ABSTRACT Beräkning av centroid av bilder av enskilda fluorescerande partiklar och molekyler tillåter lokalisering och spårning i ljusmikroskop till en precision om en storleksordning större än mikroskop upplösning. De faktorer som begränsar precisionen av dessa tekniker undersöks och en enkel ekvation härleds som beskriver precisionen av lokalisering över ett brett spektrum av villkor. Dessutom konstrueras och testas en lokaliseringsalgoritm som är motiverad av teorin om montering av minst Scares både på bildstackar med 30-nm fluorescerande pärlor och på datorgenererade bilder (Monte Carlo-simuleringar). Resultat från algoritmen visar god enighet med härledd precisionsekvation för både simuleringar och faktiska bilder. Tillgången till en enkel ekvation för att beskriva lokalisering precision hjälper utredare både i att bedöma kvaliteten på en experimentell apparat och i att rikta uppmärksamheten på de faktorer som begränsar ytterligare förbättring. Precisionen av localization skalor som den inversa kvadratroten av antalet fotoner i platsen för skott buller begränsad fall och som inversen av antalet fotoner för bakgrundsljud begränsad fall. Den optimala bildförstoringen beror på det förväntade antalet fotoner och bakgrundsljud, men i de flesta fall av intresse bör pixelstorleken vara ungefär lika med standardavvikelsen för punktspridningsfunktionen.
där s är standardavvikelsen för polyesterstapelfibrerna och N antalet insamlade fotoner REF.
Precise nanometer localization analysis for individual fluorescent probes
{'venue': 'Biophys. J', 'journal': None, 'mag_field_of_study': ['Biology', 'Medicine']}