ՓՈՓՈԽՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐ ՄԱՐԴՈՒ Ստամոքսի դեպքում [արյան չարամիտ նորագոյացություններ] 14 Նախորդ ուսումնասիրությունները ընդգծել են պոլիամինի կենսասինթեզի խթանող դերը ուռուցքի աճում [8, 10]:  Պոլիամինները փոքր մոլեկուլային քաշի ալիֆատիկ ամիններ են, որոնք առաջանում են L արգինինի կատաբոլիզմում:  Արգինազ ֆերմենտը կատալիզացնում է L-arginine- ի հիդրոլիզը L-ornithine զ urea:  Epoliamines- ը սինթեզվում է L-ornithine- ից ornithine- ով `decarboxylase ֆերմենտով, որը արդյունք է արգինազի ռեակցիայի:  Պոլիամինները հայտնաբերված են մի շարք պրոկարիոտների բոլոր էուկարիոտ բջիջներում:   Գրականության մեջ տարբեր տվյալների վերլուծությունը ցույց է տվել, որ չարորակ նորագոյացությունների առկայության դեպքում արգինազի ակտիվությունը մեծանում է:   Orույց է տրվել, որ ornithine- ի (պոլիամինի) բարձր պարունակությունը նպաստում է քաղցկեղածնությանը `բարձր արգինազի ակտիվության պատճառով:  Պոլիամինի քանակի ավելացումը խթանում է ուռուցքի և մետաստատիկ գործընթացների անգիոգենեզը:  Տարբեր օրգաններում չարորակ ուռուցքների առկայության դեպքում ցույց է տրվել արյան շիճուկում պոլիամինի (պուտրեսցին, սպերմիդին, սերմի) քանակի կտրուկ աճ [12]:  Օրնիտին դեկարբոկիլազա ֆերմենտը Myc ուռուցքածինների համար առաջին ուղղակի թիրախն է:  Պոլիամինի բարձր մակարդակը նպաստում է քաղցկեղի բջիջների արագ աճին:  Իմունային բջիջների կողմից պոլիամինի կլանումը ճնշում է հակատուռուցքային ցիտոկինների ՝ կպչունության մոլեկուլների քանակի արտադրությանը, որն ի վերջո դադարեցնում է իմունային բջիջների ցիտոտոքսիկ ակտիվությունը:  Սա քաղցկեղի բջիջներին թույլ է տալիս շրջանցել իմունային համակարգը:  CD44 և E-cadherins- ը սոսինձ մոլեկուլներ են, որոնց սինթեզը ճնշվում է հիպոքսիայով `պոլիամինի բարձր կոնցենտրացիաների պատճառով, ինչը նպաստում է մետաստազների տարածմանը, քանի որ այն հեշտացնում է բջիջների առանձնացումը ծնողական ուռուցքից:  Անոթի պատին կցվելուց հետո, պոլիամինի մեծ սինթեզի պատճառով, ուռուցքային բջիջները արագ աճում և բաժանվում են [6, 15]: Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպության տվյալներով ՝ տարիքային սահմանափակման պատճառով Հայաստանում 100,000 մարդու մահացությունը 39,8 է, ինչը Հայաստանը դարձնում է աշխարհում առաջին երկիրը քաղցկեղով մահացության ցուցանիշով:   Հասկանալով արգինազի պոլիամինի ազդեցության տարբեր ուղղությունները քաղցկեղի մեջ, հնարավոր է մշակել կանխարգելման և բուժման մոդելներ:  Այս ուսումնասիրության նպատակն էր ուսումնասիրել մարդու շիճուկում պոլիամինի և արգինազի ակտիվության քանակի կապը մարդու ստամոքս-աղիքային տրակտի չարորակ նորագոյացությունների դեպքում: