ԳԻՆՈՒ ԱՐՏԱԴՐԱԿԱՆ ԹԱՓԻ ԿԵՆՍԱԲԱՆԱԿԱՆ ԳՈՐCTՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆԸ Բուսական ծագման կենսաբանորեն ակտիվ միացությունների, հատկապես երկրորդական փոխանակման արտադրանքի ներկայիս մեծ պահանջարկը կապված է այդ միացությունների լայն տարածման հետ մարդու գործունեության տարբեր ոլորտներում:  Առանձնահատուկ հետաքրքրություն է ներկայացնում բույսերի թափոնների հայտնաբերումը, որոնք ունեն բարձր հակաօքսիդիչ ակտիվություն `դեղագործության, սննդի և կոսմետիկայի արդյունաբերության մեջ դրանց մեծ նշանակության պատճառով: Մարդու մարմնում ազատ ռադիկալները ձեւավորվում են տարբեր էնդոգեն համակարգերով `ազդելով տարիքի հետ կապված բազմաթիվ պաթոլոգիական պայմանների վրա:   Սինթետիկ հակաօքսիդիչները կարող են վտանգավոր լինել մարդու առողջության համար, ուստի բուսական հիմքով ոչ թունավոր հակաօքսիդանտների որոնումը մնում է արդիական:   Բանջարեղենի թափոններից հատուկ ուշադրություն է դարձվում խաղողագործական թափոններին: Խաղողագործությունը գյուղատնտեսության հիմնական ճյուղերից մեկն է ամբողջ աշխարհում:  Խաղողի բերքը տարեկան 60 միլիոն տոննա է, որից միայն 80% -ը օգտագործվում է գինեգործության համար, իսկ մնացած 20% -ը թափոն է գինու արտադրության համար: Գինու արտադրության թափոնները հարուստ են ալկոհոլով և գինաթթվով (երկօքսիաթթու թթու):   Գինու արտադրության թափոններն են խաղողի որթատունկը, խաղողի քաղվածքը, խմորված սոուսը, ներառյալ գինու լիցքավորումից ստացված մնացորդները, գինու քարերը, քաղկեդոնո-սուլֆիդացված մնացորդը, ինչպես նաև խաղողի տերերը, կադրերը [1] Խաղողի ամենահզոր կենսաքիմիական միացությունները պոլիֆենոլներն են, որոնք ունեն բարձր կենսաքիմիական ակտիվություն և օգտակար են մարդու առողջության համար:   Ֆենոլային միացությունները հիմնականում պարունակում են երկրորդական մետաբոլիտներ ՝ անթոցիաններ, ֆլավոնոիդներ, ստիլբեն և ֆենոլաթթուներ:  Անտոցիանները գունանյութեր են, որոնք հիմնականում հայտնաբերված են խաղողի պտղի թաղանթում:  Ֆլավոնոիդները տարածված են խաղողի մեջ, կուտակվում են սերմերի մեջ և հիմնականում պարունակում են (+) կատեխիններ և (-) էպիկատեխիններ:     Այս կենսաբանորեն ակտիվ նյութերի ներուժը շատ մեծ է: Նրանք ունեն հակաօքսիդիչ գործունեություն և կանխում են մի շարք հիվանդությունների առաջացումը կամ զարգացումը [3]: Այս աշխատանքի նպատակն էր ուսումնասիրել գինու արտադրության թափոնների (կեղև (պտուղ), տարեկանի, ճյուղի քաղվածքներ) կենսաբանական ակտիվությունը: Հետազոտության և մեթոդների օբյեկտ (հետազոտության նպատակը սորգոյի արտադրության վատնումն է):  Գինու արտադրության թափոնների ՝ կեղեւի, լորդի, ճյուղի քաղվածքների ստացում: Քննված գինու արտադրությունից ստացված թափոնները տարբերվում և չորանում են օդի չորացման պայմաններում:   Չոր նմուշներից յուրաքանչյուրում 300 մգ մանրացված է ապակե տապակի մեջ, մինչ փոշոտ զանգված ստացվի:  Որպես վճարունակ օգտագործվել է մեթիլ սպիրտ (70%):  Լուծիչը ավելացվել է գինու արտադրության թափոնների փոշիացված զանգվածին, համասեռացվել և տեղափոխվել սառնարան 24 ժամ 5-6 C0 ջերմաստիճանում [6]:   Հետո այն արդյունահանվեց 3-4 անգամ, ցենտրիֆուգացվեց 5000 ppm- ով, համակցված քաղվածքը չորացրեցին սենյակային ջերմաստիճանում:   Ստացված չոր քաղվածքները կշռվել և տեղափոխվել են հերմետիկորեն փակ տարաներ, պահվել սառնարանում 5-6 ° C ջերմաստիճանում և օգտագործվել ակտիվ բաղադրիչները որոշելու համար: Ազատ ռադիկալների մեթոդով հակաօքսիդիչ գործունեության որոշում:   Քաղվածքի հակաօքսիդիչ ակտիվությունը գնահատվել է 1․1 diphenyl-2-picrylhydrazyl- ի միջոցով `օգտագործելով DPFH ազատ ռադիկալների մեթոդը [5]: Փորձարարական տարբերակները պարունակում էին 500-ական նմուշ, համապատասխանաբար, 1000, 500, 250 և 125 մկգ / մլ, 375 մկգ էթանոլի և 125 մկտ DPFH 1000 մկգ / մլ կոնցենտրացիաների քաղվածք (պատրաստված 96% ալկոհոլի մեջ):   Թեստային տարբերակը պարունակում էր 750 μl էթանոլ և 125 μl DPF (բացասական թեստ):  Կաթեչինն օգտագործվել է որպես դրական թեստ:   Լուծույթները ինկուբացվել են 45 րոպե սենյակային ջերմաստիճանում:  Լուծույթների սեղմակների սպեկտրը չափվել է սպեկտրաչափի միջոցով (GENESYS 10S UV-Vis, ԱՄՆ) ՝ 517 նմ:  Ռեակցիայի ընթացքում DPF- ի մանուշակագույն գույնը աստիճանաբար փոխարինվում է դեղինով:  Հակառադիկալ ակտիվությունը հաշվարկվում է հետևյալ բանաձևով, որտեղ Ac- ը փորձարկողի օպտիկական խտության արժեքն է (առանց փորձարկման լուծույթի DPFF- ի օպտիկական խտության արժեքը) և, քանի որ փորձարարական տարբերակների օպտիկական խտության արժեքը: Արդյունքները ներկայացված են IC50- ի արժեքով, որը փորձարկման լուծույթի կոնցենտրացիան է (μg / ml), որի օպտիկական խտությունը համապատասխանում է 517 նմ-ով DFPH լուծույթի օպտիկական խտության 50% -ին:   Այսինքն ՝ սա փորձարկման նյութի կոնցենտրացիան է, որը չեզոքացնում է լուծույթի մեջ առկա ազատ ռադիկալների 50% -ը: Մետաղական գործունեության որոշում:  Մեթոդը հիմնված է ֆերոզինի և Fe2 + իոնների և) -5,6-բիս (4-ֆենիլ-սուլֆոնաթթու) -1,2,4-տրիազինների վրա) կարող է քանակականացվել Fe2 + - ով `կարմրավուն բարդույթ ստեղծելու համար: Այս ռեակցիայի ընթացքը սահմանափակվում է այլ թուլացնող գործակալների առկայությամբ, որոնք կարմրավուն գույն ունեն (ֆերոզին-Fe2 + բարդ կազմավորում):  Գույնի իջեցումը գնահատում է Ferrosine- ի հետ քաղվածքի մրցունակությունը Fe2 + իոնների համար:  Բույսերի հակաօքսիդիչները կազմում են բարդ միացություններ մետաղական իոններով (հյուծող ակտիվություն) ՝ զսպելով էլեկտրոնների տեղափոխումը:  Այսպիսով, օքսիդացման ռեակցիան դադարում է, և ազատ ռադիկալները չեն հայտնվում: Փորձարկման նմուշը պարունակում է 100 μl քաղվածք (10 մգ 1 մլ DMSO- ի համար): (լուծված է դիմեթիլսուլֆօքսիդի մեջ), 50 մկլ 2 մլ FeCl2 և 200 մկլ 5 մլ ֆերոզին: Թողեք ինկուբացիայի համար 10 րոպե սենյակային ջերմաստիճանում:  Դրական թեստում քաղվածքի փոխարեն օգտագործվել է 100 μl EDTC (էթիլենդիամինետետերացախաթթու), իսկ բացասական թեստում ՝ 100 μl DMSO:   Նմուշների օպտիկական կլանումը չափվել է 562 նմ ալիքի երկարությամբ: Ֆլավոնոիդների ընդհանուր պարունակության որոշում սպեկտրոսկոպիայի միջոցով:   Օգտագործելով այս մեթոդը, կարելի