ ակտիվության հայտնաբերման վրա ցույց է տվել, որ շտամների հակաբակտերիալ ակտիվության հայտնաբերումը կախված չէ թթվածնի առկայությունից: 2.X, որի հակաբակտերիալ ակտիվությունը ճնշվում է, երբ աճում է անաէրոբ պայմաններում (աղյուսակ 1): Լուծվող թթվածնի ազդեցությունը մանրէազերծման ձևավորման վրա Աղյուսակ 1 շտամներ նմուշմուշակ Փորձարկվող օրգանիզմների աճի գոտիները (Ø մմ) Առանց ցնցումների V NAKH շտամը S. aureus և M. luteus բակտերիաների դեմ, և E. coli- ի աճը չի խանգարում նույնիսկ նոսրացման դեպքում: Նման տվյալներ են ձեռք բերվել Lactobacillus sp. 1.9 շտամի համար: Leuconostoc sp. 2.X լարվածության մշակույթի հեղուկն ինքնին կազմում է NAK, քանի որ նույնիսկ նոսրացման դեպքում այն ​​կորցնում է իր հակասական գործունեությունը: Հակաբակտերիալ նյութի արտազատման ունակության ուսումնասիրությունները ենթադրում են, որ ուսումնասիրված ԿԲԴ-ների հակաբակտերիալ ակտիվությունը արտաբջջային է (աղյուսակ 2): Աղյուսակ 2. Հակաբակտերիալ նյութի կլանում Ստեմներ Փորձարկվող օրգանիզմների թեստային աճի գոտիներ (Ն մմ) Նմուշներ ՎԵՐԱԿԱՆԳՆՈՒՄԻ E ՁԻՔԻ ՀԱՆՁՆԱՈՒՄ ՁԿՆԱՅԻՆ ՆՍՏԱՈՒՄ մնացորդի ակտիվության մասնակի նվազումը կարելի է բացատրել ցենտրիֆուգացման ընթացքում ջերմաստիճանի բարձրացմամբ:   Նմանատիպ փորձեր են կատարել նաև Ա. Բաբայանը և համահեղինակները [2]:  Տարբերություն մեր տվյալներից, L. rhamnosus INA-5.1, INA-201021.1 և L. delbrueckii subsp. Bulgaricus INRA-2010-5.2 շտամների հակաբակտերիալ ակտիվությունը կապված է բակտերիալ բջիջների պատի հետ [2]: Քանի որ CBD- ների հակաբակտերիալ ակտիվությունը կարող է պայմանավորված լինել առաջնային նյութափոխանակության արտադրանքներից մեկով `կաթնաթթվով, ուսումնասիրվել է CBD- ների հակաբակտերիալ ակտիվությունը pH 6.5 և 8-ով:   Այն համապատասխանում է աղիների պայմաններին:  Ընդհանուրացված տվյալները ներկայացված են Աղյուսակ 3-ում: Աղյուսակի տվյալները ցույց են տալիս, որ ցածր բազալային pH- ով շտամները պահպանում են իրենց հակաբակտերիալ գործունեության մի մասը:  Ստացված տվյալները ցույց են տալիս, որ CBT շտամների հակաբակտերիալ հատկությունները պայմանավորված չեն կաթնաթթվով: Աղյուսակ 3. pB հակաբակտերիալ ակտիվության կախվածությունը pH- ից Փորձարկվող օրգանիզմների աճի ճնշման գոտիներից (Ø մմ) Նմուշի կաթ H 6.5 Կաթ pH 8 MRM pH6.5 MR pH 8 Հակաբակտերիալ գործակալի ջերմակայունության ուսումնասիրությունը ցույց է տվել, որ Leuconostoc sp. 2.X և Leuconostoc sp. 2.V շտամները պահպանում են հակաբակտերիալ ակտիվությունը 55 ° C ջերմաստիճանում E. coli VKPM M17 ինկուբացիայի և Lactobacillus sp. Լարում 1.9, երբ մշակվում է 60 ° C ջերմաստիճանում 15 րոպե: Մինչդեռ դեմ S. aureus 5233- ին, Leuconostoc sp. 2.X- ն ցուցաբերում է գործունեության կեսը 55 ° C ջերմաստիճանում, Leuconostoc sp. 2. Վ 65 ° C ջերմաստիճանում և Lactobacillus sp. 1,9 70 ° C ջերմաստիճանում:   Պետք է նշել, որ միայն Lactobacillus sp. 1.9 շտամը պահպանում է իր ակտիվությունը 90 ° C ջերմաստիճանում M. luteus WT- ի դեմ:   Temperatureերմաստիճանի հետագա բարձրացումը հանգեցնում է բաղադրիչի գործունեության կորստին (Նկար 2): յ: յ: n: ա թ: ւ: o: ա k: ա ց: ա բ: ի: ճ: ա մ: մ: ի: տ: o: գ: Temերմաստիճանը, ˚C Նկար 2. Կաթնաթթվային բակտերիաների հակաբակտերիալ ակտիվության