Հիվանդները  Հետազոտություններն իրականացվել են VA- ի կողմից Ֆանարջյանի անվան ուռուցքաբանության ազգային կենտրոնի կողմից տրամադրված ստամոքս-աղիքային քաղցկեղով հիվանդների շիճուկային նմուշներում:  Ուսումնասիրվել է 25 հիվանդի արյան շիճուկ (I-IV աստիճան, 48-75 տարեկան, G1 և G2 տարբերակում, տղամարդկանց և կանանց արյան շիճուկում ստացված արդյունքները առանձնացված չեն):  Հիվանդները դեռ չեն ստացել քիմիաթերապիա կամ ճառագայթային թերապիա, ինչպես նաև հիվանդների արյան շիճուկ, որոնց մոտ դեռ այլ հիվանդություն չի ախտորոշվել:  Վերահսկիչ խումբը բաղկացած էր 7 առողջ անհատներից ՝ 51 51 15 տարիքային խմբում (4 կին և 3 տղամարդ):  Քաղցկեղը գնահատվել է TNM (ուռուցք, նոդուլ, մետաստազ) համակարգի միջոցով:  Կերակրափողի, ստամոքսի և հաստ աղիքի քաղցկեղով հիվանդների արյան շիճուկի հետազոտության արդյունքները ներկայացվել են գիտաժողովի տեսքով:  Աղեստամոքսային տրակտի տարբեր օրգանների չարորակ նորագոյացություններով հիվանդների մոտ ախտորոշվում է զարգացման հետևյալ փուլերը. 6 հիվանդ ՝ I աստիճանի (62 ± 7, T1 կամ T2, N0, M0), 7 հիվանդ ՝ II աստիճանի (56 ± 12, T3) կամ T4, N0, M0), 7 հիվանդ ՝ III աստիճանի (63 ± 11, T1- 4, N1 / N2, M0) և 5 հիվանդ ՝ IV աստիճանի (71 ± 15, T1-4, N1-2, M1): Ռեակտիվներ:   Փորձի ընթացքում օգտագործվել են L-arginine, glycine buffer, MnCl2 × 4H2O, YEK, DAMO, թթվային խառնուրդ, HClO4, դենսիլ քլորիդ, Na2CO3, պրոլին, էթիլացետատ, քրոմատագրական թիթեղներ, քլորոֆորմիլ / տրի քլոր: Արգինազի իզոֆերմենտի տեսակի, գործունեության և սպիտակուցների քանակի սպեկտրի որոշում:  Գելի ֆիլտրում (Sephadex G-150, արտազատում ֆոսֆատային բուֆերի անընդհատ հոսքով (0.2 Մ, pH 7.2)) իոնափոխանակիչ քրոմատագրություն (CM- ցելյուլոզա, M1, աստիճան 0.15 Մ, 0.2 Մ, 0.25 Մ KCl լուծույթներով 5 մմ Tris- HCl, pH 7.5) օգտագործելով Kossman մեթոդը [14]:   Որոշակի փոփոխություններով ակտիվությունը որոշելու համար օգտագործվել է Վանսլայկի և Արչիբալդի մեթոդը [1, 2, 14]:   Դեղին գույնի ուժգնությունը չափվեց սպեկտրաֆոտոմետրիկ մեթոդով. Սպիտակուցի քանակական վերլուծություն 487 նմ-ով:  Սպիտակուցի քանակը որոշվեց պոլիամինի խտացումով և բարակ շերտով քրոմատագրությամբ:   Որոշակի երկարությամբ (Genesys 10, ԱՄՆ):  Ֆերմենտի ակտիվությունն արտահայտվում էր մոլ x վրկ -1 (կատ): Համաձայն Լոուրիի մեթոդի: Morgan մեթոդը օգտագործվել է փոփոխություններով: Արդյունքների մշակում Statistica 10 (StatSoft) ծրագրով:  Ստացված արդյունքները ներկայացված են միջին ± ստանդարտ շեղման (M ± SD) արժեքներով:  Մշակված է Statistica 10 ծրագրի միջոցով:  Արդյունքները վերլուծվել են Student t-test- ի միջոցով (եզակի նմուշ): Այս ուսումնասիրության նպատակն էր