Կովկասը կենսաբազմազանության առումով աշխարհի ամենահարուստ տարածաշրջաններից մեկն է:   Վերջին տարիներին հատուկ ուշադրություն է դարձվում թռչունների և նրանց մակաբույծների հետազոտություններին:   Թռչունները վարակված են վիրուսային, բակտերիալ, մակաբուծական և սնկային հարուցիչներով և կարող են հանդիսանալ դրանց պահոցները [3,4]:  Տասնամյակներ շարունակ վարակիչ և մակաբուծական վայրի բնության մեջ:   Հայտնի է, որ արյան սպորները առաջացնում են կենսաբազմազանության սպառում, ինչը հատկապես վտանգավոր է էնդեմիկ կենդանական աշխարհի համար [1,2]:  213 Plasmodium, Haemoproteus և Leucocytozoon տեսակների մակաբույծները, որոնք մեր ուսումնասիրած թռչունների արյան սպորներն են, փոխանցվում են մի շարք լայն տարածում ունեցող և բավականին տարածված երկոտանի միջատներով ՝ մոծակներ, գիշերային մոծակներ և մոծակներ:   Այս միջատները կոսմոպոլիտ են և հայտնաբերվել են բոլոր մայրցամաքներում, բացի Անտարկտիդայից:  Գրավոր աղբյուրներում անբավարար տեղեկատվություն կա թռչնի արյան մակաբույծների ուսումնասիրությունների վերաբերյալ:   Մեր հետազոտության նպատակն է պարզել թռչնի արյան մակաբույծների բազմազանությունն ու տարածվածությունը կենսաբազմազանությամբ հարուստ Կովկասի տարածաշրջանում:  Նյութեր եւ մեթոդներ.  մեթոդները   2010 թ. Մայիսից օգոստոս ամիսներին արյան նմուշներ են հավաքվել Հայաստանի Հանրապետության (ՀՀ) և Լեռնային Karabakhարաբաղի Հանրապետության (ԼRՀ) մի շարք անտառային տեսակների (206 նմուշ), ինչպես նաև Կրասնոդարի երկրամասի մի շարք անտառային տեղերից: (190 նմուշ) Ռուսաստանի Դաշնություն (Նկար 1):  Գծապատկեր 1. Նմուշառման վայրերը Հայաստանում, Լ NKՀ-ում և Ռուսաստանում:  214 Թռչունների որս իրականացվել է համապատասխան ցանցերի միջոցով:   Որոշվեց յուրաքանչյուր թռչնի տեսակը, ապա երակից վերցվեց արյան նմուշ:   Արյունը պահվում էր սենյակային ջերմաստիճանում 96% էթանոլի լուծույթում:  Բոլոր թռչունները պտտվել են, որպեսզի կանխեն նույն անհատի կրկնակի որսը և ազատ են արձակվել:  Ամբողջական ԴՆԹ-ն հանվել է արյան նմուշից (ինչպես թռչնի, այնպես էլ մակաբույծի առկայության դեպքում):   Haemoproteus spp., Plasmodium spp թռչնի մոտ: և Leucocytozoon spp. Դրա ներկայությունը որոշելու համար օգտագործվել է PCR (պոլիմերազային շղթայական ռեակցիա) մեթոդը:   Պարազիտը պարզելու համար օգտագործվել են միտոքոնդրիալ ցիտոխրոմ B գենը ծածկող նախածաններ, որը վերը նշված մակաբույծների համար առավել լայնորեն օգտագործվում է [8,9]:  PCR- ն իրականացվել է հետևյալ նախաներկերի միջոցով. HAEMNF- ի արձագանքման պայմանները 30 վայրկյան են `95 ° C, 30 վայրկյան` 52 ° C, և 45 վայրկյան `72 ° C 40 ցիկլ:  Նմուշները ինկուբացվել են 95 ° C ջերմաստիճանում ցիկլային ռեակցիաներից առաջ 