կախվածությունը ջերմաստիճանից Հետաքրքիր է նշել, որ ուսումնասիրելիս հակաբակտերիալ ակտիվության կախվածությունը ջերմաստիճանից, փորձարկող օրգանիզմը կարող է լինել ճիշտ ընտրություն:   Բաբայանը և համահեղինակները նշում են, որ L. rhamnosusINA-5.1, INA-2010-21.1 և L. delbrueckii subsp. Bulgaricus INRA-2010-5.2 շտամներն ունեն հակաբակտերիալ ակտիվություն, զգայուն են ջերմաստիճանի փոփոխությունների նկատմամբ և կայուն են pH փոփոխությունների նկատմամբ [2]: Ֆենոլի և հակաբիոտիկների նկատմամբ կայունության ուսումնասիրությունը ցույց է տվել, որ Leuconostoc 2.X և Leuconostoc sp. 2.V կայուն են 0.3% ֆենոլի նկատմամբ: Այս շտամները դիմացկուն են կանամիցին, bacitracin և moxifloxacin հակաբիոտիկներին:  Leuconostoc sp. 2.X և Lactobacillus sp. 1.9-ը դիմացկուն են նագենտամիցինին և ֆուրազոլինին:  Առավել կայուն շտամը Leuconostoc sp. 2.X, որը դիմացկուն է cefazolin- ին և ampicillin- ին (Աղյուսակ 4): Աղյուսակ 4 Կաթնաթթվային բակտերիաները հակաբիոտիկների ճնշման տակ են  Ստացված տվյալները ցույց են տալիս, որ ուսումնասիրված ԿԲԴ-ներում հակաբակտերիալ ակտիվությամբ օժտված նյութը ոչ միայն սպիտակուցային է (Նկար 3): Նկար 3. Կաթնաթթվային բակտերիաների մնացորդային հակաբակտերիալ ակտիվությունը պրոտեինազ K- ով բուժումից հետո: Ալժիրի ավանդական խմորված կաթից մեկուսացված գրականություն / «Raib»: Աֆր J. Biotechnol. 2008, 7:  2908 ՀՀ բնական գիտությունների էլեկտրոնային ամսագրի: 2013, 2 (21):  38-43 թթ. 3. Bezkorovainy A. Պրոբիոտիկներ:  գոյատևման և աճի որոշիչները աղիներում / Ամ. J. Clin. Nutr. 2001 թ., 73 թ.  3995-4055.lacticin 481 խումբը դառնում է տարիքի / FEMS Microbiol Rev. 2007, 31:  134–167.բակտերիաներ / Biochimie. 2002,84 թթ.  577–592.6: Kleerebezemab M., Hols P., Hugenholtz J. Կաթնաթթվային մանրէներ ՝ որպես բջիջների գործարան: Մանրէաբանական: Տեխնոլ.,. 2000, 26:  840-848.7. Moll, GN, WN Konings, Driessen AJM Bacteriocins.   Մեմբրանի ներդրման և ծակոտիների ձևավորման մեխանիզմ / Անտոնի վան Լիուվենհուկ, 1999, 76:  185–198. Դրական բակտերիաներ / Int. Միկրոբիոլ, 4. 13-19.9. Papagianni M., 2003. Ribosomally սինթեզված պեպտիդներ և հակամանրէային հատկություններ: կենսասինթեզ, կառուցվածք, ֆունկցիա և կիրառություններ / Բիոտեխնոլ: Adv.2001, 21:  465–499.10. Willey IM, Van der Dank WA Lantibiotics.   բազմազան կառուցվածքի և ֆուկցիայի պեպտիդներ / Annu. Rew. Միկրոբիոլ 2007, 61: 477-501 թթ. Վերդյան Ա., Բազուկյան Ի., Թռչունյան Ա. ՀԱՅԱՍՏԱՆՈՒՄ ԲՈՒՅՍԵՐԻ ՄԵSԱԴՐՎՈ L ԿԱԹՆԱԹԹԻ ՀԱԿԱԲԱԿՏԵՐԱՅԻՆՆԵՐԻ ՊԵՏՈՒԹՅՈՒՆԸ: ։

Թթու  դրած  բանջարեղենից  մեկուսացվել  են  հակամանրէային  ակտիվությամբ  օժտված 3 կաթնաթթվային բակտերիաներ։
  Շտամների հակամանրէային ակտիվությունը դիտվում է 18 ժամ աճեցումից հետո ՄՌՇ սննդամիջավայրում։
  Նվազագույն արգելակող ակտիվություն  է  դիտվել  1։
 4  նոսրացման  դեպքում։
   Հակաբակտերիական  նյութերը  ջերմակայուն  են,  սակայն  զգայուն  են  pH-ի  փոփոխությանը։
   Պարզաբանվել  է,  որ  հակաբակտերիական  ակտիվությունը  պայմանավորված  է  ոչ  միայն  սպիտակուցային  բնույթի  նյութերով։
   Lactobacillus  sp.  1.9  և  Leuconostoc  sp.  2.V  շտամները  կայուն  են  0.3%  ֆենոլի,  իսկ  Leuconostoc sp. 2.X՝ տարբեր հակաբիոտիկների նկատմամբ։
