ԲԱՐՁՐ Էլեկտրոնային ճառագայթների հիվանդության դեղաքանակի ուժի ազդեցությունը մարդու քրոնիկական միելոիդային լիկիմիայում  Լազերային ճառագայթով էլեկտրոնային ճառագայթը բնութագրվում է վայրկյանում անցողիկ իկ ծայրահեղ կարճ իմպուլսներով, ինչը ստեղծում է ռադիոբիոլոգիական արդյունավետությունը բարձրացնելու եզակի հնարավորություն [1]: Տարբեր հեղինակների կողմից իրականացվել են «invitro» և «invivo» արագացուցիչների կենսաբանական ազդեցությունների ուսումնասիրություններ: Լազերային արագացված պրոտոնների և էլեկտրոնների ազդեցությունը ԴՆԹ-ի վնասման և բջիջների կենսունակության վրա ուսումնասիրվել է մարդու նորմալ in vitro ուռուցքային բջիջներում:   Ակնկալվում է, որ կոպիտ հատիկներով արտանետվող ճառագայթումը ապագայում կարող է ունենալ կլինիկական կիրառություն: Կենսաբանական օբյեկտների վրա ճառագայթման ազդեցության կարեւոր ասպեկտներից մեկը ճառագայթման դոզայի ազդեցությունն է:   Variousածր, բարձր էներգիայի դոզաներում մարդու իոններով ճառագայթահարված ճառագայթման մեջ տարբեր գեների արտահայտման մեջ փոփոխություններ են նկատվել:   Մասնավորապես, ճառագայթման բարձր դոզաներում փոփոխվել է գեների արտահայտությունը, որոնք պատասխանատու են B- բջիջներով միջնորդավորված անձեռնմխելիության, բջիջների բնական մարդասպանի գործունեության և բջջային-բջջային ազդանշանի առաջացման համար:   Ինչպես և սպասվում էր, ճառագայթահարման բոլոր դոզաներում p53 գենի արտահայտման աճ կար:   Չափից մեծ դոզան առաջացնում է մելանոմայի բջիջների կենսունակության ավելի ցայտուն անկում, քան ցածր դոզան, ընդ որում `դա հանգեցնում է բջջային ապոպտոզի` մեծացնելով ԴՆԹ-ի վնասման մակարդակը [4]:   Այնուամենայնիվ, ըստ այլ հեղինակների, ճառագայթման տարբեր չափաբաժինները էական ազդեցություն չեն թողնում բջջային կենսունակության կամ ԴՆԹ-ի վնասի վերականգնման վրա մարդու գլիոբլաստոմայում U87-MG և T98G [5], պարանոցի քաղցկեղ SiHa, թոքային քաղցկեղ H460, քաղցր կրծողների թոքերի քաղցկեղ [6]: , Հզորության ազդեցությունը ճառագայթային բջիջների կենսունակության վրա ԴՆԹ-ի վնասների վերականգնման վրա հայտնաբերվել է ռենտգեն ճառագայթահարված գլիոմա բջիջներում: Radiationառագայթահարման դոզայի և դոզայի էներգիայի ազդեցության բացակայությունը, ինչպես նաև հետազոտության անոմալ քաղցկեղի բջիջների զգայունությունը խիստ անհրաժեշտ են ճառագայթային կենսաբանության մեջ բարձր արագությամբ էլեկտրոնային ճառագայթների օգտագործմանը նպաստելու համար, մասնավորապես քաղցկեղի բուժման ոլորտում: Այս ուսումնասիրության նպատակն էր հետաքննել դոզայի հզորության ազդեցությունը K-562 (մարդու քրոնիկ միելոիդային լեյկոզ) բջիջների վրա, ճառագայթահարված AREAL գծային արագացուցիչի գերարագ էլեկտրոնային ճառագայթով ՝ օգտագործելով ԴՆԹ գիսաստղի մեթոդը: Ուսումնասիրության և մեթոդների օբյեկտ:   Ուսումնասիրության օբյեկտը K-562 լեյկոզն էր (բջիջներ):   ԴՆԹ-ի վնասը գնահատվել է ուլտրաէլեկտրոնային ճառագայթով ճառագայթահարված բջիջներում և ԴՆԹ գիսաստղի վերականգնմամբ: (Մարդու քրոնիկ միելոիդ) Բջջային կուլտուրա:   K-562 բջիջները մշակվել են RPMI-1640 միջավայրում, որին ավելացվել է 10% սաղմնային շիճուկ, 2 մմ L-glutamine, 100 IU / ml պենիցիլին, 100 μg / ml streptomycin: Բջջային մշակույթների ճառագայթում:   Բջիջները ճառագայթում էին ծայրահեղ կարճ էլեկտրոնային ճառագայթներով, որոնք լազերով ծածկված էին «ԱՐԵԱԼ» գծային արագացուցիչով:   Irառագայթումից առաջ 2 մլ բջջային կախոցը տեղադրվել է 0,5 × 105 բջիջ / մլ էպենդորֆների մեջ հորիզոնականորեն փոխանցված փնջից 1 սմ հեռավորության վրա:  Բջիջները ճառագայթահարվել են 0 և 8 գ չափաբաժիններով ՝ 3,6 և 36 գ / րոպե դեղաչափով: ԴՆԹ գիսաստղերի մեթոդը:  ԴՆԹ-ի գիսաստղի հիմնական մեթոդը [8] կատարվել է ՝ ԴՆԹ-ի վնասը գնահատելու վերականգնումը 8 գնահատելու համար, ճառագայթումից անմիջապես հետո 24 ժամ անց:   ԴՆԹ-ի առաջնային վնասի գնահատման համար ընտրվել է 0 ժամ, իսկ ԴՆԹ-ի վնասի վերագնահատման համար `24 ժամ: Յուղազերծված ապակին պետք է ծածկված լինի 1% ագարոզով և պահվի 37 ° C ջերմաստիճանում 12-24 ժամ տևողությամբ `կարծրացնելու համար:   20 μl K-562 բջջային կախոցը խառնվել է 0,5% լուծույթի 80 μl ցածր հալման կետի (LMA) հետ:   100 մկգ ագարոզային բջիջների խառնուրդը կաթել են կրող ապակու վրա:   Դրանից հետո դրանք դրվեցին + 4 ° C ջերմաստիճանում 10 րոպե ՝ երկրորդ շերտը կարծրացնելու համար:  Տեղահանված են լիզին-բուֆերային պայմաններում (2,5 մ NaCl, 100 մմ EDTA, 10 մմ Tris, pH = 10,0 և Triton X ՝ սպիտակուցային և թաղանթային ծածկույթները քայքայելու համար:   Նախապատրաստական ​​աշխատանքները այնուհետև տեղադրվեցին հիմնական բուֆերով (300 մմ NaOH և 1 մմ EDTA) լցված էլեկտրոֆորեզի սարքում `30 րոպե 1 ժամ 30 րոպեով` հայտնաբերելու համար հիմնական անշարժ կայքերի ԴՆԹ-ի փաթաթումը:   Էլեկտրոֆորեզը կատարվել է 25 Վ և 300 մԱ լարման դեպքում 20 րոպե:   Էլեկտրոֆորեզից հետո պատրաստուկները 15 րոպե մշակվել են չեզոք բուֆերով (0.4 M Tris, pH = 7.5) և ներկվել 20 μg / ml էթիդիում բրոմիդի լուծույթով: Յուրաքանչյուր տարբերակում վերլուծվել է 180 բջիջ:   Ձիթապտղի պոչի պահի (OTM) պարամետրն օգտագործվել է ԴՆԹ-ի վնասը որոշելու համար, որը հավասար է գիսաստղի ԴՆԹ-ի պարունակության տոկոսի արտադրանքին `պոչի երկարության արտադրանքին:  Գիսաստղի պատկերները կլուծվեն CometIV ծրագրակազմի միջոցով:   Ստացված տվյալները վիճակագրվել են ՝ օգտագործելով «Statgraphics 2.1» ծրագիրը ՝ օգտագործելով «Mann-Withney (U)» ոչ պարամետրային թեստը: Հետազոտության արդյունքները.   