ուսումնասիրել «արգինազի ակտիվության փոխկապակցվածությունը» պոլիամինի քանակի հետ, ինչպես նաև «պարզաբանել» արգինազի իզոենզիմային կազմը ստամոքս-աղիքային տրակտի (կերակրափող, ստամոքս) տարբեր աստիճանի չարորակ նորագոյացություններում: , կրկնակետ). Փորձարարական աշխատանքի առաջին փուլում որոշվել է տարբեր աստիճանի բարդություններ ունեցող հիվանդների արյան շիճուկում արգինազի գործունեության ակտիվությունը (նկ. 1):  Ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ աղեստամոքսային քաղցկեղով հիվանդների շիճուկային արգինազի ակտիվությունը մեծանում է առողջ մարդու շիճուկային արգինազի գործունեության համեմատ `I աստիճանի դեպքում` 2.18, II աստիճանի դեպքում `2.5, III աստիճանի դեպքում` 2.71, և IV աստիճանի դեպքում 2.94 անգամ:  Արգինազի ակտիվությունը մեծանում է քաղցկեղի բարդությունների ավելացման հետ միասին: Մարդու ստամոքս-աղիքային տրակտի չարորակ նորագոյացություններում շիճուկի արգինազի ակտիվության տողի փոփոխություն (n = տե՛ս հիվանդի նկարագրությունը, p <0,001): Արգինազի ակտիվության աճը պետք է ինչ-որ կերպ արտացոլվի նապոլիմինների քանակի մեջ:  Այս ենթադրությունը հաստատելու համար աշխատանքի հաջորդ փուլում առողջ և հիվանդ մարդու արյան նմուշներում կատարվել է պոլիամինի քանակական որոշում: Տող Շիճուկային պոլիամինի քանակական-որակական վերլուծություն բարակ շերտի քրոմատագրման միջոցով:  Ձախ սյուն - նորմ, աջ սյուն - II աստիճանի ստամոքսային քաղցկեղ, RF SPM - 0.21, RF SPD - 0.85, RF PUT - 0.89, ծագում - սկիզբ, SPM - սերմ, SPD - սպերմիդին, PUT - պուտրեսցին:               Քրոմատագրական պատկերը ցույց է տալիս, որ քաղցկեղի յուրաքանչյուր փուլում արգինազի ակտիվության հետ մեկտեղ նապոլիմինների քանակը մեծանում է (նկ. 2 և աղյուսակ 1): Աղյուսակ 1. Աղեստամոքսային տրակտի քաղցկեղ ունեցող առողջ մարդու արյան շիճուկում պոլիամինի քանակի փոփոխություն (n = 5, p <0,05):  Պոլիամինի քանակը ներկայացված է nM պոլիամինով `1 մլ արյան շիճուկում:  SPM- սերմնահեղուկ, SPDspermid, PUT-putrescin: Քաղցկեղի ընթացքում պոլիամինի քանակի ընդհանուր աճը նորմայի համեմատ `համապատասխանաբար 59,3%, 68,4%, 80,3% և 113,3% I, II, III և gradesV դասարաններում: Առողջ աղեստամոքսային տրակտով հիվանդների քաղցկեղով հիվանդների արյան շիճուկում կատարվել է արգինազի իզոենզիմային կազմի որոշում:  Ի տարբերություն դրա, շիճուկային սպիտակուցի և արգինազի ակտիվ քրոմատագրերով հիվանդների մոտ գել իոնափոխանակությամբ քրոմատագրությունից հետո ստացված պիկերը շեղվում են աջ, իսկ մասամբ մաքրված արգինազի ակտիվությունն աճում է գագաթներին համապատասխան խմբակցություններում:  Կաթնասունների լյարդի արգինազի (արգինազ I) իզոէլեկտրական կետի (pI) արժեքը