է որոշել բույսերի նմուշներում պարունակվող ֆլավոնոիդների ընդհանուր քանակը:   Մեթոդն այն է, որ AlCl3- ը փոխազդում է ֆլավոնոիդների հետ `կազմելով դեղին բարդույթ: Չափման կորի կառուցման համար պատրաստվել է 1% (1 մգ / մլ) էթանոլի էթանի ստանդարտ լուծույթ, որից կատարվել են համապատասխան կոնցենտրացիաներով նոսրացումներ:  Փորձարարական տարբերակը պարունակում էր 5 մլ էթանոլի քաղվածք 0․4 մգ / մլ կոնցենտրացիայով և 5 մլ AlCl3 էթանոլի 2% լուծույթով:  Փորձարկման տարբերակը պարունակում էր 5 մլ էթանոլի քաղվածք և 5 մլ էթանոլ ՝ առանց AlCl3- ի:  Թեստային լուծույթը պահեք սենյակային ջերմաստիճանում 10 րոպե `ինկուբացիոն եղանակով:   Լուծույթի կլանումը այնուհետև չափվեց սպեկտրոսկոպիայի միջոցով 415 նմ: Folin-Cheokaltue ռեակտիվի օգտագործմամբ ընդհանուր ֆենոլների որոշում:   Folin-Cheokalteu ռեակտիվը ֆոսֆովոլոֆրամատի ոս ֆոսֆոմոլիբդատի ՝ բաց կանաչ հեղուկի խառնուրդ է:  Ֆենոլները ունակ են հիմնական միջավայրում վոլֆրամը և մոլիբդատը օքսիդացնելու (WO2, MoO2) օքսիդների:  Վերջիններս ունեն կապույտ գույն:   Որքան ավելի հագեցած է կապույտ գույնը, այնքան շատ ֆենոլներ են քաղվածքում:  Ֆենոլների ընդհանուր քանակը որոշելու համար քաղվածքների 5 մգ-ը լուծարվել է 5 մլ թորած ջրի մեջ և պահվել և 5-8 րոպե սենյակային ջերմաստիճանում:  Ստացված փորձանմուշ ստանալու համար ստացված քաղվածքի 0,5 մլ-ին ավելացվել է 0,1 մլ Folin-Cheocalteureagent և 1 մլ 7% Na2CO3 լուծույթ:  Ստացված լուծույթը թորած ջրով պատրաստվել է մինչև 2,5 մլ:   Թեստային լուծույթը պահեք սենյակային ջերմաստիճանում `ինկուբացիայի համար երկու ժամ:   Ֆենոլների ընդհանուր քանակը որոշվել է էգալաթթվի (ԳԳ) համարժեքով:  Կառուցվել է նոսրացման հետ համեմատության կորը: Հակաբակտերիալ ակտիվության որոշում ագարի դիֆուզիոն մեթոդով:   Հակաբակտերիալ ակտիվության որոշումը կատարվել է ագարի ցրման մեթոդով [4]:  Փորձարկվել են չոր քաղվածքների տարբեր կոնցենտրացիաներ `լուծույթների նվազագույն ազդեցության կոնցենտրացիան որոշելու համար:   Որպես վճարունակ օգտագործվել է դիմեթիլսուլֆօքսիդ:   Միկրոօրգանիզմներով վարակված (100 μl գիշերային կուլտուրա) վարագույրների մեջ հատվել է 20 մմ ագար-ստերիլ խոռոչ ՝ 8 մմ տրամագծով մետաղական ձողով, որոնցից յուրաքանչյուրին ավելացվել է 100 մկգ փորձանմուշով և 22-78 ժամվա ընթացքում ինկուբացվել (ընտրություն ջերմաստիճանը կախված է թեստ-միկրոօրգանիզմի բնույթից):  Թեստի արդյունքները գնահատվել են հորերի շուրջ միկրոօրգանիզմների աճի բացակայությունը չափելու միջոցով:   Ampicillin- ը (25 μg / մլ) օգտագործվել է որպես դրական հսկողություն, իսկ DMSO- ն `որպես բացասական հսկողություն: Հակամանրէային ակտիվության թեստի արդյունքների գնահատման համար օգտագործվել են գրամ-դրական (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis) և գրամ-բացասական (Escherichia coli M17, E. coli dhpα-pUC18) մանրէների շտամներ [6]: Հակաբակտերիալ գործունեության արժեքը ներկայացված է քաղվածքների նվազագույն կենտրոնացված կոնցենտրացիայով (NHS): Հետազոտության արդյունքները և դրանց քննարկումը:  