ANOXYBACILLUS FLAVITHERMUS K1- ի ամիլազ AKTIVUTYANJERMASTICHANAYIN ԵՎ Էյչ կախյալ եւ PH կայունության եւ SPITAKUTSIJERMAKAYUNUTYAN TIRUYTIUSUMNASIRUMEKensabanakan ակտիվ նյութեր եւ ջերմակայուն enzymes (termozimneri) լարում-արտադրողների ջերմասեր բակտերիաների զգալիորեն բարելավել դիմումի kensatekhnologiakanartadrutyunnerum թույլ է տալիս yevaragatsnelu կենսասինթեզի եւ kensakatalizi գործընթացները khnayelumanreazertsman պահանջվում էներգիան այլ batsarelukontaminatsian բակտերիաներ, քանի որ ինչպես նաև մշակել կենսաբանական նյութերի սինթեզի նոր, առավել առաջադեմ տեխնոլոգիական մեթոդներ [1]: Կենսատեխնոլոգիայում օգտագործվող կենսակալիզատորների մեծ մասը (85%) պատկանում է հիդրոլազների դասին, իսկ ամիլոլիտիկ ֆերմենտները (հատկապես α- ամիլազները, գլյուկոամիլազները և գլյուկոզոմերազները) կազմում են արտադրված բոլոր ֆերմենտների 30% -ը:  Օսլայի հիդրոլիզատներն օգտագործվում են օսլայից գլյուկոզի արտադրության մեջ, որը կարևոր դեր է խաղում սննդի, դեղագործության և քիմիական արդյունաբերության մեջ: Ներկայումս արտադրության պայմաններում ջերմակայուն ֆերմենտների պահանջարկը մեծանում է:   Արդյունաբերական նշանակության բիոկատալիզատոր ընտրելիս դրա բավարար քանակությամբ արտադրման հնարավորությունը նախապայման է:  Թերմոսոմների օգտագործումը սահմանափակվում է մի շարք դժվարություններով, կապված ջերմոֆիլային բջիջների դժվար աճի հետ, դրանցում այդ գեների արտահայտման ցածր մակարդակի հետ [1]: Սույն աշխատանքի նպատակն է ուսումնասիրել ջերմաստիճանի H pH- ի (ջերմաստիճանի H pH օպտիմիզացում, ջերմակայունություն, pH կայունություն) ազդեցությունը ջերմաֆիլային anoxybacillus flavithermus K1 շտամի ամիլազ ֆերմենտի գործունեության վրա, որը մեկուսացված է ԱԱՀ-ի Քարվաճառ երկրաջերմային աղբյուրից: Նյութ և մեթոդ: Ուսումնասիրության նյութը Քարվաճառի ԱԱՀ-ի երկրաջերմային աղբյուրից մեկուսացված Anoxybacillusflavitermus K1 շտամն էր:   Որպեսզի ամիլազի ակտիվությունը որոշելու համար A.flavitermus K1 շտամի աճի կորը ձեռք բերվի, այն աճեցվել է հետևյալ սննդարար միջավայրում (%) ՝ օսլա 1, NaCl0,5, MgSO4 0,05, KNO3 0,5, pH-7․0: A. flavithermus K1 շտամի ամիլազային ակտիվությունը քանակականացվել է էդինիտրոսալիցիլաթթվի միջոցով ՝ մշակույթներն աճեցնելով օսլա պարունակող միջավայրում [3]:  50 մլ ստերիլ հեղուկ միջավայր վարակվել է 1 մլ մշակութային հեղուկով `24 ժամվա ընթացքում, 55 ° C ջերմաստիճանում 160 պտույտով, ինկուբացիայի միջոցով:   Մշակույթի հեղուկը ինկուբացիայի ավարտից հետո 20 րոպե ցենտրիֆուգացվեց 5000 պտտ / րոպե 4 ° C ջերմաստիճանում:  Ստացված քաղվածքը ծառայեց որպես ամիլազի աղբյուր: Արձագանքի խառնուրդին ավելացվել է սպիտակուցի խտանյութ `ֆերմենտային սպիտակուցի գործունեության համար օպտիմալ ջերմաստիճանը որոշելու համար: շաքարերի քանակը վերը նշված մեթոդով:   Ֆերմենտային սպիտակուցի ջերմային դիմադրությունը և pH- ը որոշելու համար ՝ ավելցուկը պահվում է 15 րոպե համապատասխանաբար 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110 և 120 ° C և pH 2-ից 12-ը: Որպես ֆերմենտի գործունեության միավոր ընտրվել է ֆերմենտի քանակը, որն արտադրում է 1 μmol իջեցված շաքար `1 մլ-ի համար մեկ րոպեի ընթացքում: Արդյունքներ և քննարկում: A. flavitermus K1 շտամը բնութագրվում է ջերմամարմիններին բնորոշ արագ աճով:  Երբ թափահարում են ցնցման պայմաններում, 7 ժամ հետո այն հասնում է աճի փուլին (Նկար 1):  Շտամն օպտիմալ աճում է 55 ° C և pH-7,0 ջերմաստիճանում:  Բջջի առաջացման ժամանակը 20 րոպե էր, արագության հաստատունը ՝ 3: Ինչպես երեւում է Նկար 1-ում ցույց տրված կորի միջից, համեմատաբար երկար տոհմը բնորոշ է A. Flavitermus K1 շտամի աճի վաղ փուլին:  Դա պայմանավորված է օսլայի ձուլման նախապատրաստմամբ: Նկար 2-ի գծապատկերը ցույց է տալիս մշակույթ-հեղուկ ամիլազի ակտիվությունը տարբեր ջերմաստիճաններում:   Ինչպես երեւում է նկարից, ամիլազի առավելագույն ակտիվությունը գրանցվել է 60 ° C ինկուբացիայի ժամանակ:  Որոշվել է նանամիլազի սպիտակուցի ջերմային դիմադրությունը 50120 ° C ջերմաստիճանի սահմաններում (Նկար 3): Նկար 3 A. flavithermus K1 շտամի մշակումը Նկար 2. A.flavithermus K1 շտամի ամիլազի ակտիվությունը տարբեր ջերմաստիճաններում: Նկար 3. A.flavitermus K1 շտամային հեղուկի ջերմային դիմադրությունը: Ապացուցված է, որ ամիլազի սպիտակուցի ակտիվությունը 5070 ° C է, ինչը համապատասխանում է ֆերմենտի առավելագույն ակտիվության ջերմաստիճանին: 80-100 ° C ջերմաստիճանի դեպքում սպիտակուցը կորցնում է իր գործունեության 80% -ը, իսկ բարձր ջերմաստիճաններում սովորաբար գրանցվում է ակտիվացնող: Նկար 4. A. flavitermus K1 stamyamylase- ի ակտիվությունը տարբեր pH պայմաններում, 60 ° C: Նկար 5. A. flavithermus K1 stamiamlase սպիտակուցի pH- ինդուկցիայի կայունությունը: Նկար 4-ը ցույց է տալիս ֆերմենտային սպիտակուցի ակտիվության կախվածությունը pH- ից:   Ըստ ամենայնի, առավելագույն ակտիվությունը գրանցվել է pH 8-ում:   Ֆերմենտային սպիտակուցի pH- ի դիմադրությունը որոշվել է 2-12-ի pH տիրույթում (Նկար 5):  Ամիլազի սպիտակուցը 15 րոպե պահպանեց իր ակտիվությունը `pH 7․8 ջերմաստիճանում, իսկ pH 3- և 9-11-ում` կորցնում է իր գործունեության 60-80% -ը: Աղյուսակ 1 Կենսատեխնոլոգիայում օգտագործված ամիլազների համեմատական ​​բնութագրերը Գործողություն: օպտիմալ ամիլազ Գործունեության օպտիմալ ջերմաստիճան Այս աշխատության մեջ հղումներ Ինչպես երեւում է աղյուսակի տվյալներից, հայտնի ջերմաֆիլակտիլիաների ակտիվ ամիլազային ակտիվության pH- ի և ջերմաստիճանի միջակայքերը տատանվում են համապատասխանաբար 5-8-ից 70-100 ° C:  Հնդկաստանում երկրաջերմային աղբյուրներից մեկուսացված Bacillusamyloliquefaciens ջերմաֆիլ մանրէը արտադրում է ամիլազ, որի ակտիվությունը չեզոքացվում է pH- ի և 70 ° C օպտիմիզացված ջերմաստիճանի միջոցով:   A. flavitermus K1- ամիլազը օպտիմալորեն ակտիվ է `համեմատած այս արտադրողական շտամի ամիլազի հետ` pH 8 հիմնական պայմաններում:  Geophilus thermoleovorans- ից ջերմաֆիլացված մեկիլազը բնութագրվում է առավելագույն հայտնի միջուկի pH- ով (pH 8) և բարձր ջերմաստիճանի օպտիմիզացմամբ (100 ° C):  Չնայած A. flavithermusK1 ամիլազը իր pH գործունեության օպտիմալացմամբ չի զիջում վերջինիս, բայց բնութագրվում է ցածր ջերմաստիճանային ակտիվությամբ: ԳՐԱԿԱՆՈՒԹՅՈՒՆ Պետրոսյան Լուսինե ANOXYBACILLUS FLAVITHERMUS K1 AMYLASE ԳՈՐCTՈՒՆԵՈՒԹՅԱՆ ԲICՇԿՈՒԹՅՈՒՆ ԵՎ PH ԿԱPՄԱԿԵՐՊՈՒԹՅՈՒՆ ԵՎ ՍՊԻՏԱԿ ԴԻՄԱԴՐՈՒԹՅՈՒՆ, ԳՆԱՈՒԹՅՈՒՆ ։

Anoxybacillus    flavithermus    K1  շտամը  օսլա  պարունակող  սննդամիջավայրում  օպտիմալ (55° C, pH 7), պարբերական աճեցման պայմաններում ստացիոնար փուլին  հասնում է կուլտիվացման 7-րդ ժամում, բջիջների գեներացման ժամանակը կազմում  է  20  րոպե,  իսկ  արագության  հաստատունը՝  3։
   Ամիլազային  առավելագույն  ակտիվությունը դրսևորվել է 60° C ջերմաստիճանում և pH 8 պայմաններում։
  Ցույց է տրվել,  որ ամիլազային սպիտակուցը 80-100° C  ջերմաստիճանային միջակայքում կորցնում  է իր ակտիվության 80 %-ը։
  Ամիլազային սպիտակուցը պահպանում է ակտիվությունը  pH 3-11 պայմաններում, ընդ որում, pH 3 և 4 արժեքներում կորցնելով ակտիվության  80 %-ը։