AREAL արագացուցիչի ԴՆԹ-ի վնասը 8 գ, 3,6 և 36 գ / րոպե էլեկտրոնային ճառագայթով ԴՆԹ-ն վնասում է դրանց վերականգնումը K-562 բջիջներում ներկայացված է աղյուսակ 1-ում: Գիսաստղերի պատկերները ներկայացված են Նկար 1-ում և 2-ում:   ԴՆԹ գիսաստղի մեթոդի ընտրությունը պայմանավորված է ռադիոբիոլոգիայում դրա լայն կիրառմամբ: Դեղաքանակ: ա, GrDose հզորություն, Gr / min 0h24h0h24h Աղյուսակ 1. Բարձր (36 գր / րոպե) և ցածր դոզան (3,6 գր / րոպե) բարձր դոզան էլեկտրաճառագայթային ճառագայթահարված K-562 բջիջներ ԴՆԹ-ի վնասման արագությամբ (OTM, միջին սխալ ստանդարտ սխալ) Եվառագայթահարումից 0 և 24 ժամ անց * p <0,05 էական տարբերություն `համեմատած համապատասխան կարգավորիչի հետ: #p <0,05 Էական տարբերություն ՝ 0 ժամ ճառագայթումից հետո տվյալների համեմատ: Նկար 1. Գիսաստղի պատկերները չճառագայթահարված K-562 բջիջներում: ԴՆԹ-ի վնասի ավելացում ինչպես ցածր (3.6 Գ / րոպե), այնպես էլ բարձր (36 Գ / րոպե) դոզաներում:  -Ածր էներգիայի դոզաները հանգեցնում են ԴՆԹ-ի վնասման նույն մակարդակին:   24 ժամ ցածր դոզան ճառագայթումից հետո ԴՆԹ-ի վնասվածքների քանակը զգալիորեն կրճատվել է `ճառագայթահարումից անմիջապես հետո դիտարկված մակարդակի համեմատ, գրեթե դա չի տարբերվում պատասխան թեստից:   Այսպիսով, ԴՆԹ-ի վնասվածքի մեծ մասը կարող է ամբողջությամբ վերականգնվել ճառագայթահարումից հետո:   Irառագայթումից քսանչորս ժամ անց OTM մակարդակը զգալիորեն իջնում ​​է բարձր դոզան ճառագայթահարված բջիջներում, բայց մնում է բարձր ՝ համեմատելով համապատասխան կարգավորիչի հետ: Այսպիսով, բարձր դոզանման ճառագայթման դեպքում ԴՆԹ-ի վնասը մասամբ վերականգնվում է:   Մկների բջիջներում լիմֆոցիտներում ճառագայթահարմամբ ԴՆԹ-ի վնասի վերականգնում ճառագայթահարումից 24 ժամ անց [10], Saccharomyces cerevisiae խմորիչ բջիջներում ՝ ճառագայթումից 4 ժամ անց [11]:  Այնուամենայնիվ, ճառագայթման դոզայի ազդեցությունը ԴՆԹ-ի վերականգնման վրա այս հեղինակները չեն ուսումնասիրել: Չնայած ցածր դոզան բարձր դոզաները հանգեցնում են ԴՆԹ-ի վնասման նույն մակարդակին, ԴՆԹ-ի վերականգնումն ավելի ամբողջական է `ցածր էներգիայի ճառագայթմամբ:  Ստացված տվյալները բացատրելու համար իրականացվել է ԴՆԹ-ի վնասների բաշխման վերլուծություն բջիջների կողմից (աղյուսակ 2), ինչպես նկարագրում է ԴՆԹ-ի կոմպոտ մեթոդը [12]:   Արդյունքների համաձայն, ցածր էներգիայի ճառագայթման դեպքում գերակշռում են 20-30 և 30-40 ՕՏՄ սահմաններում ԴՆԹ-ի վնաս ունեցող բջիջները:  Բարձր ինտենսիվ ճառագայթման դեպքում գերակշռում են 40-50 ՕՏՄ սահմաններում ԴՆԹ-ի վնասման մակարդակ ունեցող բջիջները: Կան նաև