տատանվում է 8,8-ից 9,4-ի սահմաններում:  PH <pI- ով, սպիտակուցները ստանում են էնդոգեն լիցք:  Մեր լաբորատորիայում կատարված ուսումնասիրությունները (5 մմ Tris-HCI- ով, pH 7.5, տող 3 C և D- ով մաքրում) ցույց տվեցին, որ արգինազի ակտիվությունը միայն կատիոնային սպիտակուցների ֆրակցիաներում է, ինչը համահունչ է գրականությանը:  Արդյունքները ցույց են տալիս, որ արգինազ 2 իզոենզիմների շիճուկում առկա է միայն արգինազ I- ը (նկ. 3): Տող 3. Արգինազի ակտիվության շիճուկ (▲) կորուստ սպիտակուցային (■) սպիտակուցային կորերի գել (A: Ve = 92 մլ և B: Ve = 108 մլ, Sephadex G-150 աշտարակ (2 x 40 սմ)) Սիոնային փոխանակում (C: Ve = 96 մլ և D. Ve = 104 մլ, CM- ցելյուլոզային աշտարակ (1 x 18 սմ) քրոմատագրությունից հետո (n = 3, p <0,05, II աստիճանի քաղցկեղի բարդություն): Այսպիսով, ստամոքս-աղիքային տրակտի քաղցկեղի դեպքում շիճուկային արգինազի ակտիվությունը զգալիորեն մեծանում է, ինչը կապված է քաղցկեղի փուլերի հետ:   Մեր արդյունքները ցույց են տալիս, որ հիվանդության փուլերի հետ մեկտեղ ավելանում է պոլիամինի զուգարանը:  Մենք առաջարկում ենք, որ արգինազի գործունեության քանակի պոլիամինի մակարդակի վերահսկումը կարող է օգտագործվել քաղցկեղի հնարավոր բուժման համար:   Հաշվի առնելով վերոգրյալը, այս ֆերմենտային ինհիբիտորներն օգտագործող այլ ուսումնասիրություններում լաբորատորիան ուսումնասիրեց առնետների մոտ արգինազի ակտիվության հակատուռուցքային հատկությունները ՝ ի տարբերություն 7,12-դիմեթիլբենզանտրացենի (DMBA) առաջացրած կրծքի քաղցկեղի: ԳՐԱԿԱՆՈՒԹՅՈՒՆ [3] Bonavida B., ազոտի օքսիդ և քաղցկեղ:  Պաթոգենեզ և թերապիա, Springer InternClin Cancer Res, 2011, 30: 95. [11] Munder M., Arginase.  կաթնասունների իմունային համակարգի զարգացող հիմնական դերակատար: Բջիջներ և հանդուրժողականություն քաղցկեղի մեջ:  Մեխանիզմները և թերապևտիկ հեռանկարները: Immunol Rev., GHorgyan ARGHIK ՓՈՓՈԽՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐ ՇԻHՈՒԿԻ ԱՐԳԻՆԱՍԻ ԳՈՐCTՈՒՆԵՈՒԹՅԱՆ ԵՎ ՊՈԼԻԱՄԻՆՏԻՏՈՒԹՅԱՆ ԳՈՒՄԱՐԸ ՄԱՐԴԿԱՅԻՆ ԱՍՏROԱՄԱՆԱԿՆԵՐՈՒՄ, ԿՏԵ ՈՒ TԵՐ, ԿԱՆԳԱԽՈՒՄԲ ԽԵANԳԵՏԻՆ, ՈՒԼՈՒUMԵՐ: ։

Հիվանդության  վաղ  փուլերում  արյան  շիճուկում  արգինազի  ակտիվության  և  պոլիամինների քանակության աճը և հետագա բարձրացումը զարգացման աստիճանին զուգահեռ` հաստատում է L-արգինինի նյութափոխանակային ուղու այս մետաբոլիտների  կարևորագույն  դերը  քաղցկեղի  զարգացման  գործընթացներում։
   Մենք  եզրակացնում ենք, որ արգինազի ակտիվության արգելակման ճանապարհով պոլիամինների քանակության նվազումը քաղցկեղի զարգացման գործընթացներում կարող  է  ունենալ  հակաուռուցքային  ազդեցություն,  մասնավորապես՝  անգիոգենեզի  և  մետաստազի գործընթացներում։
