При сборке проекта пропадает картинка, как исправить?
Сначала добавьте в код функцию:def resource_path(relative):

    if hasattr(sys, '_MEIPASS'):
        return os.path.join(sys._MEIPASS, relative)
    else:
        return os.path.join(os.path.abspath("."), relative)
а потом обращайтесь к ресурсам примерно так:self.setWindowIcon(QtGui.QIcon(resource_path('runcubit_gui.ico')))
self.tray_icon.setIcon(QtGui.QIcon(resource_path('runcubit_gui.ico')))
Это будет работать и при прямом вызове питоновского скрипта, и после PyInstaller'а.
Когда я собирал свой проект в один файл (--onefile) через pyinstaller, помиимо использования resource_path (как уже написал Andy_U) я картинки также прописывал и в my_project.spec-файле в блоке datas в Analysis - datas=[('background.png', '.'), (...)...] - "загружать картинки в сам exe файл".
И уже после этого запускал на сборку изменённый spec: "pyinstaller my_project.spec" - тогда всё работало.
Если нужны подробности или пример - напишу дополнительно.