Խաղողի սեփականատիրոջ կադրերի քաղվածքներն ունեցել են ցածր արգելակող արժեքներ (IC50 = 19,8 մկգ / մլ և 28,1 մկգ / մլ) և համապատասխանաբար հակառադիկալ ազդեցություն (Նկար 1, 2): k: ի: դ: ա ռ: ա k: ա Հ: Lord's Extract n: ի: ա յ: Ձագ լ: ա k: ի: դ: ա ռ: ա k: ա Հ: Գծապատկեր 1. Խաղողի սեփականատիրոջ հակառադիկալ գործունեություն, ճյուղ: քաղվածք Գծապատկեր 2. Խաղողի սեփականատիրոջ, կեղևի և ցողունի քաղվածքների հակառադիկալ գործունեություն. 1. Կատեխին (+ տամախաղ), 2. outիլ, 3. Թեյ, 4. Կեղև, 5. Վերահսկիչ (-) Թեյի քաղվածքում ֆենոլի ընդհանուր պարունակությունը 55,4 55 1,1 համապատասխանաբար, տարեկանի կեղեւի քաղվածքներում 76 76,52 ± 1,2 և 78 μ 1,6 μg GHT / ml (Նկար 3): Ֆլավոնոիդների ընդհանուր պարունակությունը տերևի, զուգի կեղևի քաղվածքներում համապատասխանաբար 166, 77․4 և 26․3 μg GHT / ml էր: ից (Նկար 3): Ֆենոլի պարունակություն Ֆլավոնոիդ պարունակություն Տե՛ր: Sprիլեր: Կեղև: Նկար 4. Խաղողի, թեփի, կեղեւի քաղվածքների մեջ ֆենոլային ֆլավոնոիդների ընդհանուր պարունակությունը: Մեր ուսումնասիրության համաձայն, ուսումնասիրված քաղվածքները չեն ազդում երկաթի իոնների պառակտման հնարավորության վրա: Փորձարկված բոլոր գրամ-դրական և գրամ-բացասական բակտերիաներից միայն Escherichia coli- ն ցույց տվեց ուսումնասիրվող քաղվածքների նկատմամբ որոշակի զգայունություն (Նկար 4):  Այս դեպքում ճնշող նվազագույն կոնցենտրացիան 250 μg / մլ էր: Նկար 4. Գոտիներ, որոնք առաջացել են E. coli M17 շտամի աճի բացակայության պայմաններում գինու թափոններից քաղվածքների արդյունահանմամբ: Այսպիսով, գինու արտադրության թափոնները օժտված են կենսաբանական ակտիվությամբ, ցուցադրում են հակաօքսիդիչ ակտիվություն:   Ստացվել են նոր փորձարարական տվյալներ, որոնք կարող են նպաստել գինու արտադրության թափոնների հետագա ուսումնասիրությանը, որպես երկրորդական նյութափոխանակության արտադրանքի այլընտրանքային աղբյուրի:   Իր արժեքավոր հատկությունների շնորհիվ գինու արտադրության թափոնները լավ օբյեկտ են կենսատեխնոլոգիական հետազոտությունների համար և կարող են լայնորեն օգտագործվել բժշկության, կոսմետիկայի և սննդի արդյունաբերության մեջ: Կոլումբիական ժողովրդական բժշկության մեջ օգտագործվող տաս բուժիչ բույսերի ԳՐԱԿԱՆՈՒԹՅՈՒՆ:  Հնարավոր այլընտրանք Գայանե Խալաթյանում, Սաիրայան Նաիրա ԳԻՆՈՒ ԱՐՏԱԴՐԱԿԱՆ ԹԱՓՈՆԻ ԿԵՆՍԱԲԱՆԱԿԱՆ ԳՈՐCTՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆԸ Հիմնաբառեր. Գինու արտադրության թափոններ, ֆենոլներ, ֆլավոնոիդներ, IC50: ։

Սինթետիկ  հակաօքսիդանտները  մարդու  առողջության  համար  կարող  են  վտանգավոր լինել, հետևաբար, բուսական ծագման ոչ թունավոր հակաօքսիդանտների  որոնման  խնդիրը  շարունակում  է  արդիական  մնալ։
   Այս  աշխատանքի  նպատակն  է  եղել  ուսումնասիրել  գինու  արտադրության  թափոնի  (պտղի,  տերևի,  ընձյուղի  լուծամզվածքների)  կենսաբանական  ակտիվությունը։
   Ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ գինու արտադրության թափոնn ունի հակաօքսիդանտային մեծ  ներուժ և կարող է օգտագործվել սննդում, բճշկությունում և կոսմետիկայում։