ավելի քան 50 OTM բջիջներ: Բջիջների պոպուլյացիայի տարասեռությունը 30-40 Ա է: Այսպիսով, չնայած ճառագայթման տակ ԴՆԹ-ի վնասման միջին մակարդակը նույնն է ՝ 3.6 գ / րոպե և 36 գ / րոպե, ԴՆԹ վնասի բաշխումը զգալիորեն տարբերվում է:   3.6 գ / րոպե ճառագայթում գերակշռում են ԴՆԹ-ի ցածր և միջին մակարդակի վնաս ունեցող բջիջները, իսկ 36 գ / րոպե ճառագայթման դեպքում գերակշռում են ԴՆԹ-ի բարձր մակարդակի վնաս ունեցող բջիջները:   Այսպիսով, բարձր դոզաներով ճառագայթահարված բջիջներում ԴՆԹ-ի վնասման ավելի բարձր մակարդակները հանգեցնում են ԴՆԹ-ի վերականգնման նվազեցմանը: OTM մակարդակ 3.6 Գ / րոպե 36 Գ / րոպե Բջիջների ընդհանուր բջջային համարը% Բջիջների բջիջների ընդհանուր քանակը 50% -ից բարձր Աղյուսակ 2.8 գ Բարձր դոզան ցածր դոզան ճառագայթում ԴՆԹ-ի վնասների բաշխում ուժեղ K-562 բջիջներով բջիջներում (հիմքում ընկած D բջիջներ 180 բջիջ)   AREAL գծային արագացուցիչի կողմից ԴՆԹ վնասի եպ վերականգնման ուսումնասիրությունը `օգտագործելով գերարագ էլեկտրոնային ճառագայթահարված K-562 բջիջներ` օգտագործելով ԴՆԹ գիսաստղի մեթոդը, վկայում է այն մասին, որ համեմատաբար 8 Գ դոզայով ճառագայթահարված բջիջները համեմատվել են ԴՆԹ վնասի վերլուծության հետ:  Բարձր (36 Գ / րոպե) և ցածր (3.6 Գ) ճառագայթային վնասվածքների միջին մակարդակները զգալիորեն տարբերվում են:   Այնուամենայնիվ, ըստ բջիջներում ԴՆԹ-ի վնասների բաշխման, դոզայի ավելացումը մեծացնում է ԴՆԹ-ի վնասման տարբեր մակարդակ ունեցող բջիջների հարաբերակցությունը ավելի վնասված բջիջների վրա `նվազեցնելով նրանց վերականգնման ունակությունը:   Այսպիսով, ըստ ստացված տվյալների, ճառագայթման դոզայի բարձրացումը հանգեցնում է ուռուցքային բջիջների ռեպրեսիայի ճնշմանը ՝ բարձրացնելով ճառագայթման հակաուռուցքային ներուժը: ԳՐԱԿԱՆՈՒԹՅՈՒՆ [1] Գոդուել Յ., Լազերային շարժիչով մասնիկների արագացում դեպի ռադիոբիոլոգիա և բժշկություն, Springer: Nikolyan SonaGERARAGE ELECTRONIC RADIATION DOSAGE Effect Effect in Human Chronical MYELOID LEUKEMIA բջիջներում D, հիմնաբառեր. Գերարագ դ ։

Ուսումնասիրվել  է  դոզայի  հզորության  էֆեկտը՝  գերարագ  էլեկտրոնային  փնջով  ճառագայթված  K-562  (մարդու  քրոնիկ  միելոիդ  լեյկեմիա)  բջիջներում՝  կիրառելով  ԴՆԹ-կոմետների  մեթոդը։
   Ցածր  (36  Գր/ր)  հզորությամբ  ճառագայթմամբ  մակածված  ԴՆԹ-ի  վնասվածքները  դրսևորում  են՝  ըստ  բջիջների  բաշխման  արտահայտված  տարբերություններ։
   Բարձր  հզորությամբ  դոզայով  ճառագայթման  ժամանակ  գերակշռում  են  ԴՆԹ-ի  ավելի  բարձր  վնասվածությամբ  բջիջները,  որով  և  պայմանավորված  է  ԴՆԹ-ի  վերականգնման  ավելի  ցածր  մակարդակը՝ համեմատած ցածր հզորությամբ դոզայով ճառագայթված բջիջների։