15 րոպե և 60 ° C ջերմաստիճանում արձագանքից հետո 10 րոպե:   12,5 մկլ ռեակցիայի լուծույթը պարունակում էր 2 մկկմ տարանջատված ԴՆԹ, յուրաքանչյուր այբբենարանից 0.24 uM, 1x GoTaq® Flexi բուֆեր, 0.287 մմ dNTP, 2 մգ MgCl 2, 5.978 մկլ H2 O և 1.2 u Taq ԴՆԹ պոլիմերազ (Promega Corporation) վերջնական կոնցենտրացիաները:  ԴՆԹ-ի առկայությունը որոշելու համար վերջնական նյութը էլեկտրոֆորիզացվել է 2,0% ագարոզա գելի վրա, որի արդյունքը դիտվել է ուլտրամանուշակագույն ճառագայթների տակ:   Դրական նմուշները մաքրվել են ExoSAP-IT PCR մաքրման հավաքածուի միջոցով (USB Corporation) և ուղարկվել Macrogen (Macrogen corporationNetherlands) ՝ նուկլեոտիդների հաջորդականացման համար:   Հաջորդականությունները մշակվել են BioEdit ծրագրի միջոցով [10], իսկ հապլոտիպերը որոշվել են DNAsp 5 ծրագրի միջոցով [11]:   Որպեսզի պարզեն, արդյոք հապլոտիպերը պատկանում են որոշակի 215 մակաբույծների, դրանք համեմատվել են Միջազգային գենային բանկի և MalAvi տվյալների շտեմարանի հաջորդականությունների հետ:  Արդյունքներ  Արդյունքներ  Ուսումնասիրված նմուշներից, որոնք ներկայացնում են թռչունների 34 տեսակ, վարակվածների թիվը կազմել է 249 նմուշ, 29 թռչնատեսակ:  Աղյուսակ 1 PCR հետազոտության արդյունքները Հայաստանում և Ռուսաստանի Կրասնոդարի երկրամասում Հայաստան Նմուշների քանակը Թռչնատեսակներ Կրասնոդարի երկրամաս Ռուսաստանի թռչուն: Վարակված թռչուններ: Վարակված. ված առանց ընդարձակ մարդու: մարդ ընդարձակ և - Թռչուն: Թռչուններ. առանձին-առանձին: առանձին-առանձին: Վարակված վարակված: ված Ընդարձակ ընդարձակ ընդարձակ քանակի քանակի և քանակի քանակի քանակի և համարի այլ տեսակներ 144 76 64.5% (49) 68 69.1% (47) Ընդհանուր 396 206 57.7% (119) 190 70, 0% (133) Նմուշների նմուշներ (ընդհանուր) Վարակված (ընդհանուր ) Համեմատվել են որոշ տեսակների համար Հայաստանում և Կրասնոդարի երկրամասում թռչունների վարակման մակարդակները, ինչպես նաև ընդհանուր վարակման մակարդակները (աղյուսակ 1):  Ուսումնասիրվել են նուկլեոտիդների հաջորդականությունները, որոնք ներկայացնում են 40 առանձին հապլոտիպեր: Նրանցից 26-ը ներկայացնում են Haemoproteus spp., 11-ը ՝ Plasmodium spp: և միայն 3` Leucocitozoon spp. (Աղյուսակ 2):  Հայտնաբերվել են նաև որոշ նոր հապլոտիպեր, որոնք դեռ գրանցված չեն Միջազգային գենային բանկում:  Աղյուսակ 2 Նուկլեոտիդների հաջորդականությունները և թռչնաբուծական մակաբույծների հապլոտիպերի քանակը Նուկլեոտիդների հաջորդականությունը - 147 (40 հիպլոտիպ) New Gene Bank Cosm. Նոր գեն բանկ Eur. Տիեզերք 2 հպ. 16 հպ. Քննարկում և նոր եվրո: 5 հպ. 8 հպ. Gene Bank Cosm. Եվրո 1 հատ: 5 հպ. 1 հատ: եզրակացություն.  եզրակացություն.  Վերջին 0 հեպլը: 2 հպ. Տասնամյակների ընթացքում, երբ մակաբուծային շղթայական ռեակցիաները ներմուծվել են մակաբուծական հետազոտությունների ոլորտում, թռչնագրիպի մալարիայի վրա հիմնված մեթոդները առանձնահատուկ հետաքրքրություն են առաջացրել, և էկոլոգիական և, էվոլյուցիոն առումով, սկսել են լայնորեն ուսումնասիրվել:   Չնայած ժամանակակից մեթոդները հեշտացրել են մակաբույծների ուսումնասիրությունը, դրանք զերծ չեն իրենց թերություններից և հետագա զարգացման և կատարելագործման կարիք ունեն:  217 Հայտնի է, որ PCR մեթոդով աշխատելիս չի կարելի լիովին համոզվել, որ նմուշներում չկան մակաբույծներ, որոնք բացասական արդյունք են ցույց տալիս, այնուամենայնիվ, մեր վերլուծությունները հիմնված են ստացված և մատչելի արդյունքների վրա:  Թռչնաբուծական վարակի տարածվածությունը 62.8% է, ինչը բավականին բարձր է `համեմատած այլ աշխարհագրական տարածքների հետ [15,16]:  Կրասնոդարի երկրամասում ուսումնասիրված թռչունների գրեթե բոլոր տեսակների վարակն ավելի բարձր է, քան Հայաստանում, ինչը, հավանաբար, պայմանավորված է կլիմայական պայմաններով:  Նուկլեոտիդային հաջորդականությունների ուսումնասիրության արդյունքում հայտնաբերվել է թռչունների մոտ մալարիա առաջացնող մակաբույծների 3 սերունդ, որոնցից ամենատարածվածը նուկլեոտիդների հաջորդականությունն է (71.4%), որին հաջորդում է Plasmodium spp: - 31 նուկլեոտիդային հաջորդականություն (21,1%) և Leucocytozoon spp. - 11 նուկլեոտիդային հաջորդականություն (7,5%):   Մեր ուսումնասիրությունների արդյունքում հայտնաբերվել է 14 նոր հապլոտիպ, որոնք մինչ այժմ ոչ մի տեղ չեն գրանցվել, ինչը վկայում է տարածաշրջանում թռչունների արյան սպորների էնդեմիկության բավականին բարձր մակարդակի մասին:   Հայտնաբերվել են նաև 7 ​​տիեզերական հապլոտիպեր, որոնք գրանցվել են նաև այլ մայրցամաքներում:   Հաշվի առնելով, որ մակաբույծները ունեն թռչնատեսակների չափազանց ցածր առանձնահատկություն [14], մենք կարող ենք խոսել գոյություն ունեցող սպառնալիքի մասին, այսինքն ՝ մակաբույծները համաճարակի պոտենցիալ աղբյուր են, ինչը հատկապես վտանգավոր է էնդեմիկ կենդանական աշխարհի համար:  Հետազոտությունն իրականացվել է Գալուստ Գյուլբենկյան հիմնադրամի ֆինանսական աջակցությամբ:  , ։

Մակաբույծների բազմազանությունը եւ տարածվածությունը որոշելու նպատակով գենետիկական ուսումնասիրության են ենթարկվել Հայաստանի, Լեռնային Ղարաբաղի Հանրապետության եւ ՌԴ Կրասնոդարի երկրամասի 12 տարբեր վայրերից հավաքված թռչունների արյան նմուշներ։
  ՈՒսումնասիրվել են նաեւ նուկլեոտիդային 147 հաջորդականություններ, որոնք ներկայացնում են տարբեր հապլոտիպեր։
  Ստացված արդյունքները ցույց են տալիս Կովկասի տարածաշրջանում թռչունների՝ մակաբույծներով վարակվածության եւ մակաբույծների էնդեմիկության բավականին բարձր մակարդակ։
